JP2003514824A - 合成脂質−ａ類似体およびその使用 - Google Patents

合成脂質−ａ類似体およびその使用

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ジアング，ジ−フア
バッハ，ミミ
ヤラマティ，ダマヤンチ
コガンティ，ラオ
ロンジェネッカー，マイケル
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ビオミラ，インコーポレーテッド
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Abstract

(57)【要約】 本発明では単糖類（１）および二糖類（２）誘導体に基づいた新規合成脂質−Ａ類似体を設計し調製した。２つの構造式（１）および（２）は天然には見出されていない新規脂質構造（３）および（４）を組み込む。また、一様な脂質の新規付随事項を組み込む新規二糖類脂質−Ａ構造（２）、式中Ｒ１、Ｒ４およびＲ５は構造式（III）の同じ置換基である、を合成した。腫瘍結合ＭＵＣ１から誘導した合成リポペプチドおよび合成リピド−Ａのような全体的に合成化合物を含むリポソーム処方薬をそれらの治療有用性と共に記載する。脂質−Ａ類似体（１）および（２）の免疫賦活性および毒性の比較試験結果が含まれる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、１９９９年１１月１５日に出願されたＵＳ出願番号６０・１６４，９
２８の仮出願の非仮出願である。この先の仮出願をここにその全体を参考文献と
して組み込む。 本発明はバクテリア脂質−Ａの新規な合成構造擬態およびそのような類似体の合
成方法に関する。バクテリア脂質−Ａ組成物はアジュバントとして広く用いられ
ワクチン処方に用いられる種々の抗原への免疫応答を高める。合成アジュバント
は、単一の化学的に定義された実在物であり、リポソーム起源のワクチン処方ま
たは正常混合物のために必要な同種へと導く。この発明は、非常に毒性が低いが
天然脂質−Ａのそれらと比較できるアジュバント性質をもつ脂質−Ａ類似体の設
計と合成を含む。これら合成構造は非天然脂質、非天然化学結合および非天然脂
質−Ａ構造の間には見られない脂質鎖の組み合わせを組み込む。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
リポ多糖類（ＬＰＳ）はグラム−陰性バクテリアの外膜の外小葉に専ら見られる
ユニークな糖脂質である、構造は1a,b、バクテシアＬＰＳ分子が３つの主領域を
もつ：Ｏ−抗原領域、コア領域および脂質−Ａ領域。Ｏ−抗原領域は種−特異的
多糖類部分であり、生物体の抗原特異性を決定する。コア領域はオリゴ糖類鎖で
あり、外膜の無欠を維持する役割を演じることができる。脂質−Ａ領域が保護さ
れその場にリポ多糖類を保持する疎水性アンカーとして働く。
【０００３】 ＬＰＳは、注入されるときまたはグラム陰性バクテリア感染により蓄積されると
き、哺乳動物の多くの異常生理学の引き金であることが知られている1b。ＬＰＳ
の脂質−Ａ化合物の発見前に、「エンドトキシン」の語は一般にＬＰＳの効果を
記載するために用いられた。グラム−陰性バクテリアからのエンドトキシンは熱
安定性の細胞結合した発熱性の潜在的致死的である。そのエンドトキシン活性に
加えてＬＰＳはまた種々の生物活性を示し、免疫アジュバント活性、Ｂ−リンパ
球有糸分裂誘発、マクロファージ活性化、インターフェロン生成、腫瘍回帰等を
含む。Ｏ−抗原およびコア領域の両方がＬＰＳの毒性活性を調節する間に、一般
に疎水性脂質−Ａ部分はエンドトキシンのこれら病態生理学効果に責を負うべき
であることが知られている2a,b。
【０００４】 脂質−Ａは１−Ｏ−および４’−Ｏ−位置でホスホリル化したβ−（１，６）−
結合Ｄ−グルコサミン二糖類からなる。ヒドロキシル化および非ヒドロキシル化
脂肪酸は二糖類のヒドロキシル基およびアミノ基に結合し脂質−Ａに疎水性を与
える。図１は天然脂質Ａ構造の２例を示す、Ｅ．coliから単離した化合物A3a,b
、およびサルモネラ種から単離した化合物4a-d。タカダとコタニはエンド−毒性
と他の生物学的活性のための脂質−Ａの構造の必要性の研究を行い5a、種々のグ
ループによる合成脂質−Ａ類似体の入手性のためである6-10。
【０００５】 さらに、いずれかのホスフェート基の除去はアジュバント活性の相等するロスな
しに毒性のかなりのロスとなる。モノホスフォリル脂質−Ａのビオアッセイは、
毒性および発熱性応答でのモル基準の１０００倍の低い効果であったが、それは
ジホスフォリル脂質−Ａ（およびエンドトキシン自体）に匹敵していた11a。通
常LPSと会合した多くの生物学的活性を保持しながらＥ．coliからのジホスホリ
ル脂質−Ａは毒性を減らした11b、c、d。
【０００６】 脂質−Ａの効果のある生物学的活性は有用な応用を開発することに多くの研究努
力が向けられた。例えば、脂質−Ａ生合成の阻害はアンチバクテリア薬12,13に
対し新規の標的活動であり、この阻害機構を通して作用する未来の薬は新規クラ
スのアンチビオチックを構成する14,15。脂質−Ａの免疫刺激活性は新規治療の
抗−腫瘍剤16を、および改変した脂質−Ａ構造および類似体を用いることにより
新規治療の抗−腫瘍剤16、および免疫アジュバントを開発するために研究された
。さらに、脂質−Ａ類似体の治療薬は、マクロファージとの相互作用を阻害する
能力に基づいたセプシスの治療のため研究された。最近、エイサイ19はセプシス
の治療のための効力ある合成脂質−Ａアンタゴニストを開発した。
【０００７】 障害と関連した脂質−Ａ／ＬＰＳのため、および結合した毒性のない有効なアジ
ュバントのための有効な治療が必要である。天然源からの改変していない脂質−
Ａの高毒性は製薬としての一般的使用を妨げている。天然産の脂質−Ａの主要な
欠点は製薬学的に受容できる純度、再生活性および安定性をもつ充分な物質に近
づくことである。天然産の脂質−Ａは脂質鎖の数を変える脂質−Ａの成分を含む
細胞壁の数種の化合物の混合物である。天然脂質−Ａ生成物中のこのような異成
分は２つの起源に帰する：（１）
【０００８】 脂質−Ａ類似体が構造的に複雑であることが認められるが、化学合成は勿論最も
二者択一的であり、天然源からの脂質−Ａに接近することに関連した困難性を解
消する。脂質の自然の組み合わせは自然に存在する脂質の多様性と呼ばれる。似
た炭素長である脂質に不随する一様性があるので本発明の合成脂質には脂質の多
様性はない。本発明はいくつかの新規モノ−ホスホリル化脂質−Ａ類似体の設計
および合成に関し、各々（Ｉ）および（ＩＩ）（図３）のような非天然脂質の組
み合わせ、脂質（図４）の非天然の組み合わせからなる。次の特徴は、天然源か
ら得られたものおよび／または当該分野で報告されたものから本発明に開示され
た合成脂質−Ａ構造を特徴づける。
【０００９】 １）モノホスフォリル化：天然からの化学的に改変した脂質−Ａ構造は１−およ
び４’位置で２個のホスフェート基をもつが、本発明での合成脂質−Ａ類似体は
４’位置で１個のホスフェート基をもつ。 ２）非天然脂質の組み合わせ：化合物３３および１０２（図３）のような分子は
少なくとも１個の新規で非天然の脂質（ＩまたはＩＩ）を含む。 ３）脂質の非天然組み合わせ：これは脂質−Ａ類似体であり均一の鎖長の脂質を
もち、組み合わせは天然には見出されずそれらの合成は従来知られていない。化
合物５４と８６（図４）はこのカテゴリイに入る。化合物７０（図１９）は同じ
ようであるが、３−Ｏ−位置にｎ−プロピル基を含み、非天然エーテル結合をも
つ短非天然アルキル基を組み込む脂質−Ａ類似体の例である。
【００１０】 この発明に開示されたすべての合成脂質−Ａ構造は、脂質構造（図１）を誘導す
る天然産のＥ．coliおよび／またはサルモネラからの擬態であることが期待され
る。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
低毒性をもつアジュバント活性のための脂質−Ａ分子に必要な最小の構造を詳述
するいくつかの刊行物があるが、この活性を維持するのに必要な構造的特徴の系
統的研究はまだない。 いくつかの将来有望なアジュバントは現在臨床研究中であるが、アジュバントと
して構造的に限定された分子はヒト治療ワクチンとともに使用するためには市販
されていない。このような将来有望なアジュバントの１例は、バクテリア培養地
から精製された天然脂質−Ａ生成物である。天然脂質−Ａアジュバント生成物は
脂質鎖の数を変えるいくつかの脂質−Ａ成分の混合物を含む。脂質鎖エステルは
炭水化物コアに結合し、細胞壁の加水分解をコントロールする間に開裂すること
ができ多くの成分を生成する。これら製剤に関係した主な問題の一つは組成中の
不一致とアジュバントとしての性能であり、後者はワクチンによる治療の有効性
に多いに不可欠である。他の追加となる因子、例えば高い生成コストや最終製薬
組成中の活性成分を決定することの難しさはこのような天然源からのアジュバン
トを市販品として魅力ないものにする。
【００１２】 合成脂質−Ａ類似体は天然産のアジュバント製剤よりもいくつかの利点をもつ。
合成化合物は単一構造をもつことが化学的に明らかにされ、したがって最終組成
への製造からの追跡やコントロールを容易にする。合成生成物はコストが安く品
質と性能の両方での一貫性を保持しながら商業上のスケールアップに容易に適合
できる。
【００１３】 本発明では、新規の脂質−Ａ類似体を設計し、合成し最後に理歩ペプチドとして
、抗原由来の癌結合ムチン（ＭＵＣ１）を含むリポソームワクチンに組み込み、
アジュバント活性を評価する。本発明の顕著な特徴を以下に記載する。
【００１４】 新規の脂質構造 任意所定の天然脂質−Ａ構造では、脂質の分担は均一の長さでも構造でもないが
、天然に最も普通に見出される脂質は（Ｒ）−３−ヒドロキシ−テトラデカン酸
（３−ヒドロキシミリスチン酸）およびその３−Ｏ−アシル化誘導体である。脂
質多様性は天然脂質−Ａ構造間の最も顕著な変化に断然寄与する。それらはすべ
てエステルとアミドボンドによって糖のヒドロキシとアミノ基にそれぞれ結合す
るが、変化は結合した脂質の数、各脂質鎖の長さおよび脂質鎖内に含まれる官能
基を含む。これらの変化は全体の脂質−Ａ分子の種々の生物学的ファンクション
および更に重要なことにはそのアジュバント性に貢献する。化学的に言えば、エ
ステル結合は生理学上の状態下に加水分解を受け易いので不安定である。脂質鎖
の漸次のロスはゆっくりとアジュバントの活性をワクチンの長期貯蔵下に減らし
、それらの貯蔵寿命を減らす。エステルの代わりに非天然であるが安定なエーテ
ル結合の導入、または両者の組み合わせはアジュバントの安定性を高め、ワクチ
ン製剤の貯蔵寿命を長くする。脂質−Ａ類似体の合成における主な利点は脂質鎖
およびそれらの結合の多様性を用いて、安全で安定なアジュバントとしての有効
性を達成するように分子が設計されることである。
【００１５】 これらの特徴に合わせて、我々は豪勢脂質−Ａ類似体を構築するため一般式（３
）および（４）（図２）をもつ新規の合成脂質酸を設計した。化合物５および２
３は本発明では２つの特例の一般構造（３）および（４）として調製された。化
合物５はアスパラギン酸部分を含み、β−アミノ酸としてみとめられる。その絶
対構造は（Ｒ）−３−ヒドロキシ−テトラデカン酸に相当し、化合物５は（Ｒ）
−３−アシロキシ−テトラデカン酸の擬態であると考えられる。化合物２３はエ
ーテル結合を含むトリ−脂質脂肪酸であり、全分子の安定性を高めるために組み
込まれる。エステルを基礎としたトリ−脂質構造は今までは天然脂質−Ａ類似体
に発見されなかったが、それらの存在は完全に排除されてはいない。本発明はま
た脂質多様性を示すもののアジュバント活性を比較するため均一の脂質不随事項
をもつ脂質−Ａの合成に焦点を合わせる。
【００１６】 一般式（３）および（４）（図２）の脂質は新規設計であり、したがってそれら
を組み込む対応する脂質−Ａ構造はすべて特徴的である。２つのタイプの脂質−
Ａ類似体、単糖類（１）および二糖類（２）（図３）は、本発明の一部として設
計され合成された。 少なくとも１のＲ1およびＲ2は独立して（Ｉ）および（ＩＩ）（図３）から選ば
れ、天然脂質−Ａ構造の還元されない末端糖の特色をなす。 少なくとも１のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5は独立して構造（Ｉ）および（Ｉ
Ｉ）（図３）から選ぶ構造（２）の二糖類誘導体は天然脂質−Ａ構造のモノホス
ホリル化類似体である。化合物５８（図１６）、７７（図２１）、１０２（図２
９）および１０４（図３０）はそのような構造の特徴をもついくつかの例である
。
【００１７】 均一脂質不随事項をもつ脂質−Ａ類似体 脂質−Ａの脂質多様性は化学合成による大規模生産には複雑すぎ実際的でない分
子にする。本発明の一部として設計された化合物の主な特徴の一つは、二糖類の
バックボーンの２−アミノ、２’−アミノ、および３’−Ｏ位置の脂質置換基が
同一であり、エーテルまたはエステル結合ジ脂質構造フラグメントから構成され
ていることである。そのような特徴は図４にまとめてある。化合物は一般式（２
）を有し、Ｒ1、Ｒ4およびＲ5は等しくジ脂質構造（ＩＩＩ）をもつ。特異的化
合物は本発明では、構造５４（図１５）、７０（図１９）、８６（図２４）およ
び９４（図２６）のように、調製例として調製される。
【００１８】 脂質−Ａ類似体の調製のための新規プロセス 本発明は脂質−Ａ類似体（１）および（２）の合成のための新規方法を愚クム。
ここに開示された一般的合成ルートは本発明の種々置換された脂質−Ａ類似体を
調製する。異なる類似体は別の出発物質を用いて容易に得られる。詳細は添付図
面および実施例にまとめた。
【００１９】 単糖類誘導体３３の合成方法は図９に示され、二糖類誘導体４８は図１０−１３
に示される。この新規方法の重要な特徴は異なる炭水化物構築ブロックの組み合
わせを用い、保護基戦略および特異的構造を達成するための試薬を用いるる一般
的戦略である。例えば、グルコサミン誘導体の４，６−ベンジリデン保護はリン
酸塩基を導入する４−ＯＨをフリーにするため選択的開環の自由を与える。リン
酸塩基を保護したベンジルエステルは、２段階法で導入され、分子上の他のベン
ジル基と共に、触媒による水素添加を通じて豪勢の最終段階で、また容易に脱保
護される利点を与える。化合物５４、５８、７０および７７の合成のための更な
る例は図１４−図２１に記載される。
【００２０】 この方法はさらに改変してさらに有効な方法を与え、特に炭水化物バックボーン
の両アミノ基に同じ置換基をもつ化合物の調製に有用である。図２２−２４は化
合物８６の合成をこの改変したプロセスを用いて示す。
【００２１】 この改変したプロセスでは、ホスフェート基はグリコシド結合が形成される前に
単糖類誘導体に導入され、グリコシルアクセプターは４−ＯＨと６−ＯＨの両方
に保護されていない基をもち（例えば図２２の化合物７９）、簡単な経路によっ
て調製される。全プロセスに含まれるステップは、物質が高価になり取り扱いが
特にさら特に困難な二糖類段階で減らされる。プロセスは大規模生産に設計され
脂質−Ａ類似体のグラムスケール合成に非常に有効であった。追加例の化合物９
４、１０２および１０４はこの改変したプロセスで調製され、図２５−３０に記
載する。 本発明に開示された戦略上の中間体は脂質−Ａ類似体の合成に用いられ文献では
未知である。
【００２２】 リポソーム処方 リポソームは極性脂質の物理的セルフアセンブリイによって生成され、これはリ
ポソームの膜構成を画定する。リポソームは単一層またはマルチ層小胞として種
々のサイズで形成される。そのようなリポソームは、それ自体免疫性をもたない
小分子からなるが、マクロ分子のように振る舞い強い免疫性を示す。
【００２３】 脂質の自己組立性の利点を考慮すると、１またはそれ以上の免疫原を脂質粒子の
一部になる極性脂質に結合させる事ができる。各免疫原は１またはそれ以上の抗
原決定（エピトープ）からなる。これらエピトープはＢ−細胞エピトープ（抗体
により認識）またはＴ−細胞エピトープ（Ｔ−細胞により認識）である。リポソ
ームは結合した免疫原によって顕在化された免疫応答をアジュバントするように
働くことができる。免疫原と単に混合したアジュバントよりもさらに有効に働き
さらに高い局地有効濃度をもつ。
【００２４】 さらに、ハプテンは前記抗原の代わりに結合させることができる。免疫原のよう
に、ハプテンは抗原決定子からなるが、定義によりそれ自体の免疫応答を引き出
すには小さすぎる（代表的には、ハプテンは５，０００ダルトンよりは小さい）
。この場合に、脂質部分はアジュバントとして働くが、免疫原キャリヤとしても
働き、ハプテンと脂質の結合は豪勢免疫原として働く（すなわち、体液および／
または細胞免疫を顕在化させる物質）。
【００２５】 脂質が免疫原キャリヤとして働かないとしても、リポソームボーンハプテンはな
お合成抗原として働く（すなわち、抗体またはＴ−細胞のような、体液または細
胞免疫システムの成分によって認識される物質）。「抗原」の語はハプテンと免
疫原を含む。 従って本発明は膜がここに開示したような脂質Ａ類似体、少なくとも１のＢ−細
胞またはＴ−細胞エピトープからなりリポソームを企図する。
【００２６】 我々はリポソーム膜を形成するリポ−ペプチド、グリコ−リピドおよびグリコ−
リポ−ペプチドの形でいくつかの合成抗原を設計した。同様に、よく定義された
構造特性の合成脂質−Ａ分子をリポソーム膜にアンカーすることができる。
【００２７】 バクテリアアジュバント調製とは異なった方法で、合成脂質−Ａ類似体がリポソ
ーム膜に構造的によく画定された脂質に貢献する。このような画定された構造は
処方後に「活性」な膜成分を再断言する義務を減らすだけでなく、またリポソー
ム膜の画定へ貢献する。そのようなリポソームは「全体的に合成ワクチン処方」
はアジュバントとして合成脂質−類似体および抗原として合成リポペプチドを含
む。
【００２８】 エピトープ 本発明のエピトープはＢ−細胞またはＴ−細胞であり、それらは任意の化学性質
であり、ペプチド、炭水化物、脂質、グリコペプチドおよびグリコリピドを含ま
ない。エピトープは天然産のエピトープと同一、または天然産のエピトープの改
変体である。
【００２９】 Ｂ−細胞ペプチドエピトープは代表的には、長さが少なくとも５個のアミノ酸、
さらに少なくとも６個のアミノ酸、またさらに少なくとも７個または８個のアミ
ノ酸であり、連続（「線形」）または非連続（「配座」）（後者は物理的近接へ
の第一級アミノ酸配列の非隣接部分をもたらす蛋白質の折り畳みによって形成さ
れる）。Ｔ−細胞ペプチドエピトープは直線であり、通常８ないし１５、さらに
９−１１のアミノ酸の長さである。
【００３０】 関心のあるエピトープは特異的または病原体、または腫瘍と結合したものを含む
。細胞内、表面、または病気の原因である有機体の分泌抗原によって存在するな
らば、またはビールスの場合には、ビールす粒子と結合しているかまたはビール
スによって感染した細胞に特異的であるならば、エピトープは特定の感染症と結
合していると言える。前記腫瘍の細胞内、表面または分泌抗原によって存在する
ならば、特定の腫瘍と結合していると言える。問題の腫瘍タイプの全細胞ライン
によって、または特定の腫瘍の全細胞によって、または主要の全寿命の間に存在
する必要はない。問題の腫瘍に特異的である必要はない。エピトープは一般に、
任意の腫瘍（癌、ネオプラズム）と結合するならば「ｓ表結合」と言われる。
【００３１】 「病気結合エピトープ」はまた任意の非天然産エピトープを含み、問題の病気と
自然に結合したエピトープに充分類似しており、自然の病気エピトープを認識す
る細胞毒のリンパ球は類似した非自然のエピトープを認識する。類似したコメン
トは「腫瘍結合エピトープ」に当てはまる。
【００３２】 さらに頻繁に他の源よりは特定の源と結合するならば、エピトープは特定の源（
例えば病気原因の有機体または腫瘍）であると言える。有用な予防、治療または
診断効果がまだ得られるならば、絶対的な特異性は必要がない。
【００３３】 「腫瘍−特異的」エピトープの場合には、
【００３４】 「腫瘍−特異的エピトープ」の語はまた
【００３５】 「特異的」の語は絶対的特異性を意味するつもりはなく、単に、マッチした普通
の対象よりは病原体または主要と結合して生じる可能性での臨床的に有用な差異
を意味する。
【００３６】 病原体はサブ菌（例えばビールス）、菌（例えば、菌類、原生動物）、または多
細胞（例えば、虫、拙速動物等）である。
【００３７】 また、アミノ酸配列が得られるならばＢ−細胞またはＴ−細胞エピトープの位置
を予言できる。 天然産Ｔ−細胞エピトープはそれらのコンプレックスから分離することによって
回収できる。
【００３８】 脂質−Ａ類似体のアジュバント活性 一般に低分子量の合成抗原が免疫原が弱く完全に合成したワクチンの成功に最大
の障害であると理解されている。
【００３９】 製薬学的方法および調製 出願人は参考文献としてＷＯ９８／３３８１０の３２−４６頁を組み込む。
【００４０】
【発明の実施の形態】
以下、図面に基づき詳細に説明する。 脂質−Ａ類似体の化学合成（図５−図３０） 脂質−Ａ分子の不変の構造的特徴はそのβ−（１，６）−結合Ｄ−グルコサミン
二糖類バックボーンである。この構造は元はバクテリアであるが、その純形態で
のこの二糖類は多分脂質構造によって示される生物学的活性の範囲には関連して
いない。脂質鎖は多分基本的機構を与え、これにより二糖類は広範囲の性質を示
す。したがって、脂質鎖のみが脂質−Ａの性質の増進によって量的役割を演じる
。広範囲の脂質はこの必要性を満たすが、それらの数において脂質は分子の性質
に量的に影響を与えるようである。我々は合成し天然および非天然の脂質のある
範囲の影響、および共に炭化水素コアに脂質を結合する結合の範囲を調べた。
【００４１】
【実施例】
以下、本発明を実施例に基づき説明する。 概要：融点は正確ではない。空気および混気に敏感な反応は窒素雰囲気下で行っ
た。無水のＴＨＦ、ＤＭＦおよびジクロロメタンはアルドリッチ社から購入した
。他の乾燥溶媒は通常の方法で生成した。ＡＣＳグレード溶媒はフィッシャー社
から購入し、蒸留なしでクロマトグラフィに用いた。ＴＬＣプレート（シリカゲ
ル６０Ｆ254、薄さ０．２５ｍｍ、メルク社）およびカラムクロマトグラフィ用
のフラッシュシリカゲル６０（３５〜７５μｍ）はローズサイエンティフィク社
、カナダから購入した。１Ｈおよび３１Ｐスペクトルはプロトンケミカルシイフ
トの内部標準にＴＭＳを使用し、Brucker AM３００MHZ或いはVarian Unity ５０
０MHzあるいはBrucker DRX６００MHzスペクトロメーターで記録した。旋光度は
室温（２０〜２２℃）でパーキンエルマー２４１ホーラリメーターで測定した。
元素分析データーはアルバータ大学のマイクロ分析ラボラトリイで行った。電子
スプレイますスペクトル分析はMSSOB或いはMSD1SPC マススペクトルメーターで
行った。
【００４２】 実施例１：化合物２の調製 乾燥THF（35ml）中の化合物１（3.16g、7.69mmol）の溶液を−20℃に冷却する。
N-メチルモルホリン（0.76ml、0.70g、6.92ｍmol）およびクロロ蟻酸イソブチル
（0.94ｇ、0.90ml、6.92ｍmol）を加えた混合物は５分間攪拌し、乾燥THF（２ml
）に溶解したノニルアミン（1.27ml、0.99g、6.92ｍmol）を上記溶液に加えた。
混合物は１時間−20℃で攪拌した。残さはフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサ
ン：酢酸エチル、２：１）で精製し、化合物２（3.27g、79％）を得た。TLC:Rf
＝0.44（ヘキサン：酢酸エチル、３：１）。
【００４３】 実施例２ 化合物３の調製 化合物２（9.50g、19.47ｍmol）を乾燥THF（40ml）に溶解する。ピペリジン（10
ml）を加えて、混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を除去し、残さをフラッシ
ュクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、１：１、次にジクロロメタン中５
％メタノール）で精製して化合物３（5.64g、92％）を得た。TLC：Rｆ＝0.38（
ジクロロメタン中５％メタノール）。
【００４４】 実施例３ 化合物４の調製 テトラデカン酸（4.51g、19.78ｍmol）を乾燥THF（50ml）に溶解する。N-メチル
モルホリン（3.78ml、3.47g、34.4ｍmol）を加え、溶液を−25℃に冷却した。ク
ロロ蟻酸イソブチル（2.34ml、2.47g、8.06ｍmol）を滴下し、混合物を５分間攪
拌した。化合物３（5.40g、17.20ｍmol）の乾燥THF（50ml）溶液を上記の溶液に
滴下した。−20℃で30分間攪拌した後、混合物を１時間いないに室温まで温めた
。次に、メタノール（５ml）を加え、反応混合物を更に５分間攪拌した。真空で
濃縮し、残さはフラッシュクロマトグラフィ（ジクロロメタン：アセトン、30：
１および25：１）で精製し、化合物４（7.21g、80％）を得た。
【００４５】 実施例４ 化合物５の調製 化合物４（7.74g、14.77ｍmol）をトリクロロ酢酸−水（95：５、v/v、180ml）
に溶解し、溶液を室温で４時間攪拌した。次に溶媒を除去し、残さをフラッシュ
クロマトグラフィ（ジクロロメタン中に２〜４％メタノール）で精製し化合物５
（6.71ｇ、97％）を得た。
【００４６】 実施例５ 化合物８の調製 （１）化合物６：ドデカナル（25.0g、136ｍmol）、ブロモ酢酸エチル（25.0g、
150ｍmol）および150mlTHFの混合物に窒素雰囲気下で亜鉛粉末（19.6g、299ｍmo
l）を加えた。反応フラスコを超音波浴中に取り付け、超音波処理を開始した。
ヨウ素（3.5ｇ、27.2ｍmol）をゆっくりと反応フラスコに加えた。超音波処理２
〜３分後に反応は激しく始まった。次に超音波処理を呈しし、反応フラスコを超
音波浴から移動させた。亜鉛を濾過除去し、THF（10ml）で６〜７回洗浄した。
集めた濾過液は真空で濃縮した。淡黄色粘稠液体が得られた。ヘキサン（200ml
）を加え、5分間振とうさせた。白色固体が沈殿した。濾過し、ヘキサン（３×1
5ml）で洗浄した。集めた濾過液および洗浄液は乾燥状態まで濃縮し、残さはカ
ラムクロマトグラフィ（ヘキサン中10％酢酸エチル）で精製して純粋な化合物６
（22.2ｇ、60％）を得た。TLC：Rf＝0.25（ヘキサン中10％酢酸エチル）。
【００４７】 （２）化合物７：３−ヒドロキシミリスチン酢酸エステル化合物６（122.0ｇ、0
.5ｍmol）をエタノール（800ml）に溶解し、KOH（33.6ｇ）を加えた。反応混合
物は１時間還流し、次に氷浴で冷却後、10％HCl（1000ml）を加えた。析出した
白色固体は濾過除去し、簡単に乾燥させた（192.0g）。固体は沸騰へキサンで再
結晶させて白い結晶化合物７（98.2ｇ、90％）を得た。TLC:Rf=0.35（ジクロロ
メタン中５％メタノール）。
【００４８】 （３）３−ヒドロキシミリスチン酸−デヒドロアビエチルアミン塩：純デヒドロ
アビエチルアミン（文献21bに従い精製、131.0ｇ、459.6ｍmol）をヘキサン（3.
0L）およびジエチルエーテル（1.5L）の混合物に溶解した。化合物７（11.0ｇ、
450.8ｍmol）をジエチルエーテル（3.0L）に溶解し、上記アミン溶液に攪拌添加
した。添加後、直ちに結晶化が始まった。攪拌を停止し、反応混合物を１時間室
温に放置した。白色固体を濾別しヘキサンで洗浄した：ジエチルエーテル混合物
（１：１）。沈殿はメタノール（500ml）に溶解（加熱溶解）し、次にヘキサン
：ジエチルエーテル混合物（１：１、700ml）を加えた。混合物は冷蔵庫（−90
℃）に一晩保管した。白色固体が析出し、濾過して集めた。固体は融点が更に上
昇しなくなるまで再結晶を繰り返した。純（R）−塩の最終収量は38ｇ、40％。m
．p．131.5〜132℃。
【００４９】 2.10ppmでの二つの二重ピークの一組はただ１個の異性体の存在を特徴とする。
３−ヒドロキシミリスチン酸ラセミ体から生成した塩について、２個の二重ピー
クの二組はこの位置に出現する。NMRはこの分離効果を検知するため用いる事が
できる。
【００５０】 （４）化合物８：デヒドロビエチルアミンとミリスチン酸の塩（38.0ｇ）を２L
の丸底フラスコに入れ、炭酸ナトリウム飽和水溶液（1000ml）およびジエチルエ
ーテル（800ml）を加えた。混合物は30分間、激しく攪拌した。水相とエーテル
相を分離し、固体を集めた。固体は水（300ml）、エーテル（３×100ml）で洗浄
し、短時間乾燥させた。固体は完全に溶解するまで、１Lの２％HCl（水溶液）お
よび酢酸エチル（1.5L）で処理した。有機相は無水炭酸ナトリウムで乾燥し、濃
縮してR-に富む酸を得た。これを酢酸エチルおよびへキサンから再結晶して化合
物８（16.5g）を得た。〜95％e.e.[α]D 20＝−15.5（ｃ1.0、CHCl3）。
【００５１】 実施例６ 化合物９の調製 化合物８（16.0ｇ、65.6ｍmol）を無水酢酸エチルに溶解し、ブロモアセトフェ
ノン（15.66g、78.7ｍmol）およびトリエチルアミン（7.95g、78.7ｍmol））を
窒素雰囲気下で加えた。反応混合物を一晩攪拌した。白色固体が沈殿した。これ
を濾別し酢酸エチル（３×10ml）で洗浄した。集めた洗浄駅および濾液は蒸発さ
せ淡黄色固体を得た。このものをシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘ
キサン、１：８）により精製し白色結晶固体として化合物９（22.0ｇ、92％）を
得た。TLC：Rf=0.42（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）。1Ｈ ＮＭＲ。
【００５２】 実施例７ 化合物１０の調製 化合物９（500ｇ、1.381ｍmol）をピリジン（５ml）に溶解し、この溶液に４−
ジメチルエチルアミノピリジン（DMAP,8.46mg、0.68ｍmol）を加えた。次に生成
した混合物を氷浴で５分間冷却し、塩化ラウロイル（383μl、1.657ｍmol）を滴
下した。 TLC：Rf=0.34（酢酸エチル：ヘキサン、１：９）。
【００５３】 実施例８ 化合物１１の調製 化合物９（16.0ｇ、44.2ｍmol）をピリジン（150ml）に溶解し、DMAP（270mg、2
.2ｍmol）を加えた。塩化テトラデカノイル（13.1ｇ、53.0ｍmol）を冷水浴中に
反応混合物を保守しながら滴下した。反応混合物を室温で３時間攪拌した。TLC
：Rf=0.54（酢酸エチル：ヘキサン、５：１）。
【００５４】 実施例９ 化合物１２の調製 塩化ラウロイルを塩化パルミトイルで置換した以外は、化合物１０の調製で記載
したと同じ方法で合成した。化合物９（500mg、1.381ｍmol）および塩化パルミ
トイル（628.5μl）間の反応を終了し、溶媒除去からの残さを酢酸エチルで再溶
解し水洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。所望の生成物、
化合物１２を溶媒として酢酸エチル−ヘキサン（１：９）を用いるシリカゲルカ
ラム精製により無色固体（463.4mg、56％）として得た。追加の生成物（563.6mg
）は僅かに不純な形態で得られた。TLC：Rf〔α〕D 20＝＋2.0（c 1.0、クロロホ
ルム）。
【００５５】 実施例１０ 化合物１３の調製 化合物10（510mg）を酢酸エチル(18ml)中80％酢酸に溶解し、Zn粉末（1.0ｇ）を
添加した。全混合物を一晩攪拌しながら放置した。次の朝、反応物を追加のZn粉
末（400mg）で処理し、5時間さらに攪拌した。固体を次に濾過除去し、豊富な量
の酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮乾燥した。残さをフラッシュシリカカラム
（酢酸エチル：ヘキサン：酢酸、１：10：１％）で精製し、化合物１３（327ｇ
、82％）を０℃で冷却し無色固体として得た。TLC：Rf=0.22（酢酸エチル：ヘキ
サン、１：９）。〔α〕D 20＝1.2（c1.0、クロロホルム）。1Ｈ ＮＭＲ。
【００５６】 実施例１１ 化合物１４の調製 化合物１１（23.0ｇ）、亜鉛粉末（50g）および氷酢酸（350ml）の混合物を室温
で２時間攪拌した。亜鉛粉末を濾過除去し、酢酸エチル（100ml）で洗浄した。
合わせた濾過物を減圧下に濃縮し、２回トルエンで共沸させた。無色粘稠液の残
さをシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン中２％メタノール）で精製し
た。溶媒の蒸発後に純化合物１４（16.5ｇ、90％）を白い固体として得た。TLC:
Rf＝0.40（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）。〔α〕D 20＝−1.25（c 2.0、クロ
ロホルム）。1Ｈ ＮＭＲ。
【００５７】 実施例１２ 化合物１５の調製 化合物１２（429.9mg、0.716ｍmol）を酢酸エチル（4.4ml）に溶解し酢酸（17.6
ml）を添加した。亜鉛粉末（2.1ｇ）を添加した後、混合物を室温で一晩攪拌し
た。Znを次に濾過除去し充分な量の酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮し、フラ
ッシュシリカゲルカラム（酢酸エチル：ヘキサン：酢酸、1：10：１％）で精製
し化合物１５（245g、72％）を得た。TLC:Rf＝0.25（酢酸エチル：ヘキサン、1
：10）。〔α〕D 20＝−1.3（c 1.0、クロロホルム）。1Ｈ ＮＭＲ。
【００５８】 実施例１３ 化合物１５の調製 化合物９（5.0ｇ、13.8ｍmol）、ベンジルトリクロロアセタミデート（7.0ｇ、2
7.6ｍmol）、分子篩粉末（４Å、3.0ｇ）、無水ジクロロメタン（100ml）および
無水へキサン(100ml)を250mlの丸底フラスコに入れ30分間窒素雰囲気下に攪拌し
た。０℃まで冷却しトリグルオロ硫酸（0.414g、2.8ｍmol）を添加し5時間０℃
で攪拌した。反応はトリエチルアミン（2ml）で急に冷却した。純１６（6.0ｇ、
96％）を得た。TLC：Rf＝0.36。
【００５９】 実施例１４ 化合物１７の調製 化合物１４の調製で記載したと同じ方法で、化合物１７を化合物１６（6.0ｇ）
から亜鉛粉末（10.0ｇ）および氷酢酸(100ml)の存在で調製した。65％収率で白
い固体を得た。TLC：Rf=0.45．
【００６０】 実施例１５ 化合物１９の調製 （１）化合物１８：ドデシルアルコール（810mg、4.348ｍmol）、ピリジン（394
μl）およびジクロロメタン（0.5ml）の混合物を、トリフルオロメチルスルホン
酸無水物の冷却溶液（無水トリフリック、8.0mlのジクロロメタン中1.433ml）に
０℃で15分間ゆっくりと加えた。 TLC：Rf＝0.77．
【００６１】 （２）化合物１９：脂質９（1.05g、2.989ｍmol）および乾燥１，２−ジクロロ
エタン（25ml）中硫酸ナトリウム（7.0ｇ）を5分間攪拌し粗トリフレート１８溶
液（2.0mlの乾燥１，２−ジクロロエタン中1.433g）を添加した。 TLC：Rf=0.29．
【００６２】 実施例１６ 化合物２０の調製 化合物１４の合成のために記載したと同じ方法で、化合物２０を酢酸（12.0ml）
中Zn粉末（1.12ｇ）と化合物１９（1.02ｇ、1.922ｍmol）の反応から調製した。
TLC:Rf=0.20
【００６３】 実施例１７ 化合物２１の調製 （−）−DIP−Cl（9.6g、30ｍmol）を無水ジエチルエーテル（35ml、Na／ベンゾ
フェノンで新しく蒸留した）に窒素雰囲気下に溶解した。混合物を−40℃まで冷
却した。アリルマグネシウムブロマイド（0.9M溶液および27.7ml、25ｍmol）を
上記冷却した溶液に添加した。ドデカノールを乾燥エーテルに溶解し氷浴を用い
0℃に冷却した。 30分間室温で攪拌した上記反応混合物を−78℃まで冷却した。 TLC：Rf＝0.26．
【００６４】 実施例１８ 化合物２２の調製 化合物２０（250mg、0.61mmol）および２１（272mg、1.21 mmol）を乾燥ジクロ
ロメタン（５ml）に溶解した。DCC（377mg、1.83 mmol）およびDMAP（15.0mg、0
.12 mmol）を添加した。
【００６５】 実施例１９ 化合物２３の調製 化合物２２（280mg、0.45 mmol）をヘキサンに溶解し、酢酸（2ml）およびアリ
クオット（３滴）を加えた。混合物を０℃に冷却し、カリウムマンガネート溶液
（15ml水中980mg）を添加した。
【００６６】 実施例２０ 化合物２６の調製 （１）Ｄ−グルコサミン塩化水素（195ｇ、0.88 mmol）および重炭酸ナトリウム
（152ｇ、1.89 mmol）を機械的攪拌をしながらプラスチック容器に水（２Ｌ）で
溶解した。この混合物にトリクロロエトキシカルボニルクロライド（180mg、0.8
5 mmol）をゆっくり35分以内に添加した。添加の終了後、攪拌1.5時間攪拌を続
けた。反応混合物を次に10％HCl溶液（300ml）で酸化した。固体を濾過除去し水
（800ml）、ジエチルエーテル（500ml）で洗浄し、50℃で真空下に乾燥しＮ-Tro
c−保護Ｄ−グルコサミン（275ｇ、91％）を得て、次のステップに直接用いた。
（２）化合物２４：塩酸（ｇ）をベンジルアルコール（30ml、282 mmol）に12分
間０℃でバブルし、約1.45ｇのHClを得た。このベンジルアルコールおよび酸溶
液を次にＮ-Troc−保護Ｄ−グルコサミン（10.0ｇ、28.2 mmol）を含む丸底フラ
スコに添加した。懸濁液の混合物を100℃で25分間加熱し、加熱の際に、懸濁液
は次第に透明溶液になった。反応物を室温で30分間冷却後、へキサン（200ml）
で処理し激しくかき混ぜた。上の有機相を捨て、フラスコの底に残ったミルク状
固体を得た。異なる溶媒〔（酢酸エチル：ヘキサン（１：４、50ml）および酢酸
エチル（50ml）でミルク状固体を２回処理した。ミルク状固体をさらにヘキサン
（200ml）で処理し２４（8.72ｇ、70％）を粗生成物として得た。これは弁じる
アルコールからフリーであり次のステップの反応に使用した。 （３）化合物２６：化合物２４（3.14g、7.06 mmol）を乾燥アセトニトリル（50
ml）に懸濁した。
【００６７】 実施例９７ Ｔ-細胞増殖の測定 Ｔ−細胞増殖は標準3Ｈチミジン結合アッセイを用いて評価した。異なる脂質−
Ａ類似体でアジュバントした種々のリポソームワクチンに対応するＴ−細胞増殖
は表１−３および図３１−３３にまとめる。
【００６８】 表１ 脂質−Ａ類似体３３，４８および５８のＴ−細胞増殖およびインターフェ
ロン−ガンマ生成 表２ 脂質−Ａ類似体４８、５４、７０、７７および８６のＴ−細胞増殖および
インターフェロン−ガンマ生成 表３ 脂質−Ａ類似体８６、９４、１０２および１０４のＴ−細胞増殖およびイ
ンターフェロン−ガンマ生成 表４ 合成および天然脂質−Ａ類似体の致死毒性の比較 表５ テキストで用いた通常の省略 表６ 本発明で用いた脂質−Ａ類似体の構造のリスト 表７ 本発明で用いた化合物のＩＵＰＡＣ名のリスト 表８ アミノ酸の単一文字および３文字コード
【００６９】
【表１】
【００７０】
【表２】
【００７１】 実施例９８ インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）生成の測定
【００７２】
【表３】
【００７３】 実施例９９ 合成および天然脂質−Ａ類似体の致死毒性
【００７４】
【表４】
【００７５】
【表５】
【００７６】
【表６】
【００７７】
【表７】
【図面の簡単な説明】
【図１】天然脂質―Ａ構造の例、Ｅ．ｃｏｌｉからのＡおよびサルモネラ菌から
のＢ。
【図２】一般式（３）および（４）の新規脂質酸およびそれらの２例。
【図３】新規脂質構造を含む単糖類および二糖類脂質−Ａ類似体およびそれらの
２例。
【図４】均一ジ脂質鎖を含む二糖類脂質−Ａ類似体およびそれらの例。
【図５】脂質５の合成。
【図６】脂質の合成。
【図７】トリ−脂質２３の合成。
【図８】グルコサミン誘導体の合成。
【図９】化合物３３の合成。
【図１０】グリコシル化アクセプタの合成。
【図１１】グリコシル化ドナー４３の合成。
【図１２】二糖類４５の合成。
【図１３】化合物４８の合成。
【図１４】二糖類５１の合成。
【図１５】化合物５４の合成。
【図１６】化合物５８の合成。
【図１７】グリコシル化アクセプタ６４の合成。
【図１８】二糖類６７の合成。
【図１９】化合物７０の合成。
【図２０】アミン７０の合成。
【図２１】化合物７７の合成。
【図２２】グリコシル化７９の合成。
【図２３】グリコシル化ドナー８３の合成。
【図２４】化合物８６の合成。
【図２５】グリコシル化ドナー９１の合成。
【図２６】化合物９４の合成。
【図２７】グリコシル化アクセプタ９８の合成。
【図２８】アミン１００の合成。
【図２９】化合物１０２の合成。
【図３０】化合物１０４の合成。
【図３１】脂質−Ａ類似体３３、４８、５８または天然脂質−Ａとアジュバント
したＭＵＣ１−ベースのリポソームワクチンで免疫にしたマウスでのＴ−細胞増
殖（ＣＰＭ、分当り）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ、pg／ml）
生産。
【図３２】脂質−Ａ類似体４８、５４、７０、７７、８６または天然脂質−Ａと
アジュバントしたＭＵＣ１−ベースのリポソームワクチンで免疫にしたマウスで
のＴ−細胞増殖（ＣＰＭ、分当り）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−
γ、pg／ml）生産。
【図３３】脂質−Ａ類似体８６、９４、１０２，１０４または天然脂質−Ａとア
ジュバントしたＭＵＣ１−ベースのリポソームワクチンで免疫にしたマウスでの
Ｔ−細胞増殖（ＣＰＭ、分当り）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ
、pg／ml）生産。
【図３４】リポペプチドＢＰ１−１４８の構造、腫瘍結合ＭＵＣ１マウスから誘
導した改変２５−アミノ酸配列（アミノ酸の単一文字コード）。
【図３５】リポソーム処方に組み込まれるビールスおよび腫瘍抗原から誘導され
たペプチドとグリコペプチドの例。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１３年６月１４日（２００１．６．１４）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【化６３】 式中、ＸはＯおよびＮＨであり；Ｒは置換または非置換、分枝または直線の、飽
和または不飽和Ｃ１−２０脂肪族炭化水素、炭水化物単位または任意の保護基で
あり；Ｒ１およびＲ２は任意の脂肪族または芳香族置換基、または任意の保護基
であり；Ｒ３はフェニルまたは置換フェニル基である。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【化６４】 式中、Ｘ、Ｒ、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３はステップ（１）の出発物質におけるよう
に定義され、Ｒ４はアリル、または置換または非置換ベンジルまたはフェニル基
である。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項５０】前記エピトープが腫瘍結合エピトープである請求項４４記載のリ
ポソーム。
【手続補正書】
【提出日】平成１４年７月１５日（２００２．７．１５）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】合成脂質−Ａ類似体およびその使用
【特許請求の範囲】
【化１】 式中、少なくともＲ1，Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4，Ｒ5は次の構造式から選択され
【化２】 式中、残りのＲ1，Ｒ2，Ｒ3，Ｒ4およびＲ5は、たとえあるとしても、水素、Ｒ
−、−ＣＯＲおよび次の構造式から選択され、
【化３】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は水素、または置換または非置換、分枝または直線のＣ 1-20 飽和または不飽和脂肪族炭化水素；Ａ，ＢおよびＬは独立して−ＣＨ2−、
−Ｃ（＝Ｏ）および−Ｃ（＝Ｓ）−基から選択され； 各Ｘは−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ2、および−ハロゲンからなる群から独立して選
択され； ｍおよびｎは独立して０と１０の間の整数の範囲から選択され、 Ｘ1およびＸ2は−Ｏ−または−ＮＨ−であり、 Ｙ1およびＹ2は独立して−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）2、−ＣＯＯＨ、−ＯＳ
Ｏ3Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）2および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ2ＣＨ2ＮＨ2
）からなる群から選択され、 ＺはＨ，−ＣＨ2Ｅ、または−ＣＨ2ＭＧであり、式中、Ｅは−水素、−ハロゲン
、−ＯＨ、−ＮＨ2、−ＯＳＯ3Ｈ、−ＳＯ3Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2または−Ｏ
Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2；Ｍは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ(＝Ｏ)−
、−ＯＣ＝（Ｓ）−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−；Ｇは−水素、または飽和また
は不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素であり、 または生理学的に受容できるそれらの塩。
【化４】
【化５】
【化６】 Ｒ2およびＲ3が水素原子であり；Ｒ4が次の基であり
【化７】 そしてＲ5が次の基である
【化８】 請求項４記載の化合物。
【化９】 基Ｒ1、Ｒ4およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項５記載の化
合物。
【化１０】 基Ｒ1、Ｒ4およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項５記載の化
合物。
【化１１】 そしてＲ2が水素原子または次の基であり
【化１２】 Ｒ3が水素原子であり；そしてＲ4が次の基である請求項４記載の化合物。
【化１３】
【化１４】 Ｒ1、Ｒ2およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）であり、基Ｒ4のそれが（Ｓ
）である請求項８記載の化合物。
【化１５】 式中、Ｒ1＝Ｒ4 ＝Ｒ5およびＲ1，Ｒ2，Ｒ3、Ｒ4およびＲ5が−Ｒ，−ＣＯＲお
よび次の構造式から選択される。
【化１６】 式中、各Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’が独立して水素、置換または非置換、分枝または直酸
、飽和または不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素であり；Ａ、ＢおよびＬは独立してＣ
Ｈ2、ＣＯおよびＣＳ基であり；Ｘは−ＯＨ，−ＳＨ、−ＮＨ2および水素であり
；ｍおよびｎは０と１０の間の整数であり、 Ｘ1およびＸ2は−Ｏ−または−ＮＨ−であり、 Ｙ1およびＹ2は独立して−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）2、−ＣＯＯＨ、−ＯＳ
Ｏ3Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）2および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ2ＣＨ2ＮＨ2
）からなる群から選択され、 ＺはＨ，−ＣＨ2Ｅ、または−ＣＨ2ＭＧであり、式中、Ｅは−水素、−ハロゲン
、−ＯＨ、−ＮＨ2、−ＯＳＯ3Ｈ、−ＳＯ3Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2または−Ｏ
Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）2であり；Ｍは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ（
＝Ｏ）−、−ＯＣ＝（Ｓ）−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり；Ｇは水素、置
換または非置換した、分枝または直線、飽和または不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素
であり、 前記化合物がフリーの酸または生理学的に受容できるそれらの塩である。
【化１７】 式中、Ｒ1＝Ｒ4＝Ｒ5。
【化１８】 そしてＲ2が水素原子、ｎ−プロピル基または次の構造式であり
【化１９】 そしてＲ3が水素原子である。
【化２０】 そして基Ｒ1、Ｒ4およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項１４
記載の化合物。
【化２１】 そして基Ｒ1、Ｒ4およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項１４
記載の化合物。
【化２２】 Ｒ1、Ｒ4、およびＲ5が次の構造式の同じ基であり
【化２３】 そして基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項
１４記載の化合物。
【化２４】 Ｒ1、Ｒ4、およびＲ5が次の構造式の同じ基であり
【化２５】 そして基Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4およびＲ5のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項
１４記載の化合物。
【化２６】 式中、Ｒ1およびＲ2の少なくとも１は次の基から選択され
【化２７】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は独立して水素、または置換または非置換した、分枝ま
たは直線の、飽和または不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素であり；Ａ，ＢおよびＬは
独立してＣＨ2およびＣＯ基であり；ｍおよびｎは０と１０の間の整数であり、
残りのＲ1またはＲ2は水素、基−Ｒ，−ＣＯＲまたは次の構造式から選択され
【化２８】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は独立して水素、または置換または非置換した、分枝ま
たは直線の、飽和または不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素であり；Ａ，ＢおよびＬは
独立してＣＨ2、ＣＯおよびＣＳ基から選択され；Ｘは−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ2 および水素であり；ｍおよびｎは０と１０の間の整数である。
【化２９】
【化３０】 そしてＲ2がＣＨ3（ＣＨ2）12ＣＯの基である請求項２０記載の化合物。
【化３１】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は独立して水素、および置換または非置換した、分枝ま
たは直線の、飽和または不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素であり；Ａ，ＢおよびＬは
独立して−ＣＨ2−、−Ｃ（＝Ｏ）−、および−Ｃ（＝Ｓ）−基から選択され；
ｍおよびｎは独立して０と１０の間の整数から選択される。
【化３２】
【化３３】
【化３４】
【化３５】
【化３６】 式中、Ｒ1がベンジルオキシ、アリルオキシ、ヒドロキシ、またはＯＣ（ＮＨ）
ＣＣｌ3の群であり； Ｒ2が水素、−ＣＯＯＣＨ2ＣＣｌ3、または次の構造式からなる基から選択され
；
【化３７】 式中、ｍおよびｎは独立して０と２０の間の整数から選択され； そしてＲ3はＣＨ3（ＣＨ2）zＣＯまたは次の構造式であり
【化３８】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり、そしてｘ、ｙおよびｚは独
立して０と２０の間の整数から選択される。
【化３９】 式中、Ｒ1はベンジルオキシ、アリルオキシ、ヒドロキシル、またはＯＣ（ＮＨ
）ＣＣｌ3の基であり； Ｒ2が水素、−ＣＯＯＣＨ2ＣＣｌ3、または次の構造式から選択され；
【化４０】 式中、ｍおよびｎは独立して０と２０の間の整数から選択され； そしてＲ3はＣＨ3（ＣＨ2）zＣＯまたは次の構造式であり
【化４１】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり； ｘ、ｙおよびｚは独立して０と２０の間の整数から選択され；そして Ｒ4が水素またはＰ（Ｏ）（ＯＢｎ）2である。
【化４２】 式中、Ｒ1はアミノラジカル、フタルアミドラジカル、または次の構造式であり
【化４３】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり； ｘおよびｙは独立して０と２０の間の整数から選択され、 Ｒ2はアリルまたはベンジルである。
【化４４】 式中、Ｒ1が水素、ＣＯＯＣＨ2ＣＣｌ3または次式の１であり；
【化４５】 式中、ＡおよびＢは独立して−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘ、ｙお
よびｚは独立して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ2はベンジルまたは次の構造式であり
【化４６】 式中、Ｄはベンジル、ＣＨ3（ＣＨ2）2またはＣＨ3（ＣＨ2）yＣＯであり； ｘ、ｙおよびｚは独立して０と２０の間の整数から選択される。
【化４７】 式中、Ｒ1は次の構造式の群であり
【化４８】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
２０の間の整数から選択され Ｒ2は水素、アリル、ベンジルまたは次の構造式であり
【化４９】 式中、ｚは０と２０の間の整数であり； Ｒ3は水素、ＣＯＯＣＨ2ＣＣｌ3、または次の構造式の１であり、
【化５０】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｍ、ｎ、ｘおよびｙは独立
して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ4は次の構造式の基であり
【化５１】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
２０の間の整数から選択される。
【化５２】 式中、Ｒ1は次の構造式の基であり
【化５３】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
２０の間の整数から選択され； Ｒ2は水素、アリル、ベンジルまたは次の構造式であり
【化５４】 式中、ｚは０と２０の間の整数であり； Ｒ3は水素、ＣＯＯＣＨ2ＣＣｌ3、または次の構造式の１であり、
【化５５】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｍ、ｎ、ｘおよびｙは独立
して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ4は次の構造式の群であり
【化５６】 式中、Ａは−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
２０の間の整数から選択され； Ｒ5は水素または（ＢｎＯ）2Ｐ（Ｏ）である。
【化５７】 式中、Ｒ1は次の構造式から選択され
【化５８】 式中、ＡおよびＢは独立して−ＣＨ2−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘ、ｙお
よびｙは独立して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ2はベンジルまたは次の構造式の基であり
【化５９】 式中、ｚは０と２０の間の整数であり； Ｒ3は水素、ＣＯＯＣＨ2ＣＣｌ3、または次の構造式であり、
【化６０】 式中、ＡはＣＨ2またはＣＯであり；ｘ、ｙおよびｚは独立して０と２０の間の
整数であり； Ｒ4は次の構造式の基であり
【化６１】 式中、ＡはＣＨ2またはＣＯであり；ｘおよびｙは独立して０と２０の間の整数
である。
【化６２】 式中、ＸはＯおよびＮＨであり；Ｒは置換または非置換した、分枝または直線の
、飽和または不飽和Ｃ1-20脂肪族炭化水素、炭水化物単位または任意の保護基で
あり；Ｒ1およびＲ2は任意の脂肪族または芳香族置換基、または任意の保護基で
あり；Ｒ3はフェニルまたは置換フェニル基である。
【化６３】 式中、Ｘ、Ｒ、Ｒ1，Ｒ2およびＲ3はステップ（１）の出発物質におけるように
定義され、Ｒ4はアリル、または置換または非置換ベンジルまたはフェニル基で
ある。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】 本発明は、１９９９年１１月１５日に出願されたＵＳ出願番号６０／１６４，９
２８の仮出願の非仮出願である。この先の仮出願をここにその全体を参考文献と
して組み込む。 本発明はバクテリア脂質−Ａの新規な合成構造擬態およびそのような類似体の合
成方法に関する。バクテリア脂質−Ａ組成物はアジュバントとして広く用いられ
ワクチン処方に用いられる種々の抗原への免疫応答を高める。合成アジュバント
は、単一の化学的に定義された実在物であり、リポソーム起源または正常の混合
物のいずれかのワクチン処方のために必要な同種性へと導く。この発明は、非常
に毒性は低いが天然脂質−Ａのそれらと比較できるアジュバント性質をもつ脂質
−Ａ類似体の設計と合成を含む。これら合成構造は非天然脂質、非天然化学結合
および天然脂質−Ａ構造間には見られない脂質鎖の組み合わせを組み込む。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】 リポ多糖類（ＬＰＳ）はグラム−陰性バクテリアの外膜の外小葉に専ら見られる
ユニークな糖脂質である、構造は1a,b、バクテシアＬＰＳ分子が３つの主領域：
Ｏ−抗原領域、コア領域および脂質−Ａ領域をもつ。Ｏ−抗原領域は種−特異的
多糖類部分であり、生物体の抗原特異性を決定する。コア領域はオリゴ糖類鎖で
あり、外膜の完全な状態を維持する役割を演じることができる。脂質−Ａ領域は
保存され適所にリポ多糖類を保持する疎水性アンカーとして働く。
【０００３】 ＬＰＳは、注入されるときまたはグラム陰性バクテリア感染により蓄積されると
き、哺乳動物の多くの異常生理学の引き金であることが知られている1b。ＬＰＳ
の脂質−Ａ成分の発見前に、「エンドトキシン」の語は一般にＬＰＳの効果を記
載するために用いられた。グラム−陰性バクテリアからのエンドトキシンは熱安
定性で、細胞結合し、発熱性で潜在的に致死性である。そのエンドトキシン活性
に加えて、ＬＰＳはまた種々の生物活性を示し、免疫アジュバント活性、Ｂ−リ
ンパ球有糸分裂誘発、マクロファージ活性化、インターフェロン生成、腫瘍回帰
等を含む。Ｏ−抗原およびコア領域の両方がＬＰＳの毒性活性を調節する間に、
一般に疎水性脂質−Ａ部分はエンドトキシンのこれら病態生理学効果の原因であ
ることが知られている2a,b。
【０００４】 脂質−Ａは１−Ｏ−および４’−Ｏ−位置でホスホリル化したβ−（１，６）−
結合Ｄ−グルコサミン二糖類からなる。ヒドロキシル化および非ヒドロキシル化
脂肪酸は二糖類のヒドロキシル基およびアミノ基に結合し脂質−Ａに疎水性を与
える。図１は天然脂質Ａ構造の２例、Ｅ．coliから単離した化合物A3a,b、およ
びサルモネラ種から単離した化合物Ｂ4a-dを示す。タカダとコタニはエンド−毒
性と他の生物学的活性のための脂質−Ａの構造の必要性の研究を行い5a、種々の
グループによる合成脂質−Ａ類似体の入手可能性に感謝している6-10。リビら5b は毒性に必要な最小の項像がビスホスホリル化β−（１，６）−結合ジ−グルコ
サミンコアであり、これに長い鎖の脂肪酸が結合していることを示した。脂質鎖
の最適数は、ヒドロキシアシルまたはアシルオキシアシル基の形で、脂質−Ａ6
の強いエンドトキシンおよび関連した生物学上の活性を与えるために二糖類バッ
クボーンに要求されることが明らかである。免疫アジュバント活性のために、し
かしながら、脂質−Ａの構造の要求はエンドトキシン活性およびＩＦＮ−α／β
またはＴＮＦ−誘発の性質5に必要なものほど強固ではない。しかしながら、全
脂肪酸の除去は脂質−Ａに通常あるとする全生物活性を排除する。
【０００５】 さらに、いずれかのホスフェート基の除去はアジュバント活性の相当するロスな
しに毒性のかなりのロスとなる。モノホスホリル脂質−Ａのビオアッセイは、毒
性および発熱性応答を顕在化する際にモル基準で１０００倍低い効果であったが
、それは免疫刺激活性でのジホスホリル脂質−Ａ（およびエンドトキシン自体）
に匹敵していた11a。Ｅ.coliおよびサルモネラ菌からのジホスホリル脂質−Ａは
毒性が高いことが知られているが、通常ＬＰＳと会合した多くの生物学的活性を
保持しながらＥ.coliからのモノホスホリル脂質−Ａは毒性を減らした11b、c、d 。
【０００６】 脂質−Ａの効果のある生物学的活性は有用な応用を開発することに多くの研究努
力が向けられた。例えば、脂質−Ａ生合成の阻害はアンチバクテリア薬12,13に
対し新規の標的活動であり、この阻害機構を通して作用する未来の薬は新規クラ
スのアンチビオチックを構成するであろう14,15。脂質−Ａの免疫刺激活性は、
改変した脂質−Ａ構造および類似体を用いることにより新規治療の抗−腫瘍剤16 、17 および免疫アジュバントを開発するために研究された。さらに、脂質−Ａ類
似体の治療薬は、マクロファージとの相互作用を阻害する能力に基づいたセプシ
ス18の治療のため、および脂質−Ａの毒性活性のための拮抗薬として研究された
。最近、エイサイ19はセプシスの治療のための効力ある合成脂質−Ａアンタゴニ
ストを開発した。
【０００７】 障害と関連した脂質−Ａ／ＬＰＳのため、および結合した毒性のない効力あるア
ジュバントのための有効な治療が必要である。天然源からの改変していない脂質
−Ａの高毒性は製薬としての一般的使用を妨げている。天然産の脂質−Ａの主要
な欠点は製薬学的に受容できる純度をもち、再生活性および安定性の充分な物質
に近づくことである。天然産の脂質−Ａは脂質鎖の数を変える脂質−Ａの成分を
含む細胞壁の数種の化合物の混合物である。天然脂質−Ａ生成物中のこのような
異成分は２つの起源に帰する：（１）脂質−Ａ部分の集合での生合成変異性およ
び（２）製造および精製中の脂質−Ａバックボーンからの脂肪酸のロス。したが
って、混合物の組成の再現性という意味で製造プロセスを制御することは難しく
、それは生物活性および毒性でかなりの結果をもたらす。例えば、アジュバント
活性の削減はアジュバントとして脂質−Ａで処方された抗原への免疫応答の削減
に導く。天然脂質−Ａの処理中にかなりの数の脂質鎖のロスはアジュバントおよ
び他の生物活性のロスとなる。したがって、脂質−Ａ分子の脂質鎖は、強力な免
疫応答へと導く、マクロファージおよび他の抗原を与える細胞（ＡＰＣ）に抗原
の内面化のようなアジュバント化のかなりの役割を演じることが明らかである。
【０００８】 脂質−Ａ類似体が構造的に複雑であることが認められるが、化学合成は勿論最も
良い選択肢であり、天然源からの脂質−Ａに接近することに関連した困難性を解
消する。脂質の自然の組み合わせは自然に存在する脂質多様性と呼ばれる。似た
炭素長である脂質に付随する一様性があるので本発明の合成脂質には脂質の多様
性はない。本発明はいくつかの新規モノ−ホスホリル化脂質−Ａ類似体の設計お
よび合成に関し、各々（Ｉ）および（ＩＩ）（図３）のような非天然脂質の組み
合わせ、または重要な脂質（図４）の非天然の組み合わせからなる。次の特徴は
、天然源から得られたものおよび／または当該分野で報告されたものから本発明
に開示された合成脂質−Ａ構造を特徴づける。
【０００９】 １）モノホスホリル化：天然からの化学的に改変しない脂質−Ａ構造は１−およ
び４’位置で２個のホスフェート基をもつが、本発明での合成脂質−Ａ類似体は
４’位置で１個のホスフェート基をもつ。 ２）非天然脂質の組み合わせ：化合物３３および１０２（図３）のような分子は
少なくとも１個の新規で非天然の脂質（ＩまたはＩＩ）を含む。 ３）脂質の非天然の組み合わせ：これは脂質−Ａ類似体であり均一の鎖長の脂質
をもち、組み合わせは天然には見出されずそれらの合成は従来知られていない。
化合物５４と８６（図４）はこのカテゴリイに入る。化合物７０（図１９）は同
じようであるが、３−Ｏ−位置にｎ−プロピル基を含み、非天然エーテル結合を
もつ短非天然アルキル基を組み込む脂質−Ａ類似体の例である。
【００１０】 この発明に開示されたすべての合成脂質−Ａ構造は、脂質−Ａ構造（図１）を誘
導する天然産のＥ．coliおよび／またはサルモネラからの擬態であることが期待
される。
【００１１】
【課題を解決するための手段】 低毒性をもつアジュバント活性のための脂質−Ａ分子に必要な最小の構造を詳述
するいくつかの刊行物があるが、この活性を維持するのに必要な構造的特徴の系
統的研究はまだない。 いくつかの将来有望なアジュバントは現在臨床研究中であるが、アジュバントと
して構造的に限定された分子はヒト治療ワクチンとともに使用するためには市販
されていない。このような将来有望なアジュバントの１例は、バクテリア培養地
から精製された天然脂質−Ａ生成物である。天然脂質−Ａアジュバント生成物は
脂質鎖の数を変えるいくつかの脂質−Ａ成分の混合物を含む。脂質鎖エステルは
炭水化物コアに結合し、細胞壁の加水分解をコントロールする間に開裂すること
ができ多くの成分を生成する。これら製剤に関係した主な問題の一つは組成中の
不一致とアジュバントとしての性能であり、後者はワクチンによる治療の有効性
に多いに不可欠である。他の追加となる因子、例えば高い生成コストや最終製薬
組成中の活性成分を決定することの難しさはこのような天然源からのアジュバン
トを市販品として魅力のないものにする。
【００１２】 合成脂質−Ａ類似体は天然産のアジュバント製剤よりもいくつかの利点をもつ。
合成化合物は単一構造をもつことが化学的に明らかにされ、したがって最終組成
への製造からの追跡やコントロールを容易にする。合成生成物はコストが安く品
質と性能の両方での一貫性を保持しながら商業上のスケールアップに容易に適合
できる。
【００１３】 本発明では、新規の脂質−Ａ類似体を設計し、合成し最後にリポペプチドとして
、抗原由来の癌結合ムチン（ＭＵＣ１）を含むリポソームワクチンに組み込み、
アジュバント活性を評価する。本発明の顕著な特徴を以下に記載する。
【００１４】 新規の脂質構造 任意所定の天然脂質−Ａ構造では、脂質の分担は均一の長さでも構造でもないが
、天然に最も普通に見出される脂質は（Ｒ）−３−ヒドロキシ−テトラデカン酸
（３−ヒドロキシミリスチン酸）およびその３−Ｏ−アシル化誘導体である。脂
質多様性は天然脂質−Ａ構造間の最も顕著な変化に最も寄与する。それらはすべ
てエステルとアミドボンドによって糖のヒドロキシとアミノ基にそれぞれ結合す
るが、変化は結合した脂質の数、各脂質鎖の長さおよび脂質鎖内に含まれる官能
基を含む。これらの変化は全体の脂質−Ａ分子の種々の生物学的ファンクション
および更に重要なことにはそのアジュバント性に貢献すると信じられている。化
学的に言えば、エステル結合は生理学上の状態下に加水分解を受け易いので不安
定である。脂質鎖の漸次のロスはゆっくりとアジュバントの活性をワクチンの長
期貯蔵下に減らし、それらの貯蔵寿命を減らす。エステルの代わりに非天然であ
るが安定なエーテル結合の導入、または両者の組み合わせはアジュバントの安定
性を高め、ワクチン製剤の貯蔵寿命を長くする。脂質−Ａ類似体の合成における
主な利点は脂質鎖およびそれらの結合の多様性を用いて、安全で安定なアジュバ
ントとしての有効性を達成するように分子が設計されることである。
【００１５】 これらの特徴に合わせて、我々は豪勢脂質−Ａ類似体を構築するため一般式（３
）および（４）（図２）をもつ新規の合成脂質酸を設計した。化合物５および２
３は本発明では２つの特例の一般構造（３）および（４）として調製された。化
合物５はアスパラギン酸部分を含み、β−アミノ酸としてみとめられる。その絶
対構造は（Ｒ）−３−ヒドロキシ−テトラデカン酸に相当し、化合物５は（Ｒ）
−３−アシルオキシ−テトラデカン酸の擬態であると考えられる。化合物２３は
エーテル結合を含むトリ−脂質脂肪酸であり、全分子の安定性を高めるために組
み込まれる。エステルを基礎としたトリ−脂質構造は今までは天然脂質−Ａ類似
体に発見されなかったが、それらの存在は完全に排除されてはいない。本発明は
また脂質多様性を示すもののアジュバント活性を比較するため均一の脂質不随事
項をもつ脂質−Ａの合成に焦点を合わせる。
【００１６】 一般式（３）および（４）（図２）の脂質は新規設計であり、したがってそれら
を組み込む対応する脂質−Ａ構造はすべて特徴的である。２つのタイプの脂質−
Ａ類似体、単糖類（１）および二糖類（２）（図３）は、本発明の一部として設
計され合成された。 少なくとも１のＲ1およびＲ2は独立して（Ｉ）および（ＩＩ）（図３）から選ば
れる構造（１）の単糖類誘導体は、天然脂質−Ａ構造の還元されない末端糖の特
色をなす。化合物３３（図９）はこのような構造の１例である。 少なくとも１のＲ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5が独立して構造（Ｉ）および（Ｉ
Ｉ）（図３）から選ばれる構造（２）の二糖類誘導体は天然脂質−Ａ構造のモノ
ホスホリル化類似体である。化合物５８（図１６）、７７（図２１）、１０２（
図２９）および１０４（図３０）はそのような構造の特徴をもついくつかの例で
ある。
【００１７】 均一脂質付随事項をもつ脂質−Ａ類似体 脂質−Ａの脂質多様性は化学合成による大規模生産には複雑すぎ実際的でない分
子にする。本発明の一部として設計された化合物の主な特徴の一つは、二糖類の
バックボーンの２−アミノ、２’−アミノ、および３’−Ｏ位置の脂質置換基が
同一であり、エーテルまたはエステル結合ジ脂質構造フラグメントから構成され
ていることである。そのような特徴は図４にまとめてある。化合物は一般式（２
）を有し、Ｒ1、Ｒ4およびＲ5は等しくジ脂質構造（III）をもつ。特異的化合物
は本発明では、構造５４（図１５）、７０（図１９）、８６（図２４）および９
４（図２６）のような、代表例として調製される。
【００１８】 脂質−Ａ類似体の調製のための新規プロセス 本発明は脂質−Ａ類似体（１）および（２）の合成のための新規方法を含む。こ
こに開示された一般的合成ルートは本発明の種々置換された脂質−Ａ類似体を調
製する。異なる類似体は別の出発物質を用いて容易に得られる。詳細は添付図面
および実施例にまとめた。
【００１９】 単糖類誘導体３３の合成方法は図９に示され、二糖類誘導体４８は図１０−１３
に示される。この新規方法の重要な特徴は異なる炭水化物構築ブロックの組み合
わせを用い、保護基戦略および特異的構造を達成するための試薬を用いる一般的
戦略である。例えば、グルコサミン誘導体の４，６−ベンジリデン保護はリン酸
塩基を導入できる４−ＯＨをフリーにするため選択的開環の自由を与える。リン
酸塩基を保護したベンジルエステルは、２段階法で導入され、分子上の他のベン
ジル基と共に、触媒による水素添加を通じて合成の最終段階で、また容易に脱保
護される利点を与える。化合物５４、５８、７０および７７の合成のための更な
る例は図１４−図２１に記載される。
【００２０】 この方法はさらに改変してさらに有効な方法を与え、特に炭水化物バックボーン
の両アミノ基に同じ置換基をもつ化合物の調製に有用である。図２２−２４は化
合物８６の合成をこの改変したプロセスを用いて示す。
【００２１】 この改変したプロセスでは、ホスフェート基はグリコシド結合が形成される前に
単糖類誘導体に導入され、グリコシル化アクセプターは４−ＯＨと６−ＯＨの両
方に保護されていない基をもち（例えば図２２の化合物７９）、簡単な経路によ
って調製される。全プロセスに含まれるステップは、材料がさらに高価になり取
り扱いが特にさら特に困難な二糖類段階で減らされる。プロセスは大規模生産に
設計され脂質−Ａ類似体のグラムスケール合成に非常に有効であった。追加例の
化合物９４、１０２および１０４はこの改変したプロセスで調製され、図２５−
３０に記載する。 本発明に開示された戦略上の中間体は脂質−Ａ類似体の合成に用いられ文献では
未知である。
【００２２】 リポソーム処方 リポソームは極性脂質の物理的セルフアセンブリイによって生成され、これはリ
ポソームの膜構成を画定する。リポソームは単一層またはマルチ層小胞として種
々のサイズで形成される。そのようなリポソームは、それ自体免疫性をもたない
小分子からなるが、マクロ分子粒子のように振る舞い強い免疫特性を示す。
【００２３】 脂質のセルフアセンブリイ性の利点を考慮すると、１またはそれ以上の免疫原を
脂質粒子の一部になる極性脂質に結合させる事ができる。各免疫原は１またはそ
れ以上の抗原決定因子（エピトープ）からなる。これらエピトープはＢ−細胞エ
ピトープ（抗体により認識）またはＴ−細胞エピトープ（Ｔ−細胞により認識）
である。リポソームは結合した免疫原によって顕在化された免疫応答をアジュバ
ントするように働くことができる。さらに高い局地有効濃度をもつので免疫原と
単に混合したアジュバントよりもさらに有効に働くようだ。
【００２４】 さらに、ハプテンは前記抗原の代わりに結合させることができる。免疫原のよう
に、ハプテンは抗原決定因子からなるが、定義によりそれ自体の免疫応答を引き
出すには小さすぎる（代表的には、ハプテンは５，０００ダルトンより小さい）
。この場合に、脂質部分はアジュバントとして働くが、免疫原キャリヤとしても
働き、ハプテンと脂質の結合は合成免疫原として働く（すなわち、体液および／
または細胞免疫を顕在化させる物質）。
【００２５】 脂質が免疫原キャリヤとして働かないとしても、リポソームボーンハプテンはな
お合成抗原として働く（すなわち、抗体またはＴ−細胞のような、体液または細
胞免疫システムの成分によって認識される物質）。「抗原」の語はハプテンと免
疫原の両方を含む。 従って本発明は膜がここに開示したような脂質Ａ類似体、少なくとも１のＢ−細
胞またはＴ−細胞エピトープからなるリポソームを企図する。
【００２６】 我々はリポソーム膜を形成するリポ−ペプチド、グリコ−リピドおよびグリコ−
リポ−ペプチドの形でいくつかの合成抗原を設計した。同様に、よく定義された
構造特性の合成脂質−Ａ分子をリポソーム膜にアンカーすることができる。
【００２７】 バクテリアアジュバント調製とは異なった方法で、合成脂質−Ａ類似体がリポソ
ーム膜に構造的によく画定された脂質に貢献する。このような画定された構造は
処方後に「活性」な膜成分を再断言する義務を減らすだけでなく、またリポソー
ム膜の画定へ貢献する。そのようなリポソームはアジュバントとして合成脂質−
類似体および抗原として合成リポペプチドを含む「全体的に合成ワクチン処方物
」と呼ばれる。
【００２８】 エピトープ 本発明のエピトープはＢ−細胞またはＴ−細胞エピトープであり、それらは任意
の化学性質であり、ペプチド、炭水化物、脂質、グリコペプチドおよびグリコリ
ピドを限定なしで含む。エピトープは天然産のエピトープと同一、または天然産
のエピトープの改変体である。
【００２９】 Ｂ−細胞ペプチドエピトープは代表的には、長さが少なくとも５個のアミノ酸、
さらに少なくとも６個のアミノ酸、またさらに少なくとも７個または８個のアミ
ノ酸であり、連続（「線形」）または非連続（「配座」）（後者は物理的近接へ
の第一級アミノ酸配列の非隣接部分をもたらす蛋白質の折り畳みによって形成さ
れる）である。Ｔ−細胞ペプチドエピトープは直線であり、通常８ないし１５、
さらに９−１１のアミノ酸の長さである。
【００３０】 関心のあるエピトープは特異的にあるいは病原体、または腫瘍と結合したものを
含む。細胞内、表面、または病気の原因である有機体の分泌抗原によって存在す
るならば、またはビールスの場合には、ビールス粒子と結合しているかまたはビ
ールスによって感染した細胞に特異的であるならば、エピトープは特定の感染症
と結合していると言える。特定の腫瘍の細胞内、表面または分泌抗原によって示
されるならば、特定の腫瘍と結合していると言える。問題の腫瘍タイプの全細胞
ラインによって、または特定の腫瘍の全細胞によって、または腫瘍の全寿命の間
に存在する必要はない。問題の腫瘍に特異的である必要はない。エピトープは一
般に、任意の腫瘍（癌、ネオプラズム）と結合しているならば「腫瘍結合」と言
われる。
【００３１】 「病気結合エピトープ」はまた任意の非天然産エピトープを含み、問題の病気と
自然に結合したエピトープに充分類似しており、自然の病気エピトープを認識す
る細胞毒のリンパ球は類似した非自然のエピトープを認識する。類似したコメン
トは「腫瘍結合エピトープ」に当てはまる。
【００３２】 さらに頻繁に他の源よりは特定の源と結合するならば、エピトープは特定の源（
例えば病気原因の有機体または腫瘍）であると言える。有用な予防、治療または
診断効果がまだ得られるならば、絶対的な特異性は必要がない。
【００３３】 「腫瘍−特異的」エピトープの場合には、それは腫瘍、他の腫瘍、または通常細
胞と結合する場合が多い。好ましくは、問題の腫瘍との結合の際の発生頻度と、
（ａ）腫瘍が誘導されるタイプの通常細胞、および（ｂ）少なくとも１の他のタ
イプの腫瘍との結合の際の発生頻度との間の統計学上の有意な（ｐ＝0.05）差で
ある必要がある。通常細胞よりも（任意のまたは全タイプの）腫瘍と頻繁に結合
しているので、一般にエピトープは「腫瘍−特異的」であると言える。全腫瘍と
結合する必要はない。
【００３４】 「腫瘍−特異的エピトープ」の語はまた任意の非天然産エピトープを含み、これ
は問題の腫瘍特異的な（または一般に腫瘍に適当な、特異的な）天然産エピトー
プに十分に類似しており、その結果、類似のエピトープによって刺激された細胞
毒のリンパ球は本質的に天然エピトープによって刺激されたＣＴＬｓと同様に特
異的である。 一般に、（投与ルートおよび感染した特定の正常組織によって）さらに高い特異
性は一般に更に少ない逆の効果へと導くので、腫瘍−対−正常特異性は腫瘍−対
−腫瘍特異性よりもさらに重要である。腫瘍−対−腫瘍特異性は治療用途とは対
照的に診断ではさらに重要である。 ＨＬＡ−Ａ１のようなＭＨＣの特定の対立遺伝子によって「限定」されるときＣ
ＴＬエピトープへの照会は、このようなエピトープが問題の対立形態によって結
合され示されることを示す。これは前記エピトープがＨＬＡ−Ａ２、ＨＬＡ−Ａ
３、ＨＬＡ−Ｂ７、またはＨＬＡ−Ｂ４４のような、ＭＨＣの異なる対立形態に
よって結合され示されることを意味するものではない。
【００３５】 「特異的」の語は絶対的特異性を意味するつもりはなく、単に、マッチした普通
の対象よりは病原体または腫瘍と結合して生じる可能性での臨床的に有用な差異
を意味する。
【００３６】 病原体はサブ菌（例えばビールス）、菌（例えば、菌類、原生動物）、または多
細胞（例えば、虫、節足動物等）である。腫瘍は間葉性または上皮起源であるこ
とができる。癌は結腸、直腸、頚部、胸、肺、胃、子宮、皮膚、口、舌、唇、喉
頭、腎臓、膀胱、前立腺、脳、および血球の癌を含む。天然産エピトープは分離
−および−テストプロセスによって同定できる。１は抗原または免疫原であるこ
とが知られた蛋白質で出発する。次の１は免疫活性のための蛋白質のフラグメン
トをテストする。これらのフラグメントは蛋白質分解剤で蛋白質を処理して得ら
れ、または、ペプチド配列が既知ならば、蛋白質の配列に対応するさらに小さい
ペプチドを合成により準備できる。テストしたフラグメントは全体の蛋白質配列
、またはその蛋白質に及ぶことができ、それらは隣接し、オーバーラップし、ま
たは分離される。フラグメントのいくつかは免疫学的に活性であり、活性なフラ
グメントはそれ自体分離−および−テスト分析にかけられ、プロセスは最小長の
免疫学的に活性な配列が同定されるまで続けられる。アッセイは勿論異なるが、
このアプローチを用いてＢ−細胞またはＴ−細胞エピトープを同定できる。Geys
enは直線エピトープを同定するため免疫学的活性のための特定の蛋白質のフラグ
メントに隣接するまたはオーバーラップするすべての可能なオリゴペプチド（pr
ef.6−10a.a.）を系統的にスクリーニングすることを教示する。WO 84/03564参
照。
【００３７】 また、アミノ酸配列が得られるならばＢ−細胞またはＴ−細胞ペプチドエピトー
プの位置を予言できる。Ｂ−細胞エピトープは高い局所的な平均値の領域で親水
性の傾向がある。HoppおよびWood，Proc.Nat.Acad.Sci. (USA) 78：3824(1981)
；JamesonおよびWolf,CABIOS,4：181(1988)。Ｔ−細胞エピトープは特定の単膜
式種の細胞のＭＨＣクラスＩ分子に結合したペプチドのための既知の共通配列を
もとに予言することができる。例えばSlingluff，WO98/33810、特に15−16頁；P
arkerら、「各ペプチド側鎖の独立した結合に基づくペプチドを結合する可能なH
LA-A2を評価するための図」、J.Immunol.152：163(1994)。 天然産Ｔ−細胞エピトープはそれらのコンプレックスからＭＨＣクラスＩ分子を
用いて分離し次いでそれらを、例えば、マススペクトル技術により配列決定する
ことによって回収できる。
【００３８】 一般的に言えば、自然に生じる病気または腫瘍特異的エピトープに等しいエピト
ープに加えて、本発明はそのようなエピトープとは異なるが実質的には同じであ
り、したがって独自に病気−または腫瘍−特異的なエピトープを包含する。また
自然に生じるエピトープと実質的に同じではないが、それにもかかわらず３Ｄコ
ンフォメーションの類似の結果として後者と交叉反応するエピトープを含む。
【００３９】 エピトープは、参照エピトープの免疫活性の少なくとも10％を有し、わずか１の
非保存性の置換によって参照エピトープと異なるならば参照エピトープ（例えば
、自然に生じるエピトープ）と実質的に同じであると考えられる。 ＣＴＬエピトープであるならば、さらに直接関係のあるＭＨＣ分子の既知の結合
モチーフによって示唆される非保存性の置換基を組み込むことができる。Kastら
、J.Immunol,152：3904−12(1994)はＨＬＡ分子Ａ１、Ａ2.1、Ａ３、Ａ11および
Ａ24のためＨＬＡ−Ａ特異的ペプチド結合モチーフを示している。Engelhardら
、Sette著、Naturally Processed Peptides，57：39−62(1993)はＨＬＡ−Ａ2.1
およびＨＬＡ−Ｂ７への結合を決定した特徴を探求した。またHobohimら；Eur.J
.Immunol.,23：1271-6(1993)；Kawakamiら、J.Immunol.,154：3961-8(1995)参照
。これらおよび他の情報源は、種々のＨＬＡ分子に対し好ましい許容されるＡＡ
ｓは次のものを含む（が制限されるものではない）：
【００４０】 表１０ 分子 位置 好適なＡＡ 許容されたＡＡ Ａ１ ２ Ｔ，Ｓ，Ｍ ３ Ｄ，Ｅ Ａ，Ｓ ９ Ｙ Ａ2.1 ２ Ｌ，Ｍ Ｉ，Ｖ，Ａ，Ｔ ９ Ｌ，Ｖ，Ｉ Ａ，Ｍ，Ｔ Ａ３ ２ Ｌ，Ｍ，Ｉ，Ｖ，Ｓ Ｃ，Ｇ，Ｄ Ａ，Ｔ，Ｆ ９ Ｋ，Ｒ，Ｙ，Ｈ，Ｆ Ａ Ａ11 ２ Ｍ，Ｌ，Ｉ，Ｖ，Ｓ Ｃ，Ｄ，Ｆ Ａ，Ｔ，Ｇ，Ｎ ９ Ｋ Ｒ，Ｈ，Ｙ Ａ24 ２ Ｙ，Ｆ，Ｗ Ｍ ９ Ｆ，Ｌ，Ｉ，Ｗ Ｂ７ １ Ａ Ｍ，Ｓ，Ｒ，Ｌ ２ Ｐ Ｖ ３ Ｒ Ａ，Ｋ，Ｓ，Ｍ ９ Ｌ Ｉ，Ａ，Ｖ Ｂ８ ３ Ｋ 未知 ５ Ｋ 未知 ９ Ｌ 未知 Ｂ27 ２ Ｒ 未知 ９ Ｒ，Ｋ，Ｈ 未知 Ｂ35 ２ Ｐ 未知 ９ Ｙ 未知 Ｂ53 ２ Ｐ 未知 位置がリストに載っていないならば、リストに載せた位置に対するよりも遥かに
多くの種類のＡＡｓを研究は示した。リストに載せた位置に対して、特に「好適
な」または「許容された」ＡＡｓに対し保守的または半保守的であるならば、リ
ストに載っていないＡＡｓは許容される。
【００４１】 保守的置換基はここでは次の５個の基の１個内に交換基として定義される： Ｉ．小脂肪族、非極性または僅かに極性の残基： Ala, Ser, Thr, Pro, Gly II．極性、負に荷電した残基：およびそれらのアミド Asp, Asn, Glu, Gln III.極性、正に荷電した残基： His, Arg, Lys IV. 大きい脂肪族、非極性残基： Met, Leu, Ile, Val, Cys Ｖ．大きい芳香族残基： Phe, Tyr, Trp 次の基の中、次の置換基は「かなり保守的」であると考えられる。 Asp/Glu His/Arg/Lys Phe/Tyr/Trp Met/Leu/Ile/Val
【００４２】 半保守的置換基は、上の（Ｉ）、(II）および（III）からなるスーパーグループ
（Ａ）、または上の（IV）および（Ｖ）からなるスーパーグループ（Ｂ）に制限
される上の２個の基（Ｉ）-（Ｖ）の間で交換されることが定義される。また、A
laは全てのノングループＩアミノ酸に対し半保守的置換基と考えられる。
【００４３】 大いに保守的な置換基は他の保守的な置換基よりも活性に影響することが少ない
ようで、保守的置換基は単なる半保守的置換基よりも活性に影響することが少な
いようで、そして半保守的置換基は他の非保守的置換基よりも活性に影響するこ
とが少ない。さらに、単一の置換基は多重突然変異体よりも活性に影響すること
が少ないようだ。
【００４４】 関心のあるペプチドの単一または多重の置換突然変異体は元のペプチドの項力を
全く持たないが、そのような突然変異体は良く用いられる。 置換基は遺伝子的に符号化された、またはさらに天然産のアミノ酸に制限されな
い。エピトープはペプチド合成によって調製されるとき、所望のアミノ酸が直接
用いられる。或いは、遺伝子学的に符号化されたアミノ酸は、選択された側鎖ま
たは末端残基と反応できる有機誘導剤と反応することにより改変することができ
る。
【００４５】 他の交換基に属する遺伝子学的に符号化されたアミノ酸に対するよりも、元のア
ミノ酸に対し、そして同じ交換基での他のアミノ酸に対し、大きさ（容量）およ
び親水性がさらに類似しているならば、非遺伝子学的に符号化されたアミノ酸は
遺伝子学的に符号化されたアミノ酸に対し保守的置換基と考えられる。
【００４６】 実質的に同じペプチドエピトープは種々の技法で同定でき、そのうちのいくつか
は、結合モチーフの先在する知識によらない。したがって、この分野では既知の
ペプチドエピトープのすべての可能な単一の置換変異体を合成できることが知ら
れている。ノンペプチドでは、このような変異体がある（20×９−１＝179）。G
eysenら、Proc. Nat. Acad. Sci.(USA),81:3998-4002(1984)。異なる置換体の効
果は常に付加的ではないが、エピトープでの異なる残基位置にて2個の有利なま
たは中性的な単一置換体が大抵の場合に安全に結合できることを期待することは
妥当である。
【００４７】 天然産および非天然産ペプチドエピトープの両方を、適当な抗体または他の受容
体が入手できるならば、標的によって結合したペプチドに対しペプチド組合せラ
イブラリーをスクリーニングすることによって同定することができる。体液性ペ
プチドエピトープは、関心のある抗原を認識するように既知の標的モノクローナ
ル抗体への特異的結合に対し組合せペプチドファージライブラリーをスクリーニ
ングすることによって同定することができる。好ましくは、ライブラリーは予め
スクリーニングして抗体のエピトープ結合部位とは別に抗体を結合するペプチド
を除去する；これは第二の同じイソタイプのコントロール抗体に結合するファー
ジを除くことによって行うことができる。
【００４８】 同様に、ＣＴＬペプチドエピトープを同定するため、単一または多重置換変異体
の族を合成し、混合物をＨＬＡ−Ａ2.1正のリンパ芽球状の細胞系Ｔ２（または
特異的ＣＴＬエピトープを与えることができる他の細胞系）に与え、そしてＴ２
細胞を所望の特異性のＣＴＬｓにさらすことができる。Ｔ２細胞が溶解するなら
ば、有効なエピトープはＴ２細胞からの直接の回収によってまたは有効なペプチ
ド混合物のサブセットをテストする連続的プロセスのいずれかによって同定する
ことができる。縮重ペプチドの調製方法はButter,USP 5,010,175, Haughten ら
、Proc.Nat.Acad.Sci.(USA),82:5131-35(1985), Geysenら、Proc.Nat.Acad.Sci.
(USA),81:3998-4002(1984); WO86/06487; WO86/00991に記載されている。
【００４９】 多重突然変異誘発を用いて集中して少数の残基位置またはさらに広く大多数の位
置をスクリーニングすることができる。１のアプローチは各位置で各a.a.タイプ
の代表的メンバー、例えば、後で同定されるような交換グループＩ−Ｖの各々の
標本を少なくとも探査することである。好ましくは、GlyおよびProは１の他のグ
ループＩ残基のほかにスクリーニングされる。好ましくは、少なくとも１のスク
リーニングされた残基はＨ−結合残基である。正の変異体が特定の標本の特色を
なすならば、同様なアミノ酸を次のライブラリーに探求することができる。例え
ば、Phe置換体が結合を改善するならば、TyrおよびTrpは次のラウンドで試験す
ることができる。
【００５０】 当業者は、どの残基が変化するかを決定する際に、またペプチドを結合した自然
に処理されたＭＨＣの配列の比較をすることができ、ＭＨＣまたはＴＣＲ結合に
含まれる残基を同定するため、ＭＨＣ：ペプチド：ＴＣＲコンプレックスの３Ｄ
構造を得ることができる。そのような残基は単独のままか、またはＭＨＣまたは
ＴＣＲ結合を高める試みで賢明に突然変異させるかいずれかが可能である。 炭水化物ハプテンの詳細にわたる議論はWong，USP6,013,779にある。
【００５１】 脂質−Ａ類似体のアジュバント活性 一般に低分子量の合成抗原が免疫原が弱く完全に合成したワクチンの成功に最大
の障害であると理解されている。そのような合成抗原の免疫原を改善する一つの
方法はアジュバントの環境でそれを伝えることである。本発明においてこれら新
規の合成樹脂−Ａ類似体の第一次の標的はそれらのアジュバントの性質である。
理想のアジュバントは宿主の免疫系統を非特異的に刺激すると信じられており、
これは次の任意の外来抗原の遭遇の際に外来抗原に強い特異的免疫応答を生成す
ることができる。そのような強い特異的免疫応答は、またその記憶によって特徴
づけられ、宿主免疫系統のＴ−リンパ球（Ｔ−細胞）が活性化されるときにのみ
生成される。ここで我々は、免疫応答を測定するため２つの重要なパラメーター
としてＴ−細胞芽体発生およびＩＦＮ−γ生成を選択する。
【００５２】 実験的にＴ−細胞芽体発生はＴ−細胞増殖に直接関連するＤＮＡ合成を測定し、
これはまたＴ−細胞活性化の直接の結果となる。他方、ＩＦＮ−γはそれらが活
性化するときＴ細胞によって分泌された主なシトキンである。したがって、Ｔ−
細胞芽体発生およびＩＦＮ−γ生成の両者はＴ−細胞活性化を示し、これは任意
の蛋白質−基礎の抗原への強い特異的応答を誘発するように宿主免疫系統を助け
る際にアジュバントの能力を示唆する。合成リポペプチド抗原、H2N-STAPPAHGVT
SAPDTRPAPGSTAPPK(Pal)G-OH（図３４、単一文字アミノ酸コードは表８に定義す
る）、腫瘍結合ＭＵＣ１ムチンから誘導される改変した25アミノ酸配列を用いる
ことによって、我々は本発明に開示された合成脂質−Ａ類似体のアジュバントの
性質を評価することができる。インヴィヴォ／インヴィトロ研究の予備行為によ
って得られたＴ−細胞芽体発生およびＩＦＮ−γレベル（図３１−３３）のデー
タに基づき、合成脂質−Ａ構造48，54，70，86,102および104が、バクテリア起
源の脂質−Ａ製剤として、アジュバントと同様に有効であることを十分に示して
いる。
【００５３】 免疫原のみによって導き出されるレベルに関して少なくとも１のリポソーム／免
疫原の組合せに応じてＴ−細胞芽体発生またはインターフェロンガンマ生成のい
ずれかのレベルを増加（ｐ＝0.05）するならば、化合物はアジュバントと考えら
れる。好ましくは両方である。好ましくはその増加は少なくとも10％であり、さ
らに好ましくは50％であり、さらに好ましくは少なくとも100％である。
【００５４】 合成脂質−Ａ類似体８６の第一次インヴィヴォ毒性の評価はバクテリアサルモネ
ラ菌から得られた天然脂質−Ａ生成物のそれよりも毒性がはるかに低いことを示
した（表４、実施例９９）。従って、規定するガイドラインをもつそのようなワ
クチンの処方の効力、安全性、安定性およびコンプライアンスによって、本発明
で開示された全体的な合成および新規の脂質−Ａ類似体と関連した多くの利点が
ある。
【００５５】 好ましくは、本発明の脂質化合物の毒性は前記天然脂質−Ａ製品のそれよりも50
％以下である；好ましくは後者の10％よりも小さい。本発明で開示された合成化
合物のインヴィヴォ研究はアジュバントとして有効性の査定に限られていた。し
かしそれらは抗−腫瘍剤、ＬＰＳ／脂質−Ａ拮抗薬、脂質−Ａ生合成用阻害剤の
ような他の領域では広く応用され、したがって新規の抗生物質として有用である
。種々の生物学上の活性はそのうちに開示される。
【００５６】 製薬学的方法および調製 出願人は参考文献としてＷＯ９８／３３８１０の３２−４６頁を組み込む。 好ましい本発明の動物対象は霊長類哺乳動物である。「哺乳動物」の語は哺乳類
綱に書く属するものを意味し、勿論ヒト対象の治療に有用である。「非ヒト霊長
類」の語はヒト族を除く亜目類人猿の任意のメンバーである。そのような非ヒト
霊長類は超科Ceboidea、族Ceboidae（カツラザル、ホエザル、クモザルおよびリ
スザルを含む新世界猿）および族Callithricidae（マーモセットを含む）；超族
Cercopithecoidea、族Cercopithecidae(マカークザル、マンドリル、ヒヒ、テン
グザル、モナザル、およびインドの神聖なハヌマンモンキーを含む)；および超
族Hominoidae、属Pongidae（テナガザル、オランウータン、ゴリラ、およびチン
パンジーを含む）を含む。アカザルはマカークザルの一員である。
【００５７】 ここで用いる「保護」の語は、「予防」、「抑制」および「治療」を含む。「予
防」は病気の誘導前の蛋白質の投与を含む。「抑制」は病気の臨床発現前の組成
物の投与を含む。「治療」は病気の発現後の保護組成物の投与を含む。 ヒトおよび獣医学の薬では、究極の誘導的な事象が未知であり、潜伏し、または
患者は事象が起きた後に良くなるまで確かめないので、「予防」と「抑制」との
間の区別は必ずしもできない。したがって、ここで定義された「予防」および「
抑制」の両方を包含するように「防御」の語を「治療」と区別して用いることが
普通である。ここで用いられる「保護」の語は「防御」を含むことを意味する。
また絶対的である必要はなく、臨床価値をもつのに十分であるという条件で保護
は有用であると理解すべきである。拮抗剤よりも少なく保護を与える薬剤は、他
の薬剤が特定の個に無効であるならば、保護のレベルを高めるため他の薬剤と組
み合わせて用いられるならば、または拮抗剤よりも安全ならば、まだ価値がある
。
【００５８】 組成物は非経口、経口、および腸管外ならば全身にわたりまたは局所的に投与す
ることができる。非経口ルートは皮下、静脈皮内、筋肉内、腹膜内、鼻腔内、経
皮、または口内ルートを含む。１またはそれ以上のこのようなルートが用いられ
る。非経口投与は、例えば、巨丸注入または時間をかけた漸次の潅流によって可
能である。あるいは、または同時に、経口ルートで投与できる。皮内および筋肉
内注射の任意の組合せが用いられるが、好ましくは免疫化は筋肉内注射次いで皮
内注射によってまず行われる。
【００５９】 本発明の免疫原の適当な投与は年齢、性、健康状態、受容者の体重、同時に行う
治療、たとえあるとしても、治療の頻度、および望まれる効果の性質に依存する
ことが理解される。しかし、過度の実験なしで、当業者によって理解され決定さ
れるように、最も好ましい投与は各対象に合わせられる。これは一般的に標準投
与を含み、例えば患者の体重が軽ければ投与を減らす。
【００６０】 ヒトに用いる前に、薬剤はまず実験動物で安全性と有効性を評価する。ヒトの臨
床研究では、問題の薬剤の予備臨床データ、および類似の薬剤（たとえあるとし
ても）類似の薬剤の通例の投与量に基づきヒトに安全であることが期待される投
与量で開始される。この投与量が有効ならば、投薬は所望により最小有効量を決
定するように減らすことができる。この投与量が無効ならば、注意深く増加し、
患者の副作用のサインをモニターする。例えば、参照 Berkowら、The Merck Man nual , 15th edition, Merck and Co., Rahway, N.J., 1987; Goodmanら、Goodma n and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics , 8th edition, P
ergamon Press, Inc., Elmsford, N.Y., (1990); Avery's Drug Treatment: Pri nciples and Practice of Crinical Pharmacology and Therapeutics , 3rd edit
ion, ADIS Press, LTD., Williams and Wilkins, Baltimore, MD. (1987), Ebad
i, Pharmacology, Little, Brown and Co., Boston (1985) 、ここに引用した参
考文献は参考文献として組み込まれる。
【００６１】 各治療に要する全投与量は、予め決定されたかまたは特別に、免疫化スケジュー
ルによって、異なるかまたは同じ投与量で複数回または一回の投与で投与される
。そのスケジュールは免疫学的に有効なように選択される、すなわち、抗原に有
効な免疫応答を引き出し、これによって保護を与えるようにできるかぎり他の薬
剤と共に、充分であるようにする。これを達成するに十分な投与量は「治療に有
効な投与量」と定義される。（それ自体で投与されるならば、各投与量は有効で
はないが、スケジュールは免疫学的に有効であり、「治療に有効な投与量」の意
味は免疫化スケジュールにおいてはよく説明される。）この用途に有効な量は、
例えば、ペプチド組成、投与方法、治療される病気の段階とつらさ、患者の体重
と健康の一般的状態、および処方する医者の判断による。
【００６２】 一般的に、薬の活性成分の一日量は、70kgの成人では、10ナノグラムないし10グ
ラムの範囲である。免疫原としては一般的投与量は10ナノグラムから10ミリグラ
ム、さらに１マイクログラムないし10ミリグラムである。しかし、本発明はこれ
らと投与範囲に限られない。
【００６３】 本発明の組成物は一般に重い病気の状態、すなわち、寿命が脅かされまたは潜在
的に寿命が脅かされる状態で用いられる。そのような場合、異質の物質とペプチ
ドの比較的無毒の性質の最小化の観点で、これらペプチド組成物の実質的に過剰
な投与は治療する医者によって望ましく感じられる。
【００６４】 有効な任意の間隔で投与される。間隔が短すぎると、免疫無力または他の逆効果
が生じる。間隔が長すぎると、免疫の変化を受ける。最適の間隔は各投与がさら
に長いならばさらに長くできる。代表的な間隔は１週間、２週間、４週間（また
は１ヶ月）、６週間、８週間（または２ヶ月）および１年である。追加の投与量
、および間隔の増減の適正は、患者の免疫適確の点で（例えば、関連した抗原に
対する抗体のレベル）、継続する基準を再評価することができる。 リポソームを調製するための種々の方法が入手可能である、例えば、Szokら、 A
nn. Rev, Biophys. Bioeng. 9:467(1980), U.S. Patent Nos. 4,235,871, 4,501
,728, 4,837,028および5,019,369に記載があり、ここに参考文献として組み込む
。
【００６５】 適当な投与量形態は病気、免疫原、および投与法に依存する；可能性は錠剤、カ
プセル、トローチ剤、デンタルペースト、座剤、吸入薬、溶液、軟膏および非経
口デポ剤を含む。参照、例えば、Berker、上記、Goodman、上記、Avery、上記お
よびEbadi、上記、これらは全部引用された参考文献を含めて、ここに参考文献
として組み込む。
【００６６】
【発明の実施の形態】 以下、図面に基づき詳細に説明する。 脂質−Ａ類似体の化学合成（図５−図３０） 脂質−Ａ分子の不変の構造的特徴はそのβ−（１，６）−結合Ｄ−グルコサミン
二糖類バックボーンである。この構造は元はバクテリアであるが、その純形態で
のこの二糖類は多分脂質構造によって示される生物学的活性の範囲には関連して
いない。脂質鎖は多分基本的機構を与え、これにより二糖類は広範囲の性質を示
す。したがって、脂質鎖のみが脂質−Ａの性質の増進によって量的役割を演じる
。広範囲の脂質はこの必要性を満たすが、それらの数において脂質は分子の性質
に量的に影響を与えるようである。我々は合成し天然（図６の１３−１５および
１７の化合物）および非天然（図５の５、図７の２０および２３の化合物）の脂
質のある範囲の影響、および共に炭化水素コアに脂質を結合する結合の範囲を調
べた。
【００６７】 天然で脂質−Ａ構造で見出される最も普通の脂質は（Ｒ）−３−ヒドロキシ−ミ
リスチン酸である。３−ヒドロキシ基はさらに異なる長さの脂質でアシル化され
る。化合物５（図５）はアスパラギン酸の天然立体化学を用いて設計される。化
合物５のアミノ基の三次元配向は（Ｒ）−３−ヒドロキシミリスチン酸のヒドロ
キシル基のそれと同じであり、５は（Ｒ）−３−アシルオキシミリスチン酸の立
体構造擬態であることがきたいされる。
【００６８】 ５の調製は図５に記載されている。市販されているアスパラギン酸誘導体１は活
性化試薬としてイソブチルクロロホルメートを用いてノニルアミンと結合し、79
％の収量で化合物２を得る。２からのFmoc基の除去、次いでテトラデカノン酸と
の結合によって化合物４を与える。tert−ブチル保護基はTFAで処理して除き５
を97％の収量で得る。
【００６９】 図６は（Ｒ）−３−ヒドロキシ−ミリスチン酸誘導体の合成を記載する。ドデカ
ノールをエチルブロモアセテートと反応させるレフォルマッキー反応は化合物６
を与え、これはラセミ３−ヒドロキシ−ミリスチン酸７に加水分解した。７の光
学分割は既知の方法により行われた21Aa,b。そのデヒドロアビエチルアミン塩の
ジアステレオマーは分別結晶により分離され、塩のジアステレオマー純度は融点
および／またはＮＭＲスペクトルによってモニターされた。塩の塩基および酸の
処理はＲ−異性体８を＞95％のエナンチオマー過剰（e.e.）で与え、これは92％
の収量でフェナシルエステル９に変化した。ＤＭＡＰの存在でピリジン中で種々
のアシルクロライドによる３−ヒドロキシ基のアシル化は化合物１０−１２を与
え、これは亜鉛粉末で処理するとフリーの脂質酸１３−１５を与える22,23。他
方９はトリフルオロスルフォン酸の存在でベンジルトリクロロアセトイミデート
と処理して３−ベンジルオキシ誘導体１６を与え、これは次にそのフリーの酸１
７に変わる24。
【００７０】 図７は非天然エーテル結合を含む新規ジ脂質２０およびトリ脂質２３の合成を示
す。炭酸カリウムの存在で９とトリフレート１８との反応は１９を与え、これは
脱保護されジ脂質酸２０を与える。−78℃にてキラル試薬（−）−ＤＩＰＣ１の
存在でドデカノールおよびアリルブロマイドからの２１25a,b,cの非対称合成は
約70％の収率で〜85％e.e.の生成物を得る。エナンチオマー過剰は、そのメチル
トリフルオロメチルフェニル酢酸[(Ｒ)−(＋)−MTPA]エステル26,27のその旋光
度データおよびＮＭＲデータから決定された。２１および２０はジクロロメタン
中DCCおよびDMAPの存在でカップルして２２を81％の収率で形成させた。２２で
の二重結合の酸化開裂は61％でトリ脂質フリー酸２３を与えた。報告された天然
からの脂質−A構造のうち、トリ脂質部分はまだ知られていない。
【００７１】 図８はグルコサミン誘導体を調製するために用いた一般法を示す。これら誘導体
は良く知られており基本的には文献に記載された方法に従って調製される28,29
。
【００７２】 図９は脂質−Ａ構造の非還元末端の単糖類類似体３３の合成が記載されている。
化合物２６はDCCおよびDMAPの存在でテトラデカン酸とカップルし、２９を91％
の収率で得る。酢酸中、亜鉛粉末での２９のTroc基の還元除去、次に脂質酸５で
のカップリングにより、化合物３０を60％の収率で得る。ソジウムシアノボロハ
イドライドおよびHCl含有エーテル溶液を用いたレギオセレクティブベンジリデ
ン開環は４−ＯＨ化合物３１を86％の収率で得た。２段階ホスフェート基導入は
３１をジベンジルジイソプロピルホスフォルアミジトと反応させた亜リン酸塩を
形成し、次いでｍ−クロロ過安息香酸（ｍ−CPBA）で酸化して３２を66％の収率
で得た。３２のベンジル保護基を除去する触媒反応の水素化は単糖類脂質−Ａ類
似体３３を79％の収率で得る。
【００７３】 図１０はモノホスフォリル化二糖類脂質−Ａ類似体の合成に用いられる２つのグ
リコシル化受容体の調製を記載する。グルコサミン誘導体３４31は容易にグルコ
サミン塩化水素から入手できる。40℃にてDMAPとピリジンの存在で３４の６−Ｏ
−位置でのトリチル基のレギオセレクティブ導入は３５を90％の収率で与えた。
臭化ベンジルおよび水素化ナトリウムを用いるベンジル化、次に110℃にて80％
酢酸との処理によって３７を得た。フタルイミド基はエタノール中で還流してヒ
ドラジンで処理して除き、フリーのアミン３８を得た。これは脂質酸１５と１４
を用いてDCCの存在でカップリングして３９および４０をそれぞれ得た。
【００７４】 グリコシル化ドナー４３の調製は図１１に示される。化合物２８はDCCおよびDMA
Pの存在で１４とカップリングして４１を非常に良い収率で得た。次いでアリル
基を２段階、先ずIr(I)コンプレックスで処理してアリル二重結合を異性化し、
次にNBSの存在で加水分解して除く。４２をトリクロロアセトニトリルおよびDBU
で処理して４３を81％の収率で得た。
【００７５】 二糖類脂質−Ａ類似体４８のための完全な合成は図１２および図１３に示される
。触媒としてトリフルオロボロンジエチルエーテレートを用いる３９と４３との
間のグリコシル化反応は所望の二糖類４４を65％の収率で得た（図１２）。化合
物４３のTroc−保護基は、隣接関係基として働き、グリコシル化反応の立体化学
の結果を制御し、β−グリコシドを専ら提供する。４４でのTroc−基の除去、次
いでDCCの存在での脂質酸１３とのカップリングは、化合物４５を与えた。ソジ
ウムシアノボロハイドライド／HClを用いた選択的ベンジリデン開環は4'−ＯＨ
化合物４６が得られた（図１３）。ホスフェート基は亜リン酸塩生成によって導
入され、次の酸化は４７が85％の収率で得られた。THF−酢酸中水素とパラジウ
ム／炭素を用いる最後の脱ベンジル化はモノホスフォリル化脂質−Ａ類似体４８
を与えた。
【００７６】 上記戦略のすべては二糖類脂質−Ａ類似体を構成する際に非常に有効であり、ま
たいくつかの通常の基礎単位を用いることによって脂質分担での変化を適合させ
るために非常に柔軟である。同じ戦略を用いて２つの他の類似体５４と５８を調
製したが、これは図１４−図１６に記載した。
【００７７】 サルモネラタイプの脂質−Ａ（図１）の提案された構造と比較して、化合物４８
（図１３）は３−Ｏ−位置で結合した脂質をもたないが、脂質置換パターンの残
りは同じままである。化合物５４（図１５）は５４で全脂質の長さが同じ(Ｃ14)
であることを除き、４８と同じ置換パターンをもつ。脂質の繰り返しは化合物の
大規模調製に有利である。化合物５８（図１６）は脂質をベースにした非天然ア
スパラギン酸をもつが、５４の近擬態と考えても良い。
【００７８】 別の脂質酸を二糖類のバックボーンの３−Ｏ−位置に導入するため、還元する
末端糖での異なる保護戦略が用いられた。図１７は新しいグリコシル化受容体６
４の調製を示す。化合物５９から、３−Ｏ−アリル化、ベンジリデン基の除去、
およびトリチル基のレギオ選択的導入は６０を与えた。臭化ベンジルと水素化ナ
トリウムを用いた６０の４−ＯＨ基のベンジル化、次にトリチル基の除去は６２
を与えた。６２のフタルイミド基は還流エタノール中ヒドラジンでの処理によっ
て開裂し、フリーアミン化合物６２を与え、これはDCCの存在で１４でアシル化
して６４を生成した。３−Ｏ−位置でのアリル基は脂質を３−Ｏ−位置に、合成
中の任意の段階で脂質を導入する自由度を提供し、除かない場合は、アリル基は
ｎ−プロピル基への触媒反応水素化を受け、分子への永久付加物として残存する
。
【００７９】 化合物４８の合成のために記載したと同じ方法を用いて、４３と６４のカップリ
ングは所望の二糖類６５を88％の収率で与えた（図１８）。Troc−基の還元開裂
、フリーアミンのアシル化によって、６５は６７に変わり、還元ベンジリデン開
環、ホスフェート基の導入および水素化を含む一連の変換後に、最後には脂質−
Ａ類似体に導かれた（図１９）。類似体７０はエーテル結合によって結合した３
−Ｏ−位置のｎ−プロピル基をもつ。エーテル結合によって結合したそのような
短い簡単なアルキル鎖をもつ化合物は天然源からまたは化学合成によっていずれ
も脂質−Ａ類似体について以前には報告されていなかった。
【００８０】 図２０は二糖類バックボーンの３−Ｏ−位置にて脂質酸を導入する戦略を示す。
６５のアリル基はIr(I)コンプレックスで処理して除去し、次いでNBSによって７
１が得られた。DCCとDMAPの存在で１７を用いた７１のカップリングは７２を71
％の収率で与え、次いで酢酸中亜鉛を用いた処理でフリーアミン７３を生成した
。上記と同じシリーズの反応を行うことによって、化合物７３は最終構造７７に
変化した（図７１）。
【００８１】 いくつかの他の脂質類似体を調製する過程で、新規の単純化した戦略を採用し図
２２−図２４に示したような８６を合成した。図２２ではグリコシル受容体７９
は３−Ｏ−位置でのアシル化および４，６−イソプロピリデン基の除去の２工程
で２７から調製された。
【００８２】 図２３は４−Ｏ−位置でのベンジル保護ホスフェートを用いて完了する新しいグ
リコシルドナー８３の調製を記載する。ソジウムシアノボロハイドライドおよび
乾燥HClを用いる４１でのベンジリデン環の選択的開環は化合物８０を良い収量
で与えた。ホスフェート基を保護したベンジルを次に４−Ｏ−位置に導入し８１
を85％の収率で生成した。脱アリル化、次いでトリクロロアセトニトリルとDBU
を用いた反応によって新しいグリコシル化ドナー８３を生成した。
【００８３】 ７９と８３（図２４）との間のカップリング反応は触媒としてトリフルオロボロ
ンエーテレートの存在で行われ、所望の二糖類８４を66％の収率で生成した。Tr
oc−基の還元除去、次いで脂質酸１４を用いたカップリングによって化合物８５
を与え、次に脱ベンジル化は脂質−Ａ類似体８６が得られた。
【００８４】 改変した戦略では、ホスフェート基はグリコシド結合の生成前に導入した。２つ
のフリーヒドロキシ基での受容体のグリコシル化はレギオ選択的および立体選択
的に行われ（１→６）−結合−β−グリコシドのみを生成した。これを行う際に
、合成工程は二糖類工程で減らされた。このプロセスは同時に導入できる２−お
よび２’−アミンで同じ置換体をもつ脂質−Ａ類似体に非常に有効であった。
【００８５】 この同じ方法を用いて、別の脂質−Ａ類似体９４を調製した（図２５、図２６）
。化合物８６と９４の差は後者ではジ−脂質部分がエーテル結合を含むことであ
る。エーテル結合は天然産の脂質−Ａ構造では知られていないが、天然エステル
結合よりも安定の良い脂質−Ａ構造を与える。さらに、エーテル結合は加水分解
状態の影響を受け易くなく、一層疎水性である。したがって、エーテル結合をも
つ脂質部分は安定性がさらに良く、その天然の対照物よりも良いアジュバント特
性を示すことができる。図２５では、グリコシル化ドナー９１の調製を記載して
いる。脂質酸２０（→８７）を用いた２８のカップリングによるスタートは、ベ
ンジリデン開環（→８８）、ホスフェート基導入（→８９）、脱アリル化（→９
０）およびイミデート生成を経て、化合物９１が得られた。上述のように、７９
と９１のグリコシル化反応は二糖類９２を与え（図２６）、Troc−基の除去、脂
質酸２０でのアシル化、および最後に脱ベンジル化により、脂質−Ａ類似体９４
が得られた。
【００８６】 改変した戦略を用い、２つのさらなる脂質類似体−Ａの合成例を図２７−図３０
に記載する。図２７では、新しいグリコシル化受容体９８の調製を記載する。ベ
ンジルトリクロロアセトイミデートおよびトリフルオロメチルスルホン酸を用い
２７の３−Ｏ−位置にベンジル基を導入し、９５が得られた。イソプロピリデン
およびTroc−基の両方を除去し、フリーアミン９７を形成し、トリ−脂質酸２３
でカップリングする際にグリコシル−受容体９８が得られた。
【００８７】 トリフルオロボロンエーテレートの存在で９１と９８との間のグリコシル化反応
は所望の二糖類９９を56％の収率で与え（図２８）、酢酸中活性化亜鉛での処理
ではアミン化合物１００を得た。２０（図２９）と１７（図３０）を用いたアミ
ノ基のアシル化は１０１と１０３をそれぞれ与えた。１０１と１０３の完全な脱
保護は２つの脂質−Ａ類似体１０２と１０４をそれぞれ与えた。
【００８８】 １０２と１０４の化合物は共に還元する末端糖にてアミノ基にトリ−脂質部分を
有する。トリ−脂質成分をもつ天然産の脂質−Ａ構造は報告がなく、また任意の
化学的に合成した構造でも報告がない。炭化水素コアに結合した脂質鎖の数は脂
質−Ａ類似体の生物学的活性を定量的に調整する。脂質−Ａ構造のトリ−脂質部
分の存在が生物学的活性に正味の量的影響をもたらすかどうか未だ研究されてい
ない。我々はトリ−脂質構造フラグメントが脂質−Ａ構造の生物学的性質を有意
には変えないと信じている。我々の予備的インヴィヴォテストの結果は１０２と
１０４の化合物は共にバクテリア起源の脂質−Ａ製剤のそれおよび合成類似体８
６のそれに似たアジュバント特性を示した。
【００８９】 生物学テストの結果（図３１−３３） リポソーム処方を用いて種々の合成脂質−Ａ構造のアジュバント性質、および合
成ポリペプチド抗原BP−148への免疫応答、H2N-STAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPK(Pa
l)G-OH（図３４）、腫瘍結合MUC1ムチンから誘導された改変した25−アミノ酸配
列を評価した。市販品の脂質−Ａ生成物を、これはワクチンプログラムのための
アジュバントとして現在臨床評価の下にあるが、比較に用いた。AVANTIから購入
した天然脂質−Ａ製品はサルモネラ菌細胞から抽出された脂質−Ａ混合物を含む
が、本発明では天然脂質−Ａとして示している。
【００９０】 このように、合成ポリペプチド抗原、bp1−148、および脂質−Ａ類似体３３、４
８、５４、５８、７０、７７、８６、９４、１０２、１０４または天然脂質−Ａ
を含むリポソーム処方を用い、マウスを免疫にし、Ｔ−細胞芽体発生およびイン
ターフェロンガンマ（IFN−γ）生成に関して免疫応答を測定した。化合物は異
なる時間で３つのグループでテストし、予備的結果を別々に図３１−３３に示す
。変量は動物グループのような異なる因子および実験因子にあるので、異なるグ
ループからのデータは比較しない。
【００９１】 そのようなリポソーム処方の導入後のマウスのＴ−細胞芽体発生および高レベル
のIFN−γ生成は十分に合成脂質構造４８、５４、７０、８６、１０２および１
０４が天然脂質−Ａと比較して類似のアジュバント活性をもつことを示した。図
３１−図３３に示すように、これら合成脂質−Ａ類似体４８、５４、７０、８６
、１０２および１０４を含むリポソームワクチン処方が有意なＴ−細胞芽体発生
および高レベルのインターフェロン−ガンマを誘発する。ＣＰＭ（分当りのカウ
ント）およびIFN−γ(pg/ml)の値は天然脂質−Ａを含む処方に対し観察されたも
のと比較できる。合成脂質−Ａ類似体９４（図３３）を含む処方または有意のＴ
−細胞芽体発生を誘発するが、インターフェロン−ガンマレベルでの生成は低い
。さらに化合物９４のテストはそのアジュバントの性質に明白な結果を与えるた
めに必要である。化合物３３、７７および５８はＴ−細胞芽体発生およびインタ
ーフェロン−ガンマ生成に不活性である。
【００９２】 化合物８６は図３２に示された第二グループでテストした他のすべての脂質−Ａ
類似体よりも僅かにさらに活性であるようだ。天然脂質−Ａと直接比較すると、
合成類似体８６はＴ−細胞芽体発生およびIFN−γ生成の両方で似ている値を示
した。構造的には、化合物８６は全部で７個の脂質鎖をもち、二糖類バックボー
ンの３−Ｏ−位置に３−ヒドロキシミリスチン酸部分を含む。化合物５４と化合
物７０は構造上、化合物５４が３−Ｏ−位置に脂質鎖をもたず、化合物７０が簡
単なｎ−プロピル基を３−Ｏ−位置にもつことを除き、化合物８６に非常に近い
。Ｔ−細胞芽体発生およびインターフェロン−ガンマ（IFN−γ）生成の両者の
比較結果は化合物５４、７０および８６に対し得られている（図３２）。この観
察は、脂質−Ａ二糖類バックボーンの３−Ｏ−位置での置換基の性質が脂質−Ａ
類似体のアジュバントにあまり効果がないことを示している。さらに、化合物４
８と７０（図３２）は、両方とも同じ置換パターンをもつが脂質鎖の長さのみが
異なり、能力ではほぼ同じである。この結果は脂質鎖の長さの僅かの変化が脂質
−Ａ類似体のアジュバント性に大して影響を与えないという我々の確信を確認さ
せた。
【００９３】 図３３に示すように、化合物１０２と１０４はまた化合物８６と天然脂質−Ａの
両者の比較と同様の結果を示した。興味あることに、化合物１０２と１０４は共
に二糖類バックボーンの２−Ｎ−位置に非天然トリ−脂質脂肪酸部分を含む。さ
らに、天然エステル結合の代わりに非天然エーテル結合もまた、多脂質脂肪酸部
分に脂質−脂質結合に対し組み込まれる。化合物１０２と１０４が、天然脂質−
Ａ生成物と似たアジュバントを示すという発見は、脂質−Ａ構造の脂質の位置で
僅かな変化がこれら分子のアジュバント性に影響を与えないという我々の考えを
更に証明する。これらの結果は、構造が一層簡単で、さらに安定な、そして生物
学的にさらに活性な分子を与えることができる。新規の脂質Ａ類似体を企画する
のに極めて利用価値がある。
【００９４】 合成類似体３３、５８および７７はアスパラギン酸基礎の脂質を含む。これらリ
ポソーム処方への観察された弱い応答はまず不十分な溶解性の結果としてリポソ
ームへの混入が不十分であることに帰する。異なる処方技術はリポソームへの十
分な混入を保証しそれらのアジュバントの性質を再評価するために必要である。
【００９５】
【実施例】 以下、本発明を実施例に基づき説明する。 概要：融点は訂正してはいない。空気および混気に敏感な反応は窒素雰囲気下で
行った。無水のＴＨＦ、ＤＭＦおよびジクロロメタンはアルドリッチ社から購入
した。他の乾燥溶媒は通常の方法で生成した。ＡＣＳグレード溶媒はフィッシャ
ー社から購入し、蒸留なしでクロマトグラフィに用いた。ＴＬＣプレート（シリ
カゲル60Ｆ254、薄さ0.25mm、メルク社）およびカラムクロマトグラフィ用のフ
ラッシュシリカゲル60（35〜75μm）はローズサイエンティフィク社、カナダか
ら購入した。1Ｈおよび31Ｐスペクトルはプロトンケミカルシイフトの内部標準
にＴＭＳを使用し、Brucker AM 300MHZ或いはVarian Unity 500MHzあるいはBruc
ker DRX 600MHzスペクトロメーターのいずれかで記録した。旋光度は室温（20〜
22℃）でパーキンエルマー 241ポーラリメーターで測定した。元素分析データー
はアルバータ大学のマイクロ分析ラボラトリイで行った。電子スプレイマススペ
クトル分析はMS5OB或いはMSD1SPC マススペクトルメーターで行った。
【００９６】 実施例１：化合物２の調製 乾燥THF（35ml）中の化合物１（3.16g、7.69mmol）の溶液を−20℃に冷却した。
N-メチルモルホリン（0.76ml、0.70g、6.92mmol）およびクロロ蟻酸イソブチル
（0.94ｇ、0.90ml、6.92mmol）を加えた。混合物は５分間攪拌し、乾燥THF（２m
l）に溶解したノニルアミン（1.27ml、0.99g、6.92mmol）を上記溶液に加えた。
混合物は１時間−20℃で攪拌した。メタノール（３ml）を添加し反応混合物を真
空濃縮した。残さはフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、２：
１）で精製し、化合物２（3.27g、79％）を得た。TLC:Rf＝0.44（ヘキサン：酢
酸エチル、３：１）。[α]D 22＝＋16.9（c 0.64、クロロホルム）。1H NMR(300M
Hz,CDCl3):δ0.88(t,J=6.5Hz,3H,CHCl3), 1.42(br s,12H,6CH2), 1.50(br s,11H
,3CH3,CH2), 2.59(dd,J=16.0,6.5Hz,1H,Asp-β-H), 2.93(dd,J=16.0,3.5Hz,1H,A
sp-β'-H), 3.24(m,2H,NCH2), 4.22(t,J=7.0Hz,1H,Fmoc-CH), 4.45(m,3H,OCH2,A
sp-α-H), 5.96(d,J=7.0Hz,1H,NH), 6.45(m,1H,NH), 7.29-7.79(m,8H,Ar-H), An
al.Calcd for C32H44N2O5(536.71):C,71.61;H,8.26;N,5.22. Found:C,71.68;H,8
.51;N,5.27.
【００９７】 実施例２ 化合物３の調製 化合物２（9.50g、19.47mmol）を乾燥THF（40ml）に溶解する。ピペリジン（10m
l）を加えて、混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を除去し、残さをフラッシ
ュクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、１：１、次にジクロロメタン中５
％メタノール）で精製して化合物３（5.64g、92％）を得た。TLC：Rf＝0.38（ジ
クロロメタン中５％メタノール）。[α]D 22＝−41.0（c 0.59、クロロホルム）
。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ0.86(t,J=6.5Hz,CH3), 1.22(br s,12H,6CH2), 1.45(
s,9H,3CH3), 1.55(m,2H,CH2), 1.68(s,2H,NH2), 2.46(dd,J=16.0,8.0Hz,1H,Asp-
β-H), 2.83(dd,J=16.0,4.0Hz,1H,Asp-β'-H), 3.20(m,2H,NCH2), 3.80(dd,J=8.
0,4.0Hz,1H,Asp-α-H), 7.36(br s,1H,NH). Anal.Calcd for C17H34N2O3(314.4
7):C,64.93;H,10.90;N,8.90. Found:C,65.01;H,11.20;N,8.96.
【００９８】 実施例３ 化合物４の調製 テトラデカン酸（4.51g、19.78mmol）を乾燥THF（50ml）に溶解する。N-メチル
モルホリン（3.78ml、3.47g、34.4mmol）を加え、溶液を−25℃に冷却した。ク
ロロ蟻酸イソブチル（2.34ml、2.47g、18.06mmol）を滴下し、混合物を５分間攪
拌した。化合物３（5.40g、17.20mmol）の乾燥THF（50ml）溶液を上記の溶液に
滴下した。−25℃で30分間攪拌した後、混合物を１時間以内に室温まで温めた。
次に、メタノール（５ml）を加え、反応混合物を更に５分間攪拌した。真空で濃
縮し、残さはフラッシュクロマトグラフィ（ジクロロメタン：アセトン、30：１
および25：１）で精製し、化合物４（7.21g、80％）を得た。TLC：Rf＝0.37（ヘ
キサン：酢酸エチル、３：１）。[α]D 22＝−14.4（c 0.61、クロロホルム）。1 H NMR(300MHz,CDCl3):δ0.87(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.25(br s,32H,16CH2), 1.4
6(br s,11H,3CH3,CH2), 1.54(m,2H,CH2), 2.21(t,J=7.5Hz,2H,CH2), 2.52(dd,J=
16.5,7.0Hz,1H,Asp-β-H), 2.84(dd,J=16.5,4.0Hz,1H,Asp-β'-H), 3.21(m,2H,N
CH2), 4.71(m,1H,Asp-α-H), 6.63(t,J=5.0Hz,1H,NH), 6.84(d,J=7.0Hz,1H,NH).
Anal.Calcd for C31H60N2O5(524.83):C,70.94;H,11.52;N,5.34. Found:C,70.8
4;H,11.87;N,5.28.
【００９９】 実施例４ 化合物５の調製 化合物４（7.74g、14.77mmol）をトリクロロ酢酸−水（95：５、v/v、180ml）に
溶解し、溶液を室温で４時間攪拌した。次に溶媒を除去し、残さをフラッシュク
ロマトグラフィ（ジクロロメタン中に２〜４％メタノール）で精製し化合物５（
6.71ｇ、97％）を得た。TLC：Rf＝0.33（クロロホルム中５％メタノール）。[α
]D 22＝−27.5（c 0.24、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ0.88(t,J=6.
5Hz,6H,2CH3), 1.26(br s,32H,16CH2), 1.48(m,2H,CH2), 1.62(m,2H,CH2), 1.24
(t,J=7.5Hz,2H,CH2), 2.69(dd,J=16.5,7.0Hz,1H,Asp-β-H), 2.89(dd,J=16.5,4.
0Hz,1H,Asp-β'-H), 3.21(m,2H,NCH2), 4.79(m,1H,Asp-α-H), 6.95(t,J=5.5Hz,
1H,NH), 7.05(d,J=7.5Hz,1H,NH). Anal.Calcd for C27H52N2O4(468.72):C,69.1
9;H,11.18;N,5.98. Found:C,69.14;H,11.28;N,5.95.
【０１００】 実施例５ 化合物８の調製 （１）化合物６：ドデカナル（25.0g、136mmol）、ブロモ酢酸エチル（25.0g、1
50mmol）および150ml THFの混合物に窒素雰囲気下で亜鉛粉末（19.6g、299mmol
）を加えた。反応フラスコを超音波浴中に取り付け、超音波処理を開始した。ヨ
ウ素（3.5ｇ、27.2mmol）をゆっくりと反応フラスコに加えた。超音波処理２〜
３分後に反応は激しく始まった。次に超音波処理を停止し、反応フラスコを超音
波浴から移動させた。亜鉛を濾過除去し、THF（10ml）で６〜７回洗浄した。集
めた濾過液は真空で濃縮した。淡黄色粘稠液体が得られた。ヘキサン（200ml）
を加え、5分間振とうさせた。白色固体が沈殿した。濾過し、ヘキサン（３×15m
l）で洗浄した。集めた濾過液および洗浄液は乾燥状態まで濃縮し、残さはカラ
ムクロマトグラフィ（ヘキサン中10％酢酸エチル）で精製して純粋な化合物６（
22.2ｇ、60％）を得た。TLC：Rf＝0.25（ヘキサン中10％酢酸エチル）。1H NMR(
300MHz,CDCl3):δ0.88(t,J=6.5Hz,CH3), 1.26(m,6H), 1.28(t,J=6.5Hz,3H,CH3),
1.40-1.50(m,4H), 2.40(dd,J=16.0,7.0Hz,1H), 2.50(dd,J=16.0,3.0Hz,1H), 3.
05(s,1H,OH), 4.00(m,1H,H-3), 4.17(q,J=6.5Hz,2H).
【０１０１】 （２）化合物７：３−ヒドロキシミリスチン酸エステル６（122.0ｇ、0.5mmol）
をエタノール（800ml）に溶解し、KOH（33.6ｇ）を加えた。反応混合物は１時間
還流し、次に氷浴で冷却後、10％HCl（1000ml）を加えた。析出した白色固体は
濾過除去し、簡単に乾燥させた（192.0g）。固体は沸騰へキサン（800ml）で再
結晶させて白い結晶化合物７（98.2ｇ、90％）を得た。TLC：Rf＝0.35（ジクロ
ロメタン中５％メタノール）。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ0.88(t,J=6.5Hz,CH3)
, 1.25(m,20H), 2.20(dd,J=15.0,7.5Hz,1H), 2.28(dd,J=15.0,5.5Hz,1H), 3.80(
br s,1H), 4.55(br s,1H).
【０１０２】 （３）３−ヒドロキシミリスチン酸−デヒドロアビエチルアミン塩：純デヒドロ
アビエチルアミン（文献21bに従い精製、131.0ｇ、459.6mmol）をヘキサン（3.0
L）およびジエチルエーテル（1.5L）の混合物に溶解した。化合物７（110.0ｇ、
450.8mmol）をジエチルエーテル（3.0L）に溶解し、上記アミン溶液に攪拌しな
がら添加した。添加後、直ちに結晶化が始まった。攪拌を停止し、反応混合物を
１時間室温に放置した。白色固体を濾別しヘキサン：ジエチルエーテル混合物（
１：１）で洗浄した。沈殿はメタノール（500ml）に溶解（加熱溶解）し、次に
ヘキサン：ジエチルエーテル混合物（１：１、700ml）を加えた。混合物は冷蔵
庫（−90℃）に一晩保管した。白色固体が析出し、濾過して集めた。固体は融点
が更に上昇しなくなるまで再結晶を繰り返した。純（R）−塩の最終収量は38ｇ
、40％。m.p.131.5〜132℃。1H NMR(600MHz,CDCl3):δ:0.85(t,J=6.5Hz,3H,CH3)
, 1.00(s,3H,CH3), 1.19(d,J=6.5Hz,6H,CH3), 1.25(s,3H,CH3), 1.25-1.70(m),
2.10(dd,J=15.0,10.0Hz,1H), 2.27(m,2H), 2.63(d,J=12.5Hz,1H), 2.79(m,2H),
2.87(m,2H), 3.81(m,1H), 6.40(br s,3H), 6.85(d,J=1.5Hz,1H), 6.95(dd,J=8.0
,1.5Hz,1H), 7.12(d,J=8.0Hz,1H)。2.10ppmでの二重のダブレットのピークの一
組は存在する一個のみの異性体に特有である。ラセミ３−ヒドロキシミリスチン
酸から生成した塩に対し、二重のダブレットの二組がこの位置で現れる。ＮＭＲ
をここで用いて分離有効性を検出できる。
【０１０３】 （４）化合物８：デヒドロビエチルアミンとミリスチン酸の塩（38.0ｇ）を２L
の丸底フラスコに入れ、炭酸ナトリウム飽和水溶液（1000ml）およびジエチルエ
ーテル（800ml）を加えた。混合物は30分間、激しく攪拌した。水相とエーテル
相を分離し、固体を集めた。固体は水（300ml）、エーテル（３×100ml）で洗浄
し、短時間乾燥させた。固体は完全に溶解するまで、１Lの２％HCl（水溶液）お
よび酢酸エチル（1.5L）で処理した。水相を分離し酢酸エチルで抽出した（２×
150ml）。有機相は無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮してＲ−に富む酸を得た
。これを酢酸エチルおよびへキサンから再結晶して化合物８（16.5g）を得た。
〜95％e.e.[α]D 20＝−15.5（ｃ1.0、CHCl3）。
【０１０４】 実施例６ 化合物９の調製 化合物８（16.0ｇ、65.6mmol）を無水酢酸エチルに溶解し、ブロモアセトフェノ
ン（15.66g、78.7mmol）およびトリエチルアミン（7.95g、78.7mmol）を窒素雰
囲気下で加えた。反応混合物を一晩攪拌した。白色固体が沈殿した。これを濾別
し酢酸エチル（３×10ml）で洗浄した。集めた洗浄液および濾液は蒸発させ淡黄
色固体を得た。このものをシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン
、１：８）により精製し白色結晶固体として化合物９（22.0ｇ、92％）を得た。
TLC：Rf=0.42（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）。[α]D 20＝−5.7（c 1.0、ク
ロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,3H,CH3), 1.30(br s,
16H), 1.40-1.60(m,4H), 2.57(dd,J=15.0,9.0Hz,1H), 2.70(dd,J=15.0,3.0Hz,1H
), 3.45(d,J=3.5Hz,1H), 4.18(m,1H,H-3), 5.37(d,J=16.0Hz,1H), 5.49(d,J=16.
0Hz,1H), 7.50(m,2H), 7.64(m,1H), 7.92(m,2H)。
【０１０５】 実施例７ 化合物１０の調製 化合物９（500ｇ、1.381mmol）をピリジン（５ml）に溶解し、この溶液に４−ジ
メチルアミノピリジン（DMAP, 8.46mg、0.68mmol）を加えた。次に生成した混合
物を氷浴で５分間冷却し、塩化ラウロイル（383μl、1.657mmol）を滴下した。
塩化ラウロイルの添加が終了したとき、全混合物を室温で終夜攪拌した。次の朝
、反応混合物のＴＬＣは出発脂質９の存在を示した。次いで反応混合物を０℃ま
で冷却し、この温度でさらに塩化ラウロイル（160μl）で処理した。次いで、反
応混合物を浴から除きさらに３時間室温で反応させた。反応を停止するため、メ
タノール（１ml）を加え、10分後反応混合物を濃縮し蒸発乾固させた。残さを次
にシリカゲルクロマトグラフィにかけ精製し（酢酸エチル：ヘキサン；１：９）
、化合物１０を得た（524mg、70％）。反応の収率は不純な留分（320mg）を再度
精製した場合よりも高かった。TLC：Rf=0.34（酢酸エチル：ヘキサン、１：９）
。[α]D 20＝＋1.0（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,
J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.30(m,34H), 1.65(m,4H), 2.30(t,J=6.5Hz,2H), 2.72(dd,J
=15.5,5.5Hz,1H), 2.78(dd,J=15.5,7.5Hz,1H), 5.30(m,1H,H-3), 5.35(s,2H), 7
.47(m,2H), 7.63(m,1H), 7.90(m,2H)。
【０１０６】 実施例８ 化合物１１の調製 化合物９（16.0ｇ、44.2mmol）をピリジン（150ml）に溶解し、DMAP（270mg、2.
2ｍmol）を加えた。塩化テトラデカノイル（13.1ｇ、53.0mmol）を冷水浴中に反
応混合物を保守しながら滴下した。反応混合物を室温で３時間攪拌した。TLCが
反応の完了を示したとき、メタノール（20ml）を添加し反応を停止し30分間攪拌
した。溶媒を除き乾燥させ残さを800mlの酢酸エチルに溶解し氷水で洗浄した（
２×100ml）。水層を酢酸エチルで抽出し戻した（３×100ml）。合わせた有機層
を無水硫酸ナトリウムで乾燥し溶媒を真空除去した。得られた無色の残さをシリ
カゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、１：10）で精製し化合物１１
を得た（23.0ｇ、92％）。TLC：Rf=0.54（酢酸エチル：ヘキサン、５：１）。[
α]D 20＝＋0.95（c 2.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=
6.5Hz,6H,2CH3), 1.26(br s,38H), 1.65(m,4H), 2.31(t,J=6.5Hz,2H), 2.72(dd,
J=16.0,5.5Hz,1H), 2.79(dd,J=16.0,7.5Hz,1H), 5.32(m,1H,H-3), 5.34(s,2H),
7.35(m,2H), 7.61(m,1H), 7.90(m,2H)。
【０１０７】 実施例９ 化合物１２の調製 化合物１２は塩化ラウロイルを塩化パルミトイルで置換した以外は、化合物１０
の調製で記載したと同じ方法で合成した。化合物９（500mg、1.381mmol）および
塩化パルミトイル（628.5μl）間の反応を終了したとき、溶媒除去からの残さを
酢酸エチルで再溶解し水洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した
。所望の生成物、化合物１２を展開液として酢酸エチル−ヘキサン（１：９）を
用いるシリカゲルカラム精製により無色固体（463.4mg、56％）として得た。追
加の生成物（563.6mg）は僅かに不純な形態で得られた。TLC：Rf〔α〕D 20＝＋2
.0（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH 3 ), 1.30(br s,42H), 1.65(m,4H), 2.31(t,J=6.5Hz,2H), 2.72(dd,J=15.0,5.5Hz
,1H), 2.78(dd,J=15.0,7.5Hz,1H), 5.30(m,1H,H-3), 5.35(s,2H), 7.48(m,2H),
7.61(m,1H), 7.90(m,2H)。
【０１０８】 実施例１０ 化合物１３の調製 化合物10（510mg）を80％酢酸中酢酸エチル(18ml)に溶解し、Zn粉末（1.0ｇ）を
添加した。全混合物を一晩良く攪拌しながら放置した。次の朝、反応物を追加の
Zn粉末（400mg）で処理し、５時間さらに攪拌した。固体を次に濾過除去し、豊
富な量の酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮乾燥した。残さをフラッシュシリカ
カラム（酢酸エチル：ヘキサン：酢酸、１：10：１％）で精製し、化合物１３（
327ｇ、82％）を０℃で冷却し無色固体として得た。TLC：Rf=0.22（酢酸エチル
：ヘキサン、１：９）。〔α〕D 20＝1.2（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300M
Hz,CDCl3-CD3OD):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.30(br s,34H), 1.62(m,4H),
2.30(t,J=6.5Hz,2H), 2.52(dd,J=15.5,5.5Hz,1H), 2.60(dd,J=15.5,7.5Hz,1H),
5.22(m,1H,H-3)。
【０１０９】 実施例１１ 化合物１４の調製 化合物１１（23.0ｇ）、亜鉛粉末（50g）および氷酢酸（350ml）の混合物を室温
で２時間攪拌した。亜鉛粉末を濾過除去し、酢酸エチル（100ml）で洗浄した。
合わせた濾液を減圧下に濃縮し、２回トルエンで共沸させた。無色粘稠液の残さ
をシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン中２％メタノール）で精製した
。溶媒の蒸発後に純化合物１４（16.5ｇ、90％）を白い固体として得た。TLC:Rf
＝0.40（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）。〔α〕D 20＝−1.25（c 2.0、クロロ
ホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.30(br s,38H
), 1.40-1.55(m,4H), 2.47(dd,J=16.5,9.0Hz,1H), 2.58(dd,J=16.5,3.0Hz,1H),
4.05(m,1H,H-3)。
【０１１０】 実施例１２ 化合物１５の調製 化合物１２（429.9mg、0.716ｍmol）を酢酸エチル（4.4ml）に溶解し酢酸（17.6
ml）を添加した。亜鉛粉末（2.1ｇ）を添加した後、混合物を室温で一晩攪拌し
た。Znを次に濾過除去し充分な量の酢酸エチルで洗浄した。濾液を濃縮し、フラ
ッシュシリカゲルカラム（酢酸エチル：ヘキサン：酢酸、1：10：１％）で精製
し化合物１５（245g、72％）を得た。TLC:Rf＝0.25（酢酸エチル：ヘキサン、1
：10）。〔α〕D 20＝−1.3（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ
:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.23(br s,42H), 1.62(m,4H), 2.28(t,J=6.5Hz,2H)
, 2.56(dd,J=16.0,5.5Hz,1H), 2.64(dd,J=16.0,7.5Hz,1H), 5.20(m,1H,H-3)。
【０１１１】 実施例１３ 化合物１６の調製 化合物９（5.0ｇ、13.8mmol）、ベンジルトリクロロアセトイミデート（7.0ｇ、
27.6mmol）、分子篩粉末（４Å、3.0ｇ）、無水ジクロロメタン（100ml）および
無水へキサン(100ml)を250mlの丸底フラスコに入れ30分間窒素雰囲気下に攪拌し
た。０℃まで冷却しトリフルオロメチルスルフォン酸（0.414g、2.8mmol）を添
加し５時間０℃で攪拌した。生成物の形成改善がTLCで示されなくなったとき、
反応はトリエチルアミン（2ml）で停止させた。反応混合物を小セライト床に通
して濾過し、ジクロロメタンで完全に洗浄し、一緒にした濾過液洗浄液を濃縮し
た。得られた無色残さをシリカカラム（酢酸エチル：ヘキサン、１：10）で精製
し、純１６（6.0ｇ、96％）を光沢の白色固体として得た。TLC：Rf＝0.36（ヘキ
サン：酢酸エチル、６：１）。〔α〕D 20＝−7.4（c 2.0、クロロホルム）。1H
NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,3H,CH3), 1.25(br s,18H), 1.62(m,2H),
2.66(dd,J=15.0,5.5Hz,1H), 2.80(dd,J=15.0,7.5Hz,1H), 3.95(m,1H), 4.54(d,
J=11.5Hz,1H), 4.60(d,J=11.5Hz,1H), 5.27(d,J=15.5Hz,1H), 5.35(d,J=15.5Hz,
1H), 7.32(m,5H,Ar-H), 7.47(m,2H), 7.60(m,1H), 7.90(m,2H)。
【０１１２】 実施例１４ 化合物１７の調製 化合物１４の調製で記載したと同じ方法で、化合物１７を化合物１６（6.0ｇ）
から亜鉛粉末（10.0ｇ）および氷酢酸(100ml)の存在で調製した。反応は30分で
完了した。作業が終わった後、無色残さを溶媒系として酢酸エチル：ヘキサン：
酢酸（２：８：１％）を用いシリカカラムで精製した。溶媒蒸発後、化合物１７
を65％収率で白い固体として得た。TLC：Rf=0.45（ヘキサン：酢酸エチル、４：
１）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,3H,CH3), 1.26(br s,18H), 1.
60(m,2H), 2.55(dd,J=15.5,5.5Hz,1H), 2.64(dd,J=15.5,6.5Hz,1H), 3.87(m,1H)
, 4.58(s,2H), 7.30(m,5H,Ar-H).
【０１１３】 実施例１５ 化合物１９の調製 （１）化合物１８：ドデシルアルコール（810mg、4.348mmol）、ピリジン（394
μl）およびジクロロメタン（0.5ml）の混合物を、トリフルオロメチルスルフォ
ン酸無水物の冷却溶液（無水トリフリック、8.0mlのジクロロメタン中1.433ml）
に０℃で15分間ゆっくりと加えた。得られた混合物を次に同じ温度で20分間攪拌
した。反応物はわずかに橙色の懸濁液として現れ、そのTLCはドデシルアルコー
ルが存在しないことを示した。冷却したヘキサン（20ml）を添加した。次に固体
をNa2SO4床に通して濾過しさらに少量のヘキサンで洗浄した。溶媒の除去で澄ん
だ液体として粗トリフレート生成物を得た。さらに高真空で乾燥後、粗トリフレ
ート１８の量は1.433ｇであった。TLC：Rf=0.77（ヘキサン：酢酸エチル、10：
１）。
【０１１４】 （２）化合物１９：脂質９（1.05g、2.989mmol）および乾燥１，２−ジクロロエ
タン（25ml）中硫酸ナトリウム（7.0ｇ）を５分間攪拌し粗トリフレート１８溶
液（2.0mlの乾燥１，２−ジクロロエタン中1.433g）を添加した。得られた懸濁
液は室温で週末の間攪拌した。次に80℃で２時間加熱した。なお若干の脂質９が
反応混合物に残っていたが、反応を終了した。固体をNa2SO4床に通して濾過し、
CH2Cl2(150ml)で洗浄した。合わせた濾液を飽和NaHCO3(20ml)、水（50ml）で洗
浄し、Na2SO4で乾燥させた。溶媒除去による残さをフラッシュシリカゲルカラム
（CH2Cl2：ヘキサン、１：１）で精製し、僅かに不純な１９を得、これを第二の
カラム（CH2Cl2：ヘキサン、４：１）で再精製し純粋な１９（1.05ｇ、69％）を
得た。TLC：Rf=0.29（ヘキサン：酢酸エチル、10：１）。〔α〕D 20＝−3.8（c
1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.
26(br s,36H), 1.55(m,4H), 2.60(dd,J=15.5,5.5Hz,1H), 2.74(dd,J=15.5,7.5Hz
,1H), 3.46(m,2H), 3.76(m,2H), 5.30(d,J=16.5Hz,1H), 5.39(d,J=16.5,1H), 7.
49(m,1H), 7.61(m,1H), 7.91(m,2H).
【０１１５】 実施例１６ 化合物２０の調製 化合物１４の合成のために記載したと同じ方法で、化合物２０を酢酸（12.0ml）
中Zn粉末（1.12ｇ）と化合物１９（1.02ｇ、1.922ｍmol）の反応から調製した。
室温で終夜攪拌した後、Znを除去し、合わせた濾液を蒸発乾固させた。残さをフ
ラッシュシリカゲルカラムで精製し、まず、CH2Cl2：ヘキサン（８：１）で精製
し高Ｒf値で全不純物を除き次に酢酸エチル：ヘキサン（１：５）で精製し所望
の生成物２０を88％収率（741.5mg）で溶出した。TLC：Rf=0.20（ジクロロメタ
ン：ヘキサン、８：１）。〔α〕D 20＝−4.8（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(
300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.27(br s,36H), 1.56(m,4H), 2.
54(d,J=6.0Hz,2H), 3.50(m,2H), 3.69(m,1H).
【０１１６】 実施例１７ 化合物２１の調製 （−）−DIP−Cl（9.6g、30mmol）を無水ジエチルエーテル（35ml、Na／ベンゾ
フェノンで新しく蒸留した）に窒素雰囲気下で溶解した。混合物を−40℃（ドラ
イアイス／アセトン）まで冷却した。アリルマグネシウムブロマイド（Aldorich
、ジエチルエーテル中の1.0M溶液は0.9M溶液即ち27.7ml、25mmolとみなされた）
を上記冷却した溶液に徐々に添加した。反応混合物を室温まで温め30分間攪拌を
続けた（全部で1.0時間攪拌した）。その間にドデカノール（4.41ml、3.68ｇ、2
0mmol）を乾燥エーテルに溶解し氷浴を用い０℃に冷却した。30分間室温で攪拌
した上記反応混合物を−78℃まで冷却し、冷却したドデカノールを15分内に徐々
に添加し−78℃で1.0時間攪拌を続けた。TLC（酢酸エチル：ヘキサン、１：15）
がほぼ反応が終了したことを示したとき、冷却浴を除去し、反応混合物を５−10
分攪拌した。飽和酢酸ナトリウム水溶液（5.0ml）および過酸化水素（50％、5.0
ml）をゆっくり注意深く加え５分間攪拌した。酢酸なとりうむ溶液および過酸化
水素の添加を５分毎に繰り返し、全部で20mlの酢酸ナトリウムと15mlの過酸化水
素を添加した。これら試薬の添加の間に、反応混合物を温め、温度が高すぎない
ように注意した（必要なら冷却用氷浴を使用）。得られた混合物はジエチルエー
テルで抽出（３×20ml）した。合わせたエーテル抽出液は水および食塩水（１×
25ml）で洗浄し無水硫酸ナトリウム（60ｇ）で乾燥し濃縮して無色油状化合物を
得た。酢酸エチル中10％へキサンを用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィに
よる精製は純２１を無色粘稠油として60％の収率で得た。TLC：Rf=0.26（ヘキサ
ン：酢酸エチル、15：１）。〔α〕D 20＝＋4.9（c 0.57、クロロホルム）。1H N
MR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,3H,CH3), 1.28(br s,18H), 1.46(m,2H),
2.09-2.18(m,1H), 2.30(m,1H), 3.63(m,1H,OH), 5.13(m,2H), 5.83(m,1H).
【０１１７】 実施例１８ 化合物２２の調製 化合物２０（250mg、0.61mmol）および２１（272mg、1.21mmol）を乾燥ジクロロ
メタン（５ml）に溶解した。DCC（377mg、1.83mmol）およびDMAP（15.0mg、0.12
mmol）を添加し、混合物を室温で24時間攪拌した。水（0.3ml）およびメタノー
ル（５ml）を添加して反応を停止し混合物を10分間攪拌した。溶液をクロロホル
ム（10ml）で２回共沸蒸留して真空乾燥させ濃縮し、残さをへキサン（10ml）で
処理した。固体を濾過し濾液を真空濃縮した。残さをフラッシュシリカゲルクロ
マトグラフィ（ヘキサン／酢酸エチル、30：１）で精製し２２（302mg、81％）
を得た。TLC：Rf=0.33（ヘキサン：酢酸エチル、３：１）。〔α〕D 20＝＋8.2（
c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.89(t,J=6.5Hz,9H,3CH3),
1.26(br s,54H), 1.52(m,6H), 2.31(m,2H), 2.36(dd,J=15.5,6.5Hz,1H), 3.43(m
,2H), 3.68(m,1H), 4.93(m,1H), 5.07(m,2H), 5.75(m,1H). ES-MS calcd for C4 1 H80O3:620.6;Found:621.9(M+H+)。
【０１１８】 実施例１９ 化合物２３の調製 化合物２２（280mg、0.45mmol）をヘキサン（10ml）および酢酸（2ml）に溶解し
、アリクオット（３滴）を加えた。混合物を０℃に冷却し、過マンガン酸カリウ
ム溶液（15ml水中980mg）を添加した。反応混合物を０℃で６時間攪拌した。反
応が終了したとき、硫酸ナトリウム（2.5ｇ）と塩化水素溶液（６N、5ml）を添
加した。暗褐色固体が消え混合物は透明溶液になった。混合物をヘキサン（30ml
×３）とジクロロメタン（30ml×３）で抽出した。ヘキサンとジクロロメタン抽
出物は共に生成物を含んでおり、別々に飽和塩化ナトリウム溶液（20ml）で洗浄
し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空濃縮した。合わせた残さをフラッシュシリカ
ゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）で精製し２３（176mg
、61％）を得た。TLC：Rf=0.30（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）。〔α〕D 20
＝−2.4（c 0.5、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.89(t,J=6.5Hz,9
H,3CH3), 1.27(br s,54H), 1.48-1.65(m,6H), 2.38(dd,J=15.0,6.0Hz,1H), 2.53
(dd,J=15.0,7.0Hz,1H), 2.57(dd,J=15.5,5.5Hz,1H), 2.66(dd,J=15.5,7.0Hz,1H)
, 3.42(m,2H), 3.67(m,1H), 5.22(m,1H). ES-MS calcd for C40H78O5:638.6;Fou
nd:639.3(M+H+)。
【０１１９】 実施例２０ 化合物２６の調製 （１）Ｄ−グルコサミン塩化水素（195ｇ、0.88mmol）および重炭酸ナトリウム
（152ｇ、1.89mmol）を機械的攪拌をしながらプラスチック容器に水（２Ｌ）で
溶解した。この混合物にトリクロロエトキシカルボニルクロライド（180mg、0.8
5mmol）をゆっくり35分以内に添加した。添加の終了後、1.5時間攪拌を続けた。
反応混合物を次に10％HCl溶液（300ml）で酸性化した。固体を濾過除去し水（80
0ml）、ジエチルエーテル（500ml）で洗浄し、50℃で真空下に乾燥しＮ-Troc−
保護Ｄ−グルコサミン（275ｇ、91％）を得て、次のステップに直接用いた。 （２）化合物２４：塩酸（ｇ）をベンジルアルコール（30ml、282mmol）に12分
間０℃で泡立たせ、約1.45ｇのHClを得た。このベンジルアルコールおよび酸の
溶液を次にＮ-Troc−保護Ｄ−グルコサミン（10.0ｇ、28.2mmol）を含む丸底フ
ラスコに添加した。懸濁液の混合物を100℃で25分間加熱し、加熱の際に、懸濁
液は次第に透明溶液になった。反応物を室温で30分間冷却後、へキサン（200ml
）で処理し激しくかき混ぜた。上の有機相を捨て、フラスコの底に残ったミルク
状固体を得た。異なる溶媒〔酢酸エチル：ヘキサン（１：４、50ml）および酢酸
エチル（50ml）〕でミルク状固体を２回処理した。ミルク状固体をさらにヘキサ
ン（200ml）で処理し２４（8.72ｇ、70％）を粗生成物として得た。これはベン
ジルアルコールを含まず次のステップの反応に使用した。 （３）化合物２６：化合物２４（3.14g、7.06mmol）を乾燥アセトニトリル（50m
l）に懸濁した。ベンズアルデヒドジメチルアセタール（3.21ml、21.38mmol）お
よびｐ−トルエンスルフォン酸（50mg、0.26mmol）を添加した。混合物を室温で
４時間攪拌し、トリエチルアミン（１ml）を添加し反応を停止させた。次に溶媒
を除去し、残さを酢酸エチルとヘキサンから再結晶により精製し２６を得た（3.
63ｇ、96％）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:2.52(s,1H,OH), 3.59(m,1H), 3.77(dd
,J=10.0,10.0Hz,1H), 3.85-4.00(m,3H), 4.25(dd,J=11.0,5.5Hz,1H), 4.55(d,J=
12.0Hz,1H), 4.60-4.84(m,3H), 4.99(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.30(d,J=10.0Hz,1H,
NH), 5.57(s,1H), 7.25-7.50(m,10H,Ar-H).
【０１２０】 実施例２１ 化合物２７の調製 無水CH2Cl2（16ml）中、粗化合物２４（1.35g、3.04mmol）および無水CaSO4（0.
6g）の混合物を室温で５分間攪拌した。この懸濁液に、２，２−ジメトキシプロ
パン（1.2ml、9.12mmol）を添加し、ｐ−トルエンスルフォン酸一水化物（62mg
、0.30mmol）を添加した。得られた混合物を次に1.5時間反応させた。反応混合
物を次に固体NaHCO3で中和し、固体を濾過しCH2Cl2で洗浄した。溶媒と試薬を除
いた残さをフラッシュシリカゲルカラム（酢酸エチル：ヘキサン、１：２）で精
製し２７（1.19g、81％）を無色の泡で得た。TLC：Rf=0.67（ヘキサン：酢酸エ
チル、３：２）。〔α〕D 20＝＋104.2（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz
,CDCl3):δ:1.45(s,3H,CH3), 1.55(s,3H,CH3), 3.59-3.88(m,5H), 3.93(ddd,J=9
.5,9.5,3.5Hz,1H,H-2), 4.49(d,J=11.5Hz,1H), 4.65(d,J=12.0Hz,1H), 4.72(d,J
=11.5Hz,1H), 4.80(d,J=12.0,1H), 4.93(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.32(d,J=9.5Hz,1
H,NH), 7.20(m,5H,Ar-H)。
【０１２１】 実施例２２ 化合物２８の調製 （１）化合物２５：塩化水素（ｇ）をアリルアルコール（190ml）に０℃で約30
分間泡立たせ約9.5ｇのHClを得た。このアリルアルコールとHClの溶液をＮ−Tro
c−保護Ｄ−グルコサミン（実施例２０参照／(１)、69g；194.58mmol）を含む丸
底フラスコに移した。全混合物は懸濁液として現れ104℃の浴に浸して５分後に
透明な溶液になった。同じ温度で加熱を35分間続けた。反応混合物を浴から除い
た後、室温にて冷却し、次にアリルアルコールを蒸発させて除いた。トルエンと
の共沸を行い水分を除き粗生成物２５を褐色がかったフレークとして得、これを
直接次のステップの反応に用いた。TLC：Rf=0.64（ジクロロメタン中10％メタノ
ール）。 （２）化合物２８：前記粗生成物２５を次にCH3CN（600ml）に溶解し室温で6.5
時間、ベンズアルデヒドジメチルアセテート（87ml）およびｐ−トルエンスルフ
ォン酸一水和物（490mg、2.40mmol）で処理した。反応混合物を次に固体NaHCO3
（12g）で処理し、アルカリ性ｐHを得た。固体を濾過しアセトンで洗浄し、合わ
せた濾液を濃縮乾燥させた。所望の生成物２８を無色固体（45.74g、49％）とし
てエタノール（275ml）再結晶で得た。TLC：Rf=0.22（ヘキサン：酢酸エチル、
３：１）。〔α〕D 20＝＋69.3（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3)
:δ:2.50(br s,1H,OH), 3.56(dd,J=9.5,9.5Hz,1H), 3.75(dd,J=10.0,10.0Hz,1H)
, 3.82-4.04(m,4H), 4.18-4.30(m,2H), 4.68(d,J=11.5Hz,1H), 4.82(d,J=11.5Hz
,1H), 4.92(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.25(d,J=10.0Hz,1H,NH), 5.28-5.35(m,2H), 5
.55(s,1H), 7.38(m,3H), 7.50(m,2H)。
【０１２２】 実施例２３ 化合物２９の調製 テトラデカン酸（1.29g、5.55mmol）および２６（2.00g、3.76mmol）を乾燥ジク
ロロメタン（50ml）に窒素下で溶解した。この溶液にジシクロヘキシルカルボジ
イミド（DCC、1.17g、5.66mmol）および４−ジメチルアミノピリジン（DMAP、0.
23g、1.89mmol）を添加した。混合物を室温で２時間攪拌し、固体を濾過し、ジ
クロロメタン（4ml）で洗浄した。濾液を真空濃縮し残さをシリカゲルクロマト
グラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、６：１）で精製し、２９（2.53g、91％）を
得た。TLC：Rf=0.40（ヘキサン：酢酸エチル、６：１）。〔α〕D 22＝＋44.7（c
0.57、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.89(t,J=6.5Hz,3H,CH3), 1
.25(m,20H), 1.57(m,2H,CH2), 2.30(m,2H,CH2), 3.72(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-4
), 3.79(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-6), 3.97(ddd,J=10.0,10.0,5.5Hz,1H,H-5), 4.
05(ddd,J=10.0,10.0,3.5Hz,1H,H-2), 4.21(dd,J=10.0,5.5Hz,1H,H-6'), 4.54(d,
J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.66,4.71(2d,J=12.0Hz,各1H,CCl3CCH2O), 4.76(d,J=11.5
Hz,1H,CHHPh), 4.97(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.35(d,J=10.0Hz,1H,NH), 5.41(dd,J=
10.0,10.0Hz,1H,H-3), 5.53(s,1H,CHPh), 7.30-7.45(m,10H,Ar-H). Anal. calcd
for C37H50Cl3NO8(743.16):C,59.80;H,6.78;N,1.88. Found;C,60.03;H,6.63;N,
1.97。
【０１２３】 実施例２４ 化合物３０の調製 化合物１３の調製で述べたように酢酸エチル（150ml）中、活性化亜鉛（6.56g、
100.9mmol）および80％酢酸によって化合物２９（2.49g、3.35mmol）を３０に変
換した。反応は６時間で完了し、通常の作業で残さを得た。次いでジオキサンか
ら凍結乾燥させて遊離アミン化合物（1.83g、96％）を得た。TLC：Rf=0.41（ジ
クロロメタン中５％メタノール）。前記アミノ化合物（900mg、1.59mmol）を乾
燥CH2Cl2-DMF（４：１、100ml）に再溶解した。このアミン溶液に窒素雰囲気で
化合物５（1.15g、2.46mmol）およびDCC（528mg、2.46mmol）を添加した。反応
混合物を室温で48時間攪拌した。溶媒を除去し残さを繰り返しフラッシュクロマ
トグラフィ（先ずクロロホルム中３ないし５％アセトン、次いでジクロロメタン
中８ないし10％アセトン）で精製し、３０（1.08g、62％）を得た。TLC：Rf=0.4
2（ジクロロメタン中５％メタノール）。〔α〕D 22＝＋31.0（c 0.29、クロロホ
ルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.86(t,J=6.5Hz,9H,3CH3), 1.23(m,52H,26CH 2 ), 1.45-1.65(m,6H,3CH2), 2.18-2.35(m,5H,2CH2,Asp-β-H), 2.70(dd,J=15.0,
3.5Hz,1H, Asp-β'-H), 3.16(m,2H,NCH2), 3.68(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-4), 3.
75(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-6), 3.93(ddd,J=10.5,10.0,3.5Hz,1H,H-5), 4.20(dd
,J=10.0,3.5Hz,1H,H-6'), 4.30(ddd,J=10.0,10.0,3.5Hz,1H,H-2), 4.58,4.70(2d
,J=11.0Hz,各1H,CH 2Ph), 4.60(m,1H,Asp-α-H), 4.97(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.32
(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-3), 5.50(s,1H,CHPh), 6.13(d,J=10.0Hz,1H,NH), 6.97
(t,J=5.0Hz,1H,NH), 7.25-7.44(m,11H,NH,Ar-H). ES-MS calcd for C61H99N3O9:
1017.7; Found:1019.3(M+H)。
【０１２４】 実施例２５ 化合物３１の調製 乾燥THF-CHCl3（６：１、24ml）中３０（150mg、0.15mmol）の溶液に、分子篩（
４Å、0.5g）を加え混合物を室温で20分間攪拌した。ソジウムシアノボロハイド
ライド（188mg、3.00mmol）を加え混合物を０℃まで冷却しHCl(g)／Et2Oを気体
が放出されなくなるまで徐々に滴下した。追加のソジウムシアノボロハイドライ
ド（400mg）を添加し、気体が生成しなくなるまでHCl(g)／Et2Oをゆっくり加え
た。混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液（50ml）に注ぎ、酢酸エチル（100ml×
３）で抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム溶液(15ml)で洗浄し、硫酸ナトリ
ウムで乾燥し、濃縮した。残さをフラッシュクロマトグラフィ（ジクロロメタン
中１ないし２％のメタノール）で精製し３１（130mg、86％）を得た。TLC：Rf=0
.46（ジクロロメタン：メタノール、95：３、２回展開した）。〔α〕D 22＝＋30
.7（c 0.46、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.89(t,J=6.5Hz,9H,3C
H3), 1.25(br s,52H,26CH2), 1.45(m,2H,CH2), 1.60(m,4H,2CH2), 2.21(m,2H,CH 2 ), 2.30(m,2H,CH2), 2.35(dd,J=15.0,7.0Hz,1H,Asp-β-H), 2.71(dd,J=15.0,3.
5Hz,1H, Asp-β'-H), 2.72(d,J=3.0Hz,1H,OH), 3.17(m,2H,NCH2), 3.65-3.87(m,
4H,H-4,H-5,2H-6), 4.25(ddd,J=10.5,9.5,3.5Hz,1H,H-2), 4.54-4.73(m,5H,2CH 2 Ph,Asp-α-H), 4.96(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.13(dd,J=10.5,9.0Hz,1H,H-3), 6.13
(d,J=9.0Hz,1H,NH), 7.02(t,J=5.5Hz,1H,NH), 7.28-7.40(m,11H,NH,Ar-H). Anal
. calcd for C61H101N3O9:C,71.80;H,9.98;N,4.12. Found; C,71.66;H,10.39;N,
4.48. ES-MS calcd 1019.8; Found:1021.1(M+H)。
【０１２５】 実施例２６ 化合物３２の調製 乾燥ジクロロメタン（10ml）中化合物３１（125mg、0.123mmol）に１Ｈ−テトラ
ゾール（26mg、0.37mmol）およびジベンジルジイソプロピルフォスフォルアミダ
イト（86.3mg、0.084ml、0.25mmol）を添加した。混合物を室温で30分間攪拌し
次いで０℃に冷却した。ｍ−クロロ過安息香酸（ｍ−CPBA,55％、136mg、0.44mm
ol）を添加し混合物を30分間０℃で攪拌した。次いで混合物を10％亜硫酸ナトリ
ウム（20ml）に注入しジクロロメタン（20ml×３）で抽出した。有機層を飽和重
炭酸ナトリウム溶液（10ml）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。残
さは繰り返しフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン：アセトン、６：１および
４：１；トルエン：アセトン、10：１および８：１）で精製し３２（104mg、66
％）を得た。TLC：Rf=0.20（トルエン：アセトン、８：１）。〔α〕D 22＝＋23.
7（c 0.59、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.89(m,9H,3CH3), 1.25
(m,52H,26CH2), 1.44(m,2H,CH2), 1.63(m,2H,CH2), 1.74(m,2H,CH2), 2.14(t,J=
7.0Hz,2H,CH2), 2.22(m,2H, CH2), 2.31(dd,J=15.0,6.5Hz,1H,Asp-β-H), 2.72(
dd,J=15.0,3.5Hz,1H, Asp-β'-H), 3.17(m,2H,NCH2), 3.68(m,2H,2H-6), 3.95(m
,1H,H-5), 4.28(ddd,J=10.5,9.5,3.5Hz,1H,H-2), 4.47(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh),
4.55(d,J=12.0Hz,CHHPh), 4.60(m,3H,H-4,Asp-α-H,CHHPh), 4.72(d,1H,J=11.5H
z,1H,CHHPh), 4.90(m,4H,2CH 2Ph), 4.99(d,J=3.5Hz,1H,H-1), 5.34(dd,J=10.5,9
.0Hz,1H,H-3), 6.13(d,J=9.5Hz,1H,NH), 7.03(t,J=5.5Hz,1H,NH), 7.28-7.42(m,
21H,NH,Ar-H). Anal. calcd for C75H114N3O12P:(1280.72):C,70.34;H,8.97;N,3
.28. Found; C,70.54;H,8.90;N,3.26.
【０１２６】 実施例２７ 化合物３３の調製 メタノール：酢酸エチル：酢酸（２：１：0.3、80ml）の混合物中３２（30mg、0
.023mmol）の溶液に、パラジウム／炭素（５％、50mg）を添加した。混合物を室
温で24時間水素雰囲気下に攪拌した。固体を濾過し濾液を濃縮した。残さをジオ
キサン：クロロホルム（10：１、30ml）から凍結乾燥し３３を得た（17mg、79％
）。TLC：Rf=0.27（クロロホルム：メタノール：水、２：１：0.1）。〔α〕D 22 ＝＋310.8（c 0.074、クロロホルム：メタノール、４：１）。α−異性体につい
て：1H NMR(500MHz,CDCl3-CD3OD、１：１):δ:0.89(t,J=7.0Hz,9H,3CH3), 1.28(
br.s,52H,26CH2), 1.49(m,2H,CH2), 1.60(m,4H,2CH2), 2.23(t,J=7.5Hz,2H,CH2)
, 2.35(m,2H,CH2), 2.49(dd,J=14.0,5.0Hz,1H,Asp-β-H), 2.61(dd,J=14.0,6.0H
z,1H, Asp-β'-H), 3.17(m,2H,NCH2), 3.72(m,2H,2H-6), 3.96(m,1H,H-5), 4.12
(dd,J=10.5,3.5Hz,1H,H-2), 4.28(m,1H,H-4), 4.65(m,1H,Asp-α-H), 5.10(d,J=
3.5Hz,1H,H-1), 5.32(dd,J=10.5,9.5Hz,1H,H-3). 31P NMR(202.3MHz,DMSO-d6):
δ-0.02ppm. ES-MS calcd for C47H90N3O12P:919.6. Found 921.1(M+H).
【０１２７】 実施例２８ 化合物３５の調製 乾燥ピリジン（10ml）中３４31（1.0g、3.50mmol）の溶液に、トリフェニルメチ
ルクロライド（836mg、3.0mmol）およびDMAP（30.5mg、0.25mmol）を添加した。
混合物を室温で20時間攪拌した。追加の塩化トリチル（418mg、1.25mmol）およ
びDMAP（30.5mg、0.25mmol）を添加し混合物を40℃で４時間攪拌した。溶媒をト
ルエンで共沸蒸留し、残さをフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチ
ル、１：１）で精製し３５（1.42g、88％）を得た。TLC：Rf=0.36（ヘキサン：
酢酸エチル、１：１）。〔α〕D 22＝−48.3（c 0.6、クロロホルム）。1H NMR(3
00MHz,CDCl3):δ:2.70(br.s,1H,OH), 3.00(br.s,1H,OH), 3.44-3.53(m,2H,2H-6)
, 3.59(m,1H,H-5), 3.65(dd,J=9.5,9.0Hz,1H,H-4), 4.21(dd,J=9.5,8.0Hz,1H,H-
2), 4.55,4.95(2d,J=12.0,各1H,CH 2Ph), 5.23(d,J=8.0Hz,1H,H-1), 7.10-7.80(m
,24H,Ar-H). Anal calcd for C40H35NO7・1.3H2O(641.72):C,72.23;H,5.70;N,2.
10. Found C,72.24;H,5.92;N,1.83.
【０１２８】 実施例２９ 化合物３６の調製 水素化ナトリウム（120mg、5.02mmol）および臭化ベンジル（0.86g、0.60ml、5.
02mmol）を乾燥DMF（10ml）に添加した。この溶液にDMF（8ml）中３５（1.34g、
2.09mmol）の溶液を３分以内に滴下した。混合物を室温で１時間攪拌し、さらに
追加量の臭化ベンジル（0.43g、0.30ml、2.51mmol）および水素化ナトリウム（6
0mg、2.51mmol）で処理した。反応混合物をさらに２時間長くした。メタノール
（2ml）を添加し混合物をさらに10分攪拌した。次いで反応物を氷水（100ml）に
注入しジエチルエーテル（60ml×３）で抽出した。合わせたエーテル層を氷水（
150ml×３）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。残さはフラッシュク
ロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、５：１）で精製し３６（1.55g、90％
）を得た。TLC：Rf=0.60（ヘキサン：酢酸エチル、３：１）。〔α〕D 22＝＋5.5
（c 0.8、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:3.32(dd,J=10.0,4.5Hz,1H
,H-6a),3.60(m,1H,H-5), 3.68(dd,J=10.0,1.8Hz,1H,H-6a), 4.03(dd,J=9.5,8.2H
z,1H,H-2), 4.33(m,2H,H-3,H-4), 4.43(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.47(d,J=10.0H
z,1H,CHHPh), 4.61(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.72(d,J=10.0Hz,1H,CHHPh), 4.80(
d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.94(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 5.20(d,J=8.2Hz,1H,H-1),
6.84-7.80(m,34H,Ar-H). Anal. calcd for C54H47NO7・1.3H2O(821.97):C,76.7
2;H,5.91;N,1.66. Found; C,76.56;H,6.13;N,1.52.
【０１２９】 実施例３０ 化合物３７の調製 酢酸−水（４：１、60ml）中３６（1.42g、1.73mmol）の溶液を110℃で１時間攪
拌した。溶媒をトルエンとの共沸蒸留で除去し残さをフラッシュクロマトグラフ
ィ（ヘキサン：酢酸エチル、２：１）で精製し３７（700mg、70％）を得た。TLC
：Rf=0.31（ヘキサン：酢酸エチル、２：１）。〔α〕D 22＝＋16.0（c 0.25、ク
ロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:1.90(dd,J=6.5,6.5Hz,1H,OH),3.54(m,
1H,H-5), 3.73(dd,J=9.5,9.0Hz,1H,H-4), 3.78(m,1H,H-6a), 3.93(m,1H,H-6b),
4.19(dd,J=10.0,8.5Hz,1H,H-2), 4.36(dd,J=10.0,9.0Hz,1H,H-3), 4.43(d,J=12.
0Hz,1H,CHHPh), 4.50(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.73(d,J=11.0Hz,1H,CHHPh), 4.7
6(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.79(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.90(d,J=11.0Hz,1H,CH H Ph), 5.20(d,J=8.5Hz,1H,H-1), 6.80-7.80(m,19H,Ar-H). Anal. calcd for C35 H33NO7・0.8H2O(579.65):C,70.76;H,5.87;N,2.35. Found; C,70.74;H,6.14;N,2.
20.
【０１３０】 実施例３１ 化合物３８の調製 95％エタノール（40ml）中３７（0.60g、1.04mmol）の溶液にヒドラジン一水和
物（2.06g、2.0ml、41.2mmol）を添加した。混合物を２時間還流し、次いで溶媒
を真空除去した。残さをフラッシュクロマトグラフィ（ジクロロメタン中１ない
し２％メタノール）で精製し３８（450mg、97％）を得た。TLC：Rf=0.20（ジク
ロロメタン中２％メタノール）。〔α〕D 22＝−9.4（c 0.35、クロロホルム）。 1 H NMR(300MHz,CDCl3):δ:1.75(br.s,3H,OH,NH2), 2.92(dd,J=9.0,8.0Hz,1H,H-2
), 3.43(m,1H,H-5), 3.49(dd,J=9.5,9.5Hz,1H,H-4), 3.66(dd,J=9.5,9.0Hz,1H,H
-3), 3.76(dd,J=12.0,5.0Hz,1H,H-6a), 3.91(dd,J=12.0,2.5Hz,1H,H-6b), 4.39(
d,J=8.0Hz,1H,H-1), 4.63(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.70(d,J=11.0Hz,1H,CHHPh),
4.74(d,J=11.0Hz,1H,CHHPh), 4.86(d,J=11.0Hz,1H,CHHPh), 4.88(d,J=11.5Hz,1
H,CHHPh), 4.99(d,J=11.0Hz,1H,CHHPh), 7.35(m,15H,Ar-H). Anal. calcd for C 27 H31NO5(449.5):C,72.14;H,6.95;N,3.15. Found; C,72.34;H,7.15;N,3.12.
【０１３１】 実施例３２ 化合物３９の調製 化合物３８（400mg、0.89mmol）、１５（401mg、0.83mmol）およびDCC（275mg、
1.34mmol）を冠そうジクロロメタン（10ml）に溶解し得られた混合物を室温で３
時間攪拌した。固体を路会sジクロロメタン（４ml）で洗浄した。濾液を濃縮し
残さをシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン中0.5ないし１％メタノー
ル）で精製し３９（57mg、76％）を得た。TLC：Rf=0.30（ジクロロメタン中２％
メタノール）。〔α〕D 22＝−2.6（c 0.7、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDC
l3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.25(br.s,42H,21CH2), 1.55(m,4H,2CH2),
2.14(m,2H,CH2), 2.28(dd,J=15.0,6.0Hz,1H,CHH), 2.36(dd,J=15.0,6.0Hz,1H,CH H ), 3.48(m,2H,H-2,H-5), 3.59(dd,J=9.0,9.0Hz,1H,H-4), 3.71(dd,J=11.5,4.5H
z,1H,H-6a), 3.87(dd,J=11.5,2.5Hz,1H,H-6b), 4.10(dd,J=10.0,9.0Hz,1H,H-3),
4.60(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.65(d,J=11.5Hz,2H,2CHHPh), 4.80(d,J=11.5Hz,
1H,CHHPh), 4.81(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.83(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.95(d,
J=8.0Hz,1H,H-1), 5.04(m,1H,lipid-3-H), 5.90(d,J=8.0Hz,1H,NH), 7.35(m,15H
,Ar-H). Anal. calcd for C57H87NO8・0.3H2O(914.32):C,74.44;H,9.60;N,1.52. Found; C,74.38;H,9.85;N,1.56.
【０１３２】 実施例３３ 化合物４０の調製 乾燥ジクロロメタン（30ml）中化合物３８（410mg、0.913mmol）の溶液に化合物
１４（623mg、1.73mmol）およびDCC（564mg、2.74mmol）を添加した。混合物を
室温で24時間攪拌した。固体を濾過しジクロロメタン（４ml）で洗浄した。濾液
を濃縮し残さをシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン中0.5ないし１％
メタノール）で精製し４０（664mg、82％）を得た。TLC：Rf=0.33（ジクロロメ
タン中１％メタノール）。〔α〕D 22＝−3.2（c 0.6、クロロホルム）。1H NMR(
300MHz,CDCl3):δ:0.90(t,J=7.0Hz,6H,2CH3), 1.25(m,38H,19CH2), 1.55(m,4H,
2CH2), 1.89(dd,J=7.0,6.0Hz,1H,OH), 2.15(m,2H,CH2), 2.27(dd,J=15.0,5.5Hz,
1H,CHH), 2.36(dd,J=15.0,6.0Hz,1H,CHH), 3.46(m,1H,H-5), 3.52(m,1H,H-4), 3
.59(dd,J=10.0,9.0Hz,1H,H-3), 3.70(m,1H,H-6a), 3.86(m,1H,H-6b), 4.10(dd,J
=10.0,8.0Hz,1H,H-2), 4.60(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.64(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh
), 4.65(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.81(d,J=11.5Hz,2H,2CHHPh), 4.83(d,J=12.0H
z,1H,CHHPh), 4.95(d,J=8.0Hz,1H,H-1), 5.04(m,1H,lipid-3-H), 5.92(d,J=8.0H
z,1H,NH), 7.30(m,15H,Ar-H). Anal. calcd for C55H83NO8(886.26):C,74.47;H,
9.44;N,1.58. Found; C,74.25;H,9.44;N,1.64.
【０１３３】 実施例３４ 化合物４１の調製 化合物２８（312mg、0.65mmol）、１４（200mg、0.44mmol）およびDCC（136mg、
0.66mmol）およびDMAP（27mg、0.22mmol）を乾燥ジクロロメタン（５ml）に溶解
した。混合物を室温で４時間攪拌した。固体を濾過し酢酸エチル（５ml）で洗浄
した。濾液を濃縮し残さをフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル
、８：１）で精製し４１（398mg、98％）を得た。TLC：Rf=0.69（ヘキサン：酢
酸エチル、３：１）。〔α〕D 22＝＋32.0（c 0.5、クロロホルム）。1H NMR(300
MHz,CDCl3):δ:0.90(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.25(m,38H,19CH2), 1.52(m,4H,2CH 2 ), 2.16(t,J=7.5Hz,2H,CH2), 2.50(dd,J=16.0,6.0Hz,1H,CHH), 2.63(dd,J=16.0
,6.0Hz,1H,CHH), 3.71(dd,J=9.5,9.5Hz,1H,H-4), 3.78(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-
6a), 3.94(m,1H,H-5), 3.98-4.08(m,2H,H-2,CHHCH=CH2), 4.21(m,1H,CHHCH=CH2)
, 4.29(dd,J=10.0,5.0Hz,1H,H-6b), 4.69,4.76(2d,J=12.0Hz,各1H,Troc-CH2), 4
.94(d,J=3.6Hz,1H,H-1), 5.16(m,1H,lipid-3-H), 5.30(m,2H,CH=CH2), 5.39(dd
,J=9.5,9.5Hz,1H,H-3), 5.42(d,J=10.0Hz,1H,NH), 5.53(s,1H,CH-Ph), 5.90(m,1
H,CH=CH2), 7.30-7.35(m,15H,Ar-H). Anal. calcd for C47H74Cl3NO10(919.46):
C,61.40;H,8.11;N,1.52. Found; C,61.40;H,8.19;N,1.58.
【０１３４】 実施例３５ 化合物４２の調製 [ビス（メチルジフェニルホスフィン）]（１，５−シクロオクタジエン）イリジ
ウム(I)ヘキサフルオロホスフェート（37mg、0.044mmol）を乾燥THF（5ml）に懸
濁し水素ガスを５分間泡状で導入し黄色がかった溶液を得、これを乾燥THF（5ml
）中４１（400mg、0.44mmol）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌し
た。水（0.5ml）とＮ−ブロモスクシンイミド（NBS、117mg、0.66mmol）を次い
で添加し、反応を１時間長く攪拌した。溶媒除去から得られた残さを酢酸エチル
（200ml）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液（20ml×２）で洗浄した。合わ
せた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。残さをフラッシュクロマトグラ
フィ（ヘキサン：酢酸エチル、４：１および３：１）で精製し４２（314mg、82
％）をα／β＝４：１の割合のアノマー混合物として得た。TLC：Rf=0.36（ヘキ
サン：酢酸エチル、３：１）。〔α〕D 22＝−9.6（c 1.0、クロロホルム）。α-
異性体に対し1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(t,J=6.5Hz,6H,2CH3), 1.24(m,38H,
19CH2), 1.50(m,4H,2CH2), 2.16(t,J=7.5Hz,2H,CH2), 2.49(dd,J=15.0,5.0Hz,1
H,CHH), 2.60(dd,J=15.0,7.0Hz,1H,CHH), 3.65(d,J=4.0Hz,1H,OH), 3.70(dd,J=9
.5,9.5Hz,1H,H-4), 3.77(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-6a), 4.03(m,1H,H-2), 4.17(m
,1H,H-5), 4.28(dd,J=10.0,4.5Hz,1H,H-6b), 4.67,4.75(2d,J=12.0Hz,各1H,Troc
-CH2), 5.15(m,1H,lipid-3-H), 5.35(dd,J=4.0,4.0Hz,1H,H-1), 5.43(dd,J=9.5
,9.5Hz,1H,H-3), 5.51(s,1H,CHPh), 5.81(d,J=10.0Hz,1H,NH), 7.32-7.47(m,5H,
Ar-H). Anal. calcd for C44H70Cl3NO10(879.39):C,60.10;H,8.02;N,1.59. Foun
d; C,60.11;H,8.09;N,1.61.
【０１３５】 実施例３６ 化合物４３の調製 乾燥ジクロロメタン（30ml）中４２（2.50g、2.88mmol）の溶液にトリクロロア
セトニトリル（8.64g、6.0ml、60.0mmol）およびDBU（10滴）を添加した。混合
物を室温で２時間攪拌し真空濃縮した（乾燥はしない）。残さをフラッシュクロ
マトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル：トリエチルアミン、６：１：１％および
５：１：15）で精製し４３（2.40g、81％）を得た。TLC：Rf=0.25（ヘキサン：
酢酸エチル、８：１）。〔α〕D 22＝＋35.0（c 1.0、クロロホルム）。1H NMR(3
00MHz,CDCl3):δ:0.90(t,J=7.0Hz,6H,2CH3), 1.25(m,38H,19CH2), 1.50(m,4H,2
CH2), 2.20(t,J=7.5Hz,2H,CH2), 2.56(dd,J=15.5,5.5Hz,1H,CHH), 2.65(dd,J=15
.5,7.0Hz,1H,CHH), 3.81(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-4), 3.83(dd,J=10.0,10.0Hz,1
H,H-6a), 4.06(m,1H,H-5), 4.25(ddd,J=10.0,9.0,4.0Hz,1H,H-2), 4.36(dd,J=10
.0,5.0Hz,1H,H-6b), 4.63,4.78(2d,J=12.0Hz,各1H,Troc-CH2), 5.18(m,1H,lipid
-3-H), 5.45(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-3), 5.56(d,J=9.0Hz,1H,NH), 5.58(s,1H,
CHPh), 6.42(d,J=4.0Hz,1H,H-1), 7.30-7.45(m,5H,Ar-H), 8.73(s,H,NH). Anal.
calcd for C46H70Cl6N2O10(1023.78):C,53.97;H,6.89;N,2.74. Found; C,53.80
;H,6.77;N,2.80.
【０１３６】 実施例３７ 化合物４４の調製 乾燥ジクロロメタン（６ml）中３９（269mg、0.295mmol）および４３（452mg、0
.442mmol）の溶液に分子篩（４Å、1.0g）を添加した。混合物を室温で20分間攪
拌し次いで０℃に冷却した。トリフルオロボロンエーテレート溶液（CH2Cl2中0.
15M、0.5ml）を滴下し反応混合物を０℃で30分間攪拌した。次いでトリエチルア
ミン（0.05ml）で処理した。固体を濾過しジクロロメタンで洗浄した。濾液を濃
縮し残さを酢酸エチルから沈殿しシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン
中1.5％メタノール）で精製し４４（340mg、65％）を得た。TLC：Rf=0.31（ジク
ロロメタン中２％メタノール）。〔α〕D 22＝−13.3（c 0.7、クロロホルム）。 1 H NMR(300MHz,CDCl3＋CD3OD):δ:0.88(t,J=6.5Hz,12H,4CH3), 1.24(m,72H,36CH 2 ), 1.52(m,8H,4CH2), 1.70(m,4H,2CH2), 1.94(m,4H,2CH2), 2.16(m,4H,2CH2),
2.27(dd,J=15.0,6.0Hz,1H,CHH), 2.35(dd,J=15.0,6.5Hz,1H,CHH), 2.49(dd,J=1
5.5,5.5Hz,2H,CHH), 2.59(dd,J=15.5,7.0Hz,1H,CHH), 3.35-4.14(m,10H,H-2,H-3
,H-4,H-5,H-6,H-2',H-4',H-5',H-6'a), 4.31(dd,J=10.0,5.5Hz,1H,H-6'b), 4.53
(d,J=8.0Hz,1H,H-1'), 4.57-4.69(m,5H,Cl3CCH2,3CHHPh), 4.75(dd,J=11.5Hz,1H
,CHHPh), 4.78(d,J=11.0Hz,1H,CHHPh), 4.88(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.89(d,J
=8.0Hz,1H,H-1), 5.04(m,1H,lipid-3-H), 5.18(m,2H,H-3',lipid-3-H), 5.48(s
,1H,CHPh), 7.25-7.45(m,20H,Ar-H). Anal. calcd for C101H155Cl3N2O17(1755.
70):C,66.95;H,8.84;N,1.55. Found; C,66.83;H,8.63;N,1.66.
【０１３７】 実施例３８ 化合物４５の調製 化合物３０の調製で記載したと同じ方法を用い、化合物４５を合成した。まず室
温で60時間酢酸エチル（500ml）中活性化亜鉛（5.0g）および80％酢酸で処理し
た４４（224mg、0.126mmol）から粗アミンを得た。ジオキサンから凍結乾燥した
アミノ化合物（192mg、95％）を得た。そして、このアミン化合物（212mg、0.13
2mmol）および１３（115mg、0.238mmol）をDCC（122mg、0.60mmol）および乾燥
ジクロロメタン（10mg）の存在で室温にて48時間で化合物４５に変換した。純４
５（160mg、60％）は粗４５をシリカゲルクロマトグラフィ精製（クロロホルム
中３％アセトン）して得た。TLC：Rf=0.30（ジクロロメタン中２％メタノール）
。〔α〕D 22＝−8.9（c 0.7、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.88(
t,J=6.5Hz,18H,6CH3), 1.10-1.90(m,126H,63CH2), 2.14(t,J=7.0Hz,4H,2CH2),
2.26(m,6H,3CH2), 2.50(dd,J=15.0,5.5Hz,1H,CHH), 2.59(dd,J=15.5,7.5Hz,1H,C
HH), 3.40-4.14(m,10H,H-2,H-3,H-4,H-5,2H-6,H-2',H-4',H-5',H-6'a), 4.27(dd
,J=11.0,5.0Hz,1H,H-6'b), 4.60(d,J=11.5Hz,2H,2CHHPh), 4.66(d,J=12.0Hz,1H,
CHHPh), 4.73(d,J=8.0Hz,1H,H-1'), 4.74(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.75(d,J=11
.5Hz,1H,CHHPh), 4.82(d,J=8.0Hz,1H,H-1), 4.86(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 5.05(
m,2H,2lipid-3-H), 5.15(m,1H,lipid-3-H), 5.25(dd,J=10.0,10.0Hz,1H,H-3'),
5.48(s,1H,CHPh), 5.94(d,J=9.0Hz,1H,NH), 6.06(d,J=9.0Hz,1H,NH), 7.25-7.4
3(m,20H,Ar-H). Anal. calcd for C124H202N2O18・1.5H2O(2008.96):C,73.15;H,
10.14;N,1.37. Found; C,73.06;H,9.95;N,1.22.
【０１３８】 実施例３９ 化合物４６の調製 乾燥THF（8ml）中４５（148mg、0.074mmol）の溶液に分子篩（４Å、1.0g）を添
加した。混合物を室温で窒素下20分間攪拌した。ソジウムシアノボロハイドライ
ド（340mg、5.41mmol）を添加し混合物を０℃まで冷却した。HCl（ｇ）／Et2O溶
液（〜３ml）を気体が出なくなるまでゆっくり滴下した。次に混合物を飽和重炭
酸ナトリウム溶液（50ml）に注ぎ入れジクロロメタン（100ml×３）で抽出した
。合わせた有機層を飽和ナトリウム溶液（20ml）で洗浄し硫酸ナトリウムで乾燥
し濃縮した。残さをフラッシュクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン、10
0：２から100：５までの勾配溶出）で精製し４６（79mg、53％）を得た。TLC：R f =0.16（クロロホルム：アセトン、100：５）。〔α〕D 22＝−16.0（c 0.2、ク
ロロホルム）。1H NMR(500MHz,CDCl3):δ:0.89(t,J=6.5Hz,18H,6CH3), 1.08-1.9
4(m,126H,63CH2), 2.13-2.36(m,10H,5CH2), 2.51(dd,J=15.0,5.5Hz,1H,CHH), 2
.58(dd,J=15.0,8.0Hz,1H,CHH), 3.32(br.s,1H,OH), 3.43-3.77(m,8H,H-2,H-4,H-
5,2H-6,H-2',H-4',H-5',H-6'a), 3.86(ddd,J=10.0,8.5,8.5Hz,1H,H-2'), 3.92(d
d,J=9.0,9.0Hz,1H,H-3), 4.08(dd,J=11.0,2.5Hz,1H,H-6'b), 4.61(d,J=11.5Hz,1
H,CHHPh), 4.55(d,J=12.0Hz,1H,CHHPh), 4.56(d,J=8.5Hz,1H,H-1'), 4.57(d,J=
11.5Hz,1H,CHHPh), 4.60(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.64(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh),
4.72(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.73(d,J=11.5Hz,1H,CHHPh), 4.79(d,J=7.5Hz,1H,
H-1), 4.83(d,J=12.5Hz,1H,CHHPh), 4.95(dd,J=10.5,9.0Hz,1H,H-3'), 4.95-5.0
8(m,2H,2lipid-3-H), 5.11(m,1H,lipid-3-H), 5.77(d,J=8.5Hz,1H,NH), 5.93(d
,J=8.5Hz,1H,NH), 7.30(m,20H,Ar-H). Anal. calcd for C124H204N2O18(2010.98
):C,74.06;H,10.22;N,1.39. Found; C,73.74;H,10.57;N,1.43.
【０１３９】 実施例４０ 化合物４７の調製 化合物３２の調製で記載したと同じ方法を用い、化合物４６（68mg、0.034mmol
）と乾燥ジクロロメタン（３ml）中１Ｈ−テトラゾール（10mg、0.144mmol）ジ
ベンゾイルジイソプロピルホスフォルアミジド（33mg、0.032ml、0.096mmol）お
よびｍ−クロロ過安息香酸（59mg、〜55％、0.19mmol）との反応から化合物４７
を得た。１時間０℃で攪拌後、通常の作業を行い、残さを繰り返しのシリカゲル
クロマトグラフィ（クロロホルム中１ないし５％アセトンおよびトルエン：アセ
トン、18：１ないし12：１で勾配溶出）によって精製し４７（65mg、85％）を得
た。TLC：Rf=0.22（クロロホルム中５％アセトン）。〔α〕D 22＝−4.0（c 0.4
、クロロホルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.90(m,18H,6CH3), 1.25(m,114H,
57CH2), 1.45-1.70(m,12H,6CH2), 2.10-2.50(m,12H,6CH2), 3.52-3.93(m,9H,H
-2,H-3,H-4,H-5,H-6a,H-2',H-5',2H-6'), 4.09(br.d,J=11.0Hz,1H,H-6b), 4.43(
m,3H,CH 2Ph,H-4'), 4.56-4.91(m,12H,6CH 2Ph), 4.78(d,J=7.5Hz,1H,H-1'), 4.9
8(d,J=8.5Hz,1H,H-1), 5.05(m,2H,2lipid-3-H), 5.16(m,1H,lipid-3-H), 5.39(
dd,J=10.0,9.0Hz,1H,H-3'), 5.88(d,J=8.5Hz,1H,NH), 6.08(d,J=7.5Hz,1H,NH),
7.25(m,30H,Ar-H). Anal. calcd for C138H217N2O21P(2271.21):C,72.98;H,9.63
;N,1.23. Found; C,72.83;H,9.60;N,1.23.
【０１４０】 実施例４１ 化合物４８の調製 THF-HOAc（10：１、90ml）中４７（48mg、0.021mmol）の溶液にパラジウム／炭
素（５％、70mg）を添加した。混合物を室温で水素雰囲気下24時間攪拌した。固
体を濾過し濾液を真空濃縮した。残さをフラッシュクロマトグラフィ（クロロホ
ルム：メタノール：水、４：１：０および次に３：１：0.1）で精製し４８（25m
g、68％）を得た。TLC：Rf=0.38（クロロホルム：メタノール：水、３：１：0.1
）。〔α〕D 22＝＋8.0（c 0.1、クロロホルム：メタノール、４：１）。ES-MS c
alcd for C96H181N2O21P(1729.3). Found 1728.3 (M+H)（負のモード）。 実施例４２ 化合物４９の調製 乾燥ジクロロメタン（6ml）中４０（290mg、0.328mmol）および４３（503mg、0.
492mmol）の溶液に、分子篩（４Å、0.5g）を添加した。混合物を室温で窒素下2
0分間攪拌した。トリフルオロボロンエーテレート溶液（CH2Cl2中0.1M、1.3ml）
を20分以内に滴下した。混合物を１時間攪拌し飽和重炭酸ナトリウム溶液（10ml
）に注ぎ入れジクロロメタン（20ml×３）で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナ
トリウムで乾燥し濃縮した。残さをシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタ
ン中0.5ないし１％メタノール）で精製し４９（457mg、80％）を得た。TLC：Rf=
0.21（クロロホルム中３％アセトン）。〔α〕D 22＝−17.8 （c 0.6、クロロホ
ルム）。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ:0.90(t,J=7.0Hz,12H,4CH3), 1.25(m,76H,38C
H2), 1.52(m,8H,4CH2), 2.15(m,4H,2CH2), 2.26,2.35(2dd,J=14.0,6.0Hz,各1H,C
H2), 2.48(dd,J=15.0,5.5Hz,1H,CHH), 2.58(dd,J=15.0,7.0Hz,1H,CHH), 3.34-3.
78(m,8H,H-2,H-3,H-4,H-5,H-6a,H-2',H-4',H-5',H-6'a), 4.02-4.13(m,2H,H-6b,
H-5'), 4.30(dd,J=10.5,5.0Hz,1H,H-6'b), 4.52(d,J=8.0Hz,1H,H-1'), 4.57-4.9
0(m,8H,3CH 2Ph,Troc-CH2), 4.89(d,J=8.0Hz,1H,H-1), 5.02(m,1H,lipid-3-H), 5
.15(m,3H,NH,H-3',lipid-3-H), 5.55(s,1H,CHPh), 6.00(d,J=8.0Hz,1H,NH), 7.
25-7.45(m,20H,Ar-H). Anal. calcd for C99H151N2O17(1747.64):C,68.04;H,8.7
1;N,1.60. Found; C,67.92;H,8.85;N,1.64.
【０１４１】 実施例４３ 化合物５０の調製 化合物１３の調製のために記載したように、酢酸エチル（400ml）中80％酢酸と
活性化亜鉛（5.0g、76.5mmol）を室温にて60時間処理して４９（740mg、0.424mm
ol）から化合物５０を合成した。溶媒除去により得られた粗５０（666mg、100％
）をジオキサンから凍結乾燥しさらに精製することなく使用した。
【０１４２】 実施例４４ 化合物５１の調製 ４５のために記載した方法と同じ方法で、化合物５０（175mg、0.11mmol）を乾
燥ジクロロメタン（5ml）中DCC（68mg、0.33mmol）の存在で１４（101mg、0.22m
mol）と結合した。通常の作業の後、シリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメ
タン中１％メタノール）で５１（150mg、67％）を得た。TLC：Rf＝0.27（ジクロ
ロメタン中1％メタノール）。[α]D 22＝−14.2（c0.5、クロロホルム）。1H NMR
(300MHz, CDCl3)： δ=0.90(t, J=7.0Hz, 18H, 6CH3)、 1.25(m, 114H, 57CH2)
、 1.53(m, 12H, 6CH2)、 2.15(t, J=7.0Hz, 4H, 2CH2)、 2.23-2.39(m, 6H, 3C
H2)、 2.56(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H, CHH)、 2.60(dd, J=15.5, 7.0Hz, 1H, CHH )、 3.37-4.00(m, 9H, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6a, H-2’, H-4’, H-5’, H-6
’a)、4.09(dd, J=11.0, 2.0Hz, 1H, H-6b)、 4.27(dd, J=11.0, 4.5Hz,1H, H-6
’b), 4.58-4.88(m, 7H, 3CH 2Ph, H-1’)、 4.82(d, J=7.5Hz, 1H, H-1) 、 5.
00-5.09(m, 2H, 2lipid-3-H)、 5.16(m, 1H, lipid-3-H)、 5.26(dd, J=10.0, 1
0.0Hz, 1H, H-3’)、 5.47(s, 1H, CHPh)、 5.93(d, J=8.5Hz, 1H, NH)、7.2
5-7.45(m, 20H, Ar-H)。Anal. Calcd for C124H202N2O18・0.5H2O(2008.96)：
C, 73.80; H, 10.14; N, 1.39。Found C, 73.64; H,9.88; N,1.41。
【０１４３】 実施例４５ 化合物５２の調製 ３１のために記載されたものと類似の方法で、化合物５１（135mg、0.067mmol）
をソジウムシアノボロハイドライド（211mg、3.36mmol）および乾燥THF：CHCl3
（４：１、50ml）中HCl（ｇ）／Et2Oで室温で処理した。通常の作業の後、フラ
ッシュクロマトグラフィ（クロロホルム中２％ないし５％のメタノール）で精製
し５２（112mg、83％）を得た。TLC：Rf＝0.20（ジクロロメタン中2％メタノー
ル）。[α]D 22＝−13.5（c0.6、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=
0.89(t, J=6.5Hz, 18H, 6CH3)、 1.25(m, 114H, 57CH2)、 1.50(m, 12H, 6CH2)
、 2.14(t, J=7.0Hz, 2H, CH2)、 2.23-2.60(m, 10H, 5CH2)、 3.33(dd, J=3.3H
z, 1H, OH)、 3.44-3.96(m, 10H, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6a, H-2’, H-4’, H
-5’, 2H-6’)、4.09(dd, J=10.0, 2.0Hz, 1H, H-6b)、 4.49(m, 9H, 4CH 2Ph, H
-1’)、 4.80(d, J=7.5Hz, 1H, H-1) 、 4.92-5.18(m, 4H, H-3’, 3lipid-3-H
)、 5.80(d, J=9.0Hz, 1H, NH)、5.95(d, J=8.5Hz, 1H, NH)、 7.30(m, 20H, Ar
-H)。Anal. Calcd for C124H204N2O18・H2O(2010.98)： C, 73.40; H, 10.23;
N, 1.38。Found C, 73.40; H,10.04; N,1.38。
【０１４４】 実施例４６ 化合物５３の調製 ３２のために記載したものと類似の方法で、化合物５２（61mg、0.030mmol）を
乾燥ジクロロメタン（3.0ml）中１Ｈ―テトラゾール（12.6mg、0.18mmol）およ
びジベンジルジイソプロピルホスフォルアミダイト（42mg、0.041ml、0.12mmol
）で処理した。ついでm-CPBA（75mg、55％、0.24mmol）で処理した。通常の作業
の後、シリカゲルクロマトグラフィ（クロロホルム中１ないし５％のアセトン、
そして次にトルエン：アセトン、18：１ないし12：１）で精製し５３（58mg、85
％）を得た。TLC：Rf＝0.17（クロロホルム中1％アセトン）。[α]D 22＝−3.1（
c0.35、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.87(t, J=6.5Hz, 18H,
6CH3)、 1.24(m, 114H, 57CH2)、 1.40-1.57(m, 12H, 6CH2)、2.11-2.50(m, 12H
, 6CH2)、 3.52-3.94(m, 9H, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6a, H-2’, H-5’, 2H-6
’)、4.09(dd, J=11.0, 2.0Hz, 1H, H-6b)、 4.44(m, 3H, 4CH 2Ph, H-4’)、 4.
56-4.90(m, 12H, 6CH 2Ph, H-4’)、 4.78(m, J=8.0Hz, 1H, H-1’) 、4.98(d, J
=8.0Hz, 1H, H-1) 、 5.05(m, 2H, 2lipid-3-H)、 5.16(m, 1H, lipid-3-H)、5
.39(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-3’)、5.88(d, J=8.5Hz, 1H, NH)、6.08(d, J=8
.0Hz, 1H, NH)、 7.25(m, 30H, Ar-H)。Anal. Calcd for C138H217N2O21P・0.5
H2O(2271.21)： C, 72.69; H, 9.63; N, 1.22。Found C, 72.45; H, 9.32; N,1
.19。
【０１４５】 実施例４７ 化合物５４の調製 ３３のために記載したものと類似の方法で、化合物５３（54mg、0.028mmol）をT
HF：酢酸、10：１（90ml）中パラジウム／炭素（5％、70mg）を用い水素雰囲気
中で５４（30mg、62％）に変換した。TLC：Rf＝0.35（クロロホルム：メタノー
ル：水、３：１：0.1）。[α]D 22＝−10.0（c0.1、クロロホルム：メタノール、
４：１）。ES-MS Calcd for C96H181N2O21P：1729.3。Found 1728（M-H）（負の
モード）。
【０１４６】 実施例４８ 化合物５５の調製 ３０のために記載したものと類似の方法で、化合物５０（300mg、0.19mmol）を
ジクロロメタン：DMF（４：１、50ml）中化合物５（222mg、0.475mmol）で結合
させた。シリカゲルクロマトグラフィ（クロロホルム中２ないし６％アセトン）
で精製し５５（256mg、66％）を得た。TLC：Rf＝0.33（クロロホルム：アセトン
、９：１）。[α]D 22＝−24.0（c0.2、クロロホルム：メタノール、５：１）。1 H NMR(300MHz, CDCl3：CD3OD、４：１)： δ=0.98(t, J=6.5Hz, 18H, 6CH3)、 1
.25(m, 108H, 54CH2)、 1.40-1.60(m, 14H, 7CH2)、2.07-2.63(m, 12H, 6CH2)、
3.12(t, J=7.0Hz, 2H, NCH2)、 3.45-3.90(m, 9H, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6a,
H-2’, H-4’, H-5’, H-6’a)、4.10(dd, J=11.0, 2.0Hz, 1H, H-6b)、4.31(d
d, J=11.0, 5.5Hz, H-6’b)、 4.48(t, J=6.5Hz, 1H, Asp- α -H)、4.56-4.87
(m, 7H, 3CH 2Ph, H-1’)、 4.85(d, J=8.0Hz, 1H, H-1) 、 5.08-5.19(m, 2H,
2lipid-3-H)、 5.34(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-3’)、5.51(s, 1H, CHPH)、 7
.20-7.45(m, 20H, Ar-H)。Anal. Calcd for C123H200N4O18・H2O(2022.95)： C
, 72.38; H, 9.97; N, 2.74。Found C, 72.19; H,9.68; N,2.70。
【０１４７】 実施例４９ 化合物５６の調製 ３１のために記載したものと類似の方法で、化合物５５（220mg、0.109mmol）を
ソジウムシアノボロハイドライド（1.37g、21.78mmol）および乾燥THF：CHCl3（
４：１）中HCl（g）／EtO2を用いて室温で処理し、５６（150mg、68％）を得た
。TLC：Rf＝0.20（ジクロロメタン中２％メタノール）。[α]D 22＝−14.0（c0.2
、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3-CD3OD、４：１)： δ=0.72(t, J=6.5
Hz, 18H, 6CH3)、 1.10(m, 108H, 54CH2)、 1.21-1.46(m, 14H, 7CH2)、1.96-2.
39(m, 12H, 6CH2)、 2.15(d, J=6.0Hz, 1H, OH)、 2.95(m, 2H, NCH2)、3.30-3.
77(m, 10H, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6a, H-2’, H-4’, H-5’, H-6’)、3.96(d
d, J=11.0, 2.0Hz, 1H, H-6b)、4.31(m, 1H, Asp- α -H)、4.35-4.68(m, 9H,
4CH 2Ph, H-1)、 4.48(d, J=8.0Hz, 1H, H-1’) 、4.86(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H,
H-3’) 、 4.96(m, 2H, 2lipid-3-H)、 7.10(m, 20H, Ar-H)。Anal. Calcd fo
r C123H202N4O18・1.5H2O(2024.96)： C, 72.00; H, 10.07; N, 2.73。Found C
, 71.97; H,9.91; N,2.69。
【０１４８】 実施例５０ 化合物５７の調製 ３２のために記載したものと類似の方法で、化合物５６（85mg、0.042mmol）を
５７（80mg、83％）に変えた。TLC：Rf＝0.37（クロロホルム：アセトン、９：
１）。[α]D 22＝−6.2（c0.4、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0
.88(m, 18H, 6CH3)、 1.23(m, 108H, 54CH2)、 1.25-1.60(m, 14H, 7CH2)、 2.1
2-2.57(m, 12H, 6CH2)、 3.15(m, 2H, NCH2)、 3.48-3.92(m, 9H, H-2, H-3,
H-4, H-5, H-6a, H-2’, H-5’, 2H-6’)、4.10(br.d, J=11.0Hz, 1H, H-6b)、
4.37-4.90(m, 16H, H-1, H-1’, H-4’, Asp-α-H, 6CH 2Ph)、5.08(m, 2H, 2lip
id-3-H)、 5.32(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-3’) 、6.20(d, J=8.0Hz, 1H, NH)
、6.62(d, J=8.0Hz, 1H, NH) 、 7.08(m, 2H, 2NH)、 7.25(m, 30H, Ar-H)。An
al. Calcd for C137H215N4O21P・1.5H2O(2285.19)： C, 71.16; H, 9.50; N, 2
.42。Found C, 71.02; H,9.43; N,2.23。
【０１４９】 実施例５１ 化合物５８の調製 ３３のために記載したものと類似の方法で、化合物５７（52mg、0.023mmol）を
５８（32mg、80％）に変えた。TLC：Rf＝0.29（クロロホルム：メタノール：水
、３：１：0.1）。[α]D 22＝−10.0（c0.1、クロロホルム：メタノール、４：１
）。ES-MS Calcd for C95H179N4O21P：1743.3。Found 1742（M-H）（負のモード
）。
【０１５０】 実施例５２ 化合物６０の調製 （１）化合物５９：乾燥アセトニトリル（250ml）中３４（15.95g、40.13mmol）
の溶液に、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（18.32g、18.01ml、120.4mmol
）およびｐ−トルエンスルホン酸（328mg、1.73mmol）を添加した。室温で窒素
雰囲気下に1.5時間撹拌後、トリエチルアミン（2ml）を添加して反応を終えた。
次に真空濃縮し残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、７
：３）で精製し、５９（13.93g、71％）を得た。 （２）乾燥DMF（15ml）中５９（2.02g、4.14mmol）の溶液を水素化ナトリウム（
230mg、9.58mmol）、臭化アリル（0.75g、0.50ml、6.21mmol）および乾燥DMF（2
0ml）の混合物に10分以内で滴下した。次に反応混合物を室温で3時間撹拌した。
３６のために記載したものと類似の作業を行いシリカゲルクロマトグラフィ（ヘ
キサン：酢酸エチル、５：１）によって精製し、３−Ｏ−アリル化合物（1.79g
、82％）を得た。 （３）３−Ｏ−アリル化合物（5.79g、11.0mmol）を酢酸−水（４：１、130ml）
で65℃にて6時間処理した。溶媒を除去し残渣をフラッシュクロマトグラフィ（
ヘキサン：酢酸エチル、１：２）で精製し、4,6−ジハイドロキシ化合物（4.91g
、95％）を得た。 （４）化合物６０：上記4,6−ジハイドロキシ化合物（4.79g、10.91mmol）の乾
燥ピリジン（50ml）溶液にトエイフェニルメチルクロライド（6.38g、22.86mmol
）およびDMAP（226mg、2.18mmol）を添加した。反応混合物を室温で６時間撹拌
し、ついで35℃で16時間撹拌した。溶媒除去の残渣をシリカゲルクロマトグラフ
ィ（ヘキサン：酢酸エチル、４：１）で精製し６０（5.87g、79％）を得た。TLC
：Rf＝0.66（ヘキサン：酢酸エチル、１：２）。[α]D 22＝−37.2（c1.0、クロ
ロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=2.71(d, J=2.8Hz, 1H, OH)、 3.46(m
, 2H, 2H-6)、3.59(m, 1H, H-5)、 3.80(m, 1H, H-4)、 3.95(m, 1H, CHHCH=CH 2 )、 4.15(dd, J=10.0, 8.5Hz, 1H, H-3) 、 4.16(m, 1H, CHHCH=CH2)、 4.25
(dd, J=10.0, 8.0Hz, 1H, H-2) 、4.55(d, J=12.0Hz, CHHPh) 、4.84(d, J=12.0
Hz, 1H, CHHPh) 、4.85(m, 1H, CHH=CH)、5.02(m, 1H, CHHPh) 、5.19(d, J=8.0
Hz, 1H, H-1) 、 5.59(m, 1H, CH2=CH) 、7.09-7.90(m, 24H, Ar-H)。Anal. Ca
lcd for C43H39NO7(681.78)： C, 75.75; H, 5.76; N, 2.04。Found C, 75.37;
H, 5.67; N,2.04。
【０１５１】 実施例５３ 化合物６１の調製 水素化ナトリウム（200mg、8.33mmol）、臭化ベンジル（1.01g、0.70ml、8.35mm
ol）および乾燥DMF（20ml）の混合物に乾燥DMF（20ml）中６０（3.80g、5.57mmo
l）の溶液を10分以内に滴下した。室温で3時間撹拌した後、メタノール（4ml）
を添加しさらに10分間撹拌を続けた。ついで反応物を氷冷飽和塩化ナトリウム溶
液（500ml）に注入しジクロロメタン（200ml×3）で抽出した。合わせた有機層
を硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィ（ヘキ
サン：酢酸エチル、４：１）で精製し６１（2.45g、57％）を得た。TLC：Rf＝0.
67（ヘキサン：酢酸エチル、２：１）。[α]D 22＝−37.2（c1.0、クロロホルム
）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=3.32(dd, J=10.0, 3.5Hz, 1H, H-6a)、 3.62(
m, 1H, H-5)、3.69(dd, J=10.0, 1.0Hz, 1H, H-6b) 、 3.93(m, 1H, CHHCH=CH2)
、 3.96(m, 1H, H-4) 、4.25(m, 1H, CHHCH=CH2) 、4.27(dd, J=10.5, 8.5Hz,
1H, H-2) 、4.42(dd, J=10.5, 8.5Hz, 1H, H-3) 、 4.44(d, J=10.0Hz, 1H, CHH Ph) 、4.66(d, J=12.0Hz, 1H, CHHPh) 、 4.70(d, J=10.0Hz, 1H, CHHPh) 、
4.83(m, 1H, CHH=CH) 、4.83(m, 1H, CHH=CH) 、4.99(d, J=12.0Hz, 1H, CHHPh)
、5.02(m, 1H, CHH=CH) 、5.27(d, J=8.5Hz, 1H, H-1), 5.59(m, 1H, CH2=CH)
、6.92-7.90(m, 29H, Ar-H)。Anal. Calcd for C50H45NO7・0.5H2O(771.91)：
C, 76.90; H, 5.94; N, 1.79。Found C, 76.72; H, 6.11; N,1.78。
【０１５２】 実施例５４ 化合物６２の調製 化合物６１（1.50g、1.94mmol）を酢酸：水：アリルアルコール（８：２：１、2
20ml）に溶解し、この溶液を110℃で１時間加熱した。次に溶媒を真空除去し残
渣をフラッシュクロマトグラフィ（ヘキサン：酢酸エチル、2.5：１ついで２：
１）で精製し６２（0.90g、87％）を得た。TLC：Rf＝0.33（ヘキサン：酢酸エチ
ル、２：１）。[α]D 22＝−16.3（c1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl 3 )： δ=1.90(dd, J=6.0, 6.0Hz, 1H, OH)、 3.52(m, 1H, H-6a)、3.55(dd, J=9
.5, 8.5Hz, 1H, H-4) 、 3.75(m, 1H, H-5)、3.90(m, 2H, H-6b, CHHCH=CH2) 、
4.20(m, 2H, H-3, CHHCH=CH2) 、4.28(dd, J=10.0, 8.0Hz, 1H, H-2) 、4.52(d,
J=12.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.68(d, J=10.5Hz, 1H, CHHPh) 、 4.79(d, J=12.0H
z, 1H, CHHPh) 、 4.80(m, 1H, CHH=CH) 、4.84(d, J=10.5Hz, 1H, CHHPh) 、5
.00(m, 1H, CHH=CH) 、5.23(d, J=8.0Hz, 1H, H-1), 5.55(m, 1H, CH2=CH) 、7.
10-7.85(m, 14H, Ar-H)。Anal. Calcd for C31H31NO7・0.7H2O(529.59)： C, 6
8.67; H, 6.02; N, 2.58。Found C, 68.46; H, 5.93; N,2.53。
【０１５３】 実施例５５ 化合物６３の調製 化合物６２（0.90g、1.70mmol）を95％エタノール（60ml）に溶解し、これにヒ
ドラジン一水和物（3ml）を添加した。混合物を２時間還流下に加熱した。つい
で溶媒を真空除去し残渣をフラッシュクロマトグラフィ（ジクロロメタン中１％
メタノール）で精製し６３（525mg、77％）を得た。TLC：Rf＝0.28（ジクロロメ
タン中３％メタノール）。[α]D 22＝−17.0（c0.5、クロロホルム）。1H NMR(30
0MHz, CDCl3)： δ=1.75(s, 3H, NH2, OH)、 2.87(dd, J=9.5, 8.0Hz, 1H, H-2)
、 3.35(dd, J=9.5, 9.5Hz, 1H, H-4) 、 3.36(m, 1H, H-5)、3.57(dd, J=9.5,
9.5Hz, 1H, H-3) 、 3.72(dd, J=12.0, 4.0Hz, 1H, H-6a) 、 3.88(dd, J=12.0,
2.5Hz, 1H, H-6b) 、4.24(m, 1H, CHHCH=CH2) 、4.36(d, J=8.0Hz, 1H, H-1)
、 4.42(m, 1H, CHHCH=CH2) 、4.62(d, J=11.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.64(d, J=1.0
Hz, 1H, CHHPh) 、4.82(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、 4.88(d, J=11.5Hz, 1H,
CHHPh) 、5.18-5.33(m, 2H, CH 2=CH) 、5.97(m, 1H, CH2=CH) 、7.30(m, 10H, A
r-H)。
【０１５４】 実施例５６ 化合物６４の調製 化合物４０のために記載したのと類似の方法で、化合物６３（510mg、1.28mmol
）をDCC（659mg、3.20mmol）の存在で１４（870mg、1.92mmol）と結合し、シリ
カゲルクロマトグラフィ（クロロホルム中２ないし５％アセトン）後、６４（85
3mg、80％）を得た。TLC：Rf＝0.38（ジクロロメタン中％メタノール）。[α]D 2 2 ＝−6.0（c1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.89(t, J=6.5
Hz, 6H, 2CH3)、 1.25(br.s, 38H, 19CH2)、 1.59(m, 4H, 2CH2)、 1.86(t, J=7
.0Hz, 1H, OH) 、2.23(t, J=7.5Hz, 2H, CH2)、 2.37(dd, J=15.0, 5.5Hz, 1H,
CHH) 、2.48(dd, J=15.0, 5.5Hz, 1H, CHH) 、 3.40(m, 2H, H-2, H-5) 、3.52
(dd, J=9.5, 8.5Hz, 1H, H-4) 、3.70(m, 1H, H-6a) 、3.85(m, 1H, H-6b) 、 4
.00(dd, J=10.0, 8.5Hz, 1H, H-3) 、4.14(m, 1H, CHHCH=CH2) 、4.26(m, 1H, C
HHCH=CH2) 、4.59(d, J=11.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.63(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh)
、4.82(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.83(d, J=11.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.96(d,
J=8.0Hz, 1H, H-1) 、5.08(m, 1H, lipid-3-H) 、5.13(m, 1H, CHH=CH) 、5.13(
m, 2H, CHH=CH) 、5.88(m, 1H, CH =C H2) 、6.00(d, J=8.0Hz, 1H, NH) 、7.35
(m, 10H, Ar-H)。Anal. Calcd for C51H81NO8・0.7H2O(836.20)： C, 72.17; H
, 9.78; N, 1.65。Found C, 72.07; H, 9.81; N,1.72。
【０１５５】 実施例５７ 化合物６５の調製 化合物４４のために記載したのと類似の方法で、化合物６５をイミド化合物４３
（1.15g、1.12mmol）およびグリコシル受容体６４（652mg、0.75mmol）とBF3エ
ーテル化合物（CH2Cl2、3.5ml中0.15M）を用いて調製した。シリカゲルクロマト
グラフィ（クロロホルム中１ないし２％アセトン）後、６５（1.30g、83％）を
得た。TLC：Rf＝0.36（クロロホルム中６％アセトン）。[α]D 22＝−18.6（c0.5
、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.86(t, J=6.5Hz, 12H, 4CH3)
、 1.22(br.s, 76H, 38CH2)、 1.53(m, 8H, 4CH2)、 2.15(t, J=7.5Hz, 2H, CH2 ) 、2.20(t, J=7.5Hz, 2H, CH2)、 2.32(dd, J=14.0, 5.5Hz, 1H, CHH) 、2.42
(dd, J=14.0, 6.0Hz, 1H, CHH) 、2.47(dd, J=15.0, 5.0Hz, 1H, CHH) 、2.57(d
d, J=15.0, 7.0Hz, 1H, CHH) 、 3.34-4.21(m, 12H, H-2, H-3, H-4, H-5, 2H-6
, H-2’, H-4’, H-5’, H-6’a, CH 2CH=CH2 ) 、4.30(dd, J=10.0, 5.0Hz, 1H,
H-6’b) 、4.51(d, J=8.5Hz, 1H, H-1’) 、4.57(m, 4H, 2CHHPh, CCl3CCH 20)
、 4.78(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.85(d, J=11.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.88(d,
J=8.0Hz, 1H, H-1) 、5.00-5.25(m, 5H, 2lipid-3-H, CH 2=CH) 、5.45(s, 1H,
CHPh) 、5.85(m, 1H, CH=CH2) 、6.00(d, J=8.0Hz, 1H, NH) 、7.30(m, 15H, Ar
-H)。Anal. Calcd for C95H149Cl3N2O17・(1697.58)： C, 67.21; H, 8.85; N,
1.65。Found C, 66.99; H, 8.96; N,1.65。
【０１５６】 実施例５８ 化合物６７の調製 （１）化合物６６：化合物５０のために記載したと類似の方法で、化合物６５（
350mg、0.206mmol）を活性化亜鉛（9.0g）および酢酸エチル中80％酢酸（500ml
）を用い室温で処理し６６（314mg、100％）を得た。これを直接次の工程に用い
た。 （２）化合物６７：化合物６６（304mg、0.20mmol）１４（191mg、042mmol）お
よびDCC（130mg、0.62mmol）を乾燥ジクロロメタン（10ml）に溶解した。混合物
を室温で24時間撹拌し固体を濾過した。濾液を濃縮し残渣をフラッシュクロマト
グラフィ（クロロホルム中２％アセトン）で精製し、６７（220mg、56％）を得
た。TLC：Rf＝0.25（クロロホルム中５％アセトン）。[α]D 22＝−16.0（c0.5、
クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.89(t, J=6.5Hz, 18H, 6CH3)、
1.23(br.s, 114H, 57CH2)、 1.55(m, 12H, 6CH2)、 2.13-2.48(m, 10H, 5CH2)
、2.50(dd, J=15.0, 5.5Hz, 1H, CHH) 、2.59(dd, J=15.0, 7.5Hz, 1H, CHH) 、
3.38-4.24(m, 12H, H-2, H-3, H-4, H-5, 2H-6, H-2’, H-4’, H-5’, H-6’a,
CH 2CH=CH2 ) 、4.30(dd, J=10.5, 5.5Hz, 1H, H-6’b) 、4.58(d, J=11.0Hz, 1
H, CHHPh) 、4.59(d, J=12.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.73(d, J=8.5Hz, 1H, H-1’)
、4.77(d, J=12.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.83(d, J=8.0Hz, 1H, H-1) 、4.85(d, J=1
1.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.99-5.30(m, 6H, H-3’, CH 2=CH, 3lipid-3-H) 、5.48(s
, 1H, CHPh) 、5.87(m, 1H, CH2=CH) 、5.91(d, J=8.5Hz, 1H, NH) 、6.07(d, J
=8.0Hz, 1H, NH) 、7.35(m, 15H, Ar-H)。Anal. Calcd for C120H200N2O18(1958
.90)： C, 73.58; H, 10.30; N, 1.43。Found C, 73.40; H, 10.70; N,1.39。
【０１５７】 実施例５９ 化合物６８の調製 化合物３１のために記載したと類似の方法で、化合物６７（194mg、0.10mmol）
を６８（130mg、67％）に変換した。TLC：Rf＝0.22（クロロホルム中８％アセト
ン）。[α]D 22＝−9.6（c0.5、クロロホルム）。1H NMR(600MHz, CDCl3)： δ=0
.89(t, J=7.0Hz, 18H, 6CH3)、 1.25(br.s, 114H, 57CH2)、 1.49-1.58(m, 12H,
6CH2)、 2.21(t, J=8.0Hz, 2H, CH2)、2.26(m, 3H, CH2, CHH)、2.27(t, J=8.0
Hz, 2H, CH2)、2.33(dd, J=14.0, 6.0Hz, 1H, CHH) 、2.36(dd, J=15.0, 6.5Hz,
1H, CHH) 、2.43(dd, J=15.0, 6.5Hz, 1H, CHH) 、2.50(dd, J=16.5, 6.5Hz, 1
H, CHH) 、2.53(dd, J=16.5, 8.0Hz, 1H, CHH) 、3.28(d, J=3.0Hz, 1H, OH) 、
3.43(m, 2H, H-4, H-5’) 、3.54(m, 2H, H-2’, H-6a) 、3.62(ddd, J=10.0, 9
.0, 3.0Hz, 1H, H-4’) 、3.71(m, 3H, H-5, 2H-6’) 、3.84(m, 2H, H-3, H-2
’) 、4.06(dd, J=11.0, 2.5Hz, 1H, H-6b) 、4.10-4.20(m, 2H, CH 2CH=CH2) 、
4.52(d, J=12.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.58(m, 4H, H-1’, 3CHHPh) 、4.74(d, J=10
.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.80(d, J=8.0Hz, 1H, H-1) 、4.83(d, J=11.5Hz, 1H, CHH Ph) 、4.95(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-3’) 、5.02(m, 1H, lipid-3-H) 、5.10
(m, 3H, 2lipid-3-H, CHH=CH) 、5.22(m, 1H, CHH=CH) 、5.77(d, J=9.0Hz, 1H,
NH) 、5.85(m, 1H, CH2=CH) 、5.98(d, J=8.0Hz, 1H, NH) 、7.30(m, 15H, Ar-
H)。Anal. Calcd for C120H202N2O18(1960.92)： C, 73.50; H, 10.38; N, 1.4
3。Found C, 73.25; H, 10.95; N,1.60。
【０１５８】 実施例６０ 化合物６９の調製 化合物３２のために記載したと類似の方法で、化合物６８（117mg、0.060mmol）
を６９（81mg、61％）に変換した。これを繰り返しのフラッシュクロマトグラフ
ィ（まずクロロホルム中１ないし３％のアセトン、次にトルエン：アセトン、15
：１ないし12：１、続いてヘキサン：アセトン、６：１ないし５：１）で精製し
た。TLC：Rf＝0.46（クロロホルム中９％アセトン）。[α]D 22＝−4.8（c0.33、
クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.89(t, J=6.5Hz, 18H, 6CH3)、
1.25(br.s, 114H, 57CH2)、 1.45-1.55(m, 12H, 6CH2)、 2.19-2.51(m, 12H, 6
CH2)、3.45-4.23(m, 12H, H-2, H-3, H-4, H-5, 2H-6, H-2’, H-5’, 2H-6’,
CH 2CH=CH2 ) 、4.50(m, 3H, H-4’, CH 2Ph) 、4.58(d, J=12.5Hz, 2H, 2CHHPh)
、4.75(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.80(d, J=8.0Hz, 1H, H-1) 、4.88(m, 5H
, 5CHHPh) 、4.99(d, J=8.0Hz, 1H, H-1’) 、5.05-5.26(m, 5H, 3lipid-3-H, C H 2 =CH) 、5.41(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-3’) 、5.86(m, 1H, CH2=CH) 、5.93
(d, J=8.0Hz, 1H, NH) 、6.09(d, J=7.5Hz, 1H, NH) 、7.30(m, 25H, Ar-H)。An
al. Calcd for C134H215N2O21P (2221.15)： C, 72.46; H, 9.76; N, 1.26。Fo
und C, 72.21; H, 9.92; N,1.27。
【０１５９】 実施例６１ 化合物７０の調製 化合物３３のために記載したと類似の方法で、化合物６９（73mg、0.035mmol）
を７０（55mg、95％）に変換した。TLC：Rf＝0.35（クロロホルム：メタノール
：水、３：１：0.1）。[α]D 22＝+6.0（c0.1、クロロホルム：メタノール、４：
１）。ES-MS Calcd for C99H187N2O21P：1771.3。Found（負のモード） 1770.3
（M-H）、1771.3（M-H、同位体のピーク）。
【０１６０】 実施例６２ 化合物７１の調製 化合物４２のために記載したと類似の方法で、化合物６５（350mg、0.195mmol）
を７１（200mg、62％）に変換した。TLC：Rf＝0.30（クロロホルム中５％アセト
ン）。[α]D 22＝−25.7（c0.83、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ
=0.90(t, J=6.5Hz, 12H, 4CH3)、 1.25(br.s, 76H, 38CH2)、 1.55(m, 8H, 4CH2 )、 1.70(s, 1H, OH)、2.17(t, J=7.0Hz, 2H, 4CH3)、2.26(t, J=7.0Hz, 2H, CH 2 )、2.43(m, 2H, CH2)、2.50(dd, J=14.0, 5.5Hz, 1H, CHH)、2.60(dd, J=15.0,
7.5Hz, 1H, CHH)、3.40-3.90(m, 9H, H-2, H-3, H-4, H-5, H-6a, H-2’, H-5
’, H-6’a)、4.13(br.d, J=10.0Hz, 1H, H-6b), 4.34(dd, J=10.0, 5.0Hz, 1H,
H-6’b)、 4.51, 4.52(2d, J=8.5Hz, 各1H, H-1, H-1’) 、4.60(d, J=12.5Hz,
1H, CHHPh) 、4.66(m,3H, CHHPh, Cl3CCH2O), 4.90(d, J=12.5Hz, 1H, CHHPh)
、4.98(d, J=11.5Hz, 1H, 5CHHPh) 、5.04-5.25(m, 3H, H-3’, 2lipid-3-H) 、
5.49(s, 1H, CHPh), 6.02(d, J=5.0Hz, 1H, NH) 、7.40(m, 15H, Ar-H)。Anal.
Calcd for C92H145Cl3N2O17・0.8H2O (1657.52)： C, 66.06; H, 8.84; N, 1.6
7。Found C, 66.06; H, 8.84; N,1.64。
【０１６１】 実施例６３ 化合物７２の調製 化合物２８のために記載したと類似の方法で、化合物７１（670mg、0.405mmol）
をDCC（208mg、1.01mmol）およびDMAP（25mg、0.20mmol）の存在で１７（270mg
、0.81mmol）と結合した。反応は72時間で完了した。シリカゲルクロマトグラフ
ィ（ジクロロメタン：ヘキサン：アセトン、２：１：３；およびジクロロメタン
中１％メタノール）で７２（570mg、71％）を得た。TLC：Rf＝0.60（ジクロロメ
タン：ヘキサン：アセトン、10：５：１）。[α]D 22＝−20.0（c1.0、クロロホ
ルム）。1H NMR(600MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=7.0Hz, 15H, 5CH3)、 1.25(m,
74H, 37CH2)、 1.53(m, 10H, 5CH2)、 2.17(t, J=7.5Hz, 2H, CH2)、2.22(dd,
J=15.0, 6.0Hz, 1H, CHH)、2.24(t, J=7.5Hz, 2H, CH2)、2.34(dd, J=15.0, 6.5
Hz, 1H, CHH) 、2.45(dd, J=16.0, 5.0Hz, 1H, CHH) 、2.50(dd, J=15.5, 5.5Hz
, 1H, CHH) 、2.55(dd, J=16.0, 7.5Hz, 1H, CHH) 、2.59(dd, J=15.5, 7.5Hz,
1H, CHH) 、3.38(ddd, J=10.0, 10.0, 5.0Hz, 1H, H-5’) 、3.56(m, 2H, H-4,
H-5) 、3.62(m, 1H, H-2) 、3.64(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-4’) 、3.69(dd,
J=11.0, 5.0Hz, 1H, H-6a) 、3.76(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-6’a) 、3.83(
m, 1H, lipid-3-H)、3.95(m, 1H, H-2’) 、4.05(br.d, J=11.0Hz, 1H, H-6b)
、4.32(dd, J=10.0, 5.0Hz, 1H, H-6’b) 、4.45(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、4
.48(d, J=11.0Hz, 2H, 2CHHPh) 、4.51(d, J=8.0Hz, 1H, H-1) 、4.59(d, J=8.0
Hz, 1H, H-1’) 、4.60-4.67(m, 4H, 2CHHPh, Cl3CCH2O)、4.85(d, J=12.0Hz, 1
H, CHHPh) 、5.01(m, 1H, lipid-3-H) 、5.12(d, J=9.0Hz, 1H, NH) 、5.19(m,
4H, H-3, H-3’, 2lipid-3-H)、5.48(s, 1H, CHPh) 、5.71(d, J=8.0Hz, 1H, NH
) 、7.20-7.45(m, 20H, Ar-H)。Anal. Calcd for C113H177Cl3N2O19(1974.00)：
C, 68.76; H, 9.04; N, 1.42。Found C, 68.68; H, 9.10; N,1.39。
【０１６２】 実施例６４ 化合物７４の調製 （１）化合物７３：化合物５０の調製のために記載したと類似の方法で、化合物
７２（550mg、0.279mmol）を酢酸エチル（500mg）中80％酢酸と活性化亜鉛（9.0
g）で室温にて処理して７３（500mg、100％）を得た。TLC：Rf＝0.12（ジクロロ
メタン中２％メタノール）。 （２）化合物７４：化合物７３（270mg、0.15mmol）、５（211mg、0.45mmol）お
よびDCC（139mg、0.68mmol）、を乾燥CH2Cl2：DMF（４：１、15ml）に溶解し混
合物を室温で24時間撹拌した。溶媒を除去し残渣をシリカゲルクロマトグラフィ
（クロロホルム中３ないし７％アセトン）で７４（220mg、65％）を得た。TLC：
Rf＝0.15（クロロメタン中８％アセトン）。[α]D 22＝−20.0（c0.5、クロロホ
ルム）。1H NMR(600MHz, CDCl3)： δ=0.90(m, 126H, 63CH2)、 1.50(m, 14H, 7
CH2)、2.13(m, 2H, CH2)、2.16-2.25(m, 5H, 2CH2, CHH)、 2.31(dd, J=15.5, 7
.0Hz, 1H, CHH)、2.36(dd, J=15.0, 7.0Hz, 1H, CHH)、2.45(dd, J=16.0, 5.0Hz
, 1H, CHH) 、2.50(m, 2H, 2CHH)、2.55(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H, CHH) 、2.60(
dd, J=15.0, 7.5Hz, 1H, CHH) 、3.17(m, 2H, NCH2)、3.42(ddd, J=10.0, 10.0,
5.0Hz, 1H, H-5’) 、3.52(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-4) 、3.61(dd, J=10.0,
10.0Hz, 1H, H-4’) 、3.64(m, 2H, H-5, H-2’)、3.73(m, 1H, H-6a)、3.75(d
d, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-6’a) 、3.82(m, 1H, lipid-3-H)、4.06(m, 2H, H-2
, H-6b) 、4.33(dd, J=10.0, 5.0Hz, 1H, H-6’b) 、4.44(d, J=11.5Hz, 1H, CH H Ph) 、4.46(d, J=11.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.47(m, 1H, Asp-α-H)、4.49(d, J=1
1.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.57(d, J=11.5Hz, 1H, CHHPh) 、4.67(d, J=12.5Hz, 1H,
CHHPh) 、4.89(d, J=8.5Hz, 1H, H-1’) 、5.06(m, 1H, lipid-3-H) 、5.13(m,
2H, 2lipid-3-H)、5.21(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-3) 、5.38(dd, J=10.0, 10
.0Hz, 1H, H-3’) 、5.47(s, 1H, CHPh) 、5.97(d, J=9.0Hz, 1H, NH) 、6.46(d
, J=8.0Hz, 1H, NH)、7.05(t, J=5.0Hz, 1H, NH) 、7.10(d, J=8.0Hz, 1H, NH)
、7.22-7.45(m, 20H, Ar-H)。Anal. Calcd for C137H226N4O20(2249.31)： C,
73.15; H, 10.13; N, 2.49。Found C, 73.00; H, 10.51; N,2.41。
【０１６３】 実施例６５ 化合物７５の調製 化合物３１について記載したと類似の方法で、化合物７４（140mg、0.062mmol）
を乾燥THF（25ml）中ソジウムシアノボロハイドライド（780mg、12.4mmol）およ
びHCl（g）／Et2Oを用いて室温にて処理し、７５（90mg、64％）を得た。TLC：R f ＝0.17（クロロホルム中10％アセトン）。[α]D 22＝−16.0（c0.5、クロロホル
ム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.89(t, J=6.5Hz, 21H, 7CH3)、 1.25(br.s
, 126H, 63CH2)、1.40-1.60(m, 14H, 7CH2)、2.15-2.60(m, 14H, 7CH2)、 3.15(
m, 2H, NCH2)、3.33(d, J=3.0Hz, 1H, OH) 、3.43-4.12(m, 11H, H-2, H-4, H-5
, 2H-6, H-2’, H-4’, H-5’, 2H-6’a, lipid-3-H) 、4.41-4.59(m, 6H, Asp-
α 〓H, 5CHHPh)、4.61(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.65(d, J=12.0Hz, 1H, C
HHPh) 、4.70(d, J=8.5Hz, 1H, H-1) 、4.77(d, J=8.0Hz, 1H, H-1’) 、4.85(d
, J=12.0Hz, 1H, CHHPh) 、5.04-5.21(m, 4H, H-3, H-3’, 2lipid-3-H) 、5.96
(d, J=9.0Hz, 1H, NH) 、6.31(d, J=8.0Hz, 1H, NH)、5.21(dd, J=10.0, 9.0Hz,
1H, H-3) 、5.38(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-3’) 、7.08(t, J=5.0Hz, 1H, N
H) 、7.15-7.30(m, 21H, NH, Ar-H)。Anal. Calcd for C137H228N4O20(2251.32)
： C, 73.09; H, 10.21; N, 2.48。Found C, 73.31; H, 10.77; N,2.41。
【０１６４】 実施例６６ 化合物７６の調製 化合物３２の調製のために記載したと類似の方法で、化合物７５（120mg、0.053
mmol）を７６（81mg、60％）に変換して得た。これを繰り返しのフラッシュクロ
マトグラフィ（まずクロロホルム中３％アセトンついでトルエン：アセトン、10
：１ないし８：１）で精製した。TLC：Rf＝0.30（クロロホルム中９％アセトン
）。[α]D 22＝−10.9（c0.33、クロロホルム）。1H NMR(600MHz, CDCl3)： δ=0
.90(t, J=7.0Hz, 21H, 7CH3)、 1.25(br.s, 126H, 63CH2)、1.45-1.60(m, 14H,
7CH2)、2.15-2.55(m, 14H, 7CH2)、 3.16(m, 2H, NCH2)、3.51-4.10(m, 10H, H-
2, H-4, H-5, 2H-6, H-2’, H-4’, H-5’, 2H-6’a, lipid-3-H) 、4.38-4.50(
m, 7H, H-4’, 6CHHPh)、4.55(d, J=11.0Hz, 1H, CHHPh) 、4.65(d, J=12.5Hz,
1H, CHHPh) 、4.70(d, J=8.0Hz, 1H, H-1) 、4.84(d, J=12.5Hz, 1H, CHHPh) 、
4.87-4.92(m, 5H, Asp- α 〓H, H-1’, 3CHHPh)、5.07(m, 2H, 2lipid-3-H) 、
5.18(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-3) 、5.31(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-3’)
、5.93(d, J=9.0Hz, 1H, NH) 、6.51(d, J=8.0Hz, 1H, NH)、7.03(t, J=5.5Hz,
1H, NH)、7.09(d, J=7.0Hz, 1H, NH)、7.16-7.33(m, 30H, Ar-H)。Anal. Calcd
for C151H241N4O23P(2511.55)： C, 72.21; H, 9.67; N, 2.23。Found C, 72.1
3; H, 9.82; N,2.17。
【０１６５】 実施例６７ 化合物７７の調製 化合物３３のために記載したものと同じ方法で、化合物７６（70mg、0.03mmol）
を７７（42.5mg、78％）に変換した。TLC：Rf＝0.37（クロロホルム：メタノー
ル：水、３：１：0.1）。[α]D 22＝−11.0（c0.1、クロロホルム：メタノール、
４：１）。ES-MS Calcd for C109H205N4O23P：1969.5。Found（負のモード）：
1968.5（M-H）、1969.5（M-H、同位体のピーク）。
【０１６６】 実施例６８ 化合物７８の調製 脂質酸１７（1.5g、4.5mmol）、糖化合物２７（3.18g、7.8mmol）、EDCI（1.3g
、6.8mmol）およびDMAP（0.275g、2.2mmol）を無水ジクロロメタン（40ml）に加
え3時間室温で窒素下に撹拌した。TLCは反応の終了を示した。溶媒を真空除去し
無色残渣をシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン中10％酢酸エチル）で精製し
７８（2.4g、70％）を得た。TLC：Rf＝0.54（ヘキサン：酢酸エチル、３：１）
。 [α]D 20＝＋69.1（c0.53、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.
88(t, J=6.5Hz, 3H, CH3)、 1.25(br.s, 18H)、1.32(s, 3H, CH3)、1.43(s, 3H,
CH3)、1.51(m, 2H)、2.42(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H)、2.68(dd, J=15.5, 6.5Hz,
1H)、3.71-3.86(m, 5H)、4.02(ddd, J=10.0, 10.0, 3.5Hz, 1H, H-2)、4.45(d,
J=11.5Hz, 1H) 、4.49(d, J=12.0Hz, 1H) 、4.55(d, J=12.0Hz, 1H) 、4.58(d,
J=11.5Hz, 1H) 、4.69(d, J=12.0Hz, 1H) 、4.71(d, J=12.0Hz, 1H) 、4.92(d,
J=3.5Hz, 1H, H-1)、5.24(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-3) 、5.32(d, J=10.0Hz
, 1H, NH) 、7.30(m, 10H, Ar-H)。
【０１６７】 実施例６９ 化合物７９の調製 化合物７８（2.4g）および酢酸エチル中80％酢酸（50ml）を35℃で２時間攪拌し
た。次に溶媒を減圧下に除去しトルエンと共に蒸発させた。得られた無色残渣を
シリカゲルクロマトグラフィ（トルエン中10％アセトン）で精製し７９（2.1ｇ
、85％）を得た。TLC：Rf＝0.25（トルエン：アセトン、４：１）。[α]D 20＝＋
54.6（c2.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz,
6H, CH3), 1.25(br.s, 18H, 9CH2), 1.51(m, 2H, CH2), 1.99(br.s, 1H, OH), 2
.49(dd, J=14.5, 4.5Hz, 1H), 2.61(dd, J=14.5, 7.5Hz, 1H), 3.01(br.s, 1H,
OH), 3.62-3.95(m,6H), 4.98(d, J=12.0Hz, 1H), 4.50(d, J=12.0Hz, 1H), 4.53
(d, J=12.0Hz,1H), 4.62(d, J=12.0Hz, 1H) , 4.67(d, J=12.0Hz, 1H) ,4.94(d,
J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.15(dd, J=10.0, 9.0Hz, 1H, H-3), 5.29(d, J=9.0Hz, 1
H, NH), 7.30(m, 10H, Ar-H)。
【０１６８】 実施例７０ 化合物８０の調製 ４６のために記載したものと類似の方法で、化合物４１（1.45g、1.60mmol）を
ソジウムシアノボロハイドライド（1.0g、15.96mmol）および塩化水素ガスで新
しく飽和させたジエチルエーテル溶液で処理しフラッシュシリカゲルクロマトグ
ラフィ（まずヘキサン：酢酸エチル、５：１、次に４：１）の後、８０（1.23ｇ
、85％）を得た。TLC：Rf＝0.20（ヘキサン：酢酸エチル、４：１）。[α]D 20＝
＋47.5（c1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5H
z, 6H, 2CH3), 1.25(br.s, 38H, 19CH2), 1.50(m, 4H, 2CH2), 2.28(t, J=7.5Hz
, 2H, CH2), 2.48(dd, J=14.0, 4.0Hz, 1H), 2.58(dd, J=14.0, 7.5Hz, 1H), 3.
27(d, J=3.5Hz,1H, OH), 3.70-3.86(m,4H), 3.92-4.03(m,2H), 4.58(d, J=12.0H
z, 1H) , 4.64(d, J=12.0Hz, 1H) ,4.66(d, J=12.0Hz, 1H), 4.76(d, J=12.0Hz,
1H), 4.92(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.13(m,2H), 5.19-5.31(m,2H,CH 2=CH), 5.4
0(d, J=9.5Hz, 1H, NH), 5.88(m, 1H, CH2=CH), 7.30(m, 5H, Ar-H)。ES-MS cal
cd for C47H76Cl3NO10： 919.5。Found：920.8（M+H）。
【０１６９】 実施例７１ 化合物８１の調製 ４７のために記載したものと類似の方法で、化合物８０（1.20g、1.30mmol）を
乾燥ジクロロメタン（12ml）中１H−テトラゾールおよびジペンジルジイソプロ
ピルフォスフォルアミダイト（900mg、0.875ml、2.61mmol）で処理し次いでｍ−
CPBA（1.63g、55％、5.22mmol）で処理した。フラッシュシリカゲルクロマトグ
ラフィ（まずヘキサン：酢酸エチル、４：１次に３：１）で精製し８１（1.33g
、86％）を得た。TLC：Rf＝0.31（ヘキサン：酢酸エチル、３：１）。[α]D 20＝
＋35.0（c1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5H
z, 6H, 2CH3), 1.24(br.s, 38H, 19CH2), 1.50(m, 4H, 2CH2), 2.17(t, J=7.0Hz
, 2H, CH2), 2.41(dd, J=16.5, 5.5Hz, 1H), 2.51(dd, J=16.5, 7.5Hz, 1H) , 3
.66(d, J=11.0, 4.5Hz, 1H), 3.74(dd, J=11.0, 2.0Hz, 1H), 3.91(m,1H), 4.00
(m,2H), 4.20(m,1H), 4.44(d, J=12.0Hz, 1H), 4.53(m, 1H, H-4), 4.54(d, J=1
2.0Hz, 1H), 4.63(d, J=12.0Hz,1H), 4.88-4.95(m,5H), 5.11(m, 1H), 5.20-5.3
2(m, 2H, CH2=CH), 5.35(dd, J=10.5, 9.0Hz, 1H, H-3), 5.41(d, J=9.5Hz, 1H,
NH), 5.88(m, 1H, CH2=CH), 7.30(m, 15H, Ar-H)。EＳ−MS calcd for C61H89C
l3NO13P：1179.6。Found：1181.0（M+H）。
【０１７０】 実施例７２ 化合物８２の調製 ４２のために記載したものと類似の方法で、化合物８１（1.30g、1.10mmol）を
乾燥THF（10ml）に溶解し［ビス（メチルジフェニルホスフィン）］（１，５−
シクロオクタジエン）イリジウム（I）ヘキサフルオロホスフェート（14mg、0.0
165mmol）で処理し、水（0.5ml）およびＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、29
4mg、1.62mmol）で処理して８２（950mg、76％を）得た。TLC：Rf＝0.31（酢酸
エチル：ヘキサン、１：２）。[α]D 20＝＋17.5（c1.0、クロロホルム）。1H NM
R(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz, 6H, 2CH3), 1.24(br.s, 38H, 19CH2 ), 1.50(m, 4H, 2CH2), 2.18(t, J=7.0Hz, 2H, CH2), 2.39(m, 2H, CH2), 3.59(
dd, J=11.0, 6.0Hz, 1H), 3.71(dd, J=11.0, 1.5Hz, 1H), 3.94(m,1H), 4.16(m,
1H), 4.40(m,3H), 4.49(d, J=12.0Hz, 1H), 4.65(d, J=12.0Hz, 1H), 4.72(d, J
=12.0Hz,1H), 4.90(m,4H), 5.09(m, 1H), 5.39(t, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.37(dd
, J=10.0, 9.5Hz, 1H, H-3), 5.70(d, J=9.5Hz, 1H, NH), 7.30(m, 15H, Ar-H)
。EＳ−MS calcd for C58H85Cl3NO13P：1139.5。Found：1141.0（M+H）。
【０１７１】 実施例７３ 化合物８３の調製 ４３のために記載したものと類似の方法で、化合物８２（920mg、0.81mmol）を
トリクロロアセトニトリル（2ml）およびDBU（４滴）で処理した。フラッシュシ
リカゲルクロマトグラフィ（まずヘキサン：酢酸エチル、４：１、3.5：１およ
び３：１、0.5％のトリエチルアミンを用いる）で精製し８３（700mg、68％）を
得た。TLC：Rf＝0.36（ヘキサン：酢酸エチル、３：１）。[α]D 20＝＋12.5（c0
.4、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz, 6H, 2CH 3 ), 1.24(br.s, 38H, 19CH2), 1.50(m, 4H, 2CH2), 2.19(t, J=7.0Hz, 2H, CH2)
, 2.46(m, 2H, CH2), 3.71(m,2H), 4.04(m,1H), 4.15(ddd, J=1.0, 8.5, 3.5Hz,
1H, H-2), 4.43(d, J=12.0Hz, 1H), 4.52(d, J=12.0Hz,1H), 4.61(d, J=12.0Hz
,1H), 4.71(ddd, J=9.5, 9.5, 9.5Hz, 1H, H-4), 4.77(d, J=12.0Hz, 1H), 4.94
(m, 4H), 5.12(m, 1H), 5.39(d, J=10.0, 9.5Hz, 1H, H-3), 5.65(d, J=8.5Hz,
1H, NH), 6.47(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 7.32(m, 15H, Ar-H), 8.72(S, 1H, NH)
。EM−MS calcd for C60H85Cl6N2O13P：1282.4。Found：1284.0（M+H）。
【０１７２】 実施例７４ 化合物８４の調製 ４４のために記載したものと類似の方法で、イミデート化合物８３（190mg、0.1
48mmol）および７９（112mg、0.148mmol）をジクロロメタン溶液中トリフルオロ
ボロンジエチルエーテレート溶液（0.1M 、0.4ml）で処理し８４（172mg、66％
）を得た。TLC：Rf＝0.25（ヘキサン：酢酸エチル、2.5 ：１）。[α]D 20＝＋17
.5（c2.0、クロロホルム）。1H NMR(600MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz, 9
H, 3CH3), 1.24(br.s, 56H, 28CH2), 1.42-1.62(m, 6H, 3CH2), 2.23(m, 2H, CH 2 ), 2.38(d, J=15.0, 8.0Hz, 1H), 2.46(dd, J=15.0, 4.0Hz, 1H), 2.47(dd, J=
15.0, 5.0Hz, 1H), 2.63(dd, J=15.0, 7.5Hz, 1H), 3.00(s,1H,OH), 3.48(m,1H,
lipid-3-H), 3.61(dd, J=11.0, 5.5Hz, 1H), 3.65(m, 2H), 3.78(dd, J=11.0, 2
.0Hz, 1H), 3.83(m,3H), 3.94(ddd, J=10.0, 10.0, 4.0Hz, 1H, H-2), 4.06(br.
d, J=10.0Hz, 1H), 4.42(ddd, J=9.5, 9.5, 9.5Hz, 1H, H-4’), 4.45(d, J=12
.0Hz, 1H), 4.50(m,4H), 4.52(d, J=12.0Hz, 1H), 4.57(d, J=12.0Hz, 1H), 4.6
6(d, J=12.0Hz, 1H), 4.72(m,2H), 4.90(m,6H), 5.15(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H,
H-3), 5.19(m, 1H, lipid-3-H), 5.25(d, J=10.0Hz, 1H, NH), 5.38(dd, J=10.
0, 10.0Hz, 1H, H-3’), 5.61(d, J=8.0Hz, 1H, NH), 7.30(m, 25H, Ar-H)。指
摘は1H−1H COSYスペクトルに基づいた。
【０１７３】 構造の証明のために、化合物８４を無水酢酸およびピリジンで処理しそのモノア
セテートを得た。TLC：Rf＝0.30（トルエン：アセトン、８：１）。[α]D 20＝＋
21.4（c0.4、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz,
9H, 3CH3), 1.23(br.s, 56H, 28CH2), 1.50(m, 6H, 3CH2), 1.80(s,3H,CH3), 2
.18(t, J=7.0Hz, 2H, CH2), 2.44(m,3H), 2.53(dd, J=16.0, 7.0Hz, 1H), 3.45(
m,1H), 3.61(m,3H), 3.80(m,2H), 3.97(m,3H), 4.42(m,1H), 4.49(m,6H), 4.58-
4.75(m,5H), 4.89(m,2H), 4.91(m,2H), 4.96(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.05(dd,
J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-4), 5.24(d, J=10.0Hz, 1H, NH), 5.32(dd, J=10.0, 10
.0Hz, 2H, H-3, H-3’), 11H, lpid-3-H), 5.25(d, J=10.0Hz, 1H, NH), 5.38(dd, J=10.0, 10.0Hz, 2H,
H-3, H-3’), 5.70(d, J=8.0Hz, 1H, NH), 7.30(m, 25H, Ar-H)。
【０１７４】 実施例７５ 化合物８５の調製 化合物８４（30mg、0.017mmol）を酢酸（10ml）に溶解し室温で30分間亜鉛（1.0
ｇ）で処理した。固体を濾過しジクロロメタン（50ml）で洗浄した。溶媒を除去
しフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（ジクロロメタン中1％ないし3％メタ
ノール）で精製し遊離アミン化合物（20mg、78％）を得た。前記遊離アミン化合
物（19mg、0.012mmol）、１４（22.5mg、0.049mmol）およびDCC（10.2mg、0.049
mmol）の乾燥ジクロロメタン（3ml）溶液を室温で20時間攪拌した。溶媒を除去
し残渣を繰り返しフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（まずジクロロメタン
中0.5ないし2％メタノール、ついで、ヘキサン：アセトン、６：１）で精製し８
５（16mg、54％）を得た。TLC：Rf＝0.43（ジクロロメタン中４％メタノール）
。[α]D 20＝＋30.0（c0.25、クロロホルム）。1H NMR(600MHz, CDCl3)： δ=0.
90(m, 21H, 7CH3), 1.25(m, 132H, 66CH2), 1.50(m, 14H, 7CH2), 2.18(dd, J=8
.5, 3.5Hz, 1H), 2.20-2.37(m, 9H), 2.41(dd, J=14.5, 7.5Hz, 1H), 2.44(dd,
J=15.5, 4.5Hz, 1H), 2.48(dd, J=15.5, 3.5Hz, 1H), 2.63(dd, J=15.5, 7.0Hz,
1H), 3.58-3.63(m,2H), 3.67(m,1H), 3.72-3.79(m,4H), 3.81-3.86(m,2H), 4.0
0(dd, J=11.0, 2.5Hz, 1H), 4.24(ddd, J=10.5, 9.0, 3.5Hz, 1H, H-2), 4.38(d
dd, J=9.0, 9.0, 9.0Hz, 1H, H-4’), 4.44(d, J=11.5Hz, 1H), 4.45(d, J=12.0
Hz, 1H), 4.51(d, J=12.0Hz, 1H), 4.54(d, J=11.5Hz, 1H), 4.70(d, J=12.0Hz,
1H), 4.88(m, 5H), 4.99(d, J=8.0Hz, 1H, H-1’), 5.05(m,1H), 5.13(m,2H),
5.18(dd, J=10.5, 9.0Hz, 1H, H-3), 5.34(dd, J=10.5, 9.0Hz, 1H, H-3’), 5.
92(d, J=9.0Hz, 1H, NH), 6.27(d, J=7.5Hz, 1H, NH), 7.30(m, 25H, Ar-H)。EM
−MS calcd for C145H237N2O23P：2405.7。Found：1204.4（M+2H+）。
【０１７５】 実施例７６ 化合物８６の調製 ４８のために記載したものと類似の方法で、化合物８５（12.0mg、0.005mmol）
を８６（9.5mg、97％）に変換した。TLC：Rf＝0.46（クロロホルム：メタノール
：水、３：１：１）。[α]D 20＝−6.6（c0.1、クロロホルム：メタノール、４：
１）。EM−MS calcd for C145H237N2O23P：2405.7。Found：1204.4（M−H、負の
モード）。
【０１７６】 実施例７７ 化合物８７の調製 ７８のために記載したものと類似の方法で、脂質酸２０（547.9mg、1.33mmol）
をEDCI（286.82mg、1.33mmol）、DMAP（85.36mg、1.15mmol）および２８（706.1
4mg、1.46mmol）を用い乾燥CH2Cｌ2（14.0mg）中処理しフラッシュクロマトグラ
フィ（酢酸エチル：ヘキサン、１：９）で精製し８７（1.08ｇ、92％）を得た。
TLC：Rf＝0.31（酢酸エチル：ヘキサン、１：７）。[α]D 20＝＋33.1（c1.0、ク
ロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.８８(t, J=6.5Hz, 6H, 2CH3),
1.25(m, 36H), 1.40(m, 4H), 2.35(dd, J=15.0, 6.0Hz, 1H), 2.60(dd, J=15.0,
6.5Hz, 1H), 3.28(m, 1H), 3.41(m,1H), 3.63(m,1H), 3.72(dd, J=9.5, 9.5Hz,
1H), 3.79(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H), 3.91-4.10(m,3H), 4.23(m,1H), 3.79(dd
, J=10.0, 10.0Hz, 1H), 3.91-410(m,3H), 4.23(m,1H), 4.23(m, 1H), 4.30(dd,
J=10.0, 4.5Hz, 1H), 4.67(dd, J=12.0Hz, 1H), 4.76(dd, J=12.0Hz, 1H), 4.9
4(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.23-5.39(m,3H), 5.41(dd, J=10.0, 10.0Hz, 1H, H-
3), 5.52(s,1H), 5.90(m,1H), 7.34(m,3H), 7.44(m,2H)。
【０１７７】 実施例７８ 化合物８８の調製 アセトニトリル（140ml）を８７（1.655ｇ、1.863mmol）に添加し0℃に冷却した
。この懸濁液にBH3Me2NH（550.8mg、9.49mmol）を添加し、3分間攪拌し次に徐々
にBF3OEｔ2（1.2ml）で処理した。添加後、0℃で次いで45分間室温で反応させた
。透明な反応混合物を飽和NaHCO3（50.0ml）を含む分液漏斗に注入し、水層を分
離し酢酸エチル（150l）で洗浄した。合わせた有機層を濃縮乾燥し、その残渣を
フラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、１：７）で精
製し化合物８８（1.25g、72％）を得た。TLC：Rf＝0.14（ヘキサン：酢酸エチル
、７：１）。[α]D 20＝＋35.6（c1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)
： δ=０．８８(t, J=6.0Hz, 6H, 2CH3), 1.25(m, 36H), 1.50−1.60(m, 4H),
2.45(dd, J=15.0, 5.0Hz, 1H), 2.67(dd, J=15.0, 7.0Hz, 1H), 3.04(d, J=2.5H
z, 1H), 3.42(m,2H), 3.66-3.87(m,6H), 4.00(m,2H), 4.20(m,1H), 4.58(d, J=1
2.0Hz, 1H), 4.64(d, J=12.0Hz, 1H), 4.94(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.12-5.33(
m,4H), 5.90(m,1H), 7.30(m,5H)。
【０１７８】 実施例７９ 化合物８９の調製 ３２のために記載したものと類似の方法で、化合物８８（1.21ｇ、1.364mmol）
を１H−テトラゾール（288mg、4.11mmol）、ジベンジルジイソプロピルフォスフ
ォルアミダイト（916μl）次いでｍ−CPBA（942mg、5.456mmol）で処理した。フ
ラッシュシリカゲルカラム（アセトン：ヘキサン、１：７）化合物８９を72％の
収率で得た。TLC：Rf＝0.53（ヘキサン：酢酸エチル、４：１）。[α]D 20＝＋37
.6（c1.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz, 6
H, 2CH3), 1.25(m, 36H), 1.40(m, 4H), 2.31(dd, J=16.0, 6.5Hz, 1H), 2.53(d
d, J=16.0, 6.0Hz, 1H), 3.19(m,1H), 3.33(m,1H), 3.55(m,1H), 3.72(m,2H), 3
.90-4.04(m,3H), 4.20(m,1H), 4.46(d, J=12.0Hz, 1H), 4.53-4.63(m, 3H), 4.8
1(d, J=12.0Hz, 1H), 4.92(m,5H), 5.21-5.33(m,3H), 5.39(dd, J=10.0, 10.0Hz
, 1H, H-3), 5.90(m, 1H), 7.30(m, 15H, Ar−H)。
【０１７９】 実施例８０ 化合物９０の調製 ４２のために記載したものと類似の方法で、化合物８９（1.13ｇ、0.98mmol）を
無水THF（23ml）中水素ガスと共に［ビス（メチルジフェニルホスフィン）］（
１，５−シクロオクタジエン）イリジウム（I）ヘキサフルオロホスフェート（2
5.2mg、0.03mmol）の飽和溶液で処理し、引き続き通常の作業を行った。粗９０
からの不純物をヘキサンで一部抽出し、この工程を数回繰り返し純９０を79％の
収率（860.8mg）で得た。TLC：Rf＝0.48（ヘキサン：酢酸エチル、４：１）。[
α]D 20＝＋16.2（c0.5、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t
, J=6.5Hz, 6H, 2CH3), 1.25(br.s, 36H), 1.45(m, 4H), 2.30(dd, J=16.0, 6.0
Hz, 1H), 2.51(dd, J=16.0, 6.0Hz, 1H), 3.19(m,1H), 3.32(m,1H), 3.53-3.65(
m,3H), 3.75(dd, J=11.0, 2.0Hz, 1H), 3.94(m,1H), 4.17(m,1H), 4.42(d, J=12
.0Hz, 1H), 4.45(m, 1H, H-4), 4.52(d, J=12.0Hz, 1H), 4.57(d, J=12.0Hz, 1H
), 4.72(d, J=12.0Hz, 1H), 4.86-4.95(m,4H), 5.28(dd, J=3.5, 3.5Hz, 1H, H-
1), 5.33(d, J=10.0Hz, 1H, NH), 5.40(dd, J=10.5, 9.5Hz, 1H, H-3), 7.30(m,
15H, Ar−H)。
【０１８０】 実施例８１ 化合物９１の調製 ４３のために記載したものと類似の方法で、化合物９０（900mg、0.82mmol）を
トリクロロアセトニトリル（1ml）およびDBU（4滴）で室温にて2時間処理した。
溶媒を除去し残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキ
サン、１：４および１：3.5、0.5％トリエチルアミンを用いて）で化合物９１（
626mg、61％）を得た。TLC：Rf＝0.30（酢酸エチル：ヘキサン、１：３）。[α] D 20 ＝＋42.7（c2.0、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J
=6.5Hz, 6H, 2CH3), 1.25(br.s, 36H), 1.45(m, 4H), 2.37(dd, J=15.5, 6.0Hz,
1H), 2.53(dd, J=16.0, 6.0Hz, 1H), 3.21(m,1H), 3.34(m,1H), 3.57(m,1H), 3
.73(d, J=2.5Hz, 2H), 4.04(m,1H), 4.15(ddd, J=9.5, 8.5, 3.5Hz, 1H, H-2),
4.45(d, J=2.5Hz, 1H), 4.50(d, J=12.0Hz, 1H), 4.53(d, J=12.0Hz, 1H), 4.80
(m,1H), 4.83(d, J=12.0Hz, 1H), 4.95(m,4H), 5.30(d, J=8.5Hz, 1H, NH), 5.4
3(dd, J=10.0, 9.5Hz, 1H, H-3), 6.45(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 7.30(m, 15H, A
r−H), 8.75(s, 1H, NH)。
【０１８１】 実施例８２ 化合物９２の調製 ４４のために記載したものと類似の方法で、無水CH2Cl2（4ml）中イミデート化
合物９１（221.1mg、0.17mmol）、化合物７９（109.7mg、0.15mmol）および分子
篩（４Å、500mg）の混合物を希釈したBF3ジエチルエーテレート溶液（７５μｌ
）で処理した。この希釈したBF3ジエチルエーテレート溶液は50μlのBF3エーテ
レート溶液を300μlの無水CH2Cl2で希釈して調製した。次いで通常の作業を行い
シリカゲルクロマトグラフィ（酢酸エチル：CH2Cl2：ヘキサン、１：１：２）で
純化合物９２（183.1mg、68％）を得た。TLC：Rf＝0.35（酢酸エチル：ヘキサン
、１：２）。[α]D 20＝＋21.2（c0.5、クロロホルム）。1H NMR(500MHz, CDCl3)
： δ=0.88(t, J=6.5Hz, 9H, 3CH3), 1.26(m, 54H), 1.42-1.60(m, 6H), 2.34(
dd, J=16.0, 6.0Hz, 1H), 2.44(dd, J=16.0, 5.0Hz, 1H), 2.47(dd, J=15.0, 5.
0Hz, 1H), 2.63(dd, J=15.0, 7.5Hz, 1H), 3.11(d, J=3.5Hz, 1H, OH), 3.21(m,
1H), 3.35(m,1H), 3.54(m,1H), 3.65(m,3H), 4.45(d, J=11.5Hz, 1H), 4.47-4.6
1(m,7H), 4.65(d, J=12.0Hz, 1H), 4.65(m,1H), 4.70(d, J=11.5Hz, 1H), 4.80(
d, J=8.0Hz, 1H, H-1’), 4.90(m,5H), 5.16(dd, J=9.5, 9.5Hz, 1H), 5.26(d,
J=10.0Hz, 1H, NH), 5.37(m,2H), 7.30(m, 25H, Ar−H)。
【０１８２】 実施例８３ 化合物９３の調製 ８５のために記載したものと類似の方法で、化合物９２（173.9mg）をZn粉末（4
75mg）および酢酸（4ml）を用いて遊離アミノ酸化合物に変換した。アミン化合
物の混合物をDCC（205.83mg、〜1.0mmol）を用いて脂質酸２０（251mg、0.58mmo
l）と結合させた。通常の作業の後、シリカゲルクロマトグラフィ（アセトン：
ヘキサン：クロロホルム）で純化合物９３（96.3mg、45％）を得た。TLC：Rf＝0
.30（ヘキサン：ジクロロメタン：アセトン、６：２：１）。[α]D 20＝＋22.0（
c1.0、クロロホルム）。1H NMR(500MHz, CDCl3)： δ=0.88(t, J=6.5Hz, 21H,
7CH3), 1.24(m, 126H), 1.30-1.50(m, 14H), 2.21-2.31(m,4H), 2.32(dd, J=16.
0, 6.5Hz, 1H), 2.42(dd, J=15.0, 5.0Hz, 1H), 2.50(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H),
2.61(dd, J=15.5, 7.0Hz, 1H), 3.18(m,1H), 3.28-3.41(m,5H), 3.49-3.56(m,4
H), 3.61-3.87(m,8H), 4.02(m,1H), 4.28(ddd, J=10.5, 9.5, 3.5Hz, 1H, H-2),
4.43(m,4H), 4.51(d, J=11.5Hz, 1H), 4.53(d, J=11.5Hz, 1H), 4.69(d, J=11.
5Hz, 1H), 4.83(d, J=8.0Hz, 1H, H-1’), 4.89(m,5H), 5.19(dd, J=10.5, 9.5H
z, 1H), 5.36(d, J=10.5, 9.5Hz, 1H), 6.44(d, J=9.5Hz, 1H, NH), 6.57(d, J=
7.5Hz, 1H, NH), 7.30(m, 25H, Ar−H)。
【０１８３】 実施例８４ 化合物９４の調製 ３３のために記載したものと類似の方法で、化合物９３（60.8mg, 0.27mmol）を
９４に変換し、これをシリカゲルクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール
：水：酢酸、15：１：0.1：0.1）で精製し純化合物９４（26.9mg、55％）を得た
。TLC：Rf＝0.32（クロロホルム：メタノール：水：酢酸、10：１：0.1：0.1）
。[α]D 20＝＋15.0（c1.0、クロロホルム）。EM−MS calcd for C104H201N2O20P
：1829.5（負のモード、M−H、13C同位体ピーク）。
【０１８４】 実施例８５ 化合物９５の調製 化合物２７（500mg、1.03mmol）およびベンジルトリクロロアセトイミデート（5
21mg、2.06mmol）をジクロロメタン：ヘキサン、１：２（15ml）に溶解し分子篩
（4Å、〜1.0ｇ）を添加した。混合物を室温で15分間攪拌しトリフルオロメタン
スルホン酸（460mg、28μl、0.31mmol）を添加した。反応は2時間続け次いでト
リエチルアミン（0.2ml）を添加した。固体をセライトに通して濾過しジクロロ
メタンで洗浄した。濾液を真空濃縮し残渣をフラッシュシリカゲルクロマトグラ
フィで精製し９５（300mg、56％を得た）。TLC：Rf＝0.36（酢酸エチル：ヘキサ
ン、１：４）。[α]D 20＝＋93.8（c0.8、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl 3 )： δ=1.45(s, 3H, CH3), 1.55(s, 3H, CH3), 3.62(dd, J=10.0, 8.5Hz, 1H)
, 3.70-3.88(m,5H) 3.98(ddd, J=10.0, 10.0, 3.5Hz, 1H), 4.47(d, J=12.0Hz,
1H), 4.63(d, J=12.0Hz, 1H), 4.68(d, J=12.0Hz, 1H), 4.71(d, J=12.0Hz, 1H)
, 4.71(d, J=12.0Hz, 1H), 4.75(d, J=12.0Hz, 1H), 4.86(d, J=12.0Hz, 1H), 4
.93(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.09(d, J=10.0Hz, 1H, NH), 7.30(m, 25H, Ar−H)
。
【０１８５】 実施例８６ 化合物９６の調製 化合物９５（280mg、0.49mmol）を45℃にて2時間酢酸：水（４：１、20ml）で処
理した。通常の作業後、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（トルエン：ア
セトン、４：１）で精製し９６（247mg、95％を得た）。TLC：Rf＝0.20（トルエ
ン：アセトン、３：１）。[α]D 20＝＋90.0（c0.5、クロロホルム）。1H NMR(30
0MHz, CDCl3)： δ=2.00(br.s, 1H, OH), 2.60(br.s, 1H, OH), 3.62-3.73(m,3
H), 3.81(br.s,2H), 3.98(ddd, J=10.0, 10.0, 4.0Hz, 1H, H-2), 4.50(d, J=11
.5Hz, 1H), 4.66(d, J=12.0Hz, 1H), 4.70(d, J=11.5Hz, 1H), 4.72(d, J=12.0H
z, 1H), 4.77(d, J=11.5Hz, 1H), 4.82(d, J=11.5Hz, 1H), 4.93(d, J=4.0Hz, 1
H, H-1), 5.19(d, J=10.0Hz, 1H, NH), 7.30(m, 10H, Ar−H)。ES−MS calcd fo
r C23H26Cl3NO7：533.1。found：533.8（M＋H）。
【０１８６】 実施例８７ 化合物９７の調製 化合物９６（450mg、0.84mmol）を酢酸（30mg）に溶解し室温にて6時間亜鉛（6.
0g）で処理した。固体を濾過し酢酸で洗浄し、濾液を真空濃縮した。残渣を短い
シリカゲルカラム（メタノール中６％ないし８％のジクロロメタン）に通し９７
（300mg、95％）を得た。TLC：Rf＝0.20（ジクロロメタン中６％メタノール）。
[α]D 20＝＋133.0（c0.2、メタノール）。1H NMR(300MHz, CD3OD)： δ=3.10(d
d, J=10.0, 3.5Hz, 1H, H-2), 3.57-3.82(m,5H), 4.60(d, J=11.5Hz, 1H), 4.69
(d, J=11.0Hz, 1H), 4.75(d, J=11.5Hz, 1H), 5.06(d, J=11.0Hz, 1H), 5.23(d,
J=3.5Hz, 1H, H-1), 7.35(m, 10H, Ar−H)。
【０１８７】 実施例８８ 化合物９８の調製 ５５のために記載したものと類似の方法で、化合物９７（100mg、0.28mmol）を
ジクロロメタン：ジメチルフォルムアミド（５：１、6ml中）２３（162mg、0.25
mmol）およびDCC（209mg、1.02mml）で処理した。通常の作業の後フラッシュシ
リカゲルクロマトグラフィ（クロロホルム：アセトン、９：１）で精製し９８（
93mg、38％）を得た。TLC：Rf＝0.30（ジクロロメタン：メタノール、100：２）
。[α]D 20＝＋52.0（c0.4、クロロホルム）。1H NMR(300MHz, CDCl3)： δ=0.8
8(t, J=6.5Hz, 6H, 2CH3), 1.25(br.s, 54H), 1.45-1.60(m,6H), 2.00(m,1H,OH)
, 2.59(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H), 2.40(m,3H), 2.50(d, J=1.5Hz, 1H, OH), 3.3
7(t, J=6.5Hz, 2H), 3.61-3.80(m,5H), 4.30(ddd, J=9.5, 9.5, 3.5Hz, 1H, H-2
), 4.48(d, J=12.0Hz, 1H), 4.65(d, J=11.5Hz, 1H), 4.70(d, J=12.0Hz, 1H),
4.73(d, J=11.5Hz, 1H), 4.89(d, J=3.5Hz, 1H, H-1), 5.07(m,1H), 5.96(d, J=
8.5Hz, 1H, NH), 7.30(m, 10H, Ar−H)。ES−MS calcd for C60H101NO9：979.7
。found：980.9（M＋H）。
【０１８８】 実施例８９ 化合物９９の調製 ４４のために記載したものと類似の方法で、化合物９１（188mg、0.16mmol）、
９８（93mg、0.10mmol）分子篩（4Å、1.0ｇ）および乾燥ジクロロメタン（3ml
）の混合物をBF3エーテレート溶液（ジクロロメタン中0.05M）で処理した。通常
の作業の後、繰り返しのフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（ヘキサン：酢
酸エチル、2.5：１および２：１、トルエン：アセトン、８：１）で精製し９９
（109mg、56％）を得た。TLC：Rf＝0.33（ヘキサン：酢酸エチル、２：１）。[
α]D 20＝＋24.0（c0.3、クロロホルム）。1H NMR(500MHz, CDCl3)： δ=0.88(t
, J=6.5Hz, 15H, 5CH3), 1.25(m, 90H), 1.40-1.58(m,10H), 2.25-2.45(m,6H),
2.95(br.s, 1H, OH), 3.21(m,1H), 3.36(m,3H), 3.47-3.53(m,2H), 3.57-3.67(m
,4H), 3.72(m,2H), 3.80(m,2H), 4.03(br.d, J=11.0Hz, 1H) 4.67(d, J=11.5Hz,
1H), 4.69(d, J=11.5Hz, 1H), 4.75(d, J=11.5Hz, 1H), 4.85-4.92(m,6H), 5.0
4(m,1H), 5.36(m,2H), 5.80(d, J=9.0Hz, 1H, NH), 7.30(m, 25H, Ar−H)。
【０１８９】 実施例９０ 化合物１００の調製 ４５のために記載したものと類似の方法で、化合物９９（95mg、0.046mmol）を
亜鉛粉末（2.0g）および酢酸（20ml）を用い遊離アミノ化合物１００に変換した
。粗化合物をジオキサンから冷凍乾燥し１００（85mg、97％）を得た。TLC：Rf
＝0.11（ジクロロメタン中２％メタノール）。
【０１９０】 実施例９１ 化合物１００の調製 ４５のために記載したものと類似の方法で、遊離アミノ化合物、１００（42mg、
0.02mmol）を乾燥ジクロロメタン（3ml）中DCC（28mg、0.13mmol）を用いて脂質
酸、２０（36.8mg、0.09mmol）と結合した。通常の作業の後、フラッシュシリカ
ゲルクロマトグラフィ（ヘキサン：クロロホルム：アセトン、６：３：1.5）で
精製し１０１（38mg、75％）を得た。TLC：Rf＝0.50（ヘキサン：クロロホルム
：アセトン、６：３：２）。[α]D 20＝＋21.2（c0.4、クロロホルム）。1H NMR(
600MHz, CDCl3)： δ=0.86(m, 21H, 7CH3), 1.23-1.60(m, 140H), 2.20-2.39(m
,8H), 2.47(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H), 3.17(m,1H), 3.17(m,1H), 3.31-3.39(m,5
H), 3.50-3.67(m,7H), 3.68-3.78(m,4H), 3.84(dd, J=11.0, 3.5Hz, 1H) 3.96(d
d, J=11.0, 3.0Hz, 1H), 4.21(ddd, J=10.5, 9.0, 3.0Hz, 1H, H-2), 4.40(d, J
=12.0Hz, 1H), 4.43(d, J=12.0Hz, 1H), 4.44(m,1H), 4.47(d, J=12.0Hz, 1H),
4.64(d, J=12.0Hz, 1H), 4.65(d, J=12.0Hz, 1H), 4.87(m,7H), 5.03(m,1H), 5.
34(dd, J=10.5, 9.0Hz, 1H), 5.75(d, J=9.0Hz, 1H, NH), 6.57(d, J=9.0Hz, 1H
, NH), 7.30(m, 25H, Ar−H)。
【０１９１】 実施例９２ 化合物１０２の調製 ３３のために記載したものと類似の方法で、水素雰囲気下、化合物１０１（20mg
、8.78μl）をTFT−酢酸（10：１、50ml）中パラジウム／炭素（５％、50mg）に
よって24時間１０２に変換した。通常の作業の後、フラッシュシリカゲルクロマ
トグラフィ（クロロホルム：メタノール：水：酢酸、９：１：0.1：0.1および８
：１：0.1：0.1）で精製し１０２（12mg、75％）を得た。TLC：Rf＝0.38（クロ
ロホルム：メタノール：水：水酸化アンモニウム、７：３：0.4：0.2）。[α]D 2 0 ＝＋2.0（c0.2、クロロホルム：メタノール、４：１）。ES−MS calcd for C10 4 H201N2O20 P： 1829.4。found：1829.5（負のモード、M−H、13Ｃ同位体ピーク
）。
【０１９２】 実施例９３ 化合物１０３の調製 １０１のために記載したものと類似の方法で、化合物１００（42mg、0.02mmol）
および１７（30mg、0.09mmol）を乾燥ジクロロメタン（3ml）中DCC（28mg、0.13
4mmol）を用いて処理し、繰り返しのフラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（
ヘキサン：エチルアセトン、２：１； ヘキサン：アセトン、３：１）で精製し
１０３（37mg、76％）を得た。TLC：Rf＝0.39（ヘキサン：クロロホルム：アセ
トン、６：３：２）。[α]D 20＝＋21.2（c0.4、クロロホルム）。1H NMR(600MHz
, CDCl3)： δ=0.86(m, 18H, 6CH3), 1.23-1.60(m, 120H), 2.23(dd, J=15.0,
6.5Hz, 1H), 2.25-2.39(m,7H), 2.24(dd, J=15.5, 5.5Hz, 1H), 3.17(m,1H), 3.
34(m,3H), 3.50-3.76(m,12H), 3.89(dd, J=11.0, 3.0Hz, 1H), 4.20(ddd, J=10.
5, 9.0, 3.0Hz, 1H, H-2), 4.37(d, J=11.5Hz, 1H), 4.39-4.43(m,3H), 4.46(d,
J=11.5Hz, 1H), 4.51(d, J=8.0Hz, 1H), 4.53(d, J=11.5Hz, 1H), 4.61(d, J=1
1.5Hz, 1H), 4.65(d, J=12.0Hz, 1H), 4.82-4.90(m,6H), 5.03(m,1H), 5.22(dd,
J=10.0, 9.0Hz, 1H), 5.71(d, J=9.0Hz, 1H, NH), 6.38(d, J=8.0Hz, 1H, NH),
7.30(m, 30H, Ar−H)。
【０１９３】 実施例９４ 化合物１０４の調製 １０２のために記載したものと類似の方法で、化合物１０３（16mg、7.27μmol
）をTFT−酢酸（10：１、50ml）中水素雰囲気下にパラジウム／炭素（50mg）で
処理し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィ（クロロホルム：メタノール：
水：酢酸、９：１：0.1：0.1および８：１：0.1：0.1および６：１：0.1：0.1）
で精製し１０４（10.5mg、87％）を得た。TLC：Rf＝0.20（クロロホルム：メタ
ノール：水：水酸化アンモニウム、７：３：0.4：0.2）。[α]D 20＝＋3.5（c0.2
、クロロホルム：メタノール、４：１）。ES−MS calcd for C92H177N2O20 P：
1661.3。found：1661.3（負のモード、M−H、13Ｃ同位体ピーク）。
【０１９４】 実施例９５ リポソーム処方物の調製 合成脂質−Ａ類似体３３、４８、５４、５８、７０、７７、８６、９４、１０２
、１０４および市販の脂質−Ａ製品天然脂質−Ａをリポソーム処方物に組み入れ
た。天然脂質−ＡはAVANTIから購入し、これはサルモネラ菌細胞壁から抽出され
た脂質−Ａ類似体の混合物を含む。一般的にリポソーム処方物は400μgのMUCIベ
ースのリポペプチドBP1-148、H2N-STAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPK(Pal)G-OH、200
μgの脂質−Ａ類似体、6.94mgのコレステロール、1.46mgのジミリストイルホス
ファチジルグリセロール（DMPC）および11.62mgのジパルミトイルホスファチジ
ルコリン（DPPC）をサリン（0.9％NaCl溶液）1mlにつき含有する。リポソーム構
成物はまずホスホリピドコレステロールおよび脂質Ａ類似体を約53℃でtert−ブ
タノールに溶解して作られる。ついで、リボぺぶちどと水（５％、v/v）をtert
−ブタノール溶液に添加した。得られた透明な95％ tert−ブタノール溶液を約
４容量の早く撹拌した水に、18ケージニードルのガラススポイトで約50℃にて注
入した。このプロセスで形成した小さい単一層の小胞（SUV）を冷却し、0.22μm
フィルターに通してろ過し殺菌し、ガラス瓶に入れ凍結乾燥した。乾燥粉末を注
入前に殺菌食塩水で再水和し、多層の大胞（MLV）を形成した。形成したリポソ
ームはマウスを免疫化するために用いられる。
【０１９５】 実施例９６ リポソームワクチンで免疫化したマウス C57−ブラックマウスの群は一回の投与量として40μgのMUCIベースのリボペプチ
ドBP1-148（図34）、これはH2N-STAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPK(Pal)G-OHのペプチ
ド配列をもつ、および20μgの脂質−Ａ類似体を含有するリポソームワクチンを
皮下注射により免疫化させた。９日後、ワクチン注射マウスを犠牲にして廃液す
るリンパ節（局所応答）または脾臓（組織的応答）からリンパ球を取り出し各群
の免疫応答を決定した。免疫化したマウスから取りだしたリンパ球をインビトロ
培地に、ペプチド配列H2N-STAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPK-OHをもつMUCIベースの
補助抗原BP1-151の存在で、インキュベーションした。
【０１９６】 実施例９７ Ｔ−細胞増殖の測定 Ｔ−細胞増殖は標準3Ｈチミジン結合アッセイを用いて評価した。簡単には、各
マウスからの鼠径部リンパ節リンパ球を通過したナイロンウールを106個の天然
のマイトマイシンＣ処理した同系の脾細胞、これは抗原提示細胞（APCs）として
役立つ、を含む培地に添加した。各ウェルに20μgのMUC1ベースのブースチング
ペプチドBP1-151、H2N-STAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPK-OH（単一文字アミノ酸コー
ド、表８）を正のコントロールのために添加した；そして抗原またはペプチドBP
1-72を含まない培地、これはペプチド配列H2N-EAIQPGCIGGPKGLPGLPGP-OHをもつ
、負のコントロールとして用いた。培地を72時間、全容量250μg／ウェルでイン
キュベートし、ついで50μlの容量で１μCiの3Ｈ−チミジンを添加した。プレー
トをさらに18−20時間インキュベートした。細胞を収集し、［3Ｈ］dTh結合を液
体シンチレーションカウンターで測定した。異なる脂質−Ａ類似体でアジュバン
トした種々のリポソームワクチンに対応するＴ−細胞増殖は表１−３および図３
１−３３にまとめる。
【０１９７】 表１ 脂質−Ａ類似体３３、４８および５８のＴ−細胞増殖およびインターフェ
ロン−ガンマ生成 表２ 脂質−Ａ類似体４８，５４、７０，７７および８６のＴ−細胞増殖および
インターフェロン−ガンマ生成 表３ 脂質−Ａ類似体８６、９４、１０２および１０４のＴ−細胞増殖およびイ
ンターフェロン−ガンマ生成 表４ 合成および天然脂質−Ａ類似体の致死毒性の比較 表５ テキストで用いた通常の省略語 表６ 本発明で用いた脂質−Ａ類似体の構造のリスト 表７ 本発明で用いた化合物のＩＵＰＡＣ名のリスト 表８ アミノ酸の単一文字および３文字コード
【０１９８】
【表１】
【０１９９】
【表２】
【０２００】 実施例９８ インターフェロン−ガンマ（IFN−γ）生成の測定 インターフェロン−ガンマ（IFN−γ）を酵素結合イムノアブソルベント検定法
（ELISA）を用いる細胞培養上澄み液で測定した。96−ウェルプレートを50μlの
R4.6AZ中、37℃にて30分間50μlのキャッチャーMabsで被覆した。次にプレート
を洗浄し試験試料を45分間インキュベートした。2回洗浄後第二のビオチチル化
抗体、XMG1.2を添加した。洗浄後、パーオキシダーゼ共役ストレプタヴィジンを
添加し30分間再度インキュベートした。最後に、100μlのセイヨウワサビオキシ
ダーゼ（HRPO）基質溶液を添加した。光学濃度をThermomax ELISAリーダーを用
い10分間運動モードで405nm波長にて測定した。種々の脂質−Ａ類似体に相当す
るインターフェロン−γ（IFN−γ）レベルを表１−表３および図３１−図３３
に示す。
【０２０１】
【表３】
【０２０２】 実施例９９ 合成および天然脂質−Ａ類似体の致死毒性 合成脂質−Ａ類似体８６および天然脂質−Ａ（詳細は実施例９５を参照）を致死
毒性についてテストした。試験法および結果は以下にまとめる（表８）。 ａ）脂質−Ａ類似体溶液の調製： 1mgの脂質−Ａ類似体を1mlの20％DMSOに溶
解し食塩水で希釈し0.5ml中50μg、10μgおよび2μgの投与量を得た。 ｂ）アクチノマイシンＤの調製： 5mgのアクチノマイシンＤを1mlのエタノー
ルに溶解し、食塩水で希釈し0.5ml中550μg/kgの投与量を得た。 ｃ）処置： コントロールとして種々の投与量の脂質−Ａ類似体または溶媒を
C57−ブラックマウスに腹膜内投与した。20分後、全群のマウスに500μlのアク
チノマイシンＤを注射した。ついでマウスを死亡率または任意の他の毒性症状に
つき観察した。 最初の24時間の観察の間、3匹のマウス全部に天然脂質−Ａを高い50μgの投与量
で注射し、同様に2匹のマウスに天然脂質Ａを10μgの投与量で注射し死亡を見た
（表４）。3回全部合成脂質−Ａ類似体８６を注射したマウス群および低い2μg
の天然脂質Ａを注射したマウス群の生存を調べた。24時間後にマウスの死亡は記
録されず実験は4日後に終了した。この研究結果は合成脂質−Ａ類似体８６がこ
の実験でテストした天然脂質−Ａ製品よりも毒性がはるかに小さいことを示した
。
【０２０３】
【表４】
【０２０４】 上記実施例は、脂質−Ａ類似体およびそれらの中間体の合成のために詳細な方法
、およびリポソームワクチンを調製し、合成脂質−Ａ類似体でアジュバントし、
マウスの特異的免疫応答を誘導する方法を記載した。この発明で用いられた通常
の略語を表５にまとめる。アジュヴァンティシティのために調製しテストした脂
質−Ａ類似体の構造は表６にまとめる。本発明で調製した全化合物のIUPAC名の
完全なリストは表７に示す。ペプチド配列のため、アミノ酸の単一文字のコード
を本発明で用いた。例えば、表８において天然産のアミノ酸の標準単一文字およ
び３文字コードのリストを参照。
【０２０５】
【表５】 表５ 明細書に使用した共通の略語 All アリル APC 抗原提示細胞 BF3Oet2 トリフルオロボランジエチルエーテレート Bn ベンジルt Bu tert−ブチル m-CPBA m−クロロ過安息香酸 CPM １分あたりのカウント DBU 1,8−ジアザビシクロ［5,4,0］ウンデク−7−エン DCC ジシクロヘキシルカーボジイミド (-)-DIPCI (-)−B−クロロジイソピノカンフェニルボラン DMAP ４−ジメチルアミノピリジン DMF ジメチルホルムアミド DMPC ジミリストイルホスファチジルグリセロール DPPC ジパルミトイルホスファチジルコリン DMSO ジメチルスルホキサイド EDCI 1-[3-（ジメチルアミノ）プロピル]-3-エチルカーボジイミド塩酸塩 ES-MS 電子スプレーマススペクトロメトリー Et エチル Fmoc ９−フルオレニルメトキシカルボニル IFN-γ インターフェロン−γ LPS リポ多糖類 Me メチル MLV 多層ラメラ大胞 NBS Ｎ−ブロモスクシンイミド NMM Ｎ−メチルモルホリン NMR 核磁気共鳴 Pal パルミトイル Ph フェニル Phth フタルイミド iPr イソプロピル Py ピリジン SUV 単ラメラ小胞 Tf トリフルオロメチルスルホニル TFA トリフルオロ酢酸 THF テトラヘドロフラン TLC 薄層クロマトグラフィ Troc トリクロロエトキシカルボニル Trt トリフェニルメチル p-TsOH ｐ−トルエンスルホン酸
【０２０６】
【表６】
【０２０７】
【表７】 表７ 本発明で調製された化合物のIUPAC名のリスト 化合物１ N-9-フルオレニルメトキシカルボニル-L-アスパラギン酸tert-ブチ
ルエステル 化合物２ (3S)-3-(9-フルオレニルメトキシカルボニルアミノ)-4-ノニルアミ
ノ-4-オキソ−ブチル酸tert−ブチルエステル 化合物３ (3S)-3-アミノ-4-ノニルアミノ-4-オキソ−ブチル酸tert−ブチル
エステル 化合物４ (3)-3-テトラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ−ブチル酸te
rt−ブチルエステル 化合物５ (3s)-3-テトラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ−ブチル酸
化合物６ 3-ヒドロキシテトラデカン酸エチルエステル 化合物７ 3-ヒドロキシテトラデカン酸、または3-ヒドロキシミリスチン酸 化合物８ (3R)-3-ヒドロキシテトラデカン酸、または(3R)-3-ヒドロキシミリ
スチン酸 化合物９ (3R)-3-ヒドロキシテトラデカン酸フェナシルエステル 化合物１０ (3R)-3-ドデカノイルオキシテトラデカン酸フェナシルエステル 化合物１１ (3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカン酸フェナシルエステ
ル 化合物１２ (3R)-3-ヘキサデカノイルオキシテトラデカン酸フェナシルエステ
ル 化合物１３ (3R)-3-ドデカノイルオキシテトラデカン酸 化合物１４ (3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカン酸 化合物１５ (3R)-3-ヘキサデカノイルオキシテトラデカン酸 化合物１６ (3R)-3-ベンジルオキシテトラデカン酸フェナシルエステル 化合物１７ (3R)-3-ベンジルオキシテトラデカン酸 化合物１８ ドデシルトリフルオロメタンスルホネート 化合物１９ (3R)-3-ドデシルオキシテトラデカン酸フェナシルエステル 化合物２０ (3R)-3-ドデシルオキシテトラデカン酸 化合物２１ (4R)-4-ヒドロキシペンタデセン−１ 化合物２２ (4R)-4-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイルオキシ]ペンタデ
セン−１ 化合物２３ (3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイルオキシ]−テトラ
デカン酸 化合物２４ ベンジル2-デオキシ-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミ
ノ)−α−Ｄ−グルコピラノシド 化合物２５ アリル2-デオキシ-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ
)−α−Ｄ−グルコピラノシド 化合物２６ ベンジル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ｂベンジリデン-2-(2,2,2-トリクロ
ロエトキシカルボニルアミノ)−α−Ｄ−グルコピラノシド 化合物２７ ベンジル2-デオキシ-4,6-ジ-0-イソプロピリデン-2-(2,2,2-トリク
ロロエトキシカルボニルアミノ)−α−Ｄ−グルコピラノシド 化合物２８ アリル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-(2,2,2-トリクロロエ
トキシカルボニルアミノ)−α−Ｄ−グルコピラノシド 化合物２９ ベンジル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-(2,2,2-トリクロロ
エトキシカルボニルアミノ)−3−0−テトラデカノイル−α-D-グルコピラノシド
化合物３０ ベンジル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-[(3S)-3-テトラデ
カンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-テトラデカノイル-α
-D-グルコピラノシド 化合物３１ ベンジル6-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド
-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-テトラデカノイル-α-D-グルコ
ピラノシド 化合物３１ ベンジル6-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド
-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-テトラデカノイル-α-D-グルコ
ピラノシド 化合物３２ ベンジル6-0-ベンジル-2-デオキシ-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォ
ノ)-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3
-0-テトラデカノイル-α-D-グルコピラノシド 化合物３３ 2-デオキシ-4-0-ホスフォノ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド-4-ノ
ニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-テトラデカノイル-α／β-D-グルコピ
ラノース 化合物３４ ベンジル2-デオキシ-2-フタルイミド-β-D-グルコピラノシド 化合物３５ ベンジル2-デオキシ-2-フタルイミド-6-0-トリフェニルメチル-β-
D-グルコピラノシド 化合物３６ ベンジル2-デオキシ-3,4-ジ-0-ベンジル2-フタルイミド-6-0-トリ
フェニルメチル-β-D-グルコピラノシド 化合物３７ ベンジル2-デオキシ-3,4-ジ-0-ベンジル2-フタルイミド-β-D-グル
コピラノシド 化合物３８ ベンジル2-アミノ-2-デオキシ-3,4-ジ-0-ベンジル-β-D-グルコピ
ラノシド 化合物３９ ベンジル2-デオキシ-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-ヘキサデカノ
イルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物４０ ベンジル2-デオキシ-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノ
イルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物４１ アリル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[(3R)-3-テトラデ
カノイルオキシテトラデカノイル]-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミ
ノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物４２ 2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイ
ルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-
α/β-D-グルコピラノース 化合物４３ 2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイ
ルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-
α-D-グルコピラノシルトリクロロアセトイミデート 化合物４４ ベンジル2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0
-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエト
キシカルボニルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3
-ヘキサデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物４５ ベンジル2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-[
(3R)-3-ドデカノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイ
ルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3
R)-3-ヘキサデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物４６ ベンジル2-デオキシ-6-0-{6-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3R)-3-ド
デカノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテ
トラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-ヘキ
サデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物４７ ベンジル2-デオキシ-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジルホス
フォノ)-2-デオキシ-2-[(3R)-3-ドデカノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[
(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3,
4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-ヘキサデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D
-グルコピラノシド 化合物４８ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-2-[(3R)-3-ドデカノイルオキシテト
ラデカンアミド]-4-0-ホスフォノ-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラ
デカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-ヘキサデカノイルオキシテト
ラデカンアミド]-α／β-D-グルコピラノース 化合物４９ ベンジル2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0
-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエト
キシカルボニルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3
-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物５０ ベンジル2-デオキシ-6-0-{2-アミノ-2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジ
リデン-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピ
ラノシル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカン
アミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物５１ ベンジル2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-[
(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシル}-
3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β
-D-グルコピラノシド 化合物５２ ベンジル2-デオキシ-6-0-{6-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3R)-3-テ
トラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベ
ンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピ
ラノシド 化合物５３ ベンジル2-デオキシ-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホス
フォノ)-2-デオキシ-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-3
-0- [(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシ
ル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド
]-β-D-グルコピラノシド 化合物５４ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4-0-ホスフォノ-2-[(3R)-3-テトラデ
カノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテト
ラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテ
トラデカンアミド]-α／β-D-グルコピラノース 化合物５５ ベンジル2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-[
(3R)-3-テトラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-[(3R
)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3,4-
ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-
グルコピラノシド 化合物５６ ベンジル2-デオキシ-6-0-{6-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3S)-3-テ
トラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-[(3R)-3-テト
ラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベン
ジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラ
ノシド 化合物５７ ベンジル2-デオキシ-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホス
フォノ)-2-デオキシ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-
ブタンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-
グルコピラノシル}-3,4-ジ-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテト
ラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物５８ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド-4-ノ
ニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-4-0-ホスフォノ-3-0-[(3R)-3-テトラデカ
ノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-テトラデ
カノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノース 化合物５９ ベンジル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-フタルイミド-β-D
-グルコピラノシド 化合物６０ ベンジル3-0-アリル-2-デオキシ-6-0-トリフェニルメチル-2-フタ
ルイミド-β-D-グルコピラノシド 化合物６１ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-トリフェニル
メチル-2-フタルイミド-β-D-グルコピラノシド 化合物６２ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-2-フタルイミド-β
-D-グルコピラノシド 化合物６３ ベンジル3-0-アリル-2-アミノ-4-0-ベンジル-2-デオキシ-β-D-グ
ルコピラノシド 化合物６４ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3R)-3-テトラ
デカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物６５ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4
,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]
-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-2-[
(3R)-3-ヘキサデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物６６ ベンジル3-0-アリル-6-0-{2-アミノ-2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジ
リデン-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピ
ラノシル}-4-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラ
デカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物６７ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4
,6-ジ-0-ベンジリデン-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]
-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシ
ル}-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラ
ノシド 化合物６８ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-6
-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R
)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3
R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物６８ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-6
-0-ベンジル-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R
)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3
R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物６９ ベンジル3-0-アリル-4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-6
-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオ
キシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイ
ル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカン
アミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物７０ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシ
テトラデカンアミド]-4-0-ホスフォノ-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテ
トラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3-0-プロピル-2-[(3R)-3-テトラデカ
ノイルオキシテトラデカンアミド]-α／β-D-グルコピラノース 化合物７１ ベンジル4-0-ベンジル-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベ
ンジリデン-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-
トリクロロエトキシカルボニアルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-
テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物７２ ベンジル4-0-ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノ
イル]-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[(3R)-3-テト
ラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニ
アルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテト
ラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物７３ ベンジル6-0-{2-アミノ-2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[
(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-4-
0-ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノイル]-2-デオキシ-2- [(3
R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物７４ ベンジル4-0-ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノ
イル]-2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-2-[(3S)-3-テトラ
デカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデ
カノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-[(3R)-3-テトラ
デカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物７５ ベンジル4-0-ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノ
イル]-6-0-{6-0-ベンジル-2-デオキシ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド-4-ノニル
アミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデ
カノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-デオキシ-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオ
キシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシド 化合物７６ ベンジル4-0-ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノ
イル]-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジルホスフォノ)-2-デオキシ-2-[(3S)
-3-テトラデカンアミド-4-ノニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-3-0-[(3R)-3-
テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-デオキ
シ-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノ
シド 化合物７７ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-2-[(3S)-3-テトラデカンアミド-4-ノ
ニルアミノ-4-オキソ-ブタンアミド]-4-0-ホスフォノ-3-0-[(3R)-3-テトラデカ
ノイルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3R)-3-ヒドロ
キシテトラデカノイル]-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド
]-α／β-D-グルコピラノース 化合物７８ ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノイル]-2-デオ
キシ-4,6-ジ-0-イソプロピリデン-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミ
ノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物７９ ベンジル-3-0-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカノイル]-2-デオ
キシ-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシド
化合物８０ アリル6-0-ベンジル-2-デオキシ-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオ
キシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-α-D-
グルコピラノシド 化合物８１ アリル6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-デオキシ
-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロ
エトキシカルボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物８２ 6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-デオキシ-3-0-[
(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキ
シカルボニルアミノ)-α／β-D-グルコピラノース 化合物８３ 6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-デオキシ-3-0-[
(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキ
シカルボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシルトリクロロアセトイミデート 化合物８４ ベンジル-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-
デオキシ-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-ト
リクロロエトキシカルボニルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3R)-3-ベ
ンジルオキシテトラデカノイル]-2-デオキシ-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカル
ボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物８５ ベンジル-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-
デオキシ-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]-2-[(3R)-3-
テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3
R)-3-ベンジルオキシテトラデカノイル]-2-デオキシ-2-[(3R)-3-テトラデカノイ
ルオキシテトラデカンアミド]-α-D-グルコピラノシド 化合物８６ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4-0-ホスフォノ-2-[(3R)-3-テトラデ
カノイルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテト
ラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3R)-3-ヒドロキシテトラデカノ
イル]-2-[(3R)-3-テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド]-α／β-D-グル
コピラノース 化合物８７ アリル2-デオキシ-4,6-ジ-0-ベンジリデン-3-0-[(3R)-3-ドシルオ
キシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-α-D-
グルコピラノシド 化合物８８ アリル6-0-ベンジル-2-デオキシ-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテト
ラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-α-D-グルコピ
ラノシド 化合物８９ アリル6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-デオキシ
-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシ
カルボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物９０ 6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-デオキシ-3-0-[
(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボ
ニルアミノ)-α／β-D-グルコピラノース 化合物９１ 6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-デオキシ-3-0-[
(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボ
ニルアミノ)-α-D-グルコピラノシルトリクロロアセトイミデート 化合物９２ ベンジル6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-
デオキシ-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-2-(2,2,2-トリクロロ
エトキシカルボニルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3R)-3-ベンジルオ
キシテトラデカノイル]-2-デオキシ-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルア
ミノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物９３ ベンジル6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホスフォノ)-2-
デオキシ-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-2-[(3R)-3-ドデシル
オキシテトラデカンアミド]-β-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3R)-3-ベンジルオ
キシテトラデカノイル]-2-デオキシ-2-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカンア
ミド]-α-D-グルコピラノシド 化合物９４ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4-0-ホスフォノ-2-[(3R)-3-ドデシル
オキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-β
-D-グルコピラノシル}-3-0-[(3R)-3-ヒドロキシテトラデカノイル]-2-[(3R)-3-
ドデシルオキシテトラデカンアミド]-α／β-D-グルコピラノース 化合物９５ ベンジル3-0-ベンジル-2-デオキシ-4,6-ジ-イソプロピリデン-2-(2
,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物９６ ベンジル3-0-ベンジル-2-デオキシ-2-(2,2,2-トリクロロエトキシ
カルボニルアミノ)-α-D-グルコピラノシド 化合物９７ ベンジル2-アミノ-3-0-ベンジル-2-デオキシ-α-D-グルコピラノシ
ド 化合物９８ ベンジル3-0-ベンジル-2-デオキシ-2-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオ
キシテトラデカノイルオキシ]-テトラデカンアミド}-α-D-グルコピラノシド 化合物９９ ベンジル3-0-ベンジル-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホ
スフォノ)-2-デオキシ-3-0-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]
-2-(2,2,2-トリクロロエトキシカルボニルアミノ)-β-D-グルコピラノシル}-2-{
(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイルオキシ]-テトラデカンアミド}
-α-D-グルコピラノシド 化合物１００ ベンジル6-0-{2-アミノ-6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-ホス
フォノ)-2-デオキシ-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-β-D-グル
コピラノシル}-3-0-ベンジル-2-デオキシ-2-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテ
トラデカノイルオキシ]-テトラデカンアミド}-α-D-グルコピラノシド 化合物１０１ ベンジル3-0-ベンジル-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-
ホスフォノ)-2-デオキシ-2-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[
(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-デオキシ
-2-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイルオキシ]-テトラデカンア
ミド}-α-D-グルコピラノシド 化合物１０２ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4-0-ホスフォノ-2-[(3R)-3-ドデシ
ルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-
β-D-グルコピラノシル}-2-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル
オキシ]-テトラデカンアミド}-α／β-D-グルコピラノース 化合物１０３ ベンジル3-0-ベンジル-6-0-{6-0-ベンジル-4-0-(ジ-0-ベンジル-
ホスフォノ)-2-デオキシ-2-[(3R)-3-ベンジルオキシテトラデカンアミド]-3-0-[
(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-β-D-グルコピラノシル}-2-デオキシ
-2-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイルオキシ]-テトラデカンア
ミド}-α-D-グルコピラノシド 化合物１０４ 2-デオキシ-6-0-{2-デオキシ-4-0-ホスフォノ-2-[(3R)-3-ヒドロ
キシテトラデカンアミド]-3-0-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイル]-β-D
-グルコピラノシル}-2-{(3R)-3-[(3R)-3-ドデシルオキシテトラデカノイルオキ
シ]-テトラデカンアミド}-α／β-D-グルコピラノース
【０２０８】
【表８】 表８ アミノ酸の単一文字および三文字コード アミノ酸 単一文字 三文字 Ｌ−アラニン Ａ Ａｌａ Ｌ−システイン Ｃ Ｃｙｓ Ｌ−アスパラギン酸塩Ｄ Ａｓｐ Ｌ−グルタメート Ｅ Ｇｌｕ Ｌ−フェニルアラニンＦ Ｐｈｅ Ｌ−グリシン Ｇ Ｇｌｙ Ｌ−ヒスチジン Ｈ Ｈｉｓ Ｌ−イソロイシン Ｉ Ｉｌｅ Ｌ−リジン Ｋ Ｌｙｓ Ｌ−ロイシン Ｌ Ｌｅｕ Ｌ−メチオニン Ｍ Ｍｅｔ Ｌ−アスパラギン Ｎ Ａｓｎ Ｌ−プロリン Ｐ Ｐｒｏ Ｌ−グルタミン Ｑ Ｇｌｎ Ｌ−アルギニン Ｒ Ａｒｇ Ｌ−セリン Ｓ Ｓｅｒ Ｌ−トレオニン Ｔ Ｔｈｒ Ｌ−バリン Ｖ Ｖａｌ Ｌ−トリプトファン Ｗ Ｔｒｐ Ｌ−チロシン Ｙ Ｔｙｒ
【０２０９】 参考文献 1 a) Stryer, Biochemistry, 2nd Ed. W. H. Freeman and Co., New York, p74
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30 Willi Bannwarth and Arnold Trzeciak, Helv. Chim. Acta, 1987, 70, 1
75-196. 31 Tomoya Ogawa and Satru Nakabayashi, Carbohydr. Res. 1981, 97, 81-8
6. 引用の参照文献は従来技術を構成するものではない。明細書中での全参考文献は
、特許、刊行された特許出願、および特許でない刊行物を含み、ここにその全体
を参考文献として組み込まれ、前記引用文献によって引用された文献も同様であ
る。
【図面の簡単な説明】
【図１】天然脂質−Ａ構造の例、E. coliからのＡおよびサルモネラ菌からの
Ｂ。
【図２】一般式（３）および（４）の新規脂質酸およびそれらの２例。
【図３】新規脂質構造を含む単糖類および二糖類脂質−Ａ類似体およびそれら
の２例。
【図４】均一ジ脂質鎖を含む二糖類脂質−Ａ類似体およびそれらの２例。
【図５】脂質５の合成。
【図６】脂質の合成。
【図７】トリ−脂質２３の合成。
【図８】グルコサミン誘導体の合成。
【図９】化合物３３の合成。
【図１０】グルコシル化アクセプタの合成。
【図１１】グルコシル化ドナー４３の合成。
【図１２】二糖類４５の合成。
【図１３】化合物４８の合成。
【図１４】二糖類５１の合成。
【図１５】化合物５４の合成。
【図１６】化合物５８の合成。
【図１７】グルコシル化アクセプタ６４の合成。
【図１８】二糖類６７の合成。
【図１９】化合物７０の合成。
【図２０】アミン７３の合成。
【図２１】化合物７７の合成。
【図２２】グルコシル化７９の合成。
【図２３】グルコシル化ドナー８３の合成。
【図２４】化合物８６の合成。
【図２５】グルコシル化ドナー９１の合成。
【図２６】化合物９４の合成。
【図２７】グルコシル化アクセプタ９８の合成。
【図２８】アミン１００の合成。
【図２９】化合物１０２の合成。
【図３０】化合物１０４の合成。
【図３１】脂質−Ａ類似体３３、４８、５８または天然脂質−Ａとアジュバン
トしたＭＵＣ１−ベースのリポソームワクチンで免疫にしたマウスでのＴ−細胞
増殖（ＣＰＭ、分当たり）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ、pg／
ml）生産。
【図３２】脂質−Ａ類似体４８、５４、７０、７７、８６または天然脂質−Ａ
とアジュバントしたＭＵＣ１−ベースのリポソームワクチンで免疫にしたマウス
でのＴ−細胞増殖（ＣＰＭ、分当たり）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦ
Ｎ−γ、pg／ml）生産。
【図３３】脂質−Ａ類似体８６、９４、１０２、１０４または天然脂質−Ａと
アジュバントしたＭＵＣ１−ベースのリポソームワクチンで免疫にしたマウスで
のＴ−細胞増殖（ＣＰＭ、分当たり）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ
−γ、pg／ml）生産。
【図３４】リボペプチドＢＰ１−１４８の構造、腫瘍結合ＭＵＣ１ムチンから
誘導した改変２５−アミノ酸配列（アミノ酸の単一文字コード）。
【図３５】リポソーム処方に組み込まれるビールスおよび腫瘍抗原から誘導さ
れたペプチドとグリコペプチドの例。 補正をする事項に対応するPCT/US00/31281の英語明細書の翻訳にあたり、全文に
わたって適切でない翻訳、脱落事項があったので全文を訂正した。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｃ 237/06 Ｃ０７Ｃ 237/06 Ｃ０７Ｈ 1/02 Ｃ０７Ｈ 1/02 15/04 15/04 Ａ Ｅ 15/203 15/203 // Ｃ０７Ｋ 14/47 ＺＮＡ Ｃ０７Ｋ 14/47 ＺＮＡ Ｃ０７Ｍ 7:00 Ｃ０７Ｍ 7:00 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ， ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，Ｊ Ｐ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ， ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，Ｒ Ｏ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ， ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ヤラマティ，ダマヤンチ カナダ国 アルバータ ティ６ジェイ ６ ティ４，エドモントン，10633−31アヴェ ニュ，＃107 (72)発明者 コガンティ，ラオ カナダ国 アルバータ ティ６ジェイ ３ アール３，エドモントン，11605−26アヴ ェニュ (72)発明者 ロンジェネッカー，マイケル カナダ国 アルバータ ティ６アール １ シィ８，エドモントン，ルーニィ クレセ ント 440 Ｆターム(参考） 4C057 AA20 CC03 DD01 DD02 DD03 HH03 JJ09 JJ12 JJ20 4C076 AA19 CC06 4C085 AA03 AA38 BB01 CC31 DD59 FF14 FF17 4H006 AA01 AB84 BP10 BS10 BT12 BV22 4H045 AA10 AA30 BA18 BA55 CA41 EA28 【要約の続き】

Claims (56)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】次式の化合物： 【化１】 式中、少なくともＲ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５は次の構造式から選択され 【化２】 式中、残りのＲ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｒ４およびＲ５は、たとえあるとしても、水素
    、Ｒ−、−ＣＯＲおよび次の構造式から選択され、 【化３】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は水素、または置換または非置換、分枝または直線のＣ
    １−２０飽和または不飽和脂肪族炭化水素；Ａ，ＢおよびＬは独立して−ＣＨ２
    −、−Ｃ（＝Ｏ）および−Ｃ（＝Ｓ）−基から選択され； 各Ｘは−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、および−ハロゲンからなる群から独立して選
    択され； ｍおよびｎは独立して０と１０の間の整数の範囲から選択され、 Ｘ１およびＸ２は−Ｏ−または−ＮＨ−であり、 Ｙ１およびＹ２は独立して−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−Ｏ
    ＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２
    ＮＨ２）からなる群から選択され、 ＺはＨ，−ＣＨ２Ｅ、または−ＣＨ２ＭＧであり、式中、Ｅは−水素、−ハロゲ
    ン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２また
    は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２；Ｍは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ＝
    （Ｓ）−、またはーＮＨＣ（＝Ｏ）−；Ｇは水素、または飽和または不飽和Ｃ１
    −２０脂肪族炭化水素であり、 または生理学的に受容できるそれらの塩。
  2. 【請求項２】Ｘ１およびＸ２がＮＨであり；Ｙ１が−ＯＨまたは−ＯＰ（Ｏ
    ）（ＯＨ）２；Ｙ２が−ＯＨまたは−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、およびＺが−ＣＨ
    ２ＯＨである請求項１記載の化合物。
  3. 【請求項３】置換基および糖リングの置換基の立体化学が次式で定義される
    請求項１記載の化合物。 【化４】
  4. 【請求項４】Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が次の群から選択される請
    求項３記載の化合物。 【化５】
  5. 【請求項５】Ｒ１が次の基であり 【化６】 Ｒ２およびＲ３が水素原子であり；Ｒ４が次の基であり 【化７】 そしてＲ５が次の基である 【化８】 請求項４記載の化合物。
  6. 【請求項６】Ｒ4が次の基であり 【化９】 基Ｒ１、Ｒ４およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項５記載の
    化合物。
  7. 【請求項７】Ｒ4が次の基であり 【化１０】 基Ｒ１、Ｒ４およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項５記載の
    化合物。
  8. 【請求項８】Ｒ１およびＲ５が次の構造の基であり 【化１１】 そしてＲ２が水素原子または次の基であり 【化１２】 Ｒ３が水素原子であり；そしてＲ４が次の基である請求項４記載の化合物。 【化１３】
  9. 【請求項９】Ｒ２が水素原子であり、Ｒ１およびＲ５のキラル炭素の絶対配
    置が（Ｓ）である請求項８記載の化合物。
  10. 【請求項１０】Ｒ２が次の構造式の基であり 【化１４】 Ｒ１、Ｒ２およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）であり、基Ｒ４のそれが
    （Ｓ）である請求項８記載の化合物。
  11. 【請求項１１】次式の化合物。 【化１５】 式中、Ｒ１＝Ｒ５およびＲ１，Ｒ２，Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が−Ｒ，−ＣＯＲお
    よび次の構造式から選択される。 【化１６】 式中、各Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’が独立して水素、置換または非置換、分枝または直酸
    、飽和または不飽和Ｃ１−２０脂肪族炭化水素であり；Ａ、ＢおよびＬは独立し
    てＣＨ２、ＣＯおよびＣＳ基であり；Ｘは−ＯＨ，−ＳＨ、−ＮＨ２および水素
    であり；ｍおよびｎは０と１０の間の整数であり、 Ｘ１およびＸ２は−Ｏ−または−ＮＨ−であり、 Ｙ１およびＹ２は独立して−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−Ｏ
    ＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２および−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２
    ＮＨ２）からなる群から選択され、 ＺはＨ，−ＣＨ２Ｅ、または−ＣＨ２ＭＧであり、式中、Ｅは−水素、−ハロゲ
    ン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２また
    は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２；Ｍは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ＝
    （Ｓ）−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−；Ｇはすしお、または飽和または不飽和Ｃ
    １−２０脂肪族炭化水素であり、 前記化合物がフリーの酸または生理学的に受容できるそれらの塩。
  12. 【請求項１２】Ｘ１およびＸ２がＮＨであり；Ｙ１が−ＯＨまたは−ＯＰ（
    Ｏ）（ＯＨ）２；Ｙ２が−ＯＨまたは−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、およびＺが−Ｃ
    Ｈ２ＯＨである請求項１記載の化合物。
  13. 【請求項１３】置換基および糖リングの置換基の立体化学が次式で定義され
    る請求項１１記載の化合物。 【化１７】 式中、Ｒ１＝Ｒ４＝Ｒ５。
  14. 【請求項１４】Ｒ１＝Ｒ４＝Ｒ５が次の構造式から選択される請求項１３記
    載の化合物。 【化１８】 そしてＲ２が水素原子、ｎ−プロピル基または次の構造式であり 【化１９】 そしてＲ３が水素原子である。
  15. 【請求項１５】Ｒ２が水素原子であり、Ｒ１、Ｒ４、およびＲ５が次の構造
    式の同じ基であり 【化２０】 そして基Ｒ１、Ｒ４およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項１
    ４記載の化合物。
  16. 【請求項１６】Ｒ２がｎ−プロピル基であり、Ｒ１、Ｒ４、およびＲ５が次
    の構造式の同じ基であり 【化２１】 そして基Ｒ１、Ｒ４およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項１
    ４記載の化合物。
  17. 【請求項１７】Ｒ２が次の基であり、 【化２２】 Ｒ１、Ｒ４、およびＲ５が次の構造式の同じ基であり 【化２３】 そして基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請
    求項１４記載の化合物。
  18. 【請求項１８】Ｒ２が次の構造式の同じ基であり 【化２４】 Ｒ１、Ｒ４、およびＲ５が次の構造式の同じ基であり 【化２５】 そして基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請
    求項１４記載の化合物。
  19. 【請求項１９】次式の化合物： 【化２６】 式中、少なくともＲ１およびＲ２は次の基から選択され 【化２７】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は水素、または置換または非置換、分枝または直線のＣ
    １−２０飽和または不飽和脂肪族炭化水素；Ａ，ＢおよびＬは独立して−ＣＨ２
    −およびＣＯ基であり；ｍおよびｎは０と１０の間の整数であり、 残りのＲ１またはＲ２は水素、基−Ｒ，−ＣＯＲまたは次の構造式から選択され 【化２８】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は独立して水素、または置換または非置換、分枝または
    直線の飽和または不飽和Ｃ１−２０脂肪族炭化水素；Ａ，ＢおよびＬは独立して
    −ＣＨ２−、−ＣＯおよび−ＣＳ基から選択され；Ｘは−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ
    ２および水素であり；ｍおよびｎは０と１０の間の整数である。
  20. 【請求項２０】少なくともＲ１およびＲ２が次の構造式から選択される請求項１
    ９記載の化合物。 【化２９】
  21. 【請求項２１】Ｒ１が次の構造式の基であり 【化３０】 そしてＲ２がＣＨ３（ＣＨ２）１２ＣＯの基である請求項２０記載の化合物。
  22. 【請求項２２】基Ｒ１のキラル炭素の絶対配置が（Ｓ）である請求項２１記
    載の化合物。
  23. 【請求項２３】少なくとも１の次の構造式の置換基からなる化合物。 【化３１】 式中、各Ｒ，Ｒ’，Ｒ''は独立して水素、および置換または非置換、分枝または
    直線の飽和または不飽和Ｃ１−２０脂肪族炭化水素；Ａ，ＢおよびＬは独立して
    −ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、および−Ｃ（＝Ｓ）−基から選択され；ｍおよび
    ｎは独立して０と１０の間の整数から選択される。
  24. 【請求項２４】前記置換基が次の構造式からである請求項２３記載の化合物。 【化３２】
  25. 【請求項２５】前記置換基が次の構造式からである請求項２３記載の化合物。 【化３３】
  26. 【請求項２６】前記置換基のキラル炭素の絶対配置が（Ｒ）である請求項２４
    記載の化合物。
  27. 【請求項２７】前記置換基のキラル炭素の絶対配置が（Ｓ）である請求項２５
    記載の化合物。
  28. 【請求項２８】次の構造式の化合物。 【化３４】
  29. 【請求項２９】次の構造式の化合物。 【化３５】
  30. 【請求項３０】次の構造式の化合物。 【化３６】 式中、Ｒ１がベンジルオキシ、アリルオキシ、ヒドロキシ、またはＯＣ（ＮＨ）
    ＣＣｌ３の群であり； Ｒ２が水素、−ＣＯＯＣＨ２ＣＣｌ３、または次の構造式からなる基から選択さ
    れ； 【化３７】 式中、ｍおよびｎは独立して０と２０の間の整数から選択され； そしてＲ３はＣＨ３（ＣＨ２）２ＣＯまたは次の構造式であり 【化３８】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−、およびｘ、ｙおよびｚは独立して
    ０と２０の間の整数から選択される。
  31. 【請求項３１】次の構造式の化合物。 【化３９】 式中、Ｒ１はベンジルオキシ、アリルオキシ、ヒドロキシ、またはＯＣ（ＮＨ）
    ＣＣｌ３の群であり； Ｒ２が水素、−ＣＯＯＣＨ２ＣＣｌ３、または次の構造式からなる基から選択さ
    れ； 【化４０】 式中、ｍおよびｎは独立して０と２０の間の整数から選択され； そしてＲ３はＣＨ３（ＣＨ２）２ＣＯまたは次の構造式であり 【化４１】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり； ｘ、ｙおよびｚは独立して０と２０の間の整数から選択され；そして Ｒ４が水素またはＰ（Ｏ）（ＯＢｎ）２である。
  32. 【請求項３２】次式の化合物。 【化４２】 式中、Ｒ１はアミノラジカル、グタルアミドラジカル、または次の構造式であり 【化４３】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり； ｘおよびｙは独立して０と２０の間の整数から選択され、 Ｒ２はアリルまたはベンジルである。
  33. 【請求項３３】次式の化合物。 【化４４】 式中、Ｒ１が水素、ＣＯＯＣＨ２ＣＣｌ３または次式の１であり； 【化４５】 式中、ＡおよびＢは独立して−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−；ｘ、ｙおよびｚ
    は独立して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ２はベンジルまたは次の構造式であり 【化４６】 式中、Ｄはベンジル、ＣＨ３（ＣＨ２）２またはＣＨ３（ＣＨ２）ｙＣＯであり
    ； ｘ、ｙおよびｚは独立して０と２０の間の整数から選択される。
  34. 【請求項３４】次式の化合物。 【化４７】 式中、Ｒ１は次の構造式の群であり 【化４８】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
    ２０の間の整数から選択され Ｒ２は水素、アリル、ベンジルまたは次の構造式であり 【化４９】 式中、ｚは０と２０の間の整数であり； Ｒ３は水素、ＣＯＯＣＨ２ＣＣｌ３、または次の構造式の１であり、 【化５０】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｍ、ｎ、ｘおよびｙは独立
    して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ４は次の構造式の群であり 【化５１】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
    ２０の間の整数から選択される。
  35. 【請求項３５】次式の化合物。 【化５２】 式中、Ｒ１は次の構造式の群であり 【化５３】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
    ２０の間の整数から選択され； Ｒ２は水素、アリル、ベンジルまたは次の構造式であり 【化５４】 式中、ｚは０と２０の間の整数であり； Ｒ３は水素、ＣＯＯＣＨ２ＣＣｌ３、または次の構造式の１であり、 【化５５】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｍ、ｎ、ｘおよびｙは独立
    して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ４は次の構造式の群であり 【化５６】 式中、Ａは−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよびｙは独立して０と
    ２０の間の整数から選択され； Ｒ５は水素または（ＢｎＯ）２Ｐ（Ｏ）である。
  36. 【請求項３６】次式の化合物。 【化５７】 式中、Ｒ１は次の構造式から選択され 【化５８】 式中、ＡおよびＢは独立して−ＣＨ２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；ｘおよび
    ｙは独立して０と２０の間の整数から選択され； Ｒ２はベンジルまたは次の構造式の群であり 【化５９】 式中、ｚは０と２０の間の整数であり； Ｒ３は水素、ＣＯＯＣＨ２ＣＣｌ３、または次の構造式であり、 【化６０】 式中、ＡはＣＨ２またはＣＯであり；ｘ、ｙおよびｚは独立して０と２０の間の
    整数であり； Ｒ４は次の構造式の群であり 【化６１】 式中、ＡはＣＨ２またはＣＯであり；ｘおよびｙは独立して０と２０の間の整数
    である。
  37. 【請求項３７】（１）反応性４−Ｏ位置を生じるように、ヘキサピラノース誘
    導体の位置選択的還元的開環および（２）前記４−Ｏ位置にホスフェート基の導
    入からなる、ヘキソピラノース誘導体の４−Ｏ位置にホスフェート基を導入する
    方法。
  38. 【請求項３８】ステップ（１）が次の構造式をもつ化合物にホウ素試薬および
    酸を添加してなる請求項３７記載の方法。 【化６２】 式中、ＸはＯおよびＮＨであり；Ｒは置換または非置換、分枝または直線の、飽
    和または不飽和Ｃ１−２０脂肪族炭化水素、炭水化物単位または任意の保護基で
    あり；Ｒ１およびＲ２は任意の脂肪族または芳香族置換基、または任意の保護基
    であり；Ｒ３はフェニルまたは置換フェニル基である。
  39. 【請求項３９】前記ホウ素試薬がソジウムシアノボロンハイドライドまたはジ
    メチルアミンボランコンプレックスである請求項３８記載の方法。
  40. 【請求項４０】前記酸が塩化水素酸である請求項３８記載の方法。
  41. 【請求項４１】前記酸が飽和ジエチルエーテル溶液中、トリフルオロボロンジ
    エチルエーテルコンプレックスを与える請求項４０記載の方法。
  42. 【請求項４２】ステップ（２）の後、酸化試薬を添加して次の構造式をもつ生
    成物を生成する請求項３７記載の方法。 【化６３】 式中、Ｘ、Ｒ、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３はステップ（１）の出発物質におけるよう
    に定義され、Ｒ４はアリル、または置換または非置換ベンジルまたはフェニル基
    である。
  43. 【請求項４３】前記参加試薬がメタ−クロロペル安息香酸である請求項４２記
    載の方法。
  44. 【請求項４４】膜が（ａ）請求項１−３６のいずれか１項に記載の化合物；お
    よび（ｂ）少なくとも１のエピトープからなる非天然産のリポソーム。
  45. 【請求項４５】少なくとも１のエピトープがＢ−細胞エピトープである請求項
    ４４記載のリポソーム。
  46. 【請求項４６】少なくとも１のエピトープがＴ−細胞エピトープである請求項
    ４４記載のリポソーム。
  47. 【請求項４７】少なくとも１のエピトープがペプチドエピトープである請求項
    ４４記載のリポソーム。
  48. 【請求項４８】少なくとも１のエピトープが炭水化物、グリコペプチドまたは
    グリコリピドである請求項４４記載のリポソーム。
  49. 【請求項４９】ワクチン有効量の前記抗原からなり、請求項４３記載のリポソ
    ームからなる製薬組成物。
  50. 【請求項５０】前記抗原が腫瘍結合抗原である請求項４４記載のリポソーム。
  51. 【請求項５１】少なくとも１のエピトープがＭＵＣ１プロテインから誘導され
    る請求項４４記載のリポソーム。
  52. 【請求項５２】エピトープがアミノ酸配列 H2N-STAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPK(Pal)G-OH をもつペプチドまたはリポペプチドによって与えられる請求項５１記載のリポソ
    ーム。
  53. 【請求項５３】前記抗原に免疫応答を顕在化させることによって呼ぼうできま
    たは治療できる病気の予防または治療用の組成物の製造においての請求項５１記
    載のリポソームの使用方法。
  54. 【請求項５４】前記脂質Ａ類似体が前記抗原に免疫応答のアジュバント効果を
    もつ請求項４４記載のリポソームの使用方法。
  55. 【請求項５５】前記病気が癌である請求項５３または５４記載のリポソームの
    使用方法。
  56. 【請求項５６】ステップ（２）において、ステップ（１）で形成された生成物
    を試薬（Ｒ４Ｏ）２ＰＮ（ｉＰｒ）２、乾燥有機溶媒中１Ｈ−テトラゾール、こ
    こでＲ４はアリルである、または置換または非置換ベンジルまたはフェニル基で
    処理する請求項３７記載の方法。
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