JP4793533B2 - ポリデキストロースでの免疫系の刺激 - Google Patents

Description

発明の分野
本発明は、哺乳動物の胃腸管内の免疫応答を刺激するためのポリデキストロースの使用に関する。さらに、しかし限定されること無く、本発明は、ポリデキストロースを含み、そして腸管内で局所的な免疫刺激作用を有する改良された機能性食品または飼料組成物に関する。本発明の好ましい態様では、ポリデキストロースは、免疫刺激作用を増大するポリオールと組み合される。本発明のさらなる有益な観点において、ポリデキストロースは、結腸癌の危険性を増加させる因子を減じることにより哺乳動物の腸管の健康を改善するために、ポリオールと組み合せて使用される。

発明の背景
人々および動物の健康および良好状態は、胃腸管を通過および定住する微生物により肯定的にまたは否定的に影響され得る。これらの微生物は、毒素、代謝副生物、短鎖脂肪酸等の生産を通して宿主の生理条件に影響する。

腸管ルーメンは環境との大きな界面を含む。小腸の主な機能は食品から栄養を吸収することである。最大の栄養吸収を可能にするために、接触面積は大きくする必要がある。ヒトの腸全体の粘膜は２００ｍ²の面積にわたる。３０トン以上の食品および略同量の飲料が一生涯の間に腸を通過する。しかしながら、食餌配合物に加えて、粘膜表面は様々なバクテリア、ウイルス、寄生虫および菌に暴露される。単層の上皮が該ルーメンを覆っているため、それは同様に身体へ病原体を引き寄せる入口でもある。腸管の状態は多くの疾患（例えば、感染、アレルギーおよび癌）における重要な因子である。

多くの病原性のバクテリアおよびウイルスは、胃腸管、呼吸器管、または生殖器管の細胞管壁（上皮）を通過することにより、最初に体内への進入を得る。特別な種類の抗体、イムグロブリンＡ（ＩｇＡ）抗体はこれらの表面を保護する。ＩｇＡ抗体は、上皮表面の下側の組織中に存在する細胞により生産される２量体または多量体の分子である。それらは上皮細胞により粘膜分泌物中に運ばれ、そこで体内に未だ進入していない病原体を架橋または被覆して、病原体が上皮細胞に接触および付着するのを防止する。それ故、ＩｇＡ抗体は体外の病原体に働き、そして上皮表面分子を横切る体内への進入を防止することにより保護する。さらに、幾つかの食餌または他の環境化合物に結合することにより、該抗体はまた腸内での不必要な炎症反応を防止できる。体内の抗体生産細胞の８０％以上は腸内に存在する。これは、腸の健康状態におけるＩｇＡ機能の重要性並びに保護されることが必要な大きな表面の双方を反映している。

哺乳動物の大腸は、哺乳動物の健康に重要なバクテリアの相当かつ様々な集団を含む。腸内の有益な細菌叢は、その後吸収される短鎖脂肪酸を与える非消化性の炭水化物およびタンパク質のバクテリア発酵を通して、宿主のためにエネルギーを回収することができる。双方とも糖分解性である有益な、ビフィドバクテリウム属およびラクトバチルス属は、潜在的な病原性種の成長に好ましくない状態を作り出すと思われている。それ故、ビフィドバクテリアおよびラクトバチルスは様々なプロバイオテック製品中の成分であり、それは腸内の細菌の数を上昇させるために使用される。他方、非吸収性の炭水化物（オリゴ糖および多糖）を含む様々な種類の食品および飲料組成物が開発されている。これらはプレバイオテックと呼ばれ、そして有益細菌に好ましい腸内細菌バランスを安定化すると思われている。さらに食物繊維製品は、便秘を治療しそして緩下を促進するために使用されている。

常在腸管細菌と免疫系との相互作用は未だに大部分が未知である。誕生後、腸管免疫系は微生物無しでは僅かしか発達しないことが知られている。それ故、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋免疫細胞並びにＩｇＡ生産細胞の数、並びに細胞毒性活性は、微生物の居ない動物では低減するか、または殆ど存在しないことが示されている（ロットコッター等、Pediatr.
Res.、１９９１年３月、２９（３）：２３７〜４２）。

疫学的研究は、穀物または非デンプン多糖繊維の摂取が結腸癌を発達させる危険性を低減することを示している。しかし同様に、結腸発癌現象における食物繊維の役割について、議論をかもす結果が最近報告されている。該繊維は、発癌現象を増加させる因子について、非常に異なる種類の作用を有するかもしれない。全ての繊維が必ずしも、結腸癌の危険を低減する訳ではない。穀物食餌（小麦、オート麦、ライ麦）とイヌリンとの比較研究は、イヌリン食餌がプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）活性、および遠位結腸内のＰＫＣβ２タンパク質濃度を増加させることを示した。ＰＫＣβ２は結腸細胞増殖を媒介し、そしてＰＫＣβ２の過発現が結腸癌細胞系において見出されるので、ＰＫＣβ２の発現および活性は結腸発癌現象を増加させる思われる（Ａ−Ｍ．パジャリ等、British J. Nutrition、８、６３５〜６４３頁、２０００年）。同様に、様々な食餌を与えたＭｉｎマウス（多重腸管新形成癌モデル）での比較研究は、マウスにイヌリンまたは牛肉を与えたときには腫瘍防止作用を示さなかったが、ライ糠または小麦糠を与えたマウスでは、発癌の顕著な減少が検出された（Ｍ．ムタネン等、Carcinogenesis、２１巻、６号、１１６７〜１１７３頁、２０００年）。低コレステロール食餌、高コレステロール食餌、およびポリデキストロースにより補足された高コレステロール食餌での他の比較研究は、ポリデキストロースを伴う食餌が糞便ｐＨを顕著に低下させ、そしてインドールおよびｐ−クレゾールのような幾つかの発癌性物質の生産を低減したことを示した（遠藤，Ｋ．等、Bifidobacteria
Microflora、１０（１）巻、５３〜６４、１９９１年）。

ポリデキストロースは、高温および分圧でのグルコース、ソルビトールおよび適した酸触媒のランダム重合により合成された多糖である。用語“ポリデキストロース”は、本明細書において後により詳細に定義される。ポリデキストロースは、様々な種類の食料品において、糖および部分的に脂肪を代替する増量剤および低エネルギー成分として広く使用されている。ポリデキストロースは小腸内で消化または吸収されず、そして大部分は大便中に排出される。ポリデキストロースは、焼製品、飲料、糖菓および冷凍乳製品デザートを包含する広範囲の食品中に配合されている。腸管についてのポリデキストロースの有益な作用は、Am. J. Clin. Nutr. ７２、１５０３〜１５０９頁、２０００年およびBifidobacteria Microflora、１０（１）巻、５３〜６４頁、１９９１年に記載されている。米国特許第５４３７８８０号明細書（大塚製薬）はポリデキストロースを含有する健康飲料を記載し、日本国特許第２０７２８４２号公報（昭和産業）は食物繊維としてポリデキストロースを含有する飲料および食品を記載し、そして欧州特許第８２１８８５号明細書（ラフィネリー・ティルルモントワーズ）は腸の機能を促進するためのポリデキストロースを含有する乳製品粉末を記載する。

腸管についてのポリデキストロースの有益な作用は良く知られているが、本発明の発明者等は、ポリデキストロースの毎日の摂取が哺乳動物の腸内の免疫系を非常に有効に刺激することを今や驚くべきこと見出した。この作用は、非常に顕著に上昇したＩｇＡ濃度により示された。同時に、ポリデキストロースが炎症誘発性マーカーの増加を引き起こさない、即ち、腸の炎症の危険性が増大しないことを見出した。
さらに、本発明者等は、腸管についてのポリデキストロースの免疫刺激作用が、ポリデキストロースの投与がポリオールでさらに強化されたときに顕著に改良されることを見出した。ポリデキストロース単独またはポリオールと組み合せた免疫刺激作用は、これらの化合物が毎日の食餌中に長期にわたり含まれるときに顕著に改良される。

腸内の免疫系についてのポリデキストロースおよびポリオールの有益な相乗効果に加えて、本発明者等はまた、ポリオールと組み合せたポリデキストロースの使用が結腸内の生体アミンの量を非常に顕著に低減し、それ故、タンパク質のバクテリア代謝の最終生成物である物質を減少させることも見出した。幾つかの生体アミンは毒性を有し、そして結腸癌のより高い危険性を引き起こすことが知られている。さらに、本発明者等は、ポリデキストロースがポリオールと組み合せて使用されたとき、ポリオール自身が緩下反応を引き起こしたとしても、顕著な緩下作用がもたらされないことを見出した。

ポリオールは糖類非含有甘味料であり、その構造の一部が化学的に糖類に類似し、そして他の一部がアルコールに類似するので、糖アルコールとも呼ばれる。使用される他の用語は、多価アルコールおよびポリアルコールである。米国において食品中で現在使用されているものは、エリトリトール、水素化デンプン加水分解物（マルチトールシロップを包含する）、イソマルト、ラクチトール、マルチトール、マンニトール、ソルビトールおよびキシリトールである。それらは糖類代替物として、チューインガム、キャンディー、アイスクリーム、焼製品および果物ジャムを包含する広範囲の製品中で使用されている。それらはまた、歯磨き粉、マウスウォッシュ、ブレスミントおよび、咳止めのシロップまたは飴およびスロートロゼンジのような医薬品中でも使用されている。ラクチトール、ソルビトール、キシリトールおよびマンニトールのような多くのポリオールは、高い投与量で緩下作用を有する。ラクチトール含有成長促進飼料、並びに動物の成長および腸管機能を促進するラクチトール−ラクトース含有飼料は、米国特許第４７６００５５号明細書および欧州特許第０４６４３６２号明細書においてそれぞれ記載されている（双方ともバリオ・メイジェリに譲渡）。下痢または消化不良症候群において腸内細菌叢を再生するための生きたバクテリア、塩、非吸収性炭化水素（例えばポリオール）を含む医薬組成物は、国際公開第００／５４７８８号パンフレットに開示されている（イタルメッドＳ．Ｎ．Ｃ．）。

ポリデキストロースとポリオールとの組み合せた使用の例は、国際公開第９５／２６６４４号パンプレット（ウォリー・スウィート）、および国際公開第９８／３４５００号パンプレット（プラク・ビオヘム・ベー・ヴェー）に開示されるような食品加工のための糖製品の分野での改良、および米国特許第５６２９０４０号明細書（ロッテ・コーポレイション・リミテッド）に開示されるような糖アルコールと繊維としてポリデキストロースとを含有する低カロリーチョコレート製品を包含する。ポリオール（ラクチトールおよびソルビトール）とポリデキストロースとを含むサッカロースおよび糖類非含有低カロリー製品“ミルクジャム”が、ウルグアイ国特許出願第２６０９６号（ガブリエル・ジュリオ・フランギニ・モラレス）に開示されている。ポリデキストロースとポリオールとを含有するカロリー減冷凍デザートは、米国特許第５５２７５５４号明細書（キシロフィン・オイ）に記載され、ポリデキストロースと、マルチトールと、ラクチトールとを含有するカロリー減チョコレート組成物は、ＰＣＴ／ＵＳ００／００２４（キシロフィン・オイ）に記載され、またポリデキストロースとラクチトールとを含む糖類非含有ボイル糖菓は、欧州特許第４５２２６２号明細書（キシロフィン・オイ）に記載される。キシリトールとポリデキストロースとを含む調理された糖菓製品のためのカロリー減糖類非含有甘味料組成物は、米国特許第５０９８７３０号明細書（ダニスコ・カルター）に開示される。ポリオールおよびポリデキストロースを含む他の低カロリー糖菓は、特願昭６１−２５４１４８号（イシワタリ，Ｋ．）に記載される。満腹剤としてのポリデキストロースとキシリトールとの使用は、従来技術の米国特許出願第６０／２８２８６６号に開示される。

上述の文献は何れも、胃腸管の免疫系についてのポリデキストロースの作用を示さない。

胃腸管を標的とする殆どの機能性食料品（プレビオティックおよびプロビオティックのような）は、現在まで、腸管運動機能および吸収能力の調節に、並びに病原体との戦いに重要な役割を果たす腸管内の細菌叢バランスの調節に注目してきた。

患者の免疫学的状態が食餌により影響され得ることは良く知られている。有効成分が異なる種類および量のオリゴ糖、脂肪酸、ビタミン、ミネラル、痕跡量元素および植物抽出物、並びにそれらの組成物に変化する様々な種類の食料品および飲料のような免疫刺激調剤を開発および改良する多くの試みが成されてきた。これらの製品は、患者における免疫学的状態を、腸管内で局所的というよりむしろ、一般に改良するために開発されている。

しかしながら、腸管内の局所的な免疫系を特に支持し、かつ予防的な方法で腸管の免疫系を促進するために有用であり、かつ胃腸管内の炎症を被っている患者に、および特に胃腸管内の免疫系が弱まった患者に同様に有用である都合が良くかつ有効な方法を開発する必要がある。特に望ましいのは、腸内の免疫系を特に刺激し、そして病原性細菌叢に対して腸管を保護する物質の長期間の安全な投与を可能にする食品または食餌サプリメント製品である。

そのような安全、美味、かつインスタントの製品は、健康な摂取対象の腸管内の免疫系を強化することによる予防的な使用においても最も実用的であり、それ故に、例えば食品の取扱がより非衛生的な国々を旅行するときにしばしば起こる、病原体への突然の暴露の場合における深刻な炎症の防止を促進する。

本発明は、ポリデキストロースの使用による哺乳動物の腸管免疫系の刺激のための方法を提供することにより、前記必要に答える。本発明は、ポリデキストロースの使用の既に知られている有益な作用と哺乳動物の身体の改良された免疫学的能力とを組み合せて、腸疾患の管理および防止を改善する方法を提供することにより、従来技術の欠点を解消する。

本発明者等は、ポリデキストロースが細菌集団における免疫調節シフトを与えることを見出した。それ故、ポリデキストロースは、腸内細菌集団を正常化するために、および腸内免疫系に肯定的な作用を持つ細菌を増加させるために使用できる。

さらに、本発明はまた、ポリデキストロースをポリオールと組み合せて、ポリデキストロース単独により与えられる作用を相乗的に改良することによる、腸管内のポリデキストロースの免疫刺激作用の増強のための方法をも提供する。

免疫刺激に加えて、本願の発明者等は、ポリオール類と組み合せるとポリデキストロースが腸管、特に盲腸内の生体アミンを顕著に低減させることにさらに使用できることを予期せず見出した。該生体アミンは、より高い結腸癌の危険性を引き起こすことが知られている。生体アミンであるプトレシン、スペルミジンおよびスペルミンの過剰蓄積は細胞の悪性腫瘍転換を導き、増大したＯＤＣ（オルニチンデカルボキシラーゼ）活性は、幾つかの発癌遺伝子の発現を伴う（ヴィックストーム、Acta Ophthalmol.７０、５０６〜５１４頁、１９９１年）。

さらに、本発明の他の予期しない有益な観点は、緩下作用を有することが一般に知られているポリオールがポリデキストロースと同時に投与されるときに、該緩下作用が顕著に低減することである。

それ故、本発明は、病原体および食餌中のアレルゲンに対して腸を効果的に保護するだけでなく、結腸癌の予防に寄与する方法を提供することにより、腸管の全体の健康および
良好状態に寄与する。
Rothkotter et al., Pediatr. Res. 1991 Mar, 29(3):237-42 A.-M. Pajari et al., British J. Nutrition, 8, pp. 635-643, 2000 M. Mutanen et al., Carcinogenesis, Vol. 21, No. 6, pp. 1167-1173, 2000 Endo, K. et al. Bifidobacteria Microflora, Vol. 10(1), 53-64, 1991 Am. J. Clin. Nutr. 72, pp. 1503-1509, 2000 Bifidobacteria Microflora, Vol. 10(1), pp. 53-64, 1991 米国特許第５４３７８８０号明細書 特許第２０７２８４２号公報 欧州特許第８２１８８５号明細書 米国特許第４７６００５５号明細書 欧州特許第０４６４３６２号明細書 国際公開第００／５４７８８号パンフレット 国際公開第９５／２６６４４号パンプレット 国際公開第９８／３４５００号パンプレット 米国特許第５６２９０４０号明細書 ウルグアイ国特許出願第２６０９６号 米国特許第５５２７５５４号明細書 欧州特許第４５２２６２号明細書 米国特許第５０９８７３０号明細書 Wickstrom, Acta Ophthalmol. 70, pp. 506-514, 1991

本発明の要約
従って、本発明の目的は、哺乳動物の腸の健康状態を強化および改善するための方法および組成物を提供することにある。

本発明の１つの観点は、哺乳動物の胃腸管の免疫系を刺激する組成物の調製における有効成分としてのポリデキストロースの使用であって、少なくとも１種の医薬的に許容可能なキャリア（またはベヒクル）をポリデキストロースと混合することを含み、該ポリデキストロースは該哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を増加させることに有効である使用である。

本発明の他の観点は、哺乳動物の胃腸管の免疫系を刺激する組成物の調製における有効成分としてのポリデキストロースの使用であって、少なくとも１種のポリオールをポリデキストロースとを混合することを含み、該ポリオールは該哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を相乗的に増加させることに有効である使用である。

本発明のさらなる他の観点は、哺乳動物の胃腸管の免疫系を刺激する方法であって、該哺乳動物に該哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を増加させるために有効な量のポリデキストロースを投与することを含む方法である。

本発明の他の観点は、哺乳動物の胃腸管の免疫系を刺激する方法であって、該哺乳動物にポリオールと組み合せたポリデキストロースを投与することを含み、該ポリデキストロースおよび該ポリオールは、該哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を増
加させるために相乗的に有効な量で投与される方法である。

本発明のさらなる観点は、哺乳動物の腸内の生体アミンの量を低減するためのポリデキストロースおよびポリオールの使用に関する。従って、本発明は、生体アミンの効果的な低減により、結腸癌の危険を減じる方法および組成物を提供する。

本発明のさらなる他の観点は、ポリオールの緩下作用を抑制するためのポリデキストロースの使用に関する。従って、本発明は、緩下作用を伴わないポリオールを含む組成物の投与のための方法を提供する。

本発明の方法は幾つかの態様を取り得る。本発明の様々な観点のさらなる目的、利点および特徴は、その好ましい態様の以下の記載より明らかとなるだろう。

図面の簡単な説明
図１は、異なる食餌における回腸および盲腸内のＩｇＡ濃度をグラフにより示す（平均±ＳＥ、Ｎ＝１２）。カラム上の星印は対照との統計的差異を示す。
図２は、ゲノムＤＮＡ（４プールの平均）中のグアン＋シトシンの異なる百分率（％Ｇ＋Ｃ）でバクテリアの相対比率を表すことにより、異なる栄養補給群での盲腸微生物集団をグラフにより示す。
図３は、盲腸ＩｇＡ濃度と６０〜６４の間の％Ｇ＋Ｃを持つ微生物の数との間の相関をグラフにより示す。
図４は、ラット盲腸内の生体アミンの濃度をグラフにより示す（平均±ＳＥ、Ｎ＝１２）。
図５は、２４時間発酵後のチラミンの生産をグラフにより示す。

発明の詳細な説明
本発明は、哺乳動物の胃腸管の局所免疫系の刺激のための組成物の調製におけるポリデキストロースの使用に関し、該刺激は哺乳動物の腸内の増加したイムノグロブリンＡ濃度により示される。本発明はさらに、ポリオールと組み合せたポリデキストロースの使用による、ポリデキストロースの免疫刺激作用の増強を包含する。

本発明の態様において、免疫刺激組成物は、哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ濃度を増加させることに有効な投薬量のポリデキストロースを、少なくとも１種の医薬的に許容可能なキャリアと混合することにより調製される。

本発明の他の好ましい態様において、免疫刺激組成物は、少なくとも１種のポリオールをポリデキストロースと混合することにより調製され、該ポリオールは哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡを相乗的に増加させるために有効である。

他の好ましい態様において、ポリデキストロースおよびポリオールの有効量が、哺乳動物の腸内の生体アミンの量を低減する組成物を調製するために使用される。

本発明の他の好ましい態様において、ポリデキストロースはポリオール含有組成物を調製するために使用され、ポリデキストロースの量はポリオールの緩下作用を抑制するために有効である。

本発明は、哺乳動物の腸内の増加したイムノグロブリンＡ濃度により示される哺乳動物の胃腸管の局所免疫系の刺激のためのポリデキストロースの使用に関する。本発明はさらに、哺乳動物にポリオールと組み合せたポリデキストロースを投与することによる、ポリ
デキストロースの免疫刺激作用の増強のための方法を包含する。

本発明において、所望によりポリオールと組み合せた有効量のポリデキストロースは、腸内の免疫系を刺激するために、患者に好ましくは経口投与される。

本発明の１つの態様において、ポリデキストロースは哺乳動物の食品または飼料に添加される。

他の好ましい態様において、ポリデキストロースの有効量が、腸管内の免疫応答を刺激する組成物の調製に使用される。

他の好ましい態様において、前記ポリデキストロースは、ポリオールと組み合せて哺乳動物の食品または飼料中に添加される。

他の好ましい態様において、組み合せたポリデキストロースとポリオールとの有効量が、腸管内の免疫応答を刺激するための組成物の調製に使用される。

他の好ましい態様において、ポリデキストロースおよびポリオールは、腸内の生体アミンの顕著な減少を引き起こすために有効な量で哺乳動物に投与される。

他の好ましい態様において、組み合せたポリデキストロースとポリオールとの有効量が、腸内の生体アミンの顕著な減少を引き起こすための組成物を調製するために使用される。

本発明のさらなる態様において、ポリデキストロースはポリオールと組み合せて使用されて、該ポリオールの緩下作用を打ち消す。

本発明において、ポリデキストロースの使用は、同時に炎症マーカーの増加を誘発せずに、哺乳動物の胃腸管内のＩｇＡ濃度を思いがけなく増加させる。それ故、ポリデキストロースの作用は、望ましい種類の免疫刺激であると思われる。

試験動物の消化物中のＩｇＡの濃度の増加は、腸管上皮上に付着することを防止する抗体の正常化を介して、病原体に対する抵抗性が改善した指標である。

ポリデキストロースと組み合せたポリオールの使用は、ポリオール単独がＩｇＡ濃度に注目される作用を有さないけれども、ポリデキストロースの免疫刺激作用を相乗的に増加させる。それ故、例えばラクチトールについての相乗効果は、対照食餌と比較したとき約１０倍であることが見出されている。

本発明に関連して、ポリオールが、対照食餌と比較して、ブチレートの相対的生産を顕著に増加させることが注目される。ブチレートはそれ自体、大腸上皮細胞調節細胞の成長および分化のための重要なエネルギー源であるのと同様に、腸管のために有益であると考えられる。ブチレートはまた、結腸癌の危険性を減じることに関して興味深い揮発性脂肪酸でもある。

理論により束縛されることを望まないが、本発明者等は、ポリデキストロースとポリオールとの相乗効果が、腸管内免疫細胞の機能を改良する２つの異なる作用の組み合わせにより引き起こされ得ると思慮する。それ故、ポリデキストロースは腸管内抗体生産細胞を活性化し、他方、ポリオール発酵はブチレートの濃度の増大の形態で腸内免疫細胞のためのエネルギーを与える。

多数の様々なポリオールが、模擬腸発酵におけるその発酵パターンについて試験された。全ての試験したポリオールは、ポリオールを欠いた対照と比較して、乳酸の生産が顕著に増加した。

ポリデキストロースとポリオールとの使用はまた、消化物中の全生体アミンを低減する。生体アミンはタンパク質のバクテリア代謝の最終生成物であり、そしてその幾つかは毒性を有する。全生体アミンの削減は結腸癌の危険性を減じ、そして腸内の腐敗性発酵を抑制する。ポリデキストロースおよびポリオールはそれ故、腸の機能を改善し、そして健康の危険性を低減し、そして問題となる哺乳動物の良好状態を増加させる。

ポリオールは多かれ少なかれ注目される緩下作用を有することが知られており、食用品中でのポリオールの使用は商業的に制限されている。それ故、１０％以上のポリオールを含有する製品は、該製品が緩下作用を有し得ることの警告を設けなければならない。本発明に関連して、ポリデキストロースはポリオールの緩下作用を顕著に抑制し、そしてポリデキストロースとポリオールとの組み合せは思いがけずに緩下作用を欠いていることが見出された。これは、緩下副作用の危険性無しに食品および飼料中でのより多量のポリオールの使用を可能にするだろう。

上述したように、ポリデキストロースとポリオールとの組み合せは生体アミンの総量を低減する。しかしながら、驚くべきことに、１種のアミン、チラミンの濃度は該組み合わせにより対照的に増加する。理論により束縛されることの望まないが、本発明者等は、ポリデキストロースの抗緩下作用は、腸内のチラミンの生産の増加により引き起こされ得ると思慮する。チラミンは、腸の運動性を阻害する局所ホルモンであることが知られている。低減した運動性は、腸からの溶質および水の適切な吸収を可能にする。これが、腸のポリオールに対する耐性を改善する。

用語“ポリデキストロース”は、本願明細書で使用されるとき、胃内の酵素による消化に抵抗するグルコースの低カロリーポリマーを表す。それは、グルコース、マルトース、グルコースのオリゴマーまたはデンプンの加水分解物から生成されたグルコースのポリマー生成物、または熱処理により重縮合反応で酸、例えばルイス酸、無機酸またはモノカルボン酸、ジカルボン酸およびポリカルボン酸を包含する有機酸の存在下で重合させられたデンプンを包含し、例えば、その全ての内容が参照により本願明細書に組み込まれる以下の米国特許明細書：第２４３６９６７号、第２７１９１７９号、第４９６５３５４号、第３７６６１６５号、第５０５１５００号、第５４２４４１８号、第５３７８４９１号、第５６４５６４７号または第５７７３６０４号に記載された方法により生成されたものであるが、それらに制限されない。

用語ポリデキストロースはまた、上記されたグルコース、マルトース、グルコースのオリゴマーまたはデンプン加水分解物の、糖アルコール、例えばポリオールの存在下での重縮合により、例えば米国特許第３７６６１６５号明細書に記載された反応において生成されたグルコースのポリマー生成物をも包含する。さらに、用語ポリデキストロースは、それらに制限されずに、以下の何れかおよび全てを包含する従来技術に記載された技術により精製されたグルコースポリマーを包含する；（ａ）塩基添加による、または参照により双方の内容が本願明細書に組み込まれる米国特許第５６６７５９３号明細書および同第５６４５６４７号明細書に記載されるようなポリデキストロースの濃縮水溶液に吸着樹脂、弱塩基性イオン交換樹脂、タイプＩＩ強塩基性イオン交換樹脂、塩基性イオン交換樹脂を含む混合床樹脂、またはカチオン交換樹脂を通過させることによる、該ポリマーに関連した酸の中和；または（ｂ）ポリデキストロースを活性炭またはチャコールと接触させることによる、スラリー化または溶液を固形吸着体の床に通過させることによる、または塩素
酸ナトリウム、過酸化水素等で漂白することによる脱色；（ｃ）ＵＦ、ＲＯ（逆浸透）、寸法排除等のような分子篩法；または（ｄ）酵素により処理したポリデキストロースまたは（ｅ）従来技術に知られている何れかの他の認められた技術。

さらに、用語ポリデキストロースは、本願明細書で使用されるとき、当業者に知られている技術により生成された水素化または還元ポリグルコース生成物を包含する水素化ポリデキストロースを包含する。該技術の幾つかは、米国特許第５６０１８６３号明細書、同第５６２０８７１号明細書および同第５４２４４１８号明細書に記載され、それらの内容は参照により組み入れられる。

使用されるポリデキストロースが実質的に純粋であることが好ましい。当業者に知られている慣用の技術、例えばカラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣ等を包含するクロマトグラフィーを使用して実質的に純粋にし得る。

使用されるポリデキストロースが少なくとも８０％純粋である、即ち、少なくとも約８０％の不純物が除去されていることがより好ましい。より好ましくは少なくとも８５％純粋であり、またさらにより好ましくは少なくとも９０％純粋である。

ポリデキストロースと混合されて免疫刺激組成物を与える好ましいキャリアはポリオールである。

用語“ポリオール”は、ソルビトールおよびマンニトールのようなヘキシトール類、およびキシリトールのようなペンチトール類を意味する。該用語はまた、エリトリトールのようなＣ４−多価アルコール、またはラクチトールまたはマルチトールのようなＣ１２−多価アルコールを包含する。用語ポリオール組成物は、２種以上のポリオール類の組成物を意味する。そのような組成物は好ましくは、ソルビトールのようなポリオール類の工業的な生成において生じる組成物とは著しく異なる。好ましいのは、異なるＣ原子数を有する少なくとも２種のポリオールを含む組成物であり、特に該用語は、少なくとも１種のヘキシトールと少なくとも１種のペンチトールを含む組成物を意味する。飼料製品については特に、個々の純粋なポリオール類の工業的な生成に由来するポリオール混合物を利用するのことが有利である。そのような混合物は、ラクチトール、マルチトール、キシリトール等の結晶化からの流出液または母液を包含する。

本発明の免疫刺激組成物の調製に有用な他のキャリアおよびベヒクルは、ラクトース、カルシウムおよび他のミネラル、ビタミン、糖類および経口投与可能な組成物中に一般的に含まれる他の成分のような食用および／または栄養成分である。

ポリデキストロースは、カロリー生成甘味料の嵩、テクスチャ、食感および機能的特性を与えるために設計された成分である。ポリデキストロースの従来技術における性能に対する鍵は、グラム当たり１カロリーのそのカロリー値である。それ故、それは、ダイエット用食料品中のカロリー減増量剤として広く使用されている。食物繊維との幾つかの研究は、それらが大便の嵩を増加させ、短鎖脂肪酸の生産を増大し、大便ｐＨを低下させ、そして腸中の好ましい細菌叢（主にビフィドバクテリア）の成長を増加させるので、哺乳類の腸管機能および健康を改善することを示している。しかしながら、同様に、腸中の多量の全ビフィドバクテリアの作用に関する議論をかもす結果が最近報告されている。結腸内のビフィドバクテリアを選択的に刺激するイヌリンは、結腸癌の発達と関連する幾つかの因子を増加させることが最近報告されている（Ａ−Ｍ．パジャリ等、British J. Nutrition、８、６３５〜６４３頁、２０００年；Ｍ．ムタネン等、Carcinogenesis、２１巻、６号、１１６７〜１１７３頁、２０００年）。本発明に関連して、多量のビフィドバクテリアはまた、腸内バクテリア障害および免疫抑制のような望ましくない生理作用も引き起こ
し得る。

本発明者等は、特にポリオールと組み合せて投与されたときに、ポリデキストロースの投与が、腸内の免疫応答を非常に顕著に増加させることを驚くべきことに見出した。ポリデキストロース（およびポリオール）は、腸内の細菌集団におけるシフトを引き起こし、そして腸内免疫系に肯定的な作用を持つ細菌の成長を増加させた。それ故、ポリデキストロースは、例えば抗生物質処理または他の障害の後に腸内の細菌集団を均衡させるために使用できる。さらに、本研究は、ポリデキストロースおよびポリオールの投与がまた結腸癌の危険性を増加させることが知られている盲腸内の生体アミンを減じることも示した。

腸管についてのポリデキストロースとポリオールとの有益な相乗効果に加えて、本発明者等は、ポリデキストロースの組み合わせた投与がポリオールの緩下作用と拮抗することを見出した。良く知られているように、ポリオールの使用は、しばしば望ましくない緩下副作用により制限される。

増加したＩｇＡ生産のさらなる他の有益な作用は、食餌成分により引き起こされるアレルギーの防止である。ＩｇＡの腸管膜への分泌は、腸内食餌抗原の免疫細胞プレゼンテーションを変化させると同時に、抗体生産の増加が潜在的な食餌抗原と炎症細胞との間の接触を防止し、そしてそれ故アレルギー炎症が軽減される。

何らかの特別な理論に彼等自身が束縛されることを望まないが、本発明者等は、ポリデキストロースと組み合わせたときのポリオールの緩下作用のこの低減は、実験において見出される、腸内のチラミンの濃度の上昇により引き起こされ得ると結論付ける。それ故、ポリオール類の使用はしばしばそれらの望ましくない緩下作用により制限されるが、本発明はまた、望ましくない緩下副作用を伴わないポリオール類の長期間の安全な使用のための方法も提供する。

本発明のデータは、５０〜６９の間の％Ｇ＋Ｃを持つバクテリア、それ故最もありそうなことにはビフィドバクテリアが、ＩｇＡ応答と否定的に相関することを予期せず示した（図３）。この範囲はビフィドバクテリアの特徴である。相対的に多量のビフィドバクテリアはポリデキストロース−ラクチトール組み合わせ食餌で、またポリデキストロース食餌で低下した。属としてビフィドバクテリアは、有益であることが認められている。しかしながら、また腸内の多量の全ビフィドバクテリアの影響に関する議論をかもす結果が、最近報告されている。本発明に関連して、多量のビフィドバクテリアは、腸内バクテリア障害および免疫抑制のような望ましくない生理作用を引き起こし得ることが注目されている。細菌％Ｇ＋Ｃ特徴付けは、アパジャラチ等（Applied and Enviromental Microbiology、６４巻、１０号、４０８４〜４０８８頁、１９９８年）において記載された工程に従う。簡単に言うと、バクテリアを分画遠心分離により消化物試料から分離する。ＤＮＡをその後、バクテリア細胞から物理的、化学的および酵素的溶解の組み合わせにより回収する。回収したＤＮＡをその後、集団の個々のバクテリア員のＤＮＡ中のグアニン＋シトシン含量に基いて特徴付けする。異なるＧ＋Ｃ含量を持つＤＮＡをＣＳＣｌ密度勾配遠心分離により分離し、そして溶液をＵＶフローセルを通してポンプ送りすることにより観察する。

免疫系刺激剤として、単独でまたはポリオールの相乗効果量とのポリデキストロースの投与の時期は重要でなく、そして個々の必要に基いて摂取できる。ヒトのためのポリデキストロースの有効量は、約１ｇ〜１００ｇ／日、好ましくは５〜５０ｇ／日である。しかしながら、個人差を考慮しつつ、規則的な毎日の使用が食品および飼料の摂取および消化に関して推奨され、ポリデキストロースは毎日の食餌の０．１〜１０％、好ましくは１〜５％、最も好ましくは２〜３％を占めるべきである。

本発明の好ましい態様において、所望によりポリオールを伴うポリデキストロースは、離乳する若年哺乳動物または乳児のために有用な組成物において与えられる。離乳期齢では、乳児の腸管は非常に低い免疫応答を有し、そして腸の機能の刺激は、局所免疫防御を刺激することに役立つ。

単独でまたはポリオールの相乗効果量とのポリデキストロースは、対象の腸管内の免疫応答を刺激するために有効な量で対象に投与される。本明細書において使用されるとき、対象は動物、特に哺乳動物を指す。好ましい哺乳動物は、それらに制限されること無く、ヒト、哺乳類ペット動物（イヌ、ネコ、げっ歯類動物等）、哺乳類農場動物（ウマ、ブタ、ウシ、ヒツジ等）、哺乳類実験動物、および上述したものと同様な腸管を有する他の動物を包含する。好ましい哺乳動物はヒトである。

ポリデキストロースは好ましくは、哺乳動物に、ポリデキストロースと食用のキャリアまたはベヒクルとを含む組成物で投与される。好ましいキャリアは、上記したようにポリデキストロースに相乗効果を有するポリオールである。

前記組成物は、医薬的、治療的または栄養的に許容可能な組成物を調製するための標準の手順に従って調製され得る。それ故、ポリデキストロースは、前記キャリアと、例えばポリオールと混合され、そしてさらに乾燥、半乾燥または液体製品へと加工され得る。該ポリデキストロースおよびポリオールはまた顆粒化されて顆粒を提供し、該顆粒は、それ自身でまたは他の慣用の賦形剤および助剤と共にタブレットへと圧縮され得るか、または哺乳動物に経口投与される食品または飼料に添加される。

単独でまたはポリオールの相乗効果量とのポリデキストロースは、例えば食品または飼料中に添加することにより対象に投与されることができ、それは食中または食後に対象により消化される。そのような食品は、それらに制限されること無く、ヨーグルト、フルーツバターを包含するバター、クリームチーズ、ジェリー、ジャム、プレサーブ、マーマレード、シリアル、グラノーラバー、糖菓、クラッカー、乳製品デザート、例えばムース、アイスクリーム、ソルベおよび氷水のような冷凍食品、幼児用および乳児用食品、焼製品、例えば、ケーキ、クッキー、ペストリーおよび他の食品を包含し、飲料、例えばソフトドリンク、水を包含する水溶液、ミルク、幼児用および乳児用飲料等、シロップ、トッピング、ソースおよびプディング、サラダドレッシング、マヨネーズ、グレービーミックス、バーベキューソースまたは肉、魚または家禽と共に使用される他のソース、パスタおよび他の食品のために使用されるソースを包含する。単独でまたはポリオールとの組み合わせでポリデキストロースは、従来技術に既知の方法により、カプセル、錠剤、丸剤等に配合されることができる。

以下の非制限的な例は本発明をさらに説明する。

実施例１
各群１２匹のラットからなる対照群および試験群に別けた４週齢の雄ウイスターラットを、制御した温度（２７±２℃）および１２：１２時間の照明サイクルに保った。該動物は食料および水に自由に到達可能であった。該動物を週に１回体重測定し、そしてその体重増加を計算した。該対照群には４週間、対照（基本）食餌を与え、そして該試験群には４週間、以下により詳細に記載する免疫刺激量のポリデキストロースにより補足した対照（基本）食餌からなるＰＤＸ−食餌を与えた。

対照（基本）食餌
ジョウチおよびアンドリュー（１９７７）の“ウエスタンダイエットフォーミュラ”を、試行のために、コレステロール、塩およびタンパク質に富みそして繊維に乏しいように変更した。それ故、異なる起源から来るエネルギー量は、炭水化物から３２％、タンパク質から３１％、そして脂肪から３６％として計算された。対照食餌は、ジャガイモ３８．５、挽肉２３．３、小麦パン８．１、卵２０．４、バター１．６および糖類８．１を含有した（％ｗ／ｗ）。成分を切り刻み、混合し、そしてスチームオーブン中、２００℃で２〜３時間焼いた。該混合物を室温まで冷却させ、そして以下の成分を食餌中に混合した（％、ｗ／ｗ）：ビタミン混合物（アルトロミン・インターナショナル社製、１３２４）０．８７、コレステロール（シグマ社製）０．３７７、および塩（ＮａＣｌ）２．０。該食餌を使用するまで−２０℃で貯蔵した。

飼料の以下の分析は、ボンブ熱量計、誘導結合プラズマ放射分光計およびイオンクロマトグラフィーで行った：熱量１５５０ｃａｌ／ｇ、乾燥物質３４．２％、灰分０．９１％、Ｎａ０．６４ｍｇ／ｇ、Ｃａ０．１ｍｇ／ｇ、Ｋ３．２ｍｇ／ｇ、Ｍｇ０．２ｍｇ／ｇ、Ｃｌ１．２ｍｇ／ｇおよびリン２．５ｍｇ／ｇ。ＡＯＡＣ法で分析した食餌中の全食餌脂肪含量は４．８％であった。脂肪酸プロファイルはガスクロマトグラフィーにより分析した。前記基本食餌は、３．５％の全脂肪酸含量、飽和脂肪酸１．７％および不飽和脂肪酸１．８％を有した。飽和脂肪酸についての不飽和脂肪酸に対する比率は０．９であった。

ＰＤＸ−食餌
酸味および苦味を減じた処理済ポリデキストロースであるリテッセ（登録商標、リテッセ・ウルトラ、ロット番号Ｖ６８０１１、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）を、ヒト繊維摂取推奨およびラットのエネルギー要求に基いて計算した２％（ｗ／ｗ）の濃度で基本食餌に添加した。成人の繊維摂取の推奨は、２５〜３５ｇ／日または３ｇ／ＭＪの間で変化する。ラットにおいて対応する数値は、ラットとヒトとの間のエネルギー消費差を考慮して１２０ｍｇ／日または１．４７ｇ／日であり、それぞれ０．４９ＭＪおよび１０．４７ＭＪである。該基本食餌のエネルギー値に基いて、ラットの飼料消費は約４０ｇ／日であった。該食餌中の補足したポリデキストロースの含量は、適度な２％の濃度（２０ｇ／ｋｇ食餌）に指定した。

免疫学的分析
ＩｇＡは回腸および盲腸の消化物から抽出し、そしてＩｇＡ濃度を上清から市販で入手可能なＥＬＩＳＡキットで測定した。結果はｇ消化物当たりのμｇＩｇＡ（湿潤重量）として表した。

結果
結果は、図１で見られるように、ポリデキストロースを添加した食餌がＩｇＡの濃度を数倍増加させたことを示した（＋３４５％、ｐ＝０．００７）。

実施例２
各群１２匹のラットからなる対照群および３つの試験群に別けた４週齢の雄ウイスターラットを、制御した温度（２７±２℃）および１２：１２時間の照明サイクルに保った。該動物は食料および水に自由に到達可能であった。該動物は週に１回体重測定し、そしてその体重の増加を計算した。該対照群には４週間、対照（基本）食餌を与え、そして該試験群には４週間、以下により詳細に記載する免疫刺激量のポリデキストロース、およびポリオールにより補足した対照（基本）食餌からなるＰＤＸ−ポリオール−食餌を与えた。

対照（基本）食餌
対照食餌は実施例１に定義したものと同じ食餌であった。

ＰＤＸ−ポリオール−食餌
リテッセ（登録商標、リテッセ・ウルトラ、ロット番号Ｖ６８０１１、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）およびラクチトール（Ｎ１２５／２２４５９、ダニスコ・スイートナーズにより製造）を、ヒト繊維摂取推奨およびラットのエネルギー要求に基いて計算した各々２％（ｗ／ｗ）の濃度で基本食餌に添加した。

サンプリング
消化物試料は、回腸、盲腸および結腸から採取した。乾燥物質およびＩｇＡの測定並びに細菌数および％Ｇ＋Ｃを、個々の回腸および盲腸の消化物試料から行った。該試料を使用するまで−２０℃で貯蔵した。ｐＨを盲腸からその場で測定した。組織学的および免疫組織学的分析のための腸管組織試料を、遠位回腸および遠位盲腸から採取した。

免疫学的分析
ＩｇＡは回腸消化物および盲腸から抽出し、そしてＩｇＡ濃度を上清から市販で入手可能なＥＬＩＳＡキットで測定した。結果はｇ消化物当たりのμｇＩｇＡ（湿潤重量）として表した。

細菌分析
盲腸消化物試料中に存在する微生物の総数を決定するために、細胞を収集した消化物から洗浄手順により分離した（アパジャラチ等、Applied and Enviromental Microbiology、６４巻、１０号、４０８４〜４０８８頁、１９９８年）。計数するために、各盲腸消化物プール（処理当たり４つ、合計１６）からの分離した細胞の試料を適当に希釈し、そして細胞を４９０ｎｍの波長での吸収および５１５ｎｍでの発光を有する蛍光核酸結合染料（モレキュラー・プローブス社製）で染色した。

染色後、固定された時間間隔当たりの事象の量を、細菌を計数するために適するように調節したパラメータを持つＦＡＣＳＣアリバー（ベクトン・ディクソン・アンド・カンパニー製）フロー血球計測器中に試料を流すことにより決定した。該細胞を、特定量の固定寸法蛍光ビーズを含むＢＤトゥルーカウント（商標）チューブを使用することにより定量した。分析の間、該試料中の細胞の絶対数を細胞事象をビーズ事象と比較することにより決定できた。結果を、細胞／ｇ湿潤盲腸消化物として報告した。

細菌％Ｇ＋Ｃ特徴付け手段は、アパジャラチ等（Applied and Enviromental Microbiology、６４巻、１０号、４０８４〜４０８８頁、１９９８年）に記載された工程に従った。

結果
ポリデキストロースが食事中の唯一添加された補足物であるとき（実施例１参照）、ＩｇＡの濃度は、対照群と比較して数倍、＋３４５％（ｐ＝０．００７）増加した。ポリデキストロースとラクチトールとの組み合わせが食餌中に添加されたとき、顕著な相乗効果が達成され、ＩｇＡ濃度の増加は、対照群と比較して＋９９６％（ｐ＝０．０００１）と高かった。結果を図１に示す。

全細菌集団の構造を、％Ｇ＋Ｃ特徴付けとして知られている技術により分析した。それは、消化物試料から単離した全細菌集団ＤＮＡの組成を測定する。この研究では、ポリデキストロース、またはラクチトールと組み合わせたポリデキストロースを食餌に添加したときに、比較的多量の異なるバクテリア群が変化したことが見出された。最も明確な変化は、３５と４５との間の％Ｇ＋Ｃを持つ比較的多量のバクテリアにおいて観察された。明
らかな変化が起こった他の％Ｇ＋Ｃ範囲は６０％Ｇ＋Ｃ付近であった（図２）。

実施例３
各群１２匹のラットからなる対照群および３つの試験群に別けた４週齢の雄ウイスターラットを、制御した温度（２７±２℃）および１２：１２時間の照明サイクルに保った。該動物は食料および水に自由に到達可能であった。該動物は週に１回体重測定し、そしてその体重の増加を計算した。該対照群には４週間、対照（基本）食餌を与え、そして該試験群には４週間、以下により詳細に記載する免疫刺激量のポリデキストロース、およびポリオールにより補足した対照（基本）食餌からなるＰＤＸ−ポリオール−食餌を与えた。

対照（基本）食餌およびＰＤＸ−ポリオール−食餌
対照食餌は実施例１に定義したものと同じ食餌であり、またＰＤＸ−ポリオール−食餌は実施例２に定義したものと同じ食餌であった。

サンプリング
盲腸および結腸からの消化物試料は、生態アミンの分析のためにプール（プール当たり３動物）に別けた。該試料を分析するまで−２０℃で貯蔵した。ｐＨを盲腸からその場で測定した。

消化物からの生体アミン分析
生体アミンを盲腸消化物試料から決定した。ヘプチルアミンを内部標準として試料に添加し、そして生体アミンを０．４Ｍ過塩素酸で抽出した。遠心分離後、上清中の生体アミンをダンシルクロリドで誘導した。誘導物をＣ１８逆相カラム上に酢酸アンモニウムおよびアセトニトリルの混合物を溶離液として使用して分離し、そして蛍光検出器で検出した。

結果
ポリデキストロースとラクチトールとの組み合わせた使用は、全生体アミンの合計において１１％（ｐ＝０．０３）の減少を引き起こした（図４）。これは食餌タンパク質の腐敗の減少を示し、そしてまた一般に有害であると思慮される比較的多量の腐敗バクテリア（例えばクロストリジア）が減少したことを示す。

チラミンの濃度がポリデキストロースおよびポリオールにより実質的に影響されたことを注目することが重要である。それ故、ポリデキストロースは、対照食事と比較して、チラミンの量を増加した。他方ラクチトールはチラミンの量を低減する。ポリデキストロースをラクチトールと組み合わせて使用するとき、結果は驚くべきことに対照食事と比較して１８８％分のチラミンの増加であった。

何れかの理論により束縛されることを望まないが、本発明者等は、チラミンが結腸運動性の抑制を示すことが知られているので、より高いチラミン濃度が、ポリデキストロースと組み合されて投与されたときのラクチトールの緩下作用の抑制を説明するとの意見である。

実施例４
インビボで行った実施例１ないし３の試験を確認するためにバッチ発酵試験をインビトロで行った

試験はヒト糞便試料で行った２４時間発酵実験を基礎とした。糞便試料を２４時間バッ
チ培養、３７℃、ｐＨ６．９で緩衝培養液（ミネラル塩、痕跡量元素、ビタミン類）を含有する嫌気性条件下で培養した。培養液をブタからの盲腸消化物の１０％抽出物で補足した。ポリデキストロース、ポリオール類およびその組み合わせを、試験培養中に各々１％の濃度で添加した。

結果
全てのポリオールは、相対的および絶対的な酪酸の生産を増加させた。発酵パターンは、全てのポリオール類についておよびポリオール類とポリデキストロースとの組み合わせについて同様である。酪酸の生産は、対照と比較して全ての実験試料で顕著に増加した（表１）。

ポリオールの発酵は、腸内免疫細胞のためのエネルギー源であるブチレートの生産を増加した。ポリデキストロースがポリオールと組み合わせて投与されたときのポリデキストロースの免疫刺激作用の非常に顕著な増強（実施例２）は、ブチレート形態にあるエネルギーの増加により引き起こされ得、他方、該腸内免疫細胞によるイムノグロブリンＡの生
産の増加を導き得る。

実施例５
実施例２のインビボ試験および実施例３のインビトロ発酵を繰り返し、そしてチラミン濃度を測定した。

前記インビボ試験は、ポリデキストロースとラクチトールとの餌やりで、チラミン濃度の顕著な増加を示した。同時に、ラクチトール単独により引き起こされる緩下作用の顕著な抑制が試験動物において観察された。

幾つかのポリオール類での前記インビトロ発酵は、同様なチラミン生産の増加がポリデキストロースと、ラクチトール、ソルビトール、マルチトールおよびイソマルトとの組み合わせで現れることを確認した。それ故、これらのポリオール類は、ポリデキストロースと組み合わせにおいてラクチトールと同様にチラミンを生産した。

ポリデキストロースとポリオールとの組み合わせはチラミン濃度を増大し、そしてこの作用はインビトロ試験において観察された緩下影響の抑制を説明し得る。

実施例６ ヨーグルト製品
ペクチン（グラインドステッド・ペクチンＹＦ３１０）０．７０％および結晶性ラクチトール１．０％を乾燥ブレンドし、そして水１１．０％中に溶解し、それを８０〜８５℃まで加熱した。キイチゴ（冷凍）５０．０％、ポリデキストロース（リテッセ（登録商標）ウルトラ（商標）、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）１８．８０％および結晶性ラクチトール１７．８０％を加熱して沸騰させ、そしてその後、ペクチンとラクチトールとの混合物を良く攪拌しながら添加した。カルシウムスラリーをカルシウム塩（カルシウムラクテート５Ｈ₂Ｏ）０．２９６％を熱水５．０％中に溶解することにより作製し、そしてその後、それを良く攪拌しながら果物マスに添加した。該混合物をその後、所望の含量に到達するまで蒸発させた。ｐＨをクエン酸ナトリウム溶液を使用して３．９に調節し、そして防腐剤（Ｋ−ソルベート２０％ｗ／ｖ、０．２５％）を添加した。充填のために、該混合物を４０℃の温度まで冷却した。該混合物をヨーグルト中に１５〜２０％の最終投与量で投与した。１日当たり１つまたは２つのヨーグルトの摂食は、腸内のＩｇＡ濃度を増加させた。百分率は生の重量に基いて計算した。

実施例７ 中心をキシリトールおよびポリデキストロースで充填されたポリデキストロースハードキャンディー
ハードキャンディ充填物のための成分、結晶性キシリトール３０．１％、ポリデキストロース（リテッセ（登録商標）ウルトラ、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）４５．１％および水２４．８％を一緒に混合し、そしてその後９０．０％乾燥物質まで加熱した（約１１９℃）。生じたシロップを投与ポンプホッパーに移した。ハードキャンディ外殻のための成分、ポリデキストロース９７．０％および結晶性キシリトール３．０％を一緒に混合し、水を２５．０％で添加し、そしてその後該混合物を１３５℃に加熱した。ペパーミント油極少量、アスパルテーム０．１０％およびアセスルフェームＫ０．０５％を、＜１００℃に冷却したときにキャンディーマスに添加し、そして該マスをその後、打抜きに適したテクスチャまで練った。該キャンディーマスに、キシリトール／ポリデキストロース充填物で、該キャンディーマスを通した中心パイプに取り付けた投与ポンプを介して中心充填した。該キャンディーを包装前に冷却した。該キャンディーは糖尿病患者に適し、そして腸内のＩｇＡ濃度を増加させるのに適した糖類非含
有製品であった。百分率は生の重量に基いて計算した。

実施例８ タッフィートッピング
ポリデキストロース（リテッセ（登録商標）ＩＩ、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）１３．９％および結晶性ラクチトール１４．４％を乾燥ブレンドした。ポリデキストロースとラクチトールとのブレンド、乾燥ミルク１１．８％、マルチトールシロップ４９．８％、塩０．５％、ＧＭＳ０．４％、レクチン０．２％およびバター脂肪８．８％を６５℃で２０分間、予備混合した。該混合物をその後１２４℃まで冷却した。バニリン０．１％、アスパルテーム０．１％および香料を添加した。該混合物をカウントラインバーにトッピングするために使用し、腸管内のＩｇＡ濃度を増加させた。百分率は生の重量に基いて計算した。

実施例９ プレーンチョコレート
ココア液４２．０％およびココアバター１１．４％を溶解した。無水結晶性（または無水結晶性粉砕）ラクチトール３２．０％およびポリデキストロース（リテッセ（登録商標）ウルトラ、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）１３．８％を、ココア液、ココアバターの一部およびバニリンと混合した。該混合物を要求される粒子寸法まで精錬し、６０℃で２４時間までコンチし、そして該ココアバターの残部を添加した。レクチンおよびアスパルテームをコンチの終了１時間前に添加した。該チョコレートは糖類非含有で、そして糖尿病患者に適し、また腸内のＩｇＡを増加させるために適していた。百分率は生の重量に基いて計算した。

実施例１０ マデイラケーキ
新鮮な全卵１８．０３％、および水１５．７２％を遊星型ミキサーのボール中に入れた。結晶性ラクチトール２０．７３％、ポリデキストロース（リテッセ（登録商標）ＩＩ、ダニスコ・カルター・アメリカ・インコーポレイテッドにより製造）５．２１％、熱処理ケーキ粉２２．５３％、スキムミルク粉末１．６０％、噴霧乾燥卵アルブミン１．１０％、ベーキングパウダー０．９０％、塩０．６０％、アセスルフェームＫ０．０６％および高比率脂肪１３．５２％をその後添加し、速度１で３０秒間混合し、そして削り落とした。その後、該混合物を速度２で１．５分間混合し、そして削り落とした。再度、速度２でさらに１．５分間、０．７〜０．７５の相対密度が達成されるまで混合した。生練り粉を１ｌｂ−ケーキ缶中の紙ケース中に入れ、そして３０分間２００℃で焼いた。該ケーキは、緩下作用を有さずに、腸内のＩｇＡを増加させるために有用であった。百分率は生の重量に基いて計算した。

特に、２つの物質の非常に顕著な相乗作用が実験により明らかに示された。

ポリデキストロースとラクチトールに関して本明細書において上記された好ましい比率はまた、ポリデキストロースと他のポリオール類との混合物にも適用可能である。

そうでないことが示されない限り、前記百分率は重量百分率である。さらに、与えられる重量は乾燥重量、即ち、存在し得るキャリアの重量を除いたものである。

上記の好ましい態様および例は、本発明の範囲および精神を説明するために与えられている。これらの態様および例は、当業者に他の態様および例を明らかにするであろう。これらの他の態様および例は本発明の想定内である。

図１は、異なる食餌における回腸および盲腸内のＩｇＡ濃度を示すグラフである。 図２は、ゲノムＤＮＡ（４プールの平均）中のグアン＋シトシンの異なる百分率（％Ｇ＋Ｃ）でバクテリアの相対比率を表すことにより、異なる栄養補給群での盲腸微生物集団を示すグラフである。 図３は、盲腸ＩｇＡ濃度と６０〜６４の間の％Ｇ＋Ｃを持つ微生物の数との間の相関を示すグラフである。 図４は、ラット盲腸内の生体アミンの濃度を示すグラフである。 図５は、２４時間発酵後のチラミンの生産を示すグラフである。

Claims (25)

1. 腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を増加させることより、
   哺乳動物の胃腸管の免疫系を刺激するための、該腸管の炎症を治療または防止するための、病原性細菌または食餌性アレルゲンに対し該腸管を保護するための、または免疫系機能障害に苦しむ哺乳類を治療するための、経口投与用医薬組成物であって、
   該組成物は、
   該哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を増加させる有効量の活性成分としてのポリデキストロースを含み、該ポリデキストロースはポリオールと組み合わされるものであり、そして該ポリオールは前記哺乳動物の腸内のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）濃度を相乗的に増加させることに有効である量で供される、組成物。
2. ポリデキストロースとラクチトールとの組み合わせを含む、請求項１記載の組成物。
3. 前記ポリデキストロースおよびポリオールはさらに腸内の生体アミン量を低減することに有効である、請求項１記載の組成物。
4. 前記ポリデキストロースはさらに腸内細菌集団を均衡させるかまたは正常化することに有効である、請求項１に記載の組成物。
5. 前記哺乳動物は、ヒト、哺乳類ペット動物、哺乳類農場動物、哺乳類実験動物、哺乳類動物園動物からなる群より選択される、請求項１ないし４のうちの何れか１項に記載の組成物。
6. 前記動物は離乳期齢の若年哺乳動物である、請求項５記載の組成物。
7. 前記組成物は、乾燥、半乾燥または液体の製品、錠剤、丸剤、チューインガム、粉剤、噴霧剤、シロップ、ペットフード、動物飼料等からなる群より選択される経口投与可能な調剤の形態で調製される、請求項１に記載の組成物。
8. 前記ポリデキストロースは水素化ポリデキストロースである、請求項１に記載の組成物。
9. 前記ポリデキストロースは精製されている、請求項１に記載の組成物。
10. 前記ポリオールは、ラクチトール、キシリトール、マルチトール、ソルビトール、イソマルトからなる群より選択される、請求項１記載の組成物。
11. 前記ポリオールは、ラクチトールまたはキシリトールである、請求項１記載の組成物。
12. 前記ポリオールはラクチトールである、請求項１１記載の組成物。
13. 経口投与される、請求項１記載の組成物。
14. ポリオールと組み合せたポリデキストロースは、経口投与される、請求項１記載の組成物。
15. ラクチトールと組み合せたポリデキストロースは、経口投与される、請求項１４記載の組成物。
16. ポリオールのポリデキストロースに対する重量比は、１：１０ないし１０：１の範囲である、請求項１記載の組成物。
17. 前記重量比は１：５ないし５：１の範囲である、請求項１６記載の組成物。
18. 前記重量比は１：１である、請求項１７記載の組成物。
19. ポリデキストロースは、腸の抗生物質処理または他の障害の後に、哺乳動物の細菌集団を均衡させるかまたは正常化するために有効な量で含まれる、請求項１３または１４に記載の組成物。
20. 前記ポリデキストロースは、非水素化ポリデキストロース、水素化ポリデキストロース、または精製を受けた非水素化ポリデキストロースまたは水素化ポリデキストロース、またはその混合である、請求項１記載の組成物。
21. 胃腸管の炎症、免疫系機能障害、病原性細菌または食餌アレルゲンによる攻撃、からなる群より選ばれる腸疾患の治療または予防のための医薬組成物であって、該ヒトの胃腸管中のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）の濃度が、１乃至１００ｇ／日のポリデキストロースの食餌経口投与により増加するものであり、ポリデキストロースとポリオールとを含み、該ポリオールはポリデキストロースの免疫刺激の相乗的増強作用を与える、組成物。
22. 前記ポリデキストロースは精製されたポリデキストロースであり、そして前記ポリオールは、ラクチトール、ソルビトール、マルチトール、キシリトールおよびイソマルトからなる群より選択される、請求項２１に記載の組成物。
23. 飼料製品である、請求項２１に記載の組成物。
24. 離乳期齢の若年哺乳動物のための乾燥、半乾燥または液体製品の形態にある、請求項２１に記載の組成物。
25. 哺乳類の胃腸管中のイムノグロブリンＡ（ＩｇＡ）の濃度の増加の特性を該製品中にもた
    らすための、飼料中へのポリデキストロースの使用。

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