HU225329B1 - Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity - Google Patents

Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity Download PDF

Info

Publication number
HU225329B1
HU225329B1 HU9602498A HUP9602498A HU225329B1 HU 225329 B1 HU225329 B1 HU 225329B1 HU 9602498 A HU9602498 A HU 9602498A HU P9602498 A HUP9602498 A HU P9602498A HU 225329 B1 HU225329 B1 HU 225329B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
hyaluronate
zinc
days
cobalt
solution
Prior art date
Application number
HU9602498A
Other languages
English (en)
Inventor
Janos Illes
Erzsebet Neszmelyi
Bela Dr Stefko
Kalman Dr Burger
Original Assignee
Richter Gedeon Vegyeszet
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Richter Gedeon Vegyeszet filed Critical Richter Gedeon Vegyeszet
Priority to HU9602498A priority Critical patent/HU225329B1/hu
Publication of HU9602498D0 publication Critical patent/HU9602498D0/hu
Priority to PT97943084T priority patent/PT964687E/pt
Priority to KR10-1999-7002117A priority patent/KR100489494B1/ko
Priority to DK97943084T priority patent/DK0964687T3/da
Priority to US09/254,386 priority patent/US6348190B1/en
Priority to EP97943084A priority patent/EP0964687B1/en
Priority to PCT/HU1997/000052 priority patent/WO1998010773A1/en
Priority to ES97943084T priority patent/ES2212131T3/es
Priority to CN97197886A priority patent/CN1130204C/zh
Priority to AU44691/97A priority patent/AU4469197A/en
Priority to AT97943084T priority patent/ATE254922T1/de
Priority to UA99041975A priority patent/UA66766C2/uk
Priority to RU99107569/14A priority patent/RU2204394C2/ru
Priority to DE69726457T priority patent/DE69726457T2/de
Priority to JP10513414A priority patent/JP2001500860A/ja
Publication of HUP9602498A2 publication Critical patent/HUP9602498A2/hu
Publication of HUP9602498A3 publication Critical patent/HUP9602498A3/hu
Publication of HU225329B1 publication Critical patent/HU225329B1/hu
Priority to JP2009042896A priority patent/JP2009114206A/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Description

A találmány tárgya hlaluronsavasszociátumokat (komplexeket) tartalmazó antimikrobiális hatású gyógyászati készítmények és eljárás ezek előállítására.
A találmány tárgyát képezi ezen túlmenően a hialuronsavasszociátumok alkalmazása antimikrobiális hatású gyógyászati készítmények előállítására és eljárás mikrobák okozta kórképek gyógyítására.
Azt találtuk, hogy a hialuronsavasszociátumok - a cink- és kobalt-hialuronát - aerob és anaerob mikroorganizmusokkal szemben antimikrobiális, ezen belül jó antibakteriális és gombaölő hatást mutatnak.
A deprotonált hialuronsavnak a periódusos rendszer 4. periódusába tartozó 3d-fémionokkal képzett asszoclátumalt, így a cink- és kobalt-hialuronátot a 203 372 számú magyar szabadalmi leírás ismerteti, főként ulcus crurls, decubitus stb. gyógyító hatással.
A hialuronsav néven ismert makromolekula, amely többnyire nátriumsója formájában fordul elő, több mint ötven éve ismert vegyület, amelyet első ízben Meyer és munkatársai írtak le [J. Bioi. Chem. 107, 629 (1934); J. Bioi. Chem. 114, 689 (1939)]. Meyer a hialuronsavat savas körülmények között izolálta. Fiziológiás pH-n azonban a karboxilcsoportok disszociáltak, és a poliszacharld elnevezése nátrium-hialuronát, ha a környezeti kation nátrium. Szerkezetét Weissman és munkatársai igazolták [J. Am. Chem. Soc. 76, 1753 (1954)]. A környezeti kation meghatározása azonban nem mindig egyszerű, ezért Balazs (The Biology of Hyaluronan 1989, John Wiley and Sons, Ciba Foundation Symposium, 143.) ajánlatára a poliszacharid (mind a hialuronsav, mind a nátrium-hialuronát) általános neve hialuronan.
A hialuronsav a természetben előforduló nagy viszkozitású glükózaminoglikán, amely váltakozva β1—3 glükuronsav és β1-4 glükózaminegységeket tartalmaz. Molekulatömege 50 OOO-től több millióig terjed. A hialuronsav minden emlős kötőszövetében megtalálható, nagyobb koncentrációban fordul elő a bőrben, a szem üvegtestében, a szinoviális folyadékban, a köldökzsinórban, valamint a porcszövetben. A hialuronsav kinyerésével régóta foglalkoznak, az „ultratiszta” hialuronsav kinyerését és alkalmazását például a 4 141 973, a 4 303 676 számú amerikai egyesült államokbeli és a 01 440 19 számú európai szabadalmi leírások ismertetik.
Az irodalomban számos utalás található a hialuronsav és a sebgyógyulás közötti összefüggésre. Toole és Gross [Toole B.P., Gross „The extracellular mátrix of the regenerating newt limb: synthesis and removal of hyaluronate prior to differentation, Dev. Bioi. 25, 55-57. (1971)] szerint a hialuronsav, mint az extracellurális mátrix fő alkotója, a különböző sejttípusok vándorlásáért felelős. A fenti szerzők kísérleti vizsgálatokban megállapították, hogy a sebgyógyulás során a hialuronsav lokális koncentrációja megemelkedik, amely a szövetregenerációhoz szükséges sejtreakciókat serkenti. A fentiek mellett egyéb kísérleti adatok is azt igazolják, hogy a hialuronsav a sebgyógyulás során fellépő fiziológiai cellurális eseményeket szabályozza azáltal, hogy optimális feltételeket teremt minden, a szövetmegújulásban részt vevő sejt vándorlásához és proliferációjához.
Az utóbbi évekig a hialuronsavat nátriumsója alakjában használták a gyógyászatban - elsősorban a szemészetben, bőrgyógyászatban, sebészetben, ízületi terápiában - és a kozmetikában. A 904 547 számú belga szabadalmi leírásban ismertetettek szerint a hialuronsav alkáli-, alkáliföldfém-, magnézium-, alumínium-, ammónium- és szubsztituált ammóniumionokal képzett sói gyógyszerek felszívódását segítő hordozóanyagként is szolgálhatnak. A hialuronsav nehézfémsóit, ezen belül az ezüstsót gombaölő szerként, az aranysót a rheumatoid arthritis gyógyítására használják (WO 87/05517 számú közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés). Ismertek azonban a nehézfémvegyületek, így az ezüst- és aranyvegyületek súlyos mellékhatásai: immunológiai, a vérképző szervekre, valamint az idegrendszerre gyakorolt hatásaik kérdésessé teszik alkalmazásuk előnyösségét [Shinogi M, Maeizumi S. „Effect of preinduction of metallothlonein on tissue distribution of silver and hepatic lipid peroxidation” Bioi. Pharm. Bull. /Japan/, Apr. 1993 16(4) p 372-4; Masson C, Boulu P, Henin D: Rév. Med. Interné (Francé) May-Jun 1992 13(3) p 225-32.]
Kísérleteink során arra a meglepő felismerésre jutottunk, hogy a 203 372 számú magyar szabadalmi leírásban ismertetettek szerint a hámhiányos felületek epitelizációjának meggyorsítására, a keringési elégtelenség következtében létrejövő ulcus cruris, valamint a decubitus gyógyítására használható hialuronsavasszociátumok - a cink- és kobalt-hialuronát - meglepő módon erőteljes antimikrobiális, ezen belül antibakteriális és gombaölő hatást mutattak, továbbá az antibakteriális hatáson belül hatásosnak bizonyultak a gyomor- és nyombélfekély kialakulásáért az újabb időkben felelősnek tekintett Helicobacter pylori baktérium ellen is
A hialuronsavasszociátumok antimikrobiális hatását azért tartjuk meglepőnek, mert a hialuronsavasszociátumok eddig ismert sebgyógyító, hámképződést elősegítő hatása feltehetőleg valamilyen módon a hialuronsavnak a sebgyógyulás során az előzőekben ismertetett szervezetazonos viselkedésén alapul, ebből pedig nem következik a hialuronsavasszociátumok antimikrobiális hatása.
Kísérleteink szerint a hialuronsav cink-, illetve kobaltasszoclátumok igen hatásosnak bizonyultak mind az aerob, mind az anaerob baktériumok, így például a Staphylococcus aureus, Streptococcus sp., Pseudomonas Aeruginosa, Salmonella sp., E. coli és a Helicobacter pylori ellen.
Minthogy a szemfertőzésekért leggyakrabban a Staphylococcus aureus és a Pseudomonas aeruginosa baktériumok felelősek, a hialuronsavasszociátumok antibakteriális hatáson alapuló bőrgyógyászati (a sebgyógyulás felülfertőződésének megelőzése) felhasználása mellett különösen ígéretesnek tűnik a szemészet területén való alkalmazása is.
A szemészetben a nátrium-hialuronát intraokuláris alkalmazása ismert. 1980 óta széles körben alkalmazzák szürkehályog-műtét, műlencse-beültetés, szaru2
HU 225 329 Β1 hártya-átültetés során. Az elülső csarnokba adva meggátolja annak összeesését a műtét alatt, és védi az érzékeny szöveteket és sejteket. Az operáció után a szemből a nátrium-hialuronátot kimossák, az esetenként előforduló megemelkedett szemnyomás elkerülése végett.
A „száraz szem” szindróma kezelése során is alkalmaznak nátrium-hialuronátot (Polack FM és társai, The treatment of dry eyes with Nahyaluronate, Cornea 1982, 133-136.).
Fontos alkalmazási terület a szemfertőzések helyi antibakteriális kezelése is.
A cink- és kobalt-hialuronát asszociátumok antibakteriális hatásuk következtében különösen jól alkalmazhatónak látszanak a szemészeti terápiában, főként a cink-hialuronát tűnik nagyon ígéretesnek ezen a területen. A cink-hialuronát a szemészetben lubrikáns hatása mellett helyi antibakteriális szerként alkalmazható előnyösen, de alkalmazási területe lehet a szemsebészet is, ahol az intraokulárisan 1980 óta széles körben alkalmazott nátrium-hialuronát versenytársa lehet, éppen antibakteriális hatása következtében, az előforduló enyhe gyulladásos reakciók leküzdésére [Karén L. Goa és társai, Hyaluronic Acid, A Review of its Pharmacology and use, Drugs 47(3), 536-566 (1994)], a műtét alatti fertőzésveszély csökkentésére. Az irodalomban régen ismert a cinknek, mint esszenciális nyomelemnek a szerepe a szemben [Newsome DA., Rothman RJ; „Zinc uptake in vitro by humán retinái pigment epithelium” Invest. Ophtalmol. Vis. Sci. Nov. 1987 28(11) p.795-9]. Külön előnye a cink-hialuronát alkalmazásának, hogy a hialuronsavtartalmú más készítményekre is jellemző előnyös hatások megőrzése mellett használatával a szemműtéteknél kialakulható cinkcsökkenés is elkerülhető. Ugyanis a hialuronsav, mint polianion a műtét utáni kimosáskor képes magával vinni kationokat. Mivel azonban a cink koordinatív kötéssel is kapcsolódik a hialuronáthoz, nem kizárható, hogy cinkionok csökkenése is felléphet a szemben. A cink- hialuronát alkalmazása kiküszöbölheti ezt a jelenséget.
