JP2007314475A - トリアシルグリセロール合成抑制剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】柿の葉(Diospyros kaki)、メグスリノキ(Acer nikoense)、甜茶(Rubus suavissimus)、マカ(Lepidium meyenii Walp)及びウイキョウ(Foeniculum vulgare)から選ばれる1種以上の植物体又はその抽出物を有効成分とするトリアシルグリセロール合成抑制剤。
【選択図】なし
Description
我々の日常のほとんどは、食後という状態にあることから、代謝や動脈硬化を考える上で、食後の代謝状態は重要な意味をもつと考えられる。摂取脂肪量にもよるが、健常人においても、脂肪分を含む食事をした後の数時間、一過的に血中トリアシルグリセロール濃度の増加が起こる。脂肪分を過剰に摂取すると、トリアシルグリセロール濃度の増加がより長時間続くことになる。さらに、食後に血清脂質が異常な増加を示し、かつこの増加が蔓延する状態を一般的に食後高脂血症と呼び、食後高脂血症者は、高血圧や、虚血性心疾患などの動脈硬化性疾患の発症につながる危険性が高いことが指摘されている(非特許文献4、5参照)。
このようにCMやVLDLの合成及び放出の増加は、食後高脂血症の原因の一つであり、トリアシルグリセロール合成はCMやVLDL合成及び放出に深く関与している。
このような観点から、特に日常的に摂取しうる天然物由来の高脂血症抑制剤の探索が行われ、リパーゼ阻害活性や脂質吸収抑制活性を有する食品素材が見出されてきた(例えば、特許文献1〜3参照)。しかしながら、これまでに見出されている食品素材は、その有効性において十分満足のいくものではない。さらに、食品への嗜好性を考えると、多様性の観点からも、有効性に優れ、食経験が豊富で安全性の高い食品素材の探索がさらに必要とされる。
しかしながら、柿の葉、メグスリノキ、甜茶、マカ及びウイキョウ又はその抽出物にトリアシルグリセロールの合成抑制剤作用があることは全く知られていない。
また、本発明は、これらの植物体又はその抽出物を有効成分とする高脂血症の予防及び/又は改善剤、並びに食後高脂血症の予防及び/又は改善剤を提供するものである。
さらに、本発明は、これらの植物体又はその抽出物を有効成分とし、トリアシルグリセロール合成抑制作用を有するものであることを特徴とし、トリアシルグリセロールの合成抑制又は高脂血症の予防又は改善のために用いられるものである旨の表示を付した飲料又は食品を提供するものである。
これらは植物体をそのまま又は乾燥粉砕して用いることができる。
抽出は、例えば上記植物体1重量部に対して1〜50重量部の溶剤を用い、常温〜溶媒の沸点の範囲で数時間〜数日浸漬又は加熱還流するのが好ましい。
種々の形態の飲食品を調製するには、上記植物体又はその抽出物を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて用いることができる。
当該食品中の植物体の含有量は、一般的に0.002〜2質量%とすることが好ましく、特に0.02〜1質量%とすることが好ましい。一方、抽出物の含有量は、一般的に固形分換算で0.001〜2質量%とすることが好ましく、特に0.01〜1質量%とすることが好ましい。
柿の葉エキスについては、株式会社栃本天海堂より購入した柿(Diospyros kaki Thunb)の葉部200gを、20倍量(4リットル)の50%エタノールに常温で10日間浸漬し、不溶物を濾別後、減圧濃縮し抽出エキス末を得た(固形分33g)。メグスリノキエキスは、メグスリノキ(Acer nikoense Maxim)の木部より30%エタノールを用いて抽出された固形分1%を含むエキス液(松浦薬業株式会社)をそのまま、あるいは、減圧濃縮し抽出エキス末として使用した。甜茶エキスは、甜茶(Rubus suavissimus S. Lee)の葉部より熱水にて抽出されたエキス末(松浦薬業株式会社)を使用した。マカエキスは、マカ(Lepidium Meyenii Walp)の乾燥塊根よりエタノール/水で抽出されたエキス末(コペルニックスジャパン株式会社)を使用した。ウイキョウエキスは、ウイキョウ(Foeniculum vulgare)より精製水にて抽出されたエキス末(アスク薬品株式会社)を使用した。
小腸由来細胞株IEC−6細胞を、24穴プレートに1ウエル当たり1x105細胞となるように播き、10%牛胎児血清を添加したダルベッコ変法イーグル培地培地(DMEM)で1日培養した。次いで、各被験物質(固形成分として終濃度0.01%)と牛胎児血清(10%)を添加したDMEMに換え、1日間培養した。さらに、各被験物質(固形成分として終濃度0.01%)とオレイン酸(1mM)を、ウシ血清アルブミン(脂肪酸不含、250μM)を含むDMEM培地に換えた後、6時間培養した。培養した細胞は、氷冷したリン酸緩衝液(Phospate−Buffered Saline)で洗浄した後、トリプシン処理によりプレートより剥離し、10%牛胎児血清を添加したDMEMを用いて回収した。3500rpm、5分間の遠心分離した後、上清を除去して、細胞を100ng/ml ナイルレッドを含むリン酸緩衝液に懸濁してトリアシルグリセロール(TG)を染色した後、フローサイトメーター(ベクトンデッキンソン社製)を用いて染色された細胞10000個について蛍光強度を調べた。
被験物質のTG合成は、被験物質である抽出エキスの存在下でオレイン酸(OA)の添加に伴う平均蛍光強度の増加量を、溶媒添加時(エキス無添加;溶媒コントロール)におけるOAの添加に伴う平均蛍光強度の増加と比較することにより行った。すなわち、TG合成を以下の様に定義した。
実験動物は、日本クレアから購入したC57BL/6マウス(7週齢)を約1週間馴化した後使用した。トリアシルグリセロール合成抑制剤としては、上記で調製した柿の葉エキスを用いた。試験群及び対象群につき、一群19匹のマウスを用いた。対象群には、100gあたり、5gトリアシルグリセロール油、13gスクロース、20gカゼイン、4gセルロースパウダー、3.5gミネラル混合、1gビタミン混合、53.5gポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、0.5gのポテトスターチを柿の葉エキスに置き換えた餌を与え、飲水は水道水を自由摂取させた。3週間の飼育期間の後、15時間の絶食を行い、尾静脈採血を行った後、脂質負荷試験に供した。脂質負荷は、体重1g当たり40μlの脂質エマルジョン(10%トリアシルグリセロール油、1%卵黄レシチン、4%ウシ血清アルブミン)を、胃ゾンデを用いて経口投与することで行った。試験群に与える脂質エマルジョンにはさらに柿の葉エキスを終濃度0.5%となるように添加して用いた。投与1、2、4、6時間後に採血を行い、血漿中のトリアシルグリセロール濃度を測定した。TG濃度の測定は、トリグリセライドE−テストワコー(和光純薬工業株式会社)を用いて、グリセリン消去法により行った。反応は、96ウエルプレート中で行い、バイオラド社マイクロプレートリーダーMODEL550を用いてOD595nmの吸光度を測定した。キット付属のグリセリン標準液を用いて作製した検量線より、血漿に含まれるトリアシルグリセロール濃度を求めた。トリアシルグリセロール濃度の変化及び変化量(Δ)の結果を、それぞれ表2と表3に示す。
下記の成分を混合後ゼラチンカプセルに充填し、1錠250mgの軟カプセル剤を得た。
(組成) (%)
柿の葉エキス 30
甜茶エキス 30
メグスリノキエキス 20
乳糖 10
結晶セルロース 10
下記の成分を混合後ゼラチンカプセルに充填し、1錠250mgの軟カプセル剤を得た。
(組成) (%)
マカエキス 20
ウイキョウエキス 10
メグスリノキエキス 20
乳糖 25
結晶セルロース 25
下記成分を用い、常法に従って1錠200mgの錠剤を製造した。
(組成) (%)
柿の葉エキス 26.5
ヒドロキシプロピルセルロース 21
軽質無水ケイ酸 5.5
乳糖 13
結晶セルロース 13
タルク 13
ジアシルグリセロール 8
下記成分を用い、常法に従って1錠200mgの錠剤を製造した。
(組成) (%)
メグスリノキエキス又は甜茶エキス 10
デンプン 65
ステアリン酸マグネシウム 5
乳糖 20
Claims (4)
- 柿の葉、メグスリノキ、甜茶、マカ及びウイキョウから選ばれる1種以上の植物体又はその抽出物を有効成分とするトリアシルグリセロール合成抑制剤。
- 柿の葉、メグスリノキ、甜茶、マカ及びウイキョウから選ばれる1種以上の植物体又はその抽出物を有効成分とする高脂血症の予防及び/又は改善剤。
- 柿の葉、メグスリノキ、甜茶、マカ及びウイキョウから選ばれる1種以上の植物体又はその抽出物を有効成分とする食後高脂血症の予防及び/又は改善剤。
- 柿の葉、メグスリノキ、甜茶、マカ及びウイキョウから選ばれる1種以上の植物体又はその抽出物を有効成分とし、トリアシルグリセロール合成抑制作用を有するものであることを特徴とし、トリアシルグリセロールの合成抑制又は高脂血症の予防又は改善のために用いられるものである旨の表示を付した飲料又は食品。
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