JP2002502813A

JP2002502813A - 脂質物質及び両親媒性物質より成っているナノ粒子の形態の薬学的組成物と関連する調製工程

Info

Publication number: JP2002502813A
Application number: JP2000530200A
Authority: JP
Inventors: エスポシト・ピエランドレア; コロンボ・イタロ; コチェアニ・ニコレッタ; クルトマリアドルリーデル; カルリ・ファビオ
Original assignee: エウランドインターナショナルソシエタペルアチオニ
Priority date: 1998-02-06
Filing date: 1999-02-05
Publication date: 2002-01-29
Also published as: CA2319565A1; AU2723899A; KR20010040726A; WO1999039700A1; IT1298575B1; EP1051160A1; AU747129B2; ITMI980234A1; BR9907683A

Abstract

(57)【要約】少なくとも一つの脂質物質と少なくとも一つの両親媒性物質、及び薬学的有効成分より構成されている、合成物質より成っているナノ粒子の形の薬学的組成物。前記合成物質の表面及び集団特性のお陰で、前記組成物は有効成分の組込みの改良と難吸収性有効成分の体内利用率の増大を示す。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（背景技術）有効成分の投与に適した新賦形剤の研究分野において、大きな関心がマイクロ
メートル領域のサイズを有する重合体システムに向って又ナノメートル領域のサ
イズを有する重合体システムにまで向けられている。

【０００２】最も使用される重合体のなかで、ポリアルキルシアノアクリレート及びポリ乳
酸（ＰＬＡ）とポリ乳酸グリコール酸（ＰＬＡ−ＰＬＧＡ）誘導体は思い出すべ
きである。然し斯かるシステムは幾つかの不利な点を示す。

【０００３】例えばポリアルキルシアノアクリレートは２４時間間隔で生体により代謝され
てホルムアルデヒド、潜在的に毒性誘導体を解放する；ＰＬＡとＰＬＡ−ＰＬＧ
Ａ重合体は毒性代謝物質を産出はしないがそれらは数週間から数ヶ月の範囲の長
期劣化時間を持ち、それでこれらは危険な蓄積現象を示すかも知れない。

【０００４】更に、これらシステムの調製方法は最終形態で痕跡でも残るかも知れない可能
性のある毒性有機溶媒の使用を必要とする。

【０００５】最後に、前記システムの大部分のサイズは静脈に注射される５μｍ以上のサイ
ズを持っている外部からの物体は塞栓症を引き起すかも知れない理由でその静脈
内使用から締出される。

【０００６】これらの否定的見解はより大きな生体適合性とより低い毒性を有している投薬
システムに関して大きな注意を喚起した：これらすべての中で第一は油／水乳濁
液、リポソーム、脂質のマイクロ及びナノ粒子のような脂質コロイドシステムで
ある。

【０００７】ナノメートル領域のサイズを持っている脂質小滴より成っていて、外側水性相
に分散した油／水乳濁液が非経口栄養用賦形剤として用いられた（日本特許Ｎｏ
．５５，４７６，１９７９、おかもた、つだ、よこあま）。

【０００８】有効成分を含んでいる油／水乳濁液は特許ＷＯ９１／０２５１７，１９９１、
デービスとワシントンで記述された。このシステムは内側の脂質相に有効成分を
組込むのに高い容量を持っているが、有効成分は持続性解放形の任意展開につい
て安定性問題と限界を生じてこの相から外側の相に向って容易に拡散する。

【０００９】リボソームは燐脂質の一つ又はそれ以上の層により囲まれた水性の内側相を持
っているコロイド構造である。薬の投与のための賦形剤としてのリボソームの使
用は例えば米国特許Ｎｏ．３，９９３，７５４（１９７６、ラーマンとセルニー
）に記述されている。

【００１０】然し代表的には、斯かるシステムは在庫中の安定性問題、乏しい再現可能性の
調製方法及び有効成分を組込み且つ保持する低い可能性を示している。

【００１１】ファウンテンとその他は有効成分の投与のための賦形剤として０．５μｍから
１００μｍまでのサイズ範囲を持っている丸薬の形の脂質マイクロ粒子を発明し
た。この特許は米国特許Ｎｏ．４，６１０，８６８（１９８６）に開示されてい
る。

【００１２】ドムとその他（米国特許４３５，５４６）は、組成物に添加され且つ粒子自身
の表面にも吸着される、燐脂質の外部層により囲まれた親脂質内部相より成って
いて、水性環境に懸濁された、約４０μｍに等しいサイズを持っている不溶性粒
子、リポシェアズ（商標名Ｌｉｐｏｓｈｅｒｅｓ）を発明した。これらのシステ
ムは麻酔薬（ドムとその他、米国特許５２２７１６５）及び殺虫剤と殺毛虫剤活
性を持っている有効成分（ドムとその他、米国特許５２２７５３５）の制御され
た解除のために開発された。然し、斯かるシステムの調製技術は最終の形で痕跡
で残る溶媒の助けを必要とする。

【００１３】経口投与は、胃腸管の中で溶けにくく、そう吸収されない、又はｐＨ又は蛋白
質分解酵素（蛋白質とペプチド）の作用に敏感な有効成分については、困難なこ
とが判っている。斯かる物質の脂質ナノ粒子への組込みはこれらのナノ粒子が胃
腸管に沿って吸収され得ることからこの困難を克服することを可能にする。これ
らの減少したサイズは受動的粘膜透過吸収の機構を利用すること、又は細胞間接
合又はイオンチャネルを通過すること、又はエンドサイトーシス機構を使用する
こと、又はリンパ管束に入り込むことを可能にする。

【００１４】ナノ小球より成っている固形脂質システムはスペイサーとその他により開発さ
れた（米国特許４，８８０，６３４，１９８９）、そして吸収されにくい薬の経
口投与に向けられた。脂質小球は水性環境中で脂質物質を高エネルギーミキサー
により乳化調製され、そこでその乳濁液を室温で冷却し、超音波処理により小球
を得る。

【００１５】ガスコ（ＥＰ０５２６６６６Ａ１，０５／０８／１９９１）は脂質ナノ粒子の
調製技術を発明した。マイクロエマルジョンは表面活性剤と表面活性助剤の存在
で水性相に溶融した脂質を添加して調製され、それは約１０℃の温度に保たれた
水性環境に分散させられる。固形ナノ粒子は懸濁水中に得られるが、続いて限外
濾過により残った表面活性剤を奪って濾過又は凍結乾燥により回収される。

【００１６】斯かる技術は高エネルギー均質化に関するエネルギー節約の見地から利点があ
ることが判っている、それはより一様なサイズ分布と低い多分散指数を持つ９０
ｎｍから９００ｎｍまでの平均直径範囲を有しているより小さなナノ粒子を得る
ことを可能にする。然しマイクロエマルジョンの調製は、不耐熱物質についての
斯かる技術の使用限界である、約７０℃で最も使用される脂質物質である脂質材
料の融解を必要とする。

【００１７】（発明の開示）本発明は１０００ｎｍ未満そしてなるべくなら５０から５００ｎｍまでの範囲
の直径を有しており、少なくとも一つの脂質物質と少なくとも一つの両親媒性物
質、及び薬学的有効成分より構成されている合成物質より成っているナノ粒子の
形の薬学的組成物に関する。

【００１８】我々は本発明に従って操作していて、前記合成物質と関連する粒子が両親媒性
物質と脂質物質の通常の混合によっては又は脂質粒子への両親媒性物質の吸着に
よってでは到達できない特徴を持つことを思い掛けずに発見した。

【００１９】両親媒性物質はナノ粒子の表面に優先的に分布するかも知れない又それはナノ
粒子の内部に優先的に分布するかも知れない又それはナノ粒子の表面と内部に均
質に分布するかも知れない。

【００２０】合成物質の形成は以下のナノ粒子を得ることを可能にする：１．経口投与吸収と循環系における半減期を助ける表面特性を持つ；２．低融点のような、不耐熱性薬剤の組込みを可能にする集団特性を持つ；３．合成物質中の親脂性帯域と部分的に親水性帯域の存在のお陰で、水溶性薬剤
と脂溶性薬剤の両方の賦形作用に適する；４．本質的に脂溶性の母材の中に水溶性薬剤（例えばペプチド）を均質に組込む
ことが出来る。

【００２１】（発明を実施するための最良の形態）本発明は脂質及び両親媒性物質、後者は脂質又は重合体種であるが、より構成
されている合成物質より成っている１マイクロメートル以下のサイズを持ってい
る粒子（ナノ粒子）の形で薬学的用途向けの組成物の調製に関する。

【００２２】一般に、本発明に従うナノ粒子は脂質材料と両親媒性物質の共融解又は共溶解
により得られた合成物質から出発して調製される。共融解混合液は、それに続く
冷却で、成分の相互処理又はナノ粒子の集団の表面又は内部に向う両親媒性物質
の分離のお陰で多くの親水性帯域と多くの親脂性帯域を示している二つの出発物
質に関して新しい特性を有している合成物質を結果として生じる。これらの特性
は親脂性表面への両親媒性物質の表面吸着とは実質的に異なっている。斯かる特
性は以下に報告される特性例で詳細に述べられるであろう。

【００２３】薬は調製工程の間前記共融解混合液に溶解又は懸濁され、そして合成物質の新
性質のお陰で、それはその特性に従って多くの親水性領域又は多くの親脂性領域
の内部に選択的に分配する。更に、ナノ粒子上に負荷された親水性薬（例えばペ
プチド）は思いも掛けずナノ粒子それ自身の内部に均質に分布されることが判っ
てきた、一方表面に吸着されたペプチド分画は非常に低く、従来技術の諸例（脂
質の芯と吸着された両親媒性物質より成っている粒子）に対してよりも更に低い
ことが判ってきた。

【００２４】共融解混合液から得られたナノ粒子は出発した合成物質の同じ特性を保持して
いる。

【００２５】ナノ粒子は以下の異なった調製技術で得られても良い： −１．温度勾配を利用して、水性媒質中で（油相として、合成混合物と一つ又は
それ以上の表面活性剤と表面活性助剤の融点より高い温度に保たれた脂質と両親
媒性物質より成っている）水中油マイクロエマルジョンの分散液を用意する技術
。 −２．組成物を形成している物質の融点より高い温度で合成物質の微細乳濁液の
、又は組成物の融点以下で、表面活性剤の存在で合成物質の微細懸濁液の高圧均
質化を用意する技術。

【００２６】マイクロエマルジョン−分散工程に従う本発明の調製（技術１）は、成分それ
ら自身の融点又は後者が前者に可溶である時、少なくとも二つの成分の中の一つ
の融点で二つ又はそれ以上の脂質と両親媒性成分の最初の共融解又は共溶解を備
える；融解された合成物質と同じ温度に暖められた一つ又はそれ以上の表面活性
剤と表面活性助剤を含んでいる適当な量の水溶液が穏やかな攪拌下でこの融けた
合成物質に添加される。

【００２７】マイクロエマルジョンそれ自身の形成に必要とされる水と表面活性剤と表面活
性助剤の存在下で脂質と両親媒性成分の融点をとりながら同時にマイクロエマル
ジョンを形成することも又可能である。

【００２８】薬学的有効成分は出発時の合成物質に溶解又は分散させられるか又は有効成分
それ自身の性質次第で、マイクロエマルジョンそれ自身の調製中にマイクロエマ
ルジョンに直接添加されても良い。有効成分の分布は合成物質の中で起り、表面
上に吸着された又酵素と外部環境の劣化作用を受けた薬の量の思わざる減少を許
している。

【００２９】そうして作られた油／水マイクロエマルジョンは続いて制御された容積と攪拌
状態の中、＋１℃から＋１０℃までの温度範囲で、水又は水性媒質中に分散させ
られる、然しそれは懸濁水中に固形で合成ナノ粒子生じさせるよう、水と混和性
のある非水溶媒を用いて−１５から−３０℃の範囲であっても良い。前記ナノ粒
子は１０００ｎｍ以下の直径を持つ。ナノ粒子は脂質粒子の表面への両親媒性物
質吸着の技術により（ドム）又は脂質ナノ粒子の形成に表面活性剤として両親媒
性物質の使用により（ガスコ）得られたシステムについて違いがあることが判っ
ている。

【００３０】続いて、ナノ粒子懸濁液は表面活性剤、表面活性助剤及び遊離過剰薬の除去を
可能とする限外濾過システム（又は透析）により水又は水溶液で洗浄される。そ
れ故この工程は薬の形での表面活性剤の存在に起因する望ましくない起り得る効
果を除く事を可能にする。更にこの手順で、ナノ粒子に組込み又は吸着されてい
ない有効成分のパーセンテージを定量的に決定することが可能である。

【００３１】上記の組成物は懸濁水として投与されても良い又はそれは凍結乾燥、濾過、水
性溶媒の蒸発又は噴霧乾燥技術により固体としても回収される。

【００３２】本発明に従うナノ粒子は重量で以下の定量組成を有する： −０．５から９９．５％までの脂質物質、又なるべくなら１０％から９０％まで
、 −０．５から９９．５％までの両親媒性物質、又なるべくなら１０％から９０％
まで、 −脂質物質と両親媒性物質の和に対して０．００１から９９％までの薬理学的有
効成分、又なるべくなら０．０１％から５０％まで。

【００３３】技術（１）に従うナノ粒子の調製工程では、成分物質は重量で以下の比率で使
用される：マイクロエマルジョンでは： −脂質成分、０．１％から５０％まで又なるべくなら１０から２５％まで； −両親媒性成分、０．１％から５０％まで又なるべくなら０．５％から２５％ま
で； −表面活性剤、５％から３０％まで又なるべくなら１０％から２０％まで； −表面活性助剤、０％から１５％まで又なるべくなら３％から７％まで； −水又は水溶液、４０％から７５％まで又なるべくなら５０％から７０％まで； −合成物質に直接組込まれた又はマイクロエマルジョンに溶解された薬学的有効
成分、融合効力と望まれる適量に基づいた濃度変数において、脂質成分と両親媒
性成分の和に対して０．００１％から９９％まで又なるべくなら０．００１％か
ら５０％までの範囲。分散液では： −上記の如く調製されたマイクロエマルジョンは１：２から１：２００までの、
なるべくなら１：５から１：５０までの容積希釈で水性環境（水又は水溶液）に
分散させられる。分散液には： −共分散補助薬、０．０５％から５％まで； −重合体種の粘性化剤、０．０５％から５％まで、が添加されても良い。

【００３４】高圧均質化技術（技術２）に従う調製は一つ又はそれ以上の佐薬物質を添加し
た、水性環境中の合成物質の分散液を備える。合成物質は物質それ自身のの融点
又はこの温度のすぐ下（“軟化点”）又は固体状態で合成物質を保持している温
度でシステムを保持しているナノ粒子を形成するよう均質化される。

【００３５】合成物質は成分それら自身の融点又は後者が前者に可溶である時、少なくとも
二つの成分の中の一つの融点で二つ又はそれ以上の脂質と両親媒性成分の共融解
に続けて、技術１について報告したものに類似して、共融解又は共溶解により最
初に調製されても良い。

【００３６】合成物質は分散又は低エネルギー均質化技術（例えばＳｉｌｖｅｒｓｏｎＬ２
Ｒ型又はＵｉｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ型の装置を用いる）により表面活性物質、安
定化物質及び／又は粘性化物質を含んでいる水溶液中に予備的に分散させられて
も良い。この処理の後、もし合成物質が水中のその分散を助けるような表面特性
を示すならば必要ではないが、システムはナノ粒子分散の原因となる均質化サイ
クルを繰返すよう高圧ホモジナイザー（例えばＡＰＶＧａｕｌｉｎ、ＡＰＶＲａ
ｎｎｉｅＭｉｎｉ−Ｌａｂ、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒタイプのもの）を
受けさせられる。高圧均質化処理は合成物質の融点、“軟化”温度又は物質が超
微粒子の形で固体状態で存在する温度で起るかも知れない。

【００３７】有効成分はそのまま又はナノ粒子へのその組込み又はそれらの表面への吸着を
助ける表面活性剤の存在下で、合成物質又はシステムの共融解中のその構成成分
の各々への共融解、溶解又は分散、又は続く諸工程相の間に添加されても良い。

【００３８】続いて、技術（１）について述べたのと同様に、ナノ粒子懸濁液は限外濾過シ
ステムにより水又は水溶液で洗浄される。

【００３９】同様に、組成物は懸濁水として投与されるか又は凍結乾燥、濾過又は水性溶媒
蒸発又は噴霧乾燥技術により固体として回収されても良い。

【００４０】技術（２）に従ってナノ球の調製工程では、本発明を構成している物質は重量
で以下の比率で使用される： −脂質成分、０．１％から５０％まで、なるべくなら０．５％から１５％まで； −両親媒性成分、０．１％から５０％まで、なるべくなら０．５％から１５％ま
で； −表面活性剤、０．０５％から１０％まで、なるべくなら０．５％から５％まで
； −水、又は水溶性成分の水溶液、４５％から９９．５％まで、なるべくなら５０
％から８０％まで； −共分散佐薬、０．０５％から５％まで； −重合体種の粘性化剤、０．０５％から１％まで； −合成物質に直接組込まれた又はマイクロエマルジョンに溶解された薬学的有効
成分、融合効力と望まれる適量に基づいた濃度変数において、脂質成分と両親媒
性成分の和に対して０．００１％から９９％まで又なるべくなら０．００１％か
ら５０％までの範囲。

【００４１】本発明に従って使用可能な脂質物質の中で、我々はそれらが水と混和しないか
又はほんの部分的に混和できる点で“脂肪”として定義できる天然製品及び合成
又は半合成種の製品の両者を記述できる：１）飽和又は不飽和の何れかで且つ部分的に又は完全に水素添加された植物油で
ある天然脂肪、例えば水素添加された綿実油（Ｌｕｂｒｉｔａｂ^TM）、水素添加
された椰子油（Ｄｙｎａｓａｎ^TMＰ６０）及び水素添加された大豆油（Ｓｔｅｒ
ｏｔｅｘ^TM）；２）飽和及び／又は不飽和脂肪酸（Ｃ１０からＣ２２までの長さ範囲の脂肪族鎖
を有している）及びそれらのポリヒドロキシエチル化誘導体を含んでいる半合成
と合成モノ、ジ及びトリグリセリド、例えばトリステアリン、カプリコ−カプリ
ルトリグリセリド（Ｍｙｇｌｉｏｌ^TM、Ｃａｐｔｅｘ^TM、Ｌａｂｒａｆａｃ^TMＬ
ｉｐｏ）、ベヘン酸トリグリセリド（Ｃｏｍｐｒｉｔｏｌ^TM）、グリセリルモノ
パルミチン酸エステル（Ｍｙｖａｐｌｅｘ^TM６００）又はグリセリルパルミトス
テアリン酸エステル（Ｐｒｅｃｉｒｏｌ^TM）としてのモノグリセリド及び飽和又
は不飽和ポリヒドロキシル化トリグリセリド（Ｌａｂｒａｆｉｌ^TM、Ｌａｂｒａ
ｆａｃ^TMＨｙｄｒｏ、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ^TMのシリーズ）；３）“液体蝋”、例えばイソプロピルミリスチン酸エステル、イソプロピル−カ
プリン酸エステル、−カプリル酸エステル、−ラウリン酸エステル、−バルミチ
ン酸エステル、−ステアリン酸エステル及びオレイン酸エチルとオレイン酸オレ
イルのような脂肪酸エステル；４）“固形蝋”、例えばカルナウバ蝋及び蜜蝋；５）脂肪族アルコール類、例えばセチルアルコール、ステアリルアルコール、ラ
ウリルアルコール、セチルステアリルアルコール及びそれらのポリヒドロキシエ
チル化誘導体；６）なるべくなら中間と長鎖（Ｃ１０−Ｃ２２）を持っている脂肪族カルボン酸
、飽和（デカン酸、ラウリン酸、パルミチン、ステアリン、ドコサン酸、など）
、不飽和（オレイン、リノール、など）及びそれらのポリヒドロキシエチル化誘
導体。

【００４２】脂質種の両親媒性物質の中で、その構造の中に以下の諸例のような幾つかの親
水性成分を持っている脂質は使用できる：１）次の系列に属している燐脂質：ホスファチジルグリセロール、ホスファチジ
ルコリン及びホスファチジン酸（例えばジミリスチルホスファチジルグリセロー
ル）；２）グリセリルモノステアリン酸エステル（Ｍｙｖａｐｌｅｘ^TM６００）又はグ
リセリルパルミトステアリン酸エステル（Ｐｒｅｃｉｒｏｌ^TM）のようなモノと
ジグリセリド類；３）トリグリセリド及び飽和又は不飽和ポリヒドロキシル化トリグリセリド（例
えばＬａｂｒａｆｉｌ^TM、Ｌａｂｒａｆａｃ^TMＨｙｄｒｏ、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ^TM のシリーズ）；４）オレイン酸のデシルエステルのような脂肪酸のエステル：Ｃｅｔｉｏｌ^TMＶ
及びイソプロピルミリスチン酸エステル；５）中間鎖脂肪酸（カプリン、カプロン及びラウリン酸のような）。

【００４３】重合体種の両親媒性物質の中で、以下のような重合体が用いられる：１）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、液体（ＰＥＧ２００からＰＥＧ１００
０まで）と固体（ＰＥＧ１５００からＰＥＧ２０，０００まで）の両方；２）ポリ（プロピレンオキサイド）ポリ（エチレンオキサイド）共重合体、Ｐｏ
ｌｏｘａｍｅｒ（Ｌｕｔｒｏｌ^TM１８８、Ｌｕｔｒｏｌ^TM４０７）；３）ポリビニルアルコール；４）ポリアクリレート（Ｃａｒｂｏｐｏｌ^TM、Ｐｅｍｕｌｅｎ^TM、Ｎｏｖｅｏｎ ^TM ）；５）ポリ（メチルビニルエーテル）−無水マレイン酸（Ｇａｎｔｒｅｚ^TM）共重
合体；６）キトサンと誘導体、ヒアルロン酸と誘導体、キサンタン、スクレログルカン
、ゲラン、グアーゴム、ニセアカシア豆のゴム、アルギン酸塩及びデキストラン
のような天然起源の多糖類；７）例えばポリεカプロラクトンのようなポリエステル。

【００４４】上記の如く本発明に従う合成物質は脂質物質の中及び脂質又は重合体種の両親
媒性物質の中で選ばれた成分の混合、共融解又は共溶解により調製される。例え
ば、本発明に従う合成物質は、脂肪酸（ステアリン酸−デカン酸）、脂肪酸と燐
脂質（ステアリン酸−ジミリスチルホスファチジルグリセロール又はジミリスチ
ルホスファチジルコリン）、脂肪酸とトリグリセリド又はポリヒドロキシル化ト
リグリセリド（ステアリン酸とＬａｂｒａｆｉｌＴＭ２１３０）、脂肪酸とモノ
又はジグリセリド（ステアリン酸とグリセリルパルミトステアリン酸エステル）
、ポリエチレングリコールと脂肪酸（ステアリン酸−ＰＥＧ）、ポリエチレンオ
キサイド−ポリプロピレンオキサイドの共重合体とモノ及びジグリセリド（ｐｏ
ｌｏｘａｍｅｒとグリセリルパルミトステアリン酸エステル）の混合液から形成
される。

【００４５】本発明に従う水性相（技術１に従うマイクロエマルジョンの水性相及び／又は
技術１と２に従う分散相）が記述される：１）そのまま又は異なったｐＨとイオン強度で緩衝された水；２）ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸と誘導体
（例えばＣａｒｂｏｐｏｌ^R、Ｐｅｍｕｌｅｎ^R、など）、ポリメタクリル酸と誘
導体（例えばＥｕｄｒａｇｉｔ^R）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンの共重合体（例えばＰｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｌｕｔｒｏｌ^R）、例えばデキストラン、キサンタン、スクレログルカン、アラビアゴム、グアーゴム、キトサン、
セルローズ及び澱粉誘導体のような種々の性質の多糖類のような親水性、水溶性
又は水分散性重合体の水溶液；３）糖類（例えばソルビトール、マンニトール、キシリトール）の水溶液；４）モノ又はポリヒドロキシル脂肪族アルコール、なるべくなら短かい鎖（Ｃ２
−Ｃ４）を持っている；５）ポリエチレングリコール（例えばＰＥＧ２００、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ６０
０、ＰＥＧ１０００）；６）ポリグリコール酸グリセリド（例えばＬａｂｒａｓｏｌ^TM）；７）例えばプロピレングリコール、テトラグリコール、エトキシジグリコール（
Ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ^TM）のようなポリグリコール。

【００４６】技術１と２に使用する表面活性剤の中で、我々は一般的に必ずしも７以上では
ないＨＬＢ（親水性・親油性バランス）値を持つすべての非イオン表面活性剤を
網羅して記述したわけではないが、以下の諸例のようである：脂肪酸のソルビタ
ンエステル（例えばＳｐａｎ^R、Ａｒｌａｃｅｌ^R、Ｂｒｉｊ^R）、脂肪酸のポリオキシエチレンソルビタンエステル（例えばＴｗｅｅｎ^R、Ｃａｐｍｕｌ^R、Ｌｉ
ｐｏｓｏｒｂ^R）、ポリプロピレンオキサイド−ポリエチレンオキサイドの共重合体（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）−グリセロー
ルのエステル（Ｌａｂｒａｓｏｌ^R、ＨＬＢ６−７を持つＬａｂｒａｆｉｌ^R）、
ＰＥＧと酸又は長鎖脂肪族アルコールのエステル（例えばＣｒｅｍｏｐｈｏｒ^R ）、ポリグリセリドエステル（Ｐｌｕｒｏｌ^R）、糖類と脂肪酸のエステル（糖エステル）。必要な時には、陰イオン表面活性剤（例えばラウリル硫酸ナトリウ
ム、ステアリン酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム）、胆汁酸塩（例えばグリ
ココール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸塩、タウロコール酸塩、ウルソ
デオキシコール酸塩）又は陽イオン（例えばｔｒｉｃｅｔｏｌ）、低ＨＬＢ表面
活性剤ばかりでなく、レシチンそのまま（類脂質Ｓ７５）及び水素添加（例えば
類脂質Ｓ７５、Ｓ７５−３）、燐脂質及びそれらの半合成又は合成誘導体でさえ
用いられる。

【００４７】マイクロエマルジョンの形成に必要とされる表面活性助剤の中で、我々は例え
ばエタノール、２−プロパノール、ｎ−ブタノール、イソプロパノールのような
短鎖アルコール；短及び中間脂肪酸（例えば酪酸、吉草酸及びカプロン酸）、芳
香族アルコール（例えばベンジルアルコール）；デカン酸、ラウリン酸、カプリ
ニルアルコール及びラウリルアルコールのような中間鎖アルコールと脂肪酸（Ｃ
８−Ｃ１２）を思い出す。更に、表面活性助剤としてはモノ又はポリヒドロキシ
ル化アルコールと酸又は中間−長鎖脂肪族アルコールのエステル又はエーテルも
使用される。表面活性助剤の中で述べた成分の幾つかはマイクロエマルジョンの
油相を同時に形成する。

【００４８】本発明で使用可能な薬学的有効成分は水溶性（例えばペプチド又は蛋白質）と
脂溶性（例えばステロイドホルモン）の両者、そればかりか両賦形剤に難溶性の
もの（例えばアシクロビル）でも良い。本発明に従うナノ粒子の表面及び集団特
性は下記例のような重要な利点を可能にする：１）通常斯かる方法では吸収できない分子（例えばポリペプチド及び蛋白質）の
経口又は粘膜を透過する方法による投薬の可能性；２）親脂肪性で高い不溶性且つ難吸収性分子の経口及び／又は非経口的方法によ
る投薬の可能性；３）有効成分の生物薬学的特性の改良（例えば血漿細胞半減期の制御された又は
延長された解除と増加）；４）粘膜又は皮膚層で活性な分子を局所的方法により投薬する可能性（例えば抗
ウイルス性、抗真菌性、抗乾癬薬）；５）不愉快な香りを持っている有効成分を即座に処方を解放して投与できるよう
にカプセル化する可能性。

【００４９】本発明から有利になり得る有効成分グループは以下を含む：非ステロイド（Ｎ
ＳＡＩＤ）及びステロイド（ＳＡＩＤ）抗炎症薬、エストロゲン又は月経前期ホ
ルモン、心臓血管薬、抗ウイルス薬、抗真菌薬、抗腫瘍薬、低脂質血症薬、種々
の作用を有しているペプチドと蛋白質。

【００５０】前記有効成分の中で完全ではないが一例を挙げる：麦角アルカロイドと誘導体：ジヒドロエルゴタミン、ジヒドロエルゴトキシン及
びブロモクリプチン。

【００５１】鎮痛剤と非ステロイド抗炎症薬、及びそれらの塩類：ジクロフェナックナトリ
ウム、ジクロフェナックヒドロキシエチルピロリジン、ジクロフェナックジエチ
ルアミン、イブプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、インドメタ
シン、メフェナム酸、ナプロキセン、ニメスリド及びピロキシカム。

【００５２】抗不整脈剤：アミオダロン、ジイソピラミド、プロプラノロール及びベラパミ
ル。

【００５３】抗菌剤：アモキシシリン、フルクロキサシリン、ゲンタマイシン、リファンピ
シン、エリスロマイシン及びセファロスポリン。

【００５４】抗真菌薬と抗乾癬薬：アムホテリシン、硝酸ブトコナゾール、ケトコナゾール
、エコナソール、エトレチネート、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフ
ルビン、イトラコナゾール、ミコナゾール、ナイスタチン、サルコナゾール及び
チオコナゾール。

【００５５】抗ウイルス薬：アシクロビル、ガンシクロビル、ＡＺＴ及びプロテアーゼ抑制
剤。

【００５６】抗高血圧薬：アムロジピン、クロニジン、ジルチアゼム、フェロジピン、グア
ナベンツアセテート、イスラジピン、ミノキシジル、塩酸ニカルジピン、ニモジ
ピン、ニフェジピン、塩酸プラゾシン及びパパベリン。

【００５７】抗うつ剤：カルバマゼピン。

【００５８】抗ヒスタミン剤：ジフェンヒドラミン、クロルフェニルアミン、ピリラミン、
クロルサイクリジン、プロメタジン、アクリバスチン、シンナリジン、ロラタジ
ン及びテルフェナジン。

【００５９】抗腫瘍薬と免疫抑制薬：サイクロスポリン、ダカルバジン、エトレチネート、
エトポシド、ロムスチン、メルファラン、マイトマイシン、マイトキサントロン
、パクリタクセル、プロカルバジン、タモキシフェン、タキソルと誘導体及びタ
キソテル。

【００６０】抗不安薬、鎮静薬、睡眠薬：アルプラゾラム、ブロマゼパム、ジアゼパム、ロ
ラゼパム、オキサゼパム、テマゼパム、スルピリド及びトリアゾラム。

【００６１】 β遮断薬：アルプレノロール、アテノロール、オキシプレノロール、ピンドロ
ール及びプロプラノロール。

【００６２】 β作動薬：サルブタモール、サルメテロール。

【００６３】心臓及び心臓血管変力薬：アムリノン、ジギトキシン、ジゴキシン、ラナトシ
ドＣ、メジゴキシン及びユビデカレノン。

【００６４】コルチコステロイド：ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、酢酸コル
チゾン、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、酢酸フルドロコルチゾン、フル
ニソリド、ヒドロコーチゾン、メチルプレドニゾロン、メチルプレドニゾン及び
トリアムシノロン。

【００６５】胃腸並びに抗Ｈ２−ヒスタミン薬：シメチジン、シサプリド、ドムペリドン、
ファモチジン、ロペラミド、メサラジン、オメプラゾール、塩酸オンダンセトロ
ン及びラニチジン。

【００６６】低脂質血症薬：ベザフィブレート、クロフィブレート、ゲムフィブロジル、プ
ロブコール及びロバスタチン。

【００６７】抗アンギナ薬：硝酸アミル、硝酸グリセリン、二硝酸と一硝酸イソソルバイド
及び四硝酸ペンタエリスリトール。

【００６８】中心作用薬：例えばニコチン。

【００６９】ビタミン及び栄養剤：ベータカロチン、ビタミンＡ、ビタミンＢ２、ビタミン
Ｄと誘導体、ビタミンＥと誘導体及びビタミンＫ。

【００７０】オピオイド鎮痛剤：コデイン、右旋プロポキシフェン、ジヒドロコデイン、モ
ルヒネ、ペンタゾシン及びメサドン。

【００７１】性ホルモン：ダナゾール、エチニルエストラジオール、酢酸メドロキシプロゲ
ステロン、メチルテストステロン、テストステロン、ノルエチステロン、ノルゲ
ストレル、エストラジオール、エストリオール、プロゲステロン、スチルベスト
ロール及びジエチルスチルベストロール。

【００７２】種々の活性を持っているペプチド、蛋白質又は多糖類分子：ロイプロリドとＬＨ−ＲＨ類似体、カルシトニン、グルタチオン、ソマトトロピ
ン（ＧＨ）、ソマトスタチン、デスモプレシン（ＤＤＡＶＰ）、インターフェロ
ン、モルグラモスチン、表皮成長因子（ＥＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、イ
ンスリン、グルカゴン、トキシン又はトキソイド（例えば破傷風毒素）、蛋白質
又は多糖類の抗原因子、ヘパリン、低分子量を持っているヘパリン及びヘパリノ
イド。

【００７３】特定の局所活性を持っている分子：例えば日光防御体（紫外線吸収体）；皮膚
栄養素、セラミド及びグリコール酸。

【００７４】本発明に従う組成物の特性は以下の例のように幾つかの物理化学的方法によっ
て評価される： −集団特性の変化を証明するための熱解析（ＤＳＣ、ＴＧＡ及び“熱載物台”顕
微鏡検査法）、 −表面特性の変化を決定するための表面解析（接触角法）、 −ナノ粒子のサイズ分布の決定のためのレーザー光散乱（ＬＬＳ）技術、 −ナノ粒子の表面電荷特性の決定のためのゼータポテンシャル測定技術、 −有効成分組込み効率決定技術（蛍光分子によるマーキング技術、分離と分析技
術）、 −形態学的観測技術（透過型電子顕微鏡法：ＴＥＭ）。

【００７５】斯かる技術は本発明に従ってナノ粒子を形成している合成物質とナノ粒子自身
が新規で有利な性質を示すことを実証可能とする。脂質と両親媒性物質の適当な
組合せを用いると、物質と合成ナノ粒子を調製することが可能である： −ナノ粒子自身の大部分の親水性帯域に有効成分の溶解／分散を助けて、脂質母
材に親水性薬剤（例えばペプチド）の組込み効率を増大させる、 −ナノ粒子中に組込まれた分子の局在化を思いがけない方法で修正する：例えば
通常表面上に吸着されたペプチド分子の親脂質ナノ粒子内部への均質分布を可能
にする、 −出発成分に関してより低い表面エネルギーを示す、この結果としてより多い生
体適合性を生じる、 −単一成分よりもより親脂質性表面を示す、そして結果として経口的方法でより
可溶性を生じる、 −適用に有用な時には、単一成分よりもより親水性の表面を示し非経口的方法に
より注入された粒子の血漿中の半減期を増加させる、 −独特の特性を持つ二つの相における結果、両親媒性と脂質物質の或比率で、そ
こにおける両親媒性化合物は：１）ナノ粒子の表面に選択的に配置される（“表面に凝離される”）；２）ナノ粒子内部に選択的に配置される（“内部に凝離される”）；３）ナノ粒子自身の表面と内部に均質に配置される、 −或比率で、単一の原物質に対して独特で且つ違った特性を有している合成物質
より成っているナノ粒子は、速い方法で有効成分を解放する生理学的温度で融解
する（例えば局所的／経皮的処置と香りのマスクのため）、 −他の比率では、ナノ粒子はそれらがナノ粒子自身の拡散及び／又は減成により
有効成分の解法を確実にする生理学的温度にある間とどまっている、 −合成混合液の油−水マイクロエマルジョンに基づいた調製技術（１）における
脂質と両親媒性物質の或比率では、不耐熱性分子の組込みを可能にする低い温度
値までマイクロエマルジョンそれ自身の存在の熱的範囲を広げることは可能であ
る。

【００７６】ナノ粒子の調製工程とは別に、本発明の基本的且つ新規な特性は斯くして単一
成分に対する新しく且つ様々な表面と集団特性を有している合成物質の予期せざ
る形成である。選ばれた出発物質の定性的特性（例えば化学構造、融点、疎水性
及び吸湿性）に基づいて、又決定された混合液中の物質の相対的パーセンテージ
において、非常に多数の合成物質、又従って異なった特性を持っているナノ粒子
を得ることが可能である。

【００７７】本発明の利点は親脂性ナノ粒子内部への親水性有効成分の組込みを増加させ、
又その分布を修正できる可能性である。

【００７８】斯くして本発明の重要な利点は成分物質の専ら物理的変化により生じた新物質
より成っていて長期の毒物学的実験の試験項目を必要としないベクトルシステム
（合成ナノ粒子）を持つ可能性にある。

【００７９】実施例例証の目的で本発明に従う組成物の調製例を技術１（実施例１−３６）、技術２
（実施例３７−４５）、及び従来技術に従う比較例（Ａ−Ｅ）で報告する。得ら
れた製品の特性と従来技術の製品に対する生体内での有利な挙動は実施例（Ｆ−
Ｚ１）で報告される。

【００８０】実施例１ステアリン酸４ｇとジミリストイルホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ混合
液中のパーセント：０．５％）が混合され、そしてそれらは融解合成混合液の形
成のため約７２℃に加熱されそれにｎ−ブタノール４ｍｌが添加される。ｐＨ３
まで酸性化された水２０ｍｌ中に、タウロデオキシコール酸ナトリウム２ｇと鮭
カルシトニン３．８５ｍｇが溶解されて７２℃に加熱されたその溶液は融解され
た合成混合液に添加される。そうして作られた乳濁液に、攪拌しながら、Ｔｗｅ
ｅｎ２０の３ｍｌが透明で異方性のマイクロエマルジョンを作るよう添加される
。カルシトニンを含んでいるステアリン酸−ジミリストイルホスファチジルグリ
セロールより成っている合成固形脂質ナノ粒子を形成するため、約６０℃でマイ
クロエマルジョンは一定の攪拌（２５０ｒｐｍ）のもと、３−５℃に冷却された
ｐＨ３の５倍容積の水に分散させられる。懸濁液は過剰表面活性剤を除去するた
め限外濾過により洗浄される。蛍光測定法とクロマトグラフィー技術（特性例を
参照）により決定されたナノ粒子へのカルシトニン組込み効力は約１０．５％で
ある。ナノ粒子の平均直径は２２６ｎｍで多分散指数は０．２００である。

【００８１】実施例２１．０％に等しい合成混合液中のＤＭＰＧパーセントを用いて、実施例１の調製
が繰返される。カルシトニン組込み効力は１０．２％、ナノ粒子の平均直径は２
２０ｎｍそして多分散度は０．２６８である。

【００８２】実施例３４．５％に等しい合成混合液中のＤＭＰＧパーセントを用いて、実施例１の調製
が繰返される。カルシトニン組込み効力は１３．２％、ナノ粒子の平均直径は１
９９ｎｍそして多分散度は０．２１２である。

【００８３】実施例４５．２％に等しい合成混合液中のＤＭＰＧパーセントを用いて、実施例１の調製
が繰返される。カルシトニン組込み効力は１３．４％、ナノ粒子の平均直径は１
９５ｎｍそして多分散度は０．２００である。

【００８４】実施例５９．５％に等しい合成混合液中のＤＭＰＧパーセントを用いて、実施例１の調製
が繰返される。カルシトニン組込み効力は９．１９％、ナノ粒子の平均直径は２
３１ｎｍそして多分散度は０．１８６である。

【００８５】実施例６２５％に等しい合成混合液中のＤＭＰＧパーセントを用いて、実施例１の調製が
繰返される。カルシトニン組込み効力は９．５１％、ナノ粒子の平均直径は２０
５ｎｍそして多分散度は０．２７５である。

【００８６】実施例７１．２％に等しい合成混合液中のパーセントで両親媒性物質としてジステアロイ
ルホスファチジン酸（ＤＳＰＡ）燐脂質を用いて、実施例１の調製が繰返される
。カルシトニン組込み効力は９．９％、ナノ粒子の平均直径は２４５ｎｍそして
多分散度は０．２６１である。

【００８７】実施例８５．２％に等しい合成混合液中のＤＳＰＡパーセントを用いて、実施例７の調製
が繰返される。カルシトニン組込み効力は１４．４％、ナノ粒子の平均直径は３
２４ｎｍそして多分散度は０．３４１である。

【００８８】実施例９４．０％に等しい合成混合液中のパーセントで、有効成分として低分子量ヘパリ
ン（平均分子量４０００Ｄａ）及び、両親媒性物質としてジミリストイルホスフ
ァチジルコリン（ＤＭＰＣ）燐脂質を用いて、実施例１の調製が繰返される。ヘ
パリン組込み効力は約１．０％、ナノ粒子の平均直径は２１３ｎｍそして多分散
度は０．２４９である。

【００８９】実施例１０８．０％に等しい合成混合液中のパーセントで、ジミリストイルホスファチジル
コリン（ＤＭＰＣ）燐脂質を用いて、実施例９の調製が繰返される。ナノ粒子の
平均直径は１７９ｎｍそして多分散度は０．２４９である。

【００９０】実施例１１１０％に等しい合成混合液中のパーセントで、ジミリストイルホスファチジルコ
リン（ＤＭＰＣ）燐脂質を用いて、実施例９の調製が繰返される。ナノ粒子の平
均直径は２９０ｎｍそして多分散度は０．２７０である。

【００９１】実施例１２１４％に等しい合成混合液中のパーセントで、ジミリストイルホスファチジルコ
リン（ＤＭＰＣ）燐脂質を用いて、実施例９の調製が繰返される。ナノ粒子の平
均直径は３６９ｎｍそして多分散度は０．３６０である。

【００９２】実施例１３１．０％に等しい合成混合液中のパーセントで、両親媒性物質としてＬａｂｒａ
ｆａｃＨｙｄｒｏ^TMポリヒドロキシル化トリグリセリドを用いて、実施例１の
調製が繰返される。ナノ粒子の平均直径は３０７ｎｍそして多分散度は０．２３
４である。

【００９３】実施例１４２．５％に等しい合成混合液中のパーセントで、ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒｏ ^TM ポリヒドロキシル化トリグリセリドを用いて、実施例１３の調製が繰返される
。ナノ粒子の平均直径は３０７ｎｍそして多分散度は０．２３４である。

【００９４】実施例１５５０％に等しい合成混合液中のパーセントで、ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒｏ^TM ポリヒドロキシル化トリグリセリドを用いて、実施例１３の調製が繰返される。
ナノ粒子の平均直径は３１０ｎｍそして多分散度は０．３３２である。

【００９５】実施例１６１０．０％に等しい合成混合液中のパーセントで、ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒ
ｏ^TMポリヒドロキシル化トリグリセリドを用いて、実施例１３の調製が繰返され
る。ナノ粒子の平均直径は３２６ｎｍそして多分散度は０．３２５である。

【００９６】実施例１７１０．０％に等しい合成混合液中のパーセントで、ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒ
ｏ^TMポリヒドロキシル化トリグリセリドを用いて且つ合成混合液中には３．８ｇ
の混合液それ自身にカルシトニン３．８７ｍｇを組込んでいて、実施例１３の調
製が繰返される。ナノ粒子の平均直径は３２６ｎｍそして多分散度は０．３２５
である。

【００９７】実施例１８ステアリン酸２．１８ｇとＬａｂｒａｆｉｌ^TMＭ２１３０ＣＳポリヒドロキシル
化トリグリセリド（合成混合液中のＬａｂｒａｆｉｌパーセント：３．１％）６
７ｍｇが混合され、それらは融解された合成混合液の形成のため約７５℃に加熱
される。混合液は冷却により固化される。ｐＨ３まで酸性化された水１０ｍｌ中
に、タウロデオキシコール酸ナトリウム１．３４ｇと鮭カルシトニン３．８５ｍ
ｇが溶解されて、その溶液は７２℃に加熱されそしてそれは約７２℃で１ｍｌの
ｎブタノールが添加された融解された合成混合液に添加される。そうして作られ
た乳濁液に、攪拌しながら、Ｔｗｅｅｎ２０の４ｍｌが透明で異方性のマイクロ
エマルジョンを作るよう添加される。カルシトニンを含んでいる固形ナノ粒子を
形成するため、約５０℃に加熱されたマイクロエマルジョンは一定の攪拌（２５
０ｒｐｍ）のもと、３−５℃に冷却されたｐＨ３の５０倍容積の水に分散させら
れる。懸濁液は過剰表面活性剤を除去するため限外濾過により洗浄される。ナノ
粒子へのカルシトニン組込み効力は約１１．５％である。ナノ粒子の平均直径は
１８５ｎｍで多分散指数は０．３００である。

【００９８】実施例１９カルシトニンの組込み無しで実施例１８の調製が繰返される。合成ナノ粒子の平
均直径は１８２ｎｍであり又多分散指数は０．２９５である。

【００９９】実施例２０合成混合液中に８．９％のＬａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化ト
リグリセリドを用いて、実施例１８の調製が繰返される。ナノ粒子の平均直径は
１７３ｎｍで多分散指数は０．２６８である。

【０１００】実施例２１合成混合液中に１０％のＬａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリ
グリセリドを用いて、実施例１８の調製が繰返される。合成混合液は６６℃で融
解される。ナノ粒子の平均直径は２１６ｎｍで多分散指数は０．２８７である。

【０１０１】実施例２２合成混合液中に１５％のＬａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリ
グリセリドを用いて、実施例１８の調製が繰返される。ナノ粒子の平均直径は１
８８ｎｍで多分散指数は０．２４７である。

【０１０２】実施例２３合成混合液中に５０％のＬａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリ
グリセリドを用いて、実施例１８の調製が繰返され又合成混合液は６０℃で融解
される。ナノ粒子の平均直径は３１２ｎｍで多分散指数は０．４２４である。

【０１０３】実施例２４合成混合液中に７５％のＬａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリ
グリセリドを用いて、実施例１８の調製が繰返され又合成混合液は５４℃で融解
される。ナノ粒子の平均直径は１６２ｎｍで多分散指数は０．３１５である。

【０１０４】実施例２５合成混合液中に９５％のＬａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリ
グリセリドを用いて、実施例１８の調製が繰返され又合成混合液は３５℃で融解
される。ナノ粒子の平均直径は２０５ｎｍで多分散指数は０．２８１である。

【０１０５】実施例２６ステアリン酸１．５ｇとデカン酸（合成混合液中のデカン酸パーセント：２５％
）０．５ｇが混合され、そして混合液は合成混合液の形成のため約７５℃に加熱
される。混合液は冷却により固化される。ｐＨ３まで酸性化された水１０ｍｌ中
に、タウロデオキシコール酸ナトリウム１．３０ｇが溶解されて、５５℃に加熱
されたその溶液は約５５℃で１ｍｌのｎブタノールが添加された融解された合成
混合液に添加される。そうして作られた乳濁液に、攪拌しながら、Ｔｗｅｅｎ２
０の２．６ｍｌが透明で異方性のマイクロエマルジョンを作るよう添加される。
低融点の固形ナノ粒子を形成するため、約４５℃に保持されたマイクロエマルジ
ョンは一定の攪拌（２５０ｒｐｍ）のもと、約３−５℃に冷却されたｐＨ３の５
０倍容積の水に分散させられる。懸濁液は過剰表面活性剤を除去するため限外濾
過により洗浄される。ナノ粒子の平均直径は２８０ｎｍである。

【０１０６】実施例２７合成混合液に５０％のデカン酸を用いて、実施例２６の調製が繰返される。合成
混合液は５０℃で融解される。ナノ粒子の平均直径は３１０ｎｍであり多分散指
数は０．２８０。

【０１０７】実施例２８合成混合液に７５％のデカン酸を用いて、実施例２６の調製が繰返される。合成
混合液は３５℃で融解される。ナノ粒子の平均直径は３００ｎｍであり多分散指
数は０．２５０。

【０１０８】実施例２９ステアリン酸１．８ｇとポリエチレングリコールＰＥＧ４０００（混合液中のＰ
ＥＧ４０００パーセント：１０．０％）０．２ｇが混合され、それらは合成混合
液の形成のため約７５℃に加熱される。ｐＨ３まで酸性化された水１０ｍｌ中に
、タウロデオキシコール酸ナトリウム１．３０ｇが溶解されて、５０℃に加熱さ
れたその溶液は約５０℃で０．５ｍｌのｎブタノールが添加された融解された合
成混合液に添加される。そうして作られた乳濁液に、攪拌しながら、Ｔｗｅｅｎ
２０の２．４ｍｌが透明で異方性のマイクロエマルジョンを作るよう添加される
。合成脂質固形ナノ粒子を形成するため、約４５℃に保持されたマイクロエマル
ジョンは一定の攪拌（２５０ｒｐｍ）のもと、約３−５℃でｐＨ３の５０倍容積
の水に分散させられる。懸濁液は過剰表面活性剤を除去するため限外濾過により
洗浄される。ナノ粒子の平均直径は１８４ｎｍで多分散指数は０．３０２である
。

【０１０９】実施例３０合成混合液に２０％のポリエチレングリコールＰＥＧ４０００を用いて、実施例
２９の調製が繰返される。合成混合液は５０℃で融解される。ナノ粒子の平均直
径は２６３ｎｍであり多分散指数は０．３３４。

【０１１０】実施例３１合成混合液に１０％の両親媒性物質としてポリ（プロピレンオキサイド）−ポリ
（エチレンオキサイド）共重合体、Ｌｕｔｒｏｌ^TM１８８を用いて、実施例２９
の調製が繰返される。合成混合液は５０℃で融解される。ナノ粒子の平均直径は
３５３ｎｍであり多分散指数は０．３１４。

【０１１１】実施例３２合成混合液に２０％のＬｕｔｒｏｌ^TM１８８を用いて、実施例２９の調製が繰返
される。合成混合液は５０℃で融解される。ナノ粒子の平均直径は３７５ｎｍで
あり多分散指数は０．３００。

【０１１２】実施例３３ステアリン酸１．４ｇとＬａｂｒａｆｉｌ^TMＭ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化
トリグリセリド（混合液中のＬａｂｒａｆｉｌパーセント：３０．１％）６０７
ｍｇが混合され、それらは合成混合液の形成のため約７０℃に加熱される。この
混合液には部分的に水素添加された大豆レシチン（ＬｉｐｏｉｄＳ７５−３５）
１．０６ｇが添加される。ｐＨ３の水溶液１０ｍｌが約７０℃で融解された合成
混合液に添加され、それには１．０ｍｌのｎブタノールが添加された。そうして
作られた乳濁液に、攪拌しながら、Ｔｗｅｅｎ２０の６ｍｌが透明で異方性のマ
イクロエマルジョンを作るよう添加される。マイクロエマルジョンには約２００
ｍｇのシクロスポリンが添加される。シクロスポリンを含んでいる固形ナノ粒子
を形成するため、約５０℃に加熱されたマイクロエマルジョンは一定の攪拌（２
５０ｒｐｍ）のもと、約３−５℃に冷却されたｐＨ３の５０倍容積の水に分散さ
せられる。懸濁液は過剰表面活性剤を除去するため限外濾過により洗浄される。
シクロスポリンを含んでいるナノ粒子の平均直径は３０４ｎｍで多分散指数は０
．３６５である。

【０１１３】実施例３４マイクロエマルジョンに１００ｍｇのエトポシドを組込んで、実施例３３の調製
が繰返される。合成混合液は５０℃で融解される。合成ナノ粒子の平均直径は２
８８ｎｍであり多分散度は０．２１１。

【０１１４】実施例３５合成混合液に２０％のＬｕｔｒｏｌ^TM１８８を用いて、実施例２９の調製が繰返
される。合成混合液は５０℃で融解されそして合成混合液のグラム当たり１００
ｍｇに等しい量のアシクロビルが添加される。アシクロビルを含んでいるナノ粒
子の平均直径は３６０ｎｍであり多分散指数は０．３０２。

【０１１５】実施例３６ステアリン酸９８０ｍｇとＬａｂｒａｆｉｌ^TMＭ２１３０ＣＳポリヒドロキシル
化トリグリセリド（混合液中のＬａｂｒａｆｉｌパーセント：３０％）５１０ｍ
ｇが混合され、それらは合成混合液の形成のため約７０℃に加熱される。この混
合液には３００ｍｇのＱ１０補酵素（ユビデカレノン）と１．０６ｇの部分的に
水素添加された大豆レシチン（ＬｉｐｏｉｄＳ７５−３５）が添加される。ｐＨ
３の水溶液１０ｍｌが約７０℃で融解された合成混合液に添加され、それには１
ｍｌのｎブタノールが添加された。そうして作られた乳濁液に、攪拌しながら、
Ｔｗｅｅｎ２０の６ｍｌが透明で異方性のマイクロエマルジョンを作るよう添加
される。ユビデカレノンを含んでいる固形ナノ粒子を形成するため、約５０℃に
加熱されたマイクロエマルジョンは一定の攪拌（２５０ｒｐｍ）のもと、約３−
５℃で、ｐＨ３で５０倍容積の水に分散させられる。懸濁液は過剰表面活性剤を
除去するため限外濾過により洗浄される。ナノ粒子へのユビデカレノン組込みパ
ーセントは９９％、ナノ粒子の平均直径は１９５ｎｍで多分散指数は０．２１４
である。

【０１１６】実施例３７６ｇのステアリン酸と０．９ｇのＬａｂｒａｆｉｌ^TMＭ２１３０ＣＳポリヒドロ
キシル化トリグリセリド（混合液の１５％）が混合されて、それは約７０℃に等
しい温度で融解される。融解された合成混合液には１．５ｇの大豆レシチン（Ｌ
ｉｐｏｉｄＳ７５−３５）が３ｇのＴｗｅｅｎ２０を含んでいるｐＨ５．５で３
００ｍｌの水溶液と添加される。そうして作られた乳濁液は０から１５分の時間
範囲で７０℃に等しい温度と７５０バールに等しい圧力で、高圧Ｒａｎｎｉｅ−
ＭｉｎｉＬａｂ８．３０ホモジナイザーの中を通過させられる。分散液は固形ナ
ノ粒子の出現を与えるのに、恒温槽中で２５０ｒｐｍの一定攪拌により、回収さ
れて４℃に瞬間冷却させられる。平均直径は：

【０１１７】

【外１】

【０１１８】実施例３８共融解によりいったん調製された合成物質を、組成物それ自身の融点（Ｔ＜５０
℃）以下にシステムの温度を保持しつつ、実施例３７の調製が繰返される。得ら
れた分散液は低エネルギー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎｍｏｄ．Ｌ２Ｒ）ホモジナイザ
ー−ミキサーで５分間予備均質化され、続いて定温（４５℃）高圧（７５０バー
ル）で均質化される。

【０１１９】実施例３９０．３９ｇのステアリン酸と５．５ｇのＬａｂｒａｆｉｌ^TMＭ２１３０ＣＳポリ
ヒドロキシル化トリグリセリド（混合液の９５％）が混合されて、それは７５℃
に等しい温度で融解される。融解された合成混合液には３ｇの大豆レシチン（Ｌ
ｉｐｏｉｄＳ７５−３５）が１２ｇのＴｗｅｅｎ２０を含んでいるｐＨ５．５で
３００ｍｌの水溶液と添加される。そうして作られた乳濁液は０から１５分の時
間範囲で７０℃に等しい温度と７５０バールに等しい圧力で、高圧Ｒａｎｎｉｅ
−ＭｉｎｉＬａｂ８．３０ホモジナイザーの中を通過させられる。分散液は合成
脂質固形ナノ粒子の出現を与えるため、恒温槽中で２５０ｒｐｍの一定攪拌によ
り４℃に瞬間冷却させられる。平均直径は：

【０１２０】

【外２】

【０１２１】実施例４０共融解によりいったん調製された合成物質を、組成物それ自身の融点（Ｔ＜３５
℃）以下にシステムの温度を保持しつつ、実施例３９の調製が繰返される。得ら
れた分散液は低エネルギー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎｍｏｄ．Ｌ２Ｒ）ホモジナイザ
ー−ミキサーで予備均質化され、続いて定温（３０℃）高圧（７５０バール）で
均質化される。

【０１２２】実施例４１３．７５ｇのステアリン酸と３．７５ｇのポリエチレングリコール２００００（
ＰＥＧ２００００）（混合液の５０％）が混合されて、それは約７５℃に等しい
温度で融解される。融解された合成混合液には３ｇの大豆レシチン（Ｌｉｐｏｉ
ｄＳ７５−３５）が６ｇのＴｗｅｅｎ２０を含んでいるｐＨ５．５で３００ｍｌ
の水溶液と添加される。そうして作られた乳濁液は０から１０分の時間範囲で７
０℃に等しい温度と７５０バールに等しい圧力で、高圧Ｒａｎｎｉｅ−Ｍｉｎｉ
Ｌａｂ８．３０ホモジナイザーの中を通過させられる。分散液は固形ナノ粒子の
出現を与えるため、恒温槽中で２５０ｒｐｍの一定攪拌により、４℃に瞬間冷却
させられる。平均直径は：

【０１２３】

【外３】

【０１２４】実施例４２共融解によりいったん調製された合成物質を、組成物それ自身の融点（Ｔ＜４５
℃）以下にシステムの温度を保持しつつ、実施例４１の調製が繰返される。得ら
れた分散液は低エネルギー（Ｓｉｌｖｅｒｓｏｎｍｏｄ．Ｌ２Ｒ）ホモジナイザ
ー−ミキサーで予備均質化され、続いて定温（４５℃）高圧（７５０バール）で
均質化される。

【０１２５】実施例４３合成混合液中に１５％に等しいＰＥＧパーセントを持ち且つ合成混合液それ自身
に３００ｍｇの鮭カルシトニンを組込んで、実施例４１の調製が繰返される。Ｐ
ＥＧステアリン酸混合液へのカルシトニン組込みの効率は３５％に等しい。

【０１２６】実施例４４共融解によりいったん調製された合成物質を、組成物それ自身の融点（Ｔ＜４５
℃）以下にシステムの温度を保持しつつ、実施例４２の調製が繰返される。得ら
れた分散液はＳｉｌｖｅｒｓｏｎで予備均質化され、続いて定温（４５℃）高圧
（７５０バール）で均質化される。

【０１２７】実施例４５５％のステアリン酸と９５％のＬａｂｒａｆｉｌ^TMＭ２１３０ＣＳポリヒドロキ
シル化トリグリセリドを含んでいる合成混合液が共融解と冷却により調製される
。融解した合成混合液（７５℃）には、１ｇのイブプロフェンと大豆レシチン（
ＬｉｐｏｉｄＳ７５−３５）の混合物のグラム当たり２４０ｍｇ及び合成混合液
＋薬剤のグラム当たりｐＨ５．５の水溶液４０ｍｌの量で１．２％のＴｗｅｅｎ
２０を含んでいる水溶液が添加される。そうして作られた乳濁液は０から１０分
の時間範囲で７０℃に等しい温度と７５０バールに等しい圧力で、高圧Ｒａｎｎ
ｉｅ−ＭｉｎｉＬａｂ８．３０ホモジナイザーで処理される。分散液は固形ナノ
粒子の出現を与えるのに、恒温槽中で２５０ｒｐｍの一定攪拌により４℃に瞬間
冷却させられる。平均直径は：

【０１２８】

【外４】

【０１２９】実施例Ａ（従来技術ＥＰ０５２６６６６Ａ１に従う）１．２ｇのステアリン酸が約７２℃に加熱溶融される。ｐＨ３に酸性化した水２
０ｍｌに、２．６ｇのタウロデオキシコール酸ナトリウムが溶解させられ、７２
℃に加温されたその溶液は２ｍｌのｎブタノールが添加された溶融ステアリン酸
に添加される。そうして作られた乳濁液には、ミキサーで攪拌しながら、５ｍｌ
のＴｗｅｅｎ２０が透明で異方性のマイクロエマルジョンを得るのに添加される
。約６０℃にとられたマイクロエマルジョンは、ＥＰ０５２６６６６Ａ１で使用
された技術に従ってナノ粒子を作るために、一定攪拌（２５０ｒｐｍ）のもと、
約３−５℃、ｐＨ３で５倍量の水に分散させられる。懸濁液は過剰表面活性剤を
除去するため限外濾過により洗浄される。ナノ粒子の平均直径は２０９ｎｍで多
分散指数は０．１５５である。

【０１３０】実施例Ｂ３．８５ｍｇの鮭カルシトニンを添加して、実施例Ａの手順が繰返される。ナノ
粒子中のカルシトニン組込み効力は１．８２％である。ナノ粒子の平均直径は１
９３ｎｍで多分散指数は０．２３５である。

【０１３１】実施例Ｃ実施例Ｂの手順が繰返される。そうして調製されたナノ粒子には、両親媒性物質
（ジミリストイルホスファチジルグリセロール、ＤＭＰＧ）がステアリン酸の脂
質質量に対して１：１０に等しい比率で、ミキサーでの攪拌下で添加され、それ
はナノ粒子自身の表面に吸着される。ナノ粒子上のカルシトニン組込み効力は１
．７５％に等しい。従来技術に従う斯かる組成物は、表面上に吸着された両親媒
性成分を持つことだけに従っていて、ナノ粒子を形成している合成物質の成分と
してではなく、本発明の実施例５と直接比較できる。懸濁液は過剰表面活性剤を
除去するため限外濾過により洗浄される。ナノ粒子の平均直径は２１５ｎｍで多
分散指数は０．１７５である。

【０１３２】実施例Ｄ１．７ｇのステアリン酸と３００ｍｇのユビデカレノンが混合されて、それらは
約７０℃に加熱融解される。７０℃に加熱された、ｐＨ３で１０ｍｌの水溶液中
の０．５ｍｌのｎブタノール、１．３０ｇのタウロデオキシコール酸ナトリウム
が共融解のために添加される。そうして作られた乳濁液に、攪拌しながら、３．
２５ｇのＴｗｅｅｎ２０がマイクロエマルジョンを作るために添加される。ＥＰ
０５２６６６６Ａ１技術に従って脂質ナノ粒子を形成するために、約７０℃に加
熱されたマイクロエマルジョンは一定の攪拌（２５０ｒｐｍ）のもと、約３−５
℃で、ｐＨ３で５０倍容積の水に分散させられる。懸濁液は過剰表面活性剤を除
去するため限外濾過により洗浄される。ナノ粒子中のユビデカレノンの組込みパ
ーセントは約８０％、ナノ粒子の平均直径は２０５ｎｍで多分散指数は０．２４
４である。

【０１３３】実施例Ｅ（従来技術ＷＯ９３／０５７６８に従う）７．５ｇのステアリン酸が７５℃に等しい温度で融解される。３ｇの大豆レシチ
ン（ＬｉｐｏｉｄＳ７５−３５）が６ｇのＴｗｅｅｎ２０を含んでいるｐＨ５．
５で３００ｍｌの水溶液と添加される。そうして得られた乳濁液は０から１０分
の時間範囲で７０℃に等しい温度と７５０バールに等しい圧力で、高圧Ｒａｎｎ
ｉｅ−ＭｉｎｉＬａｂ８．３０ホモジナイザーで処理される。分散液はＷＯ９３
／０５７６８に記述された技術に従って固形ナノ粒子の出現を与えるため４℃に
瞬間冷却させられる。平均直径は：

【０１３４】

【外５】

【０１３５】特性実施例 −親水性薬剤（ペプチド）の組込み特性の改良本発明の新規な特性の一つは親水性薬剤（ペプチド）の組込み効力を改良し且つ
合成ナノ粒子内部の分布を改良する可能性である。この観点は蛍光技術により示
された。

【０１３６】カルシトニンペプチドは既知の技術（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，２７２，７１３
−７１９）に従って、蛍光団（７ニトロベンズ−２オキサ−１，３ジアゾール、
ＮＢＤ）によりマークされた、続いて本発明の実施例１−８及び比較例Ｂ−Ｃに
述べた如くナノ粒子中に組込まれた。試料は諸例で記述した限外濾過手順に従っ
て洗浄された。

【０１３７】・ナノ粒子中に組込まれたペプチドのパーセンテージ・粒子自身の表面に吸着したペプチド分だけを溶解して分解できる、蛋白質分解
酵素トリプシンによる懸濁液の処理の前後で蛍光を測定して、組込まれた総量に
対する表面に吸着されたペプチドのパーセンテージが、標準曲線に対する及び限
外濾過の前に放出された蛍光の１００％に対する蛍光の発光値の測定により、計
算された。

【０１３８】実施例Ｆ、表１で報告された結果は、如何にして合成ナノ粒子がペプチドの組
込み効力を増加させ、（吸着して蛋白質分解酵素により攻撃できた）その表面に
落着いた分を減少させ、且つ合成母材の内部に大部分を保持しているかを示して
いる。

【０１３９】実施例Ｆ表１．合成脂質ナノ粒子中のカルシトニン組込み効率、及び粒子自身の表面に吸
着したペプチドのパーセンテージ。

【０１４０】

【外６】

【０１４１】 −集団特性の修正本発明製品のもう一つの新規な特性はナノ粒子を形成している合成物質の集団特
性の修正である。集団特性の修正は微分走査カロリメーター、ＤＳＣ、パーキン
エルマーＤＳＣ７型による熱解析技術により定量的に評価される。本発明に従う
ナノ粒子は均質な合成物質によるか、又は異なった性質を持って分離された相を
表している合成物質によるか何れかで形成されている。前者の場合、均質な合成
物質が組成（実施例Ｇ）（表２）の関数としての熱的事象（融点）の修正を示す
ことが例えば観測可能である。後者の場合、温度及び各パーセント組成での比遷
移エンタルピー（実施例Ｈ、Ｉ）（表３と４）で起っている、熱的遷移又は分離
された相の融解に関する多くの熱的事象が区別できる。両者の場合とも、合成物
質の特性は単一の物質の基本では予期せざる又予見できないものである。

【０１４２】成分比率の関数として合成ナノ粒子の熱力学的挙動の修正は、例えばレーザー
光散乱の技術により、懸濁液中のナノ粒子でも観測可能である。合成ナノ粒子の
相転移は、ブルックハーベン社ＢＩ−９０型粒子解析器により測定された、温度
の関数としての散乱の強度変化から注目に値する。この技術により、如何にして
合成ナノ粒子が構成している物質の組成に従うのとは異なる相転移と融点を示す
かを指摘することが可能である；実施例Ｌ、図１参照。

【０１４３】実施例Ｇ表２．実施例２６−２８に部分的に対応しているステアリン酸と平均鎖脂肪酸（
両親媒性）の二成分混合体の融点

【０１４４】

【外７】

【０１４５】実施例Ｈ表３．合成物質ステアリン酸−ジミリストイルホスファチジルグリセロール（Ｄ
ＭＰＧ）の相転移温度とエンタルピー、及び実施例１−６に部分的に対応してい
る或意味のある組成。

【０１４６】

【外８】

【０１４７】実施例Ｉ表４．実施例１８−２５に対応している、合成物質ステアリン酸−Ｌａｂｒａｆ
ｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリグリセリドの相転移とエンタルピー

【０１４８】

【外９】

【０１４９】実施例Ｌ図１．実施例３−５と比較例Ａで述べた製品に対応している、散乱技術により決
定された、合成ナノ粒子（ステアリン酸−ＤＭＰＧ）の相転移。相転移（融解）
は温度の関数として、レーザー光散乱（“散乱”）強度の低下により指摘される
。この変化の始まり（曲線平坦部からの落込み）は転移の始まりに対応する。本
発明に従う組成物では、この転移はナノ粒子を形成している物質の組成の変化で
変更且つ制御され得ることはいかにも明らかである。粒子の融点（例Ａでは）６
３℃）は事実実施例３、４、５で夫々５５℃、５３℃及び４９℃に低下している
。

【０１５０】 −調製特性の修正（技術１）：マイクロエマルジョン存在の間隔本発明に従う合成物質の性質は低融点を持っている組成物を得ることとマイクロ
エマルジョンの熱的存在間隔を拡げることの両方を可能にし、単一成分物質の融
点よりも極低い温度で、技術１に従う合成ナノ粒子の調製（実施例Ｍ）（図２）
において中間生成物として使用される。この間隔は、マイクロエマルジョンの存
在中は最小になる（＜１０ｋＨｚ）、散乱周波数の測定により決定された。本発
明の証拠と原理的利点は合成ナノ粒子の中に不耐熱性有効成分を処方できること
である；更なる利点はナノ粒子の調製にそれらの融点より低い温度を持っている
或種の物質を使用できることである。

【０１５１】実施例Ｍ図２．油相中で、ステアリン酸とデカン酸より成っているマイクロエマルジョン
（調製技術１、実施例２６−２８及び実施例Ａ参照）の熱的存在範囲。

【０１５２】 −本発明の製品の新規な特徴の一つはナノ粒子を形成している合成物質及び結
果としてナノ粒子それ自身の表面特性を制御する可能性である。本発明の技術と
物質に従って得られたナノ粒子の表面特性は現在技術で述べられた両親媒性成分
の表面吸着とは本質的に異なる、何故ならばそれらは合成物質の構造次第である
からである。斯くして本発明の利点は達成すべき治療目的に従って生体適合性、
疎水性、親水性及び極性の好都合な特性を有している合成ナノ粒子を得る可能性
である。

【０１５３】ナノ粒子を形成している合成物質の表面特性は、Ｌｏｒｅｎｔｚｅｎ＆Ｗｅｔ
ｔｒｅ装置を用いて、接触角法により測定される。この方法は方程式（１）によ
って、吸湿性に相関可能な物質の表面エネルギーの計算を可能とする、 γｓｖ＝γｓｌ＋γｌｖ（ｃｏｓθ）（１）ここで添字ｓｖ、ｓｌ，ｌｖは夫々固体−蒸気、個体−液体及び液体−蒸気表面
の表面エネルギー（γ）に関係し、θは固体表面と液体の接触角である。各物質
の表面自由エネルギーは（２）に従って極性成分と分散成分に分割できるから： γ^t＝γ^p＋γ^d （２）一連の方程式により練られた実験的測定から、次式のようにパーセントで表現さ
れた表面の極性だけでなく、斯かる成分と全自由エネルギーの値を計算すること
が可能である：％Ｐ＝（γ^p／γ^t）^*１００（３）

【０１５４】本発明に従う合成物質の表面エネルギーの測定から、両親媒性成分は：１）合成物質により形成されたナノ粒子の表面上に優先的に配列される（“表面
上への凝離”）；２）合成物質により形成されたナノ粒子内部へ優先的に配列される（“内部へ凝
離”）；３）ナノ粒子自身の表面と内部に均等に配列される；ことを決定することが可能となった。

【０１５５】合成混合液の表面エネルギーの図表：実施例１−６に述べたナノ粒子を形成し
ているステアリン酸−ＤＭＰＧ（実施例Ｎ）、実施例１３−１７で述べたステア
リン酸−ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒｏ^TMポリヒドロキシル化トリグリセリド（実
施例Ｏ）、ステアリン酸−ＬａｂｒａｆａｃＬｉｐｏカプリル−カプリン酸トリ
グリセリド（実施例Ｐ）は図３、４及び５に例証的目的で報告された。図３、４
及び５における曲線Ａ、Ｂ及びＣは夫々全表面エネルギー、分散成分及び極性成
分に関してである。

【０１５６】実施例Ｎ図３．実施例１−６に参照できるステアリン酸−ＤＭＰＧ組成物の表面エネルギ
ーの傾向。全エネルギーの減少により特徴付けられた傾向は合成混合液中の両親
媒性成分ＭＰＧの“優先的表面凝離”を示している。

【０１５７】実施例Ｏ図４．実施例１３−１７に参照できるステアリン酸−ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒ
ｏ組成物の表面エネルギーの傾向。傾向は合成混合液中の両親媒性成分Ｌａｂｒ
ａｆａｃＨｙｄｒｏ（及びステアリン酸成分内部）の“優先的内部凝離”を示し
ている。

【０１５８】実施例Ｐ図５．ステアリン酸−ＬａｂｒａｆａｃＬｉｐｏ組成物の表面エネルギーの傾向
。不変な傾向は合成母材の中の両親媒性成分ＬａｂｒａｆａｃＬｉｐｏの均等分
布を示している。

【０１５９】使用された合成物質組成の関数としての合成ナノ粒子の表面特性の変化は、合
成ナノ粒子の懸濁水のレーザー光散乱電気泳動分析装置ＺｅｔａＭａｓｔｅｒ（
Ｍａｌｖｅｒｎ社、英国）により行われたゼータポテンシャル測定によっても定
量化できる。ゼータポテンシャル（剪断面ポテンシャル）は懸濁液中のナノ粒子
の表面電荷の測度である。ナノ粒子のゼータポテンシャル、従って表面特性、が
各組成物に特有の傾向を持ち、組成中の両親媒性物質のパーセントの関数として
変動することは実施例Ｑ−Ｔから明らかである。

【０１６０】本発明の表面特性とゼータポテンシャルを修正する可能性は更に懸濁物の沈降
又は凝集傾向を減少又は取除き、それで安定性を増加させる重要な利点を有する
。斯かる利点はナノ粒子自身を形成している物質の組成を修正して得られる。

【０１６１】表５、（実施例Ｑ−Ｔ）実施例Ｑゼータポテンシャル（ｍＶ）は実施例２−５及びＡで同様に調製された、ステア
リン酸−ＤＭＰＧナノ粒子上で測定された。

【０１６２】実施例Ｒゼータポテンシャル（ｍＶ）は実施例９−１１及びＡで同様に調製された、ステ
アリン酸−ＤＭＰＧナノ粒子上で測定された。

【０１６３】実施例Ｓゼータポテンシャル（ｍＶ）は実施例１３−１６及びＡで同様に調製された、ス
テアリン酸−ＬａｂｒａｆａｃＨｙｄｒｏポリヒドロキシル化トリグリセリドナ
ノ粒子上で測定された。

【０１６４】実施例Ｔゼータポテンシャル（ｍＶ）は実施例１９−２４及びＡで同様に調製された、ス
テアリン酸−Ｌａｂｒａｆｉｌ２１３０ＣＳポリヒドロキシル化トリグリセリド
ナノ粒子上で測定された。

【０１６５】

【外１０】

【０１６６】 −本発明及び従来技術に従う合成ナノ粒子の形態学本発明及び従来技術に従うナノ粒子の間の実質的な違いの確認について、幾つか
の重要な試料の形態が、ナノ粒子試料の調製の間“陰画着色”（クエン酸ウラシ
ル）過程を用いて、透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）技術により観察された（実施例
１と実施例Ａに対応している）。図６で合成ナノ粒子の異なった形態は、従来技
術に従って調製されたもの（実施例Ａ、図６ｂ）に較べて明らかである（実施例
１、図６ａ）：形態的相違、明と暗領域は事実合成物質の相（“選択的凝離”）
に対応している６ａ中の粒子に認められる、一方システム６ｂは均質に見えてい
る。更に実施例１に対応している試料の構成要素（図７ａと７ｂ）は、表面に存
在する物質が粒子の表面に吸着された両親媒性物質の層とは異なっているが、そ
れは粒子それ自身の不可欠の部分であることを示唆している。

【０１６７】 −ペプチドの経口吸収の改良（薬物動態学と治療効力）本発明の重要な利点を示すために、有効成分として鮭カルシトニンを含んでいる
合成脂質ナノ粒子が“生体に”投与された（実施例２、４、５）、及び従来技術
に従って調製されたカルシトニンを含んでいるナノ粒子（実施例Ａ、Ｂ、Ｃ）。

【０１６８】投薬量試験成績表と試料分析カルシトニン（比活性：４０００ＵＩ／ｍｇ；標準投薬量：６００ＵＩ／ｋｇ、
ナノ粒子に組込まれた有効投薬量：６０−８０ＵＩ／ｋｇ）を含んでいる本発明
に従う合成ナノ粒子懸濁液（２０ｍｌ）が４頭のアカゲザルに経口で投与された
。血液試料（１．５ｍｌ）が決められた時間毎に採取され、採取後直ちに分析さ
れた。

【０１６９】薬物動態学：血漿中のペプチド濃度は特定の放射免疫定量法（ＲＩＡ）により
決定され、ミリ国際単位／ｍｌ（ｍＵＩ／ｍｌ）として表現される。

【０１７０】治療効力：血漿中の全カルシウムのレベルはカロリメーターキット（Ｃｏｂａ
ｓＭｉｒａ，Ｒｏｃｈｅ，ＣＨ）により決定された。イオン化カルシウムのレベ
ルはイオン選択膜を装備した装置（ＩＧ放射計、コペンハーゲン、デンマーク）
への注入により決定された。結果は基準線に対するカルシウムレベルのパーセン
ト変化として表現された。

【０１７１】結果は以下に記述される実施例Ｕ−Ｚ１に関連した図８−１１で報告される。

【０１７２】実施例Ｕ図８．経口投与の後、本発明に従った組成物（実施例２、４、５）と従来技術に
従った組成物（実施例Ａ、Ｂ）に処方されたカルトシアニンの吸収の動態。

【０１７３】実施例Ｖ図９．本発明に従った組成物（実施例２、４、５）と従来技術に従った組成物（
実施例Ａ、Ｂ）に処方されたカルトシアニンの経口投与の後血液中の全カルシウ
ム変動の動態。

【０１７４】実施例Ｚ図１０．本発明に従った組成物（実施例２、４、５）と従来技術に従った組成物
（実施例Ａ、Ｂ、Ｃ）に処方されたカルトシアニンの経口投与後血液中のイオン
化カルシウムの動態。

【０１７５】実施例Ｚ１図１１．本発明に従った組成物（実施例２、４、５、７）と従来技術に従った組
成物（実施例Ａ、Ｂ及びＣ）に処方されたカルトシアニンの経口投与に関して血
中濃度曲線下面積（０−８時間）（血漿動態曲線に抱かれた面積）として表現さ
れる生体内利用率。

【０１７６】本発明に従った合成ナノ粒子に処方され且つ経口投与されたカルシトニンの生
体利用率が、従来技術の処方に対して著しく増加した（１３．５倍に）ことは薬
物動態学的に書かれたテストから明らかに判る。更に、本発明に従うナノ粒子は
、吸収の増加に加えて、投与から８時間まで血漿中に活性形で存在するペプチド
吸収の制御も可能であることは明らかである。更に、治療効力テストは、如何に
血液のカルシウムに関する効果が本発明の処方（実施例２、４、５）が従来技術
に従う処方に関してよりも大きいか、又それが諸成分の単純な混合液にではなく
て、合成物質の存在に依存することを指摘する。

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年２月２２日（２０００．２．２２）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/727 Ａ６１Ｋ 31/727 38/00 47/10 38/22 47/12 38/28 47/14 38/23 47/24 38/27 47/34 38/21 47/36 47/10 47/38 47/12 47/44 47/14 37/02 47/24 37/24 47/34 37/26 47/36 37/30 47/38 37/36 47/44 37/66 Ｇ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ) ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者コチェアニ・ニコレッタイタリア国、33043 チヴィダレ、ヴィアフィルマノ 10 (72)発明者デルクルトマリアドルリーイタリア国、27050 コルヴィノサンクイリコ、ヴィアオラトリオ４ (72)発明者カルリ・ファビオイタリア国、34136 トリエステ、サリタチェダッサマッレ３／１Ｆターム(参考） 4C076 AA17 AA22 AA31 AA37 AA65 CC04 CC18 CC21 CC27 CC30 CC31 DD02F DD03F DD04F DD08F DD09F DD37A DD37E DD38A DD38F DD41E DD41F DD46A DD46F DD67A DD70F EE06F EE10F EE15F EE16A EE17F EE23A EE23F EE30A EE30F EE36F EE37F EE38A EE38F FF12 FF15 FF16 4C084 AA01 DA11 DA21 DB01 DB31 DB52 MA02 MA05 MA22 MA23 MA34 MA35 MA37 MA41 NA14 ZA891 ZB111 ZB261 ZB351 ZC111 ZC331 4C086 BA02 CB07 EA04 EA27 MA03 MA05 MA22 MA23 MA34 MA35 MA37 MA41 NA14 ZA89 ZB11 ZB26 ZB35 ZC11 ZC33

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】それらが少なくとも一つの脂質物質及び少なくとも一つの両
親媒性物質、及び水溶性、脂溶性又は難溶性の薬学的有効成分より成っている合
成物質より成ることを特徴とする、固形ナノ粒子の形の薬学的組成物。
【請求項２】前記脂質物質が総計で０．５から９９．５％まで存在し且つ
前記両親媒性物質が総計で０．５から９９．５％まで存在し且つ前記有効成分が
総計で前記脂質物質と前記両親媒性物質の和に対して重量で０．００１から９９
％まで存在することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】前記ナノ粒子が１０００ｎｍ未満、なるべくなら５０から５
００ｎｍの範囲の直径を有することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】１）合成物質の形をとる少なくとも一つの脂質物質と一つの
両親媒性物質の二つ又はそれ以上の物質；２）一つ又はそれ以上の表面活性剤及
び表面活性助剤；３）分散／懸濁水又は非水相；４）一つ又はそれ以上の薬学的
活性物質より成っている、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】単一成分の融点以下の温度で存在間隔を有しているマイクロ
エマルジョンの形の請求項４に記載の組成物。
【請求項６】前記脂質物質が天然脂肪、部分的に又は完全に水素添加され
た植物油、鎖長がＣ１０からＣ２２までの範囲の脂肪族及びそれらのポリヒドロ
キシエチル化誘導体を有している飽和及び／又は不飽和脂肪酸を含んでいる半合
成及び合成モノ−、ジ−及びトリ−グリセリド類、イソプロピルミリスチン酸エ
ステル、イソプロピルカプリン酸エステル、カプリル酸エステル、ラウリン酸エ
ステル、パルミチン酸エステル、ステアリン酸エステルから選ばれた液体蝋、エ
チルオレイン酸エステル、オレイルオレイン酸エステルから選ばれた脂肪酸のエ
ステル類、カルナウバ蝋と蜜蝋から選ばれた固形蝋、セチルアルコール、ステア
リルアルコール、ラウリルアルコール、セチルステアリルアルコール及びそれら
のポリヒドロキシエチル化誘導体から選ばれた脂肪族アルコール類、デカン酸、
ラウリン酸、パルミチン、ステアリン、ドコサン酸、オレイン、リノール及びそ
れらのポリヒドロキシエチル化誘導体から選ばれた脂肪族カルボン酸（Ｃ１０−
Ｃ２２）から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】前記両親媒性物質がホスファチジルグリセロール、ホスファ
チジルコリン、ホスファチジン酸、グリセリルモノステアリン酸エステル、グリ
セリルモノオレイン酸エステル、グリセリルパルミトステアリン酸エステル、ト
リグリセリド及びポリヒドロキシル化トリグリセリド、脂肪酸及び中間鎖脂肪酸
（Ｃ６−Ｃ１２）のエステル類、ポリエチレングリコール、ポリ（プロピレンオ
キサイド）ポリ（エチレンオキサイド）共重合体、ポリオキサマー、ポリビニル
アルコール、ポリアクリレート、ポリ（メチルビニルエーテル）無水マレイン酸
共重合体、キトサン、ヒアルロン酸、セルローズ、澱粉、キサンタン、スクレロ
グルカン、ゲラン、グアーゴム、ニセアカシア豆のゴム、アルギン酸塩、デキス
トラン、ポリε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸エステル、ポリ乳酸、ポ
リグリコール酸及び共重合体から選ばれることを特徴とする、請求項１に記載の
組成物。
【請求項８】前記分散相が、水その儘か或は異なったｐＨ及びイオン強度
で緩衝された、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル
酸、ポリメタクリル酸、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンの共重合体
、デキストラン、キサンタン、スクレオグルカン、アラビアゴム、グアーゴム、
キトサン、セルローズと澱粉誘導体、ソルビトール、マンニトール、キシリトー
ル、短鎖モノ又はポリ水酸化脂肪族アルコール、液体ポリエチレングリコール類
、ポリグリコール酸グリセリド、プロピレングリコール、テトラグリコール、及
びエトキシジグリコールから選ばれた親水性、水溶性又は水分散性重合体の水溶
液から成ることを特徴とする、請求項４に記載の組成物。
【請求項９】前記表面活性剤が脂肪酸のソルビタンエステル、脂肪酸のポ
リオキシエチレンソルビタンエステル、ポリプロピレンオキサイド−ポリエチレ
ンオキサイドの共重合体、ポリエチレングリコール−グリセロールのエステル、
ポリエチレングリコールと酸又は長鎖脂肪族アルコールのエステル、ポリグリセ
リドエステル、糖類と脂肪酸のエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン
酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、タウロデオ
キシコール酸塩、タウロコール酸塩、ウルソデオキシコール酸塩、それらが部分
的水素添加及び水素添加されたレシチン類、燐脂質及びそれらの半合成又は合成
誘導体及び脂肪酸のソルビタンエステルから選ばれることを特徴とする、請求項
４に記載の組成物。
【請求項１０】前記表面活性助剤がエタノール、２−プロパノール、ｎ−
ブタノール、イソプロパノール、酪酸、吉草酸、カプロン酸、ベンジルアルコー
ル、デカン酸、ラウリン酸、カプリニルアルコール、ラウリルアルコール、モノ
又はポリ水酸化アルコールと酸又は中間鎖脂肪族アルコールのエステル又はエー
テルから選ばれることを特徴とする、請求項４に記載の組成物。
【請求項１１】前記水溶性有効成分がカルシトニン、ソマトスタチン、ソ
マトトロピン（成長ホルモンＧＨ）、ＬＨ−ＲＨ類似体、デスモプレシン（ＤＤ
ＡＶＰ）、インターフェロン、モルグラモスチン、表皮成長因子（ＥＧＦ）、神
経成長因子（ＮＧＦ）、インスリン、グルカゴン、毒素又はトキソイド、蛋白質
又は多糖類の抗原性因子、ヘパリン、低分子量ヘパリン及びヘパリノイドより成
ることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】前記脂溶性有効成分がシクロスポリン、ロイプロリド、タ
キソルと誘導体及びエトポシドより成ることを特徴とする、請求項１に記載の組
成物。
【請求項１３】前記難溶性有効成分がアシクロビル及びガンシクロビルよ
り成ることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】ａ）少なくとも一つの脂質物質と少なくとも一つの両親媒
性物質で合成物質を得るのに、物質それら自身の融点で又は後者が前者に可溶又
は分散可能である場合に少なくとも二つの物質の中の１つの融点で最初の共融解
又は共溶解；ｂ）マイクロエマルジョンを形成するため、又はマイクロエマルジョンそれ自身
の形成に有用な水及び表面活性剤と表面活性助剤の存在下で脂質と両親媒性成分
を融点にとっているマイクロエマルジョンの形成のために、溶融合成物質と同じ
温度に加熱された、一つ又はそれ以上の表面活性剤と表面活性助剤を含んでいる
水溶液の前記溶融合成物質への添加；ｃ）出発時の共融解物質中への有効成分の溶解又は分散、又はマイクロエマルジ
ョンへの有効成分の添加；ｄ）ナノ粒子懸濁液の達成のために、＋１°から＋１０℃の温度範囲で水又は水
性媒質に、又は−１５°から−３０℃の温度範囲で水と混和性の非水溶媒に、マ
イクロエマルジョンの分散；ｅ）懸濁液中に存在する表面活性剤、表面活性助剤及び自由薬剤を取除き、且つ
凍結乾燥又は濾過又は噴霧乾燥又は溶媒の蒸発により乾燥粉末の形で得るために
選択的にナノ粒子が限外濾過又は透析システムにより水又は水溶液で洗浄される
：ことにより特徴付けられる、請求項１又は請求項４で規定された薬学的組成物
の調製工程。
【請求項１５】ａ）少なくとも一つの脂質物質と少なくとも一つの両親媒
性物質で合成物質を得るのに、物質それら自身の融点で又は後者が前者に可溶又
は分散可能である時に少なくとも物質の中の１つの融点での共融解又は共溶解；ｂ）合成物質の融点で又はその“軟化”点で、又は合成物質が固体状態を保った
ままの温度で混合液を保持しながら、高圧均質化技術により、表面活性物質、安
定化及び／又は粘性化物質を含んでいる水溶液への合成物質の分散；ｃ）ナノ粒子を得る＋１０℃から−３０℃までの温度範囲での冷却回路の通過に
よる混合液の冷却；ｄ）懸濁液中に存在する表面活性剤、表面活性助剤及び遊離薬剤を取除くことを
可能にする限外濾過又は透析システムにより選択的にナノ粒子は水又は水溶液で
洗浄され、そして合成ナノ粒子は凍結乾燥技術又は濾過技術により又は噴霧乾燥
技術により又は溶媒蒸発技術により固体として回収され、有効成分は、そのまま
又はナノ粒子への組込み又はその表面への吸着を助ける表面作用を有している物
質との混合液の形で、共融解又は共溶解の段階又はそれに続く工程の間に添加さ
れている：ことにより特徴付けられる、請求項１又は請求項４で規定された薬学的組成物の
調製工程。
【請求項１６】前記ナノ粒子が０．１から５０％Ｗ／Ｖまでの濃度範囲で
懸濁水中に分散されていることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】前記ナノ粒子が薬学用途のためにカプセル剤又は丸薬の内
部の懸濁水として処方されることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項１８】前記ナノ粒子がシロップ形状で処方されることを特徴とす
る、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】前記ナノ粒子が薬学用途のためカプセル剤内部の固形粉末
として処方されることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項２０】前記ナノ粒子が薬学用途のため錠剤、小丸薬又は顆粒の内
部の固形粉末として処方されることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。