JP2003522760A - ２−フェニルカルバモイル−ベンジミダゾール類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本主題発明は以下の構造を有する化合物に関する。 【化１】

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （関連出願の相互関連） 本出願は米国仮出願番号第６０／１８１，２３６号、７９４６Ｐ、２０００年
２月９日出願、の利益を請求する。

【０００２】 （発明の分野） 本主題発明は心筋及び他の組織の虚血再潅流障害、及び他の心臓血管性及び炎
症性疾患の治療または予防に有用な２−フェニル−カルバモイルベンジミダゾー
ル類に関する。

【０００３】 （発明の概要） 本主題発明は以下の構造を有する化合物を含み、

【０００４】

【化２】

【０００５】 式中、 （ａ）Ｒ１はアルキル、アリール、アルコキシ及びアリールオキシから選択され
、 （ｂ）Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、水素、ハロ、アルキル、アルコキシ、アルキル
チオ、及びモノ−またはジ−アルキルアミノから独立に選択され、Ｒ３及びＲ４
の両方共に水素ではないということを除き、 （ｃ）それぞれＲ５は、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ヒドロキシ、アルコキ
シ、チオ、アルキルチオ、アミノ、及びモノ−またはジ−アルキルアミノから独
立に選択され、 （ｄ）それぞれＲ６は、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アリール、ヘ
テロサイクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチ
オ、アリールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アシル、アルキ
ルアシル、アリールアシル、アミド、アルキルアミド、アリールアミド、スルホ
ニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホスホニル、アルキルホスホ
ニル、アリールホスホニル、カルボキシ及びそのアルキル及びアリールエステル
類から独立に選択され、 光学異性体、ジアステレオマー、若しくは鏡像体、またはこれらの混合物と、薬
学的に許容可能な塩、水和物、または生物学的に加水分解可能なエステル、アミ
ド若しくはイミドと、かかる化合物を含み薬学的組成物、及び再潅流障害の予防
または治療のために組織にかかる化合物を使用する方法とを含む。

【０００６】 （発明の詳細な説明） 米国では、毎年約１１０万人が心筋梗塞にかかり３５０，０００人が死亡して
いる。心筋梗塞（ＭＩ）または心臓発作は、心臓に血液を供給している血管が完
全にまたは部分的に閉塞した時におこる。多くの場合、血栓溶解剤で血液の流れ
を回復させること（再潅流）が治療の第一方針である。しかし、再潅流の利益は
それに関連した急性炎症性の反応にみまわれ、結果的に再潅流障害と呼ばれる症
候群となる。 炎症は一般的には保護的な役割を果たす。例えば、細菌感染の部位において、
細菌性内毒素は細菌を破壊するために、好中球及び単球を含む循環白血球を遊走
させる炎症性サイトカインの生成を誘導する。感染が無くなれば炎症は治まる。
しかし、炎症性の症状が持続する（リュウマチ性関節炎）または必要以上に重と
うな（虚血−再潅流障害）状態が存在する。

【０００７】 炎症の必須な特性は血液から組織への好中球（ＰＭＮｓ）の移動である。この
移動は接着分子によって媒介されるカスケードの結果起こる。血管内皮細胞への
ＰＭＮｓの粘着には、両方の細胞の表面上における接着分子の相互作用が必要と
される。これらの分子はそれぞれ独立した３つの群：セレクチン、インテグリン
及び免疫グロブリンのスーパーファミリーに属している。好中球は、初めは内皮
細胞に沿って転がり、これはセレクチンによって媒介されるプロセスである。炎
症の部位において、強固な粘着は、ＰＭＮｓ上のβ₂インテグリンと内皮細胞上
に発現するＩＣＡＭ−１（細胞間接着分子−１）の相互作用によって媒介される
。最終的に、ＰＭＮｓが内皮を通って組織に移動することが組織の損傷につなが
る。好中球の内皮への粘着を防御することのできる化合物は、これに制限される
ものではないが、心筋梗塞、冠動脈バイパス移植、血管形成、狭心症、脳卒中、
末梢血管障害、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、火傷、凍傷、成人呼吸窮迫症候群
、喘息、組織及び臓器移植、一般的な外科手術、再移植、急性腎不全、リュウマ
チ性関節炎、乾癬、肝炎、膵炎、日焼け、放射線、潰瘍及びショックを含む虚血
−再潅流障害を含む多様な状態の治療に有用なはずである。（最近の論評を参照
されたい：Ｃ．コルネジョ（C. Cornejo）、Ｊ．ハルラン（J. Harlan）、Ｒ．
ウィン（R. Winn）、健康＆疾患における接着分子（in Adhesion Molecules in
Health & Disease）、Ｌ．ポール（L. Paul）及びＴ．イセックツ（T. Issekutz
）、編集、マーセル・デッカー（Marcel Dekker）、１９９７年、１８章；Ｊ．
プリンス（J. Prince）、Ｃ．バランタイン（C. Ballantyne）、新興治療目的（
Emerging Therapeutic Targets）、１９９９年、２６３−２７７）

【０００８】 用語の解説 特別な記述がない限り、以下の用語は本出願で使用する時、以下に示した意味
を有する。 用語「アルキル」は、直鎖状、分岐鎖状または環状、飽和型または不飽和型（
芳香族を除く）、置換または無置換である炭化水素鎖を意味する。用語は、単独
でまたは他の語の一部として使用してもよく、その際「アルク（alk）」と短縮
してもよい（例えば、アルコキシ、アルキルアミノ）。好ましい直鎖状アルキル
は１〜約２０個の炭素原子、より好ましくは１〜約８個の炭素原子、さらにより
好ましくは１〜約４個の炭素原子を有し、最も好ましくはメチルまたはエチルで
ある。好ましい環状及び分岐鎖状アルキルは３〜約２０個の炭素原子、より好ま
しくは３〜約１０個の炭素原子、さらにより好ましくは３〜約６個の炭素原子を
有する。好ましい環状アルキルは１つの炭化水素環を有するが、２つ、３つまた
はそれ以上の縮合またはスピロ環状炭化水素環を有してもよい。アルキルは、１
つ以上の二重結合のみを有する不飽和型（「アルケニル」）（三重結合はない）
であってよく、好ましくは１つ、２つ、または３つの二重結合を有する不飽和型
であり、より好ましくは１つの二重結合を有する不飽和型である。アルキルは１
つ以上の三重結合を有する不飽和型（「アルキニル」）であってよく、より好ま
しくは１つの三重結合を有する不飽和型である。より好ましいアルキルは飽和型
（「アルカニル」）である。用語「アルキレン」は、２つ以上の部分に結合した
アルキルを意味する。アルキルの好ましい置換基としては、アルキル、アリール
、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アルキルアミノ、
アリールアミノ、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アシル、アルキルアシル
、アリールアシル、カルボキシ、アルキルエステル、アリールエステル、アミノ
、アルキルアミノ、アリールアミノ、スルホニル、アルキルスルホニル、アリー
ルスルホニル、ニトロ、シアノ、複素環が挙げられる。好ましいアルキルは無置
換である。

【０００９】 用語「アリール」は、置換または無置換芳香族炭化水素環を意味する。用語は
単独で、または他の言葉の一部として使用してもよい（例えば、アリールオキシ
、アリールアミノ）。好ましいアリールは芳香族環に６〜約１４個の炭素原子を
有し、全部で約６〜約２０個、好ましくは約１２個までの炭素原子を有する。好
ましいアリールは、フェニルまたはナフチルであり、最も好ましくはフェニルで
ある。用語「アリーレン」は、２つ以上の他の部分に結合したアリールを意味す
る。アリールの好ましい置換基としては、アルキル、アリール、ハロ、ヒドロキ
シ、アルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、
チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アシル、アルキルアシル、アリールアシル
、カルボキシ、アルキルエステル、アリールエステル、アミノ、アルキルアミノ
、アリールアミノ、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ニ
トロ、シアノ、複素環が挙げられる。より好ましいアリールは、無置換である。

【００１０】 用語「ヘテロ原子」は、窒素、酸素またはイオウ原子を意味する。 用語「複素環」または「ヘテロサイクリル」は、環の炭素原子が置換された１
個以上のヘテロ原子、好ましくは環に１個、２個、または３個のヘテロ原子を有
する環状アルキルまたはアリールを意味する。複素環の好ましい置換基はアルキ
ルの置換基と同じである。用語「ヘテロアリール」は芳香族環を含む複素環の部
分集合をさす。好ましいヘテロアリールは、環に５〜約１４個、より好ましくは
約１０個まで、さらにより好ましくは５個または６個の炭素＋ヘテロ原子を有し
、全部で５〜約２０個、より好ましくは約１２個までの炭素＋ヘテロ原子を有す
る。 用語「安全且つ有効な量」は、健全な医療の判断の範囲内で治療すべき状態で
明確な改善をはっきりと引き起こすのに十分であるが、深刻な副作用を避けるた
め十分に少ない（合理的な利益／危険比で）、薬理学的に活性な化合物の量を意
味する。安全且つ有効な量の化合物は、治療の必要な特定の状態、患者の体格及
び年齢及び身体的状態、状態の重とうさ、治療期間、現在の治療の性質、使用さ
れる特定の薬剤的に許容可能なキャリア及び主治医の知識及び専門の要因などに
よって変化するであろう。

【００１１】 用語「薬学的に許容可能なキャリア」または「薬学的に許容可能な補形剤」は
、ヒトまたは下等な動物への投与に好適な１つ以上の適合性のある固体または液
体補形剤を意味する。用語「適合性のある」は、それぞれ通常の使用条件下で組
成物の薬剤的効果を本質的に減少させる相互作用が存在しないような方法におい
て、薬理学的に活性な化合物または化合物群と混合できる補形剤を意味する。補
形剤はそれ自体が本質的な薬理学的活性を有するものではないが、例えば希釈液
、潤滑剤、分解増強剤、溶解増強剤、被包物質、防腐剤、着色剤、香料およびそ
の他として機能してよい。薬学的に許容可能な補形剤は、治療されるヒトまたは
より下等な動物への投与に好適ならしめるために、十分に純度が高く且つ十分に
低毒性でなければならない。 用語「投与形式ユニット」は、優れた医療行為による、ヒトまたはより下等な
動物への１回の投与に好適な量の薬理学的活性化合物を含む組成物を意味する。 「生物学的に加水分解の可能なエステル」は、本発明の２−フェニルカルバモ
イル−ベンジミダゾールを含むカルボン酸のエステルで、これは本化合物の活性
に干渉せず、動物によって容易に活性フェニルカルバモイル−ベンジミダゾール
に変換される。かかるエステルとしては、低級アルキルエステル類、低級アシロ
キシ−アルキルエステル類（アセトキシメチル、アセトキシエチル、アミノカル
ボニルオキシメチル、ピバロイルオキシメチル及びピバロイルオキシエチルエス
テル類など）、ラクトニルエステル類（フタリジル及びチオフタリジルエステル
類など）、低級アルコキシアシルオキシアルキルエステル類（メトキシカルボニ
ルオキシメチル、エトキシカルボニルオキシエチル及びイソプロポキシカルボニ
ルオキシエチルエステル類など）、アルコキシアルキルエステル類、コリンエス
テル類及びアルキルアシルアミノアルキルエステル類（アセトアミドメチルエス
テル類など）が挙げられる。

【００１２】 化合物 本主題発明は以下の構造を有する２−フェニル−カルバモイルベンジミダゾー
ル化合物を含む。

【００１３】

【化３】

【００１４】 構造式（Ｉ）において、Ｒ１は、アルキル、アリール、アルコキシ及びアリー
ルオキシから成る群から選択される。好ましいＲ１部分のアルキル及びアリール
部分は、１〜約１４個の炭素原子を有する。

【００１５】 より好ましいＲ１は、１〜約１２個の炭素原子を有する無置換または置換アル
キル及び無置換または置換フェニルまたは置換ナフチルから選択される。 より好ましいアルキルＲ１としては、約２〜約８個の炭素原子、さらにより好
ましくは約３〜約６個の炭素原子を有する無置換または置換直鎖状アルキルが挙
げられ、いっそうより好ましくはｎ−プロピルまたはｎ−ブチルまたはｎ−ペン
チルである。より好ましいＲ１としては、約３〜約８個の炭素原子、さらにより
好ましくは約３〜約６個の炭素原子を有する分岐鎖状アルキルが挙げられ、いっ
そうより好ましくはイソブチルまたはイソペンチルである。より好ましいＲ１と
しては約３〜約８個の炭素原子、さらにより好ましくは３〜約６個の炭素原子を
有する環状アルキルが挙げられる。かかる直鎖状、分岐鎖状または環状アルキル
に好ましい置換基としては、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モノ−及
びジ−アルキルアミノ、チオ、アルキルチオ、アリール（特にフェニル）及び複
素環が挙げられ、より好ましくは無置換のかかるアルキルである。好ましいＲ１
は、１つ以上の二重結合を有する飽和型または不飽和型の、直鎖状、分岐鎖状ま
たは環状アルキルであり、より好ましくは飽和型である。

【００１６】 より好ましいアリールＲ１としては無置換または置換フェニルが挙げられる。
かかるフェニルに好ましい置換基としては、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、ア
ミノ、モノ−及びジ−アルキルアミノが挙げられ、無置換のかかるフェニルもま
た好ましい。 より好ましいアラルキルＲ１としては、無置換または置換ベンジルが挙げられ
る。かかるベンジルに好ましい置換基としては、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ
、アミノ、モノ−及びジ−アルキルアミノが挙げられ、無置換のかかるベンジル
もまた好ましい。 構造式（Ｉ）において、Ｒ３及びＲ４の両方が同時に水素ではないことを除き
、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ、水素、ハロ、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ
及びモノ−またはジ−アルキルアミノから成る群から独立に選択される。好まし
いＲ３及びＲ４部分のアルキル部分は１〜約８個の炭素原子を有する。 好ましいＲ３及びＲ４としては、水素、１〜約６個、好ましくは約３個までの
炭素原子を有するアルコキシ、１〜約６個、好ましくは約３個までの炭素原子を
有するアルキルチオ、各アルキルが１〜約６個、好ましくは約３個までの炭素原
子を有するモノアルキルアミノまたはジアルキルアミノ及び、１〜約６個、好ま
しくは約３個までの炭素原子を有するアルキルが挙げられる。かかる部分のアル
キル上の好ましい置換基としては、ハロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アミノ、モ
ノ−またはジ−アルキルアミノ、チオ、アルキルチオが挙げられ、より好ましく
はかかるＲ３及びＲ４部分が無置換であることである。さらにより好ましくは、
Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つがエトキシまたは特にメトキシである。好ましく
はＲ３及びＲ４の１つが水素であり、より好ましくはＲ３が水素である。

【００１７】 構造式（Ｉ）において、Ｒ５はベンジミダゾール環の部位４及び７に位置する
部分を示している。それぞれＲ５は水素、ハロ、シアノ、アルキル、ヒドロキシ
、アルコキシ、チオ、アルキルチオ、アミノ、及びモノ−またはジ−アルキルア
ミノから成る群から独立に選択される。好ましいＲ５部分のアルキル部分は、１
〜約８個の炭素原子を有する。 好ましいＲ５としては水素、ハロ、１〜約６個、好ましくは約３個までの炭素
原子を有するアルキル、１〜約６個、好ましくは約３個の炭素原子を有するアル
コキシ、各アルキルが１〜約６個、好ましくは約３個までの炭素原子を有するモ
ノアルキル−またはジアルキルアミノ及び、１〜約６個、好ましくは約３個まで
の炭素原子を有するアルキルチオが挙げられる。かかるＲ５部分のアルキル上の
好ましい置換基としては、アルコキシ、アミノ及びアルキルが挙げられ、より好
ましくはかかる部分のアルキルは無置換である。 より好ましくは、それぞれのＲ５が水素、ハロ及び１〜約３個の炭素原子を有
する無置換アルキルから独立に選択される。より好ましくは水素以外であるＲ５
が１個以下である。最も好ましくは両方のＲ５が水素である。

【００１８】 構造式（１）において、それぞれＲ６は水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキ
ル、アリール、ヘテロサイクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、
チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ
、アシル、アルキルアシル、アリールアシル、アミド、アルキルアミド、アリー
ルアミド、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホスホニル
、アルキルホスホニル、アリールホスホニル、カルボキシ、及びそのアルキル及
びアリールエステル類から成る群から独立に選択される。好ましくは、それぞれ
Ｒ６が水素、ハロ、ニトロ、約Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、フェニル、ヒドロキシ、約Ｃ ₁ 〜Ｃ₄アルコキシ、チオ、約Ｃ₁〜Ｃ₄アルキルチオ、アミノ、約Ｃ₁〜Ｃ₄モノ−
またはジアルキルアミノから選択される。より好ましくは、それぞれＲ６が水素
、フッ素、塩素、ニトロ、メチル、エチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、
メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシから選択される。好ましくは、水素
以外のＲ６が３個以下であり、より好ましくは２個以下であり、さらにより好ま
しくは１個以下である。

【００１９】 主題発明の好ましい化合物としては、構造式（Ｉ）及び指示した置換基を有す
る以下の実施例が挙げられる。

【００２０】

【表１】

【００２１】 主題発明化合物は、上記化合物の全ての活性光学異性体、ジアステレオマー及
び鏡像体、及びこれらの混合物を含む。主題発明化合物は、かかる化合物の薬学
的に許容可能な塩、水和物及び生物学的に加水分解の可能なエステル、酸アミド
及びイミドを含む。

【００２２】 化合物の合成 以下に主題発明の化合物の製造の一般的なスキーム及び好ましい主題発明化合
物の特定の合成法を提供する。特別な記述がない限り、全ての市販の試薬は精製
せずに使用する。反応は一般的に不活性雰囲気（アルゴンまたは窒素）下で行う
。濃塩水とは飽和塩化ナトリウム水溶液を言う。残った溶媒は、室温（ｒｔ）で
、真空（約０．０３ｍｍＨｇ）下で取り除かれる。

【００２３】 合成した化合物の構造は以下の分析機器を使用して確認する。プロトンＮＭＲ
スペクトルは、ＧＥ ＱＥ−３００（３００ＭＨｚ）スペクトロメーター、ブル
カー（Bruker） ＡＣ−３００（３００ＭＨｚ）４原子核プローブシステム、ま
たはヴァリアン（Varian） ユニティプラス（Unityplus）（３００ＭＨｚ）に
よって得る。全ての化学シフトは、（ＣＨ₃）₄Ｓｉから送られる１００万分の１
（ｐｐｍ）の割合（ｐｐｍ）として、δスケールに記録される。ＣＤＣｌ₃で得
られたスペクトルは（ＣＨ₃）₄Ｓｉまたは残ったＣＨＣｌ₃（７．２４ｐｐｍ）
のいずれかを参照する。Ｄ₂Ｏで得られたスペクトルはＨＯＤ（４．８０ｐｐｍ
）を参照とし、（ＣＯ₃）₂ＣＯで得られたスペクトルは残った（ＣＨ₃）₂ＣＯ（
２．０４ｐｐｍ）を参照とし、ＣＤ₃ＯＤで得られたスペクトルは残ったＣＨ₃Ｏ
Ｈ（３．３０ｐｐｍ）を参照とし、（ＣＤ₃）₂ＳＯで得られたスペクトルは残っ
た（ＣＨ₃）₂ＳＯ（２．４９ｐｐｍ）を参照する。炭素−１３スペクトルは、Ｇ
Ｅ ＱＥ−３００（７５ＭＨｚ）スペクトロメーターまたはブルカー（Bruker）
ＡＣ−３００（７５ＭＨｚ）４原子核プローブシステムで得る。ＣＤＣｌ₃で得
られるスペクトルは溶媒（７８ｐｐｍ）を参照とし、ＣＤ₃ＯＤで得られるスペ
クトルは溶媒（４９ｐｐｍ）を参照とし、（ＣＤ₃）₂ＳＯで得られるスペクトル
は溶媒（３９．７ｐｐｍ）を参照とし、（ＣＤ₃）₂ＣＯで得られるスペクトルは
溶媒（２０６．５、２９．８ｐｐｍ）を参照す。質量スペクトルは、ロボットプ
ローブを備えるフィジョンズ・トリオ（Fision's Trio）２０００、またはフィ
ジョンズ・プラットホーム（Fisons Platform）ＩＩ質量スペクトロメーターで
決定する。化学イオン化スペクトルは、試薬ガスとしてメタン及び／またはアン
モニアを使用して得る。ＥＳＩ化合物の導入は溶出溶媒として、メタノール、０
．２％蟻酸及び０．２ｍＭ酢酸アンモニウムを使用して、ヒューレットパッカー
ド（Hewlett Packard）１０５０ＨＰＬＣオートサンプラーによって行う。薄層
クロマトグラフィーはシリカゲル６０−Ｆ２５４を予めコーティングしたプレー
ト上で行う。フラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲル６０（メルク（Merc
k）、２３０−４００メッシュ）を使用して行う。融点はエレクトロサーマル（E
lectrothermal）１Ａ９２００またはメルテンプ（MelTemp）ＩＩ毛管融点装置で
測定し、補正しない。

【００２４】 スキームＩは、多くの主題発明の化合物の合成に有用な一般的なスキームであ
る。

【００２５】 スキームＩ

【００２６】

【化４】

【００２７】 ａ：ＮａＮＯ₂、プロピオン酸； ｂ：ＨＮＯ₃； Ｃ：Ｔｆ₂Ｏ／Ｅｔ₃Ｎ、トル
エン； ｄ：Ｒ１−ＮＨ₂； ｅ：ＨＣＯＯＨ、１０％Ｐｄ／Ｃ； ｆ：ｎ−Ｂ
ｕＬｉ、ＴＨＦ、Ｒ６−ＰｈＮＣＯ ５−メトキシ−２−ニトロフェノール（Ｒ４＝メトキシ、Ｒ３及び両方のＲ５
＝ＨであるスキームＩのＢ）：機械的攪拌器及び付加的な漏斗を備える２リット
ル丸底フラスコに、プロピオン酸（３００ｍＬ）と３−メトキシフェノール（３
７．２ｇ、０．３ｍｏｌ）を加える。得られた混合物を０℃まで冷却し、亜硝酸
ナトリウム（２１ｇ、０．３０４ｍｏｌ）を水（５０ｍｌ）に溶かした溶液をゆ
っくり加える。０℃で１時間攪拌後、発煙硝酸（４０ｍＬ）をゆっくり加える。
得られたスラリーを０℃で１時間攪拌し、その後２時間以上、室温まで温める。
水（２５０ｍＬ）を室温で滴下し、得られた固体を濾取して３００ｍＬ５０％プ
ロピオン酸水溶液で洗浄し、乾燥した後、黄褐色固体の５−メトキシ−２−ニト
ロフェノールを得る。

【００２８】 Ｎ−アルキル−５−メトキシ−２−ニトロアニリン（Ｒ１＝アルキル、Ｒ４＝
メトキシ、Ｒ３及び両方のＲ５＝ＨであるスキームＩのＣ）：１リットル丸底フ
ラスコに、トルエン（３００ｍＬ）、５−メトキシ−２−ニトロフェノール（５
．０ｇ、０．０３ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（６．６８ｇ、０．０６６ｍｏ
ｌ）を加える。次いで、得られた溶液を０℃まで冷却し、無水トリフリック（Ｔ
ｆ₂Ｏ）を注射器でゆっくり加える（９．３ｇ、０．０３３ｍｏｌ）。反応混合
物を０℃で５分間攪拌し、アミン（Ｒ１−ＮＨ₂）（０．１２ｍｏｌ）を加え、
反応混合物を５．５時間加熱して還流させる。室温まで冷却後、反応内容物をシ
リカゲルのプラグで濾過し（９０：１０のへキサン：酢酸エチルで溶出）、ロー
タリーエバポレーターで濃縮して粗Ｎ−アルキル−５−メトキシ−２−ニトロア
ニリンを得る。本物質は次の合成段階で使用する。

【００２９】 Ｎ１−アルキル−６−メトキシベンジミダゾール（Ｒ１＝アルキル、Ｒ４＝メ
トキシ、Ｒ３及び両方のＲ５＝ＨであるスキームＩのＤ）：２５０ｍＬ丸底フラ
スコに８８％の蟻酸（５０ｍＬ）とＮ−アルキル−５−メトキシ−２−ニトロア
ニリン（０．０２ｍｏｌ）を加える。この均一な混合物に１０％Ｐｄ−Ｃ（６０
０ｍｇ）の酢酸エチルのスラリーを加える。得られた不均一な反応混合物を１時
間１００℃まで加熱して、室温まで冷却し、セライト（水で溶出）で濾過する。
次いで、ろ液に２８％ＮＨ₄ＯＨを加えて塩基を生成させ、酢酸エチル（３×１
００ｍＬ）で洗浄する。合わせた有機物を乾燥して（ＭｇＳＯ₄）、濾過し、ロ
ータリーエバポレーターで濃縮して茶色い残さを得る。この残さをクロマトグラ
フにかけ（ＳｉＯ₂、５０：５０のへキサン：酢酸エチル）、Ｎ１−アルキル−
６−メトキシベンジミダゾールを得る。

【００３０】 アルキル−６−メトキシ−Ｎ−（Ｒ６−Ｐｈ）ベンジミダゾール−２−カルボ
キシアマイド類（Ｒ１＝アルキル、Ｒ４＝メトキシ、Ｒ３及び両方のＲ５＝Ｈで
あるスキームＩのＥ）：Ａｒ環境下で、５０ｍＬ丸底フラスコに、１−アルキル
−６−メトキシベンジミダゾール（１．０当量、０．９８ｍｍｏｌ）と無水ＴＨ
Ｆ（１０ｍＬ）を加える。この溶液を−７８℃まで冷却し、ｎ−ブチルリチウム
（１．４当量、１．３７ｍｍｏｌ）を滴下して、得られた混合物を３０分間−７
８℃で攪拌する。次いでニートＲ６−フェニルイソシアネートを注射器で加える
。次いでこの混合物を１０分間−７８℃で攪拌し、その後室温まで温めてさらに
１５分間攪拌する。次いで飽和重炭酸ナトリウムを加え（２０ｍＬ）、その後水
を加える（２０ｍＬ）。得られた混合物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出す
る。この結合体を濃塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥して（ＭｇＳＯ₄）
）、濾過し、濃縮して粗ベンズアミドを得る。次いでこの残さをクロマトグラフ
にかけ（へキサン：酢酸エチル）、純粋なＮ−１−アルキル−６−メトキシベン
ズイミダゾール−２−ベンズアマイドを得る。

【００３１】 スキームＩＩは、多くの主題発明化合物の合成に有用な、その他の一般的なス
キームである。

【００３２】 スキームＩＩ

【００３３】

【化５】

【００３４】 ｈ：（ＣＨ₂Ｏ）_n、ＫＣＮ、ＨＯＡｃ、ＺｎＣｌ₂； ｊ：ＥｔＯＨ、ＫＯＨ； ｋ：Ｒ２−ＯＨ、ＤＥＡＤ、Ｐｈ₃Ｐ、ＴＨＦ； ｍ：ＡｒＯＨ、Ｈ⁺； また
はＡｒＮＨ₂Ｈ₂Ｏ、Ｈ₂Ｒｕ（ＰＰｈ₃）₄ スキームＩＩＩは、多くの主題発明化合物の合成に有用な、その他の一般的な
スキームである。

【００３５】 スキームＩＩＩ

【００３６】

【化６】

【００３７】 ｎ：ＰｈＣＨＯ、ＨＮＯ₃、Ｈ₂ＳＯ₄； ｐ：（Ｂｏｃ）₂ＣＯ、ＣＨ₂Ｃｌ₂；
ｑ：Ｒ１−ＮＨ₂、ＣＨ₃ＣＮ； ｒ：１０％Ｐｄ／Ｃ、ＥｔＯＨ； ｓ：（ＣＨ
Ｏ−ＣＯＯＥｔ）_n／トルエン、Ｉ₂／ＥｔＯＨ； ｔ：ＣＦ₃ＣＯＯＨ、ＣＨ₂Ｃ
ｌ₂；ｕ：Ａｒ−ＮＨ₂ スキームＩＶは、多くの主題化合物を合成するのに有用な、その他の一般的な
スキームである。

【００３８】 スキームＩＶ

【００３９】

【化７】

【００４０】 ｖ：Ｒ６−ＣＯＣｌ、ＣＨ₂Ｃｌ₂； ｗ：Ｂ₂Ｈ₆、ＴＨＦ； ｘ：１０％Ｐｄ／
Ｃ、ＥｔＯＨ； ｙ：（ＣＨＯ−ＣＯＯＥｔ）_n、Ｉ₂／ＥｔＯＨ、 ｚ：ＮＨ₂
−Ａｒ

【００４１】 組成物 本主題発明は、安全かつ有効な量の上記の２−フェニル−カルバモイルベンジ
ミダゾール化合物及び薬学的に許容可能な補形剤を含む薬学的組成物を含む。組
成物はまた、任意に他の薬理学的活性化合物、特に血栓溶解などの活性を有する
もの（例えば、アブシキマブ、レテプラーゼ）、ストレプトキナーゼまたは組織
プラスミノーゲン活性化剤（例えばストレプトキナーゼ）、抗凝固剤（例えば、
へパリン、アスピリン）、β遮断剤（例えば、カルベジロール、プロパナロール
）及びカルシウムチャンネル遮断剤（例えば、べラパミル、ニフェジピン）を含
んでもよい。 薬学的に許容可能なキャリアまたはそれらの成分の幾つかの例としては、乳糖
、ブドウ糖及びショ糖等の糖類；コーンスターチ及び馬鈴薯デンプン等のデンプ
ン類；カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロ
ース等のセルロース及びその誘導体；粉末状トラガカント；麦芽；ゼラチン；タ
ルク；ステアリン酸及びステアリン酸マグネシウム等の固体の潤滑剤；硫酸カル
シウム；ピーナッツオイル、綿実油、ゴマ油、オリーブオイル、コーン油及びカ
カオ油等の植物油；プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニ
トール及びポリエチレングリコール等のポリオール類；アルギン酸；トゥィ−ン
ズ（Ｔｗｅｅｎｓ）（登録商標）等の乳化剤；ラウリル硫酸ナトリウム等の湿潤
剤；着色剤；芳香剤；補形剤；打錠剤；安定剤；酸化防止剤；保存剤；発熱性物
質非含有水；等張生理食塩水；及びリン酸緩衝液が挙げられる。

【００４２】 化合物と共に使用される薬学的に許容可能なキャリアの選択は、基本的には該
化合物が投与される方法によって決定される。本発明の化合物及び組成物は、組
織的に投与してもよい。投与の経路としては、局所的または経皮的（貼付剤、軟
膏、クリーム、粉末など）；経口；皮下、筋肉、または静脈注射などの非経口；
局所的；直腸；結腸；腹膜内；眼内、舌下；口内；吸入；及び／または鼻腔内な
どが挙げらる。投与の好ましい経路は皮下、特に毎日または必要に応じた静脈注
射である。 使用する化合物の適切な量は、動物モデルを用いた日常的な実験によって決定
してもよい。かかるモデルとしては、これらに限定されるものではないが、シロ
イタチ、イヌ及びヒト以外の霊長類モデルが挙げられる。一般的に、１日に体重
１ｋｇ当り０．０１μｇ〜１００ｍｇの量が使用される化合物または組成物の有
効性に依存して投与される。

【００４３】 注射の好ましい投与形式ユニットとしては、水の無菌溶液、生理食塩水または
これらの混合物が挙げられる。皮下の投与形式ユニット組成物は、注射用に用意
された溶液の形態でも、または注射の前に水または生理食塩水で再構成する乾燥
（例えば、凍結乾燥）組成物であってもよい。前記溶液のｐＨは約７．４に調整
するべきである。注射または外科的な移植の好適なキャリアとしては、ヒドロゲ
ル類、制御された−または持続放出性のデバイス類（devises）、ポリ乳酸及び
コラーゲンマトリクス類が挙げられる。注射の他の好適なキャリアとしては、デ
キストロース、マンニトール、ラクトース、レシチン、アルブミン、グルタミン
酸ナトリウム及びその他が挙げられる。 本主題発明の組成物はまた、投与形式ユニットで提供されることが好ましい。
投与形式ユニット組成物は、好ましくは約５０ｍｇ以上、より好ましくは約２０
０ｍｇ以上、さらに好ましくは約５００ｍｇ以上で、好ましくは約２０００ｍｇ
まで、より好ましくは約１０００ｍｇまで、さらに好ましくは約５００ｍｇまで
の、上に開示した２−フェニルカルバモイルベンジミダゾール化合物を含有する
。

【００４４】 主題組成物は、（例えば）経口、局所的、または非経口投与の好適な多様な形
態であってよい。望まれる投与の特定の経路によっては、当技術分野で周知の薬
学的に許容可能な種々のキャリアを使用してもよい。これらキャリアとしては、
固体または液体の充填剤、希釈液、屈水性誘発物質、界面活性剤及びカプセル化
物質が挙げられる。活性化合物と共に使用されるキャリア成分の量は、活性化合
物の単位分量当りの投与のための物質の実用的な量を提供するに十分である。主
題の投与形式ユニットを製造するための技術及び組成物は、以下の参考文献に記
載されている： Modern Pharmaceutics、第７巻、第９及び第１０章、バンカー
（Banker）及びローズ（Rhodes）、編集、１９７９；リーベルマン（Lieberman
）他、Pharmaceutical Dosage Forms： Tablets、１９８１；及び、アンセル（A
nsel）、Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms、第２版、１９７６。 上記のように、本主題発明の好ましい調剤形は、非経口的投与を意図したもの
である。かかる組成物に好ましい薬学的に許容可能な補形剤としては、無菌、発
熱性物質を含まない水及び生理食塩水が挙げられる。非経口投与形式ユニット組
成物は、注射用に準備された溶液の形態でも、または注射の前に水または生理食
塩水で再構成する乾燥（例えば凍結乾燥）組成物であってもよい。 主題発明の好ましい組成物としてはまた、錠剤、カプセル、粉末及び液体など
の経口投与を目的としたものが挙げられる。かかる組成物に好適な薬学的に許容
可能な補形剤としては、糖類、デンプン類、セルロース及びその誘導体、麦芽、
ゼラチン、タルク、硫酸カルシウム、硫酸マグネシウム、植物油類、合成油類、
ポリオール類、アルギン酸、リン酸緩衝液類、乳化剤類、アルコール類及び水が
挙げられる。

【００４５】 本化合物の使用法 主題発明の２−フェニル−カルバモイルベンジミダゾール化合物は、虚血性再
潅流障害の治療に有用である。いかなる特定のメカニズムにも限定されるもので
はないが、本化合物は接着分子の代謝の調節を介して作用すると考えられている
。それゆえ、主題化合物は、心疾患（心筋虚血、狭心症、心臓不整脈、心不全、
高血圧）を含む虚血性再潅流障害の治療；典型的に、脳卒中、心停止、または周
産期仮死に続いて起こる酸素欠乏症または虚血に関連する神経毒損傷を軽減させ
る治療；臓器移植後の再潅流障害を軽減させる治療；凍傷、炎症性弁疾患、乾癬
、喘息、成人呼吸窮迫症候群の治療；肺気腫、気管支炎を包含する慢性炎症性肺
疾患の治療；及び線維症、じんま疹、血管性浮腫、血管症炎、偏頭痛、リュウマ
チ性関節炎、痛風及びアレルギーの治療に、得に有用である。 多様な過程が、再潅流障害、炎症及び関連過程に含まれることが知られている
。理論に拘泥するものではないが、以下のメカニズムが、関連する本主題発明の
関心事である。再潅流障害過程において重要となるのが、内皮細胞上の細胞内接
着分子−１（ＩＤＣＭ−１）の誘導、発現、活性化である。次いでＩＣＡＭ−１
は、好中球と相互に作用し、その結果好中球が組織内に移動し、続いて有害な酵
素及び破壊的な活性酸素分子が放出される。従って、ＩＣＡＭ−１の誘導、発現
、または活性化を妨害することのできる化合物は、虚血性再潅流に有効な効果を
有すると思われる。これらの化合物は、有効な分量がＩＣＡＭ−１源に運ばれる
限りは、経口、血管内、皮下、筋肉、鼻腔内、直腸内、眼内、舌下／口内、吸入
及び局所的（貼付剤、軟膏、粉末、またはクリーム）経路によって投与すること
ができる。 理論に拘泥するものではないが、本主題発明の２−フェニルカルバモイルベン
ジミダゾール類は、ＩＣＡＭ−１の誘導、発現、または活性化を顕著に減少させ
るものと考えられている。他の検定において、主題化合物は心臓の保護と相互作
用する活性を示す。以下は化合物のかかる活性を決定するのに有用な試験法であ
る。

【００４６】 ＩＣＡＭ−１発現の阻害の測定 組織：分子（特にＩＣＡＭ−１）の接着の発現は、クロネティクス・コーポレ
ーション（Clonetics Corp.）（カタログ＃ＣＣ２５１９）（カリフォルニア州
、サンディエゴ）から得られるヒト臍帯静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を用い
て行う。 終点：ＴＮＦ−α（ＩＣ₅₀）３００Ｕ／ｍｌで誘導したＨＵＶＥＣ表面上のＩ
ＣＡＭ−１の発現を５０％阻害する物質の濃度。

【００４７】 方法：冷凍されたＨＵＶＥＣのバイアル瓶１本を、３７℃で２分以内に急速解
凍し（１ｍｌの培地に、細胞数５×１０⁵〜１×１０⁶）、次いで細胞を２２５ｃ
ｍ²フラスコ中の予め温めておいた４〜５ｍｌの育成培地（ＨＵＶＥＣ用のＥＧ
Ｍ）に移し（２５００〜５０００ｃｅｌｌｓ／ｃｍ²で播種）、湿気を与えたＣ
Ｏ₂５％環境の３７℃インキュベータ−内に置く。２４〜３０時間後に培地を変
え（死滅した細胞及び細胞保護剤を取り除くため）、その後は２〜３日ごとに変
えると、細胞は５〜７日で成長して集密状態となる。トリプシンで処理された細
胞をフラスコから取り除くため、遠心して（２００ｇ、５分）細胞をペレット状
にし、５０ｍｌ培地に細胞を再び懸濁し（１〜２×１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｍｌまで
が望ましい）、１００μｌの細胞懸濁液を９６穴（ウェル）のコラーゲンコーテ
ィングプレートで培養すると（１〜２×１０４ｃｅｌｌｓ／ウェルまでを使用）
、成長して集密状態になる（１〜２日）。古い培養用培地を取り除き（廃棄し）
、ＴＮＦ−α（または望む濃度の他のＩＣＡＭ−１刺激物）を含有する９０μｌ
の新しい培地、または９０μｌ培地のみ（刺激物を与えないコントロールウェル
用）を加える。試験する化合物（望ましい濃度の１０倍）を含有する１０μｌ培
地（またはＰＢＳ、またはＰＢＳ、１％ＤＭＳＯ）、またはコントロールウェル
用の付加的な１０μｌ培地のみ（またはＰＢＳ、またはＰＢＳ、１％ＤＭＳＯ）
（最終的な化合物濃度＝１倍、使用する場合の最終的なＤＭＳＯ濃度＝０．１％
）を加え、３７℃で４時間インキュベートする。培地を除去（廃棄）し、−２０
℃で２０分間、８０％アセトン、２０％Ｈ₂Ｏ、２００μｌ中で細胞を固定する
。アセトン及びＨ₂Ｏを除去（廃棄）して、プレートを風乾させ、−２０℃のデ
シケーター内に一晩置く。プレートをＰＢＳ（５×２５０μｌ）で洗浄し、次い
で２００μｌのＢＬＯＴＴＯ溶液を加えて非特異結合をブロックし、室温で１時
間インキュベートする。ＢＬＯＴＴＯを除去（廃棄）してＰＢＳ（２×２５０μ
ｌ）でプレートを洗浄し、その後１００μｌのＩＣＡＭ−１抗血清（ＢＬＯＴＴ
Ｏ中）を加え、室温で１時間インキュベートし、ＩＣＡＭ−１抗血清を除去（廃
棄）してＰＢＳ（５×２５０μｌ）でプレートを洗浄し、次いで１００μｌのヤ
ギ−抗マウス−ＨＲＰ抗血清抱合体（ＢＬＯＴＴＯ中）を加えて１時間室温でイ
ンキュベートする。抗血清−ＨＲＰ抱合体を除去（廃棄）してＰＢＳ（５×２５
０μｌ）でプレートを洗浄し、次いでクエン酸緩衝液で洗浄する（１×３００μ
ｌ、廃棄する）。１００μｌのＨＲＰ基質を加え、室温で５〜２０分間インキュ
ベートし（時間は変わってもよい、色の変化に注意する）、５０μｌの１規定Ｈ ₂ ＳＯ₄をウェルに加え反応を止める。プレートリーダー上４９０ｎｍでプレート
を読む。

【００４８】 ＩＣＡＭ−１ ＥＬＩＳＡ用の溶液： （１）８０％アセトン：２０％Ｈ₂Ｏ（ｖ：ｖ）を−２０℃で保存。 （２）（１×）ダルベッコ（Dulbecco's）のリン酸緩衝液（ＤＰＢＳ）、Ｃａ ⁺⁺ またはＭｇ⁺⁺を含まない、ｐＨ７．５（シグマ（Sigma）Ｄ−５６５２、１×
粉末またはシグマ（Sigma）Ｄ−１４０８、１０×液体、使用前に１：１０に希
釈する）。 （３）ＢＬＯＴＴＯ、ＤＰＢＳ中の５％（ｗ：ｖ）無脂肪乾燥ミルク（カーネ
ーション（Carnation）またはその他）。 （４）マウス−抗ヒトＩＣＡＭ−１モノクローナル抗血清（リサーチ・ディア
グノスティクス（ResearchDiagnostics）、カタログ＃ＲＤＩ−ＣＢＬ４５０−
１×、抗ＣＤ５４−クローン１５．２）、保存溶液（１ｍｇ／ｍｌ）、使用直前
にＢＬＯＴＴＯで１：１０００に希釈（最終抗血清濃度１ｍｇ／ｍｌ）。 （５）ヤギ−抗マウスＩｇＧ−ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ抱合体
（ＩｇＧ−ＨＲＰ、ＤＡＫＯ社；カタログ＃Ｐ０４４７）、保存溶液（１ｍｇ／
ｍｌ）、使用直前にＢＬＯＴＴＯで１：１０００に希釈（最終濃度１ｍｇ／ｍｌ
）。 （６）クエン酸塩緩衝液、ｐＨ５．０、６５．３ｍＭリン酸ナトリウム（二塩
基性、１２−水和物；ＭＷ＝３５８．４；２３．４ｇ／ｌ）、及び３４．７ｍＭ
クエン酸（無水、酸を含まない；ＭＷ＝１９２．１；６．６７ｇ／ｌ）−ｐＨを
調べ（５．０）、４℃で保存。 （７）ＨＲＰ基質、ｏ−フェニレンジアミンジヒドロクロリド（ＯＰＤ；シグ
マ（Sigma）、Ｐ６９１２；５ｍｇＯＰＤ／錠剤）、１錠剤／１０ｍｌクエン酸
塩緩衝液（室温）を加え、その後使用直前に４ｍｌの３０％Ｈ₂Ｏ₂（シグマ（Si
gma）、Ｈ１００９）／１０ｍｌ基質溶液を加える−最終濃度＝０．５ｍｇＯＰ
Ｄ／ｍｌ及び０．０１２％Ｈ₂Ｏ₂。 （８）ヒト腫瘍壊死α因子（ＴＮＦ−α、ベーリンガーマンハイム（Boehring
er-Manheim）；カタログ＃１３７１８４３）、１０ｍｇ／バイアル瓶（１ｍｌ中
）、１０⁸Ｕ活性／ｍｇ＝１０⁶Ｕ／１０ｍｇ、２０ｍｌ内皮細胞基本培地（ＥＢ
Ｍ）に希釈（５００００Ｕ／ｍｌ；５００ｎｇ／ｍｌ）、エッペンドルフ管（×
１３３）に１５０μｌ（７５００Ｕ；７５ｎｇ）分注し、２０℃で保存し、各実
験に対し、１つの分注を２５μｌＥＢＭに加える−最終濃度＝３００Ｕ／ｍｌま
たは３ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−α。

【００４９】 ヒト臍帯静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の阻害／好中球接着の測定 組織：接着をクロネティクス（Clonetics）（カタログ＃ＣＣ２５１９）から
得られるヒト臍帯静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）上で実施する。 終点：３００Ｕ／ｍｌのＴＮＦα（ＩＣ₂₀）で誘導したＨＵＶＥＣｓへのＰＭ
Ｎ接着を２０％阻害する物質の濃度。 方法 Ｉ．細胞： Ａ．内皮細胞 ヒト臍帯静脈血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）は、１ｍｌ分注中の凍結細胞として
購入する（クロネティクス・コーポレーション（Clonetics Corporation）、カ
リフォルニア州、サンディエゴ）。臍帯静脈内皮成長培地（ＥＧＭ−ＵＶ）、ビ
ューレットキット添加物、トリプシン処理剤（トリプシン中和溶液及びＨＥＰＥ
Ｓ緩衝液）もまた、クロネティクス（Clonetics）から購入する。フラスコを３
７℃、５％ＣＯ₂＋９５％空気、１００％湿度のインキュベーター中に置く。液
体Ｎ₂凍結細胞のバイアル瓶１本を３７℃ウォーターバス中で解凍し、バイアル
全体を５０ｍｌの新しい培地の入ったＴ−２７５フラスコに入れ、ＣＯ₂インキ
ュベーターに置く。培地は２４〜４８時間後に交換する。４〜５日以内に集密的
状態になるはずである。その期間に培地を少なくとも１度は変える。フラスコ内
の単層をハンクス平衡食塩溶液（ＨＢＳＳ）で洗浄した後、この単層をトリプシ
ン溶液を使用して分離する。トリプシン処理した細胞を２００×Ｇｓで５分間遠
心分離にかけ、培地約１５０ｍｌに再び懸濁する。１００ｕｌを、予めコラーゲ
ンコートされた９６ウェル・プレートの各ウェルに分注する。プレートの単層は
、４８時間以内に集密的状態になるはずである。

【００５０】 Ｂ．好中球分離 末梢血多形核好中球（ＰＭＮｓ）を確立された方法論を用いて分離する。（１
）ヒト血液は、認定の瀉血医により従来の静脈穿刺によって肘静脈から得る。血
液はヘパリンを加えたバキュテイナーに集められる（バキュテイナー＃６４８９
、グリーンキャップ、１５ｍｌ採血用、ＶＷＲ）各検定に血液３０ｍｌを使用す
る。ヘパリン処理した血液を、約１／２の体積の０．２％グルコース含有リン酸
緩衝食塩水（ＰＢＳ−Ｇ）で希釈する。不連続勾配のヒストパック（Histopaque
）（底に３ｍｌヒストパック（Histopaque）−１１１９及び頂上部に３ｍｌヒス
トパック（Histopaque）−１０７７）（シグマケミカル社（Sigma Chemical Co.
）、セントルイス、ミズーリ州（St. Louis, MO））を６本の１５ｍｌコニカル
遠心分離管に調製する。希釈血液をヒストパック（Histopaque）−１０７７の表
面上に注意深く入れ層状にする。管を室温で３０分間８００×Ｇで遠心分離にか
ける。遠心分離のステップ後、ヒストパック（Histopaque）−１０７７／ヒスト
パック（Histopaque）−１１１９間の境界面及びペレット状の赤血球の頂上部の
領域から、ＰＭＮｓを吸引によって取り除く。ＰＭＮｓをすべての管から回収し
、さらに全体積３０ｍｌに希釈して、６００×Ｇで１５分間遠心分離にかける。
上澄みを廃棄し、ペレット（ＰＭＮｓ及びいくらかの赤血球を含有する）を６ｍ
ｌの冷水で３０秒間処理し、混入しているＲＢＣを溶解する。通常の浸透圧は２
．７％食塩水３ｍｌを加えることによって、再び確立される。ＰＭＮｓをＰＢＳ
−Ｇでさらに２度洗浄する。ＰＭＮｓの生存性及び数は、血球計算チャンバーに
おいてトリパンブルー排除試験を用いて決定する。ＰＭＮｓ懸濁液の小分注をサ
イトフュージ（Cytofuge）調製に対して使用することもある。このサイトフュー
ジスライド（Cytofuge slide）をライト血液染色液（Wright's blood stain）（
シグマケミカル社（Sigma Chemical Co.）で染色し、調製におけるＰＭＮｓのパ
ーセントを評価するために分画コートを行う。

【００５１】 ＩＩ．内皮細胞の調整： ９６ウェルプレート中の内皮細胞の単層を、３００Ｕ／ｍｌの腫瘍壊死因子（
ＴＮＦ、ベーリンガー−マンハイム（Boehinger-Manheim）、カタログ＃１３７
１−８４３）で誘導する。ＴＮＦ及び化合物をＰＭＮｓの添加の４時間前に各ウ
ェルに加える。

【００５２】 ＩＩＩ．好中球の蛍光標識 好中球ペレットを最後に洗浄した後、５ｍｌのＰＢＳ−Ｇ中に再び懸濁する（
約１〜３×１０⁶／ｍｌ）。５（及び６）カルボキシフルオレセインジアセテー
トサクシニミジルエステル（ＣＦＳＥ、分子プローブ、ユージーン、オレゴン州
（Eugene OR））ＣＦＳＥ２０ｍＭ保存液を、ＤＭＳＯ２．２４ｍｌ（ＭＷ５５
７．５）中に２５ｍｇを溶解して調製する。保存液５μｌをＰＭＮｓ懸濁液５ｍ
ｌに加え、最終濃度を２ｕＭにする。この混合物を冷蔵庫内で２０分間インキュ
ベートする。最後にＰＭＮｓをＰＢＳ−Ｇで４回洗浄する。最後の洗浄後、ＰＭ
Ｎｓを完全なＥＧＭ−ＵＶ培地に望ましい濃度になるように再び懸濁する（通常
９６ウェルプレートの各ウェルは０．６〜１．２×１０⁵個のＰＭＮｓを受け取
る。）。

【００５３】 ＩＶ．試験化合物の添加 ＰＭＮｓ添加の４時間前に、内皮細胞の単層を含有するウェル内の培地を、Ｔ
ＮＦと共に化合物を含有する１００μｌの培地に取り換える。 Ｖ．接着の検定 Ａ．データの収集： １０μｌ体積中の（ＩＩＩを参照）ＣＦＳＥ標識好中球（０．７〜１．５×１
０⁵）をＨＵＶＥＣの単層に加える。プレートを、５％ＣＯ₂＋９５％空気、湿度
１００％、３７℃のインキュベーター内で３０分間インキュベートする。非接着
細胞は以下の手順に従って、遠心分離により除去する。

【００５４】 （１）３７℃でインキュベートした後、サイトフロアー（Cytofluor）２４０
０内で読み取りを行う。この値を、加えられた全ての細胞の１００％とする。 （２）ウェルの頂上部のわずかな凸形メニスカスに、温めた（インキュベータ
ーの）培地を満たす（通常２６０μｌ（既にウェル中にある１００μｌまたはす
でにある量に加えて））。 （３）ウェルをマイクロプレート用の接着密閉フィルム（ライニン（Rainin）
、カタログ＃９６−ＳＰ−１００）を使用して密閉する。 （４）蓋をプレートの上に置き、それぞれの泡のサイズおよび位置をマーカー
で蓋上に記録する。 （５）蓋を除去し、折って（４層に）切った紙タオルを密閉フィルムの頂部に
置く。次いでプレートの蓋を紙タオルの頂部に置き、プレートをひっくり返す。 （６）プレートを遠心分離機（ソルバール型（Sorvall Model）ＲＴ６０００
Ｄ）のプレートホルダー上に置き、５００ＲＰＭ程度まで速度を下げて回転させ
、その後遠心分離機をタイミング・ノブによってオンにする。速度制御はタコメ
ーターの読み値が１１００ＲＰＭになるまで調節する（これは２００Ｇｓに等し
い）。速度が１１００ＲＰＭに達した瞬間に、分離タイマーをスタートさせる。
正確に２分で、遠心分離機のタイマーをゼロにしてモーターを停止する。プレー
トはいずれのブレーキも使用せずに停止させる。 （７）プレートを取り除き、すべての空のウェルを記録する。蓋及び折った紙
タオルを除去する（プレートの上下はそのままにする）。次いで密閉フィルムを
生物学的物質処理ビンの上に除去し、培地を振り出す。その後プレートを紙タオ
ル上でふき取り、過剰な液体を吸い取る。

【００５５】 （８）プレートの上下の位置を元に戻し、顕微鏡下でよく観察する。 （９）２度目の読み取りをサイトフロアー（Cytofluor）上で行う。この２度
目の読み取りを使って、単層に接着して残っているＰＭＮｓのパーセントを決定
する。 （１０）サイトフロアー（Cytofluor）のＣＳＶファイルの情報をダウンロー
ドし、準備しておいたＥＸＣＥＬスプレッドシートでデータを処理し、その際バ
ックグラウンド（非誘導内皮へのＰＭＮｓの接着）は除かれ、接着阻害パーセン
トが以下のように決定される。

【００５６】

【数１】

【００５７】 （１１）ＥＸＣＥＬスプレッドシートは、ａ）単層へのＰＭＮｓ接着のパーセ
ント、ｂ）単層へのＰＭＮｓ接着のパーセントからバックグラウンド（非活性化
内皮細胞へのＰＭＮｓの接着）を引いたもの、ｃ）０％阻害までＴＮＦ単体を受
け取るウェルを考慮した接着阻害パーセント（負の数は接着の増加を示す）、を
計算する。

【００５８】 Ｂ．統計、データの取り扱い、及び保存： 統計はＥＸＣＥＬで等分散の両側ｔ−検定を用いて行い、その結果をＰ値とし
て記録する。

【００５９】 ＶＩ．追加情報 Ａ．コラーゲンによるウェルのコーティング： 酸可溶性のラット尾部コラーゲン２５ｍｇを水４４６ｍｌに溶解し、ＨＣｌを
数滴滴下して酸性化する。濾過によって滅菌する。９６ウェルプレート（０．２
８ｃｍ²）の各ウェルに５０μｌを加え、１０μｇ／ウェルにする。３７℃のイ
ンキュベーター内で一晩インキュベートする。液体を全て吸引し、使用時まで冷
蔵庫で保存する。 Ｂ．ＰＢＳ＋０．２％グルコース（デキストロース）の調製： ＰＢＳ（シグマ（Sigma））２リットルを用意し、グルコース２グラムを加える
。フィルターで滅菌し、保存する。

【００６０】 ラット心筋梗塞／再潅流障害モデル ラットの外科的調製： オスのスプラーグ・ドーリー（Sprague-Dawley）ラットに、ウレタン１．２５
ｇ／ｋｇで腹膜内麻酔をかける。頚動脈及び頚静脈は、血圧を記録するため、ま
た染色料または薬を静脈内投与するために、一時体外に出しＰＥ−５０管を挿管
する。気管切開術を行う。動物をハーバード・ローデント・ベンチレーター（Ha
rvard Rodent Ventilator）（モデル６８３、ハーバード装置（Harvard Apparat
us）、マサチューセッツ州、サウスナティック）に接続し、１分当り５０回で、
体重１００ｇ当り１．５ｍｌの換気を行う。鉛ＩＩ心電図用に針電極を設置する
。動物を望ましい体温に調節する電気加熱パッドによって３７℃に維持し、直腸
サーミスタプローブ及びコントローラで制御する。心臓を左胸開胸術により第五
肋間腔で慎重に分離し、左前面下行冠状動脈（ＬＡＤ）を確認する。６−０シル
クの結さつ糸をＬＡＤの周りに配置し、急激な閉塞及び動脈の再潅流するために
、末端を短いＰＥ−３２０チュービングに通す。ＬＡＤは、縫合部をクランプで
締め、２５ｍｍシュワルツ（Schwarz）動脈瘤クリップを使用して心臓表面に対
しきつくチュービングして閉じる。閉塞を９０分間続け、その後３．０〜４．５
時間の再潅流を行う。影響を受ける心臓領域の再潅流の１０分前に、頚静脈を介
した静脈内輸送によって薬またはビヒクルを動物に投与する。模擬手術を施した
ラットでは、虚血または再潅流を起こさない。実験の最後にＬＡＤを永久的に再
閉塞し、エバンス・ブルー染料（Evans Blue Stain）の１０ｍｇ／ｍｌ溶液を頚
部カニューラを介して投与し、虚血の影響を受ける領域、すなわち危険領域（Ａ
ＡＲ）を同定する。染色した心臓を迅速に切除し、４℃で０．９％食塩水に静置
後、クレアチンホスホキナーゼ活性（ＣＰＫ）の決定を行う。

【００６１】 クレアチンホスホキナーゼ活性の測定： 左心室遊離壁面（ＬＶＦＷ）を切開して心臓から切り取り、重さを量る。染色
が見られないことで定義されるＡＡＲを、ＬＶＦＷから切開し重量を量る。この
ＡＡＲを、１ｍＭのＥＤＴＡ及び１０ｍＭのメルカプトエタノールを含む０．２
５Ｍスクロース４ｍｌ中で、４℃で５秒間ホモジネートする。ホモジネートした
ものを、４℃で３０分間、３０００×ｇで遠心分離にかける。上澄みをＣＰＫ活
性測定のために静かに取り除き、分離し、ミエロペルオキシダーゼ活性測定のた
め、ペレットを凍結保存する。ＣＰＫ活性は、市販の基質、ＣＰＫ検定バイアル
（登録商標）（シグマ・ディアグノスティクス（Sigma Diagnostics））を用い
、２４〜２６℃、波長３４０ｎｍにおいて分光光度計で測定する。

【００６２】 ミエロペルオキシダ−ゼ活性の測定： ミエロペルオキシダ−ゼ（ＭＰＯ）はＣＰＫ調製後の凍結ペレットから分離す
る。ペレットを、０．５％ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド（ＨＴ
ＡＢ）を含むｐＨ６の５０ｍＭリン酸緩衝液に約１０％の濃度になるよう懸濁さ
せて、１０秒間超音波をあて、ドライアイスで凍結する。凍結−融解サイクルを
３回行い、サイクルの間に１０秒間超音波をあてる。サンプルを３０分間氷上で
冷却し、続いて４℃で１５分間、１２，５００×ｇで遠心分離にかける。０．１
６７ｍｇ／ｍｌのｏ−ジアニシジンジヒドロクロリド及び０．０００５％の過酸
化水素を含む、ｐＨ６の５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液中で、分注した上澄み
のＭＰＯ活性を分光光度計により２４〜２６℃、波長４６０ｎｍにおいて測定す
る。

【００６３】 計算及び統計解析： 結果は平均値±ＳＥＭとして記録する。ＣＰＫ及びＭＰＯ活性は、組織１ｇ当
りのユニットとして表され、ＣＰＫ活性の１ユニットは、１分間に１μｍｏｌの
過酸化水素を消費するＣＰＫの量として定義する。ＡＡＲは、重量に基づくＬＶ
ＦＷのパーセンテージとして定量する。平均動脈血圧（ＭＡＢＰ）は、最低血圧
（弛緩期血圧）と最高血圧（収縮期血圧）間の差の３分の１に、最低血圧を加え
て計算する。データは、プールされたｔ−検定または分散の１方向分析により、
９５％の信頼レベルで、治療効果の統計的有意性について分析する。 主題発明は、本明細書に上記した病気及び疾患のいずれか、とりわけ再潅流障
害を、本明細書に開示した安全かつ有効な量の化合物を投与することにより、治
療または予防する方法を含む。治療のかかる方法は、かかる化合物の非経口、経
口、または局所的な投与形式ユニット投与を包含することができる。非経口的投
与としては、静脈内、筋肉、皮下、腹膜内または他の注射の投薬形が挙げられる
。経口的投与としては、調剤形の経口摂取及び胃腸管からの活性物質の吸収が挙
げられる。局所的な投与としては、これに限定されるものではないが、消化器管
及び呼吸器系を含む皮膚または粘膜組織の表面に調剤形を接触させる手段を含む
。

【００６４】 非経口的投与において、一般的に投与される本化合物の量は、好ましくは約２
ｍｇ／ｋｇ以上、より好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ以上で、好ましくは約２ｍｇ／
ｋｇまで、より好ましくは１０ｍｇ／ｋｇまでである。かかる投与の頻度は、一
般的には１日に１回または２回である。治療の投薬方式は一般的に単一投与であ
り、または約１日以上、好ましくは約５日以上で、約３０日まで、好ましくは約
１５日まで続ける。 経口投与において、一般的に投与される２−フェニルカルバモイルベンジミダ
ゾール化合物の量は、好ましくは約５ｍｇ／ｋｇ以上、より好ましくは約１０ｍ
ｇ／ｋｇ以上で、好ましくは２５ｍｇ／ｋｇまで、より好ましくは１５ｍｇ／ｋ
ｇまでである。かかる投与の頻度は、一般的には１日に１回〜約４回である。治
療の投薬方式は一般的には約１日以上、好ましくは約５日以上で、約３０日まで
、好ましくは約１５日まで続ける。

【００６５】 組成物及び方法の実施例 以下の非制限の実施例は、本主題発明を説明するものである。次の組成物及び
方法の実施例は本発明を限定するものでなく、熟練した技術者がが本発明の化合
物、組成物及び方法を調製し使用する場合の手引きを提供するものである。各実
施例において、本発明内の他の化合物は、以下に示した同様の結果を示す実施例
の化合物と置き換えてもよい。

【００６６】 実施例Ａ 静脈内溶液の形態の薬学的組成物は、以下の混合などの従来の方法によって調
製する：成分 量（ｍｌｓ） 実施例１の化合物¹ １ｍｇ 無菌水 １０ｍｌ ＨＣｌ及び／またはＮａＯＨ ｐＨ７．２〜７．５¹ 実施例１の化合物は実施例２〜８のいずれかに置き換えることができる。 組織の損傷（動脈瘤治療、冠動脈バイパス術、移植手術、外傷性出血、不完全
再潅流による臓器虚血、敗血症など）が起こる直前または直後に即座に上記組成
物１ｍｌを静脈内に投与した場合、組織損傷が回避、または軽減される。

【００６７】 実施例Ｂ 液体形態の薬学的組成物は、以下に処方されるような従来の方法によって調製
される。：成分 量 実施例１の化合物² １ｍｇ リン酸緩衝生理学的食塩水 １０ｍｌ メチルパラベン ０．０５ｍｌ² 実施例１の化合物は実施例２〜８のいずれかに置き換えることができる。 組織の損傷（動脈瘤治療、冠動脈バイパス術、移植手術、外傷性出血、不完全
再潅流による臓器虚血、敗血症など）が起こる直前または直後に即座に上記組成
物１．０ｍｌを皮下に投与した場合、組織損傷が回避、または軽減される。

【００６８】 本発明の特定の実施例を記載したが、本発明の精神及び範囲から逸脱すること
なく、本明細書に開示された組成物に対して種々の変更や修正を行い得ることは
当業者には明白であろう。本発明の範囲内にあるこのような全ての修正形態につ
いては、添付の特許請求の範囲において扱うものとする。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１４年３月８日（２００２．３．８）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【化１】 ［式中： （ａ）Ｒ１が、アルキル、アリール、アルコキシ、及びアリールオキシか
ら成る群から選択され、かかるＲ１のアルキル及びアリール部分が１から約１４
個の炭素原子を有する。 （ｂ）Ｒ３及びＲ４が、水素、アルキル、アルコキシ、アルキルチオ、及
びモノ−またはジアルキルアミノから成る群から独立に選択され、かかるＲ３及
びＲ４のアルキル部分が１から約８個の炭素原子を有し、但し、Ｒ３及びＲ４の
両方共に水素ではない。 （ｃ）それぞれＲ５が、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ヒドロキシ、ア
ルコキシ、チオ、アルキルチオ、アミノ、及びモノ−またはジアルキルアミノか
らなる群から独立に選択され、かかるＲ５のアルキル部分が１から約８個の炭素
原子を有する。 （ｄ）それぞれＲ６が、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アリー
ル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、アリールオキシ、チオ、アルキルチオ、アリ
ールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アシル、アルキルアシル
、アリールアシル、アミド、アルキルアミド、アリールアミド、スルホニル、ア
ルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホスホニル、アルキルホスホニル、ア
リールホスホニル、カルボキシ、及びそのアルキル及びアリールエステルからな
る群から独立に選択される。］ 光学異性体、ジアステレオマー、若しくは鏡像体またはこれらの混合物；それら
の薬学的に許容可能な塩、水和物、または生加水分解可能なエステル、アミド若
しくはイミドである化合物。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００２０

【補正方法】変更

【補正の内容】

【００２０】

【表１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/04 Ａ６１Ｐ 17/04 17/06 17/06 19/06 19/06 25/06 25/06 29/00 29/00 １０１ １０１ 37/08 37/08 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ， ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，Ｊ Ｐ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ， ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C086 AA01 AA03 BC39 MA01 MA04 NA14 ZA01 ZA36 ZA59 ZA89 ZB11 ZB13 ZB15

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次の構造を有する化合物： 【化１】 ［式中： （ａ）Ｒ１が、アルキル、アリール、アルコキシ、及びアリールオキシか
   ら成る群から選択され、かかるＲ１のアルキル及びアリール部分が１〜１４個の
   炭素原子を有し、好ましくはＲ１は２〜８個の炭素原子を有するアルキルまたは
   はアリールである。 （ｂ）Ｒ３及びＲ４が、水素、ハロ、アルキル、アルコキシ、アルキルチ
   オ、及びモノ−またはジアルキルアミノから成る群から独立に選択され、かかる
   Ｒ３及びＲ４のアルキル部分が１〜８個の炭素原子を有し、但し、Ｒ３及びＲ４
   の両方共に水素ではなく、好ましくはＲ３及びＲ４が、水素、アルキル、アルコ
   キシ、アルキルチオ、アミノ、及びモノ−またはジアルキルアミノからなる群か
   ら独立に選択され、かかるＲ４のアルキル部分が１〜６個の炭素原子を有する。 （ｃ）それぞれＲ５が、水素、ハロ、シアノ、アルキル、ヒドロキシ、ア
   ルコキシ、チオ、アルキルチオ、アミノ、及びモノ−またはジアルキルアミノか
   らなる群から独立に選択され、かかるＲ５のアルキル部分が１〜８個の炭素原子
   を有する。 （ｄ）それぞれＲ６が、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、アリー
   ル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、チオ、アルキ
   ルチオ、アリールチオ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アシル、ア
   ルキルアシル、アリールアシル、アミド、アルキルアミド、アリールアミド、ス
   ルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、ホスホニル、アルキルホ
   スホニル、アリールホスホニル、カルボキシ、及びそのアルキル及びアリールエ
   ステルからなる群から独立に選択される。］ 光学異性体、ジアステレオマー、若しくは鏡像体またはこれらの混合物；それら
   の薬学的に許容可能な塩、水和物、または生加水分解可能なエステル、アミド若
   しくはイミドである化合物。
2. 【請求項２】 それぞれＲ５が、水素、ハロ、アルキル、アルコキシ、アル
   キルチオ、及びモノ−若しくはジアルキルアミノから成る群から独立に選択され
   、かかるＲ５のアルキル部分が１〜６個の炭素原子を有しており、且つ、それぞ
   れＲ６が、水素、ハロ、ニトロ、シアノ、アルキル、フェニル、ヒドロキシ、ア
   ルコキシ、チオ、アルキルチオ、アミノ、アルキルアミノから成る群から独立に
   選択され、かかるＲ６のアルキル部分が１〜６個の炭素原子を有し、水素以外で
   あるＲ６は３個以下である、請求項１に記載の化合物。
3. 【請求項３】 前記Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６部分のアルキル部分が独立に
   、無置換の１〜３個の炭素原子を有するか、またはハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃ アルコキシ、チオ、Ｃ₁〜Ｃ₃アルキルチオ、アミノ及びＣ₁〜Ｃ₃モノ−またはジ
   アルキルアミノで置換された１〜３個の炭素原子を有し、好ましくはＲ４がアル
   コキシであり、Ｒ３及び両方のＲ５が水素であり、水素以外であるＲ６が２個以
   下である、請求項２に記載の化合物。
4. 【請求項４】 Ｒ１が３〜８個の炭素原子を有するアルキルであり、このア
   ルキルは無置換であるか、またはハロ、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃アルコキシ、チオ
   、Ｃ₁〜Ｃ₃アルキルチオ、アミノ、Ｃ₁〜Ｃ₃モノ−またはジアルキルアミノ、フ
   ェニル、及び５または６の環原子を有する複素環から成る群から選択される置換
   基で置換されており、好ましくはＲ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６のアルキル部分が
   無置換であり、Ｒ１が飽和型または１つの二重結合を伴う不飽和型の、３〜６個
   の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状または環状アルキルである、請求項３
   に記載の化合物。
5. 【請求項５】 Ｒ１が、無置換フェニルまたはベンジルであるか、またはハ
   ロ、Ｃ₁〜Ｃ₃アルキル、ヒドロキシ、Ｃ₁〜Ｃ₃アルコキシ、アミノ、及びＣ₁〜
   Ｃ₃モノ−或はジアルキルアミノから成る群から選択される置換基で置換された
   フェニルまたはベンジルである、請求項４に記載の化合物。
6. 【請求項６】 Ｒ４がメトキシまたはエトキシであり、好ましくはＲ４がメ
   トキシである、請求項５に記載の化合物。
7. 【請求項７】 Ｒ３がアルコキシであり、Ｒ４及びＲ５が共に水素であり、
   水素以外であるＲ６が２個以下である、請求項５に記載の化合物。
8. 【請求項８】 Ｒ１が飽和型且つ非置換型であり、Ｒ３がメトキシまたはエ
   トキシである、請求項７に記載の化合物。
9. 【請求項９】 薬学的組成であって、 （ａ）安全且つ有効な量の請求項１または４のいずれかに記載の化合物、
   及び、 （ｂ）薬学的に許容可能な賦形剤 を含む薬学的組成物。
10. 【請求項１０】 虚血再潅流障害の予防または治療用の薬剤の製造のための
    請求項１または４のいずれかに記載の化合物の使用であって、請求項１または４
    に記載の化合物の安全且つ有効な量を、それらを必要とするヒトまたはより低級
    な動物へ投与することを含む使用。