JP2002275187A - ホスファチジルコリンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 簡易な操作で高純度のホスファチジルコリン
が高収率で得られる製造方法を提供する。 【解決手段】 グリセロホスホリルコリンと脂肪酸無水
物とを、溶媒中、塩基性触媒存在下に反応させて、ホス
ファチジルコリンを製造するにあたり、溶媒がハロゲン
系溶媒と非プロトン性極性溶媒からなる混合溶媒であ
り、その重量比が２／３〜１０／１であり、使用量がグ
リセロホスホリルコリンに対し５〜２０倍重量であるこ
とを特徴とするホスファチジルコリンの製造方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ホスファチジルコ
リンの製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ホスファチジルコリンは、生体膜の主要
構成成分として知られており、生体機能解析のモデル系
としての利用や、水中でのリポソームを形成する特徴を
利用したドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）キャリ
ヤー等への展開が図られるなど、化粧品、医薬、薬学、
生化学等の分野において注目されている物質である。特
にＤＤＳの分野においては、様々な化合物を結合させた
ホスファチジルコリン誘導体を利用して研究が盛んに行
われ、応用への期待が高まっている。しかしながら、ホ
スファチジルコリンとして天然より抽出・濃縮したもの
は純度が低く、またアシル基の種類が限られているた
め、材料として強度的にも機能的にも限界があった。よ
ってこれらの欠点を解消し、目的に応じた機能を持つホ
スファチジルコリンを得るため、様々な製造法が検討さ
れている。

【０００３】ホスファチジルコリンの合成法としては、 （１）グリセロホスホリルコリン（以下「ＧＰＣ」と略
す）・塩化カドミウム錯体を脂肪酸クロリドでアシル化
する方法（Ｃａｎ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏ
ｌ．３７，９５３（１９５９））。 （２）ＧＰＣをアシルイミダゾールでアシル化する方法
（Ｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓ．Ｌｉｐｉｄｓ ２８，１１１
（１９８１））。 （３）４−ジメチルアミノピリジン（以下「ＤＭＡＰ」
と略す）存在下、クロロホルムを溶媒として用い、ＧＰ
Ｃを脂肪酸無水物でアシル化する方法（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈ
ｅｍ．Ｓｏｃ．１０４，７９１（１９８２））。 （４）塩基性触媒存在下、担体に担持させたＧＰＣを脂
肪酸無水物、または脂肪酸ハロゲン化物でアシル化する
方法（特開昭６１−２０７３９６号公報）。 （５）Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド等の
縮合剤とＤＭＡＰ等のエステル化触媒を用い、ＧＰＣを
脂肪酸無水物でアシル化する方法（特開平１−６１４８
９号公報）。 （６）ＧＰＣを脂肪酸金属塩に担持させ、炭素原子上に
活性水素原子を有し、かつそれ自身アシル化されるおそ
れのない有機溶媒の中から少なくとも１種または２種か
ら選ばれる有機溶媒中、無触媒下に脂肪酸無水物とアシ
ル化する方法。（特開平２−７６８９０号公報） （７）ＧＰＣと脂肪酸無水物とを炭素数が１〜７個の低
級アルコールに溶解した後、低級アルコールを留去し、
次いで塩基性触媒を加えてアシル化する方法（特開平４
−９９７８４号公報）等が知られている。

【０００４】しかしながらこれらの製造方法には種々の
問題点がある。すなわち（１）の方法は、生体に有毒な
塩化カドミウムを使用しているためイオン交換クロマト
グラフィー等を用いても完全に除去することは困難であ
る。さらには作業環境的にも好ましくない。（２）の方
法は、脂肪酸をイミダゾール誘導体として活性化しアシ
ル化するものであるが、反応時間が長く、しかも収量が
低い。さらには反応熱の制御が困難なため、熱変成しや
すい不飽和脂肪酸残基を有するホスファチジルコリンの
製造には不適である。（３）の方法は、ＧＰＣを脂肪酸
無水物と反応させるものであるが、クロロホルム単一溶
媒でありまたＤＭＡＰの使用量がＧＰＣに対して３倍モ
ル量と過剰であるため、反応に長時間を要し、かつ収量
も低い。特に不飽和脂肪酸残基を有するホスファチジル
コリンの製造は収量が低い。（４）の方法は、ＧＰＣを
担体に担持させ、これを脂肪酸無水物と接触させてアシ
ル化させるものであるが、ＧＰＣを担体に担持させる操
作や反応後の担体の分離操作等に複雑な工程を要し、収
量も低い。（５）の方法は、粉末化したＧＰＣを脂肪酸
無水物に添加するか、もしくは脂肪酸無水物中でＧＰＣ
を微粉砕した後にアシル化するものであるが、飽和脂肪
酸残基以外の脂肪酸残基を有するホスファチジルコリン
の場合は、反応に長時間を要し、かつ収量も低い。
（６）の方法は、炭素原子上に活性水素原子を有し、か
つそれ自身アシル化されるおそれのない有機溶媒中に、
脂肪酸金属塩に担持させたＧＰＣと脂肪酸無水物と無触
媒下でアシル化するものであるが、ＧＰＣを脂肪酸金属
塩に担持させる工程（溶解、乾固）を要し、作業が煩雑
になる。また乾固しきれなかった残存メタノールが、脂
肪酸無水物と反応して収量の低下なども危惧される。さ
らには、担持とアシル化を含む脂肪酸の総使用量が多
く、経済的に不利である。（７）の方法は、ＧＰＣにア
シル基を導入するに際し、ＧＰＣとアシル基を導入する
原料とが混融しないことを解決するために、ＧＰＣを低
級アルコールに溶解し、低級アルコールを留去、減圧乾
燥したＧＰＣを脂肪酸無水物とアシル化するものである
が、ＧＰＣの低級アルコールへの溶解、低級アルコール
の留去、減圧乾燥など多大な工程を要し、生産効率が低
い。また完全に除去しきれなかった低級アルコールと脂
肪酸無水物とが反応した副生成物の混入により、精製の
困難性、また収量の低下なども危惧される。以上のよう
に、これらの方法には毒性、反応に長時間要する点、低
収量（収率）、工程数の増加による作業の煩雑性や生産
性効率の低下などの問題点があり、特に不飽和脂肪酸残
基を有するホスファチジルコリンを高収率で得ることは
困難であった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、簡易
な操作で高純度のホスファチジルコリンが高収率で得ら
れる製造方法を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、 （Ａ）式（１）で表されるＧＰＣと

【０００７】

【化４】

【０００８】式（２）で表される脂肪酸無水物とを

【０００９】

【化５】

【００１０】（式中、Ｒは炭素数７〜２１の直鎖状また
は分岐状の、飽和または不飽和炭化水素基を示す。） 溶媒中、塩基性触媒存在下に反応させて、式（３）で表
されるホスファチジルコリンを

【００１１】

【化６】

【００１２】（式中、Ｒは前記に同じ。） 製造するにあたり、溶媒がハロゲン系溶媒と非プロトン
性極性溶媒からなる混合溶媒であり、その重量比が２／
３〜１０／１であり、使用量が式（１）で表されるグリ
セロホスホリルコリンに対し５〜２０倍重量であること
を特徴とするホスファチジルコリンの製造方法。 （Ｂ）非プロトン性極性溶媒がアセトン、アセトニトリ
ル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ
−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）およびジメチルス
ルホキシド（ＤＭＳＯ）からなる群より選ばれる１種ま
たは２種以上である前記のホスファチジルコリンの製造
方法。 （Ｃ）塩基性触媒が４−ジメチルアミノピリジン、４−
ジメチルアミノ−２−メチルピリジン、４−ジエチルア
ミノピリジン、４−ピロリジノピリジンおよび４−ピロ
リジノ−２−メチルピリジンからなる群より選ばれる１
種または２種以上で、その使用量が式（１）で表される
グリセロホスホリルコリンに対し０．０５〜１倍モル量
である前記のホスファチジルコリンの製造方法。 （Ｄ）脂肪酸無水物が不飽和脂肪酸無水物である前記の
ホスファチジルコリンの製造方法である。

【００１３】

【発明の実施の形態】本発明に用いる、式（１）で表さ
れるＧＰＣは、例えば、卵黄レシチン、大豆レシチン等
の天然レシチンを常法に従って加水分解またはアルコリ
シスすることにより容易に得ることができる。式（２）
で表される脂肪酸無水物は、飽和脂肪酸無水物または不
飽和脂肪酸無水物であり、Ｒの炭素数は７〜２１であ
る。飽和脂肪酸無水物に対応する脂肪酸としては、例え
ば、オクタン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチ
ン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ベヘン酸等が挙げら
れ、不飽和脂肪酸無水物に対応する脂肪酸としては、例
えば、オレイン酸、エライジン酸、エルシン酸、リノー
ル酸、リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキ
サエン酸、アラキドン酸等が挙げられ、これらの中から
１種または２種以上を、あるいは、ヤシ油脂肪酸、牛脂
脂肪酸等の混合脂肪酸を用いてもよい。より好ましくは
不飽和脂肪酸無水物である。ここで用いる脂肪酸無水物
は、脂肪酸と脂肪酸塩化物とを縮合する方法、または脂
肪酸を脱水する方法などの常法に従って得ることができ
る。脂肪酸無水物の使用量は、ＧＰＣ１モルに対して、
２〜４倍モルの範囲が望ましい。２倍モルより少ない
と、リゾホスファチジルコリンや未反応のグリセロホス
ホリルコリンが残るため好ましくなく、また４倍モルよ
り多いと、脂肪酸無水物が未反応物として残るために精
製が困難になり好ましくない。

【００１４】本発明に用いる溶媒は、ハロゲン系溶媒と
非プロトン性極性溶媒からなる混合溶媒である。ハロゲ
ン系溶媒としては、例えば、クロロホルム、塩化メチレ
ン、塩化エチレン、１，２−ジクロロエタン、クロロベ
ンゼン等が挙げられる。より好ましくは、クロロホルム
が挙げられる。また非プロトン性極性溶媒としては、例
えば、アセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリ
ル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ
−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、ジメチルスルホ
キシド（ＤＭＳＯ）、１,３−ジメチル−２−イミダゾ
リジノン等が挙げられる。入手が容易で安価である点、
反応後の除去が容易である点から、アセトン、アセトニ
トリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）、ジメチル
スルホキシド（ＤＭＳＯ）が好ましく、より好ましく
は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
（ＤＭＦ）が挙げられる。またハロゲン系溶媒と非プロ
トン性極性溶媒との割合は重量比で２／３〜１０／１の
範囲が望ましい。ハロゲン系溶媒と非プロトン性極性溶
媒の重量比が２／３より小さいと脂肪酸無水物が溶解し
づらくなり、１０／１より大きいと反応改善の効果が少
ない。またこの混合溶媒の使用量は、ＧＰＣに対して、
５〜２０倍重量の使用である。５倍より小さいと脂肪酸
無水物が混合溶媒に溶解しづらくなり、２０倍より大き
いと反応速度が遅くなる。

【００１５】本発明に使用する塩基性触媒としては３級
アミン、もしくはピリジン誘導体が挙げられ、中でもピ
リジン誘導体が好ましい。ピリジン誘導体としては、例
えば、ピリジン、２，６−ルチジン、４−ジメチルアミ
ノピリジン、４−ジメチルアミノ−２−メチルピリジ
ン、４−ジエチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリ
ジン、４−ピロリジノ−２−メチルピリジン等が挙げら
れる。入手が容易である点から、４−ジメチルアミノピ
リジン、４−ジメチルアミノ−２−メチルピリジン、４
−ジエチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジン、
４−ピロリジノ−２−メチルピリジンが好ましく、より
好ましくは、４−ジメチルアミノピリジン、４−ジエチ
ルアミノピリジンが挙げられる。塩基性触媒の使用量
は、ＧＰＣに対して０．０５〜１倍モルの範囲が望まし
い。０．０５倍モルより少ないと反応速度が遅くなるた
め好ましくなく、１倍モルより多いと反応後の精製が困
難になるため好ましくない。反応温度は、用いる脂肪酸
無水物や溶媒により異なるが、通常は１０℃〜８０℃、
より好ましくは４０℃〜６０℃である。生成物の精製法
としては、抽出法、再沈殿法、晶析法、カラムクロマト
グラフィー等が挙げられる。

【００１６】また本発明において、反応はすべて乾燥し
た溶媒と塩基性触媒を用いることが好ましく、さらに不
活性ガス気流下で行うことが望ましい。また不活性ガス
は、例えば、窒素、アルゴン等が挙げられる。

【００１７】

【発明の効果】本発明により、これまで複雑な作業を伴
ってきたホスファチジルコリンの製造方法が、ハロゲン
系溶媒と非プロトン性極性溶媒を特定の比率で使用する
ことで、反応速度が顕著に速くなり、これにより反応時
間が短縮でき、飽和脂肪酸だけでなく不飽和脂肪酸を原
料としたホスファチジルコリンを高収率かつ高純度で得
ることができる。またＧＰＣなどの原料の誘導体化、前
処理等が不要であることから工程数が少なく、かつ触媒
の使用量も大幅に削減できる。

【００１８】

【実施例】次に実施例を挙げて本発明をさらに具体的に
説明する。表１の条件で各ホスファチジルコリンを製造
し評価を行った。脂肪酸無水物の合成、反応後のホスフ
ァチジルコリン含有率、および精製後のホスファチジル
コリンの純度の算出は、以下のように行った。 《脂肪酸無水物の合成》脂肪酸をクロロホルム中に１モ
ル濃度になるように溶解し、氷冷下でＮ，Ｎ’−ジシク
ロヘキシルカルボジイミドを０．７モル濃度になるよう
に加え、白色のＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルウレアが沈
殿してきたら、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルウレアをろ
過により除去、溶媒を減圧留去する方法により得た。 《反応後のホスファチジルコリン含有率》反応溶液の溶
媒を留去した後の残渣１００ｍｇをＴＬＣプレート（メ
ルク社製ＴＬＣ ｐｌａｔｅｓ ２０×２０ｃｍ Ｓｉ
ｌｉｃａ ｇｅｌ ６０）に添着し、クロロホルム／メ
タノール／水＝６５／２５／４（容量比）で展開した。
ホスファチジルコリンの層と他の層を別々にかき取り、
それぞれをクロロホルム／メタノール＝６５／３５（容
量比）１００ｍＬで抽出し、溶媒留去した後、残渣の重
量よりアシル化反応後のホスファチジルコリンの含有率
を求めた。 《精製後のホスファチジルコリンの純度》ＴＬＣプレー
ト（Ｍｅｒｃｋ社製ＴＬＣ ｐｌａｔｅｓ ２０×２０
ｃｍ Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０）に１００μｇ／μ
Ｌ（クロロホルム）の濃度に調整したホスファチジルコ
リンを１μＬ添着し、同プレート上に１００μｇ／μＬ
（クロロホルム）の濃度に調整した不純物（脂肪酸、モ
ノアシル化物等）を特定容量添着した。クロロホルム／
メタノール／水＝６５／２５／４（容量比）で展開さ
せ、リン酸・硫酸銅水溶液（リン酸８ｍＬ、硫酸銅（無
水）１０ｇを蒸留水で１００ｍＬとしたもの）を噴霧し
加熱して発色させた。試料と不純物に対応する化合物の
スポットを比較して純度を求めた。

【００１９】実施例１ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した２
００ｍＬの４つ口フラスコに、ＧＰＣ７．５ｇ（２９ｍ
ｍｏｌ）、ミリスチン酸無水物２７．９ｇ（６４ｍｍｏ
ｌ）、クロロホルム４５ｇおよびアセトン５５ｇを入れ
て仕込み、窒素気流下で５０℃に保った。そこへ４−ジ
メチルアミノピリジン２．１ｇ（１７ｍｍｏｌ，対ＧＰ
Ｃモル比０．５９）を入れてそのまま撹拌し、４時間反
応を行った。反応溶液をろ過し、溶媒を減圧留去後、残
渣１００ｍｇをとり、ＴＬＣで含有率を測定した結果、
反応後のジミリストイルホスファチジルコリンの含有率
は５０％であった。残渣をカラム精製（シリカゲル３０
０ｇ、クロロホルム／メタノール／水＝８０／２０／
４）し、ジミリストイルホスファチジルコリンの白色粉
末を１８．２ｇ得た（収率９２％）。この白色粉末をＴ
ＬＣで純度を測定した結果、ジミリストイルホスファチ
ジルコリンの純度は９９．４％であった。

【００２０】実施例２ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した２
００ｍＬの４つ口フラスコに、ＧＰＣ７．２ｇ（２８ｍ
ｍｏｌ）、パルミチン酸無水物３３．０ｇ（６７ｍｍｏ
ｌ）、クロロホルム７０ｇおよびアセトニトリル３０ｇ
を入れて仕込み、窒素気流下で５５℃に保った。そこへ
４−ジメチルアミノピリジン１．０ｇ（８．２ｍｍｏ
ｌ，対ＧＰＣモル比０．２９）を入れてそのまま撹拌
し、４時間反応を行った。反応溶液をろ過し、溶媒を減
圧留去後、残渣１００ｍｇをとり、ＴＬＣで含有率を測
定した結果、反応後のジパルミトイルホスファチジルコ
リンの含有率は４６％であった。残渣をカラム精製（シ
リカゲル３００ｇ、クロロホルム／メタノール／水＝８
０／２０／４）し、ジパルミトイルホスファチジルコリ
ンの白色粉末を１８．５ｇ得た（収率９１％）。この白
色粉末をＴＬＣで純度を測定した結果、ジパルミトイル
ホスファチジルコリンの純度は９９．６％であった。

【００２１】実施例３ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ１４ｇ（５４ｍｍｏ
ｌ）、オレイン酸無水物６７．９ｇ（１２４ｍｍｏ
ｌ）、クロロホルム１２０ｇおよびアセトニトリル１２
０ｇを入れて仕込み、窒素気流下で５０℃に保った。そ
こへ４−ジメチルアミノピリジン３．４ｇ（２８ｍｍｏ
ｌ，対ＧＰＣモル比０．５１）を入れてそのまま撹拌
し、５時間反応を行った。反応溶液をろ過し、溶媒を減
圧留去後、残渣１００ｍｇをとり、ＴＬＣで含有率を測
定した結果、反応後のジオレオイルホスファチジルコリ
ンの含有率は４９％であった。残渣をカラム精製（シリ
カゲル６００ｇ、クロロホルム／メタノール／水＝８０
／２０／４）し、ジオレオイルホスファチジルコリンの
白色粉末を４０．０ｇ得た（収率９３％）。この白色粉
末をＴＬＣで純度を測定した結果、ジオレオイルホスフ
ァチジルコリンの純度は９９．５％であった。

【００２２】実施例４ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ１４ｇ（５４ｍｍｏ
ｌ）、オレイン酸無水物６７．９ｇ（１２４ｍｍｏ
ｌ）、クロロホルム１９２ｇおよびＮ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）４８ｇを入れて仕込み、窒素気流
下で５０℃に保った。そこへ４−ジメチルアミノピリジ
ン３．０ｇ（２５ｍｍｏｌ，対ＧＰＣモル比０．４５）
を入れてそのまま撹拌し、６時間反応を行った。反応溶
液をろ過し、溶媒を減圧留去後、残渣１００ｍｇをと
り、ＴＬＣで含有率を測定した結果、反応後のジオレオ
イルホスファチジルコリンの含有率は４８％であった。
残渣をカラム精製（シリカゲル６００ｇ、クロロホルム
／メタノール／水＝８０／２０／４）し、ジオレオイル
ホスファチジルコリンの白色粉末を３９．６ｇ得た（収
率９２％）。この白色粉末をＴＬＣで純度を測定した結
果、ジオレオイルホスファチジルコリンの純度は９９．
４％であった。

【００２３】実施例５ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ７．２ｇ（２８ｍｍｏ
ｌ）、リノレン酸無水物３３ｇ（６１ｍｍｏｌ）、クロ
ロホルム６０ｇおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）６０ｇを入れて仕込み、窒素気流下で５０℃に保っ
た。そこへ４−ジメチルアミノピリジン２．１ｇ（１７
ｍｍｏｌ，対ＧＰＣモル比０．６１）を入れてそのまま
撹拌し、５時間反応を行った。反応溶液をろ過し、溶媒
を減圧留去後、残渣１００ｍｇをとり、ＴＬＣで含有率
を測定した結果、反応後のジリノレオイルホスファチジ
ルコリンの含有率は４８％であった。残渣をカラム精製
（シリカゲル３００ｇ、クロロホルム／メタノール／水
＝８０／２０／４）し、ジリノレオイルホスファチジル
コリンの白色粉末を１９．４ｇ得た（収率９０％）。こ
の白色粉末をＴＬＣで純度を測定した結果、ジリノレオ
イルホスファチジルコリンの純度は９９．２％であっ
た。

【００２４】比較例１ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ６．６ｇ（２６ｍｍｏ
ｌ）、パルミチン酸無水物２９．５ｇ（６０ｍｍｏｌ）
およびクロロホルム１２０ｇを入れて仕込み、窒素気流
下で５０℃に保った。そこへ４−ジメチルアミノピリジ
ン１．９ｇ（１６ｍｍｏｌ，対ＧＰＣモル比０．６１）
を入れてそのまま撹拌し、１７時間反応を行った。反応
溶液をろ過し、溶媒を減圧留去後、残渣１００ｍｇをと
り、ＴＬＣで含有率を測定した結果、反応後のジパルミ
トイルホスファチジルコリンの含有率は２４％であっ
た。残渣をカラム精製（シリカゲル３００ｇ、クロロホ
ルム／メタノール／水＝８０／２０／４）を行い、ジパ
ルミトイルホスファチジルコリンの白色粉末を８．４ｇ
得た（収率４５％）。この白色粉末をＴＬＣで純度を測
定した結果、ジパルミトイルホスファチジルコリンの純
度は９６．８％であった。

【００２５】比較例２ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ６．６ｇ（２６ｍｍｏ
ｌ）、パルミチン酸無水物２９．５ｇ（６０ｍｍｏｌ）
およびクロロホルム１２０ｇを入れて仕込み、窒素気流
下で５０℃に保った。そこへ４−ジメチルアミノピリジ
ン６．３ｇ（５２ｍｍｏｌ，対ＧＰＣモル比２．０）を
入れてそのまま撹拌し、１７時間反応を行った。反応溶
液をろ過し、溶媒を減圧留去後、残渣１００ｍｇをと
り、ＴＬＣで含有率を測定した結果、反応後のジパルミ
トイルホスファチジルコリンの含有率は２６％であっ
た。残渣をカラム精製（シリカゲル３００ｇ、クロロホ
ルム／メタノール／水＝８０／２０／４）を行い、ジパ
ルミトイルホスファチジルコリンの白色粉末を１０．５
ｇ得た（収率５６％）。この白色粉末をＴＬＣで純度を
測定した結果、ジパルミトイルホスファチジルコリンの
純度は９７．４％であった。

【００２６】比較例３ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ１４ｇ（５５ｍｍｏ
ｌ）、オレイン酸無水物６７．９ｇ（１２４ｍｍｏｌ）
およびクロロホルム２４０ｇを入れて仕込み、窒素気流
下で５０℃に保った。そこへ４−ジメチルアミノピリジ
ン３．４ｇ（２８ｍｍｏｌ，対ＧＰＣモル比０．５１）
を入れてそのまま撹拌し、２０時間反応を行った。反応
溶液をろ過し、溶媒を減圧留去後、残渣１００ｍｇをと
り、ＴＬＣで含有率を測定した結果、反応後のジオレイ
ルホスファチジルコリンの含有率は２０％であった。残
渣をカラム精製（シリカゲル６００ｇ、クロロホルム／
メタノール／水＝８０／２０／４）を行い、ジオレオイ
ルホスファチジルコリンの白色粉末を１３．８ｇ得た
（収率３２％）。この白色粉末をＴＬＣで純度を測定し
た結果、ジオレオイルホスファチジルコリンの純度は９
５．２％であった。

【００２７】比較例４ 撹拌装置、冷却管、温度計および窒素封入管を付した１
Ｌの４つ口フラスコに、ＧＰＣ１４ｇ（５５ｍｍｏ
ｌ）、オレイン酸無水物６７．９ｇ（１２４ｍｍｏ
ｌ）、クロロホルム７２ｇおよびアセトニトリル１６８
ｇを入れて仕込み、窒素気流下で５０℃に保った。そこ
へ４−ジメチルアミノピリジン３．４ｇ（２８ｍｍｏ
ｌ，対ＧＰＣモル比０．５１）を入れてそのまま撹拌
し、２０時間反応を行った。反応溶液をろ過し、溶媒を
減圧留去後、残渣１００ｍｇをとり、ＴＬＣで含有率を
測定した結果、反応後のジオレイルホスファチジルコリ
ンの含有率は１１％であった。残渣をカラム精製（シリ
カゲル６００ｇ、クロロホルム／メタノール／水＝８０
／２０／４）を行い、ジオレオイルホスファチジルコリ
ンの白色粉末を７．７ｇ得た（収率１８％）。この白色
粉末をＴＬＣで純度を測定した結果、ジオレオイルホス
ファチジルコリンの純度は９５．０％であった。

【００２８】

【表１】

【００２９】実施例１〜５ではいずれも４〜６時間の短
い反応時間で、高収率で高純度のホスファチジルコリン
が得られることがわかる。比較例１、３では溶媒として
ハロゲン系溶媒のみを使用したため、比較例２では溶媒
としてハロゲン系溶媒のみを使用し、さらにＧＰＣに対
する触媒使用量が多いため、また比較例４ではハロゲン
系溶媒と非プロトン性極性溶媒との重量比が小さいた
め、長時間反応させても収率、純度ともに実施例に比較
して低い。以上の結果から、本発明の製造方法によって
短時間で高純度なホスファチジルコリンを得ることが可
能であり、医薬物を含有する薬物運搬体などの医用材料
として安全に使用することができる。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式（１）で表されるグリセロホスホリルコ
   リンと 【化１】 式（２）で表される脂肪酸無水物とを 【化２】 （式中、Ｒは炭素数７〜２１の直鎖状または分岐状の、
   飽和または不飽和炭化水素基を示す。） 溶媒中、塩基性触媒存在下に反応させて、式（３）で表
   されるホスファチジルコリンを 【化３】 （式中、Ｒは前記に同じ） 製造するにあたり、溶媒がハロゲン系溶媒と非プロトン
   性極性溶媒からなる混合溶媒であり、その重量比が２／
   ３〜１０／１であり、使用量がグリセロホスホリルコリ
   ンに対し５〜２０倍重量であることを特徴とするホスフ
   ァチジルコリンの製造方法。
2. 【請求項２】非プロトン性極性溶媒がアセトン、アセト
   ニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジ
   メチルアセトアミドおよびジメチルスルホキシドからな
   る群より選ばれる１種または２種以上である請求項１に
   記載のホスファチジルコリンの製造方法。
3. 【請求項３】塩基性触媒が４−ジメチルアミノピリジ
   ン、４−ジメチルアミノ−２−メチルピリジン、４−ジ
   エチルアミノピリジン、４−ピロリジノピリジンおよび
   ４−ピロリジノ−２−メチルピリジンからなる群より選
   ばれる１種または２種以上で、その使用量がグリセロホ
   スホリルコリンに対し０．０５〜１倍モル量である請求
   項１または請求項２に記載のホスファチジルコリンの製
   造方法。
4. 【請求項４】脂肪酸無水物が不飽和脂肪酸無水物である
   請求項１、請求項２または請求項３に記載のホスファチ
   ジルコリンの製造方法。 【０００１】