HU223691B1

HU223691B1 - Szintetikus poliszacharidok, eljárás előállításukra és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények

Info

Publication number: HU223691B1
Application number: HU9902287A
Authority: HU
Inventors: Pierre Alexandre Driguez; Philippe Duchaussoy; Peter Diederik Jan Grootenhuis; Jean-Marc Herbert; Maurice Petitou; Constant Adriaan Anton Van Boeckel
Original assignee: Sanofi-Synthelabo
Priority date: 1996-07-19
Filing date: 1997-07-18
Publication date: 2004-12-28
Also published as: WO1998003554A1; NO990215L; IS1968B; IS4945A; ATE224917T1; NZ333721A; DE69715866D1; CN1228785A; YU1999A; CA2261597A1; US6534481B1; ZA976340B; AU726679B2; ID20604A; TR199900114T2; UA61921C2; SK5399A3; EE03929B1; HUP9902287A1; CN1200003C

Abstract

A találmány tárgya szintetikus poliszacharidok, amelyek tartalmaznakegy kapcsolódomént a III antitrombinhoz, és amelyek olyan ötmonoszacharidot tartalmazó láncból állnak, amelyek összesen kétkarbonsavcsoportot és legalább négy szulfátcsoportot tartalmaznak,ahol a domén a nem redukáló végén közvetlenül kapcsolódik egykapcsolódoménon keresztül a trombinhoz, és 10–25monoszacharidegységből álló láncot tartalmaz, a monoszacharid olyanhexóz, pentóz vagy dezoxicukor, amelynek valamennyi hidroxilcsoportjaegymástól függetlenül 1– 6 szénatomos alkilcsoporttal éteresítve van,vagy szulfát formában észteresítve van, és sóik, különösengyógyszerészetileg alkalmazható sóik. A vegyületek koagulációsrendellenességek kezelésére használhatók. A találmány a vegyületekelőállítására szolgáló eljárásra és a vegyületeket hatóanyagkénttartalmazó gyógyszerkészítményekre is vonatkozik. ŕ

Description

KIVONAT

A találmány tárgya szintetikus poliszacharidok, amelyek tartalmaznak egy kapcsolódomént a III antitrombinhoz, és amelyek olyan öt monoszacharidot tartalmazó láncból állnak, amelyek összesen két karbonsavcsoportot és legalább négy szulfátcsoportot tartalmaznak, ahol a dómén a nem redukáló végén közvetlenül kapcsolódik egy kapcsolódoménon keresztül a trombinhoz, és 10-25 monoszacharidegységből álló láncot tartalmaz, a monoszacharid olyan hexóz, pentóz vagy dezoxicukor, amelynek valamennyi hidroxilcsoportja egymástól függetlenül 1-6 szénatomos alkilcsoporttal éteresítve van, vagy szulfát formában észteresítve van, és sóik, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóik.

A vegyületek koagulációs rendellenességek kezelésére használhatók.

A találmány a vegyületek előállítására szolgáló eljárásra és a vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítményekre is vonatkozik.

A leírás terjedelme 82 oldal (ezen belül 38 lap ábra)

HU 223 691 B1

HU 223 691 Β1

A találmány tárgya szintetikus poliszacharidok, eljárás előállításukra és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények. A találmány olyan új, szintetikus poliszacharidokra vonatkozik, amelyek a heparin koagulációt gátló és trombózisellenes farmakológiai tulajdonságaival rendelkeznek.

A heparin a glükóz-amino-glikánok (GAG-k) családjába tartozik, amelyek heterogén természetes szulfátéit poliszacharidok.

A heparinkészítmények különböző lánchosszúságú keverékek, a láncok 10-100 vagy annál több monoszacharidegységet tartalmaznak. A méret heterogenitásához a szerkezeti heterogenitás is hozzáadódik. Különböznek az alkotó monoszacharidok is, de különböznek az ezeken található szubsztituensek is (lásd L. Rodén: The Biochemistry of Glycoproteins and Glycosaminoglycans”, kiadó Lennarz W. J., Plenum Press, New York ann London, 267-371, 1980).

Általában minden természetes GAG család többféle farmakológiai hatással is rendelkezik. Ezek valamennyien megtalálhatók az olyan készítményekben, amelyeket természetes termékekből lehet előállítani, így például a heparinok és a heparán-szulfátok trombózisellenes hatással rendelkeznek, ami a koaguláció több faktorára gyakorolt egyidejű hatással kapcsolatos.

A heparin két olyan enzim gátlását katalizálja, amelyek a vér koaguláció folyamatában játszanak szerepet, nevezetesen ez az Xa-faktor és a Ila-faktor (vagy trombin). Ez a katalízis pontosabban a III antitrombinon (AT III) keresztül megy végbe. Az alacsony molekulatömegű heparinkészítmények (HBPM) 4-30 monoszacharidból álló láncot tartalmaznak, és jellemzően szelektívebben hatnak az Xa-faktorra, mint a trombinra. Bizonyos szintetikus oligoszacharidok, például amelyek az EP 84 999 számú szabadalmi leírásból ismertek, szelektíven gátolták a III antitrombinon keresztül az Xa-faktort, anélkül, hogy a trombinra is hatást gyakorolnának.

Ismert, hogy az Xa-faktor gátlásához az szükséges, hogy a heparin az AT III-hoz rögződjék az antitrombin kapcsolódási doménon (DLA) keresztül, és hogy a Ilafaktor (trombin) gátlásához szükséges egy kapcsolódás az AT III-hoz, a DLA-n keresztül, továbbá a trombinhoz egy kevésbé definiált kapcsolódási doménon (DLT) keresztül.

A heparin DLA doménjának megfelelő szintetikus oligoszacharidok ismertek, ezeknek a vénás trombózisban van trombózisellenes hatásuk. Ilyen vegyületeket ismertetnek az EP 529 715, az EP 621 282 számú európai és a 2 040 905 számú kanadai szabadalmi leírásban.

Az ilyen oligoszacharidok hatékonysága az artériás trombózis megelőzésében azonban azért nem kielégítő, mert ezek nem képesek a trombin gátlására.

Az olyan heparin típusú glükóz-amino-glikánok szintézise, amelyek képesek a trombingátlásra az AT III aktivátoron keresztül, igen nagy nehézségeket okoz, és tulajdonképpen ezt ez ideig még nem sikerült megvalósítani.

A trombin és az Xa-faktor inhibitor termékek hatásának eléréséhez már javasolták két kisméretű oligoszacharid (egy DLA és egy DLT) összekapcsolását egy olyan egységen keresztül („spacer”), amely nem játszik szerepet a biológiai hatásban.

A találmány azon a felismerésen alapul, hogy új, szintetikus poliszacharidok állíthatók elő viszonylag egyszerű módon, és ezek biológiailag hatásosak. Közelebbről a hatásuk koagulációgátló és trombózisellenes hatás. Ezenkívül abból a tényből adódóan, hogy ezeket a poliszacharidokat szintézis útján állítjuk elő, ezek szerkezete szelektíven módosítható, például eltávolíthatók az olyan nemkívánatos szulfátszubsztituensek, amelyek bizonyos fehérjékkel történő kölcsönhatásban szerepet játszanak. így tehát olyan poliszacharidokat tudunk előállítani, amelyek hatékony trombózisellenes és koagulációt gátló szerek, és amelyek ezenkívül in vivő mentesek bizonyos fehérjék, például a 4-es vérlemezkefaktor (FP4) hatásától, amelyek a heparin hatását, főként a trombinra gyakorolt hatását semlegesítik.

Meglepő módon tehát azt találtuk, hogy szulfátéit és alkilezett polimer szacharidok a glucidvázon lévő alkilcsoportok és szulfátcsoportok elhelyezkedésétől függően hatékony trombózisellenes és koagulációt gátló szerek lehetnek. Általánosabban azt találtuk, hogy poliszacharidszekvenciák megvalósításával pontosan irányíthatók a GA típusú hatások, és így igen hatékony szerek állíthatók elő, amelyek a heparin tulajdonságaival rendelkeznek. A találmány tárgya tehát egyrészt új szintetikus poliszacharidok, amelyek tartalmaznak egy kapcsolódomént a III antitrombinhoz, és amelyek olyan, öt monoszacharidot tartalmazó láncból állnak, amelyek összesen két karbonsavcsoportot és legalább négy szulfátcsoportot tartalmaznak, ahol a dómén a nem redukáló végén közvetlenül kapcsolódik egy kapcsolódoménon keresztül a trombinhoz, és 10-25 monoszacharidegységből álló láncot tartalmaz, a monoszacharid olyan hexóz, pentóz vagy dezoxicukor, amelynek valamennyi hidroxilcsoportja egymástól függetlenül 1 -6 szénatomos alkilcsoporttal éteresítve van, vagy szulfát formában észteresítve van, és sóik, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóik. Előnyösen a találmány olyan fent definiált poliszacharidra vonatkozik, amelynek valamennyi hidroxilcsoportja metilezve van, vagy szulfát formában van észteresítve. Előnyösek az ilyen poliszacharidok sói, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sói is.

A találmány tárgya különösen (I) általános képletű poliszacharidok, ahol a hullámos vonal olyan kötést jelent, amely vagy a piranózgyűrű síkja fölött, vagy az alatt helyezkedik el, a (Po) általános képletű csoport egy Po poliszacharidot jelent, amely n azonos vagy különböző monoszacharidegységet tartalmaz, és amely az anomer szénatomján keresztül kapcsolódik Pe-hez, (Mo) általános képletű csoport sematikusan ábrázol piranózszerkezetű monoszacharidegységet, amely lehet hexóz, pentóz vagy a megfelelő dezoxicukrok, ahol ez az egység anomer szénatomján keresztül egy másik monoszacharidegységhez kapcsolódik, és az egység hidroxicsoportjai azonos vagy különböző X csoportokkal helyettesítve vannak,

HU 223 691 Bl

X jelentése 1 -6 szénatomos alkil- vagy szulfocsoport, n értéke 10 és 25 közötti egész szám,

Pe jelentése (Pe) általános képletű pentaszacharid, ahol R[ jelentése 1 -6 szénatomos alkilcsoport vagy szulfocsoport,

R_ta jelentése R| csoport vagy a kapcsolódó oxigénatommal és az azonos gyűrűn lévő karboxilcsoportot hordozó szénatommal együtt C-CH₂-O csoportot alkot,

R jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport,

W jelentése oxigénatom vagy metiléncsoport.

A találmány ezeknek a vegyületeknek a sóira, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóira is vonatkozik.

Általánosan megjegyezzük, hogy a leírásban a hullámvonal olyan vegyértékkötést jelöl, amely vagy a piranózgyűrű síkja fölött, vagy az alatt helyezkedik el.

A Po-ban lévő monoszacharidok lehetnek azonosak vagy egymástól különbözőek, az interglükozidos kötések pedig a vagy β típusúak.

Ezek a monoszacharidok előnyösen a következők : a hexózok közül D vagy L allóz, altróz, glükóz, mannóz, galóz, időz, galaktóz, talóz (amikor h=2) vagy a pentózok közül D vagy L ribóz, arabinóz, xilóz, lixóz (amikor h = 2). Más monoszacharidokat, például dezoxicukrokat is használhatunk (h= 1) és vagy -CH₂OX=CH₃.

Amikor a Pe pentaszacharidokban a W egység jelentése oxigénatom, és Rja jelentése megegyezik R, jelentésével, akkor ezek a pentaszacharidok ismert vegyületek, például az EP 300 099, az EP 529 715, az EP 612 282 vagy az EP 649 854 számú szabadalmi leírásból vagy a szakirodalomból, ezeket szintonokból lehet előállítani, amelyek maguk is ismertek a szakirodalomból [lásd C. Van Boeckel, M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Eng., 32, 1671-1690, (1993)].

Amikor a Pe pentaszacharidokban R, a jelentése R, jelentésétől eltérő, és/vagy W jelentése szénatomos, az ilyen pentaszacharidokat új szintonokból állítjuk elő, amelyek a találmány további tárgyát alkotják. Amikor a Pe pentaszacharidokban az L-iduronsav típusú egység helyett olyan egység van, amelynek konformációját egy híd rögzíti, ezeket a pentaszacharidokat szintén új szintonokból állítjuk elő, amelyek ugyancsak a találmány tárgyát képezik.

A találmány tárgya tehát továbbá az (I) általános képletű vegyületek előállításához hasznos új intermedierek.

A Po poliszacharidrész 10-25 alkilezett és di- vagy triszulfatált monoszacharidegységből állhat.

A Po poliszacharidrész 10-25 alkilezett és monovagy diszulfatált monoszacharidegységből állhat.

A Po poliszacharidrész 10-25 nem töltött és/vagy részlegesen töltött és/vagy teljesen töltött alkilezett monoszacharidegységből állhat. A töltött és nem töltött egységek a lánc teljes hosszában el lehetnek osztva, de ezzel ellentétben a töltött vagy nem töltött szacharid domének formájában csoportokban is szerepelhet.

A kötések a következők lehetnek: 1,2; 1,2; 1,4; 1,5; 1,6 és lehetnek a vagy β típusúak.

A leírásban az L-iduronsavat >C₄ konformációban, a D-glükuronsavat a ⁴Ci konformációban ábrázoljuk, de meg kell jegyezni, hogy általában a monoszacharidegységek konformációja oldatban ingadozik.

így például az L-iduronsav lehet 'C₄,²S₀ vagy ⁴Cú konformációjú.

A találmány szerinti vegyületek közül előnyösek az (I.A) általános képletű vegyületek, ahol (Po’) jelentése egy bizonyos Po poliszacharidcsalád, amely anomer szénatomján keresztül Pe-hez kapcsolódik, ahol Pe jelentése az (I) általános képletnél megadott, (Mo) jelentése az (I) általános képletnél megadott,

- az OX csoportok jelentése ugyanaz mint az (I) általános képletben, és egy monoszacharid esetében lehetnek azonosak vagy különbözőek,

- a [ ]_m-ben lévő monoszacharidok m-szer ismétlődő diszacharidot alkotnak, a [ ]_t-ben lévő monoszacharidok t-szer ismétlődő diszacharidot alkotnak,

- m értéke 1 és 8 közötti szám, t értéke 0 és 5 közötti szám és p értéke 0 és 1 közötti szám, azzal a megkötéssel, hogy 5 <m+t<12.

Előnyösek az említett vegyületek sói, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sói is.

Előnyös vegyületek az (1.1) általános képletű anion sói, ahol t értéke 5, 6 vagy 7, és a kation egyértékű gyógyszerészetileg alkalmazható kation. Előnyösek a megfelelő savak is.

Ugyancsak előnyösek a (1.2) általános képletű anion sói, ahol t értéke 5, 6 vagy 7, és a kation egyértékű, gyógyszerészetileg alkalmazható kation. Előnyösek a megfelelő savak is.

Különösen előnyösek az (1.3) általános képletű anion sói, ahol m értéke 1,2 vagy 3, t értéke 2,3,4 vagy 5, és a kation egyértékű gyógyszerészetileg alkalmazható kation. Különösen előnyösek a megfelelő savak is.

Ugyancsak előnyös találmány szerinti vegyületek a (II.A) általános képletűek, ahol (Po”) jelentése egy bizonyos Po poliszacharidcsalád, amely anomer szénatomján keresztül kapcsolódik Pe-hez, ahol Pe jelentése, mint az (I) általános képletben, (Mo) jelentése ugyanaz, mint az (I) általános képletben,

- az OX csoportok jelentése ugyanaz, mint az (I) általános képletben, és azonos monoszacharidon belül lehetnek azonosak vagy különböző jelentésűek,

- a [ ]_m-ben lévő monoszacharidok m’-ször ismétlődnek, a [ ],-ben lévő monoszacharidok f-szőr ismétlődnek, a [ ]_p’-ben lévő monoszacharidok p’-ször ismétlődnek.

m’ értéke 1 és 5 közötti szám, f értéke 0 és 24 közötti szám, p’ értéke 0 és 24 közötti szám, azzal a megkötéssel, hogy 10<m’+f+p’<25.

Előnyösek a fenti vegyületek sói, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sói is.

A találmány szerinti sók közül előnyösek azok, amelyekben a kation alkálifémkation, különösen előnyösek azok, ahol a kation Na⁺ vagy K⁺.

A találmány szerint különösen előnyösek a következő poliszacharidok:

HU 223 691 Bl

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l+4)-0-(3-0-metil-2,6-di-0szulfo-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₄-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-diO-metil-3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 +4)-0-(2,3,6tri-0-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l+4)-0-(2,3-di-0metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6-tri-0szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(3-0-metil-2,6-di-0-szulfo-p-Dglükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-p-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₅-O-(2,3-di-O-metil6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3-di-Ometil-3-D-glükopiranozil-uronsav)-(l+4)-O-(2,3,6-triO-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3-di-0-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-(l+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-(l—>4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6di-O-szulfo-3-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)]₆-O-(2,3-diO-metil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O(2,3-di-O-metil-3-3-D-glükopiranozil-uronsav)(1—>4)-0-(2,3,6-tri-0-szulfo-a-D-glükopiranozil)(1 -+4)-0-(2,3-di-O-metil-cx-L-jód-piranozil-uronsav)(1 -+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(2,3-di-O-metil-4,6-di-O-szulfo-a-Dglükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-(l+4)]i,-O-(2,3-di-O-metil-3-Dglükopiranozil-uronsav)-( 1+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-di-O-metil-a-Ljód-piranozil-uronsav)-(l+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-Dglükopiranozid-nátriumsó

- metil-O-(2,3-di-O-metil-4,6-di-O-szulfo-a-Dglükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 +4)], ₃-O-(2,3-di-O-metil-3-Dglükopiranozil-uronsav-( 1+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-di-O-metil-a-Ljód-piranozil-uronsav)-( 1 +4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-Dglükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(2,3-di-O-metil-4,6-di-O-szulfo-a-Dglükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 +4)], ₅-O-(2,3-di-O-metil-3-Dglükopiranozil-uronsav)-(l+4)-O-(2,3,6-tri-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-di-O-metil-a-Ljód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-Dglükopiranozid-nátriumsó

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-(l+4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6di-O-szulfo-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₂-[O-(2,3,6tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3,6-tri O-metil-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₂-O-(2,3-di-Ometil-6-0-szulfo-oc-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3di-O-metil-3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 +4)-O(2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-(2,3di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6tri-O-szulfo-a-O-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-(l+4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6di-O-szulfo-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₂-[O-(2,3,6tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3,6-tri0-metil-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₃-O-(2,3-di-Ometil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3di-O-metil-3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 +4)-0(2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l+4)-(2,3di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-3-D-glükopiranozil)-(l+4)-[0-(2,3,6-tri-0-metil-a-O-glükopiranozil)-( 1+4)-0-(2,3, ő-tri-O-metil-pD-glükopiranozil)-( 1 +4)]₄-O-(2,3-di-O-metil-6-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-di-O-metil3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1+4)-0-(2,3,6-tri-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-(2,3-di-O-metil-aL-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-0-(3-0-metil-2,4,6-tri-0-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l+4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-aD-glükopiranozil)-(l+4)]₃-O-(2,3-di-O-metil-6-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-di-O-metil3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 +4)-0-(2,3,6-tri-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-(2,3-di-O-metil-aL-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-( 1 +4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-3-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₄-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3-di-O-metil-3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 +4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-(l+4)-(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-3D-glükopiranozil)-(l+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-( 1 +4)-0-(2,3,ó-tri-O-metil-p-D-glükopiranozil)-( 1 +4)]₅-0-2,3-(di-0-metil-6-0-szulfo-aD-glükopiranozil)-( 1 +4)-O-(2,3-di-O-metil-3-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-( 1 +4)-(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó.

HU 223 691 Bl

A találmány tárgya továbbá eljárás (I) általános képletű vegyűletek előállítására, azzal jellemezve, hogy első lépésben egy kívánt (I) általános képletű poliszacharid teljesen védett prekurzorát állítjuk elő, amely a Pe dómén olyan védett prekurzorát tartalmazza, amely a nem redukáló végén egy Po-szulfatált poliszacharid védett prekurzorával meg van hosszabbítva, majd második lépésben a negatív töltésű csoportokat bevisszük és/vagy szabaddá tesszük.

Az 1. reakcióvázlaton olyan Pe pentaszacharidszerkezetet mutatunk be, ahol W jelentése oxigénatom vagy szénatom (a „DEFGH” betűket a szövegben az adott monoszacharidok jelölésére használjuk).

Egy első élj árás változatnál felhasználhatjuk a pentaszacharid EFGH tetraszacharidrészének teljesen védett prekurzorát, ezután hozzáadunk egy Po poliszacharidot, amely a redukáló terminális végén tartalmazza a Pe-ből hiányzó D egységet. Egy kapcsolás után a DLA-t teljes egészében megkapjuk, és az így restaurálva lett.

Úgy is eljárhatunk, hogy a pentaszacharid GH diszacharidrészének teljesen védett prekurzorát alkalmazzuk. Ezután adjuk hozzá a DLT prekurzorát, egy Po poliszacharidot, amely a redukáló terminális végén tartalmazza a Pe-ből hiányzó DEF egységet, így kapcsolás után megkapjuk a DLA-t teljes egészében, és az így restaurálva lett.

Az ilyen Pe prekurzorok szintézisét, amint azt már említettük, a szakirodalomból ismert szintonokból vagy a találmány körébe tartozó szintonokból végezzük. A Po prekurzor poliszacharidrészének szintézisét a szakember számára jól ismert reakciókkal végezzük az oligoszacharidok szintéziséhez alkalmazott eljárásokkal [lásd G. J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996)] vagy oligoszacharidból, amikor egy, a glükozidos kötést adó oligoszacharidot egy a glikozidos kötést fogadó oligoszachariddal kapcsolunk össze, és így egy olyan másik oligoszacharidot állítunk elő, amelynek mérete a két reakcióban részt vevő molekula méretének összege.

Ezt a lépést addig ismételjük, míg megkapjuk a kívánt (1) általános képletű vegyületet. A kívánt végtermék minősége és töltése határozza meg a szintézis egyes lépéseiben felhasznált kémiai egységek minőségét a szakember által jól ismert szabályok szerint.

A találmány szerint a Po prekurzorok előállítására az egyik előnyös eljárást a 2. reakcióvázlaton mutatjuk be. A 2. reakcióvázlaton a DLT védett prekurzorának előállítását ábrázoljuk.

A leírásban átmenetinek jelöljük az olyan szubsztituenst, amelyet csak csekély számú lépés során tartunk meg, féltartósnak a több lépésen keresztül megtartott szubsztituenst, és tartósnak a szintézis végéig megtartott szubsztituenst nevezzük. A tartós szubsztituenseket az utolsó lépés során távolítjuk el. Bizonyos tartós szubsztituensek a végső molekula részét is alkothatják.

A 2. reakcióvázlaton (a) glikozidos kötést leadó monoszacharidot jelöl, Z jelentése a hidroxilcsoport átmeneti védőcsoportja, Y jelentése az anomer szénatom aktiválója, Tn amely lehet azonos vagy különböző, az összes többi hidroxilcsoport átmeneti, féltartós vagy tartós szubsztituensét jelöli.

A (b) vegyület, amely tartalmaz egy szubsztituálatlan hidroxilcsoportot, olyan glikozidkötést kapó monoszacharidot jelent, ahol a Tn, amely lehet azonos vagy különböző, a hidroxilcsoprtok átmeneti, féltartós vagy tartós szubsztituenseit jelenti. T[ jelentése az anomer helyzetben lévő átmeneti, féltartós vagy tartós védőcsoport. Ezt akkor távolítjuk el, amikor aktiválni kívánjuk az anomer szénatomot.

A találmány szerinti vegyűletek előállítása céljából az (a) glikozidkötés donor, és a (b) glikozidkötés akceptor reagál együtt, és így a (c) diszacharid keletkezik.

Az így kapott (c) diszacharidot a T, eltávolításával és az X bevitelével (d) glikozidkötés donor diszachariddá és/vagy a Z eltávolításával (e) glikozidkötés akceptorrá alakítjuk át.

Ezután a (d) glikozidkötés donor és az (e) glikozidkötés akceptor egymással reagálnak, és így az (f) tetraszacharid keletkezik, ahol t értéke 1.

Ha ezt a reakciósorozatot ismételjük, akkor olyan (f) oligo- vagy poliszacharidot kapunk, ahol t értéke nagyobb mint 1.

A 2. reakcióvázlaton bemutatott eljárás alkalmazásával különféle teljesen védett oligo- vagy poliszacharidokat is előállíthatunk, például a (g)-t, ahol a [ ]_m és [ ]_t oligoszacharidok a találmány szerinti vegyűletek különböző töltésekkel ellátott doménjeinek teljesen védett prekurzorai.

Az eljárás következő lépéseiben az (f) és (g) vegyületeket glikozidos kötés donorrá alakítjuk, és ezeket a Pe teljesen védett prekurzorainak nem redukáló terminális egységével kapcsoljuk össze.

Amint már korábban említettük, a (g) glikozidos kötés donor poliszacharid nem redukáló terminális egységének oligoszacharidja a Pe részét alkothatja abban az esetben, amikor (g) egy olyan teljesen védett oligoszacharid nem redukáló terminális egységéhez van kapcsolva, amely a Pe szerkezet többi részének a prekurzora.

A találmány szerinti vegyületeket a teljesen védett poliszacharid prekurzoraikból állítjuk elő a következő reakciósorozattal:

- az alkoholcsoportokat O-szulfocsoporttá kell alakítani, és a karbonsavakról a védőcsoportot el kell távolítani úgy, hogy a váz kialakítása során a védelmükre használt Tn-t eltávolítjuk, majd bevisszük a szulfocsoportokat.

A találmány szerinti vegyületeket természetesen más, az oligoszacharidok előállítására ismert módszerek felhasználásával is előállíthatjuk.

A fent ismertetett eljárás a találmány szerinti előnyös eljárás. Azonban az (I) általános képletű vegyületeket a cukorkémiából jól ismert egyéb eljárásokkal is elő lehet állítani, ilyen eljárásokat ismertetnek például a következő irodalmi helyeken: Monosaccharides, Their chemistry and their roles in natural products. P. M. Collins és R. J. Ferrier, J. Wilex & Sons (1995) és G. J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996).

A Pe pentaszacharid azon részének prekurzorát, amikor W jelentése oxigénatom, és R_ta jelentése megegyezik R[ jelentésével, az oligoszacharidok előállítására alkalmas eljárásokkal különösen az EP 84 999,

HU 223 691 Β1

EP 301 618, és EP 529 715 számú szabadalmi leírásokban és az EP 9 304 769 és az EP 94 202 470 számú szabadalmi bejelentésben ismertetett eljárásokkal állítjuk elő. Amikor a teljes védelmet valósítjuk meg, akkor megfelelő védőcsoportok alkalmazásával lehetséges a nem redukáló (D) terminális egység 4-es helyzetében egy szabad hidroxilcsoport kialakítása. A Pe teljesen védett prekurzorát ilyenkor erre a helyre kapcsoljuk, az oligoszacharidok előállítására ismert eljárásokkal.

Az olyan Pe pentaszacharidot, ahol W jelentése szénatom, és Rja jelentése megegyezik R, jelentésével, amely a (II) általános képlettel jellemezhető, ahol R és R, jelentése ugyanaz, mint az (I) általános képletben, (II. 1) általános képletű szintonból állítjuk elő - a képletben T,, T„ jelentése azonosan vagy egymástól eltérően átmeneti, féltartós vagy tartós szubsztituens, Z jelentése a hidroxilcsoport védőcsoportja, amelyet magát gyökös reakcióval állítjuk elő egy szabadgyök-képző monoszacharid és egy kettős kötést tartalmazó monoszacharid reakciójával, majd a kapott C-diszacharidot (II.l) általános képletű szintonná alakítjuk korábban már leírt klasszikus eljárással (lásd C. Van Boechel, M. Petitou).

A (II) általános képletű vegyületek előállításához különösen előnyösen használhatjuk a (II.l) általános képletű szintont, amelyet 90. számú vegyületnek jelölünk.

Ezt a szintont a későbbiekben a 22. reakcióvázlaton bemutatott eljárással állítjuk elő.

Az olyan Pe pentaszacharidot, amelyben van egy R]a szubsztituens, amely egy (III) általános képletű rögzített konfigurációjú L-iduronsav-egységet alkot, ahol R és R) jelentése ugyanaz, mint az (I) általános képletűben, W jelentése oxigénatom, (III. 1) általános képletű szintonból állítjuk elő, a képletben T, és T_n jelentése egymástól függetlenül átmeneti, féltartós vagy tartós szubsztituens, Z jelentése hidroxilcsoport védőcsoport, ezt a vegyületet magát a szakirodalomból ismert eljárásokkal állítjuk elő [lásd Μ. K. Gurjar és munkatársai, Tetrahedron Letters, 36, 11, 1937-1940, 1933-1936 (1995) és 35, 14, 2241-2244 (1994)].

A (III) általános képletű vegyületek előállításához különösen előnyösen használjuk a (III. 1) általános képletű szintont. Ezt a szintont a későbbi 34. reakcióvázlaton bemutatott eljárással állítjuk elő.

A (II.l) és (III. 1) általános képletű intermedier új intermedier, amely rendkívül hasznos a találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek előállításánál. A Pe pentaszacharidokat tehát a (II.l) vagy (III. 1) képletű diszacharidszintonokból állítjuk elő a fentebb már idézett irodalmi helyen (C.A.A. Van Boeckel és M. Petitou) bemutatott eljárással. A fentebb említett féltartós csoportokon olyan csoportokat értünk, amelyeket elsősorban a glikozilező reakciók után távolítunk el, amikor már a glicidváz tartalmazza a kívánt számú egységet. Az eltávolítás során egyéb jelen lévő csoportokat nem távolítunk el és nem módosítunk, így lehetővé tesszük az ezek által elfoglalt helyzetekbe a kívánt reakcióképes csoportok bevitelét. A tartós csoportok olyan csoportok, amelyek a hidroxilcsoportok védelmét képesek a féltartós csoportok helyett történő reakcióképes csoportok bevitele alatt is biztosítani. Ezeket a csoportokat azok közül választjuk, amelyek kompatibilisek a reakcióképes csoportokkal, amelyeket a féltartós csoportok eltávolítása után viszünk be. Többek között ezek olyan csoportok, amelyek inertek a reakcióképes csoportok bevitelére végzett reakciókkal szemben, és amelyek eltávolíthatók anélkül, hogy a bevitt reakcióképes csoportokat befolyásolnák.

A találmány szerint a tartós csoportok előnyösen 1-6 szénatomos alkilcsoportok.

A féltartós és/vagy átmeneti csoportok közül példaként a benzil és acetil, levulinil, parametoxi-benzil és hasonló csoportokat említhetjük.

A célvegyület uroncsoportjainak 3-helyzetében lévő szubsztituensek jelen lehetnek már a kiindulási színtanokban, ugyanez érvényes az R, szubsztituensre.

Az (I) általános képletű vegyületek előállítására szolgáló eljárásban használt védőcsoportok a cukorkémiában szokásosan használt védőcsoportok, ilyenek ismertetése megtalálható például a Protective Groups in Organic Synthesis, TW Greene, John Wiley & Sons, New York (1981) irodalmi helyen. A védőcsoportokat előnyösen az acetil-, halogén-metil-, benzoil-, levulinil-, benzil-, szubsztituált benzil-, adott esetben szubsztituált tritil-, tetrahidro-piranil-, allil-, pentanil-, tercbutil-dimetil-szilil (tBDMS) vagy trimetil-szilil-etilcsoportok közül választjuk.

Az aktiváló csoportok a cukorkémiában szokásosan használt csoportok, ilyenek találhatók például a G. J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996) irodalmi helyen. Az ilyen aktiváló csoportok közül példaként az imidát-, tiokozid-, pentenil-glikozid-, xantát-, foszfitvagy halogenidcsoportokat említjük.

A fentiekben ismertetett eljárással a találmány szerinti vegyületek só formában állíthatók elő. A megfelelő savak előállításához a találmány szerinti só alakú vegyületeket sav formájú kationcserélő gyantára visszük.

