JP2001224378A - ヒト蛋白質とｃＤＮＡ［７］ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】 精製ヒト蛋白質、この蛋白質をコードしてい
る完全長ｃＤＮＡを含むＤＮＡ断片、このＤＮＡ断片の
発現ベクター、この発現ベクターによる形質転換細胞お
よびこの蛋白質に対する抗体の提供。 【解決手段】 １０種類の特定のアミノ酸配列のうちの
いずれかを有する精製ヒト蛋白質、１０種類の特定の翻
訳領域の塩基配列のうちのいずれかを有するＤＮＡ断
片、このＤＮＡ断片の発現ベクター、この発現ベクター
による形質転換細胞、およびこの蛋白質に対する抗体。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この出願の発明は、精製ヒト
蛋白質、この蛋白質をコードしているＤＮＡ断片、この
ＤＮＡ断片の発現ベクター、この発現ベクターにより形
質転換した各種の細胞、およびこの蛋白質に対する抗体
に関するものである。この発明の蛋白質は、医薬品とし
て、あるいはこの蛋白質に対する抗体を作製するための
抗原として用いることができる。また、この蛋白質は、
細胞内蛋白質ネットワ−クを解明するための研究試薬と
して、あるいは低分子医薬と結合する蛋白質をスクリー
ニングするための蛋白質源として用いることができる。
この発明のヒトｃＤＮＡは、遺伝子診断用プローブや遺
伝子治療用遺伝子源として用いることができる。また、
このｃＤＮＡがコードしている蛋白質を大量生産するた
めの遺伝子源として用いることができる。これらのＤＮ
Ａをインビトロ翻訳あるいは宿主細胞内で発現しうる発
現ベクターは、この発明の蛋白質をインビトロであるい
は各種の宿主細胞内で生産するのに用いることができ
る。これらの遺伝子を導入して蛋白質を過剰発現させた
細胞は、対応するレセプターやリガンドの検出、新しい
低分子医薬のスクリーニングなどに利用できる。この発
明の蛋白質に対する抗体は、蛋白質を精製するための手
段、あるいは細胞内における蛋白質の発現量や局在部位
を調べるのに用いられる。

【０００２】

【従来の技術】ヒト蛋白質は、我々の身体を構成してい
る細胞の基本要素である。その中には、（１）細胞の形
態を維持したり、細胞内の物質輸送や細胞運動に関わっ
ている細胞骨格蛋白質、（２）細胞内の物質代謝に関与
する代謝酵素、（３）エネルギ−産生に関わる蛋白質、
（４）細胞の増殖・分裂に関わる情報伝達蛋白質、
（５）蛋白質の合成に関わる翻訳関連蛋白質、（６）蛋
白質の分解に関わるプロテア−ゼ関連蛋白質、（７）ゲ
ノムの複製に関与する蛋白質、（８）遺伝子の転写に関
与する転写因子、（９）ｍＲＮＡのスプライシングに関
与する核蛋白質などが含まれる。これらの蛋白質は、ヒ
ト細胞の働きを解明する上で重要であるのみならず、医
薬品の開発においても有用である。これまで知られてい
る低分子化合物医薬の多くは、細胞内のある特定の蛋白
質と結合し、その蛋白質の働きを増強したり、阻止した
りすることによって、その薬効を表す。したがって、一
揃いのヒト蛋白質を持っていれば、これらの低分子医薬
をスクリ−ニングする際の有力な道具となる。

【０００３】従来、ヒト蛋白質を得るには、ヒト組織や
培養細胞をすりつぶした後、各種の分離法を組み合わせ
て単一の蛋白質を精製する方法がとられてきた。これま
で知られている蛋白質のように、含有量が高く、活性が
分かっているものは、従来の方法で容易に単離精製でき
るが、まだ解析されていない蛋白質の多くは含量が低
く、かつその性質によっては単離するのが困難である。
また、ヒト組織の多くは入手困難である。したがって、
従来のように蛋白質を単離精製する方法では、ヒト蛋白
質を全てそろえることは不可能に近い。

【０００４】一方、ヒト蛋白質の構造情報は、ヒトゲノ
ムＤＮＡに書かれているので、この情報をすべて読み取
れば、全ヒト蛋白質の一次構造を推定することができ
る。ヒトゲノムプロジェクトの目的の一つはここにあ
る。ただ、ゲノム解読の結果得られるのは、ＤＮＡ配列
情報だけであり、蛋白質そのものは得られない。細胞内
では、ゲノムの情報はまずｍＲＮＡに転写され、ｍＲＮ
Ａの配列情報を翻訳して蛋白質が合成される。したがっ
て、このｍＲＮＡを鋳型にして作製したｃＤＮＡが合成
できれば、このｃＤＮＡを用いて対応する蛋白質も合成
することが可能となる。そこで、各種細胞から単離した
ｍＲＮＡを鋳型にして、ｃＤＮＡを合成し、ｃＤＮＡの
部分塩基配列を決定するいわゆるＥＳＴプロジェクトが
進行している。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】蛋白質の取得を目的と
する場合、ｃＤＮＡに要求される必須要件は、蛋白質の
翻訳領域を全て含んでいること、いわゆる完全長ｃＤＮ
Ａであることである。しかしながら、従来法で合成した
ｃＤＮＡは、完全長である割合は低く、得られたものが
完全長かどうかを判定することも困難である。すなわ
ち、ＥＳＴとして知られているものの多くは蛋白質の翻
訳領域の一部のみ含んでいるｃＤＮＡ断片である。

【０００６】これに対して、この出願の発明者らは、独
自の完全長ｃＤＮＡ合成技術を完成させている（Kato,
S. et al., Gene 150:243-250, 1994）。そしてこの技
術で合成したヒト完全長ｃＤＮＡクロ−ンを解析するこ
とにより、ヒト蛋白質を完全長ｃＤＮＡの形で取得する
ことが可能となった。この技術を用いてヒト完全長ｃＤ
ＮＡをすべてクロ−ン化し、ヒト蛋白質バンクを作製す
ることが望まれている。

【０００７】また、これまでのヒト疾患に関する研究の
結果、ほとんどの病気は何らかの形で遺伝子に異常があ
るために引き起こされることが明らかになりつつある。
これらの病気を治療するためには、異常な遺伝子の替わ
りに正常な遺伝子を導入する遺伝子治療が有望視されて
いる。この際も、ヒトの完全長ｃＤＮＡは、遺伝子治療
用の遺伝子源として用いることができる。

【０００８】この出願の発明は、以上のとおりの事情に
鑑みてなされたものであって、新規の精製ヒト蛋白質、
この蛋白質をコードするＤＮＡ断片、このＤＮＡ断片の
発現ベクター、この発現ベクターにより形質転換された
細胞およびこの蛋白質に対する抗体を提供することを課
題としている。

【０００９】

【課題を解決するための手段】この出願は、前記の課題
を解決するものとして、以下の(1)〜(7)の発明を提供す
る。 (1) 配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１
６、１８または２０のいずれかのアミノ酸配列を有する
精製ヒト蛋白質。 (2) 前記発明(1)の蛋白質をコードするＤＮＡ断片。 (3) 前記発明(1)の蛋白質をコードするヒトｃＤＮＡで
あって、１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７
または１９の翻訳領域の塩基配列を有するＤＮＡ断片。 (4) 配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１
５、１７または１９のいずれかの塩基配列からなる前記
発明(3)のＤＮＡ断片。 (5) 前記発明(2)から(4)のいずれかのＤＮＡ断片をイ
ンビトロ翻訳あるいは宿主細胞内で発現しうる発現ベク
ター。 (6) 前記発明(5)の発現ベクターによる形質転換体であ
って、前記発明(1)の蛋白質を生産しうる形質転換細
胞。 (7) 前記発明(1)の蛋白質に対する抗体。

【００１０】

【発明の実施の形態】前記発明(1)の蛋白質は、ヒトの
臓器、細胞株などから単離する方法、この出願によって
提供されるアミノ酸配列に基づき化学合成によってペプ
チドを調製する方法、あるいは前記発明(2)〜(4)のＤＮ
Ａ断片を用いて組換えＤＮＡ技術で生産する方法などに
より取得することができるが、組換えＤＮＡ技術で取得
する方法が好ましく用いられる。例えば、前記発明(3)
または(4)のＤＮＡ断片（ｃＤＮＡ）を有するベクター
からインビトロ転写によってＲＮＡを調製し、これを鋳
型としてインビトロ翻訳を行なうことによりインビトロ
で蛋白質を発現できる。また翻訳領域を公知の方法によ
り適当な発現ベクターに組換えることにより、大腸菌、
枯草菌等の原核細胞や、酵母、昆虫細胞、哺乳動物細
胞、植物細胞等の真核細胞で、ＤＮＡ断片がコードして
いる蛋白質を大量に発現させることができる。

【００１１】前記発明(1)の蛋白質をインビトロ翻訳で
ＤＮＡ断片を発現させて生産させる場合には、例えば前
記発明(3)または(4)のＤＮＡ断片の翻訳領域を、ＲＮＡ
ポリメラーゼプロモーターを有するベクターに組換え、
プロモーターに対応するＲＮＡポリメラーゼを含む、ウ
サギ網状赤血球溶解物や小麦胚芽抽出物などのインビト
ロ翻訳系に添加すれば、前記発明(1)の蛋白質をインビ
トロで生産することができる。ＲＮＡポリメラーゼプロ
モーターとしては、Ｔ７、Ｔ３、ＳＰ６などが例示でき
る。これらのＲＮＡポリメラーゼプロモーターを含むベ
クターとしては、ｐＫＡ１、ｐＣＤＭ８、ｐＴ３／Ｔ７
１８、ｐＴ７／３ １９、ｐＢluescript IIなどが例示
できる。

【００１２】前記発明(1)の蛋白質を大腸菌などの微生
物でＤＮＡ断片を発現させて生産させる場合には、微生
物中で複製可能なオリジン、プロモーター、リボソーム
結合部位、ＤＮＡクローニング部位、ターミネーター等
を有する発現ベクターに、例えば前記発明(3)または(4)
のＤＮＡ断片の翻訳領域を組換えた発現ベクターを作成
し、この発現ベクターで宿主細胞を形質転換したのち、
得られた形質転換体を培養すれば、このＤＮＡ断片がコ
ードしている蛋白質を微生物内で大量生産することがで
きる。この際、任意の翻訳領域の前後に開始コドンと停
止コドンを付加して発現させれば、任意の領域を含む蛋
白質断片を得ることができる。あるいは、他の蛋白質と
の融合蛋白質として発現させることもできる。この融合
蛋白質を適当なプロテアーゼで切断することによってこ
のｃＤＮＡがコードする蛋白質部分のみを取得すること
もできる。大腸菌用発現ベクターとしては、ｐＵＣ系、
ｐＢluescript II、ｐＥＴ発現システム、ｐＧＥＸ発現
システムなどが例示できる。

