HU221253B1 - Hepatitis vaccines containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a - Google Patents

Hepatitis vaccines containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a Download PDF

Info

Publication number
HU221253B1
HU221253B1 HU9402758A HU9402758A HU221253B1 HU 221253 B1 HU221253 B1 HU 221253B1 HU 9402758 A HU9402758 A HU 9402758A HU 9402758 A HU9402758 A HU 9402758A HU 221253 B1 HU221253 B1 HU 221253B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
hepatitis
hbsag
antigen
mpl
vaccine composition
Prior art date
Application number
HU9402758A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT69931A (en
HU9402758D0 (en
Inventor
Nathalie Marie- Garcon-Johnson
Pierre Hauser
Clothilde Thiriart
Pierre Voet
Original Assignee
Smithkline Beecham Biolog
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27450853&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU221253(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GB929206797A external-priority patent/GB9206797D0/en
Priority claimed from GB929206786A external-priority patent/GB9206786D0/en
Priority claimed from GB929206788A external-priority patent/GB9206788D0/en
Priority claimed from GB929206789A external-priority patent/GB9206789D0/en
Application filed by Smithkline Beecham Biolog filed Critical Smithkline Beecham Biolog
Publication of HU9402758D0 publication Critical patent/HU9402758D0/hu
Publication of HUT69931A publication Critical patent/HUT69931A/hu
Publication of HU221253B1 publication Critical patent/HU221253B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32411—Hepatovirus, i.e. hepatitis A virus
    • C12N2770/32434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

A találmány hepatitis, különösen hepatitis B-fertőzés kezelésére vagymegelőzésére alkalmazható vakcina- készítménnyel foglalkozik, amely ahepatitisantigént, valamint egy megfelelő hordozóanyagot, példáulalumíniumot tartalmaz 3-0-dezatelilált monofoszforil lipid-A-val valókombinációban. Ezenkívül a vakcinakészítményt tartalmazó kombinációsvakcinákat is ismertetnek. ŕ

Description

A találmány új vakcinakészítményekkel, azok előállítására szolgáló eljárásokkal, és gyógyászatban való alkalmazásukkal foglalkozik. Közelebbről, a találmány tárgyát hepatitisfertőzés kezelésére szolgáló új készítmények, valamint hepatitisz vakcina összetevőt tartalmazó kombinált vakcinakészítmények képezik.
Az A, B, C, D és E hepatitisvírusok által okozott vírus-hepatitis igen gyakori vírusos megbetegedés. Főként a B- és C-vírusok felelősek sok májkarcinomás eset előfordulásáért. Hatékony vakcinák kifejlesztése tehát lényeges kérdés és a figyelemreméltó eredmények ellenére még nem megoldott feladat. Egy modem hepatitis vakcinákat ismertető összefoglaló, valamint számos kulcsfontosságú utalás található a következő alábbi szakirodalmi helyen Prof A.L.W.F. Eddleston, Láncét, 1142. oldal (1990. május 12.). [Lásd ezenkívül, B.N. Vyas, J.L. Dienstag, J.H. Hoffnagle szerk. Viral hepatitis and Liver Disease, Grune és Stratton Inc. (1984); valamint F.B. Hollinger, S.M. Lemon és H. Margolis szerk., Viral hepatitis and Liver Disease, Proceedings of the 1990 International Symposium, kiadta: William és Wilkins],
A találmány szerint „hepatitisantigén” alatt bármely olyan hepatitisvírus eredetű antigén természetű anyagot értünk, amely a vírus elleni immunitás kiváltására alkalmazható emberekben. A hepatitisantigén lehet például egy rekombináns DNS-eljárásokkal nyert polipeptid vagy egy olyan gyengített hepatitis vírustörzs, amelyet esetleg ismert eljárásokkal inaktiváltunk. A találmány kiterjed mindegyik hepatitisantigénre, azaz az A, B, C, D, illetve E antigénekre, mely megoldások példáit az alábbiakban ismertetjük.
A hepatitis A-vírussal (HAV) történő fertőzés igen gyakori, de rendelkezésre állnak tömeges immunizálásra alkalmas vakcinák, például a Havrix- (SmithKline Beecham Biologicals) vakcina, amely egy a HM175 HAV törzsből előállított elölt gyengített vakcina [lásd, Inactivated Candidate Vaccines fór hepatitis A, F.E. Andre, A. Hepbum és E.D. Hondt, Prog. Med. Virol., 37, 72-95 (1990); valamint a SmithKline Beecham Bilogicals által kiadott „Havrix” termékismertetőt (1991)].
Flehming és munkatársai (loc. cit., 56-71. oldal) összefoglalták a hepatitis A klinikai vonatkozásait, virológiáját, immunológiáját és járványtanát és tárgyalták eme gyakori vírusfertőzés elleni vakcinák kifejlesztésének lehetséges megközelítési módjait.
A találmány szerinti „HAV antigén” kifejezés bármely olyan antigénre vonatkozik, amely képes emberben a HAV ellen neutralizáló ellenanyagok képződésének kiváltására. A HAV antigén tartalmazhat élő gyengített vírusrészecskéket vagy inaktivált gyengített vírusrészecskéket vagy lehet például egy olyan HAV kapszid vagy HAV vírusprotein, amely rekombináns DNS-eljárásokkal könnyen előállítható.
A hepatitis B-vírussal (HBV) történő fertőzés kiterjedt probléma, de ma már rendelkezésre állnak tömeges immunizálásra alkalmazható vakcinák, például az Engerix B (SmithKline Beecham plc), amely egy géntechnikai úton előállított vakcina.
A hepatitis B felületi antigén (HBsAg) előállítása jól ismert. [Lásd például, Harford és munkatársai, Develop. Bioi. Standard, 54, 125, (1983); Gregg és munkatársai, Biotechnology, 5, 479, (1987); 0 226 846 számú európai szabadalmi leírást; 0 299 108 számú európai szabadalmi leírást, valamint az azokban található utalásokat].
A találmány szerinti „hepatitis B felületi antigén” vagy „HBsAg” kifejezések bármely, a HBV felületi antigén antigenitásával rendelkező HBsAg vagy annak fragmense. Nyilvánvaló, hogy a HBsAg S antigén 226 aminosavból álló szekvenciáján kívül [lásd, Tiollais és munkatársai, Natúré, 317, 489, (1985), valamint az abban található utalásokat], a találmány szerinti HBsAg kívánt esetben tartalmazhatja a fent említett szakirodalmi helyeken, valamint a 0 278 940 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett pre-S szekvenciát alkotó összes aminosavat vagy annak egy részét. Közelebbről, a HBsAg tartalmazhat egy olyan polipeptidet, amely egy olyan aminosavszekvenciát tartalmaz, amelyben egy hepatitis B-vírus ad szerotípusának nyitott olvasási keretéhez viszonyítva a HBsAg L proteinjének 12-52. maradékát a 133-145. maradékok, azt pedig a 175-400. maradékok követik (ezt a polipeptidet nevezik L* polipeptidnek, lásd a 0 414 374 számú európai szabadalmi leírást). A találmány szerint a HBsAg ugyancsak tartalmazhatja preSl-preS2 -S polipeptidet, melyet a 0 198 474 számú európai szabadalmi leírás ismertet (Endotronics), vagy annak megfelelőit, például melyeket a 0 304 578 számú európai szabadalmi leírás ismertet (McCormick és Jones). A találmány szerinti HBsAg vonatkozhat mutánsokra is, például a WO91/14703 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben vagy a 0 511 855 Al számú európai szabadalmi bejelentésben leírt „szökevény mutánsokra”, előnyösen olyan HBsAg-re, amelyben a 145. pozícióban glicin helyett arginin aminosav helyettesítés történt.
Általában a HBsAg részecske formában található. A részecskék tartalmazhatnak például kizárólag S-proteint vagy lehetnek összetett részecskék, például (L*,S), ahol L* a fenti meghatározás szerinti protein, S pedig a HBsAg S-proteinjét jelöli. Az említett részecske előnyösen abban a formában van, ahogy az élesztőben expresszálódik.
A hepatitis C-vírust (HCV) részletesen tárgyalja a 2212511B számú nagy-britanniai szabadalmi leírás és az abban található utalások. Leírták, hogy egy vagy több HCV cDNS eredetű immunogén polipeptidből esetleg vakcinák állíthatók elő.
A hepatitis D-vírus ismertetése az alábbi szakirodalmi helyen található: Viral hepatitis and Liver Disease (1990 Symposium).
A hepatitis E-vírust (HÉV) részletesen ismerteti a WO89/12462 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés és az abban található utalások. Egy vakcinakészítmény összetétele lehet például egy gyógyszergyártásba szokásos adjuváns, valamint egy HÉV eredetű rekombináns protein vagy HÉV eredetű rekombináns protein vagy HÉV eredetű proteinek elegye.
Bár a kísérleti szakaszban és kereskedelmi forgalomban levő hepatitis vakcinákkal, például a Havrix és
HU 221 253 Β1
Engerix B vakcinákkal kiváló eredményeket érnek el, elfogadott tény, hogy egy optimális vakcinának nem csupán neutralizáló ellenanyag termelést kell kiváltania, hanem amennyire az csak lehetséges, T-sejtek által közvetített sejtes immunitást is serkentenie kell. Szükség van hepatitis összetevőt tartalmazó összetett vakcinákra is, hogy így serkentsük a sejtes immunitást. A találmány ezeket a célokat valósítja meg.
A találmány tárgyát egy 3-O-dezacetilált monofoszforil lipid-A-val (a továbbiakban MPL) kapcsolt hepatitisantigént, valamint megfelelő hordozóanyagot tartalmazó vakcina képezi.
A 3-O-dezacetilált monofoszforil lipid A-t (vagy más néven 3 dez-O-acetilált monofoszforil lipid-A-t) a korábbiakban 3D-3-O-dezacetilált monofoszforil lipidA-nak vagy 3d-3-O-dezacetilált monofoszforil lipid-Anak nevezték annak jelölésére, hogy redukáló végi glukózamin 3. pozíciója dez-O-acetilált. A vegyület előállítását lásd 2 220 211 A számú nagy-britanniai szabadalmi bejelentésben. Vegyileg ezt 4, 5, illetve 6 acilezett láncokkal rendelkező 3-O-dezacetilált monofoszforil lipid-A molekulák elegye alkotja. E helyen a 3D-MPL (vagy 3d-MPL) helyett az MPL rövidítést használjuk, mivel az „MPL” a Ribi Immunochem. (Montana) regisztrált védjegye, amelyet a Ribi az általa előállított 3O-dezacetilált monofoszforil lipid-A egyértelmű megjelölésére használ.
A 2 220 211 A számú nagy-britanniai szabadalmi bejelentés megemlíti, hogy a korábban használt enterobakteriális eredetű lipopoliszacharidák (LPS) endotoxikus hatása csökkent (3-O-dezacetilálás után), míg az immunogén sajátságok megmaradtak. A 2 220 211 A számú nagy-britanniai szabadalmi bejelentés azonban ezt a megfigyelést csak bakteriális (Gram negatív) rendszerekkel kapcsolatban idézi. A találmány elsőbbsége időpontjáig annak lehetősége, hogy a 3-dezacetiIált monofoszforil lipid A-t egy hepatitisvírus antigént tartalmazó vakcinában adjuvánsként alkalmazzák, nem merült fel.
Meglepetésre azt találtuk, hogy a találmány szerinti, hepatitisvírus antigéneket tartalmazó vakcinakészítmények különösen előnyös tulajdonságokkal rendelkeznek, amint azt az alábbiakban ismertetjük.
Különösen előnyös, hogy a találmány szerinti vakcinakészítmények, még igen alacsony antigéndózisok esetén is nagyon hatásosan alkalmazhatók immunvédettség kiváltására.
Kitűnő védettséget hoznak létre az elsődleges fertőzéssel szemben és előnyösen serkentik mind a fajlagos humorális (neutralizáló ellenanyagok termelődését jelentő), mind az effektor sejtek által közvetített (DHT) immunválaszt.
További fontos előnyük, hogy a találmány szerinti vakcinakészítmények terápiás hatású vakcinákként is alkalmazhatók.
A fenti meghatározás szerinti MPL adagonként szokásosan 10-100 mikrogramm, előnyösen 25-50 mikrogramm mennyiségben van jelen, míg a hepatitisantigén egy adagban tipikusan 2-50 mikrogramm mennyiségben található.