A sav alakú találmány szerinti vegyületeket ezután bázissal semlegesíthetjük, és így valamely kívánt sót állíthatunk elő.

Az (I) általános képletű vegyületek előállítására bármely szervetlen vagy szerves bázist felhasználhatunk, amelyek az (I) általános képletű vegyületekkel gyógyszerészetileg alkalmazható sókat alkotnak.

Bázisként előnyösen nátrium-, kálium-, kalciumvagy magnézium-hidroxidot használunk. Az (I) általános képletű vegyületek nátrium- és kalciumsói az előnyös sók.

Az eljárás (a) lépésében a felhasznált védőcsoportok a cukorkémiában szokásosan használt védőcsoportok, amilyeneket például az EP 84 999 számú szabadalmi leírás vagy a Protective Groups in Organic Synthesis, TW Green, J. Wiley & Sons (1995) ismertet.

Az így előállított (I) általános képletű vegyületek adott esetben sóvá alakíthatók.

A fenti (I) általános képletű vegyületek azokat a vegyületeket is magukban foglalják, ahol egy vagy több hidrogén- vagy szénatom helyett a radioaktív izotópja, például a trícium vagy a szén-14 szerepel. Az ilyen jel6

HU 223 691 Bl zett vegyületek elsősorban a kutatásban a metabolizmus kutatásában vagy farmakokinetikai kutatásban, továbbá biokémiai vizsgálatoknál ligandumként használhatók,

A találmány szerinti vegyületeket biokémiai és farmakológiai vizsgálatoknak vetettük alá, és így kimutattuk, hogy a vegyületek igen értékes tulajdonságokkal rendelkeznek. Azok a találmány szerinti vegyületek, amelyek szelektíven kapcsolódnak a III AT-hez, a heparinnal azonos vagy annál nagyobb affinitással a heparin antikoaguláns és trombózisellenes hatásával rendelkeznek.

Az (I) általános képletű vegyületek globális trombózisellenes hatását intravénásán vagy szubkután vizsgáltuk patkánynál a pangásos vénára vonatkozó kísérletben, amelyet tromboplasztinnal indukáltunk a [J. Reyers és munkatársai, Γ Thrombosis Research, 18, 669-674 (1980)] irodalmi helyen ismertetett eljárás szerint, valamint egy artériás trombózissal kapcsolatos kísérletben, amelyet a fejverőér és a nyakér közé beültetett akadály képez patkányoknál [lásd Umetsu és munkatársai, Thromb. Haemost., 39, 74-83 (1978)]. Ebben a két kísérletben a találmány szerinti vegyületek DE₅₀-értéke legalább ugyanolyan nagyságrendű vagy kisebb, mint az ismert szintetikus heparinoidoké (a DE₅₀ 5 és 500 pg/kg közötti). A találmány szerinti vegyületek tehát különösen figyelemreméltó specifikus hatással, valamint antikoaguláns és trombózisellenes hatással rendelkeznek.

A biokémiai és farmakológiai hatásuk következtében a találmány szerinti vegyületek igen érdekes gyógyszerek. Toxicitásuk tökéletesen kompatibilis ezzel az alkalmazással. A vegyületek ezenkívül nagyon stabilak, tehát rendkívül jól alkalmazhatók gyógyszerkülönlegességek hatóanyagaként.

A fentieken kívül a találmány szerinti vegyületeket nem semlegesíti a nagy dózisú vérlemezke kationos fehérjék, mint például a vérlemezke 4-es faktor (FP4), amely a trombózis folyamata alatt az ilyen fehérjék aktiválódása során szabadul fel. A találmány szerinti vegyületek tehát különösen figyelemreméltóak az artériás vagy vénás eredetű trombózisok kezelése és megelőzése szempontjából.

A vegyületek különféle, olyan patológiás esetekben használhatók, amelyek a koagulációs rendszer hemosztázismódosulásai következményei, és amelyek főként a szívérrendszeri és agyérrendszeri zavarok során jelennek meg. Ilyenek például az arterioszklerózissal és cukorbetegséggel járó tromboembóliás zavarok, például az instabil angina, az agyvérzés, az angioplasztika. ütőérbelhártya-eltávolítás, endovaszkuláris protézisek behelyezése utáni resztenózis; vagy a trombolízis utáni retrombózissal, infarktussal, iszkémiás eredetű elbutulással, perifériás artériás megbetegedésekkel, hemodialízissel, fülfibrillációval kapcsolatos vagy az aorta-koronaér áthidalásánál alkalmazott érprotézisekkel kapcsolatos tromboembóliás zavarok. A vegyületek alkalmazhatók ezenkívül vénás eredetű tromboembóliás betegségek, például tüdőembólia kezelésére vagy megelőzésére is. A vegyületek alkalmazhatók a sebészeti beavatkozások során megjelenő vagy más betegségekkel, például rákkal, baktériumos vagy vírusos fertőzésekkel együtt járó trombózisos komplikációk kezelésére vagy megelőzésére. Amikor a találmány szerinti vegyületeket protézis behelyezése során alkalmazzuk, a vegyületek be tudják fedni a protéziseket, és így ezeket hemokompatibilissé teszik. Különösen jól rögződnek az intravaszkuláris protézisekhez (stents). Ebben az esetben a vegyületeket adott esetben kémiailag módosíthatjuk úgy, hogy a redukáló vagy nem redukáló végükre egy megfelelő kart viszünk be (lásd például az EP 649 854 számú szabadalmi leírást).

A találmány szerinti vegyületek adalékként használhatók a porózus ballonokkal elvégzett ütőérbelhártya-eltávolítás során.

A találmány szerinti vegyületek nagyon stabilak, és ezért rendkívül alkalmasak arra, hogy gyógyszerek hatóanyagát alkossák.

A találmány tárgya tehát az olyan gyógyszerkészítmény is, amely hatóanyagként egy fentiekben definiált szintetikus poliszacharidot tartalmaz.

A találmány szerint előnyösek az olyan gyógyszerkészítmények, amelyek hatóanyagként egy (I), (1.1), (1.2), (1.3) általános képletű vegyületet vagy ezek valamely gyógyszerészetileg alkalmazható sóját, és adott esetben egy vagy több inért megfelelő vivőanyagot tartalmaznak.

Az egyes adagolási egységekben a hatóanyag olyan mennyiségben van jelen, amely megfelel a tervezett napi adagnak. Általában az egyes dózisegységekben a hatóanyag mennyisége, az adagolás módja és a dózis szerint van beállítva a hatóanyag-mennyiség. Az adagolás módja lehet tabletta, kapszula vagy hasonló formában, például zacskó, ampulla, szirup vagy hasonló, csepp, transzdermális tapasz vagy nyálkahártyán keresztül leadó tapasz formájában. Az egyes adagolási egységek 0,1-100 mg, előnyösen 0,5-50 mg hatóanyagot tartalmaznak.

A találmány szerinti vegyületeket olyan más hatóanyaggal együtt is lehet alkalmazni, amely a kívánt terápia szempontjából hasznos, például trombózisellenes, antikoaguláns vérlemezke-aggregációt gátló hatóanyagokkal, például dipiridamollal, aszpirinnel, tiklopidinnel, klopidogréllel vagy a glikoprotein Ilb/IIIa komplex antagonistáival együtt.

A gyógyszerkészítményeket úgy formáljuk, hogy az emlősök, beleértve az embert is, számára adagolható legyen az említett betegségek kezelése céljából.

Az így előállított gyógyszerkészítmények előnyösen különféle formájúak, például injektálható vagy iható oldatok, drazsék, tabletták vagy kapszulák formájában vannak. A gyógyszerformák közül előnyös az injektálható oldat. A találmány szerinti gyógyszerkészítmények gyógyító vagy megelőző céllal a következő betegségek kezelésére használhatók: az érfal megbetegedései, például atheroszklerózis, hiperkoagulációs állapotok, amelyeket például műtétek után lehet megfigyelni, daganatok kifejlődésével kapcsolatos állapotok, koagulációs rendellenességek, amelyeket baktériumos, vírusos vagy enzimes aktivátorok válta7

HU 223 691 Β1 nak ki. Az adagolás mennyisége nagymértékben függ a beteg életkorától, testtömegétől, egészségi állapotától, a betegség fajtájától és súlyosságától, valamint az adagolás módjától. Az adagolás történhet naponta egy vagy több dózisban körülbelül napi 0,1 mg és 100 mg, előnyösen körülbelül 0,5 és 50 mg közötti mennyiségben intramuszkulárisan vagy szubkután, folyamatos módban vagy szabályos időközönként.

A találmány tehát az olyan gyógyszerkészítményekre is vonatkozik, amelyek hatóanyagként egy fent definiált vegyületet tartalmaznak, adott esetben egy másik hatóanyaggal együtt. Az ilyen készítményeket úgy állítjuk elő, hogy azokat az emésztőcsatornán keresztül vagy parenterálisan lehessen adagolni.

A találmány szerinti orális, szublingvális, szubkután, intramuszkuláris, intravénás, transzdermális, nyálkahártyán át történő lokális vagy rektális adagolásra alkalmas gyógyszerkészítményekben a hatóanyagot adagolási egységek formájában adagolhatjuk szokásos gyógyszerészeti hordozóanyagokkal összekeverve állatoknak és embereknek. Az adagolásra alkalmas egységek közé tartoznak az orálisan adagolható formák, például tabletták, kapszulák, porok, szemcsék, orális oldatok vagy szuszpenziók, a szublingvális és bukkális adagolásra alkalmas formák, továbbá a szubkután, intramuszkuláris, intravénás, intranazális vagy intraokkuláris adagolásra alkalmas formák és a rektális adagolásra alkalmas gyógyszerformák.

Amikor tabletta alakú szilárd készítményt állítunk elő, a hatóanyagot valamely gyógyszerészeti vivőanyaggal, például zselatinnal, keményítővel, laktózzal, magnézium-sztearáttal, talkummal, gumiarábikummal vagy hasonló anyaggal keverjük össze. A tablettákat bevonhatjuk szacharózzal vagy más megfelelő anyaggal, vagy kezelhetjük ezeket oly módon, hogy késleltetett vagy nyújtott hatásuk legyen, és a hatóanyagot előre meghatározott mennyiségben folyamatosan adják le.

Kapszulát úgy állítunk elő, hogy a hatóanyagot valamely hígítószerrel összekeverjük, és a kapott keveréket kemény vagy lágy kapszulába töltjük.

A vízben diszpergálható porok vagy szemcsék a hatóanyag mellett tartalmazhatnak diszpergáló- vagy nedvesítőszereket vagy szuszpendálószereket, például poli(vinil-pirrolidon)-t, továbbá tartalmazhatnak édesítő- és ízjavító szereket is.

Rektális adagolás céljára kúpokat állítunk elő olyan kötőanyagokkal, amelyek a rektális hőmérsékleten megolvadnak, például kakaóvajjal vagy polietilénglikollal.

Parenterális, intranazális vagy intraokkuláris adagolás céljából vizes szuszpenziót, izotóniás sóoldatot vagy steril és injektálható oldatot használunk, amely gyógyszerészeti szempontból kompatibilis diszpergálószereket és/vagy nedvesítőszereket, például polietilénglikolt vagy butilénglikolt tartalmaz.

Nyálkahártyán keresztül történő adagolás céljából a hatóanyagot valamely promotor, például epesavsó vagy hidrofil polimer, például hidroxi-propil-cellulóz, hidroxi-propil-metil-cellulóz, hidroxi-etil-cellulóz, etilcellulóz, karboxi-metil-cellulóz, dextrán, poli(vinil-pirrolidon), pektin, keményítő, zselatin, kazein, akrilsav, akrilsav-észter és ezek kopolimerjei, vinilpolimerek vagy -kopolimerek, vinil-alkoholok, alkoxipolimerek, etilén-oxid-polimerek, poliéterek vagy ezek keverékei jelenlétében formáljuk.

A hatóanyagot mikrokapszulák formájában is formálhatjuk adott esetben egy vagy több hordozó- vagy adalék anyaggal együtt.

A hatóanyag komplex formában is előfordulhat ciklodextrinnel, például α-, β- vagy γ-ciklodextrinnel, 2hidroxi-propil-P-ciklodextrinnel vagy metil^-ciklodextrinnel alkotott komplexe formájában.

A hatóanyagot a hatóanyagot tartalmazó léggömbök segítségével vagy a véredényekbe bevezetett endovaszkuláris extenzor segítségével is adagolhatjuk. A hatóanyag farmakológiai hatását ez nem befolyásolja.

Az adagolást előnyösen szubkután végezzük.

A következőkben a találmány szerinti poliszacharidok előállításához hasznos különböző intermedierek előállítását mutatjuk be, a példákban néhány találmány szerinti vegyület előállítását illusztráljuk. A találmány azonban nem korlátozható a példákban bemutatottakra.

Az alábbi rövidítéseket alkalmazzuk: TBDMS: terc-butil-dimetil-szilil; Lev: levulinil; Bn: benzil; Bz: benzoil; CCM vékonyréteg-kromatográfiás eljárás; Olm: triklór-acetimidil; LSIMS: az angol Liquid secondary Ion Mass Spectrometry rövidítése; ESIMS: az angol Electron Spray lonisation Mass Spectrometry rövidítése; TMS: trimetil-szilil; TSP: nátrium-trimetilszilil-tetradeutero-propionát; Tf: triflát; MS: molekulaszita; All: allil; PMB: p-metoxi-benzil; SE: trimetilszilil-etil. A Dowex®, a Sephadex®, a Chelex® és a Toyopearl⁸ bejegyzett védjegyek.

Az alábbi preparátumokban és példákban az általános eljárásnál ismertetett műveleti előírásokat alkalmazzuk a megfelelő vegyületekre, ilyen műveletek a következők: imidátok katalitikus kapcsolása, levulinészteres hasítása, tioglikozidok katalitikus kapcsolási rációja, elszappanosítás, metilezés, a parametoxi-benzil védőcsoport szelektív eltávolítása, az oligo- és poliszacharidokról a védőcsoport eltávolítása és szulfatálás, a benzil-észterek vagy éterek hidrogenolízisével, észterek elszappanositása vagy szulfatálás.

A következőkben az általános eljárás ismertetjük.

1. eljárás - Kapcsolás imidátokhoz tercier butildimetil-szilil-trifláttal katalizálva Argonatmoszférában -20 °C-on imidátoldathoz hozzáadunk 1 mólos diklór-metános tercier-butil-dimetil-szilil-triflát-oldatot (1 mól imidáthoz 0,2 mol-t véve), az imidátot tartalmazó oldat tartalmazza a glikozilakceptort is diklór-metános oldat formájában (17,5 ml/mmol), az adagolást 4 Á-ös molekulaszita jelenlétében végezzük. 10-20 perc elteltével (miközben a reakciót CCM-mel követjük) szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot adunk az elegyhez. Az oldatot leszűrjük, vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra pároljuk.

HU 223 691 Bl

2. eljárás -- A levulinilcsoport lehasítása

A vegyületet, amelyről a védőcsoportot el kívánjuk távolítani, feloldjuk etanol/toluol 2:1 térfogatarányú elegyében (42 ml/mmol), és az oldathoz 5 mol/mol hidrazin-acetátot adagolunk. Az elegyet 15-30 percig keverjük (a reakciót CCM-mel követjük), majd az oldatot bepároljuk.

3. eljárás - N-Jód-szukcinimiddel/ezüst-trifláttal katalizált tioglikozidokhoz történő kapcsolási reakció

Kémiai reakciókkal szemben semleges üveg lombikban feloldjuk a tioglikozidot és a glikozilakceptort vízmentes toluolban (18 ml/mmol tioglikozid), 4 Á-ös molekulaszita jelenlétében. Az elegyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd 0 °C-ra hűtjük és hozzáadunk 3 mol/mol tioglikozidkoncentrációban N-jód-szukcinimidet, majd 0,28 mol/mol tioglikozidkoncentrációban hozzáadjuk az ezüst-triflátot. 10-15 perc elteltével (a reakciót CCM-mel követjük) hozzáadjuk a szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot. Az elegyet leszűrjük, az oldatot 1 mólos vizes nárium-tioszulfát-oldattal, majd vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk.

4. eljárás — Elszappanosítás, metilezés és a parametoxi-benzil védőcsoport szelektív eltávolítása

Az észterek elszappanosítását a következőképpen végezzük: az elszappanosítandó vegyületet 4 ml/mmol koncentrációban feloldjuk diklór-metán/metanol 1:1 térfogatarányú elegyében. Az elegyhez hozzáadjuk a nátrium-metanolátot, 20 percig keverjük, majd Dowex® 50 H+ gyantával semlegesítjük. A reakcióelegyet bepároljuk és a kapott vegyületet tisztítás nélkül használjuk fel a következő lépéshez.

A metilezést a következőképpen végezzük: az előzőek szerint előállított nyerstermék és metil-jodid Ν,Νdimetil-formamiddal készített elegyéhez 7 ml/mmol koncentrációban 0 °C-on kis mennyiségenként nátrium-hidridet adagolunk. A reakció teljessé válása után a reakcióelegyet vízre öntjük, és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra pároljuk.

A parametoxi-benzil-csoportot a következőképpen hasítjuk le: az előzőek szerint előállított nyersterméket feloldjuk acetonitril/víz 9:1 térfogatarányú elegyében (20 ml/mmol koncentrációval). 0 °C-on 0,5 mol/mol koncentrációval cérium és ammóniumnitrátot adagolunk. A reakcióelegyet 2 órán keresztül keverjük (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük), majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adagolunk, etil-acetáttal extraháljuk az elegyet, a szerves fázist megszárítjuk és bepároljuk.

5. eljárás - Oligo- és poliszacharidokról védőcsoport eltávolítása és szulfatálás

A benzil-éterek és benzil-észterek hidrogenolízisét a következőképpen végezzük: 6-12 órán keresztül (az időtartamot CCM-eljárással határozzuk meg) keverjük bar hidrogénatmoszférában 5%-os szénhordozóra vitt palládium jelenlétében (amelyből a vegyület tömegének kétszeresét alkalmazzuk) az adott vegyület jégecetes oldatát. A reakcióelegyet ezután leszűrjük, és a kapott terméket közvetlenül használjuk fel a következő lépéshez.

Az észterek elszappanosításához 5 mólos vizes nátrium-hidroxid-oldatot adagolunk egy észter metanolos (150 ml/mmol) oldatához olyan mennyiségben, hogy a nátrium-hidroxid-koncentráció az adagolás végén 0,5 mólos legyen. 2-5 óra elteltével a reakcióelegyhez vizet adunk és az elegyet Sephadex® G-25 géllel töltött kolonnán (1,6 χ 115 cm) engedjük át, eluensként vizet használunk. Az elegyet bepároljuk, Dowex® 50 H⁺ kolonnán (2 ml) átengedjük és liofilizáljuk. Ennél a lépésnél Ή-NMR-eljárással ellenőrizzük, hogy valamennyi védőcsoportot eltávolítottuk-e. Amennyiben szükséges, a terméket ismét hidrogénezésnek és/vagy elszappanosításnak vetjük alá.

A szulfatálást úgy végezzük, hogy trietilamin/kén-trioxid komplexet adagolunk (5 mol/mol hidroxilcsoport) a szulfatálandó vegyület 5 mg/ml koncentrációjú dimetil-formamidos oldatához. Az elegyet 1 napig 55 °C-on tartjuk, majd az oldatot Sephadex® G-25 kolonna tetejére visszük (1,5 χ 115 cm) eluensként 0,2 mólos nátrium-kloridot használunk. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat bepároljuk és a terméket sótalanítjuk ugyanazon a kolonnán vízzel eluálva. A végterméket liofilizálás után kapjuk meg.

A következőkben néhány, találmány szerinti vegyület és az ezek előállításához használható intermedier előállítását mutatjuk be.

A 3. reakcióvázlaton a (6) és (9) képletű monoszacharid előállítását szemléltetjük.

1. preparátum

Etil-2,4,6-tri-0-acetil-3-0-metil-l-tio-[l-D-glükopiranozid [(2) képletű vegyület] g (0,19 mmol) l,2,4,6-tetra-O-acetil-3-O-metilβ-D-glükopiranózt [(1) képletű vegyület] lásd B. Helferich és munkatársai, J. Prakt. Chem., 132, 321 (1932) feloldunk, 580 ml toluolban. Az oldathoz hozzáadunk 28 ml (0,38 mmol) etán-tiolt, majd cseppenként hozzáadunk 190 ml 1 mólos toluolos trifluor-borán-dietiléterátot. Az elegyet 1,5 órán keresztül keverjük (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük), majd szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, leszűrjük, vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A kapott terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 3:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 37 g (2) képletű vegyületet kapunk, kitermelés 54%. [a]_D -26 (c= 1, diklór-metán).

H-NMR (CDClj) δ 5,05-4,96 (m, 2H, H-2, H-4),

4,39 (d, 1H, J=9,5 Hz, H-l), 4,18-4,12 (m, 2H,

H-6, H-6’), 3,60 (m, 1H, H-5), 3,50 (dd, 1H,

J=9,3 Hz, H-3), 3,41 (s, 3H, OCH₃), 2,65-2,53 (m, 2H, SCH₂CH₃), 2,12, 2,11, 2,09 (3s, 9H, 3 Ac),

1,25 (t, 1H, SCH₂CH₃).

HU 223 691 Β1

2. preparátum

Etil-4,6-benzilidén-3-O-metil-l-tio-fi-D-glükopiranozid [(3) képletű vegyület] g (0,1 mmol) (2) képletű vegyületet feloldunk metanol és diklór-etán 1:2 térfogatarányú, összesen

1,5 liter térfogatú elegyében. Hozzáadunk 150 ml 2 mólos nátrium-metanolát-oldatot, és az elegyet fél órán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután Doxew® 50 (H⁺) gyantával semlegesítjük, leszűrjük és bepároljuk a reakcióelegyet.

Az előzőek szerint előállított nyersvegyületet 1 1 vízmentes acetonitrilben feloldjuk, hozzáadunk 30 ml (0,2 mól) α,α-dimetoxi-toluolt és 2,3 g (10 mmol) kámforszulfonsavat. A reakcióelegyet 1,5 órán keresztül keverjük (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük), majd 1,4 ml trietil-amint adunk hozzá és bepároljuk. A kapott maradékot dietil-éterből kicsapatjuk és így 27 g (3) képletű vegyületet kapunk, kitermelés 81%. [a]_D -60 (c=l,63, diklór-metán).

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,51-7,34 (m, 5H, Ph), 5,55 (s,

1H, C₆H₅CH), 4,56 (d, 1H, J=9,2 Hz, H-l), 2,75 (m, 2H, SCH₂CH₃), 1,32 (t, 3H, SCH₂CH₃). Elemanalízis a C₁₆H₂₂O₅S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	58,58	6,79	9,82
talált:	58,99	6,74	9,75

3. preparátum

Etil-2-O-benzil-4,6-O-benzilidén-3-O-metil-l-tiofi-ü-glükopiranozid [(4) képletű vegyület] g (71,0 mmol) (3) képletű vegyület és 11 ml (93,0 mmol) benzil-bromid 200 ml N,N-dimetil-formamiddal készített oldatához 0 °C-on hozzáadunk 2,00 g (83,3 mmol) nátrium-hidridet. Az elegyet 2 órán keresztül keverjük (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük), majd metanolt adunk hozzá, és a reakcióelegyet vízre öntjük. Az elegyet etil-acetáttal extraháljuk, vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A kívánt vegyületet dietil-éterből csapatjuk ki, és így 18,8 g (4) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 63%, olvadáspont: 123 °C. [a]_D -35 (c=0,63, diklórmetán).

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,50-7,25 (m, 10H, 2 Ph), 5,55 (s, 1H, C₆H₅CH), 4,54 (d, 1H, J=9,7 Hz, H-l), 4,34 (m, 1H, H-6), 3,75 (t, 1H, J= 10,2 Hz, H-6’), 3,65 (s, 3H, OCH₃), 3,60-3,33 (m, 4H, H-5, H-4, H-3, H-2), 2,75 (m, 2H, SCH₂CH₃), 1,32 (t, 3H, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₂₃H_2gO₅S (416,54) összegképlet alap-

ján:	C%	H%	S%
számított:	66,32	6,78	7,70
talált:	66,25	7,28	7,54

4. preparátum

Etil-2,6-di-O-benzil-3-O-metil-l-tio-$-D-glükopiranoizid [(5) képletű vegyület]

0,65 ml (4,50 mmol) trifluor-ecetsavanhidrid 16 ml (0,21 mól) trifluor-ecetsawal készített oldatát argonatmoszférában hozzáadjuk 28,8 g (69,0 mmol) (4) képletű vegyület és 33 ml (0,21 mól) trietil-szilán 120 ml diklór-metánnal készített oldatához. Az elegyet 2 órán keresztül keverjük, etil-acetáttal hígítjuk és pH 9 eléréséig 1 mólos vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyet etil-acetáttal extraháljuk, vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra pároljuk. A kapott terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 3:1, majd 2:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 17,4 g (5) képletű vegyületet kapunk, kitermelés 60%. [a]_D -47 (c = 1, diklór-metán).

Ή-NMR (CDClj) δ 7,45-7,25 (m, 10H, 2 Ph), 4,47 (d, 1H, J=9,3 Hz, H-l), 3,66 (s, 3H, OCH₃), 3,61-3,40 (m, 2H, H-4 és H-5), 3,36-3,19 (m, 2H, H-2 és H-3), 2,73 (m, 2H, SCH₂CH₃), 1,31 (t, 3H, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₂₃H₃₀O₅S (418,55) összegképlet alap-

ján:	C%	H%	S%
számított:	66,00	7,222	7,66
talált:	65,62	7,28	7,21

5. preparátum

Etil-2,6-di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-l-tio$-glükopiranozid [(6) képletű vegyület]

17,3 g (41,4 mmol) (5) képletű vegyületet feloldunk

400 ml vízmentes dioxánban. Hozzáadunk 9,60 g (83,0mmol) levulinsavat, lóg(86mmol) l-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidrokloridot és 1 g (8,3 mmol) 4-dimetil-amino-piridint. Az elegyet 4 órán keresztül keverjük, etil-acetáttal extraháljuk, 5%-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/etil-acetát 6:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 19,9 g tiszta (6) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 93%. [a]_D -5 (c=l,46, diklór-metán). LSIMS, pozitív mód: m/z tioglicerin+NaCl, 539 (M+Na)⁺; tioglicerin+KF, 555 (M+K)⁺.

Ή-NMR (CDClj) δ 7,40-7,20 (m, 10H, 2 Ph), 4,92 (m, 1H, H-4), 2,8-2,4 (m, 6H, SCH₂CH₃ és O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,16 (s, 3G,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,32 (t, 1H, J=7,3 Hz, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₂₈H₃₆O₇S (516,65) összegképlet alap-

ján:	C%	H%	S%
számított:	65,09	7,02	6,21
talált:	65,30	7,03	5,75

6. preparátum

Allil-4,6-O-benzilidén-3-O-metil-a, $-D-glükopiranozid [(7) képletű vegyület]

135 g (0,7 mól) kereskedelmi forgalomban kapható

3-O-metil-glükóz 1 liter allil-alkohollal készített szuszpenziójához hozzáadunk 1,10 ml (0,012 mól) trifluormetánszulfonsavat. Az elegyet 2 órán keresztül 120 °Con melegítjük, majd 2 ml trietil-amin hozzáadásával semlegesítjük és szárazra pároljuk.

HU 223 691 Bl

Az így kapott nyersterméket feloldjuk 2 1 N,N-dimetil-formamidban, hozzáadunk 136 ml (0,9 mól) α,αdimetoxi-toluolt, 25 g (0,13 mmol) kámforszulfonsavat. Az elegyet 1 órán keresztül vákuumban 80 °C-on melegítjük, majd 21 ml trietil-amin hozzáadásával semlegesítjük, etil-acetáttal extraháljuk, vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. 144 g szilárd anyagot kapunk, amely az α/β izomer 3/2 arányú keveréke. Kitermelés: 57%. A kapott terméket etanolból átkristályosítjuk, így 60 g tiszta 7a-vegyületet kapunk, kitermelés : 26%. Az anyalúg egy részét szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 3:1 térfogatarányú elegyét használjuk, így 7,6 g tiszta 7β-vegyületet, 6,8 g 7α/β keveréket és 1,4 g tiszta 7a-vegyületet kapunk.

A 7β-vegyület adatai: [a]_D-43 (c=l, diklór-metán); olvadáspont: 131 °C.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,50-7,26 (m, 5H, Ph),

6,01-5,90 (m, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 5,55 (s, 1H,

C₆H₅CH), 5,38-5,32 (m, 2H, OCH₂(CH: CH₂)),

4,47 (d, 1H, J=7,5 Hz, H-l), 4,42-4,32 (m, 2H,

H-6’ és OCH₂(CH:CH₂)), 4,21-4,15 (m, 1H,

OCH₂(CH:CH₂)), 3,80 (dd, 1H, J= 10,2 Hz, H-6),

3,67 (s, 3H, OCH₃).

Elemanalízis a C₁₇H₂₂O₆ (322,36) összegképlet alap-

ján:	C%	H%
számított:	63,34	6,88
talált:	63,23	7,12

7. preparátum

Allil-2-O-acetil-4,6-O-benzilidén-3-O-metil-$-Dglükopiranozid [(8) képletű vegyűlet]

11,5 g (35,7 mmol) (7) képletű vegyületet feloldunk

100 ml diklór-metánban, hozzáadunk 4,0 ml (42,8 mmol) ecetsavanhidridet, 6,40 ml (46,4 mmol) trietil-amint és 440 mg (3,60 mmol) 4-dimetil-aminopiridint. Az elegyet 2 órán keresztül keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárassal követjük, majd az elegyet 5%-os kálium-hidrogén-szulfát vizes oldattal, vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, szárítjuk és szilárd anyag megjelenéséig bepároljuk. 12,3 g (8) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 95%, olvadáspont: 115 °C. [a]_D68 (c=l, diklór-metán). LSIMS, pozitív mód: m/z tioglicerol+NaCl, 387 (M + Na)⁺; tioglicerol+KF, 403 (M+K)+.

Ή-NMR (CDClj) δ 7,51-7,34 (m, 5H, pPh), 5,98-5,87 (m, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 5,56 (s, 1H, C₆H₅CH), 5,32-5,17 (m, 2H, OCH₂(CH: CH₂)), 4,99 (dd, J=8 Hz, 1H, H-2), 4,55 (d, J=7,9 Hz, 1H, H-l), 4,29-4,29 (m, 2H, H-6 és OCH₂(CH: CH₂)), 4,14-4,04 (m, 1H,

OCH₂(CH:CH₂)), 3,82 (t, J=102, Hz, 1H, H-6’), 3,60 (s, 3H, OCH₃), 2,12 (s, 3H, Ac).

Elemanalízis a C₁₉H₂₄O₇ (366,39) összegképlet alap-

ján:	C%	H%
számított:	63,63	6,64
talált:	62,63	6,64

8. preparátum

Allil-2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozid [(9) képletű vegyűlet]

12,0 g (33,3 mmol) (8) képletű vegyűlet és 21,3 ml (133 mmol) trietil-szilán 50 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatához 0 °C-on hozzáadjuk 306 pl (2,10 mmol) trifluor-ecetsavanhidrid 10 1 ml trifluorecetsavval készített oldatát. Az elegyet 4 órán keresztül keveijük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd etil-acetát-acetáttal hígítjuk és pH 9 eléréséig 1 mólos vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyet etil-acetáttal extraháljuk, vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/aceton 8:5 térfogatarányú elegyét használjuk. 10 g tiszta (9) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 82%. [a]_D 40 (c=1,06, diklór-metán). Ή-NMR (CDClj) δ 7,35-7,28 (m, 5H, Ph),

5,87-5,79 (m, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,28-5,14 (m, 2H, OCH₇(CH:CH₂)), 4,43 (d, 1H, J = 7,9 Hz, H-l), 4,41-4,28 (m, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,10-4,02 (m, 1H, OCHJCH :CH₇), 3,77-3,75 (m, 2H, H-6 és H-6’), 3,5í (s, 3H, ÖCH₃), 3,30 (dd, 1H, H = 8,9 Hz, H-3), 2,8 (d, 1H, OH).

