HU228335B1

HU228335B1 - New pentasaccharides, their methods of production and pharmaceutical compositions comprising same

Info

Publication number: HU228335B1
Application number: HU0102042A
Authority: HU
Inventors: Maurice Petitou
Original assignee: Akzo Nobel Nv; Sanofi Aventis
Priority date: 1998-01-19
Filing date: 1999-01-13
Publication date: 2013-03-28
Also published as: AU1974699A; CO4970823A1; SI1049706T1; NZ505614A; GT199900006A; EP1049706B1; CA2318326A1; SK10792000A3; EE200000421A1; CA2318326C; IL137240A0; SK284176B6; ES2200494T3; AU744137B2; PT1049706E; US6670338B1; PL341874A1; DK1049706T3; JP4695756B2; TW550267B

Description

Jelen találmányunk peníaszachw'idokra, azok előállítására szolgáló eljárásokra, valamint azokat tartalmazógyógyszerkészítményekre vonatkozik.

A heparin a glükózammoghkán családhoz tartozó poliszadtarid, amely antikoaguláns sajátságairól nevezetes. Ismeretes, hogy a várai vadás komplex fiziológiai jelenség (L Björk ős V. Lindáid, Moiecular and Cel.1. Bíochemlstry, 1982, Dr. W. Juafc Fubfisbers ···· Neíherlands). Bizonyos stimulusok, így a kontakt aktiválás és a szöveti faktor, elindítják a vérplazmában jelenlevő véralvadási faktorok aktivizálódását A stimulns természetétől függetlenül, a végső lépések ugyanazok, .az aktiválódott X faktor (a Xa) aktiválja a II faktort (amelyet protrorabin-nak is neveznek), amely azután, aktívák formájában (II a faktor, vagy trombin) az oldható fíbrinogén részleges proteolizíséí idézi, elő, atní az. oldhatatlan fibrin képződésével jár, mely utóbbi az alvadt vér egyik fő komponense.

Normál fiziológiai körülmények között a véralvadásban szerepet játszó faktorok aktivitását proteinek szabályozzák, ilyenek az antitbrombin III (AT Ϊ.Π) és. a heparin co-faktor Π (HC 11), amelyek szintén jelen vannak a vérplazmában. Az AT 111 gátló hatást fejt ki több faktorra, amely a véralvadásban szerepet játszik, különösen a Xa -és a 1 la faktorra.

Ily módon a Xa vagy a Ha faktor gátlása kedvező eszköz -antiko-aguláns és antitrombotíkus aktivitás eléréséhez, hiszen ezen két faktor résztvesz -a véralvadási folyamat két utolsó lépésében, amely a kiváltó síimuktstöl független.

Egy pentaszacharid, amilyent P. Sínay er ·<?/., Carbohydrate Research 1984, ZJ2 €5 leírnak, képviseli azt a minimális számú heparin szekvenciát, amely « φ az. AT ΙΠ-hoz való kötődéshez szükséges. Ezt a vegyüietet kb. 1.5 évvel ezelőtt állították elő kémiai totálsziiUézissei.

Azóta számos, kémiai totáíszíntéxíssel előállított, szintetikus oligoszacharidot leírtak az irodalomban, amelyek antltrombotikus, antikoaguláns aktivitással readelkeznek.

Az EP-0,084,999 számé szabadalomban olyan származékokat írnak le, amelyek uronsav (glükuronsav vagy iduronsav) monoszacharíd egységekből és glükozarninból állnak, és kedvező aníltromboíikus aktivitással rendelkeznek. Ezek a vegyületek a h idroxi csoport subsztitoensek mellett

Nszuilátcsopöríokaí, N-aceíilcsoportokat tartalmaznak, és bizonyos esetekben az anomer hidroxi csoportok helyett rnetox lesöpörtök szerepelnek.

Az EP-0,165,134 számú szabadalmi belel öntésben szintén antltrombotikus aktivitású szintetikus: obgoszacharidokat írnak le. A vegyületek, amelyek uronsav monoszaeharíd egységekből és glükozamlnhól épülnek fel, és. a glükozamin egység 3-as helyzetében O-szuífáícsoportot tartalmaznak, az E.P-Ö,301,618 szánté szabadalmi bejelentésben is le vannak írva. Az anyagok igen erős antltrombotikus és antikoaguláns sajátságnak, Az EP-0,454,220 számú szabadalomban O-atkil vagy O-szulíaíesoport szubsztiíuenseket tartalmazó uronsav származékokat és glükóz származékokat Írnak le. Ezek a vegyületek is amitrombotikus és antikoaguláns hatásúak.

Az EP-0.529J75 számé szabadalomban is szulfátéit giükozanúnoglikanoid származékokat írnak le, amelyekben az N-szulfát, N-aeeiát vagy a hidroxi funkciós csoportokat aikoxi-, ariioxi-, aralküoxi- vagy 0* ♦»» ♦ ♦ χ < » ♦ ♦ ♦ ♦ « φ φ φ · »χ«« ΦΦ »« φ» «ΦΦ sznlfétcsoportokkai vannak helyehesítva, A vegyületek kedvező antitrombotikos •hatást mutatnak. Az anyagok simaizom-sejt proliíeráció gátlók is,

Oligoszacharidok, éspedig az ΑΤ-1Π kötődéshez szükséges minimális hepariu .szekvenciával analóg pentaszacharidok vannak leírva az Angew. Chem.

Int. Ed, Engt 1993, 32, 3, 434-436 közleményben,. A vegyületek gíükuronsav vagy glükóz egységeket íanalmaznak, amelyekben a hidroxi rimkciÓsesopoAokat O~ szulfát-, vagy O-meíllcsoportokkal helyettesítették.

A pentaszadiaridokat azóta is sokat tanulmányozták, és az irodalomban jelezték, hogy a L-íduronsav G egység konformációja fontos szerepet játszik a tennék aktivitásában, Leírták a G egység néhány konformációs állapotát (⁴Cb ’C-t, ²S₀), és feltételezik, hogy a konformációs flexibilitás lényeges az Liduronsavat tartalmazó termékek biológiai aktivitása szempontjából. (B, Casu, M.

Petifou, A, Provasoli és P. Sinay, Con&rmaíional ílexihility; a uevv concept tor explalnmg binding and biologieaí properties of ídnronic acid-containíng glycosaminoglycans,.Trends Biochem. Seb 1988,13,221-225).

A Chem. .Eur. J„ 2, 8 (1996) 1007-1013 irodalmi hely olyan pentasz&eharidókat ismertet, melyeknél a €5 Lriduron egység egy gátolt konformációban van amit “reteszeknek” is lehet nevezni, ahol a reteszelést egy aikiiéncsoport okozza a 3helyzetü hídroxikcsoport és az 5~hel.yzeiű szénatom között ami egy 3-0-5C~a!kilén2-O(R)-«- .Lridopiraníluronát-egységet eredményez.

Ezen irodalmi hely szerint azok a. vegyületek ahol a G Lriduron. egység *€« gátolt konformációban fordulnak elő azok nagyon erős X₈ antifaktor aktivitással rendelkeznek és ebből következően nincs affinitásuk AT ill-hoz. Ez azt mutatja, * X hogy a G-egyseg konformációs flexibilitása alapvetően aktivitáshoz.

♦ x« «« «» >

fontos a biológiai

Meglepő módon azt találtak, hogy az egyik O-alkilcsoportot alkllénhíddal: helyettesítve, és ezáltal az L-iduronsav konformációját rögzítve, olyan oligoszacharidokat kaptánk., amelyek kedvező biológiai sajátságokat mutatnak,, annak ellenére, hogy nem rendelkeznek konformációs flexibilitással Ennek az oka az, hogy a jelen találmány szerinti vegyöletek különböznek az irodalomban leírt többi szintetikus heparinoidtöl, újszerű szerkezetük és igen erős, nem várt biológiai sajátságaik révén. Á találmány szerinti vegyületek olyan pentaszaeharidok, amelyekben az L-iduronsav G egység az u,n, zárt “Ss konformációban van, és amelyben a .D-glökuronsav E egység adott esetben etilcsoportot tartalmaz az 5-ös helyzetben. A vegyületek igen erős anti- Xa faktor aktivitást és igen nagy AT ΠΙ affinitás? mutatnak.