A hordozóanyag lehet egy olaj-víz típusú emulzió, egy lipid hordozóanyag, vagy alumíniumgél (alumíniumsó).
Nem toxikus olaj-víz típusú emulziók előnyösen egy vizes hordozóanyagban tartalmaznak egy nem toxikus olajat, például squalene-t, és egy emulgeáló anyagot, például Tween 80-at. A vizes hordozóanyag lehet például foszfátpufferes fiziológiás sóoldat.
A találmány egyik megvalósítási módjában egy HAV antigént (például a Havrix-vakcinában található antigént) MPL-lel és alumínium-hidroxiddal elegyítünk az alább ismertetettek szerint.
A találmány további megvalósítási módjában egy HBsAg S antigént (mint például az Engerix vakcinában található antigént) MPL-lel és alumínium-hidroxiddal elegyítünk az alább ismertetettek szerint.
A találmány egy további specifikus megvalósítási módjában a fenti meghatározás szerinti HBsAg részecskéket (L*, S) MPL-lel és alumínium-hidroxiddal elegyítjük.
A fenti megvalósítási módokban alumínium helyett egy olaj-víz típusú emulziót is használhatunk.
További megvalósítási módokat az alábbi példákban ismertetünk.
A találmány tárgyát képezi továbbá az alább ismertetett, orvosi gyógyászati célra, különösen hepatitisvírus-fertőzések kezelésére vagy megelőzésére alkalmazható vakcinakészítmény. A találmány egy előnyös megvalósítási módja esetén a találmány szerinti vakcina már aktív hepatitisfertőzésekben, különösen a hepatitis B- és/vagy C-fertőzésekben szenvedő emberek kezelésére alkalmazható terápiás hatású vakcina.
Az általunk kapott meglepően hatásos eredmények tükrében a találmány tárgya előnyösen kiterjed továbbá hepatitis A- és/vagy B-fertőzések kezelésére vagy megelőzésére alkalmazható vakcinakészítményre.
Előnyös esetben a találmány szerinti hepatitisvakcina-készítmény egyéb antigéneket is tartalmaz, úgyhogy az hatékony egy vagy több bakteriális, vírusos vagy gombás eredetű fertőzés kezelésében vagy megelőzésében.
A találmány szerinti hepatitisvakcina-készitmény tehát előnyösen tartalmaz legalább egy, olyan nem-hepatitisantigén összetevőt, amelyről a gyakorlatban ismert, hogy az alábbiak közül egy vagy több kórokozó ellen védettséget vált ki: diphtéria, tetanus, pertussis, Haemophilus influenzáé b (Hib), valamint polio.
A találmány szerinti vakcina előnyösen a fenti meghatározás szerinti HBsAg-t tartalmaz.
Közelebbről, a találmány tárgykörébe tartozó kombinációs vakcinák egy DTP (diphtéria-tetanus-pertussisj-hepatitis B kombinációs vakcina készítmény, egy Hib-hepatitis B vakcina készítmény, egy DTP-Hibhepatitis B vakcina készítmény, valamint egy IPV (inaktivált polio vakcina)-DTP-Hib-hepatitis B vakcina készítmény.
A fenti kombinációk előnyösen tartalmazhatnak egy hepatitis A ellen védettséget kiváltó összetevőt, előnyösen a Havrix vakcinában található HM-175 törzsből származó elölt gyengített törzset.
HU 221 253 Β1
Az ilyen vakcinákban alkalmazható összetevők már hozzáférhetők a kereskedelemben, a részletek megtudhatók az Egészségügyi Világszervezettől. Az IPV összetevő például lehet a Salk-féle inaktivált polio vakcina. A pertussis vakcina tartalmazhat egész sejteket vagy acelluláris terméket.
A találmány szerinti hepatitis vakcina vagy kombinációs vakcina egy a gyermekgyógyászatban alkalmazható vakcina.
Vakcinák előállításának általános ismertetése található az alábbi szakirodalmi helyen: New Trends and Developments in Vaccines, Voller és munkatársai szerk., University Park Press, Baltimore, Maryland U.S.A., (1978). Liposzómákba való enkapszulálásra szolgáló eljárást ír le például Fullerton (a 4 235 877 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban). Proteinek makromolekulákhoz való konjugálását ismertetik például Likhite (4 372 945 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás) és Armor és munkatársai (4 474 757 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás).
Az egyes vakcinaadagokban található antigén mennyiségét úgy választjuk meg, hogy az immun védettséget váltson ki anélkül, hogy tipikus vakcinák esetén jelentős káros mellékhatások lépnének fel. Ez a mennyiség attól függően változik, hogy mely fajlagos immunogéneket alkalmazzuk. Általában mindegyik adag várhatóan 1-1000 mikrogramm teljes immunogént, előnyösen 2-100 mikrogramm, legelőnyösebben 4-40 mikrogramm teljes immunogént tartalmaz. Egy adott vakcina esetében az optimális mennyiség szokásos vizsgálatok alapján, például az ellenanyag titerek figyelembe vétele és az egyénben kialakult egyéb válaszok alapján állapítható meg. Az egyén egy első immunizálást követően körülbelül 4 hét elteltével megerősítő oltásban részesülhet.
A találmány tárgyát képezi továbbá egy hepatitis fertőzés megelőzésére vagy kezelésére hatékonyan alkalmazható vakcina előállítására szolgáló eljárás, amely eljárásban a találmány szerinti hepatitisantigént egy hordozóanyaggal és MPL-lel elegyítjük.
Ennek az eljárásnak az alkalmazásával a HBsAgnel előnyösen egy vagy több további összetevőt elegyítünk, hogy így a gyermekgyógyászatban előnyösen alkalmazható kombinációs vakcinát nyerjünk.
A találmány szerinti megoldást és annak előnyeit az alábbi példákkal szemléltetjük.
1. példa
Hepatitis B vakcina készítmény
Az MPL-t a Ribi Immunochem Research Inc. cégtől szereztük be. Az alumínium-hidroxidot (Alhydrogel) a Superfos cégtől szereztük be.
Az MPL-t injektálás céljára vízfürdőben végzett ultrahangos kezeléssel 0,2-1 mg/ml koncentrációban vízben szuszpendáltuk, amíg a részecskék fotokorrelációs fényszórásos eljárással mért 80-500 nanométer átmérőt nem értek el.
