JP2002322067A - フロリジン−リッチなフェノール性画分および化粧剤、食餌療法剤またはニュートラシューティカル剤としてのその使用 - Google Patents
フロリジン−リッチなフェノール性画分および化粧剤、食餌療法剤またはニュートラシューティカル剤としてのその使用Info
- Publication number
- JP2002322067A JP2002322067A JP2002084030A JP2002084030A JP2002322067A JP 2002322067 A JP2002322067 A JP 2002322067A JP 2002084030 A JP2002084030 A JP 2002084030A JP 2002084030 A JP2002084030 A JP 2002084030A JP 2002322067 A JP2002322067 A JP 2002322067A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fraction
- weight
- phlorizin
- fraction according
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
- C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
- C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/52—Stabilizers
- A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Birds (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 化粧剤、食餌療法剤またはニュートラシュー
ティカル剤として使用し得る、バラ科植物から得られる
果物からのジヒドロカルコン（フロリジンおよびフロレ
チン）に富むフェノール画分およびこの画分を得る方法
を開発すること。 【解決手段】 総ポリフェノールに対して少なくとも１
０重量％のフロリジンを含む少なくとも２０％のポリフ
ェノールを含むことによって特徴付けられるバラ科の果
実から得た画分、ならびに、粉砕したリンゴで出発し、
１またはそれを超える固／液抽出を行い、ついでその固
形エクストラクトを乾燥させ、その後、さらに有機溶媒
での抽出を行ってポリフェノール性画分を得る該画分を
調製する方法。
ティカル剤として使用し得る、バラ科植物から得られる
果物からのジヒドロカルコン（フロリジンおよびフロレ
チン）に富むフェノール画分およびこの画分を得る方法
を開発すること。 【解決手段】 総ポリフェノールに対して少なくとも１
０重量％のフロリジンを含む少なくとも２０％のポリフ
ェノールを含むことによって特徴付けられるバラ科の果
実から得た画分、ならびに、粉砕したリンゴで出発し、
１またはそれを超える固／液抽出を行い、ついでその固
形エクストラクトを乾燥させ、その後、さらに有機溶媒
での抽出を行ってポリフェノール性画分を得る該画分を
調製する方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、果物からのフェノ
ール画分およびこの画分を得る方法に関する。このエク
ストラクトは抗オキシダント化合物、フロリジンに富
み、化粧、食餌療法またはニュートラシューティカル調
製物として使用し得る。
ール画分およびこの画分を得る方法に関する。このエク
ストラクトは抗オキシダント化合物、フロリジンに富
み、化粧、食餌療法またはニュートラシューティカル調
製物として使用し得る。
【０００２】
【従来の技術】ポリフェノール性化合物は植物界に比較
的広範にかつ多量に存在することが知られている。特
に、バラ科（Rosacea）植物においては、リンゴのポリ
フェノールの分析により少なくとも３７のフェノール性
化合物が同定されており、そのうち最も豊富に存在する
ものはクロロゲン酸、プロシアニジンＢ１およびＢ２、
エピカテキン、フロレチン、フロリジンおよびｐ−クマ
ル酸である。これらの化合物の幾つかのものは、抗オキ
シダント、抗突然変異、抗アレルギー、抗癌および抗糖
尿病特性などのごとき生理学的特性を有する。
的広範にかつ多量に存在することが知られている。特
に、バラ科（Rosacea）植物においては、リンゴのポリ
フェノールの分析により少なくとも３７のフェノール性
化合物が同定されており、そのうち最も豊富に存在する
ものはクロロゲン酸、プロシアニジンＢ１およびＢ２、
エピカテキン、フロレチン、フロリジンおよびｐ−クマ
ル酸である。これらの化合物の幾つかのものは、抗オキ
シダント、抗突然変異、抗アレルギー、抗癌および抗糖
尿病特性などのごとき生理学的特性を有する。
【０００３】多くの他のポリフェノール−リッチな製品
が市販されており、最も一般的なものは緑茶、ブドウ種
子およびマツ樹皮から抽出されるものである（米国特許
第４６９８３６０号、ＥＰ Ａ３４８７８１号、ＥＰ
Ａ２８３３４９号、ＦＲ Ａ１４２７１００号、ＦＲ
Ａ２０９２７４３号、ＦＲ Ａ２６４３０７３号および
ＦＲ Ａ２３７２８２３号）。特許ＥＰ Ａ０６５７１
６９号は、バラ科植物の未熟果実からのポリフェノール
画分の抽出をすでに開示している（３ないし１０ｇ計
量）。かく定義されるポリフェノール性画分は、多量の
ヒドロキシケイ皮酸族（クロロゲン酸、コーヒー酸、お
よびｐ−クマル酸）の誘導体およびフラボノール族（カ
テキン、エピカテキンおよびプロシアニジン）からの分
子の誘導体を含むことによって特徴付けられる。未熟果
実の果汁から得たエクストラクトの高速液体クロマトグ
ラフィーによる分析は、フロリジンは総フェノール性化
合物の７重量％未満を表し、９％未満のジヒドロカルコ
ン（フロリジンおよびフロレチン）を表すことを示して
いる。
が市販されており、最も一般的なものは緑茶、ブドウ種
子およびマツ樹皮から抽出されるものである（米国特許
第４６９８３６０号、ＥＰ Ａ３４８７８１号、ＥＰ
Ａ２８３３４９号、ＦＲ Ａ１４２７１００号、ＦＲ
Ａ２０９２７４３号、ＦＲ Ａ２６４３０７３号および
ＦＲ Ａ２３７２８２３号）。特許ＥＰ Ａ０６５７１
６９号は、バラ科植物の未熟果実からのポリフェノール
画分の抽出をすでに開示している（３ないし１０ｇ計
量）。かく定義されるポリフェノール性画分は、多量の
ヒドロキシケイ皮酸族（クロロゲン酸、コーヒー酸、お
よびｐ−クマル酸）の誘導体およびフラボノール族（カ
テキン、エピカテキンおよびプロシアニジン）からの分
子の誘導体を含むことによって特徴付けられる。未熟果
実の果汁から得たエクストラクトの高速液体クロマトグ
ラフィーによる分析は、フロリジンは総フェノール性化
合物の７重量％未満を表し、９％未満のジヒドロカルコ
ン（フロリジンおよびフロレチン）を表すことを示して
いる。
【０００４】フェノール性化合物の中では、フロレチン
およびそのグリコシル化誘導体、フロリジンがリンゴお
よびバラ科植物の他の果実の典型的なものである。特
に、フロリジンは種子中に多量に見出されるが、リンゴ
果汁および果皮中にも存在する。フロリジンは抗オキシ
ダント活性を有し、エストロゲンに類似する心血管保護
を許容する。さらに、フロリジンはチロシナーゼを含む
酵素のカスケードを活性化することによってメラニン形
成に作用することができ、したがって、紫外線に対する
高い保護を許容する。フロリジンは、グルコース、ガラ
クトースなどのごとき代謝物のナトリウム依存性血液輸
送を競合的に阻害することによって、抗糖尿病作用も有
する。フロリジンは、プロテインキナーゼＣの活性をブ
ロックすることによって腫瘍細胞の増殖を阻害すること
にも関与する。
およびそのグリコシル化誘導体、フロリジンがリンゴお
よびバラ科植物の他の果実の典型的なものである。特
に、フロリジンは種子中に多量に見出されるが、リンゴ
果汁および果皮中にも存在する。フロリジンは抗オキシ
ダント活性を有し、エストロゲンに類似する心血管保護
を許容する。さらに、フロリジンはチロシナーゼを含む
酵素のカスケードを活性化することによってメラニン形
成に作用することができ、したがって、紫外線に対する
高い保護を許容する。フロリジンは、グルコース、ガラ
クトースなどのごとき代謝物のナトリウム依存性血液輸
送を競合的に阻害することによって、抗糖尿病作用も有
する。フロリジンは、プロテインキナーゼＣの活性をブ
ロックすることによって腫瘍細胞の増殖を阻害すること
にも関与する。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、リンゴ
（ホモジネートまたは果汁）中には、他のポリフェノー
ルに対してジヒドロカルコン（フロレチンおよびフロリ
ジン）は少量しか存在しない。クロロゲン酸およびプロ
シアニジンは、ジュース用リンゴであるか生食用リンゴ
であるかにかかわらず、リンゴ中の主要ポリフェノール
であり、フロリジンおよびフロレチンが成熟ジュース用
リンゴの総ポリフェノールの５重量％を超えて表される
ことはない（１５の異なる品種の分析）（図１および
２）。
（ホモジネートまたは果汁）中には、他のポリフェノー
ルに対してジヒドロカルコン（フロレチンおよびフロリ
ジン）は少量しか存在しない。クロロゲン酸およびプロ
シアニジンは、ジュース用リンゴであるか生食用リンゴ
であるかにかかわらず、リンゴ中の主要ポリフェノール
であり、フロリジンおよびフロレチンが成熟ジュース用
リンゴの総ポリフェノールの５重量％を超えて表される
ことはない（１５の異なる品種の分析）（図１および
２）。
【０００６】公知のポリフェノール性エクストラクトに
おいては、種々の出発物質中に存在する比率と比較して
種々のフェノール性分子間の比率が保存されているが、
抽出の間に消失するかまたは分解するポリマー性プロシ
アニジンに関しては例外である。
おいては、種々の出発物質中に存在する比率と比較して
種々のフェノール性分子間の比率が保存されているが、
抽出の間に消失するかまたは分解するポリマー性プロシ
アニジンに関しては例外である。
【０００７】したがって、ヒドロキシケイ皮酸（コーヒ
ー酸、クロロゲン酸およびクマル酸）およびフラボノー
ル（カテキン、エピカテキンおよびプロシアニジン）に
は富むが、ジヒドロカルコン（フロリジンおよびフロレ
チン）に乏しいポリフェノール性エクストラクトが慣用
的に得られている（図３を参照されたい）。
ー酸、クロロゲン酸およびクマル酸）およびフラボノー
ル（カテキン、エピカテキンおよびプロシアニジン）に
は富むが、ジヒドロカルコン（フロリジンおよびフロレ
チン）に乏しいポリフェノール性エクストラクトが慣用
的に得られている（図３を参照されたい）。
【０００８】
【表１】
【０００９】ε＝定量不可能な量 ＊＝３回収集した１５品種のジュース用リンゴおよび３
品種の生食用リンゴに対する測定から収集した値
品種の生食用リンゴに対する測定から収集した値
【００１０】Karadeniz F & Ekski A. Phenolic compo
unds in apple juice from differentvarieties. Repo
rt-Scientific Technical Com. Int. Fed. Fruit Juice
Producers, (1996), 24, pp. 265-275. Sanoner P., Guyot S., Marnet N. and Drilleau J. F.
Polyphenolic profiles of French cider apples var
ieties. In "Polyphenols, wines and health",synposi
um, Bordeaux (14-16 April, 1999). Sasoner P., Guyot S., Marnet N. Molle D. and Drill
eau J. F. Polyphenolprofiles of French cider appl
es varieties. J. Agric. Food Chem. (1999),47, pp.
4847-4853.
unds in apple juice from differentvarieties. Repo
rt-Scientific Technical Com. Int. Fed. Fruit Juice
Producers, (1996), 24, pp. 265-275. Sanoner P., Guyot S., Marnet N. and Drilleau J. F.
Polyphenolic profiles of French cider apples var
ieties. In "Polyphenols, wines and health",synposi
um, Bordeaux (14-16 April, 1999). Sasoner P., Guyot S., Marnet N. Molle D. and Drill
eau J. F. Polyphenolprofiles of French cider appl
es varieties. J. Agric. Food Chem. (1999),47, pp.