Jelen találmányunk 'tárgya, nevezetesen, sav. formában lévő pentaszacharid és egy vagy több gyógyászatilag elfogadott kationnal adott gyógyászatilag elfogadott sói, amelyekben az anion az (1) képletnek felel meg::

ο ε f g

R jelentése hidrogén, vagy -SO/, (Cj-Csjaikib vagy (Cj-Cjjacilcsoport T jelentése hi drogén vagy éti lesöpört;

n jelentőse 1 vagy 2 ν * * * * · « * ♦ ♦ * * * «

A találmány magába foglalja a pentaszachmdokat sav formában, vagy győgyászattíag elfogadott sójuk tormájában.. A sav formában a -COO' és -SÖri funkciók

-COOH illetve -SOjH formában vannak,

A találmány szerinti pentaszacharidok gyógyászaíiiag elfogadott sói” kifojzés olyan pentaszacharidra utak amelyben egy vagy több -COÖ' és/vagy -SÖf fonkció ionosán kötődik valamely gyógyászati lag elfogadott feni 'kationhoz.

A találmány szerinti kedvező sók azok, amelyekben a kation valamely alkáli fém kationja, legelőnyösebben Na’ vagy K⁺,

A jelen, találmány tárgya továbbá a találmány szerinti pentaszacharidok előállítására, szolgáló eljárás, azzal jellemezve, hogy előállítjuk a 0 egység prekurzorát, amelyet a H egység prekurzorával kapcsolunk, ily módon előállítva a OH prekurzorát, amelyből végül megkapjak a pentaszacharidot: vagy a OH prekurzorát a DBF prekurzorával kapcsolva, vagy pedig a GH prekurzorát az EF prekurzorával kapcsolva, majd. hozzáadva, a D egységet.

A G, H, EF vagy DBF bármely prekurzora használható. Ez azt jelenti, hogy ezen eljárások szerint egy egész család pentaszacharidot előállíthatunk, amelyeknek közős jellemzője, hogy zárt konformációja G egységet tilalmaznak.

A font leírt eljárás a találmány szerinti előnyös eljárás, A találmány szerinti, pentaszacharidok azonban más, a cukorkám! ábói ismert módok szerint is előállíthatok, így valamely védöesoportoí tartalmazó monoszacharidot -amely elsősorban a bidtoxiesoporton, adott esetben, ha van ilyen, a karboxíesoporton védőcsopöriot tartalmaz /lásd T.W. Greeu, Protective Groaps in Organic Synthesís tWiley, N.Y. 1981 / - egy másik védett monoszaeharíddai reagálíaíva diszacharidot ·» »» állítunk elő, amelyből egy további védeti monoszachariddal védett tríszseharid, majd védett tetraszacharid, és végül védett pentaszacharid állítható elő,

A védeti pentaszacharídokat ezután deprotekiáljuk, adott esetben szuitatáljuk, vagy részlegesen deptotekíáljnk, majd szuitatáljuk és deprotekiáljuk, ily módon előállítva a találmány szerinti vegyületeket..

Ilyen eljárások ismertek és leírtak a szénhidrogén kémiában, pl. az alábbi kőzíemtéayekbea: G, Jaurand et &l. Bioorganic and Medicina! Chemistry Letters 1992, 2, 9, 897-9ÖÖ,.; J. Bastea et ml., Bioorganic and.'Medicinái Chemistry

Letters 1992, 2, 9, 905-910; és M. Petiten, C.A.A. van Boeckei in Chemical synthesis of heparin feagmesi and analogues” 203-210 - Process ín the chemistry of orgamc natural products, Ed. Springer Vertag Vienna - N.Y. 1992.1

A fent leirt eljárás lehetővé teszi, hogy a találmány szerinti vegyületeket sók formájában megkapjuk. A megfelelő savak előállítása céljából a só formában lévő találmány szerinti vegyüietet valamely sav állapotban lévő kauon-cserélo gyantával hozunk kontaktusba.

Á sav formában lévő találmány szerinti vegyületeket valamely bázissal semlegesítve előállíthatjuk a kívánt sókat.

Ebhez felhasználhatjuk bármely szervetlen vagy szerves bázist, amely gyógyásztílag elfogadott sőt ad.

Előnyösen náírium-hldroxidoí, kálium-hídroxidot, kalemm-ludroxidoí vagy megnéziwt-hidroxidoí használhatunk,

A találmány szerinti pentaszaeharidok kedvező sói a nátrium és kalcium sók.

».« *♦

A találmány szerinti vegyületek kedvező fármakotőgiai és biokémiai tulajdonságokkal nevezetesen, igen erős and- Xa faktor aktivitással és igen nagy

AT 111 affinitással rendelkeznek.

Amint említettük, a véralvadási kaszkád. folyamán a Xa a protromblnt trombinná aktiválja, amely az oldható fibriaogént proteolizálja, az oldhatatlan fibrin képződése közben, amely az alvadt vér egyik íő komponense. Á Xa faktor gátlása tehát kedvező út az antíkoaguláns és antitrombotikns aktivitás eléréséhez, A találmány szerinti termékek anti-Xa faktor aktivitását pH 7 értéken, a Teles A.N. és Lie M, által a Thrombosis Research 1977, 70, 399-4lö, közleményben leirt modell -szerint vizsgáltuk, és kimutattuk, hogy találmány szerinti termékek a szintetikus heparinoidok már ismert anti-Xa aktivitásával megegyező, vagy annál nagyobb mértékű aktivitást mutatnak, A találmány szerinti (I) képletű anionnal felírható: peutaszacharídok. AT ΙΠ affinitását spektroduorimetriás módszerrel 'határoztuk meg a. D. Atka e? nf által a Bloehermstry 1987, 2ó, 6454-6461 közleményben leírt módszerrel. A tesztek azt. az eredményt hozták, hogy a. találmány .szerinti vegyületek igen nagy AT III affinitással rendelkeznek.

Vizsgáltuk továbbá a vegyületek általános antiíromboükus aktivitását patkányon, vénás sztázis modellen, íromboplasziin indukció mellett, a J. Reyers el uh által a Thrombosis Research 1989, /<§, 669-674 közleményben leírt módszerrel. A találmány szerinti vegyületek EDse értéke legalább azonos nagyságrendű, vagy kisebb, mint a már ismeri' többi szintetikus heparinoídé, A találmány szerinti vegyületek tehát kedvező hatás-speeí Sással, valamint kedvező anükoaguláns és antíírombotikus hatással rendelkeznek.

'3

A találmány szerinti vegyüietek használhatók parenterális úton beadható gyógyászati készítmények előáll ítására,

A találmány szerinti vegyüietek igen alacsony toxlcitásúak, tóxicításuk teljes mértékben összeegyeztethető gyógyszerként való felhasználásukkal,.

A találmány szerinti vegyüietek nagyon stabilak, ezáltal különösen alkalmasak arra, hogy gyógyszerek hatóanyagai, legyenek,

Á találmány vonatkozik továbbá gyógyszerkészítményekre. amelyek hatóanyagként a találmány szerinti vegyül etet vagy valamely győgyászatílag elfogadott sóját tartalmazzák,, adott, esetben egy vagy több megfelelő inért segédanyaggal kombinálva.

A hatóanyag minden egysógdúzisban az előirányzott napi dózisoknak megfelelő mennyiségben van jelen. Minden egységdózis 0,1 -tol 100 mg hatóanyagot, előnyösen. 0.5 -tői 50 mg hatóanyagot tartalmaz.

A találmány szerinti vegyüietek aknázhatók a kívánt terápiában hasznos más hatóanyaggal vagy hatóanyagokkal kombinálva is, így például, aniitrombotikus ágensekkel, antikoaguiáns, vérlemezke-aggregáeió-gátló ágensekkel, mint példán! a dípyrióamole, az aszpirin, a ticlopídíne, és a clopidogrel, vagy a glükoproíeín HbZnia complex antagonisták.

A gyógyszerkészítmények emlősök, köztük az ember kezelésének megfelelően vannak formulázva, a fenti, betegségek gyógyítása céljából.

A gyógyszerkészítmények' előnyösen különböző gyógyszerformák lehetnek, igy például injekciós vagy iható oldatok, cukor-bevonatos tabletták.

* ♦ Λ ίο >

♦ » Μ Φ ♦««φ Φφ.

tabletták., zselatin kapszulák. Előnyös győgyszerforma az injekciós oldat. A találmány szerinti gyógyszerkészítmények hasznosak elsősorban az érfái megbetegedéseinek megelőző és gyógyító kezelésében, igy arterioszklerőzis kezelésére, vagy olyan hlperkoaguláeiós állapotok kezelésére, amelyet tumorműtétek után. vagy baktériumok, vírusok, enzimstikus aktlvátorok Indukálta koagaláeíős deregulációk után Egyeltek meg.

Még általánosabban fogalmazva, a találmány szerinti pentaszaeharidok a véralvadás rendellenességeivel kapcsolatos betegségek gyógyításában használhatók.

A dózis széles skálán mozoghat, a beteg korától, súlyától, egészségi állapotától, a panasz természetétől és súlyosságától, valamint a beadási módtól függően, A dózis lehet napi egyszeri vagy többszöri adagolással napi 0,5 mg - kb. 1000 mg, előnyösen kb. 1 mg ~ kb. 100 mg, rnéginkább napi Ö.ámg - kb, 50 mg, például napi 20 mg intramuszkulárisan vagy szabkuíán, folyamatos vagy szabályos időközönkénti adagolással, Illetve orális adásnál .napi kb. 20(1 mg - 10-00 mg.

Természetesen ezek a dózisok a beteghez igazíthatok, az észlelt hatástól, és az előzőleg elvégzett vér analízisektől függően. A szubkuián adás az előnyös út,

A jelen találmány tárgyát képezik továbbá olyan gyógyszerkészítmények, amelyek hatóanyagként a fenti vegyüietek valamelyikét tartalmazzák, kívánt esetben valamely más hatóanyaggal kombinálva. Ezek a kompozíciók arra készülnek, hogy emésztőrendszeri vagy parenterális úton adagolhatok legyenek.

A jelen találmány szerinti, szublingváiis, szubkután, intramuszkuláris, intravénás, transzdermális, transzmukózus, helyi, vagy rektális adásra készült gyógyszerkészítményekben a hatóanyag beadása adagolási egységek. formájában történik, standard gyógyszerészeti .segédanyagokkal keverve, embereknek és állatoknak. Megfelelő adagolási egységek lehetnek az orális formák, így tabletták, zselatin kapszulák, porok, granulátumok es orális szuszpenziók vagy oldatok, a szublingváiis és bukkális tormák, a szubkután, intramuszkuláris, intravénás, intranazális vagy intraokuláris tormák és a rektális formák.

Ha a szilárd. készítmény tabletta, akkor a fo hatóanyagot gyógyszerészeti hordozóval keverjük, igy például zselatinnal, keményítővel, laktózzal, magnézium sztearáttal, tálkámmá!, gumharábikummai, vagy hasonlóval, A tabletta bevonható szacharózzal, vagy más alkalmas anyaggal, vagy olymódon kezelhető, hogy elnyújtott vagy késlelteted hatással rendelkezzen, vagy, hogy a hatóanyag meghatározott mennyiségét folyamatosan bocsássa ki.

Zselatin kapszulák oly módon nyerhetők, hogy a hatóanyagot hígítóval keverjük, és a kapod elegyet lágy vagy kemény zselatin kapszulákba töltjük.

A vízzel diszpergáiödó porok vagy granulátumok a hatóanyagot diszpergálő, vagy nedvesítő ágenssel, vagy szuszpendáló szerekkel, mint pl. a poiívínii-plrrohdon, vagy édesítő, vagy íz-fokozó anyagokkal keverve tartalmazhatják.

»* ♦

Rektális beadási módhoz kúpok használhatók, amelyek a rektális hőmérsékleten olvadó kötőanyagokkal készülnek, pl. kakaóvajjal vagy polietilénglikolokkah

Parenferális, iniranazális vagy intraoknlátis adáshoz vizes szuszpenziók, Izotönlás sóoldatok vagy' steril injekciós oldatok használhatók, amelyek gyógyszetészetileg. kompatibilis díszpergálőszereket és/vagy nedvesítőszereket tartalmaznak, pl. propilén-glikolt vagy butilén-giikolt.

A transzmukózus beadási módhoz, a hatóanyagot valamely promoter, mint pi egy epeső, valamely hidrofil polimer, mint pt hídroxipropílcellulóze, hídroxipropilmetilcellulóx, .hidroxietílcellulőz, etileelltuóz, karboximefík-eliuioz, dextrán, polivinil-pirrolidon, pekünek, keményítők, zselatinok, kazein, akrilsavak, akriisav-észterek és kopolimereik, vinil-polimerek vagy kopolimerek, vínílalkoholok, alkoxipolítnerek, potietllenoxid-polimerek, poliéterek, vagy ezek keverékei jelenlétében fomxulázzuk,

A hatóanyag mikrokapszttlaként is formulálható, kivárd esetben egy vagy több támasztóanyaggal vagy adalékanyaggal

A hatóanyag létezhet valamely ciklodextrinnel adott komplex tormájában is, igy például α, Ó, vagy y ciklodextrinnel, 2~hídroxipropil~pciklodextrinne! vagy meíil-P~eikiodextrínnel adott komplex tormájában.

A hatóanyagot ballonból, vagy a véredénybe helyezett endovaszkuláris cxtenederböl is kibocsáj thatjuk. A hatóanyag farmakológia! hatásossága ily módon nincs befolyásolva.

Az -előnyös adagolási forma a szubkután út.

1.3 ** « V «. <f * * * * · «« * ♦ ♦ X V ,>

ν * ¢1 « ·' # # «** ** #« (Λ* ««*

Az alábbi módszerek, előállítások és sémák illusztrálják a találmány szerinti poliszaeharidok szintéziséhez szükséges intermedierek előállítását

Az alábbi rövidítéseket használjuk;

TBDMS: terc-feutil-dimetílszilti; Lev; levulinoil; Bn: benzik Bz; benzol!; VRK;

vékony réteg krontatográfla; Olm: triklór-aeetimidoii; LSIMS; liquid secondary ion íömegspektrometria; BSIMS·: eleetron spray lonization tőmegspeteometria; TMS: trimetílszil; TSP; nátrium-PímetiiszllíMetoáeuterio-propionát; Tf trillát; MS: moleeula szőrű; All: allil, FMB; p-rnetoxíbeazii; MP: p-mefoxlfenik SE: trímetilszüü-etil

A Dowex®, Sephadex®, Cbelex® és Toyopeari® regisztrált védjegyek.

Az alábbi példákban -általános módszereket adunk meg. az imidátok katalitikus kapcsolására, a levuíin észterek hasítására, a tíoglikozidok katalitikus kapcsolására, a para-tmetoxi-benzilcsoport elszappanosítására, metílezésére, szelektív deprotektálására, az oligo- és poliszaeharidok feenzüészterek vagy éterek hidrogenolízise útján történő deprotskíálására, szulfonálására, az észterek elszappanositására és a szulfonálásra. Ezekkel az általános módszerekkel alakíthatjuk át a megfelelő intermediereket.

A találmány -szerinti vegy&teket az alább leirt változatos előállítási módokkal szintetizálhatjuk.

/;/ολ

ί ί

Uii

< » *»<«» >

» >

»*«♦» ♦ « » ♦ ««>

« ♦»« ♦♦ * D »♦««« » * » « ♦»» ♦ * *

Az 1 diók (10 g, 42,7 mmoi) felvesszük vízmentes diklór-metánban (100 ml), hozzáadunk ierc-bufildimefilszilil-kíorídot (7.1 g, 47.3 mntol) és imidazölt (5.8 g, 85.3 mmoi). A reakcióelegyet szobahőmérsékleten kevertetjük, 2 óra mőlva az elegyet dlklór-metánnal hígítjuk, vízzel mossuk. Á szerves iázfst magnéziom-sznlíáton szárítjuk, betőményítjuk, a maradékot sziíikagél oszlopon kromaíO'gratatw (1/9 v/v etil-acetáVclklohexán) tisztítjuk. Ily módon a kívánt 2 vegyületet (11.9 g, 80%) kapjuk, szirup formájában, |jojo -34°C (c 1.9, CHCL).

2. ELŐÁLLÍTÁS

6~ó>-/oí'c~ho//7///o?f;//7xz////-./,2-ö-/zopzop///í/é9/-5-ö-o?e///~5~C-t^;/o//-<z~/7 g/üáo/nrnadz /4) 'Vízmentes dlklór-metánhoz (40 ml) -78*C-on hozzáadunk oxalíikloridot (3,2 ml, 36.8 mmoi) és dimeíil-szulfoxidot (5.2 ml, 73.4 mmoi). Az elegyet 30 percen át kevertetjük, majd hozzáadjuk a 2 vegyületet (6,4 g, 18.4 mmoi) és tovább kevertetjük I órán át. Ezután trietilamint (15.3 mh

110.0'mmoi) adunk hozzá, és 30 perc múlva a reakcióelegyet meghígítjuk diklórmetánnal. A szokásos .feldolgozási módét követve megkapjuk a (3) pentulóz.

vegyületet, amelyet közvetlenül felhasználunk az alábbi reakcióhoz: a .nyers ketont (3) felvesszük vízmentes íetrahidrofuránban (190 ml) és (FC-on hozzzáadjnk viniiraagnézium-bromid IM-os tetrahídrofurános oldatát (28 ml, 27,6 mmoi). 1 óra múlva a reakdóelegyet meghígitjuk és vízzel mossuk. A szerves fázist magnézium szulfáton szárítjuk, bepároljuk, a maradékot sziíikagél oszlopon kromatografalva tisztítjuk (1/9 v/v etd-neetát/clklohexán), Ily módon a 4 vegyületet (70%, 4.8 g) kapjuk, szirup formájában.