1-20 mikrogramm HBsAg-t (mint például az Engerix B vakcinában található S-antigént) foszfátpufferben 30-100 mikrogramm alumínium-hidroxidon (10,38 mg/ml Al3+ koncentrációjú oldat) adszorbeáltunk egy órán át szobahőmérsékleten, keverés mellett. Ezután az oldathoz 30-50 mikrogramm DMPL-t (1 mg/ml koncentrációjú oldat) adtunk. Az injektálás céljára a térfogatot és az ozmolaritást vízzel és 5 x koncentrált foszfátpufferrel 600 mikroliterre állítottuk be. Az oldatot 1 órán át szobahőmérsékleten inkubáltuk, majd felhasználásig 4 °C-on tároltuk. A tárolás folyamán történik a készítmény érlelődése. A fenti készítmény egérben vizsgálandó 10 injektálható adagot képvisel.
Hasonló készítmény állítható elő HBsAg-ként a fenti meghatározás szerinti összetett (L*, illetve S) antigén felhasználásával.
2. példa
Hepatitis A vakcina készítmény
Az MPL-t a Ribi Immunochem Research Inc., az alumínium-hidroxidot (Alhydrogel) a Superfos cégtől szereztük be.
A HAV-ot (adagonként 360-22 EU) előzetesen a végső alumínium-hidroxid koncentráció (0,5 mg/ml) 10%-ának megfelelő alumínium-hidroxidon adszorbeáltuk. Az oldathoz MPL-t (adagonként 12,5-100 mikrogrammot) adtunk.
A fennmaradó alumínium-hidroxidot az oldathoz adtuk és egy órán át szobahőmérsékleten állni hagytuk. A térfogatokat foszfátpufferrel (10 mmol/1 foszfát, 150 mmol/1 NaCl) beállítottuk, majd a készítményt felhasználásig 4 °C-on tároltuk.
3. példa
Hepatitis A + hepatitis B kombinációs vakcina készítmény
A HBsAg-t a végső alumínium-hidroxid mennyiség (0,5 mg/ml) 90%-ának megfelelő alumínium-hidroxidon adszorbeáltuk és egy éjszakán át szobahőmérsékleten tartottuk. A pH-t 6,2-re állítottuk be, majd a készítményt 14 napig szobahőmérsékleten érlelődni hagytuk.
A hepatitis A antigént (adagonként 360-22 EU) a HM-175 törzs (mint a Havrix vakcinában található törzs) inaktivált származéka formájában előzetesen az alumínium-hidroxid végkoncentráció (0,5 mg/ml) 10%-ának megfelelő alumínium-hidroxidon adszorbeáltuk. A fennmaradó alumínium-hidroxidot az oldathoz adtuk és egy órán át, keverés mellett, szobahőmérsékleten állni hagytuk.
Az alumínium-hidroxidon adszorbeált HAV-ot ezután a HBsAg készítményhez adtuk.
A HAV/HBsAg oldathoz 1 ml-es adagban 12,5-100 mikrogramm végkoncentrációban MPL-t adtunk, a térfogatot a végtérfogatra egészítettük ki, majd a készítményt felhasználásig 4 °C-on tároltuk.
4. példa
További antigéneket tartalmazó kombinációs vakcinák
DTP, IPV, Hib antigéneket, illetve sejtmentes vagy teljes pertussis sejt antigént tartalmazó kombinációs vakcinákat egy vagy több kívánt antigénnek a fenti 1.,
HU 221 253 Β1
2., illetve 3. példák szerinti készítményekhez való hozzáadásával állítunk elő.
5. példa
Humorális immunitás fokozása és sejt által közvetített immunitás kiváltása egereknek aluminium-hidroxiddal és MPL-lelformulázott HBsAg-nel való immunizálásával.
A. Al(OH)3 + MPL hatása anti-HBs ellenanyagok termelődésének kiváltására
Balb/c egereket immunizáltunk bőr alá vagy bőrbe adva, Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel és MPL adjuvánssal. Az egereket kétszer immunizáltuk a HBsAg/Al/MPL készítménnyel és az első, illetve a második adag után mértük az ellenanyagválaszt. A teljes Ig-t ELISA eljárással vagy AUSAB készlettel (Abbot Láb, 111.) határoztuk meg, különös figyelmet szenteltünk az IgG2a izotípusú ellenanyagok indukálásának, mivel ennek az izotípusnak a termelődését főként gamma-interferon kiválasztás váltja ki. Ennek az izotípusnak az indukálása tehát indirekt módon a sejt által közvetített immunitás aktiválását, nevezetesen a Thl aktiválást tükrözi.
Vizsgáltuk a HBsAg/MPL arányát, valamint az MPL részecskék méretét is, mivel az MPL vizes szuszpenziója, 100 nanométernél kisebb, illetve 500 nanométernél nagyobb részecskéket is eredményezhet.
I. kísérlet - MPL (500 nanométernél nagyobb méretű részecskékből álló) adag hatása Al(OH) 3-on adszorbeált rekombináns HBsAg immunogenitására nőstény Balb/c egeret injektáltunk bőr alá adva 50 meg Al+ ++-on [A1(OH)3 formájában] adszorbeált 2,5 meg rekombináns HBsAg-nel és emelkedő mennyiségű (3,1-50 meg) 500 nanométernél nagyobb részecske méretű MPL-lel. Az egereket kétszer oltottuk kéthetes időközökben, 100 mcl térfogattal. Az első injekciót követően két héttel (részleges véreztetés) és a megerősítő oltást követően egy héttel vért vettünk tőlük. ELISA eljárással meghatároztuk a teljes anti-HBs IgG mennyiségét és a fajlagos IgG2a mennyiségét elfogó antigénként rekombináns HBsAg felhasználásával. A titereket a maximális érték 50%-ának megfelelő hígítás (középhígítás) reciprokában fejeztük ki. Az eredményeket az 1. táblázatban adtuk meg. Ezek azt mutatják, hogy az MPL adagok emelkedésével mind a fajlagos IgG, mind a fajlagos IgG2a szint növekszik, különösen a 12,5-50 meg adagok esetében. A hatás mind az elsődleges, mind a másodlagos válasznál megfigyelhető és különösen nyilvánvaló az IgG2a esetében (egészen 20szoros emelkedésig), ami közvetett módon az MPL-lel való immunizálás által kiváltott gamma-interferon kiválasztásra utal.
II. kísérlet - MPL-t (> 500 nanométer) tartalmazó, illetve nem tartalmazó, klinikai kipróbálás céljára készült adszorbeált rekombináns HBsAg készítmények összehason l ítása
Három Al(OH)3-on adszorbeált, klinikai kipróbálás céljára készült rekombináns HBsAg készítményt állítottunk elő : A DSAH16 jelzésű készítmény nem tartalmazott MPL-t, és kontrollként szolgált. A DSAR501 és
502 jelzésű készítményeket hasonló módon állítottuk elő (0,5 mg Al+++-on [A1(OH)3 formájában] adszorbeált 20 meg rekombináns HBsAg), ezek azonban 50 meg MPL-t (>500 nm) tartalmaztak.
A három készítményt (200 mcl térfogatban 2,5 meg HBsAg, 100 meg Al+ + + és 6,25 meg MPL) 10 egeret tartalmazó csoportoknak bőr alá injektáltuk két alkalommal, kéthetes időközökben. Az egerektől a 14. napon és a megerősítő oltást követően egy héttel vért vettünk. Az anti-HBs ellenanyagok szintjét az AUSAB készlettel vagy egy házi ELISA eljárással határoztuk meg az IgG, illetve IgG2a ellenanyagokra nézve. Az eredményeket a 2. táblázatban foglaltuk össze. Ezek azt mutatják, hogy az első injektálást követően 2 héttel a két MPL-t tartalmazó készítmény igen jelentős antiHBs választ váltott ki (12,4, illetve 41,9 mIU/ml), míg az a készítmény, amely nem tartalmazott MPL-t, csak csekély mértékű választ váltott ki (0,75 mIU/ml). Azoknak az állatoknak a száma, amelyekben válasz alakult ki szintén magasabb az MPL esetében (9/10, illetve 9/10, ezzel szemben MPL hiányában 1/10). Az MPL hatása a megerősítő oltást követően igazolódott, mivel a DSAR501, illetve 502 készítményeknél körülbelül hatszor magasabb titereket kaptunk, mint azt az MPL-t nem tartalmazó készítményeknél megfigyeltük.
Ez azt jelenti, hogy legalábbis egerekben, az MPL (>500 nanométer) javítja mind az anti-HBs válasz kinetikáját, mind az anti-HBs válasz szintjét.
Az eredményeket igazoltuk, amikor a DSAH16 (MPL-t nem tartalmazó), illetve a DSAR502 (MPL-t tartalmazó) készítményekkel való immunizálást követően mértük a fajlagos IgG, illetve IgG2a választ: MPL jelenlétében az anti-HBs IgG titer ötször (az elsődleges válasz esetében), illetve háromszor (a másodlagos válasz esetében) magasabb volt.
Az IgG2a válasz esetében az MPL hatása, legalább a második adagot követően még szembetűnőbb, ami arra utal, hogy inkább az IgG2a válasz indukálódik. Ez közvetetten azt tükrözi, hogy az MPL-t tartalmazó készítmény a sejt által közvetített immunitást (gamma-interferon kiválasztást) aktiválja.
III. kísérlet - MPL (100 nanométernél kisebb méretű részecskékből álló) adag hatása Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg immunogenitására
Mivel az MPL-t 100 nanométernél kisebb méretű részecskékként sokkal könnyebb reprodukálható módon előállítani, mint 500 nanométernél nagyobb méretű részecskékként, megvizsgáltuk az MPL (>100 nanométer) részecskék hatását előzetesen Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg immunogenitására.
egérből (nőstény, Balb/c, 7 hetes korú) álló csoportokat injektáltunk bőr alá adva 50 meg Al+ + +-on [A1(OH)3 formájában] adszorbeált 1 meg rekombináns HBsAg-nel, emelkedő mennyiségű (3,1-25 meg) (100 nanométernél kisebb részecske méretű) MPL jelenlétében. Az egereket kétszer oltottuk, kéthetes időközökben, 200 mcl térfogattal. Az első injekciót követően két héttel és a megerősítő oltást követően egy héttel vért vettünk tőlük. Az összegyűjtött szérumokban ELISA eljárással meghatároztuk az anti-HBs ellen5
HU 221 253 Β1 anyag választ (teljes lg, IgG, IgG2a). A titereket középhígításban (a legmagasabb értékek 50%-ának megfelelő hígítás reciprokában) fejeztük ki. Az eredmények azt mutatták, hogy még olyan kis mennyiségű MPL, mint 3,1 meg MPL, az ellenanyag válasz nagymértékű emelkedését váltja ki mind az elsődleges, mind a másodlagos válasz esetében. A válasz 6,25 meg MPL mennyiségnél éri el a legmagasabb szintet, majd ezután csökken, és nagy MPL adagok alkalmazásánál (25 meg) hasonlóvá válik az MPL nélkül kapotthoz. Az ellenanyag válasz mintája az IgG, IgG2a és a teljes lg esetében hasonló. Ez ellentétben áll a nagyobb méretű MPL-lel (>500 nanométernél) kapott eredményekkel (lásd I. kísérlet) és arra utal, hogy a kisebb méretű MPL részecskék (>100 nanométernél) (legalábbis a Immorális immunitás esetében) sokkal hatásosabbak, mint a nagyobb méretű részecskék (<500 nanométernél), mivel kevesebb MPL-re volt szükség a maximális hatás eléréséhez. A kisméretű MPL nagyobb aktivitását több kísérlettel igazoltuk.
Amint azt a nagyobb méretű MPL-nél (>500 nanométernél) láttuk, az MPL adjuváns hatása erőteljesebb az IgG2a esetében, mint teljes IgG, illetve lg esetében. A másodlagos válasz maximális értékénél (6,25 meg MPL) az IgG2a növekedés 25-szörös, míg az IgG, illetve teljes lg növekedés 7,6-szoros, illetve 4,3-szoros volt.
B. Sejt által közvetített immunitás indukálása Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel - az MPL hatása
Ha a Immorális immunitás elegendő a hepatitis B elleni védettség létrehozására, a sejt által közvetített immunitás (CTL, Thl) különösen fontos lehet a betegség kezelésében.
Terápiás hatású vakcinák céljára új készítményekre van azonban szükség, mivel az A1(OH)3 képes a Immorális immunitás fokozására, de nem képes a sejt által közvetített immunitás fokozására.
Megvizsgáltuk az MPL hatását az Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel immunizált Balb/c egerekben az IL-2, valamint gamma-interferon kiválasztásra képes Thl sejtek indukálására.
I. kísérlet - MPL (>500 nanométernél) hatása a Thl sejtek indukálására Balb/c egerekben azAl(OH)}on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel való immunizálást követően.
nőstény Balb/c egérnek (nőstény, 5 hetes korú egerekből) mindegyik talpba 30 mcl olyan elegyet injektáltunk, amely 10 meg HBsAg-t, 15 meg Al+++-ot [A1(OH)3 formájában], valamint 15 meg MPL-t tartalmazott. A kontroliegereket hasonló módon injektáltuk azonos mennyiségű HBsAg-nel, amelyet CFA-val elegyítettünk (pozitív kontroll), illetve MPL nélkül Al(OH)3-on adszorbeáltunk (negatív kontroll).
Az immunizálást követően hat nappal az egereket elpusztítottuk, és a térdhaj lási nyirokcsomókat eltávolítottuk. A nyirokcsomóból nyert sejteket (LNC 2,105/ml) különböző időtartamokig (24 óra-74 óra) 1% negatív egérszérummal kiegészített és 5 mcg/ml rekombináns HBsAg-t tartalmazó RPMI tápfolyadékban tenyésztettük. A tenyésztést követően meghatároztuk a tápfolyadékba kiválasztott IL-2, gamma-INF, valamint IL-4 mennyiségét. Az IL-2 mennyiségét annak a képességének alapján határoztuk meg, hogy stimulálni képes egy IL-2 függő CTL sejtvonal (VDA2 sejtek) proliferációját (amelyet 3H-Timidin beépüléssel határoztunk meg), a titereket stimulációs indexként (SI=a stimulált sejtekbe beépült 3H-Timidin mennyisége/nem stimulált sejtekbe beépült 3H-Timidin mennyisége) adtuk meg. Az IL-4 és gamma-INF mennyiségét kereskedelemben hozzáférhető ELISA készlettel (a gamma-INF-t Holland Biotechnology, az IL-4-et Endogén készlettel) mértük. A titereket INF-g esetében pikogramm/ml egységben adtuk meg.
Az eredmények azt mutatják, hogy az Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel immunizált egerekből származó LNC sejtekből nem szekretálódott jelentős mennyiségű IL-2, IL-4, illetve INF-g. Ezzel szemben, az Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel, valamint MPL-lel immunizált egerekből származó LNC sejtekből nagy mennyiségű IL-2 (48 óra elteltével I.S.=38) és jelentős mennyiségű gamma-INF szekretálódott. A szekréció mértéke hasonló (a gamma-INF esetében), illetve magasabb (az IL-2 esetében), mint a HBsAg-nel, valamint CFA-val immunizált egereknél megfigyelt értékek és az in vitro szekréció korábban történik.
Az Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAgnel való immunizálást követően, még MPL jelenlétében sem sikerült IL-4-et kimutatni.
Ez a szekréciós profil azt mutatja, hogy az adszorbeált HBsAg-nel való immunizálást követően MPL jelenlétében fajlagos Thl sejtek (IL-2, gamma-INF) indukálódtak, MPL hiányában azonban ezek nem indukálódtak. A fenti immunizálási feltételek mellett nem sikerült azonban Th2 (IL-4) sejtek indukálódását kimutatni.
II. kísérlet - Az MPL (<100 nanométer) adagjának hatása a Thl sejtek indukálására Balb/c egerekben az Al(OH) 3-on adszorbeált rekombináns HBsAgnel való immunizálást követően nőstény Balb/c egérnek két-két talpába 30 mcl olyan elegyet injektáltunk, amely 10 meg HBsAg-t, 15 meg Al+ + +-ot [A1(OH)3 formájában], valamint 15 meg MPL-t tartalmazott.
Az immunizálást követően hat nappal az egereket elpusztítottuk, és a térdhajlati nyirokcsomóból nyert sejteket (LNC 2xlO5/ml) különböző időtartamokig (24 óra-96/25 óra), 1% negatív egérszérummal kiegészített és 5 mcg/ml rekombináns HBsAg-t tartalmazó RPMI tápfolyadékban tenyésztettük.
Az IL-2 szekréciót VDA2 sejtek proliferációjának stimulálása alapján határoztuk meg és az IL-2 expresszálást stimulációs indexként (S.I.) adtuk meg; a gamma-INF szekréciót egy kereskedelemben hozzáférhető készlettel mértük, és pikogramm/ml egységben adtuk meg.
Azt találtuk, hogy az IL-2 szekréciója az alacsonyabb MPL adagoknál nagymértékben megnőtt és a maximális hatást 15 meg MPL adagnál érte el.
HU 221 253 Β1
Az IL-2 szekréció általában sokkal fontosabb 24 óra, mint 48, illetve 72 óra elteltével.
Az INF-g szekréció hiányzott, amikor a rekombináns HBsAg-t MPL hiányában adszorbeáltuk az Al(OH)3-on. Kis MPL adag (7,5 meg) indukálja a gamma-INF szekrécióját és a maximális hatást ebben az esetben is 15 meg MPL adagnál értük el. Az IL-2 esetében megfigyeltekkel szemben, a gamma-INF szekréciója a tenyészetben késleltetett és az idő elteltével 96 óráig emelkedik.
Ezeknek az adatoknak az alapján megállapítható, hogy az MPL (100 nanométer) Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg-nel kombinálva a Thl sejtek hatásos induktora.
C. Következtetés
Balb/c egerekben vizsgáltuk az Al(OH)3-on és MPLen adszorbeált rekombináns HBsAg-t tartalmazó készítmény hatását a humorális, valamint a sejt által közvetített immunitás indukálására. Az eredmények azt mutatják, hogy az MPL egyértelműen javítja az anti-HBs válasz kinetikáját, mivel mind az első, mind a második immunizálást követően sokkal több anti-HBs ellenanyagot találtunk. Az anti-HBs ellenanyagok minősége is változott és elsősorban az IgG2a indukciója volt megfigyelhető, ami közvetetten a gamma-INF szekrécióra, tehát a sejt által közvetített immunitás indukálására utal.
