JP2007289036A

JP2007289036A - 小胞体反応チップ、小胞体収納方法、反応液回収方法、及び、小胞体回収方法

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Publication number: JP2007289036A
Application number: JP2006118809A
Authority: JP
Inventors: Akihiko Yabuki; 彰彦矢吹
Original assignee: Fujitsu Ltd
Current assignee: Fujitsu Ltd
Priority date: 2006-04-24
Filing date: 2006-04-24
Publication date: 2007-11-08
Anticipated expiration: 2026-04-24
Also published as: JP4795840B2

Abstract

【課題】小胞体反応チップ、小胞体収納方法、反応液回収方法、及び、小胞体回収方法に関し、簡単な操作で一槽に一細胞を収納でき、一槽で閉鎖した反応系をなし反応液の乾燥を防止するとともに、回収時においても反応液の乾燥を防止する。
【解決手段】透明基板１上に短径或いは最短対角線の長さが収納する小胞体７の平均直径の１．１倍以上で深さが小胞体７の平均直径の０．５〜０．９倍の筒状収納槽３を設けた収納槽形成層２と、収納槽形成層２上に、筒状収納槽３を投影的に包含する窪み状槽５であって深さが小胞体７の平均直径の０．５倍以下の窪み状槽５を設けた窪み状槽形成層４を順次積層した構造とする。
【選択図】図１

Description

本発明は小胞体反応チップ、小胞体収納方法、反応液回収方法、及び、小胞体回収方法に関するものであり、特に、バイオや医療分野における微少な細胞の反応・培養後に反応液或いは培養液を乾燥することなく且つ各細胞毎に回収するための構成に特徴のある小胞体反応チップ、小胞体収納方法、反応液回収方法、及び、小胞体回収方法に関するものである。

近年、バイオや医療などの分野では、新薬開発等のために反応液や培養液中での反応・細胞の培養が重要になっており、そのためには、反応・培養過程において反応液或いは培養液を乾燥を防ぐとともに、反応後の反応液或いは培養液を乾燥することなく、且つ、各細胞単位で回収することが必要となっている。

ここで、図９を参照して、従来の細胞反応チップの一例を説明する（例えば、特許文献１参照）。
図９参照
図９は、従来の細胞反応チップの要部断面図であり、透明基板５１に複数の細胞培養槽５２を設けるとともに、複数の細胞培養槽５２に共通な窪み部５３を設けたものであり、各細胞培養槽５２に培養液５５とともに細胞５４を収容して細胞５４の培養を行う。

なお、図示を省略するものの、窪み部５３は半透明なシール部材が設けられており、培養液５５の乾燥を防止するとともにバクテリア等の進入を防いでいる。
また、シール部材を介して培養液５５の交換が可能になっている。

また、培養液５５を回収する場合には、窪み部５３を満たしている培養液５５を完全に除去したのち、パラフィン等の保護液を導入して細胞培養槽５２に収容されている培養液５５をシールし、次いで、マイクロピペットをシール部材及び保護液を付き抜けるように突き刺して培養液５５を回収することになる。
特開２００４−０８１０８４号公報

しかし、上述の特許文献１の槽構造では、窪み部５３が複数の細胞培養槽５２に共通で、且つ、細胞の径より深い構造になっているため、各細胞培養槽５２に１つの細胞５４を確実に収納することが困難であるという問題がある。

また、特許文献１においては、細胞内部の核酸成分の分析を目的として、培養液や反応液の回収を目的としていないため、培養液を回収した場合、回収した培養液がマイクロピペット内で急速に乾燥してしまうという問題がある。

さらには、窪み部５３が複数の細胞培養槽５２に共通であるため、細胞の反応液の反応を観察する場合、反応液が窪み部５３を介して各細胞培養槽５２に対して触れ合っており、個々の細胞の反応状況の観察が困難になるという問題がある。

