JP2001097880A

JP2001097880A - 脱脂糠由来のリパーゼ阻害物質

Info

Publication number: JP2001097880A
Application number: JP27526999A
Authority: JP
Inventors: Yasudai Fujii; 靖大藤井
Original assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Otsuka Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1999-09-28
Filing date: 1999-09-28
Publication date: 2001-04-10

Abstract

(57)【要約】【課題】熱安定性および保存安定性に優れたリパーゼ
阻害物質、中性脂肪吸収阻害剤および内臓脂肪沈着防止
剤ならびに食品を提供することである。【解決手段】本発明のリパーゼ阻害物質は、脱脂米糠を
熱水抽出するか、または脱脂米糠の水抽出液を加熱処理
して得られる脱脂糠由来のものである。本発明によれ
ば、このリパーゼ阻害物質を有効成分として含有した中
性脂肪吸収阻害剤および／または内臓脂肪沈着防止剤、
ならびに前記リパーゼ阻害物質を添加した食品が提供さ
れる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、動脈硬化、心筋梗
塞、糖尿病等の成人病の原因となる脂肪の摂取を抑制す
るのに有効な脱脂糠由来のリパーゼ阻害物質、このリパ
ーゼ阻害物質を含有した中性脂肪吸収阻害剤および内臓
脂肪沈着防止剤、さらに成人病や肥満の予防および治療
に有用な食品に関する。

【従来の技術】

【０００２】近年の日本人の食生活は欧米型に近づいて
きており、摂取カロリーは年々高くなっている。特に脂
肪分の摂取量が顕著に増加しており、中でも動物性脂肪
の摂取量が著しく増加している。

【０００３】このため、肥満対策や成人病予防の上か
ら、摂取された脂肪分が分解され体内に吸収されるのを
抑制または阻害するリパーゼ阻害物質が注目されてい
る。リパーゼ阻害物質としては、従来より大豆蛋白質ま
たは小麦胚芽由来の蛋白質が知られている。また、特公
平８−２５８９１号公報には脱脂米胚芽を水抽出して得
られる物質がリパーゼの活性を阻害または抑制すること
が開示されている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前記大
豆蛋白質、小麦胚芽由来の蛋白質および脱脂米胚芽の水
抽出物はいずれも熱に弱く、加熱すると容易に失活す
る。このため、食品として利用する場合に必要な加熱殺
菌や加熱調理を行うことができないため、食品への利用
範囲が限られたものにならざるを得ない。また、脱脂米
胚芽の水抽出物は水溶液中で不安定であり、室温では１
週間以内、冷所に保存した場合でも１〜２週間で沈殿が
生じ、失活する。

【０００５】このように前記した各リパーゼ阻害物質は
熱安定性や水溶液中での安定性に劣っているため、食品
等に添加して利用するのが非常に困難であった。従っ
て、本発明の主たる目的は、熱安定性および保存安定性
に優れ、しかも動脈硬化、心筋梗塞、糖尿病等の成人病
の原因となる脂肪の摂取を抑制するのに有効なリパーゼ
阻害物質、中性脂肪吸収阻害剤および内臓脂肪沈着防止
剤、さらに肥満の予防や治療等に有用な食品を提供する
ことである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決すべく鋭意研究を重ねた結果、脱脂米糠を熱水抽出
するか、または脱脂米糠の水抽出液を加熱処理して得ら
れる物質が高いリパーゼ阻害活性を有すると共に、熱に
対して高い安定性を有し、しかも水溶液形態で保存した
場合でも保存安定性に優れているという新たな事実を見
出し、本発明を完成するに至った。

【０００７】すなわち、本発明は、脱脂米糠を熱水抽出
するか、または脱脂米糠の水抽出液を加熱処理して得ら
れる脱脂糠由来のリパーゼ阻害物質を提供するものであ
る。かかる本発明のリパーゼ阻害物質は、９０℃以上の
加熱にも安定であり、水溶液中でも安定性が高く、失活
しないという特有の性質を有する。

【０００８】本発明における前記熱水抽出または加熱処
理は６０℃以上の温度で行うのがよい。これは、米糠に
含まれている酵素類を失活させるためである。このリパ
ーゼ阻害物質は粗生成物のまま使用してもよく、あるい
は部分的ないしは完全に精製して使用してもよい。精製
することにより少量で高い効果が得られる。

【０００９】また、本発明のリパーゼ阻害物質は腸管内
においてリパーゼの活性を阻害して脂肪が分解されるの
を抑制するため、脂肪分が腸管から吸収されるのを阻害
する作用を有する。従って、本発明は、粗生成物のま
ま、または精製した前記リパーゼ阻害物質を有効成分と
して含有した中性脂肪吸収阻害剤および／または内臓脂
肪沈着防止剤を提供するものである。

【００１０】これらの製剤は、その中性脂肪吸収阻害作
用または内臓脂肪沈着防止作用により、脂肪分の多い食
事を摂取しても、脂肪分の体内への吸収を抑制できるた
め、肥満、動脈硬化、高血圧、心筋梗塞、脳梗塞、糖尿
病等の予防や治療に有用である。

【００１１】さらに、本発明は、粗生成物のまま、また
は精製した前記リパーゼ阻害物質を添加した食品を提供
するものである。かかる本発明の食品は、前記のように
熱安定性および水溶液中での安定性等に優れたリパーゼ
阻害物質を含有しているので、殺菌や調理等の加熱処理
が可能であり、保存中の品質保持にも優れている。従っ
て、食品としての利用範囲を広げることができる。な
お、本発明のリパーゼ阻害物質はペット用等の飼料に添
加してもよい。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明において使用される米糠と
は、米の精米過程で生成するものをいう。また、脱脂米
糠とは、米糠から脂溶性画分を除去（脱脂）したもので
ある。脱脂方法は特に限定されず、例えば有機溶媒を用
いる方法、超臨界脱脂法等が採用可能である。前記有機
溶媒としては、例えばｎ−ヘキサン、アセトン等が挙げ
られる。また、超臨界脱脂法の代表例には超臨界炭酸ガ
ス法が挙げられる。

【００１３】本発明のリパーゼ阻害物質は、脱脂米糠か
ら熱水抽出するか、または脱脂米糠から水抽出した後、
加熱処理して得られる水溶性画分である。前記熱水抽出
は、蛋白質の変性が生じる温度６０℃以上の熱水で５分
〜２時間程度行うのが好ましい。

【００１４】また、別法では、脱脂米糠から室温で１０
分〜２時間程度水抽出して得られた水溶性画分を加熱処
理する。加熱処理は前記と同様に６０℃以上で５分〜２
時間程度行うのが好ましい。また、加熱処理は精製操作
の前後いずれの段階で行ってもよい。熱水抽出および加
熱処理における温度の上限は特に限定されないが、１０
０℃以下であるのがよい。

【００１５】本発明のリパーゼ阻害物質は、熱水抽出ま
たは水抽出して加熱処理された粗生成物をそのまま使用
してもよく、あるいは精製して使用してもよい。精製
は、例えば遠心分離、透析、限外ろ過等によって行うこ
とができる。また、精製は部分的であってもよい。前記
粗生成物または精製物は、水溶液形態のまま、または常
法により乾燥して粉末ないし顆粒形態に調製し、製剤も
しくは食品に利用される。

【００１６】本発明の中性脂肪吸収阻害剤および／また
は内臓脂肪沈着防止剤は、一般的な医療用製剤の形態で
用いられる。製剤の形態は特に限定されず、種々の形態
のなかから選択でき、その代表的なものとしては錠剤、
丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤
等の経口投与剤があげられる。

【００１７】経口投与剤を調製する場合には、通常使用
される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面
活性剤、滑沢剤、溶剤、賦形剤などを用いて製剤化され
る。

【００１８】製剤中に含有されるリパーゼ阻害物質の量
は、特に限定されず広範囲に選択することができるが、
通常、全組成物中に０．１〜８０重量％とするのがよ
い。製剤の投与方法は特に限定されず、各種製剤形態、
症状、患者の年齢、性別、その他の条件に応じて従来公
知の方法のなかから適宜選択すればよい。

【００１９】薬剤の投与量としては特に限定されず、用
法、患者の年齢、性別、疾患の程度その他の条件に応じ
て適宜選択すればよく、通常、１日あたり体重１ｋｇに
対してリパーゼ阻害物質が１０〜２０００ｍｇ、特に３
０〜５００ｍｇの割合で投与するのが好ましい。

【００２０】また、本発明のリパーゼ阻害物質は高い耐
熱性を有し９０℃以上の加熱にも安定であるため、殺菌
や調理方法に殆ど制約を受けないので、このリパーゼ阻
害物質を添加した食品の範囲は広く、種々の形態のもの
が採用可能であり、例えば飲料形態のほか、粉末状、固
形状、ペースト状、流動食等の形態が挙げられる。流動
食は、例えば、リパーゼ阻害物質を含む必要な各成分を
秤量し、水に投入して充分に混合した後、レトルト・パ
ウチ内に充填密封し、殺菌処理を行うことによって製造
することができる。食品形態でのリパーゼ阻害物質の摂
取量は、前記製剤の投与量と同量またはそれ以上であっ
てもよい。

【００２１】

【実施例】以下、実施例を挙げて、本発明のリパーゼ阻
害物質を詳細に説明する。

【００２２】実施例１脱脂米糠３００ｇに３Ｌの水を加えて、攪拌しながら加
熱し、液温を８５〜９５℃に保ち、４５分間加熱攪拌し
た。ついで、温度を下げて、粗ろ過した後、６０００ｒ
ｐｍで３０分間遠心分離した。その上清液を凍結乾燥
し、リパーゼ阻害物質の粉末６０ｇを得た（回収率２０
％）。

【００２３】実施例２脱脂米糠３００ｇに３Ｌの水を加えて、室温で４５分間
攪拌した。ついで、粗ろ過した後、６０００ｒｐｍで３
０分間遠心分離した。その上清液を攪拌しながら８５〜
９５℃で４５分間加熱処理し、８０００ｒｐｍで３０分
間遠心分離した。その上清液を凍結乾燥してリパーゼ阻
害物質の粉末４５ｇを得た（回収率１５％）。

【００２４】試験例１（米糠抽出物のリパーゼ阻害活性の測定）リパーゼ活性
測定用試薬（自動分析用リパーゼ「ＢＭＹ」、ベーリン
ガーマンハイム社製）を用い、３４０ｎｍの波長におけ
る吸光度を指標にし、脂質トリオレインを分解するブタ
膵臓リパーゼ（タイプＩＶ−Ｓ、シグマ社製）の活性を
１００としたとき、試料がリパーゼの活性を阻害する割
合を阻害率（％）として示した。すなわち、試料とし
て、実施例１で得たリパーゼ阻害物質の粉末を用い、こ
れを水に所定濃度で溶解させた各試料液０．５ｍＬに酵
素液（ブタ膵臓リパーゼ液、前出のタイプＩＶ−Ｓ）
０．１ｍＬ（１００Ｕ／ｍＬ）を加えて、３７℃で５分
間保ち、これに前記リパーゼ活性測定用試薬（基質とし
てトリオレインを０．３ｍＭ含有）２．５ｍＬを添加
し、４分後および９分後に波長３４０ｎｍで吸光度を測
定した。そして、４分後の吸光度から９分後の吸光度を
引き、あらかじめ求めたリパーゼ検量線からリパーゼ活
性を求めた。リパーゼ検量線は、所定濃度に希釈したリ
パーゼ液に試料の代わりに純水を加え、上記と同様にし
て測定することによって作成した。このようにして求め
たリパーゼ活性から、リパーゼ活性１００％に対する活
性低下を阻害率（％）として求めた。その結果を図１に
示す。

【００２５】試験例２（リパーゼ阻害活性の熱安定性試験）実施例２で得たリ
パーゼ阻害物質の粉末を水に溶解して濃度２重量％の試
料液を調製した。この試料を６０℃、７０℃、８０℃お
よび９０℃の温度でそれぞれ１０分間加熱し、波長４０
０ｎｍにて液の吸光度の変化を調べた。なお、比較のた
め、加熱処理以外は実施例２と同様に抽出・乾燥して得
た粉末を水に溶解して濃度２重量％としたもの（比較
例）を用いて、前記と同様にして各温度での吸光度の変
化を調べた。吸光度の測定に際しては、試料液をよく振
ってから測定した。試験結果を図２に示す。図２に示さ
れるように、比較例では温度が高いほど吸光度が上昇し
ており、液は白濁していた。これに対して、実施例２で
は、加熱温度に関係なく、吸光度が殆ど変化していない
ことから、高い熱安定性を有していることがわかる。

【００２６】試験例３（リパーゼ阻害活性の保存安定性試験）実施例２で得た
リパーゼ阻害物質の粉末を水に溶解して濃度２重量％の
試料液を調製した。この試料を４０℃の温度で３日間保
存し、波長４００ｎｍにて液の吸光度の変化を調べた。
また、比較のため、試験例２の比較例と同じ水溶液を用
いて、同様にして吸光度の変化を調べた。吸光度の測定
に際しては、試料液をよく振ってから測定した。試験結
果を図３に示す。図３に示されるように、比較例では、
３日間の保存で吸光度が約３倍も上昇しており、比較例
の試料液には白色の析出物の生成が認められた。これに
対して、実施例２では、保存の前後で吸光度は殆ど変化
しておらず、析出物の生成も認められなかったことか
ら、高い保存安定性を有していることがわかる。

【００２７】試験例４（ラットの血中脂肪量の測定）６週齢ウイスター系ラッ
ト（雄）を１週間馴化のため普通食で飼育した後、実施
例２で得たリパーゼ阻害物質を１ｇ／５ｍＬ／ｋｇで経
口投与し、３０分後にオリーブオイル１ｍＬ／ｋｇを経
口投与した。オリーブオイル投与から４時間後に開腹
し、下大静脈から採血し、血漿を分離した。一方、コン
トロールとして、リパーゼ阻害物質液に代えて同量の生
理食塩水を投与した他は前記と同様にして、血漿を分離
した。各血漿中のトリグリセライド（ＴＧ）をC-test
Wako（和光純薬社製）を用いて測定したところ、コント
ロール群（ｎ＝５）では平均値が１４８ｍｇ／ｄｌであ
ったのに対して、実施例２のリパーゼ阻害物質群（ｎ＝
５）では平均値が９７ｍｇ／ｄｌであった。

【００２８】試験例５（内臓脂肪量の測定）４週齢ＳＤラット（雄）を２週間
馴化のため普通食で飼育した。飼育は明暗サイクル下、
２３±２℃の条件下で行った。馴化飼育後、全ラットに
ついて体重を測定し、各群ごとに体重がほぼ一定になる
ように１群１０匹ずつ普通食投与群と１０％リパーゼ阻
害物質投与群とに群分けを行った。摂餌は自由摂取と
し、普通食投与群は実験動物用飼料（オリエンタル酵母
社製のＣＲＦ−１）を与えた。また、１０％リパーゼ阻
害物質投与群には普通食投与群と同じ実験動物用飼料に
実施例２で得たリパーゼ阻害物質の粉末を１０重量％混
合したものを与えた。試験開始から２８日後、エーテル
麻酔下で開腹し、内臓脂肪を採取し、重量測定を行っ
た。また、肝臓を採取して、肝臓のトリグリセライド
（ＴＧ）を測定した。内臓脂肪重量および肝臓１ｇ当た
りのトリグリセライド（ＴＧ）量の各測定値（平均値）
を図４に示す。

【００２９】

【発明の効果】本発明のリパーゼ阻害活性物質は、高い
リパーゼ阻害活性を有すると共に、熱安定性および保存
安定性に優れているため、食品等に利用する場合にもそ
の応用範囲が広いという効果がある。前記リパーゼ阻害
物質を有効成分として含有した本発明の中性脂肪吸収阻
害剤および／または内臓脂肪沈着防止剤は、その中性脂
肪吸収阻害作用または内臓脂肪沈着防止作用により、肥
満、動脈硬化、高血圧、心筋梗塞、脳梗塞、糖尿病等の
予防や治療に有用である。

【００３０】また、本発明の食品は、熱および水溶液中
での安定性に優れたリパーゼ阻害物質を含有しているの
で、殺菌や調理等の加熱処理が可能であり、保存中の品
質保持にも優れている。従って、肥満や成人病等の予防
と治療に有効な食品として、その利用範囲を広げること
ができるという効果がある。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明にかかるリパーゼ阻害物質の濃度とリパ
ーゼ活性の阻害率（％）との関係を示すグラフである。

【図２】本発明にかかるリパーゼ阻害物質の加熱による
吸光度の変化を示すグラフである。

【図３】本発明にかかるリパーゼ阻害物質を４０℃で保
存したときの吸光度の経時変化を示すグラフである。

【図４】本発明にかかるリパーゼ阻害物質の内臓脂質に
及ぼす影響を示すグラフである。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】脱脂米糠を熱水抽出するか、または脱脂米
糠の水抽出液を加熱処理して得られる脱脂糠由来のリパ
ーゼ阻害物質。
【請求項２】前記熱水抽出または加熱処理が６０℃以上
の温度で行われる請求項１記載のリパーゼ阻害物質。
【請求項３】請求項１で得られた粗生成物を精製したリ
パーゼ阻害物質。
【請求項４】請求項１または２記載のリパーゼ阻害物質
を有効成分として含有した中性脂肪吸収阻害剤。
【請求項５】請求項１または２記載のリパーゼ阻害物質
を有効成分として含有した内臓脂肪沈着防止剤。
【請求項６】請求項１または２記載のリパーゼ阻害物質
を添加した食品。