JP2002355087A5 - - Google Patents
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【特許請求の範囲】
【請求項１】 ｕｓｈＡ遺伝子及びａｐｈＡ遺伝子が正常に機能せず、かつ、ヌクレオシド−５'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌を培地に培養し、培地中にヌクレオシド−５'−リン酸エステルを生成蓄積せしめ、同培地からヌクレオシド−５'−リン酸エステルを採取することを特徴とするヌクレオシド−５'−リン酸エステルの製造法。
【請求項２】 ｕｓｈＡ遺伝子及びａｐｈＡ遺伝子が変異が導入又は破壊されたことにより正常に機能しない請求項１記載のヌクレオシド−５'−リン酸エステルの製造法。
【請求項３】 前記ヌクレオシド−５'−リン酸エステルが５'−イノシン酸又は５'−グアニル酸である請求項１又は２に記載のヌクレオシド−５'−リン酸エステルの製造法。
【請求項４】 ｕｓｈＡ遺伝子及びａｐｈＡ遺伝子が破壊され、かつ、ヌクレオシド−５'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌。
【請求項５】 前記ヌクレオシド−５'−リン酸エステルが５'−イノシン酸又は５'−グアニル酸である請求項４記載のエシェリヒア属細菌。
【請求項６】 微生物の親株及び既知の５'−ヌクレオチダーゼを欠失した誘導株を、第一のヌクレオシド−５'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地、及び第二のヌクレオシド−５'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地で培養して、親株及び誘導株の遺伝子発現プロファイルを調べ、第一の５'−ヌクレオシド−５'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比と、第二の５'−ヌクレオシド−５'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの前記遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比の積をとり、その値の大きい遺伝子を選択することを特徴とする、ヌクレオシド−５'−リン酸エステルの蓄積に影響する５'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項７】 前記第一及び第二のヌクレオシド−５'−リン酸エステルが、５'−イノシン酸及び５'−グアニル酸である請求項６記載の５'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項８】 前記の選択された遺伝子から、タンパク質のペリプラズムへの移行に必要なシグナル配列をコードし得る遺伝子をさらに選択することを特徴とする請求項６又は７に記載の５'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項１】 ｕｓｈＡ遺伝子及びａｐｈＡ遺伝子が正常に機能せず、かつ、ヌクレオシド−５'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌を培地に培養し、培地中にヌクレオシド−５'−リン酸エステルを生成蓄積せしめ、同培地からヌクレオシド−５'−リン酸エステルを採取することを特徴とするヌクレオシド−５'−リン酸エステルの製造法。
【請求項２】 ｕｓｈＡ遺伝子及びａｐｈＡ遺伝子が変異が導入又は破壊されたことにより正常に機能しない請求項１記載のヌクレオシド−５'−リン酸エステルの製造法。
【請求項３】 前記ヌクレオシド−５'−リン酸エステルが５'−イノシン酸又は５'−グアニル酸である請求項１又は２に記載のヌクレオシド−５'−リン酸エステルの製造法。
【請求項４】 ｕｓｈＡ遺伝子及びａｐｈＡ遺伝子が破壊され、かつ、ヌクレオシド−５'−リン酸エステル生産能を有するエシェリヒア属細菌。
【請求項５】 前記ヌクレオシド−５'−リン酸エステルが５'−イノシン酸又は５'−グアニル酸である請求項４記載のエシェリヒア属細菌。
【請求項６】 微生物の親株及び既知の５'−ヌクレオチダーゼを欠失した誘導株を、第一のヌクレオシド−５'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地、及び第二のヌクレオシド−５'−リン酸エステルを唯一の炭素源とする最少培地で培養して、親株及び誘導株の遺伝子発現プロファイルを調べ、第一の５'−ヌクレオシド−５'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比と、第二の５'−ヌクレオシド−５'−リン酸エステルを炭素源とする培地で培養したときの前記遺伝子の誘導株における発現量と親株における発現量との比の積をとり、その値の大きい遺伝子を選択することを特徴とする、ヌクレオシド−５'−リン酸エステルの蓄積に影響する５'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項７】 前記第一及び第二のヌクレオシド−５'−リン酸エステルが、５'−イノシン酸及び５'−グアニル酸である請求項６記載の５'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
【請求項８】 前記の選択された遺伝子から、タンパク質のペリプラズムへの移行に必要なシグナル配列をコードし得る遺伝子をさらに選択することを特徴とする請求項６又は７に記載の５'−ヌクレオチダーゼ遺伝子の探索方法。
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|---|---|---|---|
| JP2001181573A JP4696404B2 (ja) | 2000-07-05 | 2001-06-15 | 発酵法によるヌクレオチドの製造法 |
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|---|---|---|---|
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|---|---|
| JP2002355087A JP2002355087A (ja) | 2002-12-10 |
| JP2002355087A5 true JP2002355087A5 (ja) | 2007-07-05 |
| JP4696404B2 JP4696404B2 (ja) | 2011-06-08 |
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Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP2001181573A Expired - Fee Related JP4696404B2 (ja) | 2000-07-05 | 2001-06-15 | 発酵法によるヌクレオチドの製造法 |
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| JP (1) | JP4696404B2 (ja) |
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2001
- 2001-06-15 JP JP2001181573A patent/JP4696404B2/ja not_active Expired - Fee Related
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