JP2007117092A - 認識障害の処置のための標的 - Google Patents
認識障害の処置のための標的 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2007117092A JP2007117092A JP2006317776A JP2006317776A JP2007117092A JP 2007117092 A JP2007117092 A JP 2007117092A JP 2006317776 A JP2006317776 A JP 2006317776A JP 2006317776 A JP2006317776 A JP 2006317776A JP 2007117092 A JP2007117092 A JP 2007117092A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gene
- alkyl
- expression
- mammal
- genes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
- A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
- A61K31/546—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine containing further heterocyclic rings, e.g. cephalothin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D501/00—Heterocyclic compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
- C07D501/14—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7
- C07D501/16—Compounds having a nitrogen atom directly attached in position 7 with a double bond between positions 2 and 3
- C07D501/20—7-Acylaminocephalosporanic or substituted 7-acylaminocephalosporanic acids in which the acyl radicals are derived from carboxylic acids
- C07D501/24—7-Acylaminocephalosporanic or substituted 7-acylaminocephalosporanic acids in which the acyl radicals are derived from carboxylic acids with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms or hetero rings, attached in position 3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
- A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D491/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Psychology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Networks Using Active Elements (AREA)
Abstract
【解決手段】哺乳動物における所望の行動と関連する遺伝子を特定する方法であって、(a)所望の行動を有する哺乳動物の試験集団を準備する工程;(b)所望の行動を欠如する哺乳動物のコントロール集団を準備する工程;(c)試験集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;(d)コントロール集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;(e)工程(c)と(d)において造られた各RNAプールにおいて複数の遺伝子の発現レベルを定量する工程;および、(f)複数の遺伝子から、哺乳動物の試験集団とコントロール集団との間で発現が異なる遺伝子を選択する工程であって、選択された遺伝子は、前記所望の行動と関連する候補遺伝子である工程、を含む方法。
【選択図】なし
Description
認知障害に関する理解が増すにつれて、障害を検出するための感受性の高い方法を開発すること、および、障害の治療法を開発することの必要も高まっている。認知障害について感受性の高い検出法が実現されたならば、その患者が恩恵を受けると予想される病態は数多くある。例えば、痴呆(例えば、レーヴィ体痴呆、血管性痴呆、アルツハイマー病、およびHIV関連痴呆)、ハンチントン病、パーキンソン病、分裂病、うつ病、筋萎縮性側索硬化症、軽度認知障害(MCI)、および、加齢性認知衰退(ARCD)がそれである。
一つの局面において、本発明は、被験体、例えば、哺乳動物の望ましい行動に関連する遺伝子を特定する方法であって、その所望の行動を有する被験体から成る試験集団を供給すること、その所望の行動を欠如する被験体から成る対照集団を供給すること、試験および対照集団の神経組織、例えば、海馬から発現RNAを、それぞれ、単離・プールすること、対照および試験RNAプールのそれぞれにおいて複数の遺伝子の発現レベルを定量すること、および、その複数の遺伝子から、その発現が、哺乳動物の試験集団と対照集団との間で異なる1個の遺伝子を選択することを含む方法を提供することを特徴とする。この選択された遺伝子は、所望の行動に関連することが予想される候補遺伝子である。複数の遺伝子の発現レベルは、任意の適当な手段、例えば、マイクロアレイ分析、インサイチュ・ハイブリダイゼーション組織化学、定量的PCR、SAGE分析、ノーザンブロット分析、またはドットブロット分析によって検出してもよいし、あるいは、ウェスタンブロット、タンパクスロットブロット、またはタンパクアレイを含むタンパクレベルを測定する適当な方法によって検出してもよい。この複数の遺伝子は、例えば、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4およびEAAT5のようなグルタメート輸送に関わる遺伝子、グルタメート輸送遺伝子EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4およびEAAT5以外の遺伝子、あるいは、例えば、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼのように、シナプス間隙および/または神経細胞間のシナプス外空間においてグルタメートの分解に与る遺伝子を含んでもよい。好ましくは、複数の遺伝子から選ばれる遺伝子は発現レベルの上昇を示す。別に、選択される遺伝子は、発現レベルの低下を示してもよい。
本発明の別の局面は、認知機能を増進するのに有用な化合物のスクリーニング法であって、被験体、例えば、哺乳動物に試験化合物を投与すること、前記試験化合物の投与後に前記被験体の神経組織、例えば海馬におけるグルタメート輸送遺伝子の発現レベルを定量すること、前記遺伝子の前記発現レベルを、前記試験化合物が投与されていない被験体の神経組織における同遺伝子の、参照発現レベルと比較すること、および、前記遺伝子の発現レベルが、その、対応する参照発現レベルと異なるか否かを確定することを含む方法であって、前記差は、試験化合物が、認知機能を増進することが予想される候補薬剤であることを示すことを特徴とするスクリーニング法を含む。試験化合物は、式I、IIまたはIIIに認められるもののような低分子であってもよいが、ただしそれらに限定されない。さらに、この方法は、前記遺伝子の発現レベルを、セフトリアキソンが投与された被験体の神経組織における、同遺伝子の参照発現レベルと比較することを含んでもよい。遺伝子の発現レベルは、任意の適当な手段、例えば、マイクロアレイ分析、インサイチュ・ハイブリダイゼーション組織化学、定量的PCR、SAGE分析、ノーザンブロット分析、またはドットブロット分析によって検出してもよいし、あるいは、ウェスタンブロット、タンパクスロットブロット、またはタンパクアレイを含むタンパクレベルを測定する適当な方法によって検出してもよい。この遺伝子は、例えば、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4およびEAAT5のようなグルタメート輸送に関わるものであってもよいし、あるいは、例えば、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼのように、シナプス間隙および/または神経細胞間のシナプス外空間においてグルタメートの分解に関与していてもよい。好ましくは、複数の遺伝子から選ばれる遺伝子は発現レベルの上昇を示す。別に、選択される遺伝子は、発現レベルの低下を示してもよい。
上記に加えて、本発明は、以下を提供する:
(項目1)
哺乳動物における所望の行動と関連する遺伝子を特定する方法であって、
(a)所望の行動を有する哺乳動物の試験集団を準備する工程;
(b)所望の行動を欠如する哺乳動物のコントロール集団を準備する工程;
(c)試験集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(d)コントロール集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(e)工程(c)と(d)において造られた各RNAプールにおいて複数の遺伝子の発現レベルを定量する工程;および、
(f)複数の遺伝子から、哺乳動物の試験集団とコントロール集団との間で発現が異なる遺伝子を選択する工程であって、選択された遺伝子は、前記所望の行動と関連する候補遺伝子である工程、
を含む方法。
(項目2)
哺乳動物において認知機能と関連する遺伝子を特定する方法であって、
(a)所望の認知機能を有する哺乳動物の試験集団を準備する工程;
(b)そのような認知機能を障害されている哺乳動物のコントロール集団を準備する工程;
(c)試験集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(d)コントロール集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(e)工程(c)と(d)において造られた各RNAプールにおいて複数の遺伝子の発現レベルを定量する工程;および、
(f)複数の遺伝子から、哺乳動物の試験集団とコントロール集団との間で発現が異なる遺伝子を選択する工程であって、選択された遺伝子は、認知機能と関連する候補遺伝子である工程、
を含む方法。
(項目3)
前記複数の遺伝子の発現レベルは、マイクロアレイ分析、インサイチュハイブリダイゼーション組織化学、定量的PCR、SAGE分析、ノーザンブロット分析、およびドットブロット分析から成るグループから選ばれる方法によって検出される、項目1または2に記載の方法。
(項目4)
前記複数の遺伝子は、グルタメート輸送に与る遺伝子を含む、項目1または2に記載の方法。
(項目5)
グルタメート輸送に関係する前記遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれることを特徴とする項目4に記載の方法。
(項目6)
前記複数の遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれるグルタメート輸送因子以外の遺伝子を含むことを特徴とする項目1または2に記載の方法。
(項目7)
認知機能を増進するのに有用な化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)試験化合物を哺乳動物に投与する工程;
(b)前記試験化合物の投与後、前記哺乳動物の神経組織において遺伝子の発現レベルを定量する工程;
(c)前記遺伝子の前記発現レベルを、前記試験化合物が投与されていない哺乳動物の神経組織におけるその発現の参照レベルと比較する工程;および、
(d)前記遺伝子の発現レベルが、その発現の対応する参照レベルと異なるか否かを判定する工程であって、前記相違は、試験化合物が、認知機能増進のための候補治療剤であることを示すものとする工程、
を含む方法。
(項目8)
前記遺伝子の前記発現レベルを、セフトリアキソンが投与された哺乳動物の神経組織におけるその発現の参照レベルと比較する工程をさらに含む、項目7に記載の方法。
(項目9)
前記遺伝子の発現レベルは、マイクロアレイ分析、インサイチュハイブリダイゼーション組織化学、定量的PCR、SAGE分析、ノーザンブロット分析、およびドットブロット分析から成るグループから選ばれる方法によって検出される、項目7に記載の方法。
(項目10)
前記遺伝子は、グルタメート輸送因子である、項目7に記載の方法。
(項目11)
前記遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれることを特徴とする項目10に記載の方法。
(項目12)
前記神経組織は海馬組織である、項目1、2または7に記載の方法。
(項目13)
認知機能を増進するのに有用な化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)試験化合物を哺乳動物に投与する工程;
(b)前記試験化合物の投与後、前記哺乳動物の神経組織においてグルタメート輸送体遺伝子の発現レベルを定量する工程;
(c)前記遺伝子の前記発現レベルを、前記試験化合物が投与されていない哺乳動物の神経組織におけるその発現の参照レベルと比較する工程;および、
(d)前記遺伝子の発現レベルが、その発現の対応する参照レベルと異なるか否かを判定する工程であって、前記相違は、試験化合物が、認知機能増進のための候補治療剤であることを示すものとする工程、
を含む方法。
(項目14)
哺乳動物において認知機能を増進するのに有用な化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)試験化合物を、図4に挙げられる遺伝子を発現する細胞と接触させる工程;および、
(b)前記遺伝子の発現レベルが、前記細胞を前記試験化合物と接触させたことによって変化するか否かを判定する工程であって、前記変化はもしあれば、前記試験化合物は、認知機能を、それが必要な哺乳動物において増進する能力を有することを示すものとする工程、
を含む方法。
(項目15)
前記細胞は神経組織由来のものである、項目14に記載の方法。
(項目16)
前記細胞は不死化細胞である、項目15に記載の方法。
(項目17)
前記細胞は、神経細胞系統、グリア細胞系統、または、アストロサイト細胞系統である、項目16に記載の方法。
(項目18)
前記遺伝子はグルタメート輸送因子である、項目14に記載の方法。
(項目19)
前記遺伝子の発現レベルが上昇している、項目1、2、7、13、または14に記載の方法。
(項目20)
前記遺伝子の発現レベルが低下している、項目1、2、7、13、または14に記載の方法。
(項目21)
前記試験化合物は低分子である、項目7、13、または14に記載の方法。
(項目22)
前記試験化合物は、
であり、前式において、各場合において、
LはOまたはSであり;
RはH、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、アラルキル、−OCH2CO2Hであり;