Elemanalízis a C₁₉H₂₆O₇ (366,39) összegképlet alap-

jan:	C%	H%
számított:	62,28	7,15
talált:	61,73	7,19

A (13) és (14) képletű diszacharidok előállítását a 4. reakcióvázlaton mutatjuk be.

9. preparátum

Allil-2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-4-O-(2,6-diO-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-a-D-glükopiranozil)-$-D-glükopiranozid [(10) képletű vegyűlet] 7,4 g (33,7 mmol) (6) képletű tioglikozidot és 10,3 g (28,1 mmol) (9) képletű glikozilakceptort feloldunk 150 ml diklór-etánban. Hozzáadunk 4 Á-ös molekulaszitát, és az elegyet 1 órán keresztül keverjük. -20 °Con argonatmoszférában hozzáadjuk 8,3 g (33,7 mmol) N-jód-szukcinimid és 0,30 ml (3,30 mmol) trifluor-metánszulfonsav 415 ml diklór-etán és dietil-éter 1:1 térfogatarányú keverékével készített oldatát. Az elegyet 10 percig keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd hozzáadunk nátrium-hidrogénkarbonátot, az elegyet leszűrjük és 1 mólos vizes nátrium-tioszulfát-oldattal, vízzel, telített vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/etil-acetát 11:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 11,7 g 10-a diszacharidot kapunk, kitermelés: 52%. [a]_D + 38 (c = 1,01, diklór-metán).

Ή-NMR (CDClj) δ 7,35-7,23 (m, 15H, 3 Ph), 5,90-5,80 (m, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 5,47 (d, 1H, J = 3,6 Hz, H-l’), 5,27-5,14 (m, 2H,

OCH₂(CH:CH₂)), 5,05-4,90 (m, 2H, H-4’ és H-2), 4,42 (d, 1H, J=7,6 Hz, H-l), 4,38-4,32 (m, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 4,15-4,0 (m, 1H,

HU 223 691 Β1

OCH₂(CH:CH₂)), 3,90 (dd, 1H, J = 8,8 Hz, H-4), 3,54, 3,34 (2 s, 6H, 2 OCH₃), 2,75-2,40 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,16, 2,10 (2 s, 6H, Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Elemanalízis a C₄₅H₅₆O₁₄ összegképlet alapján:

c%	H%
számított: 65,84	6,88
talált: 65,74	6,90
10. preparátum

Prop-1 ’-enil-2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-4-O(2,6-di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-$-D-gliikopiranozid [(11) képletű vegyület]

5,80 mg (0,70 pmol) l,5-ciklooktadién-bisz(metildifenil-foszfín)-iridium-hexafluor-foszfátot hozzáadunk 1,30 g (1,66 mmol) (10) képletű vegyület

4,30 ml peroxidmentes tetrahidrofúránnal készített oldatához. Az oldatot gáztalanítjuk, argonatmoszférába helyezzük, és hidrogént adunk hozzá. Az elegyet 10 percig keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd az elegyet bepároljuk. A maradékot diklór-metánnal felvesszük, telített vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluolt/etil-acetát 3:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,04 g tiszta (11) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 76%. [a]_D +47 (c= 1,1, diklór-metán). LSIMS, pozitív mód: m/z tioglicerol+NaCl, 951 (M+Na)⁺; tioglicerin+KF, 967 (M + K)⁺.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,34-7,23 (m, 15H, 3 Ph),

6,21-6,16 (m, 1H, O(CH:CH)CH₃), 5,45 (d, 1H,

J = 3,5 Hz, H-l’), 5,13-4,97 (m, 3H, H-4’,

H-2 és O(CH:CH)CH₃), 4,6 (d, 1H, J=7,55 Hz,

H-l), 3,96 (dd, 1H, J=8,9 Hz, H-4’), 3,54, 3,34 (2 s, 6H, 2 OCH₃), 2,74-2,36 (m, 4H,

I(C:O)CH₂CH₇(C:O)CH₃), 2,15, 2,08 (2s, 6H, Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 1,56-1,51 (dd, 3H, O(CH:CH)CH₃).

Elemanalízis a C₄₅H₅₆O₁₄ (820,94) összegképlet alap-

ján:	C%	H%
számított:	65,84	6,88
talált:	66,21	6,92

11. preparátum

2-O-Acetil-6-O-benzil-3-O-metil-4-O-(2,6-di-Obenzil-4-O-levuliml-3-O-metil-a-D-glükopiranozil)-a,$-D-glükopiranóz [(12) képletű vegyület]

3,9 g (14,3 mmol) higany-klorid 26 ml aceton/víz

5:1 térfogatarányú elegyével készített oldatát cseppenként hozzáadjuk 7,8 g (9,53 mmol) (11) képletű vegyület és higany-oxid 80 ml ugyanilyen oldószereleggyel készített oldatához. Az elegyet 1 órán keresztül keverjük, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot diklór-metánnal extraháljuk, telített vizes kálium-jodid-oldattal és vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/aceton 10:1, majd

4:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 6,70 g (12) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 90%. [a]_D +92 (c= 1,37, diklór-metán). CCM, R_F 0,31, diklór-metán/aceton: 14:1.

Ή-NMR (CDClj) Ö 7,37-7,24 (m, 15H, 3 Ph), 5,46 (d, 1H, J = 3,5 Hz, H-l’), 5,37 (d, J = 3,6 Hz, H-la), 4,58 (d, J=8 Hz, Η-1β), 3,54, 3,39, 3,36 (3s, 6H, 2 OCH₃), 2,75-2,4 (m, 4H,

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,16, 2,15 (2s, 6H, Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Elemanalízis a C₄₂H₅₂O₁₄ (780,83) összegképlet alap-

ján:	C%	H%
számított:	64,60	6,71
talált:	65,09	6,82

12. preparátum

2-O-Acetil-6-O-benzil-3-O-metil-4-O-(2,6-di-Obenzil-4-O-levulinil-3-O-metil-a-D-glükopiranozil)-a, $-D-glükopiranóz-triklór~acetimidát [(13) képletű vegyület]

5,00 g (6,4 mmol) (12) képletű vegyületet feloldunk 51 ml diklór-metánban, majd argonatmoszréfában hozzáadunk 3,9 ml (38,8 mmol) triklór-acetonitrilt és 1,6 g (11,6 mmol) kálium-karbonátot. Az elegyet 16 órán keresztül keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd az elegyet leszűrjük. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/aceton 8:1, majd 4:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 5,22 g (13) képletű imidátkeveréket kapunk (α/β = 60/40). Kitermelés: 87%. CCM, R_f 0,66 és 0,51, diklór-metán/aceton 20:1. Ή-NMR (CDC1₃) δ 8,62-8,59 (2s, 1H, N:H-a és β),

7,37-7,23 (m, 15H, 3 Ph), 6,51 (d, J=3,7 Hz,

H-la), 5,81 (d, J=7,l Hz, Η-1β), 5,50 d, 1H,

J=3,5 Hz, H-l’), 3,55, 3,41, 3,37 (3s, 9H, 3 OCH₃),

2,75-2,40 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃),

2,16, 2,07, 2,04 (3s, 6H, Ac és (C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Elemanalízis a C₄₄H₅₂C1₃NO|₄ (925,26) összegképlet

alapján:	C%	H%	N%
számított:	57,12	5,66	1,51
talált:	57,31	5,87	1,55

13. preparátum

AUil-2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-4-O-(2,6-di0-benzil-3-0-metil-a-D-glükopiranozil)-$-D-glükopiranozid [(14) képletű vegyület]

3,11 g (3,80 mmol) (10) képletű vegyületet a 2. számú általános eljárás szerint reagáltatunk, így 2,70 g (14) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 97%. [a]_D +25 (c=l,7, diklór-metán). LSIMS, pozitív mód: m/z tioglicerol+NaCl, 745 (M+Na)+; tioglicerol+KF, 761 (M+K)⁺.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,20 (m, 15H, 3 Ph), 5,87-5,78 (m, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,50 (d, 1H, J = 3,5 Hz, H-l’), 5,30-5,17 (m, 2H,

OCH₂(CH:CH₂)), 5,02 (dd, 1H, H-2), 4,43 (d, 1H, 5 = 7,6 Hz, H-l), 4,34-4,28 (m, 1H,

HU 223 691 Bl

OCH₂(CH:CH₂)), 4,12-4,02 (m, 1H,

OCH₂(CH:CH₂)), 3,63, 3,36 (2s, 6H, 2 OCH₃),

2,10 (s,3H, Ac).

Elemanalízis a C₄₀H₅₀O₁₂ összegképlet alapján:

C% H% számított: 66,47 6,97 talált: 66,31 7,24

A (19) képletű oligoszacharid előállítását az 5. reakcióvázlaton szemléltetjük.

14. preparátum

Allil-O-(2,6-di-O-henzil-4-O-levulinil-3-O-metil-c).D-glükopiranozil)-(l-^4)-O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-glükopiranozil)-( 1-)4)-0-(2,6-diO-benzil-3-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(1 -^4)-20-acetil-6-0-benzil-3-0-metil-$-D-glükopiranozid [(15) képletű vegyület]

4,22 g (4,56 mmol) (13) képletű imidát és 2,63 g (3,64 mmol) (14) képletű glikozilakceptor keverékét az 1. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk. A terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/dietil-éter 3:2, majd 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 4,31 g (15) képletű tetraszacharidot kapunk, kitermelés: 80%. [a]_D +52 (c=0,66, diklór-metán).

H-NMR (CDC1₃) δ 7,35-7,23 (m, 30H, 6 Ph),

5,83-5,79 (m, 1H, OCH₂(CH :CH₂)), 5,47 (d, 2H,

J = 3,5 Hz, H-l’” és H-l’), 5,25-5,14 (m,

2H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,38 (d, 1H, J=7,7 Hz,

H-l”), 4,30 (d, 1H, J=8 Hz, H-l), 4,32-4,25 (m, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,08-4,02 (m,

1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,56-3,53, 3,34, 3,27 (4s, 12H, 4 OCH₃), 2,78-2,40 (m, 4H,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,15-2,09, 1,85 (3s,

9H, 2 Ac és O(C :O)CH₂CH₂(C :O)CH₃). Elemanalízis a C_g2H₁₀₀O₂₅ (1485,7) összegképlet alap-

ján:	C%	H%
számított:	66,29	6,78
talált:	66,10	6,79

15. preparátum

O-(2,6-Di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metU-a.-Dglükopiranozil)-(l-^4)-O-(2-O-acetil-6-O-benzil3-O-metil-$-D-glükopiranozil)-( 1-)4)-0-(2,6-di0-benzil-3-0-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-)4)-2O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-a,^-D-glükopiranóz [(16) képletű vegyület]

2,30 g (1,54 mmol) (15) képletű vegyületet a 10. preparátumban leírtak szerint reagáltatunk. 10 perc elteltével a reakcióelegyhez hozzáadunk 0,30 g (1,70 mmol) N-bróm-szukcinimidet 15 ml diklór-metán és 5,50 ml víz elegyében oldva. Az elegyet 5 percig keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük. Az elegyet diklór-metánnal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-szulfát-oldattal és vízzel mossuk, majd megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/etil-acetát 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,57 g tiszta (16) képletű vegyületet kapunk, kitermelés a két lépésre számítva 71%. [a]_D +69 (c = 0,87, diklór-metán).

H-NMR (CDC1₃) δ 7,38-7,20 (m, 30H, 6 Ph), 5,47 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l’” és H-l’), 5,36 (d, 1H,

J=3,5 Hz, H-la), 4,55 (d, 1H, J=8 Hz, H-l), 4,36 (d, 1H, J=8 Hz, H-l”), 3,56, 3,54, 3,39, 3,36, 3,28 (5s, 9H, 3 OCH₃), 2,75-2,35 (m, 4H,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,16, 2,13, 2,12, 1,86 (4s, 9H, 2 Ac és O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

16. preparátum

O-2,6-Di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-a.-Dglükopiranozil)-(1^4)-O-2-O-acetil-6-O-benzil-3O-metil-$-D-glükopiranozíl)-(l^>4)-O-(2,6-di-Obenzil-3-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(I -)4)-2-0acetil-6-O-benzil-3-O-metil-a,^-D-glükopiranóztriklór-acetimidát [(17) képletű vegyület]

1,5 g (1,04 mmol) (16) képletű vegyület, 0,63 ml (6,22 mmol) triklór-acetonitril és 0, 26 g (1,87 mmol) kálium-karbonát 15 ml diklór-metánnal készített elegyét szobahőmérsékleten 16 órán keresztül keverjük. Az oldatot leszűrjük és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol és 1 %o trietil-amint tartalmazó aceton 4:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,47 g (17) képletű vegyületet kapunk, kitermelés 89,6%. CCM, R_F0,5, toluol/aceton 7:2.

17. preparátum

Allil-O-(2,6-di-O-benzil-3-O-metil-(i-D-glükopiranozil)-(1^4)-()-(2-C)-acetil-6-O-henzil-3-O-metil$-D-glükopiranozil)-(l-)4)-O-(2,6-di-O-benzil-3()-metil-a-D-glükopiranozil)-(1^4)-2-O-acetil-6O-benzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozid [(18) képletű vegyület]

1,3 g (0,87 mmol) (15) képletű vegyületet a 2. számú általános eljárással reagáltatunk a levulincsoport eltávolítása céljából, és így 1,05 g (18) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 86%. [a]_D +40 (c=0,6, diklórmetán).

‘H-NMR (CDC1₃) δ 7,36-7,23 (m, 30H, 6 Ph),

5,83-5,78 (m, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,50 (d, 1H,

J=3,5 Hz, H-l’”), 5,47 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l’),

5,25-5,21 (dd, 1H, J=l,6 Hz, J=17 Hz,

OCH₂(CH:CH₂)), 5,16-5,13 (dd, 1H, J=l,4 Hz,

J= 10 Hz, OCH₂(CH:CH₂)), 4,38 (d, 1H, J=6,5 Hz,

H-l”), 4,31 (d, 1H, J=6,5 Hz, H-l), 4,08-4,02 (m, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,59 (m, 1H, H-4’”),

3,67, 3,53, 3,39, 3,29 (4s, 12H, 4 OCH₃), 2,09, 1,86 (2s, 6H, 2 Ac).

18. preparátum

Allil-O-(2,6-di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-<j.D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-mettT\i-D-glükopiranozil)-( 1^4)-0-(2,6di-O-benzil-3-O-metil-(x-D-glükopÍranozil)(1^>4)] ₃-2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozid [(19) képletű vegyület]

842 mg (0,53 mmol) (18) képletű vegyület és

1,17 g (0,74 mmol) (17) képletű vegyület elegyét az 1.

HU 223 691 Bl számú általános eljárással reagáltatjuk. A maradékot Toyopearl® HW-50 (110x3,2 cm) kolonnán tisztítjuk, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,44 g (19) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 85%). [a]_D +57 (c=l,01, diklórmetán).

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,35-7,20 (m, 60H, 12 Ph),

5,83-5,78 (m, 1H, PCH₂(CH: CHJ), 5,24-5,21 (dd, 1H, OCH₂(CH:CHJ), 5,16-5,13 (dd, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 3,59, 3,56, 3,51, 3,47, 3,33, 3,26 (6s, 24H, 8 OCH₃), 2,75-2,35 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CHJ, 2,15, 2,09, 1,85, 1,84 (4s, 15H, 4 Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃);

A fő anomer protonok δ-értéke: 5,48; 4,37; 4,29;

4,23 ppm.
Elemanalízis	^a c₁₅₆h₄₇o	₁₈₈ (28 1 5,51) összegképlet
alapján:	C%	H%
számított:	66,56	6,73
talált:	66,22	6,75

A (29) képletű poliszacharid előállítását a 6. reakcióvázlaton szemléltetjük.

19. preparátum

O-(2,6-Di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l^>4)-[O-(2-O-acetil-6-O-benzil3-O-metilfr-D-glüküpiranozil)-(l—>4)-O-(2,6-di0-benzil-3-0-metil-a.-I)-glükopiranozil)-(l—>4)]_}2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-a,0-D-glükopiranóz [(20) képletű vegyület]

720 mg (0,25 mmol) (19) képletű vegyületet a 15. preparátumban leírtak szerint reagáltatunk. A terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/etil-acetát 3:2, majd 4:3 térfogatarányú elegyét használjuk. 555 mg (20) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 78%. [a]_D +70 (c = 0,94, diklór-metán). CCM, R_F 0,43, toluén/dietilacetát 1:1.

20. preparátum

O-(2,6-Di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metil-v.-Dglükopiranozil)-(l-v4)-[O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l -^4)-0-(2,6di-O-benzil-3-O-metil-o.-D-glükopiranozil)(1 —>4)]₃-2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-o., β-Dglükopiranóz-triklór-acetímidát [(21) képletű vegyület]

540 mg (0,195 mmol) (20) képletű vegyületet a 16. preparátumban leírtak szerint reagáltatunk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol és l%o trietil-amint tartalmazó etil-acetát 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 455 mg (21) képletű imidát keveréket kapunk (α/β=27/73). Kitermelés: 80%. CCM, R_F 0,48, toluén/dietil-acetát: 2.

Ή-NMR (CDClj δ 8,60, 8,59 (2s, 1H, N:Ha és β),

7,35-7,21 (m, 60H, 12 Ph), 2,75-2,40 (m,

4H, O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CHJ, 2,16, 2,06,

2,04, 1,85, 1,84 (5s, 15H, 4 Ac és

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Ή-NMR (CDClj a fő anomer protonok δ-értéke:

6,50; 5,79; 5,51; 5,48; 4,29; 4,25 ppm.

21. preparátum

Fenil-2,4,6-tri-0-acetil-3-0-metil-l-tio-a.-D-glükopiranozid [(22) képletű vegyület]

5,23 g (14,4 mmol) (1) képletű 1,2,4,6-tetra-O-acetil-3-O-metil^-D-glükopiranózt feloldunk 45 ml toluolban. Hozzáadunk 3,0 ml (28,8 mmol) tiofenolt és cseppenként hozzáadunk 1,77 ml (14,4 mmol) trifluorborán-dietil-éterátot, majd az elegyet fél órán keresztül 50 °C-on melegítjük. A reakcióelegyet ezután diklórmetánnal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 5:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,00 g 22a és 2,71 g (22β képletű vegyületet kapunk, kitermelés az előző sorrendben (17), illetve 46%.

A 22a képletű vegyület adatai: R_F 0,44, (ciklohexán/etil-acetát 3:2 térfogatarányú elegye). [a]_D +230 (c = 1, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 435 (m+Na)+; +KF,451 (M + K)+.

Ή-NMR (CDClj δ 7,46-7,27 (m, 5H, Ph), 5,89 (d,

1H, J=5,6 Hz, H-l), 5,05-4,97 (m, 2H, H-2 és

H-4), 4,49-4,42 (m, 1H, H-5), 4,25-4,18 (m, 1H,

H-6), 4,05-4,00 (m, 1H, H-6’), 3,66 (dd, 1H,

J=9,5 Hz, H-3), 3,51 (s, 3H, OCHJ, 2,16, 2,12,

2,00 (3s, 9H, 3 Ac).

Elemanalízis a Ci₉H₂₄O₈S (412,46) összegképlet alap-

ján:	C%	H%	S%
számított:	55,33	5,87	7,77
talált:	55,25	5,90	7,75

A (28) képletű oligoszacharid előállítását a 7. reakcióvázlaton szemléltetjük.

22. preparátum

Fenil-4,6-O-benzilidén-2,3-di-O-metil-l-tio-a.-Dglükopiranozid [(23) képletű vegyület]

970 mg (2,35 mmol) (22) képletű vegyületet feloldunk 18 ml metanol/diklór-metán 2:1 térfogatarányú elegyében. Az oldathoz hozzáadunk 150 ml 2 mólos nátrium-metanolát-oldatot. A reakcióelegyet fél órán keresztül szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd Dowex® 50 (H⁺) gyantával semlegesítjük, leszűrjük és bepároljuk.

Az előzőek szerint előállított nyersterméket 22 ml acetonitrilllel elegyítjük, hozzáadunk 0,7 ml (4,0 mmol) α,α-dimetil-oxi-toluolt és 51 mg (0,22 mmol) kámforszulfonsavat. Az elegyet 1 órán keresztül keverjük, 0,50 ml trietil-amin hozzáadásával semlegesítjük, majd bepároljuk.

Az így előállított nyerstermék és 163 pl (4,0 mmol) metil-jodid 9 ml Ν,Ν-dimetil-formamiddal készített oldatához 0 °C-on hozzáadunk 73 mg (2,80 mmol) nátrium-hidridet. Az elegyet 1 órán keresztül keverjük, majd metanolt adunk hozzá. Etil-aceáttal extraháljuk, vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk, 840 mg szilárd (23) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés: 94%,

HU 223 691 Bl olvadáspont: 178 °C. [a]_D +330 (c=l, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 411,4 (MANa)⁺; +KF, 427,4 (M+K)+.

H-NMR (CDClj) δ 7,50-7,24 (m, 1H, 2 Ph), 5,71 (d, 1H, J=3,4 Hz, H-l), 5,52 (s, 1H, C₆H₅CH), 3,62 (s, 3H, OCH₃), 3,55 (s, 3H, OCH₃). Elemanalízis a C₂₁H₂₄O₅S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	64,92	6,23	8,25
talált:	64,87	6,17	7,85

23. preparátum

Fenil-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-l-tio-v.-D-glükopiranozid [(24) képletű vegyület]

792 mg (0,47 mmol) (23) képletű vegyületet a 4.

preparátumban leírt eljárással reagáltatunk. A terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 7:2, majd 2:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 318 mg (24) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 80%. [a]_D +243 (c=l, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 413 (M+Na)+; +KF, 429 (M+K).

H-NMR (CDC1₃) δ 7,52-7,22 (m, 1H, 2 Ph), 5,71 (d, 1H, J = 5,3 Hz, H-l), 3,64 és 3,49 (2s, 6H, 2 OCH₃), 3,36 (dd, (1H, H-3).

Elemanalízis a C₂₁H₂₆O₅S (390,50) összegképlet alap-

ján:	C%	H%	S%
számított:	64,59	6,71	8,21
talált:	64,05	6,88	7,74

24. preparátum

Feml-0-(2,6-di-0-benzil-4-0-levulinil-3-0-metila.-D-glükopiranozil)-(1^4)-O-(2-O-acetil-6-Obenzil-3-O-metil-$-glükopiranozil)-(1 -+4)-6-0benzil-2,3-di-O-metil-l-tio-eL-D-glükopiranozid [(25) képletű vegyület]

436 mg (0,47 mmol) (13) képletű vegyület és 153 mg (0,39 mmol) (24) képletű vegyület elegyét az 1. számú általános eljárással reagáltatjuk. A terméket Sephadex® LH-20 kolonnán tisztítjuk, eluensként etanol/diklór-metán 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 309 mg tiszta (25) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 68%. [a]_D+144 (c=l, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 1175 (M + N)⁺; +KF, 1191 (M+K)+.

H-NMR (CDC1₃) δ 7,51-7,21 (m, 25H, 5 Ph), 5,73 (d, 1 H, J=5,2 Hz, H-l), 5,48 (d, 1H, J=3,5 Hz,

Η-1 ”), 4,46 (d, 1H, J=8 Hz, Η-1 ’), 3,7, 3,54, 3,5,

3,31 (4s, 12H, 4 OCH₃), 2,70-2,40 (m, 4H,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)C1₃), 2,16, 2,01 (2s, 6H,

Ac és O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Elemanalízis a C₆₃H₇₆O₁₆S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	65,61	6,64	2,78
talált:	65,02	6,60	2,72

25. preparátum

Metil-O-(2,6-di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metila-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(2-0-acetil-6-0benzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1 -+4)-O(6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)(l-+4)-0-benzil-2,3-di-0-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-(l-+4)-O-(3,6-di-O-acetil-2-O-benzila.-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(benzil-2,3-di-Ometil-a.-L-jód-piranoziTuronát)-(l -+4)-2,3,6-triO-benzil-a-D-glükopiranozid [(27) képletű vegyület

451 mg (0,39 mmol) (25) képletű vegyület és 434 mg (0,31 mmol) (26) képletű vegyület [lásd P. Westerduin és munkatársai, BioOrg. Med. Chem., 1, 1267 (1994)] 7,5 ml 1,2-diklór-etánnal készített elegyéhez 400 mg 4 Á-ös molakulaszita jelenlétében -25 °C-on argonatmoszférában hozzáadjuk 92 mg (0,38 mmol) Njód-szukcinimid és 37,5 pl (0,38 mmol) trifluor-metánszulfonsav 22 ml 1,2-diklór-etán és dietil-éter 1:1 térfogatarányú elegyével készített oldatát. 30 perccel később a reakcióelegyhez szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot adagolunk. Az elegyet leszűrjük, nátrium-tioszulfát-oldattal és vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot Sephadex® LH-20 kolonnán, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használva, majd szilikagél kolonnán tisztítjuk, itt eluensként ciklohexán/etil-acetát 1:1, majd 2:3 térfogatarányú elegyét használjuk. 487 mg tiszta (27) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 64%. [<x]_D +63 (c=0,54, diklórmetán). CCM, R_F 0,28, (eluens ciklohexán/etil-acetát 2:1 térfogatarányú elegye). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 2454 (M+Na)+; +KFm 2469 (M+K)+. Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,38-7,2 (m, 50H, 10 Ph), 3,56,

3,52, 3,48, 3,46, 3,44, 3,42, 3,39, 3,30, 3,17, (9s,

27H, 9 OCH₃), 2,75-2,4 (m, 4H,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,15, 1,98, 1,97, 1,87 (4s, 12H, 3 Ac és O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃); a fő anomer protonok: 5,57; 5,47; 5,30; 5,18; 4,57; 4,29; 4,08.

26. preparátum

Metil-O-(2,6-di-O-benzil-3-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(2-O-acetiI-6-O-benziT3-Ometil-C>-D-glükopiranozil)-(1^4)-0-(6-0-benzil2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(1^4)-O(benzil-2,3-di-0-metil-fi-D-glükopiranoziTurinát)-(l^>4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a.-L-jód-piranozil-urinát)-(l -+4)-2,3,6-tri-O-benzi/-a-Dglükopiranozid [(28) képletű) vegyület]

498 mg (0,2 mmol) (27) képletű vegyületről a 2.

számú általános eljárással eltávolítjuk a levulincsoportot, így 402 mg (28) képletű vegyületet kapunk, kitermelés; 84%. [a]_D + 64 (c=l, CH₂C1₂). ESIMS, pozitív mód: m/z 2352,9 (M+NH₄)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,38-7,20 (m, 50, 10 Ph), 3,67,

3,52, 3,49, 3,46, 3,44, 3,41, 3,40, 3,28, 3,17 (9s,

27H, 9 Ac), 2,65 (d, 1H, J=2,14 Hz m, OH), 1,98,

1,96, 1,87 (3s, 9H, 3 Ac); fő anomer protonok:

5,55; 5,49; 5,30; 5,18; 4,56; 4,31; 4,08.

Elemanalízis a C|₂7H₁₅₂O₄i összegképlet alapján:

	C%	H%
számított:	65,34	6,56
talált:	65,40	6,62

HU 223 691 Bl

27. preparátum

Metil-O-(2,6-di-O-benzil-4-O-levulinil-3-O-metila.-D-glükopiranozil)-(1^4)-O-(2-O-acetil-6-Obenzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[0(2,6-di-O-benzil-3-O-metil-a.-D-glükopiranozil)(l^>4)-O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-Dglükopiranozil)-(l->4)] ₄-O-(6-O-benzil-2,3-di-Ometil-a-D-glükopiranozil)-(l-s4)-O-(henzil-2,3-diO-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-(1^4)-0(3,6-di-O-acetil-2-O-benzil-a-D-glükopiranozil)(l—>4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziluronát)-(l -^4)-2,3,6-tri-O-benzil-ci-D-glükopiranozid [(29) képletű vegyület]

340 mg (1,16 mmol) (21) képletű vegyület és 256 mg (1,09 mmol) (28) képletű vegyület elegyét az 1. számú általános eljárással reagáltatjuk. A maradékot Toyopearl® HW-40 (3,2x70 cm) kolonnán tisztítjuk, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 421 mg tiszta (29) képletű izomert kapunk. Kitermelés: 76%. [a]_D +65 (c=l, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+KF, 2584,3 (M+2K)²⁺; 1736,5 (M + 3K)³⁺.

H-NMR (CDClj) δ 7,35-7,18 (m, 105H, 21 Ph),

2,75-2,4 (m, 4H, O(C:O)CN₂CH₂(C:O)CH₃),

2,15, 1,97, 1,95, 1,87, 1,84, 1,83 (68, 24H, 7 Ac és

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃); fő anomer protonok:

5,55; 5,48; 5,30; 5,18; 4,56; 4,29; 4,22; 4,08.

Az 1. példa szerinti (91) képletű poliszacharid előállítását a 8. reakcióvázlaton szemléltetjük.

28. preparátum

Metil-O-(2,6-di-O-benzil-3-O-metil-tJi-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-\)-D-glükopiranozil)-(l—>4)-[O-2,6-di-O-henzil3-O-metil-<±-D-glükopiranozil)-(l—r4)-O-(2-Oacetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozil)(1 ~>4)] ₄-O-(6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiran<jzil)-(1^4)-O-(benzil-2,3-di-()-metil-\)-Dglükopiranozil-uronát)-(l -*4)-O-(3,6-di-O-acetil2-0-benzil-u.-D-glükopiranozil)-(I^>4)-0-(benzil2,3-di-O-metil-a.-L-jód-piranozil-uronát)-(1 -+4)2,3,6-tri-O-benzil-CL-D-glükopiranozid [(30) képletű vegyület]

342 mg (0,067 mmol) (29) képletű vegyületet a 2. számú általános eljárással reagáltatunk, és így 253 mg (30) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés: 75%. [a]_D+ 59 (c=0,92, diklór-metán), ESIMS, pozitív mód: m/z+KF, 2535,6 (m+2K)²+.

H-NMR (CDC1₃) a fő anomer protonok δ-értéke:

5,55; 5,50; 5,48; 5,30; 4,56; 4,30; 4,22; 4,08.

Elemanalízis	a C₂₇₅H₃₂₈O₈₅ (4993,37) összegképlet
alapján:	C%	H%
számított:	66,57	6,60
talált:	65,09	6,57

29. preparátum

Metil-O-(2,6-di-O-benzil-4-O-levuliml-3-O-metila-D-glükopiranozil)-(1^4)-O-(2-O-acetil-6-Obenzil-3-O-metd-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O(2,6-di-O-benzil-3-O-metil-a.-D-glükopiranozil)(l-^4)-O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-Dglükopiranozil)-(l -^>4)]₆-O-(6-O-benzil-2,3-di-OmetiTa.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-0-(benzil-2,3-diO-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-(l ->4)-O(3,6-di-O-acetil-2-O-benzil-a.-D-glükopiranozil)(1^4)-(benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziluronát)-(l -^4)-2,3,6-tri-O-benzil-a-D-glükopiranozid [(31) képletű vegyület]

32,1 mg (20,6 mmol) (17) képletű vegyület és 80,7 mg (16,3 mmol) (30) képletű vegyület elegyét az 1. számú általános eljárással reagáltatjuk. A terméket Toyopearl® HW-40 kolonnán tisztítjuk, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 60 mg (31) képletű 19-mert kapunk, kitermelés: 59%. [a]_D +61 (c=0,82, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z + NaCl, 2162,4 (M + 3Na)³ + ; +KF,

2178,5 (M+3K)³⁺.

H-NMR (CDC1₃) a fő anomer protonok δ-értéke:

5,55; 5,48; 5,30; 5,18; 4,56; 4,28; 4,22; 4,08.

A 9. reakcióvázlaton a (37) képletű diszacharid előállítását mutatjuk be.

