JP2002156379A - 溶液で安定でかつ効率的に活性化するaptt測定用試薬 - Google Patents
溶液で安定でかつ効率的に活性化するaptt測定用試薬Info
- Publication number
- JP2002156379A JP2002156379A JP2000353408A JP2000353408A JP2002156379A JP 2002156379 A JP2002156379 A JP 2002156379A JP 2000353408 A JP2000353408 A JP 2000353408A JP 2000353408 A JP2000353408 A JP 2000353408A JP 2002156379 A JP2002156379 A JP 2002156379A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seconds
- reagent
- solution
- aluminum
- chloride
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
カリクレインの反応性の高いAPTT測定用試薬組成物
を提供すること。 【解決手段】APTT測定用試薬にアルミニウム化合物
を含有させること。
Description
れる血液凝固能測定用試薬及び血液凝固能の検査用試薬
に関する。より詳しくは、活性化部分トロンボプラスチ
ン時間(以下APTTという)測定用試薬組成物に関す
る。
係する、凝固第VIII因子、IX因子、XI因子、XII因子等
の血液凝固因子の異常を鋭敏に反映し、内因系止血異常
のスクリーニングとして必須の検査手段である。体外診
断薬で用いられるAPTT測定用試薬は、古くからタン
ニン酸から誘導させるエラグ酸、カオリン、又はセライ
ト等を活性化剤として用いている。調製方法として、エ
ラグ酸溶液に銅、ニッケル、コバルト類を混合させて活
性化する方法が報告されている(米国特許3,486,981、
R.E.Speckら、特表平5−506309、R.E.Speck
ら)。また、銅を用いる方法は、既にP.E.Bockらにより
報告されている(Biochemistry,8,7258,1981.)。しか
し、これらの金属イオンを用いてエラグ酸を活性化させ
るAPTT測定用試薬を調製する方法は、溶液での安定
性、検体の希釈直線性の面とプレカリクレインに対する
反応性で劣ることが問題となっている。
薬にあって、検体の希釈直線性、溶液状態での安定性に
優れ、プレカリクレインの反応性の高い試薬組成物を提
供することである。
を行い鋭意研究を重ねた結果、APTT測定用試薬にあ
って、アルミニウム化合物を含有させることにより上記
課題を解決しうることを見出し、本発明を完成した。
活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬組成物、 2.アルミニウム化合物が少なくとも塩化アルミニウム
を含む前項1記載の試薬組成物、 3.アルミニウム化合物を、試薬組成物の保存安定化有
効量添加した前項1又は2記載の試薬組成物、 4.アルミニウム化合物の添加する濃度が、10〜100μm
ol/Lである前項1〜3の何れか1に記載の試薬組成物、 5.前項1〜4のいずれか1に記載の試薬組成物を用い
た活性化部分トロンボプラスチン時間の測定方法、から
なる。
TT測定用試薬に適用できる。APTT測定用試薬と
は、PTT(部分トロンボプラスチン)測定用試薬(セ
ファリン含有)に、カオリン、セライト、エラグ酸等の
活性化剤を添加した試薬である。
に活性化し、さらに、調製後のAPTT測定用試薬の溶
液安定性、検体の希釈直線性、そしてプレカリクレイン
に対する反応性を確保しうる、エラグ酸等を活性化させ
る物質が添加される。このエラグ酸等による内因系凝固
因子を活性化させる物質として、好ましくはアルミニウ
ム化合物が使用される。アルミニウム化合物としては、
広く公知のアルミニウム化合物、例えば塩化アルミニウ
ム、臭化アルミニウム、水酸化アルミニウム、ヨウ化ア
ルミニウム、硝酸アルミニウム、リン酸アルミニウム、
硫酸アルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム等が挙げ
られ、好適には塩化アルミニウムが挙げられる。
安定化効果の確認により選定され、保存安定化有効量添
加される。液状での添加の好ましい態様としては、1〜1
000好ましくは10〜100μmol/Lの添加量である。
でもよいが、他の金属化合物との併用も可能である。そ
のような金属化合物としては、好ましくは銅化合物(硫
酸銅等)、鉄化合物(塩化第二鉄等)、マンガン化合物
(塩化マンガン等)が例示され、より好適な化合物は銅
化合物が挙げられる。
が、本発明は実施例に限定されるものではない。
酸は、東京化成、SIGMA、FLUKA、和光純薬、ICNから市
販品として購入することができる。エラグ酸を0.025gを
秤量し、0.001M水酸化ナトリウム液1Lで溶解した。こ
れに50μmol/Lになるように各種重金属を混合し、さら
に、この溶液にトリスを0.22g、ヘペスを1.45g溶解させ
てエラグ酸溶液とした。別のガラス容器にウサギ脳由来
セファリン(Bell and Alton法、Nature,174,880(195
4))を0.01g秤量し、上記エラグ酸溶液でセファリンを
溶解してAPTT測定用試薬を調製した。尚、セファリ
ンは、精製リン脂質または合成リン脂質を用いても調製
することができる。
7℃で60秒間加温した。調製されたAPTT測定用試薬
を50μL混合し、さらに37℃で180秒間加温活性化した。
20mM塩化カルシウム液を50μL混合し、凝固時間を測定
した。尚、本測定は全自動血液凝固分析装置Coagrex-70
0を用いて行った。
を使い、各種金属化合物の添加による効果を検討した。
その結果、表1に示す各種金属化合物によるエラグ酸混
合物の活性化効果についての成績が得られた。
トロ−ルNを検体として、凝固時間をCoagrex-700を用
いて測定した結果、硫酸銅、塩化マンガン、塩化アルミ
ニウム、塩化第2鉄で活性化効果が認められた。さら
に、コアグトロールNを生理的食塩水で順次希釈し、2
倍希釈液及び4倍希釈溶液を試料として、コアグトロー
ルNの希釈直線性を最小二乗法で回帰分析した。その結
果、塩化アルミニウムの場合の希釈直線性が最も優れて
いた。また、プレカリクレイ欠乏症患者血漿では塩化ア
ルミニウムが凝固時間の延長が優れ、硫酸銅、塩化マン
ガン、塩化第2鉄は同等レベルの延長度合いの悪い反応
性を示した。一方、塩化第2鉄はエラグ酸と黒色のキレ
ートを呈し沈殿物を生じた。
製されたAPTT測定用試薬の保存安定化性を、同様に
検定した。その結果、表2に示す安定化効果についての
成績が得られた。
トロールNを試料として、APTT測定用試薬の37℃下
における保存安定性を観察した結果、硫酸銅と塩化マン
ガンは凝固時間の経時的変化を与えるのに対して、塩化
アルミニウムは凝固時間の変動を与えず一定した効果が
得られ、安定性が極めて優れていた。
た塩化アルミニウムと安定性に問題があった硫酸銅で混
合調製されたAPTT測定用試薬の保存安定性を同様に
検定した。その結果、表3に示す安定化効果についての
成績が得られた。
ウムを混合してエラグ酸を活性化させた場合であっても
37℃における溶液の安定性は保持され、塩化アルミニウ
ム添加により安定化されていることが明らかとなった。
調製されたAPTT測定用試薬の性能を検定した。その
結果、表4に示す成績が得られた。
酸銅で調製されたAPTT測定用試薬を用いた場合は、
3度の試行においていずれも硫酸銅単独で調製した測定
試薬よりも優れた検体希釈直線性と安定性およびプレカ
リクレイン欠乏血漿における著しい凝固時間の延長を示
した。このことにより、アルミニウム化合物の添加によ
り、検体直希釈線性、安定性およびプレカリクレイン欠
乏血漿における著しい凝固時間の延長が保持されること
が明らかとなった。
性、溶液状態での安定性に優れ、プレカリクレインに対
する反応性の高いAPTT測定用試薬組成物が提供で
き、凝固時間の測定において感度の向上が可能となる。
Claims (5)
- 【請求項1】 アルミニウム化合物を含有させることを
特徴とする活性化部分トロンボプラスチン時間測定試薬
組成物。 - 【請求項2】 アルミニウム化合物が少なくとも塩化ア
ルミニウムを含む請求項1記載の試薬組成物。 - 【請求項3】 アルミニウム化合物を、試薬組成物の保
存安定化有効量添加した請求項1又は2記載の試薬組成
物。 - 【請求項4】 アルミニウム化合物の添加する濃度が、
10〜100μmol/Lである請求項1〜3の何れか1に記載の
試薬組成物。 - 【請求項5】 請求項1〜4のいずれか1に記載の試薬
組成物を用いた活性化部分トロンボプラスチン時間の測
定方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2000353408A JP4440452B2 (ja) | 2000-11-20 | 2000-11-20 | 溶液で安定でかつ効率的に活性化するaptt測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2000353408A JP4440452B2 (ja) | 2000-11-20 | 2000-11-20 | 溶液で安定でかつ効率的に活性化するaptt測定用試薬 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2002156379A true JP2002156379A (ja) | 2002-05-31 |
JP2002156379A5 JP2002156379A5 (ja) | 2007-12-13 |
JP4440452B2 JP4440452B2 (ja) | 2010-03-24 |
Family
ID=18826180
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2000353408A Expired - Lifetime JP4440452B2 (ja) | 2000-11-20 | 2000-11-20 | 溶液で安定でかつ効率的に活性化するaptt測定用試薬 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP4440452B2 (ja) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012047586A (ja) * | 2010-08-26 | 2012-03-08 | Sysmex Corp | ループスアンチコアグラント検出用試薬キット及びループスアンチコアグラントの存否を判定する方法 |
CN106241993A (zh) * | 2016-09-18 | 2016-12-21 | 辽宁科技大学 | 一种改性高效聚合氯化铝高分子无机絮凝剂的制备方法 |
WO2020067171A1 (ja) * | 2018-09-25 | 2020-04-02 | 積水メディカル株式会社 | 血液凝固時間測定方法 |
JP2021504705A (ja) * | 2017-11-28 | 2021-02-15 | シーメンス ヘルスケア ダイアグノスティクス プロダクツ ゲゼルシヤフト ミツト ベシユレンクテル ハフツング | 鉄キレート剤を含むプロトロンビン時間試薬 |
WO2024080371A1 (ja) * | 2022-10-14 | 2024-04-18 | 積水メディカル株式会社 | 凝固第xii因子欠乏血液検体の血液凝固時間短縮剤 |
WO2024080372A1 (ja) * | 2022-10-14 | 2024-04-18 | 積水メディカル株式会社 | 凝固第viii、ix又はxi因子欠乏血液検体の血液凝固時間調節剤、及び活性化部分トロンボプラスチン時間測定のための試薬 |
WO2024080373A1 (ja) * | 2022-10-14 | 2024-04-18 | 積水メディカル株式会社 | 活性化部分トロンボプラスチン時間測定のための試薬、及びループスアンチコアグラント陽性血液検体又はヘパリン含有血液検体の血液凝固時間調節剤 |
-
2000
- 2000-11-20 JP JP2000353408A patent/JP4440452B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012047586A (ja) * | 2010-08-26 | 2012-03-08 | Sysmex Corp | ループスアンチコアグラント検出用試薬キット及びループスアンチコアグラントの存否を判定する方法 |
CN106241993A (zh) * | 2016-09-18 | 2016-12-21 | 辽宁科技大学 | 一种改性高效聚合氯化铝高分子无机絮凝剂的制备方法 |
JP2021504705A (ja) * | 2017-11-28 | 2021-02-15 | シーメンス ヘルスケア ダイアグノスティクス プロダクツ ゲゼルシヤフト ミツト ベシユレンクテル ハフツング | 鉄キレート剤を含むプロトロンビン時間試薬 |
US11774461B2 (en) | 2017-11-28 | 2023-10-03 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | Iron chelator-containing prothrombin time reagent |
JP7527205B2 (ja) | 2018-09-25 | 2024-08-02 | 積水メディカル株式会社 | 血液凝固時間測定方法 |
WO2020067171A1 (ja) * | 2018-09-25 | 2020-04-02 | 積水メディカル株式会社 | 血液凝固時間測定方法 |
JPWO2020067171A1 (ja) * | 2018-09-25 | 2021-10-28 | 積水メディカル株式会社 | 血液凝固時間測定方法 |
WO2024080371A1 (ja) * | 2022-10-14 | 2024-04-18 | 積水メディカル株式会社 | 凝固第xii因子欠乏血液検体の血液凝固時間短縮剤 |
WO2024080373A1 (ja) * | 2022-10-14 | 2024-04-18 | 積水メディカル株式会社 | 活性化部分トロンボプラスチン時間測定のための試薬、及びループスアンチコアグラント陽性血液検体又はヘパリン含有血液検体の血液凝固時間調節剤 |
JP7473282B1 (ja) | 2022-10-14 | 2024-04-23 | 積水メディカル株式会社 | 凝固第xii因子欠乏血液検体の血液凝固時間短縮剤 |
JP7473281B1 (ja) | 2022-10-14 | 2024-04-23 | 積水メディカル株式会社 | 凝固第viii、ix又はxi因子欠乏血液検体の血液凝固時間調節剤、及び活性化部分トロンボプラスチン時間測定のための試薬 |
JP7473283B1 (ja) | 2022-10-14 | 2024-04-23 | 積水メディカル株式会社 | 活性化部分トロンボプラスチン時間測定のための試薬、及びループスアンチコアグラント陽性血液検体又はヘパリン含有血液検体の血液凝固時間調節剤 |
WO2024080372A1 (ja) * | 2022-10-14 | 2024-04-18 | 積水メディカル株式会社 | 凝固第viii、ix又はxi因子欠乏血液検体の血液凝固時間調節剤、及び活性化部分トロンボプラスチン時間測定のための試薬 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP4440452B2 (ja) | 2010-03-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4234682A (en) | Method and reagent for determining biologically active heparin in plasma | |
US4363633A (en) | Reference liquid | |
CN108761104A (zh) | 凝血激活剂及其应用 | |
US4188188A (en) | High density lipoprotein cholesterol assay | |
JPH02501115A (ja) | 血小板凝集試薬、試薬容器及びedta‐凝固防止血液中の血小板の凝集の測定方法 | |
CN104076156A (zh) | 活化部分凝血活酶时间测定法和活化部分凝血活酶时间测定用试剂盒 | |
Vroman et al. | Possible involvement of fibrinogen and proteolysis in surface activation | |
JPH0650999B2 (ja) | 血液凝固因子安定化法 | |
JPH0822967B2 (ja) | 全血中の網状赤血球の定量測定における化合物、試薬組成物及びその用途 | |
CN110108890A (zh) | 活化部分凝血活酶时间测定试剂及其应用 | |
EP0107383B1 (en) | Diagnostic activated partial thromboplastin reagent | |
JP2002156379A (ja) | 溶液で安定でかつ効率的に活性化するaptt測定用試薬 | |
JPS59187800A (ja) | 活性化された部分トロンボプラスチン時間の測定法 | |
US3773626A (en) | Reagent composition and process for determining gamma-glutamyltranspeptidase | |
US5506112A (en) | Reagent used for determining factor VIII activity | |
US5413786A (en) | Method of accelerating blood coagulation using a metal complex of oxidized ellagic acid | |
Stone | Interaction of actin with spin-labeled heavy meromyosin in the presence of nucleotides | |
JP4033534B2 (ja) | ヒトヘモグロビンの安定化方法 | |
CN114814244A (zh) | 一种狼疮抗凝物检测试剂盒 | |
JP4130724B2 (ja) | キレート物質を含む測定試薬 | |
US3310382A (en) | Biuret reagent | |
EP0677171B1 (en) | Tetrahydroxyquinone as an activator component for activated partial thromboplastine time test of blood coagulation and as a detector of blood coagulation disorders | |
US5637452A (en) | Kit for an initial screen for abnormal platelet condition comprising propyl gallate or tannin and a metal ion | |
JPH04350560A (ja) | プロテインs活性の機能的測定方法 | |
JP4123181B2 (ja) | カルシウムの測定方法および測定試薬 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20011227 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20050928 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20071017 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20071017 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20071017 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20090807 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090817 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20091006 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20091214 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100107 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130115 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4440452 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130115 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160115 Year of fee payment: 6 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |