JP2007502114A - 改良されたグルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドおよび関連ポリヌクレオチド - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、酵素学の分野、特にグルコースデヒドロゲナーゼ酵素学に関する。より詳細には、本発明は、改良酵素活性(即ち、高い基質ターンオーバー)、安定性を有するグルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドおよび改良グルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに関する。本発明は、グルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドが、酸化酵素または還元酵素と共役して、高収率で合成有機化学品または前駆体を産生し得るので有用である。
グルコースデヒドロゲナーゼ[EC.1.1.1.47]または「GDH」は、β−グルコースおよびニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(NAD)のグルコノラクトンンおよび還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドへの反応を触媒する。NADは、この反応において補因子としての役目を果たし、そしてNADPの形態でリン酸化され得る。GDHは、臨床検査および食品産業において使用される重要な酵素である。GDHはまた、化学的変換のための触媒として使用され、アルデヒドおよびケトンなどの酵素的カルボニル還元においてNADHおよびNADPHの再生において役目を果たす。
本発明は、複数の局面を有する。1つの局面では、本発明は、配列番号2の野生型GDHの少なくとも1.5倍、典型的には1.5〜約25倍、より典型的には1.5〜約11培のGDH活性(実施例4の方法により決定される)を有するポリペプチドに関し、そして、以下からなる群より選択される:
(a)配列番号54、74、84、160、164または168のアミノ酸配列と少なくとも91%の相同性、好ましくは少なくとも95%の相同性、そしてより好ましくは少なくとも98%の相同性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチド(以降「相同性ポリペプチド」という);
(b)(i)配列番号53、73、83、159、163または167のヌクレオチド配列、(ii)少なくとも100ヌクレオチドの(i)の部分配列、または(iii)(i)もしくは(ii)の相補鎖のいずれかと中程度のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によりコードされるポリペプチド(J.Sambrook、E.F.FritschおよびT.Maniatis、1989、Molecular Cloning、A Laboratory Manual、第2版、Cold Spring Harbor、N.Y.);
(c)1〜6のアミノ酸の置換、欠失および/または挿入を含む、配列番号54、74、84、160、164または168のポリペプチドの改変体;
(d)配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(a)、(b)または(c)のフラグメント;および
(e)50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高い活性を保持する(a)、(b)または(c)のポリペプチド。
本発明は、複数の局面を有する。1つの局面では、本発明は、配列番号2の野生型GDHの少なくとも1.5倍、典型的には1.5〜約25倍、より典型的には1.5〜約11培のGDH活性(例えば、実施例4の方法により決定される)を有するポリペプチドに関し、そして、以下からなる群より選択される:
(a)配列番号54、74、84、160、164または168のアミノ酸配列と少なくとも91%の相同性、好ましくは少なくとも95%の相同性、より好ましくは少なくとも98%の相同性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチド(以降「相同性ポリペプチド」という);
(b)(i)配列番号53、73または83のヌクレオチド配列、(ii)少なくとも100ヌクレオチドの(i)の部分配列、または(iii)(i)もしくは(ii)の相補鎖のいずれかと中程度のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によりコードされるポリペプチド(J.Sambrook、E.F.FritschおよびT.Maniatis、1989、Molecular Cloning、A Laboratory Manual、第2版、Cold Spring Harbor、N.Y.);
(c)1個〜6個のアミノ酸の置換、欠失および/または挿入を含む、配列番号54、74、84、160、164または168のポリペプチドの改変体;
(d)配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(a)、(b)または(c)のフラグメント;および
(e)50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高い活性を保持する(a)、(b)または(c)のポリペプチド。
第2の局面では、本発明は、本発明のGDHポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列に関する。遺伝子コードの縮重が与えられる場合、本発明はまた、本発明の上記参照GDHポリペプチドをコードする全てのポリヌクレオチドに関する。好ましい実施形態では、本発明は、配列番号54、74、84、160、164および168の新規なグルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドを、それぞれコードする配列番号53、73、83、159、163および167のある特定のポリヌクレオチドに関する。
別の局面では、本発明はまた、本発明のポリヌクレオチド(本発明のGDHポリペプチドをコードする)、そして例えばプロモーターおよびターミネーター、複製起点等のような1以上の発現調節領域を、それらが導入される宿主のタイプに依存して、含有する、組換え発現ベクターに関する。上述の種々の核酸配列および制御配列は、そのような部位において上記ポリペプチドをコードする核酸配列の挿入または置換を可能にする、1以上の都合の良い制限部位を含み得る組換え発現ベクターを産生するために一緒に結合され得る。代替的に、本発明の核酸配列は、核酸配列またはその核酸配列を含む核酸構築物を発現に適切なベクターに挿入することにより発現され得る。その発現ベクターを作製する際に、上記コード配列は、そのコード配列が発現のための適切な制御配列に作動可能に連結されるようにベクターの中で位置付けられる。
本発明で使用される発現ベクターの多くは、市販のものである。適切な市販の発現ベクターとしては、SigmaーAldrich Chemicals、St.Louis MO.、からのp3xFLAGTMTM発現ベクター(哺乳動物細胞宿主において発現するためのCMVプロモーターおよびhGHポリアデニル化部位およびpBR322複製起点ならびにE.coliにおける増幅のためのアンピシリン耐性マーカーを包含する)が挙げられる。他の適切な発現ベクターは、pBluescriptII SK(−)およびpBK−CMVであり、それらは、Stratagene、LaJolla CAから市販されており、pBR322(Gibco BRL)、pUC(Gibco BRL)、pREP4、pCEP4(Invitrogene)またはpPoly(Latheら、1987、Gene 57、193〜201)由来のプラスミドである。
本発明の発現ベクターを発現させるのに使用される宿主細胞としては、例えば、E.coli、StreptmycesおよびSalmonella typhimurium細胞のような細菌細胞;真菌細胞、例えば、酵母細胞(例えば、Saccharomyces cerevisiae またはPichia pastoris(ATCC受託番号201178));例えば、Drosophila S2およびSpodoptera Sf9細胞のような昆虫細胞;例えば、CHO、COS、293およびBowesメラーノーマ細胞のような動物細胞;ならびに植物細胞が挙げられるが、これらに限定されない。上述の宿主細胞にとっての適切な培養培地および条件は、当業者に周知である。
一度、上記GDHポリペプチドが、E.coliにおいて上記改変体遺伝子により発現されると、上記ポリペプチドは、リゾチーム処理、超音波処理、濾過、塩析、超遠心、アフィニティクロマトグラフィーなどを含む、タンパク質精製の周知の1以上の技術のいずれかを使用して、細胞およびまたは培養培地から精製される。例えばE.coliのような細菌由来のタンパク質の高効率的な抽出のための適切な溶液は、St.Louis MO.のSigma−AldrichからCelLytic BTMという商品名で市販されている。化学的プロセスにおいて適用されるために細胞ライゼートから十分にGDHポリペプチドを精製するのに適切なプロセスは、本明細書の実施例3に開示されている。
増強されたGDH活性の発現ライブラリーからGDHポリペプチドのクローンをスクリーニングすることは、典型的にはNADHまたはNADPHの生成速度を、吸収もしくは蛍光の増加を通じてモニタリングする標準的な生化学的技術を使用して実施される。そのような手順は、本明細書の実施例4に記載されている。
上記グルコースデヒドロゲナーゼの遺伝子を、Bacillus subtilisおよびBacillus megateriumのゲノムDNA調製物からポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を使用して増幅した。増幅反応のプライマーは、公開されたB.subtilisおよびB.megateriumグルコースデヒドロゲナーゼ遺伝子配列を使用して以下の通り、設計した:
通気攪拌発酵槽において、0.528g/L、硫酸アンモニウム、7.5g/Lのリン酸水素二カリウム三水和物、3.7g/Lのリン酸二水素カリウム、2g/LのTastone−154酵母抽出物、0.05g/Lの硫酸鉄(II)、および、2g/L塩化カルシウム二水和物、2.2g/Lの硫酸亜鉛七水和物、0.5g/Lの硫酸マンガン一水和物、1g/Lの硫酸第1銅七水和物、0.1g/Lのホウ酸ナトリウム十水和物ならびに0.5g/LのEDTAを含む、3ml/Lの微量元素溶液を含む,10.0Lの増殖培地を30℃の温度にした。
上記細胞ペーストを、1容量の細胞湿重量の細胞ペーストを、3容量の100mMトリス/硫酸(pH7.2)に懸濁して洗浄し、その後Sorval 12BPにおいて5000gで40分間遠心分離する。上記洗浄した細胞ペーストを、2容量の100mMトリス/硫酸(pH7.2)に懸濁した。上記細胞内GDHについて、上記懸濁液を、第1回の通過は14,000psigの圧力そして第2回の通過については8,000psigを使用して、ホモジナイザーを通して、計2回の通過をさせて、細胞から放出した。そのホモジネートをBeckman lab遠心分離器で、10,000rpmで60分遠心分離した。上記上清を、デカントして浅い容器に分配し−20℃で凍結し、凍結乾燥した。
細胞を0.5%グルコースおよび30μg/mlクロラムフェニコールを有する2xYTの中で30℃で一晩増殖した。この培養液を、次いで30μg/mlクロラムフェニコールを含有する新鮮なLBに、20倍に希釈し、37℃で2時間増殖後、1mMのIPTG(イソプロピルチオガラクトシド)を添加した。その培養液(0.3ml)を、さらに4〜5時間、37℃で増殖した。
pH電極制御自動滴定器を装備した100mLの反応槽に、100mMのトリエタノールアミンpH7緩衝液(25mL)中におけるグルコース(7.5g)溶液を入れた。この溶液に、上記2種の酵素(100mg KRED;50mg GDH)およびNADP(6.25mg)を入れた。(「KRED」はケトレダクターゼまたはカルボニルレダクターゼ分類(EC1.1.1.184)で、対応するプロキラルのケトン基質から光学的に活性のアルコールの合成に有用である)。酢酸ブチル(10ml)を、次いでいれた。最終的には、酢酸ブチル(10mL)中に、4−クロロアセト酢酸エチル(6g)をその反応槽に入れた。4MNaOHを自動滴定器(pH6.85を最下限としてセットした)により、必要に応じて滴下して常にpHを7.0に調節した。上記反応を、苛性ソーダを必要としなくなった場合に完結した。上記反応速度は、時間当たりに添加した塩基の量を測定することにより、または上記反応混合物のサンプルを取って、そのサンプルを3回等容量の酢酸エチルで抽出して、合わせた有機層をガスクロマトグラフィーで単位時間当たり産生されるエチル−S−4−クロロ−3−ヒドロキシ酪酸の量を決定して分析することにより、決定した。