30. preparátum

Etil-0-(4,6-0-benzilidén-a-D-glükopiranozil)(1^4)-6-O-tritil-l-tio-(>-D-glükopiranozid [(33) képletű vegyület]

50,0 g (0,105 mól) (32) képletű vegyület [lásd J. Westman és M. Nilsson, J. Carbohydr. Chem., 14 (7), 949-960 (1995)] 620 ml diklór-metánnal készített szuszpenziójához argonatmoszférában hozzáadunk 35 ml (0,252 mól) trietil-amint, 29,3 g (0,105 mól) tritilkloridot és 1,28 g (10 mmol) 4-dimetil-amino-piridint. A reakcióelegyet 2 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forraljuk (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük), majd az elegyet hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, 500 ml diklór-metánnal hígítjuk, majd 10%-os hideg vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, végül telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk. Szárítás után az elegyet bepároljuk, és szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 65:35, majd 50:50 térfogatarányú elegyét használjuk. A (33) képletű nyersterméket elegendően tiszta állapotban kapjuk meg ahhoz, hogy a következő reakciólépéshez felhasználjuk. Analitikai mintát kromatográfiás eljárással tisztítunk. [a]_D +53 (c=0,74, diklórmetán). ESIMS, negatív mód: m/z 715 (M-H)-. Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,52-7,25 (m, 20H, 4 Ph), 5,42 (s, C₆H₅CH), 4,97 (d, J=3,5 Hz, H-l’), 4,40 (d,

J=9,6 Hz, H-l), 3,82 (t, J=9,3 Hz, H-3’), 3,71,

3,68 (m, 2H, H-3, H-4), 3,60 (dd, J=2,0, 11,0 Hz,

H-6a), 3,55 (td, J = 5,2, 9,7, 9,7 Hz, H-5’),

3,49-3,45 (m, 3H, H-2, H-2’, H-5), 3,38 (dd,

J=10,5 Hz, H-6’a), 3,33 (dd, H-6’b), 3,30-3,27 (m, 2H, H-4’), H-6b), 2,90-2,77 (m, 2 H,

SCH₂CH₃), 1,40-1,37 (t, 3H, CH₂CH₃). Elemanalízis a C_4üH₄₄O₁₀S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	67,02	6,19	4,47
talált:	66,83	6,19	4,19

HU 223 691 Bl

31. preparátum

Etil-O-(4,6-O-benzilidén-2,3-di-O-metil-a.D-glükopiranozil)-(1^4)-2,3-di-O-metil-6-Otritil-l-tio-$-D-glükopiranozil [(34) képletű vegyület] ml (0,536 mmol) metil-jodidot argonatmoszférában cseppenként hozzáadunk 64,1 g (33) képletű vegyület 600 ml Ν,Ν-dimetil-formamiddal készített oldatához. A reakcióelegyet 0 °C-ra hűtjük és lassan hozzáadunk 13,5 g (0,536 mól) nátrium-hidridet. A kapott szuszpenziót 2 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd 0 °C-ra hűtjük, cseppenként hozzáadunk 35 ml metanolt, újabb 2 órán keresztül keverjük, végül a reakcióelegyet 500 ml etil-acetáttal és 600 ml vízzel hígítjuk. A vizes fázist etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük, vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A (34) képletű maradék elegendően tiszta a következő reakciólépésben történő felhasználáshoz. Analitikai mintát szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással megtisztítunk, eluensként ciklohexán/aceton 70:30 térfogatarányú elegyét használjuk. [a]_D +45 (c = 0,83, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 795 (M+Na)⁺; +KF, 811 (M+K)+.

‘H-NMR (CDClj) δ 7,52-7,19 (m, 20H, 4 Ph), 5,51 (d, J=3,3 Hz, H-l’), 5,43 (s, C₆H₅CH), 4,45 (d,

J=9,8 Hz, H-l), 3,60, 3,59, 3,51, 3,49 (4s, 12H,

4OCH₃), 2,86 (q, 2H, J = 7,5 Hz, SCH₂CH₃), 1,40 (t,

3H), SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₄₄H₅₂O|₀S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	68,37	6,78	4,15
talált:	68,28	6,98	4,09

32. preparátum

Etil-O-(2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)(1-)4)-2,3-di-O-metil-l-tio-$-D-glükopiranozid [(35) képletű vegyület]

67,4 g (34) képletű nyerstermék 470 ml 60%-os vizes ecetsavval készített szuszpenzióját 2 órán keresztül 80 °C-on melegítjük. A reakcióelegyet lehűtjük, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot 1 órán keresztül reagáltatjuk 940 mg nátrium-metanolát 200 ml metanollal készített elegyével. Az oldatot ezután Dowex® 50WX4 (H+) gyantával semlegesítjük, majd leszűrjük, bepároljuk, és a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. Eluensként toluol/aceton 60:40 térfogatarányú elegyét használjuk. 27,9 g (35) képletű vegyületet kapunk, kitermelés három lépésben: 60%. [a]_D +26 (c=l,07, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 465 (M+Na)⁺; +KF, 481 (m+K)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 5,62 (d, J = 3,9 Hz, H-l),

4,35 (d, J=9,8 Hz, H-l), 3,64, 3,64, 3,59, 3,58 (4s, 12H, 4OCH₃), 1,29 (t, 3H, J = 7,4 Hz),

SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₁₈H₃₄O₁₀S.H₂O összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	46,94	7,87	6,96
talált:	47,19	7,72	6,70

33. preparátum

Etil-O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-)4)-6-0-acetil-2,3-di-0-metil-l-tio-ft-Dglükopiranozid [(36) képletű vegyület]

5,86 g (13,2 mmol) (35) képletű triói és 3,21 g (29,1 mmol) N-acetil-imidazol 120 ml 1,2-diklór-etánnal készített oldatát 16 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Az elegyhez újabb 440 mg (3,96 mmol) N-acetil-imidazolt adunk, és még 4 órán keresztül keveqük. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, majd hozzáadunk 2 ml metanolt. Az elegyet ismét 1 órán keresztül keveqük, majd 1 1 diklór-metánnal hígítjuk, 1 mólos hideg vizes sósavoldattal, hideg vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk, majd megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 3,5:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 3,97 g (36) képletű diacetátot kapunk, kitermelés: 57%. [a]_D +33 (c=l,90, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 549 (M+Na)+; +KF, 565 (M+J)+. Ή-NMR (CDC1₃) δ 551, (d, J=3,9 Hz, H-l’), 4,34 (d, J=9,8 Hz, H-l), 3,64, 3,63, 3,59, 3,56 (4s, 12H, 4OCH₃), 2,11, 2,06 (2s, 6H, 2Ac), 1,31 (t, 3H, J=7,4 Hz, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₂₂H₃₈O₁₂ összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	50,17	7,27	6,09
talált:	50,15	7,49	5,89

34. preparátum

Etil-O-(6-O-acetil-4-O-levuliml-2,3-di-0-metil-a.D-glükopiranozil)-(l^)4)-6-0-acetil-2,3-di-0-metil-l-tio-$-D-glükopiranozid [(37) képletű vegyület]

19,4 g (36,8 mmol) (36) képletű diacetát 400 ml dioxánnal készített oldatához argonatmoszférában hozzáadunk 7,53 ml (73,5 mmol) levulinsavat, 14,1 g (73,5 mmol) l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidrokloridot és 900 mg (7,35 mmol) 4-dimetilamino-piridint. A reakcióelegyet 3,5 órán keresztül keverjük, 1,5 1 diklór-metánnal hígítjuk, majd vízzel, 10%-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, ismét vízzel, majd 2%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonátoldattal, végül megint vízzel mossuk, majd megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/aceton 97:3, majd 79:21 térfogatarányú elegyét használjuk. 21,8 g (37) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 95%. [a]_D+40 (c = 0,72, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 647 (M+Na)⁺; +KF, 663 (M+K)+. ‘H-NMR (CDC1₃) δ 5,56 (d, J=3,9 Hz, H-l), 4,35 (d,

J = 9,8 Hz, H-l), 3,64, 3,60, 3,58, 3,55 (4s, 12H,

4OCH₃), 2,76-2,71 (m, 4H,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,19, 2,08, 2,07 (3s,

9H, 2 Ac és O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,31 (t,

3H, J = 7,4 Hz, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₂₇H₄₄O₁₄S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	51,91	7,10	5,13
talált:	51,88	7,05	4,96

HU 223 691 Bl

A 10. reakcióvázlaton a (38) és (40) képletű diszacharid előállítását mutatjuk be.

35. preparátum

O-(6-O-Acetil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l^>4)-6-()-acetil-2,3-di-O-metilа, $-D-glükopiranóz-triklór-acetimidát [(38) képletű vegyület]

9,53 g (15,3 mmol) (37) képletű tioglikozid 180 ml diklór-metán/dietil-éter 1:1 térfogatarányú elegyével készített oldatához hozzáadunk 1,4 ml (76,3 mmol) vizet, 6,84 g (30,5 mmol) N-jód-szukcinimidet és 0,52 g (1,98 mmol) ezüst-triflátot. A reakcióelegyhez 15 perccel később (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük) hozzáadunk 5 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot, és az elegyet 1,5 1 diklór-metánnal hígítjuk. A szerves fázist vízzel, 1 mólos vizes nátrium-tioszulfát-oldattal, 2%-os vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal mossuk, majd megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 80:40, majd 100:0 térfogatarányú elegyét használjuk. A kapott szilárd anyagot elemzés nélkül használjuk fel a következő reakciólépéshez. 7,88 g (13,6 mmol) előzőek szerint előállított vegyület 120 ml diklór-metánnal készített oldatához argonatmoszférában hozzáadunk 7,08 g (21,7 mmol) cézium-karbonátot és 6,81 ml (67,9 mmol) triklór-acetonitrilt. 40 perc elteltével (ezt az időt CCM-eljárással határozzuk meg) a reakcióelegyet leszűrjük, bepároljuk és a maradékot toluol/aceton 85/15 térfogatarányú elegyével tisztítjuk. 9,16 g (38) képletű imidátot kapunk, kitermelés két lépésben: 83%. [a]_D +118 (c=l,00, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 746 (M+Na)+; 741 (M+NH₄)⁺. Ή-NMR (CDC1₃) δ 8,66, 8,65 (2s, 1H, α és β N:H), б, 52 (d, J = 3,6 Hz, H-la), 5,70 (d, J=7,5 Hz,

Η-1β), 5,58 (d, J=3,7 Hz, H-l), 2,78-2,57 (m,

4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18, 2,07, 2,06 (3 s, 9H, 2 Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Elemanalízis a C₂₇H₄₀Cl₃NO₁₅ összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	44,18	5,63	1,98
talált:	44,14	5,61	1,97

36. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(6-O-acetil-4-O-levulinil2,3-di-0-metil-a-D-glükopiranüzil)-(í—>4)-6-0acetil-2,3-di-O-metil-a,$-D-glükopiranozid [(39) képletű vegyület]

10,6 g (16,94 mmol) (37) képletű tioglikozidot a 3. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk 4,8 ml (33,90 mmol) 2-(trimetil-szilil)-etanollal 105 ml diklórmetán/dietil-éter 1:2 térfogatarányú elegyében. A kapott maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként aceton/diklór-metán 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 9,80 g (39) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 85%. A vegyület anomerek keveréke (α/β = 65/35). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 703 (M+Na)⁺. Ή-NMR (CDClj) δ 5,58 (d, J = 3,9 Hz, H-l’), 4,94 (d, J = 3,5 Hz, H-la), 4,26 (d, J = 7,7 Hz, Η- 1β),

2,76-2,56 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,08, 2,05 (3s, 9H, 2 Ac és

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,18-0,88 (m, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,02 (s, 9H,

CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₃₀H₅₂O₁₅Si összegképlet alapján:

C%	H%
számított: 52,92	7,69
talált: 53,29	7,75
3 7. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(1^4)-6-0-acetil-2,3-diO-metil-et,$-D-glükopiranozid [(40) képletű vegyület]

9.41 g (13,82 mmol) (39) képletű vegyületet a 2. számú eljárással reagáltatjuk hidrazin-acetáttal (10 mol/mol) toluol/etanol 1:2 térfogatarányú elegyében (21 ml/mmol). A maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként aceton/toluol 60:40 térfogatarányú elegyét használjuk. 4,81 g 40a-vegyületet (kitermelés: 60%), valamint 3,06 g 40α/β keveréket (kitermelés: 37%) kapunk. A 40a vegyület jellemzői a következők: [a]_D +132 (c=0,61 diklór-metán).

All. reakcióvázlaton a (41) képletű tetraszacharid előállítását mutatjuk be.

38. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(6-O-acetil-4-O-levulinil2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(60-acetil-2,3-di-0-metil-o.-D-glükopiranozil)(1-^4)] ₂-6-O-acetil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozid [(41) képletű vegyület]

4,21 g (6,74 mmol) (37) képletű tioglikozidot 3,57 g (6,13 mmol) (40) képletű glikozilakceptorral reagáltatunk a 3. számú általános eljárás szerint diklór-metán/dietil-éter 1:2 térfogatarányú, 105 ml térfogatú elegyében. A maradékot szilikagélen kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként aceton/ciklohexán 3:1, majd 9:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 4,81 g (41) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés: 69%. [a]_D +143 (c=0,56, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 1167 (M+Na)+; +KF, 1183(M+K)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 5,57 (d, J=3,9 Hz, H-l’”), 5,44,

5.41 (2d, J = 3,8 Hz, H-l”, H-l’), 4,96 (d,

J = 3,6 Hz, H-l), 2,78-2,58 (m, 4H,

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,18, 2,12, 2,12, 2,09,

2,06 (5s, 15H, 4 Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃),

1,21-0,97 (m, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (s,

9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₅₀H₈₄O₂₇Si összegképlet alapján:

	C%	H%
számított:	52,44	7,39
talált:	52,29	7,46

A 12. reakcióvázlaton a (42) képletű tetraszacharid előállítását mutatjuk be.

39. preparátum

Etil-O-(6-O-acetil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-aLD-glükopiranozil)-(l-r4)-[O-(6-O-acetil-2,3-di-O18

HU 223 691 Bl metil-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)]₂-6-O-acetil-2,3di-O-metil-l-tio-$-D-glükopiranozid [(42) képletű vegyület]

1,10 g (1,52 mmol) (38) képletű imidát és 806 mg (1,38 mmol) (36) képletű glikozilakceptor 22 ml diklór-metán/dietil-éter 1:2 térfogatarányú elegyével készített oldatát az 1. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk. A maradékot szilikagélen kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 2,5:1, majd 3:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,12 g (42) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 71%. [a]_D +95 (c=l,00, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 1111 (M+Na)⁺; +KF, 1127 (M+J)+.

Ή-NMR (CDClj) Ő 5,55 (d, J=3,9 Hz, Η-1 ”’), 5,39,

5,37 (2d, J=3,8 és 3,9 Hz, H-l”, Η-1 ’), 4,34 (d,

J=9,7 Hz, H-l), 2,84-2,51 (m, 6H, SCH₂CH₃,

O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,10, 2,09, 2,08,

2,04 (5s, 15H, 4 Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃),

1,30 (t, 3H, J=7,4 Hz, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₄₇H₇₆O₂₆S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	51,83	7,03	2,94
talált:	51,66	7,02	2,94

A 13. reakcióvázlaton a (47) képletű poliszacharid előállítását ábrázoljuk.

40. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-[O-(6-O-acetil-2,3-di-Ometil-a-D-glükopiranozil]-(1^4)] ₃-6-O-acetil2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(43) képletű vegyület]

4,71 g (4,11 mmol) (41) képletű vegyületet a 37. preparátumban leírtak szerint reagáltatunk, és így oszlopkromatográfiás eljárás után, amelynél eluensként ciklohexán/aceton 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk, 4,11 g (43) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés: 95%. [a]_D +154 (c=0,63, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 1069 (M+Na)⁺; +KF, 1085 (M+K)⁺.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 5,46, 5,46, 5,41 (2d, 3H,

J = 3,9 Hz, H-l’, H-l”, H-l’”), 4,95 (d,

J = 3,5 Hz, H-l), 2,81 (d, J = 4,4 Hz, OH),

2,1 1, 2,09, 2,08 (3s, 12H, 4 Ac), 1,19-0,97 (m, 2H, OOCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (s, 9H,

OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₄₅H₇₈O₂₅Si összegképlet alapján:

C%	H%
számított: 51,61	7,51
talált: 51,39	7,54
41. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(6-O-acetil-4-O-levulinil2,3-di-O-metil-<j.-D-glükopiranozil)-(1^4)-[O-(6O-acetil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)(1^>4)] ₆-6-O-acetil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozid [(44) képletű vegyület]

3,86 g (3,54 mmol) (42) képletű tioglikozidot és

3,60 g (3,44 mmol) (43) képletű glikozilakceptort a 38. preparátumban leírt eljárással reagáltatunk. A maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/aceton 7:2, majd 2:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 5,71 g (44) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 80%. [a]_D+161 (c=0,65, diklórmetán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg = 2072,8, kémiai tömeg = 2074,2, kísérleti tömeg =2074+1 tömegegység.

Ή-NMR (CDClj) δ 5,54 (d, J=3,8 Hz, H-l NR egység), 5,47-5,40 (m, 6H, H-l), 4,95 (d, J=3,7 Hz, H-l R egység), 2,84-2,51 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,13, 2,12, 2,11, 2,11, 2,08, 2,05 (7s, 27H, 8 Ac és O(C: O)CH₇CH₂(C: O)CH₃), 1,18-0,97 (m, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (s, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₉₀H₁₄₈O₅₁Si összegképlet alapján:

C%	H%
számított: 52,12	7,19
talált: 51,98	7,25
42. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-[O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metil-u.-D-glükopiranozil)-(l-x4j] ₇-6-O-acetil-2,3-diO-metil-a-D-glükopiranozid [(45) képletű vegyület]

3,00 g (1,45 mmol) (44) képletű vegyület 5 ml piridinnel készített oldatához 0 °C-on hozzáadunk 7,3 ml 1 mólos ecetsav/piridin 3:2 térfogatarányú elegyével készített hidrazin-hidrát-oldatot. A reakcióelegyet 20 percig keveijük, majd bepároljuk, 400 ml diklórmetánnal hígítjuk, 10%-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, majd 2%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk. Megszárítjuk, bepároljuk és a maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk. 2,43 g (45) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 85%. [a]_D +167 (c=0,57, diklórmetán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg= 1974,8, kémiai tömeg= 1976,1, kísérleti tömeg= 1975,4+2 atomtömegegység.

Ή-NMR (CDClj) δ 5,47-5,40 (m, 7H, H-l), 4,95 (d,

J=3,7 Hz, H-l Regység), 2,80 (d, J=4,4 Hz, OH),

2,13, 2,11, 2,10, 2,08, 2,07 (5s, 24H, 8 Ac),

1,18-0,97 (m, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (s,

9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalizis a C₈₅H₁₄₂O₄₉Si összegképlet alapján:

C%	H%
számított: 51,66	7,24
talált: 51,32	7,26
43. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(6-O-acetil-4-O-levuliml2,3-di-O-metil-et-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(6O-acetil-2,3-di-()-metil-cj.-D-glükopiranozil)(1—^4)] _l0-6-O-acetil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(46) képletű vegyület]

1,35 g (1,24 mmol) (42) képletű vegyületet és

2,38 g (1,20 mmol) (45) képletű vegyületet a 38. preparátumban ismertetett eljárással reagáltatunk. A maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/aceton 4:3 térfogatarányú elegyét használ19

HU 223 691 Bl juk. 2,56 g (46) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 71%. [a]_D +166 (c=0,88, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=3001,3, kémiai tömeg=3003,2, kísérleti tömeg=3004±l atomtömegegység.

H-NMR (CDClj) δ 5,54 (d, J = 3,8 Hz, H-l NR egység), 5,47-5,40 (m, 1H, H-l), 4,95 (d, J=3,7 Hz, H-l R egység), 2,81-2,51 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,13, 2,12, 2,11, 2,11, 2,08, 2,05 (7s, 39H, 12 Ac és O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,17-0,96 (m, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (s, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₁₃₀H_2I2O₇₅Si összegképlet alapján:

c%	H%
számított: 51,99	7,12
talált: 51,63	7,12
44. preparátum

(6-O-Acetil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metilа. -D-glükopiranozil)-(l-24)] _]n-6-O-acetil-2,3-diO-metil-a.,$-glükopiranóz-triklór-acetimidát [(47) képletű vegyület] (a) 400 mg (0,133 mmol) (46) képletű glikozid 2 ml trifluor-ecetsav/dikór-metán 2.1 térfogatarányú elegyével készített oldatát 1,5 órán keresztül keverjük. A reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük. A reakcióelegyet 12 ml toluol/n-propil-acetát 2:1 térfogatarányú elegyével hígítjuk, bepároljuk és 5 χ 10 ml toluollal együtt ledesztilláljuk. A maradékot kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként aceton/ciklohexán 4:3 térfogatarányú elegyét használjuk, 364 mg szilárd anyagot kapunk.

(b) Az előző lépés szerint előállított szilárd anyagot

2,5 ml diklór-metánban feloldjuk, hozzáadunk 65 mg (0,200 mmol) cézium-karbonátot és 63 ml (0,620 mmol) triklór-acetonitrilt, majd az elegyet

2,5 órán keresztül keverjük, celitszűrőn leszűrjük, bepároljuk és a maradékot szilikagélen kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/aceton/trietilamin 50:50:0,1 térfogatarányú elegyét használjuk. 348 mg (47) képletű imidátot kapunk, kitermelés: 86%. [a]_D +185 (c=0,91, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg = 3044,l, kémiai tömeg=3047,3, kísérleti tömeg = 3046,9±0,2 atomtömegegység.

H-NMR (CDC1₃) δ 8,61, 8,58 (2s, 1H, a és β N:H), б, 35 (d, J=3,7 Hz, H-la R egység), 5,59 (d,

J=7,5 Hz, H-Ιβ R egység), 5,38 (d, J=3,8 Hz,

H-l NR egység), 5,32-5,25 (m, 10H, H-l),

2,64-2,40 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃),

2,02, 1,96, 1,95, 1,94, 1,93, 1,89 (6s, 39H, 12 Ac és

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Elemanalízis a C₁₂₇H₂₀₀Cl₃NO₂₅ összegképlet alapján:

	C%	H%	N%
számított:	50,06	6,61	0,46
talált:	49,93	6,52	0,42

A 14. ábrán az 50. képletű oligoszacharid szintézisét ábrázoljuk.

45. preparátum (6-O-Acetil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metila.-D-glükopiranozil)-(l—>4)]₂-6-O-acetil- 2,3-di-Ometil-a, $-D-glükopiranöz-triklór-acetimidát [(48) képletű vegyület]

200 mg (0,174 mmol) (41) képletű vegyületet a 44. preparátumban leírtak szerint reagáltatunk. A reakcióelegyet szilikagélen kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 230 mg (48) képletű imidátot kapunk, kitermelés: 77%. ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 1210(M+Na)⁺; +KF, 1226 (M+K)+.

H-NMR (CDC1₃) δ 8,66-8,64 (2s, 1 Η, a és β

N:H), 6,51 (d, J = 3,6 Hz, H-la), 5,71 (d, J = 7,5 Hz, Η—1β), 2,90-2,52 (m, 4H,

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,17, 2,11, 2,11, 2,09,

2,05 (5s, 4 Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

46. preparátum

Metil-O-(6-O-acetil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metila.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(6-O-acetil-2,3-diO-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)] _}-O-(benzil2,3-di-0-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-(l^>4)0-(3,6-di-0-acetil-2-0-benzil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(benzil-2,3-dimetil-a.-L-jód-piranozil-uronát)-(1 -24)-2,3,6-tri-O-benzil-ti-D-glükopiranozid [(49) képletű vegyület] mg (0,061 mmol) (48) képletű imidátot és 82 mg (0,059 mmol) (26) képletű glikozilakceptort a 39. preparátumban leírt eljárással reagáltatunk. A vegyületet oszlopkromatográfiás eljárással Sephadex® LH-20 kolonnán tisztítjuk, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk, majd a tisztítást szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással folytatjuk, eluensként toluol/aceton 3:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 98 mg (49) képletű származékot kapunk, kitermelés: 69%. [a]_D +95 (c = l,01, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=2414,97, kémiai tömeg=2416,54, kísérleti tömeg=2416,2. H-NMR (CDC1₃) δ 7,43-7,20 (m, 30H, 6 Ph), 5,55 (d, J=3,9 Hz, H-l NR egység), 5,50 (d, J=3,9 Hz,

H-l NR-3 egység), 5,44 (5,38 (2d, J=3,7 és

3,9 Hz, H-l NR-1 egység, NR-2 egység), 5,29 (d,J=6,8Hz, H-l R-l egység), 5,17 (d, J=3,5 Hz,

H-l R-2 egység), 4,56 (d, J=3,7 Hz, H-l R egység), 4,10 8d, J=7,9 Hz, H-l R-3 egység), 2,81-2,50 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,15, 2,11, 2,09, 2,05, 2,00 (7s, 21H, 6 Ac és O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Elemanalízis a C₁₂₀H₁₅₈O₅₁ összegképlet alapján:

C%	H%
számított: 59,63	6,59
talált: 59,23	6,58
47. preparátum

Metil-[O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l—>4)]₄-O-(benzil-2,3-di-O-metil-\^,>-Dglükopiranozil-uronát)-(l -24)-0-(3,6-di-O-acetil2-O-benzil-a.-D-glükopiranozil)-(l-24)-O-(benzil20

HU 223 691 Bl

2.3- di-O-metil-a-L-jód-piranozil-urnnát-(l-r4)2,3,6-tri-0-benzil-a.-D-glükopiranozid [(50) képletű vegyület]

120 mg (0,050 mmol) (49) képletű oktaszacharidot a

37. preparátumban leírt eljárással reagáltatunk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 3:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 95 mg (50) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 83%. [a]_D +80 (c=0,62, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=2316,9, kémiai tömeg=2318,4, kísérleti tömeg=2318,2+0,4 atomtömegegység.

Ή-NMR (CDClj) δ 7,42-7,12 (m, 30H, 6 Ph), 5,50,

5,46, 5,43, 5,40 (4d, J=3,9, 3,9, 3,7, 3,7 Hz,

H-l NR egység, NR-1 egység, NR-2 egység,

MR-3 egység), 2,14, 2,10, 2,09, 2,08, 2,00, 1,88 (6s, 18H, 6Ac).

Elemanalízis a C|_I5Hi₅₂O₄9 összegképlet alapján:

C% H% számított: 59,57 6,60 talált: 59,49 6,61

A 15. reakció vázlaton a (97) képletű, 4. példában előállított poliszacharid szintézisét mutatjuk be.

48. preparátum

Metil-O-(6-O-acetil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metilv.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(6-O-acetil-2,3-diO-metil-(t-D-glükopiranozil)-(l —>4)] _t -O-(benzil2.3- di-()-metil-\\-D-glükopiranozil-uronát)-(l^4)O-(3,6-di-O-acetil-2-O-benzil-(i-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a.-L-jöd-piranozil-uronát)-(l ->4)-2,3,6-tri-O-benzil-a-D-glükopiranozid [(51) képletű vegyület] [(51) képletű vegyület] mg (0,027 mmol) (47) képletű imidátot a 39. preparátumban ismertetett eljárással 62 mg (0,027 mmol) (50) képletű glikozil-acetonnal reagáltatunk. A maradékot először Toyopearl® HW-40 kolonnán, majd szilikagél kolonnán tisztítjuk, eluensként ciklohexán/aceton 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 71 mg (51) képletű származékot kapunk, kitermelés: 51%, nem optimalizáltuk. [a] +136 (c=0,95, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=5200,11, kémiai tömeg=5203,39, kísérleti tömeg=52O3,5.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,42-7,18 (m, 30H, 6 Ph), 5,54 (d, J=3,8 Hz, H-l NR egység), 5,51-5,40 (m,

H-l), 5,30 (d, J=6,8 Hz, H-l R-l egység),

5,17 (d, J = 3,5 Hz, H-l R2 egység), 4,56 (d,

J=3,7 Hz, H-l R egység), 4,09 (d, J=7,9 Hz,

H-l R-3 egység), 2,85-2,53 (m, 4H,

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,17, 2,16, 2,13, 2,11,

2,08, 2,05, 2,00, 1,88 (8s, 57H, 18 Ac és

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Elemanalízis a C₂4₀H₃₅₀O₁₂₃.4H₂O összegképlet alap-

ján:	C%	H%
számított:	54,64	6,84
talált:	54,51	6,79

A 16. reakcióvázlaton az (57) képletű diszacharid szintézisét mutatjuk be.