(ajo -40A3 (c 1.3, CHCh).

Anal. számítolt: C, 57.72, H, 9.15. talált: C, 57.77, H, 9.23,

3. ELŐÁLLÍTÁS

A 4 vegyületet (3.5 g, 9.4 mmol) felvesszük vízben (50 ml), hozzáadunk ÍR.-12Ö gyantát (1 g), és az elegyet S^:ö*C-on 6 órán át melegítjük. A gyantát kiszűrjük, a .szűrletet bepáróíjuk. Az 5 nyerstermékei eeetsav-anhídriddel (izmi) piridmben (13 ml) sebezzük, A fölös ecetsav-anhidridet metanollal elbontjuk, az oldatot bepároljuk.. A maradékot dikiór-metánnal és vízzel extraháljuk. A szerves fázist magnézium szulfáton szárítjuk, bepároljuk, a maradékot szilikagél oszlopon kromaiografálva tisztítjuk (3/2 v/v étin aceíái/ciklobexán). A 6 tetraacetátot szilárd anyagként kapjuk. (7594, 2.7 g). o.p. ^:::

C.

|-ují.) -·84Ά.' (e 1,6. CHCpí.

Anal. számított: C, 52.47, H, b.tv. talált: C, 52.5L H, 6,19·.

Ci-AlS: 406 (M ··>· NH₄), 389 (M -- U

4. ELŐÁLLÍTÁS ^/Α/νϊ/.νηϊ/ίβζ/Ο-α-Ο-^/βΑίϊ/ϊΰζ/ί'/ /5)

A 6 (1.:6 g, 4,1 mmol) és 7 vegyületet (2.1 g, 4,5 mmol) (P.J. Oaregg and H. Huitberg, üarboltydr. Rés. 1981, 93, CIO) feloldjuk vízmentes diklórmetánban, molekubszűrót (4..Ö g) adunk hozzá. Á reakcióeiegyet szobahőfokon 1 órán át keveríeduk, majd -7foC-on TMSOTf (0.95 ml, 5.2 mmol) adunk hozzá, és lassan hagyjuk szobahőfokra melegedni. 2 óra múlva az elegyet frietii-aminnal semlegesítjük, Cellt-en át szűrjük, a szürletet vízzel mossak, a szerves fázist magnézium- szulfáton szárítjuk, betároljuk, a maradékot szilikagélen kromatografálva tisztítjuk (4/1 v/v ettl-ucetáVeikiohexán). Ily módon a kívánt 8 vegyületet (2.77 g, 8593) kapjak, szilárd anyag formájában o.p·. ~ 47°C. i ο pi ~5θΧ. (c 0,6, 6. HCL),

Ánal. számított: €/ 65.14, H, 6.61. talált: €, 65,09 ií, 6,70.

5. ELŐÁLLÍ TÁS g«Áí.y?/rnrnzz///~iZ-/>~^-/«áíJp/r«?nrí/.'/ 6/(6

A 8 vegyületet 12.7 g, 3,4 mmol) feloldjuk metanolban (40 mi). Katalitikus mennyiségű nátriumot adunk hozza 0°C-on. és az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán át 'kevertetjük, Az oldószert lehajtjuk, a maradék 9 vegyületet felvesszük vízmentes aceionban (40 ml), hozzáadunk 2,2-dimetoxipropánt (2 ml) és katalitikus mennyiségű p-toluolszmíonsavaí, Ej-szakán át szobahőmérsékleten kevertetjük az elegyet. Az oldószert lehajtják,, a maradékot felvesszük kloroformban és vízzel mossuk. A szerves fázist magnézlom-szulfáton szárítjuk, bepároljuk a maradékot szílikagél oszlopon kromatografalva tisztjük (1./1 v/v efll-aoetávcíkiohexán). Ny módon a kívánt 4',í}'~ izopropdldétr-O származékot 10 (1,7 g, 70%) kapjuk, szilárd anyag formájában, o.p.^::: 55°C.

j«.jn ~1%C (c 0.8, CI ICU).

Anai. számított: C, 67.97, lí, 7.13. talált: C, 67.87, H, 7.16.

CI-MS; 707 (M -t- 1 p 724 (Μ i- M f, p * *

6. ELŐÁLLÍTÁS ínrot«í>pöu«íW')-{Z~7J-^/iíáí;p/rmto<:b7 (72)

Vízmentes diklór-metánfeoz(10 ml) -78^ö€-on hozzáadunk oxabi -ki őri dót (0.35 ml, 4,0 mmol) és vízmentes dimetil-szulíoxidof <0,57 ml, 8,0 romol}. Áz elegyet 30 percen át keverteijük, majd hozzáadjuk a. 10 vegyüiet (L4 g. 2.0 mmol)· vízmentes díklór-metánnal (10 ml) készült oldatát és az elegyet tovább kevertetjük 45 percen át. Ezután, vízmentes trietilamhmal (1.7 ml, 12,0 mmol) semlegesítjük a reakcióeíegyet,. majd meghígítjuk diklór-mefenaL A szerves tézist vízzel mossuk, magnézium -szulfáton szárítjuk, bepároljuk. A maradék Π vegyületet tisztítás nélkül, közvetlenül felhasználjuk az alábbi reakcióhoz:. a 11 ketont felvesszük vízmentes tetrahidrofnránban (15 ml) és -78°C-on hozzáadjuk szuper-bídrxd IN tetrahídrofurános oldatát (4 ml, 4,0 mmol), A reakcióeíegyet 1 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük, majd hozzáadunk 5%-os nátrium-hidroxídot (2 ml) és hidrogén-peroxidot (Imi). Áz oldószert lehajtjuk, a maradékot felvesszük etíl-aeetátban, vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk. A maradékot kromatográfiásan tisztijük (2/1 v/v etil-acetát/ciklóhexán). Ily modem a 12 vegyületet (1.0 g. 70%) kapjak. [«]» -1 RC (e 0.5. CHCb).

CI-MS: 724 (M á 18), 707 (Μ z )} ·> *> ζ..

7. ELŐÁLLÍTÁS

A 12 vegyületet (940 mg, 1.3 mmol) feloldjuk piridinben (3 ml) és hozzáadunk ecetsav-anhídridet (0.3 nd). A reakcióelegyet 3 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Á fölös pirínint és eestsav-anhídridet lehajtjuk, a maradék Ό vegyületet közvetlenül fölhasználjuk az izopropilidén deprotekíálásához, amelyet 8ö% ecetsavval 15 ml) 6Ö°C-on 2 órás melegítéssel végzünk. A fölös eeeisavat lehajtjuk, a maradékot szilikagél oszlopon való kromatografálással tisztítjuk (4/1 v/v etil-aeetái/ciklohexán). Ily módon a 14 dióit (660 mg, 70%) kapjuk szilárd anyag formájában, ο,ρ.^::: 53 A3.

íab- KriC (eÖ.fo CHCb)..

Cl-MS: 709 (M v n 726 ÍM + B).

8. ELŐÁLLÍTÁS

4/0///-2,.96-/0-0-60^2//-3-0-(2-0-0047//-3-/)-^44//-6-0-/02//-5-0.-^6^7-/60?/5ö««o/?/m?íoz//)-rz~J)~^/Möp/m/íóí: /75)

A 14 vegyületet (óöö mg, 0.9 mmol) feloldjuk piridinben 13 ml) és hozzáadunk tozil-kloridot (240 mg, 1.3 mmol). A reakcióelegyet 3 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Az oldószert lehajtjuk, a maradékot meghígítjuk kloroformmal, vízzel mossuk. A szerves fázist magnézium -szulfáton szárítjuk, bepótoljuk. A maradékot szilikagél oszlopon való kromatograíáfássál tisztájuk (1/1 v/v etd-acetáí/cikfohexán). Ily módon a IS tozil vegyületet (297 mg, 80%) kapjuk, szirup formájában.

(aj_í3-26^aC (_c O.S,CHCÍ₃),

9, ELŐÁLLÍTÁS

4/tv//-2,5,6-fe/-6Lóíorr//~4~ö-(2,6-u?{á/dzí.>~5-í.)-íafe//-5-í?~y/«//~/L/>munrío/t/m/mzí/i-ö-ZLg/üá'Opó'uooz/d (16)

A 15 vegyületet (550- mg, 0.6 omol) felvesszük standban (3 ml) és hozzáadunk 0.1N etanolos nátrium-bídroxíd oldatot (5 mi), A reakcióeiegyet 3 órán át 7<R€-on melegítjük, maid ÍR-120 gyantával (f-Γ forma) semlegesítjük és Ceth-eu át szűrjük. Bepárlás után a maradékot szilíkagél oszlopon való ktontatografálással tisztítjuk (1/1 v/v etil-acetái/ciklohexán), Ily módon a 16 vegyületet (292 mg, ?{)%) kapjuk, szirup formájában.

[a]o -H3C (c ().5,CHCI₃).

CI-MS: 666 ÍM 18?.

w. llöas.lítás

4/e///-2,5,6-67-ö-/>eíJz//-4-Ö-/é£^>uz//-5-ó)-??íUf//-2-ö-5~í?^:-??/efí7/í6fe--/z-£nfopów nn?nd/)~ o:~D~gx6láízpfeíf«í?r/í/ (J 7)

A 16 vegyületet (260 mg, 0,4 mmol) feloldjuk diklőr-metánban (20 ml), az oldatot -78°C-on kevertetjük, és 30 másodpercen át ózont buborékoltatunk keresztül. rajta. Az oldat színe hatvány sárgára változik. Ezután dimetii-sznlfídot adunk az oldathoz, majd vízzel mossuk. A szerves fázist magnézium-szulfáton szárítjuk, bepároljuk -és tisztítás nélkül, közvetlenül felhasználjuk az alábbi reakcióhoz: a nyers aldehidet felvesszük terc.-buíánölbáh (16 ml), 2-raetíi-2-butént (5 ml) és vizet (16ml) adunk hozzá. Ezután az elegyhez

Λ. *.

4 adtaik NaHaPCb -ot (700 mg) majd NaClOs -ot (700 mg). A szuszpenzőt éjszakán át szobahőmérsékleten erősen kevertetjük, majd vízzel meghígííjuk, etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist magnézium-szulfáton .szárítjuk, bepároljuk, és közvetlenül felhasználjuk az alábbi reakcióhoz: a nyers savat felvesszük dimetilrórntamldban (25 ml)·, hozzáadunk teírafeutil-ammőmum-jodidot (Ö.7 g, 2.0'mmol), kálium bikarbónától (0.25 g, 2.5 mmol) és benzi.l~brom.idot A reakcióelegyet 5 óra •hosszat szobahőmérsékleten kevertetjük, majd vízzel és dieíil-éterrei extraháljuk. Az éteres fázist magnéziurn-szulfáton szárítjuk, majd bepároíjuk, a· maradékot szilikagél oszlopon való kromafografátfeal tisztítják (2/1 v-/v etilaeetát/dklohexán). Ily módon a 17 vegyüietet (236mg, 80%) kapjuk, szirup formájában.

Cl-MS: 774 (M+ 18).

2, SÉMA: Az bnidáí DEF (1.8) kóódcnzáctója a Gíí (17) vegy illettel, deproíekeió és sztüfatálás.

ÖSé

sodium sah

8//-0-0/0///-(60-^///^0/5//8/880^//88^^09)-(/--04)-0-(3,6-8//-0-0^80//-2-0-008/^//-8.8-0g/Mö/?/r«/íoz/l)-(/-^-0~(2_#^««Wrr>5-C-ée«z//ox/Awóo«//-3-0-»íe///-/6/>/8/8/0880^8708/88^//)-(/-^(/-2,3,6-/0-0-00882./8-88:-0-^///^0^//-08/020/ (19).

Αζ imidátot 18 (Van dér Heijden et al._y abstr. 9th Eur. Carbohydr. S'ymp, Uíreckí, July ő-l 1, 1997; A74, p 154) (81 mg, 78.2 prnol), az akeeptort 17 (65 mg, 86.0 pmol) és finom moiekuíaszárőt (70 mg, 4 A) 1/2 (v/v) diklórmeíán/dietíl-éter elegyben (2.4 mh kevertetlink, inért atmoszféra alatt. A reakcióelegyet 30 percen át szobahőmérsékleten kevertetjük, semleges pH értékig hozzáadunk HaH€CE-oí, Szűrés és bepárlás után a maradékot SephadexY I,H 20 gél oszlopon kromatografálva tisztítjuk (1/1 v/v diklór-metáróetanol). Ily módon a 19 vegyüietet (86 mg, 67%) kapjuk.

%% -%6^OC (c 1.0, CftCt E} ¹ H NMR lásd az alábbi 1 táblázatban.

12. ELŐÁLLÍTÁS

Mo///-0-/2,3.4-fri-G-tnetiÍ- íz- /)-g///Aoyí/níood/)-// -o4)-0-(2,3-d/-0-»?et//-/A0g/«áop/zííí?oH/uroííSíív)-(/~oV) -0-(a-D-g/í/kop/?'ííoor//i-(/ ->4)-O~{2,6-anhó/zo5-é'-Á'oz6oAo-3~€/-í.ory//-/Á/9-8aníi«í.y?/ra?ío<://)-(/ ~>4)-a-/>-'g/ökopí>o8?í?e/rf /26).

A következő módszer szerint előállítva: M, Petiten és C.A.A. van

Boeekel, Progress in the Chemistrv of Organie Hatarai Products, published by W. Herz ett?/. Vienaa, Sprlnger-Verlag, New York, 1992, 143-210.

* »

A 19 vegyület (49 mg, 30.0 nmei) eeetsavval (3 ml) készült oldatát hidrogén (3.5 MPa) alatt kevertetüuk. 12 órán át, 40°C-.on, 5% csontszsues palládium katalizátor (73 mg, 35 b) jelenlétében.

Az elegyet Celít-en át szűrjük, bepároljuk és vízzel (4 x 5 ml) együtt desztilláljuk,

A maradékot feloldjuk vizes 1M NaOH oldatban (3 ml), és 55°€-on tor 3 órán át keverteljük. Az oldatot áteresztjük Sepbadex® 625 F oszlopon (170 ml), vízzel etuáíjufc, A 20 vegyüleíet tartalmazó frakciókat Dowex 1Γ gyanta oszlopon engedjük át. Az eluámmot bepároijuk. ily módon a 20 vegyüietet (25 mg, 8654) (a]© -HÖ5^öC (c 1.0, í-í^O)

Ή NMK lásd az alábbi 1. táblázatban.

V ♦

* « •ISA

13, ELŐÁLLÍTÁS (/ J_fő~1rí~ü~jbe^zi/~a~l)~fflüÁí/pÍra»űziíi (22),

Aköi-0-(4,6-0~ízoprop3Uden~3-ö-metü-5“C-vjnii-p-D”gÍükopiranozil}(1->4)-2,3_?6-tri-O-benzíI-a~D-gIükopiranozíü (ÍÖ) (6.11 g, 8.65 mmol) és meül· jodkl -(0:8-0 mi, 13.0 mmol)MAMtmetikfomanüddai (9,-ÖÖml) készült oldatához {riC-on nátrium-·hidridet (0.31 g, 1.3.0 mmol) -adunk. Az elegyet 2 órán át (VRK) kevertetjük, ezután metanolt adunk hozzá és vízre öntjük. Az így kapott elegyet etil-acetáttal exír ahálj uk, az extráktumot vízzel mossuk, szárítjuk és bepár-o-ljuk. A maradékot szilikagél oszlopon kroroaíogratálva tisztítják (3/2 (v/v) esklöhexán/dietu~éíer), Ily módon a 22 vegyületet (5,92 g, 88%) kapjuk.

TLC: Rí ^::: 0.28, (3.2 (v/v) dklonexán/dietil-éter),

14. ELŐÁLLÍTÁS

3/eíö'~ő“ (4, ό~Ο-/ζημη7ρί/ή/όη-23~ί/ΑΟ-ίηζ4ζ2-5-63ί/^~/Τ D-g4tMí?/?í>utí uz//l·· ί / -o4)~2,A é-rt'Lö-áen ri'T íz-P-gVMopmr» ozá/ (23).

A 22 vegyüíet (5.80 g, 8.04 mmol) etü-acetátus (400 ml) oldatához pl adna- ősidőt (160 mg) adunk. Hidrogént vezetünk az oldatba. Az elegyet 40 percen át kevertetjük (TLC), szűrjük és benároljuk. ily módon a 23 vegyületet kapjuk. VRK: R_r~ Ö.6Ö (4/1 (v/v) toluol/etil-acetát) ·»*

4, J>♦ *

466/7-0-(2,5-///-0-///^//-5-6-^67-/3-1)-^/6^0/7^//07.//)-(./->4)-2,5,6~ó7-/?~áí?/íz/7fz-O-g'/nAop/rar/usírí (24).

A nyers 23 vegyületet feloldjuk,70%-os ecetsavban (őö ml) és SOVi-on 2 órán át kevertetjük. Az elegyet vákuumban hepároljuk,, majd toluoílal együtt pároljuk. Ily módon a 24 vegyületet kapjuk. VRK: Re - 0.52 (4/1 (v/v) diklórmetán/metanol).

16, ELŐÁLLÍTÁS

Mdr//-í)-fáo/í2/7-2,d“///-6?-/?.u4/7-5-C”O///-/A/)-g//íáo/.?w//us/6w//d/>-// -^)-2,5,667~6)~6é7/c//~tt~.ö-g///Á'op6'«ooz6/(25).

A 24 vegyület (5.75 g) -teírahidroforános (28 mi) oldatához hozzáadjuk a következőket: 2,2,6,ő-tetram£til--l-piperidiloxl (17.5 mg), nátrium-bidrogénkarhonát oldat (17.5 ml), káiium-bromid (87 mg) és ieirabatil-ammómarn-klorid (115,5 mg). Az elegyet 0®C-ra hűljük és 15 perc alatt hozzáadjuk telitett nátriumklorid oldatot (17 ml), telített nátrínm-hídrogén-fcarbonát oldatot (8.70 π/l) és nátrfem-hipokloritot (1,3 M, 20 ml). 1 óta keverés titán az elegyet meghigityak vízzel, kirázzuk (3 -szór) dlklór-raetánnal. A szerves fázist, vizes nátrium-klorid oldattal, mossak, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük es bepároljuk. Ily módon a nyers savszármazékot kapjuk.

A sávszárrnázékot nitrogén. atmoszféra alatt feloldjuk ΑζΛ’-dimetil.formomidban (107 ml). Hozzáadunk kálíum-bidrogén-karbonátöt (4.10 g) és. benzil-bromidot (9,70 ml), és az elegyet lő órán át kevertetjük. Ezután etíl-acetátot és vizet adunk hozzá, és kirázás után a szerves fázist bepároljuk. Szilikagél » *

Ο Ζ.

oszlopon kramatografálva 3.81 g 25 vegyületet kapunk (60%-os hozam a 23 -vegyületre számolva).

[a]_o +24 (c - 0.15, diklór-metán).

17, ELŐÁLLÍTÁS

Me///”O~í'&í;»zí7~5”E-tVí7W“<?“/tnu///fíí/-d,5~í//-O-mí?ri/~/7-D--g/«A'n/5founo’7/«í-n«íí/7-(/--^/)-2,5,6-/^/-//-0/7/,-//-0+0-^///^0///^//0+/5 (26).

Á 25 vegyületet (3.51 g, 4.46 mmoi) feloldjuk vízmentes. dioxánban (45 ml). Levubnsavat (1,00 g, 8.93 mmoi), l~(3dimetibatmnopropín-3-eííIkarbodiímid hidrokioridot (1.7(1 g, 8.93 mmoi) és 4-dimctilamino-piridhtt (041 g. 8.93 mmoi.) adunk hozzá. Az eiegyet 16 órán át kevertetjűk, majd etil-acetáttai extraháljuk. Az extraktumot 5%-os vizes káHum-hídrogén-szusfát oldattal, vízzel, telített vizes nátrínm-hidrogén-karbonáí oldattal majd vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk, A maradékot szilíkagél. oszlopon, kromatografálva (2/1 majd 3/2 (v/v) ciklohexán/eiil-acetát) tisztítjuk., ily módon a tiszta .26 vegyületet (3,64 g, 85%) kapjuk.

%+26 (c^:::: 0.9, diklór-metán).

IS. ELŐÁLLÍTÁS (/ ---->4)-/,5,6-/r/”í>aee///~2~€2~óett2//-D-g///kn/uno//L (27).

A 26 vegyületet (3.35 g, 3,78 mmoi) feloldjuk -ecetsav-anhidridben (22 ml). Az oldatot -20°C-ra hütjük és hozzáadjuk kénsav es ecetsav-anbidrid hideg oldatát (1 ml kénsav 10 ml ecetsav-anhldridben). Az eiegyet meghígíljuk etil♦ * acetáttal, vizes nátrium-hi drogén-karbonái oldattak majd vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljnk, A maradékot sziiikagél oszlopon kromatografálva (VI (v/v) eiklohexán/etil-acetát) tisztítjuk, ily módon a tiszta. 27 vegyüietet ('2.20 g, 65.5%) kapjuk. VRK: R,·- 0.24, (1/1 (v/v) ciklohexán/etiVaeeiát).

19. ELŐÁLLÍTÁS (/ -~>4)-5, ő-í//~Ö-není//-2-Ö-/>e«z//-ö-g/í/ftopímnő?, (28).

A 27 vegyidet <2.13 g, 2.67 mmol) tetrahídrofurános (5(1 ml) oldatához benzil-amint (11 ml, 101.4 mmol) adunk. Az elegyet 4 órán át kevertetjük. Etilacetáttal extraháljuk, az extmktumot vizes IM sösavoldatial (102 ml), majd vízzel mossuk, szárítjuk és bepárolj-uk. A maradókot sziiikagél oszlopon kromatografálva (1/1 (v/v) ioíuol/etíi-acetát) tisztítjuk. Ily módon a 28 vegyület (ο·/β -= 50/50) keverékét (1.33 g, 65%) kapjuk, VRK: R_{· - Ö.22 (1/1 (v/v) toiuol/etíl-acetát).

20, ELŐÁLLÍTÁS

Ö-(óiníe//-5~C-eA7-4-Ö--fe’«//u//~2,5~i//~Ö-mí7//-/>-D~g/3kop/ríwrííz//uruí?ú/)~ (/ --.->4)-5,ő-4/-ö~ucz'h7-2-ö~baííz//-/7-g^/ükop4unoz// b'/á/ónmuí/m/í/dí /39), vegyüietet (1.32 g, 1.71 mmol) feloldjuk diklór-metánban (34 míg argon alatt hozzáadunk triklór-aeewnitrilt (0.87 rak 8.50 mmol) és céziumkarbonátot íÖ.90 g, 2.73 mmol). Az elegyet 2 órán át kevertetjük (VRK.), majd szűrjük, A maradékot sziiikagél oszlopon kromatografálva. (3/2 (v/v) cíklohexán/etíl-acetát) tisztítjuk. Ily módon a 29 ímidátok. (α/β -=- 85/15} keverékét (1.2Ö g, 77%) kapjuk. VRX.: R._;:^:::: 0.36 (1/2 (v/v) cíklohexán/etil-acetát).

* ♦

4, se:

id előállítása

AeOSsOOC tevő' \

O8n

Óim

08«

♦ ♦♦

2L ELŐÁLLÍTÁS (7ó'~dí~79-neeP7-2-79-áeuz//--a-7)-gbíáopmu«ozi/Lf7->7)~Ö~ (2,d-n«ú#dr<?“5-C~be?íZí7nA7L?ráí?n//~d-O~níen7-/AD-rnííunop7í'ímnzf77~Á' ~>4)~

2,3,ó-/rt-O-h«Ksü~a-D-g7SA'opí#*e»0Sí4 (.?$).

A 29 imidat (1 .19 g, 1.29 mmoi) és metll 2,3,6~tri-O-benzil-4-t'benzil 3A)-nretil-2~0~5-C-metiiidén-a-L-tdopiranuronátLo.-D-g.lMopirano2Íd 17 0 .02 g, 1.35 mmoi) tolnoios (40 ml) oldalához 4 A molekulaszúrő (1.93 g) jelenlétében.

argon, alatt -20*72-on hozzáadjak tere-buhl-dimeulszüd-íriflás. dlklór-metános oldatát (1M-, 0.19 ml). 39 pere múlva (VRK) Ismét hozzáadunk terc-buuldínnniiszllii-'írifiál diklór-metános oldatot (IM, 0.19 ml), 30 pere múlva (VRK) szilárd nátrium -hidrogén-karbonátot adunk hozzá. Áz oldatot szűrjük, vízzel mossuk, szárítjuk, maid szárazra pároljuk. A maradékot előbb Sephadex® 1,1129 oszlopon, majd sziiikagéi oszlopon (2/1 (v/v) ioluol/etil-aeetát) króm ato grata! va tisztítjuk. Ily módon a tiszta 3Ö-a tetraszacharidot (1.14 g, 58%.; kapjuk.

ícdb +47 (e 0.21, dikfór-rneián).

22. ELŐÁLLÍTÁS (3,d-dL77-uotyí/~2“Ö~ócrís//-a-í>~gd/íA'fjpu'ííííozt7)-77---->4)~Ö-(2,d-írn/íá7rn~5--C.

ái?uz//ox?Luréo#/í/~d«Ö-níet//-/L£>-mnnnnpó-iní<?zí/)~(/-->4.L2.,.kd~r/7-ö-áeím/LíZ~

Ö~g/üko/.úmm?zü7 (3 /).

A 30 vegyületet (1,13 g, 0.75 mmoi) feloldjuk 2/1 (v/v) eíanol/toluol eíegyben (159 mi) és hozzáadunk hídrazln-aeeiátot (0.35 g, 3.73 mmoi). Az elegyet <5 Ό órán át kevertetjük (VRK), majd bepároljnk, A maradékot szílikagél oszlopon (3/2 (v/v) tolttoí/etil-acetáí) kromatograíalva tisztítjuk. Ily módón a tiszta 31 vegyűletet (0,816 g, 83%) kapjuk.

fa]ö +35 (e = 1,01, diklór-metán),

5, SÉMA: Az EFGH tetraszarkarií kapcsolása a glükózai donorral I) (32), deprotektálás és szulfaíálás.

sí

23. ELŐÁLLÍTÁS

3/í9:7-ö-66-67“űeeí//~2,5,4-/f/~6/-:4i4//-ff-/>“^/:ife:/:/rí:::í:2:7)-6/--^4)-6/-66::::2// 5-6€///-2,3-://-6/-^:4//-^0-^/03:0^::7::::02//::^::::4/)-/7 “>/)~67-0,5-rf:-6/-::€€/:7~2-6//::0:2//-0-0-^/::^0/::^::::::2:/)-67-44)-6/-42,0-::::/:/:0::-5-6.-50::2:7::.7-:^::^0:::::7-3-0:::0/:7-/^0-:::0::::0/:/^::::::2//)-47--^02,5,6-/2:-0-50::2:7-::-0-^7::3::/::7::::027:/ 435), ő~CLA.eeíÍ:l~23,4-tri-ő-metiLD~glüköpíranózAtiklor-aeetimidát 32 (34.7 mg, 0.0245 mmol) (P. Westerduin. et aL BioOrg. Med. Chem., 1994, 2, 1267) és a glükozil akceptor 31 (80 mg, 0.056 mmol) vegyüieteket a 21 előállítás szerint kezeljük. A kapott vegyületet előbb Sephadex® LH20 oszlopon (1/1 (v/v) diklór-metán/eianoí). majd szilikagél oszlopon (3/2 (v/v) di-izopropü-éter/etilaeetát): kromatografálva tisztítjuk. Ily módon a 33 származékot (54.6 mg, 5856) [etjo +55 6e ~ 1, dikiér-metán),

24. ELŐÁLLÍTÁS

5/e///~43-66~67~::í.'í4:/-2,5,4-::':-O-:?:€/:/~a-/>~g-/::á0/::>í::::?2:/l-47 -+4)-6/-65-6.-:4:/2,5--5:--6/-::::4:/-/:/-0-^//:3::/:/.:::::02//::^::::5:::)-6/---+4)-6/-45/:-.4:--0--::00///-::-0gdnLop/rnnnzí/)-/-/--+0)-0-/2,6:-i:::/:/i/rí:-5-C.-3:::'/:::A':~5~6./-::::4:7-/LO~ :?:::::::::/::V:::::í2:7)-6/ --0)~fz-0-g/í:3o/::rn:í:>2:5 (54>.

A 33 vegyüiet (40 mg, 0.024 mmol) ecetsavas (2: ml) oldatát 1036 csontszenes palládium katalizátor (80 mg) jelenlétében 1.6 órán át hidrogén atmoszféra alatt kevertetjük, majd megszűrjük. A szurletet bepereljük. Ily módon a vegyületet kapjuk.

3 25. ELŐÁLLÍTÁS mtriíÁÓ~P-gó/á:o/u7'n«oz//«rö«íí?H“fT“MÁÖffö~.ö--g/íWpímnííZí/Á('/ ->4/~€>-(2,6~ £/00/4/-0-3-0-^0^60.^/-5-//-0/^///-^-//-0^0^00^00//02///-(3-^4/-0^^-^/^^A nyers 34 vegyüiet metanoíos (866 μί) oldatához 5M vizes nátriumhidroxid oldatot (216 ul) adunk. 25 óra múlva vizet adunk hozzá és a reakcióelegyet 'Sephadex® G-25 gél (2 x 38 cm) oszlopon engedjük át, vízzel eluálva. Az eluátunaot betöményhjük, Dowex® 59 H* oszlopon (2 ml) eresztjük át.

majd fogyasztva szántjuk. Ennél a fázisnál hogy valamennyi védöcsoport eltávozott-e..

HNMR segítségével ellenőrizzük.

1. PÉLDA o?eri/-^^g/jS^p«ro«í>zí/orowev>(/-r>4>fX«P3^-M-<>-szí^>~«-Z>-g/őkopm?oo2//)-/7™M/-ö“f2jő-oo///d£-f.í~5-C-ki2z6o.v/-3-<3-ojo///~^-7>-moo??í^í>oooz///~ /7 -~>4)-3,3,6“/r/-ö-52o(/ó-ö-7)-g/öá:op/íOoo2/3 ooHom-xo (2//,

C.A.A, van Boeckel és M. Petlioe, Angew. Chem. Int, Ed. Engí., 1993,

32, 1671-1690 közleményben leírt eljárás szerint,

A 20 vegyüiet' (20 mg, 20.7 pmol) és trietil-amirkkéntioxid komplex (169 mg, 0.90 pmol) dlmetíl-íbrmamídos (2 ml) oldatát fénytől védve, IS és fél órán át 5S^C-ou melegítjük.

* ♦

Ο

A reakcióelegyet szobabőfókra hűt) ük, vizes 0.2M NaCI oldattal meghígítjuk, majd az oldatot Sepbadex® G25F (170 ml) oszlopra visszük, 03M Naül oldattal éluáljok.

A pentaszaeharldoí tartalmazó frakciókat hetöményitjük, ugyanazon az oszlopon, víz ebenst használva sótalaniljuk, Fagyasztva szárítás után a 21 vegyüietet 30.5 mg, 85%) kapjuk.

[ab *49°ü (c - 0.63,1 FO) *H NMR lásd az alábbi 2 táblázatban.

2, TÁBLÁZAT

Vegyület	Ü ni t	ILI	KG	KG	K-4	H~5	K-6	K~6^!	Ám (Hz)
21 (IVÓ?	D	5.46	532	5 55	3.34	3.87	438	4.12	3.9 1
	E	436	536	3,53	3,89	3.73	-	-	7,9
	F	5.56	4,36	4,81	4.06	4.17	4 40	4.41	3.7
	G	5.49	4.41	3.73	4.17	-	434	4,00	~ 1
	H	5.16	4.36	4.52	4.01	4,08	4.41	430	3.7

PÉLDA ^///Λί/ρ/>0//ζ/ε/7)-(/—./-0-0-(2,6-0//////0//-5-0-^//^50.1.7-3-0-///^//-/^/)//5i/////í//?fróí//.íZ//)-(/-->4)~2,5,6-rz/-O~52í/(/ó-zz-D~^/«áí>p/>í7í///z/d///frz//////5/'/ (30/.

A nyers 35 vegyűlet dimetiWbrmamidos (1.3 mi) oldatához trietilamin/kendoxíd komplexet (91 mg) adunk. 20 órán át 55®C-en melegítjük, maid az oldatot Sephadex® G25F (2 x 38 cm) oszlopra visszük, Ű.2M NaCl oldattal elnáljuk. A (emléket tartalmazó frakciókat betdményítjük, ugyanazon az oszlopon, víz eluens? használva sóta/ardduk. Fagyasztva szárítás «tán a 36 vegyűletet kapjuk <21.9 mg, 52% a 33 vegyületre számolva).

