JP2005154387A - 免疫調節性機能を誘導する乳酸菌類・成分とその取得方法 - Google Patents
免疫調節性機能を誘導する乳酸菌類・成分とその取得方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005154387A JP2005154387A JP2003398662A JP2003398662A JP2005154387A JP 2005154387 A JP2005154387 A JP 2005154387A JP 2003398662 A JP2003398662 A JP 2003398662A JP 2003398662 A JP2003398662 A JP 2003398662A JP 2005154387 A JP2005154387 A JP 2005154387A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- lactococcus
- production
- strain
- lactic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims abstract description 26
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 title claims description 33
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 title abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 109
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 claims abstract description 100
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 90
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 claims abstract description 77
- 230000031261 interleukin-10 production Effects 0.000 claims abstract description 73
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims abstract description 47
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 30
- 108090000426 Caspase-1 Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 102100035904 Caspase-1 Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 14
- 230000031037 interleukin-18 production Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 154
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 77
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 77
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 claims description 43
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 claims description 43
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 claims description 39
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 37
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 21
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 18
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 17
- 230000008975 immunomodulatory function Effects 0.000 claims description 4
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 abstract description 19
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 abstract description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 12
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 abstract description 9
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 8
- 238000010187 selection method Methods 0.000 abstract description 8
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 abstract description 7
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 abstract description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 abstract 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 abstract 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 23
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 21
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 21
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 21
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 18
- 101100031387 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) drc-1 gene Proteins 0.000 description 15
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 15
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 13
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 10
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 9
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 9
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 7
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 description 7
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 6
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 5
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 5
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 5
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 5
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 4