49. preparátum

Etil-0-(4,6-0-p-metoxi-benzilidén-a-D-glükopiranozil)-(1^4)-tio-[¹i-D-glükopiranozid [(53) képletű vegyület] °C-on argonatmoszférában 35,8 ml (0,21 mól) ánizsaldehid-dimetil-acetált és 4,44 g (19,1 mmol) kámforszulfonsavat adunk 73,89 g (0,19 mól) 52. számú vegyület [lásd W. E. Dick Jr. és J. E. Hodge, Methods in Carbohydrate Chemistry, 7, 15-18 (1976)] 990 ml acetonitril/N,N-dimetil-formamid 3,5:1 térfogatarányú elegyével készített oldatához. A reakcióelegyet 1,5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd 2,96 ml (21,0 ekv.) trietil-amin hozzáadásával semlegesítjük. Az elegyet bepároljuk, a kapott szirupot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, eluensként diklór-metán/metanol 100:0, majd 50:50 térfogatarányú elegyét használjuk. 58,6 g (53) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 61%, nem optimalizáltuk. [a]_D+37 (c=l,03, metanol). ESIMS, negatívmód: m/z, 503 (M-H)~.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,41, 6,89 (2d, 4H, CH₃OC₆H₄),

5,51 (s, CHC₆H₄), 5,20 (d, J=3,6 Hz, H-l’), 4,39 (d, J=7,l Hz, H-l), 3,78 (s, 3H, CH₃OC₅H₄), 2,75 (q, 2H, J = 7,0 Hz, SCH₂CH₃), 1,29 (t, 3H,

SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₂₂H₃₂0i,S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	52,37	6,39	6,35
talált:	52,15	6,61	5,84

50. preparátum

Etil-O-(2,3-di-O-acetil-4,6-p-metoxi-benzilidén-aD-glükopiranozil)-(l -^4)-2,3,6-tri-O-acetil-l-tiofi-D-glüköpiranozid [(54) képletű vegyület]

47,22 g (93,6 mmol) (53) képletű vegyület 450 ml diklór-metánnal készített szuszpenziójához 0 °C-on cseppenként hozzáadunk 65 ml (0,47 mól) trietil-amint és 89 ml (0,94 mól) ecetsavanhidridet. Ezután a reakcióelegyhez 5,71 g (46,8 mmol) 4-dimetil-amino-piridint adunk, és 1,5 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakciót 45 ml (1,12 mól) metanol hozzáadásával leállítjuk, majd az elegyet 10%-os hideg vizes kálium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, majd telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk. A szerves fázist megszárítjuk, bepároljuk és ciklohexán/etil-acetát elegyből kristályosítjuk, 64,9 g (54) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 97%. [a]_D +21 (c=l,00, diklór-metán). Olvadáspont: 213-215 °C. ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 737 (M+Na)+, +KF, 753 (M+K)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,34, 6,86 (2d, 4H, CH₃OC₆H₄), 5,43 (s, CHC₆H₄), 5,34 (d, J=4,l Hz, H-l’), 4,54 (d, .1=9,9 Hz, H-l), 3,78 (s, 3H, CH₃OC₆H₄), 2,74-2,60 (m, 2H, SCH₂CH₃), 2,10, 2,06, 2,03, 2,01 (4s, 15H, 5 Ac), 1,26 (t, 3H, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₃₂H₄₂O₁₆S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	53,78	5,92	4,49
talált:	53,74	6,08	4,40

HU 223 691 Β1

51. preparátum

Etil-O-(2,3-di-O-acetil-4-p-metoxi-benzil-a-D-gIükopiranozil)-(l -)4)-2,3,6-tri-O-aceti/-l-tio^-Dglükopiranozid [(55) képletű vegyület] és etil-O(2,3-di-O-acetil-4-para-metoxi-benzil-a-D-glükopiranozil)-(l-^>4)-2,3-di-O-acetil-l-tio-$-D-glükopiranozid [(56) képletű vegyület]

5,0 g (35,0 mmol) (54) képletű vegyület, 20,4 g (0,28 mól) borán-trimetil-amin komplex és 33 g 4 Á-ös molekulaszita 810 ml toluollal készített szuszpenzióját argonatmoszférában 1 órán keresztül keverjük. Az elegyet 0 °C-ra hűtjük és lassan hozzáadunk 14,0 g (0,11 mól) alumínium-kloridot. A kapott reakcióelegyet 25 percig keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd az elegyet hideg 20%os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldatba öntjük és 1 órán keresztül 0 °C-on keverjük, majd celitszűrőn leszűrjük. A szerves fázist vízzel, 2%-os vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal, majd ismét vízzel mossuk, szárítjuk és bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, és így 7,37 g (55) képletű vegyületet (kitermelés: 29%, nem optimalizált) és 1,36 g (56) képletű vegyületet (kitermelés: 6%) kapunk. Az (55) képletű vegyületből analitikai mintát ciklohexán/etil-acetát elegyből kristályosítunk. [a]_D +30 (c=l,00, diklór-metán). Olvadáspont: 151-153 °C. ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 739 (M+Na)+, +KF, 755 (M+K)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,19, 6,87 (2d, 4H, CH₃OC₆H₄),

5,36 (d, J=3,5 Hz, Η-1 ’), 4,54 (s, 2H, C₆H₄CH₂),

4,53 (d, J = 9,0 Hz, H-l), 2,70-2,65 (m, 2H,

SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₃₂H₄₂O₁₆S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	53,62	6,19	4,47
talált:	53,67	6,21	4,43
Az (56)	képletű	vegyület	adatai: [a]_D +19

(c=l,l 1, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 697 (M+Na)+, +KF, 713 (M+K)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,17, 6,84 (2d, 4H, CH₃OC₆H₄),

5,36 (d, J=4,5 Hz, H-l’), 4,54 (d, J=10,l Hz, H-l, 4,49 (s, 2H, C₆H₄CH₂), 2,69-2,64 (m, 2H, SCH₂CH₃), 2,02, 2,01, 2,00, 1,96 (4s, 12H, 4 Ac), 1,25 (t, 3H, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₃₀H₄₂O|₅ összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	53,40	6,27	4,75
talált:	53,29	6,39	4,53

52. preparátum

Etil-O-(2,3-tri-O-acetil-4-para-metoxi-benzil-a-Dglükopiranozil)-( 1-)4)-2,3,6-tri-O-acetd-l-tio-fiD-glükopiranozid [(57) képletű vegyület]

5,6 g (7,77 mmol) (55) képletű vegyület, 1,19 ml (8,54 mmol) trietil-amin és 190 mg (1,55 mmol) 4-dimetil-amino-piridin 40 ml diklór-metánnal készített elegyéhez 0 °C-on hozzáadunk 1,47 ml (15,5 mmol) ecetsavanhidridet. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 40 percig keveijük (a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük), majd az elegyet 50 ml diklór-metánnal hígítjuk, és hideg 10%-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, vízzel, majd telített vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal, végül ismét vízzel mossuk. A szerves fázist megszárítjuk, bepároljuk és szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 35:65 térfogatarányú elegyét használjuk. 5,66 g (57) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 96%. [a]_D +44 (c=l,03, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z, +NaCl, 781 (M+Na)⁺, +KF, 797 (M+K)⁺. Ή-NMR (CDClj) δ 7,15, 6,85 (2d, 4H, CH₃OC₆H₄),

5,30 (d, J=4,2 Hz, H-l’), 4,53 (d, J=10,0 Hz, H-l), 2,69-2,64 (m, 2H, SCH₂CH₃), 2,09, 2,07, 2,04, 2,01, 2,00, 1,98 (6s, 18H, 6 Ac), 1,25 (t, 3H, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₃₄H₄₆O₁₇S összegképlet alapján:

	C%	H%	S%
számított:	53,82	6,11	4,22
talált:	53,77	6,24	4,09

A 17. reakcióvázlaton a (62) képletű triszacharid előállítását mutatjuk be.

53. preparátum

Etil-4,6-O-benzilidén-2,3-di-O-metil-l-tio-$-Dglükopiranozid [(59) képletű vegyület)

2,59 g (8,29 mmol) (58) képletű vegyület [lásd A.

F. Bochkov és munkatársai, Izv. Akad. Nauk. SSSR, Ser Khim. 1, 179 (1968)] és 1,70 ml (19,9 mmol) metiljodid 25 ml Ν,Ν-dimetil-formamiddal készített elegyéhez 0 °C-on hozzáadunk 500 mg (19,9 mmol) nátriumhidridet, majd a reakcióelegy hőmérsékletét hagyjuk 20 °C-ra emelkedni. Az elegyet 30 percig keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd metanolt adunk hozzá. A reakcióelegyet vízre öntjük és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist 1 mólos vizes nátrium-tioszulfát-oldattal, majd vízzel mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel eldörzsöljük és így 0,42 g (59) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés: 15%. Az anyalúgot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 12:1 térfogatarányú elegyét használjuk, majd a terméket kristályosítjuk, és így további 1,6 g (59) képletű vegyületet kapunk. Összes kitermelés: 71%. Olvadáspont 108 °C. [a]_D-78 (c=l,00 diklórmetán). LSIMS, pozitív mód: m/z tioglicerol+NaCl, 363 (M+Na)⁺; tioglicerol+KF, 379 (M + K)⁺. Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,51-7,33 (m, 5H, Ph), 5,52 (s,

1H, C₆H₅CH), 4,45 (d, 1H, J=9,8 Hz, H-l), 3,64 (s, 3H, OCH₃), 3,62 (s, 3H, OCH₃), 2,78-2,68 (m, 2H, SCH₂CH₃), 1,31 (t, 3H, J=2,7 Hz, SCH₂CH₃).

Elemanalízis a C₁₇H₂₄O₅S (340,44) összegképlet alap-

ján:	C%	H%	S%
számított:	59,98	7,11	9,42
talált:	59,91	7,15	8,96

54. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-4,6-benzilidén-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(60) képletű vegyület]

23,0 g (67,5 mmol) (59) képletű vegyületet és

19,4 ml (135 mmol) 2-(trimetil-szilil)-etanolt feloldunk

HU 223 691 BI

345 ml dietil-éter és diklór-metán 2:1 térfogatarányú elegyében, majd hozzáadunk 11 g 4 Á-ös molekulaszitát. A reakcióelegyet 1 órán keresztül 25 °C-on keverjük, majd hozzáadunk 497 g (220 mmol) N-jód-szukcinimidet, majd 0 °C-on hozzáadunk 2,20 g (8,78 mmol) ezüst-triflátot. Az elegyet 20 percig keveijük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá. Az elegyet diklór-metánnal hígítjuk, celitszűrőn leszűrjük, vizes 1 mólos nátrium-tioszulfát-oldattal, majd vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohetán/etil-acetát 15:1, majd 5:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 4,20 g (60β) vegyületet kapunk (kitermelés: 15%) és 8,40 g (60a) vegyületet kapunk (kitermelés: 31%).

A (60a) vegyület adatai: [a]_D +96 (c=0,4, diklórmetán). ESIMS, pozitív mód: m/z, 419 (M+Na)+; 435 (M+K)⁺.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,52-7,35 (m, 5H, Ph), 5,54 (s,

1H, C₆H₅CH), 4,98 (d, 1H, J=3,7 Hz, Η-1), 3,64 (s, 3H, OCH₃), 3,62 (s, 3H, OCH₃), 1,24-0,96 (m,

2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃.

Elemanalizis a C₂₀H₃₂O₆S összegképlet alapján:

c%	H%
számított: 60,58	8,13
talált: 60,26	8,39
55. preparátum

2-(TrimetU-szilil)-etil-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a.D-glükopiranozid [61) képletű vegyület]

21,1 g (53,3 mmol) (60) képletű vegyületet feloldunk 154 ml diklór-metánban. Szobahőmérsékleten hozzáadunk 34 ml (213 mmol) trietil-szilánt, majd cseppenként hozzáadjuk 16,3 ml (213 mmol) trifluorecetsav és 0,49 ml (3,47 mmol) trifluor-ecetsavanhidrid keverékét. A reakcióelegyet 2 órán keresztül keverjük, majd lúgos pH eléréséig 1 mólos vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. Dekantálás után a vizes fázist etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük, megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/aceton 14:1, majd 12:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 12,5 g (61) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 59%. [a]_D +100 (c=l,45, diklórmetán).

Ή-NMR δ 7,40-7,20 (m, 5H, Ph), 4,98 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l), 3,62 (s, 3H, OCH₃), 3,49 (s, 3H, OCH₃), 1,14-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₂₀H₃₀O₆Si összegképlet alapján:

C%	H%
számított: 60,27	8,60
talált: 60,18	8,81
56. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(2,3,6-tri-O-acetil-4-Opara-metoxi-benzil-v.-D-glükopiranozil)-(1^4)-0(2,3,6-tri-O-acetil-ft-D-glükopiranozil)-(I->4)-6O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [62) képletű vegyület]

19,1 g (25,1 mmol) (57) képletű tioglikozid és 7,5 g (18,7 mmol) (61) képletű glikozilakceptor elegyét a 3. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk, és így szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással végzett tisztítás után, amelynek során eluensként diklór-metán/aceton 20:1, majd 10:1 térfogatarányú elegyét használjuk,

19,7 g (62) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 95%. [a]_D +90 (c= 1,15, diklór-metán).

Elemanalízis a C₅₂H₇₄O₂₃Si (1095,24) összegképlet alapján:

C% H% számított: 57,03 6,81 talált: 57,38 6,85

A 18. reakcióvázlaton mutatjuk be a (66) képletű oligoszacharid előállítását.

57. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(2,3,6-tri-O-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l^r4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-§-Dglükopiranozil)-(l-+4)-6-0-benzil-2,3-di-0-metila-D-glükopiranozid [(63) képletű vegyület]

19,7 g (18,0 mmol) (62) képletű vegyületet a 4. számú általános eljárás szerint reagáltatunk, és így a kapott termék szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással történő tisztítása után, amelynek során eluensként toluol/aceton 3:1, majd 2:1 térfogatarányú elegyét használjuk, 11,2 g (63) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés a három lépésre: 79%. [a]_D +95 (c= 1,15, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 829 (M+Na)+; +KF, 845 (M+K)+.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,34-7,25 (m, 5H, Ph), 5,60 (d, 1H, J=3,8 Hz, H-l”), 4,96 (d, 1H, J=3,8 Hz, H-l), 4,29 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H-l’), 1,08-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

58. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(2,3,6-tri-O-acetiI-4-Opara-metoxi-benzil-a-D-glükopiranozil)-(1^4)-O(2,3,6-tri-O-acetil-$-D-glükopiranezil)-(l-+4)(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(1^4)-O(2,3,6-tri-0-metil-fi-D-glükopiranozil)-(1^4)-6-0benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(64) képletű vegyület]

6,87 g (9,10 mmol) (57) képletű tioglikozid és

6,67 g (8,30 mmol) (63) képletű glikozilakceptor elegyét a 3. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk, majd a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 2:5 térfogatarányú elegyét használjuk. 10,7 g (64) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 86%. [a]_D +90 (c=0,83, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: m/z+NaCl, 1525 (M+Na)+; +KF, 1541 (M+K)+.

Ή-NMR (CDClj) δ 7,33-7,25 (m, 5H, Ph),

7,15-6,84 (m, 4H, C₆H₄OCH₃), 5,56 (d, 1H, J=3,9 Hz, H-l”), 5,29 (d, 1H, J=4,0 Hz, H-l’”), 4,97 (d, 1H, J = 3,7 Hz, H-l), 4,71 (d, 1H, J = 8,l Hz, H-l’”), 4,27 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l’),

HU 223 691 Bl

1,08-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₇₀H_l06O₃₃Si (1503,69) összegképlet alapján:

C% H% számított: 55,91 7,11 talált: 56,05 7,24

59. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-(l—>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-ft-Dglükopiranozil)-(l^>4)] ₂-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(65) képletű vegyület]

10,7 g (7,2 mmol) (64) képletű vegyületet a 4. számú általános eljárással reagáltatunk, majd a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 2:1, majd 6:5 térfogatarányú elegyét használjuk. 6,50 g (65) képletű vegyületet kapunk, kitermelés a három lépésre: 74%. [a]_D +102 (c=0,68 m diklór-metán).

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,25 (m, 5H, Ph), 5,65 (d, 1H, J=3,8 Hz, Η-Γ”), 5,62 (d, 1H, J=3,8 Hz, H-l”), 4,98 (d, 1H, J=3,7 Hz, H-l), 4,31 (d, 1H, J=8,l Hz, H-l’”), 4,29 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l’), 1,08-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₅₆H₉₈O₂₆Si (1215,48) összegképlet

alapján:	C%	H%
számított:	55,34	8,13
talált:	55,31	8,19
60. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(2,3,6-tri-O-acetil-4-Opara-metoxi-benzil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O(2,3,6-tri-O-acetil-fi-D-glükopiranozil)-(l~+4)-[O(2,3,6-tri-0-metil-a-D-glükopiranozil)-(1-+4)-0(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l-+4)[ ₂-6O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(66) képletű vegyület

4,03 g (5,31 mmol) (57) képletű tioglikozid és 5,78 g (4,75 mmol) (65) képletű glikozilakceptor elegyét a 3. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk, majd a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 5:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 8,63 g (66) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 95%. [a]_D +94 (c=0,74, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg= 1910,83, kémiai tömeg= 1912,14, kísérleti tömeg= 1911,61+0,12 atomtömegegység.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,25 (m, 5H, Ph),

7,15-6,83 (m, 4H, C₆H₄OCH₃), 5,62 (d, 1H,

J = 3,8 Hz, H-l R-2 egység), 5,60 (d, 1H,

J=3,8 Hz, H-l NR-2 egység), 5,30 (d, 1H,

J=4,0 Hz, Η-1 NR egység), 4,98 (d, 1H, J=3,7 Hz,

H-l R egység), 4,71 (d, 1H, J = 7,9 Hz,

H-l NR-1 egység), 4,30 (d, 1H, J=8,l Hz, H-l C egység), 4,29 (d, 1H, J=8,4 Hz, H-l R-l egység), 2,08 (s, 3H, Ac), 2,07 (s, 3H, Ac), 2,03 (s, 3H, Ac), 1,99 (s, 3H, Ac), 1,98 (s, 3H, Ac), 1,96 (s, 3H, Ac),

Elemanalízis a C₈₈H₁₃₈O₄₃Si (1912,14) összegképlet alapján:

C% H% számított: 55,28 7,27 talált: 55,61 7,35

A 19. reakcióvázlaton mutatjuk be a (72) képletű oligoszacharid előállítását.

61. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-fi-Dglükopiranozil)-(l -+4)] ₃-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(67) képletű vegyület]

8,63 g (4,50 mmol) (66) képletű vegyületet a 4. számú általános eljárással reagáltatunk, majd a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 3:2, majd 4:3 térfogatarányú elegyét használjuk. 5,67 g (67) képletű vegyületet kapunk, kitermelés a három lépésre: 77%. [a]_D +102 (c=0,70, diklór-metán). LSIMS, pozitív mód: m/z tioglicerol+NaCl, 1645,9 (M+Na)⁺.

Ή-NMR (CDClj) δ 7,33-7,32 (m, 5H, Ph), 5,65 (d, 2H, H = 3,8 Hz, H-l NR egység és H-l NR-2 egység), 5,62 (d, 1H, J=3,8 Hz, H-l R-2 egység), 4,98 (d, 1H, J=3,7 Hz, H-l R egység), 4,31 (d, 1H, J=8,l Hz, H-l NR-1 egység), 4,30 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l C egység), 4,29 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l R-l egység), 1,08-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₇₄H₁₃₀O₃₆Si (1912,14) összegképlet
alapján:
C%	H%
számított: 54,73	8,07
talált: 54,61	8,07

62. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(2,3,6-tri-O-acetil-4-O-pmetoxi-benzil-a-D-glükopiranozil)-(1 -+4)-O(2,3,6-tri-O-acetil-\^>i-D-glükopiranozil)-(l—>4)-lO2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0(2,3,6-tri-O-metil-ft-D-glükopiranozil)-(l-+4)] ₃-6O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(68) képletű vegyület]

1,47 g (1,95 mmol) (57) képletű tioglikozid és 2,89 g (1,77 mmol) (67) képletű glikozilakceptor elegyét a 3. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/aceton 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 3,71 g (68) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 92%. Analitikus mintát szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítunk, ahol eluensként toluol/aceton 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk. [a]_D+99 (c=O,58, diklór-metán); ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=2319,03; kémiai tömeg=2320,59; kísérleti tömeg=2319,03 ±0,12 atomtömegegység. Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,32 (m, 5H, Ph),

7,15-6,83 (m, 4H, C₆H₄OCH₃), 5,62 (d, 1H,

HU 223 691 Β1

J = 3,8 Hz, H-l R-2 egység), 5,60 (d, 2H, J=3,8 Hz, H-l NR-2 egység és C egység), 5,29 (d, 1H, J=4,0 Hz, H-l NR egység), 4,97 (d, 1H, J=3,7 Hz, H-l R egység), 4,70 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l NR-1 egység), 4,30 (d, 2H, J = 8,l Hz, H-l NR-3 egység és R-3 egység), 4,29 (d, 1H, J=7,9 Hz, Η-1 R-1 egység), 2,08 (s, 3H, Ac), 2,06 (s, 3H, Ac), 2,02 (s, 3H, Ac), 1,99 (s, 3H, Ac), 1,98 (s, 3H, Ac), 1,96 (s, 3H, Ac), 1,08-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₁₀₆H₁₇₀O₅₃Si (2320,59) összegképlet

alapján:	C%	H%
számított:	54,86	7,38
talált:	54,76	7,45

63. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l -^4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-Dglükopiranozil)-(l->4)] ₄-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozid [(69) képletű vegyület]

3,61 g (1,55 mmol) (68) képletű vegyületet a 4. számú általános eljárás szerint reagáltatunk, majd a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként toluol/aceton 4:5 térfogatarányú elegyét használjuk. 2,22 g (69) képletű vegyületet kapunk, kitermelés a három lépésre: 70%. [a]_D +103 (c=0,80, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=2031,01; kémiai tömeg=2032,38; kísérleti tömeg=2O32,38 atomtömegegység.

Ή-NMR (CDClj) δ 7,37-7,32 (m, 5H, Ph), 5,65 (d,

1H, J=3,8 Hz, H-l NR egység), 5,64 (d, 1H,

J = 3,8 Hz, H-l NR-2 egység), 5,62 (d, 2H,

J=3,8 Hz, H-l C egység és R-2 egység), 4,97 (d,

1H, J = 3,7 Hz, H-l R egység), 4,30 (d, 1H,

J —7,9 Hz, H-l NR-1 egység), 4,29 (d, 3H,

J = 7,9 Hz, H-l R-l egység, R-3 egység és

NR-3 egység), 1,08-0,91 (m, 2H,

CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃). Elemanalízis a C₉₂H₎₆₂O₄₆Si (2032,38) összegképlet alapján:

C% H% számított: 54,37 8,03 talált: 54,51 8,04

64. preparátum

2-(Trimetil-szilil)-etil-O-(4-O-levulinil-2,3,6-tri-Ometil-u-D-glükopiranoziI)-(1 -+4)-0-(2,3,6-tri-Ometil-^-D-glükopiranozil)-(l—^4)-[O-(2,3,6-tri-Ometil-a-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-Ometil-^-D-glükopiranozil)-(l->4)]₃-6-O-benzil-2,3di-O-metil-a-D-glükopiranozid [(70) képletű vegyület]

855 mg (0,42 mmol) (69) képletű vegyületet feloldunk 8 ml diklór-metánban, és 25 °C-on hozzáadunk 83 μΐ (0,59 mmol) trietil-amint, 5,14 g (0,04 mmol) 4dimetil-amino-piridint és 117 mg (0,55 mmol) levulinsavanhidridet. A reakcióelegyet 2 órán keresztül keverjük, a reakció előrehaladását CCM-eljárással követjük, majd diklór-metánt adunk az elegyhez, 10%-os vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal, majd vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra pároljuk. A vegyületet a következő lépéshez tisztítás nélkül nyers állapotban használhatjuk fel. Analitikus mintát oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítunk, eluensként ciklohexán/aceton 5:4 térfogatarányú elegyét használjuk. Tiszta (70) képletű vegyületet kapunk, ennek adatai: [a]_D +101 (c=0,89, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=2129,05; kémiai tömeg=2130,48; kísérleti tömeg=2130,00 atomtömegegység.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,32 (m, 5H, Ph), 5,65 (d, 3H, J=3,8 Hz, H-l NR egység, NR-2 egység és C egység), 5,63 (d, 2H, J=3,8 Hz, H-l R-2 egység), 5,02 (t, 1H, J= 10,1 Hz, H-4 NR egység), 4,98 (d, 1H, J = 3,7 Hz, H-l R egység), 4,32 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l NR-1 egység), 4,30 (d, 2H, J=7,9 Hz, H-l NR-3 egység és R-3 egység), 4,29 (d, 1H, J = 7,9 Hz, H-l R-l egység), 2,80-2,50 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18 (s, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,08-0,91 (m, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (s, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Elemanalízis a C₉₇H,₆₈O_4gSi (2032,38) összegképlet alapján:

C% H% számított: 54,69 7,95 talált: 54,55 8,07

65. preparátum

O-(4-O-Levulinil-2,3,6-tri-O-metil-ti-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l->4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-fi-D-glükopiranozil)-(l^>4)] ₃-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a.,fi-Dglükopiranóz [(71) képletű vegyület]

876 mg (0,41 mmol) (70) képletű vegyületet a 44.

preparátum (a) lépése szerint reagáltatunk. A maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, 600 mg (71) képletű vegyületet kapunk izomer keverék formájában (α/β = 60/40), kitermelés a három lépésre: 50%. [a]_D +89 (c=0,74, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=2028,97; kémiai tömeg=2030,24; kísérleti tömeg=2030,19±0,09 atomtömegegység.

Ή-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,32 (m, 5H, Ph), 5,65 (d, 3H, J=3,8 Hz, Η-1 NR egység, NR-2 egység és C egység), 5,63 (d, 1H, J=3,8 Hz, H-l R-2 egység), 5,33 (d, 1H, J=3,2 Hz, H-Ια R egység), 5,02 (t, 1H, J=10,l Hz, H-4 NR egység), 4,59 (d, 1H, J= 5,3 Hz, H-Ιβ R egység), 4,32 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l NR egység), 4,30 (d, 2H, J = 7,9 Hz, H-l NR-3 egység és R-3 egység), 4,29 (d, 1H, J=7,9 Hz, H-l R-l egység), 2,80-2,50 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18 (s, 3H,

O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

66. preparátum

O-(4-O-Levulinil-2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-glükopiranozil)25

HU 223 691 Bl (1 -^4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)(1 -+4)] ₃-6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a, \¹i-D-gliikopiranóz-triklór-acetimidát [(72) képletű vegyület]

593 mg (0,29 mmol) (71) képletű vegyület 7 ml diklór-metánnal készített oldatához hozzáadunk 72,2 mg (0,52 mmol) kálium-karbonátot és 176 μΐ (1,75 mmol) triklór-acetonitrilt. A reakcióelegyet 16 órán keresztül keverjük, majd leszűijük és bepároljuk. A maradékot szilikagélen szűrjük, eluensként ciklohexán és l%o trietil-amint tartalmazó aceton 5:4 térfogatarányú elegyét használjuk. 414 mg (72) képletű imidátot kapunk anomer elegy formájában (α/β=47/53). Kitermelés 46%. [a]_D +86 (c=0,84, diklór-metán).

H-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,32 (m, 5H, Ph), 6,50 (d,

1H, J = 3,5 Hz, H-Ια R egység), 5,65 (d, 1H,

J = 8,2 Hz, H-Ιβ R egység), 5,65 (d, 1H, J=3,8 Hz,

H-l NR egység), 5,64 (d, 2H, J = 3,8 Hz,

H-l NR-2 egység és C egység), 5,61 (d, 1H,

J = 3,8 Hz, H-l R-2 egység), 5,02 (t, 1H,

J=10,l Hz, H-4 NR egység), 4,37 (d, 1H,

J = 7,9 Hz, H-l R-l egység), 4,30 (d, 3H,

1=1,9 Hz, H-l NR-1 egység és NR-3 egység),

2,80-2,50 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃),

2,18 (s, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

A 20. reakcióvázlaton a (73) képletű poliszacharid előállítását szemléltetjük.

67. preparátum

Metil-O-(4-O-levulinil-2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-fi-D-glükopiranozil)-(1 -+4)-]O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3, 6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1 -+4)]₃-O-(6-O-benzi 1-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l^r4)-O-(benzil-2,3-di-Ometil-(l-D-glükopiranozil-uronát)-(1 -+4)-0-(3,6di-O-acetil-2-O-benzil-v.-D-glükopiranozil)(l-+4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziluronát)-(1-+4)-2,3,6-tri-0-benzil-a.-D-glükopiranozid [(73) képletű vegyület]

220 mg (0,16 mmol) (26) képletű glikozilakceptort és 344 mg (0,16 mmol) (72) képletű imidátot feloldunk 5 ml diklór-metán/dietil-éter 1:2 térfogatarányú elegyében. Hozzáadunk 750 mg/mmol 4 Á-ös molekulaszitát és az elegyet 25 °C-on 1 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet -25 °C-ra lehűtjük, és 0,20 mol/mol imidát koncentrációban 1 mólos diklór-metános tercier-butil-dimetil-szilil-triflát-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyet 15 percig keverjük, majd szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, leszűrjük és bepároljuk. Toyopearl® HW-50 kolonnára visszük, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk, és a glikozilakceptort tartalmazó frakciót visszavisszük a reakcióba, majd az előzőek szerint reagáltatjuk. A terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással kétszer tisztítjuk, toluol/aceton 5:4, majd 1:1 térfogatarányú elegyével eluálunk. 107 mg olyan (73) képletű vegyületet kapunk, ahol az α/β arány 7:3, és 201 mg olyan (73) képletű vegyületet, ahol az α/β arány 9:1. Összes kitermelés a 308 mg-ra számítva 57%.

H-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,25 (m, 35H, 7 Ph), 5,65 (d, 3H, J=3,5 Hz, H-l A egység, C egység és E egység), 5,57 (d, 1H, J=3,9 Hz, H-l G egység), 5,52 (d, 1H, J = 3,3 Hz, H-l I egység), 5,29 (d, 1H, J=6,8 Hz, H-l L egység), 5,17 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l K egység), 4,56 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l M egység), 4,31 (d, 3H, 1=1,9 Hz, H-l B egység, D egység és F egység), 4,27 (d, 1H, J = 8,0 Hz, H-l H egység), 4,08 (d, 1H, J=8,0 Hz, H-l J egység), 2,80-2,50 (m, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18 (s, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,97 (s, 3H, Ac), 1,81 (s, 3H, Ac).

A 21. reakcióvázlaton a (74) és (75) képletű poliszacharid szintézisét szemléltetjük.

68. preparátum

Metil-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)(1-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)(1-+4)] ₄-O-(6-O-benzil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-P-D-glükopiranozil-uronát)-(l-+4)-O-(3,6-di-O-acetil-2-Obenzil-a.-D-glükopiranozil)-(1 -+4)-O-(benzil-2,3-diO-metil-a-L-jód-piranozil-uronát)-(l -+4)-2,3,6-triO-benzil-a-D-glükopiranozid [(74) képletű vegyület] 130 mg (38,2 μιηοΐ) (73) képletű vegyületet a 2. számú általános eljárás szerint reagáltatunk, majd a nyersterméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. 118 mg (84) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 93%. [a]_D +78 (c=0,48, diklór-metán); ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=3301,49; kémiai tömeg=3303,65; kísérleti tömeg=3302,40 atomtömegegység.

H-NMR (CDC1₃) δ 7,33-7,25 (m, 35H, 7 Ph), 5,64 (d, 3H, J-3,5 Hz, H-l A egység, C egység és E egység), 5,57 (d, 2H, J=3,9 Hz, H-l H egység), 5,52 (d, 1H, J = 3,3 Hz, H-l I egység), 5,29 (d, 1H, J=6,8 Hz, H-l L egység), 5,17 (d, 1H, 3,5 Hz, H-l K egység), 4,56 (d, 1H, J=3,5 Hz, H-l M egység), 4,31 (d, 3H, 1=1,9 Hz, H-l B egység, D egység és F egység), 4,27 (d, 1H, J=8,0 Hz, H-l H egység), 4,08 (d, 1H, J=8,0 Hz, H-l J egység), 1,97 (s, 3H, Ac), 1,81 (s, 3H, Ac).

69. preparátum

Metil-O-(2,6-di-O-benzil-4-O-levuliml-3-O-metilü.-D-glükopiranozil)-(1^4)-O-(2-O-acetil-6-Obenzil-3-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1^4)-O(2,6-di-O-benzil-3-O-metil-a.-D-glükopiranozil)(l-+4)-O-(2-O-acetil-6-O-benzil-3-O-metil-$-Dglük()piranozil)-(l—+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l-+4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-^>-Dglükopiranozil)-(l-+4)] ₄-O-(6-O-benzil-2,3-di-Ometil-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(benzil-2,3-diO-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-( 1-+4)-0(3,6-di-0-acetil-2-0-benzil-a-D-glükopiranozil)(l-+4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziluronát)-( 1-+4)-2,3,6-tri-O-benzil-a-D-glükopiranozid [(75) képletű vegyület]

112 mg (33,9 pmol) (74) képletű glikozilakceptort és 59,1 mg (37,2 pmol) (17) képletű imidátot (lásd a

HU 223 691 Β1

16. preparátumot) feloldunk 2 ml toluolban. Hozzáadunk 42 pg 4 Á-ös molekulaszitát, és az elegyet 25 °C-on 1 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet -20 °C-ra lehűtjük és 0,20 mol/mol imidát koncentrációban 1 mólos toluolos tercier-butil-dimetil-szilil-triflát-oldatot adunk hozzá. Az elegyet 15 percig keverjük, majd szilárd nátrium-hidrogén-karbonátot adunk hozzá, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot Toyopearl® HW-50 kolonnára visszük, eluensként diklór-metán/etanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. Az akceptort és a 17-mert tartalmazó frakciót visszavisszük a reakcióba, és az előzőek szerint reagáltatjuk. A terméket először Toyopearl® HW-50 kolonnán, majd szilikagél kolonnán tisztítjuk, és így 71 mg (75) képletű vegyületet kapunk. Kitermelés: 44%. [a]_D+ 80 (c=0,26, diklór-metán). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg -4728,10; kémiai tömeg=4731,26; kísérleti tömeg=4731,27+0,39 atomtömegegység. Ή-NMR (CDClj) a fő anomer protonok D értéke: 5,64; 5,57; 5,52; 5,48; 5,47; 5,28; 5,17; 4,56; 4,50; 4,29; 4,27; 4,08 ppm.

A 22. reakcióvázlaton a Pe pentaszacharin előállításához használható szinten előállítását mutatjuk be, amely C-interglikozidos kötést tartalmaz. (II. 1) általános vegyületek körébe tartozik.

70. preparátum

Metil-2,3-di-O-metil-6-O-terc-butil-dimetil-szilila-D-glükopiranozid [(77) képletű vegyület]

14,0 g (92,9 mmol) tercier-butil-dimetil-szilil-kloridot, 15 ml (108 mmol) trietil-amint és 260 mg (2,13 mmol) 4-dimetil-amino-piridint argonatmoszférában hozzáadunk 15,84 g (71,3 mmol) (76) képletű vegyület [lásd D. Trimmel, W. M. Doane, C. R. Russel, C. E. Rist, Carbohydr. Rés., 11, 497 (1969)] 300 ml diklór-metánnal készített oldatához. Az elegyet szobahőmérsékleten 15 órán keresztül keverjük, majd diklórmetánnal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 1,3:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 22,79 g (77) képletű vegyületet kapunk színtelen szirup formájában. Kitermelés: 95%. [a]_D +98 (c=l,0, kloroform).