A leggyakrabban előforduló szemfertőző baktériumok a Staphylococcus csoportba tartoznak, de a kevésbé gyakori Pseudomonas aeruginosa csoport fertőzése is nagyon veszélyes, mert 24-48 órán belül teljes vakságot okozhat. A szem fertőzését gyakran éppen a szennyezett szemészeti oldatok (szemcseppek, kontaktlencse-tároló oldatok stb.) okozzák. Ilyen szennyezett szemészeti oldatok előfordulnak orvosi rendelőkben, klinikákon, és igen gyakoriak az otthoni felhasználás esetén. A szennyező mikroba leggyakrabban a Staphylococcus csoportba tartozik, de a kevésbé gyakran előforduló, viszont veszélyesebb Pseudomonas aeruginosa is gyorsan képes elszaporodni a szemészeti oldatokban (Remington’s Ophtalmic Preservatives, Chapter 86, 1588). Tehát a cink- és kobalt-hialuronát asszociátumok erőteljes hatása a két mikroorganizmusfajtával szemben igen fontossá teheti ezeknek a vegyületeknek a szemészetben való alkalmazását.
A vegyületek antimikrobiális hatását mikrobiológiai vizsgálatokkal igazoltuk. A vizsgálatokhoz a
203 372 számú magyar szabadalmi leírás szerinti cink-hialuronát- és kobalt-hialuronát-oldatokat használtuk, összehasonlító oldatként nátrium-hialuronát-oldatokat alkalmaztunk.
Az alább következő példa 0,5%-os cink-hialuronát-oldat előállítását ismerteti. A későbbiekben a %-ok mindig tömeg/térfogat%-os adatokat jelölnek, hacsak nincs másképpen megadva.
A 0,5%-os cink-hialuronát-oldatnak a példában ismertetett minőségű desztillált vízzel történő hígításával nyertünk 0,1 és 0,2%-os oldatokat.
1. példa
100 ml 0,5%-os Zn-hialuronát-oldat készítése
Az oldat készítéséhez használt Na-hialuronát jellemzői:
Molekulatömeg: 1 000 000 dalton
Fehérjetartalom: 0,045% 1%
UV-abszorpció: A: 0,085 257 nm 1% A: 0,050 280 nm c^o
Viszkozitás: η=17,25 dl/g 25 °C
Hialuronsavtartalom: 99,3%
A példában leírt műveleteket steril körülmények között végezzük.
100 ml térfogatú mérőlombikba 0,50 g nátrium-hialuronátot mérünk be, és 12,50 ml kétszer desztillált vízzel (aqua dest. pro inj.; pirogénmentes, steril) készült 0,10 mol/dm3 koncentrációjú cink-klorid-oldatot adunk hozzá, majd kétszer desztillált vízzel a térfogatot 50 ml-re egészítjük ki. Egy éjszakán át duzzadni hagyjuk, majd rázogatással feloldjuk, kétszer desztillált vízzel jelig töltjük. Az oldatot 0,45 μίτι pórusméretű membránszűrőn leszűrjük. Ilyen módon 0,50% cink-hialuronátot tartalmazó oldatot kapunk.
2. példa
100 ml 0,5%-os nátrium-hialuronát-oldat készítése
Az 1. példában használt nátrium-hialuronátból 0,50 g-ot feloldunk 100 ml kétszer desztillált vízben (aqua dest. pro inj.; pirogénmentes, steril), az előzőekben ismertetett módon. így 0,50%-os nátrium-hialuronát-oldatot kapunk. A 0,5%-os oldat fenti minőségű desztillált vízzel történő megfelelő hígításával készítünk 0,1 és 0,2%-os oldatokat.
1. kísérletsorozat
Az 1. és 2. példa szerint előállított 0,5%-os oldatokból hígítással készített 0,2%-os cink- és nátrium-hialuronát-oldatokat mesterségesen fertőztük különböző tesztorganizmusokkal, adott, azonos csíraszámmal, és az idő függvényében vizsgáltuk a csíraszám változásait. A csíraszám adott időpontokban történő meghatározását lemezöntéses módszerrel végeztük. Az értéke3
HU 225 329 Β1 lés baktériumok és gombák esetében automata telepszámlálóval (Colony-Counter), penészgombáknál pedig vizuálisan történt.
Alkalmazott táptalaj: szója-kazein agar (Casoagar/Merck/)
Tesztorganizmusként az Országos Közegészségügyi Intézet Nemzeti Törzsgyűjteményének tagjait (HNCMB) alkalmaztuk.
Vizsgált mikroorganizmusok: Staphylococcus aureus, Streptococcus sp. Escherichia coli
Salmonella sp.
Candida albicans Aspergilus niger
Az inokulum kiindulásitesztorganizmus-száma: 5 Z106/ml
Parallel kísérletek száma: 3 Az alkalmazott oldatok:
- 0,2%-os vizes cink-hialuronát-oldat
- 0,2%-os vizes nátrium-hialuronát-oldat
Az eredmények néhány mikroorganizmusra vonatkozóan az 1. és 2. táblázatban láthatók.
1. táblázat
0,2%-os Zn-hialuronát-oldat viselkedése különböző tesztorganizmusokkal szemben a kontakt idő függvényében (telepszám/ml)
Mintavételi idők
Tesztorganizmusok 0 óra 1 óra 2 óra 3 óra 4 óra 5 óra 6 óra 24 óra
Staphylococcus aureus 4,80*105 4,75*105 4,50*105 3,60*105 1,00*10“ 8,00* 103 4,50*103 1,00*102
Streptococcus sp 5,10*105 4,00*105 3,60* 104 2,80* 104 1,50*103 1,00* 103 5,00*102 <100
Escherichia coli 5,40*105 5,00*105 8,80* 104 4,20*10“ 3,80*10“ 3,00*10“ 2,50*10“ 2,00* 103
Salmonella sp 5,10*105 4,40*105 3,50*10“ 8,00*103 5,00*103 4,00* 103 2,40* 103 0
Candida albicans 5,20*10» 4,80*105 4,00*105 9,00*10“ 5,00*10“ 4,20*10“ 3,60*10“ 1,60*102
Aspergillus niger 4,20*105 3,40*10“ 3,80* 104 3,60* 104 2,80*10“ 2,60*10“ 1,00*10“ 4,00* 103
2. táblázat
0,2%-os Na-hialuronát-oldat viselkedése különböző tesztorganizmusokkal szemben a kontakt idő függvényében (telepszám/ml)
Mintavételi idők
T esztorganizmusok 0 óra 1 óra 2 óra 3 óra 4 óra 5 óra 6 óra 24 óra
Staphylococcus aureus 5,00*105 5,10*105 4,90*105 5,00*105 4,80*105 4,85*105 4,50*105 4,20*105
Streptococcus sp 4,40*105 4,20*10® 4,25*105 4,20*105 4,10*105 4,10*105 4,00*105 3,80*105
Escherichia coli 5,20*105 5,00*105 5,10*105 5,00*105 4,90*105 4,95*105 4,90*105 4,80*105
Salmonella sp 5,10*105 5,00*105 4,90*105 4,90*105 4,80*105 4,70*105 4,70*105 4,20*105
Candida albicans 4,20*105 4,00*105 4,10*105 4,10*105 4,20*105 4,50*105 4,50*105 5,00*105
Aspergillus niger 4,00*105 3,80*105 3,80*105 3,90*105 3,90*105 4,00*105 4,20*105 6,00*105
Az 1. és 2. táblázat adataiból látható, hogy 24 óra elteltével már lényeges különbség mutatkozott az anti- 55 mikrobiális hatásban. Míg a 0,2%-os cink-hialuronát-oldat a vizsgált tesztorganizmusok többségénél több nagyságrendnyi csökkenést okozott, addig a nátrium-hialuronát-oldatban a tesztorganizmusok száma lényegesen nem változott. 60
2. kísérletsorozat
A cink-hialuronát antimikrobiális hatásának bizonyítása érdekében a 0,2%-ostól eltérő koncentrációjú oldatokkal is elvégeztük a kísérleteket, a vizsgálati idő különböző mértékű növelése mellett. A 3. táblázat 0,1 %-os cink- és nátrium-hialuronát-oldatok hatását mutatja három kiemelt tesztorganizmussal szemben
HU 225 329 Β1
3. táblázat
Idő Staphylococcus aureus Salmonella sp Pseudomonas aeruginosa
tesztorganizmus/ml tesztorganizmus/ml tesztorganiz- mus/ml
cink-hialuronát nátrium-hialuronát cink-hialuronát nátrium-hialuronát cink-hialuronát
0 óra 4,2*10« 1,3*10« 2,0*10« 8,0*10« 2,1*10«
24 óra 2,6*10« 4,1*10« 1,1*10« 8,1*10« 2,4*104
48 óra 0 6,2*10« 0 1,2*10« 3,0*103
72 óra 0 8,4*10« 0 1,8*10« <100
96 óra 0 0 <100
168 óra 0 0 0
Látható, hogy a cink-hialuronátos kísérletekben Staphylococcus és a Salmonella esetében már gyakorlatilag 48 óra alatt 0-ra csökkent a tesztorganizmusszám, miközben a nátrium-hialuronáttal folytatott vizsgálatok eredményei gyakorlatilag azonos nagyságrendben maradtak. A Pseudomonas aeruginosa esetében lassabban megmutatkozó hatást tapasztalunk, ami abból látható, hogy lényeges csökkenés csak a második naptól kezdődően jelentkezett.
3. kísérletsorozat
A Pseudomonas aeruginosa szemészeti jelentősége miatt részletesen vizsgáltuk a különböző koncentrációjú cink-hialuronát-oldatoknak a Pseudomonas aeruginosára gyakorolt hatását, azonos koncentrációjú nátrium-hialuronát-oldatokkal összehasonlítva. Az eredmények a 4. és 5. táblázatban láthatók.
4. táblázat
Zn-hialuronát hatása Pseudomonas aeruginosára
Idő, óra Zn-hialuronát-oldatok
0,1% 0,2% 0,5%
tesztorganizmus/ml
0 5,5*10« 8,0*10« 1,0*10«
24 5,0*10« 5,5*10« 6,0*10«
