JP2002355087A5 - - Google Patents
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【特許請求の範囲】
【請求項1】 ushA遺伝子及びaphA遺伝子が正常に機能せず、かつ、ヌクレオシド−5'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌を培地に培養し、培地中にヌクレオシド−5'−リン酸エステルを生成蓄積せしめ、同培地からヌクレオシド−5'−リン酸エステルを採取することを特徴とするヌクレオシド−5'−リン酸エステルの製造法。
【請求項2】 ushA遺伝子及びaphA遺伝子が変異が導入又は破壊されたことにより正常に機能しない請求項1記載のヌクレオシド−5'−リン酸エステルの製造法。
【請求項3】 前記ヌクレオシド−5'−リン酸エステルが5'−イノシン酸又は5'−グアニル酸である請求項1又は2に記載のヌクレオシド−5'−リン酸エステルの製造法。
【請求項4】 ushA遺伝子及びaphA遺伝子が破壊され、かつ、ヌクレオシド−5'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌。
【請求項5】 前記ヌクレオシド−5'−リン酸エステルが5'−イノシン酸又は5'−グアニル酸である請求項4記載のエシェリヒア属細菌。
【請求項6】 微生物の親株及び既知の5'−ヌクレオチダーゼを欠失した誘導株を、第一のヌクレオシド−5'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地、及び第二のヌクレオシド−5'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地で培養して、親株及び誘導株の遺伝子発現プロファイルを調べ、第一の5'−ヌクレオシド−5'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比と、第二の5'−ヌクレオシド−5'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの前記遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比の積をとり、その値の大きい遺伝子を選択することを特徴とする、ヌクレオシド−5'−リン酸エステルの蓄積に影響する5'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項7】 前記第一及び第二のヌクレオシド−5'−リン酸エステルが、5'−イノシン酸及び5'−グアニル酸である請求項6記載の5'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項8】 前記の選択された遺伝子から、タンパク質のペリプラズムへの移行に必要なシグナル配列をコードし得る遺伝子をさらに選択することを特徴とする請求項6又は7に記載の5'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項1】 ushA遺伝子及びaphA遺伝子が正常に機能せず、かつ、ヌクレオシド−5'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌を培地に培養し、培地中にヌクレオシド−5'−リン酸エステルを生成蓄積せしめ、同培地からヌクレオシド−5'−リン酸エステルを採取することを特徴とするヌクレオシド−5'−リン酸エステルの製造法。
【請求項2】 ushA遺伝子及びaphA遺伝子が変異が導入又は破壊されたことにより正常に機能しない請求項1記載のヌクレオシド−5'−リン酸エステルの製造法。
【請求項3】 前記ヌクレオシド−5'−リン酸エステルが5'−イノシン酸又は5'−グアニル酸である請求項1又は2に記載のヌクレオシド−5'−リン酸エステルの製造法。
【請求項4】 ushA遺伝子及びaphA遺伝子が破壊され、かつ、ヌクレオシド−5'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌。
【請求項5】 前記ヌクレオシド−5'−リン酸エステルが5'−イノシン酸又は5'−グアニル酸である請求項4記載のエシェリヒア属細菌。
【請求項6】 微生物の親株及び既知の5'−ヌクレオチダーゼを欠失した誘導株を、第一のヌクレオシド−5'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地、及び第二のヌクレオシド−5'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地で培養して、親株及び誘導株の遺伝子発現プロファイルを調べ、第一の5'−ヌクレオシド−5'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比と、第二の5'−ヌクレオシド−5'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの前記遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比の積をとり、その値の大きい遺伝子を選択することを特徴とする、ヌクレオシド−5'−リン酸エステルの蓄積に影響する5'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項7】 前記第一及び第二のヌクレオシド−5'−リン酸エステルが、5'−イノシン酸及び5'−グアニル酸である請求項6記載の5'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項8】 前記の選択された遺伝子から、タンパク質のペリプラズムへの移行に必要なシグナル配列をコードし得る遺伝子をさらに選択することを特徴とする請求項6又は7に記載の5'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
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JP2001181573A JP4696404B2 (ja) | 2000-07-05 | 2001-06-15 | 発酵法によるヌクレオチドの製造法 |
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JP2002355087A JP2002355087A (ja) | 2002-12-10 |
JP2002355087A5 true JP2002355087A5 (ja) | 2007-07-05 |
JP4696404B2 JP4696404B2 (ja) | 2011-06-08 |
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2001181573A Expired - Fee Related JP4696404B2 (ja) | 2000-07-05 | 2001-06-15 | 発酵法によるヌクレオチドの製造法 |
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CN101065477B (zh) | 2004-06-25 | 2011-10-05 | 协和发酵生化株式会社 | 物质的制备方法 |
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EP2264144A4 (en) * | 2008-02-25 | 2012-11-07 | Ajinomoto Kk | PROCESS FOR THE PREPARATION OF 5'-GUANYLIC ACID |
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Family Cites Families (1)
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JPS5420195A (en) * | 1977-07-14 | 1979-02-15 | Ajinomoto Co Inc | Preparation of guanosine-5'-monophosphoric acid |
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2001
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