JP2006516278A - 腸内細菌叢の組成の改善のためのスフィンゴ脂質 - Google Patents
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Abstract
Description
図2は、実施例4において記載されたように、フィトスフィンゴシンの1重量%を含んだブタ基本飼料をブタに給餌した後、時間の関数として小腸の末端で集められたろう管のあるブタ(fistulated pig)の腸内容物におけるスフィンゴ脂質濃度を示す。
図3は、実施例5において記載されたように、50μg/mlのフィトスフィンゴシンの存在下で、TIM−2大腸モデルにおける細菌混合物のインキュベーション後の種々の嫌気性細菌の細菌数を示す。
実施例
フィトスフィンゴシン、スフィンゴミエリン、スフィンガニンアセテート、スフィンゴシン、グルコシルセラミドIII及びリソスフィンゴミエリンの抗菌活性が、寒天平板上で、液体培養物中で、小腸モデルTIM-1において及び大腸モデルTIM-2において試験された(欧州公開特許公報EP 0 642 382号及び米国特許明細書第5,525,305号)。
スフィンゴ脂質は、そこで活性であることができる小腸及び大腸に、食品とともに輸送されるべき必要があるために、胃及び小腸モデルTIM-1におけるフィトスフィンゴシン及びスフィンガニンの輸送が試験された。また、ろう管のあるブタ(fistulated pig)がフィトスフィンゴシン(1重量%)を含む飼料を給餌された後、該動物におけるフィトスフィンゴシンの輸送が試験された。ろう管のあるブタでは、小腸の終端で消化された飼料が集められることができるように、小腸は大腸から切り離される。
TIM-1における抗菌活性
フィトスフィゴシン及びスフィンガニンは、平板上で及び液体培養中で強い抗菌活性を有する故に、該実験は、Lactobacillus acidophilus(Rogosa寒天平板上で)及びClostridium difficile(Clostridium difficile寒天上で)の存在下で、20μg/mlのスフィンゴ脂質を使用して、小腸モデルTIM-1中で繰り返された。それぞれの寒天平板上に管腔(lumen)サンプルを播いた後、抗菌活性を示さないことが明らかになった。
食品からのスフィンゴ脂質が、吸収されることなしに又は小腸内において化学的に若しくは酵素的に変性されることなしに、小腸を通じて輸送されるかどうかを調べるために、フィトスフィンゴシン及びスフィンガニンが標準のTim-1食品中に混合され、そしてTIM-1処理に暴露された。各スフィンゴ脂質のうち、食品における100グラムの食品当たり5 mg(0.005重量%)が試験された。TIM-1胃内のTIM-1消化工程を開始した後、固定された時間で、100グラムの管腔サンプルが得られた。また、透析物サンプルが、半透過性のTIM-1膜を通じて輸送された物質から得られた。該透析物サンプルは、1428〜1122グラムの間で色々であった。表2は、それらがLC-MSによって決定された場合の種々のサンプルにおけるスフィンゴ脂質濃度を示す。サンプルの次に、分単位での暴露時間が与えられる。
食品からのスフィンゴ脂質が実際に大腸内に到着し且つ時期早尚に吸着されない又は代謝されないかどうかをインビボ(in vivo)システムにおいて調べるために、フィトスフィゴシン(1重量%)が添加されたブタ基礎飼料が、ろう管のあるブタに給餌された。
Clostridium difficileは、ヒト及び動物における大腸内でしばしば見つけられ、そして下痢の原因となる。標準のTIM-2食品に、下記の細菌の混合物が添加された:Bifidobacterium(細菌数(対数) 8.8)、Bacteroides(細菌数(対数) 9.7)、スルファイト低減clostridia(細菌数(対数) 6.6)、Enterococcus(細菌数(対数) 8. 7)、Lactobacillus(細菌数(対数) 8.5)及びEnterobacteriaceae (対数細菌数 6.6) (図3の開始値を参照)。
上記された試験の結果は、寒天平板上で、フィトスフィンゴシン、スフィンゴシン、スフィンガニン、スフィンゴシン及びリソスフィンゴミエリンがグラム陽性細菌に対して強い抗菌活性を有することを示す。フィトスフィンゴシン及びスフィンガニンはまた、液体培養において強い抗菌活性を有する。TIM-2大腸モデルでは、フィトスフィンゴシンは、下痢の原因となるClostridium difficileに対して、選択的な抗菌活性を有する。胃/小腸モデルTIM-1では、スフィンガニン及びフィトスフィンゴシンの両方が、そこで抗菌的に活性でありうるような十分な程度に、大腸に輸送される。ブタでもまた、飼料からの十分なフィトスフィンゴシンが、大腸において望ましい活性を有することができるように小腸の末端で分泌された。
Claims (12)
- 鳥又は哺乳動物の腸内細菌叢の組成を改善するための方法であって、フィトスフィンゴシン、スフィンゴシン、リソスフィンゴミエリン及びスフィンガニン、又はそれらの前駆体、誘導体若しくは適切な塩からなる群から選択される1以上のスフィンゴ脂質が過剰である食品を、前記鳥又は前記哺乳動物に投与することを含む方法。
- 前記1以上のスフィンゴ脂質が、0.05〜50重量%の量で前記食品中に存在する、請求項1に記載の方法。
- 前記スフィンゴ脂質が、1〜10重量%の量で前記食品中に存在する、請求項1に記載の方法。
- 鳥又は哺乳動物の腸内細菌叢の組成を改善するための方法であって、フィトスフィンゴシン、スフィンゴシン、リソスフィンゴミエリン及びスフィンガニン、又はそれらの前駆体、誘導体若しくは適切な塩からなる群から選択されるスフィンゴ脂質、及び1以上の賦形剤を含む医薬調製物を、前記鳥又は前記哺乳動物に投与することを含む方法。
- 前記スフィンゴ脂質がフィトスフィンゴシンである、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- フィトスフィンゴシン、スフィンゴシン、リソスフィンゴミエリン及びスフィンガニン、又はそれらの前駆体、誘導体若しくは適切な塩からなる群から選択される1以上のスフィンゴ脂質が過剰である食品。
- 前記1以上のスフィンゴ脂質が、0.05〜50重量%の量で存在する、請求項6に記載の食品。
- 前記スフィンゴ脂質がフィトスフィンゴシンである、請求項6又は7に記載の食品。
- 請求項6〜8のいずれか一項に記載の食品を含む動物飼料。
- 腸内細菌叢の組成の改善のための医薬品の調製のために、フィトスフィンゴシン、スフィンゴシン、リソスフィンゴミエリン及びスフィンガニンからなる群から選択されるスフィンゴ脂質を使用する方法。
- 前記スフィンゴ脂質がフィトスフィンゴシンである、請求項10に記載の方法。
- 前記スフィンゴ脂質又はそれらの誘導体若しくは適切な塩を、0.05〜50重量%の量で食品中に取り込むことを含む、請求項6〜8のいずれか一項に記載の食品の調製のための方法。
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