48 2,0* 103 3,0* 103 3,0*103
72 <100 <100 <100
5. táblázat
Na-hialuronát hatása Pseudomonas aeruginosára
Idő, óra Na-hialuronát-oldatok
0,1% 0,2% 0,5%
tesztorganizmus/ml
0 1,1 *107 2,0*107 1,7*107
24 1,0*107 2,0*107 1,5*107
48 1,1*10« 1,3*10« 1,2*10«
72 1,2*107 1,1*107 1,2*10«
HU 225 329 Β1
A táblázatok adatai azt a kedvező képet tárják elénk, hogy a cink-hialuronát-oldatok láthatóan hatásosabbak, mint a nátrium-hialuronát-oldatok, s már a 0,1 %-os cink-hialuronát-oldat is ugyanolyan hatást mutat, mint a 0,2 és 0,5%-os cink-hialuronát-oldat, ami előnyös alapul szolgálhat egy hatásos külsődleges felhasználású készítmény kifejlesztéséhez.
A kobalt(ll)-hialuronát antibakteriális hatását szintén megvizsgáltuk. A 3. példában ismertetjük a kobalt-hialuronát-oldat készítését.
3. példa
0,1 %-os kobalt-hialuronát-oldat készítése
100 ml-es mérőlombikba 0,10 g 1. példa szerinti nátrium-hialuronátot mérünk be, és 2,50 ml kétszer desztillált vízzel (aqua dest. pro inj.; pirogénmentes, steril) készült 0,10 mol/dm3 koncentrációjú kobalt-klorid-oldatot adunk hozzá, majd kétszer desztillált vízzel a térfogatot kiegészítjük 50 ml-re. Egy éjszakán át duz5 zadni hagyjuk, majd rázogatással feloldjuk, végül kétszer desztillált vízzel jelig töltjük. Az oldatot 0,45 pm pórusméretű membránszűrőn leszűrjük. Ilyen módon 0,10%-os kobalt-hialuronát-oldatot kapunk.
4. klsérletsorozat
A mikrobiológiai vizsgálatokat teljesen az előzőekben ismertetettek szerint hajtottuk végre, azzal a különbséggel, hogy Salmonella sp. helyett E. coli baktériumot alkalmaztunk. Az eredmények a 6. táblázatban láthatók.
6. táblázat
Idő Staphylococcus aureus tesztorganizmus/ml E. coli tesztorganizmus/ml
0,1 %-os nátriumhialuronát 0,1 %-os kobalthialuronát 0,1 %-os nátriumhialuronát 0,1 %-os kobalthialuronát
0 óra 3,0x10® 1,9x10® 4,5*10® 5,8x10®
4 óra 2,1*10® 7,5x10® 4,6*10® 4,5x10®
24 óra 1,3x10® 3,5x10® 1,8x10® 1,0*10®
48 óra 5,8x104 1,0x102 5,5x10® 9,0x102
72 óra 2,8*10® <10 5,5x10® 1,0x102
96 óra 1,5*10® <10 1,3x10® <10
168 óra 1,6*10® <10 2,5x10® <10
A 6. táblázat adataiból látható, hogy mindkét vizsgált tesztorganizmussal szemben a kobalt-hialuronátoldat hasonló hatékonyságot mutat, mint a cink-hialuronát-oldatok, míg az összehasonlításra szolgáló nátrium-hialuronát-oldatok ez esetben is - a mérési módszerek szórását figyelembe véve - hatástalannak bizonyultak.
5. kísérletsorozat
A cink-hialuronát asszociátum antibakteriális hatását az alább következő minimális gátló koncentráció (MIC) és mikrobicid koncentráció (CID) értékekkel jelle35 mezhetjük, összehasonlítva a Na-hialuronát megfelelő értékeivel.
A MIC- és CID-értékeket 0,2%-os oldatok esetében határoztuk meg. A meghatározásokat ismert módon végeztük: a vizsgálati anyagokból hígítási sort készítettünk, és azt mesterségesen befertőztük a kiválasztott tesztorganizmusok megfelelő hígításával. A megfelelő hőmérsékletű és idejű inkubálás után a koncentrációsort vizuálisan értékeltük, és meghatároztuk azt a legkisebb koncentrációt, amelynél a mikroorganizmus nem képes szaporodni (MIC), illetve ahol a mikroorganizmusok elpusztultak (CID). Az eredmények a 7. táblázatban láthatók.
7. táblázat
Zn-hialuronát MIC- és CID-értékei (pg/ml)
Staphylococcus areus Salmonella sp Pseudomonas Streptococcus sp Escherichia coli
MIC 40 5,4 96 26
CID 120 160 400 310
A 0,2%-os nátrium-hialuronát-oldat 2000 pg/ml koncentrációban sem mutatott egyik tesztorganizmussal szemben sem gátlóhatást, tehát MIC-értékeket nem tudtunk meghatározni.
A fentiekből látható, hogy a cink-hialuronát MlC-értékei a vegyület számottevő mikrobiológiai hatására utalnak, amely nagyságrendekkel jobb, mint a Na-hialuronáté.
HU 225 329 Β1
6. kísérletsorozat
A hialuronsavasszociátumok ígéretes szemészeti alkalmazásának lehetősége megköveteli, hogy a készítmények mikrobiológiai stabilitása jó legyen, vagyis a különböző mikroorganizmusokkal történő befertőzött- 5 séggel szembeni ellenálló képességük megfelelő legyen. Kiterjedt vizsgálatokat végeztünk a cink- és kobalt-hialuronát-oldatok mikrobiológiai stabilitásának meghatározására, a szemészetben közismerten alkalmazott nátrium-hialuronáttal összehasonlítva. A kísér- 10 letekben megvizsgáltuk azt is, hogy szükség van-e a cink-hialuronát-tartalmú oldatok valamilyen konzerválószerrel történő tartósítására.
A vizsgálatokat az USP XXII kiadás (p. 1478) „Antimicrobial preservatives effectiveness” című cikkelyé- 15 ben ismertetettek szerint végeztük. A vizsgálat lényege: a vizsgálandó anyagot különböző tesztorganizmusokkal mesterségesen befertőztük, és az idő függvényében vizsgáltuk a telepképző egységek számának változását. Tesztorganizmusként az Országos Közegészségügyi Intézet Nemzeti Törzsgyűjteményének tagjait (HNCMB) alkalmaztuk. A vizsgálatokat különböző koncentrációjú cink- és nátrium-hialuronát-oldatokkal végeztük, konzerválószer jelenlétében és anélkül.
A minták telepképzőegység-számának (csíraszám) meghatározása lemezöntéses módszerrel történt. Az értékelés baktériumok és gombák esetében automata telepszámlálóval (Colony-Counter), penészgombáknál pedig vizuálisan történt.
Az eredmények az alábbi táblázatokban láthatók. Egy-egy eredmény három párhuzamos minta értékének átlagát jelenti, telepszám/ml-ben kifejezve.
8. táblázat
0,1%-os cink-hialuronát-oldat mikrobiológiai stabilitási vizsgálatának eredményei
Mintavételi időpont Kiindulási 0h 1 nap 2 nap 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap 7 nap 14 nap 21 nap 28 nap
Teszt- organizmus
Staphylo- coccus aureus 5,2*10® 1,3*104 1,4x103 1,3*103 1,1*103 3,0*102 <10 <10 <10 0 0
Pseudomonas aeruginosa 5,6*10® 0 0 0 0 0 0 <1 0 0 0
Escherichia coli 1,1*10® 1,0*104 3,9* 103 2,4* 103 102 <100 <100 <100 <10 0 0
Aspergitlus niger 4,5*10® 5,5*104 3,0* 104 3,7*103 3,8* 103 4,1*103 3,9*103 3,8*103 3,0*103 3,1 *103 3,0* 103
Candida albicans 6,4*10® 2,5* 104 4,2*103 2,5* 103 2,1*103 2,6* 102 3,1*102 3,2* 102 <100 <10 0
9. táblázat
0,2%-os cink-hialuronát-oldat mikrobiológiai stabilitási vizsgálatának eredményei
Mintavételi időpont Kiindulási 0h 1 nap 2 nap 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap 7 nap 14 nap 21 nap 28 nap
Teszt- organizmus
Staphylo- coccus aureus 4,9*10® 4,8* 104 2,2*103 <10 <10 <10 <10 0 <10 0 0
Pseudomonas aeruginosa 1,1*10® 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Escherichia coli 4,8*10® 1,1*10® 6,2* 104 2,6* 104 102 <10 <10 30 <10 0 0
Aspergillus niger 4,2*10® 1,8*104 1,7*104 1,1*104 1,0*104 8,2* 103 6,1x103 2,2*103 5,2* 102 2,2* 102 1,7*102
Candida albicans 3,9*10® 1,1*10® 1,9*104 2,0* 104 1,8*104 6,1*103 3,5*103 3,1*103 9,8* 102 <100 0
HU 225 329 Β1
10. táblázat
0,5%-os cink-hialuronát-oldat mikrobiológiai stabilitási vizsgálatának eredményei
Mintavételi időpont Kiindulási 0h 1 nap 2 nap 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap 7 nap 14 nap 21 nap 28 nap
Teszt- organizmus
Staphylo- coccus aureus 4,3x105 1,5x104 3,0*103 <100 10 <10 0 0 0 0 0
Pseudomonas aeruginosa 6,1*105 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Escherichia coli 5,1 x105 4,1χ104 3,1x103 1,6x102 <100 0 0 0 0 0 0
Aspergillus niger 4,8x105 4,2χ104 3,6x104 2,8x104 2,8x104 2,4x104 4,0x103 3,6x103 3,1x103 1,9x102 1,8*102
Candida albicans 1,1 x105 3,0x104 1,2x103 9,0x103 4,1x103 6,9x102 3,1x102 1,4x102 0 0 0
11. táblázat
0,5%-os cink-hialuronát+K-szorbát oldat mikrobiológiai stabilitási vizsgálatának eredményei
Mintavételi időpont Kiindulási 0h 1 nap 2 nap 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap 7 nap 14 nap 21 nap 28 nap
Teszt- organizmus
Staphylo- coccus aureus 1,1x105 2,6x103 20 <10 0 0 0 0 0 0 0
Pseudomonas aeruginosa 1,8x105 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
Escherichia coli 6,7χ105 5,9x104 4,4x103 1,6x102 <100 0 0 0 0 0 0
Aspergillus niger 4,6x105 4,1x104 1,8x103 2,1x103 1,9x103 1,6x103 1,6x103 5,4x102 2,0x102 1,9x102 1,6*102
Candida albicans 4,8x105 2,7x104 2,1x103 6,5x103 4,9x103 3,0x103 4,2x102 3,2x102 0 0 0
12. táblázat
0,5%-os nátrium-hialuronát+K-szorbát oldat mikrobiológiai stabilitási vizsgálatának eredményei
Mintavételi időpont Kiindulási 0h 1 nap 2 nap 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap 7 nap 14 nap 21 nap 28 nap
Teszt- organizmus
Staphylo- coccus aureus 1,5x105 6,8x104 5,1x104 4,2x103 2,1χ103 2,0x102 20 <10 <10 0 0
Pseudomonas aerugt- nosa 2,1x105 2,4x104 3,0x103 <100 <100 10 0 0 0 0 0
Escherichia coli 3,5x105 3,0x104 1,2x104 8,4x103 8,2x103 8,4x103 8,4χ103 8,1χ103 5,4*102 3,4x102 0
HU 225 329 Β1
12. táblázat (folytatás)
Mintavételi időpont Kiindulási 0h 1 nap 2 nap 3 nap 4 nap 5 nap 6 nap 7 nap 14 nap 21 nap 28 nap
Teszt- organizmus
Aspergillus niger 3,2*105 5,4*104 3,2* 104 6,8* 103 5,4* 103 5,5*103 4,8* 103 5,1*103 4,7* 103 3,0*103 2,8*103
Candida albicans 9,8*104 6,7* 104 5,6*104 6,1*104 5,4* 104 5,5* 104 6,8* 104 7,9*104 1,3*105 8,1*104 6,7* 104
Az USP XXII-ben leírtak és az általános követelmények szerint egy anyag megfelelően konzervált, ha a mesterséges fertőzéssel bejuttatott baktériumok számát 99%-kal csökkenti 14 nap alatt, ha a tesztorganizmusok 14 nap alatt sem szaporodnak, valamint ha egyik tesztorganizmus sem mutat időleges szaporodást a vizsgálat 28 napja alatt. A vizsgálati eredményekből a következő látható:
1. A 0,1 %-os cink-hialuronát-tartalmú oldat mikrobiológiai stabilitása megfelel az USP XXII előírásainak, tekintettel arra, hogy az 5 tesztorganizmus közül 4 (a Staphylococcus aureus, Psedomonas aeruginosa, Escherichia coli, Candida albicans) nemcsak az előírt pusztulást mutatta, hanem a 28. napi mintavételnél már nem tudtunk élő csírát kimutatni. Az Aspergillus niger viselkedése előírásszerű, sőt - 2 nagyságrend csökkenést mutat.
2. A 0,2%-os cink-hialuronát-tartalmú oldat mikrobiológiai stabilitása hasonló a 0,1 %-os cink-hialuronát-tartalmú oldat stabilitásához, tehát az USP XXII követelményeinek megfelel.
3. A 0,5%-os cink-hialuronát-tartalmú oldat stabilitása - az elképzeléseknek megfelelően - megfelel az USP XXII követelményeinek, sőt az eredmények arra utalnak, hogy a cink-hialuronát-koncentráció emelkedésével javul a stabilitási tulajdonság.
4. A 0,5%-os cink-hialuronát+0,1%-os K-szorbát tartalmú oldat stabilitási tulajdonságai megfelelőek, de számottevően nem javulnak a K-szorbát konzerválószer hatására.
5. A 0,5%-os nátrium-hialuronát+0,1%-os K-szorbát tartalmú oldat is megfelel az USP XXII kívánalmainak valamennyi vizsgált mikroorganizmus esetében.
Az eredményekből az a nagyon fontos következtetés vonható le, hogy a cink-hialuronát-oldat esetében egyáltalán nincs szükség konzerválószer alkalmazására, szemben a nátrium-hialuronáttal, amely még konzerválószer jelenlétében is rosszabb stabilitást mutatott, mint a cink-hialuronát-oldat. A nátrium-hialuronát-oldathoz feltétlenül szükséges konzerválószer, mivel egyébként könnyen befertőződik.
Ez a felismerés azért nagyjelentőségű, mert a konzerválószerek gyakran allergizálóhatásúak lehetnek, így kiküszöbölésük - különösen a szemészet területén - nagyon reményteljessé teszi a cink-hialuronát alkalmazását.
7. kísérletsorozat
A kobalt-hialuronát mikrobiológiai stabilitását a 13. táblázatban ismertetettek jellemzik.
13. táblázat
0,1 %-os kobalt-hialuronát-oldat mikrobiológiai stabilitása
Mintavételi időpont Kontroll 0 nap -30’ 24 h 48 h 72 h
Tesztorganizmus
Pseudomonas aeruginosa 1,5*104 6,5*103 0 0 0
Salmoella sp. 2,5* 104 4,8*103 0 0 0
A táblázat adataiból látható, hogy a 0,1 %-os ko- 55 balt-hialuronát-oldat mikrobiológiai stabilitása Pseudomonas aeruginosa baktériummal szemben ugyanolyan jó, mint a 0,1 %-os cink-hialuronát-oldaté.
Megfigyelhető, hogy szinte azonnali hatás mutatkozik az inokulálás után. A 72 órás vizsgálat befejezése 60 után sterilitásvizsgálatot végeztünk, melynek eredmény arra utalt, hogy a kobalt-hialuronát hatása a vizsgált baktériumokra nem sztatikus, hanem baktericidhatás.
Az alább következő példákban szemészeti, illetőleg bőrgyógyászati külsődleges alkalmazásra szolgáló készítmények előállítását ismertetjük.
HU 225 329 Β1
4. példa
Cink-híaluronát-tartalmú szemcsepp
100 ml 0,1%-os cink-hialuronát-tartalmú szemcsepp készítése
A szemcsepp készítéséhez az 1. példában ismertetett nátrium-hialuronátot használtuk.
100 ml-es mérőlombikba 0,10 g purum pulvis minőségű nátrium-hialuronátot mérünk be, és 1,87 ml 0,10 mol/dm3 koncentrációjú cink-klorid-oldatot és 27,50 ml 1,00 mol/dm3 koncentrációjú szorbitoldatot adunk hozzá. Az oldatok kétszer desztillált vízzel készültek. Ezt követően kétszer desztillált vízzel a térfogatot 50 ml-re egészítjük ki. Egy éjszakán át duzzadni hagyjuk, majd rázogatással feloldjuk, kétszer desztillált vízzel jelig töltjük. Az oldatot végül 0,45 pm pórusméretű membránszűrőn leszűrjük.
5. példa
Cink-hialuronát-tartalmú bőrgyógyászati készítmény
100 g 0,2%-os cink-hialuronát-gél készítése
A gél előállításához használt nátrium-hialuronát jellemzői;
Molekulatömeg; 800 000 dalton
Fehérjetartalom: 0,094% 1%
UV-abszorpció: A: 0,320 257 nm 1% A: 0,240 280 nm C-+0
Viszkozitás: η=14,5 dl/g 25 °C
Hialuronsavtartalom: 95,2%
0,2 g nátrium-hialuronátot kb. 30 ml desztillált vízben feloldunk, majd hozzáadunk 5,0 ml 0,1 mólos cink-klorid-oldatot.
1,0 g Carbopol 934-es gélképzőt kb. 40 ml desztillált vízzel elkeverünk, 1-1,5 órán át folytatva a keverést, majd 10-12 órán át duzzasztjuk. Ezt követően hozzáadunk 1,0 ml 20%-os nátrium-hidroxid-oldatot. Az előzőekben elkészített cink-hialuronát-oldatot 0,45 pm pórusméretű szűrőn átszűrjük, állandó keverés mellett a gélhez öntjük, majd desztillált vízzel 100 g-ra kiegészítjük.
A 8-12. táblázatokban ismertetett stabilitásvizsgálatokban szereplő gomba- és penészgombafajták esetén kapott jó eredmények azt mutatják, hogy a cink-hialuronát számottevő gombaellenes hatással is rendelkezik, nem csak baktériumellenes hatással.
8. kísérletsorozat
Hasonlóan nagy jelentőségű a vegyületeknek a Helicobacter pylori baktériummal szembeni hatékonysága is, amely alapján a vegyületek a gyomor- és nyombélfekélyek gyógyításában, illetve kialakulásának megelőzésében, főként pedig a gyógyulás utáni újrafertőződés megakadályozásában alkalmazhatók.
Helicobacter pylori baktériummal szembeni hatékonyság vizsgálata
A vizsgálatokat 1,0 tömeg/tf.%-os cink-hialuronát-oldattal, különböző fekélyes betegek gyomorbiopsziás mintáiból kitenyésztett Helicobacter pylori törzsekkel végeztük. Referenciaanyagként De-Nol (kolloid bizmut-szubcitrát) 1%-os oldatát alkalmaztuk. A vizsgálatokhoz 10% marhavérrel kiegészített agar táptalajt használtunk. Kontrollként a vizsgálandó vegyületeket nem tartalmazó lemezeket használtunk. A beoltott lemezeket 5% oxigént és 7-8% szén-dioxidot tartalmazó gázatmoszférában 37 °C-on, 3-5 napig inkubáltuk. Minimális gátló koncentráció (MIC) értéknek az anyagok azon legkisebb koncentrációját tekintettük, amely a kontroli-lemezeken jól növekedő baktérium szaporodását teljes mértékben gátolta. A cink-hialuronátnak és a De-Nol-nak a vizsgált törzs esetében mért MlC-értékeit a 14. táblázat tartalmazza.
14. táblázat
Törzs jele Cink-hialuronát MIC pg/ml De-Nol MIC pg/ml
822/96 500 500
A táblázat adataiból az látható, hogy a cink-hialuronátnak a Helicobacter pylorival szembeni in vitro hatékonysága összemérhető a terápiában használatos De-Nol hatékonyságával. Ez a tény azért figyelemre méltó, mert a De-Nol bizmuttartalmú készítmény, amelynek mellékhatásai (toxicitási problémák, emellett a betegnek is kellemetlen a szedése) nem elhanyagolhatóak, míg a cink-hialuronát alkalmazása esetén ilyen mellékhatások feltehetően nem várhatók.

Claims (10)

1. Antimikrobiális hatású gyógyászati készítmények, amelyek hatóanyagként cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátumot (komplexet), és önmagában ismert, a gyógyászati készítmények előállításánál szokásosan alkalmazott hordozó- és/vagy segédanyagokat tartalmaznak.
2. Az 1. igénypont szerinti készítmények, amelyek hatóanyagként cink-hialuronát asszociátumot tartalmaznak.
3. Eljárás antimikrobiális hatású, hatóanyagként cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátumot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy a cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátumot a gyógyászati készítmények előállításánál szokásosan alkalmazott hordozó- és/vagy segédanyagokkal összekeverve gyógyászati készítménnyé alakítjuk.
4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hatóanyagként cink-hialuronát asszociátumot alkalmazunk.
5 Cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátumok antimikrobiális hatású gyógyászati készítmények előállítására történő alkalmazása.
HU 225 329 Β1
6. Cink-hialuronát asszociátumok antimikrobiális hatású gyógyászati készítmények előállítására történő alkalmazása.
7. Cink- és kobalt-hialuronát asszociátumok alkalmazása baktérium- és gombafertőzések, valamint a 5 Helicobacter pylori okozta gyomor- és nyombélfekélyek gyógyítására.
8. Cink-hialuronát asszociátumok alkalmazása baktérium- és gombafertőzések, valamint a Helicobacter pylori okozta gyomor- és nyombélfekélyek gyógyítására. 10
9. Eljárás baktérium- vagy gombafertőzések, valamint a Helicobacter pylori okozta gyomor- és nyombélfekélyek kezelésére, azzal jellemezve, hogy a kezelendő személynek a cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátum egy vagy több hatékony dózisát adjuk be önmagé- 15 bán vagy gyógyászati készítmény formájában.
8. A 7. igénypont szerinti eljárás baktérium- vagy gombafertőzések, valamint a Helicobacter pylori okozta gyomor- és nyombélfekélyek kezelésére, azzal jellemezve, hogy a kezelendő személynek a cink-hialuronát asszociátum egy vagy több hatékony dózisát adjuk be önmagában vagy gyógyászati készítmény formájában.
9. Cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátumok alkalmazása a Helicobacter pylori okozta gyomor- és nyombélfekélyek gyógyulása után az újrafertőződés megelőzésére, azzal jellemezve, hogy a kezelendő személynek a cink- vagy kobalt-hialuronát asszociátum egy vagy több hatékony dózisát adjuk be önmagában vagy gyógyászati készítmény formájában.
10. Cink-hialuronát asszociátum alkalmazása a Helicobacter pylori okozta gyomor- és nyombélfekélyek gyógyulása után az újrafertőződés megelőzésére, azzal jellemezve, hogy a kezelendő személynek a cinkhialuronát asszociátum egy vagy több hatékony dózisát adjuk be önmagában vagy gyógyászati készítmény formájában.
HU9602498A 1996-09-12 1996-09-12 Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity HU225329B1 (en)