R1は−(CH2)n−C(O)Xであり、
式中、
XはOH、NR2、SH,O−アルカリ金属、または、−OC(CH3)OC(O)OCH(CH3)2であり;および、
nは、0以上6以下の整数であり;
R2はH、C1−10アルキル、C2−8アルケニル、または−(CH2)a−W−R3であり;
式中、
R3はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、−C(O)NR2、
アリール、アラルキル、またはAであり;
WはO、S、またはNR4であり;および、
aは、1以上6以下の整数であり;
式中、
R4はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、アリール、アラルキル、あるいは、R3とR4は一緒になって、未置換の、または置換されたヘテロアルキルまたはヘテロアリール環を形成してもよく、
−−線は、単結合または二重結合を示し、
R5はR1、H、SO3H、アリール、C1−10アルキル、アラルキルであり;あるいは、R5は、−−線が二重結合である場合=CHCH2CO2Hおよび=NRから成るグループから選ばれ、
mは0か1であり、および、
Aはアリールか、式Iaのヘテロアリールであり、
式中、各場合において、独立して
JはO、S、NR6、またはCR6であり;および、
yは1か2であり;
ここに、R6は電子対、H、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、または、−NR2であり;
あるいはAは、式IbまたはIcのヘテロシクロアルキルであり
式中、各場合において、独立して
JはO、S、またはNRであり;および、
XはOまたはH2である、
項目21に記載の方法。
(項目23)
前記試験化合物は、
であり、前式において、各場合において、独立して
Xは−OH、C1−10アルコキシ、−O−アルカリ金属、−N(R1)2、−SH、または、−S−C1−10アルキルであり;
Rは、直鎖または分枝鎖のC1−30アルキルであり;および、
R1はH、C1−10アルキル、C2−10アルケニル、C2−10アルキニル、アリール、または、アラルキルである;
ただし、Rは、未置換であるか、または、−OH、C1−10アルコキシ、−N(R1)2、−SH、−S−C1−10アルキル、またはアリールの1個以上によって置換され得る、
項目21に記載の方法。
(項目24)
哺乳動物における認知機能の維持において神経組織で差示的に発現される遺伝子をコードする複数のcDNA配列を含むライブラリー。
(項目25)
セフトリアキソンによる哺乳動物の治療において神経組織で差示的に発現される遺伝子をコードする複数のcDNA配列を含むライブラリー。
(項目26)
バルプロ酸による哺乳動物の治療において神経組織で差示的に発現される遺伝子をコードする複数のcDNA配列を含むライブラリー。
(項目27)
前記複数のcDNA配列は、グルタメート輸送体遺伝子由来の配列を含む、項目24、25、または26に記載のライブラリー。
(項目28)
前記グルタメート輸送体遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれることを特徴とする項目27に記載のライブラリー。
(項目29)
項目27に記載のライブラリーであって、前記複数のcDNA配列は、その中に存在する全ての配列の少なくとも20%を含む、ライブラリー。
(項目30)
項目27に記載のライブラリーであって、前記複数のcDNA配列は、その中に存在する全ての配列の少なくとも50%を含む、ライブラリー。
(項目31)
項目27に記載のライブラリーであって、前記複数のcDNA配列は、その中に存在する全ての配列の少なくとも80%を含む、ライブラリー。
(項目32)
個別にアドレスを付された位置において、項目24、25、または26のライブラリーのメンバーに相当するcDNA配列を付着させた固相支持体を含むマイクロアレイチップ。
(項目33)
図4に挙げた遺伝子の神経組織発現を刺激することが可能な組成物の、治療における使用。
(項目34)
前記遺伝子はグルタメート輸送因子である、項目33に記載の使用。
(項目35)
前記グルタメート輸送体は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、またはEAAT5であることを特徴とする項目34に記載の使用。
(項目36)
前記化合物は低分子である、項目33に記載の使用。
(項目37)
治療有効量の式:
の、治療における使用であって、
ここで、各場合において、個々に
LはOまたはSであり;
RはH、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、アラルキル、−OCH2CO2Hであり;
R1は−(CH2)n−C(O)Xであり、
ここに、
XはOH、NR2、SH,O−アルカリ金属、または、−OC(CH3)OC(O)OCH(CH3)2であり;および、
nは、0以上6以下の整数であり;
R2はH、C1−10アルキル、C2−8アルケニル、または−(CH2)a−W−R3であり;
ここに、
R3はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、−C(O)NR2、アリール、アラルキル、またはAであり;
WはO、S、またはNR4であり;および、
aは、1以上6以下の整数であり;
ここに、
R4はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、アリール、アラルキル、あるいは、R3とR4は一緒になって、未置換の、または置換されたヘテロアルキル環またはヘテロアリール環を形成してもよく、
−−線は、単結合または二重結合を示し、
R5はR1、H、SO3H、アリール、C1−10アルキル、アラルキルであり;あるいは、R5は、−−線が二重結合である場合=CHCH2CO2Hおよび=NRから成るグループから選ばれ、
mは0か1であり、および、
Aは式Iaのアリールまたはヘテロアリールであり、
式中、各場合において、独立して
JはO、S、NR6、またはCR6であり;および、
yは1か2であり;
ここに、R6は電子対、H、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、または、−NR2であり;
あるいはAは、式IbまたはIcのヘテロシクロアルキルであり
式中、各場合において、独立して
JはO、S、またはNRであり;および、
XはOまたはH2である、
使用。
(項目38)
治療有効量の式:
の、治療における使用であって、
ここで、各場合において、独立して
Xは−OH、C1−10アルコキシ、−O−アルカリ金属、−N(R1)2、−SH、または、−S−C1−10アルキルであり;
Rは、直鎖または分枝鎖のC1−30アルキルであり;および、
R1はH、C1−10アルキル、C2−10アルケニル、C2−10アルキニル、アリール、または、アラルキルである;
ただし、Rは、未置換であるか、または、−OH、C1−10アルコキシ、−N(R1)2、−SH、−S−C1−10アルキル、またはアリールの1個以上によって置換され得る、
使用。
(項目39)
項目7、13、または14の方法に従って特定された、セフトリアキソンまたはバルプロ酸以外の組成物の、治療における使用。
(項目40)
哺乳動物において認知機能を維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、前記哺乳動物においてグルタメート輸送体遺伝子の神経組織発現を刺激することを特徴とする方法。
(項目41)
哺乳動物において認知機能障害を処置するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、前記哺乳動物においてグルタメート輸送体遺伝子の神経組織発現を刺激することを特徴とする方法。
(項目42)
哺乳動物において認知機能を維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、項目33の組成物を含むことを特徴とする方法。
(項目43)
認知機能を、それが必要な哺乳動物において維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は項目37の組成物を含むことを特徴とする方法。
(項目44)
認知機能を、それが必要な哺乳動物において維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は項目38の組成物を含むことを特徴とする方法。
(項目45)
認知機能を、それが必要な哺乳動物において維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は項目39の組成物を前記哺乳動物に対して含むことを特徴とする方法。
(項目46)
前記哺乳動物は、抗生物質治療が適応的である感染症症状を持たないことを特徴とする項目43に記載の方法。
(項目47)
項目33の組成物を含み、認知機能を、それが必要な哺乳動物において増進するための医薬品の製造法であって、前記認知機能は、空間記憶獲得、長期空間記憶、および空間記憶想起から成るグループから選ばれることを特徴とする方法。
(項目48)
高齢哺乳動物において認知機能を維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、セフトリアキソン、あるいは、その類縁体または誘導体を含むことを特徴とする方法。
(項目49)
哺乳動物において認知機能障害を処置するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、セフトリアキソン、あるいは、その類縁体または誘導体を含むことを特徴とする方法。
(項目50)
前記認知機能障害は、軽度認知障害、加齢性認知衰退、記憶喪失、老衰、および、痴呆から成るグループから選ばれる状態である、項目41または49に記載の方法。
(項目51)
前記認知機能障害はアルツハイマー病である、項目41または49に記載の方法。
(項目52)
前記哺乳動物はヒトである、項目41または49に記載の方法。
(項目53)
前記哺乳動物はヒトである、項目40、42、43、44、45、46、47、または47に記載の方法。
説明の都合上、明細書、実施例および付属の特許請求項で用いられるいくつかの用語をこの場所に集めた。別様に指示しない限り、本明細書に使用される技術・科学用語は全て、本発明の所属する従来技術において通常の錬度を有する当業者によって普通に理解されるものと同じ意味を有する。
冠詞“a”および“an”は、本明細書で使用する場合、その冠詞の文法的目的物の1個、または、1個以上(すなわち、少なくとも1個)を指す。例を挙げて説明すると、an elementは、1個の要素、または、1個以上の要素を指す。
で表される機能基であって、R50、R51およびR52がそれぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、−(CH2)m−R61であり、または、R50とR51とは、それらが付着するN原子と共に、その環状構造の中に4から8原子を有する複素環を完成し;R61はアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、複素環、または、多環を表し、mは、ゼロまたは、1から8の範囲の整数を表す、式で表される機能基である。ある実施態様では、R50またはR51の一方のみがカルボニルであってもよいが、例えば、R50、R51と窒素は一緒になってイミドを形成しない。別の実施態様では、R50とR51(および要すれば随意にR52も)それぞれ独立に、水素、アルキル、アルケニル、または、−(CH2)m−R61を表す。従って、「アルキルアミン」という用語は、置換された、または、未置換のアルキルを付着させた、すなわち、R50とR51の少なくとも一方がアルキル基である、上に定義した通りのアミン基を含む。
において、X50は結合であり、あるいは、酸素または硫黄を表し、R55およびR56は、水素、アルキル、アルケニル、−(CH2)m−R61、または製薬学的に受容可能な塩を表し、R56は、水素、アルキル、アルケニル、または、−(CH2)m−R61を表し、mとR61は上に定義した通りである式によって表される機能基を含む。X50が酸素でありR55またはR56が水素でなければ、前式は「エステル」を表す。X50が酸素でありR55が上に定義した通りであると、この機能基は本明細書ではカルボキシル基と呼ばれ、特にR55が水素である場合には、この式は「カルボン酸」を表す。X50が酸素であり、R56が水素である場合は、この式は「ギ酸塩」を表す。一般に、上式の酸素原子が硫黄で置換された場合、この式は「チオールカルボニル」基を表す。X50が硫黄であり、R55またはR56が水素でない場合、この式は「チオールエステル」を表す。X50が硫黄であり、R55が水素である場合、この式は「チオールカルボン酸」を表す。X50が硫黄であり、R56が水素である場合、この式は「チオールギ酸塩」を表す。一方、X50が結合であり、R55が水素でない場合は、上式は「ケトン」基を表す。X50が結合であり、R55が水素である場合、上式は「アルデヒド」基を表す。
において、Q50はSまたはOを表し、R59は水素、低級アルキルまたはアリールを表す式によって表すことが可能である。例えば、アルキルを置換するのに用いる場合は、フォスフォリルアルキルのフォスフォリル基は、一般式:
において、Q50とR59は、それぞれ独立に上に定義した通りであって、Q51は、O、SまたはNを表す式によって表すことが可能である。Q50がSの場合は、フォスフォリル基は「フォスフォロチオエート」である。
Spring Harbor Laboratory、ニューヨーク(2001)、および、Ausebel等、「分子生物学における最近のプロトコール(Current Protocols in Molecular Biology)」Greene Publishing Associates & Wiley Interscience、ニューヨーク(1989)に記載されている技術を参照されたい。
モリスの水迷路と放射状迷路による認識機能の行動評価は、認識機能における加齢性変化を特定するのに有用であった。これらの行動評価を、動物を、その認知機能に基づいて表現型を分類する方法として用いた場合、行動評価を、認知機能の遺伝学的・生理学的測定値と組み合わせて、加齢の脳に及ぼす作用における差を検出することが可能になる。
個体から得られた組織サンプルまたは細胞からRNAを単離する場合、組織または細胞を被験体から取り出した後、遺伝子発現にそれ以上の変化が起こらないように阻止することが重要である。発現レベルの変化は、下記の擾乱、例えば、熱ショック、リポポリサッカライド(LPS)またはその他の試薬による活性化後、急速に起こることが知られている。さらに、組織・細胞中のRNAは速やかに変性することがある。従って、好ましい実施態様では、被験体から得た組織または細胞はできるだけ早く急冷凍される。
いくつかの実施態様では、数百または数千の遺伝子ではなく、一つの、または、ごく少数の遺伝子の発現を定量するだけで十分である。これらの実施態様でもマイクロアレイを使用することは可能であるが、他の、遺伝子発現を検出するための各種の方法が利用可能である。この節では、mRNA、またはそれによってコードされるポリペプチドを検出・定量するための、二三の例示的方法を記述する。方法の第一工程が細胞からのmRNAの単離を含む場合、この工程は前述した通りに実行することが可能である。1種以上の核酸の標識は後述のように実行することが可能である。
一般に、アレイによって発現プロフィールを確定することは下記の工程を含む。すなわち、(a)被験体からmRNAサンプルを入手し、それから標識核酸を調製すること(「標的核酸」または「標的」)、(b)この標的核酸を、アレイの上において対応するプローブと、例えば、ハイブリダイゼーションまたは特異的結合によって結合するのに十分な条件下で、アレイと接触させること、(c)要すれば随意にアレイから未結合の標的を除去すること、(d)結合標的を検出すること、および、(e)結果を分析すること、という工程である。本明細書で用いる「核酸プローブ」または「プローブ」とはアレイに付着される核酸であり、一方、「標的核酸」とは、アレイにハイブリダイズされる核酸である。これら工程のそれぞれを下記にさらに詳述する。
一般に、標的分子は、標的分子のマイクロアレイに対するハイブリダイゼーションの検出を可能とするよう標識される。「標識」とは、プローブはシグナル発生システムの1メンバーを含み、従って、直接でか、または、シグナル発生システムの、別の1種以上のメンバーとの組み合わせ作用を通じて検出可能となることを意味する。直接検出可能な標識の例としては、プローブの機能基、例えば、ヌクレオチドモノマー単位、例えば、プライマーのdNMPに組み込まれる、通常共有的に結合される放射性同位元素性および蛍光性機能基、または、プローブ分子の機能基に結合が可能な、検出可能な標識の、光学活性を持つ、または、化学的活性を持つ誘導体が挙げられる。
本発明に従って使用するのに好適なアレイ、例えば、マイクロアレイは、認知機能に関わるとされる候補遺伝子である遺伝子から成る1種以上のプローブを含む。例示のアレイとしては、認知機能を調べるに当たって興味のある1種以上の遺伝子、例えば、GeneChip(登録商標)ラット発現セット230アレイ、または、GeneChip(登録商標)ラット神経生物学U34アレイを含む。後者は、神経生物学の研究に関わりのある1,200を越える配列(キナーゼ、細胞表面に対する遺伝子を含む)を含む。さらに、ヒトの全ゲノムを調べるためにGeneChip(登録商標)HuSNP(商標)を使用することも可能である。この場合、同時に、ゲノム全体に渡って散在する一塩基多型(SNP、スニップ)と呼ばれる約1,500個の遺伝子変動を追跡することができる。スニップはゲノム探索において優れたマーカーとなる。なぜなら、スニップは、単純で、多量で、分散し、異なるヒト集団間の遺伝的変動の多くの原因となるものだからである。GeneChip(登録商標)アレイのような高処理技術を用いることにより、スニップは、従来のマーカー、例えば、マイクロサテライト配列よりも簡単に追跡することが可能である。
次の工程は、標的核酸をアレイと、標的核酸とアレイのプローブとの間に結合が起こるのに十分な条件下で、接触させることである。好ましい実施態様では、標的核酸は、アレイと、標的核酸とマイクロアレイのプローブとの間にハイブリダイゼーションが起こるのに十分な条件下で接触させられるが、その際、ハイブリダイゼーション条件は、所望のレベルのハイブリダイゼーション特異性が実現されるように選ばれる。
式:Td=(((((3x#GC)+(2x#AT))x37)−562)/#bp)−5、前式において、#GC、#AT、および、#bpは、それぞれ、プローブの鋳型DNAに対するアニールにおいて関与するグアニン−シトシン塩基対の数、アデニン−チミン塩基対の数、および、全塩基対の数である。
biology−hybridization with nucleic acid probes”)」の例えばI部2章「ハイブリダイゼーション原理概観および核酸プローブアッセイ戦略(“Overview of principles of hybridization and the strategy of nucleic acid probe assey”)」、Elsevier、ニューヨークは、核酸ハイブリダイゼーションに関する基本的ガイドを提供する。
前述の工程により、アレイ表面において標的核酸のハイブリダイゼーションパターンが生産される。このパターンは目視することも可能であるし、あるいは、様々の方法があるが、標的核酸の特定の標識に基づいて選ばれた特定の検出法によって検出することが可能である。代表的な検出手段としては、シンチレーションカウンティング、オートラジオグラフィー、蛍光測定、比色測定、発光測定、光散乱等が挙げられる。
Applications”)」、Academic Press,ニューヨークを参照されたい)。
認知障害の抑制に応じて上向調整される1種以上の遺伝子の発現レベルを、認知障害の抑制が無い場合の発現レベル、例えば、病気または正常被験体に特徴的な発現レベルを参照して行う比較は、コンピュータシステムを用いて実行するのが好ましい。一つの実施態様では、1種以上の発現レベルが二つのサンプルから得られ、これら二組の発現レベルが、比較のためにコンピュータシステムに導入される。ある好ましい実施態様では、1種以上の発現レベルから成る一組が、コンピュータシステムに、そのコンピュータシステムに既に存在する数値との比較のために入力される、あるいは、コンピュータ読み取り可能な形に変換され、次にコンピュータシステムに入力される。
本発明のさらに別の実施態様は、前述の治療効果の中から選ばれる任意の一つを実現するために、製薬学的に受容可能な担体と共に、製薬または無菌組成物を投与することに関する。このような製薬組成物は、加齢の際に、認知機能の維持または促進に関連する遺伝子の発現を有利に修飾する分子、例えば低分子を含む可能性がある。
加齢時に認知機能を増進または維持するのに関連する遺伝子(例えば、EAAT遺伝子)の発現を有利に修飾する低分子の例としては、式Iのセファロスポリンに関連する化合物が挙げられる、すなわち、
ここに、各場合において、
LはOまたはSであり;
RはH、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、アラルキル、−OCH2CO2Hであり;
R1は−(CH2)n−C(O)Xであり、
ここに、
XはOH、NR2、SH,O−アルカリ金属、または、
−OC(CH3)OC(O)OCH(CH3)2であり;および、
nは、0と6を含めた0から6までの整数であり;
R2はH、C1−10アルキル、C2−8アルケニル、または
−(CH2)a−W−R3であり;
ここに、
R3はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、−C(O)NR2、
アリール、アラルキル、またはAであり;
WはO、S、またはNR4であり;および、
aは、1と6を含めた1から6までの整数であり;
ここに、
R4はH,C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、アリール、アラルキル、あるいは、R3とR4は一緒になって、未置換の、または置換されたヘテロアルキルまたはヘテロアリール環を形成してもよく、
−−線は、単結合または二重結合を示し、
R5はR1、H、SO3H、アリール、C1−10アルキル、アラルキルであり;あるいは、R5は、−−線が二重結合である場合の=CHCH2CO2Hおよび=NRから成るグループから選ばれ、
mは0か1であり、および、
Aはアリールか、式Iaのヘテロアリールであり、
ここに、各場合において、
JはO、S、NR6、またはCR6であり;および、
yは1か2であり;
ここに、R6は電子対、H、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、または、−NR2であり;
あるいはAは、式IbまたはIcのヘテロシクロアルキルであり
ここに、各場合において、
Xは−OH、C1−10アルコキシ、−O−アルカリ金属、−N(R1)2、−SH、または、−S−C1−10アルキルであり;
Rは、直鎖または分枝鎖C1−30アルキルであり;および、
R1はH、C1−10アルキル、C2−10アルケニル、C2−10アルキニル、アリール、または、アラルキルである;
ただし、Rは、未置換であるか、または、1個以上の−OH、C1−10アルコキシ、−N(R1)2、−SH、−S−C1−10アルキル、またはアリールによって置換されるものとする。
ここに、各場合において、
RはH、C1−10アルキル、C2−10アルケニル、C2−10アルキニル、アリール、または、アラルキルであり;
R1はH、C1−10アルキル、C2−10アルケニル、C2−10アルキニル、アリール、または、アラルキルであり;
R2は、下記、すなわち、N、O、またはSから選ばれる1−4個のヘテロ原子を含むヘテロ環またはヘテロアリール環であり;
LはO、S、またはNRであり;および、
XはCR2、O、またはSである。
として存在する場合、各互変異性体は、平衡状態で存在していても、R’による適当な置換によって一方の形に固定されることがあっても、本発明の範囲に含まれるものと考えられる。ある一回の出現時における置換基の意味は、任意に選ばれる、他の出現時の、その置換基の意味とも、あるいは、任意に選ばれる、他の置換基の意味とも独立する。
本明細書に記載される組成物に対する等価物と考えられるものとして、その他の点では一致し、それと同じ一般的性質を持つ組成物であって、その興味の組成物の特性に重大な影響を与えない、1個以上の単純な変動が置換基または成分に形成される組成物が挙げられる。
いずれの化合物においても、治療的有効量は、先ず、細胞培養アッセイ、例えば、Aronica等、上記の方法に従って、あるいは、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、またはブタのような動物モデルにおいて推定することが可能である。特に好ましい動物モデルは、本明細書に記載される、行動的に特徴のあるラットを用いる。次に、この情報を用いて、ヒトに対する有用な用量および投与ルートを決定する。
これまで概括的に説明してきたので、下記の実施例を参照することによって本発明がさらに容易に理解されよう。この実施例は、単に、いくつかの点と本発明の実施態様を具体的に説明するために含められるもので、いかなる意味でも本発明を限定することを意図するものではない。
9.1.1 モリスの水迷路(MWM)と放射状迷路(RAM)被験体
我々は、9匹の若年(4−6月齢)と18匹の高齢(25−27月齢)病原性無縁のロングエバンス系ラットについてMWMによる行動試験を行い、マイクロアレイ分析にも同じ動物を用いた。さらに別の10匹の高齢ラットをMWMでテストし、その後、RAMで訓練と試験を行い、2種の試験を通じて認知機能個体差の試験−再試験信頼度を評価した。
MWM装置は、水(27℃)を満たした大きな、円形プール(直径1.83m、高さ0.58m)から成る。水は、あらかじめ非毒性色素またはその他の物質を加えて不透明にしておく。作業の典型的な「隠れ台」バージョンの場合、ラットは、隠された避難台(高さ34.5cm)を見つけ出すように訓練される。この台は、迷路の4分の1円の一つの中心部において水面下丁度1.0cmに配される。この台は、行動試験中、迷路の外部から、タンクの底部に沈下させることも、その正規の位置に上昇させることもできる。この台の位置は、複数の試行の間一定に置かれる。台の位置をマークする局所的目印が無いため、ラットが、プール周辺の任意のスタート地点から始めて効率的にその台の位置を特定することを可能とする能力は、迷路周囲の情報の利用に依存する。迷路は、白い模様が添えられた黒いカーテンで囲まれており、これが空間目印の形を与える。表面を黒く塗った第二の台(高さ37.5cm)が目印訓練の際水面2cm上に突出する。これは、認知に無関係な要因に対するコントロールとして使用される作業バージョンとなる。プールにおけるラットの行動は、プールの中心2.5m上に吊り下げられたカメラによって記録された。カメラは、ビデオ追跡システム(HVS Image Advanced Tracker VP200)および、HVS Image、ハンプトン、英国のRichard Bakerによって開発されたHVSソフトウェアを搭載するPCコンピュータに接続された。
我々は、ロングエバンス雑種ラットの高齢集団において、加齢の認知に及ぼす作用に対する感度、および、信頼度の高い個体差測定に関して、MWMプロトコールを最適化した(Gallagher M,Burwell,R,Burchinal M,Behav.Neurosci.107:618−626;1993)。
ビデオ追跡のコンピュータ記録を編集し、迷路における各ラットの成績に関するデータを得た。訓練試行と探求試行における測定値は変動分析によって分析した。
隠れ、カモフラージュ台に関する訓練時の成績は、若年ラットグループと、高齢ラットグループの間では異なっていた[F(1,23)=12.69、p<0.002]。目視可能な台による目印訓練では両グループの間に差は無かった。目印訓練における避難までの潜時は、若年ラットでは平均9.36秒で、高齢ラットでは10.60秒であった。
8本の高架放射状迷路の各アーム(7x75cm)は、8角形の中心台(直径30cm、高さ51.5cm)の各辺から突出する。アームにおける透明な側壁は高さが10cmで、65oの角度をなし凹形を形成する。食物ウェル(直径4cm、深さ2cm)が、各
アームの遠位端に配される。プレクシグラスでできたブロック(高さ30cm、幅12cm)は、設置されると任意のアームへの進入を阻止することが可能である。多数の、迷路外目印が、装置を取り巻く室内に供給されており、照明も頭上の固定器を通じて与えられた。
ラットは先ず、8分間セッションで連続4日間迷路に馴らされた。各セッションにおいて、食物報酬がRAMの上にばら撒かれた。最初は中央台と複数のアームの上で、次第に複数のアームに限局していく。この馴化相の後、食物ペレットを各アーム末端に置く標準的訓練プロトコールが使用された。ラットは、1日1回の試行を連続18日受けた。1日1回の試行は、8個の食物ペレット全てが獲得された時点、または、16回の選択がなされたか、または、15分が経過したか、そのいずれかの時点で終了した。エラーとは、食物を既に獲得したアームへ戻ること(そのアームに4肢全てを置く)である。この相の終了後、作業の記憶要求を、試行中に遅れを課すことによって増した。各試行の開始時、3本のアームは閉鎖された。閉鎖アームの実体および形態は試行毎に変えた。ラットは、試行の開始時にアクセスが可能な5本のアームにおいて食物を得ることが許された。次に、ラットは60秒間迷路から取り出された。この間に迷路に対する障壁が取り除かれ、8本全てのアームに対するアクセスが可能となった。次にラットは中央台に戻され、残りの食物報酬を獲得することが許された。
記憶エラーは、60秒遅延を用いた試験試行において、ラットが、遅延前に既に訪れた5本のアームの内の1本に戻った時に起こった。各ラットの成績は、4回の連続試験試行について平均された。パラメトリック統計(非対合t−検定)を用いて、若年グループと高齢グループの間の成績を比較した。相関分析(ピアソンのr)を用いて、高齢ラット(N=10)について、モリス水迷路における成績(学習示数スコア)と放射状迷路(記憶エラー)の間の関係を調べた。
RAMの遅延バージョンにおける若年成人ラットの成績は、60秒から8時間に渡る遅延間隔の関数として変動する(Chappell等、Neuropharmacology 37:481−488,1998)。以前にMWMにおいてその特性が明らかにされた高齢ラットは、若年ラットに比べて、60秒の遅延後より多くの記憶エラーを冒した(p<0.025)。平均すると、若年ラットは0.17エラーを冒したのに対し、高齢ラットは平均1.52エラーを冒した。一方、10匹の高齢ラットは、RAMにおいて広範囲の成績を示した。最初のMWM特徴と、RAMにおける記憶力成績の間には有意な相関が観察された(r=0.82、データを図2に示す)。
9.2.1 行動的に特性解明された動物からのRNA調製
