JP2003113396A - 共役脂肪酸含有モノグリセリドおよびその製造方法 - Google Patents
共役脂肪酸含有モノグリセリドおよびその製造方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 本発明は、共役脂肪酸を含有するモノグリセ
リドおよび、すべてのリパーゼを触媒として使用するこ
とができる上記共役脂肪酸含有モノグリセリドの製造方
法を提供する。 【解決手段】 共役脂肪酸（好ましくは脂肪酸中５０％
以上）を含有するモノグリセリド。リパーゼを触媒とし
て用い、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸とグリセリンを、
エステル化またはエステル化とグリセロリシスの反応に
付することを特徴とする、上記の共役脂肪酸含有モノグ
リセリドの製造方法。
リドおよび、すべてのリパーゼを触媒として使用するこ
とができる上記共役脂肪酸含有モノグリセリドの製造方
法を提供する。 【解決手段】 共役脂肪酸（好ましくは脂肪酸中５０％
以上）を含有するモノグリセリド。リパーゼを触媒とし
て用い、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸とグリセリンを、
エステル化またはエステル化とグリセロリシスの反応に
付することを特徴とする、上記の共役脂肪酸含有モノグ
リセリドの製造方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、共役脂肪酸含有モ
ノグリセリドおよびその製造方法に関し、更に詳細に
は、本発明は食品の乳化剤あるいは飲料用添加物等の用
途に有用な共役脂肪酸含有モノグリセリド、および、リ
パーゼの存在下で共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸とグリセ
リンを基質としてエステル化反応、または同一反応系内
でのエステル化反応とグリセロリシスの連続的反応を利
用して共役脂肪酸含有モノグリセリドを製造する方法に
関するものである。
ノグリセリドおよびその製造方法に関し、更に詳細に
は、本発明は食品の乳化剤あるいは飲料用添加物等の用
途に有用な共役脂肪酸含有モノグリセリド、および、リ
パーゼの存在下で共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸とグリセ
リンを基質としてエステル化反応、または同一反応系内
でのエステル化反応とグリセロリシスの連続的反応を利
用して共役脂肪酸含有モノグリセリドを製造する方法に
関するものである。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】共役
リノール酸は抗ガン作用、体脂肪低減作用、動脈硬化抑
制作用、抗アレルギー作用等の多彩な生理活性を有し、
遊離脂肪酸の形態で健康食品として利用されているが、
モノグリセリドの形態では利用されていない。非共役脂
肪酸による通常の脂肪酸グリセリンエステルは、食品、
医薬品、化粧品の分野において乳化剤として広く用いら
れており、中でもモノグリセリドは最もよく用いられて
いる。一般的に、非共役脂肪酸による通常のモノグリセ
リドは、グリセリンと脂肪酸を高温下でエステル化させ
るか、脂肪酸メチルと油脂（トリグリセリド）を高温下
でエステル交換させることによって製造されている。
リノール酸は抗ガン作用、体脂肪低減作用、動脈硬化抑
制作用、抗アレルギー作用等の多彩な生理活性を有し、
遊離脂肪酸の形態で健康食品として利用されているが、
モノグリセリドの形態では利用されていない。非共役脂
肪酸による通常の脂肪酸グリセリンエステルは、食品、
医薬品、化粧品の分野において乳化剤として広く用いら
れており、中でもモノグリセリドは最もよく用いられて
いる。一般的に、非共役脂肪酸による通常のモノグリセ
リドは、グリセリンと脂肪酸を高温下でエステル化させ
るか、脂肪酸メチルと油脂（トリグリセリド）を高温下
でエステル交換させることによって製造されている。
【０００３】しかし、不安定な共役リノール酸等を含む
共役脂肪酸含有モノグリセリドの製造に従来の化学的方
法を適用することはできず、本発明者らの知る限り共役
脂肪酸含有モノグリセリドの製造法を含めて報告されて
いない。
共役脂肪酸含有モノグリセリドの製造に従来の化学的方
法を適用することはできず、本発明者らの知る限り共役
脂肪酸含有モノグリセリドの製造法を含めて報告されて
いない。
【０００４】また、酵素反応を利用した、非共役長鎖脂
肪酸のモノグリセリドの合成法については、特開平９−
２６８２９９号や特公平４−１２１１２号などの公報に
記載がある。前者の公報は、Pseudomonas属由来リパー
ゼの存在下、トリグリセリドをグリセロリシス化してモ
ノグリセリドを効率よく合成する方法を提案している。
この方法を応用して共役脂肪酸モノグリセリドを製造し
ようとした場合には、通常共役脂肪酸は遊離脂肪酸とし
て流通しているため、共役脂肪酸をまずトリグリセリド
に変換してからでないと、モノグリセリドを製造するこ
とはできない。また、後者の公報は、モノおよびジグリ
セリドリパーゼを用いて遊離脂肪酸とグリセリドをエス
テル化し、モノグリセリドを製造する方法を提供してい
る。この方法は３０℃での反応であり、エステル化率が
６０％以下のときでは、全グリセリド中のモノグリセリ
ドの含量は９０％以上となるが、エステル化率を９０％
以上に高めると、ジグリセリドの副成が認められ、モノ
グリセリドとジグリセリドの含量はほぼ等量となってし
まう。
肪酸のモノグリセリドの合成法については、特開平９−
２６８２９９号や特公平４−１２１１２号などの公報に
記載がある。前者の公報は、Pseudomonas属由来リパー
ゼの存在下、トリグリセリドをグリセロリシス化してモ
ノグリセリドを効率よく合成する方法を提案している。
この方法を応用して共役脂肪酸モノグリセリドを製造し
ようとした場合には、通常共役脂肪酸は遊離脂肪酸とし
て流通しているため、共役脂肪酸をまずトリグリセリド
に変換してからでないと、モノグリセリドを製造するこ
とはできない。また、後者の公報は、モノおよびジグリ
セリドリパーゼを用いて遊離脂肪酸とグリセリドをエス
テル化し、モノグリセリドを製造する方法を提供してい
る。この方法は３０℃での反応であり、エステル化率が
６０％以下のときでは、全グリセリド中のモノグリセリ
ドの含量は９０％以上となるが、エステル化率を９０％
以上に高めると、ジグリセリドの副成が認められ、モノ
グリセリドとジグリセリドの含量はほぼ等量となってし
まう。
【０００５】共役脂肪酸は、前記のように多彩な生理活
性を有し、遊離脂肪酸の形態で健康食品として利用され
ている。この共役脂肪酸を各種の食品、特にドリンク剤
への添加物あるいは乳化剤としての利用用途を開くため
に、モノグリセリドの形態としての供給が期待される。
しかし上述のように、共役脂肪酸は熱に対して不安定で
あるため、共役脂肪酸グリセリドの製造に、従来の化学
法による非共役脂肪酸グリセリドに使われている製造方
法を応用することはできず、また、非共役脂肪酸グリセ
リドの製造に関してこれまでに提案されている酵素的方
法は、特定の微生物（Pseudomonas属）由来のリパーゼ
を触媒としたグリセロリシス反応（特開平９−２６８２
９９号公報、J. Am. Oil Chem. Soc., 68, 6-10, 199
1）、およびエステル化率を低くしたときのエステル化
反応（特公平４−１２１１２号公報）にのみ有効な方法
である。
性を有し、遊離脂肪酸の形態で健康食品として利用され
ている。この共役脂肪酸を各種の食品、特にドリンク剤
への添加物あるいは乳化剤としての利用用途を開くため
に、モノグリセリドの形態としての供給が期待される。
しかし上述のように、共役脂肪酸は熱に対して不安定で
あるため、共役脂肪酸グリセリドの製造に、従来の化学
法による非共役脂肪酸グリセリドに使われている製造方
法を応用することはできず、また、非共役脂肪酸グリセ
リドの製造に関してこれまでに提案されている酵素的方
法は、特定の微生物（Pseudomonas属）由来のリパーゼ
を触媒としたグリセロリシス反応（特開平９−２６８２
９９号公報、J. Am. Oil Chem. Soc., 68, 6-10, 199
1）、およびエステル化率を低くしたときのエステル化
反応（特公平４−１２１１２号公報）にのみ有効な方法
である。
【０００６】本発明は、共役脂肪酸を含有するモノグリ
セリドを製造する技術、具体的には、全てのリパーゼ
（モノグリセリドリパーゼ、モノおよびジグリセリドリ
パーゼ、トリグリセリドリパーゼを含む）を触媒として
用いることが可能で、かつ高いエステル化率の場合でも
モノグリセリド含有率の高い共役脂肪酸グリセリンエス
テルを製造できる技術を提供することを目的とする。
セリドを製造する技術、具体的には、全てのリパーゼ
（モノグリセリドリパーゼ、モノおよびジグリセリドリ
パーゼ、トリグリセリドリパーゼを含む）を触媒として
用いることが可能で、かつ高いエステル化率の場合でも
モノグリセリド含有率の高い共役脂肪酸グリセリンエス
テルを製造できる技術を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な技術的背景に鑑み、上記目的を達成すべく鋭意研究を
重ねた結果、リパーゼを触媒としてエステル化を利用し
た反応系および同一反応系内でのエステル化反応とグリ
セロリシスの連続的反応を利用した反応系の構築に成功
し、この知見を基に本発明を完成させるに至った。すな
わち、本発明は下記のモノグリセリド、その製造方法お
よび精製方法を要旨とするものである。
な技術的背景に鑑み、上記目的を達成すべく鋭意研究を
重ねた結果、リパーゼを触媒としてエステル化を利用し
た反応系および同一反応系内でのエステル化反応とグリ
セロリシスの連続的反応を利用した反応系の構築に成功
し、この知見を基に本発明を完成させるに至った。すな
わち、本発明は下記のモノグリセリド、その製造方法お
よび精製方法を要旨とするものである。
【０００８】共役脂肪酸を含有するモノグリセリド、好
ましくは共役脂肪酸（代表的には共役リノール酸）を全
脂肪酸中５０％以上含有する上記のモノグリセリド。リ
パーゼを触媒として用い、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸
とグリセリンを、エステル化またはエステル化とグリセ
ロリシスの反応に付することを特徴とする、上記共役脂
肪酸含有モノグリセリドの製造方法。エステル化を利用
する反応において、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸の１モ
ル量に対してグリセリンを１〜２０モル量使用し、温度
を０℃〜２０℃、あるいは２０℃〜７０℃に設定して反
応を進行させ、温度を０℃〜２０℃に設定する場合は反
応途中から、また温度を２０℃〜７０℃に設定する場合
は反応開始時から減圧下で脱水し、エステル化率が９０
％以上に達するまで０℃〜２０℃、あるいは２０℃〜７
０℃に維持することを特徴とする、上記モノグリセリド
の製造方法（第１の方法）。エステル化とグリセロリシ
スを利用する反応において、共役脂肪酸を含む遊離脂肪
酸の１モル量に対してグリセリンを１〜２０モル量使用
し、温度を２０℃〜７０℃に設定してエステル化反応を
行い、反応の途中で減圧下で脱水してエステル化率を９
０％以上に高めた後に冷却（好ましくは急冷）し、０℃
〜２０℃で静置してグリセロリシス反応を進行させるこ
とを特徴とする、上記モノグリセリドの製造方法（第２
の方法）。遊離脂肪酸が混在するモノグリセリドを含有
するまたは主成分とするグリセリド生成物にアルカリを
添加し、それにより該生成物中に存在する遊離脂肪酸を
中和してケン化物を生成させ、さらに分子量がモノグリ
セリドより大きくかつケン化物と相溶性を有する物質を
添加してケン化物の濃度を低下させた後、これを分子蒸
留に付して該ケン化物を蒸留残渣として除去することを
特徴とする、モノグリセリドを含有するまたは主成分と
するグリセリド生成物の脱酸・精製方法。
ましくは共役脂肪酸（代表的には共役リノール酸）を全
脂肪酸中５０％以上含有する上記のモノグリセリド。リ
パーゼを触媒として用い、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸
とグリセリンを、エステル化またはエステル化とグリセ
ロリシスの反応に付することを特徴とする、上記共役脂
肪酸含有モノグリセリドの製造方法。エステル化を利用
する反応において、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸の１モ
ル量に対してグリセリンを１〜２０モル量使用し、温度
を０℃〜２０℃、あるいは２０℃〜７０℃に設定して反
応を進行させ、温度を０℃〜２０℃に設定する場合は反
応途中から、また温度を２０℃〜７０℃に設定する場合
は反応開始時から減圧下で脱水し、エステル化率が９０
％以上に達するまで０℃〜２０℃、あるいは２０℃〜７
０℃に維持することを特徴とする、上記モノグリセリド
の製造方法（第１の方法）。エステル化とグリセロリシ
スを利用する反応において、共役脂肪酸を含む遊離脂肪
酸の１モル量に対してグリセリンを１〜２０モル量使用
し、温度を２０℃〜７０℃に設定してエステル化反応を
行い、反応の途中で減圧下で脱水してエステル化率を９
０％以上に高めた後に冷却（好ましくは急冷）し、０℃
〜２０℃で静置してグリセロリシス反応を進行させるこ
とを特徴とする、上記モノグリセリドの製造方法（第２
の方法）。遊離脂肪酸が混在するモノグリセリドを含有
するまたは主成分とするグリセリド生成物にアルカリを
添加し、それにより該生成物中に存在する遊離脂肪酸を
中和してケン化物を生成させ、さらに分子量がモノグリ
セリドより大きくかつケン化物と相溶性を有する物質を
添加してケン化物の濃度を低下させた後、これを分子蒸
留に付して該ケン化物を蒸留残渣として除去することを
特徴とする、モノグリセリドを含有するまたは主成分と
するグリセリド生成物の脱酸・精製方法。
【０００９】
【発明の実施の形態】本発明によるモノグリセリドは、
共役脂肪酸を含有するモノグリセリドであることは上記
したところであり、好ましくは共役脂肪酸を５０％以上
（グリセリンに結合した全脂肪酸中）含有するモノグリ
セリドである。また、本発明のモノグリセリドは、トリ
グリセリドを実質的に含まず（２％以下）、かつ遊離脂
肪酸をほとんど含まず（５％以下）、全グリセリド（モ
ノ、ジ、トリ）中モノグリセリドを通常５０％以上、好
ましくは７０％以上、より好ましくは８０％以上、特に
好ましくは９０％以上の高い割合で含有する共役脂肪酸
モノグリセリドである。本発明において、共役脂肪酸と
しては共役リノール酸、共役トリエン酸（特に共役リノ
レン酸）、共役ＥＰＡ、共役ＤＨＡ等が好ましい例とし
てあげられるが、共役リノール酸が代表的である。なお
本明細書において、％表示は特に断りのない限り、ある
いは％表示のみで明確な場合（エステル化率など）を除
き重量％を意味する。
共役脂肪酸を含有するモノグリセリドであることは上記
したところであり、好ましくは共役脂肪酸を５０％以上
（グリセリンに結合した全脂肪酸中）含有するモノグリ
セリドである。また、本発明のモノグリセリドは、トリ
グリセリドを実質的に含まず（２％以下）、かつ遊離脂
肪酸をほとんど含まず（５％以下）、全グリセリド（モ
ノ、ジ、トリ）中モノグリセリドを通常５０％以上、好
ましくは７０％以上、より好ましくは８０％以上、特に
好ましくは９０％以上の高い割合で含有する共役脂肪酸
モノグリセリドである。本発明において、共役脂肪酸と
しては共役リノール酸、共役トリエン酸（特に共役リノ
レン酸）、共役ＥＰＡ、共役ＤＨＡ等が好ましい例とし
てあげられるが、共役リノール酸が代表的である。なお
本明細書において、％表示は特に断りのない限り、ある
いは％表示のみで明確な場合（エステル化率など）を除
き重量％を意味する。
【００１０】このような共役脂肪酸含有モノグリセリド
は、前記のように、リパーゼを触媒として用い、共役脂
肪酸を含む脂肪酸混合物とグリセリンを、エステル化ま
たはエステル化とグリセロリシスの反応に付することに
より製造することができる。このような本発明方法の代
表的な態様は、前述のような、エステル化反応を利用し
た第１の方法およびエステル化反応とグリセロリシス反
応を同一反応系内で連続して行なう第２の方法である。
は、前記のように、リパーゼを触媒として用い、共役脂
肪酸を含む脂肪酸混合物とグリセリンを、エステル化ま
たはエステル化とグリセロリシスの反応に付することに
より製造することができる。このような本発明方法の代
表的な態様は、前述のような、エステル化反応を利用し
た第１の方法およびエステル化反応とグリセロリシス反
応を同一反応系内で連続して行なう第２の方法である。
【００１１】本発明方法で用いる共役脂肪酸を含む遊離
脂肪酸とは、上記のような共役脂肪酸を含むものであれ
ばいずれの起源のものでも使用できるが、好ましくは共
役脂肪酸を５０％以上、より好ましくは７０％以上含む
ものである。このような遊離脂肪酸の実用的な好ましい
例としては、リノール酸を含む油（サフラワー油、ヒマ
ワリ油等）をプロピレングリコールなどの存在下でアル
カリ共役化して製造したc9,t11-およびt10,c12-共役リ
ノール酸異性体をそれぞれ３０％以上含む遊離脂肪酸の
混合物（例えばCLA-80：リノール油脂社製）等があげら
れるが、微生物等（例えば乳酸菌）によって生産される
共役リノール酸含有油脂から得られた脂肪酸の混合物で
あってもよい（例えば、乳酸菌を用いた米国特許第６，
０６０，３０４号公報参照）。また、尿素付加法、低温
結晶法、酵素（リパーゼ）を用いた選択的な反応を利用
した方法（例えば Lipids,34,979-987(1999)、J.Am.Oil
Chem. Soc.,76,1265-1268(1999)、J.Am.Oil Chem.So
c.,79,303-308(2002)参照）等の手段により所望に精製
して共役リノール酸含有率の高い（例えば９０％以上）
遊離脂肪酸を使用すれば、最終的に共役リノール酸含有
率の高い目的のモノグリセリドを得ることができる。こ
の共役リノール酸含有率は、上記の方法における精製の
程度を適宜調節することにより所望の割合に調整するこ
とができ、また非共役脂肪酸での希釈により所望に低減
させることができる。
脂肪酸とは、上記のような共役脂肪酸を含むものであれ
ばいずれの起源のものでも使用できるが、好ましくは共
役脂肪酸を５０％以上、より好ましくは７０％以上含む
ものである。このような遊離脂肪酸の実用的な好ましい
例としては、リノール酸を含む油（サフラワー油、ヒマ
ワリ油等）をプロピレングリコールなどの存在下でアル
カリ共役化して製造したc9,t11-およびt10,c12-共役リ
ノール酸異性体をそれぞれ３０％以上含む遊離脂肪酸の
混合物（例えばCLA-80：リノール油脂社製）等があげら
れるが、微生物等（例えば乳酸菌）によって生産される
共役リノール酸含有油脂から得られた脂肪酸の混合物で
あってもよい（例えば、乳酸菌を用いた米国特許第６，
０６０，３０４号公報参照）。また、尿素付加法、低温
結晶法、酵素（リパーゼ）を用いた選択的な反応を利用
した方法（例えば Lipids,34,979-987(1999)、J.Am.Oil
Chem. Soc.,76,1265-1268(1999)、J.Am.Oil Chem.So
c.,79,303-308(2002)参照）等の手段により所望に精製
して共役リノール酸含有率の高い（例えば９０％以上）
遊離脂肪酸を使用すれば、最終的に共役リノール酸含有
率の高い目的のモノグリセリドを得ることができる。こ
の共役リノール酸含有率は、上記の方法における精製の
程度を適宜調節することにより所望の割合に調整するこ
とができ、また非共役脂肪酸での希釈により所望に低減
させることができる。
【００１２】触媒として使用するリパーゼは、グリセリ
ド類を基質として認識する酵素であれば粗製、部分精
製、精製のいずれのものでもよく、モノグリセリドリパ
ーゼ、モノおよびジグリセリドリパーゼ、あるいはトリ
グリセリドリパーゼも包含する。特に、Pseudomonas
属、Burkholderia属、Alcaligenes属、Bacillus属、Can
dida属、Geotrichum属、 Penicillium属、Rhizopus属、
Rhizomucor属、Mucor属、Aspergillus属、Thermomyces
属等の微生物が生産する酵素や豚膵臓由来の酵素が好ま
しい。これらの酵素は一般に市販されており、容易に入
手可能である。
ド類を基質として認識する酵素であれば粗製、部分精
製、精製のいずれのものでもよく、モノグリセリドリパ
ーゼ、モノおよびジグリセリドリパーゼ、あるいはトリ
グリセリドリパーゼも包含する。特に、Pseudomonas
属、Burkholderia属、Alcaligenes属、Bacillus属、Can
dida属、Geotrichum属、 Penicillium属、Rhizopus属、
Rhizomucor属、Mucor属、Aspergillus属、Thermomyces
属等の微生物が生産する酵素や豚膵臓由来の酵素が好ま
しい。これらの酵素は一般に市販されており、容易に入
手可能である。
【００１３】使用する酵素としてのリパーゼの量は、反
応時間や反応温度などの反応条件により決定されるため
特に規定されないが、一般的には反応混液１ｇ当たり１
単位（U）〜10000U、好ましくは５U〜1000U添加すれば
よく、適宜設定することができる。ここでリパーゼ（ト
リグリセリドリパーゼ）１Uとは、オリーブ油の加水分
解反応において１分間に１μmolの脂肪酸を遊離する酵
素量であり、モノグリセリドリパーゼあるいはモノおよ
びジグリセリドリパーゼ１Uとは、モノオレインの加水
分解反応において１分間に１μmolの脂肪酸を遊離する
酵素量である。酵素は遊離型のまま、あるいはイオン交
換樹脂、多孔性樹脂、セラミックス、炭酸カルシウム等
の担体に固定して使用してもよい。遊離型酵素を使用す
るときは、一旦酵素を水に溶かし、酵素水溶液を所定の
酵素量になるように反応液中に添加するのが好ましく、
このとき酵素剤はできるだけ少ない量の水で溶かした方
がよい。また、固定化酵素を使用するときには反応系に
水を加える必要はない。
応時間や反応温度などの反応条件により決定されるため
特に規定されないが、一般的には反応混液１ｇ当たり１
単位（U）〜10000U、好ましくは５U〜1000U添加すれば
よく、適宜設定することができる。ここでリパーゼ（ト
リグリセリドリパーゼ）１Uとは、オリーブ油の加水分
解反応において１分間に１μmolの脂肪酸を遊離する酵
素量であり、モノグリセリドリパーゼあるいはモノおよ
びジグリセリドリパーゼ１Uとは、モノオレインの加水
分解反応において１分間に１μmolの脂肪酸を遊離する
酵素量である。酵素は遊離型のまま、あるいはイオン交
換樹脂、多孔性樹脂、セラミックス、炭酸カルシウム等
の担体に固定して使用してもよい。遊離型酵素を使用す
るときは、一旦酵素を水に溶かし、酵素水溶液を所定の
酵素量になるように反応液中に添加するのが好ましく、
このとき酵素剤はできるだけ少ない量の水で溶かした方
がよい。また、固定化酵素を使用するときには反応系に
水を加える必要はない。
【００１４】反応系に加えるグリセリンの量は重要な因
子の一つであり、特にエステル化率とグリセリド画分の
モノグリセリド含量に影響を与える。グリセリンの量
は、通常遊離脂肪酸１モル量に対して１〜２０モル量、
好ましくは２〜１０モル量であるが、反応温度を２０℃
〜７０℃に設定したとき（第２の方法）、反応系中に存
在する酵素溶液由来の少量の水とエステル化反応によっ
て生じる水を減圧等の操作により特に除去しなくても、
グリセリン量を遊離脂肪酸１モル量に対して７モル量以
上とすることによりエステル化率を高めることができ
る。また、２０℃〜７０℃の反応におけるモノ、ジ、ト
リグリセリドの合成はグリセリン量の影響を受け難い
が、０℃〜２０℃の低温で反応させたとき（第１の方
法）、グリセリン量を遊離脂肪酸１モル量に対して７モ
ル量以上とすることによりジおよびトリグリセリドの副
成が低温反応による効果に加えて更に抑えられ、グリセ
リド画分中のモノグリセリドの割合を高めることができ
る。
子の一つであり、特にエステル化率とグリセリド画分の
モノグリセリド含量に影響を与える。グリセリンの量
は、通常遊離脂肪酸１モル量に対して１〜２０モル量、
好ましくは２〜１０モル量であるが、反応温度を２０℃
〜７０℃に設定したとき（第２の方法）、反応系中に存
在する酵素溶液由来の少量の水とエステル化反応によっ
て生じる水を減圧等の操作により特に除去しなくても、
グリセリン量を遊離脂肪酸１モル量に対して７モル量以
上とすることによりエステル化率を高めることができ
る。また、２０℃〜７０℃の反応におけるモノ、ジ、ト
リグリセリドの合成はグリセリン量の影響を受け難い
が、０℃〜２０℃の低温で反応させたとき（第１の方
法）、グリセリン量を遊離脂肪酸１モル量に対して７モ
ル量以上とすることによりジおよびトリグリセリドの副
成が低温反応による効果に加えて更に抑えられ、グリセ
リド画分中のモノグリセリドの割合を高めることができ
る。
【００１５】反応系中に存在する酵素溶液由来の水とエ
ステル化反応によって生成してくる水は、グリセリン量
を抑えた（等モルから３モル量もしくは５モル量程度）
エステル化反応に大きな影響を及ぼす。この場合の反応
（第１の方法、第２の方法を含む）において、反応途中
で例えばエステル化率が５０〜７０％に達した時点で、
または、エステル化反応を利用した第１の方法で温度を
２０℃〜７０℃に設定する場合は反応開始時点で、真空
ポンプ等を用いて減圧脱水（通常、減圧後の絶対圧力0.
5〜５mmHg程度の真空下）を行うことにより９０％以上
のエステル化率に達するまでの時間を短縮することがで
きると共に、より高いエステル化率を得ることもでき
る。なお本明細書においてエステル化率とは、反応系に
おける全遊離脂肪酸に対する、エステル（グリセリド）
生成に関与した遊離脂肪酸の割合を意味する。
ステル化反応によって生成してくる水は、グリセリン量
を抑えた（等モルから３モル量もしくは５モル量程度）
エステル化反応に大きな影響を及ぼす。この場合の反応
（第１の方法、第２の方法を含む）において、反応途中
で例えばエステル化率が５０〜７０％に達した時点で、
または、エステル化反応を利用した第１の方法で温度を
２０℃〜７０℃に設定する場合は反応開始時点で、真空
ポンプ等を用いて減圧脱水（通常、減圧後の絶対圧力0.
5〜５mmHg程度の真空下）を行うことにより９０％以上
のエステル化率に達するまでの時間を短縮することがで
きると共に、より高いエステル化率を得ることもでき
る。なお本明細書においてエステル化率とは、反応系に
おける全遊離脂肪酸に対する、エステル（グリセリド）
生成に関与した遊離脂肪酸の割合を意味する。
【００１６】エステル化反応を利用した第１の方法の好
ましい態様において、攪拌様作用により基質と酵素の混
合物をエマルションにして反応を開始後、一つの好まし
い方法は、温度を０℃〜２０℃に設定する場合は、反応
の進行と共に流動性が低下して固化した時点で攪拌様作
用を停止し、そのままエステル化率が９０％以上、好ま
しくは９５％以上に達するまで上記の所定温度に維持す
る方法である。また、別の好ましい方法は、温度を２０
℃〜７０℃に設定する場合、攪拌様作用によりエマルシ
ョンが持続するようにエステル化反応を行い、攪拌作用
を続けたままエステル化率が９０％以上、好ましくは９
５％以上に達するまで上記の所定温度に維持する方法で
ある。エステル化反応とグリセロリシス反応を利用した
第２の方法の好ましい態様は、攪拌様作用により基質と
酵素の混合物をエマルションにしてエステル化反応を行
い、エステル化率が９０％以上、好ましくは９５％以上
に達した後、反応液が固化するまで強い攪拌様作用を与
えながら急冷する方法である。
ましい態様において、攪拌様作用により基質と酵素の混
合物をエマルションにして反応を開始後、一つの好まし
い方法は、温度を０℃〜２０℃に設定する場合は、反応
の進行と共に流動性が低下して固化した時点で攪拌様作
用を停止し、そのままエステル化率が９０％以上、好ま
しくは９５％以上に達するまで上記の所定温度に維持す
る方法である。また、別の好ましい方法は、温度を２０
℃〜７０℃に設定する場合、攪拌様作用によりエマルシ
ョンが持続するようにエステル化反応を行い、攪拌作用
を続けたままエステル化率が９０％以上、好ましくは９
５％以上に達するまで上記の所定温度に維持する方法で
ある。エステル化反応とグリセロリシス反応を利用した
第２の方法の好ましい態様は、攪拌様作用により基質と
酵素の混合物をエマルションにしてエステル化反応を行
い、エステル化率が９０％以上、好ましくは９５％以上
に達した後、反応液が固化するまで強い攪拌様作用を与
えながら急冷する方法である。
【００１７】反応混液を固化させるまでのエステル化反
応は、グリセリンの液滴サイズをできるだけ小さくし、
かつ均一なエマルション状態で行うことが好ましい。グ
リセリンの液滴サイズを小さくすればするほど反応時間
を短縮することができる。エマルションを作る方法は各
種の攪拌（例えば各種形態の攪拌翼を用いた方式、スタ
ーラー、ホモゲナイザー、ミキサー）、振動（例えば超
音波処理）、ピストン方式、ハニーカム方式などの攪拌
様作用を与える様々な手段が適用できる。液滴サイズは
小さい方がグリセリンと脂肪酸の接触面積が増えるた
め、エステル化反応の効率化が計れる。このような調整
は、上記手段の出力強度等を適宜調節することにより行
うことができる。
応は、グリセリンの液滴サイズをできるだけ小さくし、
かつ均一なエマルション状態で行うことが好ましい。グ
リセリンの液滴サイズを小さくすればするほど反応時間
を短縮することができる。エマルションを作る方法は各
種の攪拌（例えば各種形態の攪拌翼を用いた方式、スタ
ーラー、ホモゲナイザー、ミキサー）、振動（例えば超
音波処理）、ピストン方式、ハニーカム方式などの攪拌
様作用を与える様々な手段が適用できる。液滴サイズは
小さい方がグリセリンと脂肪酸の接触面積が増えるた
め、エステル化反応の効率化が計れる。このような調整
は、上記手段の出力強度等を適宜調節することにより行
うことができる。
【００１８】本発明において、反応温度は特に重要であ
る。エステル化反応のみを利用してモノグリセリドを製
造するときは（第１の方法）、反応温度を０℃〜２０
℃、好ましくは０℃〜１５℃に設定すると、ジおよびト
リグリセリドの副成を抑制することができる。また、反
応温度を２０℃〜７０℃、好ましくは２５℃〜５０℃に
設定する場合は、反応開始時から減圧脱水することによ
り、ジおよびトリグリセリドの副成を抑制することがで
きる。同一反応系内でエステル化反応とグリセロリシス
反応を連続して進行させモノグリセリドを製造するとき
は（第２の方法）、まず２０℃〜７０℃、好ましくは２
５℃〜５０℃でエステル化反応を行なうことによりモ
ノ、ジグリセリドが生成する。グリセロリシス反応は０
℃〜２０℃、好ましくは０℃〜１５℃で効率よく進行し
てグリセリド画分中のモノグリセリドの割合が増加する
が、エステル化反応後、グリセロリシス反応を進行させ
るためには、上述のように強い攪拌様作用を与えながら
グリセロリシス反応の上記の所定温度まで冷却して反応
液を固化させることが好ましい。この際、冷却は可能な
限り急冷することにより速やかに固化させることが好ま
しいが、降温速度が相対的に遅くても固化させるまでに
要する時間が長くなるだけで反応に大きな影響を与える
ことはない。これらの温度設定、調節は通常の恒温装置
等を用いて行なうことができる。
る。エステル化反応のみを利用してモノグリセリドを製
造するときは（第１の方法）、反応温度を０℃〜２０
℃、好ましくは０℃〜１５℃に設定すると、ジおよびト
リグリセリドの副成を抑制することができる。また、反
応温度を２０℃〜７０℃、好ましくは２５℃〜５０℃に
設定する場合は、反応開始時から減圧脱水することによ
り、ジおよびトリグリセリドの副成を抑制することがで
きる。同一反応系内でエステル化反応とグリセロリシス
反応を連続して進行させモノグリセリドを製造するとき
は（第２の方法）、まず２０℃〜７０℃、好ましくは２
５℃〜５０℃でエステル化反応を行なうことによりモ
ノ、ジグリセリドが生成する。グリセロリシス反応は０
℃〜２０℃、好ましくは０℃〜１５℃で効率よく進行し
てグリセリド画分中のモノグリセリドの割合が増加する
が、エステル化反応後、グリセロリシス反応を進行させ
るためには、上述のように強い攪拌様作用を与えながら
グリセロリシス反応の上記の所定温度まで冷却して反応
液を固化させることが好ましい。この際、冷却は可能な
限り急冷することにより速やかに固化させることが好ま
しいが、降温速度が相対的に遅くても固化させるまでに
要する時間が長くなるだけで反応に大きな影響を与える
ことはない。これらの温度設定、調節は通常の恒温装置
等を用いて行なうことができる。
【００１９】反応に必要な時間は、温度、酵素量、グリ
セリン量等の反応条件により大きく影響を受けるため特
に規定されず、温度が高いほど、酵素量が多いほど、グ
リセリン量が多いほど反応速度は速くなるが、操作性を
考慮すると、エステル化反応のみを利用した方法（第１
の方法）では、反応温度が０℃〜２０℃の場合は、攪拌
作用を止めてからの反応時間も含めると好ましくは１０
時間〜１週間、より好ましくは２０〜９６時間程度が望
ましく、反応温度が２０℃〜７０℃で減圧脱水しながら
反応を行なう場合は好ましくは１〜96時間、より好まし
くは１０〜７２時間程度が望ましい。また、同一反応系
内でエステル化反応とグリセロリシス反応を連続して進
行させる方法（第２の方法）では、反応温度が２０℃〜
７０℃でのエステル化反応に要する時間は好ましくは１
〜７２時間、より好ましくは５〜７２時間程度が望まし
く、その後の反応温度０℃〜２０℃でのジグリセリドを
モノグリセリドに変換するグリセロリシス反応は、急冷
固化させた反応液を通常５時間〜２ヶ月間、好ましくは
１〜３０日、より好ましくは１〜１０日程度放置してお
くことが望ましい。この放置時間は、急冷しながら固化
させる上記攪拌様作用手段に大きく依存し、例えば、ホ
モゲナイザーや食品加工用のハンディーミキサーなどを
用いた強い攪拌によりグリセリン液滴サイズの小さいエ
マルションを作り、固化によりこの状態を維持すること
ができれば反応時間は大幅に短縮できる。なおエステル
化反応において、反応液を泡立てて固化させると共役脂
肪酸が酸化あるいは異性化等の反応を受け易くなるの
で、泡立てないようにあるいは窒素気流下で固化させる
ことが好ましい。
セリン量等の反応条件により大きく影響を受けるため特
に規定されず、温度が高いほど、酵素量が多いほど、グ
リセリン量が多いほど反応速度は速くなるが、操作性を
考慮すると、エステル化反応のみを利用した方法（第１
の方法）では、反応温度が０℃〜２０℃の場合は、攪拌
作用を止めてからの反応時間も含めると好ましくは１０
時間〜１週間、より好ましくは２０〜９６時間程度が望
ましく、反応温度が２０℃〜７０℃で減圧脱水しながら
反応を行なう場合は好ましくは１〜96時間、より好まし
くは１０〜７２時間程度が望ましい。また、同一反応系
内でエステル化反応とグリセロリシス反応を連続して進
行させる方法（第２の方法）では、反応温度が２０℃〜
７０℃でのエステル化反応に要する時間は好ましくは１
〜７２時間、より好ましくは５〜７２時間程度が望まし
く、その後の反応温度０℃〜２０℃でのジグリセリドを
モノグリセリドに変換するグリセロリシス反応は、急冷
固化させた反応液を通常５時間〜２ヶ月間、好ましくは
１〜３０日、より好ましくは１〜１０日程度放置してお
くことが望ましい。この放置時間は、急冷しながら固化
させる上記攪拌様作用手段に大きく依存し、例えば、ホ
モゲナイザーや食品加工用のハンディーミキサーなどを
用いた強い攪拌によりグリセリン液滴サイズの小さいエ
マルションを作り、固化によりこの状態を維持すること
ができれば反応時間は大幅に短縮できる。なおエステル
化反応において、反応液を泡立てて固化させると共役脂
肪酸が酸化あるいは異性化等の反応を受け易くなるの
で、泡立てないようにあるいは窒素気流下で固化させる
ことが好ましい。
【００２０】以上のように、リパーゼのエステル化反応
を利用した第１の方法において、攪拌様作用、グリセリ
ン濃度の調節、前述のように反応途中での減圧脱水を適
宜行なうか反応開始時から減圧脱水を行なうことによ
り、エステル化速度が上昇し短時間で９０％以上、好ま
しくは９５％以上のエステル化率が得られ、反応液の固
化後の低温放置により、最終的に反応液中のグリセリド
画分のモノグリセリド含量は８０％以上に達する。ま
た、リパーゼのエステル化反応とグリセロリシス反応を
同一反応系内で連続して行う第２の方法において、特に
反応途中での減圧脱水を適宜行なうことによりエステル
化率が９０％以上、好ましくは９５％以上に達し、この
状態で激しい攪拌様作用を加えながら好ましくは急冷し
て反応液を完全に固化させ、低温で放置してグリセロリ
シス反応を継続することにより、反応液中のグリセリド
画分のモノグリセリド含量は８０％以上に達する。上述
のような方法により、本発明の共役脂肪酸含有モノグリ
セリドを主成分とする生成物を製造することができる。
を利用した第１の方法において、攪拌様作用、グリセリ
ン濃度の調節、前述のように反応途中での減圧脱水を適
宜行なうか反応開始時から減圧脱水を行なうことによ
り、エステル化速度が上昇し短時間で９０％以上、好ま
しくは９５％以上のエステル化率が得られ、反応液の固
化後の低温放置により、最終的に反応液中のグリセリド
画分のモノグリセリド含量は８０％以上に達する。ま
た、リパーゼのエステル化反応とグリセロリシス反応を
同一反応系内で連続して行う第２の方法において、特に
反応途中での減圧脱水を適宜行なうことによりエステル
化率が９０％以上、好ましくは９５％以上に達し、この
状態で激しい攪拌様作用を加えながら好ましくは急冷し
て反応液を完全に固化させ、低温で放置してグリセロリ
シス反応を継続することにより、反応液中のグリセリド
画分のモノグリセリド含量は８０％以上に達する。上述
のような方法により、本発明の共役脂肪酸含有モノグリ
セリドを主成分とする生成物を製造することができる。
【００２１】反応後、所望により反応液（上記共役脂肪
酸含有モノグリセリドを主成分とする生成物）からモノ
グリセリドを精製するには、合目的的な任意の方法を採
用することができるが、例えば通常の脱酸、溶媒中での
脱酸、膜分離、蒸留、イオン交換クロマトグラフィー
等、およびこれらの方法の任意の組み合わせにより、遊
離脂肪酸を除去してモノグリセリドを純度よく精製する
ことができる。このような精製には、蒸留法を組合せた
方法が特に効果的であり、具体的には、例えば反応液を
分子蒸留に負荷し、未反応の遊離脂肪酸を留分として除
去した後、モノグリセリドを蒸留・留出させることによ
って精製したモノグリセリド画分を得ることができる。
酸含有モノグリセリドを主成分とする生成物）からモノ
グリセリドを精製するには、合目的的な任意の方法を採
用することができるが、例えば通常の脱酸、溶媒中での
脱酸、膜分離、蒸留、イオン交換クロマトグラフィー
等、およびこれらの方法の任意の組み合わせにより、遊
離脂肪酸を除去してモノグリセリドを純度よく精製する
ことができる。このような精製には、蒸留法を組合せた
方法が特に効果的であり、具体的には、例えば反応液を
分子蒸留に負荷し、未反応の遊離脂肪酸を留分として除
去した後、モノグリセリドを蒸留・留出させることによ
って精製したモノグリセリド画分を得ることができる。
【００２２】上記精製法に関連し、本発明は下記のよう
なグリセリドの脱酸・精製方法にも関する。遊離脂肪酸
が混在するモノグリセリドを含有するまたは主成分とす
るグリセリド生成物にアルカリを添加し、それにより該
生成物中に存在する遊離脂肪酸を中和してケン化物を生
成させ、さらに分子量がモノグリセリドよりも大きくか
つケン化物と相溶性を有する物質を添加してケン化物の
濃度を低下させた後、これを分子蒸留に付して該ケン化
物を蒸留残渣として除去することを特徴とする、モノグ
リセリドを含有するまたは主成分とするグリセリド生成
物の脱酸・精製方法。
なグリセリドの脱酸・精製方法にも関する。遊離脂肪酸
が混在するモノグリセリドを含有するまたは主成分とす
るグリセリド生成物にアルカリを添加し、それにより該
生成物中に存在する遊離脂肪酸を中和してケン化物を生
成させ、さらに分子量がモノグリセリドよりも大きくか
つケン化物と相溶性を有する物質を添加してケン化物の
濃度を低下させた後、これを分子蒸留に付して該ケン化
物を蒸留残渣として除去することを特徴とする、モノグ
リセリドを含有するまたは主成分とするグリセリド生成
物の脱酸・精製方法。
【００２３】上記の脱酸・精製方法は、上記共役脂肪酸
含有モノグリセリド（代表的には共役リノール酸含有モ
ノグリセリド）を主成分とする生成物に含まれている遊
離脂肪酸が少ない場合（通常酸価２０ｍｇKOH／ｇ以
下）に有効に使用することができる。また、上記［００
２１］に記載された蒸留脱酸において、遊離脂肪酸を留
出除去した残渣画分（共役脂肪酸含有モノグリセリドが
主成分）に遊離脂肪酸が混在し、残渣画分の蒸留によっ
て留分として得られる共役脂肪酸モノグリセリド画分に
なお遊離脂肪酸の混在が予想され更なる精製を望む場合
にも、残渣画分を「遊離脂肪酸が混在するモノグリセリ
ドを主成分とするグリセリド生成物」としてこの脱酸・
精製方法を用いることができる。好ましい例を以下に示
す。
含有モノグリセリド（代表的には共役リノール酸含有モ
ノグリセリド）を主成分とする生成物に含まれている遊
離脂肪酸が少ない場合（通常酸価２０ｍｇKOH／ｇ以
下）に有効に使用することができる。また、上記［００
２１］に記載された蒸留脱酸において、遊離脂肪酸を留
出除去した残渣画分（共役脂肪酸含有モノグリセリドが
主成分）に遊離脂肪酸が混在し、残渣画分の蒸留によっ
て留分として得られる共役脂肪酸モノグリセリド画分に
なお遊離脂肪酸の混在が予想され更なる精製を望む場合
にも、残渣画分を「遊離脂肪酸が混在するモノグリセリ
ドを主成分とするグリセリド生成物」としてこの脱酸・
精製方法を用いることができる。好ましい例を以下に示
す。
【００２４】まず、遊離脂肪酸が混在するモノグリセリ
ドを主成分とするグリセリド生成物中になお混在する遊
離脂肪酸に対して等モルのアルカリ（好ましくは水酸化
ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムなど）
を加え、酸価を０〜１０ｍｇKOH／ｇ、好ましくは０〜
５ｍｇKOH／ｇ、さらに好ましくは０〜３ｍｇKOH／ｇま
で低下させ、脂肪酸のケン化物を生成させる。次いで該
ケン化物と相溶性（もしくは相互溶解性）を有しかつモ
ノグリセリドより分子量もしくは沸点の高い物質を添加
し、180℃〜250℃、0.5〜0.005mmHgの条件での分子蒸留
に付する。このような物質としては、例えばジグリセリ
ドやトリグリセリドが好ましいが、その他コレステロー
ルエステル、ワックス類、糖エステル等も使用できる。
分子蒸留は通常の分子蒸留装置を用いて行うことができ
る。分子蒸留の結果、モノグリセリドは留分として回収
でき、ケン化物、添加したケン化物と相溶性を有する物
質、および反応液（モノグリセリド画分）中に夾雑して
いる高沸点物質（ジグリセリドやトリグリセリドが主成
分）は蒸留残渣として除去することができる。なお、ケ
ン化物に相溶性を有する物質の添加量は適宜設定できる
が、蒸留残渣の粘性を蒸留操作が妨害されない程度まで
低下させることのできる最少量に設定したとき、最も効
率よくモノグリセリドを蒸留・精製することができる。
ドを主成分とするグリセリド生成物中になお混在する遊
離脂肪酸に対して等モルのアルカリ（好ましくは水酸化
ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムなど）
を加え、酸価を０〜１０ｍｇKOH／ｇ、好ましくは０〜
５ｍｇKOH／ｇ、さらに好ましくは０〜３ｍｇKOH／ｇま
で低下させ、脂肪酸のケン化物を生成させる。次いで該
ケン化物と相溶性（もしくは相互溶解性）を有しかつモ
ノグリセリドより分子量もしくは沸点の高い物質を添加
し、180℃〜250℃、0.5〜0.005mmHgの条件での分子蒸留
に付する。このような物質としては、例えばジグリセリ
ドやトリグリセリドが好ましいが、その他コレステロー
ルエステル、ワックス類、糖エステル等も使用できる。
分子蒸留は通常の分子蒸留装置を用いて行うことができ
る。分子蒸留の結果、モノグリセリドは留分として回収
でき、ケン化物、添加したケン化物と相溶性を有する物
質、および反応液（モノグリセリド画分）中に夾雑して
いる高沸点物質（ジグリセリドやトリグリセリドが主成
分）は蒸留残渣として除去することができる。なお、ケ
ン化物に相溶性を有する物質の添加量は適宜設定できる
が、蒸留残渣の粘性を蒸留操作が妨害されない程度まで
低下させることのできる最少量に設定したとき、最も効
率よくモノグリセリドを蒸留・精製することができる。
【００２５】精製の対象物、すなわち、遊離脂肪酸が混
在するモノグリセリドを含有するまたは主成分とするグ
リセリド生成物としては、上述のように本発明方法で得
られた共役脂肪酸含有モノグリセリドを主成分とする生
成物およびその部分精製物（反応液から遊離脂肪酸の一
部を分子蒸留によって留出除去した部分精製物）の他、
通常の化学的あるいは酵素的方法で得られた非共役脂肪
酸含有グリセリド生成物（ジ、トリグリセリドを含んで
いてもよい）あるいはその部分精製物など、遊離脂肪酸
が混在するモノグリセリドを含有する任意のグリセリド
生成物を用いることもできる。
在するモノグリセリドを含有するまたは主成分とするグ
リセリド生成物としては、上述のように本発明方法で得
られた共役脂肪酸含有モノグリセリドを主成分とする生
成物およびその部分精製物（反応液から遊離脂肪酸の一
部を分子蒸留によって留出除去した部分精製物）の他、
通常の化学的あるいは酵素的方法で得られた非共役脂肪
酸含有グリセリド生成物（ジ、トリグリセリドを含んで
いてもよい）あるいはその部分精製物など、遊離脂肪酸
が混在するモノグリセリドを含有する任意のグリセリド
生成物を用いることもできる。
【００２６】本発明において、エステル化率は、反応前
の遊離脂肪酸量に対する反応脂肪酸量（反応によって消
費された脂肪酸量）で表し、遊離脂肪酸量はアルカリ滴
定による酸価から求めた。グリセリド組成はベンゼン／
クロロホルム／酢酸（５０：２０：０．５）で展開した
後、ＴＬＣ／ＦＩＤアナライザー（イヤトロスキャン）
で定量した。モノグリセリド中の脂肪酸組成は構成脂肪
酸をメチルエステル化し、ＤＢ−２３キャピラリーカラ
ム（0.25mm×30mm）を装着したガスクロマトグラフィー
により分析した。
の遊離脂肪酸量に対する反応脂肪酸量（反応によって消
費された脂肪酸量）で表し、遊離脂肪酸量はアルカリ滴
定による酸価から求めた。グリセリド組成はベンゼン／
クロロホルム／酢酸（５０：２０：０．５）で展開した
後、ＴＬＣ／ＦＩＤアナライザー（イヤトロスキャン）
で定量した。モノグリセリド中の脂肪酸組成は構成脂肪
酸をメチルエステル化し、ＤＢ−２３キャピラリーカラ
ム（0.25mm×30mm）を装着したガスクロマトグラフィー
により分析した。
【００２７】
【実施例】以下に、実施例により本発明を更に具体的に
説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定され
るものではない。
説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定され
るものではない。
【００２８】［実施例１］ グリセリン量の影響：Peni
cillium camembertii モノおよびジグリセリドリパーゼ 共役リノール酸を含む遊離脂肪酸の混合物はリノール油
脂(株)の製品 CLA-80(c9, t11-CLA, 33.1%; t10,c12-CL
A, 33.9% c9,c11-CLA, 0.9%, c10,c12-CLA, 1.4%, othe
r CLA,1.8%)を用いた。反応は50ml容バイアルビン中、
スターラーで攪拌(500rpm)しながら行った。CLA-80/グ
リセリン（＝1：1〜10,mol/mol）混液５gとPenicillium
camembertii モノ及びジグリセリドリパーゼの水溶液
（200mg/ml, 10000U/ml; 天野エンザイム; リパーゼG）
0.1mlからなる反応液を30℃で24時間攪拌しながらイン
キュベートした。反応液の組成と反応後のエステル化率
を表1に示す。エステル化反応を30℃で行ったとき、遊
離脂肪酸１モル量に対して7モル量のグリセリンを使用
すると減圧脱水しなくても90%以上のエステル化率が得
られた。また、本反応においてトリグリセリドは全く合
成されず、グリセリド画分のモノグリセリドとジグリセ
リドの生成量は、基質として用いたグリセリン量に関係
なくほぼ等量合成された。 表１ 脂肪酸/グリセリン エステル化率 反応液の組成（％） (モル/モル) （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 1：1 64.0 36.0 30.2 33.8 1：2 78.8 21.2 38.8 40.0 1：5 83.4 16.6 40.7 42.7 1：7 91.1 8.9 43.0 48.1 1：10 91.9 8.1 43.6 48.2
cillium camembertii モノおよびジグリセリドリパーゼ 共役リノール酸を含む遊離脂肪酸の混合物はリノール油
脂(株)の製品 CLA-80(c9, t11-CLA, 33.1%; t10,c12-CL
A, 33.9% c9,c11-CLA, 0.9%, c10,c12-CLA, 1.4%, othe
r CLA,1.8%)を用いた。反応は50ml容バイアルビン中、
スターラーで攪拌(500rpm)しながら行った。CLA-80/グ
リセリン（＝1：1〜10,mol/mol）混液５gとPenicillium
camembertii モノ及びジグリセリドリパーゼの水溶液
（200mg/ml, 10000U/ml; 天野エンザイム; リパーゼG）
0.1mlからなる反応液を30℃で24時間攪拌しながらイン
キュベートした。反応液の組成と反応後のエステル化率
を表1に示す。エステル化反応を30℃で行ったとき、遊
離脂肪酸１モル量に対して7モル量のグリセリンを使用
すると減圧脱水しなくても90%以上のエステル化率が得
られた。また、本反応においてトリグリセリドは全く合
成されず、グリセリド画分のモノグリセリドとジグリセ
リドの生成量は、基質として用いたグリセリン量に関係
なくほぼ等量合成された。 表１ 脂肪酸/グリセリン エステル化率 反応液の組成（％） (モル/モル) （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 1：1 64.0 36.0 30.2 33.8 1：2 78.8 21.2 38.8 40.0 1：5 83.4 16.6 40.7 42.7 1：7 91.1 8.9 43.0 48.1 1：10 91.9 8.1 43.6 48.2
【００２９】［実施例２］ 温度の影響：Penicillium
camembertii モノ及びジグリセリドリパーゼ CLA-80/グリセリン（1:5,mol/mol）５gとPenicillium c
amembertiiモノ及びジグリセリドリパーゼの水溶液（10
000U/ml）0.1mlからなる反応液を5℃から50℃の温度領
域で、スターラーで攪拌(500rpm)しながらインキュベー
トした。反応5時間及び24時間後のエステル化率と反応
液の組成を表2に示す。反応温度の上昇と共にエステル
化の速度も上昇した。反応温度を30℃以上に設定すると
ジグリセリドが副成してくるが、15℃以下の反応ではモ
ノグリセリドからジグリセリドへの変換は抑えられた。 表２ 反応温度 反応時間 エステル化率 反応液の組成（%） （℃） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 5 5 49.5 50.5 49.1 0.4 24 88.6 11.4 83.8 4.8 15 5 66.8 33.1 64.8 2.1 24 87.9 12.1 80.5 7.4 30 5 81.1 18.9 55.4 25.7 24 85.8 14.2 44.7 41.1 40 5 82.6 17.4 58.6 24.0 24 86.1 13.9 46.9 39.2 50 5 82.1 17.9 55.5 26.4 24 86.1 13.9 45.3 40.8
camembertii モノ及びジグリセリドリパーゼ CLA-80/グリセリン（1:5,mol/mol）５gとPenicillium c
amembertiiモノ及びジグリセリドリパーゼの水溶液（10
000U/ml）0.1mlからなる反応液を5℃から50℃の温度領
域で、スターラーで攪拌(500rpm)しながらインキュベー
トした。反応5時間及び24時間後のエステル化率と反応
液の組成を表2に示す。反応温度の上昇と共にエステル
化の速度も上昇した。反応温度を30℃以上に設定すると
ジグリセリドが副成してくるが、15℃以下の反応ではモ
ノグリセリドからジグリセリドへの変換は抑えられた。 表２ 反応温度 反応時間 エステル化率 反応液の組成（%） （℃） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 5 5 49.5 50.5 49.1 0.4 24 88.6 11.4 83.8 4.8 15 5 66.8 33.1 64.8 2.1 24 87.9 12.1 80.5 7.4 30 5 81.1 18.9 55.4 25.7 24 85.8 14.2 44.7 41.1 40 5 82.6 17.4 58.6 24.0 24 86.1 13.9 46.9 39.2 50 5 82.1 17.9 55.5 26.4 24 86.1 13.9 45.3 40.8
【００３０】［実施例３］ Penicillium camembertii
モノ及びジグリセリドリパーゼを触媒としたエステル化
反応だけを利用して共役リノール酸含有モノグリセリド
を製造する方法 反応は1000ml容量のマル底４つ口フラスコを用い、攪拌
はウオールウェッター(関西化学機械製作(株)製)を用い
て行った。CLA-80/グリセリン（1:3, mol/mol）300gとP
enicillium camembertiiモノ及びジグリセリドリパーゼ
の水溶液（10000 U/ml）６mlからなる反応液を5℃で攪
拌(250rpm)しながら反応を開始した。反応経過に伴い反
応液の流動性が低下してきたため、エステル化率が38.7
％に達した10時間後に攪拌速度を100rpmまで落とし、エ
ステル化率が48%に達した12時間後に50 rpm まで落とし
た。反応24時間後にエステル化率は88.2%に達し、反応
液は完全に固化して攪拌の効果が全く認められなかった
ので攪拌を停止した。同時に、エステル化率をさらに高
めるために、静置のまま3mmHg の減圧下で脱水しながら
さらに48時間(全反応時間は72時間)反応を継続した。反
応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成を表3に示
す。エステル化率が一定値に達した後に、減圧脱水する
ことによりエステル化率を97.1%にまで高めることがで
きた。また、低温で反応させたときジグリセリドの副成
はほとんど認められず、反応終了時のグリセリド画分の
モノグリセリド含量は97.0％に達した。 表３ 反応時間 エステル化率 反応液の組成（%） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 0 0 100 0 0 2 2.1 97.9 1.7 0.4 4 6.2 93.8 5.4 0.7 7 15.0 85.0 14.4 0.6 10 38.7 62.3 36.4 1.3 12 48.0 52.0 46.8 1.2 24 88.2 11.8 84.4 3.7 28 92.9 7.1 89.3 3.6 34 94.2 5.8 90.8 3.4 48 96.5 3.5 94.0 2.5 72 97.1 2.9 94.2 2.9
モノ及びジグリセリドリパーゼを触媒としたエステル化
反応だけを利用して共役リノール酸含有モノグリセリド
を製造する方法 反応は1000ml容量のマル底４つ口フラスコを用い、攪拌
はウオールウェッター(関西化学機械製作(株)製)を用い
て行った。CLA-80/グリセリン（1:3, mol/mol）300gとP
enicillium camembertiiモノ及びジグリセリドリパーゼ
の水溶液（10000 U/ml）６mlからなる反応液を5℃で攪
拌(250rpm)しながら反応を開始した。反応経過に伴い反
応液の流動性が低下してきたため、エステル化率が38.7
％に達した10時間後に攪拌速度を100rpmまで落とし、エ
ステル化率が48%に達した12時間後に50 rpm まで落とし
た。反応24時間後にエステル化率は88.2%に達し、反応
液は完全に固化して攪拌の効果が全く認められなかった
ので攪拌を停止した。同時に、エステル化率をさらに高
めるために、静置のまま3mmHg の減圧下で脱水しながら
さらに48時間(全反応時間は72時間)反応を継続した。反
応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成を表3に示
す。エステル化率が一定値に達した後に、減圧脱水する
ことによりエステル化率を97.1%にまで高めることがで
きた。また、低温で反応させたときジグリセリドの副成
はほとんど認められず、反応終了時のグリセリド画分の
モノグリセリド含量は97.0％に達した。 表３ 反応時間 エステル化率 反応液の組成（%） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 0 0 100 0 0 2 2.1 97.9 1.7 0.4 4 6.2 93.8 5.4 0.7 7 15.0 85.0 14.4 0.6 10 38.7 62.3 36.4 1.3 12 48.0 52.0 46.8 1.2 24 88.2 11.8 84.4 3.7 28 92.9 7.1 89.3 3.6 34 94.2 5.8 90.8 3.4 48 96.5 3.5 94.0 2.5 72 97.1 2.9 94.2 2.9
【００３１】［実施例４］ Penicillium camembertii
モノ及びジグリセリドリパーゼを触媒としたエステル化
反応だけを利用して共役リノール酸含有モノグリセリド
を製造する方法 反応は1000ml容量のマル底４つ口フラスコを用い、攪拌
はウオールウェッター(関西化学機械製作(株)製)を用い
て行った。CLA-80/グリセリン（1:5, mol/mol）300gとP
enicillium camembertiiモノ及びジグリセリドリパーゼ
の水溶液（10000 U/ml）６mlからなる反応液を30℃で攪
拌(280rpm)しながら反応を開始した。反応開始と共に5m
mHgの減圧下で脱水を開始し、48時間反応を継続した。
反応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成を表4に
示す。反応開始時から減圧脱水することにより、反応液
が均一な液体状態のままでエステル化率を97.0%まで高
めることができた。また、ジグリセリドの副成はほとん
ど認められず、反応終了時のグリセリド画分のモノグリ
セリド含量は89.3％に達した。 表４ 反応時間 エステル化率 反応液の組成（%） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 0 0 100 0 0 2 44.2 55.8 42.4 1.8 4 73.5 26.6 71.0 2.4 7 85.1 14.9 81.3 3.8 9 87.5 12.5 81.6 5.9 24 94.8 5.2 89.8 5.0 28 95.6 4.4 89.0 6.6 34 97.2 2.8 90.0 7.2 48 97.0 2.9 89.3 7.8
モノ及びジグリセリドリパーゼを触媒としたエステル化
反応だけを利用して共役リノール酸含有モノグリセリド
を製造する方法 反応は1000ml容量のマル底４つ口フラスコを用い、攪拌
はウオールウェッター(関西化学機械製作(株)製)を用い
て行った。CLA-80/グリセリン（1:5, mol/mol）300gとP
enicillium camembertiiモノ及びジグリセリドリパーゼ
の水溶液（10000 U/ml）６mlからなる反応液を30℃で攪
拌(280rpm)しながら反応を開始した。反応開始と共に5m
mHgの減圧下で脱水を開始し、48時間反応を継続した。
反応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成を表4に
示す。反応開始時から減圧脱水することにより、反応液
が均一な液体状態のままでエステル化率を97.0%まで高
めることができた。また、ジグリセリドの副成はほとん
ど認められず、反応終了時のグリセリド画分のモノグリ
セリド含量は89.3％に達した。 表４ 反応時間 エステル化率 反応液の組成（%） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 0 0 100 0 0 2 44.2 55.8 42.4 1.8 4 73.5 26.6 71.0 2.4 7 85.1 14.9 81.3 3.8 9 87.5 12.5 81.6 5.9 24 94.8 5.2 89.8 5.0 28 95.6 4.4 89.0 6.6 34 97.2 2.8 90.0 7.2 48 97.0 2.9 89.3 7.8
【００３２】［実施例５］ Penicillium camembertii
モノ及びジグリセリドリパーゼを触媒として用い、エス
テル化反応とグリセロリシス反応を利用して共役リノー
ル酸含有モノグリセリドを製造する方法 反応は実施例3と同じ装置を用いて同じ反応液組成で、3
0℃、250rpm の攪拌で開始した。エステル化率が84.0%
に達した9時間後、3mmHgの減圧下で脱水しながら72時間
まで攪拌しながら反応を継続した。この反応液をビーカ
ーに取り出し、氷水につけて料理用ハンドミキサーで攪
拌しながら反応液を完全に固化させた後、5℃で1週間放
置した。反応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成
を表5に示す。エステル化率が一定値に達した後に、減
圧脱水することによりエステル化率は72時間後に96.5%
まで上昇した。この反応液中のグリセリド画分にはモノ
グリセリドとジグリセリドがほぼ等量存在した。取り出
した反応液を固化させてから5℃で放置すると、ジグリ
セリドはグリセロリシスを受けてモノグリセリドに変換
され、1週間後（全反応日数10日）、エステル化率は96.
9%でほとんど変化しなかったが、グリセリド画分のモノ
グリセリド含量は95.0％まで上昇した。 表５ 反応時間 エステル化率 反応液の組成（％） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 0 0 100 0 0 1 48.3 51.7 46.2 2.1 2 71.4 28.6 66.9 4.5 4 80.8 19.2 64.6 16.2 7 81.9 18.1 56.6 25.3 9 84.0 16.0 59.7 24.3 24 90.6 9.4 48.7 41.9 48 94.6 5.4 46.5 48.1 72 96.5 3.5 47.6 48.9 120 97.3 2.7 69.1 28.2 168 96.5 3.5 84.1 11.4 240 96.9 3.1 92.1 4.8
モノ及びジグリセリドリパーゼを触媒として用い、エス
テル化反応とグリセロリシス反応を利用して共役リノー
ル酸含有モノグリセリドを製造する方法 反応は実施例3と同じ装置を用いて同じ反応液組成で、3
0℃、250rpm の攪拌で開始した。エステル化率が84.0%
に達した9時間後、3mmHgの減圧下で脱水しながら72時間
まで攪拌しながら反応を継続した。この反応液をビーカ
ーに取り出し、氷水につけて料理用ハンドミキサーで攪
拌しながら反応液を完全に固化させた後、5℃で1週間放
置した。反応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成
を表5に示す。エステル化率が一定値に達した後に、減
圧脱水することによりエステル化率は72時間後に96.5%
まで上昇した。この反応液中のグリセリド画分にはモノ
グリセリドとジグリセリドがほぼ等量存在した。取り出
した反応液を固化させてから5℃で放置すると、ジグリ
セリドはグリセロリシスを受けてモノグリセリドに変換
され、1週間後（全反応日数10日）、エステル化率は96.
9%でほとんど変化しなかったが、グリセリド画分のモノ
グリセリド含量は95.0％まで上昇した。 表５ 反応時間 エステル化率 反応液の組成（％） （時間） （％） 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド 0 0 100 0 0 1 48.3 51.7 46.2 2.1 2 71.4 28.6 66.9 4.5 4 80.8 19.2 64.6 16.2 7 81.9 18.1 56.6 25.3 9 84.0 16.0 59.7 24.3 24 90.6 9.4 48.7 41.9 48 94.6 5.4 46.5 48.1 72 96.5 3.5 47.6 48.9 120 97.3 2.7 69.1 28.2 168 96.5 3.5 84.1 11.4 240 96.9 3.1 92.1 4.8
【００３３】［実施例６］ Candida rugosaリパーゼを
触媒としたエステル化反応だけを利用して共役リノール
酸モノグリセリドを製造する方法 反応は実施例3と同じ装置を用いて行った。CLA-80/グリ
セリン（1:5, mol/mol）300g とCandida rugosa リパー
ゼの水溶液（100mg/ml; 35000U/ml;名糖産業;リパーゼ
OF）7.5mlからなる反応液を5℃で攪拌(250rpm)しながら
反応を開始した。反応経過に伴い反応液の流動性が低下
してきたため、エステル化率が37.7%に達した4時間後に
攪拌速度を100 rpmまで落とし、エステル化率が55.8%に
達した7時間後に50 rpmまで落とした。反応24時間後に
エステル化率は88.1%に達し、反応液は完全に固化して
攪拌の効果が全く認められなかったので攪拌を停止し
た。本反応で、減圧脱水しなくてもエステル化率は95%
以上に達したので、反応途中での脱水は行わなかった。
反応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成を表６に
示す。この低温エステル化反応により、ジグリセリド及
びトリグリセリドの副成はほとんど認められず、反応終
了時のグリセリド画分のモノグリセリド含量は95.4%ま
で上昇した。 表６ 反応時間 エステル 反応液の組成（％） （時間） 化率（％）脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド トリグリセリド 0 0 100 0 0 0 2 29.3 70.7 26.9 2.4 0 4 37.7 62.3 33.7 4.0 0 7 55.8 44.2 49.7 6.1 0 10 62.9 37.1 51.5 11.4 0 24 88.1 11.9 76.9 9.9 1.3 48 94.4 5.6 86.5 6.9 1.0 72 96.0 4.0 91.6 3.2 1.1
触媒としたエステル化反応だけを利用して共役リノール
酸モノグリセリドを製造する方法 反応は実施例3と同じ装置を用いて行った。CLA-80/グリ
セリン（1:5, mol/mol）300g とCandida rugosa リパー
ゼの水溶液（100mg/ml; 35000U/ml;名糖産業;リパーゼ
OF）7.5mlからなる反応液を5℃で攪拌(250rpm)しながら
反応を開始した。反応経過に伴い反応液の流動性が低下
してきたため、エステル化率が37.7%に達した4時間後に
攪拌速度を100 rpmまで落とし、エステル化率が55.8%に
達した7時間後に50 rpmまで落とした。反応24時間後に
エステル化率は88.1%に達し、反応液は完全に固化して
攪拌の効果が全く認められなかったので攪拌を停止し
た。本反応で、減圧脱水しなくてもエステル化率は95%
以上に達したので、反応途中での脱水は行わなかった。
反応経過に伴うエステル化率及び反応液の組成を表６に
示す。この低温エステル化反応により、ジグリセリド及
びトリグリセリドの副成はほとんど認められず、反応終
了時のグリセリド画分のモノグリセリド含量は95.4%ま
で上昇した。 表６ 反応時間 エステル 反応液の組成（％） （時間） 化率（％）脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド トリグリセリド 0 0 100 0 0 0 2 29.3 70.7 26.9 2.4 0 4 37.7 62.3 33.7 4.0 0 7 55.8 44.2 49.7 6.1 0 10 62.9 37.1 51.5 11.4 0 24 88.1 11.9 76.9 9.9 1.3 48 94.4 5.6 86.5 6.9 1.0 72 96.0 4.0 91.6 3.2 1.1
【００３４】［実施例７］ Alcaligenes リパーゼを触
媒として用い、エステル化反応とグリセロリシス反応を
利用して共役リノール酸含有モノグリセリドを製造する
方法 反応は実施例３と同じ装置を用いて行った。CLA-80/グ
リセリン（1:3, mol/mol）300gとAlcaligenes sp.リパ
ーゼの水溶液（50mg/ml; 1800U/ml; 名糖産業;リパーゼ
OF）33mlからなる反応液を30℃、250 rpmで攪拌しなが
ら反応を開始した。エステル化率が36.4％に達した20時
間後、3mmHgの減圧下で脱水しながら30時間まで攪拌し
ながら反応を継続した。この反応液をビーカーに取り出
し、氷水につけて料理用ハンディーミキサーで攪拌した
が、反応液は固化しなかったのでそのまま5℃で1日放置
した。反応液は固化していたが、加温して流動性を与え
た後、氷水につけてミキサーで攪拌しながら反応液を完
全に固化させた後、5℃で4日放置した。反応経過に伴う
エステル化率及び反応液の組成を表７に示す。エステル
化率が一定値に達した後に、減圧脱水することによりエ
ステル化率は30時間後に96.4％まで上昇した。この反応
液中のグリセリド画分にはモノ、ジ、トリグリセリドが
存在した。取り出した反応液を5℃で放置し、途中で反
応液を攪拌固化させることにより、ジおよびトリグリセ
リドはグリセロリシスを受けてモノグリセリドに変換さ
れた。全反応時間、150時間でのグリセリド画分のモノ
グリセリド含量は90.3％まで上昇し、低温放置によりエ
ステル化率は全く変化しなかった。 表７ 反応時間 エステル 反応液の組成（％） （時間） 化率(%) 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド トリグリセリド 0 0 100 0 0 0 7 23.4 76.6 7.4 10.1 5.9 20 36.4 63.6 12.2 16.6 7.7 25 85.8 14.2 29.8 41.0 15.0 30 96.4 3.6 14.9 54.3 27.2 54 95.1 4.9 50.9 34.2 10.0 102 96.8 3.2 76.3 19.4 1.1 150 96.2 3.8 86.9 8.4 0.9
媒として用い、エステル化反応とグリセロリシス反応を
利用して共役リノール酸含有モノグリセリドを製造する
方法 反応は実施例３と同じ装置を用いて行った。CLA-80/グ
リセリン（1:3, mol/mol）300gとAlcaligenes sp.リパ
ーゼの水溶液（50mg/ml; 1800U/ml; 名糖産業;リパーゼ
OF）33mlからなる反応液を30℃、250 rpmで攪拌しなが
ら反応を開始した。エステル化率が36.4％に達した20時
間後、3mmHgの減圧下で脱水しながら30時間まで攪拌し
ながら反応を継続した。この反応液をビーカーに取り出
し、氷水につけて料理用ハンディーミキサーで攪拌した
が、反応液は固化しなかったのでそのまま5℃で1日放置
した。反応液は固化していたが、加温して流動性を与え
た後、氷水につけてミキサーで攪拌しながら反応液を完
全に固化させた後、5℃で4日放置した。反応経過に伴う
エステル化率及び反応液の組成を表７に示す。エステル
化率が一定値に達した後に、減圧脱水することによりエ
ステル化率は30時間後に96.4％まで上昇した。この反応
液中のグリセリド画分にはモノ、ジ、トリグリセリドが
存在した。取り出した反応液を5℃で放置し、途中で反
応液を攪拌固化させることにより、ジおよびトリグリセ
リドはグリセロリシスを受けてモノグリセリドに変換さ
れた。全反応時間、150時間でのグリセリド画分のモノ
グリセリド含量は90.3％まで上昇し、低温放置によりエ
ステル化率は全く変化しなかった。 表７ 反応時間 エステル 反応液の組成（％） （時間） 化率(%) 脂肪酸 モノグリセリド ジグリセリド トリグリセリド 0 0 100 0 0 0 7 23.4 76.6 7.4 10.1 5.9 20 36.4 63.6 12.2 16.6 7.7 25 85.8 14.2 29.8 41.0 15.0 30 96.4 3.6 14.9 54.3 27.2 54 95.1 4.9 50.9 34.2 10.0 102 96.8 3.2 76.3 19.4 1.1 150 96.2 3.8 86.9 8.4 0.9
【００３５】［実施例８］ モノグリセリド中の共役リ
ノール酸含量 実施例3〜7で調整した反応液を加温して溶解した後、70
00ｘｇで遠心分離して油層を回収した。Na-methylate
を触媒として、常法に従いグリセリド画分の脂肪酸をメ
チル化し、その組成をガスクロマトグラフィーにより分
析・定量した。結果を表８に示す。グリセリド画分の脂
肪酸組成は原料として用いたCLA-80の脂肪酸組成と同じ
であった。これより、Penicillium camembertii のモノ
及びジグリセリドリパーゼ、Candida rugosa リパー
ゼ、および Alcaligenes リパーゼは、CLA-80に含まれ
ている全ての脂肪酸種を同じように認識することが分か
った。したがって本明細書で示した方法を採用すると、
原料中に含まれている脂肪酸組成と同じ組成のモノグリ
セリドを製造することができた。 表８ 共役リノール酸 試 料 16:0 18:0 18:1 c9,t11 t10,c12 c9,c11 c10,c12 others 原料(CLA-80） 6.7 2.7 17.0 33.1 33.9 0.9 1.4 1.8 実施例３ 6.6 2.8 17.3 32.7 34.2 1.0 1.3 2.1 実施例４ 7.0 2.5 18.1 32.3 33.5 1.0 1.6 1.9 実施例５ 6.5 2.9 16.9 33.0 34.6 0.9 1.5 2.0 実施例６ 7.0 2.5 18.1 32.3 33.5 1.0 1.6 1.9 実施例７ 6.7 2.6 17.1 33.4 34.2 0.8 1.4 1.6
ノール酸含量 実施例3〜7で調整した反応液を加温して溶解した後、70
00ｘｇで遠心分離して油層を回収した。Na-methylate
を触媒として、常法に従いグリセリド画分の脂肪酸をメ
チル化し、その組成をガスクロマトグラフィーにより分
析・定量した。結果を表８に示す。グリセリド画分の脂
肪酸組成は原料として用いたCLA-80の脂肪酸組成と同じ
であった。これより、Penicillium camembertii のモノ
及びジグリセリドリパーゼ、Candida rugosa リパー
ゼ、および Alcaligenes リパーゼは、CLA-80に含まれ
ている全ての脂肪酸種を同じように認識することが分か
った。したがって本明細書で示した方法を採用すると、
原料中に含まれている脂肪酸組成と同じ組成のモノグリ
セリドを製造することができた。 表８ 共役リノール酸 試 料 16:0 18:0 18:1 c9,t11 t10,c12 c9,c11 c10,c12 others 原料(CLA-80） 6.7 2.7 17.0 33.1 33.9 0.9 1.4 1.8 実施例３ 6.6 2.8 17.3 32.7 34.2 1.0 1.3 2.1 実施例４ 7.0 2.5 18.1 32.3 33.5 1.0 1.6 1.9 実施例５ 6.5 2.9 16.9 33.0 34.6 0.9 1.5 2.0 実施例６ 7.0 2.5 18.1 32.3 33.5 1.0 1.6 1.9 実施例７ 6.7 2.6 17.1 33.4 34.2 0.8 1.4 1.6
【００３６】［実施例９］ 蒸留法によるモノグリセリ
ドの精製 実施例５で得られた反応液２００ｇ（酸価：6.01mgKOH/
g）に５N KOHを4.28ml加え、さらにサフラワー油２００
ｇを添加した。脱水後、分子蒸留機（神鋼パンテック
（株））、Wiprene type 2-03）に負荷し、モノグリセ
リドの精製を試みた。まず、0.2mmHg、120℃で低沸点物
質（7.9g）を除去した後、0.2mmHg、180℃で蒸留し、9.
1gの留分を得た。この蒸留条件下で、通常遊離脂肪酸は
留出してくる。それにもかかわらずモノグリセリドが留
出してこないという結果は、遊離脂肪酸とモノグリセリ
ドは分子蒸留により粗分画できることを示している。次
いで、0.005mmHg、200℃で蒸留し、181.3gの留分を得
た。留分の酸価は1.8mg KOH/gで、モノグリセリド／ ジ
グリセリド／遊離脂肪酸の重量比は97.2:1.9:0.9であっ
た。これにより、少量混在している遊離脂肪酸を除去す
るために、これをケン化してから蒸留分画する方法が効
果的であることを認めた。
ドの精製 実施例５で得られた反応液２００ｇ（酸価：6.01mgKOH/
g）に５N KOHを4.28ml加え、さらにサフラワー油２００
ｇを添加した。脱水後、分子蒸留機（神鋼パンテック
（株））、Wiprene type 2-03）に負荷し、モノグリセ
リドの精製を試みた。まず、0.2mmHg、120℃で低沸点物
質（7.9g）を除去した後、0.2mmHg、180℃で蒸留し、9.
1gの留分を得た。この蒸留条件下で、通常遊離脂肪酸は
留出してくる。それにもかかわらずモノグリセリドが留
出してこないという結果は、遊離脂肪酸とモノグリセリ
ドは分子蒸留により粗分画できることを示している。次
いで、0.005mmHg、200℃で蒸留し、181.3gの留分を得
た。留分の酸価は1.8mg KOH/gで、モノグリセリド／ ジ
グリセリド／遊離脂肪酸の重量比は97.2:1.9:0.9であっ
た。これにより、少量混在している遊離脂肪酸を除去す
るために、これをケン化してから蒸留分画する方法が効
果的であることを認めた。
【００３７】
【発明の効果】上述してきたように、本発明は、モノグ
リセリドを高割合で含む共役脂肪酸（代表的には共役リ
ノール酸）含有モノグリセリドを提供することができる
ものである。本発明の製造方法によれば、あらゆる種類
のリパーゼ（モノグリセリドリパーゼ、ジグリセリドリ
パーゼ、トリグリセリドリパーゼを含む）を触媒として
利用でき、上記のようなモノグリセリドを高割合で含む
共役脂肪酸含有モノグリセリドを製造することができ
る。また、リパーゼを触媒として、共役脂肪酸とグリセ
リンを低温で反応させるエステル化反応を利用して、あ
るいは同一反応系内での高温によるエステル反応と低温
によるグリセロリシス反応を組合わせて利用して、９０
％以上の共役脂肪酸をエステル化させ、グリセリド画分
の共役脂肪酸モノグリセリド含量を８０％以上に高める
ことができる。
リセリドを高割合で含む共役脂肪酸（代表的には共役リ
ノール酸）含有モノグリセリドを提供することができる
ものである。本発明の製造方法によれば、あらゆる種類
のリパーゼ（モノグリセリドリパーゼ、ジグリセリドリ
パーゼ、トリグリセリドリパーゼを含む）を触媒として
利用でき、上記のようなモノグリセリドを高割合で含む
共役脂肪酸含有モノグリセリドを製造することができ
る。また、リパーゼを触媒として、共役脂肪酸とグリセ
リンを低温で反応させるエステル化反応を利用して、あ
るいは同一反応系内での高温によるエステル反応と低温
によるグリセロリシス反応を組合わせて利用して、９０
％以上の共役脂肪酸をエステル化させ、グリセリド画分
の共役脂肪酸モノグリセリド含量を８０％以上に高める
ことができる。
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 山 本 隆 也
愛知県名古屋市港区潮見町37−15 リノー
ル油脂株式会社名古屋工場内
(72)発明者 堤 賢太郎
東京都中央区日本橋２−13−12 リノール
油脂株式会社内
(72)発明者 島 田 裕 司
大阪府大阪市東住吉区北田辺４丁目６番13
号
(72)発明者 渡 辺 嘉
大阪府寝屋川市東大利町18番２−309号
(72)発明者 杉 原 耿 雄
兵庫県伊丹市千僧６丁目87番地
(72)発明者 富 永 嘉 男
大阪府大阪市西淀川区歌島２丁目７番２号
Ｆターム(参考） 4B064 AD68 AD85 CA21 CB24 CE01
DA01
4H059 BA13 BA26 BA34 BB04 BC48
CA20 CA32 CA36 CA48 CA72
EA23
Claims (14)
- 【請求項１】共役脂肪酸を含有するモノグリセリド。
- 【請求項２】共役脂肪酸を全脂肪酸中５０重量％以上含
有する、請求項１に記載のモノグリセリド。 - 【請求項３】共役脂肪酸が共役リノール酸である、請求
項１または２に記載のモノグリセリド。 - 【請求項４】全グリセリド中のモノグリセリドの割合が
５０重量％以上である、請求項１または２に記載のモノ
グリセリド。 - 【請求項５】リパーゼを触媒として用い、共役脂肪酸を
含む遊離脂肪酸とグリセリンを、エステル化またはエス
テル化とグリセロリシスの反応に付することを特徴とす
る、請求項１〜４のいずれか１項に記載の共役脂肪酸含
有モノグリセリドの製造方法。 - 【請求項６】エステル化を利用する反応において、共役
脂肪酸を含む遊離脂肪酸の１モル量に対してグリセリン
を１〜２０モル量使用し、温度を０℃〜２０℃に設定し
て反応を進行させ、エステル化率が９０％以上に達する
まで０℃〜２０℃に維持することを特徴とする、請求項
５に記載の製造方法。 - 【請求項７】攪拌様作用により基質と酵素の混合物をエ
マルションにして反応を行い、流動性が低下して固化し
た時点で攪拌様作用を停止し、そのままエステル化率が
９０％以上に達するまで所定温度に維持する、請求項６
に記載の方法。 - 【請求項８】反応の途中で減圧脱水を行なうことによ
り、エステル化の速度とエステル化率を高めることを特
徴とする、請求項５に記載の方法。 - 【請求項９】エステル化を利用する反応において、共役
脂肪酸を含む遊離脂肪酸の１モル量に対してグリセリン
を１〜２０モル量使用し、温度を２０℃〜７０℃に設定
して反応を進行させ、エステル化率が９０％以上に達す
るまで２０℃〜７０℃に維持し、かつ、反応開始時から
減圧脱水を行なうことにより、エステル化の速度とエス
テル化率を高めることを特徴とする、請求項５に記載の
方法。 - 【請求項１０】エステル化とグリセロリシスを利用する
反応において、共役脂肪酸を含む遊離脂肪酸の１モル量
に対してグリセリンを１〜２０モル量使用し、温度を２
０℃〜７０℃に設定してエステル化反応を行い、反応の
途中で減圧下に脱水してエステル化率を９０％以上に高
めた後冷却し、０℃〜２０℃で静置してグリセロリシス
反応を進行させることを特徴とする、請求項５に記載の
方法。 - 【請求項１１】攪拌様作用により基質と酵素の混合物を
エマルションにしてエステル化反応を行い、エステル化
率が９０％以上に達した後、反応液が固化するまで強い
攪拌様作用を与えながら急冷する、請求項１０に記載の
方法。 - 【請求項１２】共役脂肪酸が共役リノール酸である、請
求項５〜１１のいずれか１項に記載の方法。 - 【請求項１３】遊離脂肪酸が混在するモノグリセリドを
含有するまたは主成分とするグリセリド生成物にアルカ
リを添加し、それにより該生成物中に存在する遊離脂肪
酸を中和してケン化物を生成させ、さらに分子量がモノ
グリセリドより大きくかつケン化物と相溶性を有する物
質を添加してケン化物の濃度を低下させた後、これを分
子蒸留に付して該ケン化物を蒸留残渣として除去するこ
とを特徴とする、モノグリセリド含有グリセリド生成物
の脱酸・精製方法。 - 【請求項１４】請求項５〜１２のいずれか１項に記載の
方法で得られたグリセリド生成物を原料として使用す
る、請求項１３に記載の方法。
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