JP2000229871A - 抗アレルギー剤、活性酸素消去剤および皮膚化粧料 - Google Patents
抗アレルギー剤、活性酸素消去剤および皮膚化粧料Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 抗アレルギー作用と活性酸素消去作用を有し
皮膚化粧料構成成分としての適性も備えた物質を植物体
から見いだし、皮膚化粧料のための抗アレルギー剤およ
び活性酸素消去剤として提供する。 【解決手段】 水、メタノール、エタノール、１，３−
ブチレングリコール、プロピレングリコールまたはこれ
らの混合物を抽出溶媒とする抽出により得られたバーベ
リー樹皮の抽出物の活性酸素消去作用および抗アレルギ
ー作用を利用する。
皮膚化粧料構成成分としての適性も備えた物質を植物体
から見いだし、皮膚化粧料のための抗アレルギー剤およ
び活性酸素消去剤として提供する。 【解決手段】 水、メタノール、エタノール、１，３−
ブチレングリコール、プロピレングリコールまたはこれ
らの混合物を抽出溶媒とする抽出により得られたバーベ
リー樹皮の抽出物の活性酸素消去作用および抗アレルギ
ー作用を利用する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、皮膚化粧料に配合
するのに適した抗アレルギー剤、活性酸素消去剤、およ
びこれら皮膚の炎症や老化症状の予防と改善に有効な成
分を配合してなる皮膚化粧料に関するものである。
するのに適した抗アレルギー剤、活性酸素消去剤、およ
びこれら皮膚の炎症や老化症状の予防と改善に有効な成
分を配合してなる皮膚化粧料に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】皮膚のかぶれ、湿疹、アトピー症など、
アレルギーによる皮膚の各種炎症は、体内におけるヒス
タミン遊離、血小板凝集などのほか、スーパーオキサイ
ド、一重項酸素、ヒドロキシラジカル等の活性酸素が原
因となって発症する。
アレルギーによる皮膚の各種炎症は、体内におけるヒス
タミン遊離、血小板凝集などのほか、スーパーオキサイ
ド、一重項酸素、ヒドロキシラジカル等の活性酸素が原
因となって発症する。
【０００３】ヒスタミン遊離は、Ｉ型アレルギー反応に
伴って肥満細胞内のヒスタミンが細胞外に遊離する現象
で、遊離されたヒスタミンがアレルギー症状の起炎物質
となる。このヒスタミンの遊離を阻害することによりア
レルギー症の一部を抑制するのに有効な物質としては、
トラニラスト、クロモグリク酸ナトリウム、バイカリ
ン、バイカレイン、塩酸プロメタジン等がある。しかし
ながら、これらの物質は必ずといってよいほど副作用が
あり、一般的な皮膚化粧料に配合するには安全性の点で
問題があった。
伴って肥満細胞内のヒスタミンが細胞外に遊離する現象
で、遊離されたヒスタミンがアレルギー症状の起炎物質
となる。このヒスタミンの遊離を阻害することによりア
レルギー症の一部を抑制するのに有効な物質としては、
トラニラスト、クロモグリク酸ナトリウム、バイカリ
ン、バイカレイン、塩酸プロメタジン等がある。しかし
ながら、これらの物質は必ずといってよいほど副作用が
あり、一般的な皮膚化粧料に配合するには安全性の点で
問題があった。
【０００４】血小板凝集はアラキドン酸カスケードのホ
スホリパーゼＡ２の活性化を招き、それによりロイコト
リエンＢやプロスタグランジンＥ２等が放出されて起炎
物質となる。
スホリパーゼＡ２の活性化を招き、それによりロイコト
リエンＢやプロスタグランジンＥ２等が放出されて起炎
物質となる。
【０００５】活性酸素は、体内で過剰に産生されたり分
解酵素・ＳＯＤによる消去が不十分であったりして濃度
が高くなると、アレルギー性炎症を生じさせるだけでな
く、様々な組織障害の原因となる。皮膚は紫外線など環
境因子の刺激を直接受けるため活性酸素が発生しやすい
器官であるから、しばしば活性酸素濃度が上昇し、過酸
化脂質が生成してシミ、ソバカス、小ジワ等を増やす。
解酵素・ＳＯＤによる消去が不十分であったりして濃度
が高くなると、アレルギー性炎症を生じさせるだけでな
く、様々な組織障害の原因となる。皮膚は紫外線など環
境因子の刺激を直接受けるため活性酸素が発生しやすい
器官であるから、しばしば活性酸素濃度が上昇し、過酸
化脂質が生成してシミ、ソバカス、小ジワ等を増やす。
【０００６】そこで、上述の障害を回避するため、活性
酸素の濃度が過大になるのを防ぐのに有効な活性酸素消
去性物質を皮膚化粧料に配合すること、および、そのた
めの活性酸素消去性物質を安全性の点で有利な天然物か
ら得る試みがなされ、その結果、ウワミズザクラのプル
ヌソールＡ、ユーカリ等のエラグ酸、大麦、黒米、黒イ
ンゲン等の穀類のフラボノイド類、茶のカテキン、ゴマ
のセサミン類、セージ、ローズマリー等のハーブ類に含
まれるカルノソールやロズマノール等の有効性が確認さ
れている。
酸素の濃度が過大になるのを防ぐのに有効な活性酸素消
去性物質を皮膚化粧料に配合すること、および、そのた
めの活性酸素消去性物質を安全性の点で有利な天然物か
ら得る試みがなされ、その結果、ウワミズザクラのプル
ヌソールＡ、ユーカリ等のエラグ酸、大麦、黒米、黒イ
ンゲン等の穀類のフラボノイド類、茶のカテキン、ゴマ
のセサミン類、セージ、ローズマリー等のハーブ類に含
まれるカルノソールやロズマノール等の有効性が確認さ
れている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、抗ア
レルギー作用と活性酸素消去作用を有し皮膚化粧料構成
成分としての適性も備えた物質を植物体から見いだし、
抗アレルギー剤および活性酸素消去剤として提供するこ
とにある。
レルギー作用と活性酸素消去作用を有し皮膚化粧料構成
成分としての適性も備えた物質を植物体から見いだし、
抗アレルギー剤および活性酸素消去剤として提供するこ
とにある。
【０００８】本発明の他の目的は、安全性の高い天然物
系の抗アレルギー作用物質および活性酸素消去作用物質
を配合することにより抗炎症作用および皮膚保護作用を
強化した皮膚化粧料を提供することにある。
系の抗アレルギー作用物質および活性酸素消去作用物質
を配合することにより抗炎症作用および皮膚保護作用を
強化した皮膚化粧料を提供することにある。
【０００９】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成すること
に成功した本発明は、メタノール、エタノール、１，３
−ブチレングリコール、プロピレングリコール等の親水
性有機溶媒、水、またはこれらの混合物を抽出溶媒とす
る抽出によりバーベリー樹皮より得られる抽出物を有効
成分とする抗アレルギー剤および活性酸素消去剤、なら
びにこれらを配合することにより抗炎症作用および皮膚
保護作用を強化したことを特徴とする皮膚化粧料を提供
するものである。
に成功した本発明は、メタノール、エタノール、１，３
−ブチレングリコール、プロピレングリコール等の親水
性有機溶媒、水、またはこれらの混合物を抽出溶媒とす
る抽出によりバーベリー樹皮より得られる抽出物を有効
成分とする抗アレルギー剤および活性酸素消去剤、なら
びにこれらを配合することにより抗炎症作用および皮膚
保護作用を強化したことを特徴とする皮膚化粧料を提供
するものである。
【００１０】
【発明の実施の形態】バーベリー（Ｍａｈｏｎｉａ ｎ
ｅｐａｌａｕｌｅｎｓｉｓ）は主に中央アジアの亜高山
帯に生育するメギ科の植物であって、その樹皮は神経痛
の治療に有効とされているが、その場合の有効成分や薬
理作用の詳細は解明されていない。バーベリー樹皮に抗
アレルギー作用や活性酸素消去作用を有する物質が含ま
れていることも、もちろん知られていなかった。
ｅｐａｌａｕｌｅｎｓｉｓ）は主に中央アジアの亜高山
帯に生育するメギ科の植物であって、その樹皮は神経痛
の治療に有効とされているが、その場合の有効成分や薬
理作用の詳細は解明されていない。バーベリー樹皮に抗
アレルギー作用や活性酸素消去作用を有する物質が含ま
れていることも、もちろん知られていなかった。
【００１１】バーベリー樹皮に含まれていて抗アレルギ
ー作用や活性酸素消去作用を示す物質は、水溶性であ
り、また多くの化粧料に配合しても安定であり、さらに
経皮的に人体内によく吸収される性質のものである。し
かも、皮膚に塗布しても皮膚を刺激したり炎症を起こさ
せたりすることがない。したがって、皮膚化粧料に配合
してその有用作用を活用するのにきわめて好都合な性質
を備えている。
ー作用や活性酸素消去作用を示す物質は、水溶性であ
り、また多くの化粧料に配合しても安定であり、さらに
経皮的に人体内によく吸収される性質のものである。し
かも、皮膚に塗布しても皮膚を刺激したり炎症を起こさ
せたりすることがない。したがって、皮膚化粧料に配合
してその有用作用を活用するのにきわめて好都合な性質
を備えている。
【００１２】バーベリー樹皮から上記有用作用を示す物
質を抽出するには各種の親水性有機溶媒、水、またはこ
れらの混合物を使用することができるが、特に好ましい
抽出溶媒はメタノール、エタノール、イソプロパノー
ル、ブタノール等、炭素数１〜４の脂肪族アルコール；
１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、
グリセリン等の多価アルコール；アセトン、メチルエチ
ルケトン等の低級脂肪族ケトン；水；またはこれらの混
合物である。
質を抽出するには各種の親水性有機溶媒、水、またはこ
れらの混合物を使用することができるが、特に好ましい
抽出溶媒はメタノール、エタノール、イソプロパノー
ル、ブタノール等、炭素数１〜４の脂肪族アルコール；