Priority Applications (16)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9602498A HU225329B1 (en) 1996-09-12 1996-09-12 Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity
JP10513414A JP2001500860A (ja) 1996-09-12 1997-09-11 抗微生物活性を有する医薬組成物
CN97197886A CN1130204C (zh) 1996-09-12 1997-09-11 具有抗微生物活性的药物组合物
AT97943084T ATE254922T1 (de) 1996-09-12 1997-09-11 Pharmazeutische zusammensetzungen mit antimikrobieller wirkung
DK97943084T DK0964687T3 (da) 1996-09-12 1997-09-11 Farmaceutiske sammensætninger med antimikrobiel aktivitet
US09/254,386 US6348190B1 (en) 1996-09-12 1997-09-11 Pharmaceutical compositions with antimicrobial activity
EP97943084A EP0964687B1 (en) 1996-09-12 1997-09-11 Pharmaceutical compositions with antimicrobial activity
PCT/HU1997/000052 WO1998010773A1 (en) 1996-09-12 1997-09-11 Pharmaceutical compositions with antimicrobial activity
ES97943084T ES2212131T3 (es) 1996-09-12 1997-09-11 Composiciones farmaceuticas con actividad antimicrobiana.
PT97943084T PT964687E (pt) 1996-09-12 1997-09-11 Composicoes farmaceuticas com actividade antimicrobiana
AU44691/97A AU4469197A (en) 1996-09-12 1997-09-11 Pharmaceutical compositions with antimicrobial activity
KR10-1999-7002117A KR100489494B1 (ko) 1996-09-12 1997-09-11 항미생물 활성을 갖는 약학 조성물
UA99041975A UA66766C2 (uk) 1996-09-12 1997-09-11 Антимікробна фармацевтична композиція на основі гіалуронатного асоціату цинку або кобальту, спосіб її одержання та спосіб лікування
RU99107569/14A RU2204394C2 (ru) 1996-09-12 1997-09-11 Средство для лечения грибковых инфекций, а также желудочных и дуоденальных язв, вызванных helicobacter pylori
DE69726457T DE69726457T2 (de) 1996-09-12 1997-09-11 Pharmazeutische zusammensetzungen mit antimikrobieller wirkung
JP2009042896A JP2009114206A (ja) 1996-09-12 2009-02-25 抗微生物活性を有する医薬組成物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9602498A HU225329B1 (en) 1996-09-12 1996-09-12 Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity

Publications (4)

Publication Number Publication Date
HU9602498D0 HU9602498D0 (en) 1996-11-28
HUP9602498A2 HUP9602498A2 (hu) 1998-04-28
HUP9602498A3 HUP9602498A3 (en) 1998-05-28
HU225329B1 true HU225329B1 (en) 2006-09-28

Family

ID=89994266

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9602498A HU225329B1 (en) 1996-09-12 1996-09-12 Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity

Country Status (15)

Country Link
US (1) US6348190B1 (hu)
EP (1) EP0964687B1 (hu)
JP (2) JP2001500860A (hu)
KR (1) KR100489494B1 (hu)
CN (1) CN1130204C (hu)
AT (1) ATE254922T1 (hu)
AU (1) AU4469197A (hu)
DE (1) DE69726457T2 (hu)
DK (1) DK0964687T3 (hu)
ES (1) ES2212131T3 (hu)
HU (1) HU225329B1 (hu)
PT (1) PT964687E (hu)
RU (1) RU2204394C2 (hu)
UA (1) UA66766C2 (hu)
WO (1) WO1998010773A1 (hu)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU225991B1 (en) * 1997-04-29 2008-02-28 Richter Gedeon Nyrt Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer
GB9621273D0 (en) 1996-10-11 1996-11-27 Cortecs Ltd Therapeutic method
ITPD980168A1 (it) * 1998-07-06 2000-01-06 Fidia Advanced Biopolymers Srl Composizioni biocompatibili e biodegradabili comprendenti acido ialuronico e suoi derivati per il trattamento delle ulcere dell'appara
CA2359292A1 (en) * 1999-01-19 2000-07-27 Stericon, L.L.C. Hypertonic aqueous solutions of polybasic acid salts
GB0012487D0 (en) * 2000-05-24 2000-07-12 Pfylori Limited Use of metal compounds to treat gastrointestinal infections
FI20011403A (fi) 2001-06-29 2002-12-30 Carbion Oy Menetelmä ja koostumukset vatsan sairauksien hoitoon
US8512761B2 (en) 2006-01-27 2013-08-20 Yale University Fast acting inhibitor of gastric acid secretion
ES2562059T3 (es) * 2006-01-27 2016-03-02 Yale University Inhibidor de acción rápida de la secreción de ácido gástrico
US8557574B2 (en) * 2006-02-10 2013-10-15 Seikagaku Corporation Fungal growth inhibitor
US20070212420A1 (en) * 2006-03-10 2007-09-13 Bausch & Lomb Incorporated Pharmaceutical formulations comprising polyanionic materials and zinc-based preservatives
ITMI20061132A1 (it) * 2006-06-13 2007-12-14 Sinclair Pharmaceuticals Ltd Composizioni topiche antimicrobiche comprendenti lattoferrina, acido ialuronico o suoi sali ed estratti vegetali
US20100021561A1 (en) * 2006-09-21 2010-01-28 Chowhan Masood A Self-preserved aqueous pharmaceutical compositions
TWI394564B (zh) * 2006-09-21 2013-05-01 Alcon Res Ltd 自行保存型水性藥學組成物
CN101522171A (zh) 2006-09-28 2009-09-02 爱尔康研究有限公司 自身防腐的水性药物组合物
TWI544927B (zh) 2008-03-17 2016-08-11 愛爾康研究有限公司 具有低濃度的表面活性劑以促進治療劑之生物可利用性的藥學組成物
DK2420223T3 (da) * 2008-03-17 2017-11-06 Novartis Ag Vandige farmaceutiske sammensætninger med borat-polyol-komplekser
TWI489997B (zh) 2009-06-19 2015-07-01 Alcon Res Ltd 含有硼酸－多元醇錯合物之水性藥學組成物
TWI383796B (zh) * 2009-08-14 2013-02-01 Holy Stone Healthcare Co Ltd Use of hyaluronic acid mixture for the treatment and prevention of peptic ulcer and duodenal ulcer
HUP0900717A3 (en) 2009-11-18 2012-02-28 Richter Gedeon Nyrt Pharmaceutical composition for urological use containing zinc hyaluronate
JP6081173B2 (ja) * 2011-12-12 2017-02-15 ロート製薬株式会社 眼科用水性組成物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4623539A (en) 1983-02-04 1986-11-18 Tunc Deger C Nutrient barrier polysaccharide compositions and method of use
EP0259485A4 (en) * 1986-03-14 1988-07-29 Bio Technology General Corp HEAVY METAL SALTS OF HYALURONIC ACID FOR USE AS AN ANTIMICROBIAL AGENT.
US5472950A (en) * 1989-02-24 1995-12-05 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Compositions containing cobalt hyaluronic acid complex
HU203372B (en) * 1989-02-24 1991-07-29 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing hyaluronic associates and pharmaceutical compositions and cosmetics comprising such active ingredient
JPH0648950A (ja) * 1992-07-30 1994-02-22 Taito Kk 抗潰瘍剤

Also Published As

Publication number Publication date
HU9602498D0 (en) 1996-11-28
HUP9602498A2 (hu) 1998-04-28
DE69726457D1 (de) 2004-01-08
KR20000036098A (ko) 2000-06-26
EP0964687A1 (en) 1999-12-22
PT964687E (pt) 2004-02-27
KR100489494B1 (ko) 2005-05-16
CN1130204C (zh) 2003-12-10
DE69726457T2 (de) 2004-08-26
HUP9602498A3 (en) 1998-05-28
ES2212131T3 (es) 2004-07-16
UA66766C2 (uk) 2004-06-15
ATE254922T1 (de) 2003-12-15
CN1230117A (zh) 1999-09-29
JP2001500860A (ja) 2001-01-23
US6348190B1 (en) 2002-02-19
AU4469197A (en) 1998-04-02
RU2204394C2 (ru) 2003-05-20
EP0964687B1 (en) 2003-11-26
JP2009114206A (ja) 2009-05-28
DK0964687T3 (da) 2004-03-08
WO1998010773A1 (en) 1998-03-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU225329B1 (en) Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity
KR101155884B1 (ko) 하이드로카르빌 설톤 화합물에 의해 화학적으로 변형된폴리아미노사카라이드
JP2613605B2 (ja) 抗菌物質として有効なヒアルロン酸の重金属塩
JPH08510454A (ja) 抗感染症薬剤
EP3735218B1 (en) Coordination complexes having microbial activity and incorporable in hyaluronic acid compositions
WO2017215610A1 (zh) 一种高效安全的壳聚糖衍生物基消毒液及其制备方法
EP1128809B1 (en) Aqueous ophthalmic formulations comprising chitosan
CN111991417A (zh) 一种具有生理响应性的次氯酸凝胶及其在皮肤创面中的应用
JP3050898B2 (ja) 水性医薬製剤
US8568711B2 (en) Antimicrobial compositions
US6458774B1 (en) Compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing same
JP3054758B2 (ja) 外傷用組成物
RU2810573C2 (ru) Биоактивный гидрогель на основе хитозана высокой молекулярной массы и способ его экстемпорального получения
US20230240302A1 (en) Antimicrobial silver coordination complexes
RU2739747C1 (ru) Фармацевтическое средство для лечения артрологических заболеваний
RU2171107C1 (ru) Глазные капли
CN116850351A (zh) 一种具有较强抗菌作用的粘弹剂
RU2085187C1 (ru) Гель для ухода за кожей и лечения ее заболеваний и композиция для его получения
CN114569473A (zh) 一种环保型的免洗抑菌凝胶及其制备方法
EA041409B1 (ru) Фармацевтическое средство для лечения артрологических заболеваний
Crescenzi et al. Note: Biological activity of C6-oxidized hyaluronic acid: Antibacterial properties of the Zn (II) salt

Legal Events

Date Code Title Description
HC9A Change of name, address

Owner name: RICHTER GEDEON NYRT., HU

Free format text: FORMER OWNER(S): RICHTER GEDEON VEGYESZETI GYAR RT., HU