JP2005110506A - 組織培養によるパラゴムノキ精英樹の大量増殖法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 パラゴムノキのクローン苗の頂芽又は脇芽を含む組織を採取し、シュート伸張誘導培地によりシュートさせ、シュートを切り取り、シュートを発根誘導培地に移植する。発根したシュートは、培養土に移植し、順化後完全な植物体となり、クローン苗として用いることができる。
【選択図】 図2
Description
以下、パラゴムノキを例として説明するが、それ以外のゴムノキについても同様に方法で実施できる。
増殖に用いる材料としては、環境汚染を防ぐために外部から隔離された場所で生育させたクローン苗を用いることができる。生育させたクローン苗の頂芽又は脇芽を含む組織を採取し、適宜の大きさに切断して用いることができる。
殺菌又は滅菌された頂芽又は脇芽を含む組織は、滅菌剤の影響を除くために切り口をカットして、芽を含む部分を固体培地に差し込みシュート伸張させる。このシュート伸張用の培地としては、適宜の植物成長用固体培地に、植物ホルモンとして、BAP(ベンジルアミノプリン)を0.5〜3.0ppmとなるように添加して用いることができる。培地としては、Whiteの培地、 Hellerの培地、SH培地(SchenkとHildebrandtの培地)、MS培地(MurashigeとSkoogの培地)、LS培地(LinsmaierとSkoogの培地)、Gamborg、B5等があるが、MS培地又はその組成に変更を加えた又はMS改変培地が好適である。また、炭素源としては、スクロースを20〜40g/lとなるように添加して用いることが好適である。固化剤としては、ゲルライト又は粉末寒天を使用することができる。5wt.%のココナッツウォーターを添加することもできる。
シュート伸張のための培養は、好適には、27℃、1日あたり16時間の光照射条件下で、培養され、必要に応じ、約1月ごとに経代して培養される。
上記培地中で、約2〜3月培養し、約2〜3cmの適切な大きさに育ったシュートを採取する。採取したシュートは発根誘導培地により発根させる。
1ヶ月〜数ヶ月で根が誘導され、完全な植物体となったら、発根誘導培地から培養土に移植する。
(1)(管理圃場で育てた)パラゴムノキのクローン苗を表面を洗浄する。次に、採取されたクローン苗の頂芽又は脇芽を含む組織をまず、エタノールで表面洗浄し、次に、希釈した次亜塩素酸ナトリウム溶液で撹拌しながら滅菌する。
(2)滅菌された頂芽又は脇芽を含む組織は、切り口をカットして、芽を含む部分を固体培地に差し込みシュート伸張させる。このシュート伸張用の培地としては、MS(ムラシゲスクーグ)混合培地を基本に、植物ホルモンとして、BAP(ベンジルアミノプリン)を2.0ppm、炭素源としては、スクロース30g/lとなるように添加し、固化剤としては、ゲルライトを使用し5wt.%のココナッツウォーターを添加する。
(3)多芽体を得るためには、植物ホルモンとして、BAP(ベンジルアミノプリン)に代えNAA(ナフタレン酢酸)1ppm、TDZ(チジアズロン)を3ppmの組み合わせで培養する。
(4)シュート伸張のための培養は、27℃、1日あたり16時間の光照射条件下で、約1月ごとに継代して、シュートを伸長させる。伸びたシュートは2〜3分割し、それぞれ植継ぐことにより増殖することもできる。(図1)。
(5)継代して平均2〜3cmの大きさに育ったシュートを採取する。採取したシュートは発根誘導培地により発根させる。発根誘導培地としては、MS培地(MurashigeとSkoogの混合培地)にスクロースを30g/lとなるように添加し、植物ホルモンとしては、IBA(インドール酪酸)5ppm、NAA(ナフタレン酢酸)3ppmを組み合わせて用いる。固化剤としては、ゲルライトを使用し、5wt.%のココナッツウォーターを添加する。(図2)。
(6)1ヶ月〜数ヶ月で根が誘導され、完全な植物体となる。そこで、発根誘導培地から培養土に移植する。管理培養室(湿度100%、気温28〜30℃)から、外部環境での生育に移行させるために、外部環境に合わせるために、湿度80%で2週間、60%で週間、順化させて、クローン苗から増殖させた健全な苗を得る。
Claims (10)
- ゴムノキのクローン苗から頂芽又は脇芽を含む組織を採取する工程、該組織からシュート伸張培地でシュートを伸張させる工程、及び該シュートを採取後、該組織を再度シュート伸張培地でシュートを伸張させる工程を含む、ゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- シュートを採取後又は採取し分割増殖した後、発根誘導培地で発根させる工程を更に含む請求項1記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- 発根したシュートを培養土に移植し、順化の後、完全な苗とする工程を更に含む請求項2記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- シュートの伸張誘導にBAP(ベンジルアミノプリン)を含む固形培地を用いる請求項1〜3いずれか1項記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- BAP(ベンジルアミノプリン)の添加濃度が0.5〜3.0ppmである請求項4項記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- シュートの伸張誘導に用いる固形培地が更にスクロースを含む請求項1〜3いずれか1項記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- スクロースの濃度が、20〜40g/lである請求項6記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- シュートの伸張誘導に用いる固形培地が更に、TDZ(チジアズロン)を含む請求項1〜7いずれか1項記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- 発根誘導培地が、IBA(インドール酪酸)3〜10ppmを含有している、請求項2〜8いずれか1項記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
- ゴムノキが、パラゴムノキである請求項1〜9いずれか1項記載のゴムノキのクローン苗の大量増殖方法。
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