JP2002020293A - クラミジア感染症処置剤 - Google Patents
クラミジア感染症処置剤Info
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- chlamydia
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 クラミジア感染症の予防および治療に用いる
ことが可能で、人体に適用するに際し、安全で副作用な
どの問題がほとんどない薬剤を提供すること。 【解決手段】 ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基か
ら成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とする硫酸化
グリコサミノグリカンにおいて、該ヘキスロン酸残基の
全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸基を有しない硫酸
化グリコサミノグリカンまたはその塩を有効成分とする
クラミジア感染処置剤。
ことが可能で、人体に適用するに際し、安全で副作用な
どの問題がほとんどない薬剤を提供すること。 【解決手段】 ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基か
ら成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とする硫酸化
グリコサミノグリカンにおいて、該ヘキスロン酸残基の
全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸基を有しない硫酸
化グリコサミノグリカンまたはその塩を有効成分とする
クラミジア感染処置剤。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、構成糖として、ヘ
キスロン酸残基とヘキソサミン残基との二糖単位の繰り
返し構造を基本骨格とする硫酸化グリコサミノグリカン
において、該ヘキスロン酸残基の２位の水酸基に硫酸基
を有しない硫酸化グリコサミノグリカンまたはその塩を
有効成分とするクラミジア感染症処置剤に関するもので
ある。
キスロン酸残基とヘキソサミン残基との二糖単位の繰り
返し構造を基本骨格とする硫酸化グリコサミノグリカン
において、該ヘキスロン酸残基の２位の水酸基に硫酸基
を有しない硫酸化グリコサミノグリカンまたはその塩を
有効成分とするクラミジア感染症処置剤に関するもので
ある。
【０００２】
【従来の技術】クラミジアは偏性細胞内寄生性細菌であ
り、抗原性、封入体の性状、ＤＮＡホモロジーから、Ch
lamydia trachomatis、 Chlamydia psittaci、Chlamydi
a pneumoniaeの３種に分類され、Chlamydia trachomati
sは、更に、Ａ，Ｂ，Ｂａ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，
Ｉ，Ｊ，Ｋ，Ｌ１，Ｌ２，Ｌ３という１５の血清型に分
かれている。
り、抗原性、封入体の性状、ＤＮＡホモロジーから、Ch
lamydia trachomatis、 Chlamydia psittaci、Chlamydi
a pneumoniaeの３種に分類され、Chlamydia trachomati
sは、更に、Ａ，Ｂ，Ｂａ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，Ｈ，
Ｉ，Ｊ，Ｋ，Ｌ１，Ｌ２，Ｌ３という１５の血清型に分
かれている。
【０００３】Chlamydia trachomatisはヒトの眼や泌尿
生殖器粘膜に感染し、種々の疾患を引き起こすことが知
られている。 例えば、血清型Ａ〜Ｃは、トラコーマ
を、ＢおよびＤ〜Ｋは尿道炎、精巣上体炎、前立腺炎、
子宮頚管炎、卵管炎、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、肝
周囲炎（Fitz-Hugh-Curtis症候群）、卵管不妊、子宮外
妊娠、封入体結膜炎を、Ｌ１〜Ｌ３は、性病性リンパ肉
芽腫症（ＬＧＶ）を起こす。Chlamydia psittaciは鳥類
や哺乳類に感染し、特に、感染鳥類からヒトに感染する
オウム病が知られている。また、Chlamydia pneumoniae
は肺炎を起こすクラミジアである。
生殖器粘膜に感染し、種々の疾患を引き起こすことが知
られている。 例えば、血清型Ａ〜Ｃは、トラコーマ
を、ＢおよびＤ〜Ｋは尿道炎、精巣上体炎、前立腺炎、
子宮頚管炎、卵管炎、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、肝
周囲炎（Fitz-Hugh-Curtis症候群）、卵管不妊、子宮外
妊娠、封入体結膜炎を、Ｌ１〜Ｌ３は、性病性リンパ肉
芽腫症（ＬＧＶ）を起こす。Chlamydia psittaciは鳥類
や哺乳類に感染し、特に、感染鳥類からヒトに感染する
オウム病が知られている。また、Chlamydia pneumoniae
は肺炎を起こすクラミジアである。
【０００４】このようなクラミジア感染症の治療には、
通常、抗生物質等の抗菌剤が使用されている。ところ
が、クラミジアの増殖時間は一般細菌に比してはるかに
長いため、長期の連続投与が必要となるが、抗生物質等
の抗菌剤の長期間連続投与は好ましくないとされてい
る。また、クラミジア感染を予防する物質としてはヘパ
リン（The Journal of Biological Chemistry, Vol.27
1, No.19, pp.11134-11140,1996）や硫酸化多糖（特表
平８−５０６５７０）が知られているが、天然物から抽
出した通常のヘパリンには強い抗凝固活性や出血活性が
あり、抗血液凝固剤以外の医薬品としての適用には問題
があった。
通常、抗生物質等の抗菌剤が使用されている。ところ
が、クラミジアの増殖時間は一般細菌に比してはるかに
長いため、長期の連続投与が必要となるが、抗生物質等
の抗菌剤の長期間連続投与は好ましくないとされてい
る。また、クラミジア感染を予防する物質としてはヘパ
リン（The Journal of Biological Chemistry, Vol.27
1, No.19, pp.11134-11140,1996）や硫酸化多糖（特表
平８−５０６５７０）が知られているが、天然物から抽
出した通常のヘパリンには強い抗凝固活性や出血活性が
あり、抗血液凝固剤以外の医薬品としての適用には問題
があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、クラミジア
感染症の予防および治療に用いることが可能で、人体に
適用するに際し、安全で副作用などの問題がほとんどな
い薬剤を提供することを目的とする。
感染症の予防および治療に用いることが可能で、人体に
適用するに際し、安全で副作用などの問題がほとんどな
い薬剤を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を達成するために鋭意研究を重ねた結果、ヘキスロン酸
残基とヘキソサミン残基から成る二糖単位の繰り返し構
造を基本骨格とする硫酸化グリコサミノグリカンにおい
て、構成ヘキスロン酸残基の２位の硫酸基を除去する処
理を行った物質が、優れたクラミジア感染阻害効果を示
すことを見いだした。本発明者らは更に、上記物質が、
出血等の副作用をほとんど示さないことを見いだした。
これらの知見に基づき、構成ヘキスロン酸残基の２位の
硫酸基が除去された硫酸化グリコサミノグリカンがクラ
ミジア感染症のための処置剤として有用であることを知
得し、本発明を完成するに到った。
を達成するために鋭意研究を重ねた結果、ヘキスロン酸
残基とヘキソサミン残基から成る二糖単位の繰り返し構
造を基本骨格とする硫酸化グリコサミノグリカンにおい
て、構成ヘキスロン酸残基の２位の硫酸基を除去する処
理を行った物質が、優れたクラミジア感染阻害効果を示
すことを見いだした。本発明者らは更に、上記物質が、
出血等の副作用をほとんど示さないことを見いだした。
これらの知見に基づき、構成ヘキスロン酸残基の２位の
硫酸基が除去された硫酸化グリコサミノグリカンがクラ
ミジア感染症のための処置剤として有用であることを知
得し、本発明を完成するに到った。
【０００７】本発明は、ヘキスロン酸残基とヘキソサミ
ン残基から成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とす
る硫酸化グリコサミノグリカンにおいて、該ヘキスロン
酸残基の全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸基を有し
ない硫酸化グリコサミノグリカンまたはその塩を有効成
分とするクラミジア感染症処置剤（以下、「本発明の処
置剤」という。）に関する。
ン残基から成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とす
る硫酸化グリコサミノグリカンにおいて、該ヘキスロン
酸残基の全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸基を有し
ない硫酸化グリコサミノグリカンまたはその塩を有効成
分とするクラミジア感染症処置剤（以下、「本発明の処
置剤」という。）に関する。
【０００８】さらに、本発明は、ヘキスロン酸残基とヘ
キソサミン残基から成る二糖単位の繰り返し構造を基本
骨格とする硫酸化グリコサミノグリカンにおいて、該ヘ
キスロン酸残基の全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸
基を有しない硫酸化グリコサミノグリカンまたはその塩
をクラミジアに接触させることを特徴とするクラミジア
の生育阻害方法にも関する。
キソサミン残基から成る二糖単位の繰り返し構造を基本
骨格とする硫酸化グリコサミノグリカンにおいて、該ヘ
キスロン酸残基の全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸
基を有しない硫酸化グリコサミノグリカンまたはその塩
をクラミジアに接触させることを特徴とするクラミジア
の生育阻害方法にも関する。
【０００９】
【発明の実施の形態】以下に本発明を更に詳細に説明す
る。本発明の処置剤の有効成分である、ヘキスロン酸残
基とヘキソサミン残基から成る二糖単位の繰り返し構造
を基本骨格とする硫酸化グリコサミノグリカンにおい
て、該ヘキスロン酸残基の全てまたは一部の２位の水酸
基に硫酸基を有しない硫酸化グリコサミノグリカン（以
下、場合によりその塩も含めて「２ＯＤＳＧ」とい
う。）は、天然物から抽出、精製等を行って得られるヘ
パリン、ヘパラン硫酸等の硫酸化グリコサミノグリカン
を原料として製造することができる。
る。本発明の処置剤の有効成分である、ヘキスロン酸残
基とヘキソサミン残基から成る二糖単位の繰り返し構造
を基本骨格とする硫酸化グリコサミノグリカンにおい
て、該ヘキスロン酸残基の全てまたは一部の２位の水酸
基に硫酸基を有しない硫酸化グリコサミノグリカン（以
下、場合によりその塩も含めて「２ＯＤＳＧ」とい
う。）は、天然物から抽出、精製等を行って得られるヘ
パリン、ヘパラン硫酸等の硫酸化グリコサミノグリカン
を原料として製造することができる。
【００１０】出発物質としての硫酸化グリコサミノグリ
カンは、ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基が交互に
結合した二糖の繰り返し構造を持つ硫酸化グリコサミノ
グリカンであり、具体的にはヘパリン、ヘパラン硫酸が
例示されるが、上記基本構造を有する限り、これには限
定されない。
カンは、ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基が交互に
結合した二糖の繰り返し構造を持つ硫酸化グリコサミノ
グリカンであり、具体的にはヘパリン、ヘパラン硫酸が
例示されるが、上記基本構造を有する限り、これには限
定されない。
【００１１】２ＯＤＳＧを構成するヘキスロン酸として
は、グルクロン酸、イズロン酸、ガラクツロン酸、マン
ヌロン酸を挙げることができ、好ましくはＤ−グルクロ
ン酸および／またはＬ−イズロン酸である。
は、グルクロン酸、イズロン酸、ガラクツロン酸、マン
ヌロン酸を挙げることができ、好ましくはＤ−グルクロ
ン酸および／またはＬ−イズロン酸である。
【００１２】２ＯＤＳＧを構成するヘキソサミンとして
は、グルコサミンおよびガラクトサミンを挙げることが
でき、好ましくはグルコサミンである。グルコサミンお
よびガラクトサミンは通常それぞれ、Ｄ−グルコサミン
およびＤ−ガラクトサミンであり、通常、２位がスルホ
アミノ基ではない場合はアセチルアミノ基である。
は、グルコサミンおよびガラクトサミンを挙げることが
でき、好ましくはグルコサミンである。グルコサミンお
よびガラクトサミンは通常それぞれ、Ｄ−グルコサミン
およびＤ−ガラクトサミンであり、通常、２位がスルホ
アミノ基ではない場合はアセチルアミノ基である。
【００１３】なお、２ＯＤＳＧにおいて、ヘキソサミン
がＤ−グルコサミンである場合、ヘパリン又はヘパラン
硫酸の基本骨格を有する硫酸化グリコサミノグリカンで
あり、本発明においては、これを２ＯＤＳＨと略称す
る。また、２ＯＤＳＧは構成ヘキスロン酸の全てまたは
一部の２位の水酸基に硫酸基を有しないという特徴を有
するものであるが、この特徴は以下の分析法で分析する
ことにより特定される。
がＤ−グルコサミンである場合、ヘパリン又はヘパラン
硫酸の基本骨格を有する硫酸化グリコサミノグリカンで
あり、本発明においては、これを２ＯＤＳＨと略称す
る。また、２ＯＤＳＧは構成ヘキスロン酸の全てまたは
一部の２位の水酸基に硫酸基を有しないという特徴を有
するものであるが、この特徴は以下の分析法で分析する
ことにより特定される。
【００１４】すなわち、ヘパリンまたはヘパラン硫酸等
の２ＯＤＳＨを後述の参考例１記載のグリコサミノグリ
カン分解酵素による分解と高速液体クロマトグラフィー
（以下、ＨＰＬＣともいう）による分析を組み合わせた
方法により二糖組成分析した場合、構成ヘキスロンの２
位の水酸基に硫酸基を有する不飽和二糖が、通常の硫酸
化グリコサミノグリカンと比べて明らかに減少してお
り、その不飽和二糖組成は、通常、ΔＤｉＨＳ−ＵＳが
０〜０．５モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（Ｕ，Ｎ）Ｓ
が０〜６．５モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（Ｕ，６）
Ｓが０〜０．５モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｔｒｉ（Ｕ，
６，Ｎ）Ｓが０〜１５．０モル％程度であることが好ま
しく、これらの合計は０〜２１モル％であることが好ま
しい。また、上記以外の不飽和二糖組成は、通常の硫酸
化グリコサミノグリカンと比べて増加しており、ΔＤｉ
ＨＳ−０Ｓが０〜８．０モル％程度、ΔＤｉＨＳ−６Ｓ
が０〜５．０モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ＮＳが８．０〜
２５．０モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（６，Ｎ）Ｓが
４０．０〜９２．０モル％程度である。
の２ＯＤＳＨを後述の参考例１記載のグリコサミノグリ
カン分解酵素による分解と高速液体クロマトグラフィー
（以下、ＨＰＬＣともいう）による分析を組み合わせた
方法により二糖組成分析した場合、構成ヘキスロンの２
位の水酸基に硫酸基を有する不飽和二糖が、通常の硫酸
化グリコサミノグリカンと比べて明らかに減少してお
り、その不飽和二糖組成は、通常、ΔＤｉＨＳ−ＵＳが
０〜０．５モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（Ｕ，Ｎ）Ｓ
が０〜６．５モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（Ｕ，６）
Ｓが０〜０．５モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｔｒｉ（Ｕ，
６，Ｎ）Ｓが０〜１５．０モル％程度であることが好ま
しく、これらの合計は０〜２１モル％であることが好ま
しい。また、上記以外の不飽和二糖組成は、通常の硫酸
化グリコサミノグリカンと比べて増加しており、ΔＤｉ
ＨＳ−０Ｓが０〜８．０モル％程度、ΔＤｉＨＳ−６Ｓ
が０〜５．０モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ＮＳが８．０〜
２５．０モル％程度、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（６，Ｎ）Ｓが
４０．０〜９２．０モル％程度である。
【００１５】二糖組成分析における２ＯＤＳＨの不飽和
二糖組成は、２ＯＤＳＨを酵素処理して得た下記一般式
で表される不飽和二糖組成の溶出位置を、標準不飽和二
糖の溶出位置と比較することにより分析することができ
る。ＨＰＬＣの溶出位置を、通常紫外部（例えば波長２
３２nm）の吸収によりモニターし、２ＯＤＳＨ中の不飽
和二糖の含量は、その溶出パターンの積分値（面積）を
濃度既知の標準不飽和二糖の溶出パターンの積分値（面
積）と比較することにより求めることができる。下記一
般式中の各置換基は表１の通りである。
二糖組成は、２ＯＤＳＨを酵素処理して得た下記一般式
で表される不飽和二糖組成の溶出位置を、標準不飽和二
糖の溶出位置と比較することにより分析することができ
る。ＨＰＬＣの溶出位置を、通常紫外部（例えば波長２
３２nm）の吸収によりモニターし、２ＯＤＳＨ中の不飽
和二糖の含量は、その溶出パターンの積分値（面積）を
濃度既知の標準不飽和二糖の溶出パターンの積分値（面
積）と比較することにより求めることができる。下記一
般式中の各置換基は表１の通りである。
【００１６】
【化１】
【００１７】
【表１】
【００１８】また、上記略号の示す構造は以下の通り表
記されることもある。 ΔＤｉＨＳ−０Ｓ：ΔＨｅｘＡ１→４ＧｌｃＮＡｃ、Δ
ＤｉＨＳ−６Ｓ：ΔＨｅｘＡ１→４ＧｌｃＮＡｃ（６
Ｓ）、ΔＤｉＨＳ−ＮＳ：ΔＨｅｘＡ１→４ＧｌｃＮ
Ｓ、ΔＤｉＨＳ−ＵＳ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４Ｇｌ
ｃＮＡｃ、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（６，Ｎ）Ｓ：ΔＨｅｘＡ
１→４ＧｌｃＮＳ（６Ｓ）、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（Ｕ，
Ｎ）Ｓ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４ＧｌｃＮＳ、ΔＤｉ
ＨＳ−ｄｉ（Ｕ，６）Ｓ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４Ｇ
ｌｃＮＡｃ（６Ｓ）、ΔＤｉＨＳ−ｔｒｉ（Ｕ，６，
Ｎ）Ｓ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４ＧｌｃＮＳ（６
Ｓ）。
記されることもある。 ΔＤｉＨＳ−０Ｓ：ΔＨｅｘＡ１→４ＧｌｃＮＡｃ、Δ
ＤｉＨＳ−６Ｓ：ΔＨｅｘＡ１→４ＧｌｃＮＡｃ（６
Ｓ）、ΔＤｉＨＳ−ＮＳ：ΔＨｅｘＡ１→４ＧｌｃＮ
Ｓ、ΔＤｉＨＳ−ＵＳ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４Ｇｌ
ｃＮＡｃ、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（６，Ｎ）Ｓ：ΔＨｅｘＡ
１→４ＧｌｃＮＳ（６Ｓ）、ΔＤｉＨＳ−ｄｉ（Ｕ，
Ｎ）Ｓ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４ＧｌｃＮＳ、ΔＤｉ
ＨＳ−ｄｉ（Ｕ，６）Ｓ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４Ｇ
ｌｃＮＡｃ（６Ｓ）、ΔＤｉＨＳ−ｔｒｉ（Ｕ，６，
Ｎ）Ｓ：ΔＨｅｘＡ（２Ｓ）１→４ＧｌｃＮＳ（６
Ｓ）。
【００１９】上記式中、ΔＨｅｘは不飽和ヘキスロン
酸、ＧｌｃＮＡｃはＮ−アセチルグルコサミン、Ｇｌｃ
ＮＳはＮ−スルホグルコサミン、カッコ内は硫酸基の結
合位置を示す。
酸、ＧｌｃＮＡｃはＮ−アセチルグルコサミン、Ｇｌｃ
ＮＳはＮ−スルホグルコサミン、カッコ内は硫酸基の結
合位置を示す。
【００２０】２ＯＤＳＧの重量平均分子量は、クラミジ
ア感染阻害効果を示す限り、特に限定されないが、３，
０００Da以上が好ましく、より好ましくは、３０００〜
５０，０００Daであり、３，０００〜１４，０００Daで
あることが更に好ましい。また、２ＯＤＳＧは、クラミ
ジア感染阻害効果の点では１２〜２００糖（二糖単位で
６〜１００単位）からなるオリゴ糖または多糖であるこ
とが好ましいが、抗凝固活性を考慮すると、より低分子
であることが好ましい。尚、オリゴ糖類および多糖類
は、通常、種々の重合度の糖鎖の集合体であるため、上
記の２ＯＤＳＧの構成糖の重合度の好ましい数は、厳密
にその数である必要はなく、統計的にその数の重合度の
オリゴ糖または多糖が、他の重合度のものより多い場合
も包含する。
ア感染阻害効果を示す限り、特に限定されないが、３，
０００Da以上が好ましく、より好ましくは、３０００〜
５０，０００Daであり、３，０００〜１４，０００Daで
あることが更に好ましい。また、２ＯＤＳＧは、クラミ
ジア感染阻害効果の点では１２〜２００糖（二糖単位で
６〜１００単位）からなるオリゴ糖または多糖であるこ
とが好ましいが、抗凝固活性を考慮すると、より低分子
であることが好ましい。尚、オリゴ糖類および多糖類
は、通常、種々の重合度の糖鎖の集合体であるため、上
記の２ＯＤＳＧの構成糖の重合度の好ましい数は、厳密
にその数である必要はなく、統計的にその数の重合度の
オリゴ糖または多糖が、他の重合度のものより多い場合
も包含する。
【００２１】また、２ＯＤＳＧは、その塩の形で使用す
ることが可能であり、塩としては、例えば、ナトリウム
塩、カルシウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マ
グネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、
アンモニウム塩、トリブチルアミン塩等が挙げられる
が、アルカリ金属塩が好ましく、特にナトリウム塩が好
ましい。
ることが可能であり、塩としては、例えば、ナトリウム
塩、カルシウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マ
グネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、
アンモニウム塩、トリブチルアミン塩等が挙げられる
が、アルカリ金属塩が好ましく、特にナトリウム塩が好
ましい。
【００２２】２ＯＤＳＧにおいて、ヘキソサミン残基
が、グルコサミン残基である２ＯＤＳＨ（いわゆるヘパ
リン骨格を有する物質）は、ブタ、ウシ等の哺乳動物の
臓器（腸、肺、肝、腎、血管等）から抽出、精製された
ヘパリン、ヘパラン硫酸等の硫酸化グリコサミノグリカ
ンを原料とし、その構成ヘキスロン酸残基の２位の水酸
基に結合している硫酸基を除去する脱硫酸化処理を行っ
て得ることができるが、脱硫酸化処理方法は、ヘキスロ
ン酸残基の２位の水酸基に結合している硫酸基を選択的
又は優先的に脱硫酸化することができる処理であれば、
特に限定されない。
が、グルコサミン残基である２ＯＤＳＨ（いわゆるヘパ
リン骨格を有する物質）は、ブタ、ウシ等の哺乳動物の
臓器（腸、肺、肝、腎、血管等）から抽出、精製された
ヘパリン、ヘパラン硫酸等の硫酸化グリコサミノグリカ
ンを原料とし、その構成ヘキスロン酸残基の２位の水酸
基に結合している硫酸基を除去する脱硫酸化処理を行っ
て得ることができるが、脱硫酸化処理方法は、ヘキスロ
ン酸残基の２位の水酸基に結合している硫酸基を選択的
又は優先的に脱硫酸化することができる処理であれば、
特に限定されない。
【００２３】例えば、Jasejaらの方法（Jaseja et al.,
Can. J. Chem., 67, 1449(1989)）など、公知の方法に
準拠して行うことができ、具体的には、硫酸化グリコサ
ミノグリカンのアルカリ性水溶液を調製し、これを凍結
乾燥する方法が挙げられる。更に、脱硫酸化処理後、適
当な溶媒を用いた溶媒沈殿、限外濾過、カラムクロマト
グラフィー、透析、凍結乾燥等、または、これらの組み
合わせによって容易に濃縮・精製することができる。具
体的には、前記脱硫酸化処理により得られた凍結乾燥パ
ウダーを、蒸留水に溶解し、pH７に調整し、透析処理
後、凍結乾燥処理に順次付する方法が挙げられる。
Can. J. Chem., 67, 1449(1989)）など、公知の方法に
準拠して行うことができ、具体的には、硫酸化グリコサ
ミノグリカンのアルカリ性水溶液を調製し、これを凍結
乾燥する方法が挙げられる。更に、脱硫酸化処理後、適
当な溶媒を用いた溶媒沈殿、限外濾過、カラムクロマト
グラフィー、透析、凍結乾燥等、または、これらの組み
合わせによって容易に濃縮・精製することができる。具
体的には、前記脱硫酸化処理により得られた凍結乾燥パ
ウダーを、蒸留水に溶解し、pH７に調整し、透析処理
後、凍結乾燥処理に順次付する方法が挙げられる。
【００２４】本発明者らは、硫酸化グリコサミノグリカ
ンのクラミジア感染阻害効果を検討するため、ヒト子宮
頸癌細胞由来のヒーラ２２９細胞（ＨｅＬａ２２９）を
用いて、実施例１記載の方法により２ＯＤＳＨ及びヘパ
リンの構成糖であるヘキスロン酸、グルコサミンの水酸
基およびアミノ基に結合している全ての硫酸基を脱硫酸
化した後、グルコサミンの２位のアミノ基を再硫酸化し
たヘパリン（以下、「ＣＤＳＮＳＨ」という。）のクラ
ミジア感染阻害効果を調べた。その結果、ヘパリンにお
いては、１０μｇ／mlの濃度では、約３％の細胞が感染
を示したが、１００μｇ／mlでは約１％であり、ほぼ完
全に感染を阻害した。２ＯＤＳＨに関しては、ヘパリン
と比較すると感染阻害活性はやや弱まるものの、１００
μg／mlではヘパリンと同様に、ほぼ完全に感染を阻害
した。一方、ＣＤＳＮＳＨは感染阻害効果を示さなかっ
た。
ンのクラミジア感染阻害効果を検討するため、ヒト子宮
頸癌細胞由来のヒーラ２２９細胞（ＨｅＬａ２２９）を
用いて、実施例１記載の方法により２ＯＤＳＨ及びヘパ
リンの構成糖であるヘキスロン酸、グルコサミンの水酸
基およびアミノ基に結合している全ての硫酸基を脱硫酸
化した後、グルコサミンの２位のアミノ基を再硫酸化し
たヘパリン（以下、「ＣＤＳＮＳＨ」という。）のクラ
ミジア感染阻害効果を調べた。その結果、ヘパリンにお
いては、１０μｇ／mlの濃度では、約３％の細胞が感染
を示したが、１００μｇ／mlでは約１％であり、ほぼ完
全に感染を阻害した。２ＯＤＳＨに関しては、ヘパリン
と比較すると感染阻害活性はやや弱まるものの、１００
μg／mlではヘパリンと同様に、ほぼ完全に感染を阻害
した。一方、ＣＤＳＮＳＨは感染阻害効果を示さなかっ
た。
【００２５】上記の様にヘパリンはクラミジア感染阻害
活性を有するが、出血等の副作用があり、医薬品として
の適用には好ましくない。一方、２ＯＤＳＨはヘパリン
と同等のクラミジア感染阻害活性を有し、かつ、出血等
の副作用は極めて弱い。
活性を有するが、出血等の副作用があり、医薬品として
の適用には好ましくない。一方、２ＯＤＳＨはヘパリン
と同等のクラミジア感染阻害活性を有し、かつ、出血等
の副作用は極めて弱い。
【００２６】ヘパリンおよび２ＯＤＳＨについて、出血
活性の指標となるＴＴ活性およびＡＰＴＴ活性を後述す
る試験法３および４に従って測定した。結果を表２に示
す。なお、ＴＴまたはＡＰＴＴにおける測定時間の上限
はそれぞれ１００秒までとした。ヘパリンのＴＴ活性ま
たはＡＰＴＴ活性を１００としたとき、対応する各被検
サンプルのＴＴ活性またはＡＰＴＴ活性をその相対値で
示した。
活性の指標となるＴＴ活性およびＡＰＴＴ活性を後述す
る試験法３および４に従って測定した。結果を表２に示
す。なお、ＴＴまたはＡＰＴＴにおける測定時間の上限
はそれぞれ１００秒までとした。ヘパリンのＴＴ活性ま
たはＡＰＴＴ活性を１００としたとき、対応する各被検
サンプルのＴＴ活性またはＡＰＴＴ活性をその相対値で
示した。
【００２７】
【表２】
【００２８】これにより、２ＯＤＳＨはＡＰＴＴ、ＴＴ
活性共にヘパリンと比較して極めて低く、安全性が高い
ことが判明した。
活性共にヘパリンと比較して極めて低く、安全性が高い
ことが判明した。
【００２９】本発明の処置剤は、クラミジアに感染した
対象の生体、すなわち、ヒトを含む哺乳動物、鳥類、そ
の他脊椎動物の治療、予防、症状の緩和等の処置を目的
として、非経口的または経口的に投与される薬剤であ
る。
対象の生体、すなわち、ヒトを含む哺乳動物、鳥類、そ
の他脊椎動物の治療、予防、症状の緩和等の処置を目的
として、非経口的または経口的に投与される薬剤であ
る。
【００３０】本発明の処置剤を生体に投与する際の剤型
および投与経路としては、対象となる疾患の性質や重篤
度に応じて適宜選択することができる。例えば、それら
をそのまま、または他の薬理学的に許容され得る担体、
賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤等と共に製剤
化し、例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ
剤、液剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、座剤、膣剤、軟
膏剤、ゲル剤、スプレー剤、点眼剤、点鼻剤等経口的ま
たは非経口的に安全に投与することができる。特に、座
剤、膣剤、軟膏剤、ゲル剤、スプレー剤として非経口的
に投与することが好ましい。
および投与経路としては、対象となる疾患の性質や重篤
度に応じて適宜選択することができる。例えば、それら
をそのまま、または他の薬理学的に許容され得る担体、
賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤等と共に製剤
化し、例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、ドライシロップ
剤、液剤、錠剤、カプセル剤、注射剤、座剤、膣剤、軟
膏剤、ゲル剤、スプレー剤、点眼剤、点鼻剤等経口的ま
たは非経口的に安全に投与することができる。特に、座
剤、膣剤、軟膏剤、ゲル剤、スプレー剤として非経口的
に投与することが好ましい。
【００３１】本発明の２ＯＤＳＧの配合量並びに投与量
は、その製剤の投与方法、投与形態、使用目的、患者の
具体的症状、患者の体重などに応じて個別に決定される
べき事項であり、特に限定されないが、臨床投与量とし
て１日当たり概ね１０μg／Kg〜１０mg／Kg程度を例示
することができる。また、上記処置剤の投与間隔は１日
１回程度でも可能であり、１日１〜３回、またはそれ以
上の回数に分けて投与することもできる。また、本発明
の処置剤を性交渉時におけるクラミジア感染を防止する
ために膣内投与する場合、その投与量は１回概ね０．１
mg〜１０mg程度が好ましい。
は、その製剤の投与方法、投与形態、使用目的、患者の
具体的症状、患者の体重などに応じて個別に決定される
べき事項であり、特に限定されないが、臨床投与量とし
て１日当たり概ね１０μg／Kg〜１０mg／Kg程度を例示
することができる。また、上記処置剤の投与間隔は１日
１回程度でも可能であり、１日１〜３回、またはそれ以
上の回数に分けて投与することもできる。また、本発明
の処置剤を性交渉時におけるクラミジア感染を防止する
ために膣内投与する場合、その投与量は１回概ね０．１
mg〜１０mg程度が好ましい。
【００３２】また、本発明は、２ＯＤＳＧをクラミジ
ア、特にその感染性粒子（ElementaryBody；ＥＢ）と接
触させ、生体細胞におけるクラジミアの生育を阻害する
方法にも関する。本方法は、例えば、粘膜、避妊具等に
クラミジア感染を阻害するのに十分な量の２ＯＤＳＧを
予め塗布、コーティング又は結合させ、生体へのクラミ
ジアの感染を防止する方法等も包含する。さらに、動物
細胞を培養する際に培地中に、２ＯＤＳＧを存在させ
て、該細胞にクラミジアが感染することを防止する方法
も包含する。
ア、特にその感染性粒子（ElementaryBody；ＥＢ）と接
触させ、生体細胞におけるクラジミアの生育を阻害する
方法にも関する。本方法は、例えば、粘膜、避妊具等に
クラミジア感染を阻害するのに十分な量の２ＯＤＳＧを
予め塗布、コーティング又は結合させ、生体へのクラミ
ジアの感染を防止する方法等も包含する。さらに、動物
細胞を培養する際に培地中に、２ＯＤＳＧを存在させ
て、該細胞にクラミジアが感染することを防止する方法
も包含する。
【００３３】尚、本発明におけるクラジミア感染阻害の
メカニズムは、生体細胞のヘパリン様またはヘパラン硫
酸様プロテオグリカンであるレセプターもしくはアクセ
プターへのクラミジア感染性粒子（ＥＢ）の吸着を防止
することによるものと考えられるので、以上説明した通
り、ＥＢが生体細胞の上記レセプターもしくはアクセプ
ターに吸着する段階を、２ＯＤＳＧによって競合的に阻
害する方法のみならず、生体細胞における上記レセプタ
ーもしくはアクセプターに存在するヘパリン様またはヘ
パラン硫酸様の糖鎖を、該糖鎖を分解するグリコサミノ
グリカン分解酵素で除去することによっても阻害するこ
とができる。この様な酵素としては、例えばヘパリナー
ゼＩが例示される。
メカニズムは、生体細胞のヘパリン様またはヘパラン硫
酸様プロテオグリカンであるレセプターもしくはアクセ
プターへのクラミジア感染性粒子（ＥＢ）の吸着を防止
することによるものと考えられるので、以上説明した通
り、ＥＢが生体細胞の上記レセプターもしくはアクセプ
ターに吸着する段階を、２ＯＤＳＧによって競合的に阻
害する方法のみならず、生体細胞における上記レセプタ
ーもしくはアクセプターに存在するヘパリン様またはヘ
パラン硫酸様の糖鎖を、該糖鎖を分解するグリコサミノ
グリカン分解酵素で除去することによっても阻害するこ
とができる。この様な酵素としては、例えばヘパリナー
ゼＩが例示される。
【００３４】
【実施例】以下の実施例は、本発明を更に具体的に説明
するが、いかなる意味においても本発明を限定するもの
ではない。なお、本実施例における試験法は以下の通り
である。
するが、いかなる意味においても本発明を限定するもの
ではない。なお、本実施例における試験法は以下の通り
である。
【００３５】参考例１ 後述する本発明の実施例で使用した各種の硫酸化グリコ
サミノグリカンの分析は、以下の試験法１〜４に示す方
法によって行った。 試験法１ 〔酵素消化による二糖分析〕硫酸化グリコサミノグリカ
ン（２ＯＤＳＨ、ヘパリン）における硫酸基の置換位置
の分析方法は、次のようにして行った。すなわち、対象
とする各硫酸化グリコサミノグリカンをグリコサミノグ
リカン分解酵素を用いて酵素消化し、精製した不飽和二
糖を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で分析し
た〔新生化学実験講座３，糖質II（東京化学同人刊、１
９９１年）ｐ４９〜６２参照〕。各不飽和二糖のピーク
面積を計算し、全ピーク面積の和に対する各ピーク面積
の割合（％）を各不飽和二糖の組成割合とした。この割
合は、酵素消化物中の各不飽和二糖のモル％に相当し、
ひいては、分析対象の硫酸化グリコサミノグリカンにお
ける種々の位置に硫酸基を有する二糖単位のモル％を反
映するものである。
サミノグリカンの分析は、以下の試験法１〜４に示す方
法によって行った。 試験法１ 〔酵素消化による二糖分析〕硫酸化グリコサミノグリカ
ン（２ＯＤＳＨ、ヘパリン）における硫酸基の置換位置
の分析方法は、次のようにして行った。すなわち、対象
とする各硫酸化グリコサミノグリカンをグリコサミノグ
リカン分解酵素を用いて酵素消化し、精製した不飽和二
糖を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で分析し
た〔新生化学実験講座３，糖質II（東京化学同人刊、１
９９１年）ｐ４９〜６２参照〕。各不飽和二糖のピーク
面積を計算し、全ピーク面積の和に対する各ピーク面積
の割合（％）を各不飽和二糖の組成割合とした。この割
合は、酵素消化物中の各不飽和二糖のモル％に相当し、
ひいては、分析対象の硫酸化グリコサミノグリカンにお
ける種々の位置に硫酸基を有する二糖単位のモル％を反
映するものである。
【００３６】（１）ヘパリン、２ＯＤＳＨの分解酵素に
よる消化 新生化学実験講座３、糖質II（東京化学同人刊、１９９
１年）ｐ４９〜６２に記載の方法により、２mM酢酸カル
シウムを含む２０mM酢酸ナトリウム緩衝液（pH７．０）
２２０μlに、ヘパリン、２ＯＤＳＨ２ロット（参考例
２参照；以下、それぞれ、「２ＯＤＳＨ−１」、「２Ｏ
ＤＳＨ−２」という。）各１．０mgを溶解して、２０mU
のヘパリナーゼ、２０mUのヘパリチナーゼIおよびIIを
加えて、３７℃で２時間反応させた。
よる消化 新生化学実験講座３、糖質II（東京化学同人刊、１９９
１年）ｐ４９〜６２に記載の方法により、２mM酢酸カル
シウムを含む２０mM酢酸ナトリウム緩衝液（pH７．０）
２２０μlに、ヘパリン、２ＯＤＳＨ２ロット（参考例
２参照；以下、それぞれ、「２ＯＤＳＨ−１」、「２Ｏ
ＤＳＨ−２」という。）各１．０mgを溶解して、２０mU
のヘパリナーゼ、２０mUのヘパリチナーゼIおよびIIを
加えて、３７℃で２時間反応させた。
【００３７】（２）ＨＰＬＣによる分析 ヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および２ＯＤＳＨ−２を上記
（１）に従い分解酵素により消化を行った後の溶液５０
μlを、ＨＰＬＣ（医理化、モデル852型）を用いて分析
した。イオン交換樹脂カラム（ダイオネックス社、Carb
oPac PA-1カラム４．０mm×２５０mm）を使用し、２３
２nmでの吸光度を測定した。不飽和二糖（４〜１２糖）
スタンダードを基準とし（Yamada, et al., J. Biol. C
hem., 270, 8696-8706, (1995)）、流速１ml／分で、塩
化リチウムを用いたグラジエント系（５０mM→２．５
M）を用いる方法に準拠した（Kariya, et al., Comp.Bi
ochem.Physiol., 103B, 473, (1992)）。
（１）に従い分解酵素により消化を行った後の溶液５０
μlを、ＨＰＬＣ（医理化、モデル852型）を用いて分析
した。イオン交換樹脂カラム（ダイオネックス社、Carb
oPac PA-1カラム４．０mm×２５０mm）を使用し、２３
２nmでの吸光度を測定した。不飽和二糖（４〜１２糖）
スタンダードを基準とし（Yamada, et al., J. Biol. C
hem., 270, 8696-8706, (1995)）、流速１ml／分で、塩
化リチウムを用いたグラジエント系（５０mM→２．５
M）を用いる方法に準拠した（Kariya, et al., Comp.Bi
ochem.Physiol., 103B, 473, (1992)）。
【００３８】６種の不飽和二糖標品（８nmol each/sho
t）の溶出順は、ΔDiHS-0S（保持時間2.6分）、ΔDiHS-
NS（保持時間 10.9分）、ΔDiHS-6S（保持時間 12.0
分）、ΔDiHS-di(6,N)S（保持時間 15.2分）、ΔDiHS-d
i(U,N)S（保持時間 16.3分）、ΔDiHS-tri(U,6,N)S（保
持時間21.9分）であった。
t）の溶出順は、ΔDiHS-0S（保持時間2.6分）、ΔDiHS-
NS（保持時間 10.9分）、ΔDiHS-6S（保持時間 12.0
分）、ΔDiHS-di(6,N)S（保持時間 15.2分）、ΔDiHS-d
i(U,N)S（保持時間 16.3分）、ΔDiHS-tri(U,6,N)S（保
持時間21.9分）であった。
【００３９】試験法２ 〔分子量測定〕ヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および２ＯＤ
ＳＨ−２の３％溶液１０μlをＨＰＬＣによるゲルろ過
で分析した。使用カラムは４，０００、３，０００およ
び２，５００Ｇタイプの TSKgel-PWXLカラム（東ソー、
7.8mm × 300mm）を用い、溶出液に０．２M塩化ナトリ
ウムを使用して、１．０ml／分の流速で展開した。ヘパ
リン、２ＯＤＳＨ−１および２ＯＤＳＨ−２の検出には
示差屈折計（島津製作所、AID-2A）を用いた。本発明に
おける重量平均分子量（Mw）はヘパリンの分子量標準品
を対照にして求めた（Kaneda, et al., Biochem. Bioph
ys. Res. Com.,220,108-112(1996)）。その計算式は、
ＭＷ＝１０(10.17-0.19xRT)、〔RT:ピーク頂点の保持時
間（分）〕である。
ＳＨ−２の３％溶液１０μlをＨＰＬＣによるゲルろ過
で分析した。使用カラムは４，０００、３，０００およ
び２，５００Ｇタイプの TSKgel-PWXLカラム（東ソー、
7.8mm × 300mm）を用い、溶出液に０．２M塩化ナトリ
ウムを使用して、１．０ml／分の流速で展開した。ヘパ
リン、２ＯＤＳＨ−１および２ＯＤＳＨ−２の検出には
示差屈折計（島津製作所、AID-2A）を用いた。本発明に
おける重量平均分子量（Mw）はヘパリンの分子量標準品
を対照にして求めた（Kaneda, et al., Biochem. Bioph
ys. Res. Com.,220,108-112(1996)）。その計算式は、
ＭＷ＝１０(10.17-0.19xRT)、〔RT:ピーク頂点の保持時
間（分）〕である。
【００４０】試験法３ 〔活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）活性
の測定〕ＡＰＴＴの測定のため、ラット（ＳＤ系雄性ラ
ット（１９４〜２２４ｇ）、チャールスリバー）の下大
動脈より３．２％クエン酸１／１０容量で採血し、血液
を１０００×ｇで１０分間遠心分離して得た血漿１００
μlと、様々な濃度のヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および
２ＯＤＳＨ−２を各１００μlずつ測定用カップに入
れ、３７℃で１分間保温した。その後、あらかじめ３７
℃に保温しておいたアクチン（商品名：ウェルファイド
（株））１００μlを添加し、さらに２分間保温した。
次いで、３７℃の保温しておいた０．２MＣａＣｌ2溶液
１００μlを添加し、この時より凝固が起こるまでの時
間を血液凝固自動測定装置（KC-10A：アメルング社）で
測定した。なお、ＡＰＴＴにおける測定時間の上限は１
００秒までとした。
の測定〕ＡＰＴＴの測定のため、ラット（ＳＤ系雄性ラ
ット（１９４〜２２４ｇ）、チャールスリバー）の下大
動脈より３．２％クエン酸１／１０容量で採血し、血液
を１０００×ｇで１０分間遠心分離して得た血漿１００
μlと、様々な濃度のヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および
２ＯＤＳＨ−２を各１００μlずつ測定用カップに入
れ、３７℃で１分間保温した。その後、あらかじめ３７
℃に保温しておいたアクチン（商品名：ウェルファイド
（株））１００μlを添加し、さらに２分間保温した。
次いで、３７℃の保温しておいた０．２MＣａＣｌ2溶液
１００μlを添加し、この時より凝固が起こるまでの時
間を血液凝固自動測定装置（KC-10A：アメルング社）で
測定した。なお、ＡＰＴＴにおける測定時間の上限は１
００秒までとした。
【００４１】試験法４ 〔トロンビン時間（TT）の測定〕上記試験法３で得た血
漿１００μlと、様々な濃度のヘパリン、２ＯＤＳＨ−
１および２ＯＤＳＨ−２を各１００μlずつ測定用カッ
プに入れ、３７℃で１分間保温した。その後、３７℃に
保温しておいたトロンビン（商品名：ウェルファイド
（株）、１０U／ml）１００μlを添加し、この時より凝
固が起こるまでの時間を血液凝固自動測定装置（KC-10
A：アメルング社）で測定した。
漿１００μlと、様々な濃度のヘパリン、２ＯＤＳＨ−
１および２ＯＤＳＨ−２を各１００μlずつ測定用カッ
プに入れ、３７℃で１分間保温した。その後、３７℃に
保温しておいたトロンビン（商品名：ウェルファイド
（株）、１０U／ml）１００μlを添加し、この時より凝
固が起こるまでの時間を血液凝固自動測定装置（KC-10
A：アメルング社）で測定した。
【００４２】〔本明細書におけるヘパリン〕以下に示す
物性を有するブタ小腸由来ヘパリンのナトリウム塩（サ
イエンティフィックプロテインラボラトリー社製 LotN
o.40210910）を、上記試験法１〜４の分析における対照
物質および下記参考例２における２ＯＤＳＨの合成原料
として用いた。 ヘパリンの物性 （１）上記試験法１記載の二糖組成分析法による測定値
から算出した不飽和二糖組成はΔDiHS-0S：３．７％、
ΔDiHS-NS：３．２％、ΔDiHS-6S：４．７％、ΔDiHS-U
S：１．５％、ΔDiHS-di(6,N)S：１４．７％、ΔDiHS-d
i(U,N)S：６．８％、ΔDiHS-di(U,6)S：０．０％、ΔDi
HS-tri(U,6,N)S：６１．３％であり、未同定ピーク：
４．１％である。（％は全てモル％を表す）。 （２）日本薬局方に具体的に収載された測定法で測定さ
れた抗血液凝固活性が１７０〜１９０IU/mgである。 （３）重量平均分子量が１１，０００〜１４，０００Da
である（参考例２参照）。
物性を有するブタ小腸由来ヘパリンのナトリウム塩（サ
イエンティフィックプロテインラボラトリー社製 LotN
o.40210910）を、上記試験法１〜４の分析における対照
物質および下記参考例２における２ＯＤＳＨの合成原料
として用いた。 ヘパリンの物性 （１）上記試験法１記載の二糖組成分析法による測定値
から算出した不飽和二糖組成はΔDiHS-0S：３．７％、
ΔDiHS-NS：３．２％、ΔDiHS-6S：４．７％、ΔDiHS-U
S：１．５％、ΔDiHS-di(6,N)S：１４．７％、ΔDiHS-d
i(U,N)S：６．８％、ΔDiHS-di(U,6)S：０．０％、ΔDi
HS-tri(U,6,N)S：６１．３％であり、未同定ピーク：
４．１％である。（％は全てモル％を表す）。 （２）日本薬局方に具体的に収載された測定法で測定さ
れた抗血液凝固活性が１７０〜１９０IU/mgである。 （３）重量平均分子量が１１，０００〜１４，０００Da
である（参考例２参照）。
【００４３】参考例２ 〔２ＯＤＳＨの合成〕ヘパリンを原料とし、その２−Ｏ
−脱硫酸化反応をJasejaらの方法（Jaseja et al.,Can.
J. Chem.,67,1449(1989)）を部分的に改変した以下の
方法により実施した。すなわち、２００mgのヘパリンナ
トリウム塩を２０mlの０．４規定の水酸化ナトリウムに
溶解し、直ちに凍結乾燥処理を行った。得られた凍結乾
燥パウダーを２０mlの蒸留水に溶解した後、１規定の酢
酸を添加することによりpH７に調整した。次いで、この
溶液を透析処理、凍結乾燥処理に順次付した。その結
果、１６５mgの２ＯＤＳＨをナトリウム塩として得た。
この標品を２ＯＤＳＨ−１とした。又、上記凍結乾燥処
理を２回行うことにより、より完全に２−Ｏ−脱硫酸化
した２ＯＤＳＨをナトリウム塩として１５０mg得た。こ
の標品を２ＯＤＳＨ−２とした。
−脱硫酸化反応をJasejaらの方法（Jaseja et al.,Can.
J. Chem.,67,1449(1989)）を部分的に改変した以下の
方法により実施した。すなわち、２００mgのヘパリンナ
トリウム塩を２０mlの０．４規定の水酸化ナトリウムに
溶解し、直ちに凍結乾燥処理を行った。得られた凍結乾
燥パウダーを２０mlの蒸留水に溶解した後、１規定の酢
酸を添加することによりpH７に調整した。次いで、この
溶液を透析処理、凍結乾燥処理に順次付した。その結
果、１６５mgの２ＯＤＳＨをナトリウム塩として得た。
この標品を２ＯＤＳＨ−１とした。又、上記凍結乾燥処
理を２回行うことにより、より完全に２−Ｏ−脱硫酸化
した２ＯＤＳＨをナトリウム塩として１５０mg得た。こ
の標品を２ＯＤＳＨ−２とした。
【００４４】〔ゲル濾過ＨＰＬＣによる分子量測定〕各
５０μg／５μlのヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および２Ｏ
ＤＳＨ−２を、０．２規定のＮａＣｌで平衡化した４，
０００、３，０００および２，５００Ｇタイプの TSKge
l-PWXLカラム（東ソー、7.8mm × 300mm）を上流から順
に各一本ずつ連結した東ソー社製ＣＣＰＭ型ＨＰＬＣに
付し、溶出液に０．２M塩化ナトリウムを使用して、
１．０ml／分の流速で展開し、ゲル濾過（GPC-）ＨＰＬ
Ｃ分析を行った。なお、被検物質の検出には示差屈折計
（島津製作所、AID-2A）を用い、カラムオーヴン中４０
℃、０．６ml／mlの定流速下で、示差屈折（RI）を指標
とした。その結果、ヘパリン、２ＯＤＳＨ−１の保持時
間は、それぞれ３３．５０および３３．６０分であっ
た。得られた結果を基に算出した分子量を表３に示す。
５０μg／５μlのヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および２Ｏ
ＤＳＨ−２を、０．２規定のＮａＣｌで平衡化した４，
０００、３，０００および２，５００Ｇタイプの TSKge
l-PWXLカラム（東ソー、7.8mm × 300mm）を上流から順
に各一本ずつ連結した東ソー社製ＣＣＰＭ型ＨＰＬＣに
付し、溶出液に０．２M塩化ナトリウムを使用して、
１．０ml／分の流速で展開し、ゲル濾過（GPC-）ＨＰＬ
Ｃ分析を行った。なお、被検物質の検出には示差屈折計
（島津製作所、AID-2A）を用い、カラムオーヴン中４０
℃、０．６ml／mlの定流速下で、示差屈折（RI）を指標
とした。その結果、ヘパリン、２ＯＤＳＨ−１の保持時
間は、それぞれ３３．５０および３３．６０分であっ
た。得られた結果を基に算出した分子量を表３に示す。
【００４５】
【表３】
【００４６】〔二糖組成分析〕ヘパリン、２ＯＤＳＨ−
１および２ＯＤＳＨ−２の不飽和二糖組成の二糖組成分
析は、参考例１の試験法１に記載の方法に従って実施し
た。結果を表３に示す。
１および２ＯＤＳＨ−２の不飽和二糖組成の二糖組成分
析は、参考例１の試験法１に記載の方法に従って実施し
た。結果を表３に示す。
【００４７】参考例３ 〔低分子化２ＯＤＳＨ画分の調製〕１００mgの２ＯＤＳ
Ｈ−１を含有する２mM酢酸含有カルシウム含有２０mMリ
ン酸カリウム緩衝液（pH７．０）１０mlに０．1単位の
ヘパリチナーゼＩ（生化学工業社製）を添加し、３７℃
で一晩、部分消化した。５分間煮沸して酵素を失活させ
た後、Superdex 30pg（２．６×６０cm，ファルマシア
社製）ゲル濾過カラムで分画した。平衡化および展開溶
液には０．２M酢酸アンモニウムを用いた。上記カラム
から溶出した１２糖以上の画分を集め、凍結乾燥して１
８mgの標品（低分子化２ＯＤＳＨ画分）を得た。分子量
範囲は約３，０００〜８，０００Daであった。又、上記
と同様の方法で、それぞれ、２ＯＤＳＨの４，６，８，
１０、１２糖に相当する画分を得た。
Ｈ−１を含有する２mM酢酸含有カルシウム含有２０mMリ
ン酸カリウム緩衝液（pH７．０）１０mlに０．1単位の
ヘパリチナーゼＩ（生化学工業社製）を添加し、３７℃
で一晩、部分消化した。５分間煮沸して酵素を失活させ
た後、Superdex 30pg（２．６×６０cm，ファルマシア
社製）ゲル濾過カラムで分画した。平衡化および展開溶
液には０．２M酢酸アンモニウムを用いた。上記カラム
から溶出した１２糖以上の画分を集め、凍結乾燥して１
８mgの標品（低分子化２ＯＤＳＨ画分）を得た。分子量
範囲は約３，０００〜８，０００Daであった。又、上記
と同様の方法で、それぞれ、２ＯＤＳＨの４，６，８，
１０、１２糖に相当する画分を得た。
【００４８】参考例４ 〔血液凝固系に対するヘパリン、２ＯＤＳＨの影響〕血
液凝固系に対するヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および２Ｏ
ＤＳＨ−２の影響を前記試験法３および４にしたがって
分析した。ヘパリン等何も添加しない状態で測定したＡ
ＰＴＴおよびＴＴの値（以下、正常値と言う）の２倍の
凝固時間を示すヘパリンの濃度はそれぞれ、０．５４μ
g／mlと０．１３μg／mlであった。同様に、正常値を２
倍に延長させる２ＯＤＳＨ−１および２ＯＤＳＨ−２の
濃度を求め、ヘパリンのＡＰＴＴ活性およびＴＴ活性そ
れぞれを１００とし、２ＯＤＳＨ−１、２ＯＤＳＨ−２
のＡＰＴＴ活性およびＴＴ活性それぞれをその相対値で
示した。
液凝固系に対するヘパリン、２ＯＤＳＨ−１および２Ｏ
ＤＳＨ−２の影響を前記試験法３および４にしたがって
分析した。ヘパリン等何も添加しない状態で測定したＡ
ＰＴＴおよびＴＴの値（以下、正常値と言う）の２倍の
凝固時間を示すヘパリンの濃度はそれぞれ、０．５４μ
g／mlと０．１３μg／mlであった。同様に、正常値を２
倍に延長させる２ＯＤＳＨ−１および２ＯＤＳＨ−２の
濃度を求め、ヘパリンのＡＰＴＴ活性およびＴＴ活性そ
れぞれを１００とし、２ＯＤＳＨ−１、２ＯＤＳＨ−２
のＡＰＴＴ活性およびＴＴ活性それぞれをその相対値で
示した。
【００４９】実施例１ 〔ヘパリン、２ＯＤＳＨ−２、ＣＤＳＮＳのＨｅＬａ２
２９細胞へのクラミジア感染に対する影響〕
２９細胞へのクラミジア感染に対する影響〕
【００５０】３×１０5cells／mlのヒト子宮頸癌細胞由
来ＨｅＬａ２２９細胞を２４穴プレートの各ウェルに１
mlずつ分注し、２４時間前培養した。クラミジア感染性
粒子（elementary body：ＥＢ）液に、予めHank's bala
nced salt solution（ＨＢＳＳ）（ＧＩＢＣＯ社製）に
溶解したヘパリン、２ＯＤＳＨ−２及びＣＤＳＮＳＨ
（生化学工業社製）を各濃度となるように添加して懸濁
した。このＥＢ懸濁液を前培養した単層ＨｅＬａ２２９
細胞に２００μlずつ分注し、室温で１時間培養した。
単層ＨｅＬａ２２９細胞をＨＢＳＳにて３回洗浄し、１
０μg／mlシクロヘキサミドを加えた１０％牛胎児血
清、０．５％グルコース含有イーグルＭＥＭ培地（ＣＭ
ＧＡ培地，ＩＣＮ Biochem社製）にて３７℃で４８時
間培養した。培養後トリプシン／ＥＤＴＡ液にて細胞を
回収し、細胞を１００％エタノールで５分間固定、親水
化し、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標）を添加した
ＰＢＳにて２回洗浄した。フルオレセンイソチオシアナ
ート（ＦＩＴＣ）標識抗クラミジア抗体（マイクロトラ
ック クラミジアトラコマチスダイレクト テスト；Ｓ
ＹＶＡ社製）で固定細胞を染色し、フローサートメトリ
ーにて感染陽性細胞率を測定した。結果を図１に示す。
その結果、ヘパリンおよび２ＯＤＳＨ−２は１００μg
／mlにおいてほぼ完全にクラミジア感染を阻害したが、
ＣＤＳＮＳＨは感染阻害効果を示さなかった。
来ＨｅＬａ２２９細胞を２４穴プレートの各ウェルに１
mlずつ分注し、２４時間前培養した。クラミジア感染性
粒子（elementary body：ＥＢ）液に、予めHank's bala
nced salt solution（ＨＢＳＳ）（ＧＩＢＣＯ社製）に
溶解したヘパリン、２ＯＤＳＨ−２及びＣＤＳＮＳＨ
（生化学工業社製）を各濃度となるように添加して懸濁
した。このＥＢ懸濁液を前培養した単層ＨｅＬａ２２９
細胞に２００μlずつ分注し、室温で１時間培養した。
単層ＨｅＬａ２２９細胞をＨＢＳＳにて３回洗浄し、１
０μg／mlシクロヘキサミドを加えた１０％牛胎児血
清、０．５％グルコース含有イーグルＭＥＭ培地（ＣＭ
ＧＡ培地，ＩＣＮ Biochem社製）にて３７℃で４８時
間培養した。培養後トリプシン／ＥＤＴＡ液にて細胞を
回収し、細胞を１００％エタノールで５分間固定、親水
化し、０．１％Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標）を添加した
ＰＢＳにて２回洗浄した。フルオレセンイソチオシアナ
ート（ＦＩＴＣ）標識抗クラミジア抗体（マイクロトラ
ック クラミジアトラコマチスダイレクト テスト；Ｓ
ＹＶＡ社製）で固定細胞を染色し、フローサートメトリ
ーにて感染陽性細胞率を測定した。結果を図１に示す。
その結果、ヘパリンおよび２ＯＤＳＨ−２は１００μg
／mlにおいてほぼ完全にクラミジア感染を阻害したが、
ＣＤＳＮＳＨは感染阻害効果を示さなかった。
【００５１】実施例２ 〔低分子化２ＯＤＳＨ画分のＨｅＬａ２２９細胞へのク
ラミジア感染に対する影響〕実施例１と同様の方法で、
ＥＢ液に、予めＨＢＳＳに溶解したヘパリン、２ＯＤＳ
Ｈ−２、参考例３で調製した低分子化２ＯＤＳＨ画分を
それぞれ１００μg／mlとなるよう添加し懸濁後、この
ＥＢ懸濁液をＨｅＬａ２２９細胞に感染させ、これらの
被検物質によるクラミジア感染の阻害効果を調べた。対
照としては、参考例３で調製した２ＯＤＳＨのオリゴ糖
画分（４，６，８，１０，１２糖）を用いた。その結
果、低分子化２ＯＤＳＨ画分においては１０％程度まで
クラミジア感染を抑制したが、１２糖以下の上記各オリ
ゴ糖画分は感染阻害効果は示さなかった。従って、クラ
ミジア感染阻害効果を示す２ＯＤＳＨは、１２糖以上の
糖鎖が必要なことが判明した。結果を図２に示す。
ラミジア感染に対する影響〕実施例１と同様の方法で、
ＥＢ液に、予めＨＢＳＳに溶解したヘパリン、２ＯＤＳ
Ｈ−２、参考例３で調製した低分子化２ＯＤＳＨ画分を
それぞれ１００μg／mlとなるよう添加し懸濁後、この
ＥＢ懸濁液をＨｅＬａ２２９細胞に感染させ、これらの
被検物質によるクラミジア感染の阻害効果を調べた。対
照としては、参考例３で調製した２ＯＤＳＨのオリゴ糖
画分（４，６，８，１０，１２糖）を用いた。その結
果、低分子化２ＯＤＳＨ画分においては１０％程度まで
クラミジア感染を抑制したが、１２糖以下の上記各オリ
ゴ糖画分は感染阻害効果は示さなかった。従って、クラ
ミジア感染阻害効果を示す２ＯＤＳＨは、１２糖以上の
糖鎖が必要なことが判明した。結果を図２に示す。
【００５２】実施例３ 〔ヘパリン、２ＯＤＳＨ−２及びＣＤＳＮＳＨ前処理Ｅ
ＢのＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染に対する影
響〕１００μｇ／mlのヘパリン、２ＯＤＳＨ−２、ＣＤ
ＳＮＳＨをそれぞれ添加したクラミジア感染性粒子（el
ementary body：ＥＢ）液を調製し、３７℃で６０分保
温した。保温後、ＥＢ液をHank's balanced salt Solut
ion（ＨＢＳＳ）（ＧＩＢＣＯ社製）に懸濁し、８００
０Ｇで３０分間の遠心を行った。ペレットをＨＢＳＳに
再懸濁し、１分間の超音波処理をし、更に８０００Ｇで
３０分間の遠心を行い、ペレットを少量のＨＢＳＳに再
懸濁することによりＥＢ懸濁を調製した。この前処理Ｅ
Ｂ懸濁液のＨｅＬａ細胞への感染率を実施例１と同様の
方法で測定した。その結果、ヘパリン及び２ＯＤＳＨ−
２でＥＢを前処理することによりクラミジア感染を阻害
したが、ＣＤＳＮＳＨは感染阻害効果を示さなかった。
結果を図３に示す。
ＢのＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染に対する影
響〕１００μｇ／mlのヘパリン、２ＯＤＳＨ−２、ＣＤ
ＳＮＳＨをそれぞれ添加したクラミジア感染性粒子（el
ementary body：ＥＢ）液を調製し、３７℃で６０分保
温した。保温後、ＥＢ液をHank's balanced salt Solut
ion（ＨＢＳＳ）（ＧＩＢＣＯ社製）に懸濁し、８００
０Ｇで３０分間の遠心を行った。ペレットをＨＢＳＳに
再懸濁し、１分間の超音波処理をし、更に８０００Ｇで
３０分間の遠心を行い、ペレットを少量のＨＢＳＳに再
懸濁することによりＥＢ懸濁を調製した。この前処理Ｅ
Ｂ懸濁液のＨｅＬａ細胞への感染率を実施例１と同様の
方法で測定した。その結果、ヘパリン及び２ＯＤＳＨ−
２でＥＢを前処理することによりクラミジア感染を阻害
したが、ＣＤＳＮＳＨは感染阻害効果を示さなかった。
結果を図３に示す。
【００５３】実施例４ 〔ヘパリナーゼＩのＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア
感染に対する影響〕実施例１と同様の方法に従って、ヘ
パリナーゼＩ（ＳＩＧＭＡ社製）についても同様に、ク
ラミジア感染陽性細胞率を測定した。その結果、１IU／
mlの濃度において、細胞の感染は約９．２％であり、ヘ
パリナーゼＩはクラミジア感染を阻害することが分かっ
た。結果を図４に示す。
感染に対する影響〕実施例１と同様の方法に従って、ヘ
パリナーゼＩ（ＳＩＧＭＡ社製）についても同様に、ク
ラミジア感染陽性細胞率を測定した。その結果、１IU／
mlの濃度において、細胞の感染は約９．２％であり、ヘ
パリナーゼＩはクラミジア感染を阻害することが分かっ
た。結果を図４に示す。
【００５４】実施例５ 〔ヘパリナーゼＩ前処理Ｈｅｌａ２２９細胞へのクラミ
ジア感染に対する影響〕単層ＨｅＬａ２２９細胞に、Ｈ
ＢＳＳに懸濁したヘパリナーゼＩ（ＳＩＧＭＡ社製）を
添加し、３７℃で６０分保温した。保温後、温ＨＢＳＳ
にで３回洗浄を行った。上記前処理を行った単層ＨｅＬ
ａ２２９細胞にＥＢ懸濁液を２００μlずつ分注して、
室温で１時間培養した。単層ＨｅＬａ２２９細胞をＨＢ
ＳＳにて３回洗浄し、１０μg／mlシクロヘキサミドを
添加した１０％牛胎児血清、０．５％グルコース含有イ
ーグルＭＥＭ培地（ＣＭＧＡ培地，ＩＣＮ Biochem社
製）にて３７℃で４８時間培養した。培養後トリプシン
／ＥＤＴＡ液にて細胞を回収し、細胞を１００％エタノ
ールで５分間固定し、親水化して、０．１％Ｔｗｅｅｎ
２０を加えたＰＢＳにて２回洗浄した。ＦＩＴＣ標識抗
クラミジア抗体で固定細胞を染色し、フローサイトメト
リーにて感染陽性細胞率を測定した。その結果、１IU／
mlの濃度において、ヘパリナーゼＩで前処理したＨｅＬ
ａ２２９細胞の感染は、約４．７％であり、ヘパリナー
ゼＩでＨｅＬａ２２９細胞を前処理することでクラミジ
ア感染を阻害することが分かった。結果を図５に示す。
ジア感染に対する影響〕単層ＨｅＬａ２２９細胞に、Ｈ
ＢＳＳに懸濁したヘパリナーゼＩ（ＳＩＧＭＡ社製）を
添加し、３７℃で６０分保温した。保温後、温ＨＢＳＳ
にで３回洗浄を行った。上記前処理を行った単層ＨｅＬ
ａ２２９細胞にＥＢ懸濁液を２００μlずつ分注して、
室温で１時間培養した。単層ＨｅＬａ２２９細胞をＨＢ
ＳＳにて３回洗浄し、１０μg／mlシクロヘキサミドを
添加した１０％牛胎児血清、０．５％グルコース含有イ
ーグルＭＥＭ培地（ＣＭＧＡ培地，ＩＣＮ Biochem社
製）にて３７℃で４８時間培養した。培養後トリプシン
／ＥＤＴＡ液にて細胞を回収し、細胞を１００％エタノ
ールで５分間固定し、親水化して、０．１％Ｔｗｅｅｎ
２０を加えたＰＢＳにて２回洗浄した。ＦＩＴＣ標識抗
クラミジア抗体で固定細胞を染色し、フローサイトメト
リーにて感染陽性細胞率を測定した。その結果、１IU／
mlの濃度において、ヘパリナーゼＩで前処理したＨｅＬ
ａ２２９細胞の感染は、約４．７％であり、ヘパリナー
ゼＩでＨｅＬａ２２９細胞を前処理することでクラミジ
ア感染を阻害することが分かった。結果を図５に示す。
【００５５】製剤例 （１）錠剤 実施例１で調製した２ＯＤＳＨ−２を１００mg秤量し、
これに乳糖６７０mg、馬鈴薯デンプン１５０mg、結晶セ
ルロース６０mg、および軽質無水ケイ酸５０mgを添加し
て混合し、これにヒドロキシプロピルセルロース３０mg
をメタノールに溶解した溶液（１０％（w／w））を添加
して練合造粒した。次に、これを径０．８mmのスクリー
ンで押し出して顆粒状にし、乾燥した後、ステアリン酸
マグネシウム１５mgを添加して圧縮成型し、１００mgの
錠剤を製造した。
これに乳糖６７０mg、馬鈴薯デンプン１５０mg、結晶セ
ルロース６０mg、および軽質無水ケイ酸５０mgを添加し
て混合し、これにヒドロキシプロピルセルロース３０mg
をメタノールに溶解した溶液（１０％（w／w））を添加
して練合造粒した。次に、これを径０．８mmのスクリー
ンで押し出して顆粒状にし、乾燥した後、ステアリン酸
マグネシウム１５mgを添加して圧縮成型し、１００mgの
錠剤を製造した。
【００５６】（２）カプセル剤 実施例１で調製した２ＯＤＳＨ−２を１００mg秤量し、
これに乳糖７６５mg、馬鈴薯デンプン１５０mg、ステア
リン酸マグネシウム１０mgおよび軽質無水ケイ酸５０mg
を添加して均一に混合し、これを１００mgずつ硬カプセ
ルに充填し、カプセル剤を製造した。
これに乳糖７６５mg、馬鈴薯デンプン１５０mg、ステア
リン酸マグネシウム１０mgおよび軽質無水ケイ酸５０mg
を添加して均一に混合し、これを１００mgずつ硬カプセ
ルに充填し、カプセル剤を製造した。
【００５７】（３）軟膏剤 実施例１で調製した２ＯＤＳＨ−２を１００mg秤量し、
これに鉱油４ｇ、石油ゼリー８ｇ、混合メチル／プロピ
ルパラバン６０mg、非イオン性界面活性剤１ｇおよび精
製水３０ｇを添加して均一に混合し、これを容器に充填
し、軟膏剤を製造した。
これに鉱油４ｇ、石油ゼリー８ｇ、混合メチル／プロピ
ルパラバン６０mg、非イオン性界面活性剤１ｇおよび精
製水３０ｇを添加して均一に混合し、これを容器に充填
し、軟膏剤を製造した。
【００５８】膣用座剤 実施例１で調整した２ＯＤＳＨ−２を１００mg秤量し、
マクロゴール４００を３０００mgとともに６０℃で加温
溶融して均一に混合した後、プラスチックの型に注いで
冷却し、膣用座剤を製造した。
マクロゴール４００を３０００mgとともに６０℃で加温
溶融して均一に混合した後、プラスチックの型に注いで
冷却し、膣用座剤を製造した。
【発明の効果】ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基か
ら成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とする硫酸化
グリコサミノグリカンにおいて、構成ヘキスロン酸残基
の２位の硫酸基を除去することにより安全で副作用のな
いクラミジア感染症処置剤を提供することができる。
ら成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とする硫酸化
グリコサミノグリカンにおいて、構成ヘキスロン酸残基
の２位の硫酸基を除去することにより安全で副作用のな
いクラミジア感染症処置剤を提供することができる。
【図１】ヘパリン、２ＯＤＳＨ−２およびＣＤＳＮＳＨ
のＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染阻害を示すグ
ラフである。
のＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染阻害を示すグ
ラフである。
【図２】ヘパリン、２ＯＤＳＨ−２および低分子化２Ｏ
ＤＳＨ画分のＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染阻
害を示すグラフである。
ＤＳＨ画分のＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染阻
害を示すグラフである。
【図３】ヘパリン、２ＯＤＳＨ−２およびＣＤＳＮＳＨ
処理ＥＢのＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染阻害
を示すグラフである。
処理ＥＢのＨｅＬａ２２９細胞へのクラミジア感染阻害
を示すグラフである。
【図４】ヘパリナーゼＩのＨｅＬａ２２９細胞へのクラ
ミジア感染阻害を示すグラフである。
ミジア感染阻害を示すグラフである。
【図５】ヘパリナーゼＩ前処理ＨｅＬａ２２９細胞への
クラミジア感染阻害を示すグラフである。
クラミジア感染阻害を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０８Ｂ 37/10 Ｃ０８Ｂ 37/10 Ｃ１２Ｑ 1/04 Ｃ１２Ｑ 1/04 Ｆターム(参考） 4B063 QA06 QQ02 QQ06 QR43 QS12 QX01 4C086 AA01 AA02 EA26 EA27 MA01 MA04 NA14 ZA81 ZB35 4C090 AA09 BA64 BA68 BB02 BB17 BB19 BB33 BB36 BB55 BB62 BB63 CA21 CA31 CA34 DA23
Claims (6)
- 【請求項１】 ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基か
ら成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とする硫酸化
グリコサミノグリカンにおいて、該ヘキスロン酸残基の
全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸基を有しない硫酸
化グリコサミノグリカンまたはその塩を有効成分とする
ことを特徴とするクラミジア感染症処置剤。 - 【請求項２】 硫酸化グリコサミノグリカンが、ヘキス
ロン酸残基の全ての２位の水酸基に硫酸基を有しない硫
酸化グリコサミノグリカンである、請求項１記載のクラ
ミジア感染症処置剤。 - 【請求項３】 ヘキソサミン残基がグルコサミン残基で
ある、請求項１または２記載のクラミジア感染症処置
剤。 - 【請求項４】 硫酸化グリコサミノグリカンがヘパリン
である、請求項１または２記載のクラミジア感染症処置
剤。 - 【請求項５】 硫酸化グリコサミノグリカンがヘパラン
硫酸である、請求項１または２記載のクラミジア感染症
処置剤。 - 【請求項６】 ヘキスロン酸残基とヘキソサミン残基か
ら成る二糖単位の繰り返し構造を基本骨格とする硫酸化
グリコサミノグリカンにおいて、該ヘキスロン酸残基の
全てまたは一部の２位の水酸基に硫酸基を有しない硫酸
化グリコサミノグリカンまたはその塩をクラミジアに接
触させることを特徴とするクラミジアの生育阻害方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000197359A JP4633233B2 (ja) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | クラミジア感染症処置剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000197359A JP4633233B2 (ja) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | クラミジア感染症処置剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002020293A true JP2002020293A (ja) | 2002-01-23 |
| JP4633233B2 JP4633233B2 (ja) | 2011-02-16 |
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ID=18695692
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|---|---|---|---|
| JP2000197359A Expired - Fee Related JP4633233B2 (ja) | 2000-06-29 | 2000-06-29 | クラミジア感染症処置剤 |
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| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4633233B2 (ja) |
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|---|---|---|---|---|
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| JP2002003384A (ja) * | 2000-06-22 | 2002-01-09 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | 成長因子誘導剤 |
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|---|---|---|---|---|
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| JP4166846B2 (ja) * | 1997-07-24 | 2008-10-15 | 生化学工業株式会社 | ヘパリン結合担体及びフルクトース−１，６−ビスリン酸アルドラーゼの分離方法 |
-
2000
- 2000-06-29 JP JP2000197359A patent/JP4633233B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| EP1535620A1 (en) * | 2002-08-13 | 2005-06-01 | Third Military Medical University Chinese People's Liberation Army P.R. of China | The use of n-acetyl-d-glucosamine for preparing medicines for urogenital tract infection's treatment and prevention |
| EP1535620A4 (en) * | 2002-08-13 | 2008-02-20 | Univ Pla 3Rd Military Medical | USE OF N-ACETYL-D-GLUCOSAMINE FOR THE MANUFACTURE OF MEDICAMENTS FOR THE TREATMENT AND PREVENTION OF HARNWAY INFECTIONS |
| US7704976B2 (en) | 2002-08-13 | 2010-04-27 | Third Military Medical University, Chinese People's Liberation Army, P.R. Of China | Use of N-acetyl-D-glucosamine for preparing medicines for urogenital tract infection's treatment and prevention |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4633233B2 (ja) | 2011-02-16 |
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