' H NMR lásd az alábbi 3 táblázatban,.

« ♦

3, TÁBLÁZAT

	H-l (1:.2 Hz)	11-2	H-3	H-4	Π-5	H-6	H-6’	Egyéb
I)	5.43 (3.9)	3,28	3.53	3.30	4,02	4.27	4.14
E	4.68 (8.1)	3.27	3.60	3.98				2.041/1.80; C7FCIÍ: 09.4: Cí-UM
F	5.50 (3,7)	4.35	4.50	3.84	4.07	4.61	4,30
G	5.47 (.1.1)	4.39	3.72	4,16		4.23	4.08
H	5.16 (3.7)	4.36	4.81	4.00	4.1?	4.50	4.39

A lenti 1. és 2., példák szerrnt eljárva állítjuk elő a következő, 3 ···· ő példa szerinti 37 - 40 vegyöieleket. Az anyagok Ή N’MR spektruma egyezésben van az alább- megadott konfigurációkkal.

* 9

9* 9

3. PÉLDA

Λ/6//Ζ-0-(3,5,4-í6/-0-mt4/M“0-42//Zf</“«-0-g(í/4e/j/ra«O5í/)“0--^/)-0-(2,5-///-0mtV//-^-0-g//íRóp/mííor//Mní//söv}-(/ ----./^-0-(2,3,^/6/-0-55////6/-/6-0-^/040///4//////5//)-(/----/4)-0-(2,0-/////////76/-5-( •-47/64//A-/-5-0'.f//íXó7-44/.)~f/////////.////6////6/z//)·· (/ nátrium só (37).

(ajo +S1°C (e = 0,48, víz)

« ♦ ♦ »

Λ.

/?7/ν//5θζ/7)-(7—^4)-47-(2,5-0////7/7/0-5-(..-6///-60,5^-3-0-///0/77-/5-0-///0////0/5700/502/7)(7 --->4)-2,5~/77~Ο<?2///(0-6-0^ aá/níff» só (36).

[oc’j-o -;-57^cC (c = 0.28, víz)

5. PÉLDA

5/0(/7-0-(233-507-(7-///077/-5-(2-525//(0-/0-0^//760///0/5//02/7)-(7 -.3)~O-(2,3-/77-47me(í/-^D^7M«p/r««oxí//wa5’aH/'-(7 ----3)-0-(2,5,6-/07-0-52///(0-0:-/7-/(7/560ρ7οο//ί:52/7)-(/“>4)~(2~(2,6~/5///57/7οο-5”(;-6/5θ6θΛ'7~3-0~///ί’(/7-/Α/?-/ί///////ο/?7θί///θ277)~ (7 ----/4)-2,5-//7-(7-^ a~D-§//76op7/woz/// ////5/7///// só (37).

[a];j -1-53··’€ (c^:::: Ö.3. víz)

»4

J.

6. PÉLDA í«eZ//-^X>-^//Í^<>/>Ír«MOZíZtfWWav}-f/-->47-€^f^>ő’fr/-ö-SZ»^?~Of“Z)~^/4ÁO/)/'rő/íogf7)-f / ---^(^0-(2,7-etf ftirffo-S-C-Aííróoxi-á-ifefzvi-.LO-miViL/ADmartnokepf0ptranűzit)~(Í --0)~2J,6~íO~0~sziáfó~^0-gttí^irafi(niit nátrium .«>

{W>

[a]o 49°C (c = 0.25, víz).

Claims

1, Pentaszacharid .sav formában., valamint .gyógyászatilag elfogadott sói, amelyeknek aníonos formája az alábbi képlettel írható fel:

0 £ F

G H có abok

R jelentése hidrogén vagy -SOf, (CrCsjalkíl vagy (C2-Cj)acilesöpört; T jelentése hidrogén vagy etílesoport; n jelentése 1 vagy 2.

2, Az 1. igénypont szerinti pentaszacharid, nátrium vagy kálium só formájában.

3, Az 1. igénypont vagy a 2. igénypont szerinti alábbi pentaszacharid * MetibO-(2,3,4-tri-O-meííl-6-O-szuhb-coD-glükopiranozii)-íl-44)-0-(2,3-díO“meííl-p-D-glükopiranoz5luronsav-(í~>4)~O-(2,3,4-tri~ö-szelfo~a-Dgiükopiranozih“(b-i*4)~0-(2,6-anbidro-5-C-kafbox3-3-0-metil-p-D mannopiranozü}-( 1 -4-4)--2,3,ó-tri-O-sznlíb-o-D-glükopiranosíd nátrium só.

* MetiLü-(2,3,4-tri-O-mstll-6-O-szulíb“Cí.-D-gldkopiranoái)-(l-->4)”O-(5--C“ etÍl-2_?3-íiÍ-0”metn-p-D-glnkopiranoziiuronsav)-(l -»>4)-0-(2,3,ó~iri-O-.szulfo«ί.

a-D-glökopíranozd)-(l-->4)-0-(2,6-anbidro-5“C-karboxi“3“0-metíI-p-Dmannoptrannzil)-(l •••>4)~2,3_s6-fri-O-szfefo-a-D-gIükopírartozid nátrium só.

« Metil· ()-(2,3,4-tn-ö-metH-6-O“SZuÍfo~a~D-gIüknpiraimzil)-(i -/4)-0-(2,3-010~medl-P~D~glüköptrasoziurönsöv)~( 1 ->4>O-(2,3 ,ő- íti-O--szuHn-a-Dglükopiranozií)-(1.“»4>ö-(2₅ő-anhtdro-5-C-karboxi~3~ö-meííl~P-Ömanno'pirattO:ZÍl)~(l~»4Á2~ö-sznlfö-3-,6-ás-Ő-metil-a-D-glük.opiranozid nátrium só.

·· Meti 1-0-(2,3,4-trí-Ö-metíl-6-O-szulfo-.a-D'~gÍükoph'aKozi0-(l-->4)-O-{2,3~di0-nteíd-p-D-gÍükopiranozduronsav)~(i'-»4)-0-(2,3,6-íri-0-szudb-a~DglükopíraROZÍI)-(i-*4)“O-(2,6-anhid.ro-S-€~karboxi-3-OmetjI-b-DmanTOpiranozilKl”»4)-2,3~dí“0-szulfo6-0-metü-a-D--glük-opiranozid nátrium só.

♦ Metil-0-(2,3,4~tó~(?)-metü-6-0-sziáíó-a-D-giükopiranozü)-(l-»4)-0-(2,3diÖ-metii-p-D-gsükopimnozdnronsav)-0-v4)-0-(2,3,ó-tri-()-szutfó~a-D~ glükopicanozil)-(l~^4)~0-(2_?6-anhidro-5~C-karboxi-3-0-metll-p~D·ηΐ8η»ορή·αηοζϋ)-(1->4)-2<6-4ϊ-0-5ζη1ί<>-3-0-ίη«η1-σ.-0-§Ιΰ1ίορΪΓ3ηοζίί1 nátrium só.

• Metil~0-(2,3,4-tri-0-meül-6-0~sz«hb-a-Ö~glükopiraj.u>zíi)-'(l -»4}-O-(2,3~díO-meöt-p-D-glükoprramjzdurorföav)~( f -^4)-0-(2,3,6-tri-O-szuifo-a-Dgl UkopÍranozd)-( t -»4)-Q-<2,7-anbidm-5-C~karboxi-6-deoxi-3-Ö-metd-p-DmannoheptopiranozBX .1 -/4)-2,3 .ó-tri-O-szudó-a-D-glükupiranozid nátrium só.

4. Gyógyszerkészítmények, amelyek hatóanyagként az 1-3 igénypont valamelyike szerinti pentaszacharidot tartalmazzák, gyógyászati fog elfogadott bázissal adott sójuk formájában, vagy sav formában, gyógyszerészeti lég elfogadott nem toxikus, inért segédanyaggal kombinálva vagy keverve,

5. A 4, igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, egységdó-zisok formájában, amelyekben a hatóanyag legalább egy gyógyszerészeti segédanyaggal van kombinálva.

6. Az 5. igénypont szerinti készítmény amelyben minden egységdozis Őri

- 100 mg hatóanyagot tartalmaz.

7. Az 6. igénypont szerinti készítmény amelyben minden egységdózis (1,5

- 50 mg hatóanyagot tartalmaz.

8. Az 1-3, igénypont szerinti -po-liszacharld felhasználása gyógyszer készítésére, amely a véralvadás rendellenességeivel kapcsolatos betegségek gyógyításában hasznos.