HBsAg-t, Al(OH)3-ot, valamint MPL-t tartalmazó készítményekkel közvetlenül igazoltuk a Thl sejtek indukálását, ami világosan azt mutatja, hogy az MPL az IL-2t, valamint a gamma-INF-t szekretáló Thl sejtek hatásos induktora. Egy ilyen típusú készítmény tehát fontossággal bír a terápiás hatású vakcinák kifejlesztésében.
A fenti kísérletek eredményeit az alábbi 1. és 6. táblázatok mutatják.
6. példa
MPL klinikai alkalmazása HBsAg adjuvánsaként Előzetes eredmények
MPL-HBV-002 vizsgálat (folyamatban)
Ez a vizsgálat fiatal, egészséges, fertőzésen át nem esett, önként vállalkozó felnőttekben hasonlítja össze a HBsAg-MPL és az Engerix B hatását.
A vizsgálat tárgyai:
- Immunogenitás: az anti-HBs ellenanyag válasz mértéke
- Az anti-HBs ellenanyag válasz kinetikája
- Mindkét vakcina által indukált sejt által közvetített immunitás (in vitro és in vivő)
- Mellékhatások, toxikológia és biztonságosság
Anyagok és módszerek
a) Vakcinák
HBsAg (mint az Engerix B) Alumínium MPL
I. 20 mikrogramm 500 ug 50 ug
II. 20 mikrogramm 500 ug nincs
b) Populáció * Egészséges felnőttkorú önként vállalkozók, 18-30 éves kor között * Ezeknek HBV-fertőzést jelző markerekre negatívnak kellett lenniük és soha nem lehettek hepatitis B ellen vakcinázva
c) Tervezés
- Kettős-vak, randomizált vizsgálat.
- A vakcinázás menete: 0., 1., 6. hónap volt.
- A vizsgálatot 12. hónapig követtük.
- Vérminták:
* Az anti-HBs ellenanyag meghatározást végeztünk az immunizálás előtt és az immunizálást követő 7., 15. és 30. napon.
* Minden immunizálás előtt és 2 nappal azután meghatároztuk a biokémiai és hematológiai paramétereket.
* Az első vakcinázást megelőzően, azt követően, valamint az emlékeztető oltás után vért vettünk a sejt által közvetített immunitás értékelésére.
- Reaktogenitás: A résztvevőknek a vakcinázás napján és az azt követő 7 napon át egy naplóban fel kellett jegyezniük a helyi és általános jelek és tünetek esetleges előfordulását.
Eredmények
Az eredményeket a második adagot követő 2 hónapos időtartamig az alábbiakban foglaltuk össze.
Populáció:
Tájékoztatást követően összesen 29 személy adta beleegyezését, de csak 27 egyén - 15 férfi és 12 nő felelt meg a feltételeknek. 15 egyént osztottunk az I. csoportba és 12 egyént a II. csoportba. Az átlagéletkor 22 év volt.
Biztonságosság:
Súlyos káros mellékhatást nem jelentettek és nem vontunk ki senkit a vizsgálatból, illetve nem kellett senkit kivonni a vizsgálatból. Nem észleltük a hematológiai, illetve biokémiai paraméterek klinikailag jelentős változását. A helyi és általános jelek és tünetek előfordulási aránya és súlyossága mindkét vakcinázott csoportban hasonló volt.
Immunogenitás:
Az anti-HBs ellenanyag titereket a 90. napig, azaz a második adagot követően két hónapig mértük. Szerokonverzió (SC, %-ban) alatt az eredetileg szeronegatív egyénekben ellenanyagok megjelenését értjük.
Szerológiai védettség mértékén protektív anti-HBsellenanyag titerrel rendelkező egyének százalékos arányát értjük. Úgy tűnik a GMT-t tekintve a két csoport között nincs egyértelmű különbség az ellenanyag válasz mértékében, a válasz kinetikája azonban különbözik, amennyiben az MPL-t tartalmazó vakcina egyértelműen előnyösebb. A második adagot követő 7. napon az MPL-HBV vakcinát kapott egyének 93%-ában, illetve 80%-ában jött létre szerokon verzió és alakult ki védettség, összehasonlítva az Engerix B vakcinát kapott csoportnál tapasztalt 95%-os szerokonverziós, illetve 58%-os szerológiai védettségi aránnyal. Ez a különbség fennmaradt a második adagot követő 2. hónapig és különösen egyértelmű a szerológiai védettség létrejötte esetében. Ebben az időpontban mindegyik MPL-HBV vakcinát kapott egyén védetté vált, összehasonlítva az alumínium adjuvánst tartalmazó vakcinával vakcinázott egyéneknél megfigyelt 58%-os aránnyal.
MPL-HBV-003 vizsgálat (folyamatban)
Az anyagok és módszerek hasonlóak voltak, mint az MPL-HBV-002 vizsgálatban (lásd fent).
HU 221 253 Bl
A vakcinázás menete eltért:
csoport egyének száma vakcina vakcinázás menete
I. 25 MPL-HBs/Ag/ alumínium; 0-2 hónap
II. 25 Engerix B 0-2 hónap
III. 25 MPL-HBs/Ag/ alumínium; 0-6 hónap
IV. 25 Engerix B 0-6 hónap
Eredmények
Bár az anti-HBs ellenanyag válasz kinetikáját nem követtük olyan szorosan, mint az előző vizsgálatban, úgy tűnik, hogy a jelen vizsgálatból ugyanaz a következtetés vonható le. Az MPL-lel adjuvált vakcinát kapott egyéneknél a második adagot követően magasabb válasz jött létre, mint azoknál, akiket MPL-t nem tartalmazó vakcinával injektáltak. A második MPL-HBV vakcina második adagját követően egy hónappal egy egyén kivételével mindenkinél (95,8%) védettséget jelentő litert találtunk, összehasonlításképpen, az Engerix B csoportban ez az érték 72,7% volt. Az előző vizsgálattal ellentétben úgy tűnik továbbá, hogy az MPL-HBV vakcina magasabb ellenanyag ti tereket váltott ki, mint az Engerix B (214 mIU/ml, illetve 72 mIU/ml), ami arra utal, hogy talán lényeges az adagok közt eltelt hosszabb időtartam.
