JP2008056664A - コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 - Google Patents
コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008056664A JP2008056664A JP2007197535A JP2007197535A JP2008056664A JP 2008056664 A JP2008056664 A JP 2008056664A JP 2007197535 A JP2007197535 A JP 2007197535A JP 2007197535 A JP2007197535 A JP 2007197535A JP 2008056664 A JP2008056664 A JP 2008056664A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- collagen
- composition
- degradation product
- soybean
- thermolysin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
【解決手段】 本発明は、(A)コラーゲン、ゼラチン、及びそれらの分解物からなる群より選択される少なくとも一種と、(B)ダイズタンパク質のサーモリシン分解物とを含有する組成物を提供する。
【選択図】 なし
Description
(1)(A)コラーゲン、ゼラチン、及びそれらの分解物からなる群より選択される少なくとも一種と、
(B)ダイズタンパク質のサーモリシン分解物
とを含有する組成物。
(2)細胞におけるコラーゲン産生を促進するために使用され得る、項目(1)に記載の組成物。
(3)線維芽細胞増殖を促進するために使用され得る、項目(1)又は(2)に記載の組成物。
また、本発明において用語「線維芽細胞増殖促進能を有する」とは、被験物を線維芽細胞に作用させた場合に、当該被験物を作用させない場合と比較して、線維芽細胞の増殖が促進されることを意味する。特定の態様では、当該用語における線維芽細胞とは皮膚線維芽細胞を意味する。
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物の調製
粉末状分離ダイズタンパク質(製品名「PR-800」、不二製油株式会社製)50gを2Lの蒸留水に分散し、0.1N NaOHでpH8.0に調整した。500mgのサーモリシン(EC3.4.24.4、Bacillus thermoproteolyticus由来、製品名「サモアーゼPC10F」、大和化成株式会社製、100 units/mg)を添加して、60℃で15時間での分解を行なった。反応後、100℃で10分間煮沸してサーモリシンを失活させた。放冷後、25gのろ過助剤(ラジオライト500、昭和化学工業株式会社)を添加し、撹拌した後、ろ過を行なった。得られたろ液を500mlまで減圧濃縮し、その後凍結乾燥をして、最終的に約26gのダイズタンパク質サーモリシン分解物を得た。
皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン産生検定(1)
ヒト正常皮膚由来線維芽細胞(CRL−1836;ATCC)を、48ウェルカルチャープレート中で、サブコンフルエント状態になるまで培養した。より詳細には、1.0×104細胞/ウェルの密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガスおよび95%空気の環境下で2日間培養を行った。培養液は、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(D−MEM)に牛胎仔血清(FBS)を10重量%の濃度で含有した培地を各ウェル400μlずつ使用した。次いで、上記培養液からFBSを抜いた無血清培地に交換し、さらに1日間培養した。その後、培養液を除去し、下記の表1に示す被験薬をそれぞれの濃度で溶解した400μlの無血清培地に交換して培養した。一方、コラーゲン類もダイズサーモリシン分解物も添加しない無血清培地を400μl添加したものをコントロールとして用いた。3日間培養した後、培養液を採取し、培養液中に分泌されたタイプIコラーゲン濃度を、酵素結合免疫測定法(Anti−Human Procollagen typeI C−peptide EIA Kit;タカラバイオ株式会社製)で定量した。定量結果をもとに、コントロール培養液中のタイプIコラーゲン量を100%として各被験培養液中のコラーゲン量を算出した。この結果を表1に纏める。
[測定条件]
・検出器:紫外線分光光度計SPD−10A((株)島津製作所製)
・カラム:TSKgel G2500PWXL(東ソー(株)製、φ7.8mm300mm)
・カラム温度:r.t.
・移動相:水、アセトニトリル及びトリフルオロ酢酸の混液(55:45:0.1(v/v/v))
・流量:0.5ml/分
・測定波長:220nm
・測定レンジ:0.2AUFS
・試料濃度:0.2mg/ml
・注入量:20μl
その結果、CTP−Fの分子量は約100〜約9800の範囲内にあることが推定された。
実施例3
ダイズサーモリシン分解物の分子量分画物の調製
ダイズサーモリシン分解物の分子量分画物を用いても、コラーゲン類によるコラーゲン産生促進能を増強し得るかどうかを探るため、被験材料として、実施例1で調製したダイズサーモリシン分解物の他に、ダイズタンパク質のサーモリシン分解物の分子量分画物の調製を行った。
ダイズサーモリシン分解物の分子量分画物のコラーゲン産生促進能検定
以上のようにして調製された分子量分画物を用いて、コラーゲン産生促進能の検定を行った。
まず、ヒト正常皮膚由来線維芽細胞(CRL−1836;ATCC)を、48ウェルカルチャープレート中で培養した。より詳細には、12500細胞/1cm2密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガスおよび95%空気の環境下で約72時間培養を行った。培養液は、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(D−MEM)に牛胎仔血清(FBS)を10重量%の濃度で含有した培地を各ウェル500μlずつ使用した。細胞がコンフルエントになった時点で、培養液を除去し、下記の表2に示す被験物を100μg/ml添加したD−MEM培地を500μlずつ添加した。なお、実施例1で調製したダイズサーモリシン分解物も実施例3で調製した分子量分画物も添加しない培地を500μl添加したものをコントロールとして用いた。72時間培養した後、培養液を採取し、培養液中に分泌されたタイプIコラーゲン濃度を、酵素結合免疫測定法(Anti−Human Procollagen typeI C−peptide EIA Kit;タカラバイオ株式会社製)で定量した。定量結果をもとに、コントロール培養液中のタイプIコラーゲン量を100%として各被験培養液中のタイプIコラーゲン量を算出した。結果を表2に纏める。
皮膚線維芽細胞におけるコラーゲン産生検定(2)
上記実施例2とは異なるコラーゲン類を用いて、ダイズサーモリシン分解物との併用効果について更に確認を行った。
まず、ヒト正常皮膚由来線維芽細胞(NHDF:CRL−2089)を、48ウェルカルチャープレート中で培養した。より詳細には、1.0×104細胞/ウェルの密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガスおよび95%空気の環境下で2日間培養を行った。培養液は、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(D−MEM)に牛胎仔血清(FBS)を10重量%の濃度で含有した培地を各ウェル400μlずつ使用した。次いで、上記培養液からFBSを抜いた無血清培地に交換し、さらに1日間培養した。その後、培養液を除去し、下記の表3に示す被験薬をそれぞれの濃度で溶解した400μlの無血清培地に交換して培養した。ここで本実施例では、コラーゲン類として、魚由来(魚鱗由来)のコラーゲンを分解して得られたコラーゲン分解物(平均分子量1500)を使用した。一方、コラーゲン類もダイズサーモリシン分解物も添加しない無血清培地を400μl添加したものをコントロールとした。3日間培養した後、上清を除去し、無血清培地で3回洗浄した後、無血清培地を各ウェルに400μlずつ添加し、さらに2日間培養した。その後、培養液を採取し、培養液中に分泌されたタイプIコラーゲン濃度を、酵素結合免疫測定法(Anti−Human Procollagen typeI C−peptide EIA Kit;タカラバイオ株式会社製)で定量した。定量結果をもとに、コントロール培養液中のタイプIコラーゲン量を100%として各被験培養液中のコラーゲン量を算出した。この結果を表3に纏める。
皮膚線維芽細胞の増殖促進試験
コラーゲン類とダイズサーモリシン分解物との併用によるコラーゲン産生促進効果の作用機序について詳しく調べるため、線維芽細胞の増殖に対する両成分の影響を検討した。
まず、ヒト正常皮膚由来線維芽細胞(NHDF;CRL−2089)を、96ウェルカルチャープレート中で培養した。より詳細には、1600細胞/ウェルの密度でプレートに播種し、37℃で、5%炭酸ガスおよび95%空気の環境下で24時間培養を行った。培養液には、Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)を各ウェル100μlずつ使用した。その後、培養液を除去し、下記の表4に示す被験薬をそれぞれの濃度で溶解した200μlの無血清培地に交換して培養した。なお本実施例では、コラーゲン類として、上記実施例5で使用したものと同じもの(即ち、魚由来(魚鱗由来)のコラーゲンを分解して得られたコラーゲン分解物(平均分子量1500))を用いた。一方、コラーゲン類もダイズサーモリシン分解物も添加しない無血清培地を200μl添加したものをコントロールとして用いた。さらに48時間培養した後、WST−8法にて各ウェル中の生細胞数を計測した(Cell Counting Kit−8;(株)同仁化学研究所製)。測定結果をもとに、コントロールにおける生細胞数を100%として、各被験薬添加群の生細胞数(%)を算出した。この結果を表4に纏める。
〔成分〕 〔比率〕
コラーゲン分解物 0.1
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 0.1
スクワラン 2.0
流動パラフィン 5.0
セタノール 0.5
モノステアリン酸グリセリル 2.0
POE(25)セチルエーテル 2.0
グリセリン 4.0
1,3-ブチレングリコール 6.0
pH調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
コラーゲン分解物 1.0
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 2.0
グルコオリゴ糖 0.5
酸性キシロオリゴ糖 0.5
1,3−ブチレングリコール 12.0
ホホバ油 6.0
グリセリン 4.0
ワセリン 3.5
ポリオキシエチレン(40)硬化ヒマシ油 1.5
ステアリン酸グリセリル 1.2
アラントイン 0.1
カルボキシビニルポリマー 0.1
キサンタンガム 0.1
セタノール 0.6
パンテノール 1.0
トリエタノールアミン 適量
精製水 適量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
コラーゲン分解物 0.01
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 0.5
ワセリン 1.0
スクワラン 5.0
流動パラフィン 10.0
ステアリン酸 1.5
ステアリルアルコール 2.0
モノステアリン酸グリセリル 2.0
POE(20)セチルエーテル 3.0
グリセリン 6.0
1,3-ブチレングリコール 8.0
pH調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
コラーゲン分解物 1.0
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 0.5
1,3−ブチレングリコール 12.0
グリセリン 3.0
グルコオリゴ糖 2.0
アラントイン 0.1
ポリクオタニウム−51 0.5
ヒアルロン酸ナトリウム 0.01
PEG−1500 0.5
pH調整剤 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
コラーゲン分解物 0.005
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 0.1
POE(20)ソルビタンモノイソステアリン酸エステル 0.3
コハク酸 0.2
コハク酸ナトリウム 0.5
エデト酸三ナトリウム 0.05
1,3-ブチレングリコール 6.0
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
コラーゲン分解物 0.05
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 0.2
グルコオリゴ糖 0.5
アルキル変性カルボキシビニルポリマー 0.5
1,3−ブチレングリコール 5.0
フェニルメチルポリシロキサン 1.0
ラベンダー油 0.1
ヒアルロン酸ナトリウム 0.1
メントール 0.1
アルギニン 適量
防腐剤 適量
香料 適量
精製水 適量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500) 1.0
魚由来コラーゲン分解物 0.5
ビタミンB2 0.005
エリスリトール 10.0
酸味料 1.0
甘味料 1.0
香料 0.01
精製水 残量
100.0重量%
〔成分〕 〔比率〕
ダイズタンパク質のサーモリシン分解物(平均分子量1500)50.0mg
豚由来コラーゲン分解物 20.0mg
ビタミンB1 1.0mg
ビタミンB2 0.5mg
香料 0.625mg
甘味料 0.625mg
ショ糖脂肪酸エステル 3.75mg
マルチトール 48.5mg
125.0mg
Claims (3)
- (A)コラーゲン、ゼラチン、及びそれらの分解物からなる群より選択される少なくとも一種と、
(B)ダイズタンパク質のサーモリシン分解物
とを含有する組成物。 - 細胞におけるコラーゲン産生を促進するために使用され得る、請求項1に記載の組成物。
- 線維芽細胞増殖を促進するために使用され得る、請求項1又は2に記載の組成物。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2007197535A JP5084393B2 (ja) | 2006-07-31 | 2007-07-30 | コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006209216 | 2006-07-31 | ||
JP2006209216 | 2006-07-31 | ||
JP2007197535A JP5084393B2 (ja) | 2006-07-31 | 2007-07-30 | コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008056664A true JP2008056664A (ja) | 2008-03-13 |
JP5084393B2 JP5084393B2 (ja) | 2012-11-28 |
Family
ID=39239834
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007197535A Active JP5084393B2 (ja) | 2006-07-31 | 2007-07-30 | コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5084393B2 (ja) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009079043A (ja) * | 2007-09-04 | 2009-04-16 | Rohto Pharmaceut Co Ltd | 線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 |
JP2009284798A (ja) * | 2008-05-28 | 2009-12-10 | Uha Mikakuto Co Ltd | ジペプチジルペプチダーゼiv阻害剤の製造方法 |
JP2011032219A (ja) * | 2009-08-03 | 2011-02-17 | Fancl Corp | コラーゲンゲル収縮剤 |
JP2011157281A (ja) * | 2010-01-29 | 2011-08-18 | Fancl Corp | コラーゲンゲル収縮剤 |
WO2011124848A1 (fr) | 2010-04-07 | 2011-10-13 | Societe Industrielle Limousine D'application Biologique, Dite Silab | Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline de soja pour lutter contre l'apparition des rides |
JP2011219454A (ja) * | 2010-03-24 | 2011-11-04 | Fancl Corp | 細胞間接着剤 |
CN104490610A (zh) * | 2014-11-19 | 2015-04-08 | 南通宝田包装科技有限公司 | 一种抑制真菌美白面膜生产包装工艺 |
JP2018525360A (ja) * | 2015-07-22 | 2018-09-06 | テンプル ユニヴァーシティ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイアー エデュケーション | 創傷治癒、組織工学、及び再生医療のための組成物及び方法における使用のための大豆由来の生物活性ペプチド |
JP2019014669A (ja) * | 2017-07-05 | 2019-01-31 | 共栄化学工業株式会社 | 皮膚外用組成物 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000309521A (ja) * | 1999-02-23 | 2000-11-07 | Shiseido Co Ltd | 皮膚外用剤 |
JP2001120227A (ja) * | 1999-10-29 | 2001-05-08 | We'll Corporation:Kk | ダイエット食品 |
JP2002020312A (ja) * | 2000-07-10 | 2002-01-23 | Meiji Seika Kaisha Ltd | 体脂肪減少促進用食品組成物及び体脂肪減少促進剤 |
-
2007
- 2007-07-30 JP JP2007197535A patent/JP5084393B2/ja active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000309521A (ja) * | 1999-02-23 | 2000-11-07 | Shiseido Co Ltd | 皮膚外用剤 |
JP2001120227A (ja) * | 1999-10-29 | 2001-05-08 | We'll Corporation:Kk | ダイエット食品 |
JP2002020312A (ja) * | 2000-07-10 | 2002-01-23 | Meiji Seika Kaisha Ltd | 体脂肪減少促進用食品組成物及び体脂肪減少促進剤 |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009079043A (ja) * | 2007-09-04 | 2009-04-16 | Rohto Pharmaceut Co Ltd | 線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 |
JP2009284798A (ja) * | 2008-05-28 | 2009-12-10 | Uha Mikakuto Co Ltd | ジペプチジルペプチダーゼiv阻害剤の製造方法 |
JP2011032219A (ja) * | 2009-08-03 | 2011-02-17 | Fancl Corp | コラーゲンゲル収縮剤 |
JP2011157281A (ja) * | 2010-01-29 | 2011-08-18 | Fancl Corp | コラーゲンゲル収縮剤 |
JP2011219454A (ja) * | 2010-03-24 | 2011-11-04 | Fancl Corp | 細胞間接着剤 |
WO2011124848A1 (fr) | 2010-04-07 | 2011-10-13 | Societe Industrielle Limousine D'application Biologique, Dite Silab | Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline de soja pour lutter contre l'apparition des rides |
CN104490610A (zh) * | 2014-11-19 | 2015-04-08 | 南通宝田包装科技有限公司 | 一种抑制真菌美白面膜生产包装工艺 |
JP2018525360A (ja) * | 2015-07-22 | 2018-09-06 | テンプル ユニヴァーシティ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイアー エデュケーション | 創傷治癒、組織工学、及び再生医療のための組成物及び方法における使用のための大豆由来の生物活性ペプチド |
JP2019014669A (ja) * | 2017-07-05 | 2019-01-31 | 共栄化学工業株式会社 | 皮膚外用組成物 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5084393B2 (ja) | 2012-11-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5084393B2 (ja) | コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 | |
JP4033877B2 (ja) | I型コラーゲン産生促進用組成物 | |
JP5588474B2 (ja) | コラーゲンおよび/またはヒアルロン酸産生促進用組成物 | |
JP2004203811A (ja) | 化粧料 | |
JP2008201773A (ja) | 皮膚外用剤 | |
KR20170093694A (ko) | 콜라겐 트리펩타이드를 고함량으로 함유하는 콜라겐 가수분해물 및 이의 용도 | |
JP2004250372A (ja) | 皮膚老化防止・改善剤及び/又は肌荒れ防止・改善剤キット | |
US20090054346A1 (en) | Elastin production-enhancing agents | |
KR101705938B1 (ko) | 피부 콜라겐 생성 촉진제 | |
JP2008110927A (ja) | ローヤルゼリー蛋白加水分解物を含む化粧料 | |
JP2004115438A (ja) | 抗老化用組成物 | |
JP2008001661A (ja) | コラーゲン産生促進能を有する組成物 | |
JP5241054B2 (ja) | コラーゲン合成促進用組成物 | |
JP5118398B2 (ja) | コラーゲン産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 | |
JP2005263794A (ja) | コラーゲン合成促進用組成物 | |
KR101789355B1 (ko) | 피부 콜라겐 생성 촉진제 | |
JP4698935B2 (ja) | 皮膚コラーゲン産生促進剤 | |
JP2005047910A (ja) | 皮脂分泌抑制用組成物 | |
KR20130114141A (ko) | 피부 콜라겐 생성 촉진제 | |
KR20080038491A (ko) | 녹용에서 추출한 콜라겐을 함유하는 기능성 강화 화장료조성물 및 그 제조방법 | |
WO2006101119A1 (ja) | コラーゲン合成促進剤 | |
JP6660519B1 (ja) | エラスターゼ阻害剤 | |
JP2004107243A (ja) | シワ及び/又はたるみ改善用キット | |
JP5118399B2 (ja) | ヒアルロン酸産生促進能及び/又は線維芽細胞増殖促進能を有する組成物 | |
JP2004331564A (ja) | 皮膚コラーゲン産生促進剤 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20100614 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120626 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120801 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120828 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120904 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5084393 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150914 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150914 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |