JP2003519219A

JP2003519219A - エストロゲン受容体をモジュレートするための化合物および方法

Info

Publication number: JP2003519219A
Application number: JP2001550213A
Authority: JP
Inventors: バーグワット，シュリパッド，エス．; ミッキー，ジェフリー，エー．; カムングクーン，サク
Original assignee: シグナルファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド
Priority date: 1999-12-30
Filing date: 2000-12-29
Publication date: 2003-06-17
Also published as: WO2001049673A3; CN1281598C; CN1437591A; DE60018215D1; HK1058521A1; KR20020075388A; AU781282B2; CA2396059A1; WO2001049673A2; ATE289300T1; ES2238034T3; IL150463A0; EP1246814A2; AU3077101A; EP1246814B1; DE60018215T2; DK1246814T3; PT1246814E

Abstract

(57)【要約】エストロゲン受容体(ER)を介して遺伝子発現をモジュレートする式(I)の化合物、および該化合物を含む医薬組成物を開示する（式中、R₁、R₂、R₃、nおよびpは本明細書中で定義するとおりである）。特定の実施形態では、該化合物はER-αよりもER-βに対して選択的なモジュレーターである。また、ER-βを発現する細胞および／または組織（ER-βを優先的に発現する細胞および／または組織を含む）においてER-βをモジュレートするための方法を開示する。より一般的には、乳癌、精巣癌、骨粗鬆症、子宮内膜症、心血管疾患、高コレステロール血症、前立腺肥大、前立腺癌、肥満、のぼせ、皮膚作用、気分変動、記憶喪失、尿失禁、脱毛、白内障、自然ホルモン不均衡、および環境化学物質に暴露されることに関連する有害な生殖作用を含めて、エストロゲン関連症状を治療するための方法を開示する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】関連出願の相互参照本出願は、1998年12月30日に出願された米国仮出願第60/114,472号の利益を主
張するものであり、1999年12月30日に出願されたPCT/US99/31290、1999年12月30
日に出願された米国出願第09/475,776号および2000年1月27日に出願された米国
出願第09/492,939号の一部継続出願である(各々の出願は、参照によりそれら全
体を本明細書に組み入れる)。

【０００２】技術分野本発明は、一般的にエストロゲンアンタゴニストおよびアゴニストならびにサ
イトカインを阻害するための化合物に関するものであり、より具体的にはエスト
ロゲン受容体-β(ER-β)活性を選択的にモジュレートする化合物、ならびにそれ
に関する医薬組成物および方法に関するものである。

【０００３】発明の背景エストロゲンホルモンは、女性及び男性の組織に対して広範囲の効果を有する
。これらの生物学的効果の多くは陽性の効果であり、骨密度の維持、心血管系の
保護、中枢神経系(CNS)の機能、および臓器系の老化作用からの保護が挙げられ
る。しかしながら、このような陽性効果に加えて、エストロゲンはまた乳腺及び
子宮内膜における癌のリスクを増大させる強力な増殖因子でもある。

【０００４】最近まで、エストロゲンは細胞の単一のエストロゲン受容体（ER）に結合する
と推定されていた。下記に考察するように、第2のER(ER-β)がクローン化され(
最初のERはER-αに改名された)、さらにER応答をモジュレートするコファクター
が発見されたことで、この単純な見解は著しく変化した。リガンドは2つの異な
るERに結合することができる。この2つの異なるERは、組織特異的なコアクチベ
ーターおよび/またはコリプレッサーの存在下で遺伝子の調節領域におけるエス
トロゲン応答エレメントまたは他の転写因子に結合する。ER-αおよびER-βなら
びにそのコファクターが組織特異的発現であることでERシグナル伝達が複雑であ
ると考えると、ERリガンドは、組織特異的な方法でエストロゲンの陽性効果を模
倣したり、または陰性効果をブロックするエストロゲンアゴニストおよびアンタ
ゴニストとして作用することができることが現在のところ理解される。このこと
により、全く新しい部類の薬物(選択的エストロゲン受容体モジュレーター(Sele
ctive Estrogen Receptor Modulators；SERMs)と呼ばれる)の発見が生じている
。これらの薬物は、癌および骨粗鬆症、ならびに心血管疾患および神経変性疾患
(例えばアルツハイマー病)の予防および/または治療に対する有意な可能性を有
する。

【０００５】骨粗鬆症などの骨再吸収疾患は、幅広い年代が影響を受ける衰弱症状であり、
これに対する治療は限定されたものにすぎない。例えば、骨粗鬆症に米国の50代
では女性の約50％および男性の約10％が影響を受けている。骨粗鬆症を患う個体
においては、骨質量の減失が増大することでもろい骨となり、結果として骨折の
リスクが増大する。パジェット病および転移性骨癌などのその他の骨再吸収疾患
には、同様の症状が存在する。

【０００６】骨は、幾つかの異なる細胞型を含有する生組織である。健康な個体において骨
芽細胞によって生成される骨の量は、破骨細胞によって骨が除去または再吸収さ
れる量によって釣合いがとられている。骨再吸収疾患を患う個体では、これら2
つの細胞型の機能が不均衡である。おそらくこのような不均衡の最も周知な例が
閉経後の女性が経験する骨再吸収の急速な増大である。このような骨減失の促進
は、閉経期に関係するエストロゲン欠乏に原因がある。しかしながら、エストロ
ゲン減失により骨再吸収が増大する機構が長い間議論されている。

【０００７】最近、研究者らはインターロイキン-1(IL-1)および腫瘍壊死因子(TNF)などの
骨再吸収サイトカインの増加が閉経後の骨減失の原因であり得ること(Kimbleら,
J. Biol. Chem. 271：28890-28897, 1996)、およびこれらのサイトカインのイ
ンヒビターが齧歯類において卵巣摘出後の骨減失を減少させることができること
(Pacifici, J. Bone Miner Res. 11：1043-1051, 1996)を示唆している。さらに
、エストロゲンの中断によりマウス骨髄細胞および骨細胞によるIL-6分泌の増大
が導かれることが報告されており(Girasoleら, J. Clin. Invest. 89：883-891,
1992；Jilkaら, Science 257：88-91, 1992; Kimbleら, Endocrinology 136：3
054-3061, 1995；Passseriら, Endocrinology 133：822-828, 1993)、IL-6に対
する抗体はエストロゲンが枯渇したマウスに生じる破骨細胞前駆体の増大を阻害
することができ(Girasoleら, 前掲)、さらに卵巣摘出後の骨減失はIL-6を欠くト
ランスジェニックマウスでは生じない(Poliら, EMBO J. 13：1189-1196, 1994)
。

【０００８】骨減失を遅らせるための存在する治療としては、一般的にはエストロゲン、ビ
スホスホネート、カルシトニンおよびラロキシフェンなどの化合物の投与が挙げ
られる。しかしながら、これらの化合物は一般的には長期的な治療に使用され、
望ましくない副作用を有する。さらに、このような治療は、典型的には破骨細胞
形成を低減することより成熟した破骨細胞の活性に向けられている。例えば、エ
ストロゲンは破骨細胞のアポトーシスを誘導し、一方カルシトニンは破骨細胞を
萎縮させ、骨の表面から分離させる(Hughesら, Nat. Med. 2：1132-1136, 1996
；Jilkaら, Exp. Hematol. 23：500-506, 1995)。同様にビスホスホネートは破
骨細胞の活性を低減し、それらの形態を変化させ、破骨細胞のアポトーシスを増
大させる(Parfittら, J. Bone Miner 11：150-159, 1996；Suzukiら, Endocrino
logy 137：4685-4690, 1996)。

【０００９】またサイトカインは種々の癌において重要な役割を果たすと考えられている。
例えば前立腺癌の背景において、研究者らはIL-6がオートクライン/パラクライ
ン増殖因子であること(Seigallら, Cancer Res. 50：7786, 1999)、腫瘍の生存
を増強すること(Okamotoら, Cancer Res. 57：141-146, 1997)、ならびにIL-6中
和抗体が細胞増殖を低減すること(Okamotoら, Endocrinology 138：5071-5073,
1997；Borsellinoら, Proc. Annu. Meet. Am. Assoc. Cancer Res. 37：A2801,
1996)を示している。IL-6についての同様の結果が、多発性骨髄腫(Martinez-Maz
aら, Res. Immunol. 143：764-769, 1992；Kawanoら, Blood 73：517-526, 1989
；Zhangら, Blood 74：11-13, 1989；Garrettら, Bone 20：515-520, 1997；お
よびKleinら, Blood 78：1198-12-4, 1991)、腎細胞癌(Kooら, Cancer Immunol.
35：97-105, 1992；Tsukamotoら, J. Urol. 148：1778-1782, 1992；およびWei
ssglasら, Endocrinology 138：1879-1885, 1997)および子宮頸癌(Estuceら, Gy
necol. Oncol. 50：15-19, 1993；Tartourら, Cancer Res. 54：6243-6248, 199
4；およびIglesiasら, Am. J. Pathology 146：944-952, 1995)に関して報告さ
れている。

【００１０】さらに、またIL-6は関節炎、特にアジュバント-、コラーゲン-および抗原-誘
導関節炎に関与していると考えられており(Alonziら, J. Exp. Med. 187：146-1
48, 1998；Ohshimaら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95：8222-8226, 1998；お
よびLeistenら, Clin. Immunol. Immunopathol 56：108-115, 1990)、また関節
炎の治療における抗IL-6抗体が報告されている(Wendlingら, J. Rheumatol. 20
：259-262, 1993)。加えて、エストロゲンがマウスにおいて実験的自己免疫性脳
脊髄炎およびコラーゲン-誘導関節炎の抑制を誘導することが示されている(Jans
sonら, Neuroimmunol. 53：203-207, 1994)。

【００１１】上記のように、エストロゲンが細胞中の単一のエストロゲン受容体(ER)に結合
し、立体構造変化を引き起こすことで熱ショックタンパク質から放出させ、種々
の遺伝子のプロモーター領域のいわゆるエストロゲン応答エレメントに該受容体
を二量体として結合させることがすでに仮定されていた。さらに、一般的に薬理
学者は、非ステロイド系の小分子リガンドがエストロゲンのERへの結合に対して
競合し、エストロゲン受容体を発現する各組織におけるアンタゴニストまたはア
ゴニストとして作用すると考えていた。したがって、このようなリガンドは、純
粋なアンタゴニストまたはアゴニストとして伝統的に分類されていた。このこと
はもはや正しいとは考えられていない。

【００１２】反対に、エストロゲンが遺伝子発現を通じて細胞の薬理作用をモジュレートす
ること、およびエストロゲン効果はエストロゲン受容体によって媒介されること
が現在のところ知られている。上記のように、現在のところ2種のエストロゲン
受容体、ER-αおよびER-βが存在する。遺伝子調節におけるエストロゲン受容体
の効果は、ERのエストロゲン応答エレメント(ERE)への直接結合(「古典的経路」
)によって(Jeltschら, Nucleic Acids Res. 15：1401-1414, 1987；Bodineら, E
ndocrinology 139：2048-2057, 1998)、ERの他の転写因子(例えば、NF-κB、C/E
BP-β又はAP-1)への結合(「非古典的経路」)によって(Steinら, Mol. Cell Biol
. 15：4971-4979, 1995；Paechら, Science 277：1508-1510, 1997；Duanら, En
docrinology 139：1981-1990, 1998)、およびイオンチャンネル受容体に関与す
る非ゲノム効果(Wattersら, Endocrinology 138：4030-4033, 1997；Improta-Br
earsら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96：4686-4691, 1999；Guら, Endocrinol
ogy 140：660-666, 1999；Beyerら, Eur. J. Neurosci. 10：255-262, 1998)を
通じて媒介され得る。

【００１３】ここ数年の進歩により、ERは、ERの転写活性をも組織特異的およびリガンド特
異的にモジュレートするコアクチベーター（例えば、SRC-1、CBPおよびSRA）お
よびコリプレッサー（例えば、SMRTおよびN-CoR）と会合することが示されてい
る。さらには、エストロゲンにより調節される遺伝子の大多数が古典的エストロ
ゲン応答エレメントを有していないという事実が示唆されている。このような場
合、ERは、これらの遺伝子の調節に決定的となる転写因子と相互作用する。ERに
より活性がモジュレートされることが知られている転写因子としては、例えば、
AP-1、NF-κB、C/EBPおよびSp-1が挙げられる。

【００１４】 ERシグナル伝達が複雑であり、ならびにERおよびそのコファクターを発現する
組織が様々なタイプであることを考えると、現在ではERリガンドをもはや単に純
粋なアンタゴニストまたはアゴニストとして分類することはできないと考えられ
ている。したがって、「選択的エストロゲン受容体モジュレーター」（SERM）と
いう用語が生み出された。SERMはERに結合するが、様々な組織の様々な遺伝子に
おいて、エストロゲンのアゴニストまたはアンタゴニストとして作用し得る。例
えば、SERMとして作用する最も周知な薬物のうちの2種が、タモキシフェンおよ
びラロキシフェンである。これら2種の化合物ならびに現在開発中の他のSERMを
用いた研究により、SERMのその受容体に対する親和性は、多くの場合その生物学
的活性と相関しないことが示されている。したがって、新規なERモジュレーター
のスクリーニングに伝統的に使用されるリガンド結合アッセイは、組織選択性と
アゴニスト/アンタゴニスト作用とを区別をしていなかったことになる。

【００１５】さらに最近には、第2のエストロゲン受容体、ER-βが同定され、クローン化さ
れている（KatzenellenbogenおよびKorach Endocrinology 138, 861-2(1997)；K
uiperら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93, 5925-5930, 1996；Mosselmanら、FE
BS Lett. 392, 49-53, 1996）。ER-βとER-αと改名された古典的ERとでは、リ
ガンド結合ドメインおよびカルボキシ末端トランス活性化ドメインにおいてかな
り異なるアミノ酸配列であり(約56％のアミノ酸同一性)、アミノ末端トランス活
性化ドメインにおいては相同性がわずか20％である。このことは、幾つかのリガ
ンドはどちらか1つの受容体に対して他の受容体に対してよりも高い親和性を有
しうることを示唆する。さらに、2つの受容体のリガンド依存的立体構造変化及
びコファクターとの相互作用は、単一のリガンドとは非常に異なる生物学的作用
を引き起こすだろう。言い換えれば、ER-αに対してアゴニストとして作用する
リガンドが、ER-βに対してアンタゴニストとして非常によく働く場合がある。P
aechらによってこのような作用の例が記載されている（Science 277, 1508-1510
, 1997）。この論文には、エストロゲンはER-αの存在下でAP-1部位を活性化す
るが、ER-βの存在下では同じ部位を阻害することが報告されている。これに反
して、ラロキシフェン（Eli Lilly & Co.)およびタモキシフェンならびにICI-18
2,780（Zeneca Pharmaceuticals）は、ER-βを介してAP-1部位を刺激するが、ER
-αの存在下ではこの部位を阻害する。別の例がSunらによって記載されている（
Endocrinology 140, 800-4, 1999）。この論文では、テトラヒドロクリセンのR,
R-エナンチオマーはER-αに対してはアゴニストとなるが、ER-βに対しては完全
なアンタゴニストとなり、一方、S,S-エナンチオマーは双方の受容体に対してア
ゴニストとなることが報告されている。

【００１６】さらには、良好なER-β抗体がないため、主にRT-PCRまたはin-situハイブリダ
イゼーションにより分析したところ、ER-αおよびER-βは双方とも重複した様々
な組織分布を有する。しかしながら、これらの結果のうちいくつかについては議
論が分かれており、これはER測定に使用した方法、分析した種（ラット、マウス
、ヒト）および/または単離した一次細胞の分化状態に起因すると考えられる。
組織はER-αおよびER-βの双方を発現することが非常に多いが、これらの受容体
は異なる細胞型に局在化されている。さらに、唯一ER-αのみを含有する組織（
例えば腎臓）もあれば、ER-αが非常に優位である組織（子宮、下垂体、精巣上
体など）もある（Couseら, Endocrinology 138, 4613-4621, 1997；Kuiperら, E
ndocrinology 138, 863-870, 1997）。これに反して、高レベルのER-βを発現す
る組織には前立腺、精巣、卵巣および脳の特定領域が含まれる（Brandenberger
ら, J. Clin. Endocrinol. Metab. 83, 1025-8, 1998；Enmarkら, J. Clinic. E
ndocrinol. Metabol. 82, 4258-4265, 1997；Laflammeら, J. Neurobiol. 36, 3
57-78, 1998；SarおよびWelsch, Endocrinology 140, 963-71, 1999；Shughrue
ら, Endocrinology 138, 5649-52, 1997a；Shughrueら, J. Comp. Neurol. 388,
507-25, 1997b）。

【００１７】 ER-αノックアウトマウス（Korach, Science 266, 1524-1527,1994）およびER
-βノックアウトマウス（Kregeら, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 15677-82,
1998）の開発により、ER-βは様々な組織において様々な機能を有することがさ
らに示されている。例えば、ER-αノックアウトマウス（雄および雌）は不妊性
であり、雌は性的受容性を示さず、雄には典型的な雄の攻撃的行動がみられない
（Cookeら, Biol. Reprod. 59, 470-5, 1998；Dasら, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 94, 12786-12791, 1997；Korach, 1994；Ogawaら, Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 94, 1476-81, 1997；Rissmanら, Endocrinology 138, 507-10, 1997a；Ris
smanら, Horm. Behav. 31, 232-243, 1997b）。さらに、これらの動物の脳は、
なおも野生型動物に類似のパターンでエストロゲンに反応しており（Shughrueら
, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 11008-12, 1997c）、またエストロゲンは、
なおも機械的損傷によって引き起こされる血管創傷を阻害する（Iafratiら, Nat
ure Med. 3,545-8, 1997）。これに反して、ER-βを欠くマウスは正常に発育し
、妊性であり、さらに正常な性的行動を示すが、野生型マウスよりは少数で小さ
い同腹仔を産み（Kregeら, 1998）、正常に乳房が発達し、正常に乳汁を分泌す
る。生殖能力の低減は卵巣能力の低減による結果であると考えられている。また
ER-βが卵巣における優位なER型であり、これらは成熟した濾胞の顆粒膜細胞に
局在化している。

【００１８】要約すると、エストロゲンアンタゴニストまたはアゴニストとして働く化合物
は、長い間、脳、骨、心血管系、皮膚、毛嚢、免疫系、膀胱および前立腺に関連
する症状を含めた多様なエストロゲンが関連する症状の治療における有意な薬学
的有用性について理解されてきた（Barkhemら, Mol. Pharmacol. 54, 105-12, 1
998；Farhatら, FASEB J. 10, 615-624, 1996；Gustafsson, Chem. Biol. 2, 50
8-11, 1998；Sunら, 1999；Tremblayら, Endocrinology 139, 111-118, 1998；T
urnerら, Endocrinology 139, 3712-20, 1998）。さらに、種々の乳癌細胞およ
び非乳癌細胞がERを発現し、特定のエストロゲンアンタゴニストに対する標的組
織として働くことが記載されている（Brandenbergerら, 1998；ClintonおよびHu
a, Crit. Rev. Oncol. Hematol. 25, 1-9, 1997；Hataら, Oncology 55 Suppl 1
, 35-44, 1998；Rohlffら, Prostate 37, 51-9, 1998；Simpsonら, J Steroid B
iochem Mol Biol 64, 137-45, 1998；Yamashitaら, Oncology 55 Suppl 1, 17-2
2, 1998）。

【００１９】最近ER-βが同定され、ER-αおよびER-βが異なる生物学的役割を有すること
が認識されたため、ER選択的モジュレーターも同様に有意な臨床的有用性を持つ
こととなろう。ER-βは、前立腺、膀胱、卵巣、精巣、肺、小腸、血管内皮およ
び脳の様々な部分を含む多くの組織で強力に発現されているので、前立腺癌、精
巣癌、心血管疾患、神経変性障害、尿失禁、CNS、胃腸管の症状、骨癌およびそ
の他の癌などの種々の疾患および症状を治療する際には、選択的にER-βをモジ
ュレートする化合物が臨床上重要となる。このような化合物はER-αを含有する
組織に対しては最小限の効果を有し、したがって異なる副作用プロファイルを示
すだろう。例えば、エストロゲン置換療法は種々の有益な効果（例えば、骨の保
護、心血管作用、のぼせ、痴呆の防止、骨の代謝など）に関与するが、一方この
ような療法には逆効果（例えば乳癌および子宮内膜癌、血栓症など）もある。こ
れらの逆効果のいくつかは、ER-αまたはER-βの特定の機構が介在すると考えら
れている。したがって、ER-βアンタゴニストまたはアゴニストは、ER-αアンタ
ゴニストまたはアゴニストと比較して異なる治療的プロファイルを示し、高レベ
ルのER-βを発現する組織において優先的に有益であろう（例えば、Nilssonら,
TEM 9, 387-395, 1998；ChangおよびPrins, The Prostate 40, 115-124, 1999を
参照されたい）。さらに、多くの研究者が、環境化学物質及びフィトエストロゲ
ンは、エストロゲンに類似した生物学的反応を引き起こすことによりER-βと優
先的に相互作用することを示している（例えば、Kuiperら, Endocrinology 139,
4252-4263, 1998を参照されたい）。したがって、ER-βと拮抗する化合物はま
た、健康、生殖能力などに影響を及ぼす化学物質との相互作用を調節する上で重
要であろう。

【００２０】近年、ERと相互作用する多くのステロイド系および非ステロイド系化合物の双
方が開発されている。例えば、タモキシフェンは、元々抗エストロゲンとして開
発され、乳癌の治療に使用されていたが、さらに最近では子宮、骨および心血管
系における部分的エストロゲンアゴニストとして作用することが見出された。ラ
ロキシフェンは、SERMであると言われており、骨粗鬆症の治療において認可され
ているもう1つの化合物である。

【００２１】

【化１４】

【００２２】またラロキシフェンの類似体が報告されている(Greseら, J. Med. Chem. 40：
146-167, 1997)。

【００２３】クマリン系化合物に関しては、多くの構造が提案されており、以下の文献が挙
げられる：Roaら, Synthesis 887-888, 1981；Buu-Hoiら, J. Org. Chem. 19：1
548-1552, 1954；Guptaら, Indian J. Exp. Biol. 23：638-640, 1985；公開さ
れたPCT出願第WO 96/31206号；Vermaら, Indian J. Chem. 32B：239-243, 1993
；Lednicerら, J. Med. Chem. 8：725-726, 1965；Micheliら, Steroids 5：321
-335, 1962；Brandtら, Int. J. Quantum Chemistry：Quantum Biol. Symposia
13：155-165, 1986；Waniら, J. Med. Chem. 18：982-985, 1975；Pollardら, S
teroids 11：897-907, 1968。

【００２４】したがって、一般的に当技術分野においてはエストロゲンアンタゴニストおよ
びアゴニスト、より具体的にはサイトカイン、特にIL-6を阻害する化合物（その
ような化合物を含有する医薬組成物ならびにその使用に関する方法を含む）が必
要である。またER-βを選択的にモジュレートする化合物が必要である。本発明
はこれらの必要を満たし、また他の関連する利点を提供する。

【００２５】発明の概要要約すると、本発明は一般的に、エストロゲンアンタゴニストおよび／または
アゴニスト、それを含む医薬組成物、ならびにエストロゲンに関係した症状の治
療方法に関するものである。かかる症状は、以下でより詳しく説明するが、一般
的には、肥満、乳癌、骨粗鬆症、子宮内膜症、心血管疾患、前立腺癌、更年期症
候群、脱毛、II型糖尿病、アルツハイマー病、尿失禁、GI管の症状、精子形成、
損傷後の血管防護、学習と記憶、CNS作用、血漿脂質レベル、挫瘡、白内障、多
毛症、その他の固形癌（大腸、肺、卵巣、黒色腫、CNSおよび腎臓）、多発性骨
髄腫、およびリンパ腫が含まれる（しかし、これらに限定されるものではない）
。

【００２６】より具体的な実施形態において、本発明は、インターロイキン-6(IL-6)のよう
なサイトカインを抑制するための化合物、それと関連した症状の治療に関する方
法、ならびに１種以上の本発明化合物を含有する医薬組成物に関するものである
。これに関して、増加したレベルのサイトカインと関連した症状の治療には、癌
、関節炎、および骨吸収疾患を治療する方法、特に、破骨細胞の形成を低減させ
る方法および／または骨粗鬆症の状況下でのサイトカイン生産をブロックする方
法が含まれる（しかし、これらに限定されるものではない）。

【００２７】本発明の化合物は以下の一般構造を有する：

【化１５】 [式中、R₁、R₂、R₃、nおよびpは、以下の詳細な説明で定義するとおりである]。
上記化合物の立体異性体、プロドラッグ、および製薬上許容される塩も含まれる
。

【００２８】上記のように、本発明の化合物は、広範な治療および予防用途において有用で
あり、骨吸収と関連した種々の疾患の治療、ならびに癌や関節炎の治療に使用す
ることができる。そのような方法は、治療が必要な動物（ヒトを含む）に、有効
量の本発明化合物を、好ましくは医薬組成物の形で、投与することを含む。

【００２９】別の実施形態においては、ER-βを発現する細胞および／または組織に、有効
量の構造(I)の化合物を接触させることにより、該細胞および／または組織をモ
ジュレートする方法を開示する。ある実施形態では、細胞および／または組織は
ER-αよりも優先してER-βを発現する。例えば、これらの細胞および／または組
織は、骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上体、胃腸(GI)管、腎臓、乳
房、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬および視床下部の細胞および／ま
たは組織である。

【００３０】さらに他の実施形態においては、本発明は、エストロゲン関連症状の治療が必
要な温血動物に、該動物への投与に適した医薬組成物に製剤化された、有効量の
構造(I)の化合物を投与することにより、エストロゲン関連症状を治療する方法
を開示する。代表的な実施形態では、エストロゲン関連症状は、乳癌、骨粗鬆症
、子宮内膜症、心血管疾患、高コレステロール血症、前立腺肥大、肥満、前立腺
癌、更年期症候群、II型糖尿病、アルツハイマー病、尿失禁、胃腸管の諸症状、
精子形成、損傷後の血管防護、子宮内膜症、学習および記憶、CNS作用、血漿脂
質レベル、挫瘡、多毛症、その他の固形癌（大腸、肺、卵巣、精巣、黒色腫、CN
Sおよび腎臓）、多発性骨髄腫、リンパ腫、前立腺腫瘍、肥満、のぼせ、皮膚作
用、気分変動、記憶喪失、および／または環境化学物質への暴露による有害な生
殖作用などである。他の実施形態では、IL-6やGM-CSFなどのサイトカインを抑制
する方法、ならびにそれと関連した癌を治療する方法を開示する。

【００３１】本発明のこれらのまたは他の態様は、添付図面および以下の詳細な説明を参照
することにより、明らかとなるであろう。その目的のために、本発明の特定の態
様をより詳細に説明している各種文献を提示するが、これらはそのまま参照によ
り本明細書中に含めるものとする。

【００３２】詳細な説明上記のとおり、本発明は、エストロゲンアンタゴニストおよび／またはアゴニ
ストとしての活性を有する化合物、そのような化合物を1種以上含む医薬組成物
、およびそれに関係した方法に関する。エストロゲンアンタゴニストおよび／ま
たはアゴニストとして、本発明の化合物は広範囲のエストロゲン関連症状の治療
に有用である。ここで、「治療」という用語は、エストロゲン関連症状の治療お
よび／または予防を含むものである。したがって、本発明の化合物は治療薬およ
び／または予防薬として投与することができる。エストロゲン「アゴニスト」は
、ERと結合して1以上の組織でエストロゲンの作用を模倣する化合物であり、一
方、「アンタゴニスト」は、ERと結合して1以上の組織でエストロゲンの作用を
ブロックする化合物である。さらに、「エストロゲン関連症状」という用語は、
エストロゲン、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（SERM）、ER-αまた
はER-βの上昇したもしくは低下したレベルと関連したあらゆる症状を含むもの
である。

【００３３】したがって、本発明の化合物は、乳癌、骨粗鬆症、子宮内膜症、心血管疾患、
高コレステロール血症、前立腺肥大、肥満、前立腺癌、更年期症候群、II型糖尿
病、アルツハイマー病、尿失禁、胃腸管の諸症状、精子形成、損傷後の血管防護
、子宮内膜症、学習および記憶、CNS作用、血漿脂質レベル、挫瘡、多毛症、そ
の他の固形癌（大腸、肺、卵巣、精巣、黒色腫、CNSおよび腎臓）、多発性骨髄
腫、リンパ腫、前立腺腫瘍、肥満、のぼせ、皮膚作用、気分変動、記憶喪失、お
よび／または環境化学物質への暴露による有害な生殖作用を含めて（しかし、こ
れらに限定されるわけではない）、エストロゲン関連症状を治療する方法におい
ても使用される。

【００３４】本発明の一態様において、本発明の化合物は、選択的エストロゲン受容体モジ
ュレーターであり、さらに特定すると、ER-βに対して選択的であることが見出
された。したがって、本発明のこの態様では、本化合物は、骨粗鬆症、ホルモン
により調節される癌、癌の併用療法（例えば、タキソール、シスプラチンまたは
化学療法を用いるもの）、婦人科の疾患、および環境化学物質への暴露による症
状を治療するための薬剤として有用である。

【００３５】本発明の化合物は、以下の一般構造を有する：

【化１６】［式中、 nは、0、1、2、3または4であり； pは、0、1または2であり； R₁は、無置換または置換のC_6-12アリール、C_7-12アリールアルキル、C_3-12複
素環もしくはC_4-16複素環アルキルであり； R₂は、NR_aR_bであり、ここで、R_aおよびR_bは独立して水素、C_1-8アルキル、C_6- ₁₂ アリール、または複素環であり、R_aおよびR_bは場合によりC_1-6アルキル、ハロ
ゲン、C_1-6アルコキシ、ヒドロキシおよびカルボキシルから独立に選択される３
個までの置換基で置換されていてもよく；または R₂は、以下の構造を有する複素環であり；

【化１７】（ここで、m₁およびm₂は独立して0、1または2であり、m₁とm₂の両方が0であるこ
とはなく、AはCH₂、O、SまたはNHであり、Zは0、1、2または3個の複素環置換基
であって、ハロゲン、C_1-8アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アリールアルキル、
C_3-12複素環、またはC_4-16複素環アルキルから選択され、そして該複素環上のど
の水素原子も、該複素環の隣接原子上の水素原子と一緒になって、二重結合を形
成することができる） R₃は、水素、R₄、C(=O)R₄、C(=O)OR₄、CONHR₄、CONR₄R₅、またはSO₂NR₅R₅であ
り； R₄およびR₅は、独立して、C_1-8アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラルキル、
またはO、NR₆およびS(O)_qから選択される２個までのヘテロ原子を含む５員もし
くは６員の複素環であり、ここで、上記の基のそれぞれは場合によりR₇から独立
に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、qは0、1または2であり
； R₆は、水素またはC_1-4アルキルであり； R₇は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、C_1-6アルキル、C_1-4アルコキシ、C_1-4ア
シルオキシ、C_1-4チオ、C_1-4アルキルスルフィニル、C_1-4アルキルスルホニル、
(ヒドロキシ)C_1-4アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラルキル、COOH、CN、CONH
OR₈、SO₂NHR₈、NH₂、C_1-4アルキルアミノ、C_1-4ジアルキルアミノ、NHSO₂R₈、NO ₂ 、または５員もしくは６員の複素環であり、ここで、R₈は、存在する場合、そ
れぞれ独立してC_1-6アルキルである］。

【００３６】本明細書中で使用する「C_6-12アリール」とは、6〜12個の炭素原子を含む芳香
族部分を意味する。１実施形態では、C_6-12アリールは、限定されるものではな
いが、フェニル、テトラリニルおよびナフタレニルから選択される。

【００３７】「C_7-12アラルキル」とは、7〜12個の炭素原子を含むアレーンであり、脂肪族
単位と芳香族単位の両方を有する。１実施形態では、C_7-12アラルキルは、限定
されるものではないが、ベンジル、エチルベンジル(すなわち、-(CH₂)₂フェニル
)、プロピルベンジルおよびイソブチルベンジルから選択される。

【００３８】「C_3-12複素環」とは、２種以上の原子からなる環を含み、かつ、３〜１２個
の炭素原子を含む化合物を意味する。C_3-12複素環の例としては、限定されるも
のではないが、ピロリル、フラニル、チエニル、イミダゾリル、オキサゾリル、
チアゾリル、ピラゾリル、ピロリジニル、ピリジニル、ピリミジニルおよびプリ
ニルを挙げることができる。

【００３９】「C_4-16複素環アルキル」とは、C_1-8アルキルと結合しているC_3-12複素環を含
む化合物を意味する。

【００４０】「C_1-8アルキル」とは、１〜８個の炭素原子を含む直鎖または分枝の炭素鎖を
意味し、例えば、限定されるものではないが、メチル、エチル、およびn-プロピ
ル等が挙げられる。同様に、「C_1-Xアルキル」とは、上記と同様の意味を有する
が、この場合「X」は、C_1-6アルキルのように８未満の炭素原子数を表わす。

【００４１】「置換された」または「置換の」C_1-Xアルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラル
キル、C_3-12複素環またはC_4-16複素環アルキル部分とは、少なくとも１個の水素
原子が１個の置換基で置換されているC_1-Xアルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラ
ルキル、C_3-12複素環またはC_4-16複素環アルキル部分を意味する。

【００４２】「置換基」とは、ハロゲン、-OH、-R’、-OR’、-COOH、-COOR’、-COR’、-C
ONH₂、-NH₂、-NHR’、-NR’R’、-SH、-SR’、-SOOR’、-SOOHおよび-SOR’から
選択される部分を意味し、ここで、R’は、存在する場合、それぞれ独立して、
無置換または置換のC_1-8アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラルキル、C_3-12複
素環もしくはC_4-16複素環アルキルから選択される。

【００４３】「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。

【００４４】本発明の１実施形態において、以下の構造(i)および(ii)によってそれぞれ表
わされるように、複素環R₂のＡはCH₂であり、m₁は1であり、m₂は0もしくは1であ
る。

【化１８】上記構造(i)および(ii)において、任意の置換基Ｚは複素環のいずれの原子上に
あってもよく、また、構造(I)の化合物との結合点は炭素原子を介しても窒素原
子を介してもよいことを明確にするために、水素原子を表示してないことに注意
する必要がある。

【００４５】したがって、置換基Ｚが存在する場合、構造(i)および(ii)のより具体的な実
施形態においては、R₂は以下の構造(iii)〜(vi)を含む（式中、Ｚは例えばメチ
ルである）。

【化１９】

【００４６】別の実施形態において、例えば、以下の構造(vii)および(viii)によって表わ
されるように、複素環R₂のＡはOもしくはNHであり、m₁は1であり、m₂は0もしく
は1である。

【化２０】

【００４７】上記構造(i)および(ii)の場合と同様に、構造(vii)および(viii)において、任
意の置換基Ｚは複素環のいずれの原子上にあってもよく、また、構造(I)の化合
物との結合点は炭素原子を介しても窒素原子を介してもよいことを明確にするた
めに、水素原子を表示してないことに注意する必要がある。

【００４８】上記の構造に加えて、複素環の任意の水素原子は、隣接する複素環原子に結合
している水素原子と一緒になって二重結合を形成してもよい。例えば、上記の構
造(vii)に関していえば、対応する不飽和類似体として、以下の構造(ix)、(x)お
よび(xi)が挙げられる。

【化２１】

【００４９】本発明の１実施形態において、R₁は無置換または置換のフェニルであり、本発
明の化合物は以下の構造(II)を有する（式中、Ｘは上記定義どおりの１以上の任
意の置換基を表わし、R₂、R₃、nおよびpは上記定義どおりである）。

【化２２】

【００５０】別の実施形態においては、以下の構造(III)によって表わされるように、R₃は
水素である（式中、R₁、R₂、nおよびpは上記定義どおりである）。

【化２３】

【００５１】構造(II)および(III)のより具体的な実施形態においては、本発明の代表的な
化合物は以下の構造(IV)を有する（式中、Ａ、Ｘ、Ｚ、m₁、m₂、nおよびpは上記
定義どおりである）。

【化２４】

【００５２】構造(IV)のさらなる実施形態において、m₁、m₂およびpは１であり、ＡはCH₂で
あり、任意の置換基Ｚは存在せず、nは2であり、そして本発明の化合物は以下の
構造(V)を有する（式中、Ｘは上記定義どおりの１以上の任意の置換基を表わす
）。

【化２５】

【００５３】より具体的な実施形態において、Ｘは、(a)存在しないか、(b)単一の置換基（
例えば、パラ位の単一置換基）を表わすか、のいずれかである。したがって、本
発明の代表的な化合物には、（限定されるわけではないが）以下の構造(VIa)お
よび(VIb)を有する化合物が挙げられる（式中、構造(VIb)のＸはフッ素または塩
素などのハロゲンを表わす）。

【化２６】

【００５４】本発明のさらなる実施形態において、pは0であり、そして本発明の化合物は以
下の構造(VII)を有する（式中、R₁、R₂、R₃、およびnは上記定義どおりである）
。

【化２７】

【００５５】構造(VII)の１実施形態において、R₁は無置換または置換のフェニルであり、
そして本発明の化合物は以下の構造(VIII)を有する（式中、Ｘは上記定義どおり
の１以上の任意の置換基を表わし、R₂、R₃およびnは上記定義どおりである）。

【化２８】

【００５６】別の実施形態においては、以下の構造(IX)によって表わされるように、R₃は水
素である（式中、R₁、R₂およびnは上記定義どおりである）。

【化２９】

【００５７】構造(VIII)および(IX)のより具体的な実施形態において、本発明の代表的な化
合物は以下の構造(X)を有する（式中、Ａ、Ｘ、Ｚ、m₁、m₂およびnは上記定義ど
おりである）。

【化３０】

【００５８】構造(X)のさらなる実施形態において、m₁およびm₂は１であり、ＡはCH₂であり
、任意の置換基Ｚは存在せず、nは2であり、そして本発明の化合物は以下の構造
(XI)を有する（式中、Ｘは上記定義どおりの１以上の任意の置換基を表わす）。

【化３１】

【００５９】より具体的な実施形態において、Ｘは、(a)存在しないか、(b)単一の置換基（
例えば、パラ位の単一置換基）を表わすか、のいずれかである。したがって、本
発明の代表的な化合物には、限定されるわけではないが、以下の構造(XIa)およ
び(XIb)を有する化合物が挙げられる（式中、構造(XIb)のＸはフッ素または塩素
などのハロゲンを表わす）。

【化３２】

【００６０】 pが0である実施形態において、特にR₃が水素であり、かつクマリン環の４位の
フェニル基がパラ置換されている場合、本発明の化合物はER-αよりもER-βに対
する選択性を示すことが見出された。

【００６１】本発明の化合物は、既知の技術、および、本明細書中に開示する合成経路によ
って、有機合成分野における当業者が製造することができる。例えば、本発明の
代表的な化合物は、以下の一般的反応スキーム１によって合成することができる
。

【化３３】

【００６２】反応スキーム１は、R₃がメチルまたは水素であり、かつ、R₂が構造(I)で定義
される複素環である化合物をもたらす。R₃位におけるさらなる置換は、適当な置
換フェノールを使用して、または、有機合成の分野で知られている技法を用いて
、その後ヒドロキシル基(R₃=Hの場合)を変換することによって達成することがで
きる。同様に、R₂がNR_aR_bである構造(I)の化合物は、反応スキーム１の第２工程
から最終工程において複素環の代わりに対応するアミノクロライドR_aR_bN(CH₂)_nC
lを使用することによって製造することができる。

【００６３】より具体的には、本発明の代表的な化合物(R₃が水素で、R₂がピペリジ-1-イル
の場合)は、以下の反応スキーム２によって合成することができる。

【化３４】

【００６４】立体異性体に関していえば、構造(I)の化合物はキラル中心をもつことがあり
、ラセミ体、ラセミ体混合物、および個別のエナンチオマーもしくはジアステレ
オマーとして存在することができる。このような異性体（それらの混合物を含む
）はすべて、本発明の範囲に含まれる。さらに、結晶形態の構造(I)で示される
化合物の一部は多形体として存在することができ、それらは本発明の範囲に含ま
れる。さらに、構造(I)で示される化合物の一部は、水または他の有機溶媒との
溶媒和物を形成することもできる。このような溶媒和物も同様に本発明の範囲に
含まれる。

【００６５】以下の理論によって限定することは意図していないが、骨吸収疾患に関しては
、本発明の化合物はサイトカインの産生によって、および/もしくは破骨細胞の
形成を阻害することによって作用すると考えられている。サイトカインIL-6は破
骨細胞形成の誘導に重要な因子であることが既に示されている(Girasoleら, 前
掲; Jilkaら(1992), 前掲; Jilkaら(1995), 前掲; Kimbleら(1995), 前掲; Paci
ficiら, 前掲; およびPasseriら, 前掲)。他の研究者らは、IL-6に対する中和抗
体、アンチセンスオリゴ、もしくはSant 5アンタゴニストの投与によって、卵巣
を摘出したマウスの柱骨中の破骨細胞数が減少すること(Devlinら, J. Bone Min
er 13:393-399, 1998; Girasoleら, 前掲; Jilkaら(1992); およびSchillerら,
Endocrinology 138:4567-4571, 1997)、ヒト巨細胞の象牙質再吸収が低減するこ
と(Ohsakiら, Endocrinology 131:2229-2234, 1993; およびReddyら, J. Bone M
in. Res. 9:753-757, 1994)、ならびに正常なヒト骨髄培養中での破骨細胞の形
成が減少することを明らかにしている。またエストロゲンが、エストロゲン受容
体と転写因子NF-κBおよびC/EBPβとの間の相互作用によってIL-6プロモーター
活性をダウンレギュレートすることも見出されている(Steinら, Mol. Cell Biol
. 15:4971-4979)。

【００６６】顆粒球-マクロファージコロニー刺激因子(GM-CSF)は破骨前駆細胞の増殖に役
割を果たすことが示唆されている。ヒトもしくはマウスの骨髄細胞もしくは末梢
血細胞の長期培養において、GM-CSFは破骨細胞の形成を促進する(Kuriharaら, B
lood 74:1295-1302, 1989; Lorenzoら, J. Clin. Invest. 80:160-164, 1987; M
acDonaldら, J. Bone Miner 1:227-233, 1986; およびShinarら, Endocrinology
126:1728-1735, 1990)。閉経後の女性もしくはエストロゲン療法を中止した女
性から単離した骨髄細胞は閉経前の女性から得た細胞よりもGM-CSFの発現レベル
が高かった(Bismarら, J. Clin. Endocrinol. Metab. 80:3351-3355, 1995)。ま
た、GM-CSFの発現が、整形外科インプラントが腐食した患者において骨吸収性の
破骨細胞の組織分布と関連していることが示されている(Al-Saffarら, Anatomic
Pathology 105:628-693, 1996)。

【００６７】さらに、抗IL-6抗体でIL-6の作用をブロックすると、実施例8のヒト骨髄細胞
共培養系中での破骨細胞様細胞の形成を低減することが示されている。この系は
不死化されたヒト破骨細胞および単球前駆細胞系U937を含んでおり、これらは同
一の組織培養ウエル中で共培養される。適切な培養条件下で破骨細胞はIL-6を分
泌し、そのIL-6は単球前駆細胞に作用してそれの破骨細胞様細胞への分化を起こ
させる。従ってこの共培養系は、骨の生理学的環境をよりよく反映しており、IL
-6の産生をブロックし、破骨細胞の活性化と形成をもたらすことが知られている
化合物の有効性を調べる際の機能的情報を提供する。例えば、エストロゲンは実
施例8の共培養系においてIL-6の産生を抑制することが見出された。

【００６８】さらに抗GM-CSF抗体が破骨細胞様細胞の形成を減少させ、エストロゲンが実施
例8の共培養系中のGM-CSFの産生を低減させることが見出された。このことはエ
ストロゲンが破骨細胞形成に対し阻害効果があり、IL-6およびGM-CSFの産生のブ
ロックすることにより機能するものであることを示している。従って、IL-6およ
び/もしくはGM-CSF産生をブロックする、または破骨細胞の形成と機能を阻害す
る、またはその双方の作用を有する本発明の化合物は骨吸収疾患の治療に有用で
ある。

【００６９】上述のとおり、サイトカインはまた種々の癌においても重要な役割を果たして
いると考えられている。前立腺癌においては、研究者らはIL-6が自己分泌/パラ
分泌性の増殖因子であって(Seigallら, 前掲)、腫瘍の生存を増強し(Okamotoら,
(Cancer Res. 1997), 前掲)、IL-6に対する中和抗体が細胞増殖を低減させるこ
と(Okamotoら, (Endocrinology 1997), 前掲; Borsellinoら, 前掲)を示してい
る。IL-6はまた、多発性骨髄腫(Martinez-Mazaら, 前掲; Kawanoら, 前掲; Zhan
gら, 前掲; Garrettら, 前掲; およびKleinら, 前掲)、腎細胞癌(Kooら, 前掲;
Tsukamotoら, 前掲; およびWeissglasら, 前掲)、ならびに子宮頸癌(Estuceら,
前掲; Tartourら, 前掲; および、Iglesiasら, 前掲)に関して重要な役割を果た
していることが報告されている。

【００７０】 IL-6はまた、関節炎、特にアジュヴァント-、コラーゲン-、および抗原-誘発
性の関節炎に関与していると考えられており(Alonziら, 前掲; Ohshimaら, 前掲
; およびLeistenら, 前掲)、抗IL-6抗体は関節炎の治療用途が報告されている(W
endlingら, 前掲)。さらに、エストロゲンはマウスでの実験的自己免疫性脳脊髄
膜炎およびコラーゲン誘導性関節炎の抑制を誘発することが示されている(Janss
onら, 前掲)。

【００７１】従って、本発明の他の実施形態では、骨吸収疾患の治療のための方法が含まれ
ており、一般的にそのような疾患としては骨粗鬆症、転移性骨癌、および高カル
シウム血症、整形外科インプラントによる骨溶解病変、パジェット病、ならびに
副甲状腺機能亢進症に伴う骨の喪失が含まれるがそれらに限定はされない。IL-6
に伴うその他の病態としては種々の癌および関節炎が含まれる。代表的な癌とし
ては、乳癌、前立腺癌、大腸癌、子宮体癌、多発性骨髄腫、腎細胞癌、および子
宮頸癌が挙げられる。関節炎の病態としては、アジュヴァント-、コラーゲン-、
細菌性-、および抗原-誘発性関節炎、とりわけ関節リウマチが含まれる。

【００７２】さらに、本発明の化合物はまた、エストロゲンのアンタゴニストおよび/もし
くはアゴニストとして作用し、広範なエストロゲン関連症状の治療に有用である
。この点に関して、治療とはあるエストロゲン関連症状の治療および/もしくは
予防の双方を含むものである。従って、本発明の化合物は治療剤および/もしく
は予防剤として投与することができる。エストロゲンの「アゴニスト」とは、1
つ以上の組織においてエストロゲン受容体(ER)と結合してエストロゲンの作用を
模倣する化合物であり、一方「アンタゴニスト」は1つ以上の組織においてERと
結合してエストロゲンの作用をブロックする化合物である。さらに、「エストロ
ゲン関連症状」という用語は、エストロゲン、選択的エストロゲン受容体モジュ
レーター(SERM)もしくはERのレベルの上昇もしくは低下を伴ういかなる症状をも
包含するものである。この点に関して、ERとしては、ER-αおよび/もしくはER-
βの双方、ならびにアイソフォーム、変異体、およびERに著しい相同性を有する
タンパク質が挙げられる。

【００７３】従って、本発明の化合物はまた、エストロゲン関連症状の治療方法において用
いることができ、そのような症状としては、限定はされないが、乳癌、骨粗鬆症
、子宮内膜症、心血管疾患、高コレステロール血症、前立腺肥大、前立腺癌、
肥満、のぼせ、表皮作用、気分変動、記憶喪失、更年期障害、脱毛(脱毛症)、II
型糖尿病、アルツハイマー病、尿失禁、胃腸管病態、精子形成、損傷後の血管保
護、学習と記憶、CNS作用、血漿脂質レベル、挫瘡、白内障、男性型多毛症、そ
の他の固形癌(大腸、肺、卵巣、メラノーマ、CNS、および腎など)、多発性骨髄
腫、リンパ腫、および環境化学物質への曝露もしくは自然のホルモン不均衡に伴
う生殖機能への悪影響が含まれる。

【００７４】エストロゲンのアゴニストである本発明の化合物は、経口避妊薬、更年期障害
の軽減、切迫流産もしくは習慣性流産の防止、月経困難症の軽減、機能不全性子
宮内出血の軽減、子宮内膜症の軽減、卵巣の発達促進、挫瘡の治療、女性の過剰
な体毛生育(多毛症)の減少、心臓血管疾患の予防と治療、動脈硬化症の予防と治
療、骨粗鬆症の予防と治療、良性前立腺肥大および前立腺癌の治療、肥満、およ
び分娩後の乳汁分泌抑制に有用である。これらの作用物はまた、血漿脂質レベル
に有益な影響を及ぼし、高コレステロール血症の治療と予防に有用である。エス
トロゲンのアンタゴニストである本発明の化合物は例えば、乳房および卵巣の組
織において抗エストロゲンとして有用であり、従って乳癌および卵巣癌の治療と
予防に有用である。

【００７５】本発明の方法には、構造式(I)の1化合物、もしくはその1種以上を含有する医
薬組成物を、それを必要としている動物に対して、対象とする疾患もしくは症状
を治療するために十分な量投与することを含んでいる。このため、「治療する」
(または関連用語である「治療すること」もしくは「治療」)という用語は、ある
化合物を、典型的には送達のための適切なビヒクルもしくは作用物と組み合わせ
て、ある疾患もしくは症状を示していない動物に対して(例えば予防的投与)、ま
たはある疾患もしくは症状を示している動物に対して(例えば、治療的投与)、投
与することを意味している。さらに、「有効な量」という用語は、ある化合物の
投与量であって、ある一定時間後に所望の効果をもたらす量を意味している。例
えば、骨吸収疾患に関しては、有効な量は、プラシーボでの治療を受けた動物に
おける骨量とは統計学的に異なる骨量をもたらす。同様に、癌および関節炎に対
しては、有効量とは癌性もしくは関節炎を罹患している組織に対して所望の効果
をもたらすために十分な量である。

【００７６】本発明の方法には、構造式(I)の化合物、もしくはその塩の有効量を活性成分
として投与することが含まれる。構造式(I)の化合物の製薬上許容される塩は、
典型的には、有機酸(例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、マレイ
ン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、もしくはトルエンスル
ホン酸)、無機酸(例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、もしくはリン酸)、ならび
にアミノ酸(例えば、アスパラギン酸もしくはグルタミン酸)との塩などの通常用
いられている無毒の塩である。これらの塩は当業界の化学者には既知の方法を用
いて調製することができる。

【００７７】本発明の化合物は、動物(ヒトを含む)に経口的にもしくは非経口的に従来から
用いられている形態の製剤、例えばカプセル剤、マイクロカプセル剤、錠剤、顆
粒剤、粉剤、トローチ剤、丸剤、坐剤、注射剤、懸濁剤、およびシロップ剤など
の形態で投与することができる。適切な剤型は、従来から用いられている、有機
もしくは無機の添加剤、例えば賦形剤(例えば、ショ糖、デンプン、マンニトー
ル、ソルビトール、乳糖、ブドウ糖、セルロース、タルク、リン酸カルシウムも
しくは炭酸カルシウム)、結合剤(例えば、セルロース、メチルセルロース、ヒド
ロキシメチルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ポリビニルピロリドン、ゼ
ラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、ショ糖、もしくはデンプン)
、崩壊剤(例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルデンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、重炭酸ナトリウム、リン
酸カルシウム、もしくはクエン酸カルシウム)、滑沢剤(例えば、ステアリン酸マ
グネシウム、軽質無水ケイ酸、タルク、もしくはラウリル硫酸ナトリウム)、着
香剤(例えば、クエン酸、メントール、グリシン、もしくはオレンジ粉末)、保存
剤(例えば、安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラベン、も
しくはプロピルパラベン)、安定化剤(例えば、クエン酸、クエン酸ナトリウム、
もしくは酢酸)、懸濁化剤(例えば、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、
もしくはステアリン酸アルミニウム)、分散剤(例えば、ヒドロキシプロピルメチ
ルセルロース)、希釈剤(例えば、水)、ならびにワックス基剤(例えば、カカオ脂
、白色ワセリン、もしくはポリエチレングリコール)などの添加剤を用いて、一
般的に行われている方法で調製することができる。医薬組成物中の活性成分の量
は、その成分が所望の治療的効果を発揮するレベルとすることができる。例えば
、経口および非経口投与の双方で単位投与量中0.1mg〜100mgの量である。

【００７８】活性成分はヒトの患者では通常は１日に1〜4回、0.1mg〜100mgの単位投与量で
投与することができるが、上記の投与量は患者の年令、体重、および症状、なら
びに投与形式の如何によって適切に変更することができる。好ましい投与量は、
ヒトの患者では0.25mg〜25mgである。１日1回投与が好ましい。

【００７９】製薬化学者であれば、1つ以上の接近可能なヒドロキシル基を有する生理学的
に活性な化合物が、製薬上許容されるエステルの形態で頻繁に投与されているこ
とが判るであろう。そのような化合物、例えばエストラジオールなどの化合物に
関する文献は、そのようなエステルの使用例を多数提供している。そのようなエ
ステルが体内で代謝によって開裂され、活性薬剤がヒドロキシ化合物それ自体と
なると考えられている。製薬業界では、ある化合物の作用の持続期間もしくは作
用の速度をエステル基を適切に選択することによって調整することはよく知られ
ている。

【００８０】このため、プロドラッグも本発明の意図するもののうちに含まれる。プロドラ
ッグは、患者に投与されたときに、in vivoで構造式(I)の化合物を放出するよう
な共有結合で結合した担体である。プロドラッグは通常は、慣例的な操作によっ
て、もしくはin vivoで開裂されて親の化合物が得られるように官能基を修飾す
ることによって調製される。プロドラッグには、例えば、ヒドロキシル基(R₃＝H
の時)が何らかの基と結合していて、患者に投与されたときにそれが開裂してヒ
ドロキシル基を形成するような本発明の化合物を含んでいる。

【００８１】本発明の化合物の製薬上許容される酸付加塩は、その化合物そのもので、もし
くはそれの何らかのエステルで生成することができ、そのようなものとしては製
薬化学においてしばしば用いられている製薬上許容される塩が含まれる。例えば
、塩は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、スルホン酸（ナフタリンスルホン酸
、メタンスルホン酸、およびトルエンスルホン酸など）、硫酸、硝酸、リン酸、
酒石酸、ピロ硫酸、メタリン酸、コハク酸、ギ酸、フタル酸、乳酸などの無機酸
もしくは有機酸を用いて作製することができ、最も好ましいのは塩酸、クエン酸
、安息香酸、マレイン酸、酢酸、およびプロピオン酸を用いることである。通常
、本発明の化合物を酸付加塩の形で投与することが好ましいが、それは塩基性基
を有している医薬品の投与においてはそのような形とすることが通例となってい
るからである。

【００８２】本発明の化合物は、上述のとおり、酸付加塩の形で投与されることが非常に多
い。そのような塩は、有機化学では通常行われているように、本発明の化合物を
適切な酸、例えば上述のものなどと反応させることによって都合よく作製される
。これらの塩は中程度の温度で高収率で迅速に生成され、それらは合成の最終ス
テップで適切な酸洗浄を行ってその化合物を単離することのみで調製されること
もある。塩を形成する酸は、適切な有機溶媒、もしくは水性有機溶媒、例えばア
ルカノール、ケトン、もしくはエステルなどの中に溶解する。他方、本発明の化
合物が遊離塩基の形であることを所望する場合には、通常行われている手法に従
って塩基性の最終洗浄ステップから単離される。塩酸塩を調製するための典型的
な技法は、遊離塩基を適切な溶媒中に溶解し、その溶液を十分に乾燥してから、
分子ふるい（モレキュラーシーブス）にかけ、その後、それを塩化水素ガスの気
泡中に通す。

【００８３】本発明の化合物をヒトに投与する投与量はかなり広範囲に変動し、それは担当
医師の判断による。ある化合物を塩の形、例えばラウリル酸塩などの塩の形で投
与する場合であって、その塩形成部分がかなりの分子量を持ったものである場合
には投与量を調節する必要があることに注意すべきである。本発明の化合物の効
果的な投与速度の一般的な範囲は、約0.05mg/日〜約100mg/日である。好ましい
速度範囲は、約0.25mg/日〜25mg/日である。もちろん、化合物の1日投与量を分
割して１日の何時間か毎に投与することを行うこともある。しかし、ある所定の
場合において、投与される化合物の量は、活性化合物の溶解性、用いられる剤型
、および投与経路などの因子の如何によるであろう。

【００８４】本発明の化合物の投与経路は非常に重要とは言えない。これらの化合物は消化
管から吸収されることが知られており、便利さの点から化合物を経口投与するこ
とが通常は好ましい。しかし、場合によっては所望によりそれらの化合物を皮下
投与、もしくは直腸での吸収のための坐剤として投与しても同等に有効である。

【００８５】本発明の化合物は通常は、該化合物が存在していることから重要で新規な本発
明の実施形態となっている医薬組成物として投与される。通常のタイプの組成物
は全て用いることができ、そのようなものとしては錠剤、チュアブル錠剤、カプ
セル剤、溶剤、非経口用溶液、トローチ剤、坐剤、および懸濁剤が含まれる。組
成物は、1日投与量、もしくは1日投与量を都合よく分割したものを、1つの投与
単位中に含有するように製剤化され、その投与単位は1個の錠剤もしくはカプセ
ル剤もしくは都合の良い量の液とすることができる。

【００８６】これらの化合物は全て容易に錠剤、カプセル剤などに製剤化することができる
。塩酸塩などの水溶性の塩から溶液を調製することが好ましい。通常は、組成物
は全て製薬化学の分野で既知の方法に従って調製される。カプセル剤は該化合物
を適当な希釈剤と混合し、その混合物の適量をカプセル中に充填することによっ
て調製される。通常用いられる希釈剤には、不活性な粉末状物質、例えば多種類
のデンプン、セルロースの粉末（特に結晶性および微結晶性セルロース）、糖（
フルクトース、マンニトール、及びスクロースなど）、穀物の粉末および類似の
食用粉末が含まれる。

【００８７】錠剤は、直接圧縮、湿式顆粒化、もしくは乾式顆粒化によって調製される。錠
剤には通常は、希釈剤、結合剤、滑沢剤、および崩壊剤、ならびに本発明の化合
物が配合される。典型的な希釈剤としては、例えば、各種のデンプン、ラクトー
ス、マンニトール、カオリン、リン酸カルシウムもしくは硫酸カルシウム、塩化
ナトリウムなどの無機塩、および糖粉末が挙げられる。セルロース誘導体の粉末
も有用である。典型的な錠剤の結合剤は、デンプン、ゼラチン、およびラクトー
ス、フルクトース、ブドウ糖などの糖などの物質である。天然のおよび合成のゴ
ムも好都合であり、そのようなものとしては、アラビアゴム、アルギン酸塩、メ
チルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが含まれる。ポリエチレングリコー
ル、エチルセルロース、およびロウも結合剤として用いることができる。

【００８８】滑沢剤は典型的には、錠剤の製剤化時に金型中で錠剤と穿孔機が貼り付くこと
を防ぐために必要である。滑沢剤は、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよび
ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸などの滑りやすい固体、および硬化植物
油から選択される。錠剤の崩壊剤は、湿潤した際に膨潤して錠剤を崩壊させ、化
合物を放出するようにさせる物質である。崩壊剤としては、デンプン、クレイ、
セルロース、アルギン、およびゴムが含まれる。より特定して述べれば、例えば
、トウモロコシおよびジャガイモデンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナ
イト、木質セルロース、粉末天然スポンジ、陽イオン交換樹脂、アルギン酸、グ
アーガム、シトラスパルプ、およびカルボキシメチルセルロースを、ならびに例
えばラウリル硫酸ナトリウムを用いることができる。錠剤はしばしば着香と密封
の目的で糖でコーティングされるか、もしくはフィルムを形成する保護剤でコー
ティングされて、その錠剤の溶解性が変えられる。該化合物はまた、チュアブル
錠剤として製剤化することもでき、それは現在では当業界で十分確立されている
とおり、マンニトールなどの味の良い物質を大量に製剤中に用いることによって
行われる。

【００８９】化合物を坐剤として投与することを所望する場合には、典型的な基剤を用いる
ことができる。カカオ脂は伝統的な坐剤の基剤であり、それにロウを添加するこ
とによって改変して融点をわずかに上げることができる。特に種々の分子量のポ
リエチレングリコールを含む水と混和性の坐剤の基剤は広く用いられている。

【００９０】化合物の効果は、適当な製剤化を行うことによって遅延させるかもしくは延長
させることができる。例えば、該化合物の緩徐に溶解するペレットを調製して、
錠剤もしくはカプセル剤中に入れることができ、または徐放性のインプラント可
能なデバイスとして調製することもできる。このような技法は、数種の異なる溶
解速度を有するペレットを作ってそのペレットの混合物をカプセルに充填するこ
とによって改良することができる。あらかじめ予測した時間にわたり溶解に抵抗
性を示すようなフィルムを用いて錠剤もしくはカプセル剤をコーティングするこ
とができる。非経口製剤であって、該化合物が血清中でゆっくりと分散するよう
にその化合物を油性もしくは乳化したビヒクル中に溶解もしくは懸濁して、持続
的に作用するものとすることができる。

【００９１】下記の実施例は説明のために示しているものであり、限定するものではない。

【００９２】実施例要約すれば、実施例1〜11は、本発明の代表的な化合物の合成に関するもので
ある。実施例12は、これらの化合物がIL-6の産生をブロックする能力をアッセイ
するための、ヒト骨細胞共培養系について開示するものである。実施例13は、本
発明の代表的な化合物について、それを実施例12のヒトの骨細胞共培養系中でア
ッセイしたときの活性を開示するものである。実施例14〜21は、本発明の代表的
な化合物の活性を証明する実験データをさらに示すものである。

【００９３】実施例1 2-(4-ヒドロキシベンジルアセトン)-5-メトキシフェノール

【化３５】 3-メトキシフェノール(50g, 0.40モル)、4-ヒドロキシフェニル酢酸(71g, 0.4
6モル)、およびZnCl₂(174g, 1.28モル)の混合物に、POCl₃(100mL, 1.6モル)を添
加した。その混合物を65℃で2時間攪拌し、氷水(2L)中に注ぎ、氷が溶けるまで
攪拌した。澄明な上清をデカントし、残査を水(1L)で洗い、EtOAcと水に分配さ
せた。有機層をブラインで洗い、乾燥し(MgSO₄)、ろ過して濃縮した。この結果
得られた油をクロマトグラフィー(SiO₂、20% EtOAc/n-ヘキサン)で精製して、2-
(4-ヒドロキシベンジルアセトン)-5-メトキシフェノールを白色の固体として得
た(34.1g, 収率33%)；融点 137-140℃。

【００９４】実施例2 2-(4-トリイソプロピルシリルオキシベンジルアセトン)-5-メトキシフェノール

【化３６】 CH₂Cl₂(50mL)中に2-(4-ヒドロキシベンジルアセトン)-5-メトキシフェノール(
10g, 0.038モル)、NEt₃(6mL, 0.042モル)を含む混合物に塩化トリイソプロピル
シリル(9mL, 0.042モル)を添加した。その混合物を22時間攪拌し、濃縮し、残査
をEtOAcと水とに分配した。有機層をNaOH(1N)およびブラインで洗った。有機層
を乾燥し(MgSO₄)、ろ過し、濃縮した。残査をn-ヘキサンで処理して 2-(4-トリ
イソプロピルシリルオキシベンジルアセトン)-5-メトキシフェノールを白色の固
体として得た(6.2g, 収率38%)；融点66-68℃。

【００９５】実施例3 3-フェニル-4-(4-ヒドロキシベンジル)-7-メトキシクマリン

【化３７】 CH₃CN(50mL)中に2-(4-トリイソプロピルシリルオキシベンジルアセトン)-5-メ
トキシフェノール(4g, 9.6ミリモル)、K₂CO₃(4g, 29ミリモル)の混合物に塩化フ
ェニルアセチル(2.3mL, 14ミリモル)を添加した。その混合物を還流しつつ22時
間攪拌し、水(0℃)(500mL)中に注ぎ、EtAOc(2x)で抽出した。有機層を乾燥し(Mg
SO₄)、ろ過し濃縮した。残査をEt₂Oと共に攪拌し、その結果得られた固形物をろ
過し再結晶させて(EtOH)、3-フェニル-4-(4-ヒドロキシベンジル)-7-メトキシク
マリン(0.88g, 収率15%)を白色固体として得た；融点235-236℃。

【００９６】実施例4 3-フェニル-4-[4-(2-{ピペリン-1-イル})エトキシ]-ベンジル-7-メトキシクマリン

【化３８】 3-フェニル-4-(4-ヒドロキシベンジル)-7-メトキシクマリン(0.50g, 1.39ミリ
モル)、K₂CO₃(0.58g, 4.18ミリモル)、塩酸2-クロロエチルピペリジン(0.41g, 2
.22ミリモル)およびアセトン(50mL)の混合物を還流しつつ6時間加熱した。溶媒
を濃縮して固形物としそれをEtOAcと水に分配した。有機層をNaOH(1H)、ブライ
ンで洗い、乾燥し(MgSO₄)、ろ過し、濃縮した。残査をHCl(EtOAc中に20%)ととも
に攪拌し、固形物をろ過して3-フェニル-4-[4-(2-{ピペリン-1-イル})エトキシ]
-ベンジル-7-メトキシクマリンを得た(0.57g, 収率87%)；融点171-172℃。

【００９７】実施例5 3-フェニル-4-[4-(2-{ピペリジン-1-イル})エトキシ]-ベンジル-7-ヒドロキシクマリン

【化３９】 3-フェニル-4-[4-(2-{ピペリン-1-イル})エトキシ]-ベンジル-7-メトキシクマ
リン(0.10g, 0.20ミリモル)、HOAc(氷酢酸)(15mL)、およびHBr(48%, 15mL)の混
合物を48時間還流した。この混合物をEtOAc(120mL)とNaOH(1N, 120mL)とに分配
し、水層をEtOAcで洗った。次いで水層を酸性化し(濃塩酸、pH1-2)、ろ過して3-
フェニル-4-[4-(2-{ピペリジン-1-イル})エトキシ]-ベンジル-7-ヒドロキシクマ
リンを得た(0.88g, 収率99%)；融点160-161℃。

【００９８】実施例6 3-(4-フルオロフェニル)-4-[4-(1-メチルピペリジル-3-オキシ)]-ベンジル-7-ヒドロキシクマリン

【化４０】 3mLのCH₂Cl₂中に3-(4-フルオロフェニル)-4-[(4-ヒドロキシフェニル)メチル]
-7-メトキシ-2H-クロメン-2-オン(0.27g, 0.72ミリモル)を含む溶液を、3-ヒド
ロキシ-1-メチルピペリジン(0.42g, 3.6ミリモル)、トリフェニルホスフィン(0.
94g, 3.6ミリモル)、およびジエチルアゾジカルボキシレート(0.65g, 3.6ミリモ
ル)で処理した。反応混合物を25℃で8時間攪拌し、次いで減圧下で濃縮した。粗
製生成物を4mLのHBr(48%, 水性)および氷酢酸の1:1溶液中に溶解した。この結果
得られた溶液を90℃で12時間加温した。この反応混合物を濃縮し、この結果得ら
れた残査を10mLの飽和NaHCO₃水溶液で中和した。この水性混合物をCH₂Cl₂(3 x 1
5mL)で抽出し、有機層をあわせたものを乾燥し(MgSO₄)、次いで減圧下で濃縮し
た。フラッシュ・クロマトグラフィー(SiO₂, CH₂Cl₂/MeOH, 10:1)で精製してそ
の生成物(106mg, 32%)を単離した。

【００９９】あるいはまた、3-(4-フルオロフェニル)-4-[(4-ヒドロキシフェニル)メチル]-
7-メトキシ-2H-クロメン-2-オンを下記のエナンチオマー(a)もしくは(b)のうち
の1つとPPh3およびジエチルアゾジカルボキシレート(DEAD)の存在下で反応させ
、その後HBr/HOAcと反応させて対応するエナンチオマー性生成物を得る。

【０１００】

【化４１】

【０１０１】実施例7 2-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル-4-ヒドロキシフェニル

【化４２】 15mLのPOCl₃中に3-メトキシフェノール(2.5g, 20.14ミリモル)、4-ヒドロキシ
安息香酸(3.2g, 23.16ミリモル)、およびZnCl₂(8.78g, 64.44ミリモル)を含む溶
液を65℃で2時間加温した。この結果得られた反応混合物を氷水(100mL)中に注い
だ。水層をCH₂Cl₂で抽出し、有機層をあわせたものを乾燥し(MgSO₄)、次いで減
圧下で乾燥した。粗製生成物をフラッシュ・クロマトグラフィーで精製して表題
の化合物(3.93g, 80%)をオフホワイトの固体として得た(LC/MS＝244(M＋H^＋))。

【０１０２】実施例8 3-(4-クロロフェニル)-4-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシ-2H-クロメン-2-
オン

【化４３】 20mLのDMF中に2-ヒドロキシ-4-メトキシフェニル-4-ヒドロキシフェニルケト
ン(2.6g, 10.65ミリモル)、4-クロロフェニル酢酸(4.0g, 23.43ミリモル)、K₂CO ₃ (4.4g, 31.95ミリモル)、カルボニルジイミダゾール(3.8g, 23.43ミリモル)、
および4-ジメチルアミノピリジン(0.1g)を含んでいる懸濁液を90℃で5時間加温
した。この反応混合物を150mLの水に注ぎ、30分間攪拌した。沈殿生成物をろ過
により集め、フラッシュ・クロマトグラフィー(2.1g, 52%, LC/MS＝379(M＋H^＋)
)により所望の精製生成物を単離した。

【０１０３】実施例9 3-(4-クロロフェニル)-7-メトキシ-4[4-(2-ピペリジルエトキシ)フェニル]-2H-
クロメン-2-オン

【化４４】表題の化合物は3-(4-クロロフェニル)-4-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシ
-2H-クロメン-2-オンから、実施例4に記載のようにして調製した(LC/MS＝492(M
＋H^＋))。

【０１０４】実施例10 3-(4-クロロフェニル)-7-ヒドロキシ-4[4-(2-ピペリジルエトキシ)フェニル]-2H -クロメン-2-オン

【化４５】表題の化合物は3-(4-クロロフェニル)-7-メトキシ-4-[4-(2-ピペリジルエトキ
シ)フェニル]-2H-クロメン-2-オンから、実施例5に記載のようにして調製した(L
C/MS＝476(M＋H^＋))。

【０１０５】実施例11 その他の代表的化合物本明細書に記載の方法によって、表1の化合物を調製することができる。

【０１０６】

【表１】代表的な化合物

【０１０７】実施例12 ヒト骨細胞共培養系代謝性骨疾患のない患者から得た正常ヒト大腿海綿骨からの骨芽細胞の作成は
既に報告されているとおりに行った(Kung Sutherlandら, Osteoporosis Interna
tional 5:335-343, 1995; Wongら, J. Bone Miner 5:803-813, 1990)。骨の断片
から付着していた組織と血液を取り除き、28mM HEPES, pH7.4、10% FCS、1.1mM
CaCl₂、2mM グルタミン、および1%の抗生物質/抗真菌薬を添加したHam’s F12を
含有する培地中で4週間培養した。コンフルエンシーに達してからその細胞を集
め、ネオマイシン耐性遺伝子ならびにヒトパピローマウイルス(HPV18)のE6およ
びE7オンコジーン(International Journal of Oncology 6:167-174, 1995)を含
むレトロウイルスベクター(pLXSN)を用いて不死化した。不死化された骨芽細胞
はG418(600μg/mL)を含有する培地中で選択した。

【０１０８】ヒトU937単球細胞系(市販の細胞から連続希釈によってクローン化した)を、10
%FCSおよび1%抗生物質-抗真菌薬を含有するRPMI 1640中で維持した。

【０１０９】この共培養系は下記のとおりに確立した。ヒト骨芽細胞を96ウェルの培養皿に
5 x 10³個/ウェルの密度でまいた。RPMI培養中のU937細胞(5 x 10⁴個/ウェル)を
骨芽細胞の上に重層した。破骨細胞様細胞の形成は100nM PMAで誘導した。化合
物もしくはIL-6(Sigma)およびGM-CSF(Pharmingen)に対する中和抗体の破骨細胞
様細胞の形成に及ぼす影響を調べるために、化合物もしくは抗体をPMA添加の30
分前に添加した。培養を96時間後に停止し、組織化学的もしくは免疫組織化学的
分析にかけた。

【０１１０】実施例13 ヒト骨同時培養物における代表的な化合物の活性実施例5の化合物(すなわち、表Iの化合物No.1)を実施例12のヒト骨共培養系で
アッセイし、この化合物はIL-6およびGM-CSFに関してのIC₅₀がそれぞれ10nMおよ
び38nMであることがわかった。

【０１１１】実施例14 HOB細胞におけるIL-6およびGM-CSF産生に及ぼす代表的な化合物の活性ヒト骨芽細胞(HOB)を通常のHOB培地(28mM HEPES, pH7.4、10% FCS、1.1mM CaC
l₂、2mM グルタミン、および1%の抗生物質/抗真菌薬を添加したHam’s F12培地)
中で7 x 10³個/ウェルの密度で96ウェルの培養皿にまいた。翌日、細胞を化合物
1もしくはビヒクル(0.2% DMSO)で、IL-1β(1 ng/mL)とTNF-α(10 ng/mL)の組合
せを添加する前に30分間処理した。培養は18時間から24時間継続した。培地中の
IL-6およびGM-CSFのレベルを市販のELISAキット(Endogen, Cambridge, 米国マサ
チューセッツ州)を用いて測定した。この実験の結果はIL-6阻害については図1A
に、GM-CSF阻害については図1Bに示してある。これらの図には、ジエチルスチル
ベストロール(DES)およびラロキシフェンとの比較データも示してある。

【０１１２】実施例15 RA細胞でのIL-6産生に及ぼす代表的な化合物の活性初代培養関節リウマチ滑膜細胞をフェノールレッド不含のDMEMに2mM グルタミ
ン、1% 抗生物質/抗真菌薬、および10% 活性炭処理FCSを添加した培地中で8 x 1
0³個/ウェルの密度で96ウェルの培養皿にまいた。翌日、細胞を化合物1もしくは
ビヒクル(0.2% DMSO)で、IL-1β(2 ng/mL)とTNF-α(2 ng/mL)の組合せを添加す
る前に30分間処理した。培養は18時間から24時間継続した。培地中のIL-6のレベ
ルを市販のEndogenのELISAキットを用いて上述のとおり測定した。この実験の結
果は図2に、DESおよびラロキシフェンとの活性の比較と共に、示してある。

【０１１３】実施例16 乳癌細胞の増殖に及ぼす代表的化合物の活性 MCF-7乳癌細胞を、1% 抗生物質、0.05% β-メルカプトエタノール、0.01% エ
タノールアミン、0.42 ng/mL 亜セレン酸ナトリウム、および5% 活性炭処理FCS
を含有しているフェノールレッド不含のDMEM：F-12(1:1)培地中で5 x 10³個/ウ
ェルの密度で24ウェルの培養皿にまいた。翌日、化合物1およびビヒクル(0.2% D
MSO)を添加し、48時間毎に培地を新しく交換した。培養を9日後に停止し、Cyqua
ntキット(Molecular Probes, Eugene, 米国オレゴン州)を用いて増殖をアッセイ
した。この実験の結果は図3に、タモキシフェンとラロキシフェンの比較データ
、ならびにそれらとエストラジオールとの組合せについての比較データを含めて
示してある。

【０１１４】実施例17 前立腺癌細胞の増殖に及ぼす代表的化合物の活性 DU145前立腺癌細胞をEarle's Balanced塩類、1% 抗生物質-抗真菌薬、2mM グ
ルタミン、0.1mM 非必須アミノ酸、1mM ピルビン酸ナトリウム、および10% 活性
炭処理FCSを含有するフェノールレッド不含のMEM Eagle培地中で2 x 10³個/ウェ
ルの密度で96ウェルの培養皿にまいた。翌日、化合物1およびビヒクル(0.2% DMS
O)を添加し、48時間毎に培地を新しく交換した。培養を5日後に停止し、上述の
とおりCyquantキットを用いて増殖をアッセイした。この実験の結果は図4に、DE
Sとの比較データを含めて示してある。

【０１１５】実施例18 固相エストロゲン受容体結合アッセイヒトエストロゲン受容体(ER-αおよびER-β)との結合を、McGuire, Cancer Re
s. 38:4289-4291, 1978の方法を改作して、固相³H-エストラジオール競合アッセ
イで評価した。簡潔に記せば、ヒト組換えER-α(15nM)もしくはER-β(50nM)を96
ウェルマイクロタイタープレートのウェルに固定化した。試験化合物のERとの結
合は室温で1時間、30nMの³H-エストラジオールと競合させて評価した。この実験
の結果は少なくとも3回の異なる実験の平均を表2に示してある。得られた結果の
妥当性を確保するために参照化合物を各アッセイの必須の部分として同時に試験
した。

【０１１６】

【表２】

【０１１７】タモキシフェン、ラロキシフェン、およびエストラジオールについての結合デ
ータはこれらの化合物についての公表文献での数値と対応するものであった。化
合物1(塩酸塩の形のもの)とER-αおよびER-βとの結合は、17β-エストラジオー
ル、クエン酸タモキシフェン、およびラロキシフェン塩酸塩の結合に匹敵するも
のであった。化合物1はER-αおよびER-βと高い親和性(エストラジオールと同様
)で結合する。大多数のERリガンドに典型的に見られるとおり、ER-βに対する親
和性はER-αに対する親和性よりわずかに低かった。

【０１１８】実施例19 子宮の不利な傾向本明細書で述べてきたとおり、選択的エストロゲン受容体モジュレーターまた
はSERMとして機能する化合物が好ましい。好ましい1実施形態においては、SERM
は未熟ラット子宮バイオアッセイ(Robertsonら, Biol. Reprod. 54:183-196, 19
96; Medlockら, Biol. Reprod. 56:1239-1244, 1997; Martelら, Endocrinology
139:2486-2492, 1998; Hyderら, Cancer Cells 120:165-171, 1997)、および卵
巣摘出ラット子宮バイオアッセイ(Satoら, FASEB J. 10905-912, 1996; Ruenitz
ら, Bone 23:537-542, 1998; Luoら, Endocrinology 139:2645-2656, 1998; Ke
ら, Bone 20:31-39, 1997)などの既知のアッセイ法で評価するとき子宮の不利な
傾向(liability)を示さない。これらのアッセイは双方とも、特定の化合物が子
宮の湿重量および乾重量に与える影響を測定するものであり、組織学的データを
提供する。

【０１１９】化合物1をエストロゲンおよびラロキシフェンHClと並行させて皮下投与(s.c.)
を用いて3日間の未熟ラット子宮アッセイで試験した(Medlockら, 前掲)。エスト
ロゲンは子宮重量の4.5倍の増加をもたらしたが、これは文献で報告された値と
同じである(Ashbyら, Regul. Toxicol. Pharmacol. 25:226-231, 1997; Medlock
ら, 前掲)。ラロキシフェン・HClは1mg/kgの投与量で子宮重量の50%もの増加が
しょうじ、これも公表されているデータと一致するものであった(Ashbyら, 前掲
)。化合物1は子宮重量の約30%の増加を生じさせ、これはビヒクル(すなわちPEG-
400)で処置した動物と統計学的には差がなかった。ラロキシフェン・HClと化合
物1の双方ともベル型の用量-応答曲線を示し、それはSERMに典型的に見られるも
のである。

【０１２０】さらに、化合物1を17β-エストラジオールおよびラロキシフェン・HClと並行
させて卵巣摘出ラットで28日間の子宮バイオアッセイで試験した(Keら, 前掲)。
3種の化合物は全て毎日皮下注射で投与した。エストロゲンは卵巣摘出によって
起こる子宮重量の低下を防止し、子宮重量を550%増加させた。これらの結果は公
表されているデータと一致するものである(Greseら, Proc. Natl. Acad. Sci. U
SA 94:14105-14110, 1997; Ashbyら, 前掲; Keら, 前掲)。ラロキシフェン・HCl
は子宮重量の約70%の増加をもたらし、これは既に報告された値と同じである(Gr
eseら, 前掲; Ashbyら, 前掲)。化合物1は子宮重量の約40%の増加をもたらし、
これはラロキシフェン・HClが媒介する重量増加と比べ、統計学的に有意に低い
ものであった。これらの結果は、化合物1が子宮の不利な傾向を顕著に示さない
、という未熟ラット子宮バイオアッセイからのデータを支持するものである。こ
のように、この化合物は癌および骨粗鬆症、ならびに心血管系疾患およびアルツ
ハイマー病などの神経変性疾患の予防および/もしくは治療に顕著な潜在能力を
有している。

【０１２１】実施例20 比較試験化合物1をLednicerら, J. Med. Chem. 8:725-726, 1965の化合物と比較して試
験した。より特定して述べれば、この文献はエストロゲンアンタゴニストを意図
したクマリンベースの化合物に関するものである。それらの化合物のうちの1つ(
すなわち、表IVの化合物20、以後「L-20」と呼ぶ)は、次の構造を有する(LC/MS(
M＋H)^＋＝414)：

【化４６】化合物「L-20」上記の化合物を実施例18のER結合アッセイ、およびIL-6活性についての実施例
12のヒト骨共培養系で本発明の化合物No.38と比較して試験した。これらの実験
の結果は表3に示してある。

【０１２２】

【表３】

【０１２３】実施例21 U2OS骨肉腫細胞におけるER選択性ヒトU2OS骨肉腫細胞(ATCC)を、ヒト完全長ER-αもしくはER-βそれぞれの発現
ベクターを用いて、標準的な分子生物学的技法によりトランスフェクトした。高
レベルのER-αmRNAもしくはER-βmRNAを発現する、安定なサブクローンが作成さ
れた。ER-αもしくはER-βの発現はRNaseプロテクション分析を用いて確認した
。親U2OS細胞はER-αもしくはER-βのいずれの測定可能な量の発現も示さなかっ
た。

【０１２４】細胞を、活性炭処理したウシ胎児血清を添加したフェノールレッド不含の培地
中で1ウェルあたり8000個の細胞の密度で96ウェルのプレートにまいた。24時間
後に細胞をビヒクル(0.2% DMSO)かもしくは試験化合物の指定された濃度(0.2% D
MSO中の濃度)のいずれかで処理した。30分後に細胞を10 ng/mLのIL-1βおよび10
ng/mLのTNF-αで刺激した。24時間後に培地の上清を市販のELISAキットをキッ
トの製造者の使用説明書に従って用いて、サイトカイン産生(IL-6)を分析した。
ビヒクル(0.2% DMSO)の存在下でのサイトカイン産生を100%とした。

【０１２５】このアッセイの結果は表4に、本発明の化合物を代表するものならびに先行技
術における試験化合物について示してある。この表において、活性は対照DMSO(1
00%)に対する50%阻害によって計算したIC₅₀で示してある。

【０１２６】

【表４】

【０１２７】上記の表から、本発明の代表化合物(例えば化合物No.16と38)はER-βに対して
ER-αを上回る特異性を示したが、先行技術の化合物(17-βエストラジオールを
例外として)はER-αについてER-βよりも選択的であった。

【０１２８】本発明の特定の実施形態は本明細書中に説明のために述べられているとはいえ
、種々の改変を本発明の精神と範囲から逸脱することなく行うことができること
は理解されるであろう。従って、本発明は特許請求の範囲による限定を除いて限
定されない。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１Ａおよび図１Ｂは、それぞれ、IL-6およびGM-CSFの生産を阻害する代表的
な本発明化合物の活性を示す。

【図２】図２は、慢性関節リウマチ滑膜細胞におけるIL-6生産を阻害する代表的な本発
明化合物の活性を示す。

【図３】図３は、乳癌の増殖を阻害する代表的な本発明化合物の活性を示す。

【図４】図４は、前立腺癌細胞系を阻害する代表的な本発明化合物の活性を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 1/00 Ａ６１Ｐ 1/00 3/04 3/04 3/06 3/06 3/10 3/10 5/00 5/00 9/00 9/00 9/14 9/14 13/02 13/02 13/08 13/08 13/12 13/12 15/00 15/00 15/12 15/12 17/00 17/00 19/00 19/00 19/02 19/02 19/08 19/08 19/10 19/10 25/28 25/28 27/12 27/12 29/00 １０１ 29/00 １０１ 35/00 35/00 35/04 35/04 37/00 37/00 43/00 １０１ 43/00 １０１Ｃ０７Ｄ 405/12 Ｃ０７Ｄ 405/12 409/04 409/04 (31)優先権主張番号０９／６１１，１５６ (32)優先日平成12年７月６日(2000．7．6) (33)優先権主張国米国（ＵＳ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ミッキー，ジェフリー，エー．アメリカ合衆国 92126 カリフォルニア州，サンディエゴ，ベルショアーレーン 11435 (72)発明者カムングクーン，サクアメリカ合衆国 92105 カリフォルニア州，サンディエゴ，ナンバー４，42エヌディーストリート 3530 Ｆターム(参考） 4C062 EE28 4C063 AA01 BB01 BB08 CC79 CC92 DD03 DD10 DD25 DD54 DD79 EE01 4C086 AA01 AA02 AA03 BC07 BC21 BC38 BC73 GA04 GA07 GA09 MA01 MA04 NA14 ZA02 ZA15 ZA16 ZA33 ZA36 ZA44 ZA66 ZA70 ZA81 ZA89 ZA96 ZA97 ZB15 ZB26 ZC03 ZC21 ZC33 ZC35

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】以下の構造：【化１】［式中、 nは、0、1、2、3または4であり； pは、0、1または2であり； R₁は、無置換または置換のC_6-12アリール、C_7-12アリールアルキル、C_3-12複
素環もしくはC_4-16複素環アルキルであり； R₂は、NR_aR_bであり、ここで、R_aおよびR_bは独立して水素、C_1-8アルキル、C_6- ₁₂ アリール、または複素環であり、R_aおよびR_bは場合によりC_1-6アルキル、ハロ
ゲン、C_1-6アルコキシ、ヒドロキシおよびカルボキシルから独立に選択される３
個までの置換基で置換されていてもよく；または R₂は、以下の構造を有する複素環であり；【化２】（ここで、m₁およびm₂は独立して0、1または2であり、m₁とm₂の両方が0であるこ
とはなく、AはCH₂、O、SまたはNHであり、Zは0、1、2または3個の複素環置換基
であって、ハロゲン、C_1-8アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アリールアルキル、
C_3-12複素環、またはC_4-16複素環アルキルから選択され、そして該複素環上のど
の水素原子も、該複素環の隣接原子上の水素原子と一緒になって、二重結合を形
成することができる） R₃は、水素、R₄、C(=O)R₄、C(=O)OR₄、CONHR₄、CONR₄R₅、またはSO₂NR₅R₅であ
り； R₄およびR₅は、独立して、C_1-8アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラルキル、
またはO、NR₆およびS(O)_qから選択される２個までのヘテロ原子を含む５員もし
くは６員の複素環であり、ここで、上記の基のそれぞれは場合によりR₇から独立
に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、qは0、1または2であり
； R₆は、水素またはC_1-4アルキルであり； R₇は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、C_1-6アルキル、C_1-4アルコキシ、C_1-4ア
シルオキシ、C_1-4チオ、C_1-4アルキルスルフィニル、C_1-4アルキルスルホニル、
(ヒドロキシ)C_1-4アルキル、C_6-12アリール、C_7-12アラルキル、COOH、CN、CONH
OR₈、SO₂NHR₈、NH₂、C_1-4アルキルアミノ、C_1-4ジアルキルアミノ、NHSO₂R₈、NO ₂ 、または５員もしくは６員の複素環であり、ここで、R₈は、存在する場合、そ
れぞれ独立してC_1-6アルキルである］を有する化合物、またはその立体異性体、プロドラッグ、もしくは製薬上許容さ
れる塩。
【請求項２】 R₁が無置換または置換のC_6-12アリールである、請求項１に
記載の化合物。
【請求項３】 R₁が無置換または置換のフェニルである、請求項２に記載の
化合物。
【請求項４】 R₁が無置換フェニルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】 R₁が置換フェニルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】 R₁が4-ハロフェニル、4-メチルフェニル、4-ヒドロキシフェ
ニル、4-トリフルオロフェニル、3-ハロフェニル、2-ハロフェニル、2,4-ジハロ
フェニル、または3,4-ジハロフェニルであり、ここで、ハロはフルオロ、ブロモ
、またはヨードである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】 R₁が無置換または置換のヘテロアリールである、請求項１に
記載の化合物。
【請求項８】 R₁が無置換または置換のピリジニルまたはチオフェニルであ
る、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】 R₁が無置換または置換のC_7-12アリールアルキルである、請
求項１に記載の化合物。
【請求項１０】 R₁が無置換または置換のベンジルである、請求項９に記載
の化合物。
【請求項１１】 R₁が無置換または置換のC_3-12複素環またはC_4-16複素環ア
ルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】 nが2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】 nが0、1、3または4である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】 R₃が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】 R₃がC(=O)(C_1-8アルキル)またはC(=O)(C_6-12アリール)で
ある、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】 R₃がC(=O)O(C_1-8アルキル)、SO₂NH₂またはCONH₂である、
請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】 R₂が以下の構造：【化３】を有する複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】 m₁およびm₂が1である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項１９】 AがCH₂である、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】 R₂がピペリジン-1-イルである、請求項１９に記載の化合
物。
【請求項２１】 AがOである、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２２】 R₂がモルホリン-4-イルである、請求項２１に記載の化合
物。
【請求項２３】 m₁が1で、m₂が0である、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２４】 AがCH₂であり、R₂が０または１個のZ置換基で置換された
イミダゾリジン-2-イルである、請求項２３に記載の化合物。
【請求項２５】 R₂が０または１個のZ置換基で置換されたイミダゾール-1-
イルまたはイミダゾール-2-イルである、請求項１７に記載の化合物。
【請求項２６】 R₂-(CH₂)_n-O-部分がフェニル環の４位に結合されている、
請求項１に記載の化合物。
【請求項２７】 R₂-(CH₂)_n-O-部分がフェニル環の３位に結合されている、
請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】以下の構造：【化４】を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】以下の構造：【化５】（ここで、Xは１個以上のフェニル置換基を表す）を有する、請求項１に記載の
化合物。
【請求項３０】以下の構造：【化６】を有する、請求項２８に記載の化合物。
【請求項３１】以下の構造：【化７】を有する、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３２】以下の構造：【化８】（ここで、Xはハロゲンである）を有する、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】請求項１に記載の化合物を製薬上許容される担体もしくは
希釈剤と共に含有する医薬組成物。
【請求項３４】サイトカインの抑制が必要な動物に、有効量の請求項３３
に記載の組成物を投与することを含んでなる、上記動物においてサイトカインを
抑制する方法。
【請求項３５】サイトカインがIL-6である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】サイトカインがGM-CSFである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】 ER-βを発現する細胞に、有効量の請求項１に記載の化合
物を接触させることを含んでなる、上記細胞においてER-βをモジュレートする
方法。
【請求項３８】前記細胞がER-αよりもER-βを優先的に発現する、請求項
３７に記載の方法。
【請求項３９】前記細胞が骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上
体、胃腸管、腎臓、乳房、眼、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬、また
は視床下部の細胞である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】 ER-βを発現する組織に、有効量の請求項１に記載の化合
物を接触させることを含んでなる、上記組織においてER-βをモジュレートする
方法。
【請求項４１】前記組織がER-αよりもER-βを優先的に発現する、請求項
４０に記載の方法。
【請求項４２】前記組織が骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上
体、胃腸(GI)管、腎臓、乳房、眼、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬、
または視床下部の組織である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】エストロゲン関連症状の治療が必要な動物に、有効量の請
求項３３に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる、エストロゲン関連症
状の治療方法。
【請求項４４】前記エストロゲン関連症状が、乳癌、骨粗鬆症、子宮内膜
症、心血管疾患、高コレステロール血症、前立腺肥大、前立腺癌、肥満、のぼせ
、表皮作用、気分変動、記憶喪失、前立腺癌、更年期症候群、II型糖尿病、アル
ツハイマー病、尿失禁、GI管の症状、精子形成、損傷後の血管防護、子宮内膜症
、学習と記憶、CNS作用、血漿脂質レベル、挫瘡、多毛症、固形癌、多発性骨髄
腫、リンパ腫、脱毛、白内障、自然ホルモン不均衡、または環境化学物質への曝
露に関連する有害な生殖作用である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】骨吸収疾患の治療が必要な動物に、有効量の請求項３３に
記載の組成物を投与することを含んでなる、骨吸収疾患の治療方法。
【請求項４６】骨吸収疾患が骨粗鬆症である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】骨吸収疾患が転移性骨癌、整形外科インプラントによる骨
溶解病変、パジェット病、または上皮小体機能亢進に伴う骨損失である、請求項
４５に記載の方法。
【請求項４８】 IL-6に関連する癌の治療が必要な動物に、有効量の請求項
３５に記載の組成物を投与することを含んでなる、上記癌の治療方法。
【請求項４９】前記癌が乳癌、前立腺癌、大腸癌、子宮内膜癌、多発性骨
髄腫、腎細胞癌、または子宮頸癌である、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】関節炎の治療が必要な動物に、有効量の請求項３３に記載
の組成物を投与することを含んでなる、関節炎の治療方法。
【請求項５１】前記関節炎が慢性関節リウマチである、請求項５０に記載
の方法。
【請求項５２】 ER-βを発現する細胞に、有効量の請求項１に記載の化合
物を接触させることを含んでなる、上記細胞における遺伝子発現をモジュレート
する方法。
【請求項５３】前記細胞が骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上
体、胃腸管、腎臓、乳房、眼、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬、また
は視床下部の細胞である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】以下の構造を有する請求項１に記載の化合物、またはその
製薬上許容される塩。【化９】
【請求項５５】以下の構造を有する請求項１に記載の化合物、またはその
製薬上許容される塩。【化１０】
【請求項５６】以下の構造を有する請求項１に記載の化合物、またはその
製薬上許容される塩。【化１１】
【請求項５７】以下の構造を有する請求項１に記載の化合物、またはその
製薬上許容される塩。【化１２】
【請求項５８】以下の構造を有する請求項１に記載の化合物、またはその
製薬上許容される塩。【化１３】
【請求項５９】治療に有効な量の請求項５４〜５７のいずれか１項または
請求項５８に記載の化合物、および製薬上許容される担体または希釈剤を含有す
る医薬組成物。
【請求項６０】サイトカインの抑制が必要な動物に、有効量の請求項５９
に記載の組成物を投与することを含んでなる、上記動物においてサイトカインを
抑制する方法。
【請求項６１】サイトカインがIL-6である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】サイトカインがGM-CSFである、請求項６０に記載の方法。
【請求項６３】 ER-βを発現する細胞に、有効量の請求項５４〜５７のい
ずれか１項または請求項５８に記載の化合物を接触させることを含んでなる、上
記細胞においてER-βをモジュレートする方法。
【請求項６４】前記細胞がER-αよりもER-βを優先的に発現する、請求項
６３に記載の方法。
【請求項６５】前記細胞が骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上
体、胃腸管、腎臓、乳房、眼、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬、また
は視床下部の細胞である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】 ER-βを発現する組織に、有効量の請求項５４〜５７のい
ずれか１項または請求項５８に記載の化合物を接触させることを含んでなる、上
記組織においてER-βをモジュレートする方法。
【請求項６７】前記組織がER-αよりもER-βを優先的に発現する、請求項
６６に記載の方法。
【請求項６８】前記組織が骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上
体、胃腸(GI)管、腎臓、乳房、眼、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬、
または視床下部の組織である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】エストロゲン関連症状の治療が必要な動物に、有効量の請
求項５９に記載の医薬組成物を投与することを含んでなる、エストロゲン関連症
状の治療方法。
【請求項７０】前記エストロゲン関連症状が、乳癌、骨粗鬆症、子宮内膜
症、心血管疾患、高コレステロール血症、前立腺肥大、前立腺癌、肥満、のぼせ
、表皮作用、気分変動、記憶喪失、前立腺癌、更年期症候群、II型糖尿病、アル
ツハイマー病、尿失禁、GI管の症状、精子形成、損傷後の血管防護、子宮内膜症
、学習と記憶、CNS作用、血漿脂質レベル、挫瘡、多毛症、固形癌、多発性骨髄
腫、リンパ腫、脱毛、白内障、自然ホルモン不均衡、または環境化学物質への曝
露に関連する有害な生殖作用である、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】骨吸収疾患の治療が必要な動物に、有効量の請求項５９に
記載の組成物を投与することを含んでなる、骨吸収疾患の治療方法。
【請求項７２】骨吸収疾患が骨粗鬆症である、請求項６５に記載の方法。
【請求項７３】骨吸収疾患が転移性骨癌、整形外科インプラントによる骨
溶解病変、パジェット病、または上皮小体機能亢進に伴う骨損失である、請求項
６５に記載の方法。
【請求項７４】 IL-6に関連する癌の治療が必要な動物に、有効量の請求項
６１に記載の組成物を投与することを含んでなる、上記癌の治療方法。
【請求項７５】前記癌が乳癌、前立腺癌、大腸癌、子宮内膜癌、多発性骨
髄腫、腎細胞癌、または子宮頸癌である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】関節炎の治療が必要な動物に、有効量の請求項５９に記載
の組成物を投与することを含んでなる、関節炎の治療方法。
【請求項７７】前記関節炎が慢性関節リウマチである、請求項７６に記載
の方法。
【請求項７８】 ER-βを発現する細胞に、有効量の請求項５４〜５７のい
ずれか１項または請求項５８に記載の化合物を接触させることを含んでなる、上
記細胞における遺伝子発現をモジュレートする方法。
【請求項７９】前記細胞が骨、膀胱、子宮、卵巣、前立腺、精巣、精巣上
体、胃腸管、腎臓、乳房、眼、心臓、血管壁、免疫系、肺、下垂体、海馬、また
は視床下部の細胞である、請求項７８に記載の方法。