１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、
グリセリン等の多価アルコール；アセトン、メチルエチ
ルケトン等の低級脂肪族ケトン；水；またはこれらの混
合物である。
【００１３】抽出条件および抽出に用いる装置は特に限
定されないが、好適には重量比で５〜１５倍量の抽出溶
媒にバーベリー樹皮の粉砕物を浸漬し、常温ないし１０
０℃程度の加熱下にゆるやかに撹拌しながら可溶性成分
を溶出させる。濾過または遠心分離して得られた抽出液
から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、さ
らに乾燥すれば約３〜１０数％の収率で淡褐色の抽出物
が得られるが、抗アレルギー剤または（および）活性酸
素消去剤として利用するバーベリー樹皮抽出物は固形の
抽出物である必要はなく、上記抽出液またはその濃縮液
の状態のものであってもよい。また、その有用作用を損
なわない限り、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換
樹脂処理、液−液向流分配等の方法により精製してから
用いてもよい。
定されないが、好適には重量比で５〜１５倍量の抽出溶
媒にバーベリー樹皮の粉砕物を浸漬し、常温ないし１０
０℃程度の加熱下にゆるやかに撹拌しながら可溶性成分
を溶出させる。濾過または遠心分離して得られた抽出液
から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、さ
らに乾燥すれば約３〜１０数％の収率で淡褐色の抽出物
が得られるが、抗アレルギー剤または（および）活性酸
素消去剤として利用するバーベリー樹皮抽出物は固形の
抽出物である必要はなく、上記抽出液またはその濃縮液
の状態のものであってもよい。また、その有用作用を損
なわない限り、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換
樹脂処理、液−液向流分配等の方法により精製してから
用いてもよい。
【００１４】製剤化する場合は、上述の抽出物またはそ
の精製物を、必要に応じて任意の助剤と混合して、錠
剤、散剤、液剤等、任意の剤形のものとする。
の精製物を、必要に応じて任意の助剤と混合して、錠
剤、散剤、液剤等、任意の剤形のものとする。
【００１５】本発明による抗アレルギー剤および活性酸
素消去剤を配合した皮膚化粧料を製造するのに特別の配
慮は不要であって、化粧料製造に通常使用される原料を
常法により処理して乳液、ローション、クリーム、ゼリ
ー、パック等各種形態の化粧品を製造する工程の任意の
段階でこれを添加すればよい。
素消去剤を配合した皮膚化粧料を製造するのに特別の配
慮は不要であって、化粧料製造に通常使用される原料を
常法により処理して乳液、ローション、クリーム、ゼリ
ー、パック等各種形態の化粧品を製造する工程の任意の
段階でこれを添加すればよい。
【００１６】皮膚化粧料に対する好適配合率は、皮膚化
粧料の種類によっても異なるが、標準的なバーベリー樹
皮抽出物としておおむね０．００１〜１０重量％（特に
好ましくは０．０５〜２重量％）である。
粧料の種類によっても異なるが、標準的なバーベリー樹
皮抽出物としておおむね０．００１〜１０重量％（特に
好ましくは０．０５〜２重量％）である。
【００１７】添加対象となる皮膚化粧料の基本的な構成
成分の選択が制限されることはなく、たとえばアボガド
油、コメヌカ油、コメ胚芽油、ラノリン、蜜ロウ、スク
ワラン、ワセリン、流動パラフィン等の油性成分；グリ
セリン、１，３−ブチレングリコール、コラーゲン、ヒ
アルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸およびそ
の塩、キトサン、キチン等の保湿剤；グリセロリン脂
質、スフィンゴ脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂
質等の複合脂質；ＳＯＤ、カタラーゼ、β−カロチン、
イチョウ葉抽出物、ビタミンＣおよびその誘導体、ビタ
ミンＥおよびその誘導体、オウゴン抽出物、クジン抽出
物等の活性酸素消去作用物質；グアイアズレン、カマア
ズレンおよびその誘導体；グリチルリチン酸、グリチル
レチン酸およびその塩、グリチルレチン酸誘導体、酸化
亜鉛等の抗炎症剤；その他各種植物抽出物、増粘剤、防
腐剤、紫外線吸収剤、香料、酸化防止剤、水、アルコー
ル等、皮膚化粧料製造に通常使用される成分を任意に使
用することができる。
成分の選択が制限されることはなく、たとえばアボガド
油、コメヌカ油、コメ胚芽油、ラノリン、蜜ロウ、スク
ワラン、ワセリン、流動パラフィン等の油性成分；グリ
セリン、１，３−ブチレングリコール、コラーゲン、ヒ
アルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸およびそ
の塩、キトサン、キチン等の保湿剤；グリセロリン脂
質、スフィンゴ脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂
質等の複合脂質；ＳＯＤ、カタラーゼ、β−カロチン、
イチョウ葉抽出物、ビタミンＣおよびその誘導体、ビタ
ミンＥおよびその誘導体、オウゴン抽出物、クジン抽出
物等の活性酸素消去作用物質；グアイアズレン、カマア
ズレンおよびその誘導体；グリチルリチン酸、グリチル
レチン酸およびその塩、グリチルレチン酸誘導体、酸化
亜鉛等の抗炎症剤；その他各種植物抽出物、増粘剤、防
腐剤、紫外線吸収剤、香料、酸化防止剤、水、アルコー
ル等、皮膚化粧料製造に通常使用される成分を任意に使
用することができる。
【００１８】
【実施例】バーベリー樹皮抽出例 乾燥したバーベリー樹皮の粗砕物５００ｇを抽出溶媒３
０００ｍｌに投入し、７０℃に加熱しながら２時間撹拌
する。その後、濾過して得られた抽出液を減圧下に濃縮
し、さらに減圧乾燥機で乾燥して抽出物を得る。抽出溶
媒を種々変更して上記抽出を行なった場合の抽出物収率
は表１のとおりであった。
０００ｍｌに投入し、７０℃に加熱しながら２時間撹拌
する。その後、濾過して得られた抽出液を減圧下に濃縮
し、さらに減圧乾燥機で乾燥して抽出物を得る。抽出溶
媒を種々変更して上記抽出を行なった場合の抽出物収率
は表１のとおりであった。
【００１９】
【表１】
【００２０】試験例１ 上記各抽出例で得られたバーベリー樹皮抽出物につい
て、スーパーオキサイド消去作用、一重項酸素消去作
用、およびＤＰＰＨ（ジフェニルピクリルヒドロラジカ
ル）に対するラジカル消去作用を試験した。試験法は次
のとおりである。
て、スーパーオキサイド消去作用、一重項酸素消去作
用、およびＤＰＰＨ（ジフェニルピクリルヒドロラジカ
ル）に対するラジカル消去作用を試験した。試験法は次
のとおりである。
【００２１】スーパーオキサイド消去作用（ＮＢＴ
法）：３ｍＭキサンチン、０．０５ＭＮａ２ＣＯ３緩衝
液（ｐＨ１０．２）、３ｍＭ ＥＤＴＡ、ＢＳＡ溶液お
よび０．７５ｍＭ ＮＢＴ ０．１ｍｌを試験管にと
り、これに試料溶液０．１ｍｌを添加し、２５℃で１０
分間放置する。次いでキサンチンオキシダーゼ溶液を加
えて素早く撹拌し、２５℃で２０分間静置する。その後
６ｍＭ塩化銅を加えて反応を停止させ、５６０ｎｍにお
ける吸光度を測定する。同様の操作と吸光度測定を、酵
素溶液を添加せずに行う。さらに、試料溶液を添加せず
に蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行い、
次式によりスーパーオキサイド消去率を求める。
法）：３ｍＭキサンチン、０．０５ＭＮａ２ＣＯ３緩衝
液（ｐＨ１０．２）、３ｍＭ ＥＤＴＡ、ＢＳＡ溶液お
よび０．７５ｍＭ ＮＢＴ ０．１ｍｌを試験管にと
り、これに試料溶液０．１ｍｌを添加し、２５℃で１０
分間放置する。次いでキサンチンオキシダーゼ溶液を加
えて素早く撹拌し、２５℃で２０分間静置する。その後
６ｍＭ塩化銅を加えて反応を停止させ、５６０ｎｍにお
ける吸光度を測定する。同様の操作と吸光度測定を、酵
素溶液を添加せずに行う。さらに、試料溶液を添加せず
に蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行い、
次式によりスーパーオキサイド消去率を求める。
【００２２】消去率（％）＝〔１−（Ｓｔ−Ｓｏ）／
（Ｂｔ−Ｂｏ）〕×１００ 但し Ｓｔ：試料溶液添加，酵素溶液添加時の吸光度 Ｓｏ：試料溶液添加，酵素溶液無添加時の吸光度 Ｂｔ：試料溶液無添加，酵素溶液添加時の吸光度 Ｂｏ：試料溶液無添加，酵素溶液無添加時の吸光度
（Ｂｔ−Ｂｏ）〕×１００ 但し Ｓｔ：試料溶液添加，酵素溶液添加時の吸光度 Ｓｏ：試料溶液添加，酵素溶液無添加時の吸光度 Ｂｔ：試料溶液無添加，酵素溶液添加時の吸光度 Ｂｏ：試料溶液無添加，酵素溶液無添加時の吸光度
【００２３】試料溶液の試料濃度を段階的に変更して上
記抑制率の測定を行い、活性酸素産生の抑制率が５０％
になる試料溶液の濃度を内挿法により求める。
記抑制率の測定を行い、活性酸素産生の抑制率が５０％
になる試料溶液の濃度を内挿法により求める。
【００２４】一重項酸素消去作用：透明ガラス瓶（１０
ｍｌ容）中で２％赤血球懸濁液５ｍｌ、試料を所定濃度
で含むｐＨ７．４の等張リン酸緩衝液５ｍｌ、および光
増感剤（１０ｍＭヘマトポルフィリン−２０ｍＭ水酸化
ナトリウム溶液）０．０１ｍｌを混合する。得られた溶
液をメリーゴーランド上、７．５Ｗハロゲンランプで３
５分間均一に照射して１Ｏ２を発生させ、赤血球の溶血
を生じさせる。この反応溶液１ｍｌを採取し、等張リン
酸緩衝液２ｍｌを加えて混合後、４℃で３０００ｒｐｍ
・５分間の遠心分離を行う。次いで上清を採取し、波長
５４０ｎｍの吸光度を測定する。別に、赤血球を一部溶
血させた上記反応溶液１ｍｌをとり、これに蒸留水２ｍ
ｌを加えて完全に溶血させたものを対照液とし、同様に
吸光度測定を行う。測定された吸光度より次式により一
重項酸素消去率を求める。 一重項酸素消去率（％）＝（１−Ｂ／Ａ）×１００ 但し Ａ：対照液の吸光度 Ｂ：反応溶液上清の吸光度
ｍｌ容）中で２％赤血球懸濁液５ｍｌ、試料を所定濃度
で含むｐＨ７．４の等張リン酸緩衝液５ｍｌ、および光
増感剤（１０ｍＭヘマトポルフィリン−２０ｍＭ水酸化
ナトリウム溶液）０．０１ｍｌを混合する。得られた溶
液をメリーゴーランド上、７．５Ｗハロゲンランプで３
５分間均一に照射して１Ｏ２を発生させ、赤血球の溶血
を生じさせる。この反応溶液１ｍｌを採取し、等張リン
酸緩衝液２ｍｌを加えて混合後、４℃で３０００ｒｐｍ
・５分間の遠心分離を行う。次いで上清を採取し、波長
５４０ｎｍの吸光度を測定する。別に、赤血球を一部溶
血させた上記反応溶液１ｍｌをとり、これに蒸留水２ｍ
ｌを加えて完全に溶血させたものを対照液とし、同様に
吸光度測定を行う。測定された吸光度より次式により一
重項酸素消去率を求める。 一重項酸素消去率（％）＝（１−Ｂ／Ａ）×１００ 但し Ａ：対照液の吸光度 Ｂ：反応溶液上清の吸光度
【００２５】試料溶液の試料濃度を段階的に変更して上
記消去率の測定を行い、一重項酸素の消去率が５０％に
なる試料溶液の濃度を内挿法により求める。
記消去率の測定を行い、一重項酸素の消去率が５０％に
なる試料溶液の濃度を内挿法により求める。
【００２６】ＤＰＰＨに対するラジカル消去作用：１．
５×１０−４ＭＤＰＰＨメタノール溶液３ｍｌに試料溶
液３ｍｌを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜ、３０
分間静置する。その後、５２０ｎｍの吸光度を測定す
る。対照試験として、試料溶液の代わりにその溶媒を用
いて同様に操作し、５２０ｎｍの吸光度を測定する。ま
た、空試験として、メタノールに試料溶液３ｍｌを加え
たのち直ちに５２０ｎｍの吸光度を測定する。測定され
た各吸光度より、次式によりラジカル消去率を算出す
る。
５×１０−４ＭＤＰＰＨメタノール溶液３ｍｌに試料溶
液３ｍｌを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜ、３０
分間静置する。その後、５２０ｎｍの吸光度を測定す
る。対照試験として、試料溶液の代わりにその溶媒を用
いて同様に操作し、５２０ｎｍの吸光度を測定する。ま
た、空試験として、メタノールに試料溶液３ｍｌを加え
たのち直ちに５２０ｎｍの吸光度を測定する。測定され
た各吸光度より、次式によりラジカル消去率を算出す
る。
【００２７】 消去率（％）＝〔１−（Ｂ−Ｃ）／Ａ〕×１００ 但し Ａ：対照試験の吸光度 Ｂ：試料溶液を添加した場合の吸光度 Ｃ：空試験の吸光度
【００２８】試料溶液の試料濃度を段階的に変更して上
記消去率の測定を行い、ＤＰＰＨラジカルの消去率が５
０％になる試料溶液の濃度を内挿法により求める。
記消去率の測定を行い、ＤＰＰＨラジカルの消去率が５
０％になる試料溶液の濃度を内挿法により求める。
【００２９】試験結果を表２に示す。
【００３０】
【表２】
【００３１】試験例２ 前記抽出例１〜５による各抽出物について下記の方法に
よりヒスタミン遊離抑制作用を調べた（細胞内のヒスタ
ミンが遊離されると同時にヘキソサミニダーゼも遊離さ
れることから、ヘキソサミニダーゼ遊離を指標にヒスタ
ミン遊離抑制作用を評価する方法である。）。
よりヒスタミン遊離抑制作用を調べた（細胞内のヒスタ
ミンが遊離されると同時にヘキソサミニダーゼも遊離さ
れることから、ヘキソサミニダーゼ遊離を指標にヒスタ
ミン遊離抑制作用を評価する方法である。）。
【００３２】試験法：２５ｍｌのフラスコに入れた１５
％ＦＢＳ添加ＭＥＭ培地にＲＢＬ−２Ｈ３細胞１．０×
１０６個を播種し、５％ＣＯ２下、３７℃で４日間培養
する。その後トリプシン処理および遠心処理（１０００
ｒｐｍ，２分間）を行なって細胞を沈殿物として得る。
これを上記培地と同じ培地に４．０×１０５ｃｅｌｌ／
ｍｌ懸濁させ、そこにマウスモノクロナール抗ジニトロ
フェニル基ＩｇＥ（ＤＮＰ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｇ
Ｅ）を５μｌ添加し、濃度を０．５μｇ／ｍｌとする。
得られた細胞浮遊液を９６穴プレートに８０μｌ播種
し、５％ＣＯ２下３７℃で２４時間培養する。培養終了
後、各穴中の培地を除去し、シリガリアン緩衝液で洗浄
する。次に上記緩衝液３０μｌおよび試料溶液１０μｌ
を加え、３７℃で１０分間インキュベートする。次にジ
ニトロフェニル化ウシ血清アルブミン（ＤＮＰ−ＢＳ
Ａ）１０μｌを加え、さらに３７℃で１５分間インキュ
ベートする。その後、氷冷下で上清液１０μｌを新たな
９６穴プレートに移し替え、これに１ｍＭ ｐ−ニトロ
フェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミド溶液１
０μｌを加え、３７℃で１時間インキュベートする。反
応終了後、０．１Ｍ Ｎａ２ＣＯ３・ＮａＨＣＯ３溶液
２５０μｌを加え、マイクロプレートリーダーにて４１
５ｎｍにおける吸光度Ａを測定する。試料溶液を添加し
ない細胞浮遊液についても同様の処理と吸光度測定を行
う（このとき測定される吸光度をＢとする）。また、細
胞浮遊液のかわりに上記緩衝液を用いて同様の処理と吸
光度測定を行う（このとき測定される吸光度をＣとす
る）。そして、次式によりヘキソサミニダーゼ遊離抑制
率を算出する。 ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）＝〔１−（Ａ−
Ｃ）／（Ｂ−Ｃ）〕×１００
％ＦＢＳ添加ＭＥＭ培地にＲＢＬ−２Ｈ３細胞１．０×
１０６個を播種し、５％ＣＯ２下、３７℃で４日間培養
する。その後トリプシン処理および遠心処理（１０００
ｒｐｍ，２分間）を行なって細胞を沈殿物として得る。
これを上記培地と同じ培地に４．０×１０５ｃｅｌｌ／
ｍｌ懸濁させ、そこにマウスモノクロナール抗ジニトロ
フェニル基ＩｇＥ（ＤＮＰ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｉｇ
Ｅ）を５μｌ添加し、濃度を０．５μｇ／ｍｌとする。
得られた細胞浮遊液を９６穴プレートに８０μｌ播種
し、５％ＣＯ２下３７℃で２４時間培養する。培養終了
後、各穴中の培地を除去し、シリガリアン緩衝液で洗浄
する。次に上記緩衝液３０μｌおよび試料溶液１０μｌ
を加え、３７℃で１０分間インキュベートする。次にジ
ニトロフェニル化ウシ血清アルブミン（ＤＮＰ−ＢＳ
Ａ）１０μｌを加え、さらに３７℃で１５分間インキュ
ベートする。その後、氷冷下で上清液１０μｌを新たな
９６穴プレートに移し替え、これに１ｍＭ ｐ−ニトロ
フェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミド溶液１
０μｌを加え、３７℃で１時間インキュベートする。反
応終了後、０．１Ｍ Ｎａ２ＣＯ３・ＮａＨＣＯ３溶液
２５０μｌを加え、マイクロプレートリーダーにて４１
５ｎｍにおける吸光度Ａを測定する。試料溶液を添加し
ない細胞浮遊液についても同様の処理と吸光度測定を行
う（このとき測定される吸光度をＢとする）。また、細
胞浮遊液のかわりに上記緩衝液を用いて同様の処理と吸
光度測定を行う（このとき測定される吸光度をＣとす
る）。そして、次式によりヘキソサミニダーゼ遊離抑制
率を算出する。 ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）＝〔１−（Ａ−
Ｃ）／（Ｂ−Ｃ）〕×１００
【００３３】試料溶液の濃度を段階的に変更して上記方
法により抑制率を測定し、抑制率が５０％になる試料溶
液の濃度を内挿法により求める。試験結果は表３のとお
りであった。
法により抑制率を測定し、抑制率が５０％になる試料溶
液の濃度を内挿法により求める。試験結果は表３のとお
りであった。
【００３４】
【表３】 抽出物 ５０％抑制濃度（ｐｐｍ） 抽出例１ ２０１．５ 抽出例２ １９５．０ 抽出例３ ２０５．５ 抽出例４ １９８．５ 抽出例５ ２００．５
【００３５】試験例３ 前記抽出例１〜５による各抽出物について、下記の方法
で血小板凝集抑制作用を試験した。
で血小板凝集抑制作用を試験した。
【００３６】試験法：日本種白色家兎の血液に７７ｍＭ
ＥＤＴＡを１／１０量添加し、１０００ｒｐｍで１０
分間遠心分離して沈殿物を除く。上清を２１００ｒｐｍ
で１０分間遠心分離し、沈殿した血小板を採取する。得
られた血小板を血小板洗浄液に浮遊させ、２１００ｒｐ
ｍで１０分間遠心分離する。沈殿した血小板を採取し、
血小板数が３０万個／μｌになるように血小板浮遊液に
浮遊させる。上述のようにして調製した洗浄血小板浮遊
液２２３μｌに塩化カルシウム溶液１μｌを加え、３７
℃に１分間保持する。そこに試料溶液１μｌを加えてさ
らに２分間同温度に保持した後、１分間撹拌する。次い
でコラーゲン溶液を２５μｌ添加し、３７℃に１０分間
保持した後、可視光線透過率Ａを測定して、血小板凝集
状態の指標とする。別に、試料溶液を添加しないほかは
上記と同様に操作して可視光線透過率Ｂを測定し、次式
により血小板凝集抑制率を求める。
ＥＤＴＡを１／１０量添加し、１０００ｒｐｍで１０
分間遠心分離して沈殿物を除く。上清を２１００ｒｐｍ
で１０分間遠心分離し、沈殿した血小板を採取する。得
られた血小板を血小板洗浄液に浮遊させ、２１００ｒｐ
ｍで１０分間遠心分離する。沈殿した血小板を採取し、
血小板数が３０万個／μｌになるように血小板浮遊液に
浮遊させる。上述のようにして調製した洗浄血小板浮遊
