JP2002262895A - 不飽和脂肪酸又はその誘導体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 ロドコッカス（Rhodococcus）属に属す
る不飽和脂肪酸生産菌を用い、濃度０．２５Ｍ以上でｐ
Ｈ７．２〜９のリン酸緩衝液又は濃度０．３Ｍ以上でｐ
Ｈ７．０〜９のリン酸緩衝液の存在下、脂肪酸又はその
誘導体を該菌体に作用させる不飽和脂肪酸又はその誘導
体の製造法、該不飽和脂肪酸生産菌。 【効果】 不飽和脂肪酸又はその誘導体を微生物菌体外
に極めて効率よく且つ高純度で製造することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、微生物を用いる不
飽和脂肪酸又はその誘導体の製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】不飽和
脂肪酸又はその誘導体は、香料、薬剤、塗料、界面活性
剤、化粧品等として、或いはこれらの合成原料として広
く利用されている。微生物を利用した不飽和脂肪酸又は
その誘導体の製造には、これまでエキノスポラジウム
（Echinosporangium）属細菌（特許第２７１０３４４号
公報）、モルテイエレラ（Mortierella）属細菌（特開
昭６０−２５９１９２号公報）を用いる発酵法等が知ら
れているが、何れも収量が低く、反応時間も長く、また
菌体内に不飽和脂肪酸を蓄積するため回収が困難である
という問題があった。

【０００３】また、ロドコッカス（Rhodococcus）属細
菌により、不飽和脂肪酸又はその誘導体が菌体外に生産
されることも報告されているが（特公平２−６５１６号
公報、特公平４−１２７１８号公報）、その生産性及び
純度は十分であるとはいえなかった。

【０００４】本発明は、微生物により不飽和脂肪酸又は
その誘導体を生産する方法であって、菌体外生産がで
き、その生産量がより高く、且つ高純度で生産できる方
法及びこれに用いる不飽和脂肪酸生産菌を提供すること
を目的とする。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、不飽和脂
肪酸又はその誘導体を効率よく生産する微生物及び生産
条件を種々検討したところ、ロドコッカス属に属する不
飽和脂肪酸生産菌が特定の濃度及びｐＨをもつリン酸緩
衝液の存在下で増殖と連動して不飽和脂肪酸又はその誘
導体を高濃度且つ高純度で培地中に生産することを見出
した。

【０００６】すなわち本発明は、ロドコッカス（Rhodoc
occus）属に属する不飽和脂肪酸生産菌を用い、濃度
０．２５Ｍ以上でｐＨ７．２〜９のリン酸緩衝液又は濃
度０．３Ｍ以上でｐＨ７．０〜９のリン酸緩衝液の存在
下、脂肪酸又はその誘導体を該菌体に作用させる不飽和
脂肪酸又はその誘導体の製造法及び該不飽和脂肪酸生産
菌を提供するものである。

【０００７】

【発明の実施の形態】本発明の製造法において用いられ
る不飽和脂肪酸生産菌としては、ロドコッカス（Rhodoc
occus）属に属し、飽和脂肪酸から不飽和脂肪酸を生産
する能力を有するものであればよく、例えばロドコッカ
ス・エスピー（Rhodococcus sp.）ＫＳＭ−Ｂ−３Ｍ株
（ＦＥＲＭ ＢＰ１５３１）や、ロドコッカス・エスピ
ー（Rhodococcus sp.）ＫＳＭ−Ｔ６４５株（ＦＥＲＭ
Ｐ−１８１８２）等が挙げられる。このうち、不飽和
脂肪酸の生産量の点からロドコッカス・エスピーＫＳＭ
−Ｔ６４５株が特に好ましい。ロドコッカス・エスピー
ＫＳＭ−Ｔ６４５株は、ロドコッカス・エスピーＫＳＭ
−Ｂ−３Ｍ株に紫外線を照射して得られた新規な変異株
であり、以下の菌学的性質を有する。

【０００８】（Ａ）形態 桿菌で、細胞は多形性で、若い培養では短桿状、古い培
養では球状となる。大きさは０．５〜０．８μｍ×１．
０〜５．０μｍである。

【０００９】（Ｂ）生理学的性質 生育範囲 温度：５〜３７℃（最適２５〜３５℃） pH： ５〜９．５（最適６〜８） グラム染色：陽性 ゼラチンの液化（グルコース・ペプトン・ゼラチン培
地）：陰性 スターチの加水分解（スターチ寒天培地）：陰性 脱脂牛乳凝固、ペプトン：共に陰性 メラニン様色素の生成（チロシン培地、ペプトン・イ
ースト・鉄培地）：陰性

【００１０】（Ｃ）炭素源の資化性 Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−キシロース ＋ Ｄ−グルコース ＋ Ｄ−フラクトース ＋ シュークロース ＋ イノシトール ＋ Ｌ−ラムノース ＋ Ｄ−マンニトール ＋

【００１１】（Ｅ）化学的分類学的性質 グルコリルテスト：グリコリル型 メナキノン システム：ＭＫ−８（Ｈ₂）

【００１２】以上の菌学的性質を、Bergey's Manual of
Systematic Bacteriology第９巻（１９９４年）に基づ
き検索した結果、ロドコッカス属に属する細菌と認めら
れたため、本菌株をロドコッカス・エスピーＫＳＭ−Ｔ
６４５と命名した。この菌株は、工業技術院生命工学工
業技術研究所にＦＥＲＭ Ｐ−１８１８２として寄託さ
れている。

【００１３】本発明の製造法において、原料として用い
られる脂肪酸としては、炭素数１〜２２、好ましくは１
４〜２０の飽和又は不飽和の脂肪酸が挙げられ、その誘
導体としては当該脂肪酸のアルキル（炭素数１〜１０、
好ましくは２〜４）若しくはアリールエステル、第１級
若しくは２級アンモニウム塩又はアルカリ金属塩が挙げ
られる。このうち、ｎ−ヘキサデカン酸（パルミチン
酸）、ｎ−テトラデカン酸（ミリスチン酸）、オクタデ
カン酸（ステアリン酸）これら脂肪酸のメチル、エチ
ル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブ
チル、ｔｅｒｔ−ブチル等の各エステル、アンモニウム
塩、ナトリウム塩、カリウム塩等が好ましい。

【００１４】斯かる脂肪酸又はその誘導体は、本発明の
反応によれば、脂肪酸の炭化水素鎖の特定の位置に不飽
和結合が導入された不飽和脂肪酸又はその誘導体に変換
される。例えば、パルミチン酸又はそのエステルを原料
として用いれば、シス−６−ヘキサデセン酸を主生成物
として得ることができる。

【００１５】本発明の製造法は、濃度０．２５Ｍ以上で
ｐＨ７．２〜９のリン酸緩衝液又は濃度０．３Ｍ以上で
ｐＨ７．０〜９のリン酸緩衝液の存在下、脂肪酸又はそ
の誘導体を微生物菌体に作用させ、不飽和脂肪酸又はそ
の誘導体を反応液中に生成させるものである。微生物菌
体の取得は、通常の微生物の培養方法によればよく、培
養に際して用いられる培地、ｐＨ、温度、培養時間等に
ついては当該菌株が十分に生育するものであればいずれ
の条件でもよい。好ましくは、３０℃で１〜２日間、好
気的に培養するのがよい。

【００１６】反応は、得られた培養液をそのまま、或い
は培養液から菌体を遠心分離等の方法により回収後、濃
度０．２５Ｍ以上でｐＨ７．２〜９のリン酸緩衝液又は
濃度０．３Ｍ以上でｐＨ７．０〜９のリン酸緩衝液に懸
濁させ、これに脂肪酸又はその誘導体を添加して行われ
る。

【００１７】ここで、菌体培養液又は菌体は、反応液に
対して０．１〜１０％、特に０．５〜５％用いることが
好ましく、脂肪酸又はその誘導体は、１〜３０％、特に
１０〜２５％であることが好ましい。

【００１８】本発明においては、濃度０．２５Ｍ以上で
ｐＨ７．２〜９のリン酸緩衝液又は濃度０．３Ｍ以上で
ｐＨ７．０〜７．２のリン酸緩衝液が用いられる。ｐＨ
７．０未満或いは濃度が０．２５未満であると、効率よ
く不飽和化することができず、ｐＨが９を超えると微生
物が増殖できない。斯かる効果の点から、濃度０．２５
Ｍ以上でｐＨ７．２〜９であるものが好ましく、特に濃
度０．３〜０．５Ｍで、ｐＨ７．２〜８であるものが好
ましい。

【００１９】また、リン酸緩衝液としては、いずれの対
イオンを有するものでもよいが、リン酸１ナトリウム−
リン酸２カリウム又はリン酸１カリウム−リン酸２カリ
ウムが好ましい。

【００２０】当該反応液中には、菌体の増殖を妨げない
限り、更に硫酸マグネシウム塩、硫酸鉄塩、窒素源、ビ
タミン類等を添加することができる。尚、この場合、硫
酸マグネシウム塩は０．００５〜１％、好ましくは０．
０１〜０．５％、硫酸鉄塩は１〜１００ppm、好ましく
は５〜５０ppmで添加することが好ましい。

【００２１】反応は２０〜３７℃、好ましくは２５〜３
０℃の温度条件で、好気的条件下に４８〜１２０時間、
特に６０〜９６時間行うことが好ましい。

【００２２】かくして反応液中に生成した不飽和脂肪酸
又はその誘導体は、天然有機化合物等で通常行われてい
る抽出・単離方法により、容易に回収・分離できる。例
えば反応液を遠心分離により菌体・油相・水相に分けて
油相を分取したり、或いは反応液をそのまま有機溶剤で
抽出することにより極めて簡便に目的物を回収できる。
また、この反応により高純度の目的物が回収できるが、
さらに精製する必要のある場合は通常のカラムクロマト
グラフィー、分配抽出、溶媒晶析等により精製単離が可
能である。

【００２３】

【実施例】以下、実施例を用いて本発明を更に詳細に説
明する。 実施例１ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-T6
45を接種し、３０℃にて１日間培養を行った。この培養
液０．４mLを、ＭＳＧ（グルタミン酸ナトリウム）２０
ｇ、酵母エキス（Ｄｉｆｃｏ社製）４．５ｇ、ＭｇＳＯ
₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５m
g、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂
Ｏ １．２mgを、０．３５Ｍ リン酸緩衝液（pH７．２
５）１Ｌに溶解した培地２０mL及びパルミチン酸イソプ
ロピル３．８mLを入れた５００mL容ひだ付き三角フラス
コに接種し、２６℃にて４日間、２１０rpmにて振盪培
養及び反応を行った。反応後、反応液に含まれる主生成
物（シス−６−ヘキサデセン酸イソプロピル）を酢酸エ
チルで抽出し、ガスクロマトグラフィーによる分析を行
ったところ、生産性は５１ｇ／Ｌ、反応液中の全油中の
シス−６−ヘキサデセン酸イソプロピルの割合は８０．
５％であった（表１）。

【００２４】実施例２ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-T6
45を接種し、３０℃にて１日間培養を行った。この培養
液０．４mLを、ＭＳＧ（グルタミン酸ナトリウム）２０
ｇ、酵母エキス（Ｄｉｆｃｏ社製）３ｇ、ＭｇＳＯ₄・
７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５mg、
ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ
１．２mgを、０．２５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．２５又
は７．５）１Ｌに溶解した培地２０mL及びパルミチン酸
イソプロピル４．４mLを入れた５００mL容ひだ付き三角
フラスコに接種し、２６℃にて４日間、２１０rpmにて
振盪培養及び反応を行った。反応後、反応液に含まれる
主生成物（シス−６−ヘキサデセン酸イソプロピル）を
酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラフィーによる分
析を行ったところ、生産性は４８．５ｇ／Ｌ、反応液中
の全油中のシス−６−ヘキサデセン酸イソプロピルの割
合は７０．９％であった（表１）。

【００２５】実施例３ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-T6
45を接種し、３０℃にて１日間培養を行った。この培養
液０．４mLを、ＭＳＧ（グルタミン酸ナトリウム）２０
ｇ、酵母エキス（アサヒビール社製）８．０ｇ、ＭｇＳ
Ｏ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５
mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂
Ｏ １．２mgを、０．３５Ｍ リン酸緩衝液（ｐＨ７．
２５又は７．５）１Ｌに溶解した培地２０mL及びパルミ
チン酸イソプロピル４．４mLを入れた５００mL容ひだ付
き三角フラスコに接種し、２６℃にて４日間、２１０rp
mにて振盪培養及び反応を行った。反応後、反応液に含
まれる主生成物（シス−６−ヘキサデセン酸イソプロピ
ル）を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラフィーに
よる分析を行ったところ、生産性は各々のpHで５８．７
ｇ／Ｌ、４８．９ｇ／Ｌ、反応液中の全油中のシス−６
−ヘキサデセン酸イソプロピルの割合は７３．８％、７
９．３％であった（表１）。

【００２６】実施例４ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２００mLを入れた２
L容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-T645
を接種し、３０℃にて１日間培養を行った後。この培養
液すべてを、ＭＳＧ（グルタミン酸ナトリウム）２０
ｇ、酵母エキス（アサヒビール社製）７．５ｇ、ＭｇＳ
Ｏ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５
mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂
Ｏ １．２mgを、０．３５Ｍ リン酸緩衝液（ｐＨ７．
２５）に溶解した培地１２．５Ｌ及びパルミチン酸イソ
プロピル２．７５Ｌを入れた３０Ｌ容ジャーファーメン
ターに接種し、２６℃にて４日間、３５０rpm、０．５v
vmにて通気攪拌培養及び反応を行った。反応後、反応液
に含まれる主生成物（シス−６−ヘキサデセン酸イソプ
ロピル）を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラフィ
ーによる分析を行ったところ、生産性は４５．０ｇ／
Ｌ、反応液中の全油中のシス−６−ヘキサデセン酸イソ
プロピルの割合は７５．０％であった（表１）。

【００２７】実施例５ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-B-
3Mを接種し、３０℃にて１日間培養を行った。後、この
培養液０．４mLを、ＭＳＧ ２０ｇ、酵母エキス（Difc
o社製）３ｇ、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、Ｆｅ
ＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６
mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ １．２mgを、０．３Ｍ リン
酸バッファー（pH７．５）１Ｌに溶解した培地２０mL及
びパルミチン酸イソプロピル４．４mLを入れた５００mL
容ひだ付き三角フラスコに接種し、２６℃にて４日間、
２１０rpmにて振盪培養及び反応を行った。反応後、反
応液に含まれる主生成物（シス−６−ヘキサデセン酸イ
ソプロピル）を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラ
フィーによる分析を行ったところ、生産性は４７．０ｇ
／Ｌ、反応液中の全油中のシス−６−ヘキサデセン酸イ
ソプロピルの割合は６８．５％であった（表２）。

【００２８】実施例６ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２mLを入れたφ２２
×１９５mm試験管にRhodococcus sp. KSM-T645を接種
し、３０℃にて１日間培養を行った。後、この培養液７
０μＬを、ＭＳＧ ２０ｇ、酵母エキス（Difco社製）
３ｇ、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・
７Ｈ₂Ｏ １５mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、Ｃ
ｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ １．２mgを、０．２５Ｍ Ｋ，Ｋ２
リン酸バッファー（pH７．０）１Ｌに溶解した培地１．
５mL及びミリスチン酸イソプロピル０．３５mLを入れた
φ２２×１９５mm試験管に接種し、２７℃にて４日間２
１０spmにて振盪培養及び反応を行った。反応後、反応
液に含まれる主生成物（シス−６−テトラデセン酸イソ
プロピル）を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラフ
ィーによる分析を行ったところ、生産性は２６．５ｇ／
Ｌ、反応液中の全油中のシス−６−テトラデセン酸イソ
プロピルの割合は３６．７％であった（表３）。

【００２９】比較例１ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-T6
45を接種し、３０℃にて１日間培養を行った後。この培
養液０．４mLを、ＭＳＧ（グルタミン酸ナトリウム）２
０ｇ、酵母エキス（アサヒビール社製）４．５ｇ、Ｍｇ
ＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ ₄・７Ｈ₂Ｏ １
５mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、ＣｕＳＯ₄・５
Ｈ₂Ｏ １．２mgを０．２５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．
０）１Ｌに溶解した培地２０mL及びパルミチン酸イソプ
ロピル３．６mLを入れた５００mL容ひだ付き三角フラス
コに接種し、２６℃にて４日間、２１０rpmにて振盪培
養及び反応を行った。反応後、反応液に含まれる主生成
物（シス−６−ヘキサデセン酸イソプロピル）を酢酸エ
チルで抽出し、ガスクロマトグラフィーによる分析を行
ったところ、生産性は３４．９ｇ／Ｌ、反応液中の全油
中のシス−６−ヘキサデセン酸イソプロピルの割合は４
１．１％であった（表１）。

【００３０】比較例２ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-T6
45を接種し、３０℃にて１日間培養を行った。この培養
液０．４mLを、ＭＳＧ（グルタミン酸ナトリウム）２０
ｇ、酵母エキス（アサヒビール社製）４．５ｇ、ＭｇＳ
Ｏ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５
mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂
Ｏ １．２mgを０．１Ｍ又は０．２Ｍリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ７．２５）１Ｌに溶解した培地２０mL及びパルミチン
酸イソプロピル３．６mLを入れた５００mL容ひだ付き三
角フラスコに接種し、２６℃にて４日間、２１０rpmに
て振盪培養及び反応を行った。反応後、反応液に含まれ
る主生成物（シス−６−ヘキサデセン酸イソプロピル）
を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラフィーによる
分析を行ったところ、生産性は各々２８．１、３２．７
ｇ／Ｌ反応液中の全油中のシス−６−ヘキサデセン酸イ
ソプロピルの割合は３７．６％、３７．３％であった
（表１）。

【００３１】比較例３ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２０mLを入れた５０
０mL容ひだ付き三角フラスコにRhodococcus sp. KSM-B-
3Mを接種し、３０℃にて１日間培養を行った。後、この
培養液０．４mLを、ＭＳＧ ２０ｇ、酵母エキス（Difc
o社製）３ｇ、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、Ｆｅ
ＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ １５mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６
mg、ＣｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ １．２mgを、０．３Ｍ リン
酸バッファー（pH７．０）１Ｌに溶解した培地２０mL及
びパルミチン酸イソプロピル４．４mLを入れた５００mL
容ひだ付き三角フラスコに接種し、２６℃にて４日間、
２１０rpmにて振盪培養及び反応を行った。反応後、反
応液に含まれる主生成物（シス−６−ヘキサデセン酸イ
ソプロピル）を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグラ
フィーによる分析を行ったところ、生産性は３５．５ｇ
／Ｌ、反応液中の全油中のシス−６−ヘキサデセン酸イ
ソプロピルの割合は４５．４％であった（表２）。

【００３２】比較例４ ＳＣＤ培地（日本製薬株式会社製）２mLを入れたφ２２
×１９５mm試験管にRhodococcus sp. KSM-T645を接種
し、３０℃にて１日間培養を行った。後、この培養液７
０μＬを、ＭＳＧ ２０ｇ、酵母エキス（Difco社製）
３ｇ、ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ ０．０５ｇ、ＦｅＳＯ₄・
７Ｈ₂Ｏ １５mg、ＭｎＳＯ₄・６Ｈ₂Ｏ ０．６mg、Ｃ
ｕＳＯ₄・５Ｈ₂Ｏ １．２mgを、０．３５Ｍ Ｋ，Ｋ２
リン酸バッファー（pH７．２５）１Ｌに溶解した培地
１．５mL及びミリスチン酸イソプロピル０．３５mLを入
れたφ２２×１９５mm試験管に接種し、２７℃にて４日
間２１０spmにて振盪培養及び反応を行った。反応後、
反応液に含まれる主生成物（シス−６−テトラデセン酸
イソプロピル）を酢酸エチルで抽出し、ガスクロマトグ
ラフィーによる分析を行ったところ、生産性は１０．５
ｇ／Ｌ、反応液中の全油中のシス−６−テトラデセン酸
イソプロピルの割合は１１．８％であった（表３）。

【００３３】

【表１】

【００３４】

【表２】

【００３５】

【表３】

【００３６】

【発明の効果】本発明によれば、不飽和脂肪酸又はその
誘導体を微生物菌体外に極めて効率よく且つ高純度で製
造することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｐ 7/64 (Ｃ１２Ｐ 7/64 Ｃ１２Ｒ 1:01） Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/20 (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ａ Ｃ１２Ｒ 1:01） Ｃ１２Ｒ 1:01） (72)発明者 辻野 幸晴 栃木県芳賀郡市貝町赤羽2606 花王株式会 社研究所内 (72)発明者 滝川 博文 栃木県芳賀郡市貝町赤羽2606 花王株式会 社研究所内 Ｆターム(参考） 4B064 AD88 CA03 CB22 CC03 CD05 CD07 DA01 DA16 4B065 AA45X AC14 AC15 BA17 BB09 CA13 CA44 CA50 CA51 4H006 AA02 AB12 AB14 AB20 AB68 AB99 AC48 4H059 BA26 BA30 BB02 BB03 BC48 CA74 EA21

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ロドコッカス（Rhodococcus）属に属す
   る不飽和脂肪酸生産菌を用い、濃度０．２５Ｍ以上でｐ
   Ｈ７．２〜９のリン酸緩衝液又は濃度０．３Ｍ以上でｐ
   Ｈ７．０〜９のリン酸緩衝液の存在下、脂肪酸又はその
   誘導体を該菌体に作用させる不飽和脂肪酸又はその誘導
   体の製造法。
2. 【請求項２】 不飽和脂肪酸生産菌が、ロドコッカス・
   エスピー（Rhodococcus sp.）ＫＳＭ Ｔ６４５株（Ｆ
   ＥＲＭ Ｐ−１８１８２）である請求項１項記載の製造
   法。
3. 【請求項３】 ロドコッカス・エスピー（Rhodococcus
   sp.）ＫＳＭ Ｔ６４５株（ＦＥＲＭ Ｐ−１８１８
   ２）。