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 4
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000000981 bystander Effects 0.000 description 3
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 3
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 3
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 3
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical group CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 235000001252 Lactococcus lactis subsp lactis bv diacetylactis Nutrition 0.000 description 2
- 241000168725 Lactococcus lactis subsp. lactis bv. diacetylactis Species 0.000 description 2
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 2
- 101001033265 Mus musculus Interleukin-10 Proteins 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108010031650 Thy-1 Antigens Proteins 0.000 description 2
- 102100033523 Thy-1 membrane glycoprotein Human genes 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229920006167 biodegradable resin Polymers 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 2
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 235000013471 Lactococcus lactis subsp hordniae Nutrition 0.000 description 1
- 241001183079 Lactococcus lactis subsp. hordniae Species 0.000 description 1
- 206010023799 Large intestinal ulcer Diseases 0.000 description 1
- 102000017095 Leukocyte Common Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010013709 Leukocyte Common Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229920000704 biodegradable plastic Polymers 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 1
- 230000006058 immune tolerance Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000024664 tolerance induction Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/02—Making cheese curd
- A23C19/032—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
- A23C19/0323—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin using only lactic acid bacteria, e.g. Pediococcus and Leuconostoc species; Bifidobacteria; Microbial starters in general
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
- A23K10/18—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
- A23V2400/231—Lactis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
【解決手段】 哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からIL−10産生を誘導するラクトコッカス属乳酸球菌又はその成分;ラクトコッカス属乳酸球菌などの微生物を、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞と共培養し、IL−10産生誘導能が高い菌株を選抜することを特徴とする前記微生物又は成分の取得方法;前記乳酸球菌などの微生物を、腸上皮細胞株と共培養し、カスパーゼ−1活性及びIL−18産生誘導能により選抜することを特徴とする前記微生物又は成分の選抜方法;前記乳酸球菌を有効成分として含有する食品又は食品素材、並びに動物飼料。
【選択図】 なし
Description
ここで、「健康な状態における免疫恒常性とは何か」を考慮する際に、免疫関連遺伝子の機能発現、すなわち免疫細胞の分化・機能成熟が環境因子により大きく左右されるという事実が重要である。
これに関連して、近年顕著な増加が社会問題となっている食物アレルギー疾患や大腸性潰瘍炎など炎症性腸疾患を初めとする自己免疫疾患等の免疫病の急増、ひいてはアレルギー体質や生活習慣病の発症等に、腸内環境に対する生体応答が反映されている可能性があると指摘されている(非特許文献1参照)。
その過程で、消化管はトレランス誘導に適した環境にあること、かつ消化管に存在する免疫細胞の多くは活性化された状態にあることが明らかとなってきた。免疫恒常性維持のために、消化管では免疫調節性細胞が「積極的に」誘導され、活性化されるのであるとしたら、その現象を支える環境要因が消化管にあると考えられる。
例えば、デキサメタゾン等の化学物質が、免疫調節性細胞を誘導するとして、医薬品の開発が進められている(非特許文献4参照)。
しかし、免疫調節性細胞を誘導する微生物及びその成分についての研究は、端緒についたばかりであり、その検索・評価方法もまだ確立されたものがない。このため、免疫調節性細胞を誘導する微生物及びその成分は、乳酸菌の中にも見出されていなかった。
また、一般に、無菌マウスでは、免疫寛容状態が成立しないなど免疫制御能が低いことが知られているが、炎症性サイトカインの1つであるIL−18は、微生物成分で誘導されることから、微生物及びその成分が免疫調節性細胞の機能成熟に重要であることが強く示唆される。未熟型IL−18を活性型IL−18へ変換する酵素のひとつとしてカスパーゼ−1が知られているが、驚くべきことに、前記ラクトコッカス属乳酸球菌は、腸上皮細胞株において、カスパーゼ−1非依存的にIL−18を産生する特徴を有することが明らかとなり、IL−18及びカスパーゼ−1活性により免疫調節性細胞誘導物質を効率よく検索できることを見出し、本発明に到達した。
本発明は、係る知見に基づくものである。
請求項2に係る本発明は、ラクトコッカス属乳酸球菌が、生菌又は死菌体である請求項1記載のラクトコッカス属乳酸球菌である。
請求項3に係る本発明は、ラクトコッカス属乳酸球菌が、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株(FERM BP−08559)である請求項1又は2記載のラクトコッカス属乳酸球菌である。
請求項5に係る本発明は、被検菌が、ラクトコッカス属乳酸球菌である請求項4記載の微生物株、又は該微生物由来の免疫調節性機能を有する成分の取得方法である。
請求項6に係る本発明は、被検菌を、腸上皮細胞株と共培養し、カスパーゼ−1活性の誘導能が低く、かつインターロイキン−18産生誘導能が高い細胞を誘導することを特徴とする、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導する微生物株、又は該微生物由来の免疫調節性機能を有する成分の選抜方法である。
請求項7に係る本発明は、請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌を有効成分として含有する食品又は食品素材である。
請求項8に係る本発明は、請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌を有効成分として含有する動物飼料である。
即ち、本発明の微生物、特にラクトコッカス属乳酸球菌及び該乳酸球菌由来の成分は、安全性が高く経口摂取が可能であることから、食品又は食品素材、並びに動物飼料の有効成分として利用することにより体内で効率的に免疫調節性細胞を誘導することができる点で有用である。
また、本発明の取得方法によれば、上述のようなラクトコッカス属乳酸球菌を効率的に取得することができる。
更に、本発明の選抜方法によれば、免疫恒常性を保つ上で重要な役割を担う免疫調節性細胞を効率的に誘導する微生物又は成分、例えばラクトコッカス属乳酸球菌を選抜することができる。
請求項1に係る本発明は、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導するラクトコッカス属乳酸球菌、又は該乳酸球菌由来の免疫調節性機能を有する成分を提供する。
樹状細胞とは、免疫担当細胞の1つであり、例えば、マウス等の哺乳類の骨髄細胞の初代短期培養細胞として得ることができる。具体的には例えば、BALB/c系マウスの骨髄細胞を採取した後、B220、Thy−1抗原陽性の群を除去し、GM−CFS、TNF−α等のサイトカインを添加したRPMI培地や、DMEM培地等で常法により培養し、浮遊細胞として得られる群(成熟型)を用いることができる。また、末梢血中の単球細胞(モノサイト)にインターロイキン−4(IL−4)、TNF−α、GM−CFS等のサイトカインを添加して本発明に適した樹状細胞を得ることもできる。
具体的には例えば、BALB/c系マウスの脾臓細胞を採取した後、赤血球を除去し、10% ウシ胎児血清等の血清を添加したRPMI培地や、DMEM培地等に必要に応じてコンカナバリンAを添加して常法により培養し、浮遊細胞として得られる群を用いることができる。
培養期間については、例えば10% ウシ胎児血清等の血清を添加したRPMI培地を用いる場合は、2〜7日培養とすることができる。2日未満であるとIL−10産生誘導機能が十分に発現されないおそれがあり、また7日を超えると、初代培養細胞の機能低下が見られるためである。
このような樹状細胞や脾臓細胞としては、哺乳類から直接採取した細胞を利用することもできるし、あらかじめ株化された細胞を利用することもできる。
このような請求項1に係る本発明のラクトコッカス属乳酸球菌としては、例えば、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス(Lactococcus lactis subsp.lactis)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス(Lactococcus lactis subsp.cremoris)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス(Lactococcus lactis subsp.lactis biovar diacetylactis)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ホルディニア(Lactococcus lactis subsp.hordniae)を挙げることができる。
ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティスとしては、527株(日本国茨城県つくば市東1−1−1 中央第6の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されており、その受託番号は、FERM P−18216である。)、712株(日本国茨城県つくば市東1−1−1 中央第6の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されており、その受託番号は、FERM P−15235である。)、G53株、G50株(日本国茨城県つくば市東1−1−1 中央第6の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されており、その受託番号は、FERM P−18415である。)及びH45株を挙げることができ、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリスとしては、C60株、HP株、及びML株を挙げることができ、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティスとしては、N7株(日本国茨城県つくば市東1−1−1 中央第6の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されており、その受託番号は、FERM P−18217である。)、8W株(日本国茨城県つくば市東1−1−1 中央第6の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託されており、その受託番号は、FERM P−14165である。)、及びDRC−1株を挙げることができる。これらのラクトコッカス属乳酸球菌は、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)や理化学研究所(埼玉県和光市)から入手することができる。
ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス DRC−1は、独立行政法人 農業生物資源研究所の農業生物資源ジーンバンクに寄託されており、その受託番号はMAFF−400206である。また、その性質についてはPowell I.B.et al.FEMS Microbiol.Lett.1990;72:209.に記載されている。
また、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株は、日本国茨城県つくば市東1−1−1 中央第6の独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに寄託されており、その受託番号はFERM BP−08559である。
このような請求項1に係る本発明のラクトコッカス属乳酸球菌由来の成分としては、上記のようなラクトコッカス属乳酸球菌を構成する多糖類等の成分であって、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導する機能を有するものを挙げることができる。
そして、請求項1に係る本発明の成分は、ラクトコッカス属乳酸球菌の生菌体又は死菌体から、通常用いられる抽出・精製方法を用いて得ることができる。
尚、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導する機能を有するラクトコッカス属乳酸球菌の成分と同様の多糖類等の成分は、ラクトコッカス属乳酸球菌以外の微生物(例えば、藻類)にも存在する可能性が高く、これらの微生物の成分も、同様にして利用することができる。
即ち、請求項4に係る本発明は、被検菌であるラクトコッカス属乳酸球菌を、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞と共培養し、インターロイキン−10産生誘導能が高い菌株を選抜することを特徴とする哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導するラクトコッカス属乳酸球菌の取得方法である。
ここで、哺乳類の樹状細胞、及び脾臓細胞については、それぞれ請求項1に係る本発明の説明中において述べた通りである。
これらのラクトコッカス属乳酸球菌は、生菌体であっても、死菌体であっても良い。あらかじめ乳酸菌の培養の常法に従って任意の条件で培養した後、死菌体の場合は加熱等の手段により殺菌し、1〜2回、好ましくは2回、生理食塩水や滅菌水などで洗浄して、本発明の目的に用いることができる。
インターロイキン−10産生誘導能が高い菌株の選抜は、IL−10産生量を測定するための方法を利用して行うことができる。このような方法としては例えば、ELISA(固相酵素免疫測定法、エライザ)の他、細胞内IL−10染色後フローサイトメーターで測定する方法、RT−PCR等が挙げられる。ELISAにより測定する場合には、OptEIAマウスIL−10測定キット(ファーミンジェン社製)を用い、プロトコールに従って行うことができる。
即ち、請求項6に係る本発明は、被検菌を、腸上皮細胞株と共培養し、カスパーゼ−1活性の誘導能が低く、かつインターロイキン−18産生誘導能が高い細胞を誘導することを特徴とする、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導する微生物株、又は該微生物由来の免疫調節性機能を有する成分の選抜方法を提供するものである。
腸上皮細胞株としては、哺乳類のものであれば特に限定されず、また、ヒト腫瘍細胞由来腸上皮細胞株であるCaco−2細胞の他、HT−29等株化されたものであっても良い。例えば、Caco−2細胞を用いる場合は、常法によりあらかじめ培養したものを共培養に供することができる。即ち、トリプシン/EDTAを含むRPMI培地で30〜40℃、5〜15分処理して浮遊細胞とした後、FCSを含むRPMI培地に懸濁して10〜14日培養後、FCSを含むRPMI培地で微生物菌体を懸濁したものと共培養したものを用いることができる。
カスパーゼ−1の誘導能の測定には、蛍光ラベルしたオリゴペプチド(例えば、配列表の配列番号1記載のアミノ酸配列の5´末端にアセチル基を付加し、3´末端をMCAで蛍光標識したオリゴペプチド(ペプチド研究所、カスパーゼ−1活性測定試薬))及び蛍光分光光度計を用いることができる。
インターロイキン−18産生誘導能の測定には、ELISA(固相酵素免疫測定法、エライザ)が挙げられる。ELISAにより測定する場合には、IL−18測定キット(MBL社)を用い、プロトコールに従って行うことができる。
ラクトコッカス属乳酸球菌については、前記請求項1に係る本発明の項において、既に説明した通りである。
このようにして選抜された微生物株、又はその成分は、カスパーゼ−1活性の誘導能は低いものの、他のIL−18誘導試薬(リポポリサッカライド(LPS)等)活性は高い値を示す。
尚、内因性IL−18とIL−10との関係について詳細は不明であるが、本発明者らがIL−18欠損マウス由来の樹状細胞をラクトコッカス ラクティスと共培養したところ、産生されるIL−10量は顕著に低下したことから、両者の間には何らかの調節関係があることが示唆される。
一方、請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌は、乳酸菌の一種であるため、食品として経口投与が可能であり、消化管において免疫調節性を発揮するプロバイオティクスとして有用である。このような食品及び食品素材、並びに動物飼料を提供するのが、請求項7及び8に係る本発明である。
即ち、請求項7に係る本発明の食品又は食品素材、並びに請求項8に係る動物飼料は、請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌を有効成分として含有する。
また、請求項8に係る本発明の動物飼料の対象となる動物の種類及び年齢としては、特に限定はなく、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ等の家畜の他、マウス等の実験動物とすることができる。ラクトコッカス属乳酸球菌の含有量は、体重1kgあたり菌体重量で0.5〜1mg/日程度の投与で十分な効果が奏され、上記の菌体量を1日1回もしくは数回に分けて給餌すれば良い。
更に、請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌は、経口投与が可能であり、消化管において免疫調節性を発揮するプロバイオティクスとして有用であるという特性を生かして、医薬品としての応用も可能である。
更にまた、トウモロコシやイモを発酵して乳酸を製造し、これをポリマー化して製造される生分解プラスチックへの応用も可能である。
ラクトコッカス属乳酸球菌を含む各種微生物の死菌体を、骨髄由来樹状細胞と共培養し、IL−10産生誘導能が高い菌株の選抜を行った。
微生物としては、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)に保存されているもの及び理化学研究所(埼玉県和光市)または発酵研究所(大阪府大阪市)から入手したエンテロコッカス属乳酸菌(IFO12964株、IFO13712株、FH8株)、ロイコノストック属乳酸菌(D4株及びD48株)、ラクトバチルス属乳酸菌(JCM1132株)、ラクトコッカス属乳酸球菌(ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス(527株(FERM P−18216)、712株(FERM P−15235)、G53株及びH45株)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス(C60株(FERM BP−08559)、HP株及びML株)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス(N7株(FERM P−18217)、8W株(FERM P−14165)及びDRC−1株(MAFF−400206))の計16株を用いた。
これらの供試微生物は、予め常法に従い一昼夜培養した。培養後の微生物を70℃30分間加熱して殺菌し、微生物の死菌体として以下の操作に供した。
一方、比較対照として、免疫修飾物質を無添加の群(Med)、及び微生物の死菌体の代わりに免疫賦活微生物成分の代表とされるLPS(大腸菌由来LPS(シグマ社製))を用いて以下の操作を行った。
得られた樹状細胞を、24ウェルプレートに、5x105cells/ウェルとなるように播種し、血清(10% ウシ胎児血清:FCS,シグマ社)を添加したRPMI培地を用いて24時間、37℃の条件で培養した。
共培養終了後、培養上清を遠心分離によって分離し、上清中に含まれるIL−10をELISA(固相酵素免疫測定法、エライザ)によって測定した。IL−10測定に際しては、OptEIAマウスIL−10測定キット(ファーミンジェン社製)を用い、プロトコールに従って行った。
各種微生物における骨髄由来樹状細胞からのIL−10産生量(pg/ml)の結果を、図1に示す。
特に、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株及びラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチルラクティス DRC−1株の2株は、非常に顕著なIL−10産生量が見出されたことから、骨髄由来樹状細胞からのIL−10産生誘導能にきわめて優れていることが示された。
一方、比較対照として、免疫賦活微生物成分の代表とされるLPSを添加した場合は、IL−10産生誘導能は観察されなかった。
ラクトコッカス属乳酸球菌を含む各種微生物の死菌体を脾臓細胞と共培養し、IL−10産生誘導能が高い菌株の選抜を行った。
供試微生物については、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)に保存されているもの及び理化学研究所(埼玉県和光市)から入手したエンテロコッカス属乳酸菌(FH8株)、ロイコノストック属乳酸菌(D4株及びD48株)、ラクトバチルス属乳酸菌(JCM1132株及びBY株)、ラクトコッカス属乳酸球菌(ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス(G50株(FERM P−18415)、527株(FERM P−18216)、712株(FERM P−15235)、G53株及びH45株)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス(C60株(FERM BP−08559)、HP株及びML株)、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス(N7株(FERM P−18217)、8W株(FERM P−14165)及びDRC−1株(MAFF−400206))の計16株を用いて、培養した微生物の死菌体を調製して以下の操作に供した。
その後、実施例1と同様にしてELISA法にてIL−10産生量を測定した。
尚、比較対照(Med)として、微生物を接種しない他は同様にして培養及びIL−10測定を行った。
各種微生物における脾臓細胞からのIL−10産生量(pg/ml)の結果を、図2に示す。
特に、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス 527株、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株及びML株、並びにラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチルラクティス DRC−1株の4株は、非常に顕著なIL−10産生量が見出されたことから、骨髄由来樹状細胞からのIL−10産生誘導能にきわめて優れていることが示された。
一方、比較対照として、免疫賦活微生物成分の代表とされるLPSを添加した場合は、IL−10産生誘導能は観察されなかった。
ラクトコッカス属乳酸球菌の死菌体の脾臓細胞からのIL−10産生誘導能とバイスタンダー(脾臓細胞増殖活性)抑制との関係について検討した。
ラクトコッカス属乳酸球菌としては、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株(FERM BP−08559)、及びラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス DRC−1株(MAFF−400206)を用いた。また、比較対照として、ラクトバチルス属乳酸菌(JCM1132株及びBY株)を用いた。これらの供試微生物は、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)に保存されているもの及び理化学研究所(埼玉県和光市)から入手した。各種微生物について、実施例1と同様にして微生物の死菌体を調製した。
次に、新たに調製したBALB/c系マウスの脾臓細胞から、赤血球を除去し、RPMI培地で2回洗浄した後、血清(10%FCS)を添加した同培地に懸濁し、3x106cells/ウェル/1mlになるように24ウェルプレートに播種した。更に、コンカナバリンAを最終濃度2μg/mlとなるように添加した(下段の培養)。一方、各ウェルに、0.45μmの膜で仕切られたカルチャーインサートを装填し、その中(上段の培養)に前記の微生物の死菌体と前培養を行った脾臓細胞を2x106cells/ウェル/500μlの分量添加し、液性因子のみが膜を通過できる状態で、2日間、37℃の条件で共培養を行った(第二次培養)。
図3は、各種微生物における脾臓細胞からのIL−10産生量(pg/ml)を示し、図4は、各種微生物による脾臓細胞増殖活性(cpmx103)への影響を示す図である。尚、図3及び図4中の**は、Controlと比較して有意差(p<0.01)があった旨を示し、*は、Controlと比較して有意差(p<0.05)があった旨を示す。
また、IL−10は、強い細胞増殖抑制活性を有するが、本実施例において観察された細胞増殖抑制も、免疫調節性細胞から誘導されたIL−10の細胞増殖抑制活性が重要な役割を果たしていると考えられる。
ラクトコッカス属乳酸球菌が、消化管の最前線に位置する腸上皮細胞へ及ぼす効果を解析した。
ラクトコッカス属乳酸球菌としては、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス N7株(FERM P−18217)、DRC−1株(MAFF−400206)及び8W株(FERM P−14165)を用いた。また、比較対照として、ラクトバチルス属乳酸菌(JCM1132株)を用いた。これらの供試微生物は、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)に保存されているもの及び理化学研究所(埼玉県和光市)から入手した。これらのそれぞれについて、実施例1と同様に培養して微生物の死菌体を調製した。
更に比較対照として、微生物の代わりに、免疫賦活微生物成分の代表とされるLPS(大腸菌由来LPS(シグマ社製))を1μg/mlとなるように添加して以下の処理を行った。
24時間後、遠心分離により培養上清を採取し、上清中のIL−18量をELISA法で測定した(MBL社、IL−18測定キット)。手順及び条件はキットに添付のプロトコールに従った。
図5に各微生物における腸上皮細胞からのIL−18産生量(pg/ml)を示し、図6に各微生物による腸上皮細胞のIL−18一定産生量あたりのカスパーゼ−1活性(pmol)を示す。
尚、このようにラクトコッカス属乳酸菌(ラクトコッカス ラクティス)がカスパーゼ−1非依存性にIL−18産生を誘導し、かつ高いIL−10産生を誘導することは、樹状細胞の実験系でも確認された。すなわち、カスパーゼ−1遺伝子欠損マウス由来の樹状細胞は、ラクトコッカス属乳酸菌(ラクトコッカス ラクティス)の刺激に対してIL−18を産生することができた。
以上の結果より、ラクトコッカス ラクティスはカスパーゼー1非依存性にIL−18を産生し、樹状細胞、脾臓細胞よりIL−10産生を誘導すること、脾臓細胞との共培養により免疫調節性細胞を発現させることが見出された。
以上の実施例1〜4において明らかにされたIL−10産生誘導機能が、ラクトコッカス属乳酸球菌の死菌体を経口投与した際にin vivoで再現されるか否かを解析した。
ラクトコッカス属乳酸球菌としては、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス DRC−1株(MAFF−400206)及び、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株(FERM BP−08559)を用いた。これらの供試微生物は、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)に保存されているものを用いた。これらのそれぞれについて、実施例1と同様に培養して微生物の死菌体を調製した。
すなわち、それぞれの死菌体を0.85%食塩水に懸濁して乾燥菌体重量で1mg/mlとなるように調製し、一回一頭あたり200μl(乾燥菌体重量にすると200μg)を経口ゾンデを用いて胃内投与した。10回投与後、マウスを屠殺し、脾臓細胞を調製した。
マウスからの脾臓細胞の取得は、以下の手順で行った。まず、NC/Nga系マウスの脾臓細胞から赤血球を除去し、RPMI培地で2回洗浄した後、血清(10%FCS)を添加した同培地に懸濁し、5x105cells/ウェルになるように48ウェルプレートに播種した。更に、コンカナバリンAを最終濃度2μg/mlになるように添加して、2日間、37℃の条件で培養した。
その後、実施例1と同様にしてELISA法にてIL−10産生量を測定した。
すなわち、48時間後の培養液を0.1mlずつ96ウェルプレートに播種し、実施例3と同様にして0.1μCiの3[H]−チミジンをパルスした。16時間後にセルハーベスターを用いてファイバーフィルター上に細胞を採取したものを液体シンチレーターに浸し、放射能の取り込みをシンチレーションカウンターで測定した。
図7は、各種死菌体を経口摂取したマウス脾臓細胞からのIL−10産生量(pg/ml)を示し、図8は、各種微生物を経口摂取したマウスにおける脾臓細胞増殖活性(cpmx104)を示す。尚、図7及び図8中の***は、salineと比較して有意差(p<0.001)があった旨を示し、**は、salineと比較して有意差(p<0.01)があった旨を示す。
このことから、ラクトコッカス属乳酸球菌を経口摂取した場合にも、IL−10産生誘導機能が保持され、かつ、脾臓細胞から免疫調製性細胞が誘導されたことが、in vivoにおいて実際に確認された。
上記実施例の結果から、ラクトコッカス属乳酸球菌の死菌体が哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導することが明らかとなった。そこで、本実施例においては、該乳酸球菌中の免疫調節性機能を有する成分の存在を明らかにすることを目的とした。
ラクトコッカス属乳酸球菌としては、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ ラクティス バイオバラエティー ジアセチラクティス DRC−1株(MAFF−400206)及び、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株(FERM BP−08559)を用いた。これらの供試微生物は、独立行政法人 農業・生物系特定産業技術研究機構 畜産草地研究所(茨城県つくば市)に保存されているものを用いた。
すなわち、上記ラクトコッカス属乳酸球菌を3回0.85%生理食塩水で洗浄し、上清を除いた後、1/10量の精製水に縣濁し、100℃で5時間加熱した。加熱後、50,000g、30分の遠心で残渣を沈殿後、上清を採取した。更に、分子量カットフィルターつきの遠心濃縮用チューブを用い、分子量30,000以上の高分子画分(フラクション1:Fr1)とそれ以下の画分(フラクション2:Fr2)を得た。尚、濃縮率20倍で調製したため、菌の培養液から考えた最終濃縮率は約200倍となった。
骨髄由来樹状細胞としては、BALB/c系マウス由来の10日間培養後の細胞群を用いた。細胞群を1x105/wellとなるように96穴プレートに播種し、Fr1、Fr2、あるいは実施例1と同様にして得たラクトコッカス属乳酸球菌の死菌体(heat−killed DRC−1、heat−killed C60)5x106を添加して24時間培養した。培養上清について実施例1と同様にIL−10産生を測定した。
脾臓細胞としては、NC/Nga系マウスの脾臓細胞から赤血球を除去後2回洗浄したものを用いた。この脾臓細胞を5x105/wellとなるように96穴プレートに播種し、Fr1、Fr2あるいは実施例1と同様にして得たラクトコッカス属乳酸球菌の死菌体5x106を添加して96時間培養した。培養上清については実施例1と同様にIL−10産生を測定した。
尚、比較対照(medium)として、Fr1、Fr2及び微生物活性成分を添加しない他は同様にして培養及びIL−10測定を行った。
また、図11及び12には、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株(FERM BP−08559)の場合のIL−10産生量(pg/ml)を、骨髄由来細胞、脾臓細胞のそれぞれについて示す。
尚、図9〜12中の**は、mediumと比較して有意差(p<0.01)があった旨を示し、*は、mediumと比較して有意差(p<0.05)があった旨を示す。
このことから、ラクトコッカス属乳酸球菌由来の分子量3万以上の高分子画分、すなわち多糖類画分が、免疫調節性機能、すなわちIL−10産生誘導促進機能を有する成分であることが明らかとなった。
即ち、本発明のラクトコッカス属乳酸球菌、及び該乳酸球菌由来の成分は、安全性が高く経口摂取が可能であることから、食品又は食品素材、並びに動物飼料の有効成分として利用することにより、体内で効率的に免疫調節性細胞を誘導することができる点で有用である。
また、本発明の取得方法によれば、上述のようなラクトコッカス属乳酸球菌を効率的に取得することができる。
更に、本発明の選抜方法によれば、ラクトコッカス属乳酸球菌の他に、免疫調節性細胞を効率的に誘導する微生物株とその成分を選抜することができる。
図7及び図8中の***は、salineと比較して有意差(p<0.001)があった旨を示し、**は、salineと比較して有意差(p<0.01)があった旨を示す。
図9〜12中の**は、mediumと比較して有意差(p<0.01)があった旨を示し、*は、mediumと比較して有意差(p<0.05)があった旨を示す。
Claims (8)
- 哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導するラクトコッカス属乳酸球菌、又は該乳酸球菌由来の免疫調節性機能を有する成分。
- ラクトコッカス属乳酸球菌が、生菌体又は死菌体である請求項1記載のラクトコッカス属乳酸球菌。
- ラクトコッカス属乳酸球菌が、ラクトコッカス ラクティス サブスピーシーズ クレモリス C60株(FERM BP−08559)である請求項1又は2記載のラクトコッカス属乳酸球菌。
- 被検菌を、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞と共培養し、インターロイキン−10産生誘導能が高い菌株を選抜することを特徴とする哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導する微生物株、又は該微生物由来の免疫調節性機能を有する成分の取得方法。
- 被検菌が、ラクトコッカス属乳酸球菌である請求項4記載の微生物株、又は該微生物由来の免疫調節性機能を有する成分の取得方法。
- 被検菌を、腸上皮細胞株と共培養し、カスパーゼ−1活性の誘導能が低く、かつインターロイキン−18産生誘導能が高い細胞を誘導することを特徴とする、哺乳類の樹状細胞又は脾臓細胞からインターロイキン−10産生を誘導する微生物株、又は該微生物由来の免疫調節性機能を有する成分の選抜方法。
- 請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌を有効成分として含有する食品又は食品素材。
- 請求項1〜3のいずれかに記載のラクトコッカス属乳酸球菌を有効成分として含有する動物飼料。
Priority Applications (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2003398662A JP4589618B2 (ja) | 2003-11-28 | 2003-11-28 | 免疫調節性機能を誘導する乳酸菌類とその成分 |
US10/996,463 US7642081B2 (en) | 2003-11-28 | 2004-11-26 | Lactic acid bacteria and their cellular components inducing immunoregulatory function, and method of obtaining the same |
EP10153185A EP2189521B1 (en) | 2003-11-28 | 2004-11-29 | Method of obtaining lactic acid bacteria and their cellular components inducing immunoregulatory function |
EP04106138A EP1538198B1 (en) | 2003-11-28 | 2004-11-29 | Lactic acid bacteria and their cellular components inducing immunoregulatory function, and method of obtaining the same |
US12/615,861 US20110269165A1 (en) | 2003-11-28 | 2009-11-10 | Lactic acid bacteria and their cellular components inducing immunoregulatory function, and method of obtaining the same |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2003398662A JP4589618B2 (ja) | 2003-11-28 | 2003-11-28 | 免疫調節性機能を誘導する乳酸菌類とその成分 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010116956A Division JP5158986B2 (ja) | 2010-05-21 | 2010-05-21 | 免疫調節性機能を有する微生物株・成分の選抜方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005154387A true JP2005154387A (ja) | 2005-06-16 |
JP4589618B2 JP4589618B2 (ja) | 2010-12-01 |
Family
ID=34463866
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003398662A Expired - Lifetime JP4589618B2 (ja) | 2003-11-28 | 2003-11-28 | 免疫調節性機能を誘導する乳酸菌類とその成分 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US7642081B2 (ja) |
EP (2) | EP2189521B1 (ja) |
JP (1) | JP4589618B2 (ja) |
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007122885A1 (ja) | 2006-03-31 | 2007-11-01 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | インターロイキン産生調節剤、該インターロイキン産生調節剤を含む医薬組成物及び飲食品、並びにその製造方法 |
WO2009066537A1 (ja) * | 2007-11-19 | 2009-05-28 | Meiji Dairies Corporation | 免疫調節性機能誘導剤及び食品組成物 |
JP2009256312A (ja) * | 2008-03-26 | 2009-11-05 | Fujicco Co Ltd | 免疫調節用組成物およびそれを用いた飲食品または飲食品素材 |
WO2013008803A1 (ja) * | 2011-07-11 | 2013-01-17 | 国立大学法人 熊本大学 | 発酵能を有する細菌を用いた多能性細胞の製造方法 |
JP2014501100A (ja) * | 2010-12-17 | 2014-01-20 | コンパニ・ジェルベ・ダノン | 消化器の病的状態の改善に使用するためのラクトコッカスラクティス株 |
JP2015086214A (ja) * | 2013-09-26 | 2015-05-07 | 雪印メグミルク株式会社 | 免疫疾患予防剤 |
WO2021024915A1 (ja) | 2019-08-07 | 2021-02-11 | 日清食品ホールディングス株式会社 | 炎症性サイトカインの産生誘導活性は低いが抗炎症性サイトカインの産生誘導活性が高いビフィズス菌 |
KR20220115758A (ko) * | 2021-02-10 | 2022-08-18 | 숙명여자대학교산학협력단 | 신규한 엔테로코커스 패칼리스 균주 및 락토코커스 락티스 균주, 및 이의 유청 발효물을 포함하는 구강질환 또는 대장질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물 |
KR20230057300A (ko) | 2020-09-02 | 2023-04-28 | 닛신 쇼꾸힝 홀딩스 가부시끼가이샤 | 근위축 유전자의 발현을 억제하는 비피더스균 |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2420569C2 (ru) | 2005-11-29 | 2011-06-10 | Актогеникс Нв | Индукция толерантности к антигенам через слизистую |
BRPI0807857A2 (pt) | 2007-01-25 | 2014-05-27 | Actogenix Nv | Tratamento de doença imune por meio de distribuição através da mucosa de antígenos. |
FR2912916B1 (fr) * | 2007-02-26 | 2009-05-22 | Oreal | Composition cosmetique ou dermatologique comprenant un milieu de culture cellulaire |
ES2399993T3 (es) | 2007-03-02 | 2013-04-04 | Protectimmun Gmbh | Composición farmacéutica para la protección frente a alergias y enfermedades inflamatorias |
WO2010020379A1 (en) | 2008-08-16 | 2010-02-25 | Protectimmun Gmbh | Composition for prevention and treatment of allergic and/or inflammatory diseases |
BR112012003706A2 (pt) * | 2009-08-18 | 2015-09-01 | Nestec Sa | Composição nutritiva que compreende cepas de lactococcus e reduz sintomas de alergia, especialmente em bebês e crianças |
NZ613335A (en) | 2010-12-28 | 2015-05-29 | Kirin Holdings Kk | Agent for inducing interferon production containing lactic acid bacteria |
US9814756B2 (en) | 2012-06-15 | 2017-11-14 | Temple University—Of the Commonwealth System of Higher Education | Use of isolated bacterial amyloids for treatment of inflammatory disorders or diseases of the epithelium |
FI20165932L (fi) | 2016-12-07 | 2018-06-08 | Univ Helsinki | Immunomodulatorisia koostumuksia |
CN110982729A (zh) * | 2019-10-23 | 2020-04-10 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 一种降解木材加工副产物杨树皮纤维素的复合菌剂 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0565229A (ja) * | 1991-09-09 | 1993-03-19 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 血清コレステロール上昇抑制剤及び飲食品 |
JPH0799986A (ja) * | 1993-09-30 | 1995-04-18 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ラクトバチリン酸高濃度含有菌体およびその製造方法 |
JP2000256201A (ja) * | 1999-03-02 | 2000-09-19 | Meiji Milk Prod Co Ltd | ビフィズス菌によるオリゴ糖利用能改善剤 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20010049115A1 (en) * | 2000-01-17 | 2001-12-06 | Collins John Kevin | Vitro model for gastrointestinal inflammation |
WO2001014520A2 (en) | 1999-08-19 | 2001-03-01 | Chr. Hansen A/S | Phage resistant lactic acid bacterial mutants |
WO2002090551A2 (en) | 2001-05-03 | 2002-11-14 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw | Self-containing lactococcus strain |
JP4176715B2 (ja) | 2002-06-28 | 2008-11-05 | プレバ、バイオテック、ソシエダッド、アノニマ | プロバイオティクス菌株、その選択方法、その組成物、およびその使用 |
-
2003
- 2003-11-28 JP JP2003398662A patent/JP4589618B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-11-26 US US10/996,463 patent/US7642081B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-11-29 EP EP10153185A patent/EP2189521B1/en not_active Not-in-force
- 2004-11-29 EP EP04106138A patent/EP1538198B1/en active Active
-
2009
- 2009-11-10 US US12/615,861 patent/US20110269165A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0565229A (ja) * | 1991-09-09 | 1993-03-19 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | 血清コレステロール上昇抑制剤及び飲食品 |
JPH0799986A (ja) * | 1993-09-30 | 1995-04-18 | Snow Brand Milk Prod Co Ltd | ラクトバチリン酸高濃度含有菌体およびその製造方法 |
JP2000256201A (ja) * | 1999-03-02 | 2000-09-19 | Meiji Milk Prod Co Ltd | ビフィズス菌によるオリゴ糖利用能改善剤 |
Cited By (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007122885A1 (ja) | 2006-03-31 | 2007-11-01 | Morinaga Milk Industry Co., Ltd. | インターロイキン産生調節剤、該インターロイキン産生調節剤を含む医薬組成物及び飲食品、並びにその製造方法 |
JP5527690B2 (ja) * | 2007-11-19 | 2014-06-18 | 株式会社明治 | 免疫調節性機能誘導剤及び食品組成物 |
JPWO2009066537A1 (ja) * | 2007-11-19 | 2011-04-07 | 明治乳業株式会社 | 免疫調節性機能誘導剤及び食品組成物 |
WO2009066537A1 (ja) * | 2007-11-19 | 2009-05-28 | Meiji Dairies Corporation | 免疫調節性機能誘導剤及び食品組成物 |
JP2009256312A (ja) * | 2008-03-26 | 2009-11-05 | Fujicco Co Ltd | 免疫調節用組成物およびそれを用いた飲食品または飲食品素材 |
JP2014501100A (ja) * | 2010-12-17 | 2014-01-20 | コンパニ・ジェルベ・ダノン | 消化器の病的状態の改善に使用するためのラクトコッカスラクティス株 |
US9587224B2 (en) | 2011-07-11 | 2017-03-07 | National University Corporation Kumamoto University | Method for producing pluripotent cell using bacterium having fermentation ability |
WO2013008803A1 (ja) * | 2011-07-11 | 2013-01-17 | 国立大学法人 熊本大学 | 発酵能を有する細菌を用いた多能性細胞の製造方法 |
JPWO2013008803A1 (ja) * | 2011-07-11 | 2015-02-23 | 国立大学法人 熊本大学 | 発酵能を有する細菌を用いた多能性細胞の製造方法 |
JP2015086214A (ja) * | 2013-09-26 | 2015-05-07 | 雪印メグミルク株式会社 | 免疫疾患予防剤 |
WO2021024915A1 (ja) | 2019-08-07 | 2021-02-11 | 日清食品ホールディングス株式会社 | 炎症性サイトカインの産生誘導活性は低いが抗炎症性サイトカインの産生誘導活性が高いビフィズス菌 |
KR20220038588A (ko) | 2019-08-07 | 2022-03-29 | 닛신 쇼꾸힝 홀딩스 가부시끼가이샤 | 염증성 사이토카인의 산생 유도 활성은 낮지만 항염증성 사이토카인의 산생 유도 활성이 높은 비피더스균 |
KR20230057300A (ko) | 2020-09-02 | 2023-04-28 | 닛신 쇼꾸힝 홀딩스 가부시끼가이샤 | 근위축 유전자의 발현을 억제하는 비피더스균 |
KR20220115758A (ko) * | 2021-02-10 | 2022-08-18 | 숙명여자대학교산학협력단 | 신규한 엔테로코커스 패칼리스 균주 및 락토코커스 락티스 균주, 및 이의 유청 발효물을 포함하는 구강질환 또는 대장질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물 |
KR102630615B1 (ko) * | 2021-02-10 | 2024-01-31 | 숙명여자대학교산학협력단 | 신규한 엔테로코커스 패칼리스 균주 및 락토코커스 락티스 균주, 및 이의 유청 발효물을 포함하는 구강질환 또는 대장질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20110269165A1 (en) | 2011-11-03 |
EP1538198A2 (en) | 2005-06-08 |
EP1538198B1 (en) | 2012-10-24 |
US20050158292A1 (en) | 2005-07-21 |
EP1538198A3 (en) | 2005-06-15 |
JP4589618B2 (ja) | 2010-12-01 |
EP2189521B1 (en) | 2013-01-23 |
EP2189521A1 (en) | 2010-05-26 |
US7642081B2 (en) | 2010-01-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4589618B2 (ja) | 免疫調節性機能を誘導する乳酸菌類とその成分 | |
JP5600179B2 (ja) | ビフィズス菌株 | |
Santos Rocha et al. | Anti-inflammatory properties of dairy lactobacilli | |
RU2546251C2 (ru) | Пробиотический штамм бифидобактерий | |
Tsai et al. | Effect of the administration of Lactobacillus paracasei subsp. paracasei NTU 101 on Peyer's patch-mediated mucosal immunity | |
JP5401733B2 (ja) | プロバイオティクス及びシンバイオティックとしてのラクトバチルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacilluskefiranofaciens)の使用 | |
JP4942831B2 (ja) | 抗アレルギー用組成物 | |
CN105407908A (zh) | 罗斯拜瑞氏菌属鞭毛蛋白和免疫调控 | |
KR20200027855A (ko) | 장내 항염증 및 균총 개선 활성을 갖는 락토바실러스 람노서스 균주 | |
RU2535974C2 (ru) | Иммуномодулирующие пробиотические молочно-кислые бактерии | |
JP4876262B2 (ja) | 抗炎症効果を有する新規植物性乳酸菌株、該菌株を用いた炎症性腸疾患又は慢性下痢症に対する予防及び治療剤、抑制剤並びに添加剤 | |
CA2979786A1 (en) | Means and methods for treating inflammatory diseases | |
JP3671212B2 (ja) | 免疫賦活に有用なラクトコッカス属乳酸菌 | |
JP5158986B2 (ja) | 免疫調節性機能を有する微生物株・成分の選抜方法 | |
JP4479162B2 (ja) | 免疫機能調節剤および免疫機能調節食品 | |
JP2019141036A (ja) | バチルス属細菌、インターロイキン−22産生誘導剤、皮膚バリア機能増強剤 | |
JP2010057395A (ja) | 腸管免疫調節作用を有する乳酸菌 | |
KR102443494B1 (ko) | 신균주 비피도박테리움 애니멀리스 cacc 789 및 이를 유효성분으로 함유하는 반려동물용 사료 조성물 | |
JP2008061513A (ja) | 免疫バランスを正常化するラクトバチルス属乳酸菌及びそれを用いた飲食品 | |
JP6732731B2 (ja) | プロバイオティクスの被貪食能の評価方法およびこれを利用したスクリーニング方法 | |
JP4459938B2 (ja) | 免疫バランスを正常化するストレプトコッカス属乳酸菌及びそれを用いた飲食品 | |
KR102443495B1 (ko) | 신균주 락토바실러스 람노서스 cacc 612 및 이를 유효성분으로 함유하는 반려동물용 사료 조성물 | |
CN111212902B (zh) | 刺激生长的乳杆菌菌株 | |
JP2018046760A (ja) | 有用なイムノバイオティクスのスクリーニング方法 | |
TETİK et al. | Antimicrobial effect of probiotic microorganisms on clinical and standard Staphylococcus aureus isolates |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060921 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100324 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100521 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100615 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100811 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100907 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100910 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4589618 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130917 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313117 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313115 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |