JP2003095857A

JP2003095857A - 皮膚外用剤

Info

Publication number: JP2003095857A
Application number: JP2001293073A
Authority: JP
Inventors: Kazuhisa Osumi; 和寿大隅; Tsutomu Sakaida; 勉坂井田; Tomonori Katada; 友則堅田; Satoru Nakada; 悟中田
Original assignee: Nonogawa Shoji Ltd
Current assignee: Nonogawa Shoji Ltd
Priority date: 2001-09-26
Filing date: 2001-09-26
Publication date: 2003-04-03

Abstract

(57)【要約】（修正有）【解決手段】インドジュズノキ、セイロンオリーブ、タ
マゴホルトノキ等のホルトノキ属植物の抽出物を含有す
る皮膚外用剤を提供する。【効果】ホルトノキ属植物の抽出物は、優れた活性酸素
消去作用、ヒアルロニダーゼ阻害、エラスターゼ阻害、
コラゲナーゼ阻害及びチロシナーゼ阻害作用を有し、安
定であった。さらに、ホルトノキ属植物の抽出物を含有
する皮膚外用剤は、安全性が高く、優れた老化防止、美
白作用を示した。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ホルトノキ属植物
の抽出物を含有することにより、老化防止と美白作用に
優れた皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、生体成分を酸化させる要因とし
て、フリーラジカルや活性酸素がとりあげられ、その悪
影響が問題となっている。フリーラジカルや活性酸素
は、生体内で生じ、コラーゲン等の生体組織を分解ある
いは架橋し、また、油脂類を酸化して、細胞に障害を与
える過酸化脂質をつくると言われている。この様な障害
は、肌のシワやハリが低下する等の老化の原因になると
考えられており、老化を防ぐ方法の一つにフリーラジカ
ルや活性酸素を除去する抗酸化剤を配合する方法が知ら
れている。従来、老化防止を目的として用いられるフリ
ーラジカル消去剤にはアスコルビン酸、トコフェロー
ル、３，５−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシトルエ
ン（ＢＨＴ）、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯ
Ｄ）等が用いられてきた。

【０００３】皮膚は、表皮、真皮、皮下組織からなる
が、中でも真皮は皮膚の構造維持に極めて重要であり、
ヒアルロン酸、エラスチン、コラーゲン等から形成され
る真皮結合組織によって皮膚のハリが保たれている。こ
の結合組織が収縮力を失い、さらに弾力性を失う結果と
して皮膚のシワやタルミが発生すると考えられている。

【０００４】また、皮膚が紫外線を浴びるとエラスター
ゼやコラゲナーゼ等のマトリックスメタロプロテアーゼ
が活性化されることが知られている。これらの酵素は、
真皮の主要成分であるエラスチンやコラーゲンを減少さ
せることによりシワやタルミを促進すると言われてい
る。また、ヒアルロニダーゼは、炎症時に活性化され、
高分子のヒアルロン酸を低分子化することにより、皮膚
のハリを低下させてシワ等の老化を引き起こすことが知
られている。

【０００５】近年、この皮膚のシワやタルミ等を防止す
る多くの化粧料が知られ、その有効成分としてレチノイ
ン酸、α−ヒドロキシ酸、レチノール等が報告されてい
る。しかしながら、これらの有効成分は皮膚刺激性や安
定性に問題がある。また、シワやタルミを防ぐ方法の一
つに、ヒアルロニダーゼ、エラスターゼ、コラゲナーゼ
阻害剤を配合することが知られている。しかし、これら
の酵素の阻害作用を持つ植物原料として、ホルトノキ属
植物は検討されていなかった。

【０００６】一般にシミ、ソバカス、日焼け等に見られ
る皮膚の色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激に
より、皮膚内に存在するメラニン色素生成細胞がメラニ
ン色素を過剰に生成し、これが皮膚内に沈着することが
原因と考えられている。このような色素沈着を防ぐ方法
の一つに、メラニンの過剰な生成を抑制する方法が知ら
れている。従来、色素沈着の治療にはハイドロキノンや
アスコルビン酸等を外用する処置が行われてきた。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】皮膚の老化防止又は抗
酸化を目的として用いられるＳＯＤは不安定であり、製
剤化が難しく、トコフェロールも効果が充分であるとは
言えない。また、合成化合物であるＢＨＴ等は安全性に
問題があり、配合量に制限があることから、化学合成品
ではなく、安定でかつ副作用の少ない天然原料が望まれ
ている。同様に、安全で安定なヒアルロニダーゼ、エラ
スターゼ及びコラゲナーゼ阻害作用を有することが老化
防止に好ましい。また、美白剤して用いられるアスコル
ビン酸は経時的に分解しやすい等の欠点があるため、同
様に安定性が高く、効果の優れた天然物由来の皮膚外用
剤が望まれている。

【０００８】以上のことから、安全で安定性に優れ、老
化防止及び美白作用に優れた皮膚外用剤が望まれてい
る。

【０００９】

【課題を解決するための手段】このような事情により、
本発明者らは鋭意検討した結果、ホルトノキ属植物の抽
出物が優れた活性酸素消去作用、ヒアルロニダーゼ阻
害、エラスターゼ阻害、コラゲナーゼ阻害及びチロシナ
ーゼ阻害作用をもち、安定性においても優れていること
を見出した。さらに、その抽出物を含有する皮膚外用剤
が、安全で安定であり、老化防止及び美白作用に優れて
いることを見出し、本発明を完成するに至った。

【００１０】本発明に用いるホルトノキ属植物（ホルト
ノキ科）には、インド、ネパールに分布するインドジュ
ズノキ（Ｅｌａｅｏｃａｒｐｕｓｓｐｈａｅｒｉｃｕ
ｓ）、セイロンオリーブ（Ｅｌａｅｏｃａｒｐｕｓｓ
ｅｒｒａｔｕｓ）、ヒマラヤ東部・アッサム地方に分布
するタマゴホルトノキ（Ｅｌａｅｏｃａｒｐｕｓｆｌ
ｏｒｉｂｕｎｄｕｓ）、アッサムに分布するナガエホル
トノキ（Ｅｌａｅｏｃａｒｐｕｓｐｅｔｉｏｌａｔｕ
ｓ）等を挙げることができる。本植物は、一般に果実が
精神安定、咳止め剤として、葉が解毒、解熱として、用
いられており、生薬として入手することできる。

【００１１】本発明に用いるホルトノキ属植物の抽出物
とは、植物体の葉、茎、樹皮、花、果実、種子、根等の
植物体の一部又は全草から抽出したものである。好まし
くは、植物体の果実や種子から抽出して得られるものが
良い。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽
出したものであっても良いし、常温抽出したものであっ
ても良い。

【００１２】抽出する溶媒としては、例えば、水、低級
アルコール類（メタノール、エタノール、1−プロパノ
ール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノ
ール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリ
コール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケト
ン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニト
リル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化
水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エ
ーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロ
ピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級
アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良
く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレ
ングリコール及びプロピレングリコールが良い。これら
の溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。

【００１３】上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いて
も良く、必要に応じて、濃縮、希釈し、濾過処理、活性
炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更に
は、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の
処理を行い、乾燥物として用いても良い。

【００１４】本発明の皮膚外用剤には、上記抽出物をそ
のまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲
内で、外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、
炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界
面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿
剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、
美白剤、キレート剤等の成分を配合することができる。

【００１５】本発明の皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外
品、医薬品のいずれにも用いることができ、その剤形と
しては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エ
アゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、フ
ァンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚
に適用されるものが挙げられる。

【００１６】本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本
発明の皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して０．０
００１重量％以上、好ましくは０．００１〜１０重量％
の配合が良い。０．０００１重量％未満では十分な効果
は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果
の増強は認められにくく不経済である。また、添加の方
法については、予め加えておいても、製造途中で添加し
ても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。

【００１７】

【実施例】次に本発明を詳細に説明するため、実施例と
して本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及
び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるもので
はない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、％とは
重量％を示す。

【００１８】製造例１インドジュズノキの熱水抽出物インドジュズノキの果実の乾燥物４０ｇに精製水８００
ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過
し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してインドジュズノキ
の熱水抽出物を２．１ｇ得た。

【００１９】製造例２インドジュズノキのエタノール
抽出物インドジュズノキの果実の乾燥物１００ｇにエタノール
１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾
液を濃縮乾固して、インドジュズノキのエタノール抽出
物を２．０ｇ得た。

【００２０】製造例３インドジュズノキの５０％１，
３−ブチレングリコール抽出物インドジュズノキの果実の乾燥物２０ｇに精製水２００
ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬを加
え、常温で７日間抽出した後、濾過し、インドジュズノ
キの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３６０
ｇ得た。

【００２１】製造例４セイロンオリーブの熱水抽出物セイロンオリーブの葉及び果実の乾燥物２０ｇに精製水
４００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した
後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してセイロン
オリーブの熱水抽出物を３．０ｇ得た。

【００２２】製造例５タマゴホルトノキのエタノール
抽出物タマゴホルトノキの樹皮の乾燥物１００ｇにエタノール
１Ｌを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾
液を濃縮乾固して、タマゴホルトノキのエタノール抽出
物を４．８ｇ得た。

【００２３】製造例６タマゴホルトノキの５０％１，
３−ブチレングリコール抽出物タマゴホルトノキの葉及び樹皮の乾燥物２０ｇに精製水
２００ｍＬ及び１，３−ブチレングリコール２００ｍＬ
を加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、タマゴホル
トノキの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物を３
６０ｇ得た。

【００２４】実施例１化粧水処方配合量１．インドジュズノキの熱水抽出物（製造例１）０．１部２．１，３−ブチレングリコール８．０３．グリセリン２．０４．キサンタンガム０．０２５．クエン酸０．０１６．クエン酸ナトリウム０．１７．エタノール５．０８．パラオキシ安息香酸メチル０．１９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）０．１１０．香料適量１１．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそ
れぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とす
る。

【００２５】比較例１従来の化粧水実施例１において、インドジュズノキの熱水抽出物を精
製水に置き換えたものを従来の化粧水とした。

【００２６】実施例２クリーム処方配合量１．インドジュズノキのエタノール抽出物（製造例２）０．０５部２．スクワラン５．５３．オリーブ油３．０４．ステアリン酸２．０５．ミツロウ２．０６．ミリスチン酸オクチルドデシル３．５７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）３．０８．ベヘニルアルコール１．５９．モノステアリン酸グリセリン２．５１０．香料０．１１１．パラオキシ安息香酸メチル０．２１２．パラオキシ安息香酸エチル０．０５１３．１，３−ブチレングリコール８．５１４．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃
に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解し
て混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え
て乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０
を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

【００２７】比較例２従来のクリーム実施例２において、インドジュズノキのエタノール抽出
物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。

【００２８】実施例３乳液処方配合量１．インドジュズノキの熱水抽出物（製造例１）０．００１部２．スクワラン５．０３．オリーブ油５．０４．ホホバ油５．０５．セタノール１．５６．モノステアリン酸グリセリン２．０７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）３．０８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）２．０９．香料０．１１０．プロピレングリコール１．０１１．グリセリン２．０１２．パラオキシ安息香酸メチル０．２１３．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃
に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解し
て混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え
て乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を
加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

【００２９】実施例４ゲル剤処方配合量１．インドジュズノキの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物（製造例３）１．０部２．エタノール５．０３．パラオキシ安息香酸メチル０．１４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．）０．１５．香料適量６．１，３−ブチレングリコール５．０７．グリセリン５．０８．キサンタンガム０．１９．カルボキシビニルポリマー０．２１０．水酸化カリウム０．２１１．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分２〜５と、成分１及び６〜１１をそれ
ぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。

【００３０】実施例５パック処方配合量１．セイロンオリーブの熱水抽出物（製造例４）０．１部２．タマゴホルトノキのエタノール抽出物（製造例５）０．１３．ポリビニルアルコール１２．０４．エタノール５．０５．１，３−ブチレングリコール８．０６．パラオキシ安息香酸メチル０．２７．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（２０Ｅ．Ｏ．）０．５８．クエン酸０．１９．クエン酸ナトリウム０．３１０．香料適量１１．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分１〜１１を均一に溶解し製品とする。

【００３１】実施例６ファンデーション処方配合量１．タマゴホルトノキのエタノール抽出物（製造例５）１．０部２．ステアリン酸２．４３．ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（２０Ｅ．Ｏ．）１．０４．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）２．０５．セタノール１．０６．液状ラノリン２．０７．流動パラフィン３．０８．ミリスチン酸イソプロピル６．５９．カルボキシメチルセルロースナトリウム０．１１０．ベントナイト０．５１１．プロピレングリコール４．０１２．トリエタノールアミン１．１１３．パラオキシ安息香酸メチル０．２１４．二酸化チタン８．０１５．タルク４．０１６．ベンガラ１．０１７．黄酸化鉄２．０１８．香料適量１９．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分２〜８を加熱溶解し、８０℃に保ち油
相とする。成分１９に成分９をよく膨潤させ、続いて、
成分１及び１０〜１３を加えて均一に混合する。これに
粉砕機で粉砕混合した成分１４〜１７を加え、ホモミキ
サーで撹拌し７５℃に保ち水相とする。この水相に油相
をかき混ぜながら加え、冷却し、４５℃で成分１８を加
え、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品とする。

【００３２】実施例７浴用剤処方配合量１．インドジュズノキの熱水抽出物（製造例１）５．０部２．炭酸水素ナトリウム５０．０３．黄色２０２号（１）適量４．香料適量５．硫酸ナトリウムにて全量を１００とする［製造方法］成分１〜５を均一に混合し製品とする。

【００３３】実施例８軟膏処方配合量１．セイロンオリーブの熱水抽出物（製造例４）０．０１部２．タマゴホルトノキの５０％１，３−ブチレングリコール抽出物（製造例６）０．５３．ポリオキシエチレンセチルエーテル（３０Ｅ．Ｏ．）２．０４．モノステアリン酸グリセリン１０．０５．流動パラフィン５．０６．セタノール６．０７．パラオキシ安息香酸メチル０．１８．プロピレングリコール１０．０９．精製水にて全量を１００とする［製造方法］成分３〜６を加熱溶解して混合し、７０℃
に保ち油相とする。成分１、２及び７〜９を加熱溶解し
て混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え
て乳化して、かき混ぜながら３０℃まで冷却して製品と
する。

【００３４】次に、本発明の効果を詳細に説明するた
め、実験例を挙げる。

【００３５】実験例１活性酸素消去作用製造例１、２、４及び５を試料として用い、活性酸素の
一種であるスーパーオキシドの消去作用を測定した。陽
性対照として、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯ
Ｄ）を用いた。また、試料の安定性を確認するために、
試料を４０℃で２週間保存して同様に測定を行った。

【００３６】各濃度の試料水溶液０．１ｍＬに０．４５
ｍＬの発色試薬（０．２４ｍＭニトロブルーテトラゾリ
ウム、０．４ｍＭキサンチンを含む０．１Ｍリン酸緩衝
液；ｐＨ８．０）と０．４５ｍＬの酵素液（０．１Ｕ／
ｍＬキサンチンオキシダーゼ・０．１Ｍリン酸緩衝液；
ｐＨ８．０）を加え、３７℃で２０分間反応させジホル
マザンを生じさせた。この溶液に反応停止液（６９ｍＭ
ドデシル硫酸ナトリウム水溶液）１．０ｍＬを加えた
後、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。各試料
の阻害作用は、次の式から求められる消去率で算出し
た。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブラ
ンクとしてチロシナーゼの代わりに０．１Ｍリン酸緩衝
液（ｐＨ８．０）を用いた。消去率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０Ａ：対照の５６０ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．５６
０）Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．５６０Ｃ：試料のＯ．Ｄ．５６０Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．５６０これらの試験結果を表１に示した。その結果、ＳＯＤは
４０℃で２週間の保存により、活性酸素消去作用が大き
く減少したが、ホルトノキ属植物の抽出物は消去作用に
変化はなかった。以上のことから、ホルトノキ属植物の
抽出物は、安定で優れた活性酸素消去作用を示した。

【００３７】

【表１】

【００３８】実験例２ヒアルロニダーゼ阻害作用製造例１、２、４及び５を試料として用い、ヒアルロニ
ダーゼ阻害作用をＭｏｒｇａｎ−Ｅｌｓｏｎ法を応用し
た方法〔食品衛生学雑誌，３１，３（１９９０）〕に準
じて測定した。すなわち、試料液に０．１Ｍ酢酸バッフ
ァ（ｐＨ４．０）１７５μＬを加え、さらにヒアルロニ
ダーゼの酵素活性を４００Ｕ／ｍＬ、ヒアルロン酸の濃
度を０．４ｍｇ／ｍＬ、活性化剤のコンパウンド４８／
８０を０．０６ｍｇ／ｍＬになるようにして全量を５０
０μＬに調整した後、ヒアルロニダーゼ反応を３７℃で
４０分間実施した。反応後にｐ−ジメチルアミノベンズ
アルデヒド試薬を加えて発色させ、５８５ｎｍにおける
吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式
から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料
の代わりに精製水を用い、ブランクとしてヒアルロニダ
ーゼの代わりに精製水を用いた。阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０Ａ：対照の５８５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．５８
５）Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．５８５Ｃ：試料のＯ．Ｄ．５８５Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．５８５

【００３９】これらの実験結果を表２に示した。その結
果、ホルトノキ属植物の抽出物は優れたヒアルロニダー
ゼ阻害作用を示した。

【００４０】

【表２】

【００４１】実験例３エラスターゼ阻害作用製造例１、２、４及び５を試料として用い、エラスター
ゼ阻害作用を測定した。マイクロプレートを用いて、試
料液５０μＬに酵素液として０．０２ｍｇ／ｍＬエラス
ターゼＴｙｐｅ３（シグマ製）・トリス塩酸緩衝液
（ｐＨ８．０）を５０μＬ加える。基質溶液として０．
４５ｍｇ／ｍＬのＮ−Ｓｕｃｃｉｎｙｌ−Ａｌａ−Ａｌ
ａ−Ａｌａ−ρ−ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｄｅ（シグマ
製）・０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）を１０
０μＬ加えて混合した後、３７℃、１時間反応させ、４
１５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、各試料の阻
害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。な
お、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクと
してエラスターゼの代わりに０．２Ｍトリス塩酸緩衝液
（ｐＨ８．０）を用いた。阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０Ａ：対照の４１５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．４１
５）Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．４１５Ｃ：試料のＯ．Ｄ．４１５Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．４１５

【００４２】これらの実験結果を表３に示した。その結
果、ホルトノキ属植物の抽出物は優れたエラスターゼ阻
害作用を示した。

【００４３】

【表３】

【００４４】実験例４コラゲナーゼ阻害作用製造例１、２、４及び５を試料として用い、コラゲナー
ゼ阻害作用を測定した。マイクロプレートを用いて、試
料液５０μＬに酵素液として０．１ｍｇ／ｍＬのコラゲ
ナーゼＴｙｐｅ４（シグマ製）水溶液を５０μＬ加
える。基質溶液として０．３９ｍｇ／ｍＬのＰｚ−ペプ
タイド（Ｐｚ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｄ−
Ａｒｇ−ＯＨ、シグマ製）・２０ｍＭ塩化カルシウム入
りトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．１）を加えて混合し、３
７℃、３分反応させた後、２５ｍＭクエン酸１ｍＬを加
えて反応を停止させた。酢酸エチル５ｍＬを加えて抽出
して、酢酸エチル層を３２０ｎｍの吸光度を測定した。
また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害
率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を
用い、ブランクとしてコラゲナーゼの代わりに２０ｍＭ
塩化カルシウム入りトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．１）を
用いた。阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０Ａ：対照の３２０ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．３２
０）Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．３２０Ｃ：試料のＯ．Ｄ．３２０Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．３２０

【００４５】これらの実験結果を表４に示した。その結
果、ホルトノキ属植物の抽出物は優れたコラゲナーゼ阻
害作用を示した。

【００４６】

【表４】

【００４７】実験例５チロシナーゼ阻害作用製造例１、２、４及び５を試料として用い、チロシナー
ゼ阻害作用を測定した。陽性対照として、アスコルビン
酸を用いた。また、試料の安定性を確認するために、試
料を４０℃で２週間保存して同様に測定を行った。

【００４８】チロシナーゼ阻害試験は、試験管に試料溶
液０．２ｍＬおよびＬ−チロシン溶液（０．２ｍｇ／ｍ
Ｌ）１ｍＬとマックベイン氏の緩衝液（ｐＨ６．８）
０．６ｍＬを加えた後、１，０００Ｕ／ｍＬのチロシナ
ーゼ水溶液０．２ｍＬを加えてよく混合し、３７℃、３
分反応させ、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。各
試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出
した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブ
ランクとしてチロシナーゼの代わりに精製水を用いた。阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１０
０Ａ：対照の４７５ｎｍにおける吸光度（Ｏ．Ｄ．４７
５）Ｂ：対照ブランクのＯ．Ｄ．４７５Ｃ：試料のＯ．Ｄ．４７５Ｄ：試料ブランクのＯ．Ｄ．４７５

【００４９】これらの実験結果を表５に示した。その結
果、ホルトノキ属植物の抽出物は優れたチロシナーゼ阻
害作用を示した。また、陽性対照に用いたアスコルビン
酸は、４０℃で２週間保存するとチロシナーゼ阻害作用
が低下したが、ホルトノキ属植物の抽出物は阻害作用に
変化がなかった。以上のことから、ホルトノキ属植物の
抽出物は、安定で優れたチロシナーゼ阻害作用を示し
た。

【００５０】

【表５】

【００５１】実験例６使用試験１実施例１の化粧水、実施例２のクリーム、比較例１の従
来の化粧水及び比較例２の従来のクリームを用いて、女
性３０人（２１〜４６才）を対象に１ヶ月間の使用試験
を行った。使用後、肌のシワ、タルミの改善効果をアン
ケートにより判定した。

【００５２】これらの試験結果を表６に示した。その結
果、ホルトノキ属植物の抽出物を含有する皮膚外用剤は
優れたシワ、タルミの改善作用を示した。なお、試験期
間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問
題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なか
った。

【００５３】

【表６】

【００５４】実験例７使用試験２実施例１の化粧水、実施例２のクリーム、比較例１の従
来の化粧水及び比較例２の従来のクリームを用いて、シ
ミ、ソバカスに悩む女性１５人（２１〜４６才）を対象
に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、シミ、ソバカ
スの改善効果をアンケートにより判定した。

【００５５】これらの試験結果を表７に示した。その結
果、ホルトノキ属植物の抽出物を含有する皮膚外用剤
は、優れたシミ、ソバカスの改善作用を示した。なお、
試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性におい
ても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問
題なかった。

【００５６】

【表７】

【００５７】実施例３〜８についても同様に使用試験を
行ったところ、優れたシワ、タルミ、シミ、ソバカス等
の改善作用を示した。

【００５８】

【発明の効果】以上のことから、本発明のホルトノキ属
植物の抽出物は、優れた活性酸素消去作用、ヒアルロニ
ダーゼ阻害、エラスターゼ阻害、コラゲナーゼ阻害及び
チロシナーゼ阻害作用を有し、安定性にも優れていた。
さらに、これらの抽出物を含有する皮膚外用剤は、安全
で優れた老化防止、及び美白作用を示した。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 7/02 Ａ６１Ｋ 7/02 Ｚ 7/48 7/48 9/06 9/06 9/08 9/08 9/10 9/10 9/70 ４０５ 9/70 ４０５ 35/78 35/78 ＣＡ６１Ｐ 17/16 Ａ６１Ｐ 17/16 39/06 39/06 43/00 １０７ 43/00 １０７ (72)発明者中田悟名古屋市西区鳥見町２−７日本メナード化粧品株式会社総合研究所内Ｆターム(参考） 4C076 AA06 AA09 AA13 AA17 AA29 AA72 BB31 CC18 FF68 4C083 AA082 AA111 AA112 AA122 AB032 AB232 AB242 AB312 AB352 AB432 AB442 AC022 AC072 AC102 AC122 AC182 AC242 AC302 AC352 AC422 AC432 AC442 AC482 AC542 AD092 AD112 AD272 AD352 AD512 BB24 BB41 CC01 CC03 CC04 CC05 CC07 CC12 CC25 DD12 DD21 DD22 DD23 DD28 DD31 DD41 EE01 EE07 EE10 EE12 EE16 EE42 4C088 AB12 AC01 AC03 AC04 AC05 AC06 AC11 BA09 BA10 BA11 BA37 CA05 CA06 CA08 CA11 CA17 MA04 MA05 MA07 MA17 MA22 MA28 MA32 MA63 NA03 NA06 NA14 ZA89 ZB22 ZC41

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ホルトノキ属植物の抽出物を含有するこ
とを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項２】ホルトノキ属植物の抽出物を含有するこ
とを特徴とする活性酸素消去剤。
【請求項３】ホルトノキ属植物の抽出物を含有するこ
とを特徴とする老化防止剤。
【請求項４】ホルトノキ属植物の抽出物を含有するこ
とを特徴とする美白剤。
【請求項５】インドジュズノキ、セイロンオリーブ、
タマゴホルトノキ及びナガエホルトノキから選ばれる１
種又は２種以上の抽出物を含有することを特徴とする皮
膚外用剤。