JP2002531520A - ガンの新規処置 - Google Patents
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
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- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
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- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
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-
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- A61K2039/80—Vaccine for a specifically defined cancer
- A61K2039/884—Vaccine for a specifically defined cancer prostate
Abstract
(57)【要約】
本発明は、哺乳類及びヒトのガンの処置のための、同種間の免疫療法剤としての使用が意図される１又は複数の細胞系を含んで成る生成物に関する。今までのところ細胞を基にしたガンワクチンの研究全てが、共通の特徴を有しており、すなわち患者の腫瘍に存在する抗原を分ける少なくとも複数のＴＳＡ及び／又はＴＡＡを含む細胞を使用する意図である。それぞれの場合において、腫瘍細胞は、腫瘍細胞だけが適当なＴＳＡ又はＴＡＡを含み、そして前記細胞の組織の起源が患者の腫瘍部位に適合するという前提で、出発点として利用される。本発明の主な観点は、不死化した正常な、非悪性細胞の、同種細胞のガンワクチンの基礎としての使用である。正常な細胞はＴＳＡ又は適当な濃度のＴＡＡを持たないので、本明細書に記載の正常細胞が抗ガンワクチンとして有効であることは驚きである。前立腺ガンの場合、例えばワクチンは、異なる不死化正常細胞系の１つ又はその組み合わせに基づくこともある。前記細胞系は、それらが哺乳類又はヒトにおいて使用する前に複製不能であることを保証するために、５０〜３００Gyでのガンマ線照射を利用して、致死的に照射される。
Description
【０００１】 本発明の分野 本発明は、腫瘍の病巣に対する攻撃を開始するためにガンに苦しむ哺乳類又は
ヒトの免疫系を誘導することによって、哺乳類（ヒトを含む）の原発性、転移性
及び残留性のガンの処置のための薬剤に関する。特に、本発明はワクチンアジュ
バント及び／又は他の補助因子を用いる又は用いない、全細胞、その誘導体及び
一部の使用に関する。更に具体的には、この開示は処置計画の基礎を形成する全
細胞並びにその誘導体及び一部の特定の組み合わせの使用を記載する。
ヒトの免疫系を誘導することによって、哺乳類（ヒトを含む）の原発性、転移性
及び残留性のガンの処置のための薬剤に関する。特に、本発明はワクチンアジュ
バント及び／又は他の補助因子を用いる又は用いない、全細胞、その誘導体及び
一部の使用に関する。更に具体的には、この開示は処置計画の基礎を形成する全
細胞並びにその誘導体及び一部の特定の組み合わせの使用を記載する。
【０００２】 本発明の背景 ガン細胞が、それらの正常な非ガン性対応物と比較して、定性的及び定量的、
空間的及び時間的に多くの変異を含み、そして腫瘍細胞の増殖及び伝播の間のあ
る時点で、これらの一部が宿主の免疫系によって異常として認識されることがで
きることは当業界で知られている。このことは、宿主の免疫系の力を利用し、そ
してガン細胞への攻撃を指示する免疫療法を開発する世界中の多くの研究努力を
導き、それによって少なくとも生命を脅かさないレベルまでその様な異常な細胞
を排除してきた（Maraveyas, A. & Dalgleish, A. G. 1977 Active immunothera
py for solid tumours in vaccine design in The Role of Cytokine Networks,
Ed. Gregoriadis et al., Plenum Press, New York, pages 129-145; Morton,
D. L. and Ravindranath, M. H. 1996 Current concepts concerning melanoma
vaccines in Tumor Immunology - Immunotherapy and Cancer Vaccines, ed. Da
lgleish, A. G. and Browning, M., Cambridge University Press, pages 241-2
68に概説されている。更なる詳細はこれらの出版物の他の紙面を参照のこと）。
空間的及び時間的に多くの変異を含み、そして腫瘍細胞の増殖及び伝播の間のあ
る時点で、これらの一部が宿主の免疫系によって異常として認識されることがで
きることは当業界で知られている。このことは、宿主の免疫系の力を利用し、そ
してガン細胞への攻撃を指示する免疫療法を開発する世界中の多くの研究努力を
導き、それによって少なくとも生命を脅かさないレベルまでその様な異常な細胞
を排除してきた（Maraveyas, A. & Dalgleish, A. G. 1977 Active immunothera
py for solid tumours in vaccine design in The Role of Cytokine Networks,
Ed. Gregoriadis et al., Plenum Press, New York, pages 129-145; Morton,
D. L. and Ravindranath, M. H. 1996 Current concepts concerning melanoma
vaccines in Tumor Immunology - Immunotherapy and Cancer Vaccines, ed. Da
lgleish, A. G. and Browning, M., Cambridge University Press, pages 241-2
68に概説されている。更なる詳細はこれらの出版物の他の紙面を参照のこと）。
【０００３】 ガンの免疫療法を追求する多くの試みがなされてきており、そしてこれらは以
下の５つの範疇に分類されうる：
下の５つの範疇に分類されうる：
【０００４】 非特異的免疫療法 免疫系を非特異的に刺激する試みは、Ｗｉｌｌｉａｍ Ｃｏｌｅｙの一世紀以
上前の草分け的な実験に遡る（Coley, W. B., 1894 Treatment of inoperable m
alignant tumours with toxins of erisipelas and the Bacillus prodigosus.
Trans. Am. Surg. Assoc. 12: 183)。限定されるいくつかの場合において成功す
るが（例えば、泌尿器の膀胱ガンの処置のためのＢＣＧ、メラノーマ及び腎臓ガ
ンの処置のためのＩＬ−２）、非特異的な免疫調節が、多くのガンを処置するの
に十分であることを証明しない様であることは広く認識されている。非特異的な
免疫刺激剤は免疫応答性の一般的な増強される状態を導きうるが、それらは標的
化能力及び、更に免疫監視をくぐり、阻止し、そしてくつがえす多くの機構及び
可塑性を有するであろう腫瘍の病巣を扱うための巧妙さを欠く。
上前の草分け的な実験に遡る（Coley, W. B., 1894 Treatment of inoperable m
alignant tumours with toxins of erisipelas and the Bacillus prodigosus.
Trans. Am. Surg. Assoc. 12: 183)。限定されるいくつかの場合において成功す
るが（例えば、泌尿器の膀胱ガンの処置のためのＢＣＧ、メラノーマ及び腎臓ガ
ンの処置のためのＩＬ−２）、非特異的な免疫調節が、多くのガンを処置するの
に十分であることを証明しない様であることは広く認識されている。非特異的な
免疫刺激剤は免疫応答性の一般的な増強される状態を導きうるが、それらは標的
化能力及び、更に免疫監視をくぐり、阻止し、そしてくつがえす多くの機構及び
可塑性を有するであろう腫瘍の病巣を扱うための巧妙さを欠く。
【０００５】 抗体及びモノクローナル抗体 抗体、及び特にモノクローナル抗体の形態の受動免疫療法は、抗ガン剤として
の、多くの研究及び開発の対象であった。最初、その素晴らしい特異性のために
魔法の弾丸と呼ばれたモノクローナル抗体は、抗体自身に対する免疫応答（それ
によりそれらの活性が排除される）及び血管を通過して病巣に近づくことのでき
ない抗体の能力を含むいくつかの理由のため、ガンの免疫療法の分野におけるそ
れらの期待を果たすのに失敗した。最近、３つの生成物がヒトへの使用のための
医薬として登録され、すなわちＰａｎｏｒｅｘ（Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｌｃｏｍｅ
）、Ｒｉｔｕｘａｎ（ＩＤＥＣ／Ｇｅｎｅｔｅｃｈ／Ｈｏｆｆｍａｎ ｌａ Ｒ
ｏｃｈｅ）及びＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（Ｇｅｎｅｔｅｃｈ／Ｈｏｆｆｍａｎ ｌａ
Ｒｏｃｈｅ）のことであり、研究及び開発のための５０以上の他の計画が進行
している。抗体は、（免疫学的感覚において）ガン抗原を模倣している様な抗イ
ディオタイプ抗体を用いる能動免疫療法にも利用されうる。概念は洗練されてい
るが、抗体に基づいた試みの利用は最終的に、哺乳類又はヒトの対象者のガン細
胞のサブセットが変異し、そして特定の抗体によって認識される抗原を失い、そ
してそれによって、もはや抗体で処置が不可能なガン細胞の集団の増殖を導きう
るという、「免疫学的逸脱」の現象によって制限されうることを証明しうる。
の、多くの研究及び開発の対象であった。最初、その素晴らしい特異性のために
魔法の弾丸と呼ばれたモノクローナル抗体は、抗体自身に対する免疫応答（それ
によりそれらの活性が排除される）及び血管を通過して病巣に近づくことのでき
ない抗体の能力を含むいくつかの理由のため、ガンの免疫療法の分野におけるそ
れらの期待を果たすのに失敗した。最近、３つの生成物がヒトへの使用のための
医薬として登録され、すなわちＰａｎｏｒｅｘ（Ｇｌａｘｏ−Ｗｅｌｌｃｏｍｅ
）、Ｒｉｔｕｘａｎ（ＩＤＥＣ／Ｇｅｎｅｔｅｃｈ／Ｈｏｆｆｍａｎ ｌａ Ｒ
ｏｃｈｅ）及びＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（Ｇｅｎｅｔｅｃｈ／Ｈｏｆｆｍａｎ ｌａ
Ｒｏｃｈｅ）のことであり、研究及び開発のための５０以上の他の計画が進行
している。抗体は、（免疫学的感覚において）ガン抗原を模倣している様な抗イ
ディオタイプ抗体を用いる能動免疫療法にも利用されうる。概念は洗練されてい
るが、抗体に基づいた試みの利用は最終的に、哺乳類又はヒトの対象者のガン細
胞のサブセットが変異し、そして特定の抗体によって認識される抗原を失い、そ
してそれによって、もはや抗体で処置が不可能なガン細胞の集団の増殖を導きう
るという、「免疫学的逸脱」の現象によって制限されうることを証明しうる。
【０００６】 サブユニットワクチン 感染症及び他の分野のためのワクチンの実験を頼りに、多くの研究者が、排他
的に又は選択的にガン細胞と関連している抗原、すなわち腫瘍特異的抗原（ＴＳ
Ａ）又は腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を同定し、そして特異的な能動免疫療法の基礎
として前記の抗原又はその画分を使用しようと努めてきた。
的に又は選択的にガン細胞と関連している抗原、すなわち腫瘍特異的抗原（ＴＳ
Ａ）又は腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）を同定し、そして特異的な能動免疫療法の基礎
として前記の抗原又はその画分を使用しようと努めてきた。
【０００７】 ＴＡＡ又はＴＳＡの範疇に分類されるタンパク質又はそれから誘導したペプチ
ドを同定するために、多くの方法が存在する。例えば、ディファレンシャルディ
スプレイ技術を利用することが可能であり、これによってＲＮＡの発現が、病巣
で排他的又は選択的に発現するＲＮＡを同定するために、腫瘍組織と隣接してい
る正常な組織との間で比較される。前記ＲＮＡの配列決定は、その特異的な組織
でその特異的な時期に発現する複数のＴＡＡ及びＴＳＡを同定したが、その中に
は、ＴＡＡ又はＴＳＡの同定が、病巣における抗原のプロファイルの十分な反映
を長時間提供できない、いずれかの与えられた時期の病巣の「片鱗」のみを表す
という試みの潜在的な欠陥がある。同様に、細胞障害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の
クローニング及び腫瘍組織由来のｃＤＮＡの発現クローニングは、多くのＴＡＡ
及びＴＳＡの同定を、特にメラノーマにおいてもたらした。前記の試みは、ＴＡ
Ａ又はＴＳＡの１つだけの同定が、臨床的に関連している抗原のプロファイルの
適当な表現を提供できないという、ディファレンシャルディスプレイ技術と同一
の固有の欠点を有する。
ドを同定するために、多くの方法が存在する。例えば、ディファレンシャルディ
スプレイ技術を利用することが可能であり、これによってＲＮＡの発現が、病巣
で排他的又は選択的に発現するＲＮＡを同定するために、腫瘍組織と隣接してい
る正常な組織との間で比較される。前記ＲＮＡの配列決定は、その特異的な組織
でその特異的な時期に発現する複数のＴＡＡ及びＴＳＡを同定したが、その中に
は、ＴＡＡ又はＴＳＡの同定が、病巣における抗原のプロファイルの十分な反映
を長時間提供できない、いずれかの与えられた時期の病巣の「片鱗」のみを表す
という試みの潜在的な欠陥がある。同様に、細胞障害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）の
クローニング及び腫瘍組織由来のｃＤＮＡの発現クローニングは、多くのＴＡＡ
及びＴＳＡの同定を、特にメラノーマにおいてもたらした。前記の試みは、ＴＡ
Ａ又はＴＳＡの１つだけの同定が、臨床的に関連している抗原のプロファイルの
適当な表現を提供できないという、ディファレンシャルディスプレイ技術と同一
の固有の欠点を有する。
【０００８】 ５０以上のその様なワクチンの試みは、広範なガンの処置において発達してい
るが、ヒトの医薬生成物としての市販の認可を受けたものはまだない。上文の抗
体に基づいた試みに記載したものに類似の方法において、サブユニットワクチン
は、免疫学的逸脱の現象によっても制限されうる。
るが、ヒトの医薬生成物としての市販の認可を受けたものはまだない。上文の抗
体に基づいた試みに記載したものに類似の方法において、サブユニットワクチン
は、免疫学的逸脱の現象によっても制限されうる。
【０００９】 遺伝子治療 ヒトの対象者における多くの遺伝子治療の試験が、ガンの処置の領域内でされ
てきており、これらの多くが患者の免疫応答を引き起こしそして／あるいは増幅
する様に検討されてきた。商業的な開発における特に注目すべきものは、Ｖｉｃ
ａｌ Ｉｎｃによって開発されたヒト腫瘍の範囲のためのアロベクチン−７及び
ロイベクチン、Ｃａｌｙｄｏｎ Ｉｎｃによって開発された前立腺ガンの処置の
ためのＣＮ７０６、並びにＳｔｒｅｓｓＧｅｎ Ｉｎｃの、メラノーマ及び肺ガ
ンのためのストレスタンパク質の遺伝子治療である。現在、企業及び大学の連合
によって進められている、これら及び他の多くの「免疫−遺伝子治療」が最終的
に成功したのかと証明するのは尚早であるが、これらの試みのうち、商業的な利
用が１０年以上先であろうことは広く受け入れられている。
てきており、これらの多くが患者の免疫応答を引き起こしそして／あるいは増幅
する様に検討されてきた。商業的な開発における特に注目すべきものは、Ｖｉｃ
ａｌ Ｉｎｃによって開発されたヒト腫瘍の範囲のためのアロベクチン−７及び
ロイベクチン、Ｃａｌｙｄｏｎ Ｉｎｃによって開発された前立腺ガンの処置の
ためのＣＮ７０６、並びにＳｔｒｅｓｓＧｅｎ Ｉｎｃの、メラノーマ及び肺ガ
ンのためのストレスタンパク質の遺伝子治療である。現在、企業及び大学の連合
によって進められている、これら及び他の多くの「免疫−遺伝子治療」が最終的
に成功したのかと証明するのは尚早であるが、これらの試みのうち、商業的な利
用が１０年以上先であろうことは広く受け入れられている。
【００１０】 細胞を基にしたワクチン 腫瘍は：潜在的な標的タンパク質の発現のダウンレギュレーション；潜在的な
標的タンパク質の変異；受容体及び他のタンパク質の表面発現のダウンレギュレ
ーション；ＭＨＣクラスＩ及びIIの発現のダウンレギュレーション、それによる
ＴＡＡ又はＴＳＡペプチドの直接的な提示の不可能；アネルギーを導くＴ細胞の
不完全な刺激を導く共刺激分子のダウンレギュレーション；免疫系に対するおと
りとして働く、選択的な、代表的でない膜部分の分断；免疫系をアネルギー化す
る選択的な膜部分の分断；阻害分子の分泌；Ｔ細胞の死滅の誘導；及び多くの他
の方法を含む、様々な方法において、免疫系を中和する注目すべき能力を有する
。明らかなことは、身体の中の免疫学的異種性及び可塑性が、異種性を同様に組
み入れる免疫療法の計画によって、ある程度適合されなければならないであろう
ことである。全ガン細胞、又はその粗製誘導体の、ガンの免疫療法としての使用
は、ウイルス性疾患に対するワクチンとしての、全部の不活性化又は弱毒化ウイ
ルスの使用と類似して考察されうる。潜在的な利点は： （ａ）全細胞が、上述した病巣のものに適合する十分な異種性の抗原のプロファ
イルを提供する幅広い抗原を含み； （ｂ）多価であり（すなわち複数の抗原を含み）、免疫学的逸脱の危険性が低下
しており（これらの抗原の全てを「欠いている」ガン細胞の確率が操作される）
；そして （ｃ）細胞を基にしたワクチンが、それ自身まだ同定されていないＴＳＡ及びＴ
ＡＡを含む；これは、現在まだ同定されていない抗原が知られている比較的少な
いＴＳＡ／ＴＡＡよりも臨床的に関連していない様であるならば可能である、こ
とである。
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ＴＡＡ又はＴＳＡペプチドの直接的な提示の不可能；アネルギーを導くＴ細胞の
不完全な刺激を導く共刺激分子のダウンレギュレーション；免疫系に対するおと
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る選択的な膜部分の分断；阻害分子の分泌；Ｔ細胞の死滅の誘導；及び多くの他
の方法を含む、様々な方法において、免疫系を中和する注目すべき能力を有する
。明らかなことは、身体の中の免疫学的異種性及び可塑性が、異種性を同様に組
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しており（これらの抗原の全てを「欠いている」ガン細胞の確率が操作される）
；そして （ｃ）細胞を基にしたワクチンが、それ自身まだ同定されていないＴＳＡ及びＴ
ＡＡを含む；これは、現在まだ同定されていない抗原が知られている比較的少な
いＴＳＡ／ＴＡＡよりも臨床的に関連していない様であるならば可能である、こ
とである。
【００１１】 細胞を基にしたワクチンは、２つの範疇に分けられる。最初に、自己組織由来
の細胞を基にしたものは、患者からの生検の摘出、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの腫瘍細
胞の培養、トランスフェクション及び／又は他の手段による細胞の修飾、細胞複
製不能にするための照射及び、続いて同一の患者に細胞を戻すためにワクチンと
して注射することを含む。この試みは、過去十年にわたってかなりの注目を受け
たが、この個々の目的に合わせた治療が、複数の理由から本質的に実行不能であ
ることが次第に明らかとなってきた。この試みは時間がかかり（しばしば、ワク
チンの臨床的な投与量の製造のためのリードタイムが、患者の期待寿命を超える
）、高価であり、そして「注文の」生成物として、標準化した生成物を指定する
ことができない（生成物ではなく、方法のみが標準化され、そして、それ故に最
適化され、そして質が調節されうる）。更に、自己組織由来のワクチンを調製す
るために使用した腫瘍の生検は、ある増殖特性、それを独特なものにする周囲の
組織との相互作用及び関係を有するだろう。このことは、免疫療法のための自己
の細胞の使用に対する潜在的に重大な欠点を暗示しており：最初の細胞を提供す
る生検は、ちょうどその時点で、その環境における腫瘍の免疫学的な片鱗を提示
し、そしてこれは疾患の進行全体に及んで与えられうる、維持される活性を有す
るワクチンのために、長時間に及ぶ免疫学的提示として不適当であると思われる
。
の細胞を基にしたものは、患者からの生検の摘出、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの腫瘍細
胞の培養、トランスフェクション及び／又は他の手段による細胞の修飾、細胞複
製不能にするための照射及び、続いて同一の患者に細胞を戻すためにワクチンと
して注射することを含む。この試みは、過去十年にわたってかなりの注目を受け
たが、この個々の目的に合わせた治療が、複数の理由から本質的に実行不能であ
ることが次第に明らかとなってきた。この試みは時間がかかり（しばしば、ワク
チンの臨床的な投与量の製造のためのリードタイムが、患者の期待寿命を超える
）、高価であり、そして「注文の」生成物として、標準化した生成物を指定する
ことができない（生成物ではなく、方法のみが標準化され、そして、それ故に最
適化され、そして質が調節されうる）。更に、自己組織由来のワクチンを調製す
るために使用した腫瘍の生検は、ある増殖特性、それを独特なものにする周囲の
組織との相互作用及び関係を有するだろう。このことは、免疫療法のための自己
の細胞の使用に対する潜在的に重大な欠点を暗示しており：最初の細胞を提供す
る生検は、ちょうどその時点で、その環境における腫瘍の免疫学的な片鱗を提示
し、そしてこれは疾患の進行全体に及んで与えられうる、維持される活性を有す
るワクチンのために、長時間に及ぶ免疫学的提示として不適当であると思われる
。
【００１２】 細胞を基にしたワクチンの第２の型及び本発明の目的は、患者にとって遺伝的
に（そしてそれ故に免疫学的に）不適合な同種細胞の使用を記載する。同種細胞
は自己細胞と同一な多価の利点による恩恵を受ける。更に、同種細胞のワクチン
がｉｎ ｖｉｔｒｏで無期限に培養されうる不死化細胞系に基くことがある場合
、次の様に、この試みは自己組織を用いる試みのリードタイム及び費用上の不利
を被らない。同様に、同種間の試みは、疾患の段階の観点から見た個体の疾患の
プロファイル、病巣の位置及び他の治療に対する潜在的な抵抗性に適合しうる細
胞型の組み合わせを使用する機会を提供する。
に（そしてそれ故に免疫学的に）不適合な同種細胞の使用を記載する。同種細胞
は自己細胞と同一な多価の利点による恩恵を受ける。更に、同種細胞のワクチン
がｉｎ ｖｉｔｒｏで無期限に培養されうる不死化細胞系に基くことがある場合
、次の様に、この試みは自己組織を用いる試みのリードタイム及び費用上の不利
を被らない。同様に、同種間の試みは、疾患の段階の観点から見た個体の疾患の
プロファイル、病巣の位置及び他の治療に対する潜在的な抵抗性に適合しうる細
胞型の組み合わせを使用する機会を提供する。
【００１３】 細胞を基にしたガンワクチンの利用の、多くの刊公された報告が存在している
（例えば、Dranoff, G. et al. WO93/06867; Gansbacher, P. WO94/18995; Jaff
ee, E. M. et al. WO97/24132; Mitchell, M. S. WO90/03183; Morton, D. M. e
t al. WO91/06866を参照のこと）。これらの研究は、ＧＭ−ＣＳＦ，ＩＬ−２、
インターフェロン又は他の免疫学的に活性な分子を産生するための細胞のトラン
スフェクション及び「自殺」遺伝子の使用に対する、免疫療法の抗原としてガン
細胞を用いる基本的な方法に由来する変形の範囲を包含する。集団は、患者のハ
プロタイプに対してＨＬＡ適合又は部分的に適合する同種細胞系及び更にメラノ
ーマの領域の患者のハプロタイプに対して不適合な同種細胞系及び更にＧＭ−Ｃ
ＳＦでトランスフェクションした不適合な同種の前立腺細胞系を使用した。
（例えば、Dranoff, G. et al. WO93/06867; Gansbacher, P. WO94/18995; Jaff
ee, E. M. et al. WO97/24132; Mitchell, M. S. WO90/03183; Morton, D. M. e
t al. WO91/06866を参照のこと）。これらの研究は、ＧＭ−ＣＳＦ，ＩＬ−２、
インターフェロン又は他の免疫学的に活性な分子を産生するための細胞のトラン
スフェクション及び「自殺」遺伝子の使用に対する、免疫療法の抗原としてガン
細胞を用いる基本的な方法に由来する変形の範囲を包含する。集団は、患者のハ
プロタイプに対してＨＬＡ適合又は部分的に適合する同種細胞系及び更にメラノ
ーマの領域の患者のハプロタイプに対して不適合な同種細胞系及び更にＧＭ−Ｃ
ＳＦでトランスフェクションした不適合な同種の前立腺細胞系を使用した。
【００１４】 本発明の説明 本明細書で開示されている本発明は、哺乳類及びヒトのガンの処置のための、
同種間の免疫療法剤としての使用が意図される１又は複数の細胞系を含んで成る
生成物に関する。
同種間の免疫療法剤としての使用が意図される１又は複数の細胞系を含んで成る
生成物に関する。
【００１５】 今までのところ細胞を基にしたガンワクチンの研究全てが、共通の特徴を有し
ており、すなわち患者の腫瘍に存在する抗原で共有されている少なくとも複数の
ＴＳＡ及び／又はＴＡＡを含む細胞を使用する意図である。それぞれの場合にお
いて、腫瘍細胞は、腫瘍細胞だけが適当なＴＳＡ又はＴＡＡを含み、そして前記
細胞の組織の起原が患者の腫瘍部位に適合するという前提で、出発点として利用
される。
ており、すなわち患者の腫瘍に存在する抗原で共有されている少なくとも複数の
ＴＳＡ及び／又はＴＡＡを含む細胞を使用する意図である。それぞれの場合にお
いて、腫瘍細胞は、腫瘍細胞だけが適当なＴＳＡ又はＴＡＡを含み、そして前記
細胞の組織の起原が患者の腫瘍部位に適合するという前提で、出発点として利用
される。
【００１６】 本発明の主な観点は、不死化した正常な、非悪性細胞の、同種細胞のガンワク
チンの基礎としての使用である。正常な細胞はＴＳＡ又は適当な濃度のＴＡＡを
持たないので、本明細書に記載の正常細胞が抗ガンワクチンとして有効であるこ
とは驚きである。この試みは一般的であり、そして処置することが意図される腫
瘍と同一な特定の組織に由来する不死化した正常細胞の使用によって、いずれか
の哺乳類の腫瘍に適合されうる。不死化した正常細胞は、発表されている方法を
用いて当業者によって調製されてもよく、又はそれら細胞バンク、例えばＡＴＣ
Ｃ又はＥＣＡＣＣに由来していてもよく、又はそれらは当業界の複数の研究グル
ープから入手可能である。
チンの基礎としての使用である。正常な細胞はＴＳＡ又は適当な濃度のＴＡＡを
持たないので、本明細書に記載の正常細胞が抗ガンワクチンとして有効であるこ
とは驚きである。この試みは一般的であり、そして処置することが意図される腫
瘍と同一な特定の組織に由来する不死化した正常細胞の使用によって、いずれか
の哺乳類の腫瘍に適合されうる。不死化した正常細胞は、発表されている方法を
用いて当業者によって調製されてもよく、又はそれら細胞バンク、例えばＡＴＣ
Ｃ又はＥＣＡＣＣに由来していてもよく、又はそれらは当業界の複数の研究グル
ープから入手可能である。
【００１７】 前立腺ガンの場合、例えばワクチンは、Rhim, J. S. and Kung, H-F., 1997 C
ritical Reviews in Oncogenesis 8(4): 305-328において概説され、そして引用
されている方法を用いて調製されうる前立腺に由来するか、又はＰＮＴ１Ａ（Ｅ
ＣＡＣＣ参照番号９５０１２６１４）、ＰＮＴ２（ＥＣＡＣＣ参照番号９５０１
２６１３）又はＰＺ−ＨＰＶ−７（ＡＴＣＣ番号：ＣＲＬ−２２２１）から選択
される、異なる不死化正常細胞系の１つ又はその組み合わせに基づくこともある
。
ritical Reviews in Oncogenesis 8(4): 305-328において概説され、そして引用
されている方法を用いて調製されうる前立腺に由来するか、又はＰＮＴ１Ａ（Ｅ
ＣＡＣＣ参照番号９５０１２６１４）、ＰＮＴ２（ＥＣＡＣＣ参照番号９５０１
２６１３）又はＰＺ−ＨＰＶ−７（ＡＴＣＣ番号：ＣＲＬ−２２２１）から選択
される、異なる不死化正常細胞系の１つ又はその組み合わせに基づくこともある
。
【００１８】 本発明の更なる観点は、１又は複数の不死化正常細胞系と、原発性及び転移性
のガンの生検に由来する１，２又は３つの異なる細胞系とを組み合わせることに
よる、ＴＳＡ及び／又はＴＡＡの添加にある。
のガンの生検に由来する１，２又は３つの異なる細胞系とを組み合わせることに
よる、ＴＳＡ及び／又はＴＡＡの添加にある。
【００１９】 全ての適当な細胞系が、大規模な細胞培養における良好な増殖並びに質の調節
及び再現可能な産生を認めるのに十分な特性を示すだろう。
及び再現可能な産生を認めるのに十分な特性を示すだろう。
【００２０】 前記細胞系は、それらが哺乳類又はヒトにおいて使用する前に複製不能である
ことを保証するために、５０〜３００Gyでのガンマ線照射を利用して、致死的に
照射される。
ことを保証するために、５０〜３００Gyでのガンマ線照射を利用して、致死的に
照射される。
【００２１】 前記細胞系及び免疫療法剤として有用であると上文で引用した組み合わせは、
輸送及び貯蔵を見越して凍結しなければならず、それ故に本発明の更なる観点は
、凍結保護溶液で調製した、上文で引用した細胞のいずれかの組み合わせにある
。適当な凍結保護溶液は、限定しないが１０〜３０％ｖ／ｖ水性グリセロール溶
液、５〜２０％ｖ／ｖジメチルスルホキシドを含むことがあり、又は５〜２０％
ｗ／ｖのヒト血清アルブミンが単一の凍結保護剤として又は組み合わせで、その
いずれかで使用されうる。
輸送及び貯蔵を見越して凍結しなければならず、それ故に本発明の更なる観点は
、凍結保護溶液で調製した、上文で引用した細胞のいずれかの組み合わせにある
。適当な凍結保護溶液は、限定しないが１０〜３０％ｖ／ｖ水性グリセロール溶
液、５〜２０％ｖ／ｖジメチルスルホキシドを含むことがあり、又は５〜２０％
ｗ／ｖのヒト血清アルブミンが単一の凍結保護剤として又は組み合わせで、その
いずれかで使用されうる。
【００２２】 本発明の更なる態様は、非特異的な免疫賦活剤、例えばＢＣＧ又はＭ．バッカ
エ（Ｖａｃｃａｅ）、破傷風毒素、ジフテリア毒素、百日咳菌、インターロイキ
ン２、インターロイキン１２、インターロイキン４、インターロイキン７、完全
フロイントアジュバント、不完全フロイントアジュバント又は当業界で知られて
いる他の非特異的薬剤との、前記細胞系の組み合わせの使用にある。その利点は
、一般的な免疫賦活剤が一般的に増強されている免疫状態を作り出し、一方、細
胞系の組み合わせがそれらのハプロタイプな不適合を介して免疫の増強を増し、
そしてそれらの特異的な起源の異種性の結果として、ＴＡＡ及びＴＳＡの多血症
に対する免疫応答を標的化する。
エ（Ｖａｃｃａｅ）、破傷風毒素、ジフテリア毒素、百日咳菌、インターロイキ
ン２、インターロイキン１２、インターロイキン４、インターロイキン７、完全
フロイントアジュバント、不完全フロイントアジュバント又は当業界で知られて
いる他の非特異的薬剤との、前記細胞系の組み合わせの使用にある。その利点は
、一般的な免疫賦活剤が一般的に増強されている免疫状態を作り出し、一方、細
胞系の組み合わせがそれらのハプロタイプな不適合を介して免疫の増強を増し、
そしてそれらの特異的な起源の異種性の結果として、ＴＡＡ及びＴＳＡの多血症
に対する免疫応答を標的化する。
【００２３】 本発明は次の例、及び図に関して記述される。
【００２４】 例１ 細胞の増殖、照射、調製及び保存 正常な前立腺組織に由来する不死化細胞系、すなわちＰＮＴ２は、液体窒素貯
蔵物からの回収後、２mM Ｌ−グルタミン及び５％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を添
加したＲＰＭＩ１６４０培地中で、回転びん培養において増殖した。Ｔ１７５静
置フラスコ中での増殖の後、前記細胞は８５０cm2 の増殖領域を有する回転びん
中に、１〜２０×１０7 細胞／回転びんで播種した。
蔵物からの回収後、２mM Ｌ−グルタミン及び５％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を添
加したＲＰＭＩ１６４０培地中で、回転びん培養において増殖した。Ｔ１７５静
置フラスコ中での増殖の後、前記細胞は８５０cm2 の増殖領域を有する回転びん
中に、１〜２０×１０7 細胞／回転びんで播種した。
【００２５】 原発性の前立腺組織に由来する不死化細胞系、すなわちＮＩＨ１５４２−ＣＰ
３ＴＸは、液体窒素貯蔵物からの回収の後、２５μｇ／mlのウシ下垂体抽出物、
５ng／mlの上皮増殖因子、２mM Ｌ−グルタミン、１０mM ＨＥＰＥＳ緩衝液及
び５％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を添加したＫＳＦＭ培地（以降、「修飾ＫＳＦＭ
」と称する）中で、回転びん培養において増殖した。Ｔ１７５静置フラスコ中で
の増殖の後、前記細胞は１，７００cm2 の増殖領域を有する回転びん中に、２〜
５×１０7 細胞／回転びんで播種した。
３ＴＸは、液体窒素貯蔵物からの回収の後、２５μｇ／mlのウシ下垂体抽出物、
５ng／mlの上皮増殖因子、２mM Ｌ−グルタミン、１０mM ＨＥＰＥＳ緩衝液及
び５％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を添加したＫＳＦＭ培地（以降、「修飾ＫＳＦＭ
」と称する）中で、回転びん培養において増殖した。Ｔ１７５静置フラスコ中で
の増殖の後、前記細胞は１，７００cm2 の増殖領域を有する回転びん中に、２〜
５×１０7 細胞／回転びんで播種した。
【００２６】 ２つの続発性のものに由来する細胞系、すなわちＬｎＣａｐ及びＤｕ１４５も
使用し、これらはともにＡＴＣＣを起源としている。ＬｎＣａｐは、１〜１０×
１０6 細胞／容器で播種し、そして続いてほぼ集密的になるまで増殖した後、１
０％ＦＣＳ及び２mM Ｌ−グルタミンを添加したＲＰＭＩ培地中で、大きな表面
領域の静置フラスコにおいて増殖した。Ｄｕ−１４５は、静置フラスコ中で凍結
貯蔵物から増殖し、そして続いて１〜２０×１０7 細胞／びんで、８５０cm2 の
回転びんに播種し、そして１０％ＦＣＳ及び２mM Ｌ−グルタミンを含むＤＭＥ
Ｍ培地中で集密的になるまで増殖した。全ての細胞系が、１倍の標準的な濃度の
トリプシンを利用して採集された。ＤＭＥＭ中での延長した洗浄の後、前記細胞
を５〜４０×１０6 細胞／mlの濃度で再懸濁し、そしてＣｏ60の供給源を用いて
、５０〜３００Gyで照射した。照射後、前記細胞は１０％ＤＭＳＯ，８％ヒト血
清アルブミン／リン酸緩衝塩溶液から成る凍結保護用液中で調製され、そして使
用が必要とされるまで液体窒素中で５〜１５０×１０6 細胞／μｌの細胞濃度で
凍結される。
使用し、これらはともにＡＴＣＣを起源としている。ＬｎＣａｐは、１〜１０×
１０6 細胞／容器で播種し、そして続いてほぼ集密的になるまで増殖した後、１
０％ＦＣＳ及び２mM Ｌ−グルタミンを添加したＲＰＭＩ培地中で、大きな表面
領域の静置フラスコにおいて増殖した。Ｄｕ−１４５は、静置フラスコ中で凍結
貯蔵物から増殖し、そして続いて１〜２０×１０7 細胞／びんで、８５０cm2 の
回転びんに播種し、そして１０％ＦＣＳ及び２mM Ｌ−グルタミンを含むＤＭＥ
Ｍ培地中で集密的になるまで増殖した。全ての細胞系が、１倍の標準的な濃度の
トリプシンを利用して採集された。ＤＭＥＭ中での延長した洗浄の後、前記細胞
を５〜４０×１０6 細胞／mlの濃度で再懸濁し、そしてＣｏ60の供給源を用いて
、５０〜３００Gyで照射した。照射後、前記細胞は１０％ＤＭＳＯ，８％ヒト血
清アルブミン／リン酸緩衝塩溶液から成る凍結保護用液中で調製され、そして使
用が必要とされるまで液体窒素中で５〜１５０×１０6 細胞／μｌの細胞濃度で
凍結される。
【００２７】 ワクチン接種 前立腺ガンの患者は、少なくとも３０ng／mlの血清ＰＳＡレベルを有する、ホ
ルモン治療に対して抵抗性があることに基づいて選択した。この試験を行うため
の倫理的な許可及びＭＣＡ[イギリスの薬剤管理機関（ＵＫ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
ｓ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ａｇｅｎｃｙ）]の認可が求められ、そして得られた。
ルモン治療に対して抵抗性があることに基づいて選択した。この試験を行うため
の倫理的な許可及びＭＣＡ[イギリスの薬剤管理機関（ＵＫ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
ｓ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ａｇｅｎｃｙ）]の認可が求められ、そして得られた。
【００２８】 ３つのワクチン接種の計画のうち１つは、この試験の各部門に従った：
【表１】
【００２９】 前記細胞は、３７℃の水溶中でおだやかにあたため、そして患者への注射の前
に放線菌のアジュバントと混合した。注射は、流入領域リンパ説のくぼみへの４
つの注射部位で皮内から行った。投与間の最小間隔は２週間であり、そして投与
の多くが４週間隔で与えられた。最初の投与前に、そしていくつかの引き続きの
投与の前に、患者は上文のワクチン接種の計画において列記した４つの細胞系に
対する遅延型過敏（ＤＴＨ）について試験された（全ての試験がアジュバント無
しの０．８×１０6 細胞を含む）。
に放線菌のアジュバントと混合した。注射は、流入領域リンパ説のくぼみへの４
つの注射部位で皮内から行った。投与間の最小間隔は２週間であり、そして投与
の多くが４週間隔で与えられた。最初の投与前に、そしていくつかの引き続きの
投与の前に、患者は上文のワクチン接種の計画において列記した４つの細胞系に
対する遅延型過敏（ＤＴＨ）について試験された（全ての試験がアジュバント無
しの０．８×１０6 細胞を含む）。
【００３０】 免疫学的応答の解析（ａ）Ｔ細胞の増殖応答 ワクチン接種が、ワクチン接種した細胞系に由来する抗原を認識したＴ細胞集
団の特異的な増殖をもたらしたかどうかを決定するために、我々は前立腺細胞系
の溶解液での刺激の後に、Ｔ細胞での増殖アッセイを行った。クリニックに訪れ
た各人の全血液を抽出し、そして以下に記載する様なＢｒｄＵ（ブロモデオキシ
ウリジン）に基づいた増殖アッセイに使用した。
団の特異的な増殖をもたらしたかどうかを決定するために、我々は前立腺細胞系
の溶解液での刺激の後に、Ｔ細胞での増殖アッセイを行った。クリニックに訪れ
た各人の全血液を抽出し、そして以下に記載する様なＢｒｄＵ（ブロモデオキシ
ウリジン）に基づいた増殖アッセイに使用した。
【００３１】 患者のＢｒｄＵ増殖法
【表２】
【００３２】 方法 １）１mlの血液を９mlのＲＰＭＩ＋２mM Ｌ−ｇｌｎ＋ＰＳ＋５０μＭ ２−Ｍ
ｅで希釈する。血清を加えない。３７℃で一晩放置する。 ２）次の朝、４５０μｌの希釈血液を４８穴プレートに分割し、そして５０μｌ
の賦活溶解液を加える。前記溶解液は、腫瘍細胞（２×１０6 細胞等価物／ml）
を液体窒素中で３回凍結融解し、そして続いて必要になるまで凍結してアリコー
トを保存することによって作成した。 ３）３７℃で５日間細胞を培養する。 ４）５日目の晩に、３０μｇ／mlのＢｒｄＵを５０μｌ加える。 ５）１００μｌの各試料を９６穴丸底プレートに分割する。 ６）プレートを遠心し、そして上清を除く。 ７）室温で５分間、１００μｌのＰｈａｒｍａｌｙｓｅを用いて赤血球を溶解す
る。 ８）５０μｌのＣｙｔｏｆｉｘで２回洗浄する。 ９）遠心し、そして上清を軽くはじいて除去する。 １０）１００μｌのＰｅｒｍ洗浄液で、室温で１０分間透過処理をする。 １１）Ｐｅｒｍ洗浄液で体積を合わせる補正希釈時の抗体を含んで成る、３０μ
ｌの抗体混合物を加える。 １２）暗がりにおいて室温で３０分間インキュベートする。 １３）１回洗浄し、そして１００μｌの２％パラホルムアルデヒド中で再懸濁す
る。 １４）これを解析の準備ができたクラスターチューブ中の４００μｌのＦＡＣＳ
フローに加える。 １５）３０００回のＣＤ３の事象を保有する、ＦＡＣＳスキャンで解析する。
ｅで希釈する。血清を加えない。３７℃で一晩放置する。 ２）次の朝、４５０μｌの希釈血液を４８穴プレートに分割し、そして５０μｌ
の賦活溶解液を加える。前記溶解液は、腫瘍細胞（２×１０6 細胞等価物／ml）
を液体窒素中で３回凍結融解し、そして続いて必要になるまで凍結してアリコー
トを保存することによって作成した。 ３）３７℃で５日間細胞を培養する。 ４）５日目の晩に、３０μｇ／mlのＢｒｄＵを５０μｌ加える。 ５）１００μｌの各試料を９６穴丸底プレートに分割する。 ６）プレートを遠心し、そして上清を除く。 ７）室温で５分間、１００μｌのＰｈａｒｍａｌｙｓｅを用いて赤血球を溶解す
る。 ８）５０μｌのＣｙｔｏｆｉｘで２回洗浄する。 ９）遠心し、そして上清を軽くはじいて除去する。 １０）１００μｌのＰｅｒｍ洗浄液で、室温で１０分間透過処理をする。 １１）Ｐｅｒｍ洗浄液で体積を合わせる補正希釈時の抗体を含んで成る、３０μ
ｌの抗体混合物を加える。 １２）暗がりにおいて室温で３０分間インキュベートする。 １３）１回洗浄し、そして１００μｌの２％パラホルムアルデヒド中で再懸濁す
る。 １４）これを解析の準備ができたクラスターチューブ中の４００μｌのＦＡＣＳ
フローに加える。 １５）３０００回のＣＤ３の事象を保有する、ＦＡＣＳスキャンで解析する。
【表３】
【表４】
【表５】
【００３３】 増殖アッセイの結果を図１に示し、ここで、ＣＤ４又はＣＤ８のいずれかにポ
ジティブなＴ細胞の増殖指数が、様々な細胞の溶解液に対してプロットされる。
増殖指数は、Ｔ細胞が増殖するパーセンテージを溶解液無しのコントロールで割
ることによって導かれる。
ジティブなＴ細胞の増殖指数が、様々な細胞の溶解液に対してプロットされる。
増殖指数は、Ｔ細胞が増殖するパーセンテージを溶解液無しのコントロールで割
ることによって導かれる。
【００３４】 患者番号１１２，３０７及び４０６の結果を示す。４つの細胞溶解液、すなわ
ちＮＩＨ１５４２，ＬｎＣａｐ，Ｄｕ−１４５及びＰＮＴ−２の結果を与える。
全体で、処置した患者の５０％が前記細胞系のうち少なくても１つに対する特異
的な増殖応答を増している。
ちＮＩＨ１５４２，ＬｎＣａｐ，Ｄｕ−１４５及びＰＮＴ−２の結果を与える。
全体で、処置した患者の５０％が前記細胞系のうち少なくても１つに対する特異
的な増殖応答を増している。
【００３５】（ｂ）患者の血清を利用するウエスタンブロット 標準化した細胞溶解液は、ウエスタンブロット解析のための変性ＳＤＳ ＰＡ
ＧＥゲル上に同様のタンパク量を添加することを可能にするために、いくつかの
前立腺細胞系について調製された。各ブロットは、分子量マーカー、並びにＮＩ
Ｈ１５４２，ＬｎＣａｐ，Ｄｕ−１４５及びＰＮＴ−２の細胞溶解液由来の等量
のタンパク質が添加された。このブロットは、続いてワクチン接種前及びワクチ
ン接種の１６週後（４〜６回の投与）の患者の血清でプローブした。
ＧＥゲル上に同様のタンパク量を添加することを可能にするために、いくつかの
前立腺細胞系について調製された。各ブロットは、分子量マーカー、並びにＮＩ
Ｈ１５４２，ＬｎＣａｐ，Ｄｕ−１４５及びＰＮＴ−２の細胞溶解液由来の等量
のタンパク質が添加された。このブロットは、続いてワクチン接種前及びワクチ
ン接種の１６週後（４〜６回の投与）の患者の血清でプローブした。
【００３６】 方法 ａ）試料の調製（前立腺の腫瘍系） ・細胞のペレットをＰＢＳ中で３回洗浄する。 ・１×１０7 細胞／ml溶解緩衝液で再懸濁する。 ・液体窒素／水溶中での素速い凍結融解に５サイクル通す。 ・細胞片を除去するために５分間１５００rpm で遠心する。 ・膜混入物を除去するために３０分間２０，０００rpm で超遠心する。 ・２００μｌに分割し、そして−８０℃で保存する。
【００３７】 ｂ）ゲル電気泳動 ・溶解液をＬａｅｍｅｌｌｉの試料緩衝液と１：１で混合し、そして５分間煮沸
する。 ・４〜２０％のグラジエンドゲルの穴に２０μｇの試料を添加する。 ・Ｂｊｅｒｒｕｍ及びＳｃｈａｆｅｒ−Ｎｉｅｌｓｏｎのトランスファー緩衝液
（ＳＤＳを含む）中で、２００Ｖで３５分間ゲルを流す。
する。 ・４〜２０％のグラジエンドゲルの穴に２０μｇの試料を添加する。 ・Ｂｊｅｒｒｕｍ及びＳｃｈａｆｅｒ−Ｎｉｅｌｓｏｎのトランスファー緩衝液
（ＳＤＳを含む）中で、２００Ｖで３５分間ゲルを流す。
【００３８】 ｃ）ウエスタントランスファー ・トランスファー緩衝液中で１５分間、ゲル、ニトロセルロース膜及びブロッテ
ィングペーパーを平衡化する。 ・セミドライの電気泳動トランスファーセルの陽極上のゲル−ニトロセルロース
サンドイッチを並べる：２枚のブロッティングペーパー、ニトロセルロース膜、
ゲル、２枚のブロッティングペーパー。 ・陰極をかけ、そして２５Ｖで９０分間流す。
ィングペーパーを平衡化する。 ・セミドライの電気泳動トランスファーセルの陽極上のゲル−ニトロセルロース
サンドイッチを並べる：２枚のブロッティングペーパー、ニトロセルロース膜、
ゲル、２枚のブロッティングペーパー。 ・陰極をかけ、そして２５Ｖで９０分間流す。
【００３９】 ｄ）タンパク質の免疫学的検出 ・４℃で一晩、ＰＢＳ／０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０中の５％Ｍａｒｖｅｌでニ
トロセルロース膜をブロッキングする。 ・ＰＢＳ／０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０中で膜を２回すすぎ、続いて室温で２０
分間及び２×５分間、振盪プラットホーム上で洗浄する。 ・振盪プラットホーム上で室温で１２０分間、明らかにした患者の血漿の1：２
０希釈液中で膜をインキュベートする。 ・５分の最終洗浄を加えて、上文の様に洗浄する。 ・振盪プラットホーム上で室温で９０分間、ビオチン抗ヒトＩｇＧ又はＩｇＭの
１：２５０希釈液中で膜をインキュベートする。 ・５分の最終洗浄を加えて、上文の様に洗浄する。 ・振盪プラットホーム上で室温で６０分間、ストレプトアビジン−西洋クサビペ
ルオキシダーゼ結合体の１：１０００希釈液中で膜をインキュベートする。 ・上文の様に洗浄する。 ・発色させるために、５分間ジアミノベンジジンペルオキシターゼ基質中で膜を
インキュベートし、膜を水ですすぐことで反応を停止させる。
トロセルロース膜をブロッキングする。 ・ＰＢＳ／０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０中で膜を２回すすぎ、続いて室温で２０
分間及び２×５分間、振盪プラットホーム上で洗浄する。 ・振盪プラットホーム上で室温で１２０分間、明らかにした患者の血漿の1：２
０希釈液中で膜をインキュベートする。 ・５分の最終洗浄を加えて、上文の様に洗浄する。 ・振盪プラットホーム上で室温で９０分間、ビオチン抗ヒトＩｇＧ又はＩｇＭの
１：２５０希釈液中で膜をインキュベートする。 ・５分の最終洗浄を加えて、上文の様に洗浄する。 ・振盪プラットホーム上で室温で６０分間、ストレプトアビジン−西洋クサビペ
ルオキシダーゼ結合体の１：１０００希釈液中で膜をインキュベートする。 ・上文の様に洗浄する。 ・発色させるために、５分間ジアミノベンジジンペルオキシターゼ基質中で膜を
インキュベートし、膜を水ですすぐことで反応を停止させる。
【００４０】 患者１１２，３０５及び４０２の図３の結果は、明らかに１６週の期間に及ぶ
ワクチン接種（４〜６回の投与）が、細胞系の溶解液に対する抗体の力価及び更
にはこのワクチン接種法で入手できない溶解液（ＤＴＨ試験以外）に対する交差
反応性の増大をもたらしうることを示している。
ワクチン接種（４〜６回の投与）が、細胞系の溶解液に対する抗体の力価及び更
にはこのワクチン接種法で入手できない溶解液（ＤＴＨ試験以外）に対する交差
反応性の増大をもたらしうることを示している。
【００４１】（ｃ）抗体の力価の決定 抗体の力価は、標準化した細胞系でＥＬＩＳＡプレートをコーティングし、そ
してワクチン接種した患者由来の血清に対する希釈研究を行うことで決定した。
してワクチン接種した患者由来の血清に対する希釈研究を行うことで決定した。
【００４２】 抗溶解液ＩｇＧを用いるＥＬＩＳＡの方法 １．次の希釈を用いて、５０μｌ／穴 溶解液（１０μｇ／ml）でプレートをコ
ートする。
ートする。
【表６】 ２．カバーをし、そして４℃で一晩インキュベートする。 ３．２回ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎで洗浄する。乾燥させるためにペーパータオル上で
プレートをたたく。 ４．ＰＢＳ／１０％ＦＣＳでブロックする（１００μｌ／穴）。 ５．カバーし、そして室温で１時間（最低）インキュベートする。 ６．ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎで２回洗浄する。 ７．１００μｌのＰＢＳ−１０％ＦＣＳを列２〜８に加える。 ８．２００μｌの血漿試料（ＰＢＳ−１０％ＦＣＳ中で１／１００希釈、すなわ
ち１０μｌの血漿を９９０μｌのＰＢＳ−１０％ＦＣＳに加えたもの）を列１に
加え、そしてプレートの下方向への１００μｌの連続希釈を行う。一番下の穴か
ら過剰な１００μｌを除く。カバーし、そして冷蔵庫で一晩インキュベートする
。 ９．ビオチン化した抗体（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｒ；ＩｇＧ ３４１６２Ｄ）を最
終濃度１mg／mlに希釈する（すなわち２０ml／１０ml）。 １０．カバーし、そして室温で４５分間インキュベートする。 １１．上文の様に６回洗浄する。 １２．ストレプトアビジン−ＨＲＰ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｒ，１３０４７Ｅ Ｏ
；１：１０００希釈）に希釈する（すなわち１０ml−＞１０ml）。 １３．穴当たり１００mlを加える。 １４．室温で３０分間インキュベートする。 １５．８回洗浄する １６．穴当たり１００ml基質を加える。室温で１０〜８０分展開する。 １７．１００mlの１Ｍ Ｈ2ＳＯ4を加えることで発色反応を停止する。 １８．４０５nmでＯＤを読み取る。
プレートをたたく。 ４．ＰＢＳ／１０％ＦＣＳでブロックする（１００μｌ／穴）。 ５．カバーし、そして室温で１時間（最低）インキュベートする。 ６．ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎで２回洗浄する。 ７．１００μｌのＰＢＳ−１０％ＦＣＳを列２〜８に加える。 ８．２００μｌの血漿試料（ＰＢＳ−１０％ＦＣＳ中で１／１００希釈、すなわ
ち１０μｌの血漿を９９０μｌのＰＢＳ−１０％ＦＣＳに加えたもの）を列１に
加え、そしてプレートの下方向への１００μｌの連続希釈を行う。一番下の穴か
ら過剰な１００μｌを除く。カバーし、そして冷蔵庫で一晩インキュベートする
。 ９．ビオチン化した抗体（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｒ；ＩｇＧ ３４１６２Ｄ）を最
終濃度１mg／mlに希釈する（すなわち２０ml／１０ml）。 １０．カバーし、そして室温で４５分間インキュベートする。 １１．上文の様に６回洗浄する。 １２．ストレプトアビジン−ＨＲＰ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｒ，１３０４７Ｅ Ｏ
；１：１０００希釈）に希釈する（すなわち１０ml−＞１０ml）。 １３．穴当たり１００mlを加える。 １４．室温で３０分間インキュベートする。 １５．８回洗浄する １６．穴当たり１００ml基質を加える。室温で１０〜８０分展開する。 １７．１００mlの１Ｍ Ｈ2ＳＯ4を加えることで発色反応を停止する。 １８．４０５nmでＯＤを読み取る。
【００４３】 患者１１２，３０５及び４０２の図３結果は、基準線（Ｏ）、４週、８週及び
１６週の抗体の力価を示す。本データは、少なくとも４回の投与によるワクチン
接種後、患者が細胞系の溶解液に対する抗体の力価及び更にはこのワクチン接種
法で入手できない溶解液（ＤＨＴ投与以外）に対する交差反応性の増大を示すこ
とがあることを示す。
１６週の抗体の力価を示す。本データは、少なくとも４回の投与によるワクチン
接種後、患者が細胞系の溶解液に対する抗体の力価及び更にはこのワクチン接種
法で入手できない溶解液（ＤＨＴ投与以外）に対する交差反応性の増大を示すこ
とがあることを示す。
【００４４】（ｄ）ＰＳＡレベルの評価 ワクチンを受けている患者のＰＳＡレベルは、試験の開始時及びワクチン接種
の間、慣習的に使用する臨床用のキットを用いて記録した。患者１１０，３０３
及び４０４のＰＳＡ値は図４に示し（縦軸は血清ＰＳＡ（ng／ml）であり；横軸
は時間であり、最初の点はワクチン接種計画の開始を表す）、そしてＰＳＡ値の
落ち込み又は部分的な安定化を表し、この患者の集団において、しばしば指数関
数的な増大が標準的に持続する。患者１１０の結果は、骨の痛みを軽減するため
の放射線治療によって多少混乱するが、ＰＳＡレベルは放射線治療の前に低下し
た。
の間、慣習的に使用する臨床用のキットを用いて記録した。患者１１０，３０３
及び４０４のＰＳＡ値は図４に示し（縦軸は血清ＰＳＡ（ng／ml）であり；横軸
は時間であり、最初の点はワクチン接種計画の開始を表す）、そしてＰＳＡ値の
落ち込み又は部分的な安定化を表し、この患者の集団において、しばしば指数関
数的な増大が標準的に持続する。患者１１０の結果は、骨の痛みを軽減するため
の放射線治療によって多少混乱するが、ＰＳＡレベルは放射線治療の前に低下し
た。
【００４５】 例２：マウスのメラノーマ保護モデルにおける正常なメラノサイトの使用 正常なメラノサイト細胞系は、挑戦的な投与としてＢ１６．Ｆ１０を利用する
マウスのワクチン接種保護モデルに使用した。Ｃ５７マウスはＰＢＳ，５×１０ 6 個の照射されたＫ１７３５同種のメラノーマ細胞又は５×１０6 個の照射され
たＭｅｌａｎ Ｐ１の自己の正常なメラノサイト細胞のいずれかのうちの２つの
ワクチン接種を１４及び７日目に受けた。０日目の挑戦は１×１０4 個のＢ１６
．Ｆ１０細胞で行い、そして腫瘍の大きさは１０日目以降から３日ごとに測定し
た。動物は、腫瘍が腫瘍の最大の大きさを超えて１．５×１．５cmに生育したと
きにと殺した。図５は、Ｍｅｌａｎ １Ｐ細胞によるワクチン接種が、この特に
活動的なマウスの腫瘍に対してある程度の保護をもたらすことを示す。
マウスのワクチン接種保護モデルに使用した。Ｃ５７マウスはＰＢＳ，５×１０ 6 個の照射されたＫ１７３５同種のメラノーマ細胞又は５×１０6 個の照射され
たＭｅｌａｎ Ｐ１の自己の正常なメラノサイト細胞のいずれかのうちの２つの
ワクチン接種を１４及び７日目に受けた。０日目の挑戦は１×１０4 個のＢ１６
．Ｆ１０細胞で行い、そして腫瘍の大きさは１０日目以降から３日ごとに測定し
た。動物は、腫瘍が腫瘍の最大の大きさを超えて１．５×１．５cmに生育したと
きにと殺した。図５は、Ｍｅｌａｎ １Ｐ細胞によるワクチン接種が、この特に
活動的なマウスの腫瘍に対してある程度の保護をもたらすことを示す。
【図１−１】 図１−１は患者１１２，３０７及び４０６のＴ細胞の増殖を示す。
【図１−２】 図１−２は患者１１２，３０７及び４０６のＴ細胞の増殖を示す。
【図２−１】 図２−１は患者１１５，３０４及び４０２由来の血清のウエスタンブロット解
析を示す。
析を示す。
【図２−２】 図２−２は患者１１５，３０４及び４０２由来の血清のウエスタンブロット解
析を示す。
析を示す。
【図３−１】 図３−１は患者１１２，３０５及び４０２由来の血清の抗体の力価を示す。
【図３−２】 図３−２は患者１１２，３０５及び４０２由来の血清の抗体の力価を示す。
【図３−３】 図３−３は患者１１２，３０５及び４０２由来の血清の抗体の力価を示す。
【図３−４】 図３−４は患者１１２，３０５及び４０２由来の血清の抗体の力価を示す。
【図３−５】 図３−５は患者１１２，３０５及び４０２由来の血清の抗体の力価を示す。
【図３−６】 図３−６は患者１１２，３０５及び４０２由来の血清の抗体の力価を示す。
【図４−１】 図４−１は患者１１０，３０３及び４０４のＰＳＡデータを示す。
【図４−２】 図４−２は患者１１０，３０３及び４０４のＰＳＡデータを示す。
【図５】 図５は正常なメラノサイトで免疫化したＣ５７マウスの生存曲線を示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 39/04 Ａ６１Ｋ 39/05 39/05 39/08 39/08 39/10 39/10 39/39 39/39 47/10 47/10 47/20 47/20 47/42 47/42 Ａ６１Ｐ 13/08 Ａ６１Ｐ 13/08 35/00 35/00 37/04 37/04 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｒ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ， ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，Ｋ Ｚ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ， ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，Ｓ Ｋ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 スミス，ピーター マイケル イギリス国，ロンドン エスダブリュ17 ０ダブリュジー，ピー．オー．ボックス 17717，クランマー テラス，セント ジ ョージズ ホスピタル メディカル スク ール，オニバックス リミティド (72)発明者 サットン，アンドリュー デレック イギリス国，ロンドン エスダブリュ17 ０ダブリュジー，ピー．オー．ボックス 17717，クランマー テラス，セント ジ ョージズ ホスピタル メディカル スク ール，オニバックス リミティド (72)発明者 ウォーカー，アンソニー イアン イギリス国，ロンドン エスダブリュ17 ０ダブリュジー，ピー．オー．ボックス 17717，クランマー テラス，セント ジ ョージズ ホスピタル メディカル スク ール，オニバックス リミティド Ｆターム(参考） 4C076 AA11 BB11 BB16 BB21 CC06 CC07 CC17 CC27 DD38 DD55 EE41 FF70 4C084 AA02 BA44 CA62 DA12 DA14 DA16 MA05 MA17 MA55 MA66 NA05 NA14 ZA811 ZB091 ZB261 4C085 AA03 AA38 BA09 BA10 BA12 BA17 BB17 BB18 CC07 FF03 FF20 GG01 GG05 GG10 4C087 AA01 AA02 BB57 CA04 MA01 MA05 MA17 MA55 MA66 NA05 NA14 ZA81 ZB09 ZB26 【要約の続き】 利用して、致死的に照射される。
Claims (23)
- 【請求項１】 ３つのヒト前立腺細胞系を含んで成る前立腺ガンの処置のた
めの免疫療法剤であって、このうちの１つの細胞系が正常な組織に由来し、そし
て他の２つの細胞系が腫瘍組織に由来する免疫療法剤。 - 【請求項２】 ３つのヒト前立腺腫瘍細胞系を含んで成る前立腺ガンの処置
のための免疫療法剤であって、このうちの１つの細胞系が原発腫瘍に由来し、そ
して他の２つの細胞系が２つの異なる腫瘍組織に由来する免疫療法剤。 - 【請求項３】 ３つのヒト前立腺細胞系を含んで成る前立腺ガンの処置のた
めの免疫療法剤であって、この３つの細胞系が１，２又は３つの正常組織に由来
する免疫療法剤。 - 【請求項４】 ３つのヒト前立腺細胞系を含んで成る前立腺ガンの処置のた
めの免疫療法剤であって、このうちの２つの細胞系が正常な組織に由来し、そし
て他の細胞系が腫瘍部位に由来する免疫療法剤。 - 【請求項５】 正常な組織由来の細胞系がＰＮＴ１Ａ（ＥＣＡＣＣ参照番号
：９５０１２６１４）又はＰＮＴ２（ＥＣＡＣＣ参照番号：９５０１２６１３）
から選択される、請求項１，３及び４のいずれか１項に記載の免疫療法剤。 - 【請求項６】 腫瘍組織由来の細胞系がＮＩＨ１５１９−ＣＰＴＸ，ＮＩＨ
１５３２−ＣＰ２ＴＸ，ＮＩＨ１５３５−ＣＰ１ＴＸ，ＮＩＨ１５４２−ＣＰ３
ＴＸ，ＣＡ−ＨＰＶ−１０，ＬｎＣａｐ，ＤＵ１４５又はＰＣ３から選択される
、請求項１，２及び４のいずれか１項に記載の免疫療法剤。 - 【請求項７】 ３つの細胞系、すなわちＰＮＴ２，ＮＩＨ１５４２−ＣＰ３
ＴＸ及びＤＵ１４５を含んで成る前立腺ガンの処置のための免疫療法剤。 - 【請求項８】 ３つの細胞系、すなわちＰＮＴ２，ＮＩＨ１５４２−ＣＰ３
ＴＸ及びＬｎＣａｐを含んで成る前立腺ガンの処置のための免疫療法剤。 - 【請求項９】 ３つの細胞系、すなわちＰＮＴ２，ＤＵ１４５及びＬｎＣａ
ｐを含んで成る前立腺ガンの処置のための免疫療法剤。 - 【請求項１０】 前記の腫瘍細胞系が５０〜３００Gyで照射された、請求項
１〜９のいずれか１項の免疫療法剤。 - 【請求項１１】 前記の腫瘍細胞系が１００〜１５０Gyで照射された、請求
項１〜９のいずれか１項に記載の免疫療法剤。 - 【請求項１２】 放線菌調製物、例えばＢＣＧ又はＭ．バッカエ（Ｖａｃｃ
ａｅ）、破傷風毒素、ジフテリア毒素、百日咳菌、インターロイキン２、インタ
ーロイキン１２、インターロイキン４、インターロイキン７、完全フロイントア
ジュバント、不完全フロイントアジュバント又は他の非特異的薬剤アジュバント
から選択されるワクチンアジュバントと組み合わせた、請求項１〜１１のいずれ
か１項に記載の免疫療法剤を含んで成る免疫原性組成物。 - 【請求項１３】 放線菌調製物、例えばＢＣＧ又はＭ．バッカエから選択さ
れるワクチンアジュバントと組み合わせた、請求項１〜１１のいずれか１項に記
載の免疫療法剤を含んで成る免疫原性組成物。 - 【請求項１４】 前記細胞が、限定しないが１０〜３０％ｖ／ｖの水性グリ
セロール溶液、５〜２０％ｖ／ｖジメチルスルホキシド又は５〜２０％ｗ／ｖの
ヒト血清アルブミンを単一の凍結保護物質として又は組み合わせて、そのいずれ
かで含む凍結保護溶液で調製される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の免
疫療法剤又は組成物。 - 【請求項１５】 前記細胞が、５〜２０％ｖ／ｖジメチルスルホキシド及び
５〜２０％ｗ／ｖのヒト血清アルブミンを組み合わせて含む、凍結保護溶液で調
製される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の免疫療法剤又は組成物。 - 【請求項１６】 免疫Ｔ細胞の活性化を特徴とする患者の免疫応答を誘導す
る、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の免疫療法剤又は組成物。 - 【請求項１７】 抗体産生の誘導を特徴とする患者の免疫応答を誘導する、
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の免疫療法剤又は組成物。 - 【請求項１８】 前立腺ガンの患者の血清ＰＳＡのレベルにおいて、増加又
は減少の速度で低下を誘導する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の免疫療
法剤又は組成物。 - 【請求項１９】 皮内投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の
免疫療法剤又は組成物。 - 【請求項２０】 前立腺内に投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に
記載の免疫療法剤又は組成物。 - 【請求項２１】 生理学的に許容される補形薬、アジュバント又は担体と一
緒に、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の免疫療法剤を含んで成るか又はそ
れから成る、前立腺ガンの処置のための免疫療法ワクチン組成物。 - 【請求項２２】 適当な剤形の１又は複数回投与で、請求項１〜２２のいず
れか１項に記載の免疫療法剤又は組成物を患者に投与することを含む、前立腺ガ
ンの予防又は処置の方法。 - 【請求項２３】 ヒトの前立腺ガンの処置のための薬剤の製造における、請
求項１〜１１のいずれか１項に記載の免疫療法剤の使用。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002531521A (ja) * | 1998-12-10 | 2002-09-24 | オニバックス リミティド | ガンの新規処置 |
| JP2004522162A (ja) * | 2001-06-01 | 2004-07-22 | レイセオン・カンパニー | 改良された高速度でマルチレベルの冷却されないボロメータおよびその製造方法 |
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Families Citing this family (8)
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| AU4935700A (en) * | 1999-05-21 | 2000-12-12 | Onyvax Limited | New vaccine formulations-3 |
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| BRPI0414014A (pt) * | 2003-08-26 | 2006-10-24 | Becton Dickinson Co | métodos para distribuição intradérmica de agentes terapêuticos |
| US20100255020A1 (en) * | 2007-11-20 | 2010-10-07 | Nec Corporation | Method for inducing cytotoxic t-cells, cytotoxic t-cell inducers, and pharmaceutical compositions and vaccines employing them |
| AU2009200767A1 (en) * | 2008-03-10 | 2009-09-24 | Aristocrat Technologies Australia Pty Limited | A gaming system and a method of gaming |
| CA2743904A1 (en) * | 2008-11-17 | 2010-05-20 | The Regents Of The University Of Michigan | Cancer vaccine compositions and methods of using the same |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997028255A1 (en) * | 1996-02-02 | 1997-08-07 | The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Immortal human prostate epithelial cell lines and clones and their applications in the research and therapy of prostate cancer |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU677165B2 (en) * | 1991-10-04 | 1997-04-17 | Johns Hopkins University School Of Medicine, The | The regulation of systemic immune responses utilizing cytokines and antigens |
| JPH05246889A (ja) * | 1992-03-05 | 1993-09-24 | Seitai Chiyousetsu Kenkyusho:Kk | 制癌方法および制癌剤 |
| AU2370195A (en) * | 1994-04-28 | 1995-11-29 | Scott Freeman | Cell lines obtained by (in vivo) migration and by fusion with autoimmune cells |
| EP0815204B1 (en) * | 1995-03-17 | 2006-09-06 | The Regents Of The University Of California | Method for treating tumors by alloactivated human donor lymphocytes |
| US5788963A (en) * | 1995-07-31 | 1998-08-04 | Pacific Northwest Cancer Foundation | Isolation and/or preservation of dendritic cells for prostate cancer immunotherapy |
| ATE237338T1 (de) * | 1995-12-28 | 2003-05-15 | Univ Johns Hopkins Med | Allogene parakrine cytokine tumor impfstoffe |
| GB9620350D0 (en) * | 1996-09-30 | 1996-11-13 | Maudsley David J | Cancer vaccine |
| US6207805B1 (en) * | 1997-07-18 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Prostate cell surface antigen-specific antibodies |
| GB9827104D0 (en) * | 1998-12-10 | 1999-02-03 | Onyvax Ltd | New cancer treatments |
-
1998
- 1998-12-10 GB GBGB9827104.2A patent/GB9827104D0/en not_active Ceased
-
1999
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-
2001
- 2001-05-22 IL IL143296A patent/IL143296A/en not_active IP Right Cessation
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-
2005
- 2005-07-12 US US11/178,415 patent/US8034360B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-10-07 JP JP2011223318A patent/JP2012021028A/ja active Pending
- 2011-10-11 US US13/270,820 patent/US20120164099A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997028255A1 (en) * | 1996-02-02 | 1997-08-07 | The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Immortal human prostate epithelial cell lines and clones and their applications in the research and therapy of prostate cancer |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002531521A (ja) * | 1998-12-10 | 2002-09-24 | オニバックス リミティド | ガンの新規処置 |
| JP2004522162A (ja) * | 2001-06-01 | 2004-07-22 | レイセオン・カンパニー | 改良された高速度でマルチレベルの冷却されないボロメータおよびその製造方法 |
| WO2008096831A1 (ja) * | 2007-02-07 | 2008-08-14 | The Research Foundation For Microbial Diseases Of Osaka University | 癌の治療剤 |
| JP5239041B2 (ja) * | 2007-02-07 | 2013-07-17 | 一般財団法人阪大微生物病研究会 | 癌の治療剤 |
| US9045556B2 (en) | 2007-02-07 | 2015-06-02 | Nec Corporation | Therapeutic agent for cancer |
| CN105664147A (zh) * | 2007-02-07 | 2016-06-15 | 日本电气株式会社 | 用于癌症的治疗剂 |
| US9724403B2 (en) | 2007-02-07 | 2017-08-08 | Nec Corporation | Therapeutic agent for cancer |
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| WO2000033871A2 (en) | Use of human prostate tumour cell lines in cancer treatment | |
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