JP2002516354A5

JP2002516354A5 -

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Publication number: JP2002516354A5
Application number: JP2000550883A
Authority: JP
Filing date: 1999-05-27
Publication date: 2006-01-05
Anticipated expiration: 2019-05-27

Description

【特許請求の範囲】
【請求項１】ベータグルカン溶液のゲル化を抑制する方法であって、ベータグルカン溶液が１０℃以下の温度に冷却されたときベータグルカン溶液のゲル化を抑制するに十分な条件下で、ベータグルカン含有配合物を生物学的両性イオン緩衝液と混合し、ベータグルカン溶液を生成する工程を含む方法。
【請求項２】前記生物学的両性イオン緩衝液がＮ−［２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］（ＨＥＰＥＳ）、３−［Ｎ−モルホリノ］プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ−トリス［ヒドロキシメチル］メチル−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−ヒドロキシエチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、［カルバモイルメチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス［２−エタンスルホン酸］（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−［２−アセトアミド］−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）および３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）からなる群から選択される生物学的緩衝剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】前記生物学的両性イオン緩衝溶液がＨＥＰＥＳ緩衝剤を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】前記ＨＥＰＥＳ緩衝剤が、２．５ｍＭから５ｍＭの濃度で存在する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】前記ベータグルカン配合物がオート麦配合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】前記生物学的両性イオン緩衝溶液がさらに保存剤を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】前記生物学的両性イオン緩衝溶液のｐＨが７．２である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】ベータグルカン溶液が１０℃以下の温度に冷却されたとき、オート麦ベータグルカン溶液のゲル化を抑制する方法であって、オート麦ベータグルカン配合物を、保存剤および２．５ｍＭから５ｍＭの濃度のＨＥＰＥＳ緩衝剤を含み７．２のｐＨを有するＨＥＰＥＳ緩衝液と混合して、ベータグルカン溶液を得る工程を含む方法。
【請求項９】ベータグルカン含有穀類配合物からベータグルカンを精製する方法であって、
（ａ）ベータグルカンを分散するに十分な条件下で、前記配合物を生物学的両性イオン緩衝液と混合し、ベータグルカン溶液を形成する工程；および
（ｂ）前記ベータグルカン溶液を加熱し、分散した親水コロイド溶液を製造する工程を含む方法。
【請求項１０】前記の分散した親水コロイド溶液を濾過して、浄化されたベータグルカン溶液を提供する工程をさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】前記生物学的両性イオン緩衝液がＮ−［２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］（ＨＥＰＥＳ）、３−［Ｎ−モルホリノ］プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ−トリス［ヒドロキシメチル］メチル−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−ヒドロキシエチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、［カルバモイルメチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス［２−エタンスルホン酸］（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−［２−アセトアミド］−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）および３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）からなる群から選択される生物学的緩衝剤を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】前記生物学的両性イオン緩衝溶液がＨＥＰＥＳ緩衝剤を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】前記ＨＥＰＥＳ緩衝剤が、２．５ｍＭから５ｍＭの濃度で存在する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】前記穀類配合物がオート麦配合物である、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】前記生物学的両性イオン緩衝溶液がさらに保存剤を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１６】前記生物学的両性イオン緩衝溶液のｐＨが７．２である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】前記ベータグルカン溶液が５４℃から１００℃の温度に加熱される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１８】オート麦ベータグルカン配合物からオート麦ベータグルカンを精製する方法であって、
（ａ）前記配合物を、保存剤および２．５ｍＭから５ｍＭの濃度のＨＥＰＥＳ緩衝剤を含み、７．２のｐＨを有するＨＥＰＥＳ緩衝液と混合し、ベータグルカン溶液を形成する工程；
（ｂ）前記ベータグルカン溶液を５４℃から１００℃の温度に加熱し、分散した親水コロイド溶液を製造する工程；および
（ｃ）前記の分散した親水コロイド溶液を濾過して、浄化されたベータグルカン溶液を提供する工程を含む方法。
【請求項１９】前記ベータグルカン溶液が、６０℃から６５℃の温度に加熱される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】ベータグルカン含有穀類配合物からベータグルカンを精製する方法であって、
（ａ）前記穀類配合物中のベータグルカンを水和して、ベータグルカン溶液を製造する工程；
（ｂ）前記ベータグルカン溶液を加熱し、前記ベータグルカン溶液中のベータグルカンを溶解して、分散したベータグルカン溶液を提供する工程；
（ｃ）分散したベータグルカン溶液を濾過して、浄化されたベータグルカン溶液を提供する工程；および
（ｄ）生物学的両性イオン緩衝液を前記の浄化されたベータグルカン溶液に加え、安定化ベータグルカン溶液を提供する工程を含む方法。
【請求項２１】前記生物学的両性イオン緩衝液がＮ−［２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］（ＨＥＰＥＳ）、３−［Ｎ−モルホリノ］プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ−トリス［ヒドロキシメチル］メチル−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−ヒドロキシエチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、［カルバモイルメチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス［２−エタンスルホン酸］（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−［２−アセトアミド］−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）および３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）からなる群から選択される生物学的緩衝剤を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】前記生物学的両性イオン緩衝溶液がＨＥＰＥＳ緩衝剤を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】前記ＨＥＰＥＳ緩衝剤が、２．５ｍＭから５ｍＭの濃度で存在する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】前記穀類配合物がオート麦配合物である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】前記生物学的両性イオン緩衝溶液がさらに保存剤を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２６】前記生物学的両性イオン緩衝溶液のｐＨが７．２である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】前記ベータグルカン溶液が７５℃から８５℃の温度に加熱される、請求項１０に記載の方法。
【請求項２８】オート麦ベータグルカン配合物からオート麦ベータグルカンを精製する方法であって、
（ａ）前記オート麦ベータグルカン配合物中のベータグルカンを水和してベータグルカン溶液を製造する工程；
（ｂ）前記ベータグルカン溶液を７５℃から８５℃の温度に加熱して、前記ベータグルカン溶液中のベータグルカンを溶解し、分散したベータグルカン溶液を提供する工程；
（ｃ）分散したベータグルカン溶液を濾過して、浄化されたベータグルカン溶液を提供する工程；および
（ｄ）保存剤および２．５ｍＭから５ｍＭの濃度のＨＥＰＥＳ緩衝剤を含み、７．２のｐＨを有するＨＥＰＥＳ緩衝液を浄化されたベータグルカン溶液に加え、安定化ベータグルカン溶液を提供する工程を含む方法。
【請求項２９】ＨＥＰＥＳ緩衝液を加える前に、浄化されたベータグルカン溶液を濃縮して０．０１から４％ベータグルカン：溶媒（ｗ／ｗ）の範囲の濃縮溶液を提供する工程をさらに含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】ベータグルカン溶液からのベータグルカンの沈殿を抑制する方法であって、ベータグルカン溶液が１０℃以下の温度に冷却されるときベータグルカン溶液からのベータグルカンの沈殿を抑制するに十分な条件下で、ベータグルカン含有配合物を生物学的両性イオン緩衝液と混合しベータグルカン溶液を生成する工程を含む方法。
【請求項３１】前記生物学的両性イオン緩衝液がＮ−［２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］（ＨＥＰＥＳ）、３−［Ｎ−モルホリノ］プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ−トリス［ヒドロキシメチル］メチル−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−ヒドロキシエチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、［カルバモイルメチル］−２−アミノエタンスルホン酸（ＡＣＥＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス［２−エタンスルホン酸］（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−［２−アセトアミド］−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）および３−［Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＤＩＰＳＯ）からなる群から選択される生物学的緩衝剤を含む、請求項３０に記載の方法。

「ゲル化」とは、ヒドロゾル（分散し可溶化した粘性の水性配合物）中に存在する粒子などのモノマー粒子が連続相と結びつきポリマー性の親水ゲル（無限の粘度および基本的に無限の重量平均分子量の弾性物質）を形成する当業界に認められたプロセスを意味する。したがって、本発明の目的には、ゲル化とは、分散相が連続相と結びつき粘性のゼリー状生成物を作り出す、コロイド形成プロセスである。

上記の手順により、高粘度ベータグルカン出発材料を利用して１％溶液を作ることができ、水和および濾過工程に希薄溶液を利用している。この方法を用いて、最終濃度を４％グルカンまで上げることができる。またこの方法により、低パーセンテージベータグルカン溶液をフィードストックとして使用できるが、ダイアフィルトレーションにより緩衝交換および濃縮が可能であると同時に、分子量が１００，０００ダルトンを超える混在タンパク質を除去できるからである。
このように、ベータグルカンを製造する新規な方法が開示される。本発明の好ましい実施態様を詳細に記載してきたが、請求項により定義される本発明の精神と範囲を逸脱せずに明白な変形が可能であることを理解されたい。