JP2006509725A - イミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体、該ベンゾピラン誘導体の製造方法及び該ベンゾピラン誘導体を含有する製薬組成物 - Google Patents

Abstract

本発明は、イミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体、該誘導体の製造方法及び該誘導体を含む製薬組成物に関するものである。本発明は、新生血管形成抑制作用を通じて抗癌剤、関節リウマチ治療剤、糖尿病性網膜症等の製薬治療剤として薬理学的に有用であり、かつ虚血再潅流疾患に対する心臓保護剤及び神経細胞保護剤または臓器の保護剤として薬理学的に有用である。

Description

本発明は、下記の化学式１のようなイミダゾールを含む二次アミンで置換された新規なベンゾピラン誘導体に関するものである。また、本発明は、前記新規な化合物及び該化合物を有効成分として一つ以上含む製薬組成物の製造方法に関するものである。

本発明は、また、前記イミダゾールを含む二次アミンで置換された新規なベンゾピラン誘導体の薬学的用途に関するものである。より詳細には、本発明のベンゾピラン誘導体は新生血管形成抑制作用を示し、抗癌剤、関節リウマチ治療剤、糖尿病性網膜症等の治療剤として使用でき、また心臓保護剤、神経細胞保護剤、脳損傷保護剤、臓器保護剤として、若しくは酸化的ストレスや虚血・再潅流と関連した主な心血管外科処置において主に使用できる。

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、及び＊は明細書内で定義したものと同様である。）

国内外で癌全般に対して研究が盛んに進められているにもかかわらず、ヒトの疾患中において癌が占める比率は、漸次増加している。１９７０年代にフォルクマン（Ｊ．Ｆｏｌｋｍａｎ）によって、腫瘍成長が、既に存在する血管で新しい血管を形成する血管形成に依存することが発見されて以後、血管形成抑制剤が最も可能性があり進歩的な薬物群の一つであることが確認された。

伝統的な化学療法は、発生周期の間、癌細胞の化学毒性により腫瘍細胞の増殖を破壊するものであるが、腫瘍細胞のみならず正常細胞にも傷害を与えるという深刻な副作用があった。したがって、癌細胞周辺へ酸素と栄養分を提供するとともに、遠くにある臓器への転移方法をも提供する新生血管の形成を抑制させる新生血管形成抑制剤の発達に対する研究が、前記抗癌治療の新規なアプローチの方法の一つとして考慮されている。

成人の正常組織では、創傷の治癒または炎症の発生のような特殊な状況においてのみ新生血管が形成されるのに対して、癌組織では新生血管形成がなければ固形癌が１−２ｍｍ以上の大きさに成長できないため、固形癌の成長と転移において新生血管形成が必須的な過程として認識されている（Ｆｏｌｋｍａｎ，Ｊ．等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９２年、第２６７巻、１０９３１−１０９３４頁）。正常状態での新生血管形成は、新生血管形成誘導因子と抑制因子の均衡により厳格に調節されている。特定の病的状態下、即ち固形癌の成長、関節リウマチ、乾癬、ＡＩＤＳ合併症及び糖尿病性網膜症等の病的状態下において、このような均衡が壊れた状態にて新生血管形成が起こる（Ｆｏｒｋｍａｎ，Ｊ．，Ｋｌａｇｓｂｒｕｎ．Ｍ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８７年、第２３５巻、４４２−４４７頁）。新生血管形成は、血管内皮細胞の移動、増殖及び分化によりなされる一連の作用を含み、このような新生血管形成は、癌の成長と転移において重要な先行過程として知られている。即ち、癌の進行性成長は宿主細胞からの血管形成を必要とするため、腫瘍から由来した新生血管形成促進因子が血管内皮細胞を刺激して腫瘍塊（ｔｕｍｏｒ ｍａｓｓ）内に新しい血管形成を誘発させる。その後、悪性腫瘍周辺に形成された血管により癌細胞の他の部位への転移が容易に起きる。したがって、このような新生血管形成の抑制は、癌の成長及び転移の抑制を誘導することができる。新生血管形成誘導因子と新生血管形成抑制因子とを発見してその作用メカニズムを明らかにすることが抗癌剤開発のための重要な研究として注目されている。

新生血管の形成が連続的で独立的な様々な段階からなる複合的な過程であるため、抑制可能な多くの潜在的標的が生成され、該標的としては、新生血管形成誘導因子の生産の抑制、新生血管形成誘導因子の受容体への結合の阻害、基底膜の加水分解を阻害、内皮細胞の増殖と移動を阻害、毛細管の形成阻害、基底膜の合成阻害または転移抑制等が含まれる。このような観点からこれまでに発見及び開発された新生血管形成抑制剤は、プロスタミン（ｐｒｏｓｔａｍｉｎｅ）及び腫瘍壊死因子のようなタンパク質類、ポリサッカライド類、抗生剤類、ステロイド類、ポリ陽イオン及びポリ陰イオン類等に分類できる。特に、ヒドロコルチゾンの場合は、ヘパリンと共に処理する時、新生血管形成抑制効果を示すことが報告されている（Ｌｅｅ，Ａ．等，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８３年、第２２１巻、１１８５−１１８７頁；Ｃｒｕｍ，Ｒ．等，Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８５年、第２３０巻、１３７５−１３７８頁）。最近にアストラゼネカ（Ａｓｔｒａ Ｚｅｎｅｃａ）社のイレッサが非小細胞肺癌用の薬物として使用されていて、多数の新生血管生成抑制用薬物が現在臨床試験中である。ネオバスタット（Ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、タルセバ（Ｔａｒｃｅｖａ）、ＣＡＩ及びサロミド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ）が肯定的な臨床結果により第ＩＩＩ相の臨床試験段階にある。

虚血性心臓疾患は、心筋の酸素要求量と酸素供給量との均衡状態が失われて供給量が要求量に比べて顕著に不足した時、心筋虚血の結果として現われる。多くの場合、冠状動脈疾患が虚血性心臓疾患を起こす主原因として発見される。冠状動脈の内径が狭まれば充分な量の血液が供給されないため酸素要求量を充足させられず、狭心症、心筋梗塞症、急性心臓麻痺、不整脈等を来たすことになる（Ｇ．Ｊ．Ｇｒｏｖｅｒ，Ｃａｎ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９７年、第７５巻、３０９頁；Ｇ．Ｄ．Ｌｏｐａｓｃｈｕｋ等，Ｓｃｉｅｎｃｅ＆Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １９９７年、第４２巻）。また、虚血性心血管疾患は、冠状動脈疾患の外に他の複合的な要因によっても発病するので、経皮経管冠状動脈形成術等の手術療法だけではなく異なる薬物療法も必要である。虚血性心血管疾患の治療のためには、抗血栓剤、動脈硬化治療剤等の薬物が使用され、代表的な薬物としてはβ遮断剤、硝酸塩、ニフェジピン等のカルシウム拮抗剤、血栓溶解剤、アスピリン、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤等が使用されている。

下記の構造式を有するベンゾピラニルアニリノメチルイミダゾール（ＢＭＳ−１９１０９５）が既存のカリウムチャネル開放剤とは異なり、心臓に存在するＡＴＰ感受性カリウムチャネル（Ｋ_ＡＴＰ）に選択的に作用することが報告されている（Ｋ．Ｓ．Ａｔｗａｌ等，Ｊ．Ｍｅ．Ｃｈｅｍ．１９９３年、第３６巻、３９７１頁；Ｋ．Ｓ．Ａｔｗａｌ等，Ｊ．Ｍｅ．Ｃｈｅｍ．１９９５年、第３８巻、１９６６頁）。このＢＭＳ１９１０９５化合物は、血圧を著しく減少させないで虚血心臓を保護するので、新しい虚血心臓疾患治療剤としての開発可能性を提示した。

神経細胞の損傷または壊死は、脳卒中、頭部外傷、アルツハイマー病、パーキンソン病、新生児仮死、緑内障、糖尿病性神経障害に至る様々な神経系疾患の主原因として知られている（Ｇ．Ｊ．Ｚｏｐｐｏ等，Ｄｒｕｇｓ，１９９７年、第５４巻、９頁；Ｉ．Ｓｚｉｒａｋｉ等，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９９８年、第８５巻、１１０１頁）。神経細胞を損傷させる代表的な要因としては、神経細胞内の鉄濃度の増加、活性酸素の増加、過酸化物の増加等が挙げられる（Ｍ．Ｐ．Ｍａｔｔｓｏｎ等，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１９９５年、第４６巻、１８７頁；Ｙ．Ｇｏｏｄｍａｎ等，Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．１９９６年、第７０６巻、３２８頁）。

本発明は、上記した懸案を鑑みてなされたものである。

本発明の発明者らは、上記のような種々の効果を示す化合物を開発するために努力を重ねた結果、本発明の上記化学式Ｉにて示されるイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体を発見した。前記化合物は、新生血管形成抑制作用に優れ、生体抗癌作用、また虚血心臓疾患に対する心臓保護作用、神経細胞保護作用、脂質過酸化抑制作用または抗酸化作用等の多様な薬理効果を示す。本発明の発明者らは、前記化合物が癌、関節リウマチ、糖尿性網膜症等の新生血管形成に関連した疾患、新生児仮死、緑内障、糖尿病性神経障害、頭部外傷のような神経細胞の損傷に関連した疾患、退行性神経疾患及び動脈硬化等、ラジカル酸素と関連した疾患及び心筋梗塞、狭心症、心不全症等の心血管系疾患の治療剤に使用できることを明らかにして本発明を完成した。

本発明は、下記の化学式１で表示されるイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体及びその製薬的に許容可能な塩を含む。

（式中、Ｒ^１は、Ｈ、ＣＮ、ＮＯ_２またはＮＨ_２であり、Ｒ^２は、ＣＨ^３、

または

であり（ここで、Ｒ^ａは、Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖または側鎖アルキル基であり、かつＺは、Ｃ_２〜Ｃ_６の直鎖または側鎖アルキルである）、Ｒ^３及びＲ^４は、各々独立して、Ｈ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｃ_１〜Ｃ_３のアルキル基、ＯＲ^ｂ、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、ＮＯ_２またはＣＯ_２Ｒ^ｂであり（ここで、Ｒ^ｂは、ＨまたはＣ_１〜Ｃ_３のアルキルである）、かつ＊は、キラル（ｃｈｉｒａｌ）中心を示す。）
また、本発明は、前記化学式１で示されるイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体、該誘導体の製薬的に許容される塩のみならず、それらから製造可能な溶媒化物及び水和物をすべて含む。

本発明の前記化学式１で示されるイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体は、それらのラセミ混合物または立体異性体混合物のみならず、２、３及び４位に一つ以上のキラル中心を有する分離された立体化学異性体、即ち、ジアステレオ異性的または鏡像異性的に純粋な分離化合物を含む。

前記化学式１において２、３、４位のすべてがキラル中心である場合、本発明による３，４−ジヒドロベンゾピラン誘導体は、下記の化学式２で示される（Ｉ_１）、（Ｉ_２）、（Ｉ_３）及び（Ｉ_４）のような光学異性体で存在する。

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３及びＲ^４は、化学式１で定義したものと同様である。）
本発明の好ましい化合物を具体的に下記に示す：
１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２）（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
４）（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
９）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１２）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１４）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１７）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１８）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
１９）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２１）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−シアノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２６）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２７）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２８）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
２９）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
３６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、及び
３７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン。

本発明の化学式１の化合物は、製薬的にまたは生理学的に許容可能な遊離酸により形成された製薬的に許容可能な塩の形態で使用できる。それらの塩は、下記の塩を含むがそれらに限定されるものではない。

塩酸、臭化水素酸、硫酸、亜硫酸、リン酸等の無機酸塩、及び、クエン酸、酢酸、マレイン酸、フマル酸、グルコン酸、メタンスルホン酸、グリコール酸、コハク酸、酒石酸、４−トルエンスルホン酸、ガラクツロン酸、エンボン酸、グルタミン酸、アスパラギン等の有機酸塩を含むことができる。

本発明の酸付加塩は、通常の方法、例えば、化学式１の化合物を過量の酸水溶液中に溶解させ、その塩を、例えばメタノール、エタノール、アセトンまたはアセトニトリル等の水混和性有機溶媒を使用して沈殿させて製造できる。化学式１の化合物及び水またはアルコール（例、グリコールモノメチルエーテル）中の酸を同量加熱し、次いでこの混合物を蒸発させて乾燥させるか、または析出した塩を吸引ろ過して製造することもできる。

また、本発明は、前記化学式１のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン化合物の製造方法を含む。
具体的に、本発明は、下記のスキーム１で示されるように、化学式ＩＩの化合物を金属塩存在下にて化学式ＩＩＩの化合物と反応させることからなる化学式１のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン化合物の製造方法を提供する。

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及び＊は、化学式１で定義したものと同様である。）
本発明では、出発物質として各々の光学異性体を使用することによって化学式１の化合物を各々の光学活性異性体として製造できる。また、出発物質に部分ラセミ混合物を使用することによって化学式１の化合物をラセミ混合物として製造し、ラセミ混合物を分離して各々の光学異性体を得ることができる。光学異性体は、通常的なキラルカラムクロマトグフィーまたは再結晶方法を実施して分離できる。

上記化学式１の化合物は、以下に記載される反応と技術とにより合成できる。前記反応は使用する試薬と物質に対して適切かつ効果的な転換に適切な溶媒により遂行される。
Ｉ．出発物質の製造
（１）エポキシド化合物（ＩＩ）の製造
エポキシド化合物の製造は、本発明の発明者らによる大韓民国特許出願第２０００−６０４６７号に記述されている方法に従って、下記スキーム２で示すように、エポキシド化合物（ＩＩ_１）及びエポキシド化合物（ＩＩ_２）は、オレフィン化合物（ＩＶ_１）から製造でき、エポキシド化合物（ＩＩ_３）及びエポキシド化合物（ＩＩ_４）は、オレフィン化合物（ＩＶ_２）から製造できる。

（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、化学式１で定義したものと同様である。）
（２）イミダゾールを含む二次アミン化合物（ＩＩＩ）の製造
前記スキーム１で使用したイミダゾール環を含む二次アミン化合物は、下記スキーム３に示されるように、アニリン化合物と２−イミダゾールカルボキシアルデヒドの還元的アミン化反応（ｒｅｄｕｃｔｉｖｅ ａｍｉｎａｔｉｏｎ）により製造できる。

（式中、Ｒ^３及びＲ^４は、化学式１で定義したものと同様である。）
上記スキーム３において、還元的アミン化反応時に使用される還元剤としては、水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ_４）または、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ_３ＣＮ）等が使用できる。

好ましい溶媒は、メタノールまたはエタノールのようなアルコール系溶媒、または酢酸エチルである。
反応温度は、常温から溶媒の沸点までが好ましい。

ＩＩ．製造方法
前記スキーム１で示される化学式１の化合物の製造方法は、適切な溶媒を用いて、エポキシド化合物（ＩＩ）と二次アミン化合物（ＩＩＩ）とを適切な金属塩存在下にて反応させることからなる。

ここで、金属塩としては、Ｍｇ（ＣｌＯ_４）_２、ＣｏＣｌ_２、ＬｉＣｌＯ_４、ＮａＣｌＯ_４、ＣａＣｌ_２、ＺｎＣｌ_２、ＬｉＢＦ_４及びＺｎ（Ｔｆ）_２等を使用でき、好ましい溶媒としては、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド等を使用できる。反応温度は、室温から溶媒の沸点までである。

前記反応でエポキシド化合物（ＩＩ）の立体異性体を各々個別的に出発物質に使用した場合には、出発物質に使用した化合物に対応する立体化学を有する光学異性体を個別的に得ることができる。即ち、エポキシド化合物（ＩＩ_１）、（ＩＩ_２）、（ＩＩ_３）及び（ＩＩ_４）とアミン化合物（ＩＩＩ）から各々前記スキーム２の化合物（Ｉ_１）、（Ｉ_２）、（Ｉ_３）及び（Ｉ_４）を得ることができる。

化学式１の化合物中Ｒ^１がＮＨ_２である化合物（Ｖ）は、下記スキーム４のようにＲ^１がＮＯ_２の化合物（ＩＶ）を還元させることにより製造できる。

（式中、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及び＊は、化学式１で定義したものと同様である。）
前記還元反応は、適切な溶媒に、白金、パラジウム、パラジウム付着木炭（Ｐｄ／Ｃ；ｐａｌｌａｄｉｕｍ ｏｎ ｃａｒｂｏｎ）またはラネー・ニッケル等のような金属触媒を使用した水素化反応により実施される。好ましい反応溶媒は、メタノールまたはエタノール等のアルコール系溶媒や酢酸エチルである。

また別の方法としては、ＣｕＳＯ_４、Ｃｕ（ＯＡｃ）_２、ＣｏＣｌ_２、ＳｎＣｌ_２またはＮｉＣｌ_２等の存在下でＮａＢＨ_４等の還元剤で還元させることもできる。ここで、溶媒には、水とメタノールの混合溶媒を使用することが好ましく、反応温度は、常温から使用溶媒の沸点までが好ましい。

また本発明は、上記化学式１のようなイミダゾールを含む二次アミンで置換された新規なベンゾピラン誘導体を含む製薬組成物又はその製薬的に許容される塩を有効成分とする。特に、本発明は、新生血管形成抑制用、神経細胞保護用、脳損傷保護用、心臓保護用、心血管外科処置用または抗酸化用製薬組成物を含む。

本発明の誘導体及びその塩は、新生血管形成を抑制する作用を示す。詳細には、塩基性繊維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）で誘導したヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の管形成を抑制し、インビボマウスマトリゲルプラグアッセイ（皮下注射及び経口投与）及びＣＡＭ（ｃｈｒｉｏａｌｌａｔｏｎｉｃ ｍｅｍｂｒａｎｅ）アッセイで新生血管形成を抑制した。また、ヌードマウスでヒトの肺癌組織から分離したＡ５４９（ｈｕｍａｎ ｎｏｎ ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ）の移植実験の結果、腫瘍成長を有意に抑制し、体重減少等の副作用を示さなかった。本発明の化合物で処理されたマウスは、１００％の生存率を示し、既存の毒性を有する抗癌剤より顕著に毒性が軽減された。本発明の化合物は、抗癌剤として使用でき、関節リウマチ治療剤、糖尿病性網膜症治療剤としても応用できる。

本発明の化合物は、神経細胞を保護する作用を示す。詳細には、鉄に起因する酸化的ストレスによる神経細胞の損傷に対する保護効果が認められ、過酸化水素により誘発された神経損傷に対しても神経細胞の保護効果を示した。したがって、本発明の化合物は、神経細胞の損傷と壊死による新生児仮死、緑内障、糖尿病性神経障害、頭部外傷のような疾患の予防及び治療に使用できる。

また、本発明の化合物は、鉄及び銅による脂質過酸化を抑制し、過酸化水素により誘発されたＡ７ｒ５（ラットの胸部大動脈平滑筋細胞系，ＡＴＣＣ）における細胞内活性酸素種を阻害した。したがって、本発明の化合物は、脂質過酸化と神経細胞内のフリーラジカルの蓄積により誘発される老化、痴呆症のような退行性神経疾患の医学的治療に有用に使用できる。

ラットの摘出心臓を利用したランゲンドルフの虚血心臓モデルで本発明の化合物は、心臓保護の指標になる収縮誘発時間（ＴＴＣ，ｔｉｍｅ ｔｏ ｃｏｎｔｒａｃｔｕｒｅ）を有意に延長させ、虚血後収縮機能（左心室発生圧×心拍数、ＬＶＤＰ×ＨＲ）の回復を増進させ、細胞損傷の指標酵素になる乳酸塩脱水素酵素（ＬＤＨ，Ｌａｃｔａｔｅ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ）の遊離を減少させ、対照薬物のＢＭＳ−１８０４４８と類似の心臓保護作用を示した。本発明の化合物は、ＢＭＳ−１８０４４８やＢＭＳ−１９１０９５よりも血管弛緩作用が弱い。また、麻酔したラットを利用した虚血心筋モデルにおいて、本発明の化合物はＢＭＳ−１８０４４８と類似の抗虚血作用を示した。このように本発明の化合物は、インビトロ及びインビボで優れた抗虚血作用を示すので、心筋梗塞、心不全症、狭心症の予防及び治療の為の心臓保護剤として使用できる。

本発明の化合物は、臨床投与時に経口及び非経口の様々な剤形で投与できる。製剤化する場合には、通常使用されるような充填剤、稀釈剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤等の活性成分または成分を混合して製造できる。経口投与の為の固形製剤には、錠剤、コーティング錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸薬等が含まれ、このような固形製剤は、本発明の一つ以上の化合物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム、スクロース、ラクトースまたはゼラチン等を混和して調製する。また、単純な賦形剤の外にステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も使用できる。

経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤またはシロップ剤等が該当するが、よく使用される賦形剤として、例えば水及び流動パラフィンのような液体希釈剤、湿潤剤、甘味剤、保存剤及び香りと味とを改善する添加剤等が含まれ得る。

滅菌水溶液、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥粉末、坐剤等が含まれる非経口投与のための製剤は、活性成分または活性成分に加えて一般的な水に不溶性の賦形剤及び懸濁剤を含むことができ、それらの例としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物性油、注射可能なエステル等が挙げられる。坐剤の賦形剤としては、ハードファット（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マグロゴール、ツイーン６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロール、ゼラチン等が使用できる。

また、本発明の化合物の人体に対する投与量は、患者の年齢、体重、性別、疾患の程度、剤形の形態及び投与形態により異なり、体重が７０ｋｇの成人患者を基準にすると、一般的に０．０１〜１０００ｍｇ／日であり、好ましくは０．１〜５００ｍｇ／日であり、また、医師または薬剤師の判断に従い、一定間隔で１日１回乃至数回に分けて投与することもできる。従って、ある場合においては、上述の活性成分の量よりも少なくても十分であり、また別の場合においては、上述の量よりも多くする必要がある。活性成分の最適な用量及び投与形態は、医師又は薬剤師が彼らの知識に基づいて決定することができる。

(実施例)
以下において、本発明を実施例によりさらに詳細に説明する。
但し、下記の実施例は、本発明を例示するもので本発明の内容が当該実施例により限定されるものではない。

本発明では、赤外線分光法、核磁気共鳴スペクトル、質量分光法、液体クロマトグラフィー法、Ｘ線構造決定法、旋光度測定法と元素分析により、本発明に従う化合物の分子構造を確認した。

製造例：イミダゾールヘテロ環を含む二次アミンの製造
４−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
２−イミダゾールカルボキシアルデヒド５７０ｍｇ（５．９ｍｍｏｌ）と４−クロロアニリン７５６ｍｇ（５．９ｍｍｏｌ）とをメタノール５ｍｌに溶解後、６０℃で４時間撹拌した。反応温度を室温に下げた後、ＮａＢＨ_４の３３７ｍｇ（８．９ｍｍｏｌ）を加えて更に１時間撹拌した。水２０ｍｌを加えた後、酢酸エチル（５０ｍｌ）で抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、減圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％メタノール／クロロホルム）により精製して、目的化合物６６０ｍｇ（収率５３％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．２７（ｓ，３Ｈ），５．４０（ｂｒｓ，１Ｈ），６．５４（ｍ，２Ｈ），６．９７（ｍ，４Ｈ）。
３−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．３０（ｓ，３Ｈ），６．３３−６．４７（ｍ，Ｈ），６．６３−６．６８（ｍ，１Ｈ），６．９８（ｍ，３Ｈ）。

４−メトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ３．７６（ｓ，３Ｈ），４．３６（ｓ，２Ｈ），６．６６−６．６８（ｍ，４Ｈ），６．９８（ｓ，２Ｈ）。

２−メトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ３．８４（ｓ，３Ｈ），４．４７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝４．６Ｈｚ），４．８１（ｂｒｓ，１Ｈ），６．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８，１．６Ｈｚ），６．６７−６．８６（ｍ，３Ｈ），６．９８（ｓ，２Ｈ）。

４−トリフルオロメトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．３６（ｓ，２Ｈ），６．５０（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．８，２．２Ｈｚ），６．９６−７．２６（ｍ，４Ｈ）。

２−トリフルオロメトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．４７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），４．７２（ｂｒｓ，１Ｈ），６．６１−６．７５（ｍ，２Ｈ），７．００（ｓ，２Ｈ），７．０２−７．１７（ｍ，２Ｈ）。

４−トリフルオロメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．３１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），６．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），６．６８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），６．８７（ｓ，２Ｈ），７．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）。

２−トリフルオロメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．３９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），５．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），６．６８−７．００（ｍ，４Ｈ），７．３５−７．４５（ｍ，２Ｈ）。

４−メチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ２．１８（ｓ，３Ｈ），４．３０（ｓ，２Ｈ），６．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），６．８８−６．９６（ｍ，４Ｈ）。

４−フルオロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．３１（ｓ，２Ｈ），６．４５−６．６１（ｍ，２Ｈ），６．７１−６．９５（ｍ，４Ｈ）。

４−ブロモフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．２６（ｓ，２Ｈ），６．５２（ｂｒｓ，１Ｈ），６．５３−６．５８（ｍ，２Ｈ），６．８７−６．８９（ｍ，２Ｈ），７．１０−７．１６（ｍ，２Ｈ）。

２−イソプロピルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２３−１．２７（ｍ，６Ｈ），４．３６（ｂｒｓ，１Ｈ），４．４７（ｓ，２Ｈ），６．５４−６．５９（ｍ，１Ｈ），６．７６−６．８４（ｍ，１Ｈ），６．９９−７．２８（ｍ，４Ｈ）。

２，６−ジメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ２．１８（ｓ，６Ｈ），４．１９（ｓ，２Ｈ），６．８２−６．９９（ｍ，５Ｈ）。

２，３−ジメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ２．０７（ｓ，３Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），４．３８（ｓ，２Ｈ），４．５６（ｂｒｓ，１Ｈ），６．４６−６．５６（ｍ，２Ｈ），６．８７−６．９５（ｍ，３Ｈ）。

２，４，６−トリメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ２．１６−２．２７（ｍ，９Ｈ），４．１９（ｓ，２Ｈ），６．８２（ｓ，２Ｈ），７．００（ｓ，２Ｈ）。

４−エトキシカルボニルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２８（ｔ，３Ｈ），４．２０（ｑ，２Ｈ），４．３３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），６．５４−６．６３（ｍ，２Ｈ），６．８８（ｓ，２Ｈ），７．６８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）。

１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルベンジルアミン
^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ３．７１−３．８３（ｍ，４Ｈ），６．９０−６．９７（ｍ，２Ｈ），７．０３−７．２４（ｍ，５Ｈ）。

実施例１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
エポキシド化合物（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン４３７ｍｇ（１．５５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２ｍｌ）溶液中に、無水塩化コバルト（ＣｏＣｌ_２）２０２ｍｇ（１．５５ｍｍｏｌ）を加えた。６０℃で１０時間反応させた後、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液５ｍｌを加えて酢酸エチル（３０ｍｌ）で抽出した。有機層を塩水で洗浄して無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた後、減圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製して目的化合物３０４ｍｇ（収率４０％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４９（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），３．６３（ｓ，３Ｈ），４．３２（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｓ，１Ｈ），５．１４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．７５（ｂｒ ｓ，２Ｈ），６．９７（ｍ，４Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｄ，１Ｈ）。

実施例２：（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン１２９ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）と４−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン９５ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物７６ｍｇ（収率３４％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．６６（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），３．８７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），４．２９（ｄ，１Ｈ），４．４３（ｄ，１Ｈ），４．６４（ｓ，１Ｈ），５．６４（ｄ，１Ｈ），６．８３（ｄ，２Ｈ），６．９５（ｍ，４Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｍ，２Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ）。

実施例３：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン１２９ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）と４−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン９５ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物７６ｍｇ（収率３４％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４９（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），４．３２（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｓ，１Ｈ），５．１４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．７５（ｂｒｓ，２Ｈ），６．９７（ｍ，４Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｄ，１Ｈ）。

実施例４：（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン１２９ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）と４−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン１８３ｍｇ（０．８８ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物２６９ｍｇ（収率６３％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．６６（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），３．８７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），４．１３（ｍ，１Ｈ），４．２９（ｄ，１Ｈ），４．４３（ｄ，１Ｈ），４．６４（ｓ，１Ｈ），５．６４（ｄ，１Ｈ），６．８３（ｄ，２Ｈ），６．９５（ｍ，４Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｍ，２Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ）。

実施例５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン３５６ｍｇ（１．２６ｍｍｏｌ）と４−トリフルオロメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン３０５ｍｇ（１．２６ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物１４６ｍｇ（収率２２％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．５１（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｓ，３Ｈ），４．３２（ｍ，３Ｈ），４．５７（ｓ，１Ｈ），５．１４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．８５（ｍ，２Ｈ），６．９５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，２Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄｄ，２Ｈ），８．４２（ｍ，１Ｈ）。

実施例６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン５９１ｍｇ（２．１０ｍｍｏｌ）と４−メトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン４２７ｍｇ（２．１０ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物２８０ｍｇ（収率２８％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４７（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｄ，６Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），４．３０（ｍ，２Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），５．０２（ｄ，１Ｈ），６．６７−６．７８（ｍ，４Ｈ），６．８９−７．２６（ｍ，３Ｈ），８．０４（ｍ，２Ｈ）。

実施例７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン２００ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）と４−トリフルオロメトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン１８３ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物１８１ｍｇ（収率４７％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．５０（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．２−４．５０（ｍ，２Ｈ），４．５８−５．６５（ｍ，２Ｈ），５．１８（ｓ，１Ｈ），６．９１−６．９５（ｍ，７Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例８：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン４００ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）と４−ブロモフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン３５９ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物３１０ｍｇ（収率４１％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４８（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．１０−４．１９（ｍ，２Ｈ），４．２０−４．４０（ｍ，２Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），６．７０−７．０１（ｍ，６Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例９：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン４００ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）と２，４−ジメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン２８７ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物２３１ｍｇ（収率３３％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３９（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｄ，６Ｈ），４．１５−４．８２（ｍ，５Ｈ），６．８０−６．８９（ｍ，５Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ），７．９４−７．９９（ｄｄ，１Ｈ），８．６２（ｍ，１Ｈ）。

実施例１０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン４００ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）と２−イソプロピルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン３０６ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物１４０ｍｇ（収率２０％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２２−１．２９（ｍ，１０Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．０７−４．６３（ｍ，５Ｈ），６．７９−７．３５（ｍ，６Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，１Ｈ），８．６１（ｍ，１Ｈ）。

実施例１１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン４００ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）と２，３−ジメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン２８７ｍｇ（１．４２ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物２５３ｍｇ（収率３７％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３９（ｓ，３Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．２６−４．７４（ｍ，５Ｈ），６．７６−６．９５（ｍ，４Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ），７．９５（ｄｄ，１Ｈ），８．６３（ｄ，１Ｈ）。

実施例１２：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン５００ｍｇ（１．７７ｍｍｏｌ）と２，３−ジメチルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン３５８ｍｇ（１．７７ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物４１６ｍｇ（収率４９％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３９（ｓ，３Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．２６−４．７４（ｍ，５Ｈ），６．７６−６．９５（ｍ，４Ｈ），６．９８（ｍ，１Ｈ），７．５８（ｄ，１Ｈ），７．９５（ｄｄ，１Ｈ），８．６３（ｄ，１Ｈ）。

実施例１３：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン５００ｍｇ（１．７８ｍｍｏｌ）と４−ブロモフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン４５０ｍｇ（１．７８ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物５７０ｍｇ（収率６０％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４８（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．１０−４．１９（ｍ，２Ｈ），４．２０−４．４０（ｍ，２Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），６．７０−７．０１（ｍ，６Ｈ），７．２１（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例１４：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン３００ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ）と４−メトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン２１６ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物４４６ｍｇ（収率８６％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４７（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｄ，６Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），４．３０（ｍ，２Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），５．０２（ｄ，１Ｈ），６．６７−６．７８（ｍ，４Ｈ），６．８９−７．２６（ｍ，３Ｈ），８．０４（ｍ，２Ｈ）。

実施例１５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン８００ｍｇ（２．８４ｍｍｏｌ）と４−フルオロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン３８０ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物６５０ｍｇ（収率４８％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４９（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．３０（ｍ，２Ｈ），４．６０（ｍ，２Ｈ），５．０５（ｍ，１Ｈ），６．７６−６．９７（ｍ，７Ｈ），７．９５（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例１６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン５００ｍｇ（１．７８ｍｍｏｌ）と２−メトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン２５３ｍｇ（１．２５ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物５００ｍｇ（収率５８％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３８（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，１Ｈ），４．６０−４．８４（ｍ，３Ｈ），６．８０−７．０３（ｍ，６Ｈ），７．５８（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，１Ｈ），８．８６（ｍ，１Ｈ）。

実施例１７：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン１００ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）と２−イソプロピルフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン７５ｍｇ（０．３５ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物７２ｍｇ（収率４２％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２２−１．２９（ｍ，１０Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．０７−４．６３（ｍ，５Ｈ），６．７９−７．３５（ｍ，６Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，１Ｈ），８．６１（ｍ，１Ｈ）。

実施例１８：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン５００ｍｇ（１．７８ｍｍｏｌ）と２−メトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン２３１ｍｇ（１．７８ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物５８０ｍｇ（収率６７％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３８（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），３．９１（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，１Ｈ），４．６０−４．８４（ｍ，３Ｈ），６．８０−７．０３（ｍ，６Ｈ），７．５８（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，１Ｈ），８．８６（ｍ，１Ｈ）。

実施例１９：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン５００ｍｇ（１．７７ｍｍｏｌ）と３−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン３６６ｍｇ（１．７７ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物３３７ｍｇ（収率３９％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．５１（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．２０−４．５７（ｍ，２Ｈ），４．５７−４．５９（ｍ，２Ｈ），５．１７（ｓ，１Ｈ），６．６９−６．７３（ｍ，３Ｈ），６．９４−７．０１（ｍ，４Ｈ），７．８９（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例２０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン４５０ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）と３−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン２３２ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物２８０ｍｇ（収率３５％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．５１（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．２０−４．５７（ｍ，２Ｈ），４．５７−４．５９（ｍ，２Ｈ），５．１７（ｓ，１Ｈ），６．６９−６．７３（ｍ，３Ｈ），６．９４−７．０１（ｍ，４Ｈ），７．８９（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例２１：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−６−ニトロ−２Ｈ−１−ベンゾピラン２００ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）と４−トリフルオロメトキシフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン１８３ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物１５５ｍｇ（収率４０％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４９（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．２０−４．５０（ｍ，２Ｈ），４．５８−５．６５（ｍ，２Ｈ），５．１８（ｓ，１Ｈ），６．９１−６．９５（ｍ，７Ｈ），７．９９（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例２２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−シアノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−６−シアノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３，４−エポキシ−２−メチル−２Ｈ−１−ベンゾピラン２１０ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）と４−クロロフェニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン１６７ｍｇ（０．８ｍｍｏｌ）とを使用して、前記実施例１の製造に使用した方法に従って目的化合物１０６ｍｇ（収率２８％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４７（ｓ，３Ｈ），３．５８（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｓ，１Ｈ），５．１６（ｂｒ ｓ，１Ｈ），６．８１−６．９３（ｍ，３Ｈ），７．１７（ｄ，１Ｈ），７．３８（ｓ，１Ｈ），７．５１（ｄｄ，１Ｈ）。

実施例２３：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例３で得たニトロ化合物５２１ｍｇ（１．０７ｍｍｏｌ）をメタノール３ｍｌに溶解後、１０％Ｐｄ／Ｃ５０ｍｇを加えた。３気圧のＨ_２加圧下の室温にて１２時間反応させ、混合物に水素添加した。セライトパッドでろ過して固体を除去して濾液を濃縮させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン中に５％のメタノール）で精製して目的化合物３６８ｍｇ（収率７５％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４２（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｓ，６Ｈ），４．２７（ｍ，２Ｈ），４．４２（ｓ，１Ｈ），４．５２（ｄ，１Ｈ），５．２４（ｍ，１Ｈ），６．２９（ｓ，１Ｈ），６．５８（ｄ，２Ｈ），６．７０（ｄ，２Ｈ），６．９８（ｍ，３Ｈ），７．４１（ｍ，２Ｈ）。

実施例２４：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１で得たニトロ化合物１７７ｍｇ（０．３６ｍｍｏｌ）をメタノール２ｍｌに溶解して、Ｃｕ（ＯＡｃ）_２水溶液０．３８ｍｌ（０．４Ｍ水溶液、０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＢＨ_４）１１３ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）を３０分にわたって徐々に加えた。反応混合物を室温にて１時間撹拌した後、酢酸エチル５ｍｌを加えた。黒色の沈殿物をろ過にて除去し、ろ過された溶液に飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液５ｍｌを加えて酢酸エチル３０ｍｌで抽出した。塩水で有機層を洗浄して無水硫酸ナトリウムで乾燥して溶媒を除去した後、減圧下で濾液を濃縮させてシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：４）で精製して、目的化合物５８ｍｇ（収率３５％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４２（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｓ，６Ｈ），４．２７（ｍ，２Ｈ），４．５２（ｄ，１Ｈ），４．４２（ｓ，１Ｈ），５．２４（ｍ，１Ｈ），６．２９（ｓ，１Ｈ），６．５８（ｄ，２Ｈ），６．７０（ｄ，２Ｈ），６．９８（ｍ，３Ｈ），７．４１（ｍ，２Ｈ）。

実施例２５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例５で得たニトロ化合物６５ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２４の製造に使用した方法に従って目的化合物３４ｍｇ（収率５７％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３８（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，３Ｈ），４．０６−４．８５（ｍ，３Ｈ），４．４１（ｓ，１Ｈ），５．０６（ｂｒｓ，２Ｈ），６．３１（ｓ，１Ｈ），６．５７（ｄ，２Ｈ），６．８０−７．１８（ｍ，７Ｈ）。

実施例２６：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例２１で得たニトロ化合物１００ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物２３ｍｇ（収率２４％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．５０（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．２０−４．５０（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），５．１８（ｓ，１Ｈ），６．３０（ｓ，１Ｈ），６．６０（ｄｄ，２Ｈ），６．７０−６．９６（ｍ，６Ｈ）。

実施例２７：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１２で得たニトロ化合物１３５ｍｇ（０．２８ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物１９ｍｇ（収率１５％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２９（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，６Ｈ），４．４１−４．６３（ｍ，５Ｈ），６．５７（ｄｄ，１Ｈ），６．７０−７．１９（ｍ，６Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ）。

実施例２８：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１４で得たニトロ化合物１００ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物２１ｍｇ（収率２３％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３６（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），４．２０−４．６０（ｍ，３Ｈ），４．４５（ｓ，１Ｈ），４．７０−４．９０（ｍ，２Ｈ），６．５０（ｍ，１Ｈ），６．７０（ｄｄ，１Ｈ），６．８０−７．００（ｍ，６Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ）。

実施例２９：（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１３で得たニトロ化合物１００ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物５０ｍｇ（収率５３％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４８（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．１０−４．１９（ｍ，２Ｈ），４．２２（ｓ，２Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），６．３３−７．１５（ｍ，９Ｈ）。

実施例３０：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１１で得たニトロ化合物７０ｍｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物３５ｍｇ（収率５４％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２９（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｓ，６Ｈ），４．４１−４．６３（ｍ，５Ｈ），６．５７（ｄｄ，１Ｈ），６．７０−７．１９（ｍ，６Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ）。

実施例３１：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１６で得たニトロ化合物８０ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物７４ｍｇ（収率６６％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３０（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），４．１０−４．３０（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｓ，１Ｈ），４．７０−４．９０（ｍ，２Ｈ），６．５０（ｄｄ，１Ｈ），６．７０−７．００（ｍ，７Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ）。

実施例３２：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例６で得たニトロ化合物１０３ｍｇ（０．２１ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物７４ｍｇ（収率７７％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．３６（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），３．６４（ｓ，３Ｈ），４．２０−４．６０（ｍ，３Ｈ），４．４５（ｓ，１Ｈ），４．７０−４．９０（ｍ，２Ｈ），６．５０（ｍ，１Ｈ），６．７０（ｄｄ，１Ｈ），６．８０−７．００（ｍ，６Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ）。

実施例３３：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例９で得たニトロ化合物８６ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物５４ｍｇ（収率６７％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２６（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），３．５８（ｓ，６Ｈ），４．３６−４．５４（ｍ，３Ｈ），４．６０（ｍ，２Ｈ），６．５６（ｄｄ，１Ｈ），６．７０（ｄｄ，１Ｈ），６．８０−７．１５（ｍ，６Ｈ），７．３６（ｄ，１Ｈ）。

実施例３４：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１０で得たニトロ化合物４５ｍｇ（０．０９ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物３０ｍｇ（収率７３％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．２２−１．２９（ｍ，９Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．１０−４．６２（ｍ，５Ｈ），６．５０−６．７７（ｍ，２Ｈ），６．８５−７．３０（ｍ，６Ｈ），７．６０（ｍ，１Ｈ）。

実施例３５：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例７で得たニトロ化合物５０ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物３４ｍｇ（収率７２％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．５０（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．２０−４．５０（ｍ，２Ｈ），４．５９（ｓ，２Ｈ），５．１８（ｓ，１Ｈ），６．３０（ｓ，１Ｈ），６．６０（ｄｄ，２Ｈ），６．７０−６．９６（ｍ，６Ｈ）。

実施例３６：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例８で得たニトロ化合物５０ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物４１ｍｇ（収率８８％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４８（ｓ，３Ｈ），３．６１（ｄ，６Ｈ），４．１０−４．１９（ｍ，２Ｈ），４．２２（ｓ，２Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），６．３３−７．１５（ｍ，９Ｈ）。

実施例３７：（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピランの製造
前記実施例１５で得たニトロ化合物５０ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）を使用して、前記実施例２３の製造に使用した方法に従って目的化合物４４ｍｇ（収率９５％）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １．４９（ｓ，３Ｈ），３．６０（ｄ，６Ｈ），４．３０（ｍ，４Ｈ），４．９８（ｓ，１Ｈ），６．３３（ｓ，１Ｈ），６．５５（ｄｄ，２Ｈ），６．６０−６．９２（ｍ，６Ｈ）。

（実験例）
本発明の化学式１の化合物に対して下記の実験を実施して、様々な薬理作用を調査した。

実験例１：ＨＵＶＥＣ細胞での管形成（Ｔｕｂｅ Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ）抑制効果
化学式１の化合物の新生血管形成抑制活性を主な新生血管形成段階であるヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ（Ｈｕｍａｎ Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ Ｖｅｉｎ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｃｅｌｌ））の血管形成アッセイで測定した。

ＨＵＶＥＣ細胞をヒト臍静脈から分離して培養した。血管内皮細胞のＨＵＶＥＣ細胞を融合培養でパッサージ（ｐａｓｓａｇｅ）５以内で分離して、塩基性繊維芽成長因子（ｂＦＧＦ）が減少され、かつ高分子化されたマトリゲル（ｍａｔｒｉｇｅｌ）膜上に平板培養した。マトリゲル培養物は、前記化学式１の化合物の存在時と存在しない時にて培養し、細胞形態の変化は、相対比顕微鏡にて観察し、写真に撮影した。

試験化合物が管形成に及ぼす影響を、溶媒（ｖｅｈｉｃｌｅ）のみで処置した対照群と比較観察することにより、新生血管形成抑制作用を間接的にインビトロで確認した。結果は、下記表１に示した。

上記表１から分かるように、実施例２の化合物は、１０μＭの濃度でＨＵＶＥＣ細胞の管形成を強く抑制し、１００μＭの濃度では、管形成が認められず、用量依存的に強い抑制効果を示した。実施例３、５、１０の化合物は、５０μＭの濃度で強い管形成抑制効果を示し新生血管形成抑制効果が明確であった。特に、実施例２３の化合物は、５０μＭの濃度で管形成がまったく見られず強力な新生血管形成抑制効果を示した。本発明の化合物は、主な新生血管形成の段階である、血管形成を阻害することにより新生血管形成抑制作用を示した。

このように、本発明の化合物は、新生血管の形成を抑制する効果に優れているので、癌、関節リウマチ、糖尿病性網膜症、乾癬、エイズ合併症のような新生血管形成により誘導される様々な疾病治療に対して有用に使用できる。

実験例２：インビボにおけるマウスのマトリゲルプラグアッセイ
化学式１の化合物の生体内血管新生抑制活性を測定するために、マウスマトリゲルプラグアッセイを実施した。

Ｃ５７ＢＬ／６マウスにマトリゲルとヘパリン（３０ユニット）と塩基性繊維芽成長因子（２５ｎｇ）との混合物を皮下注射した。試験化合物をマトリゲル混合物に混ぜて皮下注射（２．２ｍｇ／ｍｌ）するか、または１日に２ｍｇずつ（１ｍｇずつ１日２回）を４日間（総量８ｍｇ／匹）経口投与した。４〜７日後にマウスの表皮を除去してマトリゲルプラグを摘出した。ドラブキン（Ｄｒａｂｋｉｎ）試薬（Ｋｉｔ５２５，Ｓｉｇｍａ社）とドラブキン法を使用してマトリゲルプラグ内のヘモグロビン量を測定した後、血管形成を定量的に測定して表２に示した。

上記表２から分かるように、実施例１の化合物は皮下注射（２．２ｍｇ／ｍｌ）及び経口投与（８．８ｍｇ／匹）によりマトリゲルのヘモグロビン量を各々７９％、９４％抑制し、インビボで血管生成抑制効果を有意に示した。

このように、本発明の化合物は、インビボで新生血管の形成を抑制する効果に優れているので、癌、関節リウマチ、糖尿病性網膜症、乾癬、エイズ合併症のような新生血管形成により誘導される様々な疾病治療に有用に使用できる。

実験例３：ＣＡＭ（ｃｈｏｒｉｏａｌｌａｔｏｎｉｃ ｍｅｍｂｒａｎｅ）アッセイ
化学式１の化合物の新生血管形成抑制活性を測定するために次のようなニワトリのインビボＣＡＭアッセイを実施した。

受精卵（ｃｈｉｃｋ ｅｇｇ）を一定の９０％に維持した湿度下において、３７℃の孵化機で３日間培養した。培養後３日目に卵内のアルブミン約２ｍｌを卵の狭い方の末端に設置した小さな穴を通じて１８ゲージ皮下注射器で抜き取り、卵のシェルから生成したＣＡＭ外膜を除去した。空気袋を覆っているシェルに穴を開けてピンセットで除去し、空気袋の底面の層膜を剥がした。更に２日間培養した後、化合物が塗布されたサーマノクスカバースリップ（ｔｈｅｒｍａｎｏｘ ｃｏｖｅｒｓｌｉｐ）を空気乾燥させ、試験化合物の新生血管形成抑制作用を試験するためにＣＡＭ上に載せた。再び３日後、注射器を使用して１０％脂質乳剤（Ｉｎｔｒａｌｉｐｏｓｅ）１乃至２ｍＬをＣＡＭに注入し、無血管領域を解剖顕微鏡で観察した。陰性対照群にはサーマノクスカバースリップのみが移植され、陽性対照群はレチノイン酸（１μｇ／卵）にて処理された。

ＣＡＭがレチノイン酸で処理したものと類似な無血管領域を呈する反応は、陽性として記録され、試験した卵の総数に対する陽性卵の百分率（％）を計算した。独立的な実験を３回反復して少なくとも２０個以上の卵を各実験に使用した。

サーマノクスカバースリップのみが移植された陰性対照群は、既存の管から新しい血管を形成し、未処理のＣＡＭで観察されたものと類似の通常の血管発達を示した。レチノイン酸で処理した陽性対照群は微細血管の形成、特に太い血管形成を有意に阻害した。前記表３から分かるように、実施例１の化合物は０．５μｇ／卵、１．５μｇ／卵の濃度にて、各々約６２％、８４％の抑制効果を示した。実施例１の化合物による陽性反応は顕著であり、鶏胚芽新生血管形成に対する抑制効果は、用量依存性であった。
このように、本発明の化合物は、インビボＣＡＭアッセイにおける新生血管形成を抑制する効果に優れているので、癌、関節リウマチ、糖尿病性網膜症、乾癬、エイズ合併症のような新生血管形成により誘導される種々の疾病治療に有用に使用できる。

実験例４：ヌードマウスを使用したヒト腫瘍の異種移植
化学式１の化合物が、ヌードマウスに移植されたヒト腫瘍の成長を阻害するかどうかを調べるためにヒト腫瘍異種移植実験を実施した。

実験に使用したヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃ ｎｕ／ｎｕ，オス）は、チャールズリバージャパン社（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｊａｐａｎ，Ｉｎｃ．）から購入して、ＮＩＨにて定められている規定にしたがってＳＰＦ（Ｓｐｅｃｉａｌ Ｐａｔｈｏｇｅｎｅ Ｆｒｅｅ）管理下で飼育し、実験した。ヒトの非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）から分離したＡ５４９細胞は、ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ ｔｉｓｓｕｅ ｃａｎｃｅｒ ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，米国）から購入して韓国化学研究院で継代維持したものを使用した。移植した腫瘍の成長に対する本発明の化合物の効果は、癌の大きさを比較して測定した。また、ヌードマウスの体重変化、生存率（％）も測定した。

（１）Ａ５４９ ＮＳＣＬＣ成長阻害
ヌードマウスは、購入後２〜３週間実験室に適応させた後、８週齢（体重が１８〜２０ｇの範囲内のもの）のオスのヌードマウスを選んで癌を移植した。

Ａ５４９腫瘍異種移植は、３×３×３ｍｍ^３サイズにカットしてヌードマウスの右側腋の皮下に移植した。細胞移植から２４時間経過後、薬物投与を始めた。その時を最初の日（第１日）とした。薬物投与は、対照群は０．５％ツイーン８０を含有するＰＢＳを、実験群は実施例２３の化合物（５０ｍｇ／ｋｇ）を２０日間連続して１日に一回腹腔に投与した。癌の体積（Ｖ）は、カリパー（ｃａｌｉｐｅｒ）を使用して下記の数式１を用いて測定した。該数式１において、ａは腫瘍を横断する最も長い径であり、かつｂは対応する垂直な短い径である。

阻害率（％）は、（１−（Ｖ_Ｔ）_ｎ／−（Ｖ_Ｃ）_ｎ）×１００として計算され、ここで、（Ｖ_Ｔ）_ｎ及び（Ｖ_Ｃ）_ｎはそれぞれ、化合物を投与後、ｎ日目における実験群と対照群との平均腫瘍体積である。

各群は８匹のマウスより構成され、統計学的な有意性は、スチューデントＴ検定（＊ｐ＜０．０５）で示した。

表４に示したように、実施例２３の化合物は、Ａ５４９ＮＳＣＬＣ細胞の成長を薬物投与開始日から４５日乃至６５日には、５０％乃至５２％の有意性にて抑制した。このように本発明の化合物は、新生血管形成抑制効果のみならずインビボにおけるヒト腫瘍異種移植試験において優れた抗癌効果を示すので、抗癌剤として使用できる。

（２）マウス体重変化における効果
化学式１の化合物によるマウスの体重変化の効果を調べた。ヌードマウスの体重は、薬物投与を開始した日から５日間隔で動物用秤（ＡＮＤ ｂａｌａｎｃｅ）を使用して求め、対照群（Ｗ_Ｃ）と実験群（Ｗ_Ｔ）の各々の平均値を求めた。

表５に示されるように、実施例２３の化合物は体重増加に対する遅延又は体重減少が見られないので、本発明の化合物は体重増加の遅延又は体重減少の副作用もなく抗癌剤として使用され得る。

（３）マウス生存率における効果
化学式１の化合物投与による毒性を決定するためにマウスの生存率が測定され、時間経過によるＡ５４９癌を移植したマウスの生存率を示した。生存率は薬物投与を開始した最初の日のマウスの匹数（Ｎ_０）と、薬物投与後ｎ日経過後のマウスの匹数（Ｎ_ｎ）を測定して下記の数式２を用いて示した。

表６に示されるように、実施例２３の化合物は１００％の生存率を示し、既存の細胞毒性を有する抗癌剤に比べて副作用と毒性が顕著に減少したことを示している。したがって、本発明の化合物は有意に毒性を低減することにより腫瘍の成長に対して優れた抑制効果を示し、よって抗癌剤として有用に使用できる。

実験例５：鉄誘発神経細胞損傷に対する保護作用
化学式１の化合物が鉄の誘発による神経細胞の損傷及び壊死を抑制するか否かを調べるために、下記の実験を行なった。

生後１７〜１８日の胎児ラットの脳から大脳皮質神経細胞（ｃｏｒｔｉｃａｌ ｎｅｕｒｏｎ）を分離して５％ＣＯ_２培養器を用いて、３７℃で７乃至９日間培養した。神経細胞培養液を最小必須培地（ＭＥＭ）で二回洗浄し、血清の濃度を０．２％に低減し、最終濃度が各々３０、７．５、１．８７５及び０．４６９μＭになるように試験化合物を添加して３０分間前処理した。ここで、試験化合物はＤＭＳＯに溶解後、培地にて希釈した。ここで、ＤＭＳＯの最終濃度は、０．２％を越えないようにした。対照群としては、溶媒のみを添加したものを使用した。

試験化合物または溶媒にて前処理後、最終濃度が５０μＭになるようにＦｅＳＯ_４を添加してＣＯ_２培養器で２４時間培養した。培養過程において、鉄の酸化毒性により神経細胞が壊死したことにより乳酸塩脱水素酵素（ＬＤＨ）が放出された。培地に放出されたＬＤＨの量を測定することにより、神経細胞の損傷の程度を評価した。試験化合物の神経細胞保護効果は、対照群のＬＤＨ放出量を基準にした時、実験群のＬＤＨ放出量の減少率を計算して評価し、用量神経保護効果反応曲線を求め、最少線形回帰（ｌｅａｓｔ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）分析を通じてＩＣ_５０を算出した。結果は、下記表７に示した。

表７に示されるように、実施例２の化合物は６．２μＭのＩＣ_５０を示し、ＬＤＨ放出量を９２％抑制し、鉄誘発による神経細胞の損傷を保護する効果を備え得る可能性を示した。

本発明の化合物は、鉄により誘発さる神経毒性に対して優れた神経細胞保護作用を示すため、神経細胞の損傷または壊死により誘発される脳卒中、痴呆症等の退行性神経系疾患のみならず、関節炎等の炎症性疾患、心筋梗塞症、急性／慢性の組織損傷の予防剤または治療剤として有用に使用できる。

実験例６：鉄により誘発される脂質過酸化抑制効果
化学式１の化合物が鉄により誘発される脂質過酸化を抑制する効果を調べるために、下記の実験を行なった。

ラットの脳をクレブス緩衝液（１５ｍＭ ＨＥＰＥＳ，１０ｍＭグルコース，１４０ｍＭ ＮａＣｌ，３．６ｍＭ ＫＣｌ，１．５ｍＭ ＣａＣｌ_２，１．４ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４，０．７ｍＭ ＭｇＣｌ_２，ｐＨ７．４）に溶解してホモジナイズさせた後、１２，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して上澄み液を脂質の原料に使用した。脳均質物に最終濃度が４００μＭになるようにＦｅＣｌ_２を加えて３７℃で３０分間放置して酸化を促進させた。ここで、試験化合物の各々を３０μＭの濃度にて添加した。対照群には、溶媒のみを添加したものを使用した。

脳均質物に鉄が添加されると酸化が促進され、脂質過酸化産物であるマロンアルデヒド（Ｍａｌｏｎａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）の量が増加する。従って、ＭＤＡ定量法で脂質過酸化度を判定した。試験化合物の脂質過酸化抑制効果は、対照群のＭＤＡ量を基準にした時、実験群のＭＤＡの量の減少の程度を計算することにより評価した。

ＭＤＡ定量法は試料を２−チオバルビツール酸（ＴＢＡ）と反応させて５３０ｎｍでの吸光度を測定することが一般的であるが、沸騰段階が含まれるので大容量の試料を処理するには不適当である。したがって、本発明では、ＴＢＡの代りにＮ−メチル−２−フェニルインドールを使用した。この場合、一分子のＭＤＡと二分子のＮ−メチル−２−フェニルインドールが反応して発色体を形成し、この発色体は、５８６ｎｍで最大吸光度を示すので、沸騰段階を必要としない。Ｂｉｏｘｙｔｅｃｈ（登録商標）ＬＰＯ−５８６キットをＭＤＡの定量に使用した。実験結果は下記表８に示した。

表８に示されるように、本発明の化合物は鉄誘発性脂質過酸化を抑制した。特に、実施例２４、２５の化合物は３０μＭの濃度で各々８３％、９７％の抑制率を示し、鉄による脂質過酸化を抑制する効果が強力であることが明らかとなった。

したがって、脂質過酸化に対して優れた抑制効果を備えることから、本発明の化合物は、脂質過酸化が促進され組織内に酸化物質が蓄積されて誘発される、脳卒中、痴呆症等の退行性神経系疾患のみならず、関節炎等の炎症性疾患、心筋梗塞症、急性／慢性組織損傷の予防剤または治療剤として有用に使用できる。

実験例７：ラット摘出血管に対する弛緩作用
化学式１の化合物が血管を弛緩させる作用を有するか否かを調べるために、下記の実験を行なった。

ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｙラット、 オス，３５０〜４５０ｇ，韓国化学研究院実験動物室から入手）の後頭部を強打して気絶させて頚動脈を通して失血させた後、胸の部分を切開した。胸廓大動脈を迅速に摘出し、脂肪組織等を除去して幅３ｍｍの大動脈環を得た。内皮を除去するために、大動脈を改良されたクレブスヘンセレイトバッファー（Ｋｒｅｂｓ Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ ｂｕｆｆｅｒ）（生理液、ＰＳＳ）で湿らせた綿棒で血管内壁を軽く擦った。血管組織を、生理液を入れた水槽（ｏｒｇａｎ ｂａｔｈ）内に吊して２ｇの停止張力（ｒｅｓｔｉｎｇ ｔｅｎｓｉｏｎ）を加えた。３７℃にて、９５％のＯ_２と５％のＣＯ_２との混合気体からなるカルボゲン（ｃａｒｂｏｇｅｎ）を供給しながらこの状態で１時間程度安定化させた。

その後、１０^−５Ｍフェニレフリンを加え血管組織を収縮させて、生理液で数回洗浄し、この操作を繰り返し、血管平滑筋の収縮／弛緩反応が再現性を持って誘発されるようにした。

一方、血管平滑筋は、３×１０^−６Ｍメトキサミンを加えて強く収縮するようにした。メトキサミンによる血管収縮反応が頂点に到達してそのまま維持された時、各々の水槽に試験化合物及び対照物質を１、３、１０、３０μＭの濃度にて累積的に加え、血管の弛緩作用を誘導させた。ここで、対照群の物質として、クロマカリム（Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）、ＢＭＳ−１８０４４８及びＢＭＳ−１９１０９５を使用した。

試験化合物を投与した後、メトキサミンによる最高収縮力の変化率を計算して濃度弛緩反応曲線を求めた。線形回帰分析を通じて、血管組織が５０％弛緩した際の薬物の濃度であるＩＣ_５０を各化合物に対して求めた。結果は、下記表９に示した。

クロマカリムは、ＩＣ_５０が０．０６７μＭであり、メトキサミン（３μＭ）で収縮したラット摘出大動脈に対して強力な弛緩作用を示し、ＢＭＳ−１８０４４８とＢＭＳ−１９１０９５は、ＩＣ_５０が各々１．３８μＭ、２．１４μＭであり、クロマカリムに比べて約２０倍及び３０倍程度弱い血管弛緩作用を示した。一方、実施例１の化合物はＩＣ_５０が９．８３μＭであり、対照薬物として公知のクロマカリム、ＢＭＳ−１８０４４８及びＢＭＳ−１９１０９５より血管弛緩作用が顕著に低かった。

本発明の化合物は、心臓に存在するＫ_ＡＴＰに作用すると心臓を保護するように機能する。一方、末梢血管平滑筋に存在するＫ_ＡＴＰに作用するＫ_ＡＴＰ開始剤は血管を弛緩させ血圧を下げる働きをする。血圧降下作用は、冠状動脈の潅流圧の低下を起こし、心臓保護効果をマスクするので、心筋虚血の治療における使用に制限を受ける。したがって、本発明の化合物は血管弛緩作用が弱いことから、心臓保護剤として最適であることが分かる。

上記したように、本発明の化合物は、血管を弛緩させる作用が非常に弱く、心臓保護機能に対する選択性が改善されるものである。
実験例８：ラットの摘出虚血心臓に対する心臓保護作用
化学式１の化合物が、インビトロにおいて摘出心臓で虚血心臓を保護する作用を示すかどうか調べるために、ラットの摘出心臓に対する抗虚血効果を以下のように実施した。

全てのインビトロの研究に対し、摘出ラット心臓には、若干の修正を加えた下記の刊行物に記載の方法を使用した［ＨＪ Ｒｉｎｇ，Ａｒｚｎｅｉｍ−Ｆｏｒｓｃｈ．／Ｄｒｕｇ Ｒｅｓ．１９８９年、第３９（ＩＩ）巻、１５３５頁：Ｔ．Ｋｒｚｅｍｉｎｓｋｉ等，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ，１９９１年、第２５巻、９５頁］。

オスのＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系ラット（３００〜４５０ｇ）にペントバルビタールナトリウムを１００ｍｇ／ｋｇにて腹腔内注射して麻酔した後、ヘパリン１０００Ｕ／ｋｇを尾の静脈に投与して気管に挿管した。詳細には、齧歯類呼吸器（ｒｏｄｅｎｔ ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ）モデル７０２５（Ｕｇｏｂａｓｉｌｅ，イタリア）を使用して人工呼吸させ、その状態で大動脈カニューレを大動脈に挿入して酸素供給されるよう修正したクレブスヘンセレイトバイカーボネートバッファ（ｏｘｙｇｅｎａｔｅｄ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｋｒｅｂｓ−Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ ｂｉｃａｒｂｏｎａｔｅ ｂｕｆｆｅｒ）と共に心臓を元の位置に戻して潅流させた。心臓を摘出し、ランゲンドルフ機器（Ｈ．Ｓ．Ｅ．，ドイツ）に移動させ、定圧潅流（８５ｍｍＨｇ）下で酸素供給されるよう修正したクレブスヘンセレイトバイカーボネートバッファ（組成＜ｍＭ／Ｌ＞：ＮａＣｌ１１６，ＮａＨＣＯ_３２４．９，ＫＣｌ４．７，ＭｇＳＯ_４１．１，ＫＨ_２ＰＯ_４１．１７，ＣａＣｌ_２２．５２，グルコース８．３２及びピルビン酸塩２．０））で潅流させた。エタノールと水との混合液（１：１ｖｏｌ／ｖｏｌ）で満したゴム風船（ｌａｔｅｘ ｂａｌｌｏｏｎ）が連結された金属カニューレを、肺静脈を通じて左心室に挿入して左心室圧（ＬＶＰ）を測定するためにイソテック（Ｉｓｏｔｅｃ）（Ｈ．Ｓ．Ｅ．，ドイツ）に連結した。心臓を１５分間安定化させた後、左心室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ，ｌｅｆｔ ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｅｎｄｄｉａｓｔｏｌｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ）を５ｍｍＨｇで与えてこの風船体積を実験期間中維持させた。ベースラインの心臓収縮機能と心拍数（ＨＲ）及び冠状血流（ＣＦ）（体外電磁気流動探針，Ｎａｒｃｏ Ｂｉｏ−Ｓｙｓｔｅｍ社，米国）を測定した。心臓収縮機能を評価する指標である左心室発生圧（ＬＶＤＰ）は、左心室最大収縮期圧（ＬＶＳＰ）と左心室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）の差を算出した。心臓の機能を調べる重要な指標である心拍数・圧力の積（Ｄｏｕｂｌｅ ｐｒｏｄｕｃｔ，ＤＰ）は、心拍数（ＨＲ）に左心室発生圧（ＬＶＤＰ）を掛けて計算した。実験の間、これら全てのパラメータを測定計算し、該測定は、各化合物にて前処理する前及び前処理から１０分後並びにバッファにて再灌流を開始後３０分において行った。再潅流ＤＰ関するデータは前処理ＤＰに対する百分率でさらに示した。

１５分間安定化させた後、心臓は溶媒（０．０４％ジメチルスルホキシド）または一定濃度の薬物を含む溶液（１０μＭ，０．０４％ジメチルスルホキシド）で各々１０分間、全虚血の徴候が現われる前に前処理した。即ち、試験薬物は、潅流に対して逆に戻る形態で即時大動脈起始部の上方にランゲンドルフ器具の酸素供給器で直接的に投与した。次いで、潅流液供給を完全に遮断して３０分間心臓全虚血（ｇｌｏｂａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ）を誘発した。全虚血期間の間、左心室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）が最初に５ｍｍＨｇ上昇するまでに所要した時間（分）を収縮誘発時間として計算した。心臓を３０分間再潅流した後に、各収縮関数（ＬＶＤＰ，ＤＰ）と蓄積再潅流乳酸塩脱水素酵素（ＬＤＨ）の放出を測定した。ＬＤＨは細胞生存能力の損傷に対する感応度指数であり、ウレブレスキー（Ｗｒｏｂｌｅｗｓｋｉ）とラドウ（ＬａＤｕｅ）の技術に基づいたベリンガーマンハイム社が供給するキットで測定した。［Ｆ．Ｗｒｏｂｌｅｗｓｋｉ及びＪＳ．Ｌａ Ｄｕｅ，Ｐｒｏｃ Ｓｏｃ Ｅｘｐ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ，１９５５年、第９０巻、２１０頁］

上記表１０に示されるように、収縮機能の指標であるＤＰ（ＬＶＤＰ×ＨＲ）が、再潅流後に薬物投与前の２３．０％に低下した。ＥＤＰも５ｍｍＨｇから４３．４ｍｍＨｇｍで増加し、ＴＴＣは２０．３分であった。ＬＤＨの再潅流時の放出量は２９．９Ｕ／ｇであった。ＢＭＳ−１８０４４８投与群は、再潅流後の心筋収縮機能（ＤＰ，ＬＶＤＰ×ＨＲ）が薬物投与前のＤＰの６７．６％であり、溶媒処理群に比べて顕著に増加した。ＥＤＰは１６．５ｍｍＨｇであり、対照処理群より有意に低い値であった。ＴＴＣは２７．８分と、対照群より延長され、再潅流時ＬＤＨ放出量は１７．２Ｕ／ｇであり、対照群より減少した。ＢＭＳ−１８０４４８にて処理された群では、全てのパラメータが有意に虚血心臓に対する明確な保護効果を示した。実施例１の化合物は、ＢＭＳ−１８０４４８と類似の良好な心臓保護効果を示し、心筋収縮機能（ＬＶＤＰ×ＨＲ）が薬物投与前の５５．７％、ＥＤＰは２４．０ｍｍＨｇ、ＴＴＣは２８分、再潅流時ＬＤＨ放出量は１０．７Ｕ／ｇであった。しかしながら、実施例１の化合物は血管弛緩作用がＢＭＳ−１８０４４８（ＩＣ_５０＝１．３８μＭ）よりも７倍低く（ＩＣ_５０＝９．８３μＭ）、心臓選択性の抗虚血活性がＢＭＳ−１８０４４８より優れていることが明らかとなった。このように本発明の化合物は、心筋梗塞、心不全症、狭心症等の虚血性心血管疾患に対して優れた選択性と保護作用を備えており、虚血性心疾患の予防及び治療のための心臓保護剤として使用できる。

実験例９：ラットの虚血心臓モデルに対する心臓保護作用
化学式１の化合物が、虚血心臓を保護する作用を示すかどうか調べるために、ラットに対する該化合物の抗虚血効果に対する実験を以下のように実施した。

オスのラット（３５０〜４５０ｇ、韓国化学研究院実験動物室より入手）にペントバルビタールを７５ｍｇ／ｋｇの用量にて腹腔注射して、麻酔した。器官切開術を実施した後、１０ｍｌ／ｋｇの一回拍出量にて、一分当り６０の心拍数で人工呼吸を実施した。大腿静脈と大腿動脈にカニューレを挿入して、各々、薬物投与及び血圧測定に使用した。

一方、虚血性心筋損傷モデルにおいて、体温は結果に重要な影響を及ぼす。体温変化を避けるために、各ラットの直腸に体温測定用探針を挿入し、恒温被覆調節ユニット（ｈｏｍｅｏｔｈｅｒｍｉｃ ｂｌａｎｋｅｔ ｃｏｎｔｒｏｌ ｕｎｉｔ）を使用して、ラットの体温を３７℃にて一定に維持させた。

以後、実験期間中、ラットの平均動脈圧と心拍数（ＨＲ）を継続して測定した。血圧測定には、シュタータムＰ２３ＸＬ圧力変換機（Ｓｔａｔｈａｍ Ｐ２３ＸＬ，Ｇｒａｓｓ社，米国マサチューセッツ州）を使用し、心拍数測定には血流速度計（ＥＣＧ／ＲＡＴＥ Ｃｏｕｐｌｅｒ，Ｈｕｇｏ Ｓａｃｈｓ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ社，ドイツ）を使用した。また、ゴード２０００チャート記録機（Ｇｒａｐｈｔｅｃ Ｌｉｎｅａｒｃｏｒｄｅｒ ＷＲ ３３１０，Ｈｕｇｏ Ｓａｃｈｓ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ社）を使用して、全ての変化を連続的に記録した。

左冠状動脈は、セリー（Ｓｅｌｙｅ Ｈ．）の方法により下記のように結紮させた。即ち、左開胸術によりラットの胸の一部を開いて、左手の中指で麻酔されたラットの右側胸に圧力を加えて心臓を外部に押し出した。以後、手術糸（５−０絹糸結紮）が付着した縫合用針で注意深く左冠状動脈前下降枝（以下、「ＬＡＤ」と記載）を含む部分を縫った後、すばやく心臓を胸廓腔に再配置させて手術糸両端を外部に位置させた。手術糸の両端はＰＥチューブ（ＰＥ１００，２．５ｃｍ）に通過させた後、２０分間そのままにしておいて安定化させた。その後、大腿静脈に挿入されたカニューレを通じて、溶媒または薬物を投与した。薬物の効果が充分に現われるように３０分間そのまま放置した。ここで、対照群の薬物にはＢＭＳ−１８０４４８を使用し、試験薬物及び対照薬物は、０．３ｍｇ／ｋｇの濃度で静脈内投与した。

次いで、糸にはめておいたＰＥチューブを心臓に押し入れ、チューブの端部の糸を止血ピンセットで引張ってＰＥチューブを冠状動脈に垂直に密着させ圧力を加えた。４５分間そのままにして冠状動脈を結紮（閉塞）させた後、止血ピンセットをはずして９０分間再潅流させた。

前記方法により冠状動脈を再結紮させて、１％エバンスブルー溶液２ｍｌを静脈投与した。次いで、過量のペントバルビタールを静脈投与してラットを屠殺して心臓を取出し、右心室と両側の心房を除去した。左心室は心尖から５６個の切片にスライスして、切片各々の重さを測定した。心臓切片各々の表面はハイスコープ（Ｈｉ−ｓｃｏｐｅ）と画像分析用コンピュータプログラム（Ｉｍａｇｅ Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ）を使用してコンピュータに入力させて、これら各切片においてブルーカラーに着色された正常血流組織の面積と着色されていない領域の面積を測定した。各切片の総面積に対する着色されていない領域の面積比を求めて、そこに各切片の重さを掛けて各切片の危険領域であるＡＡＲ（ａｒｅａ ａｔ ｒｉｓｋ）を計算した。このようにして求めた各切片に対するＡＡＲを全て合わせてこれを全体左心室の重量で割って、下記数式３によりＡＡＲ（％）を求めた。

また、心臓切片を２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライド（ＴＴＣ）リン酸緩衝溶液（３７℃、ｐＨ７．４）で１５分間培養し、１０％ホルマリン溶液で２０〜２４時間固定させた。この固定により、心筋の脱水素酵素と補助因子であるＮＡＤＨにより２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドが還元されホルマザン染料になり、組織の正常部位は赤い煉瓦色を帯びるようになる。これに対し、組織の梗塞部位には脱水素酵素と補助因子が存在しないので、２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドが還元されず、色の変化は認められなかった。

上記のように２，３，５−トリフェニルテトラゾリウムクロライドにより組織部位が着色されるか否かによって各左心室切片の正常領域及び梗塞領域を前記ＡＡＲ測定時と同一な方法で求めた。各切片に対する梗塞領域を全て合わせてこれを全体ＡＡＲ重量または全左心室重量で割って、下記数式４によりＩＺ（％）を求めた。

上記表１１に示されるように、麻酔されたラットを使用した虚血心筋損傷モデルでも、溶媒処理群は危険領域（ＡＡＲ）に対する心筋梗塞率（ＩＺ／ＡＡＲ、％）が６０．８％で、心筋に深刻な損傷が存在することを示す。ＢＭＳ−１８０４４８を投与した場合には、心筋梗塞率は３９．１％であり、顕著な抗虚血作用を示した。心筋梗塞率のみを比較した場合、実施例１の化合物はＢＭＳ−１８０４４８と類似していた。しかしながら、実施例１の化合物はＢＭＳ−１８０４４８（ＩＣ_５０＝１．３８μＭ）と比較して血管弛緩作用がかなり弱く（ＩＣ_５０＝９．３８μＭ）、血管弛緩作用に対する心臓選択性がＢＭＳ−１８０４４８よりはるかに優れているということが明らかである。また、本発明の化合物は血圧を減少させる作用も示さなかった。このように、本発明の化合物は心筋梗塞、心不全症、狭心症等の虚血性心血管疾患に対して優れた保護作用を有するので、虚血性心疾患の治療のための治療剤として使用できる。

実験例１０：ラットに対する経口投与急性毒性実験
一方、化学式１の化合物の毒性を調べるために下記の実験を行なった。
６週齢の特定病原不在（ＳＰＦ）ＳＤ系ラットを使用して、一群２匹のラットに急性毒性実験を実施した。実施例１乃至３７から得た化合物を各々０．５％メチルセルロース溶液に懸濁して１０ｍｇ／ｋｇ／１５ｍｌの用量で単回経口投与した。

投与後、動物は、毒性、又は死亡の臨床症状及び体重変化等が観察され、観察期間後に生存しているラットをエーテル麻酔下に開腹術をして血液試料を腹部大動脈から得て血液学的検査と血液生化学的検査を実施した。ラットを屠殺し、肉眼で臓器と組織の異常の有無を観察した。肉眼で見て生きている器官の組織試料を除去して１０％中性ホルマリンバッファー溶液に固定させて、組織病理学の基本的な手順にしたがい処理して光学顕微鏡で調査した。

臨床症状、体重及び死亡において有意な変化は認められなかった。また、血液検査、血液生化学パラメータ、剖検所見等でも薬物に起因する変化は観察されなかった。以上の結果、実験した化合物は全てラットで１０ｍｇ／ｋｇの用量まで毒性変化を示さないため、ラットにおける経口投与最小致死量（ＬＤ_５０）は、１００ｍｇ／ｋｇ以上であると判断された。

本発明は、例示的な方法で示したもので、使用した技術は限定的なものというよりは、記載の性質を有するものであると理解されるであろう。本発明に対する多くの修正と変化が前記示唆を考慮して可能である。ゆえに、添付した請求の範囲内において、本発明は、上記した特定の記載以外においても実施され得ることは理解されるであろう。

製剤例
化学式１の化合物を活性成分として含む製薬組成物は、経口または非経口で投与できる。経口投与のための錠剤、粉末及びカプセルの製造方法と非経口投与のための注射剤の製造方法を下記に例示するが、本発明がこれらに限定されるものではない。

＜製剤例１＞錠剤の製造（直接加圧）
活性成分として化学式１の化合物を５．０ｍｇ含有する錠剤は以下のように製造された。５ｍｇの化合物を粉砕し、篩にかけた後、ラクトース１４．１ｍｇ、クロスポビドンＵＳＮＦ０．８ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム０．１ｍｇを混合した。得られた混合物を加圧して錠剤に製造した。

＜製剤例２＞錠剤の製造
活性成分として化学式１の化合物を５．０ｍｇ含有する錠剤は以下のように製造された。５ｍｇの化合物を粉砕し、篩にかけた後、ラクトース１６．０ｍｇと澱粉４．０ｍｇを混合した。ポリソルベート８０ ０．３ｍｇを純粋な水に溶解後、この溶液の適当量を添加した。得られた混合物を粉砕し、微粒を篩にかけた後、乾燥させた。コロイダルシリコンジオキサイド２．７ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム２．０ｍｇを加えて混ぜた。得られた混合物を従来の方法により錠剤に製造した。

＜製剤例３＞粉末とカプセル剤の製造
化合物５．０ｍｇを篩にかけた後、ラクトース１４．８ｍｇ、ポリビニルピロリドン１０．０ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム０．２ｍｇと共に混合した。得られた混合物混合し、従来の方法により適切な装置を使用して、ゼラチンカプセル（Ｎｏ．５）に充填した。

＜製剤例４＞注射剤の製造
化学式１の化合物を活性成分として１００ｍｇと、マニトール１８０ｍｇと、Ｎａ_２ＨＰＯ_４・１２Ｈ_２Ｏ２６ｍｇと、蒸溜水２９７４ｍｇとを含有する注射剤を製造した。

Claims (11)

1. 下記の化学式１で表示されるイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体、その立体化学異性体及びその製薬的に許容される塩。
   

   

   （式中、Ｒ^１はＨ、ＣＮ、ＮＯ_２またはＮＨ_２であり、Ｒ^２は、ＣＨ_３、
   

   

   または
   

   

   であり（ここで、Ｒ^ａは、Ｃ_１〜Ｃ_４の直鎖または側鎖アルキル基であり、かつＺは、Ｃ_２〜Ｃ_６の直鎖または側鎖アルキル基である）、
   Ｒ^３及びＲ^４は、各々独立してＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、Ｃ_１〜Ｃ_３のアルキル基、ＯＲ^ｂ、ＣＦ_３、ＯＣＦ_３、ＮＯ_２またはＣＯ_２Ｒ^ｂであり（ここで、Ｒ^ｂは、ＨまたはＣ_１〜Ｃ_３のアルキルである）、かつ＊は、キラル中心を示す。）
2. 前記化学式１の化合物が、
   １）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２）（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ４）（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ８）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ９）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １２）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １４）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １７）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １８）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   １９）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２１）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−ニトロ−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ− （１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−シアノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２３）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−クロロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２６）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２７）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２８）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ２９）（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３０）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３１）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３２）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−メトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３３）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３４）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（２−イソプロピルフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３５）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   ３６）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−ブロモフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、及び
   ３７）（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）−６−アミノ−３，４−ジヒドロ−２−ジメトキシメチル−３−ヒドロキシ−２−メチル−４−［Ｎ−（４−フルオロフェニル）−Ｎ−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）アミノ］−２Ｈ−１−ベンゾピラン、
   を含む群から選択されることを特徴とする、請求項１に記載のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体、その立体化学異性体及びその製薬的に許容される塩。
3. 下記スキーム１のようにエポキシド化合物（ＩＩ）とイミダゾールを含む二次アミン化合物（ＩＩＩ）とを反応溶媒中にて金属塩存在下にて反応させ、化合物（Ｉ）を得る工程からなることを特徴とする請求項１に記載のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体の製造方法。
   

   

   （式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及び＊は、前記請求項１で定義したものと同様である。）
4. 前記金属塩が、Ｍｇ（ＣｌＯ_４）_２、ＣｏＣｌ_２、ＬｉＣｌＯ_４、ＮａＣｌＯ_４、ＣａＣｌ_２、ＺｎＣｌ_２、ＬｉＢＦ_４及びＺｎ（Ｔｆ）_２を含む群から選択されることを特徴とする、請求項３に記載のベンゾピラン誘導体の製造方法。
5. 前記反応溶媒が、アセトニトリル、テトラヒドロフラン及びジメチルホルムアルデヒドを含む群から選択されることを特徴とする、請求項３に記載のベンゾピラン誘導体の製造方法。
6. 下記スキーム４のように、化学式（ＩＶ）のニトロ化合物を適切な溶媒の存在下で白金、パラジウム、パラジウム付着木炭（Ｐｄ／Ｃ）またはラネー・ニッケルの金属触媒を使用して水素添加により還元反応させて化学式（Ｖ）のアミノ化合物を製造する工程、又は、
   化学式（ＩＶ）のニトロ化合物をＣｕＳＯ_４、Ｃｕ（ＯＡｃ）_２、ＣｏＣｌ_２、ＳｎＣｌ_２またはＮｉＣｌ_２存在下で還元剤と反応させて化学式（Ｖ）のアミノ化合物を製造する工程、からなることを特徴とする、請求項１に記載のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体の製造方法。
   

   

   （式中、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４及び＊は、前記請求項１で定義したものと同様である。）
7. 前記還元剤が、ＮａＢＨ_４であることを特徴とする、請求項６に記載のベンゾピラン誘導体の製造方法。
8. 請求項１のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体又はその製薬的に許容される塩を有効成分として含有する、癌、糖尿病性網膜症及び関節リウマチの治療に有効な新生血管形成抑制剤用製薬組成物。
9. 請求項１のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体又はその製薬的に許容される塩を有効成分として含有する、新生児仮死、緑内障、糖尿病性神経障害、頭部外傷の予防及び治療のための神経細胞保護剤用製薬組成物。
10. 請求項１のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体又はその製薬的に許容される塩を有効成分として含有する、老化、老年性痴呆症のような退行性神経疾患及びアテローム性動脈硬化の予防及び治療のための抗酸化剤用製薬組成物。
11. 請求項１のイミダゾールを含む二次アミンで置換されたベンゾピラン誘導体又はその製薬的に許容される塩を有効成分として含有する、心筋梗塞、心臓麻痺、及び狭心症の予防及び治療のための心臓保護用製薬組成物。