WO2011124848A1 - Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline de soja pour lutter contre l'apparition des rides - Google Patents

Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline de soja pour lutter contre l'apparition des rides Download PDF

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WO2011124848A1
WO2011124848A1 PCT/FR2011/050778 FR2011050778W WO2011124848A1 WO 2011124848 A1 WO2011124848 A1 WO 2011124848A1 FR 2011050778 W FR2011050778 W FR 2011050778W WO 2011124848 A1 WO2011124848 A1 WO 2011124848A1
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active ingredient
cosmetic
glycopeptides
hydroxyproline
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PCT/FR2011/050778
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Jean Paufique
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Societe Industrielle Limousine D'application Biologique, Dite Silab
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    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
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    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]

Definitions

  • the present invention relates to the use of specific molecules derived from soybean fibers, as well as to a particular active ingredient containing such molecules, to fill and effectively fight against the appearance of wrinkles.
  • the invention also relates to a process for obtaining this active ingredient, the compositions including it, and a cosmetic anti-wrinkle treatment method.
  • the present invention proposes to use specific molecules obtained from soybean fibers.
  • Active ingredients derived from soy are already known for anti-aging cosmetic applications.
  • the objective of the present invention is to provide a different specific active cosmetic principle, with particular molecules, which has anti-wrinkle performance much greater than those never achieved with the assets derived from soy of the prior art, and this even at lower concentration.
  • the invention is directed to the use of hydroxyproline-rich glycopeptides (HRGPs) derived from soybean fibers, or an active ingredient derived from soybean fibers containing hydroxyproline-rich glycopeptides (HRGPs), as the active ingredient.
  • HRGPs hydroxyproline-rich glycopeptides
  • glycopeptide is meant a peptide carrying a group of polysaccharides, and a peptide chain. This peptide chain consists of less than 100 amino acids.
  • glycopeptides rich in hydroxyproline or "HRGPs” is meant glycopeptides whose peptide chain contains hydroxyproline among the amino acids which constitutes it.
  • the chain is strongly branched on hydroxyproline by o-glycosylated carbohydrate substitutes of variable length.
  • the peptide chain also contains the acids purines seine, threonine, alanine, lysine, tyrosine, valine and histidine, which can appear in short repetitive sequences.
  • the invention also relates to a cosmetic active ingredient comprising glycopeptides rich in hydroxyproline (HRGPs) derived from soybean fibers.
  • HRGPs hydroxyproline
  • it is an active ingredient that has anti-wrinkle effectiveness hitherto never found with products of natural origin. It is not a simple concentration of existing products, but rather a separate active ingredient, obtainable by the implementation of a specific process.
  • the present invention therefore also relates to a process for obtaining an effective anti-wrinkle active ingredient, comprising glycopeptides rich in hydroxyproline (HRGPs), from soybean fibers.
  • HRGPs hydroxyproline
  • the method of obtaining according to the invention is simple to implement.
  • the invention also relates to cosmetic compositions including between 0.01% and 20% of a cosmetic active ingredient comprising hydroxyproline-rich glycopeptides (HRGPs) derived from soybean fibers.
  • HRGPs hydroxyproline-rich glycopeptides
  • the subject of the invention is also a cosmetic skin care method intended to combat the appearance of wrinkles, in particular to smooth the microrelief of the skin and to fill wrinkles, including the topical application of the skin.
  • a composition comprising soybean HRGPs or a soybean-derived active ingredient containing HRGPs.
  • the invention relates to the use of glycopeptides rich in hydroxyproline (HRGPs) derived from soybean fibers, or an active ingredient derived from soy containing glycopeptides rich in hydroxyproline as a cosmetic anti-wrinkle active ingredient.
  • HRGPs hydroxyproline
  • hydroxyproline-rich glycopeptides derived from soybean fibers or an active ingredient obtained from soybean fibers containing glycopeptides rich in hydroxyproline, can be used as a cosmetic agent to combat the appearance of wrinkles, in particular for smooth the skin microrelief and fill in the wrinkles.
  • the use on the skin of soybean glycopeptides rich in hydroxyproline, a rare amino acid protein, or a soy-based active ingredient containing glycopeptides rich in hydroxyproline provides effective performance on collagen I, marker universally recognized for its importance in anti-aging care.
  • Collagen I is a helical structure consisting of three polypeptide chains rich in glycine, proline and hydroxyproline.
  • Collagen is characterized by a specific amino acid sequence ( ⁇ 9ly-X-Y) n where glycine is present every 3 residues, where X is proline and Y is frequently hydroxyproline. This latter amino acid is particularly important because it allows the arrangement of collagen chains in triple-helix and is also essential to the stability of the latter.
  • the use on the skin of glycopeptides of soybeans rich in hydroxyproline, a rare amino acid in proteins, or of an active principle derived from soybean fibers containing HRGPs makes it possible to act strongly on the synthesis of collagen I.
  • the use of HRGPs of soy fibers or of an active ingredient derived from soy fibers containing HRGPs reinforces frame of the skin and its density for an anti-wrinkle effect.
  • the dermal mattress is consolidated and wrinkles wrinkles.
  • the effect obtained is greater than that of existing natural active ingredients, and comparable to that of the reference synthesis active ingredients, vitamin C, retinol and palmitoyl-pentapeptide-3. Thanks to the targeted and powerful efficacy of the invention the wrinkles are visibly reduced.
  • the invention relates to the use of an active principle derived from soy fibers containing HRGPs, as described below.
  • the invention also relates to a particular cosmetic active ingredient obtained from soybean fibers comprising hydroxyproline-rich glycopeptides (HRGPs).
  • HRGPs hydroxyproline-rich glycopeptides
  • the active ingredient according to the invention may also comprise other molecules, in particular proteins and carbohydrates in free form.
  • the active ingredient comprises:
  • the total sugar content of the active ingredient according to the invention is greater than 50% of the total weight of the dry matter, in particular it is between 50 and 70%.
  • the active ingredient according to the invention comprises between 8 and 30% of glycopeptides by weight of dry matter.
  • the active ingredient according to the invention has a hydroxyproline content of at least 18 mg / g of proteins, more preferably approximately equal to 30 mg / g of proteins.
  • glycopeptides have a molar mass of between 1440Da and 60000Da, preferably an average molecular mass of about 13600 Da.
  • glycosylated part of the glycopeptides is preferably composed of at least galactose, galacturonic acid and mannose.
  • the active ingredient according to the invention is a hydrolyzate of soybean fibers. It is preferably in the form of limpid liquid of amber color. It can be defined by at least one of the features described below, preferably all.
  • the dry matter content of an active ingredient according to the invention (measured by passing in an oven at 105 ° C. in the presence of sand of a sample of initial weight given until a constant weight is obtained) can be between 22 and 32 g / l.
  • the pH (measured by the potentiometric method at room temperature) can be between 5.0 and 6.0.
  • the total nitrogen content (determined by the method of KJELDHAL - Officiai method of analysis of the A.O.C. 1975, 12 ⁇ ed., W Horwitz, E.D.
  • the hydroxyproline assay is performed according to the method of Stegemann and Stalder (Stegemann H., and Stalder K, (1967), Clinica Chimica Acfa, 18, 260). After action of chloramine T, the oxidized hydroxyproline reacts with the paradimethylaminobenzaldehyde to give a yellow-orange color, detectable spectrophotometer at 550 nm.
  • the hydroxyproline content is preferably greater than 18 mg / g of proteins, still more preferably approximately equal to 30 mg / g of proteins.
  • the determination of the total sugar content can be carried out by the method of
  • DUBOIS DUBOIS M. et al., (1956), Analytical Chemistry, 28, No. 3, pp. 350-356.
  • the reducing sugars give an orange-yellow compound. From a standard range, the total sugar content of a sample can be determined.
  • the total sugar content of an active principle derived from soybean fibers according to the invention is preferably between 12 and 22 g / l.
  • the total sugar content can also be expressed as a percentage relative to the dry matter. It is preferably greater than 37%, even more preferably between 50% and 70%.
  • the molecular weights of the carbohydrates present in the active principle according to the invention are determined by means of high performance liquid chromatography (HPLC).
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • the composition of simple sugars is determined by ionic liquid chromatography.
  • the glucidic fraction of the active principle according to the invention is composed of polysaccharides consisting mainly of galactose, mannose and galacturonic acid.
  • the carbohydrates are either in free form and either they constitute the glycosylated portion of glycopeptides.
  • Electrophoresis under denaturing conditions of the active ingredient according to the invention was carried out using a 15% polyacrylamide gel. Gel staining was done using the "Glycoprotein Detection Kit” kit (Sigma), which allows the selective staining of glycopeptides in pink.
  • the content of glycopeptides is between 8 and 30% by weight relative to the dry matter.
  • the active ingredient according to the invention thus comprises many glycopeptides rich in hydroxyproline.
  • the raw ash content is determined by the weighing of residues from incineration at 550 ° C in an electric muffle furnace (VULCANTM 3.550-NDI).
  • the weight of the residue is calculated by deducting the tare.
  • the mineral content is expressed as a percentage of the dry matter.
  • the content of total polyphenols is measured according to the following principle.
  • the polyphenols form colored compounds in the presence of potassium ferricyanide, the intensity of this coloration being proportional to the amount of polyphenols.
  • gallic acid in this case from 40 to 120 mg / l, it is possible to deduce the amount of polyphenols present in the extract.
  • the content of uronic acids is determined by the following principle: the product of the reaction of galacturonic acid with sodium tetraborate, gives in the presence of meta-hydroxydiphenyl, a pink color for the assay spectrophotometer at 520 nm.
  • the intensity of staining is proportional to the amount of uronic acids.
  • the structure of the active fraction of the active ingredient according to the invention was then identified and characterized. It corresponds to glycopeptides rich in hydroxyproline (HRGPs), in particular HRGPs comprising glycosylated chains mainly composed of galactose, galacturonic acid and mannose.
  • the active ingredient according to the invention can be obtained preferentially by a process comprising an enzymatic hydrolysis with a carbohydrase, and an enzymatic hydrolysis with a protease.
  • a particularly suitable method comprises at least the succession of the following steps:
  • This last stage makes it possible to retain the molecules and to select them according to their size, but also according to their configuration in the space.
  • the method comprises the following steps:
  • the present invention also encompasses cosmetic compositions including soybean fiber-rich glycopeptides (HRGPs) or at least one active ingredient derived from soybean fungi comprising HRGPs, in different dosage forms, adapted for topical administration. skin.
  • HRGPs soybean fiber-rich glycopeptides
  • active ingredient derived from soybean fungi comprising HRGPs
  • compositions may be in the form of oil-in-water emulsions, water-in-oil emulsions, multiple emulsions (water / oil / water or oil / water / oil) which may be microemulsions or nanoemulsions, or in the form of solutions, suspensions, hydrodispersions, aqueous gels or powders. They can be more or less fluid and have the appearance of a cream, a lotion, a milk, a serum, an ointment, a gel, a paste or a foam, or in solid form.
  • compositions are preferably compositions containing between 0.01 and 20%, by weight of active principle (s) derived from soybean fibers comprising HRGPs according to the present invention, preferably between 0.1% and 2%.
  • compositions comprise, in addition to the active agent, a physiologically acceptable and preferably cosmetically acceptable medium, that is to say which does not cause unacceptable sensations of discomfort for the user such as redness, tightness or tingling.
  • This medium usually contains water.
  • compositions according to the invention may contain as adjuvant at least one compound chosen from: oils, which may be chosen in particular from silicone oils, linear or cyclic, volatile or non-volatile;
  • waxes such as ozokerite, polyethylene wax, beeswax or carnauba wax;
  • surfactants preferably emulsifiers, whether they are nonionic, anionic, cationic or amphoteric;
  • co-surfactants such as linear fatty alcohols
  • humectants such as polyols such as glycerine
  • compositions are especially intended for the fight against the appearance of wrinkles.
  • the invention aims at a cosmetic process for the care of human skin, intended to combat the appearance of wrinkles, in particular to smooth the microrelief of the skin and / or to fill wrinkles, comprising the topical application of a composition comprising HRGPs derived from soy fibers or an active ingredient containing them, in particular a composition containing between 0.01 and and 20% by weight of principle (s) ac ⁇ if (s) derived (s) from Soy according to the present invention.
  • An example of a process for obtaining an active ingredient according to the invention comprises the implementation of the following steps:
  • soybean powder in water at a rate of 50 g / l, two successive enzymatic hydrolyses, in the presence of a carbohydrase and a protease,
  • the active ingredient obtained has the following characteristics:
  • hydroxyproline content of which is 31 mg / g of protein, a glycopeptide fraction containing 0.64 g / l of proteins and 4.8 g / l of sugars, ie 20% of glycopeptides by weight of dry matter; the average molar mass of glycopeptides rich in hydroxyproline is 13600 Da,
  • Example 2 Use of an Active Ingredient of the Invention in an Anti-Wrinkle Day Fluid
  • This fluid emulsion has a pH of 5.2.
  • Example 3 Use of an Active Ingredient of the Invention in a Night Cream
  • This emulsion has a pH of 6.2.
  • This serum has a pH of 4.5.
  • Emulsifying B in A under a foam concentrate Emulsifying B in A under a foam concentrate
  • the purpose of this study is to evaluate the effect of an active ingredient according to the invention on the synthesis of collagen I, major component of the dermis, in comparison: two reference molecules, vitamin C and a palmitoyl pentapeptide-3, and
  • the active ingredient according to the invention is that of Example 1.
  • Product A is an active ingredient derived from soybean fibers, as mentioned in patent application FR-2765803. It has the following characteristics:
  • Product A can be obtained by carrying out a process comprising the following steps:
  • Product B is obtained by carrying out the process comprising the following steps:
  • soybean meal at a rate of at least 50 g / l by weight, in water at acidic pH
  • the operating protocol is as follows.
  • human fibroblasts are seeded in a suitable culture medium and the cells are incubated at 37 ° C.
  • the culture medium is removed and replaced by a medium containing an active ingredient of Example 1 according to the invention at 0.01% - 0.05% - 0.10% and 0.25% (V / V) or vitamin C at 0.25 ⁇ g / ml or palmitoyl pentapeptide-3 at 1% or product A at 0.10% or product B at 1 or 2%.
  • the cells are then incubated at 37 ° C.
  • the supernatants are recovered and stored at -80 ° C awaiting the ELISA assay.
  • immunocytological labeling is also performed.
  • the active ingredient according to the invention stimulates the synthesis of collagen I by normal human fibroblasts, even at very low concentration. These results show in particular that tested at 0.25%, the active ingredient according to the invention stimulates the synthesis of collagen I by normal human fibroblasts of 1190%. This effect is dose dependent and comparable to that of vitamin C tested at 0.25 ⁇ g / ml.
  • the objective of this study is to evaluate in vivo the anti-wrinkle effect of an active ingredient according to the invention formulated at 2% in emulsion against placebo at the level of the crow's feet by projection of fringes.
  • retinol formulated at 0.075% emulsion.
  • the analysis method used for the study consists in making 3D acquisitions by projection of fringing crow's feet.
  • the acquisitions are made using a fringe projection device dedicated to the 3D measurement of the cutaneous relief.
  • the effect of the product is measured on a region of interest of 15x15mm cut automatically on the original acquisition.
  • a decrease in these various parameters is characteristic of an improvement in the relief of the studied surface and a decrease in wrinkles.
  • the active ingredient according to the invention makes it possible to smooth the cutaneous relief at the level of crow's feet and reduce wrinkles by decreasing the negative volume and the positive volume.

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Abstract

L'objet de l'invention est un principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, et les compositions cosmétiques anti-rides l'incluant. L'invention se rapporte également à l'utilisation cosmétique de HRGPs de fibres de soja ou d'un principe actif en contenant, pour lutter contre l'apparition des rides.

Description

UTILISATION DE 6LYCOPEPTIDES RICHES EN HYDROXYPROLINE DE SOJA POUR LUTTER CONTRE L'APPARITION DES RIDES
La présente invention se rapporte à l'utilisation de molécules spécifiques issues de fibres de soja, ainsi qu'à un principe actif particulier contenant de telles molécules, pour combler et lutter efficacement contre l'apparition des rides. L'invention concerne également un procédé d'obtention de ce principe actif, les compositions l'incluant, et un procédé de traitement cosmétique anti-rides.
La recherche du bien être et la quête de la jeunesse restent des préoccupations majeures dans nos sociétés. Beaucoup de personnes veulent pouvoir paraître jeunes le plus longtemps possible et cherchent à retarder et limiter l'apparition des signes extérieurs du vieillissement cutané : peau plus fine, sèche, ridée et qui perd son élasticité.
Pour lutter contre les effets du temps sur la peau, il existe aujourd'hui de nombreux produits cosmétiques.
Parmi ces produits, on peut citer notamment le palmitoyl-pentapeptide-3 ou le rétinol, qui présentent une efficacité anti-rides tout à fait satisfaisante. Toutefois, ces produits sont obtenus par synthèse chimique. Ils ne correspondent donc pas forcément aux exigences actuelles pour des produits d'origine naturelle.
Des soins anti-âge d'origine naturelle ont donc été développés en parallèle, en particulier des extraits de plantes, mais leur efficacité n'est pas toujours satisfaisante, et les consommateurs attendent un résultat anti-rides plus performant. Il subsiste donc un besoin pour une solution cosmétique d'origine naturelle qui, appliquée sur la peau, procure un effet anti-rides au moins aussi performant que celui obtenu avec des produits de synthèse.
Pour y répondre, la présente invention propose d'utiliser des molécules spécifiques obtenues à partir de fibres de soja.
On connaît déjà des principes actifs issus de soja pour des applications cosmétiques anti-âge. A titre d'exemple, on peut citer les demandes JP-2009084169, JP2008056664, JP-2008024703, JP2006213649 qui décrivent des compositions comprenant des hydrolysats de protéines de soja et leur utilisation cosmétique pour lutter contre les signes du vieillissement cutané.
Toutefois, l'objectif de la présente invention est de proposer un principe actif cosmétique spécifique différent, avec des molécules particulières, qui présente des performances anti-rides beaucoup plus importantes que celles jamais atteintes avec les actifs issus de soja de l'art antérieur, et ce même à plus faible concentration.
A cet effet, l'invention vise l'utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, ou d'un actif issu de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), en tant que principe actif cosmétique anti-rides.
Par « glycopeptide » on entend un peptide portant un groupement de polysaccharides, et une chaîne peptidique. Cette chaîne peptidique est constituée de moins de 100 acides aminés.
Par « glycopeptides riches en hydroxyproline » ou « HRGPs » on entend des glycopeptides dont la chaîne peptidique contient de l'hydroxyproline parmi les acides aminés qui la constitue. La chaîne est fortement ramifiée sur l'hydroxyproline par des substituts carbohydrate o-glycosylés de longueur variable. Outre l'hydroxyproline, la chaîne peptidique contient aussi les acides aminés senne, thréonine, alanine, lysine, tyrosine, valine et histidine, qui peuvent apparaître en courtes séquences répétitives.
L'invention vise également un principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja.
Avantageusement, il s'agit d'un principe actif qui présente une efficacité antirides jusqu'alors jamais constatée avec des produits d'origine naturelle. Il ne s'agit pas d'une simple concentration de produits existants, mais bien d'un principe actif à part, susceptible d'être obtenu par la mise en oeuvre d'un procédé spécifique.
La présente invention concerne donc également un procédé d'obtention d'un principe actif anti-rides efficace, comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), à partir de fibres de soja.
Avantageusement le procédé d'obtention selon l'invention est simple à mettre en oeuvre.
Selon un autre aspect, l'invention vise aussi des compositions cosmétiques incluant entre 0,01 et 20% d'un principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja. Ces compositions peuvent se présenter sous toutes formes permettant l'application par voie topique.
Enfin, l'invention a également pour objet un procédé cosmétique de soin de la peau, destiné à lutter contre l'apparition des rides, en particulier à lisser le microrelief de la peau et à combler les rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant des HRGPs de soja ou un principe actif issu de soja contenant des HRGPs.
La présente invention est maintenant décrite en détail.
UTILISATION
Selon un premier aspect, l'invention vise l'utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, ou d'un actif issu de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline, en tant que principe actif cosmétique anti-rides.
Selon l'invention des glycopeptides riches en hydroxyproline issus de fibres de soja, ou un actif obtenu à partir de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline, peuvent être utilisés comme agent cosmétique pour lutter contre l'apparition des rides, en particulier pour lisser le microrelief cutané et combler les rides.
De façon avantageuse, l'utilisation sur la peau de glycopeptides de soja riches en hydroxyproline, acide aminé rare des protéines, ou d'un principe actif issu de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline, assure une efficacité performante sur le collagène I, marqueur universellement reconnu pour son importance dans les soins anti-vieillissement.
Le collagène I est une structure hélicoïdale constituée de trois chaînes polypeptidiques riches en glycine, proline et hydroxyproline. Le collagène est caractérisé par une séquence en acides aminés spécifiques (<9ly-X-Y)n où la glycine est présente tous les 3 résidus, où X correspond à la proline et Y est fréquemment de l'hydroxyproline. Ce dernier acide aminé est particulièrement important car il permet l'arrangement des chaînes de collagène en triple-hélice et il est également essentiel à la stabilité de celle-ci.
Avec l'âge ou au cours du vieillissement prématuré, le réseau tridimensionnel de collagène subit de profondes altérations caractérisées par une diminution de la synthèse de collagène d'une part et par sa dégradation excessive d'autre part. Ces changements se traduisent à la surface cutanée par un relâchement, une perte de fermeté et l'apparition de rides.
Selon l'invention, l'utilisation sur la peau de glycopeptides de soja riches en hydroxyproline, acide aminé rare dans les protéines, ou d'un principe actif issu de fibres de soja contenant des HRGPs, permet d'agir fortement sur la synthèse de collagène I. En boostant fortement la synthèse naturelle de collagène I, biomarqueur essentiel et incontournable pour la lutte contre le vieillissement cutané, l'utilisation d'HRGPs de fibres de soja ou d'un principe actif issu de fibres de soja contenant des HRGPs, renforce l'armature de la peau et sa densité pour un effet anti-rides. Le matelas dermique est consolidé et les rides défroissées. L'effet obtenu est supérieur à celui des principes actifs d'origine naturelle existants, et comparable à celui des actifs de synthèse de référence, la vitamine C, le rétinol et le palmitoyl-pentapeptide-3. Grâce à l'efficacité ciblée et puissante de l'invention les rides sont visiblement atténuées.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l'invention vise l'utilisation d'un principe actif issu de fibres soja contenant des HRGPs, tel que décrit en suivant.
PRINCIPE ACTIF
L'invention concerne également un principe actif cosmétique particulier obtenu à partir de fibres de soja comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs).
Le principe actif selon l'invention peut également comprendre d'autres molécules, en particulier des protéines et des carbohydrates sous forme libre.
Préférentiellement, le principe actif comprend :
- une teneur en sucres totaux supérieure à 37% en poids de matière sèche,
- une teneur en protéines totales comprise entre 5 et 7% en poids de matière sèche.
Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, la teneur en sucres totaux du principe actif selon l'invention est supérieure à 50% du poids total de la matière sèche, en particulier elle est comprise entre 50 et 70%. Préférentiellement le principe actif selon l'invention comprend entre 8 et 30% de glycopeptides en poids de matière sèche.
De façon préférée, le principe actif selon l'invention présente une teneur en hydroxyproline d'au moins 18mg/g de protéines, encore plus préférentiellement environ égale à 30mg/g de protéines.
De même, les glycopeptides présentent une masse molaire comprise entre 1440Da et 60000Da, préférentiellement une masse moléculaire moyenne de 13600 Da environ.
La partie glycosylée des glycopeptides est de façon préférée composée au moins de galactose, d'acide galacturonique et de mannose.
Le principe actif selon l'invention est un hydrolysat de fibres de soja. Il se présente préférentiellement sous forme de liquide limpide de couleur ambrée. Il peut être défini par au moins une des caractéristiques exposées ci-après, préférentiellement toutes.
Matières sèches :
Le taux de matières sèches d'un principe actif selon l'invention (mesuré par passage à l 'étuve à 105°C en présence de sable d' un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d' un poids constant) peut être compris entre 22 et 32 g/l.
Mesure du pH :
Le pH (mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante) peut être compris entre 5,0 et 6,0.
Détermination de la teneur en azote :
La teneur en azote total (déterminée par la méthode de KJELDHAL - Officiai method of analysis of the A.O.C. 1975, 12†h ed. W Horwitz, E.D.,
New-York, p. 15-60), est préférentiellement comprise entre 1,3 et 2,2g/l, soit 5 à 7% en poids par rapport à la matière sèche. Détermination de la teneur en hydroxyproline :
Le dosage de l'hydroxyproline est réalisé selon la méthode de Stegemann et Stalder (Stegemann H., et Stalder K, (1967), Clinica Chimica Acfa, 18, 260). Après action de la chloramine T, l'hydroxyproline oxydée réagit avec le paradiméthylaminobenzaldéhyde pour donner une coloration jaune- orangée, détectable au spectrophotomètre à 550 nm.
La teneur en hydroxyproline est préférentiellement supérieure à 18mg/g de protéines, encore plus préférentiellement environ égale à 30mg/g de protéines.
Carbohydrates :
Dosage de la teneur en sucres totaux :
Le dosage de la teneur en sucres totaux peut être réalisé par la méthode de
DUBOIS (DUBOIS M. et al., (1956), Analytical chemistry, 28, n°3 p. 350-356). En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de sucres totaux d'un échantillon.
Le taux de sucres totaux d'un principe actif issu de fibres de soja selon l'invention est préférentiellement compris entre 12 et 22g/l.
La teneur en sucres totaux peut aussi être exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. Elle est préférentiellement supérieure à 37%, encore plus préférentiellement comprise entre 50% et 70%.
Caractérisation des carbohydrates
Les masses moléculaires des carbohydrates présents dans le principe actif selon l'invention sont déterminées grâce à la chromatographie en phase liquide haute performance (CLHP). La composition en sucres simples est déterminée par chromatographie liquide ionique. La fraction glucidique du principe actif selon l'invention est composée de polysaccharides constitués majoritairement de galactose, mannose et acide galacturonique.
Les carbohydrates sont soit sous forme libre et soit ils constituent la partie glycosylée de glycopeptides.
Caractérisation des Glycopeptides :
Une électrophorèse en conditions dénaturantes du principe actif selon l'invention a été réalisée en utilisant un gel de polyacrylamide 15%. La coloration du gel a été faite à l'aide du kit « Glycoprotein Détection Kit » (Sigma), qui permet la coloration sélective des glycopeptides en rose.
Une coloration rose apparaît pour le principe actif selon l'invention, ce qui montre la présence de glycopeptides. La teneur en glycopeptides est comprise entre 8 et 30% en poids par rapport à la matière sèche.
En outre, le dosage de l'hydroxyproline, réalisé par spectrophotométrie, montre la présence d'hydroxyproline.
Le principe actif selon l'invention comprend donc bien des glycopeptides riches en hydroxyproline.
Teneur en cendres brutes :
La teneur en cendres brutes est dé erminée par la pesée des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique (VULCANTM 3.550-NDI).
Le poids du résidu est calculé en déduisant la tare.
La teneur en minéraux est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche.
Teneur en composés phénol iques
La teneur en polyphénols totaux est mesurée selon le principe suivant. Les polyphénols forment en présence de ferricyanure de potassium des composés colorés, l ' intensité de cette coloration étant proportionnelle à la quantité de polyphenols. En se rapportant à une gamme étalon d'acide gallique, en l 'occurrence de 40 à 120 mg/l, on peut déduire la quantité de polyphénols présents dans l'extrait.
Dosage des acides uroniques
La teneur en acides uroniques est déterminée par le principe suivant : le produit de la réaction de l'acide galacturonique avec le tétraborate de sodium, donne en présence du méta-hydroxydiphényl, une coloration rose permettant le dosage au spectrophotomètre à 520 nm.
L'intensité de coloration est proportionnelle à la quantité d'acides uroniques.
En se rapportant à une gamme étalon d'acide galacturonique, en l 'occurrence de 10 à 100 mg/l, on peut déduire la quantité d'acides uroniques présents dans le principe actif.
Identification de la fraction active
Afin de déterminer la fraction majoritairement active du principe actif selon l'invention, une étude a été réalisée. Cette étude consiste à réaliser la précipitation à l'éthanol du principe actif, et à fractionner par chromatographie le culot récupéré afin de séparer les différentes espèces moléculaires présentes.
Sur la base des relations structure-fonction, la structure de la fraction active du principe actif selon l'invention a ensuite été identifiée puis caractérisée. Elle correspond à des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), en particulier des HRGPs comprenant des chaînes glycosylées majoritairement composées de galactose, acide galacturonique et mannose. PROCEDE D'OBTENTION
Le principe actif selon l'invention peut être obtenu préférentiellement par un procédé comprenant une hydrolyse enzymatique avec une carbohydrase, et une hydrolyse enzymatique avec une protéase.
Un procédé particulièrement adapté comprend au moins la succession des étapes suivantes :
- solubilisation de fibres de soja dans l'eau,
- deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation,
- inactivation par traitement thermique, et
- ultraf iltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat.
Cette dernière étape permet de retenir les molécules et de les sélectionner en fonction de leur taille, mais également en fonction de leur configuration dans l'espace.
Préférentiellement, le procédé comprend les étapes suivantes :
- solubilisation de fibres de soja dans l'eau,
- deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation,
- inactivation par traitement thermique,
- ajustement du pH,
- f iltration presse,et
- ultraf iltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat. Des étapes de décoloration et de désodorisation de la phase soluble, peuvent être envisagées sans modif ier la partie active des principes actifs.
Les différentes étapes sont usuelles dans le domaine des extractions d'actifs à partir de plantes, et l'homme du métier est à même d'en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales, afin d'obtenir des extraits contenant au moins des glycopeptides riches en hydroxyproline.
COMPOSITIONS COSMÉTIQUES ET PROCÈDE COSMÉTIQUE DE SOIN DE LA PEAU
La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) de fibres de soja ou au moins un principe actif issu de f ibres de soja comprenant des HRGPs, dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée.
Ces compositions peuvent se présen er notamment sous forme d'émulsions huile- dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse, ou sous forme solide.
Ces compositions sont préférentiellement des compositions contenant entre 0,01 et 20%, en poids de principe(s) actif(s) issu(s) de f ibres de soja comprenant des HRGPs selon la présente invention, préférentiellement entre 0,1% et 2%.
Ces compositions comprennent, outre l'actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d'inconfort inacceptables pour l'utilisateur tels que des rougeurs, tiraillements ou picotements. Ce milieu contient généralement de l'eau.
Les compositions selon l'invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi : - les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ;
- les cires, telles que l'ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d'abeille ou la cire de carnauba ;
- les élastomères de silicone,
- les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu'ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères ;
- les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires ;
- les épaississants et/ou gélifiants,
- les humectants, tels que les polyols comme la glycérine ;
- les filtres organiques,
- les filtres inorganiques,
- les colorants, les conservateurs, les charges,
- les tenseurs,
- les séquestrants,
- les parfums,
- et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative.
Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingrédient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council).
Ces compositions sont notamment destinées à la lutte contre l'apparition des rides.
L'invention vise à cet effet un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre l'apparition des rides, en particulier à lisser le microrelief de la peau et/ou à combler les rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant des HRGPs issus de fibres de soja ou un principe actif en contenant, en particulier d'une composition renfermant entre 0,01 et 20% en poids de principe(s) ac†if(s) issu(s) de Soja selon la présente invention.
Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée.
EXEMPLES
Un exemple non limitatif de procédé d'obtention, de principe actif obtenu à partir de fibres de Soja comprenant des HRGPs, est présenté en suivant, ainsi que des exemples de composition incluant un tel principe actif.
Exemple 1 : procédé d'obtention du principe actif selon l'invention
Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- solubilisation de poudre de fibres de soja dans l'eau à raison de 50g/l, - deux hydrolyses enzymatiques successives, en présence d'une carbohydrase et d'une protéase,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation,
- inactivation par traitement thermique,
- ajustement du pH,
- f iltration, et
- ultraf iltration entre 5000 Da et 18000 Da, et récupération du rétentat. Le principe actif obtenu présente les caractéristiques suivantes :
- une teneur en matières sèches de 26,9 g/1,
- un pH de 5,8
- une teneur en sucres totaux de 58,3% en poids par rapport à la matière sèche,
- une teneur en protéines totales de 6,2% en poids par rapport à la matière sèche, dont la teneur en hydroxyproline est de 31mg/g de protéines, - une fraction glycopeptides contenant 0,64g/l de protéines et 4,8g/l de sucres, soit 20% de glycopeptides en poids de matière sèche ; la masse molaire moyenne des glycopeptides riches en hydroxyproline est de 13600 Da,
- une teneur en cendres de 9,5% en poids par rapport à la matière sèche, - une teneur en polyphenols de 0,15% en poids par rapport à la matière sèche, et
- une teneur en acides uroniques de 28,85% en poids par rapport à la matière sèche. Exemple 2 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans un fluide jour antirides
Phase A . Eau QSP 100%
Carbopol Ultrez 20 (Noveon) 0,3%
Glycérine 4%
Phase B. itaBate 20 (Cornélius) 4,5%
DUB PTCC (Stéarinerie Dubois) 6%
Montane 481 (Seppic) 3,2%
Beurre de karité (Sictia) 2%
Phase C. Conservateur 0,7%
Principe actif selon l'invention (exemple 1 ) 2%
Phase D. NaOH QSP
Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Cette émulsion fluide présente un pH de 5,2.
Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A, bien disperser le gel à 50°C sous agitation mécanique,
- Mélanger B, chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique,
- Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator,
- A 50°C, ajouter C, - A 30°C, ajuster le pH avec D, puis laisser sous émulseur jusqu'à ce que I emulsion soit uniforme.
Exemple 3 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans une crème de nuit
Phase A. Eau QSP 100
Satiaxane CX930 (Degussa) 0,5 %
Phase B. Pelemol 2014 (Cornélius) 2 %
itabate 20 (Cornélius) 2 %
Ritabate 165 (Cornélius) 4 %
PhytoWax Olive 10L40 (Sophim) 3 %
DC 73100 (Dow Corning) 1 %
DUB PTCC (Stéarinerie Dubois) 1 %
DUB BA (Stéarinerie Dubois) 2%
Phase C. Conservateur 0,7 %
Principe actif selon l'invention (exemple 1) 2%
Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Cette émulsion présente un pH de 6,2.
Elle peut être obtenue par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A, bien disperser le gel à 50°C sous agitation mécanique, - Mélanger B, chauffer A et B à 80°C, sous agitation mécanique,
- Emulsionner B dans A sous émulseur rotor stator,
- A 40°C, additionner C, dans l'ordre
- Laisser sous agitation, jusqu'à complète homogénéisation. Exemple 4 : utilisation d'un principe actif de l'invention dans un sérum
Phase A. Eau QSP 100%
Carbopol 940 (Noveon) 2,5 %
Phase B. Ritaphyl ICS (Cornélius) 6,3 % IPP 5,7 %
Pelemol 2014 (Cornélius) 1 %
Ritastearic (Cornélius) 2,5 % Montanov 202 (Seppic) 1,9 % Phase C. Conservateur 0,7 %
Principe actif sel l'invention (exemple 1) 2%
Phase D. NaOH Qsp pH 4,5
Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
Ce sérum présente un pH de 4,5.
II peut être obtenu par la mise en oeuvre des étapes suivantes :
- Mélanger A, bien disperser le gel sous agitation mécanique,
- Mélanger B,
- Chauffer A et B à 80°C,
- Emulsionner B dans A sous émulseur,
- A 40°C ajouter C et homogénéiser,
- Ajuster le pH avec D, sous forte agitation mécanique, et continuer l'homogénéisation sous émulseur jusqu'à complet refroidissement.
EVALUATION Ε L'EFFET ANTI- RIDES
Ces essais ont pour objet d'illustrer l'invention, en montrant l'efficacité antirides du principe actif selon l'invention, en comparaison à des substances de références, le palmitoyl pentapeptide-3 et la vitamine C, et en comparaison à d'autres principes actifs cosmétiques issus de fibres soja. A. Etudes in Vitro : effet sur la synthèse de collagène I
Le but de cette étude est d'évaluer l'effet d'un principe actif selon l'invention sur la synthèse de collagène I, composant majeur du derme, en comparaison : - à deux molécules de référence, la vitamine C et un palmitoyl pentapeptide-3, et
- aux produits A et B issus de fibres de soja, présentant des propriétés différentes et obtenus par la mise en oeuvre de procédés différents.
Le principe actif selon l'invention est celui de l'exemple 1.
Le produit A est un principe actif issu de fibres de soja, tel que mentionné dans la demande de brevet FR-2765803. Il présente les caractéristiques suivantes :
- taux de matière sèche : 17,6 g/1
- teneur en protéines : 5,3 g/1, soit 30,1% par rapport à la matière sèche,
- teneur en hydroxyproline : 4,636 mg/g de protéines,
- teneur en sucres : de 8,3g/l soit 41,2% par rapport à la matière sèche.
Le produit A peut être obtenu par la mise en oeuvre d'un procédé comprenant les étapes suivantes :
- solubilisation de fibres de soja dans l'eau,
- hydrolyse(s) enzymatique(s) simultanées ou successives,
- ajustement du pH,
- séparation des phases soluble et insoluble par filtration, centrif ugation, décantation,
- concentration de la fraction active par filtration, ultraf iltration, osmose inverse, ou nanof iltration, et
- filtration stérilisante.
Le produit B est un principe actif issu de fibres de soja présentant les caractéristiques suivantes :
- taux de matière sèche : 82,8g/l - teneur en protéines : 45,4g/l
- pH : 6,9.
Le produit B est obtenu par la mise en oeuvre du procédé comprenant les étapes suivantes :
- obtention d'un produit X :
- solubilisation de tourteau de soja à raison d'au moins 50 g/l en poids, dans de l 'eau à pH acide,
- hydrolyses enzymatiques simultanées ou successives en présence de protéases,
- filtration, décantation ou centrifugation afin de séparer la phase solubilisée et les produits insolubles, et
- concentrations successives de la phase active par filtration, ultraf iltration, osmose ou nanof iltration.
- obtention d'un produit Y
- solubilisation de fibres de soja dans de l 'eau à pH basique,
- au moins une hydrolyse enzymatique à l 'aide d'au moins une protéase,
- filtration, décantation ou centrifugation afin de séparer la phase solubilisée et les produits insolubles, et
- concentrations successives
- mélange de X et Y.
L'étude a été réalisée sur f ibroblastes humains normaux par dosage ELISA et par immunocytologie.
Le protocole opératoire est le suivant.
A JO, les f ibroblastes humains sont ensemencés dans un milieu de culture adapté et les cellules sont incubées à 37°C. A J2, Le milieu de culture est éliminé et remplacé par un milieu contant un principe actif de l'exemple 1 selon l'invention à 0,01% - 0,05% - 0,10% et 0,25% (V/V) ou la vitamine C à 0,25pg/ml ou un palmitoyl pentapeptide-3 à 1% ou le produit A à 0,10% ou encore le produit B à 1 ou 2%.
Les cellules sont ensuite incubées à 37°C.
A J3, les surnageants sont récupérés et stockés à -80°C en attente du dosage ELISA. Par ailleurs, un marquage immunocytologique est également réalisé.
Les résultats obtenus du taux de collagene I synthétisé en pourcentage par rapport à un témoin négatif sont présentés dans le tableau ci-après :
Figure imgf000020_0001
On constate que le principe actif selon l'invention stimule la synthèse du collagène I par les fibroblastes humains normaux, même à très faible concentration. Ces résultats montrent notamment que testé à 0,25%, le principe actif selon l'invention stimule la synthèse du collagene I par les f ibroblastes humains normaux de 1190%. Cet effet est dose dépendant et comparable à celui de la vitamine C testée à 0,25pg/ml.
On constate enfin, que l'eff icacité observée est bien supérieure à celle d'autres hydrolysats de soja, ne présentant pas les caractéristiques particulières de la présente invention, et comparable à celle obtenue avec les molécules de synthèse de référence.
B. Etudes in Vivo : Etude des propriétés anti- rides
L' objectif de cette étude est d'évaluer in vivo l'effet anti-rides d'un principe actif selon l'invention formulé à 2% en émulsion contre placebo au niveau de la patte d'oie par projection de franges.
Cette étude a été réalisée sur deux groupes de volontaires sains, de sexe féminin, présentant des rides au niveau de la zone d'étude : l'un testant le placebo, l'autre le principe actif selon l'invention (principe actif de l'exemple 1).
En parallèle, une autre étude a été menée pour évaluer l'effet de deux molécules de référence (molécules de synthèse) dans les mêmes conditions, contre placebo :
- un palmitoyl pentapeptide-3 formulé à 3% en émulsion
- le rétinol formulé à 0,075% en émulsion.
L'étude des molécules de référence a été réalisée en hémi-visage. Les produits ont été randomisés sur 43 volontaires répartis de la façon suivante :
- 31 hémi-visages pour l'étude du placebo, volontaires d'âge moyen 55 ± 9 ans,
- 27 hémi-visages pour l'étude du palmitoyl pentapeptide-3 , volontaires d'âge moyen 54 ± 10 ans, - 28 hémi-visages pour l'étude du rétinol, volontaires d'âge moyen 52 ± 9 ans.
La méthode d'analyse utilisée pour l'étude consiste à réaliser des acquisitions en 3D par projection de franges de la patte d'oie. Les acquisitions sont réalisées à l'aide d'un appareil de projection de franges dédié à la mesure 3D du relief cutané. L'effet du produit est mesuré sur une région d'intérêt de 15x15mm découpée automatiquement sur l'acquisition originale.
Les paramètres les plus pertinents retenus pour cette étude sont :
- des paramètres de rugosité en 3D
Sq : moyenne quadratique de rugosité de surface
Sa : moyenne arithmétique de rugosité de surface
- Des paramètres de volume
volume positif : volume supérieur à la surface de la peau
volume négatif : volume inférieur à la surface de la peau
Une diminution de ces différents paramètres est caractéristique d'une amélioration du relief de la surface étudiée et d'une diminution des rides.
Le protocole opératoire de l'étude est décrit en suivant.
Entre J-14 et JO, les volontaires appliquent une crème placebo deux fois par jour sur l'ensemble du visage.
A JO, on réalise une acquisition en 3D de la patte d'oie par projection de franges.
Entre JO et J55, les volontaires appliquent bi quotidiennement les produits. A J56, on réalise à nouveau une acquisition en 3D de la patte d'oie par projection de franges.
Les résultats obtenus en pourcentage de variation par rapport au résultats obtenus pour le placebo, sont présentés dans les tableaux suivants : * Paramètres de rugosité 3D :
Figure imgf000023_0001
Paramètres de volume
Figure imgf000023_0002
On constate que le principe actif selon l'invention permet de lisser le relief cutané au niveau des pattes d'oie et de réduire les rides en diminuant le volume négatif et le volume positif.
En particulier, dans les conditions de cette étude, après 56 jours d'applications biquotidiennes, le principe actif selon l'invention formulé à 2% :
- lisse le relief cutané au niveau des pattes d'oie : il diminue le paramètre Sa de 9,8% et le paramètre Sq de 9,5%, - réduit les rides en permettant une diminution des paramètres : de volume négatif de 21,1% et de volume positif de 27,0%.
On constate enfin, que l'efficacité observée est comparable à celle obtenue avec les molécules de synthèse de référence, sur tous les paramètres après 56 jours de traitement.

Claims

REVENDICATIONS
1. Principe actif cosmétique comprenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja.
2. Principe actif cosmétique selon la revendication 1, caractérisé en ce que les glycopeptides présents dans le principe actif présentent une masse moléculaire moyenne comprise entre 1500 Da et 60000 Da.
3. Principe actif cosmétique selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que les glycopeptides présents dans le principe actif présentent une masse moléculaire moyenne de 13600 Da.
4. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la partie glycosylée des glycopeptides présents dans le principe actif est composée au moins de galactose, d'acide galacturonique et de mannose.
5. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la teneur en hydroxyproline est d'au moins 18mg/g de protéines.
6. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la teneur en sucres totaux du principe actif est supérieure à 37% du poids total de la matière sèche.
7. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé la teneur en sucres totaux du principe actif est comprise entre 50 et 70% du poids total de la matière sèche.
8. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il en ce qu'il présente au moins l'une des caractéristiques suivantes, les pourcentages étant en poids par rapport à la teneur totale en matière sèche :
- une teneur en sucres totaux comprise entre 50 et 70%, - une teneur en protéines totales comprise entre 5 et 7%,
- une teneur en glycopeptides comprise entre 8 et 30%.
9. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il présente un taux de matières sèches compris entre 22 et 32g/l.
10. Procédé d'obtention d'un principe actif selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend au moins les étapes suivantes :
- solubilisation de fibres de soja dans l'eau,
- deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation,
- inactivation par traitement thermique, et
- ultraf iltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat.
11. Procédé d'obtention d'un principe actif selon l'une revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes :
- solubilisation de fibres de soja dans l'eau,
- deux hydrolyses enzymatiques successives ou simultanées, l'une en présence d'une carbohydrase et l'autre en présence d'une protéase,
- séparation des phases soluble et insoluble par décantation,
- inactivation par traitement thermique,
- ajustement du pH,
- f iltration pressent
- ultraf iltration entre 5000 Da et 18000 Da et récupération du rétentat.
12. Utilisation de glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja, ou d'un actif issu de fibres de soja contenant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs), en tant que principe actif cosmétique antirides.
13. Utilisation d'un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9, en tant que principe actif cosmétique anti-rides.
14. Utilisation selon la revendication 12 ou 13, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à lutter contre l'apparition des rides.
15. Utilisation selon l'une des revendications 12 à 14, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à lisser le microrelief de la peau et/ou à combler les rides.
16. Utilisation selon l'une des revendications 12 à 15, en tant que principe actif cosmétique dans une composition cosmétique destinée à stimuler la synthèse de collagène I des cellules de la peau.
17. Composition cosmétique pour application topique, caractérisée en ce qu'elle comprend un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9 présent entre 0,01 et 20% en poids total de la composition.
18. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lutter contre l'apparition des rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant des glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja ou un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9.
19. Procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à lisser le microrelief de la peau et/ou à combler les rides, comprenant l'application topique d'une composition renfermant glycopeptides riches en hydroxyproline (HRGPs) issus de fibres de soja ou un principe actif selon l'une des revendications 1 à 9.
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