4847-4853.
【００１１】リンゴには、たとえ存在するとしても非常
に少量のコーヒー酸しか天然に存在しない。おそらく、
実際は、コーヒー酸はクロロゲン酸の分解産物である
（Fiedler, 1954, Arzneimittel-Forsch, 4, 41）。
に少量のコーヒー酸しか天然に存在しない。おそらく、
実際は、コーヒー酸はクロロゲン酸の分解産物である
（Fiedler, 1954, Arzneimittel-Forsch, 4, 41）。
【００１２】
【課題を解決するための手段】本出願人は、本発明の主
題をなす新規なフェノール性画分を開発した。すなわ
ち、本発明は、その第１の態様として、総ポリフェノー
ルに対して少なくとも１０重量％のフロリジンを含む少
なくとも２０％のポリフェノールを含むことによって特
徴付けられるバラ科の果実から得た画分を提供する。ま
た、本発明は、その第２の態様として、総ポリフェノー
ルに対して１０ないし７０重量％のフロリジンを含むこ
とによって特徴付けられる第１の態様の画分を提供す
る。また、本発明は、その第３の態様として、クロロゲ
ン酸を含有することによって特徴付けられる第１または
第２の態様の画分を提供する。また、本発明は、その第
４の態様として、クロロゲン酸の重量に対するフロリジ
ンの重量比が１以上である第１ないし第３いずれか１の
態様の画分を提供する。また、本発明は、その第５の態
様として、エピカテキンを含有することによって特徴付
けられる第１ないし第４いずれか１の態様の画分を提供
する。また、本発明は、その第６の態様として、プロシ
アニジンＢ２を含有することによって特徴付けられる第
１ないし第５いずれか１の態様の画分を提供する。ま
た、本発明は、その第７の態様として、エピカテキンの
重量に対するフロリジンの重量比が９よりも大きいこと
を特徴とする第１ないし第６いずれか１の態様の画分を
提供する。また、本発明は、その第８の態様として、ク
エルシトシンを含有することによって特徴付けられる第
１ないし第７いずれか１の態様の画分を提供する。ま
た、本発明は、その第９の態様として、ｐ−クマル酸を
含有することによって特徴付けられる第１ないし８いず
れか１の態様の画分を提供する。また、本発明は、その
第１０の態様として、コーヒー酸の重量に対するフロリ
ジンの重量比が４よりも大きくなるような量のコーヒー
酸を含有することによって特徴付けられる第１ないし第
９いずれか１の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１１の態様として、コーヒー酸の重量比が総
ポリフェノールの１％未満を表すことによって特徴付け
られる第１０の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１２の態様として、フロレチンを含有するこ
とによって特徴付けられる第３ないし第１１いずれか１
の態様の画分を提供する。また、本発明は、その第１３
の態様として、ジヒドロカルコン（フロリジンおよびフ
ロレチン）がヒドロキシケイ皮酸（コーヒー酸、クロロ
ゲン酸およびｐ−クマル酸）に対して４０重量％よりも
大きい比率で存在することによって特徴付けられる第３
ないし第１１いずれか１の態様の画分を提供する。ま
た、本発明は、その第１４の態様として、少なくとも１
０％のフロリジン、クロロゲン酸、エピカテキン、プロ
シアニジンＢ２、クエルシトリン、ｐ−クマル酸および
コーヒー酸を含む少なくとも２０重量％の総ポリフェノ
ールを含有することによって特徴付けられる第１ないし
第１３いずれか１の態様の組成物を提供する。また、本
発明は、その第１５の態様として、５０重量％を超える
総ポリフェノールを含有することによって特徴付けられ
る第１ないし第１４いずれか１の態様の画分を提供す
る。また、本発明は、その第１６の態様として、粉末化
形態であることによって特徴付けられる第１ないし第１
５いずれか１の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１７の態様として、粉末１ｇ当りに少なくと
も１０％のフロリジンを含有することによって特徴付け
られる第１６の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１８の態様として、粉末１ｇ当りに１０ない
し７０％のフロリジンを含有することによって特徴付け
られる第１６の態様の画分。また、本発明は、その第１
９の態様として、粉砕したリンゴで出発し、１またはそ
れを超える固／液抽出を行い、ついでその固形エクスト
ラクトを乾燥させ、その後、さらに有機溶媒での抽出を
行ってポリフェノール性画分を得ることを特徴とする第
１ないし第１８いずれか１の態様の画分を調製する方法
を提供する。また、本発明は、その第２０の態様とし
て、粉砕したリンゴで出発し、１またはそれを超える固
／液抽出を行い、ついでその固形エクストラクトを酵素
的に液化して液体エクストラクトを得、ついでそれをク
ロマトグラフィーによって処理してポリフェノール画分
を得ることによって特徴付けられる第１ないし第１８い
ずれか１の態様の画分を調製する方法を提供する。ま
た、本発明は、その第２１の態様として、固形エクスト
ラクトに対してからろうを除去する（dewaxing）工程を
行うことによって特徴付けられる第１９または２０の態
様の画分を調製する方法を提供する。また、本発明は、
その第２２の態様として、最終乾燥を行うことによって
特徴付けられる第１９ないし２１いずれか１の態様の画
分を調製する方法を提供する。また、本発明は、その第
２３の態様として、成熟リンゴの抽出を行うことによっ
て特徴付けられる第１９ないし第２２いずれか１の態様
の画分を調製する方法を提供する。また、本発明は、そ
の第２４の態様として、マルス・シルベストリス・ミル
（Malus sylvestris Mill）リンゴの抽出を行うことに
よって特徴付けられる第１９ないし２３いずれか１の態
様の方法を提供する。また、本発明は、その第２５の態
様として、第１９ないし第２４いずれか１の態様の方法
によって得ることができることによって特徴付けられる
第１ないし第１８いずれか１の態様の画分を提供する。
また、本発明は、その第２６の態様として、第１ないし
第１８および第２５いずれか１の態様の組成物を含む食
餌療法またはニュートラシューティカル組成物を提供す
る。また、本発明は、その第２７の態様として、紫外線
に対する保護剤としての、第１ないし第１８および第２
５いずれか１の態様の画分の使用を提供する。また、本
発明は、その第２８の態様として、抗オキシダントとし
ての、第１ないし第１８および第２５いずれか１の態様
の画分の使用を提供する。さらに、本発明は、その第１
ないし第１８および第２５いずれか１の態様の画分を含
有することによって特徴付けられる化粧組成物を提供す
る。他の目的に関しては、下記の発明の詳細な説明およ
び実施例から明らかになるであろう。
題をなす新規なフェノール性画分を開発した。すなわ
ち、本発明は、その第１の態様として、総ポリフェノー
ルに対して少なくとも１０重量％のフロリジンを含む少
なくとも２０％のポリフェノールを含むことによって特
徴付けられるバラ科の果実から得た画分を提供する。ま
た、本発明は、その第２の態様として、総ポリフェノー
ルに対して１０ないし７０重量％のフロリジンを含むこ
とによって特徴付けられる第１の態様の画分を提供す
る。また、本発明は、その第３の態様として、クロロゲ
ン酸を含有することによって特徴付けられる第１または
第２の態様の画分を提供する。また、本発明は、その第
４の態様として、クロロゲン酸の重量に対するフロリジ
ンの重量比が１以上である第１ないし第３いずれか１の
態様の画分を提供する。また、本発明は、その第５の態
様として、エピカテキンを含有することによって特徴付
けられる第１ないし第４いずれか１の態様の画分を提供
する。また、本発明は、その第６の態様として、プロシ
アニジンＢ２を含有することによって特徴付けられる第
１ないし第５いずれか１の態様の画分を提供する。ま
た、本発明は、その第７の態様として、エピカテキンの
重量に対するフロリジンの重量比が９よりも大きいこと
を特徴とする第１ないし第６いずれか１の態様の画分を
提供する。また、本発明は、その第８の態様として、ク
エルシトシンを含有することによって特徴付けられる第
１ないし第７いずれか１の態様の画分を提供する。ま
た、本発明は、その第９の態様として、ｐ−クマル酸を
含有することによって特徴付けられる第１ないし８いず
れか１の態様の画分を提供する。また、本発明は、その
第１０の態様として、コーヒー酸の重量に対するフロリ
ジンの重量比が４よりも大きくなるような量のコーヒー
酸を含有することによって特徴付けられる第１ないし第
９いずれか１の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１１の態様として、コーヒー酸の重量比が総
ポリフェノールの１％未満を表すことによって特徴付け
られる第１０の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１２の態様として、フロレチンを含有するこ
とによって特徴付けられる第３ないし第１１いずれか１
の態様の画分を提供する。また、本発明は、その第１３
の態様として、ジヒドロカルコン（フロリジンおよびフ
ロレチン）がヒドロキシケイ皮酸（コーヒー酸、クロロ
ゲン酸およびｐ−クマル酸）に対して４０重量％よりも
大きい比率で存在することによって特徴付けられる第３
ないし第１１いずれか１の態様の画分を提供する。ま
た、本発明は、その第１４の態様として、少なくとも１
０％のフロリジン、クロロゲン酸、エピカテキン、プロ
シアニジンＢ２、クエルシトリン、ｐ−クマル酸および
コーヒー酸を含む少なくとも２０重量％の総ポリフェノ
ールを含有することによって特徴付けられる第１ないし
第１３いずれか１の態様の組成物を提供する。また、本
発明は、その第１５の態様として、５０重量％を超える
総ポリフェノールを含有することによって特徴付けられ
る第１ないし第１４いずれか１の態様の画分を提供す
る。また、本発明は、その第１６の態様として、粉末化
形態であることによって特徴付けられる第１ないし第１
５いずれか１の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１７の態様として、粉末１ｇ当りに少なくと
も１０％のフロリジンを含有することによって特徴付け
られる第１６の態様の画分を提供する。また、本発明
は、その第１８の態様として、粉末１ｇ当りに１０ない
し７０％のフロリジンを含有することによって特徴付け
られる第１６の態様の画分。また、本発明は、その第１
９の態様として、粉砕したリンゴで出発し、１またはそ
れを超える固／液抽出を行い、ついでその固形エクスト
ラクトを乾燥させ、その後、さらに有機溶媒での抽出を
行ってポリフェノール性画分を得ることを特徴とする第
１ないし第１８いずれか１の態様の画分を調製する方法
を提供する。また、本発明は、その第２０の態様とし
て、粉砕したリンゴで出発し、１またはそれを超える固
／液抽出を行い、ついでその固形エクストラクトを酵素
的に液化して液体エクストラクトを得、ついでそれをク
ロマトグラフィーによって処理してポリフェノール画分
を得ることによって特徴付けられる第１ないし第１８い
ずれか１の態様の画分を調製する方法を提供する。ま
た、本発明は、その第２１の態様として、固形エクスト
ラクトに対してからろうを除去する（dewaxing）工程を
行うことによって特徴付けられる第１９または２０の態
様の画分を調製する方法を提供する。また、本発明は、
その第２２の態様として、最終乾燥を行うことによって
特徴付けられる第１９ないし２１いずれか１の態様の画
分を調製する方法を提供する。また、本発明は、その第
２３の態様として、成熟リンゴの抽出を行うことによっ
て特徴付けられる第１９ないし第２２いずれか１の態様
の画分を調製する方法を提供する。また、本発明は、そ
の第２４の態様として、マルス・シルベストリス・ミル
（Malus sylvestris Mill）リンゴの抽出を行うことに
よって特徴付けられる第１９ないし２３いずれか１の態
様の方法を提供する。また、本発明は、その第２５の態
様として、第１９ないし第２４いずれか１の態様の方法
によって得ることができることによって特徴付けられる
第１ないし第１８いずれか１の態様の画分を提供する。
また、本発明は、その第２６の態様として、第１ないし
第１８および第２５いずれか１の態様の組成物を含む食
餌療法またはニュートラシューティカル組成物を提供す
る。また、本発明は、その第２７の態様として、紫外線
に対する保護剤としての、第１ないし第１８および第２
５いずれか１の態様の画分の使用を提供する。また、本
発明は、その第２８の態様として、抗オキシダントとし
ての、第１ないし第１８および第２５いずれか１の態様
の画分の使用を提供する。さらに、本発明は、その第１
ないし第１８および第２５いずれか１の態様の画分を含
有することによって特徴付けられる化粧組成物を提供す
る。他の目的に関しては、下記の発明の詳細な説明およ
び実施例から明らかになるであろう。
【００１３】
【発明の実施の形態】本発明によるポリフェノール性画
分は、少なくとも２０重量％、好ましくは５０重量％の
ポリフェノールを含み、そのうちの少なくとも１０重量
％、好ましくは１０〜７０重量％はフロリジンからな
る。このエクストラクトは、クロロゲン酸、エピカテキ
ン、プロシアニジンＢ２、クエルシトリン（quercitri
n）ｐ−クマル酸およびフロレチンをもその組成物中に
含み得る。特に好ましいこのポリフェノール性画分であ
る１の組成物は：重量％で −２０重量％、好ましくは５０重量％を超える総ポリフ
ェノール −フロリジンとして少なくとも３０重量％、好ましくは
３０〜４０重量％のポリフェノール −クロロゲン酸として１１重量％以下、好ましくは２〜
１１重量％のポリフェノール −エピカテキンとして４重量％以下のポリフェノール −プロシアニジンＢ２として２重量％以下のポリフェノ
ール クエルシトリンとして１.５重量％以下のポリフェノー
ル −ｐ−クマル酸として０.４重量％以下のポリフェノー
ル、および −コーヒー酸として０.２重量％未満のポリフェノール を含む。
分は、少なくとも２０重量％、好ましくは５０重量％の
ポリフェノールを含み、そのうちの少なくとも１０重量
％、好ましくは１０〜７０重量％はフロリジンからな
る。このエクストラクトは、クロロゲン酸、エピカテキ
ン、プロシアニジンＢ２、クエルシトリン（quercitri
n）ｐ−クマル酸およびフロレチンをもその組成物中に
含み得る。特に好ましいこのポリフェノール性画分であ
る１の組成物は：重量％で −２０重量％、好ましくは５０重量％を超える総ポリフ
ェノール −フロリジンとして少なくとも３０重量％、好ましくは
３０〜４０重量％のポリフェノール −クロロゲン酸として１１重量％以下、好ましくは２〜
１１重量％のポリフェノール −エピカテキンとして４重量％以下のポリフェノール −プロシアニジンＢ２として２重量％以下のポリフェノ
ール クエルシトリンとして１.５重量％以下のポリフェノー
ル −ｐ−クマル酸として０.４重量％以下のポリフェノー
ル、および −コーヒー酸として０.２重量％未満のポリフェノール を含む。
【００１４】本発明のもう１の主題は、コーヒー酸が、
存在するフロリジンの２０重量％未満の重量比率で存在
するものである。好ましくは、コーヒー酸はエクストラ
クト中の総ポリフェノールの１重量％未満を表す。フロ
リジンの比率はカテキンのものよりも重量で９倍大き
い。存在するフロリジンの量はクロロゲン酸のものと少
なくとも等しい重量である。
存在するフロリジンの２０重量％未満の重量比率で存在
するものである。好ましくは、コーヒー酸はエクストラ
クト中の総ポリフェノールの１重量％未満を表す。フロ
リジンの比率はカテキンのものよりも重量で９倍大き
い。存在するフロリジンの量はクロロゲン酸のものと少
なくとも等しい重量である。
【００１５】本発明のもう１の主題は、それがフロレチ
ンを含有することによって特徴付けられる。酸加水分解
を制御することにより、実質的に全てのフロリジンをよ
り水溶性が低いフロレチンに変換し得る。
ンを含有することによって特徴付けられる。酸加水分解
を制御することにより、実質的に全てのフロリジンをよ
り水溶性が低いフロレチンに変換し得る。
【００１６】もう１の主題は、ジヒドロカルコンがヒド
ロキシケイ皮酸に対して４０重量％以上の比率で存在す
ることによって特徴付けられる。成熟リンゴからジヒド
ロカルコン−リッチなポリフェノール性画分を選択的に
抽出する抽出方法は、以下の工程を含むことによって特
徴付けられる： ・破砕したリンゴを、添加した水の存在または不存在下
で、１またはそれを超える固／液抽出に付す。 ・ついで、得られた湿固形エクストラクトを乾燥するか
または酵素的に液化して、液体エクストラクトを得る。 ・乾燥固形エクストラクトを、純粋または水との混合液
としての極性有機溶媒、好ましくはＣ１−Ｃ４脂肪族ア
ルコールを用いる１０分間ないし２時間にわたるさらな
る抽出に付して、有機エクストラクトを得る。 ・この有機エクストラクトを、好ましくは減圧下にて、
６０℃以下の温度にて蒸発乾固させる。 ・ついで、この残渣を水に採り、その後それを、数回、
好ましくは４回、水−非混和性溶媒、好ましくは酢酸エ
チル、酢酸メチルまたは酢酸プロピルを用いて奪う。 ・得られた有機溶液を一緒に混合し、６０℃未満、好ま
しくは５０℃未満の温度にて蒸発乾固させて本発明の主
題であるポリフェノール性画分を得る。 ・もう１の経路を介して、湿潤固形エクストラクトを酵
素混合物の存在下、３０ないし５０℃、好ましくは４０
ないし４５℃の温度にて１ないし４時間、水と混合して
液体エクストラクトを得る。 ・この液体抽出物を遠心または濾過、ついで限外濾過に
よって清澄化する。 ・そのエクストラクトを、スチレン−ジビニルベンゼン
型の吸着樹脂を充填したクロマトグラフィー・カラムに
負荷する。その樹脂を酸性化した水で洗浄して不純物お
よび残渣糖を除去する。ついで、ポリフェノールを、４
０ないし７０重量％、好ましくは５０ないし６０重量％
のエタノールを含有するアルコール水溶液で溶出する。
メタノールおよびブタノールのごとき他のＣ１−Ｃ４脂
肪族アルコールも用い得る。 ・必要なら、当該方法の間にからろうを除去する工程を
導入する。 ・抽出によって得た生成物を最後に水に採り、ついで好
ましくは噴霧乾燥または凍結乾燥によって乾燥させて、
少なくとも２０重量％のポリフェノール、好ましくは５
０重量％を超えるポリフェノールを含有するベージュ色
の粉末を得る。このポリフェノールの１０重量％、好ま
しくはポリフェノールの１０ないし７０％はジヒドロカ
ルコン、好ましくはフロリジンである。
ロキシケイ皮酸に対して４０重量％以上の比率で存在す
ることによって特徴付けられる。成熟リンゴからジヒド
ロカルコン−リッチなポリフェノール性画分を選択的に
抽出する抽出方法は、以下の工程を含むことによって特
徴付けられる： ・破砕したリンゴを、添加した水の存在または不存在下
で、１またはそれを超える固／液抽出に付す。 ・ついで、得られた湿固形エクストラクトを乾燥するか
または酵素的に液化して、液体エクストラクトを得る。 ・乾燥固形エクストラクトを、純粋または水との混合液
としての極性有機溶媒、好ましくはＣ１−Ｃ４脂肪族ア
ルコールを用いる１０分間ないし２時間にわたるさらな
る抽出に付して、有機エクストラクトを得る。 ・この有機エクストラクトを、好ましくは減圧下にて、
６０℃以下の温度にて蒸発乾固させる。 ・ついで、この残渣を水に採り、その後それを、数回、
好ましくは４回、水−非混和性溶媒、好ましくは酢酸エ
チル、酢酸メチルまたは酢酸プロピルを用いて奪う。 ・得られた有機溶液を一緒に混合し、６０℃未満、好ま
しくは５０℃未満の温度にて蒸発乾固させて本発明の主
題であるポリフェノール性画分を得る。 ・もう１の経路を介して、湿潤固形エクストラクトを酵
素混合物の存在下、３０ないし５０℃、好ましくは４０
ないし４５℃の温度にて１ないし４時間、水と混合して
液体エクストラクトを得る。 ・この液体抽出物を遠心または濾過、ついで限外濾過に
よって清澄化する。 ・そのエクストラクトを、スチレン−ジビニルベンゼン
型の吸着樹脂を充填したクロマトグラフィー・カラムに
負荷する。その樹脂を酸性化した水で洗浄して不純物お
よび残渣糖を除去する。ついで、ポリフェノールを、４
０ないし７０重量％、好ましくは５０ないし６０重量％
のエタノールを含有するアルコール水溶液で溶出する。
メタノールおよびブタノールのごとき他のＣ１−Ｃ４脂
肪族アルコールも用い得る。 ・必要なら、当該方法の間にからろうを除去する工程を
導入する。 ・抽出によって得た生成物を最後に水に採り、ついで好
ましくは噴霧乾燥または凍結乾燥によって乾燥させて、
少なくとも２０重量％のポリフェノール、好ましくは５
０重量％を超えるポリフェノールを含有するベージュ色
の粉末を得る。このポリフェノールの１０重量％、好ま
しくはポリフェノールの１０ないし７０％はジヒドロカ
ルコン、好ましくはフロリジンである。
【００１７】画分は、上記の方法によって、好ましくは
バラ科植物の成熟リンゴ、詳細にはマルス・シルベスト
リス・ミル（Malus sylvestris Mill）から得る。前述
の特徴を有し、前記の方法に従って得た食用リンゴのこ
のエクストラクトは、食餌療法またはニュートラシュー
ティカル補助剤として使用し得る。本発明によるジヒド
ロキシカルコン−リッチなフェノール性画分は、紫外線
に対する保護用の剤としての特性を有する。本発明によ
るジヒドロカルコン−リッチなフェノール性画分は抗オ
キシダント特性を有する。本発明の主題は、とりわけ前
記のジヒドロキシカルコン−リッチなポリフェノール性
画分を含む化粧組成物でもある。本発明による組成物
は、摂食するかまたは皮膚に適用し得る。投与の様式に
従って、本発明による組成物は化粧品において通常用い
られるいずれの形態でも存在し得る。本発明による組成
物は、とりわけ、ゲルカプセル剤、ミルク、ローショ
ン、クリーム、ゲルまたは飲料の形態で存在し得る。
バラ科植物の成熟リンゴ、詳細にはマルス・シルベスト
リス・ミル（Malus sylvestris Mill）から得る。前述
の特徴を有し、前記の方法に従って得た食用リンゴのこ
のエクストラクトは、食餌療法またはニュートラシュー
ティカル補助剤として使用し得る。本発明によるジヒド
ロキシカルコン−リッチなフェノール性画分は、紫外線
に対する保護用の剤としての特性を有する。本発明によ
るジヒドロカルコン−リッチなフェノール性画分は抗オ
キシダント特性を有する。本発明の主題は、とりわけ前
記のジヒドロキシカルコン−リッチなポリフェノール性
画分を含む化粧組成物でもある。本発明による組成物
は、摂食するかまたは皮膚に適用し得る。投与の様式に
従って、本発明による組成物は化粧品において通常用い
られるいずれの形態でも存在し得る。本発明による組成
物は、とりわけ、ゲルカプセル剤、ミルク、ローショ
ン、クリーム、ゲルまたは飲料の形態で存在し得る。
【００１８】本発明のニュートラシューティカル、食餌
療法または化粧組成物は、それらが意図する適用に従っ
て慣用的に処方される。以下の実施例は本発明を説明す
るものであって、如何なる場合においてもそれを限定す
るものではない。
療法または化粧組成物は、それらが意図する適用に従っ
て慣用的に処方される。以下の実施例は本発明を説明す
るものであって、如何なる場合においてもそれを限定す
るものではない。
【００１９】
【実施例】実施例１：リンゴのポリフェノール性画分を
抽出するためのプロトコールＮｏ.１ 種マルス・シルベストリス・ミルのリンゴを以下の抽出
処理に付した；リンゴを粉砕し、そのホモジネートを約
２０重量％の水の存在下で攪拌する。 ・第２の工程からのいまだ湿潤形態である固形エクスト
ラクトを乾燥させ、ついで９０／１０の重量比率のメタ
ノール／水混合液中で２時間処理する。 ・その有機エクストラクトを減圧下、約５０℃の温度に
て蒸発乾固する。 ・その蒸発残渣を水に採り、ついで得られた水溶液を酢
酸エチル、水−非混和性溶媒で４回奪う。 ・得られた有機溶液を一緒に混合し、約４５℃の温度に
て蒸発させて乾燥エクストラクトを得る。 ・乾燥エクストラクトを最後に採集乾燥用の水に採り、
好ましくは噴霧乾燥または凍結乾燥によって微細なベー
ジュ色の部分水溶性の粉末を得る。
抽出するためのプロトコールＮｏ.１ 種マルス・シルベストリス・ミルのリンゴを以下の抽出
処理に付した；リンゴを粉砕し、そのホモジネートを約
２０重量％の水の存在下で攪拌する。 ・第２の工程からのいまだ湿潤形態である固形エクスト
ラクトを乾燥させ、ついで９０／１０の重量比率のメタ
ノール／水混合液中で２時間処理する。 ・その有機エクストラクトを減圧下、約５０℃の温度に
て蒸発乾固する。 ・その蒸発残渣を水に採り、ついで得られた水溶液を酢
酸エチル、水−非混和性溶媒で４回奪う。 ・得られた有機溶液を一緒に混合し、約４５℃の温度に
て蒸発させて乾燥エクストラクトを得る。 ・乾燥エクストラクトを最後に採集乾燥用の水に採り、
好ましくは噴霧乾燥または凍結乾燥によって微細なベー
ジュ色の部分水溶性の粉末を得る。
【００２０】その純粋標準に対する各分子の濃度の高速
液体クロマトグラフィーによって得たこのエクストラク
トのポリフェノール性組成は以下のとおりである（図
４）。かくして、各エクストラクトにおいて、以下の濃
度が測定された：
液体クロマトグラフィーによって得たこのエクストラク
トのポリフェノール性組成は以下のとおりである（図
４）。かくして、各エクストラクトにおいて、以下の濃
度が測定された：
【００２１】
【表２】
【００２２】この抽出方法によって得たフェノール性画
分は特にフロリジンに富むことが判明した。それは、ヒ
ドロキシ桂皮酸族の酸、より詳細にはクロロゲン酸に乏
しいという特徴を有する。それは、フラボノール族の酸
（カテキン、エピカテキン、プロシアニジンＢ１、Ｂ２
ほか）にも乏しく、それはリンゴについて記載したもの
とは全体的に異なる元のフェノール性プロフィールに通
じ、成熟リンゴを用いて標準的方法によって得たフェノ
ール性プロフィールとは全体的に異なる。
分は特にフロリジンに富むことが判明した。それは、ヒ
ドロキシ桂皮酸族の酸、より詳細にはクロロゲン酸に乏
しいという特徴を有する。それは、フラボノール族の酸
（カテキン、エピカテキン、プロシアニジンＢ１、Ｂ２
ほか）にも乏しく、それはリンゴについて記載したもの
とは全体的に異なる元のフェノール性プロフィールに通
じ、成熟リンゴを用いて標準的方法によって得たフェノ
ール性プロフィールとは全体的に異なる。
【００２３】得られた粉末は、標準としてクロロゲン酸
を用いて、フォリン−シオカルト比色定量分析法によっ
て、総ポリフェノールの５５重量％の力価を有する。こ
の方法は、フォリン−シオカルト試薬を用いる（リファ
レンス９００１、Merck）。簡単には、この試薬はリン
タングステン酸およびリンモリブデン酸の混合物よりな
り、これはフェノールの酸化の間にタングステンおよび
モリブデンの青色酸化物の混合物に還元される。発色は
存在するフェノール性化合物の含量に比例する。
を用いて、フォリン−シオカルト比色定量分析法によっ
て、総ポリフェノールの５５重量％の力価を有する。こ
の方法は、フォリン−シオカルト試薬を用いる（リファ
レンス９００１、Merck）。簡単には、この試薬はリン
タングステン酸およびリンモリブデン酸の混合物よりな
り、これはフェノールの酸化の間にタングステンおよび
モリブデンの青色酸化物の混合物に還元される。発色は
存在するフェノール性化合物の含量に比例する。
【００２４】クロマトグラフィー法および高速液体クロ
マトグラフィーによって得たプロフィールを統合する
と、値をフロリジン等価またはクロロゲン酸等価として
表すかに依存して、各々、総ポリフェノールの４９重量
％ないし６７重量％の力価を有する。
マトグラフィーによって得たプロフィールを統合する
と、値をフロリジン等価またはクロロゲン酸等価として
表すかに依存して、各々、総ポリフェノールの４９重量
％ないし６７重量％の力価を有する。
【００２５】実施例２：リンゴのポリフェノール性画分
を抽出するためのプロトコールＮｏ．２ 種マルス・シルベストリス・ミルのリンゴを以下の抽出
処理に付した： ・リンゴを破砕し、そのホモジネートを約２０％の水の
存在下で攪拌する。 ・そのホモジネートを一連の固／液抽出に付して、糖リ
ッチな液体画分を除去する。 ・その湿固形エクストラクトを、ペクチン溶解、ヘミセ
ルロース溶解およびセルロース溶解活性に富む酵素混合
物の存在下、約４５℃の温度にて約２時間、水と混合し
て液体エクストラクトを得る。 ・その液体エクストラクトを遠心または濾過、ついで限
外濾過によって清澄化する。 ・ついで、その清澄液体エクストラクトを、スチレン−
ジビニルベンゼン型の吸着樹脂を充填したクロマトグラ
フィーカラムに負荷する。 ・その樹脂を酸性化した水で洗浄して、不純物および残
渣糖を除去する。 ・ついで、６０重量％のエタノールを含有するアルコー
ル水溶液でポリフェノールを溶出する。 ・得られたポリフェノール性溶液を濃縮し、ついで噴霧
乾燥または凍結乾燥によって乾燥させて微細なベージュ
色粉末を得る。
を抽出するためのプロトコールＮｏ．２ 種マルス・シルベストリス・ミルのリンゴを以下の抽出
処理に付した： ・リンゴを破砕し、そのホモジネートを約２０％の水の
存在下で攪拌する。 ・そのホモジネートを一連の固／液抽出に付して、糖リ
ッチな液体画分を除去する。 ・その湿固形エクストラクトを、ペクチン溶解、ヘミセ
ルロース溶解およびセルロース溶解活性に富む酵素混合
物の存在下、約４５℃の温度にて約２時間、水と混合し
て液体エクストラクトを得る。 ・その液体エクストラクトを遠心または濾過、ついで限
外濾過によって清澄化する。 ・ついで、その清澄液体エクストラクトを、スチレン−
ジビニルベンゼン型の吸着樹脂を充填したクロマトグラ
フィーカラムに負荷する。 ・その樹脂を酸性化した水で洗浄して、不純物および残
渣糖を除去する。 ・ついで、６０重量％のエタノールを含有するアルコー
ル水溶液でポリフェノールを溶出する。 ・得られたポリフェノール性溶液を濃縮し、ついで噴霧
乾燥または凍結乾燥によって乾燥させて微細なベージュ
色粉末を得る。
【００２６】その純粋標準に対する各分子の濃度の高速
液体クロマトグラフィー測定によって得たこのエクスト
ラクトのポリフェノール組成は以下のとおりである（図
５）：
液体クロマトグラフィー測定によって得たこのエクスト
ラクトのポリフェノール組成は以下のとおりである（図
５）：
【００２７】
【表３】
【００２８】得られた粉末は、標準としてクロロゲン酸
を用いるフォリン−シオカルト比色定量分析法によっ
て、総ポリフェノールの５０重量％の力価を有する。こ
の抽出方法によって得たフェノール性画分は特にフロリ
ジンに富むことが判明した。実施例１のエクストラクト
と同様、この画分は、ヒドロキシ桂皮酸族の酸、より詳
細にはクロロゲン酸に乏しいという特徴を有する。それ
は、フラボノール（カテキン、エピカテキン、プロシア
ニジンＢ１、Ｂ２ほか）にも乏しい特徴も有し、それは
リンゴについて記載したものとは全体的に異なる元のフ
ェノール性プロフィールに通じ、成熟リンゴを用いて標
準的方法によって得たフェノール性プロフィールとは全
体的に異なる。
を用いるフォリン−シオカルト比色定量分析法によっ
て、総ポリフェノールの５０重量％の力価を有する。こ
の抽出方法によって得たフェノール性画分は特にフロリ
ジンに富むことが判明した。実施例１のエクストラクト
と同様、この画分は、ヒドロキシ桂皮酸族の酸、より詳
細にはクロロゲン酸に乏しいという特徴を有する。それ
は、フラボノール（カテキン、エピカテキン、プロシア
ニジンＢ１、Ｂ２ほか）にも乏しい特徴も有し、それは
リンゴについて記載したものとは全体的に異なる元のフ
ェノール性プロフィールに通じ、成熟リンゴを用いて標
準的方法によって得たフェノール性プロフィールとは全
体的に異なる。
【００２９】実施例１に対して、少量のコーヒー酸が存
在し、これは存在するフロリジンの量の４重量％のみを
表す。高速液体クロマトグラフィーによって得たプロフ
ィールを統合すると、値をフロリジン等価またはクロロ
ゲン酸等価として表すかに依存して、各々、総ポリフェ
ノールの２９重量％ないし４０重量％の力価を有する。
在し、これは存在するフロリジンの量の４重量％のみを
表す。高速液体クロマトグラフィーによって得たプロフ
ィールを統合すると、値をフロリジン等価またはクロロ
ゲン酸等価として表すかに依存して、各々、総ポリフェ
ノールの２９重量％ないし４０重量％の力価を有する。
【００３０】実施例３：リンゴのポリフェノール性画分
を抽出するためのプロトコールＮｏ．３ 本発明によるフロリジン−リッチなポリフェノール性エ
クストラクトは、最終乾燥工程の前に修飾し得る。この
方法は、鉱酸（約ｐＨ３まで希釈した）存在下のフロリ
ジン（フロレチン ２'−β−グルコシド）のフロレチ
ンへの制御された酸加水分解からなる。乾燥後に得られ
た粉末は、水溶性に乏しい（非常に低溶解性のフロレチ
ン）が、有利な抗オキシダント活性を有する。
を抽出するためのプロトコールＮｏ．３ 本発明によるフロリジン−リッチなポリフェノール性エ
クストラクトは、最終乾燥工程の前に修飾し得る。この
方法は、鉱酸（約ｐＨ３まで希釈した）存在下のフロリ
ジン（フロレチン ２'−β−グルコシド）のフロレチ
ンへの制御された酸加水分解からなる。乾燥後に得られ
た粉末は、水溶性に乏しい（非常に低溶解性のフロレチ
ン）が、有利な抗オキシダント活性を有する。
【００３１】実施例４：本発明によるフロリジン−リッ
チなポリフェノール画分の抗オキシダント（またはフリ
ーラジカル・スキャベンジング）活性 ポリフェノール性エクストラクトのフリーラジカル・ス
キャベンジング活性の測定は、わずかに修飾したBrand
−Williamsら（1995）およびLuおよびFoo（2000）によ
って記載されたＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピ
クリルヒドラジル）方法（Brand−Williams W., Cuveli
er, M. E. and Berset C.（1995）Use ofa free radica
l method to evaluate antioxidant activity. Lebensm
ittel-Wissenschaft und Technologie, 28, pp. 25-30.
Lu Y. and Foo L. Y.（2000）Antioxidant and radica
l scavenging activities of polyphenols from apple
pomace. Food Chemistry, 68, pp. 81-85.）。
チなポリフェノール画分の抗オキシダント（またはフリ
ーラジカル・スキャベンジング）活性 ポリフェノール性エクストラクトのフリーラジカル・ス
キャベンジング活性の測定は、わずかに修飾したBrand
−Williamsら（1995）およびLuおよびFoo（2000）によ
って記載されたＤＰＰＨ（１,１−ジフェニル−２−ピ
クリルヒドラジル）方法（Brand−Williams W., Cuveli
er, M. E. and Berset C.（1995）Use ofa free radica
l method to evaluate antioxidant activity. Lebensm
ittel-Wissenschaft und Technologie, 28, pp. 25-30.
Lu Y. and Foo L. Y.（2000）Antioxidant and radica
l scavenging activities of polyphenols from apple
pomace. Food Chemistry, 68, pp. 81-85.）。
【００３２】原理は、操作条件下で安定である発色ラジ
カルであって、標準化した条件下で、抗オキシダント・
エクストラクトの存在下のインキュベートの間にその濃
度が低下する、ＤＰＰＨ°の残存量を測定するものであ
る。詳細には、抗オキシダント活性を有するエクストラ
クトはＤＰＰＨ°ラジカルをＤＰＰＨ２に還元する。抗
酸化活性は、参考分子、トロロックス（水溶性ビタミン
Ｅアナログ）の活性に対して表す。
カルであって、標準化した条件下で、抗オキシダント・
エクストラクトの存在下のインキュベートの間にその濃
度が低下する、ＤＰＰＨ°の残存量を測定するものであ
る。詳細には、抗オキシダント活性を有するエクストラ
クトはＤＰＰＨ°ラジカルをＤＰＰＨ２に還元する。抗
酸化活性は、参考分子、トロロックス（水溶性ビタミン
Ｅアナログ）の活性に対して表す。
【００３３】６ｍｇのＤＰＰＨ°を７５体積％でメタノ
ール水溶液１００ｍｌに注意深く溶解する。平行して、
分析すべき試料の正確な量および１８ｍｇのトロロック
スを７５％のメタノール性溶液２５ｍｌに溶解する。２
ｍｌのＤＰＰＨ°溶液を測定すべき２５μｌの溶液と、
リークタイト・フラスコ中、３７±０.５℃の温度にて
６時間インキュベートする。溶液の発色強度の低下は、
ｔ＝０分、ｔ＝５分およびｔ＝６時間に、５１５ｎｍの
波長で測定する。活性は、６時間インキュベートした後
のナノモルのトロロックス等価／生成物ｋｇとして表
す。
ール水溶液１００ｍｌに注意深く溶解する。平行して、
分析すべき試料の正確な量および１８ｍｇのトロロック
スを７５％のメタノール性溶液２５ｍｌに溶解する。２
ｍｌのＤＰＰＨ°溶液を測定すべき２５μｌの溶液と、
リークタイト・フラスコ中、３７±０.５℃の温度にて
６時間インキュベートする。溶液の発色強度の低下は、
ｔ＝０分、ｔ＝５分およびｔ＝６時間に、５１５ｎｍの
波長で測定する。活性は、６時間インキュベートした後
のナノモルのトロロックス等価／生成物ｋｇとして表
す。
【００３４】ＤＰＰＨ法を用いて、以下のの生成物の抗
酸化活性を測定した： ・血漿 ・赤ワイン ・５％の総ポリフェノールを含有する濃縮赤ワインエク
ストラクト ・５５％の総ポリフェノールを含有する赤ワイン粉末 ・リンゴ果汁 ・４０％の総ポリフェノール（ＯＤ２８０ｎｍ）を含有
するニワトコの実エクストラクト ・３０％の総ポリフェノール（ＯＤ２８０ｎｍ）を含有
するブルーベリーのエクストラクト ・５０％の本発明の製法による総ポリフェノールを含有
するフロリジン−リッチなポリフェノール性エクストラ
クト ・９０％の本発明の製法による総ポリフェノールを含有
するフロリジン−リッチなポリフェノール性エクストラ
クト ・９０％の本発明の製法による総ポリフェノールを含有
するフロレチン−リッチなポリフェノール性エクストラ
クト
酸化活性を測定した： ・血漿 ・赤ワイン ・５％の総ポリフェノールを含有する濃縮赤ワインエク
ストラクト ・５５％の総ポリフェノールを含有する赤ワイン粉末 ・リンゴ果汁 ・４０％の総ポリフェノール（ＯＤ２８０ｎｍ）を含有
するニワトコの実エクストラクト ・３０％の総ポリフェノール（ＯＤ２８０ｎｍ）を含有
するブルーベリーのエクストラクト ・５０％の本発明の製法による総ポリフェノールを含有
するフロリジン−リッチなポリフェノール性エクストラ
クト ・９０％の本発明の製法による総ポリフェノールを含有
するフロリジン−リッチなポリフェノール性エクストラ
クト ・９０％の本発明の製法による総ポリフェノールを含有
するフロレチン−リッチなポリフェノール性エクストラ
クト
【００３５】
【表４】
【００３６】上記結果から、本発明の方法によりマルス
・シルベストリス・ミル・リンゴから抽出したフェノー
ル性エクストラクトは、参照として試験した、抗オキシ
ダント活性について知られている生成物のフリーラジカ
ル・スキャベンジングまたは抗オキシダント活性よりも
遥かに優れた活性を有する。
・シルベストリス・ミル・リンゴから抽出したフェノー
ル性エクストラクトは、参照として試験した、抗オキシ
ダント活性について知られている生成物のフリーラジカ
ル・スキャベンジングまたは抗オキシダント活性よりも
遥かに優れた活性を有する。
【００３７】実施例５：粉末化したポリフェノール性画
分のフリーラジカル−スキャベンジング作用 物質の遺伝毒性は、ゲノムＤＮＡまたはプラスミドＤＮ
Ａに損傷を作成するその能力として定義される。遺伝毒
性因子は、外因性のもの（紫外線、電離放射線、化学物
質ほか）または内因性のもの（細胞代謝によって生成さ
れるフリーラジカルほか）のものとし得る。
分のフリーラジカル−スキャベンジング作用 物質の遺伝毒性は、ゲノムＤＮＡまたはプラスミドＤＮ
Ａに損傷を作成するその能力として定義される。遺伝毒
性因子は、外因性のもの（紫外線、電離放射線、化学物
質ほか）または内因性のもの（細胞代謝によって生成さ
れるフリーラジカルほか）のものとし得る。
【００３８】本発明の方法により得たフロリジン−リッ
チなポリフェノール性画分のフリーラジカル−スキャベ
ンジング作用は、“３Ｄ”試験（Damaged DNA Detectio
n, Analytical Biochemistry, (1995), pp.37-42）によ
ってイン・ビトロ（in vitro)で測定する。
チなポリフェノール性画分のフリーラジカル−スキャベ
ンジング作用は、“３Ｄ”試験（Damaged DNA Detectio
n, Analytical Biochemistry, (1995), pp.37-42）によ
ってイン・ビトロ（in vitro)で測定する。
【００３９】原理はＤＮＡ損傷の修復に基づく、損傷し
たＤＮＡをフリーＯＨ°ラジカルに関する試験分子の保
護的効力のマーカーとして用い：そのＤＮＡに認められ
る損傷の減少はフリーラジカルの捕捉と相関する。再生
工程の間に標識（ビオチン標識したヌクレオチド）をＤ
ＮＡに取込ませ、ついでこの取込み（修復した損傷の数
の定量的指標）を化学ルミネセンスによって明らかにす
る。
たＤＮＡをフリーＯＨ°ラジカルに関する試験分子の保
護的効力のマーカーとして用い：そのＤＮＡに認められ
る損傷の減少はフリーラジカルの捕捉と相関する。再生
工程の間に標識（ビオチン標識したヌクレオチド）をＤ
ＮＡに取込ませ、ついでこの取込み（修復した損傷の数
の定量的指標）を化学ルミネセンスによって明らかにす
る。
【００４０】プラスミドＤＮＡで行うこの試験により、
損傷−突然変異−癌化工程の初期段階で遺伝毒性因子を
検出することができる。したがって、抗オキシダントま
たはフリーラジカル−スキャベンジング特性を有する、
したがって反応性酸化種（ＲＯＳ）によって引き起こさ
れる酸化的損傷からヒト細胞を保護し得る、分子または
混合物を検出し得る。
損傷−突然変異−癌化工程の初期段階で遺伝毒性因子を
検出することができる。したがって、抗オキシダントま
たはフリーラジカル−スキャベンジング特性を有する、
したがって反応性酸化種（ＲＯＳ）によって引き起こさ
れる酸化的損傷からヒト細胞を保護し得る、分子または
混合物を検出し得る。
【００４１】プロトコールは以下のとおりである： −標的ＤＮＡを感作（sensitized）ウェルに吸着させ、
ついで試験すべきポリフェノール性エクストラクト（２
％のエタノール溶液またはＤＭＳＯに溶解）の存在下も
しくは不存在下で、またはカテキン（対照）の存在下で
遺伝毒性因子とインキュベートする。この試験において
は、過酸化水素の溶血性切断によって生成したＯＨ°ラ
ジカルをＤＮＡ損傷遺伝毒性因子として用いる。過酸化
水素をウェルに添加し、ついでそれをＵＶＢ光（７００
Ｊ／ｍ２）で照射する。さらに、紫外線Ｃ線で予め損傷
させたプラスミドＤＮＡからなるポジティブ修復対照を
加える。
ついで試験すべきポリフェノール性エクストラクト（２
％のエタノール溶液またはＤＭＳＯに溶解）の存在下も
しくは不存在下で、またはカテキン（対照）の存在下で
遺伝毒性因子とインキュベートする。この試験において
は、過酸化水素の溶血性切断によって生成したＯＨ°ラ
ジカルをＤＮＡ損傷遺伝毒性因子として用いる。過酸化
水素をウェルに添加し、ついでそれをＵＶＢ光（７００
Ｊ／ｍ２）で照射する。さらに、紫外線Ｃ線で予め損傷
させたプラスミドＤＮＡからなるポジティブ修復対照を
加える。
【００４２】−超純粋ついで超純粋中の２０％のジオキ
サン溶液で、３０℃にて５分間ゆっくりと攪拌しつつ洗
浄する工程により、修復シグナルを妨害し得るタンパク
質のごとき巨大分子の存在に起因する、試料および試験
の間の非特異的な相互作用を除去することができるよう
になる。
サン溶液で、３０℃にて５分間ゆっくりと攪拌しつつ洗
浄する工程により、修復シグナルを妨害し得るタンパク
質のごとき巨大分子の存在に起因する、試料および試験
の間の非特異的な相互作用を除去することができるよう
になる。
【００４３】−修復工程は、精製した細胞エクストラク
ト（種々のＤＮＡ損傷修復経路の活性酵素を含有する）
およびビオチン−結合修飾ヌクレオチド（ｄＵＴＰ）の
存在下で行う。損傷の修復には、損傷の切除のフェーズ
につづくＤＮＡフラグメントまたは切除した塩基の再合
成のフェーズが含まれる。したがって、修復合成工程の
間に、修飾ヌクレオチドがＤＮＡに取込まれる。 −ヌクレオチドによって運搬されるビオチンに結合する
ことによってヌクレオチドがＤＮＡに結合する部位を認
識する工程（アビジン分子はペルオキシダーゼ分子に結
合している）。
ト（種々のＤＮＡ損傷修復経路の活性酵素を含有する）
およびビオチン−結合修飾ヌクレオチド（ｄＵＴＰ）の
存在下で行う。損傷の修復には、損傷の切除のフェーズ
につづくＤＮＡフラグメントまたは切除した塩基の再合
成のフェーズが含まれる。したがって、修復合成工程の
間に、修飾ヌクレオチドがＤＮＡに取込まれる。 −ヌクレオチドによって運搬されるビオチンに結合する
ことによってヌクレオチドがＤＮＡに結合する部位を認
識する工程（アビジン分子はペルオキシダーゼ分子に結
合している）。
【００４４】−化学ルミネセンス・ペルオキシダーゼ基
質を添加することにより反応を明らかにする工程。ルミ
ノメーターで観察され、判読した光シグナルは、修復さ
れた損傷の量に比例する。用量効果は６キロベース当り
１ないし１５の損傷の限界で認められ、これは大部分の
損傷の場合である。
質を添加することにより反応を明らかにする工程。ルミ
ノメーターで観察され、判読した光シグナルは、修復さ
れた損傷の量に比例する。用量効果は６キロベース当り
１ないし１５の損傷の限界で認められ、これは大部分の
損傷の場合である。
【００４５】ＲＯＳの存在下で認められた保護のパーセ
ントは、ＯＨ°種による損傷作用の相対的低下として算
出する、すなわち： ＲＬＵオキシダント−ＲＬＵ（オキシダント＋試料）／
ＲＬＵオキシダント 式中、ＲＬＵ＝相対光単位（光の量の任意単位）
ントは、ＯＨ°種による損傷作用の相対的低下として算
出する、すなわち： ＲＬＵオキシダント−ＲＬＵ（オキシダント＋試料）／
ＲＬＵオキシダント 式中、ＲＬＵ＝相対光単位（光の量の任意単位）
【００４６】保護の比パーセントは、ＵＶＣで予め損傷
した試料に対して測定した非特異的阻害のパーセントに
よって補正する。それは、添加したエクストラクトのみ
に起因するフリーラジカル−スキャベンジング活性の指
標である。ＩＣ５０は、遺伝毒性因子ＯＨ°に対する５
０％の保護活性を与える試験生成物のｍｇ／ｍｌでの濃
度である。値が低ければ低いほど、試験生成物の抗オキ
シダント活性はより大きい。
した試料に対して測定した非特異的阻害のパーセントに
よって補正する。それは、添加したエクストラクトのみ
に起因するフリーラジカル−スキャベンジング活性の指
標である。ＩＣ５０は、遺伝毒性因子ＯＨ°に対する５
０％の保護活性を与える試験生成物のｍｇ／ｍｌでの濃
度である。値が低ければ低いほど、試験生成物の抗オキ
シダント活性はより大きい。
【００４７】
【表５】
【００４８】３の試料がＯＨ°ラジカルによるＤＮＡに
対する損傷の形成に関して保護効果を有する。したがっ
て、それらは、エピカテキンのフリーラジカル−スキャ
ベンジング活性よりも高く、かつカテキンのものよりも
遥かに高い、優れたフリーラジカル−スキャベンジング
活性を有し、２の参照分子はそれ自体、それらの良好な
フリーラジカル−スキャベンジング能が認識された。用
量−応答効果は目視可能である。
対する損傷の形成に関して保護効果を有する。したがっ
て、それらは、エピカテキンのフリーラジカル−スキャ
ベンジング活性よりも高く、かつカテキンのものよりも
遥かに高い、優れたフリーラジカル−スキャベンジング
活性を有し、２の参照分子はそれ自体、それらの良好な
フリーラジカル−スキャベンジング能が認識された。用
量−応答効果は目視可能である。
【００４９】５０％の保護効果を与える濃度は低く；同
レベルの保護に、カテキンのものよりも５倍低い５０％
のポリフェノールエクストラクトが必要であり、約５０
倍低い９０％のフロリジン−リッチなポリフェノールを
含有するエクストラクトが必要である。本発明に記載す
る低濃度のポリフェノール性エクストラクトで、フリー
ラジカルの損傷作用における顕著な低下を生じるのに十
分である。したがって、本発明によるポリフェノール画
分は、ＯＨ°ラジカルの遺伝毒性作用に対してＤＮＡを
イン・ビトロ（in vitro)で保護する強力なフリーラジ
カル−スキャベンジング因子である。
レベルの保護に、カテキンのものよりも５倍低い５０％
のポリフェノールエクストラクトが必要であり、約５０
倍低い９０％のフロリジン−リッチなポリフェノールを
含有するエクストラクトが必要である。本発明に記載す
る低濃度のポリフェノール性エクストラクトで、フリー
ラジカルの損傷作用における顕著な低下を生じるのに十
分である。したがって、本発明によるポリフェノール画
分は、ＯＨ°ラジカルの遺伝毒性作用に対してＤＮＡを
イン・ビトロ（in vitro)で保護する強力なフリーラジ
カル−スキャベンジング因子である。
【００５０】実施例６：粉末ポリフェノール性画分の抗
オキシダント作用 本発明の方法により得たフロリジン−リッチなポリフェ
ノール性画分の抗オキシダント作用は、先に記載した
“３Ｄ”試験原理に従ってプラスミドＤＮＡで測定す
る。方法は同一であり、唯一異なる点は、この試験にお
いてはＤＮＡを損傷する遺伝毒性因子がメチレンブルー
を照射することによって生成した一重項酸素 １Ｏ２であ
ることである。
オキシダント作用 本発明の方法により得たフロリジン−リッチなポリフェ
ノール性画分の抗オキシダント作用は、先に記載した
“３Ｄ”試験原理に従ってプラスミドＤＮＡで測定す
る。方法は同一であり、唯一異なる点は、この試験にお
いてはＤＮＡを損傷する遺伝毒性因子がメチレンブルー
を照射することによって生成した一重項酸素 １Ｏ２であ
ることである。
【００５１】原理はＤＮＡ損傷を修復することに基づ
き、損傷したＤＮＡを一重項酸素１Ｏ ２に関する種々の
分子の保護効力のマーカーとして用いる。したがって、
照射し、超純粋中で４ｎｇ／ｍｌまで希釈したメチレン
ブルーをウェルに導入し、ついでこれを白色光（２×７
５Ｗ）で２０分間照射する。用いた参照分子はシリマリ
ンまたはシリビニン（Sigma）であり、これは酸素に関
するその解毒活性についてよく知られているシリブム・
マリアナム（Silybum marianum）から抽出し精製した抗
肝細胞毒性フラボノ−リグナンの混合物である。結果は
以下のとおりである：
き、損傷したＤＮＡを一重項酸素１Ｏ ２に関する種々の
分子の保護効力のマーカーとして用いる。したがって、
照射し、超純粋中で４ｎｇ／ｍｌまで希釈したメチレン
ブルーをウェルに導入し、ついでこれを白色光（２×７
５Ｗ）で２０分間照射する。用いた参照分子はシリマリ
ンまたはシリビニン（Sigma）であり、これは酸素に関
するその解毒活性についてよく知られているシリブム・
マリアナム（Silybum marianum）から抽出し精製した抗
肝細胞毒性フラボノ−リグナンの混合物である。結果は
以下のとおりである：
【００５２】
【表６】
【００５３】本発明により得たエクストラクトは、リン
ゴ果汁濃縮物（それ自体で相当な活性を有する）よりも
約１００倍高い抗オキシダント活性を有する。その活性
は、本発明の方法による５０重量％の総ポリフェノール
を含有するフロリジン−リッチなフェノール性エクスト
ラクトに対するシリマリンの活性に匹敵し、本発明の方
法による９０重量％の総ポリフェノールを含有するフロ
リジン−リッチなフェノール性エクストラクトに対する
シリマリンの活性よりも１０倍高い。
ゴ果汁濃縮物（それ自体で相当な活性を有する）よりも
約１００倍高い抗オキシダント活性を有する。その活性
は、本発明の方法による５０重量％の総ポリフェノール
を含有するフロリジン−リッチなフェノール性エクスト
ラクトに対するシリマリンの活性に匹敵し、本発明の方
法による９０重量％の総ポリフェノールを含有するフロ
リジン−リッチなフェノール性エクストラクトに対する
シリマリンの活性よりも１０倍高い。
【００５４】したがって、本発明によるポリフェノール
性画分は、細胞代謝によって形成された反応性酸化種の
作用に付される身体を保護することに重要な役割を果た
す強力なフリーラジカル・スキャベンジャーである。
性画分は、細胞代謝によって形成された反応性酸化種の
作用に付される身体を保護することに重要な役割を果た
す強力なフリーラジカル・スキャベンジャーである。
【００５５】実施例８：粉末化ポリフェノール性画分の
光−遺伝保護作用 本発明によるフロリジン−リッチなポリフェノール性画
分の抗−紫外線保護役割は、先に記載したイン・ビトロ
（in vitro)“３Ｄ”試験の原理に従ってプラスミドＤ
ＮＡで測定する。
光−遺伝保護作用 本発明によるフロリジン−リッチなポリフェノール性画
分の抗−紫外線保護役割は、先に記載したイン・ビトロ
（in vitro)“３Ｄ”試験の原理に従ってプラスミドＤ
ＮＡで測定する。
【００５６】原理はＤＮＡが被った損傷の量を測定する
ことに基づき、損傷ＤＮＡを紫外線に対する試験分子の
保護効力のマーカーとして用いる。試験すべき潜在的に
光−保護性の生成物は純粋なエタノールまたは超純粋水
に希釈し、ついで紫外線−透過性のプレート上に沈澱さ
せる。ついで、このプレートを吸着したプラスミドＤＮ
Ａを含有するものに重ねる。そのアセンブリーを５０Ｋ
Ｊ／ｍ２の出力の紫外線Ｂ光で照射する。用いた参照生
成物は、紫外線に対するその保護作用が認められている
市販物、Roche社からのParsol MCXである。（紫外線の
不存在下の）修復シグナルの非特異的阻害はこの試験に
おいては可能でない。なぜなら、試験生成物は吸着した
ＤＮＡと常に直接接触していないからである。
ことに基づき、損傷ＤＮＡを紫外線に対する試験分子の
保護効力のマーカーとして用いる。試験すべき潜在的に
光−保護性の生成物は純粋なエタノールまたは超純粋水
に希釈し、ついで紫外線−透過性のプレート上に沈澱さ
せる。ついで、このプレートを吸着したプラスミドＤＮ
Ａを含有するものに重ねる。そのアセンブリーを５０Ｋ
Ｊ／ｍ２の出力の紫外線Ｂ光で照射する。用いた参照生
成物は、紫外線に対するその保護作用が認められている
市販物、Roche社からのParsol MCXである。（紫外線の
不存在下の）修復シグナルの非特異的阻害はこの試験に
おいては可能でない。なぜなら、試験生成物は吸着した
ＤＮＡと常に直接接触していないからである。
【００５７】ＩＣ５０とは、紫外線Ｂ光に対して５０％
保護活性を与える試験生成物のｍｇ／ｍｌの濃度であ
る。この値が低ければ低いほど、試験生成物の抗オキシ
ダント活性は高い。結果は以下のとおりである：
保護活性を与える試験生成物のｍｇ／ｍｌの濃度であ
る。この値が低ければ低いほど、試験生成物の抗オキシ
ダント活性は高い。結果は以下のとおりである：
【００５８】
【表７】
【００５９】Paesolよりも光保護は小さいが、それにも
かかわらず、ポリフェノール性エクストラクトは高い抗
−紫外線Ｂ活性を示す。したがって、本発明において記
載するポリフェノール性エクストラクトは紫外線Ｂ光に
関する相当な光−遺伝保護作用を有し、それは公知の工
業的濃縮リンゴ果汁の効果よりも３０ないし８０倍高い
と結論付け得る。
かかわらず、ポリフェノール性エクストラクトは高い抗
−紫外線Ｂ活性を示す。したがって、本発明において記
載するポリフェノール性エクストラクトは紫外線Ｂ光に
関する相当な光−遺伝保護作用を有し、それは公知の工
業的濃縮リンゴ果汁の効果よりも３０ないし８０倍高い
と結論付け得る。
【００６０】
【発明の効果】本発明によれば、抗オキシダント化合
物、フロリジンに富み、化粧、食餌療法またはニュート
ラシューティカル調製物として使用し得る、果物からの
フェノール画分およびこの画分を得る方法を提供するこ
とが可能となる。
物、フロリジンに富み、化粧、食餌療法またはニュート
ラシューティカル調製物として使用し得る、果物からの
フェノール画分およびこの画分を得る方法を提供するこ
とが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 図１は、ジュース用リンゴ試料の各種ポリフ
ェノール性画分のＨＰＬＣプロフィールを示す図であ
る。
ェノール性画分のＨＰＬＣプロフィールを示す図であ
る。
【図２】 図２は、生食用リンゴ試料の各種ポリフェノ
ール性画分のＨＰＬＣプロフィールを示す図である。
ール性画分のＨＰＬＣプロフィールを示す図である。
【図３】 図３は、従来のポリフェノール性エクストラ
クト試料の各種ポリフェノール性画分のＨＰＬＣプロフ
ィールを示す図である。
クト試料の各種ポリフェノール性画分のＨＰＬＣプロフ
ィールを示す図である。
【図４】 図４は、本発明の実施例１によるエクストラ
クト試料の各種ポリフェノール性画分のＨＰＬＣプロフ
ィールを示す図である。
クト試料の各種ポリフェノール性画分のＨＰＬＣプロフ
ィールを示す図である。
【図５】 図５は、本発明の実施例２によるエクストラ
クト試料の各種ポリフェノール性画分のＨＰＬＣプロフ
ィールを示す図である。
クト試料の各種ポリフェノール性画分のＨＰＬＣプロフ
ィールを示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 9/14 Ａ６１Ｋ 9/14 ４Ｃ２０６ 31/12 31/12 31/192 31/192 31/216 31/216 31/353 31/353 31/7048 31/7048 35/78 35/78 Ｈ Ｘ Ａ６１Ｐ 3/10 Ａ６１Ｐ 3/10 35/00 35/00 37/08 37/08 39/00 39/00 39/06 39/06 // Ａ２３Ｌ 1/30 Ａ２３Ｌ 1/30 Ｂ (72)発明者 クロード・イニサン フランス、エフ−35000レンヌ、リュ・ア ナトール・ル・ブラス61番 (72)発明者 クリスチャン・エステーヴ フランス、エフ−53230コッス・ル・ヴィ ヴィアン、リュ・デ・ププリエ８番 (72)発明者 フレデリック・ルジャール フランス、エフ−56610アラドン、スクワ ール・サント・アンヌ７番 Ｆターム(参考） 4B018 LE03 MD08 MD09 MD60 ME06 MF01 MF06 MF12 MF14 4C076 AA29 CC03 CC18 CC26 CC29 CC40 GG05 GG06 GG09 4C083 AA111 AA112 AC311 AC471 AC841 AD391 AD392 BB47 CC01 DD17 EE11 FF01 4C086 AA01 BA08 EA11 GA17 MA01 MA04 MA44 NA14 ZB13 ZB21 ZB26 ZC01 ZC35 4C088 AB51 AC04 BA08 BA14 BA22 BA32 CA11 CA14 NA14 ZB13 ZB21 ZB26 ZC01 ZC35 4C206 AA01 CB19 DA21 KA01 KA18 MA01 MA04 MA44 NA14 ZB13 ZB21 ZB26 ZC01 ZC35
Claims (29)
- 【請求項１】 総ポリフェノールに対して少なくとも１
０重量％のフロリジンを含む少なくとも２０重量％のポ
リフェノールを含むバラ科（Rosacea）植物の果実から
得た画分。 - 【請求項２】 総ポリフェノールに対して１０ないし７
０重量％のフロリジンを含む請求項１記載の画分。 - 【請求項３】 クロロゲン酸を含有する請求項１または
２記載の画分。 - 【請求項４】 クロロゲン酸の重量に対するフロリジン
の重量比が１以上である請求項１ないし３いずれか１項
記載の画分。 - 【請求項５】 エピカテキンを含有する請求項１ないし
４いずれか１項記載の画分。 - 【請求項６】 プロシアニジンＢ２を含有する請求項１
ないし５いずれか１項記載の画分。 - 【請求項７】 エピカテキンの重量に対するフロリジン
の重量比が９よりも大きい請求項１ないし６いずれか１
項記載の画分。 - 【請求項８】 クエルシトリン（quercitrin）を含有す
る請求項１ないし７いずれか１項記載の画分。 - 【請求項９】 ｐ−クマル酸を含有する請求項１ないし
８いずれか１項記載の画分。 - 【請求項１０】 コーヒー酸の重量に対するフロリジン
の重量比が４よりも大きくなるような量のコーヒー酸を
含有する請求項１ないし９いずれか１項記載の画分。 - 【請求項１１】 コーヒー酸の重量比率が総ポリフェノ
ールの１％未満である請求項１０記載の画分。 - 【請求項１２】 フロレチンを含有する請求項３ないし
１１いずれか１項記載の画分。 - 【請求項１３】 ジヒドロカルコン（フロリジンおよび
フロレチン）がヒドロキシケイ皮酸（コーヒー酸、クロ
ロゲン酸およびｐ−クマル酸）に対して４０重量％以上
の比率で存在する請求項３ないし１１いずれか１項記載
の画分。 - 【請求項１４】 少なくとも１０重量％のフロリジン、
クロロゲン酸、エピカテキン、プロシアニジンＢ２、ク
エルシトリン、ｐ−クマル酸およびコーヒー酸を含む少
なくとも２０重量％の総ポリフェノールを含有する請求
項１ないし１３いずれか１項記載の組成。 - 【請求項１５】 ５０重量％を超える総ポリフェノール
を含有する請求項１ないし１４いずれか１項記載の画
分。 - 【請求項１６】 粉末化形態である請求項１ないし１５
いずれか１項記載の画分。 - 【請求項１７】 粉末１ｇ当りに少なくとも１０％のフ
ロリジンを含有する請求項１６記載の画分。 - 【請求項１８】 粉末１ｇ当りに１０ないし７０％のフ
ロリジンを含有する請求項１６記載の画分。 - 【請求項１９】 粉砕したリンゴで出発し、１またはそ
れを超える固／液抽出を行い、ついでその固形エクスト
ラクトを乾燥させ、その後、さらに有機溶媒での抽出を
行ってポリフェノール性画分を得る請求項１ないし１８
いずれか１項記載の画分を調製する方法。 - 【請求項２０】 粉砕したリンゴで出発し、１またはそ
れを超える固／液抽出を行い、ついでその固形エクスト
ラクトを酵素的に液化して液体エクストラクトを得、つ
いでそれをクロマトグラフィーによって処理してポリフ
ェノール画分を得る請求項１ないし１８いずれか１項記
載の画分を調製する方法。 - 【請求項２１】 固形エクストラクトに対してからろう
を除去する（dewaxing）工程を行う請求項１９または２
０記載の方法。 - 【請求項２２】 最終乾燥を行う請求項１９ないし２１
いずれか１項記載の方法。 - 【請求項２３】 成熟リンゴの抽出を行う請求項１９な
いし２２いずれか１項記載の方法。 - 【請求項２４】 マルス・シルベストリス・ミル（Malu
s sylvestris Mill）リンゴの抽出を行う請求項１９な
いし２３いずれか１項記載の方法。 - 【請求項２５】 請求項１９ないし２４いずれか１項記
載の方法によって得ることができる請求項１ないし１８
いずれか１項記載の画分。 - 【請求項２６】 請求項１ないし１８および請求項２５
いずれか１項記載の組成を含む食餌療法またはニュート
ラシューティカル組成物。 - 【請求項２７】 紫外線に対する保護用剤としての、請
求項１ないし１８および２５いずれか１項記載の画分の
使用。 - 【請求項２８】 抗オキシダントとしての、請求項１な
いし１８および２５いずれか１項記載の画分の使用。 - 【請求項２９】 請求項１ないし１８および請求項２５
いずれか１項記載の画分を含有する化粧組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR0103968 | 2001-03-23 | ||
