JP2003210160A

JP2003210160A - ＺａｎｇＺｈｉの固形培養物を得るためのインキュベーション方法、そこから得られる固形培養物、その加工した産物および使用

Info

Publication number: JP2003210160A
Application number: JP2002012198A
Authority: JP
Inventors: Meiko Ran; 明煌藍; Soshu Ran; 蒼洲藍; Churyo Ran; 仲良藍; Chumin Ran; 仲民藍
Original assignee: GO REIGYOKU
Current assignee: GO REIGYOKU
Priority date: 2002-01-21
Filing date: 2002-01-21
Publication date: 2003-07-29

Abstract

(57)【要約】【課題】本発明は、ＺａｎｇＺｈｉの固形培養のた
めの培養方法、その培養方法から得られた固形培養物、
その固形培養物の加工産物およびその使用を提供するこ
とを課題とする。【解決手段】固形ＺａｎｇＺｈｉを培養する方法で
あって、該方法は、菌糸塊を「ＢａｇＬｏｇ」に播種
して菌糸体に培養する工程、および次いで該「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」を取り外して、円錐状の子実体の形成がなされ
るまでの期間の間、のこくず培地を空気中に完全にさら
す工程を包含し、ここで、該「ＢａｇＬｏｇ」は、１
０〜７０％のセルロース誘導体物質、１０〜３０％のデ
ンプン供給源、５〜１５％の穀粒、１〜１０％のサッカ
リド、０．５〜２％のホスフェートおよび０．１〜１％
の硫酸塩を含有する、のこくず培地を含み、相対湿度は
６０〜８０％で維持され、そして該培養培地のｐＨは中
性に調整される、方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、真菌培養の分野に
属し、本発明は、ＺａｎｇＺｈｉの固形培養のための
培養方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】（発明の背景）ＺａｎｇＺｈｉは、真
菌の一種である。その学術名は、Ａｎｔｒｏｄｉａｃａ
ｍｐｈｏｒａｔａであり、「Ｚａｎｇｋｕ」、「ｒｅ
ｄＺａｎｇＺｈｉ」、「ｎｉｏｕＺａｎｇＺｈ
ｉ」または「ｎｉｏｕＺａｎｇｋｕ」とも知られ
る。台湾では、ＺａｎｇＺｈｉは、平板または鐘の形
状のＣｉｎｎａｍｏｍｕｍｋａｎｅｈｉｒａｉの中空
の腐敗している幹の内壁上でのみ生育し、そして強いシ
ナモン臭を有する。ＺａｎｇＺｈｉは、風邪を鎮めた
り、防いだり、または治したりし得、生体エネルギーの
循環を促進し得、鬱血を予防または除去し得、血液循環
を促進し得、消化不良を軽減し得、腫瘍を解毒しそして
その鎮静を促進し得、神経を鎮めてストレスを減少し
得、疼痛を緩和し、そして最良の防食剤および解毒薬で
ある。台湾の市場では最も高価な野生菌である。Ｚａｎ
ｇＺｈｉの抗腫瘍活性の機構は、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ
ｓｐ．とは異なる。Ｇａｎｏｄｅｒｍａｓｐ．で
は、腫瘍に対する免疫を間接的に促進する。Ｚａｎｇ
Ｚｈｉは、直接的に癌細胞の増殖を阻害または死傷させ
得、そして心臓を強化し、免疫を調整し、そして副交感
神経系を拮抗する効能を有し、そして血清活性を有す
る。特に、ＺａｎｇＺｈｉは、胃痛、腸痛、嘔気、糖
尿病、痛風、関節炎、熱、アレルギー、過剰な尿蛋白、
尿毒症、肝硬変、肝細胞癌（ｈｅｐａｔｏｍｉａ）、イ
ンフルエンザなどを治癒し得る。多くの研究機関が、Ｚ
ａｎｇＺｈｉの活性成分の研究において人的資源および
資材を投資している。その中で、ＮａｔｉｏｎａｌＳ
ｃｉｅｎｃｅＣｏｕｎｃｉｌｏｆｔｈｅＥｘｅ
ｃｕｔｉｖｅＹｕａｎは、化学的方法、ＮＭＲスペク
トル分析および既知の材料との比較スペクトル分析を使
用して、活性成分の構成的特徴を確立するための特別な
研究プロジェクトを有する。活性成分の研究結果は、Ｚ
ａｎｇＺｈｉの水およびメタノール抽出物が、Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓおよびＴｒｉｃｈ
ｏｐｈｙｔｏｎｅｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓの生
育の阻害に有効であることを示す。Ｚｈａｎｋｕｉｃ
ａｃｉｄＡ（ＺａｎｇＺｈｉのメタノール抽出物）
は、ｐ−３８８マウスのリンパ腫細胞の増殖および血小
板の凝集に対する目立った阻害を有する。しかしＺｈａ
ｎｋｕｉｃａｃｉｄＢは、抗コリン作用効果または
抗セロトニン効果をほとんど示さない。

【０００３】ＺａｎｇＺｈｉのトリテルペノイドに関
するＧａｕＳｈｅａｕＪｙの修士論文において、Ｚ
ａｎｇＺｈｉは、１９９０年に発見されたＧａｎｏｄ
ｅｒｎａの新規な種であることが示されている。固形子
実体の抽出物は、アセトンの使用によって得られ、次い
でＬＣクロマトグラフィーおよびＰＬＣクロマトグラフ
ィーによって分離および再結晶化される。抽出物の純度
は、ＴＬＣスキャニングおよびＨＰＬＣによって同定さ
れる。構成試験は、質量分析、赤外スペクトル分析、紫
外スペクトル分析、Ｈ−ＮＭＲ分析、およびＣ−ＮＭＲ
分析によってなされる。３，１１−ジオキソ−８，２３
−ジエン−２６−オイック酸は、ＣＣｌ ₄によって誘導
された急性肝炎のマウスの血液中のＧＰＴのレベルを低
下させ得る。

【０００４】ＺａｎｇＺｈｉのほとんどが、台湾の東
岸山岳地帯の広葉樹林地域において生育する。しかし、
台湾森林局（ＴａｉｗａｎＦｏｒｅｓｔｒｙＢｕｒ
ｅａｕ）により発行されたＮｉｏｕＺａｎｇＣｏｎ
ｓｅｒｖａｔｉｏｎＮｏｔｉｃｅの公報にしたがっ
て、この山岳地帯は、天然資源保全地区として挙げられ
ている。ＺａｎｇＺｈｉは、ほとんどの人がアジアで
購買を望む非常に人気のある製品であるので、当該地区
以外で生育するＺａｎｇＺｈｉは、ほとんど完全に収
穫されている。実際、野生のＺａｎｇＺｈｉは、地方
市場では入手不能である。

【０００５】台湾で１ヶ月当たりの販売見積りが５００
ｋｇのＺａｎｇＺｈｉであることからも、Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形培養の培養方法を提供する必要性は、近
年、より重要となってきている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】（発明の要旨）本発明
の主な目的は、ＺａｎｇＺｈｉの固形培養のための培
養方法を提供することである。培養ＺａｎｇＺｈｉ
は、野生のものと同じ薬学的効力を有する。

【０００７】本発明の他の目的は、ＦｏｏｄＩｎｄｕ
ｓｔｒｙＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐ
ｍｅｎｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅ（台湾）に保存されるＺ
ａｎｇＺｈｉ菌糸塊（ｓｐａｗｎ）（コードＣＣＲＣ
３５３９８）の接種材料の使用によるＺａｎｇＺｈ
ｉの固形培養物を提供し、この固形培養物をインキュベ
ーション方法に従ってインキュベーションすることであ
る。

【０００８】本発明の別の目的は、固形培養したＺａｎ
ｇＺｈｉの加工した産物を提供することである。

【０００９】本発明の別の目的は、活性成分として有用
な固形培養したＺａｎｇＺｈｉを提供することであ
る。

【００１０】

【課題を解決するための手段】１つの局面において、本
発明は、固形ＺａｎｇＺｈｉを培養する方法であっ
て、該方法は、菌糸塊を「ＢａｇＬｏｇ」に播種して
菌糸体に培養する工程、および次いで該「ＢａｇＬｏ
ｇ」を取り外して、円錐状の子実体の形成がなされるま
での期間の間、のこくず培地を空気中に完全にさらす工
程を包含し、ここで、該「ＢａｇＬｏｇ」は、１０〜
７０％のセルロース誘導体物質、１０〜３０％のデンプ
ン供給源、５〜１５％の穀粒（ｍｉｌｌｅｔ）、１〜１
０％のサッカリド、０．５〜２％のホスフェートおよび
０．１〜１％の硫酸塩を含有する、のこくず培地を含
み、相対湿度は６０〜８０％で維持され、そして該培養
培地のｐＨは中性に調整される、方法を提供する。

【００１１】１つの実施形態において、前記のこくず培
地は、６０〜７０％のセルロース誘導体物質、２０％の
デンプン供給源、１０％の穀粒、３．５％のグルコー
ス、１％のリン酸カリウムおよび０．５％の硫酸マグネ
シウムを含有し、前記相対湿度は８０％であり、そして
前記ｐＨは中性に調整される。

【００１２】１つの実施形態において、前記セルロース
誘導体物質は、きのこあるいは植物の茎、柄、果実また
は小板（ｓｐｅｌｋ）である。

【００１３】１つの実施形態において、前記デンプンの
供給源は、ジャガイモである。

【００１４】１つの実施形態において、前記穀粒は、米
ぬかである。

【００１５】１つの実施形態において、前記のこくず培
地は、６５％のイネ科植物の茎、柄、果実、あるいはセ
ルロース誘導体小板、２０％のジャガイモ、１０％の米
ぬか、３．５％のグルコース、１％のリン酸カリウム、
および０．５％の硫酸マグネシウムを含有する。

【００１６】１つの実施形態において、前記菌糸体の培
養のための温度は、５℃〜２８℃である。

【００１７】１つの実施形態において、前記菌糸体の培
養のための温度は、２８℃である。

【００１８】１つの実施形態において、前記「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」の湿度は、６０〜８０％である。

【００１９】１つの実施形態において、前記「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」の湿度は、８０％である。

【００２０】１つの実施形態において、前記菌糸体の培
養のための空気の条件は、０．２〜１％の二酸化炭素で
ある。

【００２１】１つの実施形態において、前記子実体の培
養は、流動空気中で行われる。

【００２２】別の実施形態において、前記子実体の培養
は、日中に２０〜３０℃の温度そして夜間に８〜１４℃
の温度でなされる。

【００２３】別の実施形態において、前記子実体の培養
は、日中に２４〜２６℃の温度そして夜間に１０〜１２
℃の温度でなされる。

【００２４】なお別の実施形態において、前記日中と前
記夜間との間の温度差は、１５℃である。

【００２５】１つの実施形態において、前記子実体の培
養のための空気湿度は、９０〜９５％である。

【００２６】別の実施形態において、前記空気は、１％
未満の二酸化炭素の空気である。

【００２７】１つの実施形態において、前記菌糸体の培
養に５０〜８０日間を費やし；前記子実体の培養に２０
〜５０日間を費やす。

【００２８】１つの実施形態において、前記菌糸体培養
の前に、大量の菌糸塊を培養する工程を包含し、該工程
は、（１）液体窒素中で保存した菌糸を含む培養寒天の
サンプル片を取り出し、そして該サンプル片を新鮮な培
地に移して、菌糸体の過剰増殖が見られるまで一定温度
で培養する工程；（２）セルロース誘導体物質を含む
「ＢａｇＬｏｇ」内に該菌糸塊を播種する工程；
（３）該「ＢａｇＬｏｇ」において菌糸が過剰増殖す
るのを待機し、上方の古い菌糸を除去し、次いで、一定
量の菌糸塊を別の「ＢａｇＬｏｇ」に播種する工程、
を包含する。

【００２９】１つの実施形態において、前記菌糸体培養
の前に、液体発酵を用いて大量の菌糸塊を培養する工程
を包含し、ここで、菌糸塊をスライドチューブ中で培養
した後、該培養した菌糸塊を５リットルの液体発酵物に
播種し、２４〜２６℃の温度にて、１４日間、２４０ｒ
ｐｍで振盪し、次いで１４日間、９０ｒｐｍで振盪し、
その後、２０リットルの液体発酵物中に播種し、１４日
間攪拌して培養し、ここで、該液体発酵物の組成は、１
〜３％のフルクトース、０．０１〜０．１％の硫酸マグ
ネシウム、０．１〜１％の酵母抽出物、０．０５〜０．
５％のリン酸カリウムである。

【００３０】別の実施形態において、前記液体発酵物の
組成が、２％のフルクトース、０．０５％の硫酸マグネ
シウム、０．５％の酵母抽出物、および０．１％のリン
酸カリウムである。

【００３１】別の局面において、本発明は、上記の方法
から得られたＺａｎｇＺｈｉの固形子実体であって、
野生ＺａｎｇＺｈｉと同じ、トリテルペノイドの生理
学的活性の特徴を有する、固形子実体を提供する。

【００３２】別の局面において、本発明は、Ｆｏｏｄ
ＩｎｄｕｓｔｒｙａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
ＩｎｓｔｉｔｕｔｅにＣＣＲＣ３５３９８として寄託さ
れた菌糸塊を使用して上記の方法によって得られた、Ｚ
ａｎｇＺｈｉの固形子実体であって、ここで、該培養
された固形ＺａｎｇＺｈｉ子実体は、野生ＺａｎｇＺ
ｈｉと同じ、トリテルペノイドの生理学的活性の特徴を
有し、円錐状で、直径が１０〜２０ｃｍ、高さが２０〜
３０ｃｍ、そして重量が０．３〜０．５キログラムであ
る、固形子実体を提供する。

【００３３】別の局面において、本発明は、Ｚａｎｇ
Ｚｈｉ子実体産物であって、小片にすりつぶし、次い
で、水またはアルコールでホモジェナイズし、濃縮され
た液体を得るように粘着性になるまで濃縮した、上記Ｚ
ａｎｇＺｈｉの固形子実体によって特徴付けられる、
ＺａｎｇＺｈｉ子実体産物を提供する。

【００３４】１つの実施形態において、上記産物は、乾
燥粉末になるように脱水され得る。

【００３５】別の実施形態において、前記粉末は、再度
湿らされそして次いで再度乾燥されて顆粒の産物が作製
され得る。

【００３６】１つの実施形態において、上記産物は、食
品組成物として使用される。

【００３７】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、肝臓保護の機能を有する。

【００３８】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、癌細胞の増殖を治癒または阻害
し得る。

【００３９】別の実施形態において、前記癌細胞は、子
宮頸部癌（ＨｅＬａ）、胃癌（ＡＧＳ）、乳癌（ＭＣＦ
−７）、肝臓癌（ＨｅＰＧ２）および腸癌（ＣＯＬＯ３
２０ＨＳＲ）である。

【００４０】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、過酸化を阻害するために使用さ
れる。

【００４１】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、抗フリーラジカルおよび抗脂質
過酸化のために使用される。

【００４２】別の局面において、本発明は、上記Ｚａｎ
ｇＺｈｉの固形子実体またはその加工した産物を含有
する、食品組成物を提供する。

【００４３】１つの実施形態において、上記食品組成物
は、肝臓保護における使用のための食品組成物である。

【００４４】１つの実施形態において、上記食品組成物
は、癌細胞の増殖の治癒または阻害における使用のため
の食品組成物である。

【００４５】１つの実施形態において、上記食品組成物
は、過酸化の阻害における使用のための食品組成物であ
る。

【００４６】１つの実施形態において、上記食品組成物
は、抗フリーラジカル活性または抗脂質過酸化活性を示
す。

【００４７】別の局面において、本発明は、上記のＺａ
ｎｇＺｈｉの固形子実体またはその加工した産物から
作製される、薬学的組成物を提供する。

【００４８】１つの実施形態において、上記薬学的組成
物は、肝臓保護における使用のための薬学的組成物であ
る。

【００４９】１つの実施形態において、上記薬学的組成
物は、癌細胞の増殖の治癒または阻害における使用のた
めの薬学的組成物である。

【００５０】１つの実施形態において、上記薬学的組成
物は、過酸化の阻害における使用のための薬学的組成物
である。

【００５１】１つの実施形態において、上記薬学的組成
物は、抗フリーラジカル活性または抗脂質過酸化活性を
示す。

【００５２】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、以下を含む野生ＺａｎｇＺｈ
ｉの機能と同じ機能を有する：精神安定化、風邪の予防
または処置、生体エネルギー循環の促進、うっ血の除
去、血液循環の促進、消化不良を軽減するための中程度
の加温、腫脹の解毒およびその鎮静の促進、ストレスを
減少するための神経の鎮静、疼痛の緩和、細菌およびウ
イルスおよび癌細胞の阻害、心臓の強化、免疫の調整、
副交感神経系および血清活性の拮抗、ならびに胃痛およ
び腸痛、不消化下痢、嘔気、糖尿病、痛風、腎炎、関節
炎、化膿、アレルギー、過剰尿タンパク質、尿毒症、肝
硬変、肝細胞癌およびインフルエンザの治癒。

【００５３】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、皮膚再生機能を有し、かつ回復
材料または身体の皮膚として使用され得る。

【００５４】１つの実施形態において、上記Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体は、褥瘡および皮膚創傷を治癒する
ためのタブ（ｔａｂ）として作製され得る。

【００５５】

【発明の実施の形態】（発明の詳細な説明）本発明は、
野生ＺａｎｇＺｈｉの成分および生命力を有するＺａ
ｎｇＺｈｉ子実体を産生するための、ＺａｎｇＺｈ
ｉの固形培養のための方法を提供する。ＺａｎｇＺｈ
ｉの固形培養のための本発明の方法は、「ＢａｇＬｏ
ｇ」培養によってＺａｎｇＺｈｉの菌糸塊を培養し、
次いで、空気中でＺａｎｇＺｈｉの子実体を産生するこ
とである。

【００５６】菌糸体培養段階の前に、通常、「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」培養のための菌糸塊を大量に増殖する。この
「ＢａｇＬｏｇ」培養は、以下の工程を包含する：
（１）液体窒素中に保存した菌糸を含む寒天培地の一片
を取り出し、これを新鮮な培地に移して、菌糸体の過剰
増殖が見られるまで一定温度下で培養する工程；（２）
この菌糸を、セルロース誘導体物質（例えば、粒（ｋｅ
ｒｎｅｌ）または小板（ｓｐｅｌｋ））を含む「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」に播種する工程；（３）、「ＢａｇＬｏ
ｇ」中で菌糸が過剰増殖した後に、上方の古い菌糸を除
去する工程；および（４）次いで、この増殖した菌糸体
を別の「ＢａｇＬｏｇ」中に接種する工程。

【００５７】菌糸体培養の段階の前に、液体培養発酵を
用いて菌糸塊を大量に増殖し、次いでそれらを「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」中に播種することも可能である。発酵のため
の液体培養物の組成は、１〜３％のフルクトース、０．
０１〜０．１％の硫酸マグネシウム、０．１〜１％の酵
母抽出物、および０．０５〜０．５％のリン酸カリウム
である。発酵のための液体培養物の最良の組成は、２％
のフルクトース、０．０５％の硫酸マグネシウム、０．
５％の酵母抽出物、および０．１％のリン酸カリウムで
ある。

【００５８】スライドチューブ中で菌糸塊を培養した
後、５リットルの液体培養物にこの増殖させた菌糸塊を
播種し、２４〜２６℃での、１４日間の２４０ｒｐｍの
振盪、次いで１４日間の９０ｒｐｍの振盪により発酵
し、次いで、それらを２０リットルの液体発酵物に播種
し、１４日間、攪拌培養し得る。

【００５９】本明細書中、いわゆる「ＢａｇＬｏｇ」
は、１０〜７０％の任意のきのこまたは植物の、茎、
柄、果実または小板（ｓｐｅｌｋ）のセルロース誘導体
物質（特に、イネ科植物の茎、柄および子実、またはさ
らにセルロース誘導体小板が好ましい）、１０〜３０％
のデンプン供給源（特に、ジャガイモが好ましい）、お
よび５〜１５％の穀粒（米ぬかが好ましい）、１〜１０
％のサッカリド（グルコースが好ましい）、０．５〜２
％のホスフェート（リン酸カリウムが好ましい）、およ
び０．１〜１％の硫酸塩（硫酸マグネシウムが好まし
い）から構成された「のこくず培地」を充填した、プラ
スチックバッグである。相対湿度は、６０〜９０％に維
持され、好ましくは、８０％に維持される。培養培地の
ｐＨ値は、中性に調整される。

【００６０】本明細書中に示された菌糸体培養段階は、
菌糸塊を「ＢａｇＬｏｇ」に播種した後の６０日の期
間を意味する。菌糸体は、５〜３２℃の温度で生長す
る；特に、２８℃が、菌糸体生長のために最も良好な温
度である。「ＢａｇＬｏｇ」培養は、約６０〜８０
％、そして好ましくは、約８０％の相対湿度で行われ
る。空気の条件に関しては、０．１〜１％の二酸化炭素
が培養のために好ましい。

【００６１】菌糸体培養段階の後に、子実体培養段階が
続く。すなわち、菌糸塊播種の日から６１〜９０日後を
いう。「ＢａｇＬｏｇ」のプラスチックバッグを取り
外し、のこくず培地を空気に完全にさらす。子実体培養
段階の間に、日中温度と夜間温度との間の差を厳密に制
御しなければならない。日中温度は、一般に、２０℃〜
３０℃の間、特に好ましくは、２５±１℃に維持され
る；夜間温度は、好ましくは、１１±１℃に維持され
る；日中温度と夜間温度との間の差は、好ましくは、１
５℃に維持される。子実体培養段階における相対湿度
は、９０％〜９５％の間に制御される。さらに、子実体
は、流動空気中で培養され得、そして二酸化炭素は１％
未満であり得る。一般に、固形培養物質は、９０〜１２
０日後に回収される。

【００６２】本発明において使用されるＣＣＲＣ３５３
９８株の菌糸塊は、ＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙＲｅ
ｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＩｎ
ｓｔｉｔｕｔｅ，Ｔａｉｗａから得られ得る。本発明の
固形培養法に従って、固形培養物質が得られる。この固
形培養物質は、直径が約１０〜３０ｃｍ、高さが１５〜
３０ｃｍ、および重量が０．２〜０．６ｋｇの円錐形で
ある。

【００６３】上記の固形培養法を用いて、固形Ｚａｎｇ
Ｚｈｉを獲得し得る。固形ＺａｎｇＺｈｉは、当業
者に公知の任意の加工法によって加工され得る。例え
ば、水またはアルコールが、活性成分を抽出するために
用いられ得、次いで、公知の濃縮法（例えば、減圧濃縮
または凍結濃縮）が濃縮産物を生成するために使用され
得る。

【００６４】脱水を行うための脱水法（すなわち、噴霧
乾燥または凍結乾燥法による）を用い得る。しかし、固
形物質を脱水するためには、凍結乾燥法が最も良好な方
法であり、そして脱水の間に固形物質は、酸素の影響に
起因して、その特徴が変化しない。

【００６５】噴霧乾燥または他の脱水法により生成され
た微粒子は、それらの直径を増大させるために塊状にさ
れ得る。これらの産物は、良好な湿潤性を有する多孔性
粒子である。

【００６６】本発明の固形培養ＺａｎｇＺｈｉ、公知
の液体培養のＺａｎｇＺｈｉおよび野生のＺａｎｇ
Ｚｈｉの比較のＨＰＬＣスペクトルを、図１に示す。Ｈ
ＰＬＣ分析により、本発明の培養法により得られた子実
体の成分は、野生のＺａｎｇＺｈｉの成分に類似し、そ
して本発明のＺａｎｇＺｈｉは、野生のＺａｎｇＺｈ
ｉに類似した活性および機能を有する。これらの活性お
よび機能としては、以下が挙げられる：精神安定化、風
邪の予防もしくは処置、生体エネルギー循環の促進、鬱
血の予防もしくは処置、血液循環の促進、消化不良の軽
減、腫脹の解毒およびその鎮静の促進、ストレスを減少
するための神経の鎮静、疼痛の緩和、細菌、ウイルスお
よび癌細胞の増殖の阻害、心臓の強化、免疫の調整、副
交感神経系および血清活性の拮抗。ＺａｎｇＺｈｉ
は、胃痛および腸痛、悪心、糖尿病、痛風、関節炎、感
染、アレルギー、過剰尿タンパク質、尿毒症、肝硬変、
肝不全およびインフルエンザなどを治癒し得る。Ｚａｎ
ｇＺｈｉは、皮膚を再生し得、そしてヒトの皮膚もし
くは仮骨物質として、または褥瘡または外傷皮膚のため
の接着剤として働き得る。

【００６７】さらに、本発明の固形培養物質は、フリー
ラジカルおよび脂質過酸化を拮抗する能力を有し、そし
て肝臓を保護し、そして癌細胞を阻害するように機能す
る。本発明の固形培養物質は、長寿のための健康食品と
して摂取され得、そしてさらに新薬へと開発され得る。

【００６８】以下の実施例は、本発明をさらに説明する
が、本発明を限定しない。当業者によって行われる本発
明のいずれの適用も改変も、本発明の範囲内に入る。

【００６９】

【実施例】ＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙＲｅｓｅａｒ
ｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＩｎｓｔｉｔ
ｕｔｅから得たＣＣＲＣ３５３９８株の菌糸塊を、液体
培養発酵によって増殖させ、次いで、「ＢａｇＬｏ
ｇ」に接種した。発酵させた液体培養物は、２％のフル
クトース、０．０５％の硫酸マグネシウム、０．５％の
酵母抽出物、および０．１％のリン酸カリウムを含ん
だ。「ＢａｇＬｏｇ」培養は、菌糸体を培養すること
である。「ＢａｇＬｏｇ」は、６５％のイネ科植物の
茎、柄、子実またはセルロース誘導体小板、２０％のジ
ャガイモ、１０％の米ぬか、３．５％のグルコース、１
％のリン酸カリウム、および０．５％の硫酸マグネシウ
ムから構成される、のこくず培地を含む。相対湿度を８
０％に、ｐＨを７に調整した。相対湿度を６０〜９０
％、好ましくは８０％に維持し、そして培養培地のｐＨ
を中性であるように調整した。

【００７０】菌糸体培養の期間は、「ＢａｇＬｏｇ」
に菌糸塊を播種した後、６０日間であった。菌糸体は、
５℃〜３２℃の間の温度で生長する；菌糸体の生長のた
めの最適温度は、２８℃である。「ＢａｇＬｏｇ」湿
度は、８０％であり、そして空気条件は、０．２〜１％
の二酸化炭素である。

【００７１】菌糸体培養段階の後に、子実体培養段階
（すなわち、菌糸の接種日から６１〜９１日）へ進み、
「ＢａｇＬｏｇ」のプラスチックバッグを取り外し、
のこくず培地を空気に完全にさらした。子実体培養段階
の間、日中温度と夜間温度との間の差は、厳密に制御さ
れなければならない。日中温度を、概して２０℃〜３０
℃との間に維持した；夜間温度を、好ましくは、１１±
１℃に維持した。日中温度と夜間温度との間の差を、好
ましくは、１５℃に維持する。子実体培養段階の相対湿
度を、９０％〜９５％の間に制御した。さらに、子実体
を、流動空気中で培養した。そして二酸化炭素は１％未
満である。

【００７２】９０〜１２０日目に、円錐状の子実体が直
径１５ｃｍかつ高さ２５ｃｍにまで成長したときに、こ
の固形培養した物質を収集した。この物質は、重量約
０．４ｋｇであった。主要活性要素（トリテルペノイ
ド）のＨＰＬＣスペクトルを、図１（１）に示し、そし
てその測定値を、以下の表１に示す。

【００７３】表１．本発明のＺａｎｇＺｈｉ子実体の
ＨＰＬＣ分析のデータ

【００７４】

【表１】本発明のＺａｎｇＺｈｉ子実体と、他の培養方法と液
体培養方法との間の差異を、ＨＰＬＣの分析によって比
較した。ＨＰＬＣスペクトルを、図１（２）〜（３）に
示し；そしてその測定値を表２および表３に示す。これ
らのスペクトルは、本発明のＺａｎｇＺｈｉ子実体お
よび野生ＺａｎｇＺｈｉ子実体が、同一の形状のピー
クを有することを示し、そしてまた、本発明の培養Ｚａ
ｎｇＺｈｉ子実体および野生ＺａｎｇＺｈｉの子実
体は、同一の活性および機能を有することを示す。

【００７５】表２．液体培養したＺａｎｇＺｈｉのＨ
ＰＬＣスペクトルの数値

【００７６】

【表２】表３．野生ＺａｎｇＺｈｉのＨＰＬＣスペクトルの数
値

【００７７】

【表３】以下の分析検査および薬理学検査は、本発明の培養Ｚａ
ｎｇＺｈｉ子実体の濃縮産物の要素および機能に従っ
て、その主要要素が、トリテルペノイド化合物、水溶性
ポリサッカリドおよびキチンを含むことを実証する。

【００７８】（水溶性ポリサッカライド）日本食品分析
センター（ＦｏｏｄＡｎａｌｙｓｉｓＣｅｎｔｅｒ
ｉｎＪａｐａｎ）による検査により、本発明の培養方
法により得られた固形ＺａｎｇＺｈｉ子実体が、高い割
合の水溶性ポリサッカライド（１００ｇの子実体あたり
１．２〜６．５ｇの水溶性ポリサッカライドを有する）
を含有することが明らかになった。

【００７９】（重金属の含有量）国立ＣｈｉｎｇＨｗ
ａ大学の原子科学学部微量分析研究所（ｔｈｅＭｉｃ
ｒｏａｎａｌｙｓｉｓＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆ
ＡｔｏｍｉｃＳｃｉｅｎｃｅＤｅｐａｒｔｍｅｎ
ｔ）によってなされた原子スペクトル分析により、本発
明の固形培養ＺａｎｇＺｈｉが、以下の重金属の含有
量を有することが明らかになった：

【００８０】

【化１】（総抗酸化活性）本発明の固形ＺａｎｇＺｈｉ物質の
１グラムの濃縮粉末と、野生ＺａｎｇＺｈｉの１グラム
の粉末とＧａｎｄｅｒｍａｓｐ．の１グラムの濃縮粉
末の間との比較により、それらが何μｇのビタミンＣに
相当するかが以下のように明らかになった：

【００８１】

【化２】この結果は、本発明の固形ＺａｎｇＺｈｉ物質の総抗
酸化活性が、野生ＺａｎｇＺｈｉの子実体の総抗酸化
活性およびＧａｎｄｅｒｍａｓｐ．の総抗酸化活性よ
りもはるかに高いことを示す。

【００８２】（毒性試験）急性経口毒性ＬＤ５０を測定
するために、試験マウスに、各々本発明のＺａｎｇＺ
ｈｉの２，０００ｍｇ／ｋｇの固形粉末を与え、一方、
他のマウスには、特別に蒸留した水をコントロールとし
て与えた。これらの結果は、試験マウスは、異常にふる
まわないし死亡もしないことを示した。従って、急性経
口毒性ＬＤ５０は、２０００ｍｇ／ｋｇよりも高い。

【００８３】（エイムス試験）エイムス試験下で、本発
明のＺａｎｇＺｈｉを、混合プレートアッセイにより
試験する。５つの試験した細菌の単離体は、Ｓａｌｍｏ
ｎｅｌｌａｔｉｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍＴＡ９７、Ｔ
Ａ９８、ＴＡ１００、ＴＡ１０２、およびＴＡ１５３５
である。各単離体は、それぞれ、１プレートあたり、３
１２．５μｇ、６２５μｇ、１２５０μｇ、２５００μ
ｇ、および５０００μｇの５つの濃度分析下にある。同
時に、細菌の単離体に特異的なネガティブコントロール
グループおよびポジティブコントロールグループを含
み、そして各グループは３連である。試験結果は、ネガ
ティブコントロールグループが受容可能な範囲に収ま
り、かつポジティブコントロールグループが変異体細菌
コロニーの増加を反映することを示す。表４に示される
ように、これらの細菌の単離体が大きいマウス肝臓酵素
代謝系（Ｓ９）下で処理されるか否かに関わらず、試験
した全ての濃度で、エイムス試験単離体のコロニーの明
白な増加は示されない。

【００８４】

【表４】（抗脂質過酸化能試験）固形培養したＺａｎｇＺｈｉ
固形濃縮物の抗脂質過酸化能および抗フリーラジカル能
を、マウス脳のホモジネートにおける脂質過酸化によっ
て試験した。酸化ストレスに曝されたマウス脳のホモジ
ネートを、Ｆｅ²⁺の導入により刺激し、そして脂質由来
のフリーラジカルの生成の速度論を導いた。図２は、本
発明のＺａｎｇＺｈｉ固形物質濃縮物の濃度を３倍お
よび８倍に増加させるに伴い、この濃縮物が、脂質過酸
化を阻害しそしてフリーラジカルの生成を減少する傾向
を有することを示す。

【００８５】（肝臓機能の保護の実験）マウス肝臓に対
する緩やかな損傷に対する異なる濃度のＺａｎｇＺｈ
ｉの効果を見出すために、四塩化炭素を使用してマウス
肝臓に対する緩やかな損傷を引き起こす実験モデルを確
立した。２４匹のマウス（ＩＣＲ系統）を、表５に示さ
れるように４つの群に分ける。

【００８６】

【表５】グループＡのマウスに、オリーブ油（０．１ｍｌ／１０
０ｇ体重）を、そしてグループＢ〜Ｄのマウスに、４０
％ＣＣｌ₄／オリーブ油（０．３ｍｌ／１００ｇ体重）
を、一週間に二回、皮下注射した。グループＡおよびＤ
のマウスには、胃チューブを介して生理食塩水を与え、
一方、グループＣおよびＤのマウスには、２つの異なる
用量の本発明の培養ＺａｎｇＺｈｉ抽出物を５週間与
えた。次いで、全てのマウスの眼窩の血液を回収して、
肝臓機能に関連する生化学的測定を試験した。その後、
これらの試験したマウスを屠殺し、最も大きな肝臓葉を
取り出して、肝臓細胞への損傷、脂質の変化、壊死、セ
ルロース増加症（ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｓ）およびこれら
の変化の程度などのような、組織病理学的観察を行っ
た。生化学的試験には、ＧＴＰおよびＧＯＴの活性が含
まれ、これらは、国際臨床化学（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏ
ｎａｌＣｌｉｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）の基準に
従って行われる。これらの実験結果は、四塩化炭素によ
って損傷を受けたマウス肝臓の血液中のＧＴＰおよびＧ
ＯＴが、５週間後に明らかに増加したことを示す。約８
５０ユニットのＧＴＰは、正常よりも２０〜２２倍高
く、そして約１７００ユニットのＧＯＴは、正常の４０
〜４２倍高い（図３〜４）。さらに、３倍および８倍濃
縮した本発明のＺａｎｇＺｈｉ抽出物を与えたマウス
は、ＣＣｌ₄によって誘導されるＧＴＰおよびＧＯＴの
増加を阻害する能力を有する。特に、ＧＴＰおよびＧＯ
Ｔがピークに達するとき、３倍濃縮抽出物は、ＧＴＰの
増加を３７％そしてＧＯＴの増加を６５％阻害し得る。

【００８７】６週間後に、正常マウスの肝臓組織と、Ｃ
Ｃｌ₄を与えたマウスの肝臓組織とを比較すると、ＣＣ
ｌ₄で処理した肝臓組織は、腫脹した灰色の粗い表面を
顕著に示す。しかし、濃縮ＺａｎｇＺｈｉ抽出物を与
えたマウスの肝臓組織は、腫脹した灰色の粗い表面を示
さない。さらに、染色することによって、多量の脂質の
顆粒、中央の血管の周辺の腫脹した肝臓細胞、肝臓細胞
の間隙に浸潤するマクロファージおよび他の刺激された
白血球、ならびに結節性変化を示す部分的に壊死した細
胞を観察することが可能である。しかし、濃縮Ｚａｎｇ
Ｚｈｉ抽出物を与えたマウスの肝臓組織は、上記の病
理学的変化を有さない。

【００８８】表６は、病原性マウス肝臓組織の半定量分
析を示す。Ｎは正常グループを表し、Ｄは、ＣＣｌ₄損
傷グループを表し、Ｘ３は、３倍濃縮抽出物を与えたグ
ループを表し、Ｘ８は、８倍濃縮抽出物を与えたグルー
プを表す。濃縮ＺａｎｇＺｈｉ抽出物は、病原性変化
を有意に改善し得ることが判明した。

【００８９】

【表６】（癌細胞阻害実験）ＴｈｅＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒ
ｙＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎ
ｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅに、本発明のＺａｎｇＺｈｉ
固形培養濃縮物が子宮頸部癌（ＨｅＬａ）、胃癌（ＡＧ
Ｓ）、乳癌（ＭＣＦ−７）、肝臓癌（ＨｅｐＧ２）、腸
癌（ＣＯＬＯ３２０ＨＳＲ）などの細胞増殖をどの
ように阻害し得るのかを見出すための実験を実施するよ
うに委託した。細胞増殖阻害の結果を、表７に示す。本
発明のＺａｎｇＺｈｉ固形培養濃縮物は、腫瘍細胞
（特に乳癌の細胞）の増殖を有意に阻害し得る（７５％
〜８７％まで）。

【００９０】

【表７】さらに、実験を実施して、微量培養テトラゾリウムアッ
セイにより５粉末標本（Ｎｅｗ１、Ｎｅｗ２、Ｎｅｗ
３、Ｎｅｗ４、およびＮｅｗ５）、１１液体標本（２０
Ｌ、Ｎｅｗ２、Ｎｅｗ３、５２０、５２１、５２２、５
２３、５２４、５２５、５２６および５２７）ならびに
それらの１：１０標本希釈物を使用することによって腸
癌増殖を阻害するという結果が見出された。図５に示さ
れる結果は、最終濃度において、ストック溶液の１／１
０は、癌細胞増殖の少なくとも３０％を阻害し得、そし
て標本２０Ｌは、９０％まで癌細胞の増殖を阻害し得る
ということを明らかにする。

【００９１】（インビトロ染色体変異の分析）さらに、
インビトロ染色体構造変異の分析を実施してチャイニー
ズハムスター卵巣細胞を本発明のＺａｎｇＺｈｉで処
理した。有糸分裂中期の細胞を分析して異常染色体の頻
度を観察および測定した。染色体の構造変異の分析は、
本発明のＺａｎｇＺｈｉの、細胞染色体に損傷を与え
る能力を評価し得る。３つの処理が以下のように与えら
れる：第１の処理は、活性なマウス肝臓酵素系（Ｓ９）
を添加せずに、細胞を３時間処理するために本発明のＺ
ａｎｇＺｈｉを添加することである；第２の処理は、
細胞を処理するためにＳ９を３時間添加することであ
る；そして第３の処理は、Ｓ９を添加せずに細胞を２０
時間処理することである。これらの３つ処理の下で試験
した全てのＺａｎｇＺｈｉ濃縮物は、染色体構造変異
の頻度の増加を引き起こさない。実験結果を、以下の表
８に示す。

【００９２】

【表８】（動物体における小核の分析）動物体における本発明の
ＺａｎｇＺｈｉの染色体異常誘発性を試験した。さら
に、マウス網状赤血球の小核の形成によって、ヒト遺伝
毒性の危険評価をした。この実験において、２５匹のマ
ウスを５つのグループに分けた。小核の分析は、マウス
の血液小核の周縁部に対する本発明のＺａｎｇＺｈｉ
の反応は陰性であるということを明らかにする。

【００９３】

【表９】上記の薬理学的データによると、本発明の固形Ｚａｎｇ
Ｚｈｉ物質は、野生のＺａｎｇＺｈｉに類似する活
性成分（例えば、多糖およびタートリポイド（ｔｅｒｔ
ｒｉｐｏｉｄ））を保有するだけでなく、抗脂質過酸
化、抗フリーラジカルおよび抗酸化という同じ機能をも
有する。さらに、本発明の固形ＺａｎｇＺｈｉ物質は、
肝臓を保護し、そして癌に対して戦う能力を有する。

【００９４】本発明は、その好ましい実施形態を特に参
照して詳細に記載されてきたが、本発明の操作の原理お
よび様式もまた、本明細書中に記載されている。本発明
は、開示された特定の形態に限定されるものとして解釈
されるべきでなく、この開示された特定の形態は、限定
というよりはむしろ例示である。改変、バリエーショ
ン、および変更が、上記特許請求の範囲により記載され
る本発明の精神および範囲から逸脱することなく当業者
によりなされ得る。（要約）本発明は、ＺａｎｇＺｈｉ（Ａｎｔｒｏｄｉ
ａｃａｍｐｈｏｒａｔａ）の固形培養物を得るための
インキュベーション方法を提供し、この方法は、以下の
工程を包含する：菌糸体の増殖のためにＰＰバッグ中で
ＺａｎｇＺｈｉの保存株をインキュベートする工程、
その後、ＺａｎｇＺｈｉ子実体を形成するために空気
中でインキュベートする工程。本発明はまた、このイン
キュベーション方法によって得られたＺａｎｇＺｈｉ
の固形培養物、およびそれから加工される産物およびそ
の使用を提供する。

【００９５】

【発明の効果】本発明は、ＺａｎｇＺｈｉの固形培養
のための培養方法、その培養方法から得られた固形培養
物、その固形培養物の加工産物およびその使用を提供す
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は、ＺａｎｇＺｈｉの成分のＨＰＬＣ比
較分析を示す。この分析は、以下を含む：（１）本発明
に従う培養されたＺａｎｇＺｈｉの子実体、（２）Ｚ
ａｎｇＺｈｉの液体培養物および（３）野生Ｚａｎｇ
Ｚｈｉの子実体。

【図２】図２は、マウス脳のホモジネートを刺激して、
フリーラジカル脂質過酸化を生じさせるための第一鉄イ
オンの使用を示し、これは、ＴＢＡＲＳ（脂質の過酸化
物成分（ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕ
ｔｅ））の増加を生じる。本発明に従って培養したＺａ
ｎｇＺｈｉ子実体の抽出物の３倍に濃縮した抽出物と
８倍に濃縮した抽出物とを比較して、本発明者らは、過
酸化反応の阻害の増加が、過酸化反応（ｎ＝３）阻害の
パーセンテージで示されるように、濃度が増加するにつ
れて変化するということに特に注目する。

【図３】図３は、肝機能の測定のためのＧＴＰの活性変
化に対する、異なる濃度のＺａｎｇＺｈｉ抽出物の効
果を示す。＃は、正常なグループと損傷グループとの間
の統計学的差異（Ｐ＜０．０１）を表す；^*は、供給グ
ループと損傷グループとの間の統計学的差異（Ｐ＜０．
０１）を表す。値は、平均±標準誤差で表される。

【図４】図４は、肝機能の生化学的測定のためのＧＯＴ
の活性変化に対する、異なる濃度のＺａｎｇＺｈｉ抽
出物の効果を示す。＃は、正常なグループと損傷グルー
プとの間の統計学的差異（Ｐ＜０．０１）を表す；
^*は、供給グループと損傷グループとの間の統計学的差
異（Ｐ＜０．０１）を表す。値は、平均±標準誤差で表
される。

【図５】図５は、腸癌細胞（ＣＯＬＯ３２０ＨＳＲ）
の増殖に対するＺａｎｇＺｈｉ粉末の抽出物の効果を
示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ２３Ｌ 1/30 Ａ２３Ｌ 1/30 ＺＡ６１Ｋ 35/70 Ａ６１Ｋ 35/70 Ａ６１Ｐ 1/08 Ａ６１Ｐ 1/08 1/14 1/14 1/16 1/16 3/10 3/10 9/00 9/00 11/00 11/00 13/02 13/02 13/12 13/12 17/02 17/02 19/02 19/02 19/06 19/06 25/18 25/18 25/22 25/22 29/00 29/00 31/04 31/04 31/12 31/12 35/00 35/00 37/02 37/02 37/08 37/08 43/00 １１１ 43/00 １１１ //(Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者藍明煌台湾，台北市迪化街二段191▲港▼９▲ハオ▼７樓 (72)発明者藍蒼洲台湾，台北市迪化街二段191▲港▼９▲ハオ▼７樓 (72)発明者藍仲良台湾，台北市迪化街二段191▲港▼９▲ハオ▼７樓 (72)発明者藍仲民台湾，台北市迪化街二段191▲港▼９▲ハオ▼７樓Ｆターム(参考） 2B011 AA07 BA06 BA09 BA10 BA13 BA18 GA03 GA04 GA08 GA09 GA10 4B018 MD10 MD82 ME06 ME08 MF06 MF07 MF13 4B065 AA71X BA22 BB02 BB18 BB26 BC02 BC03 BC07 CA44 4C087 AA01 AA02 AA04 AA05 BC01 CA09 NA14 ZA05 ZA08 ZA18 ZA27 ZA28 ZA36 ZA51 ZA66 ZA69 ZA71 ZA72 ZA73 ZA75 ZA81 ZA89 ZA96 ZB07 ZB11 ZB13 ZB26 ZB33 ZB35 ZC02 ZC35

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】固形ＺａｎｇＺｈｉを培養する方法で
あって、該方法は、菌糸塊を「ＢａｇＬｏｇ」に播種
して菌糸体に培養する工程、および次いで該「Ｂａｇ
Ｌｏｇ」を取り外して、円錐状の子実体の形成がなされ
るまでの期間の間、のこくず培地を空気中に完全にさら
す工程を包含し、ここで、該「ＢａｇＬｏｇ」は、１０
〜７０％のセルロース誘導体物質、１０〜３０％のデン
プン供給源、５〜１５％の穀粒、１〜１０％のサッカリ
ド、０．５〜２％のホスフェートおよび０．１〜１％の
硫酸塩を含有する、のこくず培地を含み、相対湿度は６
０〜８０％で維持され、そして該培養培地のｐＨは中性
に調整される、方法。
【請求項２】請求項１に記載の方法であって、ここ
で、前記のこくず培地が、６０〜７０％のセルロース誘
導体物質、２０％のデンプン供給源、１０％の穀粒、
３．５％のグルコース、１％のリン酸カリウムおよび
０．５％の硫酸マグネシウムを含有し、前記相対湿度が
８０％であり、そして前記ｐＨが中性に調整される、方
法
【請求項３】前記セルロース誘導体物質が、きのこあ
るいは植物の茎、柄、果実または小板である、請求項１
または２に記載の方法。
【請求項４】前記デンプンの供給源が、ジャガイモで
ある、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】前記穀粒が、米ぬかである、請求項１ま
たは２に記載の方法。
【請求項６】請求項１または２に記載の方法であっ
て、ここで、前記のこくず培地が、６５％のイネ科植物
の茎、柄、果実、あるいはセルロース誘導体小板、２０
％のジャガイモ、１０％の米ぬか、３．５％のグルコー
ス、１％のリン酸カリウム、および０．５％の硫酸マグ
ネシウムを含有する、方法。
【請求項７】前記菌糸体の培養のための温度が、５℃
〜２８℃である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】前記菌糸体の培養のための温度が、２８
℃である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】前記「ＢａｇＬｏｇ」の湿度が、６０
〜８０％である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】前記「ＢａｇＬｏｇ」の湿度が、８
０％である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】前記菌糸体の培養のための空気の条件
が、０．２〜１％の二酸化炭素である、請求項１に記載
の方法。
【請求項１２】前記子実体の培養が、流動空気中で行
われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】前記子実体の培養が、日中に２０〜３
０℃の温度そして夜間に８〜１４℃の温度でなされる、
請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】前記子実体の培養が、日中に２４〜２
６℃の温度そして夜間に１０〜１２℃の温度でなされ
る、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】前記日中と前記夜間との間の温度差
が、１５℃である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】前記子実体の培養のための空気湿度
が、９０〜９５％である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】前記空気が、１％未満の二酸化炭素の
空気である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】前記菌糸体の培養に５０〜８０日間を
費やし；前記子実体の培養に２０〜５０日間を費やす、
請求項１に記載の方法。
【請求項１９】請求項１に記載の方法から得られたＺ
ａｎｇＺｈｉの固形子実体であって、野生Ｚａｎｇ
Ｚｈｉと同じ、トリテルペノイドの生理学的活性の特徴
を有する、固形子実体。
【請求項２０】請求項１に記載の方法であって、ここ
で、前記菌糸体培養の前に、大量の菌糸塊を培養する工
程を包含し、該工程は、（１）液体窒素中で保存した菌
糸を含む培養寒天のサンプル片を取り出し、そして該サ
ンプル片を新鮮な培地に移して、菌糸体の過剰増殖が見
られるまで一定温度で培養する工程；（２）セルロース
誘導体物質を含む「ＢａｇＬｏｇ」内に該菌糸塊を播
種する工程；（３）該「ＢａｇＬｏｇ」において菌糸
が過剰増殖するのを待機し、上方の古い菌糸を除去し、
次いで、一定量の菌糸塊を別の「ＢａｇＬｏｇ」に播
種する工程、を包含する、方法。
【請求項２１】請求項１に記載の方法であって、ここ
で、前記菌糸体培養の前に、液体発酵を用いて大量の菌
糸塊を培養する工程を包含し、ここで、菌糸塊をスライ
ドチューブ中で培養した後、該培養した菌糸塊を５リッ
トルの液体発酵物に播種し、２４〜２６℃の温度にて、
１４日間、２４０ｒｐｍで振盪し、次いで１４日間、９
０ｒｐｍで振盪し、その後、２０リットルの液体発酵物
中に播種し、１４日間攪拌して培養し、ここで、該液体
発酵物の組成は、１〜３％のフルクトース、０．０１〜
０．１％の硫酸マグネシウム、０．１〜１％の酵母抽出
物、０．０５〜０．５％のリン酸カリウムである、方
法。
【請求項２２】前記液体発酵物の組成が、２％のフル
クトース、０．０５％の硫酸マグネシウム、０．５％の
酵母抽出物、および０．１％のリン酸カリウムである、
請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】ＦｏｏｄＩｎｄｕｓｔｒｙａｎｄ
ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＩｎｓｔｉｔｕｔｅにＣＣ
ＲＣ３５３９８として寄託された菌糸塊を使用して請求
項１の方法によって得られた、ＺａｎｇＺｈｉの固形
子実体であって、ここで、該培養された固形Ｚａｎｇ
Ｚｈｉ子実体は、野生ＺａｎｇＺｈｉと同じ、トリテ
ルペノイドの生理学的活性の特徴を有し、円錐状で、直
径が１０〜２０ｃｍ、高さが２０〜３０ｃｍ、そして重
量が０．３〜０．５キログラムである、固形子実体。
【請求項２４】ＺａｎｇＺｈｉ子実体産物であっ
て、小片にすりつぶし、次いで、水またはアルコールで
ホモジェナイズし、濃縮された液体を得るように粘着性
になるまで濃縮した、請求項２３に記載のＺａｎｇＺ
ｈｉの固形子実体によって特徴付けられる、Ｚａｎｇ
Ｚｈｉ子実体産物。
【請求項２５】乾燥粉末になるように脱水され得る、
請求項２４に記載の産物。
【請求項２６】前記粉末が、再度湿らされそして次い
で再度乾燥されて顆粒の産物が作製され得る、請求項２
５に記載の産物。
【請求項２７】食品組成物として使用される、請求項
２４に記載の産物。
【請求項２８】肝臓保護の機能を有する、請求項２３
に記載のＺａｎｇＺｈｉの固形子実体。
【請求項２９】癌細胞の増殖を治癒または阻害し得
る、請求項２３に記載のＺａｎｇＺｈｉの固形子実
体。
【請求項３０】前記癌細胞が、子宮頸部癌（ＨｅＬ
ａ）、胃癌（ＡＧＳ）、乳癌（ＭＣＦ−７）、肝臓癌
（ＨｅＰＧ２）および腸癌（ＣＯＬＯ３２０ＨＳＲ）で
ある、請求項２９に記載のＺａｎｇＺｈｉの固形子実
体。
【請求項３１】過酸化を阻害するために使用される、
請求項２３に記載のＺａｎｇＺｈｉの固形子実体。
【請求項３２】抗フリーラジカルおよび抗脂質過酸化
のために使用される、請求項２３に記載のＺａｎｇＺ
ｈｉの固形子実体。
【請求項３３】請求項２３に記載のＺａｎｇＺｈｉ
の固形子実体またはその加工した産物を含有する、食品
組成物。
【請求項３４】肝臓保護における使用のための、請求
項３３に記載の食品組成物。
【請求項３５】癌細胞の増殖の治癒または阻害におけ
る使用のための、請求項３３に記載の食品組成物。
【請求項３６】過酸化の阻害における使用のための、
請求項３３に記載の食品組成物。
【請求項３７】抗フリーラジカル活性または抗脂質過
酸化活性を示す、請求項３３に記載の食品組成物。
【請求項３８】請求項２３に記載のＺａｎｇＺｈｉ
の固形子実体またはその加工した産物から作製される、
薬学的組成物。
【請求項３９】肝臓保護における使用のための、請求
項３８に記載の薬学的組成物。
【請求項４０】癌細胞の増殖の治癒または阻害におけ
る使用のための、請求項３８に記載の薬学的組成物。
【請求項４１】過酸化の阻害における使用のための、
請求項３８に記載の薬学的組成物。
【請求項４２】抗フリーラジカル活性または抗脂質過
酸化活性を示す、請求項３８に記載の薬学的組成物。
【請求項４３】以下を含む野生ＺａｎｇＺｈｉの機
能と同じ機能を有する、請求項２３に記載のＺａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体：精神安定化、風邪の予防または処
置、生体エネルギー循環の促進、うっ血の除去、血液循
環の促進、消化不良を軽減するための中程度の加温、腫
脹の解毒およびその鎮静の促進、ストレスを減少するた
めの神経の鎮静、疼痛の緩和、細菌およびウイルスおよ
び癌細胞の阻害、心臓の強化、免疫の調整、副交感神経
系および血清活性の拮抗、ならびに胃痛および腸痛、不
消化下痢、嘔気、糖尿病、痛風、腎炎、関節炎、化膿、
アレルギー、過剰尿タンパク質、尿毒症、肝硬変、肝細
胞癌およびインフルエンザの治癒。
【請求項４４】皮膚再生機能を有し、かつ回復材料ま
たは身体の皮膚として使用され得る、請求項２３に記載
のＺａｎｇＺｈｉの固形子実体。
【請求項４５】褥瘡および皮膚創傷を治癒するための
タブとして作製され得る、請求項４１に記載のＺａｎｇ
Ｚｈｉの固形子実体。