27匹の行動的に特性解明されたラット(データを図1に示す)を、ナトリウムペントバルビタールの過剰投与(100mg/kg)により屠殺した。両側海馬を剖出し、凍結した(−80℃)。各動物について一方の海馬を、重量測定し、適当容量のフェノール−グアナジンイソチオシアネート(トリゾール試薬、組織100mg当たり1mlで、1mlを最小容量とする)中でホモジェナイズした。各サンプルをクロロフォルム(トリゾール1ml当たり200μl)で抽出し、イソプロパノロールで沈殿させた。RNAペレットを空気乾燥し、DEPC処理水に再懸濁させた。サンプルは全て−80℃で保存した。RNAの一部を、QiagenのRNeasyミニRNA抽出キットを、メーカーの指示に従って用いてさらに精製し、その後−80℃で保存した。サンプルの260nmにおける吸収を定量し、純度を、260nmと280nmにおける吸収比で定めた。サンプルの完全性と濃度を、アガロースゲル電気泳動にて確認した。アガロースゲルの写真を走査し、ピクセルを逆転し、NIH−画像を用いて定量化した。次に、必要に応じて濃度を調整した。
9.2.2 逆転写およびマイクロアレイに対するハイブリダイゼーヨン
ハイブリダイゼーション用標識cRNAプローブは、Affymetrix Enzo Bioarray高収率RNA転写標識システムを用いて調製した。RNAは逆転写してcDNAとし、さらにビオチン標識cRNAに変換した。逆転写前に、各標識システムによって供給される内部標準を試験RNAに加えた。次に、実験のGeneChip(登録商標)に対してハイブリダイゼーションを実行する前に、逆転写と標識が最適であることを確認するために、cRNAをコントロールチップに対してテストした。cRNAを、U34A Affymetrix GeneChip(登録商標)アレイに与えた。これらのアレイは、7000種の発現ラット遺伝子おより1000ESTクラスターに対する特異的配列を含み、最近開発された、より小型の神経科学遺伝子マイクロアレイの上に搭載される全ての遺伝子を含んでいた。GeneChip Fluidics Stationは、標識cDNAの遺伝子アレイへの導入と、GeneChipハイブリダイゼーションオーブンで実行される通りのハイブリダイゼーションとを自動化する。GeneArrayスキャナーを用いて、各オリゴマーセットに対するハイブリダイゼーション信号を、共焦点レーザースキャンに基づいて定量化した。
我々のデータ分析には、Genechip Analysis SuiteとAffymetrix MAS4.0、および比較的最近開発されたMAS5.0アルゴリスムを用いた。両アルゴリスムとも、既知の陰性遺伝子と、チップ当たりの平均信号強度に基づくデフォールト閾値を持っている。Genechip間の比較を可能とするために、Affymetrixによって定義された、あらかじめ定義されたオリゴマーセットに基づく正規化および縮尺法を適用した。両アルゴリスムとも、完全マッチcRNAのハイブリダイゼーションを抑制するよう計算された変異塩基を持つ一組のミスマッチ(MM)オリゴマーに対する、各発現遺伝子に対応する完全マッチ(PM)オリゴマーの、セット当たりの発現レベルの相対的数値を生成した。経験的なMAS4.0は生のデータを用いて、食い違いコールの平均値を生成するが、これは、各遺伝子についてコントロールのMMオリゴマーに対する、PMオリゴマーのハイブリダイゼーション信号強度の相対値を与える。存在する(P)、僅か(M)、または欠如(A)の絶対コールは、MMオリゴマーに対して正となるPMオリゴマーの相対数値に基づく。統計的なMAS5.0アルゴリスムは、事実上同じタイプの比較に依存するが、存在のコールは背景よりも高い発現レベルを反映する確率を強調するために、p値を生成する統計的方法を適用した。さらに、ハイブリダイゼーション信号強度を計算する際に、各探求セットにおいてPMおよびMMオリゴマー内の外来者の影響を最小とすることを意図した統計的基準を信号アルゴリスムに適用した。この二つのアルゴリスムによって生成された発現レベルを表すデータにおける基本的な差は、MAS5.0は、二つの比較グループの間で、変動発現レベルを有する遺伝子の数を過大評価させることになりかねない、陰性発現レベルを除去するように設計されていることである。全体として、MAS5.0によって設定される1オリゴマー当たり得られる信号は、MAS4.0の場合よりも小さかった。
グルタメート輸送因子に関する様々な転写物が、ヒトおよびげっ歯類神経系で検出された(図3)。これらの転写物の内二つは、海馬形成において発現されなかった(EAAT4とEAAT5)。残りの3種の転写物は、神経細胞とグリアにおいて異なる細胞局在パターンを有しており、全てが海馬において発現された。マイクロアレイにおける高齢障害無し遺伝子(セット3)に対する作用サイズ分析では、データセットGLT−1が5.87の作用サイズを持っており(高齢障害無し遺伝子の作用サイズ分析における最大値)、第二のグルタメート輸送因子であるGLASTは1.93の作用サイズを持っていた(図4)。いずれの場合も、グルタメート輸送因子mRNAは、若年、および高齢障害有りのプールされた比較対象に対して、高齢障害無しラットにおいて増加していた。マイクロアレイ実験設計に対するパワー分析から予想されたように、GLT1mRNAは、比較対象である若年、および高齢障害有りに比べて有意に増加していた(p<0.0002)。同
様の分析において、GLASTも有意に増加した(p=0.0484、図4)。
独立した一組の動物(グループ当たりのNが3または4)について、インサイチュハイブリダイゼーション組織化学用に処理した海馬切片を用いて追跡分析を行った。
我々は、マイクロアレイ分析によってAUラット海馬において上向調整されることが特定された、グルタメート輸送因子に対応する特定プローブを生成するために逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT−PCR)を用いた。高齢ラット(学習係数スコアが(AU)内にあり、(AI)若年動物のスコアの外にある動物のプール)の海馬から調製したサンプルRNAを、オリゴdTと逆転写酵素を用いて逆転写した。次にこのcDNAを、第1回PCR反応において、鋳型として、センスとアンチセンスオリゴマープローブ(表II)と共に用い、後述の特定のグルタメート輸送因子に対応する2本鎖cDNAを増幅した。標準PCR条件を用いた(初回変性94℃で4分、初回アニーリング72℃で40秒、94℃30秒の変性、55℃30秒のアニーリング、および72℃30秒の伸長を35サイクル、最終伸長72℃で4分および4℃へ冷却)。PCR産物の分液を、臭化エチジウム−アガロースゲル上で電気泳動し、適当なサイズのプローブが生成されたことを確認した。第二ラウンドPCR反応を、各増幅cDNA、SP6プロモーター配列プラス各グルタメート輸送因子PCR産物を得るために用いられた元のセンスオリゴマーに対応するセンスオリゴマーと、T7プロモーター配列および各グルタメート輸送因子PCR産物に対する元のアンチセンスオリゴマーを含むアンチセンスオリゴマーとを含む伸長オリゴマー(表II)を用いて実行した。これによって、それぞれ、センス鎖およびアンチセンス鎖上のSP6およびT7プロモーターを有する特異的グルタメート輸送因子cDNAが生成された。PCR産物を、エタノール沈殿により収集し、その配列を、DNA自動シーケンサーおよびSP6プライマーによるヌクレオチド配列決定法によって確認した。
9.2.7 インサイチュハイブリダイゼーション組織化学のための組織調製
11匹の行動学的に特性解明されたラット(n=4若年、n=7高齢)を、ナトリウムペントバルビタールの過剰投与(100mg/kg)により屠殺し、0.1Mリン酸バッファー、pH7.4(PPB)に溶解した4%パラフォルムアルデヒドによって心臓内環流した。環流は全て0700時と1000時の間で行った。固定後、脳を頭骨から取り出し、右と左の両側海馬を直ちに周囲組織から解剖分離した。剖出海馬をPPBにて24時間後続固定し、20%蔗糖を含むPPBにて24時間低温保護し、「延びた」方向で乾燥氷粉末上で凍結し、さらに処理するまで−80℃で保存した。
GLT1の量は、若年、および高齢障害有りに比べて高齢障害無しにおいて有意に多く(p<0.03)、一方、GLAST mRNAが多くなる傾向も認められた(p=0.089、図5)。インサイチュハイブリダイゼーションのために使用された一組のラットにおける認知状態を表す学習示数スコアは、マイクロアレイ実験における動物と同様であった。すなわち、高齢障害無し(182、223、240)、若年(177、219、200、227)、および、高齢障害有り(290、285、297、298)であった。
9.3.1 若年ラットのGLT1 mRNAに対するセフトリアキソン治療の効果
若年ラットに、セフトリアキソンを200mg/kg(N=2)で、または、ベヒクル(N=3)を、筋肉内に連日1週間注入した。屠殺後、海馬を剖出し、凍結した。
9.3.2.1 リアルタイムRT−PCRのためのRNA調製
RNAを、セフトリアキソン、または、生食液投与を受けた動物(状態当たり3匹の若年動物)の右側海馬から、トリゾール試薬を用いて抽出し、マイクロアレイ実験で用いた手順と同様にして、Qiagen RNeasyカラムにて精製した。濃度と完全性を確かめた後(マイクロアレイRNAの場合と同様にして)、サンプルを、マイクロリットル当たり50ngの濃度に希釈した。このサンプルの100ngを、下記の条件下で、Applied BiosytemsのTaqman逆転写試薬を用いて10μlの総容量において逆転写させた。その条件とは、1x逆転写バッファー、0.5mMの各dNTP、5.5mMのMgCl2、1.25単位/μLの多数転写逆転写酵素、0.4単位/μLのRNアーゼ阻害剤、および、2.5μMのオリゴdTプライマーである。サンプルを室温で10分インキュベートし、その後48℃で45分、95℃で5分インキュベートした。サンプルを、リアルタイムPCR反応で用いるため1:20および1:100に希釈した。2匹の別々の動物から得た抽出・精製海馬RNAを結合し、このRNAを、500ngのRNAを50μlの反応液で用いることを除いては、前述の実験サンプルのものと同一の条件で逆転写することによって標準RNAを生成した。標準cDNAを、連続希釈により1:20、1:100、1:500、および1:2500に希釈した。さらに、200ngの標準RNAを、逆転写酵素を省略したことを除いては前述のものと同じ条件で20μl反応液に移した。このサンプルをRTフリーサンプルと呼び、RNAサンプルそのものの背景活性を示すために含めた。このサンプルを1:20と1:100に連続希釈した。
cDNAの1:20と1:100希釈を用いてGLT1a、GLT1およびGAPDHの2種類の異なる濃度で、各cDNAサンプルについて3重にPCR反応を実行した。PCR反応におけるcDNAの最終濃度は、100pg/μlと20pg/μlであるが、これはインプットRNA濃度から外挿したものであった。この標準を4種類の希釈液全てに用いて、100pg/μl、20pg/μl、4pg/μl、および0.8pg/μlの外挿最終濃度を生成した。Invitrogenの白金定量PCRキットによるPCR反応混合物を、全てのサンプルについて同じプライマーとプローブセットを用いて集合し、次にこれらを、各濃度各cDNAについて別々の管に分割した。次にこのcDNAを混合液に加え、続いて、3本のリアルタイムPCR管に分けた。反応は全て、下記の条件でRotorGene3000(Corbett Research)において行った。すなわち、50℃で2分、95℃で5分、次に、95℃で25分と60℃で60秒から成る45サイクルである。データは、プライマーセットについてGLT1とGLT1aプローブに対するGAPDHとFAM/SYBRチャンネル用のJoeチャンネル上で獲得した。全ての試行に対して、スパイク抑圧およびダイナミック管正規化を用いた。個別試行中に、場合によって、GLT1またはGLT1aおよびGADPHリアルタイムPCRを実行した。
GAPDHおよびGLT1またはGLT1aの比較量を、DDCt法(LivakおよびSchmittgen、Methods25:402−408、2001)を用いて確定した。全ての反応に対する閾値を0.05蛍光単位に設定し、各サンプルのCtを、Rotorgeneソフトウェアによって定量した。各濃度における各GLT1 cDNAの平均Ct値を求め、GADPHの平均値から差し引いた。GADPH値が、GADPHの平均値より15%以上上回るまたは15%以上下回る場合、そのサンプルを取り除いた。GLT1 mRNAは、薬剤治療動物において平均1.34倍増加し、GLT1a mRNAは、薬剤治療動物において平均1.27倍増加した。これらの値は、マイクロアレイにおいてAUラットで観察された、1.31の増加を示したGLT1における全体変化と一致した。
MWMにおける認知状態について特性解明した後、高齢障害有りラットを、それ等のMWM学習示数スコアに関して等しくなるように、二つの治療条件の内の一つに割り当てた(コントロールベヒクル、またはセフトリアキソン200mg/kg)。最初は、両治療条件下のラットはRAM作業で訓練した(馴化、遅延無しバージョンで、次に60秒遅延)。次に、ベヒクルまたは薬剤の注入を毎日朝行った(午前8:00−9:00)。ラットは、毎日、放射状迷路において、遅延を3時間まで延長させて試験を受けた。3時間遅延における決定的試験を8−10日目に行った(注入7日後)。ベヒクルを投与された高齢ラットにおける記憶エラーは、同時にテストした若年グループに比べて有意に上昇していた。ベヒクルを投与された高齢ラットに比べて、薬剤投与を受けた高齢ラットの冒すエラーはより少なかった(図6)。3匹の薬剤治療ラットと、ベヒクルによって治療された4匹の高齢ラットによる、この最初の試験的評価を、さらに行動的に特性解明したラットを含めて、サンプルサイズをグループ当たり7−8匹のラットに増加させて現在再度試行中である。
RAM試験の終了時、ベヒクルおよび薬剤治療を受けた高齢ラットを屠殺した。剖出海馬を凍結し、GLT1 mRNA分析のために保存した(−80℃)。この分析は、さらに高齢ラットを加えた行動試験再試行の終了時に行った。薬剤治療が、同じ用量で薬剤治療した場合に若年ラットに見られた作用に基づいて期待されたように、薬剤治療がGLT1 mRNAを増した場合、マイクロアレイ分析を行って、セフトリアキソンによる治療を受けた高齢障害有りラットの遺伝子発現プロフィールを、コントロールの高齢障害有り被験体と比較した。
試験−再試信頼度は、高齢ラットを標準MWMプロトコールにて特性解明し、次に、数週または数ヶ月後、新たな空間環境でMWMを用いてテストすると得られる。認知障害を持つ高齢ラットにおいて機能を改善する化合物の、臨床前効力は、MWMによる再試において評価することが可能である。二つの作業(RAMとMWM)を通じる治療効果は、その二つの作業において異なる他の成分(例えば、演技にたいするモチベーション基盤)とは独立した、認知機能に対する薬剤作用の実証性を強化する。
この研究は、認知機能を改善または維持する治療用投与スケジュールを定めるために、若年ラットに試験化合物またはベヒクルを投与することを含む。試験化合物としては、バルプロ酸、代謝共役型グルタメート受容体(mGluR)活性を修飾する化合物、および、下垂体アデニルシクラーゼ活性ポリペプチド(PACAP)発現を修飾する化合物が含まれる。MWMにて特性解明された高齢障害有りラットを、薬剤またはベヒクル治療に割り当て、RAMにてテストした。次に、行動試験の終了時に、グルタメート輸送因子発現、および、その他の遺伝子プロフィール作成、例えば、mGluR発現と活性、PACAP発現、またはβ−アレスチン2発現を実施した。
これまで本発明の特異的実施態様を論じてきたが、前記の詳細説明は例示のものであって限定的ではない。本明細書を精読するならば、当業者には、本発明に関する多くの変種が明らかであろう。付属の特許請求項は、そのような実施態様および変種の全てを請求することを意図するものではなく、本発明の全範囲は、特許請求項を、等価物の完全範囲と共に、そして明細書を、上記変種と共に参照することによって定められるべきである。
Claims (53)
- 哺乳動物における所望の行動と関連する遺伝子を特定する方法であって、
(a)所望の行動を有する哺乳動物の試験集団を準備する工程;
(b)所望の行動を欠如する哺乳動物のコントロール集団を準備する工程;
(c)試験集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(d)コントロール集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(e)工程(c)と(d)において造られた各RNAプールにおいて複数の遺伝子の発現レベルを定量する工程;および、
(f)複数の遺伝子から、哺乳動物の試験集団とコントロール集団との間で発現が異なる遺伝子を選択する工程であって、選択された遺伝子は、前記所望の行動と関連する候補遺伝子である工程、
を含む方法。 - 哺乳動物において認知機能と関連する遺伝子を特定する方法であって、
(a)所望の認知機能を有する哺乳動物の試験集団を準備する工程;
(b)そのような認知機能を障害されている哺乳動物のコントロール集団を準備する工程;
(c)試験集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(d)コントロール集団の神経組織から発現RNAを単離し、プールする工程;
(e)工程(c)と(d)において造られた各RNAプールにおいて複数の遺伝子の発現レベルを定量する工程;および、
(f)複数の遺伝子から、哺乳動物の試験集団とコントロール集団との間で発現が異なる遺伝子を選択する工程であって、選択された遺伝子は、認知機能と関連する候補遺伝子である工程、
を含む方法。 - 前記複数の遺伝子の発現レベルは、マイクロアレイ分析、インサイチュハイブリダイゼーション組織化学、定量的PCR、SAGE分析、ノーザンブロット分析、およびドットブロット分析から成るグループから選ばれる方法によって検出される、請求項1または2に記載の方法。
- 前記複数の遺伝子は、グルタメート輸送に与る遺伝子を含む、請求項1または2に記載の方法。
- グルタメート輸送に関係する前記遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれることを特徴とする請求項4に記載の方法。
- 前記複数の遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれるグルタメート輸送因子以外の遺伝子を含むことを特徴とする請求項1または2に記載の方法。
- 認知機能を増進するのに有用な化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)試験化合物を哺乳動物に投与する工程;
(b)前記試験化合物の投与後、前記哺乳動物の神経組織において遺伝子の発現レベルを定量する工程;
(c)前記遺伝子の前記発現レベルを、前記試験化合物が投与されていない哺乳動物の神経組織におけるその発現の参照レベルと比較する工程;および、
(d)前記遺伝子の発現レベルが、その発現の対応する参照レベルと異なるか否かを判定する工程であって、前記相違は、試験化合物が、認知機能増進のための候補治療剤であることを示すものとする工程、
を含む方法。 - 前記遺伝子の前記発現レベルを、セフトリアキソンが投与された哺乳動物の神経組織におけるその発現の参照レベルと比較する工程をさらに含む、請求項7に記載の方法。
- 前記遺伝子の発現レベルは、マイクロアレイ分析、インサイチュハイブリダイゼーション組織化学、定量的PCR、SAGE分析、ノーザンブロット分析、およびドットブロット分析から成るグループから選ばれる方法によって検出される、請求項7に記載の方法。
- 前記遺伝子は、グルタメート輸送因子である、請求項7に記載の方法。
- 前記遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれることを特徴とする請求項10に記載の方法。
- 前記神経組織は海馬組織である、請求項1、2または7に記載の方法。
- 認知機能を増進するのに有用な化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)試験化合物を哺乳動物に投与する工程;
(b)前記試験化合物の投与後、前記哺乳動物の神経組織においてグルタメート輸送体遺伝子の発現レベルを定量する工程;
(c)前記遺伝子の前記発現レベルを、前記試験化合物が投与されていない哺乳動物の神経組織におけるその発現の参照レベルと比較する工程;および、
(d)前記遺伝子の発現レベルが、その発現の対応する参照レベルと異なるか否かを判定する工程であって、前記相違は、試験化合物が、認知機能増進のための候補治療剤であることを示すものとする工程、
を含む方法。 - 哺乳動物において認知機能を増進するのに有用な化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)試験化合物を、図4に挙げられる遺伝子を発現する細胞と接触させる工程;および、
(b)前記遺伝子の発現レベルが、前記細胞を前記試験化合物と接触させたことによって変化するか否かを判定する工程であって、前記変化はもしあれば、前記試験化合物は、認知機能を、それが必要な哺乳動物において増進する能力を有することを示すものとする工程、
を含む方法。 - 前記細胞は神経組織由来のものである、請求項14に記載の方法。
- 前記細胞は不死化細胞である、請求項15に記載の方法。
- 前記細胞は、神経細胞系統、グリア細胞系統、または、アストロサイト細胞系統である、請求項16に記載の方法。
- 前記遺伝子はグルタメート輸送因子である、請求項14に記載の方法。
- 前記遺伝子の発現レベルが上昇している、請求項1、2、7、13、または14に記載の方法。
- 前記遺伝子の発現レベルが低下している、請求項1、2、7、13、または14に記載の方法。
- 前記試験化合物は低分子である、請求項7、13、または14に記載の方法。
- 前記試験化合物は、
であり、前式において、各場合において、
LはOまたはSであり;
RはH、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、アラルキル、−OCH2CO2Hであり;
R1は−(CH2)n−C(O)Xであり、
式中、
XはOH、NR2、SH,O−アルカリ金属、または、−OC(CH3)OC(O)OCH(CH3)2であり;および、
nは、0以上6以下の整数であり;
R2はH、C1−10アルキル、C2−8アルケニル、または−(CH2)a−W−R3であり;
式中、
R3はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、−C(O)NR2、
アリール、アラルキル、またはAであり;
WはO、S、またはNR4であり;および、
aは、1以上6以下の整数であり;
式中、
R4はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、アリール、アラルキル、あるいは、R3とR4は一緒になって、未置換の、または置換されたヘテロアルキルまたはヘテロアリール環を形成してもよく、
−−線は、単結合または二重結合を示し、
R5はR1、H、SO3H、アリール、C1−10アルキル、アラルキルであり;あるいは、R5は、−−線が二重結合である場合=CHCH2CO2Hおよび=NRから成るグループから選ばれ、
mは0か1であり、および、
Aはアリールか、式Iaのヘテロアリールであり、
式中、各場合において、独立して
JはO、S、NR6、またはCR6であり;および、
yは1か2であり;
ここに、R6は電子対、H、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、または、−NR2であり;
あるいはAは、式IbまたはIcのヘテロシクロアルキルであり
式中、各場合において、独立して
JはO、S、またはNRであり;および、
XはOまたはH2である、
請求項21に記載の方法。 - 哺乳動物における認知機能の維持において神経組織で差示的に発現される遺伝子をコードする複数のcDNA配列を含むライブラリー。
- セフトリアキソンによる哺乳動物の治療において神経組織で差示的に発現される遺伝子をコードする複数のcDNA配列を含むライブラリー。
- バルプロ酸による哺乳動物の治療において神経組織で差示的に発現される遺伝子をコードする複数のcDNA配列を含むライブラリー。
- 前記複数のcDNA配列は、グルタメート輸送体遺伝子由来の配列を含む、請求項24、25、または26に記載のライブラリー。
- 前記グルタメート輸送体遺伝子は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、およびEAAT5から成るグループから選ばれることを特徴とする請求項27に記載のライブラリー。
- 請求項27に記載のライブラリーであって、前記複数のcDNA配列は、その中に存在する全ての配列の少なくとも20%を含む、ライブラリー。
- 請求項27に記載のライブラリーであって、前記複数のcDNA配列は、その中に存在する全ての配列の少なくとも50%を含む、ライブラリー。
- 請求項27に記載のライブラリーであって、前記複数のcDNA配列は、その中に存在する全ての配列の少なくとも80%を含む、ライブラリー。
- 個別にアドレスを付された位置において、請求項24、25、または26のライブラリーのメンバーに相当するcDNA配列を付着させた固相支持体を含むマイクロアレイチップ。
- 図4に挙げた遺伝子の神経組織発現を刺激することが可能な組成物の、治療における使用。
- 前記遺伝子はグルタメート輸送因子である、請求項33に記載の使用。
- 前記グルタメート輸送体は、EAAT1、EAAT2、EAAT3、EAAT4、またはEAAT5であることを特徴とする請求項34に記載の使用。
- 前記化合物は低分子である、請求項33に記載の使用。
- 治療有効量の式:
の、治療における使用であって、
ここで、各場合において、個々に
LはOまたはSであり;
RはH、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、アラルキル、−OCH2CO2Hであり;
R1は−(CH2)n−C(O)Xであり、
ここに、
XはOH、NR2、SH,O−アルカリ金属、または、−OC(CH3)OC(O)OCH(CH3)2であり;および、
nは、0以上6以下の整数であり;
R2はH、C1−10アルキル、C2−8アルケニル、または−(CH2)a−W−R3であり;
ここに、
R3はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、−C(O)NR2、アリール、アラルキル、またはAであり;
WはO、S、またはNR4であり;および、
aは、1以上6以下の整数であり;
ここに、
R4はH、C1−10アルキル、−C(O)C1−10アルキル、アリール、アラルキル、あるいは、R3とR4は一緒になって、未置換の、または置換されたヘテロアルキル環またはヘテロアリール環を形成してもよく、
−−線は、単結合または二重結合を示し、
R5はR1、H、SO3H、アリール、C1−10アルキル、アラルキルであり;あるいは、R5は、−−線が二重結合である場合=CHCH2CO2Hおよび=NRから成るグループから選ばれ、
mは0か1であり、および、
Aは式Iaのアリールまたはヘテロアリールであり、
式中、各場合において、独立して
JはO、S、NR6、またはCR6であり;および、
yは1か2であり;
ここに、R6は電子対、H、C1−10アルキル、C1−10アルコキシ、アリール、または、−NR2であり;
あるいはAは、式IbまたはIcのヘテロシクロアルキルであり
式中、各場合において、独立して
JはO、S、またはNRであり;および、
XはOまたはH2である、
使用。 - 請求項7、13、または14の方法に従って特定された、セフトリアキソンまたはバルプロ酸以外の組成物の、治療における使用。
- 哺乳動物において認知機能を維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、前記哺乳動物においてグルタメート輸送体遺伝子の神経組織発現を刺激することを特徴とする方法。
- 哺乳動物において認知機能障害を処置するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、前記哺乳動物においてグルタメート輸送体遺伝子の神経組織発現を刺激することを特徴とする方法。
- 哺乳動物において認知機能を維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、請求項33の組成物を含むことを特徴とする方法。
- 認知機能を、それが必要な哺乳動物において維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は請求項37の組成物を含むことを特徴とする方法。
- 認知機能を、それが必要な哺乳動物において維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は請求項38の組成物を含むことを特徴とする方法。
- 認知機能を、それが必要な哺乳動物において維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は請求項39の組成物を前記哺乳動物に対して含むことを特徴とする方法。
- 前記哺乳動物は、抗生物質治療が適応的である感染症症状を持たないことを特徴とする請求項43に記載の方法。
- 請求項33の組成物を含み、認知機能を、それが必要な哺乳動物において増進するための医薬品の製造法であって、前記認知機能は、空間記憶獲得、長期空間記憶、および空間記憶想起から成るグループから選ばれることを特徴とする方法。
- 高齢哺乳動物において認知機能を維持するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、セフトリアキソン、あるいは、その類縁体または誘導体を含むことを特徴とする方法。
- 哺乳動物において認知機能障害を処置するための医薬品の製造法であって、前記医薬品は、セフトリアキソン、あるいは、その類縁体または誘導体を含むことを特徴とする方法。
- 前記認知機能障害は、軽度認知障害、加齢性認知衰退、記憶喪失、老衰、および、痴呆から成るグループから選ばれる状態である、請求項41または49に記載の方法。
- 前記認知機能障害はアルツハイマー病である、請求項41または49に記載の方法。
- 前記哺乳動物はヒトである、請求項41または49に記載の方法。
- 前記哺乳動物はヒトである、請求項40、42、43、44、45、46、47、または47に記載の方法。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US42822902P | 2002-11-22 | 2002-11-22 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004555830A Division JP2006510357A (ja) | 2002-11-22 | 2003-11-24 | 認識障害の処置のための標的 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007117092A true JP2007117092A (ja) | 2007-05-17 |
Family
ID=32393364
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004555830A Withdrawn JP2006510357A (ja) | 2002-11-22 | 2003-11-24 | 認識障害の処置のための標的 |
JP2006317776A Withdrawn JP2007117092A (ja) | 2002-11-22 | 2006-11-24 | 認識障害の処置のための標的 |
JP2010106823A Withdrawn JP2010227105A (ja) | 2002-11-22 | 2010-05-06 | 認識障害の処置のための標的 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004555830A Withdrawn JP2006510357A (ja) | 2002-11-22 | 2003-11-24 | 認識障害の処置のための標的 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010106823A Withdrawn JP2010227105A (ja) | 2002-11-22 | 2010-05-06 | 認識障害の処置のための標的 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20040191803A1 (ja) |
EP (3) | EP1897959A1 (ja) |
JP (3) | JP2006510357A (ja) |
KR (2) | KR20050083971A (ja) |
CN (3) | CN101249091A (ja) |
AT (1) | ATE540129T1 (ja) |
AU (2) | AU2003302472B2 (ja) |
BR (1) | BR0315689A (ja) |
CA (2) | CA2589836A1 (ja) |
IL (1) | IL188249A0 (ja) |
MX (1) | MXPA05005398A (ja) |
NZ (1) | NZ540288A (ja) |
WO (1) | WO2004048551A2 (ja) |
ZA (2) | ZA200707021B (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1327136C (zh) * | 2003-01-31 | 2007-07-18 | 日立空调系统株式会社 | 螺旋压缩机 |
JPWO2019130745A1 (ja) * | 2017-12-27 | 2020-12-24 | サントリーホールディングス株式会社 | 被験物質の生体への作用を予測するために用いられるライブラリの作成方法及びゼブラフィッシュの行動パラメータ等の変化から被験物質の生体への作用を評価する方法 |
Families Citing this family (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060014801A1 (en) * | 2002-11-22 | 2006-01-19 | The Johns Hopkins University | Prevention and treatment of cognitive impairment using (R)-(-)-5-methyl-1-nicotynoyl-2-pyrazoline (MNP) and analogs |
EP1611238B1 (en) * | 2003-02-26 | 2009-06-17 | The John Hopkins University | Glutamate transport modulatory compounds and methods |
WO2005041978A1 (en) * | 2003-10-21 | 2005-05-12 | Johns Hopkins University | Neuroprotection with beta-lactam compounds |
CA2506379A1 (en) * | 2004-05-05 | 2005-11-05 | Mcgill University | Interpersonal cognition method and system |
EP1916943A4 (en) * | 2005-06-14 | 2009-12-16 | Cancog Technologies Inc | SYSTEM AND METHOD FOR EVALUATING COGNITIVE FUNCTION AND MEASURING TREATMENT EFFICIENCY |
US7844609B2 (en) | 2007-03-16 | 2010-11-30 | Expanse Networks, Inc. | Attribute combination discovery |
US20090043752A1 (en) | 2007-08-08 | 2009-02-12 | Expanse Networks, Inc. | Predicting Side Effect Attributes |
US8108406B2 (en) | 2008-12-30 | 2012-01-31 | Expanse Networks, Inc. | Pangenetic web user behavior prediction system |
EP3276526A1 (en) | 2008-12-31 | 2018-01-31 | 23Andme, Inc. | Finding relatives in a database |
CA2789014C (en) | 2010-02-09 | 2019-01-15 | Michela Gallagher | Methods and compositions for improving cognitive function |
CN103313712B (zh) | 2010-11-15 | 2016-10-26 | 艾吉因生物股份有限公司 | 用于治疗认知障碍的哒嗪衍生物、组合物和方法 |
WO2013036783A2 (en) | 2011-09-09 | 2013-03-14 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating intrapulmonary infections |
CN102605051B (zh) * | 2012-02-01 | 2013-12-25 | 中国人民解放军第四军医大学 | 一种EAAT2基因cRNA原位杂交的探针及其设计方法 |
JP6440625B2 (ja) | 2012-11-14 | 2018-12-19 | ザ・ジョンズ・ホプキンス・ユニバーシティー | 精神分裂病を処置するための方法および組成物 |
US10806717B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-10-20 | The Johns Hopkins University | Methods and compositions for improving cognitive function |
US20140274991A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | Ceftolozane pharmaceutical compositions |
MX2020004205A (es) | 2013-03-15 | 2021-11-16 | Merck Sharp & Dohme Llc | Composiciones antibioticas de ceftolozano. |
CA2904767C (en) | 2013-03-15 | 2022-06-21 | Agenebio, Inc. | Methods and compositions for improving cognitive function |
US9872906B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-01-23 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Ceftolozane antibiotic compositions |
EP3043797B1 (en) | 2013-09-09 | 2020-04-08 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Treating infections with ceftolozane/tazobactam in subjects having impaired renal function |
US20150094293A1 (en) | 2013-09-27 | 2015-04-02 | Calixa Therapeutics, Inc. | Solid forms of ceftolozane |
JP6883988B2 (ja) | 2013-12-20 | 2021-06-09 | エージンバイオ, インコーポレイテッド | ベンゾジアゼピン誘導体、組成物、および認知障害を処置するための方法 |
DK3297611T3 (da) | 2015-05-22 | 2019-09-02 | Agenebio Inc | Farmaceutiske sammensætninger af levetiracetam med langvarig frigivelse |
CN107810002B (zh) | 2015-05-22 | 2021-01-05 | 艾吉因生物股份有限公司 | 左乙拉西坦的延时释放药物组合物 |
IL256354B (en) | 2015-06-19 | 2022-09-01 | Agenebio Inc | History of benzodiazepines, preparations and their use for the treatment of cognitive impairment |
JP6905988B2 (ja) * | 2016-02-02 | 2021-07-21 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | Eaat3阻害剤としてのピラゾール−ピリジン誘導体 |
CN106503487B (zh) * | 2016-11-01 | 2019-03-01 | 北京理工大学 | 一种统计分析蛋白质肽键的顺式和反式结构的方法 |
US20180170941A1 (en) | 2016-12-19 | 2018-06-21 | Agenebio, Inc. | Benzodiazepine derivatives, compositions, and methods for treating cognitive impairment |
US11505555B2 (en) | 2016-12-19 | 2022-11-22 | Agenebio, Inc. | Benzodiazepine derivatives, compositions, and methods for treating cognitive impairment |
TWI644673B (zh) * | 2017-07-27 | 2018-12-21 | 百朗克股份有限公司 | 頭孢曲松的用途 |
EA202190076A1 (ru) | 2018-06-19 | 2021-09-22 | Эйджинбайо, Инк. | Производные бензодиазепина, композиции и способы лечения когнитивных нарушений |
CN110456831B (zh) * | 2019-08-16 | 2022-06-14 | 南开大学 | 一种基于主动视觉的小鼠接触行为追踪平台 |
WO2024039886A1 (en) | 2022-08-19 | 2024-02-22 | Agenebio, Inc. | Benzazepine derivatives, compositions, and methods for treating cognitive impairment |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04230219A (ja) * | 1990-06-20 | 1992-08-19 | Hoechst Ag | セファロスポリンおよびキサンチンの誘導体を含有する配合製剤ならびにそれらの使用 |
JPH07258254A (ja) * | 1994-03-11 | 1995-10-09 | F Hoffmann La Roche Ag | ベータラクタム類 |
WO2001012184A1 (en) * | 1999-08-16 | 2001-02-22 | Revaax Pharmaceuticals, Llc | Neurotherapeutic composition and method |
WO2002008384A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Regents Of The University Of California | Novel glutamate transporters |
WO2002008449A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Sir Mortimer B. Davis - Jewish General Hospital | Ho-1 suppressor as a diagnostic and prognostic test for dementing diseases |
JP2002541242A (ja) * | 1999-04-13 | 2002-12-03 | ニコックス エス エイ | 医薬化合物 |
Family Cites Families (60)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1453049A (en) * | 1973-08-21 | 1976-10-20 | Glaxo Lab Ltd | Cephalosporing antibiotics |
US3952094A (en) * | 1973-09-28 | 1976-04-20 | Beecham Group Limited | Antibacterial compositions |
CA1085392A (en) * | 1976-03-25 | 1980-09-09 | Masayuki Narisada | Arylmalonamido-1-oxadethiacephalosporins |
US4103085A (en) * | 1977-02-24 | 1978-07-25 | Bristol-Myers Company | 7-(Syn-α-alkoxy-iminofurylacetamido-3-(2-carboxyalkyl-2,3-dihydro-s-triazolo[4,3-b]pyridazin-3-on-6-ylthiomethyl)-3-cephem-4-carboxylic acids |
US4654370A (en) * | 1979-03-12 | 1987-03-31 | Abbott Laboratories | Glyceryl valproates |
FI63596C (fi) * | 1981-10-16 | 1983-07-11 | Orion Yhtymae Oy | Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser |
IL67623A (en) | 1983-01-05 | 1984-09-30 | Teva Pharma | 1'-ethoxycarbonyloxyethyl ester of valproic acid,its preparation and pharmaceutical compositions containing it |
IL72381A (en) | 1983-07-20 | 1988-03-31 | Sanofi Sa | Pharmaceutical composition based on valproic acid |
US4558070A (en) | 1983-10-26 | 1985-12-10 | Abbott Laboratories | Acid salts of valproic acid |
US4913906B1 (en) | 1985-02-28 | 2000-06-06 | Yissum Res Dev Co | Controlled release dosage form of valproic acid |
US4683202A (en) * | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4751177A (en) * | 1985-06-13 | 1988-06-14 | Amgen | Methods and kits for performing nucleic acid hybridization assays |
US4868103A (en) * | 1986-02-19 | 1989-09-19 | Enzo Biochem, Inc. | Analyte detection by means of energy transfer |
IT1190133B (it) * | 1986-06-19 | 1988-02-10 | Chiesi Farma Spa | Derivati di acido valproico e di acido (e)-2-valproenoico,procedimento per la loro preparazione e relative composizioni farmaceutiche |
JPS635091A (ja) * | 1986-06-26 | 1988-01-11 | Senjiyu Seiyaku Kk | 着色防止方法 |
DE3709230A1 (de) * | 1987-03-20 | 1988-10-06 | Desitin Arzneimittel Gmbh | Neues calciumsalz der valproinsaeure |
EP0300111B1 (en) | 1987-07-22 | 1991-10-16 | Farvalsa AG | A moisture stable solid valproic acid formulation and a method of preparing the same |
US5080891A (en) * | 1987-08-03 | 1992-01-14 | Ddi Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols |
FR2643556B1 (fr) | 1989-02-27 | 1993-03-05 | Sanofi Sa | Composition pharmaceutique a liberation prolongee d'acide valproique |
US5424186A (en) * | 1989-06-07 | 1995-06-13 | Affymax Technologies N.V. | Very large scale immobilized polymer synthesis |
US5143854A (en) * | 1989-06-07 | 1992-09-01 | Affymax Technologies N.V. | Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof |
US5252743A (en) * | 1989-11-13 | 1993-10-12 | Affymax Technologies N.V. | Spatially-addressable immobilization of anti-ligands on surfaces |
KR940000112B1 (ko) * | 1990-07-05 | 1994-01-05 | 주식회사 대웅제약 | 신규의 3-치환 세펨화합물 및 그의 제조방법 |
US5968502A (en) * | 1991-11-05 | 1999-10-19 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Protein production and protein delivery |
US5641670A (en) * | 1991-11-05 | 1997-06-24 | Transkaryotic Therapies, Inc. | Protein production and protein delivery |
US6051380A (en) * | 1993-11-01 | 2000-04-18 | Nanogen, Inc. | Methods and procedures for molecular biological analysis and diagnostics |
US5384261A (en) * | 1991-11-22 | 1995-01-24 | Affymax Technologies N.V. | Very large scale immobilized polymer synthesis using mechanically directed flow paths |
US5412087A (en) * | 1992-04-24 | 1995-05-02 | Affymax Technologies N.V. | Spatially-addressable immobilization of oligonucleotides and other biological polymers on surfaces |
DE69233087T2 (de) * | 1991-11-22 | 2003-12-24 | Affymetrix Inc N D Ges D Staat | Verfahren zur Herstellung von Polymerarrays |
EP0552108B1 (en) * | 1992-01-17 | 1999-11-10 | Lakowicz, Joseph R. | Energy transfer phase-modulation fluoro-immunoassay |
US5440023A (en) * | 1992-09-18 | 1995-08-08 | Beckman Instruments, Inc. | Method for making valproic acid derivatives |
BR9307550A (pt) * | 1992-12-02 | 1999-05-25 | Shell Int Research | Composto fungicida processo para a preparação de um composto fungicida composição fungicida processo de combate aos fungos em um local e uso |
DK0632008T3 (da) * | 1993-06-01 | 1998-09-23 | Ono Pharmaceutical Co | Pentansyrederivater |
WO1995002698A1 (en) * | 1993-07-12 | 1995-01-26 | Life Technologies, Inc. | Composition and methods for transfecting eukaryotic cells |
US6203897B1 (en) * | 1993-09-24 | 2001-03-20 | The Ishizuka Research Institute, Ltd. | Sintered composites containing superabrasive particles |
GB9326248D0 (en) * | 1993-12-23 | 1994-02-23 | Smithkline Beecham Plc | Pharmaceutical formulations |
US5631734A (en) * | 1994-02-10 | 1997-05-20 | Affymetrix, Inc. | Method and apparatus for detection of fluorescently labeled materials |
CA2148140C (en) * | 1994-04-29 | 2010-08-10 | John W. Sutherland | Homogeneous method for assay of double-stranded nucleic acids using fluorescent dyes and kit useful therein |
US5571639A (en) * | 1994-05-24 | 1996-11-05 | Affymax Technologies N.V. | Computer-aided engineering system for design of sequence arrays and lithographic masks |
US5599695A (en) * | 1995-02-27 | 1997-02-04 | Affymetrix, Inc. | Printing molecular library arrays using deprotection agents solely in the vapor phase |
US5624711A (en) * | 1995-04-27 | 1997-04-29 | Affymax Technologies, N.V. | Derivatization of solid supports and methods for oligomer synthesis |
US6051429A (en) * | 1995-06-07 | 2000-04-18 | Life Technologies, Inc. | Peptide-enhanced cationic lipid transfections |
ES2231819T3 (es) * | 1995-06-07 | 2005-05-16 | Inex Pharmaceuticals Corp | Particulas de lipido-acido nucleico preparadas a traves de un intermedio complejo de lipido-acido nucleico hidrofobo y uso para transferir genes. |
US5744335A (en) * | 1995-09-19 | 1998-04-28 | Mirus Corporation | Process of transfecting a cell with a polynucleotide mixed with an amphipathic compound and a DNA-binding protein |
US5705308A (en) * | 1996-09-30 | 1998-01-06 | Eastman Kodak Company | Infrared-sensitive, negative-working diazonaphthoquinone imaging composition and element |
IT1285801B1 (it) | 1996-10-10 | 1998-06-24 | Sigma Tau Ind Farmaceuti | Procedimento migliorato per la preparazione dell'acido valproico |
EP0946286B1 (en) * | 1996-11-14 | 2003-03-19 | Affymetrix, Inc. | Chemical amplification for the synthesis of patterned arrays |
US6683075B1 (en) * | 1996-12-23 | 2004-01-27 | Athena Neurosciences, Inc. | Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use |
US5773746A (en) * | 1997-01-24 | 1998-06-30 | Vaden; Philip D. | Coupler for attaching a suppressor to a firearm flash hider |
WO1999027128A1 (en) * | 1997-11-25 | 1999-06-03 | Smithkline Beecham Corporation | ribH |
US6131106A (en) * | 1998-01-30 | 2000-10-10 | Sun Microsystems Inc | System and method for floating-point computation for numbers in delimited floating point representation |
US6263287B1 (en) * | 1998-11-12 | 2001-07-17 | Scios Inc. | Systems for the analysis of gene expression data |
US6489319B2 (en) * | 1999-08-16 | 2002-12-03 | Revaax Pharmaceuticals, Llc | Neurotherapeutic use of carboxypeptidase inhibitors |
US6808893B1 (en) * | 1999-10-23 | 2004-10-26 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Glutamate transporter associated proteins and methods of use thereof |
JP2001261675A (ja) | 2000-03-21 | 2001-09-26 | Mitsui Chemicals Inc | ピラゾリン誘導体またはテトラヒドロピリダジン誘導体を含有する医薬 |
WO2002010768A2 (en) * | 2000-07-31 | 2002-02-07 | The Regents Of The University Of California | Model for alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases |
US6610326B2 (en) | 2001-02-16 | 2003-08-26 | Andrx Corporation | Divalproex sodium tablets |
US6702989B2 (en) * | 2001-12-10 | 2004-03-09 | The Regents Of The University Of Michigan | Pulsed carrier gas flow modulation for selectivity enhancements with gas chromatography using series-coupled column ensembles |
DE60325695D1 (de) | 2002-02-15 | 2009-02-26 | Univ Johns Hopkins | Der eaat2-promotor und dessen verwendung |
EP1611238B1 (en) | 2003-02-26 | 2009-06-17 | The John Hopkins University | Glutamate transport modulatory compounds and methods |
-
2003
- 2003-11-24 EP EP07121249A patent/EP1897959A1/en not_active Withdrawn
- 2003-11-24 NZ NZ540288A patent/NZ540288A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-11-24 CN CNA2008100825352A patent/CN101249091A/zh active Pending
- 2003-11-24 EP EP03808425A patent/EP1567674A4/en not_active Withdrawn
- 2003-11-24 CA CA002589836A patent/CA2589836A1/en not_active Abandoned
- 2003-11-24 MX MXPA05005398A patent/MXPA05005398A/es unknown
- 2003-11-24 CN CNA2008100825348A patent/CN101249090A/zh active Pending
- 2003-11-24 AT AT07121248T patent/ATE540129T1/de active
- 2003-11-24 KR KR1020057009285A patent/KR20050083971A/ko not_active Application Discontinuation
- 2003-11-24 CN CNA200380109146XA patent/CN1829804A/zh active Pending
- 2003-11-24 KR KR1020077015425A patent/KR20070086945A/ko not_active Application Discontinuation
- 2003-11-24 BR BR0315689-3A patent/BR0315689A/pt not_active IP Right Cessation
- 2003-11-24 WO PCT/US2003/038191 patent/WO2004048551A2/en active Application Filing
- 2003-11-24 JP JP2004555830A patent/JP2006510357A/ja not_active Withdrawn
- 2003-11-24 EP EP07121248A patent/EP1908850B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-11-24 ZA ZA200707021A patent/ZA200707021B/xx unknown
- 2003-11-24 AU AU2003302472A patent/AU2003302472B2/en not_active Ceased
- 2003-11-24 CA CA002506194A patent/CA2506194A1/en not_active Abandoned
- 2003-11-24 US US10/722,357 patent/US20040191803A1/en not_active Abandoned
-
2005
- 2005-05-16 ZA ZA200503935A patent/ZA200503935B/en unknown
-
2006
- 2006-11-24 JP JP2006317776A patent/JP2007117092A/ja not_active Withdrawn
-
2007
- 2007-12-19 IL IL188249A patent/IL188249A0/en unknown
-
2008
- 2008-03-03 US US12/074,550 patent/US20080177061A1/en not_active Abandoned
- 2008-11-24 AU AU2008249177A patent/AU2008249177A1/en not_active Abandoned
-
2010
- 2010-05-06 JP JP2010106823A patent/JP2010227105A/ja not_active Withdrawn
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH04230219A (ja) * | 1990-06-20 | 1992-08-19 | Hoechst Ag | セファロスポリンおよびキサンチンの誘導体を含有する配合製剤ならびにそれらの使用 |
JPH07258254A (ja) * | 1994-03-11 | 1995-10-09 | F Hoffmann La Roche Ag | ベータラクタム類 |
JP2002541242A (ja) * | 1999-04-13 | 2002-12-03 | ニコックス エス エイ | 医薬化合物 |
WO2001012184A1 (en) * | 1999-08-16 | 2001-02-22 | Revaax Pharmaceuticals, Llc | Neurotherapeutic composition and method |
WO2002008384A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Regents Of The University Of California | Novel glutamate transporters |
WO2002008449A2 (en) * | 2000-07-25 | 2002-01-31 | The Sir Mortimer B. Davis - Jewish General Hospital | Ho-1 suppressor as a diagnostic and prognostic test for dementing diseases |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1327136C (zh) * | 2003-01-31 | 2007-07-18 | 日立空调系统株式会社 | 螺旋压缩机 |
JPWO2019130745A1 (ja) * | 2017-12-27 | 2020-12-24 | サントリーホールディングス株式会社 | 被験物質の生体への作用を予測するために用いられるライブラリの作成方法及びゼブラフィッシュの行動パラメータ等の変化から被験物質の生体への作用を評価する方法 |
JP7103605B2 (ja) | 2017-12-27 | 2022-07-20 | サントリーホールディングス株式会社 | 被験物質の生体への作用を予測するために用いられるライブラリの作成方法及びゼブラフィッシュの行動パラメータ等の変化から被験物質の生体への作用を評価する方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1908850B1 (en) | 2012-01-04 |
EP1897959A1 (en) | 2008-03-12 |
AU2008249177A1 (en) | 2008-12-18 |
JP2010227105A (ja) | 2010-10-14 |
EP1908850A1 (en) | 2008-04-09 |
CA2506194A1 (en) | 2004-06-10 |
EP1567674A2 (en) | 2005-08-31 |
EP1567674A4 (en) | 2007-09-26 |
AU2003302472A1 (en) | 2004-06-18 |
ATE540129T1 (de) | 2012-01-15 |
CN101249090A (zh) | 2008-08-27 |
KR20070086945A (ko) | 2007-08-27 |
CN101249091A (zh) | 2008-08-27 |
ZA200707021B (en) | 2008-06-25 |
IL188249A0 (en) | 2008-03-20 |
WO2004048551A2 (en) | 2004-06-10 |
KR20050083971A (ko) | 2005-08-26 |
US20080177061A1 (en) | 2008-07-24 |
JP2006510357A (ja) | 2006-03-30 |
NZ540288A (en) | 2009-06-26 |
ZA200503935B (en) | 2008-05-28 |
WO2004048551A3 (en) | 2004-08-12 |
MXPA05005398A (es) | 2006-03-09 |
BR0315689A (pt) | 2005-10-18 |
CA2589836A1 (en) | 2004-06-10 |
US20040191803A1 (en) | 2004-09-30 |
AU2003302472B2 (en) | 2010-10-21 |
CN1829804A (zh) | 2006-09-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2007117092A (ja) | 認識障害の処置のための標的 | |
JP2006510357A5 (ja) | ||
US9937141B2 (en) | Carcinoma diagnosis and treatment, based on ODC1 genotype | |
EP1235933A2 (en) | Mammalian toxicological response markers | |
CN101443009A (zh) | 针对甲状腺癌的抗肿瘤剂 | |
Martyniuk et al. | Effects of acute dieldrin exposure on neurotransmitters and global gene transcription in largemouth bass (Micropterus salmoides) hypothalamus | |
SA07280713B1 (ar) | استخدام جين البروتين المصلي النشواني a في تشخيص ومعالجة الزرق والتعرف على عوامل مضادة للزرق | |
US20150306108A1 (en) | Compositions of aldh1a1 inhibitors and methods of use in treating cancer | |
US20040248286A1 (en) | Nucleic acid molecules that are differentially regulated in a bipolar disorder and uses thereof | |
Choi et al. | Systemic 5-hydroxy-L-tryptophan down-regulates the arcuate CART mRNA level in rats | |
MXPA04003382A (es) | Agentes terapeuticos y diagnostico para transtornos de la eritropoyesis. | |
US20040235019A1 (en) | Diagnostics and therapeutics for the gene expression signature of PPAR-gamma receptor ligand | |
US20090233942A1 (en) | Genetic markers associated with response to antidepressants | |
US20020098169A1 (en) | Novel sequences and their use | |
WO2001034633A2 (en) | Methods for treatment of human huntington's disease and methods of screening for active agents | |
US20170037471A1 (en) | Methods for diagnosing & treating copper-dependent diseases | |
US20140142150A1 (en) | Treating neuropsychiatric disorders | |
WO2001094410A1 (en) | Insulin regulated substance (irs-2) induced by pioglitazone, assay and use thereof | |
WO2015100300A2 (en) | Methods for diagnosing and treating copper-dependent diseases |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091106 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100205 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100210 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100506 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110401 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110630 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110705 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110801 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110804 |
|
A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20110905 |