Claims (21)
- 配列番号2の野生型GDHの少なくとも1.5倍のGDH活性を有するペプチドであって、
(a)配列番号54、74、84、160、164または168のアミノ酸配列と少なくとも91%の相同性を有するアミノ酸配列を有するポリペプチド;
(b)
(i)配列番号53、73、83、159、163または167のヌクレオチド配列、
(ii)少なくとも100ヌクレオチドの(i)の部分配列、または
(iii)(i)もしくは(ii)の相補鎖のいずれかと中程度のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によりコードされるポリペプチド;
(c)1個〜6個のアミノ酸の置換、欠失および/または挿入を含む、配列番号54、74、84、160、164または168のポリペプチドの改変体;
(d)配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(a)、(b)または(c)のフラグメント;および
(e)50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高い活性を保持する(a)、(b)または(c)のポリペプチド
からなる群より選択される、ポリペプチド。 - 請求項1に記載のグルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチド。
- 請求項1に記載のポリペプチドをコードする核酸配列を含む、単離された、核酸配列。
- 作動可能にプロモータに連結される請求項2に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
- 請求項2に記載のポリヌクレオチドを発現するように形質転換された、宿主細胞。
- 請求項1に記載のGDHポリペプチドを作製する方法であって、該ポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸構築物を含有する宿主細胞を、該ポリペプチドの産生に適切な条件下で培養する工程;ならびに該ポリペプチドを回収する工程を包含する、GDHポリペプチドを作製する方法。
- 請求項1に記載の単離および精製された、GDHポリペプチド。
- 凍結乾燥された形態の請求項1に記載のGDHポリペプチド。
- 配列番号54、74、84、160、164または168のアミノ酸配列と少なくとも91%の相同性を有するアミノ酸配列を有する、請求項1に記載のポリペプチド。
- (i)配列番号53、73、83、159、163または167のヌクレオチド配列、
(ii)少なくとも100ヌクレオチドの(i)の部分配列、または
(iii)(i)もしくは(ii)の相補鎖
のいずれかと中程度のストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸配列によりコードされる、請求項1に記載のポリペプチド。 - 1個〜6個のアミノ酸の置換、欠失および/または挿入を含む、配列番号54、74、84、160、164または168のポリペプチドの改変体である、請求項1に記載のポリペプチド。
- 配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(a)、(b)または(c)のフラグメントである、請求項1に記載のポリペプチド。
- 配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(a)のフラグメントである、請求項12に記載のポリペプチド。
- 配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(b)のフラグメントである、請求項12に記載のポリペプチド。
- 配列番号2の野生型GDHの1.5〜約11倍のGDH活性を有する(c)のフラグメントである、請求項1に記載のポリペプチド。
- 50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高く保持する(a)、(b)または(c)のポリペプチドである、請求項1に記載のポリペプチド。
- 50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高く保持する(a)のポリペプチドである、請求項16に記載のポリペプチド。
- 50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高く保持する(b)のポリペプチドである、請求項16に記載のポリペプチド。
- 50℃およびpH7での20分間のインキュベーション後、初期のGDH活性の80%より高く保持する(c)のポリペプチドである、請求項16に記載のポリペプチド。
- 緩衝媒体中に請求項1に記載のポリペプチドを含有する、組成物。
- グルコースデヒドロゲナーゼ酵素活性を有するポリペプチドであって、配列番号52と少なくとも84%の配列同一性を有するGDHポリペプチド、配列番号72と少なくとも98%の配列同一性を有するGDHポリペプチドおよび配列番号58と少なくとも98%の配列同一性を有するGDHポリペプチドからなる群より選択される、ポリペプチド。
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Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007516717A (ja) * | 2003-12-24 | 2007-06-28 | ダニスコ エイ/エス | タンパク質 |
JP2009034062A (ja) * | 2007-08-03 | 2009-02-19 | Kao Corp | アルカリプロテアーゼ |
JP2009034063A (ja) * | 2007-08-03 | 2009-02-19 | Kao Corp | アルカリプロテアーゼの安定性向上方法 |
JP2010142243A (ja) * | 2003-12-24 | 2010-07-01 | Danisco As | リン脂質転移酵素活性が向上した脂質アシル基転移酵素変異体 |