液２２３μｌに塩化カルシウム溶液１μｌを加え、３７
℃に１分間保持する。そこに試料溶液１μｌを加えてさ
らに２分間同温度に保持した後、１分間撹拌する。次い
でコラーゲン溶液を２５μｌ添加し、３７℃に１０分間
保持した後、可視光線透過率Ａを測定して、血小板凝集
状態の指標とする。別に、試料溶液を添加しないほかは
上記と同様に操作して可視光線透過率Ｂを測定し、次式
により血小板凝集抑制率を求める。
【００３７】 血小板凝集抑制率（％）＝〔（Ｂ−Ａ）／Ｂ〕×１００ 試料溶液の濃度を段階的に変更して上記血小板凝集抑制
率を測定し、抑制率が５０％になる濃度を内挿法により
求める。試験結果は表４のとおりであった。
率を測定し、抑制率が５０％になる濃度を内挿法により
求める。試験結果は表４のとおりであった。
【００３８】
【表４】 抽出物 ５０％抑制濃度（ｐｐｍ） 抽出例１ ８０．５ 抽出例２ ８７．５ 抽出例３ ９５．０ 抽出例４ １００．５ 抽出例５ ９８．５
【００３９】実施例１ 抽出例１のバーベリー樹皮水抽出物を配合した下記組成
の乳液を乳液製造の常法に従い製造した（「部」は重量
部を意味する。以下の各例において同じ。）。
の乳液を乳液製造の常法に従い製造した（「部」は重量
部を意味する。以下の各例において同じ。）。
【００４０】 ステアリン酸 ２部 スクワラン ２部 オリーブ油 ２部 セタノール ７部 ホホバ油 ２部 ポリオキシエチレン（４０ＥＯ）硬化ひまし油 １部 グリセリン １０部 バーベリー樹皮抽出物 ３部 精製水 残部（全量を１００部とする）
【００４１】実施例２ 抽出例２によるバーベリー樹皮８０％エタノール抽出物
を配合した下記組成の化粧水を、化粧水製造の常法によ
り製造した。
を配合した下記組成の化粧水を、化粧水製造の常法によ
り製造した。
【００４２】 グリセリン ３部 １，３−ブチレングリコール ３部 オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０ＥＯ） ３部 パラオキシ安息香酸メチル ０．５部 クエン酸 ０．１部 クエン酸ソーダ １部 香料 ０．０５部 バーベリー樹皮抽出物 ３部 精製水 残部（全量を１００部とする）
【００４３】実施例３ 抽出例５によるバーベリー樹皮１，３−ブチレングリコ
ール抽出物を配合した下記組成のクリームを、クリーム
製造の常法により製造した。
ール抽出物を配合した下記組成のクリームを、クリーム
製造の常法により製造した。
【００４４】 流動パラフィン ５部 サラシミツロウ ４部 セタノール ３部 スクワラン １０部 ラノリン ２部 ステアリン酸 １部 オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０ＥＯ） ３部 モノステアリン酸グリセリル ３部 １，３−ブチレングリコール ５部 パラオキシ安息香酸メチル ０．５部 香料 ０．０５部 バーベリー樹皮抽出物 ３部 精製水 残部（全量を１００部とする）
【００４５】試験例４ 実施例２の乳液について、下記の塗布試験を行なった。 試験法：肌荒れ状態の女性１０名（年齢２９〜４８歳）
からなる被験者群２群の一方に実施例２の乳液を、他方
にはバーベリー樹皮抽出物を含まないほかは実施例２と
同じ組成の比較例乳液を、それぞれ１日２回、朝夕に、
３カ月間、顔面頬部に塗布させる。
からなる被験者群２群の一方に実施例２の乳液を、他方
にはバーベリー樹皮抽出物を含まないほかは実施例２と
同じ組成の比較例乳液を、それぞれ１日２回、朝夕に、
３カ月間、顔面頬部に塗布させる。
【００４６】使用開始前と使用３カ月後の肌の状態につ
いて各被験者に感想を述べさせた結果は表５，６のとお
りで、バーベリー樹皮抽出物を含有させることにより乳
液の使用効果が顕著に向上することが確認された。
いて各被験者に感想を述べさせた結果は表５，６のとお
りで、バーベリー樹皮抽出物を含有させることにより乳
液の使用効果が顕著に向上することが確認された。
【００４７】
【表４】
【００４８】
【表５】
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 37/08 Ａ６１Ｋ 31/00 ６３７Ｅ 39/06 ６３９Ｃ (72)発明者 山本 進 広島県尾道市向東町14703−10丸善製薬株 式会社内 Ｆターム(参考） 4C083 AA082 AA111 AA112 AA122 AC022 AC072 AC122 AC242 AC302 AC422 AC432 AC442 AC482 AD512 BB51 CC04 CC05 DD23 DD27 DD31 EE06 EE12 EE16 4C088 AB63 AC06 BA08 BA09 BA10 MA63 NA14 ZA89 ZB13 ZC21
Claims (3)
- 【請求項１】 水、メタノール、エタノール、１，３−
ブチレングリコール、プロピレングリコールまたはこれ
らの混合物を抽出溶媒とする抽出により得られたバーベ
リー樹皮の抽出物を有効成分としてなる抗アレルギー
剤。 - 【請求項２】 水、メタノール、エタノール、１，３−
ブチレングリコール、プロピレングリコールまたはこれ
らの混合物を抽出溶媒とする抽出により得られたバーベ
リー樹皮の抽出物を有効成分としてなる活性酸素消去
剤。 - 【請求項３】 請求項１記載の抗アレルギー剤または
（および）活性酸素消去剤を含有することを特徴とする
皮膚化粧料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07065499A JP4523087B2 (ja) | 1999-02-10 | 1999-02-10 | 抗アレルギー剤、活性酸素消去剤および皮膚化粧料 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP07065499A JP4523087B2 (ja) | 1999-02-10 | 1999-02-10 | 抗アレルギー剤、活性酸素消去剤および皮膚化粧料 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000229871A true JP2000229871A (ja) | 2000-08-22 |
| JP4523087B2 JP4523087B2 (ja) | 2010-08-11 |
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ID=13437869
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP07065499A Expired - Fee Related JP4523087B2 (ja) | 1999-02-10 | 1999-02-10 | 抗アレルギー剤、活性酸素消去剤および皮膚化粧料 |
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|---|---|
| JP (1) | JP4523087B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004532212A (ja) * | 2001-04-05 | 2004-10-21 | ニュー・チャプター・インコーポレーテッド | 改良された抗炎症性ハーブ組成物及び使用方法 |
| JP2004346019A (ja) * | 2003-05-22 | 2004-12-09 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | コラーゲン産生促進剤及びシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤 |
| JP2007063192A (ja) * | 2005-08-31 | 2007-03-15 | Lion Corp | 男性臭抑制剤 |
| JP2008231429A (ja) * | 2008-04-07 | 2008-10-02 | Kanebo Cosmetics Inc | 抗酸化剤及び皮膚外用剤 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000226312A (ja) * | 1999-02-02 | 2000-08-15 | Shiseido Co Ltd | 皮膚外用剤 |
-
1999
- 1999-02-10 JP JP07065499A patent/JP4523087B2/ja not_active Expired - Fee Related
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|---|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
| JP2004532212A (ja) * | 2001-04-05 | 2004-10-21 | ニュー・チャプター・インコーポレーテッド | 改良された抗炎症性ハーブ組成物及び使用方法 |
| JP2004346019A (ja) * | 2003-05-22 | 2004-12-09 | Maruzen Pharmaceut Co Ltd | コラーゲン産生促進剤及びシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤 |
| JP2007063192A (ja) * | 2005-08-31 | 2007-03-15 | Lion Corp | 男性臭抑制剤 |
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