71. preparátum

Metil-2,3-di-O-metil-6-O-terc-butil-dimetil-szilila-D-xilo-4-hexulopiranozid [(78) képletű vegyület] 5,4 ml (61,9 mmol) oxalil-klorid 120 ml diklór-metánnal készített oldatához argonatmoszférában -70 °Con hozzáadjuk 8,7 ml (123 mmol) dimetil-szulfoxid 20 ml diklór-metánnal készített oldatát. 15 perc elteltével a reakcióelegyhez cseppenként hozzáadjuk 18,78 g (55,8 mmol) (77) képletű vegyület diklór-metános oldatát. A reakcióelegyet 15 percig mágneses keverővei keverjük, majd 37 ml (265 mmol) trietil-amint adunk hozzá, majd 15 perccel később a reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni. Hozzáadunk 150 ml vizet, és a vizes fázist 150 ml diklór-metánnal extraháljuk. A szerves fázisokat egyesítjük, telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 9:1, majd 4:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 17,3 g (78) képletű vegyületet kapunk színtelen olaj formájában, kitermelés: 93%. [a]_D +98 (c= 1,0 kloroform).

72. preparátum

Metil-4-dezoxi-2,3-di-O-metil-4-C-metilén-6-Oterc-butil-dimetil-szilil-a-D-xilo-hexopiranozid [(79) képletű vegyület]

43,3 g (127 mmol) metil-trifenil-foszfónium-bromid 250 ml tetrahidrofüránnal készített szuszpenziójához cseppenként argonatmoszférában hozzáadunk 75 ml 1,6 mólos n-hexánnal készített n-butil-lítium-oldatot. A reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten hagyjuk reagálni, majd -70 °C-ra lehűtjük. Ezután hozzáadjuk 13,97 g (41,8 mmol) (78) képletű vegyület 60 ml tetrahidrofüránnal készített oldatát. A reakcióelegyet 30 percig -70 °C-on keverjük, majd hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni. 1 órával később 300 ml telített vizes ammónium-klorid-oldatot adunk hozzá, és a vizes fázist dietil-éterrel extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 7:1, majd 4:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 8,30 g (79) képletű vegyületet kapunk színtelen olaj formájában. Kitermelés: 60%. [a]_D +151 (c= 1,3 kloroform).

73. preparátum

MetiT4-dezoxi-2,3-di-O-metil-4-C-metilén-<x-D-xilo-hexopiranozid [(80) képletű vegyület]

8,50 g (25,6 mmol) (79) képletű vegyület 250 ml diklór-metán/metanol 5:1 térfogatarányú elegyével készített oldatához pH 1 eléréséig kámforszulfonsavat adagolunk. A kiindulási vegyület teljes eltűnése után (ezt CM-eljárással követjük, eluensként ciklohexán/etil-acetát 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk) az oldatot trietil-amin hozzáadásával semlegesítjük. Bepárlás után a maradékot gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 1:1, majd 1:2 térfogatarányú elegyét használjuk. 5,32 g (80) képletű vegyületet kapunk színtelen szirup formájában. Kitermelés: 95%. [a]_D +239 (c=l,0, kloroform).

74. preparátum

Fenil-2,4,6-tri-O-acetiT3-O-metil-l-szeleno-(3-Dglükopiranozid [(83) képletű vegyület]

1. eljárás

5,7 ml (53,7 mmol) szeleno-fenolt argonatmoszférában hozzáadunk 13,05 g (36,0 mmol) (81) képletű vegyület (anomer elegy) [lásd E. L. Hirst, E. Percival, Methods Carbohydrate Chem., 2, 145 (1963)] 120 ml dimetil-formamiddal készített oldatához. A reakcióelegyet 0 °C-ra lehűtjük, majd cseppenként hozzáadunk

8,8 ml (71,9 mmol) 48%-os trifluor-borán-dietil-éterátoldatot. A reakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmér27

HLJ 223 691 Bl sékleten keveijük, majd 100 ml diklór-metánnal hígítjuk, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. 8,17 g nyers (83) képletű vegyületet kapunk (kitermelés a (81)-ből számítva: 68%), ezt a dezacetilező reakcióban közvetlenül használjuk fel.

2. eljárás

2,27 g (7,27 mmol) difenil-diszelenid etanolos szuszpenziójához 0 °C-on argonatmoszférában hozzáadunk 510 mg (14,6 mmol) nátrium-bórhidridet. Ezután, ha a reakcióelegy 15 perc alatt eredeti sárga színét nem veszti el, újabb adag trifluor-borán-dietil-éterátot adagolunk. Ezt az oldatot argonatmoszférában hozzáadjuk 4,22 g (11,0 mmol) (82) képletű vegyűlet [lásd A. K. Sen, K. K. Sakar, N. Banerji, J. Carbohydr. Chem., 7, 645 (1988)] 25 ml diklór-metánnal készített oldatához. A reakcióelegyet 3 órán keresztül visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd hagyjuk szobahőmérsékletre lehűlni, a nátrium-bromidot leszűrjük, és a szűrletet bepároljuk. A maradékot 100 ml diklór-metánban feloldjuk, és 50 ml 1 mólos vizes nátrium-hidroxid-oldattal és 50 ml telített vizes ammónium-kloridoldattal mossuk. A vizes fázisokat 20 ml diklór-metánnal extraháljuk, a szerves fázisokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 1,7:1 térfogatarányú elegyét használjuk, majd a terméket etil-acetátból kristályosítjuk. 4,35 g (83) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 86%. Olvadáspont: 101-102 °C. [a]_D -20 (c= 1,0 kloroform).

75. preparátum

Fenil-3-O-metiI-l-szeleno-^-D-glükopiranozid [(84) képletű vegyűlet]

32,3 g (84,3 mmol) (82) képletű vegyületből előállított nyers (83) képletű vegyületet feloldunk 500 ml metanolban, és lassan hozzáadunk 1,2 g nátriumot. 1 órával később az oldatot ÍR-120 (H⁺) gyanta hozzáadásával semlegesítjük, leszűrjük és bepároljuk. A maradékot gyorskromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát/aceton 1,5:1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 22,7 g (84) képletű vegyületet kapunk szirup formájában, a (82) képletű vegyületre számítva a kitermelés: 81%. [a]_D -58 (c=l,0, metanol).

76. preparátum

Fenil-4,6-O-benzilidén-3-O-metil-l-szeleno-^>-Dglükopiranozid [(85) képletű vegyűlet]

7,65 g (23,0 mmol) (84) képletű triói 150 ml acetonitrillel készített oldatához argonatmoszférában hozzáadunk 45 mg para-toluolszulfonsavat és 5,4 ml (36,0 mmol) benzaldehid-dimetil-acetált. A reakcióelegyet 2 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd hozzáadunk 1,5 g kálium-karbonátot. 30 perccel később az oldatot leszűrjük, majd bepároljuk. A maradékot gyógyászatikészítmény-eljárással tisztítjuk, eluensként ciklohexán/etil-acetát 3,5:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 8,55 g (85) képletű vegyületet kapunk fehér színű kristályok formájában. Kitermelés: 88%, olvadáspont: 123-124 °C (ciklohexán/etil-acetátból kristályosítva). [a]_D -38 (c= 1,0, kloroform).

77. preparátum

Fenil-4,6-O-benzilidén-3-O-metil-2-O-(metil-4-dezoxi-6-O-dimetil-szilil-2,3-di-O-metil-4-C-metiléna.-D-xilo-hexopiranozid)-l-szeleno-$-D-glükopiranozid [(86) képletű vegyűlet]

4,30 g (10,3 mmol) (85) képletű vegyűlet 30 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához Schlenck-készülékben -70 °C-on argonatmoszférában hozzáadunk 7,0 ml (11,2 mmol) 1,6 mólos n-butil-lítium-oldatot. 10 perccel később a reakcióelegyhez 5,0 ml (41,2 mmol) diklór-dimetil-szilánt adunk, és szobahőmérsékletre felmelegítjük. 3 óra elteltével a reakcióelegyet bepároljuk, a maradékhoz 2,10 g (9,62 mmol) (80) képletű vegyület és 985 mg (14,4 mmol) imidazol 210 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát hozzáadjuk. A reakcióelegyet 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, majd bepároljuk, 50 ml vizet adunk hozzá, és diklór-metánnal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A (86) képletű vegyületből analitikai mintát gyorskromatográfiás eljárással tisztítunk, eluensként toluol és 0,5 térf.% trietilamint tartalmazó aceton 25:1 térfogatarányú elegyét használjuk. Színtelen szirupot kapunk 90%-os kitermeléssel.

'H-NMR (400 Hz, C₆D₆) d 7,77-6,99 (m, 10H, aromás), 5,51 (m, 1H, C:CH₂), 5,24 (m, 1H, C:CH₂), 5,16 (s, 1H, CH Ph), 4,85 (d, 1H, J = 3,7 Hz, H-í), 4,81 (d, 1H, J = 9,8 Hz, H-l’), 4,45 (m, 1H, H-5), 4,38 (dd, 1H, J= 10,8 Hz, 4,8 Hz, H-6a), 4,33 (dd, 1H, J = 6,2 Hz, H-6b), 4,20 (m, 1H, J=9,2 Hz, H-3), 4,05 (dd, 1H, J= 10,3 Hz, 4,9 Hz, H-6a’), 3,87 (dd, 1H, J = 8,l Hz, H-2’), 3,52, 3,38, 3,31 és 3,27 (s, 3H, OCH₃), 3,37 (t, 1H, J=10,3 Hz, H-6b’), 3,35 (t, 1H, H-4’), 3,32 (dd, 1H, H-2), 3,2 (dd, 1H, J = 9,3 Hz, H-3’), 3,05 (ddd, 1H, J=9,3 Hz, H-5’), 0,38 és 0,37 (s, 3H, Si(CH₃)₂). MS (m/z): 714(M+NH₄)+.

78. preparátum

Gyökös gyűrűzárási reakció [(87) képletű vegyűlet kialakítása] és az éter hasítása [(88) képletű vegyüld]

A nyers (86) képletű vegyűlet 850 ml toluollal készített oldatához [amit 10,2 mmol (85) és 9,62 mmol (80) képletű vegyületből állítottunk elő] 8 óra alatt hozzáadunk 6,1 ml (22,7 mmol) tributil-ón-hidridet és 200 mg (1,22 mmol) 2,2’-azobisz-izobutironitrilt 14 ml gáztalanított toluollal elegyítve.

A gyökös gyűrűzárás után a reakcióelegyet bepároljuk és a maradékot tetrahidrofúránban feloldjuk. Feleslegben (20 ekv.) 40%-os vizes fluor-hidrogénsavat adagolunk. A teljes deszililezés után (ezt CCM-eljárással követjük toluol/aceton 4:1 térfogatarányú elegyével eluálva) az oldatot szilárd nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadásával semlegesítjük, leszűrjük és bepároljuk. A

HU 223 691 Β1 (88) képletű fő terméket kristályosítással tisztíthatjuk. Olvadáspont: 105 °C. [a]_D +119 (c = 1,1 kloroform). I3C-NMR (62,896 MHz, CDC1₃) d 137,29 (C kvaterner aromás), 128,88-125,96 (aromás C), 101,11 (CH Ph), 97,64 (C-l), 83,52 (C-2), 72,76, 81,95, 80,84, 72,01, 71,92 és 64,31 (C-3, C-5, C-2’, C-3’, C-4’, C-5’), 75,19 (C-l’), 69,41 (C-6’), 62,69 (C-6), 60,93, 60,70, 58,31 és 55,20 (OCH₃), 38,80 (C-4), 25,58 (C metilén).

Elemanalízis a C₂₄H₃₆O₁₀.H₂O (502,558) összegképlet

alapján:	C%	H%
számított:	57,36	7,62
talált:	57,31	7,54

79. preparátum

Metil-6-O-acetil-4-C-(2-O-acetil-4,6-O-benzilidén3-O-metil-a.-D-glükopiranozil-metil)-4-dezoxi-2,3di-O-metil-tt-D-glükopiranozid [(89) képletű vegyület]

A (88) képletű vegyületet kvantitative acetilezzük acetsavanhidrid/piridin 1:1 térfogatarányú elegyében katalitikus mennyiségű 4-dimetil-amino-piridin jelenlétében. A terméket bepárlás és kromatográfiás eljárással történt tisztítás után kapjuk meg. [a]_D +87 (c=l,0, kloroform).

'H-NMR (500 MHz, CDC1₃) lásd az 1. táblázatot. ^I3C-NMR (62,896 MHz, CDC1₃) d 170,81, 169,80 (C:O), 137,18 (aromás kvatemer C-atom),

128,92-125,95 (aromás C), 101,31 (CH Ph), 97,51 (C-l), 83,22 (C-2), 81,94, 69,25 és 63,83 (C-5,

C-4’, C-5’), 81,81 (C-3), 78,78 (C-3’), 72,74 (C-2’), 71,96 (C-l’), 69,49 (C-6’), 64,17 (C-6),

60,64, 59,82, 58,30 és 55,19 (OCH₃), 39,00 (C-4),

26,47 (C metilén), 20,91, 20,76 (OCOCH₃). Tömegspektrum (m/z): 586 (M + NH₄) ⁺ , 569 (M+H)⁺, 554 (M-OMe+NH₃)⁺, 537 (M-OMe)+.

Elemanalízis a C₂₈H₄₀O|₂.H₂O (586,632) összegképlet alapján:

C% H% számított: 57,33 7,22 talált: 57,28 7,07

A szintézis utolsó része abból áll, hogy a (89) képletű vegyületet (90) képletű imidáttá alakítjuk. Ehhez a benzilidéngyűrűt felnyitjuk, nátrium-ciano-bórhidrid és sósav alkalmazásával. Az így felszabaduló hidroxilcsoportot átmenetileg para-metoxi-benzil-éter formában védjük. Dezacilezés után a primer alkoholcsoportot úgy védjük, hogy szelektíve tercier-butil-dimetil-szilil-étert viszünk be a molekulába, és az így kapott vegyületet metilezzük. Ezután Jones-féle oxidációs reakcióval uronsavat kapunk, amelyet benzilezünk. A para-metoxi-benzil-étert ezután lehasítjuk, majd ebbe a helyzetbe levulin-észtert viszünk be. Kénsav/ecetsav/ecetsavanhidrid keveréket használva az anomer metilcsoport acetolízisét végezzük, és a 6’-helyzetben a benzil-éter is acetolízist szenved. Két anomer acetát keverékét kapjuk. Az 1-es helyzetben szelektív dezacetilezést végzünk hidrazinnal dimetil-formamidban, és az anomer elegyet, amelyet diklór-metánban oldunk, triklór-acetonitrillel l,8-diaza-biciklo[5.4.0]undec-7-én jelenlétében (90) képletű vegyületté alakítjuk. A 23. reakcióvázlaton a (99) képletű pentaszacharid előállítását mutatjuk be.

80. preparátum

Etil-O-(2,3-di-O-benzoil-4,6-O-benzilidén-a-Dglükopiranozil)-(l -+4)-2,3,6-tri-O-benzoil-1-tio-fiD-glükopiranóz [(92) képletű vegyület]

16,7 g (35,2 mmol) (91) képletű vegyület [lásd J.

Westman és M. Nilsson, J. Carbohydr. Chem., 14 (7), 949-960 (1995)] 202 ml piridinnel készített 0 °C-ra lehűtött oldatához 20 perc alatt cseppenként hozzáadunk 24,5 ml (211 mmol) benzoil-kloridot. A reakcióelegyet 20 órán keresztül keverjük szobahőmérsékleten, ekkor a vékonyréteg-kromatográfiás eljárás szerint az átalakulás körülbelül 50%-os. A reakcióelegyet vízzel és diklórmetánnal hígítjuk. Extrahálás után a szerves fázist 10%os vizes nátrum-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. A maradékhoz a fentebb leírt eljárással újra benzoil-kloridot adunk. A nyersterméket oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, és így 22 g (92) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,80, szilikagélen, toluol/etanol 9:1 térfogatarányú elegyével.

81. preparátum

O-(2,3-Di-O-benzoil-4,6-O-benzilidén-a-D-glükopiranozil)-( 1^4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-fi-D-glükopiranozil)-( 1^4)-1,6-anhidro-2,3-di-O-metil-fiD-glükopiranóz [(94) képletű vegyület]

1,05 g (1,05 mmol) (92) képletű tioglikozid,

200 mg (1,05 mmol) (93) képletű vegyület [lásd Jeanioz és munkatársai, J. Org. Chem. 26, 3939-3944 (1961)] és 1,1 g 4 Á-ös por alakú molekulaszita 18 ml toluollal készített elegyét 15 percig nitrogénatmoszférában keverjük. A reakcióelegyet ezután -20 °C-ra lehűtjük és hozzáadjuk 1,11 mmol N-jód-szukcinimid és 0,125 mmol) trifluor-metánszulfonsav 6 ml diklór-metán/dioxán 1:1 térfogatarányú elegy ével készített, frissen előállított oldatát. 10 perccel később a vörös színű reakcióelegyet leszűrjük, diklór-metánnal hígítjuk, extraháljuk, a szerves fázist 10%-os nátrium-tioszulfát-oldattal, 10%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, és így 1,25 g (94) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=O,55, szilikagél, heptán/etil-acetát 4:6 térfogatarányú elegyével.

82. preparátum

O-(4,6-O-Benzilidén-ct.-D-glükopiranozil)-(l-^4)0-($-D-glükopiranozil)-(l-+4)-1,6-anhidro-2,3-diO-metil-$-D-glükopiranóz [(95) képletű vegyület] 1,24 g (1,11 mmol) (94) képletű vegyület 7 ml metanol/dioxán 1:1 térfogatarányú elegyével készített oldatához hozzáadunk körülbelül 50 mg kálium-tercierbutilátot. A reakcióelegyet 1 órán keresztül keverjük, majd újabb 50 mg kálium-tercier-butilátot adagolunk. Az elegyet ezután még 60 percig keverjük, majd Do29

HU 223 691 Β1 wex® 50WX8 H⁺ gyantával semlegesítjük, leszűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, és így 665 mg (95) képletű vegyületet izolálunk olaj formájában. CCM:Rf=0,50, szilikagélen, diklór-metán/metanol

85:15 térfogatarányú elegy ével.

83. preparátum

O-(4,6-O-Benzilidén-2,3-di-O-metil-v.-D-glükopiranozil)-(l-^:>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-^>-D-glükopiranozil)-(l-+4)-1,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-Dglükopiranóz [(96) képletű vegyület]

660 mg (1,1 mmol) (95) képletű vegyület 8 ml vízmentes tetrahidrofüránnal készített, 5 °C-ra lehűtött oldatához nitrogénatmoszférában hozzáadunk 387 mg (9,65 mmol) nátrium-hidridet. A reakcióelegyhez cseppenként hozzáadunk 0,52 ml (8,22 mmol) metil-jodidot, majd 20 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A nátrium-hidrid felesleget metanollal elbontjuk, és a reakcióelegyet 50 ml jeges vízre öntjük. Az elegyet háromszor 20 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázist nátrium-korid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. 690 mg tiszta (96) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,25, szilikagélen, diklór-metán/metanol

95:5 térfogatarányú elegyével.

84. preparátum

O-(2,2-Di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(1-+4)-0(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1^4)-1,6anhidro-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranóz [(97) képletű vegyület]

690 mg (1,03 mmol) tiszta (96) képletű vegyületet feloldunk 7,3 ml 80%-os ecetsavban, és 40 °C-on 20 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és toluollal ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen kromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként diklór-metán/etil-acetát/metanol 8:1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 569 mg (97) képletű vegyületet kapunk vékonyréteg-kromatográfiás eljárással.

CCM :Rf= 0,40, szilikagélen, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegyével.

85. preparátum

0-(6-0-Benzoil-2,3-di-0-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1-+4)-1,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranóz [(98) képletű vegyület]

560 mg (0,96 mmol) (97) képletű vegyület diklórmetánnal készített oldatához hozzáadunk 227 mg (1,05 mmol) 1-benzoil-oxi-lH-benzotriazolt és 1,15 mmol trietil-amint, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 20 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet ezután diklór-metánnal hígítjuk, 10%-os vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és szárazra pároljuk. A terméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, és így 600 mg (98) képletű vegyületet kapunk.

CCM :Rf= 0,50, szilikagélen, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegyével.

86. preparátum

O-(2,3-Di-O-benzoil-4,6-O-benzilidén-a-D-glükopiranozil)-(1-+4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-fi-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(6-0-benzoil-2.3-di-0-metil-a.-D-glükopiranozil)-(I^4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1^4)-l,6-anhidro-2,3-diO-metil-$-D-glükopiranóz [(99) képletű vegyület]

A (98) képletű vegyületet a (94) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (99) képletű vegyületté. A kapcsolási reakciót 5 °C-on végezzük. CCM:Rf=0,50, szilikagélen, heptán/etil-acetát 2:8 térfogatarányú elegyével.

A 24. reakcióvázlaton a (104) képletű heptaszacharid előállítását szemléltetjük.

87. preparátum

O-(4,6-O-Benzilidén-a.-D-glükopiranozil)-(1-+4)($-D-glükopiranozil)-(l-^4)-0-(2,3-di-O-metil-a.D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,ó-tri-O-metil-fiD-glükopiranozil)-(1 -+4)-1,6-anhidro-2,3-di-Ometil-$-D-glükopiranóz [(100) képletű vegyület]

A (99) képletű vegyületet a (95) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (100) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,35, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

88. preparátum

0-(4,6-0-Benzilidén-2,3-di-0-metil-o.-D-glükopiranozil)-(l -+4)-()-(2,3,6-tri-O-metil-ft-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(1^4)-0-(2,3,6-tri-0-metil-t)-D-glükopiranozil)-(l-+4)-1,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-Dglükopiranóz [(101) képletű vegyület]

A (100) képletű vegyületet a (96) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (101) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,50, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

89. preparátum

O-(2,3-Di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O(2,3,6-tri-O-metil-tt-D-glükopiranozil)-(1^4)-O(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-l ,6anhidro-2,3-di-O-metil-fi-D-glükopiranóz [(102) képletű vegyület]

A (101) képletű vegyületet a (97) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (102) képletű vegyületté.

CCM:Rf=O,35, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

90. preparátum

O-(6-O-Benzoil-2,3-di-O-metil-u-D-glükopiranozil)-(I^>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-C>-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopirano30

HU 223 691 Β1 zil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(1^4)-l ,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranóz [(103) képletű vegyület]

A (102) képletű vegyületet a (98) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (103) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,40, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

7,0:1,5:1,5 térfogatarányú elegye.

91. preparátum

O-(2,3-Di-O-benzoil-4,6-O-benzilidén-a-D-glükopiranozil)-(l—r4)-ü-(2,3,6-tri-O-benzo ίΙ-β-Dglükopiranozil)-(l -+4)-O-(6-O-benzoil-2,3-di-Ometil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(2,3,6-tri-Ometil-$-D-glükopiranozil)-(1^4)-O-(2,3,6-tri-Ometil-a-D-glükopiranozil)-(í—>4)-O-(2,3,6-tri-Ometil-^-D-glükopiranozil)-(1^4)-l,6-anhidro2.3- di-O-metil-$-D-glükopiranóz [(104) képletű vegyület]

A (103) képletű vegyület és a (2) képletű diszacharid összekapcsolási reakcióját a (99) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással végezzük. CCM:Rf=0,40, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

7,0:1,5:1,5 térfogatarányú elegye.

A 25. reakcióvázlaton a (109) képletű oligoszacharid előállítását szemléltetjük.

92. preparátum

O-(4,6-O-Benzilidén-a.-D-glükopiranozil)-(l-+4)O-($-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-( 1^4)-0-(2,3,6-tri-Ometil-$-D-glükopiranozil)-(1 -+4)-0-(2,3,6-tri-Ometil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(2,3,6-tri-Ometil-$-D-glükopiranozil)-(1^4)-1,6-anhidro2.3- di-O-metil-fi-D-glükopiranóz [(105) képletű vegyület]

A (104) képletű vegyületet a (95) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (105) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,60, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

93. preparátum

O-(4,6-Benzilidén-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-fi-D-glükopiranozil)-(l-+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-^-D-glükopiranozil)-(l -+4)]₂-l ,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-Dglükopiranóz [(106) képletű vegyület]

A (105) képletű vegyületet a (96) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (106) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,70, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

94. preparátum

O-(2,3-Di-O-metil-ö.-D-glükopi.ranozil)-(l-+4)-O(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O(2,3,6-tri-O-metil-o.-D-glükopiranozil)-(1 -+4)-O(2,3,6-tri-0-metil-$-D-glükopiranozil)-(l-+4)] ₂l,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranóz [(107) képletű vegyület]

5,05 g (2,0 mmol) (106) képletű vegyület 50 ml 80%-os ecetsavval készített oldatát 40 °C-on 20 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és toluolal együtt ledesztilláljuk. A maradékot etil-acetátban feloldjuk és vízzel extraháljuk. A vizes fázist diklór-metánnal extraháljuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és szárazra pároljuk. 2,68 g (107) képletű vegyületet kapunk.

CCM :Rf= 0,50, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

95. preparátum

O-(6-O-Benzoil-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(I^>4)-0-(2,3,6-tri-0-metil-\)-D-glükopiranozil)-(l-+4)-[0-(2,3,6-tri-0-metil-o.-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l—>4)] ₂-l ,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranóz [(108) képletű vegyület]

A (107) képletű vegyületet a (98) képletű vegyület előállítására ismertetett eljárással alakítjuk (108) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,80, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

7,0/1,5/1,5 térfogatarányú elegye.

96. preparátum

0-(2,3-Di-0-benzoil-4,6-0-benzilidén-u-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-^-D-glükopiranozil)-(1^4)-0-(6-0-benzoil-2,3-di-0-metil-a-Dglükopiranozil)-(1 -+4)-0-(2,3, 6-tri-O-metil-(3-Dglükopiranozil)-(1-+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-(l—>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-(i-Dglükopiranozil)-(l—>4)]2-l,6-anhidro-2,3-di-0-metil-fi-D-glükopiranóz [(109) képletű vegyület]

1,97 g (2,0 mmol, 3,5 ekv.) (92) képletű tioglikozid,

0,86 g (0,57 mmol) (108) képletű heptaszacharid és 4 Á-ös molekulaszitapor 22 ml toluollal készített elegyét 15 percig nitrogénatmoszférában keverjük. Ezután cseppenként szobahőmérsékleten hozzáadjuk 4,96 mg (2,2 mmol) N-jód-szukcinimid és 0,808 mmol) trifluormetánszulfonsav 12 ml diklór-metán/dioxán 1:1 térfogatarányú elegyével frissen készített oldatát. 10 perccel később a reakcióelegyet leszűrjük, diklór-metánnal hígítjuk, extraháljuk, 10%-os nátrium-tioszulfát-oldattal és 10%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A nyersterméket oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, és így 1,09 g (109) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,80, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

6:2:2 térfogatarányú elegy ével.

A 26. reakcióvázlaton a (115) képletű oligoszacharid előállítását mutatjuk be.

97. preparátum

0~(4,6-0-Benzilidén-a.-D-glükopiranozil)-(l^>-4)O-($-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3-di-O-metila.-D-glükopiranozil)-( 1-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil31

HU 223 691 Β1 $-D-glükopiranozil)-[(1 -)4)-0-(2,3,6-tri-O-metiltt-D-glükopiranozil)-(l -)4)-0-(2,3,6-tri-O-metilfi-D-glükupiranozil)] ₃-(l ^)4)-1,6-anhidro-2,3-diO-metil-fi-D-glükopiranóz [(110) képletű vegyület] A (109) képletű vegyületet a (95) képletű vegyület előállítására ismertetett eljárással alakítjuk (110) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,25, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

5,0:2,5:2,5 térfogatarányú elegye.

98. preparátum

O-(4,6-O-Benzilidén-2,3-di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l-)4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l-)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-^-D-glükopiranozil)-(l -)4)]₃-I,6-anhidro-2,3-di-O-metil-$-Dglükopiranóz [(111) képletű vegyület]

A (110) képletű vegyületet a (96) képletű vegyület előállítására ismertetett eljárással alakítjuk (111) képletű vegyületté.

CCM :Rf= 0,50, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

6:2:2 térfogatarányú elegye.

99. preparátum

O-í2,3-Di-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O(2,3,6-tri-0-metil-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-[0(2,3,6-tri-O-metil-a-D-g!ükopiranozil)-(I—)4)-O(2,3,6-tri-0-metil-\)-D-glükopiranozil)-(1^4)] ₃1,6-anhidro-2,3-di-O-metil-fi-D-glükopiranóz [(111) képletű vegyület]

A (111) képletű vegyületet a (97) képletű vegyület előállítására ismertetett eljárással alakítjuk (112) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,20, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

6:2:2 térfogatarányú elegye.

100. preparátum

O-(6-O-Benzoil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l-)4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l^)4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l ^)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l-)4)];-/,6-anhidro-2,3-di-O-metil-fi-D-glükopiranóz [(113) képletű vegyület]

A (112) képletű vegyületet a (98) képletű vegyület előállítására ismertetett eljárással alakítjuk (113) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,20, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

6:2:2 térfogatarányú elegye.

101. preparátum

0-(6-0-Benzoil-4-0-levulinil-2,3-di-0-metil-a-Dglükopiranozil)-(l^>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-Dglükopiranozil)-(l-)4)-[0-(2,3,6-tri-0-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l-)4)-0-(2,3,6-tri-0-metil-(!>-Dglükopiranozil)-(l^>4)] ₃-l ,6-anhidro-2,3-di-O-metil-fi-D-glükopiranóz [(114) képletű vegyület]

320 mg (0,167 mmol) (113) képletű vegyület 1 ml dioxánnal készített oldatához hozzáadunk 48 mg (0,25 mmol) l-(3-dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidrokloridot, 29 mg (0,25 mmol) levulinsavat és 4 mg (0,033 mmol) dimetil-amino-piridint. A reakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten nitrogénatmoszférában keverjük, majd diklór-metán és vizet adunk hozzá, majd extrahálás után a szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A nyersterméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, 312 mg (114) képletű vegyületet kapunk.

CCM :Rf= 0,50, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol 6:2:2 térfogatarányú elegye.

102. preparátum

O-(6-O-Benzoil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-a-Dglükopiranozil)-(l—)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-[)-Dglükopiranozil)-(l-)4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-v.-Dglükopiranozil)-(l-)4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-Dglükopiranozil)-(l-)4)] ₃-l fi-di-O-acetil^fi-di-Ometil-a^-D-glükopiranóz [(115) képletű vegyület] 312 mg (0,155 mmol) (114) képletű vegyület

2,25 ml ecetsavanhidrid, 50 μΐ és 0,15 ml trifluor-ecetsav elegyével készített oldatát 4 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután hozzáadunk 10 ml toluolt, majd az elegyet bepároljuk és 3 χ 10 ml toluollal együtt ledesztilláljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, és így 324 mg (115) képletű vegyületet izolálunk.

CCM:Rf=0,65, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol 6:2:2 térfogatarányú elegye.

A 27. reakcióvázlaton a (117) képletű oligoszacharid előállítását mutatjuk be.

103. preparátum

O-(6-O-Benzoil-4-0-levulinil-2,3-di-0-metil-a.-Dglükopiranozil)-(l -)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-^-Dglükopiranozil)-(l -)4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-o.-Dglükopiranozil)-( 1^)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-fi-Dglükopiranozil)-(l-)4)]₃-6-O-acetil-2,3-di-O-metil-afii-D-glükopiranóz [(116) képletű vegyület]

324 mg (0,153 mmol) (115) képletű vegyület és

22,3 μΐ (0,256 mmol) morfolin 2 ml toluollal készített oldatát 4 órán keresztül 35 °C-on keverjük. Ezután újabb 22,3 μΐ morfolint adunk a reakcióelegyhez, és azt 35 °C-on 20 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet gyorsan vízzel lehűtjük, majd diklór-metánnal extraháljuk, a szerves fázist 0,1 N sósavval, majd vízzel mossuk, megszárítjuk és szárazra pároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, 280 mg (116) képletű vegyületet izolálunk. CCM:Rf - 0,45, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

6:2:2 térfogatarányú elegye.

104. preparátum

O-(6-O-Benzoil-4-O-levuliniT2,3-di-O-metil-u-Dglükopiranozil)-(l—)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-^-Dglükopiranozil)-(1^4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-( 1-)4)-()-(2,3,6-tri-O-metil-\}-Dglükopiranozil)-(l^)4)]₃-6-O-acetil-2,3-di-O-metil-afi-D-glükopiranóz [(117) képletű vegyület] μΐ (0,39 mmol) triklór-acetonitrilt és 4,7 mg cézium-karbonátot hozzáadunk 138 mg (0,066 mmol)

HU 223 691 Bl (116) képletű vegyület 1,5 ml diklór-metánnal készített oldatához. A reakcióelegyet 2 órán keresztül keverjük, majd leszűrjük, bepároljuk, és a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. 152 mg (117) képletű imidátot kapunk.

CCM:Rf=O,35, szilikagél, toluol/etil-acetát/etanol

8:1:1 térfogatarányú elegye.

A 28. reakcióvázlaton a (128) képletű diszacharid előállítását mutatjuk be.

105. preparátum

Metil-2-O-benzil-4,6-O-benzilidén-a.-D-glükopiranozid [(119) képletű vegyület] g kereskedelmi forgalomban kapható (118) képletű vegyületet feloldunk 850 ml dimetil-formamidban, és hozzáadunk 50,5 ml benzil-bromidot. A reakcióelegyet 10 °C-ra lehűtjük, majd cseppenként hozzáadunk 20%-os vizes nátrium-hidroxid-oldatot. Az elegyet 1 órán keresztül keverjük, majd a hőmérsékletet 20 °Cra növeljük, és a reakcióelegyet további 20 órán keresztül keverjük. Az oldatot ezután jeges víz és toluol elegyére öntjük, majd extraháljuk. A szerves fázist bepároljuk, a nyersterméket kristályosítással tisztítjuk. 30,0 g (119) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,60, szilikagél, toluol/etil-acetát 7:3 térfogatarányú elegye.

106. preparátum

Metil-2-O-benzil-4,6-O-benzilidén-3-O-p-metoxibenzil-a-D-glükopiranozid [(120) képletű vegyület]

26,4 g (119) képletű vegyületet feloldunk 211 ml dimetil-formamidban, és az oldatot 5 °C-ra hűtjük. Nitrogénatmoszférában hozzáadunk 2,5 g nátrium-hidridet, majd cseppenként 13,3 g 4-metoxi-benzil-kloridot. A reakcióelegyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd etil-acetáttal hígítjuk, kétszer vízzel mossuk és bepároljuk. 40,7 g (120) képletű tiszta vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,80, szilikagél, toluol/etil-acetát 7:3 térfogatarányú elegye.

107. preparátum

Metil-2-O-benzil-3-O-p-metoxi-benzil-a-D-glükopiranozid [(121) képletű vegyület]

34,9 g (120) képletű vegyületet feloldunk 60%-os vizes ecetsavban és 4 órán keresztül 60 °C-on keverünk. Az elegyet toluollal hígítjuk, majd bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, és így 26,4 g (121) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,07, szilikagél, toluol/etil-acetát 7:3 térfogatarányú elegye.

108. preparátum

Metil-2-0-benzil-3-0-p-metoxi-benzil-6-0-metil-a.D-glükopiranozid [(122) képletű vegyület]

26,4 g (121) képletű vegyületet nitrogénatmoszférában feloldunk 263 ml diklór-metánban. A reakcióelegyhez szobahőmérsékleten hozzáadunk 11,6 g trimetil-oxónium-tetrafluor-borátot és 17,4 g 2,6-di-tercbutil-4-metil-piridint. Az elegyet 4 órán keresztül reagáltatjuk, majd jeges vízre öntjük és diklór-metánnal extraháljuk. A szerves fázist nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, majd bepároljuk. A nyersterméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk és így 18,5 g (122) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,25, szilikagél, toluol/etil-acetát 7:3 térfogatarányú elegye.

109. preparátum

Etil-2,4,6-tri-0-acetil-3-0-metil-l-tio-(x-L-jód-piranóz [(124) képletű vegyület]

48.4 g (123) képletű vegyületet (1,2,4,6-tetra-Oacetil-3-O-metil-a-L-jód-piranóz) [lásd Jaurand és munkatársai, Bio. Med. Chem. Lett. 2, 897-900 (1992)] feloldunk 175 ml toluolban. Nitrogénatmoszférában hozzáadunk 20 ml etán-tiolt és 134 ml toluolos bór-trifluorid-éterátot. A reakcióelegyet 1 órán keresztül keverjük, majd 400 ml vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk hozzá, és az elegyet további 1 órán keresztül keverjük. Az elegyet ezután etil-acetátra öntjük. A szerves fázist kétszer vízzel mossuk és bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, és így 29, 6 g (124) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,45, szilikagél, toluol/etil-acetát 6:4 térfogatarányú elegye.

110. preparátum

Metil-O-(2,4,6-tri-O-acetil-3-O-metil-a-L-jód-piranozil)-(l-^4)-3-O-benzil-3-O-p-metoxi-benzil6-O-metil-a-D-glükopiranozid [(125) képletű vegyület]

17.5 g (122) képletű vegyületet és 28,2 g (124) képletű vegyületet nitrogénatmoszférában feloldunk 525 ml toluolban. A reakcióelegyhez 4 Á-ös molekulaszitát adunk, és azt -20 °C-ra lehűtjük. Folyamatos nitrogénáramban cseppenként hozzáadunk 17,4 g 0,1 mólos frissen készített N-jód-szukcinimidet és 1,38 ml trifluor-metánszulfonsavat dioxán/diklór-metán 1:1 térfogatarányú elegyében oldva. 10 perccel később a vörös színű reakcióelegyet leszűrjük és egymás után vizes nátrium-tioszulfáttal, majd vizes nátrium-hidrogén-karbonáttal mossuk. A szerves fázist vákuumban bepároljuk, és így 30,0 g (125) képletű vegyületet izolálunk. CCM:Rf=0,45, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

8:2 térfogatarányú elegye.

111. preparátum

Metil-O-(3-O-metil-tx-L-jód-piranozil)-(l-y4)-2-Obenzil-3-O-p-metoxi-benzil-6-O-metil-v.-D-glükopiranozid [(126) képletű vegyület]

30,0 g (125) képletű vegyületet feloldunk 460 ml metanol/dioxán 1:1 térfogatarányú elegyében, és kálium-tercier-butilátot adunk hozzá. 15 perccel később a reakcióelegyet Dowex 50 50WX8H+ gyantával semlegesítjük és vákuumban bepároljuk. A tisztítást oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen végezzük, és

17,4 g (126) képletű vegyületet kapunk.

HU 223 691 Bl

CCM:Rf=0,25, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

95:5 térfogatarányú elegye.

112. preparátum

Metil-O-(4,6-O-izopropilidén-3-O-metil-a.-L-jódpiranozil)-(l -^4)-2-O-benzil-3-O-p-metoxi-benzil6-0-metil-a-D-glükopiranozid [(127) képletű vegyület]

17.4 g (126) képletű vegyületet nitrogénatmoszférában feloldunk 77 ml dimetil-formamidban. Hozzáadunk 26 ml 2,2-dimetoxi-propánt, valamint para-toluolszulfonsavat, és a reakcióelegyet 30 percig keverjük. Az elegyet vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal hígítjuk, majd etil-acetáttal extraháljuk. 19,7 g (127) képletű vegyületet izolálunk az oldószer lepárlása után. CCM:Rf=0,45, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

95:5 térfogatarányú elegye.

113. preparátum

Metil-O-(4,6-0-izopropilidén-2,3-di-0-metil-a-Ljód-piranozil)-(l -r4)-O-henzil-3-O-p-metoxi-benzil-6-O-metil-a.-D-glükopiranozid [(128) képletű vegyület]

17.5 g (127) képletű vegyületet feloldunk 24,4 ml dimetil-formamidban, és az oldatot 0 °C-ra lehűtjük. Nitrogénatmoszférában hozzáadunk 1,47 g 60%-os olajos nátrium-hidrid-diszperziót és 2,36 ml jód-metánt. 1 órával később a nátrium-hidrid-felesleget metanollal elbontjuk, és az elegyet diklór-metánnal extraháljuk, majd bepároljuk. 20,0 g (128) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,85, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

95:5 térfogatarányú elegye.

A 29. reakcióvázlaton a (138) képletű diszacharid előállítását mutatjuk be.

114. preparátum

Metil-O-(4,6-O-izopropilidén-2,3-di-O-metil-u.-Ljód-piranozil)-(l-+4)-2-O-benzil-6-O-metil-a-Dglükopiranozid [(129) képletű vegyület]

18.4 g (128) képletű vegyületet feloldunk 838 ml diklór-metánban és 168 ml vízben. Hozzáadunk 7,1 g

2,3-diklór-5,6-diciano-1,4-benzokinont, és az elegyet 18 órán keresztül 4 °C-on keverjük. A reakcióelegyet vizet nátrium-hidrogén-karbonát-oldatra öntjük, és diklór-metánnal extraháljuk. A szerves fázist bepároljuk, így 12,7 g (129) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,40, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

95:5 térfogatarányú elegye.

115. preparátum

Metil-O-(4,6-O-ízopropilidén-2,3-di-O-metil-a.-Ljód-piranozil)-(l -^4)-2,3-di-O-benzil-6-O-metil-aD-glükopiranozid [(130) képletű vegyület]

10.5 g (129) képletű vegyületet feloldunk 178 ml vízmentes dimetil-formamidban, majd az oldatot nitrogénatmoszférában 0 °C-ra lehűtjük. Hozzáadunk 1,91 g 60%-os olajos nátrium-hidrid-diszperziót, majd cseppenként hozzáadunk 3,3 ml benzil-bromidot. 30 perc elteltével a reakciót befejezzük, és a nátrium-hidrid-felesleget metanollal elbontjuk. A reakcióelegyhez vizet adunk, és kétszer extraháljuk etil-acetáttal. Az oldószert lepároljuk, így 13,6 g (130) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,50, szilikagél, toluol/etil-acetát 1:1 térfogatarányú elegye.

116. preparátum

Metil-O-(2,3-di-O-metil-a.-L-jód-piranozil)-(l^>4)2,3-di-O-benzil-6-O-metd-a-D-glükopiranozid [(131) képletű vegyület]

A (130) képletű vegyületet feloldjuk ecetsav/viz 77/33 térfogatarányú elegyében, és éjszakán át keverjük. Az elegyet kétszer toluollal együtt ledesztilláltuk, majd szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. 11,5 g (131) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,09, szilikagél, toluol/etil-acetát 1:1 térfogatarányú elegye; Rf=0,68, szilikagél, diklór-metán/metanol 9:1 térfogatarányú elegye.

117. preparátum

Metil-O-(2,3-di-O-metil-a,-L-jód-piranozil-uroniksav)-(l -+4)-2,3-dí-O-benzíl-6-O-metil-a.-D-glükopiranozid [(132) képletű vegyület]

11,6 g (131) képletű vegyület 60 ml diklór-metánnal készített oldatához 33 g 2,2,6,6-tetrametil-l-piperidinil-oxit, 40 ml nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot, 218 mg kálium-bromidot és 289 mg tetrabutil-ammónium-kloridot adunk. A reakcióelegyet 0 °C-ra lehűtjük és 15 perc alatt hozzáadjuk 44 ml telített vizes nátriumklorid-oldat, 21,8 ml telített vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldat és 1,3 mól (50 ml) nátrium-hipoklorit elegyét. A reakcióelegyet 1 órán keresztül keverjük, majd vízzel hígítjuk és háromszor extraháljuk diklórmetánnal. A szerves fázist vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és szárazra pároljuk. 13,4 g nyers (132) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,14, szilikagél, diklór-metán/metanol

9:1 térfogatarányú elegye.

118. preparátum

Metil-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziluronát)-(l-+4}-2,3-di- O-benzil-6-O-metil-Oi-Dglükopiranozid [(133) képletű vegyület] Nitrogénatmoszférában feloldjuk a (132) képletű vegyületet 110 ml dimetil-formamidban. Hozzáadunk 6,7 g kálium-hidrogén-karbonátot és 10,7 ml benzilbromidot, majd a reakcióelegyet 90 percig keverjük. Ezután etil-acetátot adunk hozzá, majd vizet, extrahálás után a szerves fázist bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, és így

9,9 g (133) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,43, szilikagél, toluol/etil-acetát 4:6 térfogatarányú elegye.

119. preparátum

Metil-O-(benzil-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-(l -+4)-2,3-di-O-benzil-6-O-metil-a.-Dglükopiranozid [(134) képletű vegyület]

9,9 g (133) képletű vegyületet feloldunk 300 ml metanolban, és visszafolyató hűtő alatt nitrogénat34

HU 223 691 Bl moszférában forraljuk. Cseppenként hozzáadunk

65,2 ml 1 mólos metanolos nátrium-metilát-oldatot, és a reakcióelegyet visszafolyató hűtő alatt forralva keverjük 3 órán keresztül. Az elegyet ezután szobahőmérsékletre lehűtjük, hozzáadunk 22,2 ml 1 N nátrium-hidroxidot, majd még 90 percig keverjük. Az elegyet Dowex 50WX8H- gyantával semlegesítjük, majd leszűrjük és bepároljuk. A tiszta terméket 192 ml dimetil-formamidban feloldjuk és nitrogénatmoszférában molekulaszitát adunk hozzá. Hozzáadunk 3,2 g kálium-hidrogén-karbonátot és 4,8 ml benzil-bromidot, majd a reakcióelegyet 5 órán keresztül keverjük. Végül etil-acetátot és vizet adunk hozzá, majd extraháljuk, a két fázist elválasztjuk, a szerves fázist bepároljuk. A nyersterméket szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, így 6,19 g (134) képletű vegyületet és 1,88 g kiindulási (133) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,55, szilikagél, toluol/etil-acetát 4:6 térfogatarányú elegye.

120. preparátum

Metil-O-(benzil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-\li-Dglükopiranozil-uronát)-(l-+4)-2,3-di-O-benzd-6-Ometd-a-D-glükopiranozid [(135) képletű vegyűlet]

6,2 g (134) képletű vegyületet feloldunk 40 ml dioxánban. Hozzáadunk 2,1 g levulinsavat, 3,75 g diciklohexil-karbodiimidet és 0,2 g 4-dimetil-amino-piridint, majd a reakcióelegyet 2 órán keresztül nitrogénatmoszférában keverjük. Hozzáadunk 95 ml dietil-étert és a csapadékét leszűrjük. A szűrletet vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal mossuk, vízmentes magnéziumszulfát felet szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. Dietiléter/heptán elegyéből végzet kristályosítással 6,2 g (135) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,26, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

95:5 térfogatarányú elegye.

121. preparátum

O-(Benzil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranozd-uronát)-(l^>4)-l, 3-di-O-acetil-2-O-benzil-ó-O-metil-af-glükopiranóz [(136) képletű vegyület]

6,1 g (135) képletű vegyületet feloldunk 256 ml ecetsavanhidridben -20 °C-on nitrogénatmoszférában. A reakcióelegyhez 30 perc alatt cseppenként hozzáadunk 4,9 ml kénsavat 49 ml ecetsavanhidriddel elegyítve. 60 perc elteltével a reakcióelegyhez semleges pH eléréséig nátrium-acetátot adagolunk. Ezután az elegyhez etil-acetátot és vizet adunk, majd a fázisokat elválasztjuk. A szerves fázist bepároljuk. A maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, és így 4,2 g (136) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,24, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

8:2 térfogatarányú elegye.

122. preparátum

()-(Benzil-4-()-le\ulinil-2,3-di-()-metil-^>-D-glükopiranozil-uronát)-(l-^4)-3-O-acetil-2-O-benzil-6O-metil-u.]i-ü-glükopiranóz [(137) képletű vegyület]

4,2 g (136) képletű vegyületet feloldunk 42 ml tetrahidrofuránban, hozzáadunk 4,1 ml piperidint, majd a reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután az elegyhez etil-acetátot adunk és 0,5 N sósavval mossuk. A szerves fázist bepároljuk, a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, így 3,2 g (137) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,33, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

1:1 térfogatarányú elegye.

123. preparátum

O-(Benzil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-tx-D-glükopiranozil-uronát)-(l-^4)-O-acetd-2-O-benzil-6-Ometil-a-D-glükopiranóz-triklör-acetimidát [(138) képletű vegyűlet]

1,59 g (137) képletű vegyületet nitrogénatmoszférában feloldunk vízmentes diklór-metánban. Hozzáadunk

1,1 ml triklór-acetonitrilt és 72 mg cézium-karbonátot, majd a reakcióelegyet 1 órán keresztül keveijük. A cézium-karbonátot leszűrjük, a szűrletet bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, így 1,57 g (138) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,60, szilikagél, toluol/etil-acetát 3:7 térfogatarányú elegye.

A 30. reakcióvázlaton a (140) képletű tetraszacharid előállítását mutatjuk be.

124. preparátum

Metil-O-(benzil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metil-$-Dglükopiranozil-uronát)-(l^r4)-O-(3-O-acetil-2-Obenzil-6-0-metil-n-D-glükopiranozil)-(l-v4)-0(benzÍl-2,3-di-O-metil-(i-D-jód-piranozil-uronát)(l^>4)-2,3-di-O-benzd-6-O-metd-a.-D-glükopiranozid [(139) képletű vegyűlet]

800 mg (133) képletű vegyűlet és 455,6 mg (138) képletű vegyűlet elegyét toluollal együtt ledesztilláljuk, majd 6 ml diklór-metánban nitrogénatmoszférában feloldjuk. A reakcióelegyhez 4 Á-ös molekulaszitát adunk, majd -20 °C-ra lehűtjük. Az elegyet 20 percig keverjük, és trimetil-szilil-trifluor-metánszulfonátot adunk hozzá [a (138) képletű vegyülethez viszonyítva 15 mol% mennyiségben). 10 perc elteltével a reakciót vizes nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadásával leállítjuk. A molekulaszita leszűrése után a szűrletet diklórmetánnal hígítjuk, vízzel mossuk, bepároljuk és oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, 560 mg (139) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,50, szilikagél, toluol/etil-acetát 3:7 térfogatarányú elegye.

125. preparátum

Metil-O-(benzd-2,3-di-O-metd-$-D-glükopiranozil-uronát)-(l-r4)-O-(3-O-acetil-2-O-benzil-6-Ometil-a.-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(benzil)-2,3di-0-metil-o.-L-jód-piranozil-uronát-(( 1^4)-2,3di-O-benzil-6-O-metil-tí-D-glükopiranozid [(140) képletű vegyidet]

532,6 mg (139) képletű vegyületet feloldunk 1,9 ml piridinben, majd szobahőmérsékleten hozzáadjuk

2,4 ml ecetsav, 0,3 ml hidrazin-hidrát és 1,9 ml piridin

HU 223 691 Bl elegyét. A reakcióelegyet 9 percig keverjük, majd diklór-metánt és vizet adunk hozzá. A szerves fázist elválasztjuk, 0,1 N sósavval, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel mossuk. A szerves fázist bepároljuk és oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk. 451 mg (140) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,45, szilikagél, toluol/etil-acetát 3:7 térfogatarányú elegye.

A 31. reakcióvázlaton a (140) képletű poliszacharid előállítását mutatjuk be.

126. preparátum

Metil-O-(6-O-benzoil-4-O-levulinil-2,3-di-O-metila-D-glükopiranozil)-( 1-)4)-0-(2,3,6-tri-O-metil$-D-glükopiranozil)-(l^)4)-[O-(2,3,6-tri-O-metila-D-glükopiranozil)-(l-)4)-0-(2,3,6-tri-0-metil$-D-glükopiranozil)-( 1-)4)] ₃-O-(6-O-acetil-2,3-di0-metil-a-D-glükopiranozil)-(l^)4)-0-(benzil-2,3di-O-metil-fi-D-glükopiranozil-uronát)-(1^4)-0(3-O-acetil-2-O-benzil-6-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(l-)4)-O-benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronát)-(l-)4)-2,3-di-O-benzil-6-O-metda-D-glükopiranozid [(141) képletű vegyület]

144 mg (0,064 mmol) (117) képletű vegyület és g (0,058 mmol) (140) képletű vegyület elegyét toluollal együtt ledesztilláljuk és feloldjuk 3,0 ml diklórmetán/dietil-éter 1:2 térfogatarányú elegyében. Az elegyhez 140 mg 4 Á-ös molekulaszitát adunk nitrogénatmoszférában, majd 0 °C-ra lehűtjük. A reakcióelegyhez 128 pl 0,1 mólos diklór-metánnal készített tercier-butil-dimetil-szilil-trifluor-metánszulfonátot adunk, majd 15 perccel később a reakciót nátrium-hidrogén-karbonát-oldat hozzáadásával leállítjuk. Az elegyet vízzel és diklór-metánnal extraháljuk, a szerves fázist megszárítjuk és bepároljuk. A terméket előbb Sephadex LH-20 oszlopon kromatográfiás eljárással tisztítjuk, itt eluensként diklór-metán/metanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk, majd szilikagélen újabb oszlopkromatográfiás eljárást végzünk, és így 124 mg (141) képletű vegyületet kapunk, amelyben az α/β arány 8:2.

CCM:Rf=0,60, szilikagél, toluol/etil-aceton 1:1 térfogatarányú elegye.

127. preparátum

Metil-O-(6-O-benzoil-2,3-di-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l-)4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-^-D-glükopiranozil)-(1-)4)-]O-(2,3,6-tri-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l -)4)-0-(2,3,6-tri-O-metiTfi-D-glükopiranozil)-(l-)4)]₃-O-(6-O-acetil-2,3-di-O-metil-aD-glükopiranozil)-(l^)4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranozil-uronát)-(1-)4)-0-(3-O-acetil-2-O-benzil-6-O-metil-a-D-glükopiranozil)(l-)4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziluronát)-(l -)4)-2,3-di-O-benzil-6-O-metil-a-D-glükopiranozid [(142) képletű vegyület]

A (141) képletű vegyületet a (140) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (142) képletű vegyületté. A (142) képletű vegyületet keverék formájában izoláljuk, amelyben az α/β arány 8:2.

CCM:Rf=0,45, szilikagél, toluol/etil-acetont 1:1 térfogatarányú elegye.

A 32. reakcíóvázlaton a (147) képletű triszacharid előállítását mutatjuk be.

128. preparátum

O-(2,3,4,6-tetra-O-Acetil-o-D-glükopiranozil)(1-)4)-0-(2,3,6-tri-O-acetil-a-D-glükopiranozil)(1-)4)-1,2,3,6-tetra-O-acetil-^-D-glükopiranóz [(144) képletű vegyület] g (85 mmol) nátrium-acetát 70 ml ecetsavanhidriddel készített szuszpenziójához 155 °C-on kis részletekben hozzáadunk 7 g (13,9 mmol) maltotriózt (ez kereskedelmi forgalomban kapható). 15 perccel később az átlátszó oldatot lehűtjük, a reakciót 700 ml jeges víz hozzáadásával leállítjuk. Az elegyet etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, leszűrjük és bepároljuk.

13,1 g (144) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,53, szilikagélen, diklór-metán/etil-acetát

7:3 térfogatarányú elegy ével.

129. preparátum

Etil-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetil-o.-D-glükopiranozil)(1-)4)-0-(2,3,6-tri-O-acetil-n-D-glükopiranozil)(1-)4)-2,3,6-tri-O-acetil-l-tio-$-D-glükopiranozid [(145) képletű vegyület] g (13,5 mmol) (144) képletű vegyületet feloldunk 80 ml toluolban. Nitrogénatmoszférában hozzáadunk 1,97 ml (26,9 mmol) etán-tiolt és 13,7 ml 1 mólos toluolos trifluor-bór-dietil-éterátot. A reakcióelegyet 60 órán keresztül keverjük, majd vízzel és diklór-metánnal hígítjuk. Extrakció után a szerves fázist 10%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd vízzel mossuk, megszárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A nyersterméket oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, 8,6 g (145) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=0,60, szilikagél, diklór-metán/etil-acetát

7:3 térfogatarányú elegye.

130. preparátum

Etil-0-(a.-D-glükopiranozd)-(l^)4)-0-(a-D-glükopiranozil)-(l -)4)-1-tio-fi-D-glükopiranozid [(146) képletű vegyület]

A (145) képletű vegyületet a (95) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (146) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,80, szilikagél, etil-acetát/piridin/ecetsav/víz 13:7:1,6:4 térfogatarányú elegyével.

131. preparátum

Etil-O-(2,3,4,6-tetra-O-benzoil-a-D-glükopiranozil)-(1-)4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-a-D-glükopiranozil)-(l-)4)-2,3,6-tri-O-benzoil-l-tio-$-D-glükopiranozid [(147) képletű vegyület]

A (146) képletű vegyületet a (92) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással alakítjuk (147) képletű vegyületté.

CCM:Rf=0,50, szilikagél, toluol/etil-acetát 9:1 térfogatarányú elegye.

HU 223 691 Bl

A 33. reakció vázlaton a (150) képletű poliszacharid előállítását mutatjuk be.

132. preparátum

Metil-O-(2,3,4,6-tetra-O-benzoil-a-D-glükopiranozil)-(l -^4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-u-D-glükopiranozil)-(l-v4)-O-(2,3,6-tri-O-benzoil-$-D-glükopiranozil)-(l-^4)-O-(6-O-benzoil-2,3-di-O-metil-aD-glükopiranozil)-(1^4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$D-glükopiranozil)-(l^>4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a.D-glükopiranozil)-(l-v4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-aD-glükopiranozil)-(l—>4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-fi-D-glükopiranozil-uronát)-(l-r4)-0-(3-0-acetil-2-0-benzil-6-0-metil-a.-D-glükopiranozil)(1 -+4)-O-(benzil-2,3-di-O-metil-a.-L-jód-piranoziluronát)-(l -+4)-2,3-di-O-benzil-6-O-metil-a-D-glükopiranozid [(148) képletű vegyület

105 mg (0,066 mmol) (147) képletű tioglikozid és 55 mg (0,017 mmol) (142) képletű akceptor (ahol az α/β arány 8:2) összekapcsolását végezzük a (109) képletű vegyület előállításánál ismertetett eljárással. A terméket először Sephadex LH 20 kolonnán kromatográfiás eljárással tisztítjuk, itt eluensként diklór-metán/metanol 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk, majd szilikagélen végzünk oszlopkromatográfiás eljárást, eluensként dietil-éter/etil-acetát/etanol 9:0,5:0,5 térfogatarányú elegyével. 49 mg (148) képletű vegyületet kapunk. CCM:Rf=0,30, szilikagélen, dietil-éter/etil-acetát/etanol 85:7,5:7,5 térfogatarányú elegye.

133. preparátum

Metil-O-(2,3,4,6-tetra-O-benzoil-a.-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-(j.-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-benzoil-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(6-O-benzoil-2,3-di-O-metil-aD-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(2,3,6-tri-O-meti!-fiD-glükopiranozil)-(l -+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-aD-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(2,3,6-tri-O-metilfrD-glükopiranozil)-(l-+4)] _rO-(6-O-acetil-2,3-diO-metil-a-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3-di-Ometil-$-D-glükopiranozil-uroniksav)-( 1-+4)-0-(3O-acetil-6-O-metil-a.-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0(2,3-di-O-metil-Ck-L-jód-piranozÍl-uromksav)(1^4)-6-0-metil-a.-D-glükopiranozid [(149) képletű vegyület] mg (0,01 mmol) (148) képletű vegyület 10 ml etil-acetáttal készített oldatát nitrogénatmoszférában keverjük 10%-os csontszénre vitt palládium jelenlétében [90 tömeg%-ot alkalmazunk a (148) képletű vegyülethez viszonyítva] 3 órán keresztül, majd a reakcióelegyet leszűrjük. A szűrletet bepároljuk, így 42 mg (149) képletű vegyületet kapunk.

CCM:Rf=O,35, szilikagélen, etil-acetát/piridin/ecetsav/víz 20/7/1,6/4 térfogatarányú elegy.

134. preparátum kletil-()-(fj.-D-glükopiranozil)-(l—>4)-O-(a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-($-D-glükopiranozil)(l^>4)-0-(2,3-di-0-metil-a.-D-glükopiranozil)(1-+4)-0-(2,3,6-tri-0-metil-$-D-glükopiranozil)(1 -+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)(l->4)-0-(2,3,6-tri-0-metil-P-D-g/ükopiranozil)(l->4)]j-O-(2,3-di-O-meti/-a-D-glükopiranozi/)(l->4)-0-(2,3-di-0-metil-$-D-glükopiranozil-uroniksav)-(l^>4)-O-(6-O-metil-a-D-glükopiranozil)(1 -+4)-0-(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uroniksav)-(1^4)-6-O-metil-a-D-glükopiranozid [(150) képletű vegyület]

0,22 ml metanol és 0,66 ml 0,66 N nátrium-hidroxid-oldat elegyét hozzáadjuk 41 mg (0,01 mmol) (149) képletű vegyülethez, majd az elegyet 20 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vízzel hígítjuk, 0,5 N sósav hozzáadásával pH-ját 6,5-re állítjuk be. Bepárlás után a tiszta terméket Sephadex G-25 kolonnán sómentesítjük, eluensként víz/acetonitril 9:1 térfogatarányú elegyét használjuk. A hexadekaszacharidot tartalmazó frakciókat egyesítjük és liofílizáljuk. 26 mg (150) képletű vegyületet kapunk amorf fehér por formájában.

CCM:Rf=O,35, szilikagélen, etil-acetát/piridin/ecetsav/víz 8/7/1,6/4 térfogatarányú elegye.

135. preparátum

6-O-terc-Butil-dimetil-szilil-l ,2-O-izopropilidén-3O-metil-ek-D-glükofuranóz [(152) képletű vegyület] g (42,7 mmol) (151) képletű dióit feloldunk 100 ml vízmentes diklór-metánban, és hozzáadunk

7,1 g (47,3 mmol) terc-butil-dimetil-szilil-kloridot és 5,8 g (85,3 mmol) imidazolt. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten keveijük, 2 órával később az elegyet diklór-metánnal hígítjuk és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk, a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 1:9 térfogatarányú elegyét használjuk. 11,9 g (152) képletű címvegyületet kapunk szirup formájában. Kitermelés: 80%.

[a] -34°(c=l,9 CHClj).

136. preparátum

6-O-terc-Butil-dimetil-szilil-1,2-O-izopropilidén-3O-metil-5-C-vinil-a-D-glükofuranóz [(154) képletű vegyület] ml vízmentes diklór-metánhoz -78 °C-on hozzáadunk 3,2 ml (36,8 mmol) oxalil-kloridot és 5,2 ml (73,4 mmol) dimetil-szulfoxidot, majd az elegyet 30 percig keverjük. Ezután a reakcióelegyhez 6,4 g (18,4 mmol) (152) képletű vegyületet adunk, és az elegyet még 1 órán keresztül keverjük. Ekkor 15,3 ml (110,0 mmol) trietil-amint adunk a reakcióelegyhez, majd 30 perccel később diklór-metánnal hígítjuk. Szokásos módon kapjuk meg a (153) képletű 5-ulóz-származékot, amelyet közvetlenül használunk fel a következő lépéshez. A (153) képletű nyers ketont 100 ml vízmentes tetrahidrofuránnal felvesszük, és hozzáadunk 28 ml (27,6 mmol) 1 mólos tetrahidrofurános vinil-magnézium-bromidot. Az adagolást 0 °C-on végezzük, 1 óra elteltével a reakcióelegyet hígítjuk és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot szilikagélen

HU 223 691 Bl oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 1:9 térfogatarányú elegyét használjuk. 4,8 g kívánt (154) képletű vegyületet kapunk szirup formájában. Kitermelés: 70%.

[a] -40° (c=l,3, CHC1₃).

Elemanalízis:

c%	H%
számított: 57,72	9,15
talált: 57,77	9,23
137. preparátum

1,2,4,6-tetra-O-Acetil-3-O-metil-5-C-vinil-$-Dglükopiranóz [(156) képletű vegyület]

3,5 g (9,4 mmol) (154) képletű vegyületet 50 ml vízzel elegyítünk, hozzáadunk 1 g IR-120 gyantát, és az elegyet 6 órán keresztül 80 °C-on melegítjük. A gyantát leszűrjük, a szűrletet bepároljuk, a nyersterméket 12 ml ecetsavanhidrid és 13 ml piridin segítségével acetilezzük. Az ecetsavanhidrid-felesleget metanollal elbontjuk, és az oldószert lepároljuk. A maradékot vízzel és diklór-metánnal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk. Eluensként etil-acetát/ciklohexán 3:2 térfogatarányú elegyét használjuk. A (156) képletű tetraacetát vegyületet szilárd anyag formájában kapjuk meg. Kitermelés: 2,7 g(75%), olvadáspont: 50 °C. [a]_D -84° (c=l,6, CHC1₃)

Elemanalízis:

	C%	H%
számított:	52,47	6,19
talált:	52,51	6,19

CI-MS: 406(M+NH₄), 389 (M+l).

138. preparátum

Metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-O-(2,4,6-tri-O-acetil-3O-metil-5-C-vinil-$-D-glükopiranozil)-a.-D-glükopiranozid [(158) képletű vegyület]

1,6 g (4,1 mmol) (156) képletű vegyületet és 2,1 g (4,5 mmol) (157) képletű vegyületet [lásd P. J. Garegg és H. Hultberg, Carbohydr. Rés. 93, CIO (1981)] feloldunk 50 ml vízmentes diklór-metánban, hozzáadunk 4,0 ml molekulaszitát, majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1 órán keresztül keverjük és -78 °C-on hozzáadunk 0,95 ml (5,2 mmol) TMSOTf-t. A reakcióelegyet lassan hagyjuk szobahőmérsékletre felmelegedni, 2 óra elteltével az elegyet trietil-aminnal semlegesítjük és celitszűrőn leszűrjük. A szűrletet vízzel mossuk, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. Eluensként etil-acetát/ciklohexán 4:1 térfogatarányú elegyét használjuk, 2,77 g (158) képletű cím szerinti vegyületet kapunk szilárd anyag formájában. Kitermelés: 85%, olvadáspont: 47 °C.

[<x]_D -36° (c=0,6, CHC1₃).

Elemanalízis:

	C%	H%
számított:	65,14	6,61
talált:	65,09	6,70

139. preparátum

Metil-2,3,6-O-tri-O-benzil-4-O-(4,6-O-izopropilidén-3-O-metil-5-C-vinil-(i-D-glükopiranozil)-(j.D-glükopiranozid [(160) képletű vegyület]

2,7 g (3,4 mmol) (158) képletű vegyületet 40 ml metanolban feloldunk. 0 °C-on katalitikus mennyiségű nátriumot adunk hozzá, és az elegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószer lepároljuk, a (159) képletű maradékot 40 ml vízmentes acetonnal felvesszük, hozzáadunk 2 ml 2,2-dimetoxipropánt, és katalitikus mennyiségű para-toluolszulfonsavat. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten éjszakán át keverjük, majd az oldószert lepároljuk. A maradékot kloroformmal és vízzel felvesszük, a szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk. Eluensként etil-acetát/ciklohexán 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,7 g 4’, 6’-izopropilidén 0-160 képletű származékot kapunk. Kitermelés: 70%, a szilárd anyag olvadáspontja 5 °C.

[<x]_D + 13°(c=0,8, CHC1₃).

Elemanalízis:

	C%	H%
számított:	67,97	7,13
talált:	67,87	7,16

CI-MS: 707 (m+l) 724 (M+NH₄).

140. preparátum

Metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-O-(4,6-O-izopropilidén-3-O-metil-5-C-vinil-$-D-manopiranozil)-a.D-glükopiranozid [(162) vegyület]

0,35 ml (4,0 mmol) oxalil-klorid és 0,57 ml (8,0 mmol) vízmentes DMSO 10 ml vízmentes diklórmetánnal készített elegyét -78 °C-on 30 percig keverjük. Az oldathoz hozzáadjuk 1,4 g (2,0 mmol) (160) képletű vegyület 10 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatát, és a reakcióelegyet még 45 percig keverjük. A reakcióelegyet ezután 1,7 ml (12,0 mól) vízmentes trietil-amin hozzáadásával semlegesítjük, majd diklór-metánnal hígítjuk. A szerves fázist vízzel mossuk, vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a (161) képletű maradékot további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben. A (161) képletű ketont 15 ml vízmentes tetrahidrofuránnal felvesszük és -78 °C-on hozzáadunk 4 ml (4,0 mmol) 1 N tetrahidrofurános nátrium-hidrid-oldatot. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1 órán keresztül keverjük, majd hozzáadunk 2 ml 5%-os nátrium-hidroxidot és 1 ml hidrogén-peroxidot. Az oldószert lepároljuk, a maradékot etil-acetáttal felvesszük és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 2:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 1,0 g (162) képletű vegyületet kapunk, kitermelés: 70%.

[a]_D-11° (c=0,5, CHCI₃).

CI-MS: 724 (Μ +18), 707 (Μ +1).

HU 223 691 BI

141. preparátum

Metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-0-(2-0-acetil-3-0-metil-5-C-vinil-\i-D-mannopiranozil)-o.-D-glükopiranozid [(164) képletű vegyület]

940 mg (1,3 mmol) (162) képletű vegyületet 3 ml piridinben feloldunk, és hozzáadunk 0,3 ml ecetsavanhidridet. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán keresztül keverjük, a piridin- és ecetsavanhidrid-felesleget lepároljuk, a (163) képletű maradékot közvetlenül használjuk fel az izopropilidén védőcsoport eltávolításához 5 ml 80%-os ecetsavval 60 °C-on 2 órán keresztül. Az ecetsavfelesleget lepároljuk, a maradékot oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 4:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 660 mg (164) képletű dióit kapunk szilárd anyag formájában. Kitermelés: 70%, olvadáspont: 53 °C.

[a]_D -26° (c=0,8, CHClj).

CI-MS: 709 (M+l), 726(M+18).

142. preparátum

Metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-(2-O-acetil-3-O-metil-6O-tozil-5-C-vinil-$-D-mannopiranozil)-o.-glükopiranóz [(154) képletű vegyület]

600 mg (0,9 mmol) (164) képletű vegyületet feloldunk 3 ml piridinben, hozzáadunk 240 mg (1,3 mmol) tozil-kloridot és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán keresztül keverjük. Az oldószert lepároljuk, a maradékot kloroformmal hígítjuk és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, eluensként etilacetát/ciklohexán 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 297 mg (165) képletű tozilezett vegyületet kapunk szirup formájában. Kitermelés: 80%.

[a]_D -26° (c=0,8, CHC1₃).

143. preparátum

Metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-(2,6-anhidro-3-O-metil5-C-vinil-$-D-mannopiranozil)-a-D-glükopianozid [(166) képletű vegyület]

550 mg (0,6 mmol) (165) képletű vegyületet 3 ml etanollal felveszünk és hozzáadunk 5 ml 0,1 N etanolos nátrium-hidroxid-oldatot. A reakcióelegyet 3 órán keresztül 70 °C-on melegítjük, majd IR-120 gyantával (H+ alak) semlegesítjük és celitszűrőn leszűrjük. A maradékot bepárlás után oszlopkromatográfiás eljárással szilikagélen tisztítjuk, eluensként etil-acetát/ciklohexán 1:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 292 mg (166) képletű vegyületet kapunk szirup formájában, kitermelés: 70%.

[a]_D + 13° (c=0,5, CHCI3)CI-MS: 666 (M+18).

144. preparátum

Metil-2,3,6-tri-O-benzil-4-(benzil-3-O-metil-2-O-5C-metilidén-a-L-jód-pirán-urinátj-a-D-glükopiranozid [(167) képletű vegyület]

260 mg (0,4 mmol) (166) képletű vegyületet feloldunk 20 ml diklór-metánban, az oldatot -78 °C-on keverjük, majd 30 másodpercig ózont buborékoltatunk át rajta. Az oldat színe halványsárgává változik. A reakcióelegyhez ekkor dimetil-szulfidot adunk, és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot további tisztítás nélkül használjuk fel a következő lépésben. A nyers aldehidet 16 ml terc-butanollal felvesszük, hozzáadunk 5 ml 2-metil-2-butént és 16 ml vizet. A reakcióelegyhez ezután 700 mg NsH₂PO₄-ot, majd 700 mg NaClO₂-ot adunk. A szuszpenziót szobahőmérsékleten éjszakán át erőteljesen keverjük, majd vízzel hígítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes magnézium-szulfát felett szárítjuk, bepároljuk, majd közvetlenül használjuk fel a következő reakciólépéshez. A sav nyersterméket 25 ml dimetilformamiddal felvesszük, hozzáadunk 0,7 g (2,0 mmol) tetrabutil-ammónium-jodidot, 0,25 g (2,5 mmol) kálium-hidrogén-karbonátot és 0,25 ml (2,1 mmol) benzil-bromidot. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 5 órán keresztül keverjük, majd vízzel és dietil-éterrel extraháljuk. Az éteres fázist vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot szilikagélen oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. Eluensként etil-acetát/ciklohexán 2:1 térfogatarányú elegyét használjuk. 236 mg (167) képletű származékot kapunk szirup formájában. Kitermelés: 80%.

CI-MS: 774(M+18).

A 34. reakcióvázlaton egy Pe pentaszacharid előállításához használható szinton előállítását mutatjuk be, amelynek az L-iduronsav-konfigurációja rögzített. [A vegyület a (III. 1) általános képletű vegyületek körébe tartozik.

A következőkben a találmány szerinti vegyületek előállítását mutatjuk be.

1. példa

Metil-0-(3-0-metil-2,4,6-tri-0-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(3-O)-metil-2,6-di-O-szulfo$-D-glükopiranozil)-(l-y4)-[O-(3-O-metil-2,6-diO-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-(l^r4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-$-D-glükopiranozil)-(l-^4)] ₆0-(2,3-di-0-metil-6-0-szulfo-o.-D-glükopiranozil)-(l->4)-O-(2,3-di-O-metil-i(:-D-glükopiranozilurokinsav)-(l^>4)-O-(2,3,6-tri-O-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-( 1-^4)-0-(2,3-di-O-metil-a.-L-jódpiranozil-urokinsav)-(l ->4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a.D-glükopiranozid-nátrium [(168) képletű vegyület]

A (31) képletű vegyületet az 5. számú általános eljárás szerint reagáltatjuk, és így kapjuk meg a (168) képletű vegyületet a három lépésre számított 80%-os kitermeléssel. [a]_D +41 (c=0,8, víz). ESIMS, negatív mód: monoizotóptömeg = 7133,26; kémiai tömeg=7138,90; kísérleti tömeg=7137,26+0,0 atomtömegegység.

Ή-NMR (D₂O) a fő anomer protonok δ-értéke: 5,71;

5,48; 5,46; 5,44; 5,17; 5,08; 4,81; 4,78; 4,67 ppm.

Ugyanilyen eljárással állíthatjuk elő a (169) és (170) jelű vegyületet is. A vegyületek jellemzőit a I. táblázatban foglaljuk össze.

HU 223 691 Bl

1. táblázat (1.1) általános képletű vegyűletek

Példaszám	t	Mn
(169) számú vegyület	5	+ 39
(170) számú vegyület	6	+ 38 ]

4. példa

Metil-O-(2,3-di-O-metil-4,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-[0-(2,3-di-0-metil-6-0-szulfoa-D-glükopiranozil)-(1^4)] ₃₅-O-(2,3-di-O-metiT fi-D-glükopiranozil-urokinsav)-(l -+4)-0-(2,3,6tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3-diO-metil-a-L-jöd-piranozil-urokinsav)-(1 -+4)2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátrium [(171) számú vegyület] mg (10,5 mmol) (51) képletű vegyületet az 5. számú általános eljárással reagáltatunk, majd a kapott terméket liofílizáljuk. 50 mg (187) jelű szulfátéit vegyületet kapunk. Kitermelés három lépésben: 77%. [a]_D +107 (c=0,52, víz). ESISM, pozitív mód: monoizotóptömeg=6194,16, kémiai tömeg=6198,83, kísérleti tömeg=6195,33±l,79.

Ή-NMR (D₂O) a fő anomer protonok δ-értékei: 5,71;

5,67; 5,48; 5,43; 5,17; 5,10; 4,68 pp.

Azonos eljárással állíthatjuk elő a (172) és (173) jelű vegyületet. Ezek jellemzőit a II. táblázatban adjuk meg.

II. táblázat (1.2) általános képletű vegyűletek

Példaszám	t	[a]_D
(172) jelű vegyület	5	+ 119
(173) jelű vegyület	6	+ 124

7. példa

Metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(I—>4)-O-í3-O)-metiÍ-2,6-di-O-szulfo$-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O-(3-O-metil-2,6-diO-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-(l^>4)-O-(3-O-metiT2,6-di-O-szulfo-$-D-glükopiranozil)-(l^>4)[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)(l^>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)(1^4)]₄-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-( 1-+4)-0-(2,3-di-O-metil-$-D-glükopiranozil-urokinsav)-(l -+4)-(2,3,6-tri-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-(1-+4)-0-(2,3-di-O-metiTaL-jód-piranozil-urokinsav)-(l -+4)-2,3,6-tri-Oszidfo-a-D-glükopiranozid-nátrium [(174) jelű vegyület]

A (75) képletű vegyületet az 5. számú általános eljárással reagáltatjuk, és így kapjuk a (174) képletű vegyületet. Kitermelés a három lépésre: 84%. [a]_D +62 (c=0,46, víz). ESIMS, pozitív mód: monoizotóptömeg=4966,39; kémiai tömeg=4970,04; kísérleti tömeg=4969,63±0,78 atomtömegegység.

Ή-NMR (D₂O) a fő anomer protonok δ-értékei: 5,69;

5,63; 5,57; 5,46; 5,44; 5,41; 5,15; 5,06; 4,79; 4,66;

4,62; 4,41 ppm.

A 7. példa szerinti eljárással megfelelő intermedierekből kiindulva állítjuk elő a III. táblázatban szereplő 8-12. példa szerinti vegyületeket.

111. táblázat (1.3) általános képletű vegyűletek

Példaszám	m	t	[“Id
(175) számú vegyület	3	3	+ 51
(176) számú vegyület	1	5	+ 65
(177) számú vegyület	1	4	+ 59
(179) számú vegyület	2	3	+ 47
(179) számú vegyület	3	2	+ 36

13. példa

Metil-O-(2,3,6-tetra-O-szulfo-a-D-glükopiranoziI)(1^4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfo-a.-D-glükopiranozil)(1-+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfo-$-D-glükopiranozil)(1^4)-0-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-(l -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l-+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-(1-+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-$-D-glükopiranozil)-(l -+4)] ₃-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-a.D-glükopiranozil)- (1-+4)-0-2,3-di-O-metil-$-Dglükupirano7il-uroniksav)-(l—>4)-O-(6-O-metil2,3-di-O-szulfo-a.-D-glükopiranozil)-(l-+4)-O(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranoziI-uromksav)(l^>4)-6-O-metil-2,3-di-O-szulfo-u.-D-glükopiranozid [(180) képletű vegyület] mg (0,0084 mmol) (150) képletű védőcsoportoktól teljesen megszabadított hexadekaszacharidot feloldunk 0,87 ml dimetil-formamidban. Nitrogénatmoszférában hozzáadunk 125 mg (0,67 mmol, 80 ekv.) kéntrioxid-trietil-amin-komplexet, és az elegyet 16 órán keresztül 50 °C-on keverjük. A reakcióelegyet 0 °C-ra lehűtjük, hozzáadunk 227 mg (2,6 mmol) vizes nátrium-hidrogén-karbonátot. A reakcióelegyet kis térfogatra bepároljuk és Sephadex G-25 kolonnára visszük, eluensként víz/acetonitril 9:1 térfogatarányú elegyét használjuk. A megfelelő frakciókat elválasztjuk, kis térfogatra besűrítjük, Dpwex XW4 Na⁺ ioncserélő kolonnára visszük vízzel, eluáljuk, az eluátumot liofilizáljuk, és így 37 mg (151) képletű vegyületet kapunk fehér por formájában. [a]D +67,6 (c=l, víz) MS ESI: molekulatömeg 4370,6 (H⁺ alak) C128H₂₂₂O_H3S₁₆ (elméleti molekulatömeg=4370,14).

NMR: anomer protonok eltolódása (ppm-ben):

1-es egység: 5,17; 2-es egység: 5,03; 3-as egység: 5,41; 4-es egység: 4,42; 5-ös egység: 5,49; 6-os egység: 4,66; 7-es, 9-es és 11-es egység: 5,67; 8-as, 10-es és 12-es egység: 4,46; 13-as egység: 5,61; 14-es egység: 4,94; 15-ös egység: 5,59 pm; 16-os egység: 5,69.

A 13. példa szerint előállított (180) képletű poliszacharid szerkezetét a 35. reakcióvázlaton szemléltetjük.

HU 223 691 Bl

Claims

1. Szintetikus poliszacharidok és sóik, amelyek tartalmaznak egy kapcsolódomént a III antitrombinhoz, és amelyek olyan öt monoszacharidot tartalmazó láncból állnak, amelyek összesen két karbonsavcsoportot és legalább négy szulfátcsoportot tartalmaznak, ahol a dómén a nem redukáló végén közvetlenül kapcsolódik egy kapcsolódoménon keresztül a trombinhoz, és 10-25 monoszacharidegységből álló láncot tartalmaz, a monoszacharid olyan hexóz, pentóz vagy dezoxicukor, amelynek valamennyi hidroxilcsoportja egymástól függetlenül 1-6 szénatomos alkilcsoporttal éteresítve van, vagy szulfát formában észteresítve van, különösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóik.

2. Az 1. igénypont szerinti poliszacharidok és sóik, amelyek az (I) általános képlettel jellemezhetők, ahol a hullámos vonal olyan kötést jelent, amely vagy a piranózgyűrű síkja fölött, vagy az alatt helyezkedik el, a (Po) általános képletű csoport egy Po poliszacharidot jelent, amely n azonos vagy különböző monoszacharidegységet tartalmaz, és amely az anomer szénatomján keresztül kapcsolódik Pe-hez, (Mo) általános képletű csoport sematikusan ábrázol piranózszerkezetű monoszacharidegységet, amely lehet hexóz, pentóz vagy a megfelelő dezoxicukrok, ahol ez az egység anomer szénatomján keresztül egy másik monoszacharidegységhez kapcsolódik, és az egység hidroxicsoportjai azonos vagy különböző X csoportokkal helyettesítve vannak,

X jelentése 1-6 szénatomos alkil- vagy szulfocsoport, n értéke 10 és 25 közötti egész szám,

Pe jelentése (Pe) általános képletű pentaszacharid, ahol Rj jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy szulfocsoport,

R[3jelentése R_t csoport vagy a kapcsolódó oxigénatommal és az azonos gyűrűn lévő karboxilcsoportot hordozó szénatommal együtt C-CH₂-0 csoportot alkot,

R jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport,

W jelentése oxigénatom vagy metiléncsoport, előnyösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóik.

3. A 2. igénypont szerinti poliszacharidsók, ahol a kation alkálifémkation, előnyösen nátrium- vagy káliumion.

4. A 2. vagy 3. igénypont szerinti poliszacharidok és sóik, amelyek az (I.A) általános képlettel jellemezhetők, ahol (Po’) jelentése egy bizonyos Po poliszacharidcsalád, amely anomer szénatomján keresztül Pe-hez kapcsolódik, ahol Pe jelentése az (I) általános képletnél megadott, (Mo) jelentése az (I) általános képletnél megadott,

- a [ ]_m-ben lévő monoszacharidok m-szer ismétlődő diszacharidot alkotnak, a [ ],-ben lévő monoszacharidok t-szer ismétlődő diszacharidot alkotnak,

- m értéke 1 és 8 közötti szám, t értéke 0 és 5 között szám és p értéke 0 és 1 közötti szám, azzal a megkötéssel, hogy 5<m+t<12, előnyösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóik.

5. A 2. vagy 3. igénypont szerinti poliszacharidok és sóik, amelyek a (II. A) általános képlettel jellemezhetők, ahol (Po”) jelentése egy bizonyos Po poliszacharidcsalád, amely anomer szénatomján keresztül kapcsolódik Pe-hez, ahol Pe jelentése, mint az (I) általános képletben, (Mo) jelentése ugyanaz, mint az (I) általános képletben,

- a [ ]_m’-ben lévő monoszacharidok m’-ször ismétlődnek, a [ ]_t-ben lévő monoszacharidok t’-ször ismétlődnek, a [ ]p -ben lévő monoszacharidok p’-ször ismétlődnek.

m’ értéke 1 és 5 közötti szám, t’ értéke 0 és 24 közötti szám, p’ értéke 0 és 24 közötti szám, azzal a megkötéssel, hogy 10<m’+t’+p’< 25, előnyösen gyógyszerészetileg alkalmazható sóik.

6. A 2. vagy 3. igénypont szerinti poliszacharidsók, amelyek anionja az (1.1) általános képlettel jellemezhető, ahol t értéke 5, 6 vagy 7, és a kation egyértékű, gyógyszerészetileg alkalmazható kation, és megfelelő savak.

7. A 2. vagy 3. igénypont szerinti poliszacharidsók, ahol az anion az (1.2) általános képlettel jellemezhető, ahol t értéke 5, 6 vagy 7, és a kation egyértékű, gyógyszerészetileg alkalmazható kation, valamint a megfelelő savak.

8. A 2. vagy 3. igénypont szerinti poliszacharidsók, ahol az anion az (1.3) általános képlettel jellemezhető, ahol m értéke 1, 2 vagy 3, és t értéke 2, 3,4 vagy 5, és a kation egyértékű, gyógyszerészetileg alkalmazható kation, valamint a megfelelő savak.

9. A következők közül választott poliszacharidok:

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-PD-glükopiranozil)-( 1 -+4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-cc-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-3-D-glükopiranozil)-( 1 ^4)J₄-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3-di0-metil-p-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 -+4)-0-(2,3,6tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(2,3-di-Ometil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-(l-+4)-2,3,6-tri-Oszulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —»4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-PD-glükopiranozil)-( 1 —»4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —»4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-p-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)]₅-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3-diO-metil-P-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 -+4)-0-(2,3,6tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3-di-Ometil-a-L-jód-piranozi l-uronsav)-( 1-+4)-2,3,6-tri-Oszulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-P41

HU 223 691 Β1

D-glükopiranozil)-(l —»4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(3-0-metil-2,6di-O-szulfo-p-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)]₆-O-(2,3-di0-metil-6-0-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O(2,3-di-O-metil-P-3-D-glükopíranozil-uronsav)(1 -+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)(l—»4)-O-(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)(1-+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(2,3-di-O-metil-4,6-di-O-szulfo-a-Dglükopiranozil)-(l-+4)-[0-(2,3-di-0-metil-6-0-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)], !-O-(2,3-di-O-metil-p-Dglükopiranozil-uronsav)-(l->4)-0-(2,3,6-tri-0-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3-di-0-metil-a-Ljód-piranozil-uronsav)-(l->4)-2,3,6-tri-0-szulfo-a-Dglükopiranozid-nátriumsó

- metil-O-(2,3-di-O-metil-4,6-di-O-szulfo-a-Dglükopiranozil)-(l—>4)-[O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)] ₁₃-O-(2,3-di-O-metil-P-Dglükopiranozil-uronsav-( 1 —>4)-O-(2,3,6-tri-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3-di-O-metil-a-Ljód-piranozil-uronsav)-( 1 -+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-Dglükopiranozid-nátriumsó;

- metil-0-(2,3-di-0-metil-4,6-di-0-szulfo-a-Dglükopiranozil)-( 1 —>4)-[O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)], ₅-O-(2,3-di-O-metil-p-Dglükopiranozil-uronsav)-( 1 -+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfoa-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3-di-O-metil-a-Ljód-piranozil-uronsav)-( 1 —»4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-Dglükopiranozid-nátriumsó

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-pD-glükopiranozil)-(l—>4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6di-O-szulfo-P-D-gIükopiranozil)-(l—>4)]₂-[O-(2,3,6tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-( 1-+4)-0-(2,3,6-triO-metil-P-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)]₂-O-(2,3-di-Ometil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3dí-0-metil-P-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 -+4)-0(2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-(2,3di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1-+4)-2,3,6tri-O-szulfo-a-O-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-PD-glükopiranozil)-(l-+4)-[O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(3 -O-metil-2,6di-O-szulfo-p-D-glükopiranozil)-(l—>4)]₂-[O-(2,3,6tri-O-metil-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3,6-tri0-metil-P-D-glükopiranozil)-(l->4)]₃-0-(2,3-di-0metil-6-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3di-O-metil-P-D-glükopiranozil-uronsav)-(l-»4)-O(2,3,6-tri-0-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-(2,3di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1 ^4)-2,3,6tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-(l-+4)-0-(3-0-metil-2,6-di-0-szulfo-PD-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-P-D-glükopiranozil)-(l—>4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-cc-O-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-PD-glükopiranozil)-( 1 -+4)]₄-O-(2,3-di-O-metil-6-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3-di-O-metilP-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 —>4)-O-(2,3,6-tri-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —»4)-(2,3-di-O-metil-aL-jód-piranozil-uronsav)-(l—>4)-2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-pD-glükopiranozil)-( 1 —»4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(3-O-metil-2,6-di-Oszulfo-P-D-glükopiranozil)-(l-+4)-[0-(2,3,6-tri-0-metil-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-aD-glükopiranozil)-( 1 -+4)]₃-O-(2,3-di-O-metil-6-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-(l—»4)-O-(2,3-di-O-metilp-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1-+4)-0-(2,3,6-tri-Oszulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-(2,3 -di-O-metil-aL-j ód-piranozil-uronsav)-( 1 -+4)-2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-pD-glükopiranozil)-( 1 -+4)-[O-(2,3,6-tri-O-metil-a-Dglükopiranozil)-( 1 —>4)-O-(2,3,6-tri-O-metil-P-D-glükopiranozil)-(l-+4)]₄-O-(2,3-di-O-metil-6-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-(l—>4)-O-(2,3-di-O-metil-p-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 -+4)-0-(2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-( 1 -+4)-(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1 —>4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó;

- metil-O-(3-O-metil-2,4,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)-O-(3-O-metil-2,6-di-O-szulfo-pD-glükopiranozil)-(l-+4)-[0-(2,3,6-tri-0-metil-a-Dglükopiranozil)-( 1 -+4)-0-(2,3,6-tri-O-metil-p-D-glükopiranozil)-( 1 -+4)]₅-O-2,3-(di-O-metil-6-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-(l—>4)-O-(2,3-di-O-metil-p-D-glükopiranozil-uronsav)-( 1 —>4)-O-(2,3,6-tri-O-szulfo-aD-glükopiranozil)-( 1 —»4)-(2,3-di-O-metil-a-L-jód-piranozil-uronsav)-( 1 —>4)-2,3,6-tri-O-szulfo-a-D-glükopiranozid-nátriumsó.

10. Eljárás (I) általános képletű vegyületek előállítására, azzal jellemezve, hogy első lépésben egy kívánt (I) általános képletű poliszacharid teljesen védett prekurzorát állítjuk elő, amely a Pe dómén olyan védett prekurzorát tartalmazza, amely a nem redukáló végén egy Po szulfátéit poliszacharid védett prekurzorával meg van hosszabbítva, majd második lépésben a negatív töltésű csoportokat bevisszük és/vagy szabaddá tesszük.

11. (II.l) általános képletű vegyületek, ahol T, és T_n jelentése egymástól függetlenül azonosan vagy különböző módon átmeneti, féltartós vagy tartós szubsztituens, Z jelentése hidroxilcsoport védőcsoport.

12. (III. 1) általános képletű vegyületek, ahol T) és T_n jelentése egymástól függetlenül átmeneti, féltartós vagy tartós szubsztituens, Z jelentése hidroxilcsoport védőcsoport.

13. Gyógyszerkészítmények, amelyek hatóanyagként egy, az 1-9. igénypontok bármelyike szerinti poliszacharidot vagy poliszacharidsót tartalmazzák gyógyszerészetileg alkalmazható bázissal alkotott só vagy sav formájában inért, nem toxikus, gyógyszeré42

HU 223 691 Β1 szetileg alkalmazható vivőanyaggal együtt vagy azzal összekeverve.

14. A 13. igénypont szerinti gyógyszerkészítmények adagolható egység formájában, ahol a hatóanyag legalább egy gyógyszerészeti vivőanyaggal össze van 5 keverve.

15. A 14. igénypont szerinti készítmények, ahol az adagolható egységek 0,1 és 100 mg közötti hatóanyagmennyiséget tartalmaznak.

16. A 15. igénypont szerinti készítmények, ahol az adagolható egységek 0,5 és 50 mg közötti hatóanyagmennyiséget tartalmaznak.

17. Egy 1 -9. igénypontok bármelyike szerinti poliszacharid vagy poliszacharidsó alkalmazása koagulációs rendellenességek következményeként fellépő patológiás állapotok kezelésére szolgáló gyógyszer előállítására.

HU 223 691 Β1

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

^ox ^ox o^\ b <^ox .°^χ ’o^r\ /OX (°x>h w <ox>h <QX>h <°x>h |OX)h JF n t

(I. A)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

OX OX OX AA %· (OX)_h ' u (OX)_h (0X)_h _ — m* V

(111.1) (ΙΙΙ.Γ)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00 (Mo)

HU 223 691 Β1

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

1. reakcióvázlat OR, ooc«

2. reakcióvázlat

A DLT védett prekurzorának előállítása

OTn

OTn (a) zo

C £o

I *^**0^ |

OTn OTn (d)

OTn OTn !L° m | o^í»U OTn OTn (c) OTn ’ ^f OTn

θ θ

HO'S· t ****O~Í | ’^w.OT, OTn OTn ’ (e)

ZO’

OTn OTn X-R iX/

OTn

O

OTn

OTn i | *U.₀-i | *Uo-i I *k..o*i | <~ot, OTn OTn ' t (f)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

3. reakcióvázlat (6) és (9) képletű monoszacharid előállítása

a.

L«vO

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

4. reakcíóvázlat (13) és (14) képletű diszacharid előállítása (6)4(9)

L««O

HU 223 691 Bl Int. Cl.7; C 08 B 37/00

5. reakcióvázlat (19) képletű oligoszacharid előállítása

03)-414)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

6. reakcióvázlat (29) képletű poliszacharid előállítása o

>

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

7. reakcióvázlat (28) képletű oligoszacharid előállítása

HU 223 691 Bl Int. C17: C 08 B 37/00

8. reakcióvázlat (91) képletű poliszacharid előállítása (1. pl. szerinti vegyület)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

9. reakcióvázlat (37) képletű diszacharid előállítása

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

10. reakcióvázlat (38) és (40) képletű diszacharid előállítása

Őrt

11. reakcióvázlat (41) képletű tetraszacharid előállítása l

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

12. reakcióvázlat (42) képletű tetraszacharid előállítása

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

13. reakcióvázlat (47) képletű poliszacharid előállítása

U)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

14. reakcíóvázlat (50) képletű oligoszacharid előállítása

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

16. reakcióvázlat (57) képletű diszacharid előállítása

PMBO

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

17. reakcióvázlat (62) képletű triszacharid előállítása

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

18. reakcióvázlat (66) képletű oligoszacharid előállítása (82) l

(«)

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

19. reakcióvázlat (72) képletű oligoszacharid előállítása

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

20. reakcióvázlat (73) képletű poliszacharid előállítása

HU 223 691 Bl

Int. Cl.⁷: C 08 B 37/00

21. reakcióvázlat (74) és (75) képletű poliszacharid előállítása * < ° l\ o

HU 223 691 Bl