WO2012133761A1 (ja) * | 2011-03-30 | 2012-10-04 | ユニチカ株式会社 | 改変型グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP5846687B2 (ja) * | 2009-12-05 | 2016-01-20 | 天野エンザイム株式会社 | 変異酵素及びその用途 |
JP6480629B1 (ja) * | 2018-08-07 | 2019-03-13 | キッコーマン株式会社 | グルコースデヒドロゲナーゼの組換え製造方法 |
Families Citing this family (44)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ATE501264T1 (de) * | 2002-08-09 | 2011-03-15 | Codexis Inc | Enzymatische verfahren zur herstellung 4- substituierter 3-hydroxybuttersäure-derivate |
CA2511656A1 (en) | 2002-12-24 | 2004-07-15 | Ikeda Food Research Co., Ltd. | Coenzyme-binding glucose dehydrogenase |
AU2004266100A1 (en) | 2003-08-11 | 2005-03-03 | Codexis, Inc. | Enzymatic processes for the production of 4-substituted 3-hydroxybutyric acid derivatives and vicinal cyano, hydroxy substituted carboxylic acid esters |
JP2007502114A (ja) | 2003-08-11 | 2007-02-08 | コデクシス, インコーポレイテッド | 改良されたグルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドおよび関連ポリヌクレオチド |
DE102004059376A1 (de) * | 2004-12-09 | 2006-06-22 | Consortium für elektrochemische Industrie GmbH | GDH-Mutante mit verbesserter chemischer Stabilität |
EP2365073A1 (en) | 2005-03-25 | 2011-09-14 | Ikeda Food Research Co. Ltd. | Coenzyme-linked glucose dehydrogenase and polynucleotide encoding the same |
DE102005036880A1 (de) * | 2005-08-02 | 2007-02-08 | Julich Chiral Solutions Gmbh | Stereoselektive Synthese von chiralen Diolen |
KR20090083900A (ko) | 2006-10-02 | 2009-08-04 | 코덱시스, 인코포레이티드 | 입체이성질체적으로 순수한 스타틴 및 이의 합성 중간체 제조용 조성물 및 제조 방법 |
JP4348563B2 (ja) * | 2006-11-14 | 2009-10-21 | 東洋紡績株式会社 | 改変型フラビンアデニンジヌクレオチド依存性グルコースデヒドロゲナーゼ |
CN101784669B (zh) | 2007-08-24 | 2015-02-18 | 科德克希思公司 | 用于(r)-3-羟基四氢噻吩的立体选择性制备的改善的酮还原酶多肽 |
EP2093284A1 (de) * | 2008-02-19 | 2009-08-26 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Stabilisierung von Dehydrogenasen mit stabilen Coenzymen |
EP2329013B1 (en) | 2008-08-27 | 2015-10-28 | Codexis, Inc. | Ketoreductase polypeptides for the production of a 3-aryl-3-hydroxypropanamine from a 3-aryl-3-ketopropanamine |
US8288141B2 (en) * | 2008-08-27 | 2012-10-16 | Codexis, Inc. | Ketoreductase polypeptides for the production of 3-aryl-3-hydroxypropanamine from a 3-aryl-3-ketopropanamine |
WO2010027710A2 (en) | 2008-08-27 | 2010-03-11 | Codexis, Inc. | Ketoreductase polypeptides and uses thereof |
SG10201404330VA (en) | 2008-08-29 | 2014-10-30 | Codexis Inc | Ketoreductase Polypeptides For The Stereoselective Production Of (4S)-3[(5S)-5(4-Fluorophenyl)-5-Hydroxypentanoyl]-4-Phenyl-1,3-Oxazolidin-2-One |
EP2398909B1 (de) | 2009-02-19 | 2015-07-22 | F. Hoffmann-La Roche AG | Schnelle reaktionskinetik von enzymen mit niedriger aktivität in trockenen chemieschichten |
KR20130127555A (ko) | 2009-02-19 | 2013-11-22 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 건식 화학 층에서 낮은 활성을 갖는 효소의 고속 반응 속도 |
WO2011005527A2 (en) | 2009-06-22 | 2011-01-13 | Codexis, Inc. | Ketoreductase-mediated stereoselective route to alpha chloroalcohols |
ES2575560T3 (es) | 2009-08-19 | 2016-06-29 | Codexis, Inc. | Polipéptidos cetorreductasa para preparar fenilefrina |
EP2292751A1 (de) | 2009-08-20 | 2011-03-09 | Roche Diagnostics GmbH | Stabilisierung von Enzymen mit stabilen Coenzymen |
CN102884178B (zh) | 2009-12-08 | 2014-12-03 | 科德克希思公司 | 拉唑化合物的合成 |
WO2011073258A1 (de) | 2009-12-16 | 2011-06-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Detektion der zersetzung von enzymen in einem testelement durch kontrollierte freisetzung von geschütztem analyt |
US9040262B2 (en) | 2010-05-04 | 2015-05-26 | Codexis, Inc. | Biocatalysts for ezetimibe synthesis |
HUE037616T2 (hu) | 2010-12-08 | 2018-09-28 | Codexis Inc | Biokatalizátorok és eljárások armodafinil szintéziséhez |
EP2697662B1 (en) | 2011-04-13 | 2018-06-06 | Codexis, Inc. | Biocatalytic process for preparing eslicarbazepine and analogs thereof |
SG11201402401TA (en) | 2011-11-18 | 2014-06-27 | Codexis Inc | Biocatalysts for the preparation of hydroxy substituted carbamates |
EP2636750A1 (en) | 2012-03-06 | 2013-09-11 | Roche Diagniostics GmbH | Compatible solute ectoine as well as derivatives thereof for enzyme stabilization |
WO2013170050A1 (en) | 2012-05-11 | 2013-11-14 | Codexis, Inc. | Engineered imine reductases and methods for the reductive amination of ketone and amine compounds |
EP2770064A1 (de) | 2013-02-22 | 2014-08-27 | F. Hoffmann-La Roche AG | Hocheffiziente Herstellung von Blutglucose-Teststreifen |
WO2014150633A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Immobilized ketoreductases and process for making and using immobilized ketoreductase |
CN105358687B (zh) | 2013-04-17 | 2018-10-09 | 科学与工业研究委员会 | 在有效生产对映体富集的醇中用于酮的对映体选择性还原的设计师细胞及其应用 |
EP2994536B1 (en) | 2013-05-08 | 2017-06-14 | Roche Diabetes Care GmbH | Stabilization of enzymes by nicotinic acid |
CN106232619B (zh) | 2013-11-13 | 2022-09-09 | 科德克希思公司 | 工程化的亚胺还原酶和用于酮和胺化合物的还原胺化的方法 |
EP3074524B1 (en) | 2013-11-27 | 2019-11-06 | Roche Diabetes Care GmbH | Composition comprising up-converting phosphors for detecting an analyte |
EP2927319A1 (en) | 2014-03-31 | 2015-10-07 | Roche Diagnostics GmbH | High load enzyme immobilization by crosslinking |
EP3131882B1 (en) | 2014-04-14 | 2020-07-15 | Roche Diagnostics GmbH | Phenazinium mediators |
US10060907B2 (en) | 2014-08-22 | 2018-08-28 | Roche Diagnostic Operations, Inc. | Redoxindicators |
SG11201703258PA (en) | 2014-11-25 | 2017-05-30 | Codexis Inc | Engineered imine reductases and methods for the reductive amination of ketone and amine compounds |
EP3256577B1 (en) | 2015-02-10 | 2020-08-26 | Codexis, Inc. | Ketoreductase polypeptides for the synthesis of chiral compounds |