| FR0103968A FR2822466B1 (fr) | 2001-03-23 | 2001-03-23 | Fraction phenolique riche en phloridzine et son utilisation en tant qu'agent cosmetique, alimentaire ou nutraceutique |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002322067A true JP2002322067A (ja) | 2002-11-08 |
| JP2002322067A5 JP2002322067A5 (ja) | 2005-09-15 |
| JP5192110B2 JP5192110B2 (ja) | 2013-05-08 |
Family
ID=8861487
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2002084030A Expired - Fee Related JP5192110B2 (ja) | 2001-03-23 | 2002-03-25 | フロリジン−リッチなフェノール性画分および化粧剤、食餌療法剤またはニュートラシューティカル剤としてのその使用 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7041322B2 (ja) |
| EP (1) | EP1243586B1 (ja) |
| JP (1) | JP5192110B2 (ja) |
| AT (1) | ATE304538T1 (ja) |
| DE (1) | DE60206095T2 (ja) |
| DK (1) | DK1243586T3 (ja) |
| ES (1) | ES2247279T3 (ja) |
| FR (1) | FR2822466B1 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007099698A (ja) * | 2005-10-05 | 2007-04-19 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | 皮膚化粧料及び頭髪化粧料 |
| JP2007326799A (ja) * | 2006-06-07 | 2007-12-20 | Kao Corp | 活性酸素消去酵素発現促進剤 |
| JP2015505821A (ja) * | 2011-11-28 | 2015-02-26 | ネステク ソシエテ アノニム | ヒドロキシケイ皮酸のバイオアベイラビリティの増強 |
| JP2017515875A (ja) * | 2014-05-16 | 2017-06-15 | ビオアクティーヴェ フード ゲーエムベーハー | 高血糖障害の処置のための生物学的活性物質の組み合わせ |
| JP2018150276A (ja) * | 2017-03-13 | 2018-09-27 | アサヒグループホールディングス株式会社 | フロレチン配糖体類の精製方法 |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2836336B1 (fr) * | 2002-02-26 | 2004-08-27 | Diana Ingredients | Utilisation dans un traitement cosmetique d'une fraction phenolique riche en dihydrochalcones |
| US20040109905A1 (en) * | 2002-09-18 | 2004-06-10 | Debasis Bagchi | Method and composition of anthocyanin-rich berry extracts that prevents or inhibits angiogenesis and helicobacter pylori and acts as a powerful antioxidant that provides various health benefits |
| WO2004101770A1 (en) | 2003-03-13 | 2004-11-25 | Universite De Moncton (Bureau De Soutien A L'innovation) | Antioxidant producing bacterium and uses thereof |
| US9358262B2 (en) * | 2003-03-13 | 2016-06-07 | University Of Ottawa | Use of antioxidant-enriched fermented blueberry extracts in the treatment of diabetes |
| FR2862303B1 (fr) * | 2003-11-17 | 2006-01-06 | Agronomique Inst Nat Rech | Preparations colorantes hydrosolubles jaunes derivees des dihydrochalcones, leur procede des preparation, et leurs utilisations |
| EP1835884A2 (en) * | 2005-01-14 | 2007-09-26 | Lipo Chemicals Inc | Composition and method for treating hyperpigmented skin |
| US20060172012A1 (en) * | 2005-01-28 | 2006-08-03 | Finley John W | Anti-inflammatory supplement compositions and regimens to reduce cardiovascular disease risks |
| CN100463913C (zh) * | 2005-03-11 | 2009-02-25 | 天津市尖峰天然产物研究开发有限公司 | 从蔷薇科植物的皮根枝叶及榨汁废料中提取根皮苷的工艺 |
| WO2007150052A1 (en) * | 2006-06-23 | 2007-12-27 | Equine Research Associates, Ltd | Animal nutritional supplement and method |
| FR2906145B1 (fr) * | 2006-09-25 | 2008-12-12 | Cooperative Les Celliers Assoc | Procede d'extraction de phloridzine a partir de pepins de pomme |
| NZ564691A (en) * | 2007-12-21 | 2010-03-26 | Nz Inst Plant & Food Res Ltd | Glycosyltransferases, polynucleotides encoding these and methods of use |
| FR2928263B1 (fr) * | 2008-03-07 | 2010-06-18 | Oreal | Procede de traitement cosmetique a base de polyphenols de fruits ou de legumes |
| CA2668216A1 (en) * | 2008-06-03 | 2009-12-03 | Atlantic Bioventure Centre | Modular portable micro-factory system |
| EP2299852B1 (en) * | 2008-06-16 | 2015-08-05 | Eckes-Granini Group GmbH | Beverage composition |
| FR2935096B1 (fr) * | 2008-08-21 | 2010-12-10 | Cooperative Agricole D Elle Et Vire | Compositions riches en acide chlorogenique, leur procede d'obtention et leur utilisation |
| EP2370069B1 (en) * | 2008-11-26 | 2020-09-30 | Perio Sciences, LLC | Antioxidant compositions for soft oral tissue and methods of formulation and use thereof |
| BR112013019515B1 (pt) | 2011-01-31 | 2019-11-19 | Dsm Ip Assets Bv | processo para a preparação de um extrato enriquecido em dihidrochalconas |
| AU2012315782B2 (en) | 2011-09-30 | 2015-10-29 | Perio Sciences, Llc | Antioxidant compositions for treatment of inflammation or oxidative damage |
| KR101417310B1 (ko) | 2012-08-06 | 2014-07-08 | 제주대학교 산학협력단 | 아그배나무 가지 추출물, 분획물 또는 화합물을 포함하는 화장료 조성물 |
| US10616382B2 (en) * | 2016-09-02 | 2020-04-07 | Accedian Networks Inc. | Efficient capture and streaming of data packets |
| CN108634309B (zh) * | 2018-04-13 | 2021-10-08 | 陕西师范大学 | 野生水麻叶提取物及其新用途 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001348336A (ja) * | 2000-06-07 | 2001-12-18 | Fancl Corp | 紫外線障害抑制用組成物 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1427100A (fr) | 1964-12-14 | 1966-02-04 | Ile De Rech Pharma Et Therapeu | Procédé pour l'obtention d'hydroxyflavanne-3-4-diols |
| FR2092743A1 (en) | 1970-06-15 | 1972-01-28 | Aquitaine Invest Pharma | Complete extraction of total flavanol gomers from plats -peripheral - venous activity |
| GB1541469A (en) | 1976-12-01 | 1979-02-28 | Inverni Della Beffa Spa | Method of obtaining flavonolic oligomers |
| US5110801A (en) * | 1984-08-13 | 1992-05-05 | Leveen Harry H | Treatment of acne |
| US4698360B1 (en) | 1985-04-09 | 1997-11-04 | D Investigations Pharmacologiq | Plant extract with a proanthocyanidins content as therapeutic agent having radical scavenger effect and use thereof |
| FR2611140B1 (fr) | 1987-02-20 | 1991-02-22 | Lamaison Jean Louis | Procede d'obtention de principes tanniques d'origine vegetale, composition cosmetologique et composition pharmaceutique contenant le principe tannique purifie obtenu selon le procede |
| IT1219732B (it) | 1988-06-28 | 1990-05-24 | Tecnofarmaci Spa | Frazioni oligomeriche procianidoliche,loro procedimento di preparazione e composizioni farmaceutiche che le contengono |
| FR2643073B1 (fr) | 1989-02-15 | 1991-08-16 | Expansion Rech Phytochimie | Procede de preparation d'extraits polyphenoliques de type flavane-3-ol purifies et extraits obtenus |
| CA2128293C (en) * | 1993-12-06 | 2002-09-03 | Masayuki Tanabe | Fruit polyphenols and medicinal compositions containing them |
| DE4444238A1 (de) * | 1994-12-13 | 1996-06-20 | Beiersdorf Ag | Kosmetische oder dermatologische Wirkstoffkombinationen aus Zimtsäurederivaten und Flavonglycosiden |
| JPH09175982A (ja) * | 1995-12-28 | 1997-07-08 | Nikka Uisukii Kk | 化粧品 |
| WO2001015706A1 (en) * | 1999-08-27 | 2001-03-08 | Ehrenkranz Joel R L | Method of using dihydrochalcone derivatives to block glucose transfer |
| FR2799121B1 (fr) * | 1999-10-01 | 2004-02-13 | Fabre Pierre Dermo Cosmetique | Extraits de branches de pommiers utiles en dermocosmetologie et leur procede de preparation |
| US6509054B1 (en) * | 2000-05-05 | 2003-01-21 | American Fruits And Flavors | Food additives having enlarged concentration of phenolics extracted from fruits, and process of obtaining the same |
-
2001
- 2001-03-23 FR FR0103968A patent/FR2822466B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-03-19 DE DE60206095T patent/DE60206095T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-19 EP EP02290690A patent/EP1243586B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-19 ES ES02290690T patent/ES2247279T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-19 AT AT02290690T patent/ATE304538T1/de active
- 2002-03-19 DK DK02290690T patent/DK1243586T3/da active
- 2002-03-22 US US10/105,040 patent/US7041322B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-03-25 JP JP2002084030A patent/JP5192110B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-11-18 US US11/282,396 patent/US7427418B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001348336A (ja) * | 2000-06-07 | 2001-12-18 | Fancl Corp | 紫外線障害抑制用組成物 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007099698A (ja) * | 2005-10-05 | 2007-04-19 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | 皮膚化粧料及び頭髪化粧料 |
| JP2007326799A (ja) * | 2006-06-07 | 2007-12-20 | Kao Corp | 活性酸素消去酵素発現促進剤 |
| JP2015505821A (ja) * | 2011-11-28 | 2015-02-26 | ネステク ソシエテ アノニム | ヒドロキシケイ皮酸のバイオアベイラビリティの増強 |
| JP2017515875A (ja) * | 2014-05-16 | 2017-06-15 | ビオアクティーヴェ フード ゲーエムベーハー | 高血糖障害の処置のための生物学的活性物質の組み合わせ |
| JP2018150276A (ja) * | 2017-03-13 | 2018-09-27 | アサヒグループホールディングス株式会社 | フロレチン配糖体類の精製方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2822466A1 (fr) | 2002-09-27 |
| DE60206095D1 (de) | 2005-10-20 |
| EP1243586A1 (fr) | 2002-09-25 |
| ATE304538T1 (de) | 2005-09-15 |
| US7427418B2 (en) | 2008-09-23 |
| DK1243586T3 (da) | 2005-11-21 |
| DE60206095T2 (de) | 2006-06-29 |
| ES2247279T3 (es) | 2006-03-01 |
| FR2822466B1 (fr) | 2004-07-02 |
| US20030003120A1 (en) | 2003-01-02 |
| JP5192110B2 (ja) | 2013-05-08 |
| US7041322B2 (en) | 2006-05-09 |
| US20060073223A1 (en) | 2006-04-06 |
| EP1243586B1 (fr) | 2005-09-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5192110B2 (ja) | フロリジン−リッチなフェノール性画分および化粧剤、食餌療法剤またはニュートラシューティカル剤としてのその使用 | |
| Masci et al. | Evaluation of different extraction methods from pomegranate whole fruit or peels and the antioxidant and antiproliferative activity of the polyphenolic fraction | |
| Kroyer | Red clover extract as antioxidant active and functional food ingredient | |
| Chang et al. | The protective effect of Opuntia dillenii Haw fruit against low-density lipoprotein peroxidation and its active compounds | |
| Dai et al. | A comprehensive study of anthocyanin-containing extracts from selected blackberry cultivars: Extraction methods, stability, anticancer properties and mechanisms | |
| Li et al. | Comparative study of antioxidant activity of grape (Vitis vinifera) seed powder assessed by different methods | |
| EP0924986B1 (en) | Antioxidant derived from lentil and its preparation and uses | |
| Zhao et al. | Antioxidant properties of two gallotannins isolated from the leaves of Pistacia weinmannifolia | |
| ES2655562T3 (es) | Composiciones cosméticas que contienen fracciones de extractos de arándano rojo | |
| WO2006090935A1 (ja) | アセロラ果実由来ペクチンおよびその用途 | |
| Monforte et al. | Phytochemical composition and gastroprotective effect of Feijoa sellowiana Berg fruits from Sicily | |
| Kumar et al. | Antioxidant and free radical scavenging activities of edible weeds | |
| Kesraoui et al. | In vitro evaluation of antioxidant activities of free and bound phenolic compounds from Posidonia oceanica (l.) Delile leaves | |
| Jeong et al. | Antioxidant activities of aqueous extracts from three cultivars of guava leaf | |
| JP2001299305A (ja) | 活性酸素消去用組成物およびその製造法 | |
| Guo et al. | Antioxidant and antidiabetic activities of Ulmus davidiana extracts | |
| CA2298422A1 (en) | External agent for skin | |
| KR100604244B1 (ko) | 토마토추출물을 함유하는 화장료 조성물 | |
| KR101155512B1 (ko) | 곰피 유래 피부보호용 조성물 | |
| Majee et al. | Determination of Total Phenolic Content and Total Antioxidant Activity in Various Parts of Trapa bispinosa | |
| KR101315975B1 (ko) | 참다래 추출물을 함유한 각질제거 효과 조성물 | |
| Sim et al. | Antioxidant activity of ethanol extracts from the root and bark of Ulmus davidiana | |
| Stanković et al. | Skin protection against solar UV radiation by natural plant products: extracts from elder fruit (Sambucus nigra L.) | |
| JP2005336137A (ja) | 活性酸素消去剤の製造方法および用途 | |
| JP2000198726A (ja) | 過酸化脂質生成抑制剤及びこれを含有する組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050325 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050325 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20081125 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090224 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090227 |
|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20090310 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090325 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090310 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090406 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090424 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20090630 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091102 |
|
| A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20100120 |
|
| A912 | Re-examination (zenchi) completed and case transferred to appeal board |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A912 Effective date: 20100702 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20110927 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111101 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20111107 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111201 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20111207 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111228 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120110 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120528 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20121003 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20121009 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20121102 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20121107 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121130 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20130131 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5192110 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160208 Year of fee payment: 3 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |