JP2004501140A - キナゾリノンを用いた方法並びに組成 - Google Patents

Abstract

以下の式（ａ、ｂ、ｃおよびｄ）で表されるキナゾリノンを開示する。これらのキナゾリノンは、ＫＳＰキネシン活性に関係する細胞増殖性疾患並びに異常の治療に有用である。
【化３１】

Description

【０００１】
【発明の分野】
本発明は、有糸分裂キネシンＫＳＰの阻害剤であり、ガン、異常増殖、再狭窄、心臓肥大、免疫異常、炎症等の細胞増殖性疾患の治療に有用であるキナゾリノン誘導体に関する。
【０００２】
【発明の背景】
抗マラリア性を有していることで知られているアジアの植物から、キナゾリンアルカロイドである３−［β−ケト−ガンマ−（３−ヒドロキシ−２−ピペリジル）−プロピル］−４−キナゾロンの構造が明らかになったことにより、１９５０年代初めに、キナゾリン誘導体の医薬品化学に関する関心が高まった。更なる抗マラリア剤を捜し求めて、様々な置換キナゾリンが合成された。特に重要なのは、２−メチル−３−ｏ−トリル−４−（３Ｈ）−キナゾリノン誘導体の合成であった。メタカロンとという名前で知られているこの化合物は、マラリア原虫に対しては効果がなかったが、強力な催眠剤であることがわかった。
【０００３】
メタカロンの導入と、その催眠効果の発見以来、キナゾリノン系の化合物の薬理作用が研究されてきた。現在では、キナゾリノン並びにその誘導体に、催眠、鎮静、鎮痛、抗痙攣、鎮咳、抗炎症作用等の、幅広い生物学的特性があることがわかっている。
【０００４】
キナゾリノン誘導体の生物学的利用に関しては、様々な記載がなされている。例えば、米国特許 Ｎｏ． ５，１４７，８７５には、気管支拡張作用を有する２−（置換フェニル）−４−オキソキナゾリンが記載されている。また、米国特許 Ｎｏ． ３，７２３，４３２， ３，７４０，４４２およびＮｏ．３，９２５，５４８には、抗炎症剤として有用な１ −置換−４−アリール−２（ｌ Ｈ）−キナゾリノン誘導体類が記載されている。さらに、ヨーロッパ特許公報ＥＰ ０ ０５６ ６３７ Ｂ１には、高血圧の治療に用いられる。４（３Ｈ）−キナゾリノン誘導体類が記載されている。ヨーロッパ特許公報ＥＰ ０ ８８４ ３１９ Ａｌ には、神経変性、精神異常、麻薬およびアルコールによって引き起こされる中枢神経系ならびに末梢神経系異常の治療に用いられるキナゾリン−４−オン誘導体の薬剤組成が記載されている。
【０００５】
キナゾリノンは、ガンを含む細胞増殖性異常の治療に用いられる、増え続ける治療薬の一種である。例えば、ＰＣＴ ＷＯ ９６／０６６１６には、血管滑面細胞増殖を阻害するキナゾリノン誘導体を含む薬剤組成が記載されている。ＰＣＴ ＷＯ ９６／１９２２４では、これと同じキナゾリノン誘導体を用いて、糸球体間質細胞増殖を阻害する。米国特許 Ｎｏ． ４，９８１，８５６、Ｎｏ． ５，０８１，１２４ および Ｎｏ． ５，２８０，０２７では、キナゾリノン誘導体を用いて、デオキシウリジン１リン酸のメチル化を触媒し、ＤＮＡ合成に必要なチミジン１リン酸を生成する酵素である、チミジル酸生成酵素を阻害する。 米国特許 Ｎｏ． ５，７４７，４９８ およびＮｏ． ５，７７３，４７６では、チロシンレセプターキナーゼの過剰活性あるいは不適当な活性を特徴とするガンの治療にキナゾリノン誘導体を用いている。米国特許 Ｎｏ． ５，０３７，８２９では、（１Ｈ−アゾ−ｌ−イルチル） 置換キナゾリン組成を、上皮細胞に生じるガンの治療に用いている。ＰＣＴ ＷＯ ９８／３４６１３ は、新血管形成を軽減し、悪性腫瘍を治療するのに有用なキナゾリノン誘導体を含む組成を記載している。米国特許 Ｎｏ． ５，１８７，１６７は、抗腫瘍活性を有するキナゾリン−４−オン誘導体を含む薬剤組成を記載している。
【０００６】
ガンの治療に用いられる他の治療薬には、タキサンやビンカ・アルカロイドがある。タキサンおよびビンカ・アルカロイドは、様々に細分化された細胞組織中に存在する微小管に作用する。微小管は、有糸分裂紡錘体の主要構成要素である。有糸分裂紡錘体は、細胞分裂により生じた２つの娘細胞の各々に、ゲノムの複製を分配する役割を果たす。これらの薬剤で有糸分裂紡錘体が破壊されることにより、ガン細胞の分裂を阻害して、ガン細胞死を誘発する、と推測される。一方、微小管は、神経処理プロセスにおける細胞内輸送の経路を含む、他の細胞組織を形成する。これらの薬剤は、有糸分裂紡錘体を特異的に標的とするわけではないため、副作用があり、その効果は限られたものである。
【０００７】
ガンの治療に用いられる薬剤の投与による副作用を軽減することが可能になれば、治療上大きな意味を持つため、これらの薬剤の特異性を向上させることに多大なる関心が集まっている。従来、ガン治療の目覚しい進歩は、新規な機構で作用する治療薬の開発に結びついてきた。この例として、タキサンやカンプトセシン類のトポイソメラーゼＩ 阻害剤が挙げられる。このような観点から、有糸分裂 キネシンは、新しい抗がん剤として魅力的な標的である。
【０００８】
有糸分裂 キネシンは、有糸分裂紡錘体の組み立てと機能に不可欠な酵素であるが、神経処理プロセス等においては、通常、他の微小管組織のようには働かない。有糸分裂 キネシンは、有糸分裂のすべての段階で本質的な役割を果たす。この酵素は、ＡＴＰの加水分解により放出されるエネルギーを、微小管に沿った細胞運搬の指向性移動を推進する物理的な力に変換する「分子モーター」である。 この仕事に十分な触媒領域は、約３４０個のアミノ酸からなる小さな組織である。有糸分裂の間、キネシンは、微小管を組織化し、有糸分裂紡錘体である双極性構造を形成する。キネシンは、紡錘体微小管に沿った染色体の移動と、有糸分裂の所定の段階に結びついた有糸分裂紡錘体における構造変化とを仲介する。有糸分裂 キネシン機能を実験的に混乱させることにより、有糸分裂紡錘体の奇形や機能障害が引き起こされ、場合によっては、その結果、細胞周期の停止や細胞死が起こる。
【０００９】
ＫＳＰは、同定されている有糸分裂キネシンの一種である。ＫＳＰは、逆行性ホモ二量体からなる双極性ホモ四量体を構成するプラス端指向性微小管モータの進化保存キネシン亜属に属する。有糸分裂の間、ＫＳＰは、有糸分裂紡錘体の微小管に結合する。ＫＳＰに対する抗体をヒト細胞中にマイクロインジェクションすることにより、前中期における紡錘体の極分離を妨げ、その結果、単極性紡錘体が形成され、有糸分裂を停止させ、プログラムされた細胞死を誘発する。ＫＳＰ並びにヒト以外の生物の体内に存在するキネシンは、逆行性微小管をたばねて、互いに滑走させて、紡錘体の２つの極を分離させる。ＫＳＰは、さらに、後期Ｂにおいて、紡錘体の伸張を仲介し、紡錘体極に微小管を集める役割を果たすと考えられる。
【００１０】
ヒト ＫＳＰ （ＨｓＥｇ５とも称する）は、［Ｂｌａｎｇｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｅｌｌ， ８３：１１５９−６９ （１９９５）； Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ， ｅｔ ａｌ．， Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．， ３９：１６３５−４２ （１９９６）； Ｇａｌｇｉｏ ｅｔ ａｌ．， Ｊ．　Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．， １３５：３３９−４１４ （１９９６）； Ｂｌａｎｇｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， ２７２：１９４１８−２４ （１９９７）； Ｂｌａｎｇｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｅｌｌ Ｍｏｔｉｌ Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ， ４０：１７４−８２ （１９９８）； Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ ａｎｄ Ｒａｔｔｎｅｒ， Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．， １１１：２５５１−６１ （１９９８）； Ｋａｉｓｅｒ， ｅｔ ａｌ．， ＪＢＣ ２７４：１８９２５−３１ （１９９９）； ＧｅｎＢａｎｋ受理番号： Ｘ８５１３７， ＮＭ００４５２３ ａｎｄ Ｕ３７４２６］に記載され、また、ＫＳＰ 遺伝子フラグメント （ＴＲＩＰ５） に関しては、［Ｌｅｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．， ９：２４３−５４ （１９９５）； ＧｅｎＢａｎｋ 受理番号： Ｌ４０３７２］　に記載されている。さらに、ゼノプス（ツメガエル属のカエル）ＫＳＰ 同族体 （Ｅｇ５）並びにショウジョウバエＫＬＰ６１ Ｆ／ＫＲＰ１ ３０ に関しても報告されている。
【００１１】
有糸分裂キネシンは、新規な有糸分裂化学療法剤の発見並びに開発における魅力的なターゲットである。従って、本発明は、有糸分裂キネシンＫＳＰの阻害に有用な方法並びに組成を提供することを目的とする。
【００１２】
【発明の概要】
上記の目的に従い、本発明は、増殖性細胞疾患の治療に利用可能な組成並びに方法を提供する。この組成とは、ＫＳＰ阻害剤、特にヒトＫＳＰ 阻害剤である。
【００１３】
本発明は、細胞増殖性疾患を治療する、ＫＳＰキネシン活性に関係する異常を治療する、さらに、ＫＳＰキネシンを阻害するための方法に関する。これらの方法では、以下に示す化合物群から選択される化合物が用いられる。
【００１４】
【化１６】

ここで、
Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
Ｒ_１５ は、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される。
【００１５】
本発明の化合物を利用した治療に効果がある疾患並びに異常には、ガン、異常増殖、再狭窄、心臓肥大、免疫異常、炎症等が挙げられる。この中でも、ガン、異常増殖、再狭窄、並びに、心臓肥大に効果があり、特に、ガンに対する効果が大きい。
【００１６】
本発明は、また、ＫＳＰキネシンの阻害に有用な化合物に関する。これらの化合物は、先に示した構造を有する。
【００１７】
本発明は、さらに、ＫＳＰ キネシンに結合する化合物、例えば、本発明の化合物の結合を置換する、あるいは、結合と競争する化合物をスクリーニングする方法を提供する。この方法は、標識された本発明の組成と、ＫＳＰ キネシンと、少なくとも一つの生体活性物質候補とを結合させるステップと、ＫＳＰ キネシンに対する前記生体活性物質候補の結合を測定するステップと、を備える。
【００１８】
また、本発明は、ＫＳＰ キネシン活性のモジュレーターをスクリーニングする方法を提供する。この方法は、本発明の組成と、ＫＳＰ キネシンと、少なくとも一つの生体活性物質候補とを結合させるステップと、ＫＳＰ キネシン活性対する前記生体活性物質候補の影響を測定するステップと、を備える。
【００１９】
【発明の実施の形態】
本発明は、有糸分裂 キネシンのモジュレーターであるキナゾリノン中心構造に基づく、新規な化合物群に関する。他のキネシン（例えば、輸送キネシン）に影響を与えることなく、有糸分裂キネシンを阻害あるいは調節することにより、細胞増殖を特異的に阻害することができる。すなわち、本発明は、有糸分裂キネシン機能を混乱させることにより、有糸分裂紡錘体の奇形あるいは機能障害を引き起こし、その結果、細胞周期を止め、細胞死をもたらすという現象を利用したものである。ヒトＫＳＰキネシンを阻害する方法は、本発明の阻害剤を、ＫＳＰ のフラグメントと変異体とを含むＫＳＰキネシン、特に、ヒトＫＳＰキネシンに接触させるステップを備える。ここで、阻害とは、例えば、ＫＳＰキネシンのＡＴＰ加水分解活性の阻害、および／あるいは、紡錘体形成活性の阻害であり、これにより、有糸分裂紡錘体が破壊される。あるいは、減数分裂紡錘体を破壊するようにしてもよい。
【００２０】
本発明は、細胞増殖に関係する異常の治療に用いられる、有糸分裂 キネシン、特に、ＫＳＰの阻害剤およびモジュレーターを開発することを目的とする。従来、新しい機構で働く治療薬を同定することにより、一種の細胞増殖性異常であるガンの治療効果が飛躍的に向上してきた。これには、例えば、微小管形成過程で作用すると考えられるタキサン系薬剤のみならず、カンプトセシン系のトポイソメラーゼＩ阻害剤も含まれる。本明細書に記載される組成並びに方法は、異なった選択性を有し、これらに限定されるものではないが、ガン、異常増殖、再狭窄、心臓肥大、免疫異常、炎症を含む、細胞増殖性疾患の治療に好適に用いられる。
【００２１】
従って、本発明は、以下の化合物を用いる方法に関する。
式１ａに示すキナゾリノンアミド
【００２２】
【化１７】

【００２３】
式１ｂに示すキナゾリノンスルホンアミド
【００２４】
【化１８】

【００２５】
並びに、式１ｃおよび１ｄに示すキナゾリノンアミン
【００２６】
【化１９】

【００２７】
【化２０】

【００２８】
ここで、
Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
Ｒ_１５ は、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される。
【００２９】
先に示した属並びにその亜属に含まれるすべての化合物は、キネシン阻害剤として有効であるが、その化合物がすべて新規な化合物であるわけではない。特に、尿素類（すなわち、Ｒ_３ がＲ_１５ＮＨである化合物）に関しては、コレシストキニン活性を変える薬剤として、米国特許 Ｎｏ． ５，７５６，５０２に開示されている。特許請求の範囲から特定の化合物を除外したのは、機能的には発明の概念の一部であるが、本発明の範囲と無関係な理由で特許性がない対象に対する主張を避けるという、出願人の意図によるものである。
【００３０】
定義
「随意の」あるいは「随意に」という表現は、その単語に続いて説明される事象あるいは状況が起こってもよいし、起こらなくてもよいことを意味し、その事象あるいは状況が生じた例も、生じなかった例も、その説明に含まれることを意味する。たとえば、「随意置換アルキル」は、下記のように、「アルキル」あるいは「置換アルキル」を意味する。当業者には自明のように、一つあるいは複数の置換基を含む基は、（たとえば、置換アルキルには随意置換シクロアルキル基が含まれ、これには、随意置換アルキル基が含まれるという具合に、無限に続く）立体的にありえない、および／あるいは、合成不可能な置換あるいは置換パターンを導入しようとするものではない。
【００３１】
アルキルは、直鎖、分岐、環状炭化水素構造並びにその組み合わせを含む。低級アルキルは、１ないし５の炭素原子を含むアルキル基である。低級アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓ−および ｔ−ブチル が挙げられる。アルキル基は、Ｃ_２０ 以下であることが望ましい。アルキル基が Ｃ_１３ 以下であることが、さらに望ましい。シクロアルキルは、アルキルの一種であり、３ないし１３の炭素原子を含む環状炭化水素基を含む。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、ノルボルニル、アダマンチルが挙げられる。また、アルキルは、アルカニル、並びに、不飽和アルケニルおよびアルキニル残基も意味し、これには、シクロヘキシルメチル、ビニル、アリル、イソプレニル等が含まれる。
【００３２】
アルキレンは、アルキルと同様の残基を意味するが、二つの結合点を持つ。アルキレンの例としては、エチレン（ −ＣＨ_２ＣＨ_２−）、エテニレン（−ＣＨ_２＝ＣＨ_２）、プロピレン （−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−）、ジメチルプロピレン （ −ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３） _２ＣＨ_２−）、シクロヘキシルプロピレン（−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（Ｃ_６Ｈ_１３）− ）が挙げられる。所定数の炭素原子を有するアルキル残基の名称を挙げた場合には、同数の炭素原子を有する幾何異性体をすべて含むものとする。例えば、「ブチル」には、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチルが含まれ、「プロピル」には、ｎ−プロピル とイソプロピル（すなわちｉ−プロピル）が含まれる。
【００３３】
アルコキシあるいはアルコキシルは、酸素を介して親構造に結合する、１ないし８の炭素原子を含む直鎖、分岐、環状構造の基、並びに、それらの組み合わせを意味する。例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、シクロプロピロキシが挙げられる。低級アルコキシ は、１ないし４の炭素原子を含む同様の基である。
【００３４】
アシルは、カルボニル官能基を介して親構造に結合する、１ないし８の炭素原子を含む直鎖、分岐、環状構造の基、並びに、飽和、不飽和、芳香族、並びに、それらの組み合わせを意味する。親構造に対する結合点がカルボニルのままである限り、アシル残基中の一つあるいは複数の炭素を、窒素、酸素、あるいは、イオウに置き換えたものでもよい。例としては、アセチル、ベンゾイル、プロピオニル、イソブチリル、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルが挙げられる。低級アシルは、１ないし４の炭素原子を含む同様の基である。
【００３５】
アリールおよびヘテロアリールは、Ｏ、Ｎ、あるいはＳから選択された０ないし３のヘテロ原子を含む、５員環あるいは６員環の芳香族あるいはヘテロ芳香族環を意味する。あるいは、Ｏ、Ｎ、あるいはＳから選択された０ないし３のヘテロ原子を含む、９員環あるいは１０員環のバイサイクリック芳香族あるいはヘテロ芳香族環系を意味する。また、あるいは、Ｏ、Ｎ、あるいはＳから選択された０ないし３のヘテロ原子を含む、１３員環あるいは１４員環のトリサイクリック芳香族あるいはヘテロ芳香族環系を意味する。６員環ないし１４員環の芳香族炭素環の例としては、ベンゼン、ナフタレン、インダン、テトラリン、フルオレンが挙げられ、５員環ないし１０員環の芳香族ヘテロ環の例としては、イミダゾール、ピリジン、インドール、チオフェン、ベンゾピラノン、チアゾール、フラン、ベンズイミダゾール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、ピリミジン、ピラジン、テトラゾール、ピラゾールが挙げられる。
【００３６】
アルキルアリール は、アリール部がアルキレン残基を介して親構造に結合する残基を意味する。 この例としては、ベンジル、フェネチル、フェニルビニル、フェニルアリル等が挙げられる。オキサアルキルおよびオキサアルキルアリールは、１ないし複数のメチレンが酸素に置換された、アルキル およびアルキルアリール残基を意味する。オキサアルキルおよびオキサアルキルアリール残基の例としては、エトキシエトキシエチル （３，６−ジオキサオクチル）、ベンジルオキシメチル並びにフェノキシメチルが挙げられる。一般に、ポリエチレングリコール等のグリコールエーテルも、このグループにはいる。アルキルヘテロアリールは、ヘテロアリール部がアルキレン残基を介して親構造に結合する残基を意味する。 この例としては、フラニルメチル、ピリジニルメチル、ピリミジニルエチル等が挙げられる。
【００３７】
ヘテロ環は、１ないし４の炭素原子が、酸素、窒素、イオウ等のヘテロ原子に置換された、シクロアルキルあるいはアリール残基を意味する。本発明の範囲内のヘテロ環の例としては、イミダゾリン、ピロリジン、ピラゾール、ピロール、インドール、キノリン、イソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、ベンゾフラン、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキソール（一般に、置換基として存在する場合、メチレンジオキシフェニルと称される）、テトラゾール、モルホリン、チアゾール、ピリジン、ピリダジン、チオフェン、フラン、オキサゾール、オキサゾリン、イソキサゾール、ジオキサン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。”Ｎ−ヘテロシクリル”は、置換残基として用いられる、窒素を含むヘテロ環を意味する。ヘテロシクリルという単語は、ヘテロシクリルの一部であるヘテロアリールも含んでいる。Ｎ−ヘテロシクリル残基の例としては、４−モルホニリル、４−チオモルホニリル、１−ピペリジニル、１−ピロリジニル、３−チアゾリジニル、ピペラジニル、４−（３，４−ジヒドロベンゾキサジニル）等が挙げられられる。また、置換ヘテロシクリルの例としては、４−メチル−１−ピペラジニルおよび４−ベンジル−１−ピペリジニルが挙げられる。
【００３８】
置換アルキル、アリール、並びに、ヘテロアリールは、１ないし複数の水素原子が、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキレンジオキシ（例えば、メチレンジオキシ）、フルオロアルキル、カルボキシ （−ＣＯＯＨ）、カルボアルコキシ（すなわち、アシルオキシ−Ｏ（Ｏ）ＣＲ）、カルボキシアルキル （すなわち、エステル−Ｃ（Ｏ）ＯＲ）、カルボキサミド、スルフォンアミドアルキル、スルフォンアミドアリール、アミノカルボニル、ベンジルオキシカルボニルアミノ （ＣＢＺ−アミノ）、シアノ、カルボニル、ニトロ、第一級、第二級、第三級アミノ（たとえば、アルキルアミノやジアルキルアミノ）、アミノアルキレン、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルフォニル、アルキルスルフォンアミド、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルフォニル、アミジノ、アリール（たとえば、フェニルやベンジル）、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、フェノキシ、ベンジルオキシ、あるいは、ヘテロアリールオキシで置換された、アルキル、アリール、あるいは、ヘテロアリールを意味する。本発明の目的を達成するために、置換アルキルは、さらに、オキサアルキル残基、すなわち、１ないし複数の炭素原子が酸素で置換されたアルキル残基を含む。置換アルキルアリールおよび置換オキサアルキルアリールは、アルキレン部およびアリール部のいずれかあるいは両方が置換された残基を意味する。置換アルキルへテロアリールおよび置換オキサアルキルへテロアリールは、アルキレン部およびヘテロアリール部のいずれかあるいは両方が置換された残基を意味する。さらに、所定の位置に、二つあるいは三つの置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’を含むものでもよい（たとえば、ジエチルアミノやトリエチルアミノ）。
【００３９】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、あるいは、ヨウ素の何れかを意味する。ただし、フッ素、塩素、あるいは、臭素が望ましい。ジハロアリール、ジハロアルキル、トリハロアリール等は、同一または異なった複数のハロゲンで置換されたアリール およびアルキルを意味する。 例えば、４−クロロ−３−フルオロフェニルは、ジハロアリールの一つである。
【００４０】
本明細書に記載する化合物のうち多くが、１ないし複数の不斉中心（例えば、Ｒ_２ および Ｒ_２’が結合した炭素）を有し、光学異性体、ジアステレオマー、絶対的な原子空間配置（Ｒ）−あるいは （Ｓ）−という形で定義可能な他の立体異性体を生じさせる。本発明には、ラセミ混合物、光学的純体、中間混合物を含む、このような可能な異性体全てが含まれる。光学活性 （Ｒ）−および（Ｓ）− 異性体は、キラルシントンあるいはキラル剤を用いて生成してもよいし、あるいは、周知の手法を用いて、分離するようにしてもよい。本明細書に記載される化合物が、オレフィン性二重結合あるいは他の幾何不斉中心を有する場合、特に記載しない限り、その化合物には、Ｅ および Ｚ幾何異性体が含まれる。また、互変異性型も、これに含まれる。
【００４１】
必要に応じて、結晶化等により分離可能なジアステレオ異性体塩あるいは錯体を形成する、結晶化、ガス液体クロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー等により分離可能なジアステレオ異性体誘導体を形成する、一つの光学異性体をその光学異性体特異性試薬と選択的に反応、例えば、酵素酸化あるいは還元させた後、変性光学異性体と非変性光学異性体とを分離する、あるいは、例えば、キラル配位子が結合したシリカのようなキラル担体やキラル溶媒の存在下等のキラル環境でのガス液体クロマトグラフィーあるいは液体クロマトグラフィー等の、当業者に周知の方法で、Ｒ−異性体とＳ−異性体を分離するようにしてもよい。上述した分離手法の何れかで所望の光学異性体を他の化学構造体に換えた場合、所望の光学異性型を遊離するステップが必要な場合もある。光学活性試薬、基質、触媒または溶媒を用いて不斉合成を行う、あるいは、不斉形質転換により一つの光学活性体を別の光学活性体に換えることにより、所定の光学活性体を合成するようにしてもよい。図４に、光学活性出発物質からの合成の例を示す。
【００４２】
当業者に容易に理解されるように、２つの隣接するＲ_２ 基が、融合して環状構造を形成するものでもよい。融合した環状構造が、ヘテロ原子を含むものでもよいし、１ないし複数の置換基”Ｒ”．で置換されたものでもよい。さらに、シクロアルキル（すなわち、飽和環状構造）に関しては、所定の位置に２つの置換基Ｒ およびＲ’をもつものでもよい。
【００４３】
【好適な実施例】
化学式１ａ、１ｂ、１ｃ 並びに１ｄを考慮に入れ、ただし、構造式１ａを中心に考えた場合、Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、置換アルキル、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アルキルアリール、および、置換アルキルアリールから選択されることが望ましい。
【００４４】
Ｒ_１ は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル、および 置換フェニルから選択されることが望ましい。
【００４５】
Ｒ_１ を、水素、エチル、プロピル、メトキシエチル、ナフチル、フェニル、ブロモフェニル、クロロフェニル、メトキシフェニル、エトキシフェニル、トリル、ジメチルフェニル、クロロフルオロフェニル、メチルクロロフェニル、エチルフェニル、フェネチル、 ベンジル、クロロベンジル、メチルベンジル、メトキシベンジル、シアノベンジル、ヒドロキシベンジル、テトラヒドロフラニルメチル、および （エトキシカルボニル）エチルから選択することが望ましい。
【００４６】
Ｒ_２ が水素、アルキル、シクロアルキル、あるいは 置換アルキルであることが望ましい。当業者に容易に理解されるように、化学式１ａ、１ｂ、１ｃ および１ｄ は、Ｒ_２ が結合した炭素に、潜在的なキラル中心を有する。すわち、Ｒ_２ 位置は、２つの置換基 Ｒ_２ およびＲ_２’を持つことが可能である。Ｒ_２ およびＲ_２’ 基は、同一でもよいし、異なっていてもよい。異なっている場合には、組成がキラルになる。 Ｒ_２ および Ｒ_２’ が異なる場合、単一の非水素 Ｒ_２基のみを用いるのが望ましい。本発明は、純粋な光学異性体と、ラセミ混合物を含む光学異性体の混合物の利用を検討するものである。 ただし、一般には、ほぼ光学的に純粋なユートマーの利用が好ましい。特に、Ｒ光学異性体が望ましい。
【００４７】
さらに、Ｒ_２ が、水素、低級アルキルおよび 置換低級アルキルから選択され、Ｒ_２’が水素であることが望ましい。もっとも望ましくは、Ｒ_２ を、水素、メチル、エチル、プロピル（特に、ｉ−プロピル）、ブチル（特に、ｔ−ブチル）、メチルチオエチル、アミノブチル、（ＣＢＺ）アミノブチル、シクロヘキシルメチル、ベンジルオキシメチル、メチルスルフィニルエチル、メチルスルフィニルメチル、ヒドロキシメチル、ベンジル、並びに インドリルメチルから選択する。特に、Ｒ_２がｉ−プロピルであるＲ光学異性体が望ましい。
【００４８】
さらに、Ｒ_３ を、アルキル、置換アルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、アリール、置換アリール、置換オキサアルキルアリール、−Ｏ−Ｒ_１５　および　−ＮＨ−Ｒ_１５から選択し、Ｒ_１５ がアルキル、アリールおよび置換アリールから選択することが望ましい。
【００４９】
Ｒ_３ が− ＮＨＲ_１５でない場合には、Ｒ_３ をＣ_１ないしＣ_１３ アルキル、置換低級アルキル、フェニル、ビフェニルおよびナフチルを含むアリール、１ないし複数のハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、メチレンジオキシ、あるいは、トリフルオロメチルで置換したフェニルを含む置換アリール、ベンジル、フェノキシメチル、ハロフェノキシメチル、フェニルビニル、ヘテロアリール、低級アルキルで置換したヘテロアリール、並びに、 ベンジルオキシメチルから選択することが望ましい。
【００５０】
Ｒ_３ が−ＮＨＲ_１５でない場合、もっとも望ましくは、Ｒ_３を、エチル、プロピル、クロロプロピル、ブトキシ、ヘプチル、ブチル、オクチル、トリデカニル、（エトキシカルボニル）エチル、ジメチルアミノエチル、ジメチルアミノメチル、フェニル、ナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、シアノフェニル、ハロ（トリフルオロメチル）フェニル、クロロフェノキシメチル、メトキシフェニル、カルボキシフェニル、エチルフェニル、トリル、ビフェニル、メチレンジオキシフェニル、メチルスルフォニルフェニル、メトキシクロロフェニル、クロロナフチル、メチルハロフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ブチルフェニル、ペンチルフェニル、メチルニトロフェニル、フェノキシメチル、ジメトキシフェニル、フェニルビニル、ニトロクロロフェニル、ニトロフェニル、ジニトロフェニル、ビス（トリフルオロメチル）フェニル、ベンジルオキシメチル、ベンジル、フラニル、ベンゾフラニル、ピリジニル、インドリル、メチルピリジニル、キノリニル、ピコリニル、ピラゾリル、並びに、イミダゾリルから選択する。
【００５１】
Ｒ_３ が− ＮＨＲ_１５の場合には、Ｒ_１５ を低級アルキル、シクロヘキシル、フェニル、並びに、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルチオで置換したフェニルから選択することが望ましい。
【００５２】
Ｒ_３ が −ＮＨＲ_１５である場合、もっとも望ましくは、Ｒ_１５ が、イソプロピル、ブチル、シクロヘキシル、フェニル、ブロモフェニル、ジクロロフェニル、メトキシフェニル、エチルフェニル、トリル、トリフルオロメチルフェニル、あるいは、メチルチオフェニルである。
【００５３】
Ｒ_４ を、アルキル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、および、 −アルキレン−Ｒ_１６から選択し、Ｒ_１６ をアルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、並びに、Ｎ−ヘテロシクリルから選択することが望ましい。
【００５４】
Ｒ_４ を、低級アルキル、置換低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシあるいは低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、−アルキレン−Ｒ_１６から選択し、ここで、Ｒ_１６ が、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルであることが望ましい。
【００５５】
もっとも望ましくは、Ｒ_４ をメチル、エチル、プロピル、ブチル、シクロヘキシル、カルボキシエチル、カルボキシメチル、メトキシエチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ジメチルアミノエチル、ジメチルアミノプロピル、ジエチルアミノエチル、ジエチルアミノプロピル、アミノプロピル、メチルアミノプロピル、２，２−ジメチル−３−（ジメチルアミノ）プロピル、１−シクロヘキシル−４−（ジエチルアミノ）ブチル、アミノエチル、アミノブチル、アミノペンチル、アミノヘキシル、アミノエトキシエチル、イソプロピルアミノプロピル、ジイソプロピルアミノエチル、１−メチル−４−（ジエチルアミノ）ブチル、（ｔ−Ｂｏｃ）アミノプロピル、ヒドロキシフェニル、ベンジル、メトキシフェニル、メチルメトキシフェニル、ジメチルフェニル、トリル、エチルフェニル、（オキソピロリジニル）プロピル、（メトキシカルボニル）エチル、ベンジルピペリジニル、ピリジニルエチル、ピリジニルメチル、モルホニリルエチル、モルホニリルプロピル、ピペリジニル、アゼチジニルメチル、アゼチジニルプロピル、ピロリジニルエチル、ピロリジニルプロピル、ピペリジニルメチル、ピペリジニルエチル、イミダゾリルプロピル、イミダゾリルエチル、（エチルピロリジニル）メチル、（メチルピロリジニル）エチル、（メチルピペリジニル）プロピル、（メチルピペラジニル）プロピル、フラニルメチル、並びに、インドリルエチルから選択する。
【００５６】
また、Ｒ_５ 、Ｒ_６ 、Ｒ_７ およびＲ_８は、水素、ハロゲン（特にクロロおよびフルオロ）、低級アルキル（特にメチル）、置換低級アルキル（特にトリフルオロメチル）、低級アルコキシ（特にメトキシ）、およびシアノから選択されることが望ましい。この中でも、特に、水素およびハロゲンが望ましい。各置換基別に説明すると、Ｒ_５が水素あるいはハロゲンであり、Ｒ_６ が水素、メチルあるいはハロゲンであり、Ｒ_７ が水素、ハロゲン、アルキル（特にメチル）、アルコシキ（特にメトキシ）あるいはシアノであり、Ｒ_８ が水素 あるいはハロゲンであることが望ましい。Ｒ_５ 、Ｒ_６ 、Ｒ_７ およびＲ_８のうち一つだけ、特に、Ｒ_７ が水素原子でない化合物が望ましい。
【００５７】
特に好適な例では、Ｒ_１ がベンジルあるいはハロベンジルであり、Ｒ_２ がエチルおよびプロピルから選択され、Ｒ_２’ が水素、Ｒ_３ （あるいはＲ_３’、Ｒ_３’’）が置換フェニル、Ｒ_４ が −（ＣＨ）_ｍＯＨ （ここで、ｍは２あるいは３）あるいは −（ＣＨ_２ ） _ｐ Ｒ_１６（ここで、ｐ は１ないし３、Ｒ_１６はアミノ、プロピルアミノ、あるいはアゼチジニル）で、Ｒ_５ が水素、Ｒ_６ が水素、Ｒ_７ がハロゲン、Ｒ_８ が水素である。
【００５８】
化学式１ｂのスルフォンアミドを主に考えた場合、Ｒ_１ を、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、および、置換フェニルから選択し、Ｒ_２ を水素 および低級アルキルから選択し、Ｒ_２’ が水素であり、Ｒ_３’ を、Ｃ_１ないしＣ_１３アルキル、フェニル、ナフチル、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、あるいは、トリフルオロメチルで置換されたフェニル、ビフェニリル、並びに、 ヘテロアリールから選択し、Ｒ_４ を低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、 低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、−アルキレン−Ｒ_１６から選択し、ここで、Ｒ_１６ がジ（低級アルキル）アミノ、（低級アルキル）アミノ、アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリル、特に、ピロリジノ、ピペリジノ あるいはイミダゾリルであることが望ましい。
【００５９】
化学式１ｂのスルフォンアミドを主に考えた場合、もっとも望ましくは、Ｒ_１ を、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、並びに、 置換フェニルから選択し、Ｒ_２ が水素あるいは低級アルキルであり、Ｒ_２’が水素、Ｒ_３ を置換フェニルおよびナフチルから選択し、Ｒ_４ が−アルキレン−Ｒ_１６、 Ｒ_７ が水素、フルオロ、メチル、あるいは、 クロロであり、Ｒ_{５ 、}Ｒ_６ およびＲ_８ が水素であり、Ｒ_１６ を、ジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピロリジノ、ピペリジノ、イミダゾリル、並びに、モルホリノから選択する。
【００６０】
化学式１ｃ および１ｄのアミンを主に考えた場合、Ｒ_１ を水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル、並びに、置換フェニルから選択し、Ｒ_２ を水素、低級アルキル、および 、置換低級アルキルから選択し、Ｒ_２’が水素であり、Ｒ_３’’ をＣ_１ないしＣ_１３アルキル、置換低級アルキル、フェニル、ナフチル、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、あるいは、トリフルオロメチルで置換されたフェニル、ビフェリニル、ベンジル、並びに、ヘテロシクリルから選択し、Ｒ_４ を低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、 低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、置換ベンジル、 ヘテロシクリル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、−アルキレン−Ｒ_１６から選択し、ここで、Ｒ_１６ がジ（低級アルキル）アミノ、（低級アルキル）アミノ、アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルであることが望ましい。
【００６１】
化学式１ｃ および １ｄのアミンを主に考えた場合、Ｒ_１ を低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル 、並びに、置換フェニルから選択し、Ｒ_２ が 水素あるいは低級アルキルであり、Ｒ_２’ が水素であり、Ｒ_３’’を 置換フェニル、ヘテロシクリル、並びに、ナフチルから選択し、Ｒ_４ を置換 ベンジル、ヘテロシクリル、並びに、−アルキレン−Ｒ_１６から選択し、Ｒ_６ および Ｒ_７ を、水素 並びにハロゲンから選択し、Ｒ_５ およびＲ_８ が水素であり、Ｒ_１６ をジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピロリジニル、ピペリジニル、イミダゾリル、並びに、モルホニリルから選択することが、もっとも望ましい。 （式１ｄのように）Ｒ_３’’が存在する場合には、ハロフェニル、ポリハロフェニル、トリル、ジメチルフェニル、メトキシフェニル、ジメトキシフェニル、シアノフェニル、トリフルオロメチルフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、ビス（トリフルオロメチル）フェニル、カルボキシフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシカルボニルフェニル、ピペリジニル、並びに、ナフチルから選択することが、もっとも望ましい。
【００６２】
上述したように、また特に、後述のテストデータも考慮に入れて考えると、以下に示す置換基の順列・組み合わせ（それぞれ、優先順位の順に下位グループ分けされている）が、本発明の化合物、医薬品処方、製造法、並びに、使用法に関して望ましい。
【００６３】
１．化学式１ａ、１ｂ、１ｃ、１ｄのいずれかにおいて（望ましくは化学式１ａあるいは１ｄのいずれかにおいて）、Ｒ_１ は、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アルキルアリール、あるいは、置換アルキルアリール（好ましくは、ベンジルあるいは置換ベンジル）である。
ａ．Ｒ_２およびＲ_２’が結合されている不斉中心がＲ立体配置であり、Ｒ_２’が水素である。
ｉ．望ましくは、Ｒ_２が低級アルキル（好ましくは、エチル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル、あるいはｔ−ブチル）である。
１．最も望ましくは、Ｒ_２がｉ−プロピルである。
ｂ．望ましくは、Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル）である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_４が第一級アミノ低級アルキルである。
ｃ．Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン、低級アルキル（好ましくは、メチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（好ましくは、メトキシ）、およびシアノから選択される。
ｉ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
１．より望ましくは、Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ、特に、フルオロあるいはクロロ、最も望ましくはクロロである。
ｄ．化学式１ａおよび１ｄの場合、Ｒ_３あるいはＲ_３’’がアリール（好ましくは、フェニル）、置換アリール（好ましくは、低級アルキルあるいは低級アルコキシ置換フェニル）、アルキルアリール（好ましくは、ベンジルやフェニルビニル）、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール（好ましくは、フェノキシ低級アルキル）、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール（好ましくは、置換ベンジルや置換フェニルビニル）、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール（好ましくは、置換フェノキシ低級アルキル）、あるいは置換オキサアルキルヘテロアリールである。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_３あるいはＲ_３’’がアリール、置換アリール、低級アルキルアリールあるいは置換低級アルキルアリールである。
【００６４】
２．化学式１ａ、１ｂ、１ｃ、１ｄのいずれかにおいて、Ｒ_２およびＲ_２’が結合されている不斉中心がＲ立体配置であり、Ｒ_２’が水素である。
ａ．望ましくは、Ｒ_２が低級アルキル（好ましくは、エチル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル、あるいはｔ−ブチル）である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_２がｉ−プロピルである。
ｂ．望ましくは、Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル）である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_４が第一級アミノ低級アルキルである。
ｃ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_７が水素、ハロゲン（特に、クロロあるいはフルオロ）、低級アルキル（特にメチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（特にメトキシ）あるいはシアノである。
１．特に、Ｒ_７がクロロである。
【００６５】
３．化学式１ａ、１ｂ、１ｃ、１ｄのいずれかにおいて、Ｒ_７が水素、ハロゲン（特に、クロロあるいはフルオロ）、低級アルキル（特にメチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（特にメトキシ）あるいはシアノである。
ａ．Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノである。
ｂ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_７がクロロである。
【００６６】
４．化学式１ｂあるいは１ｃのいずれかにおいて、Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル、特に好ましくは、第一級アミノ低級アルキル）である。
ａ．Ｒ_２およびＲ_２’が結合されている不斉中心がＲ立体配置であり、Ｒ_２’が水素である。
ｉ．望ましくは、Ｒ_２が低級アルキル（好ましくは、エチル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル、あるいはｔ−ブチル）である。
１．最も望ましくは、Ｒ_２がｉ−プロピルである。
ｂ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_７が水素、ハロゲン（特に、クロロあるいはフルオロ）、低級アルキル（特にメチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（特にメトキシ）あるいはシアノである。
１．特に、Ｒ_７がクロロである。
【００６７】
本発明の化合物、医薬品処方、製造法、並びに使用法において、最も望ましいのは化学式１ａに、以下に示す置換基の順列・組み合わせ（それぞれ、優先順位の順に下位グループ分けされている）を組み込んだものである。
【００６８】
１．Ｒ_１がアルキルアリールあるいは置換アルキルアリール（好ましくは、ベンジルあるいは置換ベンジル、最も好ましくはベンジル）である。
ａ．Ｒ_２およびＲ_２’が結合されている不斉中心がＲ立体配置であり、Ｒ_２’が水素である。
ｉ．望ましくは、Ｒ_２が低級アルキル（好ましくは、エチル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル、あるいはｔ−ブチル）である。
１．最も望ましくは、Ｒ_２がｉ−プロピルである。
ｂ．Ｒ_３がアリール（好ましくは、フェニル）、置換アリール（好ましくは、低級アルキル、低級アルコキシ、および／あるいはハロゲン置換フェニル）、アルキルアリール（好ましくは、ベンジルやフェニルビニル）、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール（好ましくは、フェノキシ低級アルキル）、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール（好ましくは、置換ベンジルや置換フェニルビニル）、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール（好ましくは、置換フェノキシ低級アルキル）、あるいは置換オキサアルキルヘテロアリールである。
ｉ．望ましくは、Ｒ_３がアリール、置換アリール、低級アルキルアリール、置換低級アルキルアリール、あるいは、オキサ（低級）アルキルアリールである。
１．最も望ましくは、Ｒ_３がメチル、および／あるいは、ハロゲン置換フェニルである。
ｃ．Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル）である。
ｉ．望ましくは、Ｒ_４が第一級アミノ置換低級アルキルである。
１．最も望ましくは、Ｒ_４が３−アミノ−ｎ−プロピルである。
ｄ．Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン（好ましくは、クロロおよびフルオロ）、低級アルキル（好ましくは、メチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（好ましくは、メトキシ）、およびシアノから選択される。
ｉ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン、低級アルキルあるいはシアノである。
１．最も望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ａ． Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
２．Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
【００６９】
２．Ｒ_２およびＲ_２’が結合されている不斉中心がＲ立体配置で（好ましくは、Ｒ_２’が水素）である。
ａ．望ましくは、Ｒ_２が低級アルキル（好ましくは、エチル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル、あるいはｔ−ブチル）である。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_２がｉ−プロピルである。
ｂ．Ｒ_３がアリール（好ましくは、フェニル）、置換アリール（好ましくは、低級アルキル、低級アルコキシ、および／あるいはハロゲン置換フェニル）、アルキルアリール（好ましくは、ベンジルやフェニルビニル）、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール（好ましくは、フェノキシ低級アルキル）、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール（好ましくは、置換ベンジルや置換フェニルビニル）、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール（好ましくは、置換フェノキシ低級アルキル）、あるいは置換オキサアルキルヘテロアリールである。
ｉ．望ましくは、Ｒ_３がアリール、置換アリール、低級アルキルアリール、置換低級アルキルアリール、あるいは、オキサ（低級）アルキルアリールである。
１．最も望ましくは、Ｒ_３がメチル、および／あるいは、ハロゲン置換フェニルである。
ｃ．Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル）である。
ｉ．望ましくは、Ｒ_４が第一級アミノ置換低級アルキルである。
１．最も望ましくは、Ｒ_４が３−アミノ−ｎ−プロピルである。
ｄ．Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン（好ましくは、クロロおよびフルオロ）、低級アルキル（好ましくは、メチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（好ましくは、メトキシ）、およびシアノから選択される。
ｉ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン、あるいは、低級アルキルである。
１．最も望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ａ． Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
２．Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
【００７０】
３．Ｒ_３がアリール（好ましくは、フェニル）、置換アリール（好ましくは、低級アルキル、低級アルコキシ、および／あるいはハロゲン置換フェニル）、アルキルアリール（好ましくは、ベンジルやフェニルビニル）、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール（好ましくは、フェノキシ低級アルキル）、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール（好ましくは、置換ベンジルや置換フェニルビニル）、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール（好ましくは、置換フェノキシ低級アルキル）、あるいは置換オキサアルキルヘテロアリールである。
ａ．望ましくは、Ｒ_３がアリール、置換アリール、低級アルキルアリール、置換低級アルキルアリール、あるいは、オキサ（低級）アルキルアリールである。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_３がメチル、および／あるいは、ハロゲン置換フェニルである。
ｂ．Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル）である。
ｉ．望ましくは、Ｒ_４が第一級アミノ置換低級アルキルである。
１．最も望ましくは、Ｒ_４が３−アミノ−ｎ−プロピルである。
ｃ．Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン（好ましくは、クロロおよびフルオロ）、低級アルキル（好ましくは、メチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（好ましくは、メトキシ）、およびシアノから選択される。
ｉ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン、低級アルキルあるいはシアノである。
１．最も望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ａ． Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
２．Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
【００７１】
４．Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは第一級、第二級、第三級アミノ置換低級アルキル）である。
ａ．望ましくは、Ｒ_４が第一級アミノ置換低級アルキルである。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_４が３−アミノ−ｎ−プロピルである。
ｂ．Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン（好ましくは、クロロおよびフルオロ）、低級アルキル（好ましくは、メチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（好ましくは、メトキシ）、およびシアノから選択される。
ｉ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン、低級アルキルあるいはシアノである。
１．最も望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
ａ． Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
２．Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
【００７２】
５．Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン（好ましくは、クロロおよびフルオロ）、低級アルキル（好ましくは、メチル）、置換低級アルキル、低級アルコキシ（好ましくは、メトキシ）、およびシアノから選択される。
ａ．望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７およびＲ_８が水素、ハロゲン、低級アルキルあるいはシアノである。
ｉ．最も望ましくは、Ｒ_５、Ｒ_６およびＲ_８が水素である。
１． Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
ｉｉ．Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（最も好ましくは、クロロ）である。
本発明の化合物、医薬品処方、製造法、並びに使用法において、最も望ましいのは化学式１ａであり、ここで、Ｒ_１がアルキルアリールあるいは置換アルキルアリール（好ましくはベンジルあるいは置換ベンジル）、Ｒ_２が低級アルキル（望ましくはｉ−プロピル）、Ｒ_２’が水素、Ｒ_３が置換アリール（好ましくは、メチルおよび／あるいはハロゲン置換フェニル）Ｒ_４が置換アルキル（好ましくは、３−アミノ−ｎ−プロピル）、Ｒ_５ 、Ｒ_６およびＲ_８が水素、Ｒ_７がハロゲンあるいはシアノ（好ましくはクロロ）であり、Ｒ_２およびＲ_２’が結合されている不斉中心がＲ立体配置である。
【００７３】
合成・試験・使用法
本発明の組成は、当業者に周知の手法を用いて、以下に概要を示すような方法で合成される。例えば、本明細書に引例として組み込まれるＡｇｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． ｏｆ Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．，２０：３７９−３８６ （１９７７）では、芳香族第一級アミンを用いたＮアシルアントラニル酸の酸触媒濃縮によりキナゾリノンを生成する。あるいは、本明細書にすべて引例として組み込まれる米国特許出願 ５，７８３，５７７、５，９２２，８６６、並びに、５，１８７，１６７に記載の方法で、キナゾリノンを生成するようにしてもよい。
【００７４】
本発明の組成は、図１、２、４および５に示すように生成される。式 １ｄの化合物も、図１に示すものと類似の方法で生成される。ただし、最終ステップのハロゲン化アシルは、ハロゲン化アルキルに置き換えられる。
【００７５】
本発明の組成は、種々の用途で利用可能である。当業者に容易に理解可能なように、有糸分裂を様々な方法で改変可能である。すなわち、有糸分裂経路における所定の構成成分の活性を増加させる、あるいは、減少させることにより、有糸分裂に影響を与えることができる。つまり、所定の構成成分を阻害する、あるいは、活性化することによって平衡を乱し、有糸分裂に影響を与える（崩壊させる）こともできる。同様なアプローチで、減数分裂を改変することも可能である。
【００７６】
望ましくは、本発明の組成を用いて、有糸分裂紡錘体形成を調節し、有糸分裂における長期細胞周期を停止させる。本明細書で、「調節」とは、紡錘体形成を増大・減少させる等、有糸分裂紡錘体形成を改変することを意味する。また、「有糸分裂紡錘体形成」とは、有糸分裂キネシンにより微小管を双極性構造にすることを意味する。「有糸分裂紡錘体機能障害」は、有糸分裂停止と単極性紡錘体形成を意味する。
【００７７】
本発明の組成は、有糸分裂 キネシンである ＫＳＰに結合し、および／あるいは、その活性を調節するのに、有用である。他の生物由来のＫＳＰキネシンも利用可能であるが、ＫＳＰがヒトＫＳＰであることが望ましい。ここで、調節とは、紡錘体極分離を増加あるいは減少させることにより、有糸分裂紡錘体極の奇形を引き起こし、すなわち、紡錘体極を外に広げ、あるいは、有糸分裂紡錘体の形態学的混乱を引き起こす。ＫＳＰには、ＫＳＰの変異体および／あるいはフラグメントも含まれる。本明細書に全体が引例として組み込まれる、１９９９年１０月２７日出願の米国特許出願「細胞増殖モジュレーターのスクリーニング方法並びに細胞増殖状態診断方法」（Ｕ．Ｓ． Ｓｅｒｉａｌ Ｎｕｍｂｅｒ ０９／４２８，１５６）参照のこと。さらに、他の有糸分裂キネシンを本発明に用いるようにしてもよい。ただし、本発明の組成は、ＫＳＰに特異的である。
【００７８】
活性を定量するために、ＫＳＰあるいは本発明に従う化合物を、拡散させることなく、独立したサンプル受容領域を有する不溶性支持体（例えば、マイクロタイタープレート、アレイ等）に結合させる。不溶性支持体は、本発明の組成が結合可能ないかなる組成でもよく、可溶性物質から容易に分離可能で、全般的なスクリーニング法と互換可能なものである。このような支持体の表面は、堅固な凝集性でも多孔性でもよく、任意の使い勝手のよい形状であればよい。適当な不溶性支持体の例としては、マイクロタイタープレート、アレイ、膜、ビーズ等が挙げられる。これらは、通常、ガラス、プラスチック（例えば、ポリスチレン）、多糖類、ナイロン、ニトロセルロース、テフロン（登録商標）等で形成される。少量の試薬とサンプルを用いて、多数の検定を同時に行うことができるため、マイクロタイタープレートおよびアレイが特に便利である。本発明の薬剤並びに全体的な方法と互換可能であり、組成の活性を維持し、非拡散型である限りは、組成の結合方法は特に限定されない。望ましい結合方法としては、 （タンパク質が支持体に結合する際に、配位子結合部位と活性化シーケンスのいずれをも立体的に妨害しない）抗体を利用する方法、「粘着性の」あるいはイオンを含む支持体に直接結合させる方法、化学的架橋、並びに、表面上でタンパク質あるいは薬剤を合成する方法等が挙げられる。タンパク質あるいは薬剤を結合させた後、過剰の未結合材料を洗い落とす。次に、ウシ血清アルブミン （ＢＳＡ）、カゼイン、あるいは、他の無害なタンパク質あるいはその一部を用いてインキュベーションを行うことにより、サンプル受容領域をブロックするようにしてもよい。
【００７９】
本発明の抗有糸分裂薬剤のみを用いて、有糸分裂 キネシン、特にＫＳＰの活性を調節するようにしてもよい。この場合、本発明の有糸分裂薬剤をＫＳＰに結合させて、ＫＳＰ活性の定量を行う。ここで、キネシン活性は、当業者に周知のものであり、一つのキネシン活性でも複数のキネシン活性でもよい。キネシン活性には、ＡＴＰ加水分解への影響力、微小管結合、滑走および重合／解重合（微小管動力学への影響）、紡錘体の他のタンパク質への結合、細胞周期制御に関係するタンパク質への結合、キナーゼ、プロテアーゼ等の他の酵素に対する基質としての作用、ならびに、紡錘体極分離のような特定のキネシン細胞活性が含まれる。
【００８０】
運動性障害の検定方法は、当業者に周知である　［例えば、Ｈａｌｌ， ｅｔ ａｌ． （１９９６）， Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｊ．， ７１： ３４６７−３４７６、Ｔｕｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．， １９９６， ＡｎａＬ Ｂｉｏｃｈｅｍ． ２４２ （１）：２０−５、Ｇｉｔｔｅｓ ｅｔ ａｌ．， １９９６， Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｊ． ７０（ｌ）： ４１８−２９、Ｓｈｉｒａｋａｗａ ｅｔ ａｌ．， １９９５， Ｊ． Ｅｘｐ． ＢｉｏＬ １９８： １８０９−１５、Ｗｉｎｋｅｌｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．， １９９５， Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｊ． ６８： ２４４４−５３、Ｗｉｎｋｅｌｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．， １９９５， Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｊ． ６８： ７２Ｓ参照］。
【００８１】
ＡＴＰａｓｅ加水分解活性を求めるための当業者に周知の方法を用いることもできる。溶液に基づく検定を行うことが望ましい。本明細書に全体が引例として組み込まれる１９９９年５月１８日出願の米国出願０９／３１４，４６４に、このような検定法が詳述されている。あるいは、従来知られている方法を用いてもよい。例えば、 キネシンから放出されるＰ_ｉ を定量してもよい。具体的な例で説明する。０．３Ｍ ＰＣＡ （過塩素酸）およびマラカイトグリーン試薬 （８．２７ ｍＭ モリブデン酸ナトリウムＩＩ、０．３３ｍＭマラカイトグリーンシュウ酸塩、並びに、０．８ｍＭ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１ ００）を用いて、以下の手順でＡＴＰａｓｅ加水分解活性の検定を行う。０．３Ｍの冷 ＰＣＡ ９０ μＬ中で反応溶液１０μＬを急冷する。リン酸標準溶液を用いて、データを無機リン酸放出量（ｍＭ）に変換する。ＰＣＡですべての反応溶液とリン酸標準溶液を急冷した後、マイクルタイタープレート等の対象穴にマラカイトグリーン試薬を１００μＬ加える。１０ないし１５分間混合物を展開した後、６５０ｎｍでプレートの吸光度を測定する。リン酸標準溶液を用いた場合には、吸光度の測定値を ｍＭ Ｐ_ｉ 値に変換し、時間に対してプロットできる。当業者に周知のＡＴＰａｓｅ 検定には、さらに、ルシフェラーゼ検定も含まれる。
【００８２】
また、キネシンモーター領域のＡＴＰａｓｅ 活性を用いて、調節剤の効果をモニターすることができる。微小管の不在下でキネシンのＡＴＰａｓｅ検定を行うこともできるし、微小管の存在下でＡＴＰａｓｅ検定を行うこともできる。このような検定では、様々な種類の調節剤を検出可能である。調節剤の効果が微小管並びにＡＴＰの濃度と無関係なものでも、キネシンＡＴＰａｓｅに対する薬剤の効果がＡＴＰ濃度、微小管濃度、あるいは、その両方を増加させることにより減少するものでもよい。さらには、逆に、調節剤の効果がＡＴＰ濃度、微小管濃度、あるいは、その両方を増加させることにより増加するものでもよい。
【００８３】
生体外でＫＳＰの生化学活性を調節する薬剤を生体内でスクリーニングするようにしてもよい。生体内でこのような薬剤をスクリーニングする方法には、細胞周期分配、細胞生死判別、細胞存在判定、形態、活性、分配、あるいは、有糸分裂紡錘体量の検定が挙げられる。フローサイトメトリー等を用いて細胞集団の細胞周期分配をモニターする方法は、細胞生死判別法として当業者に周知である。例えば、本明細書に全体が引例として組み込まれる、１９９９年１０月２２日出願の米国特許出願「細胞増殖モジュレーターのスクリーニング方法並びに細胞増殖状態診断方法」（Ｕ．Ｓ． Ｓｅｒｉａｌ Ｎｕｍｂｅｒ ０９／４２８，１５６）参照のこと。
【００８４】
上述した検定法に加えて、紡錘体の形成と奇形をモニターする微視的方法も、当業者に周知である （例えば、Ｗｈｉｔｅｈｅａｄ ａｎｄ Ｒａｔｔｎｅｒ （１９９８）， Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ． １１１：２５５１−６１、Ｇａｌｇｉｏ ｅｔ ａｌ， （１９９６） Ｊ． Ｃｅｌｌ ｂｉｏｌ．， １３５：３９９−４１４参照） 。
【００８５】
本発明の組成は、ＫＳＰキネシンを阻害する。阻害を表す指標の一つがＩＣ_５０値である。これは、ＫＳＰ活性を５０％減少させる組成濃度として定義される。組成のＩＣ_５０値が約１ｍＭ未満であることが望ましい。好ましくは、ＩＣ_５０値が約１００μＭ未満、より好ましくは、ＩＣ_５０値が約１０μＭ未満、もっと好ましくは、ＩＣ_５０値が約１μＭ未満、特に好ましくは、ＩＣ_５０値が約１００ｎＭ未満、最も好ましくは、ＩＣ_５０値が約１０ｎＭ未満である。ＩＣ_５０値の測定は、ＡＴＰａｓｅを定量することにより行う。
【００８６】
阻害を表す別の指標は、Ｋ_ｉ値である。ＩＣ_５０値が約１μＭ未満の化合物に対して、Ｋ_ｉ 値あるいはＫ_ｄ 値は、キナゾリノンとＫＳＰとの相互作用を示す解離定数として定義される。化合物のＫ_ｉ値が約１００ μＭ未満であることが望ましい。好ましくは、Ｋ_ｉ値が１０μＭ未満、より好ましくは、Ｋ_ｉ値が約１μＭ未満、特に好ましくは、Ｋ_ｉ値が約１００ｎＭ未満、最も好ましくは、Ｋ_ｉ値が約１０ｎＭ未満である。化合物のＫ_ｉ値は、三つの仮定に基づいて、ＩＣ_５０値から求められる。第一の仮定は、その酵素に結合する化合物分子がたった一つだけであり、協同しない。第二の仮定は、活性酵素と試験対象化合物の濃度が既知である（すなわち、生成物は有意の量の不純物や不活性形を含まない）。第三の仮定は、酵素−阻害剤複合体の酵素率は０である。率データ（すなわち、化合物濃度）は、以下の式で適合させる。
【００８７】
【数１】

【００８８】
ここで、Ｖ は測定率、Ｖ_ｍａｘは遊離酵素の割合、Ｉ_０は阻害剤濃度、 Ｅ_０は酵素濃度、Ｋ_ｄは酵素−阻害剤複合体の解離定数である。
【００８９】
阻害を表すさらに別の指標は、ＧＩ_５０値である。これは、細胞成長率を５０％減少させる化合物濃度として定義される。化合物のＧＩ_５０値が約 １ｍＭ未満であることが望ましい。好ましくは、ＧＩ_５０値が約２０μＭ 未満、より好ましくは、ＧＩ_５０値が約１０μＭ未満、もっと好ましくは、ＧＩ_５０値が約１μＭ未満、さらに好ましくは、ＧＩ_５０値が１００ｎＭ未満、最も好ましくは、ＧＩ_５０値が約１０ｎＭ未満である。ＧＩ_５０値の測定は、細胞増殖検定により行う。
【００９０】
本発明の組成は、細胞増殖性疾患の治療に用いられる。本明細書に記載の方法並びに組成で治療可能な疾患は、以下に限定されるものではないが、ガン（詳しくは、後述する）、自己免疫疾患、関節炎、拒絶反応、炎症性腸疾患、外科手術、血管形成術等の医療行為により誘発された増殖等が含まれる。細胞が高増殖状態あるいは低増殖状態（異常な状態）にあるわけではないが、治療を必要とする場合もありえる。例えば、創傷治癒の過程で、細胞は「正常に」増殖をしているが、増殖の増強が望ましい場合もある。また、農業分野においては、上述したように、細胞は「正常な」状態にあるが、穀物の成長を直接促進させることにより、あるいは、穀物の成長に悪影響を与える植物や生物の成長を阻害することにより、増殖を調節して穀物の生産を増大させることが望ましい場合も考えられる。従って、本発明は、上記のような異常や状態の何れかに陥っている、あるいは、陥る可能性のある細胞あるいは個体に適用される。
【００９１】
本明細書に記載の組成並びに方法は、皮膚ガン、乳ガン、脳腫瘍、子宮頸ガン、睾丸ガン等の充実性腫瘍の治療に、特に有用であると、思われる。本発明の組成並びに方法で治療可能なガンの例としては、以下に限定されるものではないが、心臓：腫瘍（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫、奇形腫、肺：気管支原性肺ガン（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺ガン）、肺胞（細気管支）ガン、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫、胃腸：食道（扁平上皮細胞ガン、腺ガン、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（悪性腫瘍、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（腺管ガン、インスリノーマ、グルカゴン産生腫瘍、 ガストリン産生腫瘍、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸 （腺ガン、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺ガン、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）、尿生殖路：腎臓 （腺ガン、ウィルム腫瘍 ［腎石灰沈着症］、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮ガン、移行上皮ガン、腺ガン）、前立腺（腺ガン、肉腫）、精巣（セミノーマ、奇形腫、胎生期ガン、奇形ガン、絨毛ガン、肉腫、間質細胞ガン、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）、肝臓：肝臓ガン（肝細胞ガン）、胆管ガン、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫、骨：骨原性肉腫 （骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫 （細網細胞肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞 腫、脊索腫、骨軟骨腫（骨軟骨外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫、巨細胞腫、神経系：頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣細胞腫、胚細胞腫 ［松果体腫］、多形性膠芽腫、乏突起膠腫、シュワン鞘腫、網膜芽腫、先天性腫瘍）、脊髄（神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）、婦人科：子宮（子宮内膜ガン）、子宮頸管（子宮頸ガン、前腫瘍子宮頸部形成異常）、卵巣（卵巣ガン［漿液性嚢胞腺ガン、ムチン性嚢胞腺ガン、未分類ガン］、顆粒膜−包膜細胞腫、セルトリ−ライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰（扁平上皮ガン、上皮内ガン、腺ガン、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞ガン、扁平上皮ガン、ブドウ状肉腫 ［胎児性横紋筋肉腫］、ラッパ管（ガン）、血液系：血液（骨髄性白血病 ［急性および慢性］、急性リンパ性白血病、慢性リンパ球性白血病、脊髄増殖症候群、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫 ［悪性リンパ腫］、皮膚：悪性黒色腫、基底細胞ガン、扁平上皮ガン、カポジ肉腫、奇胎形成異常母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬、並びに、副腎： 神経芽細胞腫が挙げられる。すなわち、本明細書で用いられる「ガン細胞」という言葉は、上述のいずれかに冒されている細胞を意味する。
【００９２】
従って、本発明の組成は細胞に投与される。本明細書中で用いられる「投与」という言葉は、本発明の有糸分裂薬剤を、治療に有効な投与量、培養細胞あるいは患者の細胞に投与することを意味する。ここで、「治療に有効な投与量」とは、投与によって効果を生み出す分量を意味する。正確な投与量は、治療の目的によって異なるが、当業者は、周知の手法でこれを決めることができる。当業者に周知のように、全身に作用させるか、局所的な作用に留めるか、また、年齢、体重、健康状態、性別、食習慣、投与時間、薬剤の相互作用、条件の厳密性に関して調節が必要となるであろうが、当業者は、ルーチン実験を行うことにより、このような調節を行うことができる。また、本明細書で用いられる「細胞」という言葉は、有糸分裂あるいは減数分裂を変更可能な任意の細胞を意味する。
【００９３】
本発明の「患者」には、人間のみでなく、哺乳動物を初めとする他の動物、さらには、他の生物も含まれる。すなわち、本発明の方法は、ヒトの治療にも、獣医分野にも適用可能である。望ましくは、患者が哺乳動物であり、最も望ましくは、患者がヒトである。
【００９４】
所望の薬理活性を有する有糸分裂薬剤を、生理的に許容可能な担体に担持させて、患者に投与するようにしてもよい。後述するように、投与法にしたがって、化合物は、様々に成形可能である。この場合、治療活性化合物の濃度は、約０．１ないし１００ 重量％の範囲で決められる。薬剤を単独で投与するようにしてもよいし、あるいは、放射線治療や他の化学療法薬のような他の治療法と組み合わせて投与してもよい。
【００９５】
薬剤組成を、調剤的に許容可能な塩のような水溶性の形態に成形することが望ましい。これには、酸添加塩と塩基添加塩の両方が含まれる。「調剤的に許容可能な酸添加塩」は、遊離塩基の生物学的効力を保持し、生物学的な意味においても他の意味でも望ましくないものではない塩を意味する。添加される酸は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸でも、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、琥珀酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸等の有機酸でもよい。「調剤的に許容可能な塩基添加塩」には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウム塩等の無機塩基由来の塩が含まれる。特に望ましいのは、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、および、マグネシウム塩である。調剤的に許容可能な無毒の有機塩基由来の塩には、第一級、第二級、第三級アミン、天然置換アミン等の置換アミン、環状アミンおよび塩基性イオン交換樹脂の塩が含まれる。例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン等である。
【００９６】
薬剤組成は、顆粒、錠剤、丸薬、座薬、カプセル、懸濁液、軟膏、ローション等、様々な形態に成形可能である。経口あるいは局所使用に適した薬剤用有機あるいは無機担体および／あるいは希釈剤を用いて、治療活性化合物を含む組成を成形するようにしてもよい。当業者に周知の希釈剤には、水性媒体、植物および動物性油脂がある。助剤として、安定剤、湿潤剤や乳化剤、浸透圧調節塩、ｐＨ 調節緩衝液、皮膚浸透エンハンサ等を用いてもよい。また、薬剤組成に、血清アルブミン等の運搬体タンパク質、緩衝液、微結晶性セルロース、乳糖、とうもろこしや他の澱粉等の充填剤、結着剤、甘味料や他の香料添加剤、色素、ポリエチレングリコールから選択される一ないし複数の成分を含むようにしてもよい。このような添加剤は当業者に周知であり、様々な形態で用いられる。
【００９７】
本発明の 有糸分裂剤の投与は、様々な方法で行われる。例としては、これらに限定されるものではないが、経口投与、皮下投与、静脈内投与、鼻腔内投与、経皮投与、腹腔内投与、筋肉内投与、肺内投与、膣内投与、直腸投与、眼内投与が挙げられる。創傷や炎症の治療の場合には、有糸分裂剤を溶液あるいはスプレーの形で直接塗布してもよい。
【００９８】
本発明の化合物を用いて、ＫＳＰ キネシンに結合する化合物のスクリーニングを行う場合には、ＫＳＰを支持体に結合させた後、本発明の化合物（すなわち、有糸分裂剤）を加えて、測定を行う。あるいは、本発明の化合物を支持体に結合させた後、ＫＳＰを加えるようにしてもよい。新規な結合剤として利用可能な化合物には、特定の抗体や、ケミカルライブラリのスクリーニングで同定された人工結合剤や、ペプチド類似体等がある。ヒト細胞に対する毒性の低い候補薬剤のスクリーニング検定に大きな関心が集まっている。この目的で、標識生体外タンパク質−タンパク質結合検定、電気泳動度測定、タンパク質結合の免疫検査、（リン酸化測定等の）機能検査等、様々な検定が行われる。
【００９９】
ＫＳＰへの有糸分裂剤の結合は、種々の方法で測定可能である。有糸分裂剤（本発明の化合物）を蛍光物質あるいは放射性物質で標識し、直接結合を測定する方法も望ましい。 例えば、ＫＳＰの全部または一部を固体の支持体に結合させて、標識した有糸分裂剤（例えば、本発明の化合物の少なくとも一つの原子を検出可能な同位体に置き換えた化合物）を加え、過剰の試薬を洗い落とし、固体支持体上に残っている標識化合物の量を測定する。当業者によく知られているような種々の手法で、ブロッキングや洗浄を行うようにしてもよい。
【０１００】
ここで、「標識」とは、放射性同位体、蛍光タグ、酵素、抗体、磁性粒子等の粒子、化学発光タグ、所定の結合分子等の検出可能な信号として作用するラベルで、直接あるいは間接的に化合物を標識することを意味する。所定の結合分子の例としては、ビオチンとストレプトアビジンのペアや、ジゴキシンとアンチジゴキシンのペアが挙げられる。所定の結合分子の場合、通常は、相補的な分子を、周知の手法に従って、上述した検出可能な分子で標識する。ラベルは、直接的あるいは間接的に検出可能な信号を与えるものであればよい。
【０１０１】
一つの成分のみを標識するようにしてもよい。例えば、キネシンタンパク質の場合、^１２５Ｉを用いてチロシン部位を標識するようにしてもよいし、発蛍光団で標識するようにしてもよい。あるいは、異なったラベルを用いて、複数の成分を標識するようにしてもよい。例えば、タンパク質を^１２５Ｉ で標識して、有糸分裂剤を発蛍光団で標識するものでもよい。
【０１０２】
本発明の化合物を競争剤として用いて、候補薬剤のスクリーニングを行うようにしてもよい。 「生体活性候補薬剤」、「候補薬剤」、並びに、本明細書で用いられる、それに類似する言葉は、タンパク質、オリゴペプチド、小さな有機分子、多糖類等、その生体活性が試験対象となる任意の分子を意味する。これらの薬剤は、細胞増殖の表現型、あるいは、核酸シーケンスとタンパク質シーケンスの両方を含む細胞増殖シーケンスの表現を、直接的または間接的に変更可能なものでもよい。また、細胞増殖タンパク質結合および／あるいは活性の変更をスクリーニングするようにしてもよい。このようなスクリーニングは、微小管の存在下または不在下で行われる。タンパク質結合あるいは活性をスクリーニングする場合には、特定のタンパク質に結合することが既にわかっている化合物、例えば、微小管等の高分子構造体やＡＴＰ等のエネルギー源を除外することが望ましい。内因性の自然な状態で細胞増殖タンパク質に結合しない候補薬剤を、ここでは、「外因性」薬剤と呼ぶことにするが、そのような候補薬剤の検定を行うようにしてもよい。外因性薬剤は、ＫＳＰに対する抗体を除外したものであることが望ましい。
【０１０３】
多数の化学種が候補薬剤になりえるが、一般的には、有機分子、好ましくは、分子量が１００ダルトンより大きく、約 ２，５００ダルトン未満の小さな有機化合物が候補薬剤である。候補薬剤は、タンパク質との構造的な相互作用に必要な官能基、特に、水素結合並びに親油性結合を有し、少なくとも一つのアミン、カルボニル、ヒドロキシル、エーテル、あるいは、カルボキシル基、好ましくは、少なくとも二つの官能基を備える。候補薬剤が、周期性炭素あるいは環状へテロ構造体、および／あるいは、上記の官能基の一つあるいは複数で置換された芳香族あるいはポリ芳香族構造体を備えるものでもよい。ペプチド、糖類、脂肪酸、ステロイド、プリン、ピリミジン誘導体、類似構造体、あるいはその組み合わせ等を含む生体分子も候補薬剤になりえる。特に、ペプチドが好ましい。
【０１０４】
合成あるいは天然化合物のライブラリ等の、様々な母集団から候補薬剤が選択される。ランダム化オリゴヌクレオチド発現等、様々な有機化合物や生体分子のランダムおよび指向性合成に、多数の手段を利用可能である。あるいは、細菌、菌類、植物ならびに動物の抽出物として得られる天然化合物のライブラリを利用可能であり、容易に作成可能である。さらに、天然あるいは合成化合物のライブラリ並びに化合物を、周知の化学的、物理的、生化学的手段を用いて、容易に修飾可能である。既存の薬剤に、アシル化、アルキル化、エステル化、アミド化などの指向性あるいはランダムな化学的修飾を施して、類似構造体を生成するようにしてもよい。
【０１０５】
競争的なスクリーニング検定は次のような工程で行われる。まず、ＫＳＰと候補薬剤とを結合させた第一サンプルを作成する。第二サンプルには、有糸分裂剤と、ＫＳＰと、候補薬剤とをいれる。このスクリーニングは、微小管の存在下で行ってもよいし、不在下で行ってもよい。 両方のサンプルにおいて、候補薬剤の結合を測定する。その変化、すなわち、二つのサンプル間の結合の相違は、ＫＳＰに結合可能で、その活性を調節可能な薬剤の存在を示している。 したがって、第二サンプルにおける候補薬剤の結合が第一サンプルと異なっている場合、その候補薬剤はＫＳＰに結合可能であると判定される。
【０１０６】
競争的な結合を検定することによって、候補薬剤の結合を測定する方法も好適である。この場合には、抗体、ペプチド、結合剤、配位子等、ＫＳＰに結合することがわかっている結合体を競争剤として用いる。所定の状況下では、候補薬剤と結合体との間に結合の競争が起こり、結合体が候補薬剤に置き換わることもありえる。
【０１０７】
処理としては、まず、候補薬剤を標識し、候補薬剤あるいは競争剤、あるいはその両方をＫＳＰに加え、結合に十分な時間放置する。最適な活性を促進する任意の温度、通常は４ないし４０℃の温度で、インキュベーションを行うようにしてもよい。
【０１０８】
インキュベーションの時間は、最適な活性が得られるように選択すればよいが、迅速なハイ・スロープット・スクリーニングが可能になるように、最適化してもよい。通常は、０．１ないし１時間で十分である。過剰の試薬を除去あるいは洗い流した後、第二の成分を加える。標識成分の存在あるいは不在により結合を測定する。
【０１０９】
処理の一例として、最初に競争剤を加え、続いて、候補薬剤を加えてもよい。競争剤が置換されることは、候補薬剤がＫＳＰに結合している、すなわち、候補薬剤が、ＫＳＰ活性に結合し、これを調節する能力があることを示している。この場合、どちらの成分を標識してもよい。競争剤が標識されている場合には、洗浄溶液中のラベルの存在から、候補薬剤が競争剤に置き換わったことがわかる。逆に、候補薬剤が標識されている場合には、支持体上のラベルの存在から、候補薬剤が競争剤に置き換わったことがわかる。
【０１１０】
あるいは、別の処理の例として、最初に候補薬剤を加え、インキュベーションと洗浄を行った後、競争剤を加えるようにしてもよい。競争剤による結合が存在しなければ、候補薬剤が高親和性でＫＳＰに結合していることがわかる。この場合、候補薬剤が標識されていれば、支持体上のラベルの存在と、競争剤の結合の不在とから、候補薬剤がＫＳＰ結合能力を有していると判定できる。
【０１１１】
ＫＳＰの結合部位を特定することも望ましい。結合部位は、様々な手法で特定可能である。例えば、いったんＫＳＰを有糸分裂 剤に結合させた後、ＫＳＰを切断あるいは修飾する。この操作を繰り返して、結合に必要な成分を特定する。
【０１１２】
ＫＳＰ活性を調節可能な候補薬剤をスクリーニングすることにより、調節の検定を行う。これは、候補薬剤をＫＳＰに結合させ、ＫＳＰの生物学的活性の変化を定量するというステップで行われる。したがって、この場合には、候補薬剤は、 ＫＳＰに結合し（これが、不要な場合もあるが）、生物学的活性あるいは生化学的活性を変化させるものでなければならない。スクリーニング法には、前述したように、細胞周期分配、細胞生死判別あるいは細胞存在、形態、活性、分配、あるいは、有糸分裂紡錘体量の変化に基づく、細胞の生体外スクリーニング法も、生体内スクリーニング法も含まれる。
【０１１３】
あるいは、分別スクリーニングにより、天然ＫＳＰには結合可能であるが、修飾ＫＳＰには結合不能な薬剤を同定するようにしてもよい。
【０１１４】
正の対照群と負の対照群を検定に用いるようにしてもよい。統計的に有意な結果を得るためには、すべての対照群や試験サンプルで測定を少なくとも三度行うことが望ましい。サンプルのインキュベーションを行う場合には、薬剤がタンパク質に結合するのに十分な時間、インキュベーションを続ける。インキュベーション終了後、サンプルを洗浄して、非特異的に結合した薬剤を取り除き、通常は標識されている結合薬剤の量を測定する。たとえば、放射線同位体でラベルした場合には、サンプルをシンチレーション・カウンタにかけて、結合化合物を定量するようにしてもよい。
【０１１５】
種々の他の試薬をスクリーニング検定に用いてもよい。これらの試薬の例としては、最適なタンパク質−タンパク質結合の促進、および／あるいは、非特異的、すなわち、バックグラウンドの相互作用の削減に用いられる、塩、アルブミン等の中性タンパク質、界面活性剤等が挙げられる。また、プロテアーゼ（タンパク分解酵素）阻害剤、ヌクレアーゼ（核酸分解酵素）阻害剤、抗細菌剤等、検査効率を高めるような試薬を用いてもよい。複数の成分の混合物を用いる場合には、必要な結合が形成されるような順番で、各成分を添加すればよい。
【０１１６】
以下の実施例は、上述した発明がより明らかになるように説明するものであり、本発明の好適な実施の形態を詳述するものである。ただし、これらの実施例は、なんら本発明を限定するものではなく、例示に過ぎない。本明細書で参照したすべての文献は、その全体が引例として組み込まれる。
【０１１７】
【実施例】
略語および定義
以下に、本明細書で用いられる略語ならびに用語の意味を記載する。
Ａｃ　＝　アセチル
ＢＮＢ　＝　４−ブロモメチル−３−ニトロ安息香酸
Ｂｏｃ　＝　ｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｂｕ　＝　ブチル
ｃ−　＝　シクロ
ＣＢＺ　＝　カルボベンゾキシ ＝ ベンジルオキシカルボニル
ＤＢＵ　＝　ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデス−７−エン
ＤＣＭ　＝　ジクロロメタン ＝ 塩化メチレン＝ ＣＨ２Ｃｌ２
ＤＣＥ　＝　ジクロロエチレン
ＤＥＡＤ　＝　ジエチルアゾジカルボン酸エステル
ＤＩＣ　＝　ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ　＝　Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ　＝　４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ　＝　Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ　＝　ジメチルスルホキシド
ＤＶＢ　＝　１，４−ジビニルベンゼン
ＥＥＤＱ　＝　２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン
Ｅｔ　＝　エチル
Ｆｍｏｃ　＝　９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＧＣ　 ＝　ガス・クロマトグラフィー
ＨＡＴＵ　＝　Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾル−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸エステル
ＨＭＤＳ　＝　ヘキサメチルジシラザン
ＨＯＡｃ　＝　酢酸
ＨＯＢｔ　＝　ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｍｅ　＝　メチル
ｍｅｓｙｌ　＝　メタンスルホニル
ＭＴＢＥ　＝　メチル ｔ−ブチル エーテル
ＮＭＯ　＝　酸化Ｎ−メチルモルホリン
ＰＥＧ　＝　ポリエチレングリコール
Ｐｈ　＝　フェニル
ＰｈＯＨ　＝　フェノール
ＰｆＰ　＝　ペンタフルオロフェノール
ＰＰＴＳ　＝　ピリジニウムｐ−トルエンスルフォン酸エステル
Ｐｙ　＝　ピリジン
ＰｙＢｒｏＰ　＝　ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロリン酸エステル
ｒｔ　＝　室温
ｓａｔ＝ｄ　＝　飽和
ｓ−　＝　第二級
ｔ−　＝　第三級
ＴＢＤＭＳ　＝　ｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＥＳ　＝　トリエチルシラン
ＴＦＡ　＝　トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ　＝　テトラヒドロフラン
ＴＭＯＦ　＝　トリメチルオルト蟻酸エステル
ＴＭＳ　＝　トリメチルシリル
ｔｏｓｙｌ　＝　ｐ−トルエンスルホニル
Ｔｒｔ　＝　トリフェニルメチル
【０１１８】
【第１実施例】
化合物の合成
一般的な合成を図１および図２に示す。
【０１１９】
ステップ１： Ｎ− ブチリルアントラニル酸
アントラニル酸（１） （０．５ ｍｏｌｅ、６８．５ ｇ） および ジメチルホルムアミド （２５０ ｍＬ）を、温度計、滴下漏斗、効率的な磁気攪拌棒を備えた５００ ｍＬの三つ口丸底フラスコに入れた。次に、混合溶液の温度が４０ーＣを超えないような速度で、塩化ブチリル（０．５５ ｍｏｌｅ、 ５７．１ ｍＬ）を、フラスコ内の溶液に滴下した。けん濁液を、少なくとも３時間、室温でよく攪拌した。混合溶液を水（２０００ ｍＬ）に注ぎ、さらに１時間攪拌した。沈殿した生成物をろ過して集め、冷水で洗って、Ｐ_２０_５ を用いて、減圧下で乾燥させ、化合物 ２ （６７．３ ｇ、６５％）を得た。
【０１２０】
ステップ２： ２− プロピル −３，１−［４Ｈ］ ベンゾキサジン −４− オン
磁気攪拌棒、（真空注入口付き）クライゼン蒸留ヘッド、温度計を備えた５００ ｍＬ丸底フラスコで、化合物 ２ （５１．８ ｇ、０．２５ ｍｏｌｅ） を、無水酢酸 （１８０ ｍＬ）に溶解させた。フラスコをオイル・バスに入れ、よく攪拌しながら、ゆっくりと、１７０ないし１８０ーＣ まで加熱した。生成した酢酸を大気圧でゆっくりと飛ばした。蒸留装置のヘッド温度をモニターすることにより、形質転換の進行度合いを測定した。次に、反応混合物を６０ ーＣまで冷却し、減圧 （約２０ ｍｍ Ｈｇ）蒸留により、過剰の無水酢酸を除いた。残留物を冷却し、生成物を結晶化した。得られた生成物を ｎ−ヘキサン（７５ ｍＬ） を用いて粉砕し、ろ過、単離することにより２−プロピル−３，１−［４Ｈ］ベンゾキサジン−４−オン（３） （２９．３ ｇ、６２％）を得た。上述の処理により得られた化合物 ３は、充分な純度を有し、直接次のステップに用いることができた。
【０１２１】
ステップ３： ２− プロピル −３− ベンジルキナゾリン −４− オン
化合物 ３ （２８．４ ｇ、０．１５ ｍｏｌｅ） およびベンジルアミン （１７．５ ｍＬ、０．１６ ｍｏｌｅ）を、 ２５０ ｍＬ 丸底フラスコに入れ、クロロホルム （５０ ｍｌ）で６時間還流した。化合物 ３を完全に溶かした後、クロロホルムを減圧で飛ばした。残留物をクライゼン蒸留ヘッドと磁気攪拌棒とを備えたフラスコに入れ、エチレングリコール （１００ ｍＬ） とＮａＯＨ ペレット （０．６０ ｇ） とを加えた。フラスコをオイル・バスにつけて、よく攪拌しながら、１３０から１４０ ーＣ に再加熱した。生成した水を蒸留して除去しながら、その温度に５時間保った。反応完了後、透明溶液を室温まで冷やし、一晩放置して、生成物を沈殿させた。３％ＨＣｌ水溶液を加えて、懸濁液の ｐＨを７から８に合わせた。結晶をろ別し、冷水で洗って、イソプロピルアルコール（あるいは、アセトン）で再結晶させて、２−プロピル−３−ベンジルキナゾリン−４−オン（化合物 ４） （２８．０ ｇ、６７％）を得た。
【０１２２】
ステップ４： ２−（ｌ’− ブロモプロピル ）−３− ベンジルキナゾリン −４− オン
温度計、滴下漏斗、効率的な磁気攪拌棒を備えた２５０ ｍＬ の三つ口丸底フラスコに化合物 ４ （２７．８ ｇ、０． １０ ｍｏｌｅ）を入れ、無水酢酸ナトリウム（１０．０ ｇ）および氷酢酸 （１３０ ｍＬ）を加えた。 酢酸 （１０ ｍＬ）に溶解した臭素（１６．０ ｇ、０．１０ ｍｏｌｅ）を、上記溶液に、４０ ーＣで１ないし２時間かけて滴下した。滴下終了後、混合溶液を水（１５００ ｍＬ）に注ぎ、室温で、１ないし２時間攪拌した。沈殿生成物２−（ｌ’−ブロモプロピル）−３−ベンジルキナゾリン−４−オンをろ過・単離し、温水で洗って、残った微量の酢酸を除き、少量のイソプロピルアルコールで洗浄した。それを乾燥して、化合物５ （３３．０ ｇ、９２％）を得た。
【０１２３】
ステップ５： ２−［ｌ’−（Ｎ，Ｎ− ジメチルエチレンジアミノ ） プロピル ］−３− ベンジルキナゾリン −４− オン
化合物 ５ （１０．７ ｇ、０．０３ ｍｏｌｅ） および Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン （６．６ ｍＬ、０．０６ ｍｏｌｅ） を無水エタノール（６０ ｍＬ）に溶かして、６時間加熱還流した。反応完了後、溶媒を減圧下で飛ばした。残留物を ジクロロメタン （１５０ ｍＬ）に溶かして、 ３％ ＮａＯＨ水溶液 （約１０ないし２０ ｍＬ）で洗浄した。ＭｇＳＯ_４ を用いて有機層を乾燥させ、減圧下で乾固させた。シリカゲルの短パッド上でＣＨＣ１_３−ＭｅＯＨ−アンモニア水の９０：１０：０．１溶離液を用いたフラッシュ・クロマトグラフィーを行うことにより、残った油状物質を精製した。これにより、所望の化合物（５） ２−［ｌ’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミノ）プロピル］−３−ベンジルキナゾリン−４−オン（６）（６．０ ｇ、５５％）を得た。
【０１２４】
ステップ６： Ｓｔｅｐ ６： ２−［ｌ’−（Ｎ−４− フルオロベンゾイル ）−（Ｎ，Ｎ− ジメチルエチレンジアミノ ） プロピル ］−３− ベンジルキナゾリン −４− オン
ＨＰＬＣ 用 ＣＨＣｌ_３ （０．５ ｍＬ）を用いて、化合物 ５（１．８２２ ｇ、５．０ ｍｍｏｌ） の原液を作成した。 ２．０ ｍＬ容量フラスコで、ＨＰＬＣ用１，２−ジクロロエタン（２．０ ｍＬ）を用いて、塩化ｐ−フルオロベンゾイル （１６０．２ ｍｇ， １ ｍｍｏｌ）の原液を作成した。さらに、ＨＰＬＣ用１，２−ジクロロエタンを用いて、トリエチルアミン （０．５ Ｍ、２．０ ｍＬ）溶液を作成した。自動リキッド・ディスペンサーＢｅｃｋｍａｎ Ｂｉｏｍｅｔ ２０００を用いて、各溶液を１００ μＬずつ、ガラス製反応容器にピペット分注した。メカニカル・シェーカを用いて、反応混合物を振とうさせ、超音波水槽で超音波にあて、室温で一晩インキュベーションした。混合物をＣＨＣｌ_３ （３００ μＬ）で希釈し、 ５％ ＮａＨＣＯ_３水溶液と水とで洗浄した。溶媒を減圧下で除去し、化合物６ （６５％）を得た。生成した化合物の純度を調べるために、ＣＨ_２Ｃｌ_２−エタノール−濃縮アンモニア水の１００：１０：１溶離液を用いて、ＴＬＣで解析した。
【０１２５】
【実施例２および３】
一般化学式１ｄで示される 化合物の合成
【０１２６】
【化２１】

ａｌｋｙｌｅｎｅ：アルキレン、Ｒｅｓｉｎ：樹脂
【０１２７】
無水溶媒は、すべて、ＳｕｒｅＳｅａｌ（登録商標）容器入りで、アルドリッチ・ケミカル社から購入した。試薬のうちの大部分も、アルドリッチ・ケミカル社から購入した。
略号：ＤＣＭ：ジクロロメタン、ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ＴＥＳ：トリエチルシラン、ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸。４ × ６アレイのアルミニウム合成ブロックに収容され、テフロン（登録商標）で裏打ちされたゴム膜で密閉した１５ × ７５ ｍｍスクリューキャップ付き丸底バイアルで、アレイ合成を行った。試薬を加え、一チャンネルあるいはマルチチャンネル・ピペッターを用いて、水性抽出を行った。その後、Ｗｈａｔｍａｎ／Ｐｏｌｙｆｉｌｔｒｏｎｉｃｓ ２４ 穴、１０ ｍＬろ過ブロックを用いて、ろ過した。Ｌａｂｃｏｎｃｏ Ｖｏｒｔｅｘ−エバポレーターを用いて、あるいは、４ × ６ 窒素マニホールドでスイープすることにより、アレイから揮発物質を蒸発させた。
【０１２８】
【実施例２ （単一化合物の固相合成）】
ステップ１：１，３−ジアミノプロパントリチル樹脂 （Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、１．２ ｍｍｏｌ／ｇ） （０．２０ ｇ， ０．２４ ｍｍｏｌ） を秤量して、スクリューキャップ付きバイアルに入れ、ＤＭＦ とクロロホルムの１：１ 混合物を３ ｍＬ加えた。ＤＩＥＡ （０．１３０ ｍＬ、０．７２ ｍｍｏｌ） と（実施例１で得られた）２−（１’−ブロモプロピル）−３−ベンジルキナゾリン−４−オン （０．１８８ ｇ、０．４８ ｍｍｏｌ）とを加えた。バイアルを密閉し、７０ ーＣに加熱し、一晩振とうした。樹脂をろ別し、洗浄して（３ × ＤＣＭ、２ × ＭｅＯＨ、１ × ＤＣＭ、２ × エーテル）、減圧下で乾燥させた。樹脂２７ ｍｇを５：５：９０ ＴＦＡ：ＴＥＳ：ＤＣＭで１５分間処理し、処理した混合物をろ過、乾固して、８ ｍｇ （収率：６４％） のキナゾリン−ジアミン中間物質を得た。ＬＣＭＳ解析の結果、８０ ％以上の純度があった。
【０１２９】
ステップ２：ステップ１で生成した樹脂を、３ ｍＬのＤＣＭで膨潤させて、ＤＩＥＡ （０．１３０ ｍＬ、０．７２ ｍｍｏｌ） および臭化４−ブロモベンジル （０．１２ ｇ、０．４８ ｍｍｏｌ）を加えた。バイアルを密閉し、一晩振とうした。一部をとって ＬＣＭＳ解析を行った結果、混合物中の 出発物質と生成物の比率が約 １：１であった。ＤＩＥＡ０．１３０ ｍＬと臭化４−ブロモベンジル０．１２ ｇ を加え、７０ ーＣ で８時間混合物を振とうした。得られた樹脂をろ別し、（上述したように）洗浄し、減圧下で乾燥させた。
【０１３０】
ステップ３：ステップ２で生成した樹脂を、５：５：９０ ＴＦＡ：ＴＥＳ：ＤＣＭ溶液に入れて、３０分間ずつ２度振とうし、ろ別した。ろ液を一緒にして、乾固させ、１４０ ｍｇのオレンジ色の油状物質を得た。この物質を逆相分取ＨＰＬＣ （グラディエント：アセトニトリル−水）で精製して、モノＴＦＡ塩２７ ｍｇ （３ステップでの収率：１７％）を得た。
【０１３１】
【実施例３ （複数の化合物のコンビナトリアル合成）】
ステップ１：１，２−ジアミノエタントリチル樹脂 （Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、０．９５ ｍｍｏｌ／ｇ） （２００ ｇ、１．９ ｍｍｏｌ） と１，３−ジアミノプロパントリチル樹脂 （Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、１．１４ ｍｍｏｌ／ｇ） （２．０ ｇ、２．２８ ｍｍｏｌ） を、各々、別々の１０ ｍＬポリプロピレンガラス管 （Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に入れた。 ＤＭＦ４ ｍＬと、クロロホルム４ ｍＬと、 ３当量のＤＩＥＡ （それぞれ、１．０ ｍＬ および１．２ ｍＬ） と、２当量の（実施例１で得られた）２−（１’−ブロモプロピル）−３−ベンジルキナゾリン−４−オン（それぞれ、１．５ ｇ および１．８ ｇ）を、各々の樹脂に加えた。混合物を７０ ーＣで一晩振とうした。各混合物を洗浄して（３ × ＤＣＭ、２ × ＭｅＯＨ、１ × ＤＣＭ、２ × エーテル）、減圧下で乾燥させた。一部をとって解析した結果、それぞれ、純度９０ ％以上の所望のキナゾリン−ジアミンの存在が確認された。
【０１３２】
ステップ２：キナゾリノン エチル−ジアミン樹脂 （１０５ ｍｇ、０．１０ ｍｍｏｌ） をアレイの最初の２列のバイアル各々に入れ、キナゾリノン プロピル−ジアミン樹脂 （８８ ｍｇ、０．１０ ｍｍｏｌ） をアレイの最後の２列のバイアル各々に入れた。ＤＩＥＡ （０．１３１ ｍＬ、０．７５ ｍｍｏｌ）を各バイアルに加えた。別のアミンをアレイの最初の２列の各バイアルに加え、一方、アレイの最後の２列に対してはＤＩＥＡを繰り返し加えた。反応ブロックを、７０ ーＣで一晩振とうした。先が細くなっているゲルチップを装着したマルチチャンネル・ピペットを用いて、各バイアルから液体分を除去し、残った樹脂を　洗浄して（２ × ＤＣＭ、１ × ＭｅＯＨ、１ × ＤＣＭ）、減圧下で乾燥させた。
【０１３３】
ステップ３：１０：５：８５ ＴＦＡ：ＴＥＳ：ＤＣＭ 溶液２ ｍＬを各バイアルに加えた。反応ブロックを４５分間振とうし、生成混合物をフィルターブロックに移して、ろ過し、０．７５ ｍＬ ＤＣＭで二度洗浄した。溶液を乾固させて、黄色から赤色の油状物質を得た。得られた高粘度の油状物質をエーテルを用いて二度粉砕して、ＤＣＭに溶かし、４ Ｍ ＨＣｌジオキサン溶液で処理することにより、黄褐色から白色の粉状あるいは無定形固体として、ＨＣｌ塩（化合物あたりの塩の数はわからない）を得た。ＬＣＭＳ解析の結果、どの化合物も７５ ％以上の純度であった。
【０１３４】
【実施例４−６】
６種類のラセミ化合物 キナゾリノンをキラル・クロマトグラフィーにより、その光学異性体に分離した。これらの化合物のうち３つのキラル・クロマトグラフィーに関して、説明する。
【０１３５】
【実施例４】
【化２２】

【０１３６】
カラム− Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ、２５０ × ４．６ ｍｍ （Ｄｉａｃｅｌ Ｉｎｃ．）。サンプル濃度− ０．５ ｍｇ／ｍＬ ＥｔＯＨ。 条件 − ６０％ ＥｔＯＨ ヘキサン溶液で１５分間。 光学異性体 １ は４．５分で溶離、光学異性体 ２は４．９分で溶離。
【０１３７】
【実施例５】
【化２３】

【０１３８】
カラム− Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ、２５０ × ４．６ ｍｍ （Ｄｉａｃｅｌ Ｉｎｃ．）。サンプル濃度− ０．５ ｍｇ／ｍＬ ＥｔＯＨ。条件 − １０％ ＥｔＯＨ ヘキサン溶液で１５分間。（Ｒ）−光学異性体は８．４分で溶離、（Ｓ）−光学異性体は ９．６分で溶離。
【０１３９】
【実施例６】
【化２４】

【０１４０】
カラム − Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ、２５０ × ４．６ ｍｍ （Ｄｉａｃｅｌ Ｉｎｃ．）。サンプル濃度− ０．５ ｍｇ／ｍＬ ＥｔＯＨ。 条件 − ７０％ ＥｔＯＨヘキサン溶液で１５分間。光学異性体 １は６．５分で溶離、光学異性体 ２は８．８ 分で溶離。
【０１４１】
以下の表に、上述の処理で分離された３種類の化合物のラセミ体と光学異性体のＩＣ_５０ 活性を示す。３種類の化合物のいずれの場合も、一つの光学異性体が、他の光学異性体よりも有意に大きな活性を有する。独立キラル合成により、より活性な光学異性体がＲ 光学異性体であると思われる。
【０１４２】
【表１】

【０１４３】
【実施例７および８】
以下の２つの 化合物を、図４に示す経路で、単一の光学異性体として合成した。データから、より活性な光学異性体 がＲ 光学異性体であることがわかる。
【０１４４】
【表２】

【０１４５】
【実施例９】
酒石酸を用いた再結晶によるキラルの分離
実施例１で得られた中間体Ａを、分離することにより図４に示す最初の５つのステップの代替物になる中間体 Ｂに変換可能である。その変換処理を、以下のスキームで示す。
【０１４６】
【化２５】

【０１４７】
イソプロピルアルコールとメタノールの混合溶液中で、１．１当量のＤ−酒石酸とＢと の混合物を加熱し、その後、室温まで冷却することにより、Ｂの Ｒ 光学異性体 を選択的に結晶化することができる。
【０１４８】
実施例９：　Ｘ ＝ Ｃｌ， Ｒ ＝ Ｈ
１００ ｍＬ の沸騰メタノール中で、１００ ｍＬの沸騰イソプロピルアルコールに溶解させたラセミ中間体Ｂ （１．５ ｇ）を、０．８ ｇ のＤ−酒石酸と混合した。得られた混合物を室温までゆっくりと冷却した。一晩放置後、固形物をろ別し、酢酸エチルとヘキサンで洗浄し、空気乾燥した。乾燥固体 （０．８ ｇ） を５０ ｍＬ イソプロピルアルコールと５０ ｍＬ メタノールの沸騰混合溶液に溶解し、室温までゆっくりと冷却した。一晩放置後、得られた固体をろ別し、酢酸エチルとヘキサンで洗浄し、空気乾燥した。次に、乾燥固体に飽和ジカルボン酸ナトリウムを加えて、３０分間攪拌し、酢酸エチルで抽出した。得られた有機物をＭｇＳＯ_４を用いて乾燥し、ろ過して、乾固させた。生成した透明油状物質の重さは３４５ ｍｇであった。一部をＳ−Ｍｏｓｈｅｒアミドに変換して、生成物を^１ＨＮＭＲで測定したところ、キラル純度は９５％以上であった。
【０１４９】
Ｄ− および Ｌ−酒石酸の両方を用いて上述の処理により得られた物質から、図４の残りのステップに従って、以下の光学異性的に純粋な化合物 を生成した。
【０１５０】
【表３】

【０１５１】
【実施例１０】
キナゾリノンＫＳＰ 阻害剤で処理した細胞集団における有糸分裂停止の誘発
【０１５２】
以下のようにして、ＤＮＡ含有量を測定することにより細胞周期のステージを求めるＦＡＣＳ解析を行った。１０ｃｍの皿に Ｓｋｏｖ−３細胞 （ヒト卵巣ガン） を１：１０に分割して植え付け、５％ ウシ胎仔血清 （ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ １６４０媒体を用いて、亜集団まで成長させた。 １０ｎＭパクリタキセル、４００ｎＭ キナゾリノン １、２００ｎＭ キナゾリノン２、あるいは、０．２５％ ＤＭＳＯ （化合物の媒体）のいずれかで、２４時間、細胞を処理した。次に、５ｍＭ ＥＤＴＡを含むＰＢＳで細胞をプレートから洗い流して、ペレットにし、１％ ＦＣＳを含むＰＢＳで一度洗浄し、４ーＣの８５％ エタノール中で一晩固定させた。解析をする前に、細胞をペレットにし、一度洗浄して、１ミリリットル中に１０μｇのヨウ化プロピジウムと２５０μｇのリボヌクレアーゼ（ＲＮＡｓｅ） Ａ とを含む溶液で ３７ーＣ、３０分間染色した。 Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ ＦＡＣＳｃａｎを用いてフローサイトメトリー分析を行い、一サンプルあたり１０，０００細胞のデータをＭｏｄｆｉｔプログラムで解析した。
【０１５３】
キナゾリノン 化合物のみでなく、周知の抗有糸分裂 剤であるパクリタキセルも、細胞集団をＧ０／Ｇ１細胞周期ステージ （ＤＮＡ含有量：２ｎ） からＧ２／Ｍ細胞周期ステージ （ＤＮＡ含有量：４ｎ）に移行させた。この類の他の化合物でも同様の効果が見られた。
【０１５４】
キナゾリノン ＫＳＰ 阻害剤の投与による単極性紡錘体形成
Ｇ２／Ｍ累積の性質を調べるために、ヒト腫瘍細胞株Ｓｋｏｖ−３ （卵巣）、ＨｅＬａ （子宮頸部）、および、Ａ５４９ （肺）を、一穴あたり４，０００ 細胞（ＳＫＯＶ−３ ＆ ＨｅＬａ）あるいは一穴あたり ８，０００細胞（Ａ５４９）の密度で、９６穴プレートに植え付け、２４時間固着させて、種々の濃度のキナゾリノン 化合物で２４時間処理した。 細胞を４％ ホルムアルデヒドで固定して、（蛍光標識した二次抗体を用いて認識される）抗チューブリン抗体 および（ＤＮＡを染色する） Ｈｏｅｃｈｓｔ 色素で染色した。
【０１５５】
目視検査の結果、キナゾリノン 化合物が有糸分裂の前中期ステージで細胞周期を停止させることがわかった。ＤＮＡが濃縮され、紡錘体形成が開始されるが、細胞周期が停止した細胞では、一様に単極性紡錘体が観察された。これは、紡錘体の極分離が阻害されていることを示している。抗ＫＳＰ 抗体のマイクロインジェクションによっても、有糸分裂が停止され、細胞周期が停止した細胞では単極性紡錘体が観察される。
【０１５６】
キナゾリノン ＫＳＰ 阻害剤で処理した腫瘍 細胞株における細胞増殖の阻害
９６穴プレートの一穴あたり１０００ないし２５００細胞の密度で（ 密度は細胞株によって異なる） ９６穴プレートに細胞を植え付け、２４時間、固着、成長させた。その後、種々の濃度の薬剤で４８時間処理した。各化合物を添加した時間をＴ_０とする。薬剤として３−（４，５−ジメチルチアゾル−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウム（ＭＴＳ） （Ｉ．Ｓ＞ 特許Ｎｏ． ５，１８５，４５０） （Ｐｒｏｍｅｇａ製品カタログ＃Ｇ３５８０参照。ＣｅＩｌＴｉｔｅｒ ９６（登録商標）ＡＱ_{ｕｅｏｕｓ}　一溶液細胞増殖の検定） を用いたテトラゾリウム検定を行い、Ｔ_０ における生細胞数と４８時間化合物に露出後に残った細胞数とを数えた。４８時間後に残った細胞数を薬剤 添加時の生細胞数と比較することにより、成長阻害を算出した。
【０１５７】
媒体のみ（０．２５％ ＤＭＳＯ）で処理した対照群の４８時間後の細胞成長を１００％として、各化合物で処理したサンプル群の細胞成長をこれと比較した。キナゾリノン ＫＳＰ 阻害剤は、以下の腫瘍型のヒト腫瘍細胞株における細胞増殖を阻害した。肺ガン（ＮＣＩ−Ｈ４６０、Ａ５４９）、乳ガン（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＣＦ−７， ＭＣＦ−７／ＡＤＲ−ＲＥＳ）、結腸ガン（ＨＴ２９、ＨＣＴ１５）、卵巣ガン（ＳＫＯＶ−３， ＯＶＣＡＲ−３）、白血病 （ＨＬ−６０（ＴＢ）、Ｋ−５６２）、中枢神経系腫瘍 （ＳＦ−２６８）、腎臓ガン（Ａ４９８）、骨肉腫 （Ｕ２−ＯＳ）、ならびに、子宮頸ガン（ＨｅＬａ）。さらに、マウスの腫瘍細胞株（Ｂ１６、黒色腫）もキナゾリノン 化合物の存在下で成長阻害された。
【０１５８】
化合物濃度（μＭ ）に対して処理群中の細胞成長率をプロットすることにより、Ｇｉ_５０値を算出した。各化合物に関して算出されたＧｉ_５０ 値は、対照群と比較して５０％だけ成長が阻害された場合の概算濃度を示す。すなわち、以下の式で表される濃度を示す。
１００ × ［（Ｔｒｅａｔｅｄ_４８ − Ｔ_０） ／ （Ｃｏｎｔｒｏｌ_４８ − Ｔ_０）］ ＝ ５０
【０１５９】
すべての化合物の濃度を二度ずつ測定し、対照群は１２穴の平均を取る。同様のレイアウトの９６穴プレートおよび Ｇｉ_５０ 算出スキームが、米国立がん研究所 （Ｍｏｎｋｓ， ｅｔ ａｌ．， Ｊ． ＮａｔＩ． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ８３：７５７−７６６ （１９９１）参照）で用いられている。ただし、国立がん研究所で行われている細胞計量では、ＭＴＳは用いられておらず、他の方法で計量が行われている。
【０１６０】
ＩＣ_５０の算出
ＡＴＰａｓｅ検定によりＫＳＰ 活性に関する各組成のＩＣ_５０値を測定する。この検定に用いられる溶液１は、３ ｍＭ ホスホエノールピルビン酸カリウム（Ｓｉｇｍａ Ｐ−７１２７）、２ ｍＭ ＡＴＰ （Ｓｉｇｍａ Ａ−３３７７）、１ ｍＭ ＩＤＴＴ （Ｓｉｇｍａ Ｄ−９７７９）、５ μＭ パクリタキセル （Ｓｉｇｍａ Ｔ−７４０２）、１０ ｐｐｍ消泡剤２８９ （Ｓｉｇｍａ Ａ−８４３６）、２５ ｍＭ ピペス（ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸））／ＫＯＨ ｐＨ ６．８ （Ｓｉｇｍａ Ｐ６７５７）、２ ｍＭ ＭｇＣ１_２ （ＶＷＲ ＪＴ４００３、および、１ ｍＭ ＥＧＴＡ （Ｓｉｇｍａ Ｅ３８８９）を含む。また、溶液２は、１ ｍＭ ＮＡＤＨ （Ｓｉｇｍａ Ｎ８１２９）、０．２ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ （Ｓｉｇｍａ Ａ７９０６）、ピルビン酸キナーゼ ７Ｕ／ｍｌ、Ｌ−乳酸デヒドロゲナーゼ１０Ｕ／ｍｌ （Ｓｉｇｍａ Ｐ０２９４）、１００ｎＭ ＫＳＰモーター領域、５０μｇ／ｍｌ微小管、１ｍＭ ＤＴＴ （Ｓｉｇｍａ Ｄ９７７９）、５μＭ パクリタキセル （Ｓｉｇｍａ Ｔ−７４０２）、１０ｐｐｍ 消泡剤２８９ （Ｓｉｇｍａ Ａ−８４３６）、２５ｍＭ ピペス／ＫＯＨ ｐＨ ６．８ （Ｓｉｇｍａ Ｐ６７５７）、２ｍＭ ＭｇＣ１_２ （ＶＷＲ ＪＴ４００３−０１）、および、１ｍＭ ＥＧＴＡ （Ｓｉｇｍａ Ｅ３８８９）を含む。溶液１を用いて、９６穴マイクロタイタープレート （Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ ３６９５）で、組成の連続希釈（８ないし１２ 倍希釈）を行う。連続希釈により、各穴の溶液１の容量は、５０μｌになる。各穴に５０μｌの溶液２を加えて、反応を開始させる。この処理には、マルチチャンネル・ピペッター を用い、手動操作で行ってもよいし、自動液体処理装置を用いてもよい。次に、マイクロタイタープレートをマイクロプレート吸光度測定装置にいれ、動モードで、各穴の３４０ｎｍのおける吸光度を複数回測定した。 ＡＴＰａｓｅの割合に比例する測定変化率を化合物濃度の関数としてプロットする。 非線形適合プログラム（例えば、Ｇｒａｆｉｔ ４）を用いて、下記の４パラメータ式で得られたデータを適合させて、標準ＩＣ_５０ 値を求める。
【０１６１】
【数２】

【０１６２】
ここで、ｙ は測定率で、ｘは化合物の濃度を示す。
【０１６３】
キナゾリノン 化合物 は、パクリタキセルのような他の化学療法薬に対する耐性を有する、Ｐ−糖タンパク質を表現する （マルチドラッグ耐性ＭＤＲ^＋としても知られる） 細胞株（ＭＣＦ−７／ＡＤＲ−ＲＥＳ、ＨＣＴ１ ５） を含む様々な細胞株の成長を阻害する。すなわち、キナゾリノンは、 細胞増殖を阻害する抗有糸分裂性を有し、薬剤耐性腫瘍細胞株によるＭＤＲ^＋の過剰表現の耐性対象とはならない。
【０１６４】
この類の他の化合物も、ＧＩ_５０値は異なるが、細胞増殖を阻害することがわかった。試験を行ったキナゾリノン化合物のＧＩ_５０ 値は、２００ｎＭから最大試験濃度以上までばらついた。このことから、ＫＳＰ 活性を阻害する化合物の大部分は生化学的に細胞増殖を阻害したが、最大試験濃度 （通常、約２０μＭ）における細胞成長の阻害率は５０％未満であった。試験を行った化合物のうち多くの化合物では、ＧＩ_５０値が１０μＭ未満であり、ＧＩ_５０ 値が１μＭ未満のものもあった。ガンの臨床治療（ガン化学療法）に適用され成功を収めている抗増殖性化合物のＧＩ_５０値は、非常にばらついている。例えば、Ａ５４９細胞では、パクリタキセルのＧＩ_５０値が４ｎＭ、ドキソルビシンのＧＩ_５０値が６３ｎＭ、５−フルオロウラシルのＧＩ_５０値が１μＭ、ヒドロキシウレアのＧＩ_５０値が５００μＭ である（米国立がん研究所のデータに準拠する。Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ プログラム、ｈｔｔｐ：／／ｄｔｐ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）。したがって、実質的に任意の濃度で細胞増殖を阻害する化合物が有用であると考えられる。ただし、ＧＩ_５０値が１ｍＭ未満の化合物が望ましい。さらに言えば、ＧＩ_５０値が２０μＭ未満の化合物が望ましい。もっと望ましい化合物は、ＧＩ_５０値が１０μＭ未満の化合物である。ＧＩ_５０値が１μＭ未満の化合物等、 より小さなＧＩ_５０ 値の化合物も望ましいと考えられる。本発明のキナゾリノン 化合物の内いくつかは、２００ｎＭ以下から１０ｎＭ以下のＧＩ_５０値で、細胞増殖を阻害する。
【０１６５】
【実施例１１】
ヒト悪性腫瘍断片をヌード・マウス宿主内で成長させた後、腫瘍を皮下注射で取り出し、体重約２０ｇの複数の雌ヌード・マウスに、トロカール皮下注射で移植した。腫瘍が約７７ｍｇの大きさになったところで、ヌード・マウスをペア・マッチングして、治療群と対照群とに分けた。各群の腫瘍ヌード・マウスを８匹ずつとし、マウス一匹ずつに耳標をつけて、実験中、個別に観察を行った。ペア・マッチング後、第１日目に、初回投与を行った（最大濃度５ｍｇ／ｍＬの各テスト化合物を６６ｍＭクエン酸緩衝液ｐＨ５．０／０．９％食塩水／１０％Ｔｗｅｅｎ８０で処方した。投与量：１０ｍＬ／ｋｇ）投与は、表に示す濃度とスケジュールで行った。
【０１６６】
第１日目から、一週間に二回ずつマウスの体重を測定し、また、一週間に二回ずつ、キャリパーで腫瘍の大きさを計測した。計測した腫瘍の大きさは、周知の式Ｗ２×Ｌ／２に従って、腫瘍のｍｇ重量に換算した。対照群の腫瘍の大きさが平均１ｇに達したところで、実験を終了した。実験終了時に、各マウスの体重を測定し、殺して、腫瘍を摘出した。腫瘍の重量を測定し、各群の平均治療腫瘍重量を算出した。（平均治療腫瘍重量の変化）／（平均対照腫瘍重量の変化）×１００％（ΔＴ／ΔＣ）を１００％から引いて、各群の腫瘍増殖阻害率を算出した。
【０１６７】
（以下に示す）化合物１ないし５を上述の方法でテストした結果を表ＡないしＤに示す。本発明の他の化合物も、この方法でテストした結果、同等の活性を示した。
【０１６８】
【化２６】

【０１６９】
【化２７】

【０１７０】
【化２８】

【０１７１】
【化２９】

【０１７２】
【化３０】

【０１７３】
【表４】

【０１７４】
【表５】

【０１７５】
【表６】

【０１７６】
【表７】

【０１７７】
以上、実施例を参照して本発明を説明したが、当業者には周知のように、本発明の要旨の範囲内で様々に変更・変形可能である。また、所定の状況、材料、組成、方法、ステップ等を本発明の目的、要旨に合わせて、様々に変更・変形可能である。このような変更・変形はすべて、以下の特許請求の範囲内であると考えられる。以上の説明で引用した特許やその他の文献は、すべて、引例して本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の組成を生成するための一般的な合成スキームを示す。
【図２】キナゾリノンＫＳＰ阻害剤を合成するための合成経路を示す。
【図３】キナゾリノンＫＳＰ阻害剤の化学構造を示す。
【図４】ほぼ純粋な単一光学異性体の合成経路を示す。
【図５】スルホンアミド５（ａ）、カルバミン酸エステル５（ｂ）、尿素５（ｃ）、および、アミン５（ｄ）の合成経路を示す。

Claims (64)

1. 細胞増殖性疾患の治療方法であって、以下の化合物群から選択される化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩を投与するステップを備える
   

   

   ここで、
   Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
   Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
   Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
   Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
   Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
   Ｒ_１５ は、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される。
2. ＫＳＰキネシン活性に関係する異常の治療方法であって、下記の化合物群から選択される化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩を投与するステップを備える
   

   

   ここで、
   Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
   Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
   Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
   Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
   Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
   Ｒ_１５ は、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される。
3. ＫＳＰ キネシンの阻害方法であって、下記の化合物群から選択される化合物、あるいは薬学的に受容可能な前記化合物の塩に ＫＳＰキネシンを接触させるステップを備える
   

   

   ここで、
   Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
   Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、　Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
   Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
   Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
   Ｒ_１５ は、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される。
4. 請求項１、２、３の何れかに記載の方法であって、
   Ｒ_１ が、水素、アルキル、アリール、置換アルキル、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アルキルアリール、置換アルキルアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
   Ｒ_２ が、水素、アルキル、並びに、置換アルキルから選択され、
   Ｒ_２’ が 水素であり、
   Ｒ_３ が、アルキル、置換アルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、アリール、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換オキサアルキルアリール 、Ｒ_１５Ｏ− 、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
   Ｒ_４ が、アルキル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、
   Ｒ_５ が水素であり、
   Ｒ_６、Ｒ_７　および Ｒ_８ が、水素、ハロゲン、メチル、シアノ、並びに、トリフルオロメチルから独立に選択され、
   Ｒ_１５ が、アルキル、アリール、並びに、置換アリールから選択され、
   Ｒ_１６ が、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ 、並びに、Ｎ−ヘテロシクリ ルから選択される。
5. Ｒ_２ が水素、アルキル、置換アルキルから選択され、 Ｒ_２’ が水素であり、Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置である、請求項１，２、３のいずれかに記載の方法。
6. 以下の式で表わされる化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩を投与するステップを備える、請求項１、２、３の何れかに記載の方法。
   

   
7. Ｒ_１が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アリール、置換アリール、アルキルアリール、並びに、置換アルキルアリールから選択される、請求項６記載の方法。
8. Ｒ_１が、水素、エチル、プロピル、メトキシエチル、ナフチル、フェニル、ブロモフェニル、クロロフェニル、メトキシフェニル、エトキシフェニル、トリル、ジメチルフェニル、クロロフルオロフェニル、メチルクロロフェニル、エチルフェニル、フェネチル、ベンジル、クロロベンジル、メチルベンジル、メトキシベンジル、テトラヒドロフラニルメチル、並びに、（エトキシカルボニル）エチルから選択される、請求項７記載の方法。
9. Ｒ_２ が水素、低級アルキル、置換低級アルキルから選択され、 Ｒ_２’ が水素であり、Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置である、請求項６記載の方法。
10. Ｒ_２ が、水素、メチル、エチル、プロピル、メチルチオエチル、アミノブチル、（ＣＢＺ）アミノブチル、シクロヘキシルメチル、ベンジルオキシメチル、メチルスルフィニルエチル、メチルスルフィニルメチル、ヒドロキシメチル、ベンジル、並びに、インドリルメチルから選択される、請求項９記載の方法。
11. Ｒ_３ が、Ｃ_１ないしＣ_１３ アルキル、置換低級アルキル、アリール、置換アリール、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール、並びに、置換オキサアルキルヘテロアリールから選択される、請求項６記載の方法。
12. Ｒ_３ が、エチル、プロピル、クロロプロピル、ブトキシ、ヘプチル、ブチル、オクチル、トリデカニル、（エトキシカルボニル）エチル、ジメチルアミノエチル、ジメチルアミノメチル、フェニル、ナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、シアノフェニル、ハロ（トリフルオロメチル）フェニル、クロロフェノキシメチル、メトキシフェニル、カルボキシフェニル、エチルフェニル、トリル、ビフェニリル、メチレンジオキシフェニル、メチルスルフォニルフェニル、メトキシクロロフェニル、クロロナフチル、メチルハロフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ブチルフェニル、ペンチルフェニル、メチルニトロフェニル、フェノキシメチル、ジメトキシフェニル、フェニルビニル、ニトロクロロフェニル、ニトロフェニル、ジニトロフェニル、ビス（トリフルオロメチル）フェニル、ベンジルオキシメチル、ベンジル、フラニル、ベンゾフラニル、ピリジニル、インドリル、メチルピリジニル、キノリニル、ピコリニル、ピラゾリル、並びに、イミダゾリルから選択される、請求項１１記載の方法。
13. Ｒ_３ が Ｒ_１５−ＮＨ− で、Ｒ_１５ が、低級 アルキル、シクロヘキシル、フェニル、並びに、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルチオで置換されたフェニルから選択される、請求項６記載の方法。
14. Ｒ_１５ が、イソプロピル、ブチル、シクロヘキシル、フェニル、ブロモフェニル、ジクロロフェニル、メトキシフェニル、エチルフェニル、トリル、トリフルオロメチルフェニル 、並びに、メチルチオフェニルから選択される、請求項１３記載の方法。
15. Ｒ_４ が、低級アルキル、置換低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、ここで、Ｒ_１６ は、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項６記載の方法。
16. Ｒ_４が、メチル、エチル、プロピル、ブチル、シクロヘキシル、カルボキシエチル、カルボキシメチル、メトキシエチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ジメチルアミノエチル、ジメチルアミノプロピル、ジエチルアミノエチル、ジエチルアミノプロピル、アミノプロピル、メチルアミノプロピル、２、２−ジメチル−３−（ジメチルアミノ）プロピル、１−シクロヘキシル−４−（ジエチルアミノ）ブチル、アミノエチル、アミノブチル、アミノペンチル、アミノヘキシル、アミノエトキシエチル、イソプロピルアミノプロピル、ジイソプロピルアミノエチル、１−メチル−４−（ジエチルアミノ）ブチル、（ｔ−Ｂｏｃ）アミノプロピル、ヒドロキシフェニル、ベンジル、メトキシフェニル、メチルメトキシフェニル、ジメチルフェニル、トリル、エチルフェニル、（オキソピロリジニル）プロピル、（メトキシカルボニル）エチル、ベンジルピペリジニル、ピリジニルエチル、ピリジニルメチル、モルホニリルエチル、モルホニリルプロピル、ピペリジニル、アゼチジニルメチル、アゼチジニルプロピル、ピロリジニルエチル、ピロリジニルプロピル、ピペリジニルメチル、ピペリジニルエチル、イミダゾリルプロピル、イミダゾリルエチル、（エチルピロリジニル）メチル、（メチルピロリジニル）エチル、（メチルピペリジニル）プロピル、（メチルピペラジニル）プロピル、フラニルメチル、並びに、インドリルエチルから選択される、請求項１５記載の方法。
17. Ｒ_１ が、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル 、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素、アルキル、置換低級アルキル、並びに、ベンジルから選択され、
    Ｒ_２’ が 水素であり、
    Ｒ_３ が、置換フェニル 並びに ナフチルから選択され、
    Ｒ_４ が、置換アルキル 並びにＲ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_５ が、水素 あるいはハロゲンであり、
    Ｒ_６ が 、水素、メチル、あるいは、ハロゲンであり、
    Ｒ_７ が、水素、ハロゲン、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、あるいは、シアノであり、
    Ｒ_８ が、水素 あるいはハロゲンであり、
    Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、Ｎ−ヘテロシクリル 、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される、請求項６記載の方法。
18. Ｒ_１ が、ベンジルあるいはハロベンジルであり、
    Ｒ_２ が、エチル並びに プロピルから選択され、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_３ が 置換フェニルであり、
    Ｒ_３’ が 置換フェニルであり、
    Ｒ_３’’ が 置換フェニルであり、
    Ｒ_４ が、（ＣＨ_２） _ｍ ＯＨ あるいは （ＣＨ _２ ） _ｐ Ｒ_１６ であり、ここで、ｍ は ２ あるいは ３、ｐ は １ないし３であり、
    Ｒ_５ が 水素であり、
    Ｒ_６ が 水素であり、
    Ｒ_７ が ハロゲンであり、
    Ｒ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、アミノ、プロピルアミノ、並びに、アゼチジニルから選択される、請求項１、２、３の何れかに記載の方法。
19. Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置である、請求項１８記載の方法。
20. 以下の式で表わされる化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩を投与するステップを備える、請求項１、２、３の何れかに記載の方法。
    

    
21. Ｒ_１ が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル 、並びに、置換フェニルから選択され、　Ｒ_２ が、水素、低級アルキル 、並びに、置換低級アルキル から選択され、Ｒ_２’ が 水素であり、
    Ｒ_３’ が、Ｃ_１ないしＣ_１３ アルキル、フェニル、ナフチル、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、あるいは、トリフルオロメチルで置換されたフェニル、ビフェニリル、ベンジル、並びに、ヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_４ が、低級アルキル、置換低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、
    ここで、Ｒ_１６ が、アミノ、（低級アルキル）アミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項２０記載の方法。
22. Ｒ_１ が、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素 あるいは低級アルキルであり、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_３ が、置換フェニル 並びにナフチルから選択され、
    Ｒ_４ が、Ｒ_１６−アルキレン−、ヒドロキシ低級アルキル、あるいは、カルボキシ低級アルキルであり、
    Ｒ_６ およびＲ_７ が、水素並びにハロゲンから選択され、
    Ｒ_５ および Ｒ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピペリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル 、並びに、モルホニリルから選択される、請求項２０記載の方法。
23. 以下の式で表わされる化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩を投与するステップを備える、請求項１、２、３の何れかに記載の方法。
    

    
24. Ｒ_１ が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素、低級アルキル、並びに、置換低級アルキル から選択され、Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_４ が、低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、ここで、Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキル）アミノ、アルキルアミノ、アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項２３記載の方法。
25. Ｒ_１ が、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素あるいは低級アルキルであり、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_４ がＲ_１６−アルキレン−であり、
    Ｒ_６ およびＲ_７ が、水素 並びにハロゲンから選択され、
    Ｒ_５ およびＲ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピロリジニル、ピペリジニル、イミダゾリル、並びに、モルホニリルから選択される、請求項２３記載の方法。
26. 以下の式で表わされる化合物を投与するステップを備える、請求項１、２、３の何れかに記載の方法。
    

    
27. Ｒ_１ が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素、低級アルキル、並びに、置換低級アルキルから選択され、Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_３’’ が、Ｃ_１ないしＣ_１３ アルキル、置換低級アルキル、フェニル、ナフチル、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、あるいは、トリフルオロメチルで置換されたフェニル、ビフェニリル、ベンジル、並びに、ヘテロシクリルから選択され、
    Ｒ_４ が、低級アルキル、置換低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、置換ベンジル、ヘテロシクリル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、
    ここで、Ｒ_１６ がジ（低級アルキル）アミノ、（低級アルキル）アミノ、アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項２６記載の方法。
28. Ｒ_１ が、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素 あるいは 低級アルキルであり、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_３’’ が、置換フェニル、ヘテロシクリル、並びに、ナフチルから選択され、　Ｒ_４ が、置換ベンジル、ヘテロシクリル、置換低級アルキル、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_６ および Ｒ_７ が、水素並びにハロゲンから選択され、
    Ｒ_５ および Ｒ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピロリジニル、アゼチジニル、ピペリジニル、イミダゾリル、並びに、モルホニリルから選択される、請求項２７記載の方法。
29. Ｒ_１ がベンジルであり、
    Ｒ_２ がエチルであり、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_３’’ が、ハロフェニル、ポリハロフェニル、トリル、ジメチルフェニル、メトキシフェニル、ジメトキシフェニル、シアノフェニル、トリフルオロメチルフェニル、トリフルオロメトキシフェニル、ビス（トリフルオロメチル）フェニル、カルボキシフェニル、ｔ−ブチルフェニル、メトキシカルボニルフェニル、ピペリジニル、並びに、ナフチルから選択され、
    Ｒ_４ が、置換ベンジル、ピペリジニル、ヒドロキシ （低級アルキル） 、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_６ およびＲ_７ が、水素 並びにハロゲンから選択され、
    Ｒ_５ およびＲ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、ジメチルアミノ、アミノ、ピロリジニル、並びに、ピペリジニルから選択される、請求項２８記載の方法。
30. 前記疾患あるいは異常が、ガン、異常増殖、再狭窄、および、心臓肥大から成る群から選択される、請求項１あるいは２記載の方法。
31. 以下の化合物群から選択される化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩
    

    

    ここで、
    Ｒ_１ は、水素、アルキル、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、置換アルキル、置換アルキルアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
    Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
    Ｒ_１５ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される、
    ただし、Ｒ_３ がＲ_１５−ＮＨ− である場合、Ｒ_２ および Ｒ_４ のいずれも、水素以外でなければならない。
32. 以下の化合物群から選択される化合物、あるいは、薬学的に受容可能な前記化合物の塩
    

    

    ここで、
    Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
    Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
    Ｒ_１５ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択される。
33. 請求項３１および３２のいずれかに記載の化合物あるいは塩であって、
    Ｒ_１ が、水素、アルキル、アリール、置換アルキル、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、並びに、置換アルキルアリールから選択され、
    Ｒ_２ が、水素、アルキル、並びに、置換アルキルから選択され、Ｒ_２’ が 水素であり、Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置であり、
    Ｒ_３ が、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、置換アリール、置換アルキル、置換ヘテロアリール、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール 、Ｒ_１５Ｏ− 、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_４ が、アルキル、アリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、
    Ｒ_５ が水素であり、
    Ｒ_６、Ｒ_７　および Ｒ_８ が、水素、ハロゲン、メチル、並びに、トリフルオロメチルから独立に選択され、
    Ｒ_１５ が、アルキル、アリール、並びに、置換アリールから選択され、
    Ｒ_１６ が、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ 、並びに、Ｎ−ヘテロシクリ ルから選択される。
34. 以下の式で表される請求項３１記載の化合物あるいは薬学的に受容可能な前記化合物の塩。
    

    
35. Ｒ_１が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アルキルアリール、並びに、置換アルキルアリールから選択される、請求項３４記載の化合物あるいは塩。
36. Ｒ_１が、水素、エチル、プロピル、メトキシエチル、フェネチル、ベンジル、クロロベンジル、メチルベンジル、メトキシベンジル、テトラヒドロフラニルメチル、並びに、（エトキシカルボニル）エチルから選択される、請求項３５記載の化合物あるいは塩。
37. Ｒ_２ が、水素、低級アルキル、並びに、置換低級アルキルから選択され、Ｒ_２’ が 水素であり、Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置である、請求項３４記載の化合物あるいは塩。
38. Ｒ_２ が、エチル、ｉ−プロピル、ｃ−プロピル、並びに、ｔ−ブチルから選択される、請求項３７記載の化合物あるいは塩。
39. Ｒ_３ が、アリール、置換アリール、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール、並びに、置換オキサアルキルヘテロアリールから選択される、請求項３４および３７のいずれかに記載の化合物あるいは塩。
40. Ｒ_３ が、フェニル、置換フェニル、ベンジル、置換ベンジル、フェニルビニル、置換フェニルビニル、フェノキシ低級アルキル、置換フェノキシ低級アルキル、フラニル、ベンゾフラニル、ピリジニル、インドリル、メチルピリジニル、キノリニル、ピコリニル、ピラゾリル、並びに、イミダゾリルから選択される、請求項３９記載の化合物あるいは塩。
41. Ｒ_３ が、ハロフェニル、ジハロフェニル、シアノフェニル、ハロ（トリフルオロメチル）フェニル、クロロフェノキシメチル、メトキシフェニル、カルボキシフェニル、メチルフェニル、エチルフェニル、トリル、ビフェニリル、メチレンジオキシフェニル、メチルスルフォニルフェニル、メトキシクロロフェニル、メチルハロフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ブチルフェニル、ペンチルフェニル、メチルニトロフェニル、ジメトキシフェニル、フェニルビニル、ニトロクロロフェニル、ニトロフェニル、ジニトロフェニル、並びに、ビス（トリフルオロメチル）フェニルから選択される、請求項４０記載の化合物あるいは塩。
42. Ｒ_３ が Ｒ_１５−ＮＨ− で、Ｒ_１５ が、イソプロピル、ブチル、シクロヘキシル、フェニル、ブロモフェニル、ジクロロフェニル、メトキシフェニル、エチルフェニル、トリル、トリフルオロメチルフェニル 、並びに、メチルチオフェニルから選択される、請求項３７記載の化合物あるいは塩。
43. Ｒ_４ が、低級アルキル、置換低級アルキル、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、ここで、Ｒ_１６ は、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項３４、３７、並びに、３９のいずれかに記載の化合物あるいは塩。
44. Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７、およびＲ_８が、水素、ハロゲン、低級アルキル、置換低級アルキル、低級アルコキシ、並びに、シアノから選択される、請求項３４、３７、並びに、３９のいずれかに記載の化合物あるいは塩。
45. Ｒ_５、Ｒ_６、およびＲ_８が、水素である、請求項４４記載の化合物あるいは塩。
46. Ｒ_７がハロゲンである、請求項４５記載の化合物あるいは塩。
47. Ｒ_１ が、アルキルアリール並びに置換アルキルアリールから選択され、
    Ｒ_２ が、低級アルキルであり、Ｒ_２’ が 水素であり、Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置で、
    Ｒ_３ が、置換アリールであり、
    Ｒ_４ が、置換アルキルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、ハロゲンあるいはシアノであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項３４記載の化合物あるいは塩。
48. Ｒ_１ が、ベンジルあるいは置換ベンジルであり、
    Ｒ_２ が、ｉ−プロピルであり、
    Ｒ_３ が、メチルおよび／あるいはハロゲンで置換されたフェニルであり、
    Ｒ_４ が、３−アミノ−ｎ−プロピルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、クロロあるいはシアノであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項４７記載の化合物あるいは塩。
49. Ｒ_１ が、ベンジルであり、
    Ｒ_２ が、ｉ−プロピルであり、
    Ｒ_３ が、ｐ−フルオロフェニルであり、
    Ｒ_４ が、３−アミノ−ｎ−プロピルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、フルオロであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項４７記載の化合物あるいは塩。
50. Ｒ_１ が、ベンジルであり、
    Ｒ_２ が、ｉ−プロピルであり、
    Ｒ_３ が、ｐ−フルオロフェニルであり、
    Ｒ_４ が、３−アミノ−ｎ−プロピルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、クロロであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項４７記載の化合物あるいは塩。
51. Ｒ_１ が、ベンジルであり、
    Ｒ_２ が、ｉ−プロピルであり、
    Ｒ_３ が、３−フルオロ−４−メチルフェニルであり、
    Ｒ_４ が、３−アミノ−ｎ−プロピルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、クロロであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項４７記載の化合物あるいは塩。
52. Ｒ_１ が、ベンジルであり、
    Ｒ_２ が、ｉ−プロピルであり、
    Ｒ_３ が、ｐ−メチルフェニルであり、
    Ｒ_４ が、３−アミノ−ｎ−プロピルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、クロロであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項４７記載の化合物あるいは塩。
53. Ｒ_１ が、ベンジルであり、
    Ｒ_２ が、ｉ−プロピルであり、
    Ｒ_３ が、ｐ−メチルフェニルであり、
    Ｒ_４ が、３−アミノ−ｎ−プロピルであり、
    Ｒ_５ が、水素 であり、
    Ｒ_６ が 、水素であり、
    Ｒ_７ が、シアノであり、
    Ｒ_８ が、水素 である、
    請求項４７記載の化合物あるいは塩。
54. 以下の式で表される請求項３２記載の化合物あるいは薬学的に受容可能な前記化合物の塩。
    

    
55. Ｒ_１ が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル 、並びに、置換フェニルから選択され、　Ｒ_２ が、水素、低級アルキル 、並びに、置換低級アルキル から選択され、Ｒ_２’ が 水素であり、
    Ｒ_３’ が、Ｃ_１ないしＣ_１３ アルキル、フェニル、ナフチル、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、あるいは、トリフルオロメチルで置換されたフェニル、ビフェニリル、ベンジル、並びに、ヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_４ が、低級アルキル、置換低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、
    ここで、Ｒ_１６ が、アミノ、（低級アルキル）アミノ、ジ（低級アルキル）アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項５４記載の化合物。
56. Ｒ_１ が、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素 あるいは低級アルキルであり、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_３ が、置換フェニル 並びにナフチルから選択され、
    Ｒ_４ が、Ｒ_１６−アルキレン−、ヒドロキシ（低級アルキル）、あるいは、カルボキシ（低級アルキル）であり、
    Ｒ_７ が、水素、フルオロ、クロロ、あるいは、メチルであり、
    Ｒ_５ 、Ｒ_６および Ｒ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキル）アミノ、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピロリジニル、並びに、ピペリジニルから選択される、請求項５５記載の化合物。
57. 以下の式で表される請求項３２記載の化合物あるいは薬学的に受容可能な前記化合物の塩。
    

    
58. Ｒ_１ が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、フェニル、ナフチル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素、低級アルキル、並びに、置換低級アルキル から選択され、Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_４ が、低級アルキル、シクロヘキシル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、あるいは、低級アルキルで置換されたフェニル、ベンジル、ヘテロアリールメチル、ヘテロアリールエチル、ヘテロアリールプロピル、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、ここで、Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキル）アミノ、（低級アルキル）アミノ、アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項５７記載の化合物あるいは塩。
59. Ｒ_１ が、低級アルキル、ベンジル、置換ベンジル、並びに、置換フェニルから選択され、
    Ｒ_２ が、水素あるいは低級アルキルであり、
    Ｒ_２’ が水素であり、
    Ｒ_４ がＲ_１６−アルキレン−であり、
    Ｒ_７ が、水素、フルオロ、クロロ、あるいは、メチルであり、
    Ｒ_５ 、Ｒ_６および Ｒ_８ が水素であり、
    Ｒ_１６ が、ジ（低級アルキルアミノ）、（低級アルキル）アミノ、アミノ、ピロリジニル、ピペリジニル、イミダゾリル、並びに、モルホニリルから選択される、請求項５８記載の化合物あるいは塩。
60. 以下の式で表される請求項３２記載の化合物あるいは薬学的に受容可能な前記化合物の塩。
    

    
61. Ｒ_１ が、水素、低級アルキル、置換低級アルキル、アルキルアリール、並びに、置換アルキルアリールから選択され、
    Ｒ_２ が、水素、低級アルキル、並びに、置換低級アルキルから選択され、Ｒ_２’ が水素であり、Ｒ_２ および Ｒ_２’ が結合されている不斉中心が、Ｒ立体配置で、
    Ｒ_３’’ が、アリール、置換アリール、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換アルキルアリール、置換アルキルへテロアリール、置換オキサアルキルアリール、並びに、置換オキサアルキルへテロアリールから選択され、
    Ｒ_４ が、低級アルキル、置換低級アルキル、並びに、Ｒ_１６−アルキレンから選択され、ここで、Ｒ_１６ がジ（低級アルキル）アミノ、（低級アルキル）アミノ、アミノ、低級アルコキシ、あるいは、Ｎ−ヘテロシクリルである、請求項６０記載の化合物あるいは塩。
62. 請求項３１記載の化合物であって、前記化合物が図３に規定された式で表される。
63. ＫＳＰキネシンモジュレーターをスクリーニングする方法であって、
    （ａ）　キネシンと、生体活性物質候補と、以下の化合物群から選択される化合物と、を結合させるステップと、
    

    

    ここで、
    Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
    Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
    Ｒ_１５ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択され、
    （ｂ）キネシンの活性に対する、前記生体活性物質候補の影響を測定するステップと、を備える。
64. ＫＳＰキネシンに結合する化合物をスクリーニングする方法であって、
    （ａ）キネシンと、生体活性物質候補と、以下の化合物群から選択される標識化合物と、を結合させるステップと、
    

    

    ここで、
    Ｒ_１ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_２ および Ｒ_２’は、水素、アルキル、オキサアルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから独立に選択され、あるいは、Ｒ_２ および Ｒ_２’は結合して、３員環ないし７員環を形成し、
    Ｒ_３ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、オキサアルキル、オキサアルキルアリール、置換オキサアルキルアリール、オキサアルキルヘテロアリール、置換オキサアルキルヘテロアリール、Ｒ_１５Ｏ−、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_３’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１５−ＮＨ−から選択され、
    Ｒ_３’’ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_４ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、置換アルキルヘテロアリール、並びに、Ｒ_１６−アルキレン−から選択され、
    Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７ および Ｒ_８ は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、フルオロアルキル、ニトロ、シアノ、ジアルキルアミノ、アルキルスルフォニル、アルキルスルホンアミド、スルホンアミドアルキル、スルホンアミドアリール、アルキルチオ、カルボキシアルキル、カルボキサミド、アミノカルボニル、アリール、並びに、ヘテロアリールから独立に選択され、
    Ｒ_１５ は、水素、アルキル、アリール、アルキルアリール、ヘテロアリール、アルキルヘテロアリール、置換アルキル、置換アリール、置換アルキルアリール、置換ヘテロアリール、並びに、置換アルキルヘテロアリールから選択され、
    Ｒ_１６ は、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、Ｎ−ヘテロシクリル、並びに、置換Ｎ−ヘテロシクリルから選択され、
    （ｂ）キネシンへの前記生体活性物質候補の結合を測定するステップと、を備える。

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