EP3523639A4 (en) | 2016-10-05 | 2020-06-03 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | DETECTION REAGENTS AND ELECTRODE ARRANGEMENTS FOR DIAGNOSTIC MULTIANALYTE TEST ELEMENTS AND METHOD FOR USE THEREOF |
EP3339431A1 (en) * | 2016-12-22 | 2018-06-27 | Roche Diabetes Care GmbH | Glucose dehydrogenase variants with improved properties |
EP3587393B1 (en) | 2018-06-21 | 2024-01-17 | F.I.S.- Fabbrica Italiana Sintetici S.p.A. | Enzymatic process for the preparation of droxidopa |
US20220090027A1 (en) * | 2018-12-10 | 2022-03-24 | The Regents Of The University Of California | Engineered polypeptides that exhibit increased catalytic efficiency for unnatural cofactors and uses thereof |
SG11202110860SA (en) * | 2019-05-01 | 2021-10-28 | Codexis Inc | Engineered glucose dehydrogenases and methods for the reductive amination of ketone and amine compounds |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002538782A (ja) * | 1999-02-19 | 2002-11-19 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング | グルコースデヒドロゲナーゼ融合蛋白質及び発現システムにおけるそれらの使用 |
JP2003061682A (ja) * | 2001-06-11 | 2003-03-04 | Sumitomo Chem Co Ltd | 還元酵素遺伝子及びその利用 |
Family Cites Families (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3019450A1 (de) | 1980-05-21 | 1981-11-26 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur gewinnung von glucosedehydrogenase und hierfuer geeigneter mikroorganismus |
US4542098A (en) | 1983-05-06 | 1985-09-17 | Institut Francais Du Petrole | Production of glucose dehydrogenase and use of the resultant enzyme in the enzymatic synthesis of L-carnitine |
US4877733A (en) | 1986-05-02 | 1989-10-31 | Toyo Jozo Kabushiki Kaisha | Glucose dehydrogenase and its production |
DE3711881A1 (de) | 1987-04-08 | 1988-10-27 | Merck Patent Gmbh | Verfahren zur herstellung von glucosedehydrogenase aus bacillus megaterium |
DE3808531C1 (ja) | 1988-03-15 | 1989-07-13 | Eppendorf - Netheler - Hinz Gmbh, 2000 Hamburg, De | |
JPH0286779A (ja) | 1988-09-22 | 1990-03-27 | Amano Pharmaceut Co Ltd | 改良型組換えdna、それを含む形質転換体及びそれを用いた耐熱性グルコースデヒドロゲナーゼの製造法 |
JP2850515B2 (ja) | 1990-09-25 | 1999-01-27 | 東洋紡績株式会社 | グルコースデヒドロゲナーゼおよびその製造法 |
GB9512837D0 (en) | 1995-06-23 | 1995-08-23 | Zeneca Ltd | reduction of ketone groups |
AU755543B2 (en) | 1997-12-19 | 2002-12-12 | Warner-Lambert Export Limited | Process for the synthesis of 1,3-diols |
HUP0103659A3 (en) | 1998-04-30 | 2003-01-28 | Kaneka Corp | Process for producing 6-cyanomethyl-1,3-dioxane-4-acetic acid derivatives |
HUP0101122A3 (en) | 1998-08-05 | 2006-02-28 | Kaneka Corp | Process for the preparation of optically active 2-[6-(hydroxymethyl)-1,3-dioxan-4-yl]acetic acid derivatives |
WO2001004336A1 (de) | 1999-07-09 | 2001-01-18 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Verfahren zur reduktion von keto-carbonsäuren und deren estern |
SI20642A (sl) | 1999-12-03 | 2002-02-28 | Kaneka Corporation | Nova karbonil-reduktaza, gen le-te in postopek za uporabo le-teh |
US6884607B2 (en) * | 2000-12-07 | 2005-04-26 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Process for producing optically active 4-halo-3-hydroxybutanoate |
ATE501264T1 (de) | 2002-08-09 | 2011-03-15 | Codexis Inc | Enzymatische verfahren zur herstellung 4- substituierter 3-hydroxybuttersäure-derivate |
JP2007502114A (ja) | 2003-08-11 | 2007-02-08 | コデクシス, インコーポレイテッド | 改良されたグルコースデヒドロゲナーゼポリペプチドおよび関連ポリヌクレオチド |
AU2004266100A1 (en) * | 2003-08-11 | 2005-03-03 | Codexis, Inc. | Enzymatic processes for the production of 4-substituted 3-hydroxybutyric acid derivatives and vicinal cyano, hydroxy substituted carboxylic acid esters |
-
2004
- 2004-08-11 JP JP2006523377A patent/JP2007502114A/ja active Pending
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2006
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- 2006-02-02 NO NO20060543A patent/NO20060543L/no not_active Application Discontinuation
-
2010
- 2010-05-28 US US12/790,784 patent/US7939309B2/en active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002538782A (ja) * | 1999-02-19 | 2002-11-19 | メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング | グルコースデヒドロゲナーゼ融合蛋白質及び発現システムにおけるそれらの使用 |
JP2003061682A (ja) * | 2001-06-11 | 2003-03-04 | Sumitomo Chem Co Ltd | 還元酵素遺伝子及びその利用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6010021853, Biotechnol. Lett., 2002, Vol.24, P.1227−1232 * |
JPN6010021855, Appl. Microbiol. Biotechnol., 200304, Vol.61, P.329−335 * |
JPN7010001227, J. Ferment. Bioeng., 1990, Vol.70, No.6, P.363−369 * |
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007516717A (ja) * | 2003-12-24 | 2007-06-28 | ダニスコ エイ/エス | タンパク質 |
JP2010142243A (ja) * | 2003-12-24 | 2010-07-01 | Danisco As | リン脂質転移酵素活性が向上した脂質アシル基転移酵素変異体 |
JP2009034062A (ja) * | 2007-08-03 | 2009-02-19 | Kao Corp | アルカリプロテアーゼ |
JP2009034063A (ja) * | 2007-08-03 | 2009-02-19 | Kao Corp | アルカリプロテアーゼの安定性向上方法 |
JP2016034280A (ja) * | 2009-12-05 | 2016-03-17 | 天野エンザイム株式会社 | 変異酵素及びその用途 |
JP5846687B2 (ja) * | 2009-12-05 | 2016-01-20 | 天野エンザイム株式会社 | 変異酵素及びその用途 |
US9023608B2 (en) | 2011-03-30 | 2015-05-05 | Nipro Corporation | Modified glucose dehydrogenase |
KR20140032393A (ko) * | 2011-03-30 | 2014-03-14 | 유니티카 가부시끼가이샤 | 개변형 글루코스 데히드로게나제 |
WO2012133761A1 (ja) * | 2011-03-30 | 2012-10-04 | ユニチカ株式会社 | 改変型グルコースデヒドロゲナーゼ |
JP5949757B2 (ja) * | 2011-03-30 | 2016-07-13 | ニプロ株式会社 | 改変型グルコースデヒドロゲナーゼ |
KR101980065B1 (ko) | 2011-03-30 | 2019-05-21 | 니프로 가부시키가이샤 | 개변형 글루코스 데히드로게나제 |
JP6480629B1 (ja) * | 2018-08-07 | 2019-03-13 | キッコーマン株式会社 | グルコースデヒドロゲナーゼの組換え製造方法 |
JP2020022382A (ja) * | 2018-08-07 | 2020-02-13 | キッコーマン株式会社 | グルコースデヒドロゲナーゼの組換え製造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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