【００１３】前記発明(1)の蛋白質を、真核細胞でＤＮ
Ａ断片を発現させて生産させる場合には、例えば前記発
明(3)または(4)のＤＮＡ断片の翻訳領域を、プロモータ
ー、スプライシング領域、ポリ(A)付加部位等を有する
真核細胞用発現ベクターに組換え、真核細胞内に導入す
れば、前記発明(1)の蛋白質を真核細胞内で生産するこ
とができる。発現ベクターとしては、ｐＫＡ１、ｐＣＤ
Ｍ８、ｐＳＶＫ３、ｐＭＳＧ、ｐＳＶＬ、ｐＢＫ−ＣＭ
Ｖ、ｐＢＫ−ＲＳＶ、ＥＢＶベクター、ｐＲＳ、ｐＹＥ
Ｓ２などが例示できる。また、ｐＩＮＤ／Ｖ５−Ｈｉ
ｓ、ｐＦＬＡＧ−ＣＭＶ−２、ｐＥＧＦＰ−Ｎ１、ｐＥ
ＧＦＰ−Ｃ１などを発現ベクタ−として用いれば、Ｈｉ
ｓタグ、ＦＬＡＧタグ、ＧＦＰなど各種タグを付加した
融合蛋白質として発現させることもできる。真核細胞と
しては、サル腎臓細胞ＣＯＳ７、チャイニーズハムスタ
ー卵巣細胞ＣＨＯなどの哺乳動物培養細胞、出芽酵母、
分裂酵母、カイコ細胞、アフリカツメガエル卵細胞など
が一般に用いられるが、前記発明(1)の蛋白質を発現で
きるものであれば、いかなる真核細胞でもよい。発現ベ
クターを真核細胞に導入するには、電気穿孔法、リン酸
カルシウム法、リポソーム法、ＤＥＡＥデキストラン法
など公知の方法を用いることができる。

【００１４】前記発明(1)の蛋白質を原核細胞や真核細
胞で発現させたのち、培養物から目的蛋白質を単離精製
するためには、公知の分離操作を組み合わせて行うこと
ができる。例えば、尿素などの変性剤や界面活性剤によ
る処理、超音波処理、酵素消化、塩析や溶媒沈殿法、透
析、遠心分離、限外濾過、ゲル濾過、ＳＤＳ−ＰＡＧ
Ｅ、等電点電気泳動、イオン交換クロマトグラフィー、
疎水性クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグ
ラフィー、逆相クロマトグラフィーなどがあげられる。

【００１５】前記発明(1)の蛋白質には、配列番号２、
４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８または２０
のアミノ酸配列のいかなる部分アミノ酸配列からなるペ
プチド断片（５アミノ酸残基以上）も含まれる。これら
のペプチド断片は抗体を作製するための抗原として用い
ることができる。また、前記発明(1)の蛋白質の多く
は、翻訳された後、細胞内で各種修飾を受ける。したが
って、これらの修飾された蛋白質も前記発明(1)の蛋白
質の範囲に含まれる。このような翻訳後修飾としては、
Ｎ末端メチオニンの脱離、Ｎ末端アセチル化、糖鎖付
加、細胞内プロテア−ゼによる限定分解、ミリストイル
化、イソプレニル化、リン酸化などが例示できる。

【００１６】前記発明(2)〜(4)のＤＮＡ断片には、前記
(1)の蛋白質をコードするすべてのＤＮＡが含まれる。
このＤＮＡ断片は、化学合成による方法、ｃＤＮＡクロ
ーニングによる方法、ヒトゲノムライブラリーをスクリ
ーニングする方法などを用いて取得することができる。

【００１７】前記発明(3)または(4)のＤＮＡ断片（ｃＤ
ＮＡ）は、例えばヒト細胞由来ｃＤＮＡライブラリーか
らクローン化することができる。ｃＤＮＡはヒト細胞か
ら抽出したポリ(A)⁺ＲＮＡを鋳型として合成する。ヒト
細胞としては、人体から手術などによって摘出されたも
のでも培養細胞でも良い。ｃＤＮＡは、岡山−Berg法
（Okayama, H. and Berg, P., Mol. Cell. Biol. 2:161
-170, 1982）、Gubler-Hoffman法（Gubler, U. and Hof
fman, J., Gene 25:263-269, 1983）などいかなる方法
を用いて合成してもよいが、完全長クローンを効率的に
得るためには、実施例にあげたようなキャッピング法
（Kato, S. et al., Gene 150:243-250, 1994）を用い
ることが望ましい。また市販のヒトｃＤＮＡライブラリ
ーを用いることもできる。ｃＤＮＡライブラリーから目
的のｃＤＮＡをクローン化するには、この出願によって
提供される前記発明(3)または(4)のｃＤＮＡ（配列番号
１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７または１
９）の任意部分の塩基配列に基づいてオリゴヌクレオチ
ドを合成し、これをプローブとして用いて、公知の方法
によりコロニーあるいはプラークハイブリダイゼーショ
ンによるスクリーニングを行えばよい。また、目的とす
るｃＤＮＡ断片の両末端にハイブリダイズするオリゴヌ
クレオチドを合成し、これをプライマーとして用いて、
ヒト細胞から単離したｍＲＮＡからＲＴ−ＰＣＲ法によ
り、前記発明(3)または(4)のｃＤＮＡ断片を調製するこ
ともできる。

【００１８】前記発明(3)のＤＮＡ断片は、配列番号
１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７または１
９の翻訳領域（Open Reading Frame：ＯＲＦ）の塩基配
列を有するｃＤＮＡであり、前記発明(4)のＤＮＡ断片
は、配列番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、
１７または１９のいずれかの塩基配列からなるｃＤＮＡ
である。それぞれのクローン番号（ＨＰ番号）、ｃＤＮ
Ａクローンが得られた細胞、ｃＤＮＡの全塩基数、コー
ドしている蛋白質のアミノ酸残基数をそれぞれ表１にま
とめて示した。

【００１９】

【表１】

【００２０】なお、配列番号１、３、５、７、９、１
１、１３、１５、１７または１９のいずれかの塩基配列
に基づいて合成したオリゴヌクレオチドプローブを用い
て、表１に示したヒト細胞株やヒト組織から作製したｃ
ＤＮＡライブラリーをスクリーニングすることにより、
前記発明(3)および(4)のｃＤＮＡと同一のクローンを容
易に得ることができる。

【００２１】また、一般にヒト遺伝子は個体差による多
型が頻繁に認められる。従って配列番号１１から３０に
おいて、１または複数個のヌクレオチドの付加、欠失お
よび／または他のヌクレオチドによる置換がなされてい
るｃＤＮＡもこの発明の範囲に含まれる。

【００２２】同様に、これらの変更によって生じる１ま
たは複数個のアミノ酸の付加、欠失および／または他の
アミノ酸による置換がなされている蛋白質も、配列番号
１から１０のアミノ酸配列を有するそれぞれの蛋白質の
活性を有する限り、この発明の範囲に含まれる。

【００２３】前記発明（3）および(4)のＤＮＡ断片に
は、配列番号１１から３０の塩基配列のいかなる部分塩
基配列からなるＤＮＡ断片（10bp以上）も含まれる。ま
た、センス鎖およびアンチセンス鎖からなるＤＮＡ断片
もこの範囲に含まれる。これらのＤＮＡ断片は遺伝子診
断用のプローブとして用いることができる。

【００２４】前記発明(7)の抗体は、前記発明(1)の蛋白
質を抗原として用いて動物を免役した後、血清から得る
ことが出きる。抗原としては配列番号１から１０のアミ
ノ酸配列に基づいて化学合成したペプチドや、真核細胞
や原核細胞で発現させた蛋白質を用いることが出きる。
あるいは、上記の真核細胞用発現ベクターを注射や遺伝
子銃によって、動物の筋肉や皮膚に導入した後、血清を
採取することによって作製することができる（例えば、
特開平７−３１３１８７号公報記載の方法）。動物とし
ては、マウス、ラット、ウサギ、ヤギ、ニワトリなどが
用いられる。免疫した動物の脾臓から採取したＢ細胞を
ミエロ−マと融合させてハイブリド−マを作製すれば、
前記発明(1)の蛋白質に対するモノクロ−ナル抗体を産
生することができる。

【００２５】

【実施例】次に実施例を示してこの出願の発明をさらに
詳細かつ具体的に説明するが、この出願の発明は以下の
例によって限定されるものではない。なお、以下の実施
例において、ＤＮＡの組換えに関する基本的な操作およ
び酵素反応は、文献（"Molecular Cloning. A Laborato
ry Manual", Cold Spring Harbor Laboratory, 1989）
の記載に方従った。制限酵素および各種修飾酵素は特に
記載の無い場合は宝酒造社製のものを用いた。各酵素反
応の緩衝液組成、並びに反応条件は付属の説明書に従っ
た。ｃＤＮＡ合成は文献（Kato, S. et al., Gene 150:
243-250, 1994）の記載に従った。 実施例１：ｃＤＮＡクロ−ニング ｃＤＮＡライブラリーとして、ヒト完全長ｃＤＮＡライ
ブラリ−（ＷＯ９７／３３９９３、ＷＯ９８／１１２１
７、ＷＯ９８／２１３２８記載）を用いた。個々のライ
ブラリーから完全長ｃＤＮＡクローンを選択し、その全
塩基配列決定を行った。得られたクロ−ン（Ａ）〜
（Ｊ）の詳細は以下のとおりである。 （Ａ） ＨＰ１００７７ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
１００７７のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定し
たところ、１３２ｂｐの５’非翻訳領域、３０６ｂｐの
ＯＲＦ、１０２ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有
していた（配列番号１）。ＯＲＦは１０１アミノ酸残基
（配列番号２）からなる蛋白質をコードしており、イン
ビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１１，
５２１とほぼ同じ１１ｋＤａの翻訳産物が生成した（実
施例２）。この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質は、細胞
全体に発現が認められた（実施例４）。

【００２６】クロ−ン（Ａ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、９０％以上の相同
性を有するもの（アクセション番号ＡＦ０８６２０７）
が登録されていたが、相補配列であり蛋白質をコードし
ていなかった。また、ＥＳＴの中に９０％以上の相同性
を有するもの（例えば、アクセション番号Ｗ４８６９８
やＡＦ０８６２０７）が登録されていたが、部分配列な
のでクロ−ン（Ａ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質を
コードしているかどうかは判定できない。 （Ｂ） ＨＰ１０１６２ ヒト骨肉腫細胞株Ｓａｏｓ−２ｃＤＮＡライブラリーか
ら得られたクローンＨＰ１０１６２のｃＤＮＡインサー
トの全塩基配列を決定したところ、３２ｂｐの５’非翻
訳領域、８３７ｂｐのＯＲＦ、１９０ｂｐの３’非翻訳
領域からなる構造を有していた（配列番号３）。ＯＲＦ
は２７８アミノ酸残基（配列番号４）からなる蛋白質を
コードしており、インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予
想される分子量３１，８４４とほぼ同じ３２ｋＤａの翻
訳産物が生成した（実施例２）。この蛋白質とＧＦＰと
の融合蛋白質は、細胞全体に粒子状の発現が認められた
（実施例４）。

【００２７】この蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテ
インデータベースを検索したところ、ラット仮想蛋白質
（アクセション番号ＡＡＦ０００５２）と類似性を有し
ていた。図１に、クロ−ン（Ａ）がコ−ドするヒト蛋白
質と、ラット仮想蛋白質のアミノ酸配列の比較を示す。
−はギャップを、＊はこの発明の蛋白質と同一アミノ酸
残基を、．はこの発明の蛋白質と類似アミノ酸残基をそ
れぞれ表す。全領域にわたって、８４．９％の相同性を
有していた。

【００２８】また、クロ−ン（Ｂ）ｃＤＮＡの塩基配列
を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中
に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセ
ション番号ＡＡ３７７０４０）が登録されていたが、部
分配列なのでクロ−ン（Ｂ）がコ−ドする蛋白質と同じ
蛋白質をコードしているかどうかは判定できない。 （Ｃ） ＨＰ１０３３４ ヒトフィブロサルコ−マ細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡ
ライブラリーから得られたクローンＨＰ１０３３４のｃ
ＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１０
２ｂｐの５’非翻訳領域、２８２ｂｐのＯＲＦ、３９８
ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた（配列
番号５）。ＯＲＦは９３アミノ酸残基（配列番号６）か
らなる蛋白質をコードしていた。インビトロ翻訳の結
果、ＯＲＦから予想される分子量１０，４３１よりやや
大きい１４ｋＤａの翻訳産物が生成した（実施例２）。
この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質は、細胞全体に発現
が認められた（実施例４）。

【００２９】この蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテ
インデータベースを検索したところ、ヒトＳＨ３ドメイ
ン結合グルタミン酸リッチ様蛋白質（アクセション番号
ＮＰ＿００３０１３）と類似性を有していた。図２に、
クロ−ン（Ｃ）がコ−ドするヒト蛋白質と、ヒトＳＨ３
ドメイン結合グルタミン酸リッチ様蛋白質のアミノ酸配
列の比較を示す。−はギャップを、＊はこの発明の蛋白
質と同一アミノ酸残基を、．はこの発明の蛋白質と類似
アミノ酸残基をそれぞれ表す。全領域にわたって、３
７．５％の相同性を有していた。

【００３０】また、クロ−ン（Ｃ）ｃＤＮＡの塩基配列
を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中
に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセ
ション番号ＡＡ２９９３５０）が登録されていたが、部
分配列なのでクロ−ン（Ｃ）がコ−ドする蛋白質と同じ
蛋白質をコードしているかどうかは判定できない。 （Ｄ） ＨＰ１０４００ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
Ｐ１０４００のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定
したところ、２１ｂｐの５’非翻訳領域、１７４ｂｐの
ＯＲＦ、２２２ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有
していた（配列番号７）。ＯＲＦは５７アミノ酸残基
（配列番号８）からなる蛋白質をコードしており、イン
ビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量６，２
０７よりやや大きい８ｋＤａの翻訳産物が生成した（実
施例２）。この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質は、細胞
全体に発現が認められた（実施例４）。

【００３１】クロ−ン（Ｄ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９
０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション
番号Ｗ０５３４５）が登録されていたが、部分配列なの
でクロ−ン（Ｄ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質をコ
ードしているかどうかは判定できない。 （Ｅ） ＨＰ１０４１０ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
Ｐ１０４１０のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定
したところ、６４ｂｐの５’非翻訳領域、３４８ｂｐの
ＯＲＦ、２８５ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有
していた（配列番号９）。ＯＲＦは１１５アミノ酸残基
（配列番号１０）からなる蛋白質をコードしており、イ
ンビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量１
２，５０６より大きい１４ｋＤａの翻訳産物が生成した
（実施例２）。この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質は、
細胞質と核に発現が認められた（実施例４）。

【００３２】クロ−ン（Ｅ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９
０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション
番号Ｔ８７５３８）が登録されていたが、部分配列なの
でクロ−ン（Ｅ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質をコ
ードしているかどうかは判定できない。 （Ｆ） ＨＰ１０４１７ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
Ｐ１０４１７のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定
したところ、４６１ｂｐの５’非翻訳領域、３３３ｂｐ
のＯＲＦ、７１０ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を
有していた（配列番号１１）。ＯＲＦは１１０アミノ酸
残基（配列番号１２）からなる蛋白質をコードしてお
り、インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子
量１１，６６７よりやや大きい１４ｋＤａの翻訳産物が
生成した（実施例２）。この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋
白質は、細胞全体に発現が認められた（実施例４）。

【００３３】クロ−ン（Ｆ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９
０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション
番号Ｃ１５８１１）が登録されていたが、部分配列なの
でクロ−ン（Ｆ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質をコ
ードしているかどうかは判定できない。 （Ｇ） ＨＰ１０４８２ ヒトフィブロサルコ−マ細胞株ＨＴ−１０８０ｃＤＮＡ
ライブラリーから得られたクローンＨＰ１０４８２のｃ
ＤＮＡインサートの全塩基配列を決定したところ、１２
３ｂｐの５’非翻訳領域、４０２ｂｐのＯＲＦ、５２１
ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有していた（配列
番号１３）。ＯＲＦは１３３アミノ酸残基（配列番号１
４）からなる蛋白質をコードしており、インビトロ翻訳
の結果、高分子量の翻訳産物が生成した（実施例２）。
この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質は、細胞全体に発現
が認められた（実施例４）。

【００３４】クロ−ン（Ｇ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、プロフィラグリン
（例えば、アクセション番号Ｍ６０４９９）の相補配列
と相同性を有していた。また、ＥＳＴの中に、９０％以
上の相同性を有するもの（例えば、アクセション番号Ｍ
６２２０１）が登録されていたが、部分配列なのでクロ
−ン（Ｇ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質をコードし
ているかどうかは判定できない。 （Ｈ） ＨＰ１０４９９ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
Ｐ１０４９９のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定
したところ、７９番目のＴＧＡを停止コドンではなく、
セレノシステインと考えると、５４ｂｐの５’非翻訳領
域、２０７ｂｐのＯＲＦ、８０ｂｐの３’非翻訳領域か
らなる構造を有していた（配列番号１５）。ＯＲＦは６
８アミノ酸残基（配列番号１６）からなる蛋白質をコー
ドしていた。このＯＲＦの２５９番目の停止コドンの直
前にＧＦＰｃＤＮＡを融合させて、この蛋白質とＧＦＰ
との融合蛋白質を発現させたところ、細胞全体に発現が
認められた（実施例４）。このＯＲＦには５５番目のＡ
ＴＧしか開始コドンが認められないにもかかわらず融合
蛋白質が発現したことから、７９番目のＴＧＡは停止コ
ドンとして機能しておらず、セレノシステインをコード
していると考えられる。

【００３５】クロ−ン（Ｈ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９
０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション
番号ＡＡ５２３１７２）が登録されていたが、部分配列
なのでクロ−ン（Ｈ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質
をコードしているかどうかは判定できない。 （Ｉ） ＨＰ１０５２２ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
Ｐ１０５２２のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定
したところ、１２ｂｐの５’非翻訳領域、９９９ｂｐの
ＯＲＦ、６７３ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有
していた（配列番号１７）。ＯＲＦは３３２アミノ酸残
基（配列番号１８）からなる蛋白質をコードしており、
インビトロ翻訳の結果、ＯＲＦから予想される分子量３
７，５１２よりやや大きい４１ｋＤａの翻訳産物が生成
した（実施例２）。この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質
は、ミトコンドリアに局在が認められた（実施例４）。

【００３６】クロ−ン（Ｉ）ｃＤＮＡの塩基配列を用い
てＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中に、９
０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセション
番号Ｃ０３４２３）が登録されていたが、部分配列なの
でクロ−ン（Ｉ）がコ−ドする蛋白質と同じ蛋白質をコ
ードしているかどうかは判定できない。 （Ｊ） ＨＰ１０５３２ ヒト胃癌ｃＤＮＡライブラリーから得られたクローンＨ
Ｐ１０５３２のｃＤＮＡインサートの全塩基配列を決定
したところ、８０ｂｐの５’非翻訳領域、４８０ｂｐの
ＯＲＦ、１６７ｂｐの３’非翻訳領域からなる構造を有
していた（配列番号１９）。ＯＲＦは１５９アミノ酸残
基（配列番号２０）からなる蛋白質をコードしていた。
この蛋白質とＧＦＰとの融合蛋白質は、細胞全体に発現
が認められた（実施例４）。

【００３７】この蛋白質のアミノ酸配列を用いてプロテ
インデータベースを検索したところ、ヒトアポトーシス
関連蛋白質Ｂｂｋ（アクセション番号ＡＲ０４３３６
１、ＵＳ特許５８３４２３４）と類似性を有していた。
図３に、クロ−ン（Ｊ）がコ−ドするヒト蛋白質と、ヒ
トアポトーシス関連蛋白質Ｂｂｋのアミノ酸配列の比較
を示す。−はギャップを、＊はこの発明の蛋白質と同一
アミノ酸残基を、．はこの発明の蛋白質と類似アミノ酸
残基をそれぞれ表す。この蛋白質は、ヒトアポトーシス
関連蛋白質Ｂｂｋの３５番目のプロリンと３６番目のセ
リンの間にアルギニンが挿入され、かつＢｂｋの１４３
番目のロイシンから２３３番目のトリプロファンまでの
９１アミノ酸残基が欠失したものである。

【００３８】また、クロ−ン（Ｊ）ｃＤＮＡの塩基配列
を用いてＧｅｎＢａｎｋを検索したところ、ＥＳＴの中
に、９０％以上の相同性を有するもの（例えば、アクセ
ション番号ＡＡ２５１３９３）が登録されていたが、部
分配列なのでクロ−ン（Ｊ）がコ−ドする蛋白質と同じ
蛋白質をコードしているかどうかは判定できない。 実施例２：インビトロ翻訳による蛋白質合成 実施例１で単離したｃＤＮＡを有するプラスミドベクタ
ーを用いて、Ｔ_NＴウサギ網状赤血球溶解物キット（プ
ロメガ社製）によるインビトロ転写／翻訳を行なった。
この際［³⁵Ｓ］メチオニンを添加し、発現産物をラジオ
アイソトープでラベルした。いずれの反応もキットに付
属のプロトコールに従って行なった。

【００３９】具体的な方法は次のとおりである。プラス
ミド２μｇを、Ｔ_NＴウサギ網状赤血球溶解物１２．５
μｌ、緩衝液（キットに付属）０．５μｌ、アミノ酸混
合液（メチオニンを含まない）２μｌ、［³⁵Ｓ］メチオ
ニン（アマーシャム社）２μｌ（０．３７ＭＢｑ／μ
ｌ）、Ｔ７ＲＮＡポリメラーゼ０．５μｌ、ＲＮａｓｉ
ｎ２０Ｕを含む総量２５μｌの反応液中で３０℃、９０
分間反応させた。反応液３μｌにＳＤＳサンプリングバ
ッファー（１２５ｍＭトリス塩酸緩衝液、ｐＨ６．８、
１２０ｍＭ２−メルカプトエタノール、２％ＳＤＳ溶
液、０．０２５％ブロモフェノールブルー、２０％グリ
セロール）２μｌを加え、９５℃３分間加熱処理した
後、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動にかけ
た。オートラジオグラフィーを行ない、翻訳産物の分子
量を求めた。 実施例３：ＣＯＳ７細胞による発現 実施例１で単離したｃＤＮＡを保有する発現ベクターに
よって形質転換した大腸菌を１００μｇ／ｍｌアンピシ
リン含有２ｘＹＴ培地２ｍｌ中で３７℃２時間培養した
後、ヘルパーファージＭ１３ＫＯ７（５０μｌ）を添加
し、３７℃で一晩培養した。遠心によって分離した上澄
からポリエチレングリコール沈殿によって一本鎖ファー
ジ粒子を得た。これを１００μｌの１ｍＭトリス−０．
１ｍＭＥＤＴＡ、ｐＨ８（ＴＥ）に懸濁した。

【００４０】サル腎臓由来培養細胞ＣＯＳ７は、１０％
ウシ胎児血清を含むダルベッコ改変イーグル（ＤＭＥ
Ｍ）培地中、５％ＣＯ₂存在下、３７℃で培養した。１
ｘ10⁵個のＣＯＳ７細胞を６穴プレート（ヌンク社、穴
の直径３ｃｍ）に植え、５％ＣＯ ₂存在下、３７℃で２
２時間培養した。培地除去後、リン酸緩衝液で細胞表面
を洗浄し、さらに５０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ７．５）を
含むＤＭＥＭ（ＴＤＭＥＭ）で再度洗浄した。この細胞
に一本鎖ファージ懸濁液１μｌ、ＤＭＥＭ培地０．６ｍ
ｌ、ＴＲＡＮＳＦＥＣＴＡＭ^TM（ＩＢＦ社）３μｌを懸
濁したものを添加し、５％ＣＯ₂存在下、３７℃で３時
間培養した。サンプル液を除去後、ＴＤＭＥＭで細胞表
面を洗浄し、１０％ウシ胎児血清含有ＤＭＥＭを１穴あ
たり２ｍｌ加え、５％ＣＯ₂存在下、３７℃にて２日間
培養した。培地を［³⁵Ｓ］システインあるいは［³⁵Ｓ］
メチオニンを含む培地に交換した後、１時間培養した。
遠心分離によって、培地と細胞を分けたあと、細胞画分
の蛋白質をＳＤＳ−ＰＡＧＥにかけた。 実施例４：緑色蛍光蛋白質（ＧＦＰ）融合蛋白質の発現 ＥｃｏＲＩ認識部位を付加した翻訳開始コドンから始ま
る２６merのセンスプライマーとＢａｍＨＩ認識部位を
を付加した停止コドンまでを含む２６merのアンチセン
スプライマーを用い、目的蛋白質をコ−ドするｃＤＮＡ
を鋳型としてＰＣＲにより翻訳領域を増幅した。ＰＣＲ
産物をＥｃｏＲＩとＢａｍＨＩで消化し、ＧＦＰ融合蛋
白質発現用ベクタ−ｐＥＧＦＰ−Ｎ１（Clontec社製）
のＥｃｏＲＩ−ＢａｍＨＩ部位に挿入した。塩基配列を
確認した後、得られた融合遺伝子発現ベクタ−を実施例
３に記載の方法によりＣＯＳ７細胞にトランスフェクト
した。蛍光顕微鏡により緑色蛍光の分布を観察し、目的
蛋白質の局在部位を調べた。 実施例５：抗体の作製 ＥｃｏＲＩ認識部位を付加した翻訳開始コドンから始ま
る２６merのセンスプライマーとＳａｌＩ認識配列を付
加した停止コドンまでを含む２６merのアンチセンスプ
ライマーを用い、各ｃＤＮＡを鋳型としてＰＣＲにより
翻訳領域を増幅した。ＰＣＲ産物をＥｃｏＲＩとＳａｌ
Ｉで消化し、ｐＧＥＸ−５Ｘ−１(ファルマシア社製)の
ＥｃｏＲＩとＳａｌＩ部位に挿入した。塩基配列を確認
した後、宿主大腸菌ＪＭ１０９の形質転換を行った。Ｌ
Ｂ培地中で３７℃、５時間培養し、ＩＰＴＧを最終濃度
が０．４ｍＭになるように加え、さらに３７℃で４時間
培養した。菌体を遠心により分離し、溶解溶液（５０ｍ
Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５、１ｍＭ ＥＤＴＡ、
０．２ｍＭＰＭＦ）に溶かし、一度−８０℃で凍結させ
融解させた後、超音波破砕を行った。１０,０００ｘｇ
で３０分遠心し、上清にグルタチオンセファロース４Ｂ
を加え、４℃で１時間インキュベートした。ビーズを十
分洗浄した後、溶出溶液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ
ｐＨ７．５、５０ｍＭグルタチオン）で融合蛋白質を溶
出した。得られた融合蛋白質を抗原として家兔に常法に
より免疫を行い抗血清を得た。抗血清はまず、４０％飽
和硫安沈殿画分をＧＳＴアフィニティーカラムによりＧ
ＳＴ抗体を除いた。素通り画分をさらにＧＳＴ融合蛋白
質の抗原カラムにより精製した。

【００４１】

【発明の効果】以上詳しく説明したとおり、この出願に
よって、新規な精製ヒト蛋白質、これらの蛋白質をコー
ドしているＤＮＡ断片、このＤＮＡ断片の発現ベクタ
ー、この発現ベクターによる形質転換細胞、およびこの
蛋白質に対する抗体が提供される。この出願によって提
供される蛋白質は、いずれも細胞内で機能している蛋白
質と考えられるため、細胞内タ−ゲット蛋白質として、
対応するレセプターやリガンドの検出、新しい低分子医
薬のスクリーニングなどに利用できる。またこの蛋白質
に対する抗体を作製するための抗原として用いることが
できる。この出願によって提供されるＤＮＡ断片は、遺
伝子診断用プローブや遺伝子治療用遺伝子源として用い
ることができる。また、このＤＮＡ断片を用いることに
より、この蛋白質を大量に発現することができる。これ
ら遺伝子を導入してこの蛋白質を発現させた細胞は、こ
の蛋白質の修飾型を得るのに利用できる。この出願によ
って提供される抗体は、この発明の蛋白質の検出、定
量、精製などに利用できる。

【００４２】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> Japan Science and Technology Corporation <120> Human Proteins and cDNAs thereof (7) <130> NP00038-YS <140> <141> <160> 20 <170> PatentIn Ver. 2.1 <210> 1 <211> 540 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (133)..(438) <400> 1 ctagctttct gtgtgcttag gtgcccgagc tactgagggt ctaagtccgg gcagccgaag 60 agtgtggtag gtaacggtcc tcagcgcaag ggtcatttcg tcgctgggaa gggacggccc 120 tcgcccgcgg tg atg gtg gtt agc aag atg aac aaa gat gcg cag atg aga 171 Met Val Val Ser Lys Met Asn Lys Asp Ala Gln Met Arg 1 5 10 gca gcg att aac caa aag ttg ata gaa act gga gaa aga gaa cgc ctc 219 Ala Ala Ile Asn Gln Lys Leu Ile Glu Thr Gly Glu Arg Glu Arg Leu 15 20 25 aaa gag ttg ctg aga gct aaa tta att gaa tgt ggc tgg aag gat cag 267 Lys Glu Leu Leu Arg Ala Lys Leu Ile Glu Cys Gly Trp Lys Asp Gln 30 35 40 45 ttg aag gca cac tgt aaa gag gta att aaa gaa aaa gga cta gaa cac 315 Leu Lys Ala His Cys Lys Glu Val Ile Lys Glu Lys Gly Leu Glu His 50 55 60 gtt act gtt gat gac ttg gtg gct gaa atc act cca aaa ggc aga gcc 363 Val Thr Val Asp Asp Leu Val Ala Glu Ile Thr Pro Lys Gly Arg Ala 65 70 75 ctg gta cct gac agt gta aag aag gag ctc cta caa aga ata aga aca 411 Leu Val Pro Asp Ser Val Lys Lys Glu Leu Leu Gln Arg Ile Arg Thr 80 85 90 ttc ctt gct cag cat gcc agc ctt taa gattgaatta gattgtgttg 458 Phe Leu Ala Gln His Ala Ser Leu 95 100 ttgtggtttt atttctgaaa gtaaaacttg ccataaatta gaaaacaatt tcccaaaata 518 aaatcctttt ttgtatgatg gt 540 <210> 2 <211> 101 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Val Val Ser Lys Met Asn Lys Asp Ala Gln Met Arg Ala Ala Ile 1 5 10 15 Asn Gln Lys Leu Ile Glu Thr Gly Glu Arg Glu Arg Leu Lys Glu Leu 20 25 30 Leu Arg Ala Lys Leu Ile Glu Cys Gly Trp Lys Asp Gln Leu Lys Ala 35 40 45 His Cys Lys Glu Val Ile Lys Glu Lys Gly Leu Glu His Val Thr Val 50 55 60 Asp Asp Leu Val Ala Glu Ile Thr Pro Lys Gly Arg Ala Leu Val Pro 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Lys Glu Leu Leu Gln Arg Ile Arg Thr Phe Leu Ala 85 90 95 Gln His Ala Ser Leu 100 <210> 3 <211> 1059 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (33)..(869) <400> 3 gagttcctag taaagtggcg ggagccgcag ct atg gag ccg cag gag gag aga 53 Met Glu Pro Gln Glu Glu Arg 1 5 gaa acg cag gtt gct gcg tgg tta aaa aaa ata ttt gga gat cat cct 101 Glu Thr Gln Val Ala Ala Trp Leu Lys Lys Ile Phe Gly Asp His Pro 10 15 20 att cca cag tat gag gtg aac cca cgg acc aca gag att tta cat cac 149 Ile Pro Gln Tyr Glu Val Asn Pro Arg Thr Thr Glu Ile Leu His His 25 30 35 ctt tca gaa cgc aac agg gtc cgg gac agg gat gtc tac ctg gta ata 197 Leu Ser Glu Arg Asn Arg Val Arg Asp Arg Asp Val Tyr Leu Val Ile 40 45 50 55 gag gac ttg aag cag aaa gca agt gaa tac gag tca gaa gcc aag tat 245 Glu Asp Leu Lys Gln Lys Ala Ser Glu Tyr Glu Ser Glu Ala Lys Tyr 60 65 70 ctt caa gac ctt ctc atg gag agt gtg aat ttt tcc ccc gcc aat ctc 293 Leu Gln Asp Leu Leu Met Glu Ser Val Asn Phe Ser Pro Ala Asn Leu 75 80 85 tct agc act ggt tcc agg tat ctg aat gct ttg gtt gac agt gcg gtg 341 Ser Ser Thr Gly Ser Arg Tyr Leu Asn Ala Leu Val Asp Ser Ala Val 90 95 100 gcc ctt gaa aca aag gat acc tcg cta gct agt ttt atc cct gca gtg 389 Ala Leu Glu Thr Lys Asp Thr Ser Leu Ala Ser Phe Ile Pro Ala Val 105 110 115 aat gat ttg acc tct gat ctc ttt cgt acc aaa tcc aaa agt gaa gaa 437 Asn Asp Leu Thr Ser Asp Leu Phe Arg Thr Lys Ser Lys Ser Glu Glu 120 125 130 135 atc aag att gaa ctg gaa aaa ctt gaa aaa aat tta act gca act tta 485 Ile Lys Ile Glu Leu Glu Lys Leu Glu Lys Asn Leu Thr Ala Thr Leu 140 145 150 gta tta gaa aaa tgt cta caa gag gat gtc aag aaa gca gag ttg cat 533 Val Leu Glu Lys Cys Leu Gln Glu Asp Val Lys Lys Ala Glu Leu His 155 160 165 ctg tct aca gaa agg gcc aaa gtt gat aat cgt cgt cag aac atg gac 581 Leu Ser Thr Glu Arg Ala Lys Val Asp Asn Arg Arg Gln Asn Met Asp 170 175 180 ttt cta aaa gca aag tca gag gaa ttc aga ttt gga atc aag gct gca 629 Phe Leu Lys Ala Lys Ser Glu Glu Phe Arg Phe Gly Ile Lys Ala Ala 185 190 195 gag gag caa ctt tca gcc aga ggc atg gat gct tct ctg tct cat cag 677 Glu Glu Gln Leu Ser Ala Arg Gly Met Asp Ala Ser Leu Ser His Gln 200 205 210 215 tcc tta gta gca cta tca gag aaa ctg gca aga tta aag caa cag act 725 Ser Leu Val Ala Leu Ser Glu Lys Leu Ala Arg Leu Lys Gln Gln Thr 220 225 230 ata cct ttg aag aaa aaa ttg gag tcc tat tta gac tta atg ccg aat 773 Ile Pro Leu Lys Lys Lys Leu Glu Ser Tyr Leu Asp Leu Met Pro Asn 235 240 245 ccg tct ctt gct caa gtg aaa att gaa gaa gca aag cga gaa cta gat 821 Pro Ser Leu Ala Gln Val Lys Ile Glu Glu Ala Lys Arg Glu Leu Asp 250 255 260 agc att gaa gct gaa ctt aca aga aga gta gac atg atg gaa ctg tga 869 Ser Ile Glu Ala Glu Leu Thr Arg Arg Val Asp Met Met Glu Leu 265 270 275 caaaagccaa ataaacatcc ttttccctaa caaagtaaat tgaataggac tttacagagt 929 tctttttcct cttggcattt cctaataaca aaactttctg tgttcttaga ttacagaata 989 tcataattga tagaatatgg tttcttactg tgtgttgcat ttttgtgccc aaatacatag 1049 ttttcatatt 1059 <210> 4 <211> 278 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Met Glu Pro Gln Glu Glu Arg Glu Thr Gln Val Ala Ala Trp Leu Lys 1 5 10 15 Lys Ile Phe Gly Asp His Pro Ile Pro Gln Tyr Glu Val Asn Pro Arg 20 25 30 Thr Thr Glu Ile Leu His His Leu Ser Glu Arg Asn Arg Val Arg Asp 35 40 45 Arg Asp Val Tyr Leu Val Ile Glu Asp Leu Lys Gln Lys Ala Ser Glu 50 55 60 Tyr Glu Ser Glu Ala Lys Tyr Leu Gln Asp Leu Leu Met Glu Ser Val 65 70 75 80 Asn Phe Ser Pro Ala Asn Leu Ser Ser Thr Gly Ser Arg Tyr Leu Asn 85 90 95 Ala Leu Val Asp Ser Ala Val Ala Leu Glu Thr Lys Asp Thr Ser Leu 100 105 110 Ala Ser Phe Ile Pro Ala Val Asn Asp Leu Thr Ser Asp Leu Phe Arg 115 120 125 Thr Lys Ser Lys Ser Glu Glu Ile Lys Ile Glu Leu Glu Lys Leu Glu 130 135 140 Lys Asn Leu Thr Ala Thr Leu Val Leu Glu Lys Cys Leu Gln Glu Asp 145 150 155 160 Val Lys Lys Ala Glu Leu His Leu Ser Thr Glu Arg Ala Lys Val Asp 165 170 175 Asn Arg Arg Gln Asn Met Asp Phe Leu Lys Ala Lys Ser Glu Glu Phe 180 185 190 Arg Phe Gly Ile Lys Ala Ala Glu Glu Gln Leu Ser Ala Arg Gly Met 195 200 205 Asp Ala Ser Leu Ser His Gln Ser Leu Val Ala Leu Ser Glu Lys Leu 210 215 220 Ala Arg Leu Lys Gln Gln Thr Ile Pro Leu Lys Lys Lys Leu Glu Ser 225 230 235 240 Tyr Leu Asp Leu Met Pro Asn Pro Ser Leu Ala Gln Val Lys Ile Glu 245 250 255 Glu Ala Lys Arg Glu Leu Asp Ser Ile Glu Ala Glu Leu Thr Arg Arg 260 265 270 Val Asp Met Met Glu Leu 275 <210> 5 <211> 782 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (103)..(384) <400> 5 ggaaggaaac cgctcccgag cacggcggcg gcgtcgtctc ccggcagtgc agctgccgct 60 accgccgccc tctgcccgcc ggcccgtctg tctaccccca gc atg agc ggc ctg 114 Met Ser Gly Leu 1 cgc gtc tac agc acg tcg gtc acc ggc tcc cgc gaa atc aag tcc cag 162 Arg Val Tyr Ser Thr Ser Val Thr Gly Ser Arg Glu Ile Lys Ser Gln 5 10 15 20 cag agc gag gtg acc cga atc ctg gat ggg aag cgc atc caa tac cag 210 Gln Ser Glu Val Thr Arg Ile Leu Asp Gly Lys Arg Ile Gln Tyr Gln 25 30 35 cta gtg gac atc tcc cag gac aac gcc ctg agg gat gag atg cga gcc 258 Leu Val Asp Ile Ser Gln Asp Asn Ala Leu Arg Asp Glu Met Arg Ala 40 45 50 ttg gca ggc aac ccc aag gcc acc cca ccc cag att gtc aac ggg gac 306 Leu Ala Gly Asn Pro Lys Ala Thr Pro Pro Gln Ile Val Asn Gly Asp 55 60 65 cag tac tgt ggg gac tat gag ctc ttc gtg gag gct gtg gaa caa aac 354 Gln Tyr Cys Gly Asp Tyr Glu Leu Phe Val Glu Ala Val Glu Gln Asn 70 75 80 acg ctg cag gag ttc ctg aag ctg gct tga gtcaagcctg tccagagttc 404 Thr Leu Gln Glu Phe Leu Lys Leu Ala 85 90 ccctgctgga ctccatcacc acactccccc cagccttcac ctggccatga aggacctttt 464 gaccaactcc ctgtcattcc taacctaacc ttagagtccc tcccccaatg caggccactt 524 ctcctccctc ctctctaaat gtagtcccct ctcctccatc taaaggcaac attccttacc 584 cattagtctc agaaattgtc ttaagcaaca gccccaaatg ctggctgccc ccagccaagc 644 attggggccg ccatcctgcc tggcactggc tgatgggcac ctctgttggt tccatcagcc 704 agagctctgc caaaggcccc gcagtccctc tcccaggagg accctagagg caattaaatg 764 atgtcctgtt ccattggc 782 <210> 6 <211> 93 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Met Ser Gly Leu Arg Val Tyr Ser Thr Ser Val Thr Gly Ser Arg Glu 1 5 10 15 Ile Lys Ser Gln Gln Ser Glu Val Thr Arg Ile Leu Asp Gly Lys Arg 20 25 30 Ile Gln Tyr Gln Leu Val Asp Ile Ser Gln Asp Asn Ala Leu Arg Asp 35 40 45 Glu Met Arg Ala Leu Ala Gly Asn Pro Lys Ala Thr Pro Pro Gln Ile 50 55 60 Val Asn Gly Asp Gln Tyr Cys Gly Asp Tyr Glu Leu Phe Val Glu Ala 65 70 75 80 Val Glu Gln Asn Thr Leu Gln Glu Phe Leu Lys Leu Ala 85 90 <210> 7 <211> 417 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (22)..(195) <400> 7 ctagagcgcc gcggccccga g atg aag ccg gcg gtg gac gag atg ttc ccc 51 Met Lys Pro Ala Val Asp Glu Met Phe Pro 1 5 10 gag ggc gcc ggg ccc tac gtg gac ctg gac gag gcg gga ggc agc acc 99 Glu Gly Ala Gly Pro Tyr Val Asp Leu Asp Glu Ala Gly Gly Ser Thr 15 20 25 ggg ctc ttg atg gac ttg gca gcc aat gaa aag gcc gtt cat gca gac 147 Gly Leu Leu Met Asp Leu Ala Ala Asn Glu Lys Ala Val His Ala Asp 30 35 40 ttt ttt aac gat ttt gaa gat ctt ttt gat gat gat gac atc cag tga 195 Phe Phe Asn Asp Phe Glu Asp Leu Phe Asp Asp Asp Asp Ile Gln 45 50 55 gatgccctct ggctgcaggc ggggccaagc ccttggtaca gagccgcagt gtgagcctgc 255 gcaggacagt ttcaggtggt tttaaagaac acgtggaaat cccttgaatt taggacctgg 315 ttaaccagaa agataagact gttcttaacg acctagatga ttctgttcat ctctgaacgg 375 gatcaggttt tgtcctcact ccaattaaaa gaaagcaatg tc 417 <210> 8 <211> 57 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Met Lys Pro Ala Val Asp Glu Met Phe Pro Glu Gly Ala Gly Pro Tyr 1 5 10 15 Val Asp Leu Asp Glu Ala Gly Gly Ser Thr Gly Leu Leu Met Asp Leu 20 25 30 Ala Ala Asn Glu Lys Ala Val His Ala Asp Phe Phe Asn Asp Phe Glu 35 40 45 Asp Leu Phe Asp Asp Asp Asp Ile Gln 50 55 <210> 9 <211> 697 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (65)..(412) <400> 9 aagacatttc ctgctcggaa ccttgtttac taatttccac tgcttttaag gccctgcact 60 gaaa atg caa gct cag gcg ccg gtg gtc gtt gtg acc caa cct gga gtc 109 Met Gln Ala Gln Ala Pro Val Val Val Val Thr Gln Pro Gly Val 1 5 10 15 ggt ccc ggt ccg gcc ccc cag aac tcc aac tgg cag aca ggc atg tgt 157 Gly Pro Gly Pro Ala Pro Gln Asn Ser Asn Trp Gln Thr Gly Met Cys 20 25 30 gac tgt ttc agc gac tgc gga gtc tgt ctc tgt ggc aca ttt tgt ttc 205 Asp Cys Phe Ser Asp Cys Gly Val Cys Leu Cys Gly Thr Phe Cys Phe 35 40 45 ccg tgc ctt ggg tgt caa gtt gca gct gat atg aat gaa tgc tgt ctg 253 Pro Cys Leu Gly Cys Gln Val Ala Ala Asp Met Asn Glu Cys Cys Leu 50 55 60 tgt gga aca agc gtc gca atg agg act ctc tac agg acc cga tat ggc 301 Cys Gly Thr Ser Val Ala Met Arg Thr Leu Tyr Arg Thr Arg Tyr Gly 65 70 75 atc cct gga tct att tgt gat gac tat atg gca act ctt tgc tgt cct 349 Ile Pro Gly Ser Ile Cys Asp Asp Tyr Met Ala Thr Leu Cys Cys Pro 80 85 90 95 cat tgt act ctt tgc caa atc aag aga gat atc aac aga agg aga gcc 397 His Cys Thr Leu Cys Gln Ile Lys Arg Asp Ile Asn Arg Arg Arg Ala 100 105 110 atg cgt act ttc taa aaactgatgg tgaaaagctc ttaccgaagc aacaaaattc 452 Met Arg Thr Phe 115 agcagacacc tcttcagctt gagttcttca ccatcttttg caactgaaat atgatggata 512 tgcttaagta caactgatgg catgaaaaaa atcaaatttt tgatttatta taaatgaatg 572 ttgtccctga acttagctaa atggtgcaac ttagtttctc cttgctttca tattatcgaa 632 tttcctggct tataaacttt ttaaattaca tttgaaatat aaaccaaatg aaatatttta 692 ctgat 697 <210> 10 <211> 115 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Met Gln Ala Gln Ala Pro Val Val Val Val Thr Gln Pro Gly Val Gly 1 5 10 15 Pro Gly Pro Ala Pro Gln Asn Ser Asn Trp Gln Thr Gly Met Cys Asp 20 25 30 Cys Phe Ser Asp Cys Gly Val Cys Leu Cys Gly Thr Phe Cys Phe Pro 35 40 45 Cys Leu Gly Cys Gln Val Ala Ala Asp Met Asn Glu Cys Cys Leu Cys 50 55 60 Gly Thr Ser Val Ala Met Arg Thr Leu Tyr Arg Thr Arg Tyr Gly Ile 65 70 75 80 Pro Gly Ser Ile Cys Asp Asp Tyr Met Ala Thr Leu Cys Cys Pro His 85 90 95 Cys Thr Leu Cys Gln Ile Lys Arg Asp Ile Asn Arg Arg Arg Ala Met 100 105 110 Arg Thr Phe 115 <210> 11 <211> 1504 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (462)..(794) <400> 11 tccgtctgtt ggggggcgaa cacgccgcgg tcctcgtcgt ggtgagcgca gccactcagg 60 ctggtcctgg gggtggggct gtaggggaaa gtgctaaagc cgctgaggtg cagtggctca 120 cgcctgtaat cccagcactt tgggaggcca aggcaggtgg atcacctgag gtcgggagtt 180 caagaccagc ctgaccaaca tggagaaacc ccatctctac tagaaataca aaattagcca 240 ggcatggtgg tgcatgcctg taatcccagc tactcgggag gctgaagcag gagaatcgct 300 taaatccggg aggcggaggt tgctgtgagc cgagatcgcg ccatttccag cctgggcaac 360 aagagggaaa ctccgtctca aaaaaaaaaa aaaaaaaaga agagaaaaga aaacataagt 420 ttcagccagg catgtgaagt aagaactctg ctagagagga a atg gct gct tca tca 476 Met Ala Ala Ser Ser 1 5 tca tcc tcc tca gct ggt ggg gtc agt gga agt tct gtc act gga tct 524 Ser Ser Ser Ser Ala Gly Gly Val Ser Gly Ser Ser Val Thr Gly Ser 10 15 20 ggt ttc agt gtc tca gac ctt gcc cca cca cgg aaa gcc ctt ttc acc 572 Gly Phe Ser Val Ser Asp Leu Ala Pro Pro Arg Lys Ala Leu Phe Thr 25 30 35 tac ccc aaa gga gct gga gag atg tta gaa gat ggc tct gag aga ttc 620 Tyr Pro Lys Gly Ala Gly Glu Met Leu Glu Asp Gly Ser Glu Arg Phe 40 45 50 ctc tgc gaa tct gtt ttt agc tat caa gtg gca tcc acg ctt aaa cag 668 Leu Cys Glu Ser Val Phe Ser Tyr Gln Val Ala Ser Thr Leu Lys Gln 55 60 65 gtg aaa cat gat cag caa gtt gct cgg atg gaa aaa cta gct ggt ttg 716 Val Lys His Asp Gln Gln Val Ala Arg Met Glu Lys Leu Ala Gly Leu 70 75 80 85 gta gaa gag ctg gag gct gac gag tgg cgg ttt aag ccc atc gag cag 764 Val Glu Glu Leu Glu Ala Asp Glu Trp Arg Phe Lys Pro Ile Glu Gln 90 95 100 ctg ctg gga ttc acc ccc tct tca ggt tga tactgcctgg atggtcacct 814 Leu Leu Gly Phe Thr Pro Ser Ser Gly 105 110 ctggtgcgca gcaagtgcaa agccagtggg ggactttctc acagcttaca tagccatcca 874 gagatccaca gctacgtcac tgaattgtta atgcacattt gtacttggtt tctctgtatc 934 tattcacagg caacaaatac ttatatgtgt gatctttcag ggaatgtttt gtttatttgt 994 ttttaaaagt attgggaatc agattaagac aatcagtttc agagaaccag gaggtttggg 1054 gttaagagat actcaaaaat tttcacaagc caagtagggc atatatcaga tttggccaac 1114 tgaatggcgt ctgtcctgtc atccatatgg tgcctggaaa tatttaccag tcaaggtcaa 1174 ggtcagcatc tgtggttaaa aatatagcat tctgacctaa aaaagttatt ttgcagatga 1234 atgtgttttc aactcaggac ctatccaaat gaggaatttt taaatattct tttttttttc 1294 ctatttttag acatcaattc tatagattct gactttttct aacctcttat agacatgcca 1354 aatgctggca aaaagaagtg ctttttggat atggcagcac ttgtaaaaat aaagcagtaa 1414 gcaaaatcct tttaaacaca gaaatcctga gttcttctca ttggtggact caagcaattc 1474 tgtagcaaat aaatcctttg aaagagctcc 1504 <210> 12 <211> 110 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Met Ala Ala Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ala Gly Gly Val Ser Gly Ser 1 5 10 15 Ser Val Thr Gly Ser Gly Phe Ser Val Ser Asp Leu Ala Pro Pro Arg 20 25 30 Lys Ala Leu Phe Thr Tyr Pro Lys Gly Ala Gly Glu Met Leu Glu Asp 35 40 45 Gly Ser Glu Arg Phe Leu Cys Glu Ser Val Phe Ser Tyr Gln Val Ala 50 55 60 Ser Thr Leu Lys Gln Val Lys His Asp Gln Gln Val Ala Arg Met Glu 65 70 75 80 Lys Leu Ala Gly Leu Val Glu Glu Leu Glu Ala Asp Glu Trp Arg Phe 85 90 95 Lys Pro Ile Glu Gln Leu Leu Gly Phe Thr Pro Ser Ser Gly 100 105 110 <210> 13 <211> 1046 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (124)..(525) <400> 13 tcgaggacat gatgacgtga ccctgagtgc ctggagccgt ctcctgattg ttcctcattt 60 ctgtttgtct gcttgcactt ctggatcctg actgcccatg ggaggcatca gaccttccct 120 ggg atg tgg tgt ggc tgt gat ggg aac ctg agt gtc cag acc tat tta 168 Met Trp Cys Gly Cys Asp Gly Asn Leu Ser Val Gln Thr Tyr Leu 1 5 10 15 ccg att gct cgt ggt ggg atc cct gcc ttc ctc ctc tgc ttg acc ccg 216 Pro Ile Ala Arg Gly Gly Ile Pro Ala Phe Leu Leu Cys Leu Thr Pro 20 25 30 ggt gtc cac gaa tgg tgt cct gac cct ctt ggg acg ctg aat gcc tgg 264 Gly Val His Glu Trp Cys Pro Asp Pro Leu Gly Thr Leu Asn Ala Trp 35 40 45 agc tgt ctc gtg cct gct cgt ggt gcg atc ctt gtc ttc ctc cag tgc 312 Ser Cys Leu Val Pro Ala Arg Gly Ala Ile Leu Val Phe Leu Gln Cys 50 55 60 tgg tcc cgg tcc gtc cat ggg cag agt cag gct gtt cat gag tgc tca 360 Trp Ser Arg Ser Val His Gly Gln Ser Gln Ala Val His Glu Cys Ser 65 70 75 cct ggt aga ggg aag acc ctg aac gtc cag acc gtt ccc ctg acc ggc 408 Pro Gly Arg Gly Lys Thr Leu Asn Val Gln Thr Val Pro Leu Thr Gly 80 85 90 95 cac gtg tgg act ctt ggt ggc tct gct gtc tca gcc cag cct ttc cgt 456 His Val Trp Thr Leu Gly Gly Ser Ala Val Ser Ala Gln Pro Phe Arg 100 105 110 ggc ctg aca ctg att gtg tgt ctg agt ttt ctg aat gtc cct cac tgt 504 Gly Leu Thr Leu Ile Val Cys Leu Ser Phe Leu Asn Val Pro His Cys 115 120 125 cac tgg cct gac tac cgc tag acccccggtg tccacgatcg ctgactgcag 555 His Trp Pro Asp Tyr Arg 130 atgaagcttg cccgcgccca gtggctgagt gtctggagct gtctgctgac tgctggtggc 615 cggatccatg tctttctcct ggacttgatc ttgcctgttc atgggatgat gcagtctgtc 675 cacgagagga agtctctgcg tgacgagtgc ctgattgtct ggagctgtct gcagagtgcc 735 catgactggc tctgtcttca tcatgggacc tggggtgtct ggagccatct cttgactgct 795 cccacgcaga tccatgatgg tttctggaag ccgacccaga gtgcctctca gagtcttctg 855 agtgtccctc actgtccctg tcctggctaa ctctggatcc cctacgcttt cttgtcctgg 915 actcctgcaa tggtacctgg cttgtatttt catgtcttga cctgttcact tgagatgatg 975 atttgccatc agatgacctt gatctttcat atattttgtt ttcttctaat agactatcag 1035 tggtgtcata g 1046 <210> 14 <211> 133 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Met Trp Cys Gly Cys Asp Gly Asn Leu Ser Val Gln Thr Tyr Leu Pro 1 5 10 15 Ile Ala Arg Gly Gly Ile Pro Ala Phe Leu Leu Cys Leu Thr Pro Gly 20 25 30 Val His Glu Trp Cys Pro Asp Pro Leu Gly Thr Leu Asn Ala Trp Ser 35 40 45 Cys Leu Val Pro Ala Arg Gly Ala Ile Leu Val Phe Leu Gln Cys Trp 50 55 60 Ser Arg Ser Val His Gly Gln Ser Gln Ala Val His Glu Cys Ser Pro 65 70 75 80 Gly Arg Gly Lys Thr Leu Asn Val Gln Thr Val Pro Leu Thr Gly His 85 90 95 Val Trp Thr Leu Gly Gly Ser Ala Val Ser Ala Gln Pro Phe Arg Gly 100 105 110 Leu Thr Leu Ile Val Cys Leu Ser Phe Leu Asn Val Pro His Cys His 115 120 125 Trp Pro Asp Tyr Arg 130 <210> 15 <211> 341 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (55)..(261) <400> 15 cttttttttt cggggtcgag tccgaggggg aagaggtttg ttaatacgtt cgcc atg 57 Met 1 tgc tac gat ctt ggg acg aac tga gcc acg agc gtg gct ttg agg gcc 105 Cys Tyr Asp Leu Gly Thr Asn Xaa Ala Thr Ser Val Ala Leu Arg Ala 5 10 15 gtc cga acg ctg cag gcc ggc cag gtc cct ggg cgt cca ggc ctg gcc 153 Val Arg Thr Leu Gln Ala Gly Gln Val Pro Gly Arg Pro Gly Leu Ala 20 25 30 tac gca cca ctt tgt ccc tta gcg ttt aaa ggt ttc ttc ccg aat ctc 201 Tyr Ala Pro Leu Cys Pro Leu Ala Phe Lys Gly Phe Phe Pro Asn Leu 35 40 45 agg ccc tca gct acc tgc agg ttt cgt cgc gag ccg gct gca agt ttt 249 Arg Pro Ser Ala Thr Cys Arg Phe Arg Arg Glu Pro Ala Ala Ser Phe 50 55 60 65 gaa cct aag taa acctcaatcc ggagggccta gcggtaaggt gggcgctgtg 301 Glu Pro Lys tctattgagg tgcttagcaa taaagaaagg tagtgagttg 341 <210> 16 <211> 68 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> <222> 9 <223> selenocysteine <400> 16 Met Cys Tyr Asp Leu Gly Thr Asn Xaa Ala Thr Ser Val Ala Leu Arg 1 5 10 15 Ala Val Arg Thr Leu Gln Ala Gly Gln Val Pro Gly Arg Pro Gly Leu 20 25 30 Ala Tyr Ala Pro Leu Cys Pro Leu Ala Phe Lys Gly Phe Phe Pro Asn 35 40 45 Leu Arg Pro Ser Ala Thr Cys Arg Phe Arg Arg Glu Pro Ala Ala Ser 50 55 60 Phe Glu Pro Lys 65 <210> 17 <211> 1684 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (13)..(1011) <400> 17 ttctctcgtg ca atg gcg tcc ggg ctg gta aga ttg ctg cag cag gga cat 51 Met Ala Ser Gly Leu Val Arg Leu Leu Gln Gln Gly His 1 5 10 cgc tgc ctc ctg gct cca gtc gcc ccc aag ctg gtc cct ccg gtt cgg 99 Arg Cys Leu Leu Ala Pro Val Ala Pro Lys Leu Val Pro Pro Val Arg 15 20 25 gga gtg aag aag gga ttc cgc gcc gcc ttc cgc ttc cag aag gag tta 147 Gly Val Lys Lys Gly Phe Arg Ala Ala Phe Arg Phe Gln Lys Glu Leu 30 35 40 45 gag cgg cag cgc ctt ctg cgg tgc ccg ccg ccg ccc gtg cgc cgt tca 195 Glu Arg Gln Arg Leu Leu Arg Cys Pro Pro Pro Pro Val Arg Arg Ser 50 55 60 gag aag ccg aac tgg gat tac cat gca gaa ata caa gct ttt gga cat 243 Glu Lys Pro Asn Trp Asp Tyr His Ala Glu Ile Gln Ala Phe Gly His 65 70 75 cgg tta cag gaa aac ttt tcc tta gat ctt ctc aaa act gca ttt gtt 291 Arg Leu Gln Glu Asn Phe Ser Leu Asp Leu Leu Lys Thr Ala Phe Val 80 85 90 aat agc tgc tat att aaa agt gag gag gcc aaa cgc caa caa ctt ggg 339 Asn Ser Cys Tyr Ile Lys Ser Glu Glu Ala Lys Arg Gln Gln Leu Gly 95 100 105 ata gag aaa gaa gct gtt ctt ctg aat ctt aaa agt aat caa gaa cta 387 Ile Glu Lys Glu Ala Val Leu Leu Asn Leu Lys Ser Asn Gln Glu Leu 110 115 120 125 tcc gaa caa ggg aca tct ttt tca cag act tgc ctt aca cag ttt ctt 435 Ser Glu Gln Gly Thr Ser Phe Ser Gln Thr Cys Leu Thr Gln Phe Leu 130 135 140 gaa gac gag tac cca gac atg ccc act gaa ggc ata aaa aat ctt gtt 483 Glu Asp Glu Tyr Pro Asp Met Pro Thr Glu Gly Ile Lys Asn Leu Val 145 150 155 gac ttt ctc act ggt gag gaa gtc gtg tgt cac gtg gct aga aac ttg 531 Asp Phe Leu Thr Gly Glu Glu Val Val Cys His Val Ala Arg Asn Leu 160 165 170 gct gtg gag cag tta aca ctg agt gaa gaa ttc cca gtg ccc cca gct 579 Ala Val Glu Gln Leu Thr Leu Ser Glu Glu Phe Pro Val Pro Pro Ala 175 180 185 gtg tta cag cag act ttc ttt gca gtt att gga gcc ctg tta cag agc 627 Val Leu Gln Gln Thr Phe Phe Ala Val Ile Gly Ala Leu Leu Gln Ser 190 195 200 205 agt gga cct gag agg act gca ctt ttc atc agg gac ttc tta att act 675 Ser Gly Pro Glu Arg Thr Ala Leu Phe Ile Arg Asp Phe Leu Ile Thr 210 215 220 caa atg act gga aaa gag ctc ttt gag atg tgg aag ata ata aat ccc 723 Gln Met Thr Gly Lys Glu Leu Phe Glu Met Trp Lys Ile Ile Asn Pro 225 230 235 atg ggg cta ttg gta gaa gaa ctg aag aaa agg aat gtt tca gct cct 771 Met Gly Leu Leu Val Glu Glu Leu Lys Lys Arg Asn Val Ser Ala Pro 240 245 250 gaa tca aga ctt act agg cag tct ggt ggc acc aca gct ttg cct ttg 819 Glu Ser Arg Leu Thr Arg Gln Ser Gly Gly Thr Thr Ala Leu Pro Leu 255 260 265 tat ttt gtt ggc tta tac tgt gat aaa aag ttg att gca gaa gga cct 867 Tyr Phe Val Gly Leu Tyr Cys Asp Lys Lys Leu Ile Ala Glu Gly Pro 270 275 280 285 ggg gaa aca gta ttg gtt gca gaa gaa gag gct gct cga gtg gcc ctt 915 Gly Glu Thr Val Leu Val Ala Glu Glu Glu Ala Ala Arg Val Ala Leu 290 295 300 aga aaa ctt tat gga ttc aca gaa aat aga cgg ccg tgg aac tat tcc 963 Arg Lys Leu Tyr Gly Phe Thr Glu Asn Arg Arg Pro Trp Asn Tyr Ser 305 310 315 aag ccc aaa gaa acc ttg aga gca gaa aag agc atc act gcc agc tag 1011 Lys Pro Lys Glu Thr Leu Arg Ala Glu Lys Ser Ile Thr Ala Ser 320 325 330 ccgccatgga tgcagcagcc tgaaacttga gagcgaaagt gagataaatg tcaaaggtgt 1071 ttcaagccag acattttcac aattgtgaag aaatagatgt tttgtttctg ttttttactg 1131 tgttcccaaa attaaataaa tgttaaccaa gtcacagtgt ttttggtttt gtttttctga 1191 aatcttggtt tgatcaaatc tttttttttt tctcttgaga tggagtctta ctctgtcgcc 1251 caggctggac tgcagtggtg cgatctcggc tcactgcaac ctccacctca caggttcaag 1311 cgattctcgt ggctcagcct ccctagtagc tgggattaca ggcacacacc accatacctg 1371 gctaattttt gtatttttgg tagacatggg gtttcaccaa gttggctagg ctagtcttga 1431 actcctgacc tcaggtgatc cacccgcctt ggcctcccaa agtgctggga ttacaggtgt 1491 gagccactat acccgaccag atcaaatctt tttttgacat ttttgcaaaa aaattttcct 1551 aatgttcttg atttaattgt atagaatttg tataattagg tgtattttat ttgcgtctag 1611 ctttgaggta tcataattta tgtatcttat gtgaattttt tgctgtaata ccaataaagt 1671 tttttttctc cac 1684 <210> 18 <211> 332 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Met Ala Ser Gly Leu Val Arg Leu Leu Gln Gln Gly His Arg Cys Leu 1 5 10 15 Leu Ala Pro Val Ala Pro Lys Leu Val Pro Pro Val Arg Gly Val Lys 20 25 30 Lys Gly Phe Arg Ala Ala Phe Arg Phe Gln Lys Glu Leu Glu Arg Gln 35 40 45 Arg Leu Leu Arg Cys Pro Pro Pro Pro Val Arg Arg Ser Glu Lys Pro 50 55 60 Asn Trp Asp Tyr His Ala Glu Ile Gln Ala Phe Gly His Arg Leu Gln 65 70 75 80 Glu Asn Phe Ser Leu Asp Leu Leu Lys Thr Ala Phe Val Asn Ser Cys 85 90 95 Tyr Ile Lys Ser Glu Glu Ala Lys Arg Gln Gln Leu Gly Ile Glu Lys 100 105 110 Glu Ala Val Leu Leu Asn Leu Lys Ser Asn Gln Glu Leu Ser Glu Gln 115 120 125 Gly Thr Ser Phe Ser Gln Thr Cys Leu Thr Gln Phe Leu Glu Asp Glu 130 135 140 Tyr Pro Asp Met Pro Thr Glu Gly Ile Lys Asn Leu Val Asp Phe Leu 145 150 155 160 Thr Gly Glu Glu Val Val Cys His Val Ala Arg Asn Leu Ala Val Glu 165 170 175 Gln Leu Thr Leu Ser Glu Glu Phe Pro Val Pro Pro Ala Val Leu Gln 180 185 190 Gln Thr Phe Phe Ala Val Ile Gly Ala Leu Leu Gln Ser Ser Gly Pro 195 200 205 Glu Arg Thr Ala Leu Phe Ile Arg Asp Phe Leu Ile Thr Gln Met Thr 210 215 220 Gly Lys Glu Leu Phe Glu Met Trp Lys Ile Ile Asn Pro Met Gly Leu 225 230 235 240 Leu Val Glu Glu Leu Lys Lys Arg Asn Val Ser Ala Pro Glu Ser Arg 245 250 255 Leu Thr Arg Gln Ser Gly Gly Thr Thr Ala Leu Pro Leu Tyr Phe Val 260 265 270 Gly Leu Tyr Cys Asp Lys Lys Leu Ile Ala Glu Gly Pro Gly Glu Thr 275 280 285 Val Leu Val Ala Glu Glu Glu Ala Ala Arg Val Ala Leu Arg Lys Leu 290 295 300 Tyr Gly Phe Thr Glu Asn Arg Arg Pro Trp Asn Tyr Ser Lys Pro Lys 305 310 315 320 Glu Thr Leu Arg Ala Glu Lys Ser Ile Thr Ala Ser 325 330 <210> 19 <211> 727 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (81)..(560) <400> 19 aaaagtttgt acgagttcag tggaggagac cgcaagttga gtggaggagg cggcggtggg 60 gccccggacc aggtgcctcc atg gca ggc tct gaa gag ctg ggg ctc cgg gaa 113 Met Ala Gly Ser Glu Glu Leu Gly Leu Arg Glu 1 5 10 gac acg ctg agg gtc cta gct gcc ttc ctt agg cgt ggt gag gct gcc 161 Asp Thr Leu Arg Val Leu Ala Ala Phe Leu Arg Arg Gly Glu Ala Ala 15 20 25 ggg tct cct gtt cca act cca cct aga agc cct gcc caa gaa gag cca 209 Gly Ser Pro Val Pro Thr Pro Pro Arg Ser Pro Ala Gln Glu Glu Pro 30 35 40 aca gac ttc ctg agc cgc ctt cga aga tgt ctt ccc tgc tcc ctg ggg 257 Thr Asp Phe Leu Ser Arg Leu Arg Arg Cys Leu Pro Cys Ser Leu Gly 45 50 55 cga gga gca gcc ccc tct gag tcc cct cgg cct tgc tct ctg ccc atc 305 Arg Gly Ala Ala Pro Ser Glu Ser Pro Arg Pro Cys Ser Leu Pro Ile 60 65 70 75 cgc ccc tgc tat ggt tta gag cct ggc cca gct act cca gac ttc tat 353 Arg Pro Cys Tyr Gly Leu Glu Pro Gly Pro Ala Thr Pro Asp Phe Tyr 80 85 90 gct ttg gtg gcc cag cgg ctg gaa cag ctg gtc caa gag cag ctg aaa 401 Ala Leu Val Ala Gln Arg Leu Glu Gln Leu Val Gln Glu Gln Leu Lys 95 100 105 tct ccg ccc agc cca gaa tta cag ggt ccc cca tcg aca gag aag gaa 449 Ser Pro Pro Ser Pro Glu Leu Gln Gly Pro Pro Ser Thr Glu Lys Glu 110 115 120 gcc ata ctg cgg agg ctg gtg gcc ctg ctg gag gag gag gca gaa gtc 497 Ala Ile Leu Arg Arg Leu Val Ala Leu Leu Glu Glu Glu Ala Glu Val 125 130 135 att aac cag aag gag ggc atc ctg gct gtt tca ccc gtg gac ttg aac 545 Ile Asn Gln Lys Glu Gly Ile Leu Ala Val Ser Pro Val Asp Leu Asn 140 145 150 155 ttg cca ttg gac tga gctctttctc agaagctgct acaagatgac acctcatgtc 600 Leu Pro Leu Asp 160 cctgccctct tcgtgtgctt ttccaagtct tcctattcca ctcagggctg tggggtggtg 660 gttgccctac ctgtttttgc caaaaataaa ttgtttaaaa cttttcttat taaaaacgtt 720 acaaagt 727 <210> 20 <211> 159 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Met Ala Gly Ser Glu Glu Leu Gly Leu Arg Glu Asp Thr Leu Arg Val 1 5 10 15 Leu Ala Ala Phe Leu Arg Arg Gly Glu Ala Ala Gly Ser Pro Val Pro 20 25 30 Thr Pro Pro Arg Ser Pro Ala Gln Glu Glu Pro Thr Asp Phe Leu Ser 35 40 45 Arg Leu Arg Arg Cys Leu Pro Cys Ser Leu Gly Arg Gly Ala Ala Pro 50 55 60 Ser Glu Ser Pro Arg Pro Cys Ser Leu Pro Ile Arg Pro Cys Tyr Gly 65 70 75 80 Leu Glu Pro Gly Pro Ala Thr Pro Asp Phe Tyr Ala Leu Val Ala Gln 85 90 95 Arg Leu Glu Gln Leu Val Gln Glu Gln Leu Lys Ser Pro Pro Ser Pro 100 105 110 Glu Leu Gln Gly Pro Pro Ser Thr Glu Lys Glu Ala Ile Leu Arg Arg 115 120 125 Leu Val Ala Leu Leu Glu Glu Glu Ala Glu Val Ile Asn Gln Lys Glu 130 135 140 Gly Ile Leu Ala Val Ser Pro Val Asp Leu Asn Leu Pro Leu Asp 145 150 155

【図面の簡単な説明】

【図１】クロ−ンＨＰ１０１６２がコ−ドするヒト蛋白
質と、ラット仮想蛋白質のアミノ酸配列を比較した図で
ある。

【図２】クロ−ンＨＰ１０３３４がコ−ドするヒト蛋白
質と、ヒトＳＨ３ドメイン結合グルタミン酸リッチ様蛋
白質のアミノ酸配列を比較した図である。

【図３】クロ−ンＨＰ１０５３２がコ−ドするヒト蛋白
質と、ヒトアポトーシス関連蛋白質Ｂｂｋのアミノ酸配
列を比較した図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｎ 1/21 Ｃ１２Ｎ 15/00 ＺＮＡＡ 5/10 5/00 Ａ Ｆターム(参考） 4B024 AA01 AA11 BA01 BA21 BA41 BA61 CA04 DA02 DA06 EA04 GA11 HA01 4B065 AA26X AA90X AA93Y AB01 BA02 CA24 CA25 CA44 4H045 AA10 AA11 BA10 BA41 CA40 CA41 DA01 DA75 EA20 EA50 FA74

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 配列番号２、４、６、８、１０、１２、
   １４、１６、１８または２０のいずれかのアミノ酸配列
   を有する精製ヒト蛋白質。
2. 【請求項２】 請求項１の蛋白質をコードするＤＮＡ断
   片。
3. 【請求項３】 請求項１の蛋白質をコードするヒトｃＤ
   ＮＡであって、１、３、５、７、９、１１、１３、１
   ５、１７または１９の翻訳領域の塩基配列を有するＤＮ
   Ａ断片。
4. 【請求項４】 配列番号１、３、５、７、９、１１、１
   ３、１５、１７または１９のいずれかの塩基配列からな
   る請求項３のＤＮＡ断片。
5. 【請求項５】 請求項２から４のいずれかのＤＮＡ断片
   をインビトロ翻訳あるいは宿主細胞内で発現しうる発現
   ベクター。
6. 【請求項６】 請求項５の発現ベクターによる形質転換
   体であって、請求項１の蛋白質を生産しうる形質転換細
   胞。
7. 【請求項７】 請求項１記載の蛋白質に対する抗体。