JP2007302680A - 酸性プロテアーゼ酵素と酸性緩衝剤の組合せおよびその使用 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】少なくとも1つの酸性プロテアーゼ酵素と酸性緩衝剤を含むことを特徴とする組成物であり、酸性緩衝剤は酸と薬剤または化粧品として許容される担体を含むものである組成物。酸性プロテアーゼは、真菌プロテアーゼ、細菌プロテアーゼ、又は哺乳動物プロテアーゼから選択され、具体的には、ペプシン、カテプシン、リゾプスペプシン、ペンシロペプシン、及びエンドチアペプシンより選択される。酸性緩衝剤としては、リン酸、ピロリン酸、重硫酸ナトリウム、及び重硫酸カリウム等より選択される無機酸を含む。
【選択図】なし
Description
本発明は、少なくとも1つの酸性プロテアーゼ酵素と酸性緩衝剤(この酸性緩衝剤は、酸と、薬剤または化粧品として許容される担体を含む)を含むことを特徴とする新規な組成物に関するものであり、そしてこの組成物は、異常な皮膚症状、疾患または障害の治療または予防、および/または皮膚のきめまたは外見の改善、および/または表皮剥離の増強、および/または表皮細胞の再生の増強のために有用である。本発明はまた、異常な皮膚症状、疾患または障害の治療または予防、および/または皮膚のきめまたは外見の改善、および/または表皮剥離の増強、および/または表皮細胞の再生の増強のための組成物の使用法に関する。
ヒトの皮膚の表皮層の剥離は、表皮細胞再生の速度の上昇を誘導することは充分な根拠により示されている(E. Philips, 1995, 米国特許第5,431,913号;W.P. Smith, 1994, Cosmetics and Toiletries 109:41-8)。ヒト表皮は、一定の再生状態にある層状の扁平上皮細胞の複数の層からなる。新しい細胞は、表皮の最も内部の膜である基底層で最初に形成される。これらの細胞は、さらに新しい細胞の産生により取って代わられ、次に表皮の外部層の角質層に輸送されて、そこで通常2〜3週間毎に剥が(剥離)される。ヒトの皮膚の一般的健康状態および外見は、このプロセスの速度に大きく依存する。
本発明は、異常な皮膚症状、疾患、または障害を治療または予防するための、および/または皮膚のきめおよび/または外見を改善するための、および/または表皮の剥離を増強するための、および/または表皮の細胞の再生を増強するための、新規の医薬組成物および/または化粧品組成物に関する。本組成物は、少なくとも1つの酸性プロテアーゼと酸性緩衝剤を含む。本発明の目的において、酸性プロテアーゼは、皮膚の表面の平均pHより低いpHでペプチジルヒドロラーゼ(タンパク質分解)活性を示し、皮膚の表面の平均pH(これは、ヒトではpH約5.5である(W.P. Smith, 1994, Cosmetics and Toiletries 109:41-8))より高いかまたは等しいpHではほとんど活性がない酵素である。男性では、皮膚の表面の平均pHはpH約5.3であり、女性ではpH約6である(Ohman and Vahlquist, 1994, Acta Dermato-Venereol. 74(5):375-379)。本発明の目的において、皮膚の表面の平均pH(これはpH約5.5である)は、特に性に特異的な変動を含み、従って約5.5のpHは、男性の皮膚の表面の平均pHであるpH約5.3から、女性の皮膚の表面の平均pHであるpH約6までの範囲を含む。好ましくは、皮膚の表面の平均pH(pH約5.3〜6)より大きいかまたは等しいpHでは、本発明で有用な酸性プロテアーゼは、皮膚の表面の平均pHより低い各最適pHで示す酵素活性の約10%未満の活性を示す。
本発明において、以下の用語は、下記を包含する:
酸性緩衝剤:皮膚に典型的に適用された時、皮膚の表面pHを5.5未満に下げ、自然の皮膚のプロセスにより中和されて、自然の皮膚のプロセスが時間とともに皮膚の表面のpHを正常(これは約5.5である)に戻すような、酸と薬剤または化粧品として許容される担体、ビヒクル、または賦形剤を含む組成物。緩衝剤の酸成分は、1つまたはそれ以上の無機酸、1つまたはそれ以上の有機酸、または無機酸および/または有機酸の任意の組合せを含有することができる。
5.1 組成物
本発明は、異常な皮膚症状、疾患または障害の治療または予防、および/または皮膚のきめまたは外見の改善、および/または表皮剥離の増強、および/または表皮細胞の再生の増強のための新規組成物を提供する。この組成物は、少なくとも1つの酸性プロテアーゼと酸性緩衝剤を含む。この組成物は、全身への影響または好ましくない副作用を最小にするために、好ましくは局所投与される。本発明者は、特定の作用モードに限定されるつもりはないが、本発明の組成物は、まず皮膚の表面のpHを皮膚の平均pH(これは人については約5.5である)より低い値に下げることにより、本発明の方法を達成すると考える。pHの低下により、皮膚の表面pHが約5.5より低い時にタンパク質分解/ケラチン分解活性を示す、組成物の酸性プロテアーゼ成分の活性化が可能になる。この期間は、個体の皮膚pHの状況に依存し、酸性緩衝剤成分の調製により制御することができる。この期間を変更し所望の結果を達成できるように、調製物を調整することは、当業者にの技術の範囲内である。
HUT/g =(280nmでの吸光度×V)/(0.0084×T×W)
(式中、Vは、試験溶液の最終容量であり、Tは、反応時間(分)であり、Wは、測定で使用した元々の酵素の乾燥重量(g)である)。タンパク質濃度は、当該分野で公知の方法、例えばBradford Assay(これは、Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel et al., (編), John Wily & Sons, Inc., New York, 1994、に記載されている)により測定される。
本発明は、表皮剥離の増強、および/または表皮細胞の再生の増強のため方法を提供する。この方法は、被験体の皮膚の領域に、pH約5.5未満ではタンパク質分解活性を有するが、約5.5またはそれ以上のpHではほとんど活性がない酸性プロテアーゼ酵素と、皮膚の表面のpHを約5.5未満に下げる酸性緩衝剤とを含む本発明の組成物の有効量を、表皮剥離および/または表皮細胞の再生の増強に有効な時間、局所投与することからなり、酸性緩衝剤は自然の表皮プロセスにより中和される。
本発明の本質および本発明の実施方法をさらに詳細に説明するために、以下の実施例が提供されるが、これらは、決して本開示の残りの部分または本発明の範囲を限定するもの理解してはならない。
AFP2000、真菌由来酸性プロテアーゼ(ソルベイ社(Solvay Inc.)、エルクハート、インディアナ州);藻類抽出物/アロエ抽出物(アクティブ・オーガニクス社(Active Organics, Inc.)、ダラス、テキサス州);アラントイン(サットン・ラボラトリーズ(Sutton Laboratories)、チャタム、ニュージャージー州);アーラセル65(Arlacel 65)(ICIサーファクタンツ(ICI Surfactants)、ウィルミントン、デラウェア州);アスパラギン酸(アジノモトUSA社、ティーネック、ニュージャージー州);BHT(イーストマン・コダック社(Eastman Kodak, Co.)、ロチェスター、ニューヨーク州);ブチレングリコール(ヘキスト・セラニーズ社(Hoechst Celanese, Co.)、シャーロット、ノースカロライナ州);カーボマー(Carbomer)(B.F.グッドリッチ社(B.F. Goodrich, Co.)、ブレックスヴィル、オハイオ州);セテアリールアルコール(cetearyl alcohol)(リポケミカルズ社(Lipo Chemicals, Inc.)、パターソン、ニュージャージー州);セチルアルコール(リポケミカルズ社(Lipo Chemicals, Inc.)、パターソン、ニュージャージー州);クエン酸(ロシュ・ビタミンズ・アンド・ファイン・ケミカルズ(Roche Vitamins and Fine Chemicals)、ナトリー、ニュージャージー州);コスモワックス(Cosmowax)、クロダ・ケミカルズ社(Croda Chemicals, Ltd.)、パーシッパニー、ニュージャージー州);シクロメチコン(cyclomethicone)(ダウ・ケミカルズUSA(Dow Chemicals USA)、ミッドランド、ミシガン州;ジヒドロキシアセトン(ロナ/E.メルク工業(Rona/E. Merck Industries)、ホーソーン、ニューヨーク州);ジメチコン(dimethicone)(ダウ・ケミカルズUSA(Dow Chemicals USA)、ミッドランド、ミシガン州);EDTA二ナトリウム(チバ・ガイギー社(Ciba-Geigy Co.)、グリーンズボロ、ノースカロライナ州);DL−パンテノール(ロシュ・ビタミンズ・アンド・ファイン・ケミカルズ(Roche Vitamins and Fine Chemicals)、ナトリー、ニュージャージー州;エトキシジグリコール(ガッテフォッセ社(Gattefosse S.A.)、パリ、フランス);グルコン酸(シグマ・ケミカルズ(Sigma Chemicals)、セントルイス、ミズーリ州);グリセレス−26(Glycereth-26)(アマーコール社(Amerchol Co.)、エディソン、ニュージャージー州);グリセラルステアレート(glyceral stearate)(クロダ・ケミカルズ社(Croda Chemicals, Ltd.)、パーシッパニー、ニュージャージー州);乳酸 USP 88%(リタ社(Rita Corporation)、ウッドストック、イリノイ州);レシチン/アジア酸(asiatic acid)(アクティブ・オーガニクス社(Active Organics, Inc.)、ダラス、テキサス州);メチルグルセス−20(gluceth-20)(アマーコール社(Amerchol Co.)、エディソン、ニュージャージー州);メチルパラベン(ナップ社(Napp Co.)、ロディ、ニュージャージー州);パルミチン酸オクチル(ICIサーファクタンツ(ICI Surfactants)、ウィルミントン、デラウェア州);ネオペンタン酸オクチルドデシル(ICIサーファクタンツ(ICI Surfactants)、ウィルミントン、デラウェア州);PEG−75(リポケミカルズ社(Lipo Chemicals, Inc.)、パターソン、ニュージャージー州);ステアリン酸PEG−40(リポケミカルズ社(Lipo Chemicals, Inc.)、パターソン、ニュージャージー州);ペプシン 1:15,000 NF(アメリカン・ラボラトリーズ社(American Laboratories, Inc.)、オマハ、ネブラスカ州);リン酸85%(シグマ・ケミカルズ(Sigma Chemicals)、セントルイス、ミズーリ州);ポリアクリルアミド/C13−14イソパラフィン/ラウレス−7(laureth-7)(セピック社(Seppic, Co.)、パリ、フランス);プロピレングリコール(ダウ・ケミカルズUSA(Dow Chemicals USA)、ミッドランド、ミシガン州);プロピルパラベン(ナップ社(Napp Co.)、ロディ、ニュージャージー州);パルミチン酸レチニル(ロシュ・ビタミンズ・アンド・ファイン・ケミカルズ(Roche Vitamins and Fine Chemicals)、ナトリー、ニュージャージー州);サリチル酸(カラマ社(Kalama Co.)、シアトル、ワシントン州);カルボキシル−メチルセルロースナトリウム7HXF(アクアロン社(Aqualon, Co.)、ウィルミントン、デラウェア州);ヒアルロン酸ナトリウム(アクティブ・オーガニクス社(Active Organics, Inc.)、ダラス、テキサス州);ステアレス−10(stearety-10)(リポケミカルズ社(Lipo Chemicals, Inc.)、パターソン、ニュージャージー州);酢酸トコフェリル(ロシュ・ビタミンズ・アンド・ファイン・ケミカルズ(Roche Vitamins and Fine Chemicals)、ナトリー、ニュージャージー州);トリエタノールアミン99%(バスフ社(BASF Co.)、マウントオリーブ、ニュージャージー州);およびキサンタンガム(ケルコ(Kelco)、サンジエゴ、カリホルニア州)。
本発明の組成物は、皮膚剥離および細胞再生の増強のために、個々のヒト掌側前腕で、異なる濃度の酸性プロテアーゼであるペプシン、1:15,000 NF(アメリカン・ラボラトリーズ社(American Laboratories, Inc.)、オマハ、ネブラスカ州)および酸性緩衝剤である乳酸で試験した。年齢30〜60歳の被験者20名が選択され、本試験法に関連して供給されるもの(合成石鹸を含む)を除いて、試験期間の前5日間と試験の間、いずれの製品もその掌側前腕で使用するのを控えることが求められた。被験者はいずれも、(1)妊娠または授乳しておらず、また試験後3ヶ月以内に妊娠の予定がなく;(2)1つまたはそれ以上の既知の伝染性疾患に罹っておらず;(3)試験時に他のいずれの臨床的試験にも関係しておらず;(4)乾癬、皮膚炎、および/または湿疹に罹患しておらず;(5)レチノイド、コルチコステロイド、または抗生物質を含む、試験結果を妨害する可能性があると考えられる薬物療法を受けておらず;(6)試験前の6ヶ月間レチノイド、コルチコステロイド、または抗生物質をとっておらず;および/または(7)タバコ製品を使用しておらず、敏感皮膚でなく、試験に不適切と考えられるタイプの皮膚ではなく、また試験に不適切になると考えられる他の特徴はなかった。
上昇%=[(未処理領域の除去にかかる日数−処理領域の除去にかかる日数)/
未処理領域の除去にかかる日数]×100
6.2 本発明の方法に使用するための組成物
以下の表は、本発明の組成物の異なる実施例の処方を列挙する。以下の全ての組成物は、例えば希リン酸または水酸化ナトリウム(NaOH)により、約3〜3.2のpHに調整した。
約5.5未満のpHでタンパク質分解活性を有するかどうか、およびその活性が最適pHでの活性に比較して約10%未満まで低下するかどうかを求めるために、ある範囲のpH値にわたって2つの酸性プロテアーゼ酵素を試験した。タンパク質分解活性は、以下に記載されるようにHUT 測定法を用いてヘモグロビンに及ぼすタンパク質分解作用を求めることにより測定した。2つの酸性プロテアーゼは、アメリカン・ラボラトリーズ社(American Laboratories, Inc.)(オマハ、ネブラスカ州)により供給されるペプシン 1:15,000 NF(約1000HUT 単位/mg )、およびソルベイ社(Solvay Inc.)(エルクハート、インディアナ州)により供給される真菌由来酸性プロテアーゼのAFP2000(約100HUT単位/mg )である。測定法は、最初にヘモグロビン基質(HEMOGLOBIN SUBSTRATE)ストック溶液とTCAストック(TCA STOCK)を調製することにより実施された。ヘモグロビン基質は、2gのウシヘモグロビン(シグマ・ケミカルズ(Sigma Chemicals)、セントルイス、ミズーリ州)を80mlの蒸留水に溶解することにより調製した。次にこの溶液を正確なpH(pH2、3.5、5.5または6)に調整した。1と3の間のpH値では、1.8gのリン酸を100mMの最終濃度に溶解して、50%水酸化ナトリウムまたは50%塩酸によりpHを調整した。3と6の間のpH値では、2gのクエン酸を100mMの最終濃度に溶解して、50%水酸化ナトリウムまたは塩酸によりpHを調節した。蒸留水を加えることにより、溶液を100mlの最終容量にした。次に異なるpH値の基質を30℃で20分間インキュベートし、続いてグラスウールによりろ過した。5gのトリクロロ酢酸を100mlの蒸留水に溶解することにより、TCAストック溶液を調製した。
Claims (18)
- 異常な皮膚症状、疾患、または障害を治療または予防するための、および/または表皮の剥離を増強するための、および/または皮膚のきめまたは外見を改善するための組成物であって、(1)pH約5.5未満では酵素活性を示し、pH約5.5またはそれ以上のpHではほとんど活性がない酸性プロテアーゼと;(2)皮膚の表面pHを一時的にpH約5.5未満に下げる無機酸を含む酸性緩衝剤とを含み、この酸性緩衝剤は自然の表皮プロセスによる中和を受け、そのため皮膚の表面pHはpH約5.5に戻る、上記組成物。
- 酸性緩衝剤は、薬剤または化粧品として許容される担体、ビヒクル、または賦形剤をさらに含む、請求項1の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、真菌プロテアーゼ、細菌プロテアーゼ、または哺乳動物プロテアーゼ、およびこれらの混合物よりなる群から選択される、請求項1の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、ペプシン、カテプシン、ヒト尿の酸性プロテアーゼ、リゾプスペプシン、ペニシロペプシン、エンドチアペプシン、およびこれらの混合物よりなる群から選択される、請求項3の組成物。
- 無機酸は、リン酸、ピロリン酸、三リン酸、ポリリン酸、重硫酸ナトリウム、重硫酸カリウム、およびこれらの混合物よりなる群から選択される、請求項1の組成物。
- 酸性緩衝剤の薬剤または化粧品として許容される担体、ビヒクル、または賦形剤成分は、ローション剤、チンキ剤、クリーム剤、乳剤、ゲル剤、軟膏剤、水、水で練りうるクリーム、ポリビニルアルコール、ヒドロキシエチルセルロース、セルロース、親水性アクリルポリマー、皮膚軟化薬、皮膚加湿成分、酵素安定剤、グリセロール、界面活性剤、保存剤、医薬製剤で使用される親水性濃化剤、およびこれらの混合物よりなる群から選択される、請求項2の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、最終組成物の約0.001重量%〜約75重量%の量で存在する、請求項1の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、最終組成物の好ましくは約0.1重量%〜約50重量%の量で存在する、請求項7の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、最終組成物の最も好ましくは約1重量%〜約5重量%の量で存在する、請求項8の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、約1〜約5000HUT 単位/mg の総比活性を有する、請求項1の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、好ましくは約50〜約3000HUT 単位/mg の総比活性を有する、請求項10の組成物。
- 酸性プロテアーゼは、最も好ましくは約500〜約1500HUT 単位/mg の総比活性を有する、請求項11の組成物。
- 酸性緩衝剤の酸成分は、最終組成物の約0.001重量%〜約95重量%の量で存在する、請求項1の組成物。
- 酸性緩衝剤の酸成分は、好ましくは最終組成物の約0.01重量%〜約25重量%の量で存在する、請求項13の組成物。
- 酸性緩衝剤の酸成分は、最も好ましくは最終組成物の約1重量%〜約5重量%の量で存在する、請求項14の組成物。
- 表皮の剥離を増強するための、および/または表皮の細胞の再生を増強するための方法であって、(1)pH約5.5未満では酵素活性を示し、pH約5.5またはそれ以上のpHではほとんど活性がない酸性プロテアーゼと;(2)皮膚の表面pHを一時的にpH約5.5未満に下げる酸性緩衝剤とを含む組成物の有効量を、表皮の剥離および/または表皮の細胞の再生を増強するのに効果的な時間、被験体に皮膚の領域に局所投与することを含んでなり、酸性緩衝剤は自然の表皮プロセスによる中和を受け、そのため皮膚の表面pHはpH約5.5に戻る、上記方法。
- 異常な皮膚症状、疾患、または障害の治療または予防、および/または皮膚萎縮の影響の制御のための方法であって、(1)pH約5.5未満では酵素活性を示し、pH約5.5またはそれ以上のpHではほとんど活性がない酸性プロテアーゼと;(2)皮膚の表面pHを一時的にpH約5.5未満に下げる酸性緩衝剤とを含む組成物の有効量を、症状、疾患、または障害の治療または予防、および/または皮膚萎縮の影響の制御、および/または皮膚のきめと外見の改善に有効な時間、被験体に皮膚の領域に局所投与することを含んでなり、酸性緩衝剤は自然の表皮プロセスによる中和を受け、そのため皮膚の表面pHはpH約5.5に戻る、上記方法。
- 異常な皮膚症状、疾患または障害は、乾燥皮膚、重症の乾燥皮膚、ふけ、にきび、角化症、乾癬、湿疹、皮膚のはがれ、そう痒症、老人斑、ほくろ、黒皮症、しわ、いぼ、皮膚の斑点、過色素沈着皮膚、過角化性皮膚、炎症性皮膚症、年齢関連皮膚変化および乾癬よりなる群から選択される、請求項17の方法。
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