JP2003055184A - 皮膚外用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】ハイノキ属植物の抽出物を含有することを特徴
とする皮膚外用剤を提供する。 【構成】本発明のハイノキ属植物の抽出物は、優れた活
性酸素消去作用、ヒアルロニダーゼ阻害、エラスターゼ
阻害、コラゲナーゼ阻害及びチロシナーゼ阻害作用を有
し、安定であった。さらに、ハイノキ属植物の抽出物を
含有することを特徴とする皮膚外用剤は、安全性が高
く、優れた老化防止、美白作用を示した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ハイノキ属植物の
抽出物を含有することにより、老化防止と美白作用に優
れた皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、生体成分を酸化させる要因とし
て、フリーラジカルや活性酸素がとりあげられ、その悪
影響が問題となっている。フリーラジカルや活性酸素
は、生体内で生じ、コラーゲン等の生体組織を分解ある
いは架橋し、また、油脂類を酸化して、細胞に障害を与
える過酸化脂質をつくると言われている。この様な障害
は、肌のシワやハリが低下する等の老化の原因になると
考えられており、老化を防ぐ方法の一つにフリーラジカ
ルや活性酸素を除去する抗酸化剤を配合する方法が知ら
れている。従来、老化防止を目的として用いられるフリ
ーラジカル消去剤にはアスコルビン酸（ビタミンＣ）、
トコフェロール（ビタミンＥ）、３，５−ｔｅｒｔ−ブ
チル−４−ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、スーパーオ
キシドジスムターゼ（ＳＯＤ）等が用いられてきた。

【０００３】皮膚は、表皮、真皮、皮下組織からなる
が、中でも真皮は皮膚の構造維持に極めて重要であり、
ヒアルロン酸、エラスチン、コラーゲン等から形成され
る真皮結合組織によって皮膚のハリが保たれている。こ
の結合組織が収縮力を失い、さらに弾力性を失う結果と
して皮膚のシワやタルミが発生すると考えられている。

【０００４】また、皮膚に紫外線が当たるとエラスター
ゼやコラゲナーゼ等のマトリックスメタロプロテアーゼ
が活性化される。これらの酵素は、真皮の主要成分であ
るエラスチンやコラーゲンを減少させることにより、皮
膚のシワやタルミを促進すると言われている。また、ヒ
アルロニダーゼは、炎症時に活性化され、高分子のヒア
ルロン酸を低分子化することにより、皮膚のハリを低下
させてシワ等の老化を引き起こすことが知られている。

【０００５】近年、この皮膚のシワやタルミ等を防止す
る多くの化粧料が知られ、その有効成分としてレチノイ
ン酸、α−ヒドロキシ酸、レチノール等が報告されてい
る。しかしながら、これらの有効成分は皮膚刺激性や安
定性に問題がある。また、シワやタルミを防ぐ方法の一
つに、ヒアルロニダーゼ、エラスターゼ、コラゲナーゼ
阻害剤を配合することが知られている。しかし、これら
の酵素の阻害作用を持つ植物原料として、ハイノキ属植
物は検討されていなかった。

【０００６】一般にシミ、ソバカス、日焼け等に見られ
る皮膚の色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激に
より、皮膚内に存在するメラニン色素生成細胞がメラニ
ン色素を過剰に生成し、これが皮膚内に沈着することが
原因と考えられている。このような色素沈着を防ぐ方法
の一つに、メラニンの過剰な生成を抑制する方法が知ら
れている。従来、色素沈着の治療にはハイドロキノンや
アスコルビン酸（ビタミンＣ）等を外用する処置が行わ
れてきた。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】皮膚の老化防止又は抗
酸化を目的として用いられるＳＯＤは不安定であり、製
剤化が難しく、ビタミンＥも効果が充分であるとは言え
ない。また、合成化合物であるＢＨＴ等は安全性に問題
があり、配合量に制限があることから、化学合成品では
なく、安定でかつ副作用の少ない天然原料が望まれてい
る。同様に、安全で安定なヒアルロニダーゼ、エラスタ
ーゼ及びコラゲナーゼ阻害作用を有することが老化防止
に好ましい。また、美白剤して用いられるアスコルビン
酸は経時的に分解しやすい等の欠点があるため、同様に
安定性が高く、効果の優れた天然物由来の皮膚外用剤が
望まれている。

【０００８】以上のことから、安全で安定性に優れ、老
化防止及び美白作用に優れた皮膚外用剤が望まれてい
る。

【０００９】

【課題を解決するための手段】このような事情により、
本発明者らは鋭意検討した結果、ハイノキ属植物の抽出
物が優れた活性酸素消去作用、ヒアルロニダーゼ阻害、
エラスターゼ阻害、コラゲナーゼ阻害及びチロシナーゼ
阻害作用をもち、安定性においても優れていることを見
出した。さらに、その抽出物を含有する皮膚外用剤が、
安全で安定であり、老化防止及び美白作用に優れている
ことを見出し、本発明を完成するに至った。

【００１０】本発明に用いるハイノキ属植物（ハイノキ
科）には、インド原産のシンプロコス・ラケモーサ（Ｓ
ｙｍｐｌｏｃｏｓ ｒａｃｅｍｏｓａ）、アメリカ原産
のシンプロコス・ティンクトリア（Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ
ｔｉｎｃｔｏｒｉａ）、天美諸島から台湾に分布する
アマシバ（Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ ｍｉｃｒｏｃａｌｙ
ｘ）、西日本に広く分布するハイノキ（Ｓｙｍｐｌｏｃ
ｏｓ ｍｙｒｔａｃｅａ）、クロキ（Ｓｙｍｐｌｏｃｏ
ｓ ｌｕｃｉｄａ）、クロバイ（Ｓｙｍｐｌｏｃｏｓ
ｐｒｕｎｉｆｏｌｉａ）、シロバイ（Ｓｙｍｐｌｏｃｏ
ｓ ｌａｎｃｉｆｏｌｉａ）、カンサブロウノキ（Ｓｙ
ｍｐｌｏｃｏｓ ｔｈｅｏｐｈｒａｓｔａｅｆｏｌｉ
ａ）等を挙げることができる。

【００１１】本発明に用いるハイノキ属植物の抽出物と
は、植物体の葉、茎、樹皮、花、実、根等の植物体の一
部又は全草から抽出したものである。好ましくは、植物
体の葉、茎及び樹皮から抽出して得られるものが良い。
その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出した
ものであっても良いし、常温抽出したものであっても良
い。

【００１２】抽出する溶媒としては、例えば、水、低級
アルコール類（メタノール、エタノール、1-プロパノー
ル、2-プロパノール、1-ブタノール、2-ブタノール
等）、液状多価アルコール（1,3-ブチレングリコール、
プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（ア
セトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エ
ステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類
（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル
類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエ
ーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコ
ール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に
好ましくは、水、エタノール、1,3-ブチレングリコール
及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は一種
でも二種以上を混合して用いても良い。

【００１３】上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いて
も良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性
炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更に
は、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の
処理を行い、乾燥物として用いても良い。

【００１４】本発明の皮膚外用剤には、上記抽出物をそ
のまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲
内で、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、
炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界
面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿
剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、
美白剤、キレート剤等の成分を配合することができる。

【００１５】本発明の皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外
品、医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形と
しては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エ
アゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、フ
ァンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚
に適用されるものが挙げられる。

【００１６】本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本
発明の皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して０．０
００１重量％以上、好ましくは０．００１〜１０重量％
の配合が良い。０．０００１重量％未満では十分な効果
は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果
の増強は認められにくく不経済である。また、添加の方
法については、予め加えておいても、製造途中で添加し
ても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。

【００１７】

【実施例】次に本発明を詳細に説明するため、実施例と
して本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及
び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるもので
はない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、％とは
重量％を示す。

【００１８】製造例１ シンプロコス・ラケモーサの熱
水抽出物 シンプロコス・ラケモーサの樹皮の乾燥物２０ｇに精製
水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した
後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してシンプロ
コス・ラケモーサの熱水抽出物を４．０ｇ得た。

【００１９】製造例２ シンプロコス・ラケモーサのエ
タノール抽出物 シンプロコス・ラケモーサの樹皮の乾燥物１００ｇにエ
タノール１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過
し、その濾液を濃縮乾固して、シンプロコス・ラケモー
サのエタノール抽出物を５．８ｇ得た。

【００２０】製造例３ シンプロコス・ラケモーサの５
０％１，３−ブチレングリコール抽出物 シンプロコス・ラケモーサの樹皮の乾燥物２０ｇに精製
水２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍ
Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、シンプロ
コス・ラケモーサの５０％１，３−ブチレングリコール
抽出物を３８０ｇ得た。

【００２１】製造例４ シンプロコス・ティンクトリア
の熱水抽出物 シンプロコス・ラケモーサの葉及び果実の乾燥物２０ｇ
に精製水４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽
出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してシ
ンプロコス・ティンクトリアの熱水抽出物を３．０ｇ得
た。

【００２２】製造例５ ハイノキのエタノール抽出物 ハイノキの樹皮の乾燥物１００ｇにエタノール１Ｌを加
え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮
乾固して、ハイノキのエタノール抽出物を５．８ｇ得
た。

【００２３】製造例６ ハイノキの５０％１，３−ブチ
レングリコール抽出物 ハイノキの葉及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水２００ｍ
Ｌ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加え、
常温で７日間抽出した後、濾過し、ハイノキの５０％
１，３−ブチレングリコール抽出物を３８０ｇ得た。

【００２４】 実施例１ 化粧水 処方 配合量 １．シンプロコス・ラケモーサの熱水抽出物（製造例１） ０．１部 ２．１，３−ブチレングリコール ８．０ ３．グリセリン ２．０ ４．キサンタンガム ０．０２ ５．クエン酸 ０．０１ ６．クエン酸ナトリウム ０．１ ７．エタノール ５．０ ８．パラオキシ安息香酸メチル ０．１ ９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．） ０．１ １０．香料 適量 １１．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそ
れぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とす
る。

【００２５】比較例１ 従来の化粧水 実施例１において、シンプロコス・ラケモーサの熱水抽
出物を精製水に置き換えたものを従来の化粧水とした。

【００２６】 実施例２ クリーム 処方 配合量 １．シンプロコス・ラケモーサのエタノール抽出物（製造例２） ０．０５部 ２．スクワラン ５．５ ３．オリーブ油 ３．０ ４．ステアリン酸 ２．０ ５．ミツロウ ２．０ ６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５ ７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０ ８．ベヘニルアルコール １．５ ９．モノステアリン酸グリセリン ２．５ １０．香料 ０．１ １１．パラオキシ安息香酸メチル ０．２ １２．パラオキシ安息香酸エチル ０．０５ １３．１，３−ブチレングリコール ８．５ １４．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃
に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解し
て混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え
て乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０
を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

【００２７】比較例２ 従来のクリーム 実施例２において、シンプロコス・ラケモーサのエタノ
ール抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリーム
とした。

【００２８】 実施例３ 乳液 処方 配合量 １．シンプロコス・ラケモーサの熱水抽出物（製造例１） ０．００１ 部 ２．スクワラン ５．０ ３．オリーブ油 ５．０ ４．ホホバ油 ５．０ ５．セタノール １．５ ６．モノステアリン酸グリセリン ２．０ ７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０ ８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート ２．０ （２０Ｅ．Ｏ．） ９．香料 ０．１ １０．プロピレングリコール １．０ １１．グリセリン ２．０ １２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２ １３．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃
に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解し
て混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え
て乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を
加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

【００２９】 実施例４ ゲル剤 処方 配合量 １．シンプロコス・ラケモーサの １．０部 ５０％１，３−ブチレングリコール抽出物（製造例３） ２．エタノール ５．０ ３．パラオキシ安息香酸メチル ０．１ ４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．） ０．１ ５．香料 適量 ６．１，３−ブチレングリコール ５．０ ７．グリセリン ５．０ ８．キサンタンガム ０．１ ９．カルボキシビニルポリマー ０．２ １０．水酸化カリウム ０．２ １１．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分２〜５と、成分１及び６〜１１をそれ
ぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。

【００３０】 実施例５ パック 処方 配合量 １．シンプロコス・ティンクトリアの熱水抽出物（製造例４） ０．１部 ２．ハイノキのエタノール抽出物（製造例５） ０．１ ３．ポリビニルアルコール １２．０ ４．エタノール ５．０ ５．１，３−ブチレングリコール ８．０ ６．パラオキシ安息香酸メチル ０．２ ７．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．） ０．５ ８．クエン酸 ０．１ ９．クエン酸ナトリウム ０．３ １０．香料 適量 １１．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分１〜１１を均一に溶解し製品とする。

【００３１】 実施例６ ファンデーション 処方 配合量 １．ハイノキのエタノール抽出物（製造例５） １．０部 ２．ステアリン酸 ２．４ ３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート １．０ （２０Ｅ．Ｏ．） ４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ２．０ ５．セタノール １．０ ６．液状ラノリン ２．０ ７．流動パラフィン ３．０ ８．ミリスチン酸イソプロピル ６．５ １０．カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１ １１．ベントナイト ０．５ １２．プロピレングリコール ４．０ １３．トリエタノールアミン １．１ １４．パラオキシ安息香酸メチル ０．２ １５．二酸化チタン ８．０ １６．タルク ４．０ １７．ベンガラ １．０ １８．黄酸化鉄 ２．０ １９．香料 適量 ２０．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分２〜９を加熱溶解し、８０℃に保ち油
相とする。成分２０に成分１０をよく膨潤させ、続い
て、成分１及び１１〜１４を加えて均一に混合する。こ
れに粉砕機で粉砕混合した成分１５〜１８を加え、ホモ
ミキサーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に
油相をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分１９
を加え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とす
る。

【００３２】 実施例７ 浴用剤 処方 配合量 １．シンプロコス・ラケモーサの熱水抽出物（製造例１） ５．０部 ２．炭酸水素ナトリウム ５０．０ ３．黄色２０２号（１） 適量 ４．香料 適量 ５．硫酸ナトリウムにて全量を１００とする ［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。

【００３３】 実施例８ 軟膏 処方 配合量 １．シンプロコス・ティンクトリアの熱水抽出物（製造例４） ０．０１部 ２．ハイノキの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物 ０．５ （製造例６） ３．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．） ２．０ ４．モノステアリン酸グリセリン １０．０ ５．流動パラフィン ５．０ ６．セタノール ６．０ ７．パラオキシ安息香酸メチル ０．１ ８．プロピレングリコール １０．０ ９．精製水にて全量を１００とする ［製造方法］成分３〜６を加熱溶解して混合し、７０℃
に保ち油相とする。成分１、２及び７〜９を加熱溶解し
て混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え
て乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品と
する。

【００３４】次に、本発明の効果を詳細に説明するた
め、実験例を挙げる。

【００３５】実験例１ 活性酸素消去作用 製造例１、２、４及び５を試料として用い、活性酸素の
一種であるスーパーオキシドの消去作用を測定した。陽
性対照として、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯ
Ｄ）を用いた。また、試料の安定性を確認するために、
試料を４０℃で２週間保存して同様に測定を行った。

【００３６】各濃度の試料水溶液０．１ｍＬに０．４５
ｍＬの発色試薬（０．２４ｍＭニトロブルーテトラゾリ
ウム、０．４ｍＭキサンチンを含む０．１Ｍリン酸緩衝
液；ｐＨ８．０）と０．４５ｍＬの酵素液（０．１Ｕ／
ｍＬキサンチンオキシダーゼ・０．１Ｍリン酸緩衝液；
ｐＨ８．０）を加え、３７℃で２０分間反応させジホル
マザンを生じさせた。この溶液に反応停止液（６９ｍＭ
ドデシル硫酸ナトリウム水溶液）１．０ｍＬを加えた
後、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。各試料
の阻害作用は、次の式から求められる消去率で算出し
た。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブラ
ンクとしてチロシナーゼの代わりに０．１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ８．０）を用いた。 消去率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０ Ａ：対照の５６０ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．５６
０） Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．５６０ Ｃ：試料のＯ．Ｄ．５６０ Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．５６０ これらの試験結果を表１に示した。その結果、ＳＯＤは
４０℃で２週間の保存により、活性酸素消去作用が大き
く減少したが、ハイノキ属植物の抽出物は消去作用に変
化はなかった。以上のことから、ハイノキ属植物の抽出
物は、安定で優れた活性酸素消去作用を示した。

【００３７】

【表１】

【００３８】実験例２ ヒアルロニダーゼ阻害作用 製造例１、２、４及び５を試料として用い、ヒアルロニ
ダーゼ阻害作用をＭｏｒｇａｎ−Ｅｌｓｏｎ法を応用し
た方法〔食品衛生学雑誌，３１，３（１９９０）〕に準
じて測定した。すなわち、試料液に０．１Ｍ酢酸バッフ
ァ（ｐＨ４．０）１７５μＬを加え、さらにヒアルロニ
ダーゼの酵素活性を４００Ｕ／ｍＬ、ヒアルロン酸の濃
度を０．４ｍｇ／ｍＬ、活性化剤のコンパウンド４８／
８０を０．０６ｍｇ／ｍＬになるようにして全量を５０
０μＬに調整した後、ヒアルロニダーゼ反応を３７℃で
４０分間実施した。反応後にｐ−ジメチルアミノベンズ
アルデヒド試薬を加えて発色させ、５８５ｎｍにおける
吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式
から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料
の代わりに精製水を用い、ブランクとしてヒアルロニダ
ーゼの代わりに精製水を用いた。 阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０ Ａ：対照の５８５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．５８
５） Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．５８５ Ｃ：試料のＯ．Ｄ．５８５ Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．５８５

【００３９】これらの実験結果を表２に示した。その結
果、ハイノキ属植物の抽出物は優れたヒアルロニダーゼ
阻害作用を示した。

【００４０】

【表２】

【００４１】実験例３ エラスターゼ阻害作用 製造例１、２、４及び５を試料として用い、エラスター
ゼ阻害作用を測定した。マイクロプレートを用いて、試
料液５０μＬに酵素液として０．０２ｍｇ／ｍＬエラス
ターゼ Ｔｙｐｅ ３（シグマ製）・トリス塩酸緩衝液
（ｐＨ８．０）を５０μＬ加える。基質溶液として０．
４５ｍｇ／ｍＬのＮ−Ｓｕｃｃｉｎｙｌ−Ａｌａ−Ａｌ
ａ−Ａｌａ−ρ−ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｄｅ（シグマ
製）・０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）を１０
０μＬ加えて混合した後、３７℃、１時間反応させ、４
１５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、各試料の阻
害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。な
お、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクと
してエラスターゼの代わりに０．２Ｍトリス塩酸緩衝液
（ｐＨ８．０）を用いた。 阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０ Ａ：対照の４１５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．４１
５） Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．４１５ Ｃ：試料のＯ．Ｄ．４１５ Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．４１５

【００４２】これらの実験結果を表３に示した。その結
果、ハイノキ属植物の抽出物は優れたエラスターゼ阻害
作用を示した。

【００４３】

【表３】

【００４４】実験例４ コラゲナーゼ阻害作用 製造例１、２、４及び５を試料として用い、コラゲナー
ゼ阻害作用を測定した。マイクロプレートを用いて、試
料液５０μＬに酵素液として０．１ｍｇ／ｍＬのコラゲ
ナーゼ Ｔｙｐｅ ４（シグマ製）水溶液を５０μＬ加
える。基質溶液として０．３９ｍｇ／ｍＬのＰｚ−ペプ
タイド（Ｐｚ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｄ−
Ａｒｇ−ＯＨ、シグマ製）・２０ｍＭ塩化カルシウム入
りトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．１）を加えて混合し、３
７℃、３分反応させた後、２５ｍＭクエン酸１ｍＬを加
えて反応を停止させた。酢酸エチル５ｍＬを加えて抽出
して、酢酸エチル層を３２０ｎｍの吸光度を測定した。
また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害
率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を
用い、ブランクとしてコラゲナーゼの代わりに２０ｍＭ
塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．１）を
用いた。 阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０ Ａ：対照の３２０ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．３２
０） Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．３２０ Ｃ：試料のＯ．Ｄ．３２０ Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．３２０

【００４５】これらの実験結果を表４に示した。その結
果、ハイノキ属植物の抽出物は優れたコラゲナーゼ阻害
作用を示した。

【００４６】

【表４】

【００４７】実験例５ チロシナーゼ阻害作用 製造例１、２、４及び５を試料として用い、チロシナー
ゼ阻害作用を測定した。陽性対照として、アスコルビン
酸を用いた。また、試料の安定性を確認するために、試
料を４０℃で２週間保存して同様に測定を行った。

【００４８】チロシナーゼ阻害試験は、試験管に試料溶
液０．２ｍＬおよびＬ−チロシン溶液（０．２ｍｇ／ｍ
Ｌ）１ｍＬとマックベイン氏の緩衝液（ｐＨ ６．８）
０．６ｍＬを加えた後、１，０００Ｕ／ｍＬのチロシナ
ーゼ水溶液０．２ｍＬを加えてよく混合し、３７℃、３
分反応させ、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。各
試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出
した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブ
ランクとしてチロシナーゼの代わりに精製水を用いた。 阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０ Ａ：対照の４７５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．４７
５） Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．４７５ Ｃ：試料のＯ．Ｄ．４７５ Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．４７５

【００４９】これらの実験結果を表５に示した。その結
果、ハイノキ属植物の抽出物は優れたチロシナーゼ阻害
作用を示した。また、陽性対照に用いたアスコルビン酸
は、４０℃で２週間保存するとチロシナーゼ阻害作用が
低下したが、ハイノキ属植物の抽出物は阻害作用に変化
がなかった。以上のことから、ハイノキ属植物の抽出物
は、安定で優れたチロシナーゼ阻害作用を示した。

【００５０】

【表５】

【００５１】実験例６ 使用試験１ 実施例１の化粧水、実施例２のクリーム、比較例１の従
来の化粧水及び比較例２の従来のクリームを用いて、女
性３０人（２１〜４６才）を対象に１ヶ月間の使用試験
を行った。使用後、肌のシワ、タルミの改善効果をアン
ケートにより判定した。

【００５２】これらの試験結果を表６に示した。その結
果、ハイノキ属植物の抽出物を含有する皮膚外用剤は優
れたシワ、タルミの改善作用を示した。なお、試験期間
中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題
なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかっ
た。

【００５３】

【表６】

【００５４】実験例７ 使用試験２ 実施例１の化粧水、実施例２のクリーム、比較例１の従
来の化粧水及び比較例２の従来のクリームを用いて、シ
ミ、ソバカスに悩む女性１５人（２１〜４６才）を対象
に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、シミ、ソバカ
スの改善効果をアンケートにより判定した。

【００５５】これらの試験結果を表７に示した。その結
果、ハイノキ属植物の抽出物を含有する皮膚外用剤は、
優れたシミ、ソバカスの改善作用を示した。なお、試験
期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても
問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題な
かった。

【００５６】

【表７】

【００５７】実施例３〜８についても同様に使用試験を
行ったところ、優れたシワ、タルミ、シミ、ソバカス等
の改善作用を示した。

【００５８】

【発明の効果】以上のことから、本発明のハイノキ属植
物の抽出物は、優れた活性酸素消去作用、ヒアルロニダ
ーゼ阻害、エラスターゼ阻害、コラゲナーゼ阻害及びチ
ロシナーゼ阻害作用を有し、安定性にも優れていた。さ
らに、これらの抽出物を含有する皮膚外用剤は、安全で
優れた老化防止、及び美白作用を示した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 39/06 Ａ６１Ｐ 39/06 (72)発明者 中田 悟 名古屋市西区鳥見町２−７ 日本メナード 化粧品株式会社総合研究所内 Ｆターム(参考） 4C083 AA082 AA111 AA112 AA122 AB232 AB312 AB442 AC022 AC072 AC102 AC122 AC182 AC242 AC302 AC352 AC422 AC442 AC482 AC542 AC792 AD092 AD112 AD352 AD512 CC02 CC04 CC05 CC07 CC12 CC25 DD23 DD31 EE01 EE09 EE16 EE42 4C088 AB12 AC05 BA08 MA63 NA14 ZA89 ZC21

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ハイノキ属植物の抽出物を含有すること
   を特徴とする皮膚外用剤。
2. 【請求項２】 ハイノキ属植物の抽出物を含有すること
   を特徴とする活性酸素消去剤。
3. 【請求項３】 ハイノキ属植物の抽出物を含有すること
   を特徴とする老化防止剤。
4. 【請求項４】 ハイノキ属植物の抽出物を含有すること
   を特徴とする美白剤。