したがって、本願発明は簡単な操作で一槽に一細胞を収納でき、一槽で閉鎖した反応系をなし反応液の乾燥を防止するとともに、回収時においても反応液の乾燥を防止することを目的とする。

図１は本発明の原理的構成図であり、ここで図１を参照して、本発明における課題を解決するための手段を説明する。
図１参照
上記課題を解決するために、本発明は、小胞体反応チップにおいて、透明基板１上に短径或いは最短対角線の長さが収納する小胞体７の平均直径の１．１倍以上で深さが小胞体７の平均直径の０．５〜０．９倍の筒状収納槽３を設けた収納槽形成層２と、収納槽形成層２上に、筒状収納槽３を投影的に包含する窪み状槽５であって深さが小胞体７の平均直径の０．５倍以下の窪み状槽５を設けた窪み状槽形成層４を順次積層した構造を有することを特徴とする。
なお、本発明における小胞体７とは細胞、微生物、マイクロカプセル等の総称である。

１個の小胞体７毎に上述の構成の２段構造の槽を設けることによって、各筒状収納槽３に１個の小胞体７を確度良く収納することが可能になる。
なお、筒状収納槽３の深さが０．５倍未満であると浅すぎて小胞体７が飛び出す虞があり、また、０．９倍を超えると一つの筒状収納槽３に複数の小胞体７が収納される可能性が増す。
また、窪み状槽５の深さが小胞体７の平均直径の０．５倍を超えると、小胞体７が窪み状槽５に止まる虞がある。

また、具体的には、筒状収納槽３の短径或いは最短対角線の長さが１０〜２０μｍであり、また、窪み状槽５の深さが２〜３μｍで且つ窪み状槽５の短径或いは最短対角線の長さが５０〜１５０μｍであるとともに、筒状収納槽３が１０００〜４００００個／ｃｍ²の密度で整列配置されていることが望ましい。

また、筒状収納槽３の平面形状は楕円形或いは多角形でも良いが、典型的には円形が望ましく、窪み状槽５の平面形状は円形、楕円形、多角形でも良いが、筒状収納槽３と同心の方形が望ましい。

この場合、透明基板１は透明であれば何でも良いが、典型的にはガラス或いはプラスチックが望ましく、また、収納槽形成層２と窪み状槽形成層４とはエポキシ系フォトレジスト或いはシリコン系樹脂のいずれかであることが望ましい。

また、上述の小胞体反応チップに小胞体７を収納する場合には、筒状収納槽３の整列領域６に小胞体懸濁液を滴下して放置した後、小胞体反応チップの上面を板状部材、典型的にはガラス板或いはプラスチック板ですりきることによって小胞体懸濁液中の小胞体７を各筒状収納槽３に収納すれば良く、それによって、「すりきり」という簡単な作業で各筒状収納槽３に１個の小胞体７を確度良く収納することが可能になる。

また、各筒状収納槽３に小胞体７を収納したのち、小胞体７を含有するようにドーム状に反応液８を滴下し、次いで、反応液８より比重が軽くかつ非揮発性の保護液９をドーム状の反応液８を完全に被覆し、且つ、窪み状槽５に収まる量だけ滴下することが望ましく、それによって、反応・培養工程中における反応液８の乾燥を防止することができる。
なお、本発明における反応液８とは、培養液、培養液以外の反応液８、及び、その混合液を意味するものである。

なお、この場合の非揮発性の保護液９としては、通常の水溶液より軽く且つ化学的に反応性の低いシリコンオイル或いは流動パラフィンが好適である。

また、反応後の反応液８を回収する場合には、尖頭部を有する微小溶液吸引部材を窪み状槽５内に移動させて保護液９を少量吸引し、次いで、微小溶液吸引部材を筒状収納槽３内に移動させて反応液８と保護液９とを順に毛細管現象による吸引で微小溶液吸引部材の内部に採集し、次いで、微小溶液吸引部材の尖頭部にキャップを取り付けてアンプル試料とすれば良く、反応液８は非揮発性の保護液９で挟まれた状態になるので微小溶液吸引部材の内部で蒸発・乾燥することがない。
なお、本発明における微少溶液吸引部材とは、マイクロピペット、シリンジ、或いは、キャピラリ等の総称である。

また、反応後の小胞体７を回収する場合には、反応液８を回収したのち、中空の筒状回収部材を用いて筒状収納槽３に緩衝液、典型的には燐酸緩衝食塩水を滴下し、次いで、筒状収納槽３に残存している反応後の小胞体７を緩衝液毎、筒状回収部材により回収すれば良く、それによって、反応液８及び小胞体７を分離して回収することが可能になる。

本発明によれば、１個の小胞体毎に２段構造の細胞収納槽を設けることによって、「すりきり」という簡単な工程によって、各筒状収納槽に１個の小胞体を確度良く収納することが可能になる。

また、非揮発性の保護液を２段階に分けて吸引することによって、微小溶液吸引部材の内部において反応液を保護液で挟み込むことができ、簡単な工程で反応液の乾燥を防止することが可能になる。

本発明の小胞体反応チップは、ガラス或いはプラスチックからなる透明基板上に短径或いは最短対角線の長さが収納する小胞体、典型的には細胞の平均直径の１．１倍以上、例えば、１０〜２０μｍで深さが小胞体の平均直径の０．５〜０．９倍の筒状収納槽、典型的には円筒状収納槽を設けたエポキシ系フォトレジスト或いはシリコン系樹脂からなる収納部形成層と、収納部形成層上に、筒状収納槽を投影的に包含する窪み状槽であって深さが小胞体の平均直径の０．５倍以下、例えば、２〜３μｍで且つ窪み状槽の短径或いは最短対角線の長さが５０〜１５０μｍの窪み状槽、典型的には正方形の窪み状槽を設けたエポキシ系フォトレジスト或いはシリコン系樹脂からなる窪み状槽形成層を順次積層して構成する。

また、小胞体反応チップを用いて反応を行う場合には、筒状収納槽の整列領域に小胞体懸濁液を滴下して放置した後、小胞体反応チップの上面を板状部材、典型的にはガラス板或いはプラスチック板ですりきることによって小胞体懸濁液中の小胞体を各筒状収納槽に収納する。

次いで、各筒状収納槽に小胞体を収納したのち、小胞体を含有するようにドーム状に反応液を滴下し、次いで、反応液より比重が軽くかつ非揮発性の保護液、例えば、シリコンオイル或いは流動パラフィンをドーム状の反応液を完全に被覆し、且つ、窪み状槽に収まる量だけ滴下する。

次いで、反応が終了したのち、マイクロピペット、シリンジ、或いは、キャピラリ等の尖頭部を有する微小溶液吸引部材を窪み状槽内に移動させて保護液を少量吸引し、次いで、微小溶液吸引部材を筒状収納槽内に移動させて反応液と保護液とを順に毛細管現象による吸引で微小溶液吸引部材の内部に採集し、次いで、微小溶液吸引部材の尖頭部にキャップを取り付けてアンプル試料とする。

最後に、中空の筒状回収部材、典型的にはマイクロピペットを用いて筒状収納槽に緩衝液、典型的には燐酸緩衝食塩水を滴下し、次いで、筒状収納槽に残存している反応後の小胞体を緩衝液毎、筒状回収部材により回収する。

ここで、図２乃至図８を参照して、本発明の実施例１の細胞反応チップを用いた細胞反応方法を説明するが、対象となる細胞が平均径が５μｍの酵母の場合を例に説明する。
図２参照
まず、厚さが、例えば、１．０ｍｍの透明なガラス基板１１上にフォトレジストＳＵ８（ＭｉｃｒｏＣｈｅｍ社製商品名）からなるフォトレジスト１２を硬化後の厚さが細胞の平均直径の０．５〜０．９倍、例えば４μｍになるように塗布したのち、直径が１０〜２０μｍ、例え場、１５μｍのマスク１３を用いて紫外線を照射したのち加熱して、照射領域１４を硬化させる。

次いで、再び、フォトレジストＳＵ８（ＭｉｃｒｏＣｈｅｍ社製商品名）からなるフォトレジスト１６を硬化後の厚さが２〜３μｍ、例えば２．５μｍになるように塗布したのち、直径が５０〜１５０μｍ、例えば、１００μｍのマスク１７を用いて紫外線を照射したのち加熱して、照射領域１８を硬化させる。

次いで、フォトレジスト１６及びフォトレジスト１２を現像およびリンスすることで非照射領域１９及び非照射領域１５のフォトレジストが取り除かれることによって、窪み状槽２１及び円筒収納槽２２からなる細胞収納槽２０が形成される。

図３参照
図３は、本発明の細胞反応チップの概念的平面図であり、窪み状槽２１及び円筒収納槽２２の２段構造の細胞収納槽２０が二次元マトリクス状に整列配置された構成となる。
なお、ここでは、１０個×１０個として図示しているが、実際には、２６ｍｍ×７６ｍｍサイズのガラス基板１１に１０００〜４００００個／ｃｍ²、例えば、１３０００個／ｃｍ²の密度で形成する。

次に、図４及び図５を参照して本発明の実施例１の細胞収納方法を説明する。
図４参照
まず、反応細胞チップ１０の細胞収納槽２０が整列している整列領域２３に細胞懸濁液２４を滴下して放置した後、反応細胞チップ１０の上面をガラス板２７ですりきることで、細胞２５を培養液２６とともに、細胞収納槽２０の円筒収納槽２２に収納する。

図５参照
次いで、基質溶液からなる反応液２９及びシリコンオイルからなる非揮発性の保護液３０をそれぞれ吐出するピエゾ駆動のインクジェットヘッド２８を備えたケミカルプリンタにより、反応細胞チップ１０にマトリクス配置された細胞収納槽２０のＸＹピッチおきに反応液２９および保護液３０を順次滴下する。

この時、反応液２９を細胞２５を含有するようにドーム状に滴下することにより、その後に滴下する反応液２９より比重が軽くかつ非揮発性の保護液３０はドームの皮膜となって、反応槽を構成することになる。

なお、この場合、保護液３０は細胞収納槽２０の窪み状槽２１に収まるだけの少量を滴下することによって、反応液２９の蒸発を防止するとともに、隣接する細胞収納槽２０と保護液３０を介した混合を防止する。

次に、図６乃至図８を参照して、本発明の実施例１の回収方法を説明する。
図６参照
図６は、本発明の実施例１に用いる回収装置の概念的構成図であり、内部に対物レンズを上下移動させるフォーカス手段を持つ同軸照明付きの倒立型高倍率顕微鏡３２を収容した基台３１上にコントローラ付きのＸＹステージ３３を支持・固定し、このＸＹステージ３３によって１つ以上の細胞反応チップ１０を保持し、各細胞収納槽２０を観察位置まで移動する。

また、ＸＹステージ３３の上方には対物レンズをＺ軸方向に上下移動させるフォーカス手段を持つ同軸照明付きの正立型高倍率顕微鏡３４と正立型高倍率顕微鏡３４の顕微鏡像を撮像するＣＣＤカメラ３５が設けられており、倒立型高倍率顕微鏡３２によりチップ下面から透過して上面を観察するとともに、正立型高倍率顕微鏡３４によりチップ上面を直接観察する。

また、ＸＹステージ３３にはキャピラリ３６を位置決めするコントローラ付きのＸＹＡステージ３７とマイクロピペット３８を位置決めするコントローラ付のＸＹＺステージ３９を一組以上備えており、正立型高倍率顕微鏡３４の視野中心を基準にしてキャピラリ３６の先端或いはマイクロピペット３８先端を位置決めする。
なお、ＸＹＡステージ３７のＡ軸はキャピラリ３６の軸方向である。

また、基台３１には蛍光照明光源４０及び蛍光ＣＣＤカメラ４１が設けられており、基台３１の内部に設けられた反射鏡（図示を省略）を介して蛍光照明光源４０からの励起光が細胞反応チップ１０に向けて照射される。
また、キャピラリ３６には空圧吐出機４２が接続されており、また、マイクロピペット３８には流体インジェクタ４３が接続されている。

図７参照
図６に示した回収装置を用いて回収する場合には、まず、倒立型高倍率顕微鏡３２により標識が発現した細胞２５を識別したのち、正立型高倍率顕微鏡３４の視野下において、ＸＹＡステージ３７を駆動してキャピラリ３６を細胞収納槽２０の窪み状槽２１に移動させて、保護液３０を少量、例えば、１／２以下、好適には１／３だけ毛細管現象により吸引する。

なお、標識の発現を識別するためには、蛍光照明光源４０から励起光を細胞反応チップ１０に照射し、細胞２５の内部において発生した蛍光を倒立型高倍率顕微鏡３２を介して蛍光ＣＣＤカメラ４１で撮像することによって標識の発現を識別する。

次いで、再び、ＸＹＡステージ３７を駆動してキャピラリ３６を細胞収納槽２０の円筒収納槽２２内に移動させて反応液２９と保護液３０を順に毛細管現象による吸引でキャピラリ３６の内部に採集する。
なお、この時、反応液２９と混合している培養液も反応液２９と同時に吸引される。
最後に、キャピラリ３６の先端部にキャップを取り付けてアンプル試料とする。

図８参照
次いで、ＸＹＹステージ３９を駆動してＰＢＳ（燐酸緩衝食塩水）等の緩衝液４４が充填されたマイクロピペット３８を細胞収納槽２０に接近させ、緩衝液４４を微少量吐出した後に、細胞２５を緩衝液４４毎吸引することによって、細胞２５を回収する。

本発明によれば、１個の細胞毎に２段構造の細胞収納槽を設けているので、「すりきり」という簡単な工程によって、各円筒収納槽に１個の細胞を確度良く収納することが可能になる。

また、反応液を回収する場合に、非揮発性の保護液を２段階に分けて吸引しているので、キャピラリの内部において反応液を保護液で挟み込むことができ、簡単な工程で反応液の乾燥を防止することが可能になる。

以上、本発明の実施例を説明してきたが、本発明は実施例に記載された構成・条件等に限られるものではなく各種の変更が可能であり、例えば、上記の実施例の示した厚さ及び直径は細胞を酵母とした場合の一例に過ぎず、細胞の大きさに応じて適宜変更されるものである。

例えば、円筒収納槽に限られるものではなく、平面形状は楕円形、または、正方形、六角形或いは八角形等の多角形でも良く、それに伴って、筒状収納槽の短径或いは最短対角線の長さを収納する細胞の平均直径の１．１倍以上とするとともに、深さを細胞の平均直径の０．５〜０．９倍とすれば良い。

また、窪み状槽の平面形状は正方形に限られるものではなく、円形、楕円形、長方形、或いは、六角形または八角形等の多角形でも良く、それに伴って、筒状収納槽の短径或いは最短対角線の長さを５０〜１５０μｍとするとともに、深さを細胞の平均直径の０．５倍以下とすれば良い。

また、上記の実施例においては基板をガラス基板としているが、ガラス基板に限られるものではなく、下側から倒立型高倍率顕微鏡で細胞を観察するためにガラス基板と同様に透明であれば良く、透明プラスチック基板を用いても良いものである。

また、上記の実施例においては円筒収納槽及び窪み状槽を形成するために、エポキシ系のフォトレジストを用いているが、エポキシ系のフォトレジストに限られるものではなく、シリコン系樹脂、例えば、ＰＤＭＳ（ポリジメチルシロキサン）を用いても良いものである。

また、上記の実施例においては、細胞懸濁液をすりきる際にガラス板を用いているが、ガラス板に限られるものではなく、懸濁液と反応しない部材であれば良く、プラスチック板、金属板、ゴムべら等を用いても良いものである。

また、上記の実施例においては、保護液としてシリコンオイルを用いているが、シリコンオイルに限られるものではなく、シリコンオイルと同様に非揮発性で、反応液より低比重で、且つ、反応液に対して活性を持たないものであれば良く、例えば、流動性パラフィンを用いても良いものである。

ここで再び図１を参照して、本発明の詳細な特徴を改めて説明する。
再び、図１参照
（付記１）透明基板１上に短径或いは最短対角線の長さが収納する小胞体７の平均直径の１．１倍以上で深さが前記小胞体７の平均直径の０．５〜０．９倍の筒状収納槽３を設けた収納部形成層２と、前記収納部形成層２上に、前記筒状収納槽３を投影的に包含する窪み状槽５であって深さが前記小胞体７の平均直径の０．５倍以下の窪み状槽５を設けた窪み状槽形成層４を順次積層した構造を有することを特徴とする小胞体反応チップ。
（付記２）上記筒状収納槽３の短径或いは最短対角線の長さが１０〜２０μｍであり、また、上記窪み状槽５の深さが２〜３μｍで且つ前記窪み状槽５の短径或いは最短対角線の長さが５０〜１５０μｍであるとともに、前記筒状収納槽３が１０００〜４００００個／ｃｍ²の密度で整列配置されていることを特徴とする付記１記載の小胞体反応チップ。
（付記３）上記筒状収納槽３の平面形状が円形であり、上記窪み状槽５の平面形状が前記筒状収納槽３と同心の円形であることを特徴とする付記１または２に記載の小胞体反応チップ。
（付記４）上記透明基板１がガラス或いはプラスチックのいずれかからなり、且つ、上記収納部形成層２と窪み状槽形成層４とがエポキシ系フォトレジスト或いはシリコン系樹脂のいずれかからなることを特徴とする付記１乃至３のいずれか１に記載の小胞体反応チップ。
（付記５）付記１乃至４のいずれか１に記載の小胞体反応チップにおける筒状収納槽３の整列領域６に小胞体懸濁液を滴下して放置した後、前記小胞体反応チップの上面を板状部材ですりきることによって前記小胞体懸濁液中の小胞体７を各筒状収納槽３に収納することを特徴とする小胞体収納方法。
（付記６）上記各筒状収納槽３に小胞体７を収納したのち、前記小胞体７を含有するようにドーム状に反応液８を滴下し、次いで、前記反応液８より比重が軽くかつ非揮発性の保護液９を前記ドーム状の反応液８を完全に被覆し、且つ、上記窪み状槽５に収まる量だけ滴下することを特徴とする付記５記載の小胞体収納方法。
（付記７）上記保護液９が、シリコンオイル或いは流動パラフィンのいずれかであることを特徴とする付記６記載の小胞体収納方法。
（付記８）付記６または７に記載の小胞体収納方法によって、上記小胞体７を上記筒状収納槽３に収納して上記反応液８と反応させたのち、尖頭部を有する微小溶液吸引部材を上記窪み状槽５内に移動させて上記保護液９を少量吸引し、次いで、前記微小溶液吸引部材を前記筒状収納槽３内に移動させて前記反応液８と前記保護液９とを順に毛細管現象による吸引で前記微小溶液吸引部材の内部に採集し、次いで、前記微小溶液吸引部材の尖頭部にキャップを取り付けてアンプル試料とすることを特徴とする反応液８回収方法。
（付記９）付記８に記載の反応液８回収方法によって、上記反応液８を回収したのち、筒状回収部材を用いて上記筒状収納槽３に緩衝液を滴下し、次いで、前記筒状収納槽３に残存している反応後の小胞体７を前記緩衝液毎、前記筒状回収部材により回収することを特徴とする小胞体回収方法。

本発明の活用例としては、バイオや医療分野における細胞と反応液との反応現象の観察が典型的であるが、細胞に限られるものではなく、多細胞の微生物にも適用されるものであり、さらには、マイクロカプセル、例えば、バクテリアやウイルスを培養液とともに封入したマイクロカプセルにも適用されるものである。

本発明の原理的構成の説明図である。本発明の実施例１に用いる細胞反応チップの製造工程の説明図である。本発明の細胞反応チップの概念的平面図である。本発明の実施例１の途中までの細胞収納方法の説明図である。本発明の実施例１の図４以降の細胞収納方法の説明図である。本発明の実施例１に用いる回収装置の概念的構成図である。本発明の実施例１の途中までの回収方法の説明図である。本発明の実施例１の図７以降の回収方法の説明図である。従来の細胞反応チップの要部断面図である。

符号の説明

１透明基板
２収納部形成層
３筒状収納槽
４窪み状槽形成層
５窪み状槽
６整列領域
７小胞体
８反応液
９保護液
１１ガラス基板
１２フォトレジスト
１３マスク
１４照射領域
１５非照射領域
１６フォトレジスト
１７マスク
１８照射領域
１９非照射領域
２０細胞収納槽
２１窪み状槽
２２円筒収納槽
２３整列領域
２４細胞懸濁液
２５細胞
２６培養液
２７ガラス板
２８インクジェットヘッド
２９反応液
３０保護液
３１基台
３２倒立型高倍率顕微鏡
３３ＸＹステージ
３４正立型高倍率顕微鏡
３５ＣＣＤカメラ
３６キャピラリ
３７ＸＹＡステージ
３８マイクロピペット
３９ＸＹＺステージ
４０蛍光照明光源
４１蛍光ＣＣＤカメラ
４２空圧吐出機
４３流体インジェクタ
４４緩衝液
５１透明基板
５２細胞培養槽
５３窪み部
５４細胞
５５培養液

Claims

透明基板上に短径或いは最短対角線の長さが収納する小胞体の平均直径の１．１倍以上で深さが前記小胞体の平均直径の０．５〜０．９倍の筒状収納槽を設けた収納槽形成層と、前記収納槽形成層上に、前記筒状収納槽を投影的に包含する窪み状槽であって深さが前記小胞体の平均直径の０．５倍以下の窪み状槽を設けた窪み状槽形成層を順次積層した構造を有することを特徴とする小胞体反応チップ。
請求項１記載の小胞体反応チップにおける筒状収納槽の整列領域に小胞体懸濁液を滴下して放置した後、前記小胞体反応チップの上面を板状部材ですりきることによって前記小胞体懸濁液中の小胞体を各筒状収納槽に収納することを特徴とする小胞体収納方法。
上記各筒状収納槽に小胞体を収納したのち、前記小胞体を含有するようにドーム状に反応液を滴下し、次いで、前記反応液より比重が軽くかつ非揮発性の保護液を前記ドーム状の反応液を完全に被覆し、且つ、上記窪み状槽に収まる量だけ滴下することを特徴とする請求項２記載の小胞体収納方法。
請求項３に記載の小胞体収納方法によって、上記小胞体を上記筒状収納槽に収納して上記反応液と反応させたのち、尖頭部を有する微小溶液吸引部材を上記窪み状槽内に移動させて上記保護液を少量吸引し、次いで、前記微小溶液吸引部材を前記筒状収納槽内に移動させて前記反応液と前記保護液とを順に毛細管現象による吸引で前記微小溶液吸引部材の内部に採集し、次いで、前記微小溶液吸引部材の尖頭部にキャップを取り付けてアンプル試料とすることを特徴とする反応液回収方法。
請求項４に記載の反応液回収方法によって、上記反応液を回収したのち、中空の筒状回収部材を用いて上記筒状収納槽に緩衝液を滴下し、次いで、前記筒状収納槽に残存している反応後の小胞体を前記緩衝液毎、前記筒状回収部材により回収することを特徴とする小胞体回収方法。