Következtetés
Ebben a két vizsgálatban az MPL-lel adjuvált hepatitis B (az Engerix B vakcinához hasonlóan HBsAg-t és alumíniumot tartalmazó) vakcinát értékeltük egészséges felnőttkorú önként vállalkozókban és ezt különböző vakcinázási eljárások alkalmazásával összehasonlítottuk az Engerix B (alumíniummal formulázott HBsAg S-t tartalmazó) vakcinával. Bár egyetlen adagot követően látszólag nincs különbség a két vakcina immunogenitását tekintve, a második adagot követően az MPL-HBV vakcina egyértelműen előnyösebb, különösen a védettség létrejöttét jelző titerrel rendelkező egyének sokkal magasabb százalékos arányát tekintve. Amennyiben a két adagot egy hónap helyett két hónapos időközzel adagoltuk, ennél a csoportnál a GMT értékek is magasabbak voltak.
Ez azt jelentheti, hogy az antigénhez MPL hozzáadásával jobban ösztönözzük a válasz kialakulását. Egy ilyen vakcina ezért igen értékes lehet hepatitis B vakcinázásra lassan reagáló vagy alacsony szintű válasszal reagáló egyénekben, például idősebb emberekben vagy immunhiányos egyénekben.
A fent ismertetett kísérletek eredményeit az alábbi 7., valamint 9. táblázat mutatja.
7. példa
Hepatitis - MPL vizsgálat egerekben
A következő kísérlet azt szemlélteti, hogy MPL hozzáadása hepatitis A vakcinához jótékony hatással rendelkezik: ezt tükrözi az alacsonyabb ED50 érték [az injektált állatok 50%-ában szerológiai választ kiváltó adag ELISA egységekben (EU) kifejezve].
Módszer
NMRI egereket injektáltunk egy adag olyan kísérleti HAV vakcinával, amely adagonként különböző MPL koncentrációkat (0; 1,5; 6; 12,5 mikrogramm/adag), va15 lamint 360, 120, 40, illetve 13,3 EU-et tartalmazott. 28 nappal a beoltást követően vért vettünk és a szérumot a HABAV vizsgálattal vizsgáltuk (20% küszöbérték alkalmazásával). Kiszámítottuk az ED50 értékeket (EUban kifejezve) ez megfelelt a vizsgált állatok 50%-ában szerológiai választ kiváltó adagnak.
Eredmények
Az eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze. Az MPL-t nem tartalmazó vakcina ED50 értéke 123,7 EU volt, míg az adagonként 1,5 mikrogramm
MPL-t tartalmazó vakcina ED50 értéke 154 EU volt. Magasabb MPL adagok előnyös hatással rendelkeztek (az ED50-et alacsonyabb EU értékeknél figyeltük meg). Adagonkénti 12,5 mikrogramm MPL alkalmazása esetén az ED50 47,1 EU volt.
Következtetés
Megfelelő mennyiségű MPL hozzáadása a HAVvakcinához egérben végzett hatásvizsgálatban javítja ennek a vakcinának a teljesítményét.
Táblázat
MPL hepatitis A vakcinához való hozzáadásának hatása
A HAV vakcinához hozzáadott MPL adag; (mikrogramm/adag) ED50 (EU/adag)
0 123,7
1,5 154
6 101,1
12,5 47,1
1. táblázat
Növekvő mennyiségű MPL adag (>500 nanométer) hatása Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg immunogenitására
MPL mennyisége (mcg/adag) Anti-HBs válasz
teljes IgG IgG2a
14. nap 21. nap 14.nap 21.nap
0* 69 743 3,2 11
3,13 122 541 3,8 20
HU 221 253 BI
1. táblázat (folytatás)
MPL mennyisége (meg/adag) Anti-HBs válasz
teljes IgG IgG2a
14. nap 21.nap 14. nap 21. nap
6,25 296 882 6,4 24
12,5 371 1359 10 48
25 456 1493 18 138
50 403 1776 33 242
* ·. HBsAg Al-on
2. táblázat
MPL-t tartalmazó, illetve nem tartalmazó három klinikai célú vizsgálatra előállított készítmény összehasonlítása AUSAB válasz
Lót HBsAg adagja AL(OH)3-on (meg) MPL adagja (meg) p----- GMT anti-HBS (mIU/ml)
DSAH16 2,5 0 0,75 15,1
DSAR501 2,5 6,25 12,4 96,7
DSAR502 2,5 6,25 41,9 89,2
3. táblázat
MPL-t ( > 500 nanométer) tartalmazó, illetve nem tartalmazó két klinikai célú vizsgálatra előállított készítmény összehasonlítása Anti-HBs IgG és lgG2a válasz
Lót HBsAg adagja Al(OH)3-on (meg) MPL adagja (meg) Anti-HBS válasz
IgG IgG2a
dl5 d21 dl5 d21
DSAH16 2,5 0 20 178 <5 5
DSAR502 2,5 6,25 113 641 <5 28
4. táblázat
MPL ( < 100 nanométer) adag hatása Al(OH)3-on adszorbeált rekombináns HBsAg immunogenitására
HBsAg adagja AI(OH)3-on (meg/adag) oMPLf adagja (< 100 nm) (meg) Anti-HBs válasz
teljes lg IgG IgG2a
15. nap 21. nap 15.nap 21.nap 15. nap 21. nap
1 0 30 637 67 516 15 99
1 3,12 312 2302 335 3532 167 1752
1 6,25 538 2719 856 3932 261 2521
1 12,5 396 2104 485 3625 125 1393
1 25,0 38 446 141 638 28 233
HU 221 253 Β1
5. táblázat
MPL hatása (>500 nanométer) HBsAg-re fajlagos Thl sejtek indukálására Balb/c egerekben
HBsAg adagja (meg/egér) (<100nm) Készítmény In vitro szekréció
IL-2(S1) INF-y(pg/ml) IL-4 (pg/ml)
24. óra 48. óra 72. óra 24. óra 48. óra 72. óra 24. óra 48. óra 72. óra
20 FCA L3 2,0 8,0 <125 <125 385 NT NT NT
- FCA 0,7 1,8 0,7 <125 <125 <125 NT NT NT
20 A1(OH)3 1,0 1,4 1,2 <125 <125 <125 <40 <40 <40
20 A1(OH)3+ 2 38 10 <125 280 280 <40 <40 <40
MPL
(30 meg)
* A szövegben leírtak szerint végzett immunizálást követően a nyirokcsomó eredetű sejteket 5 meg rekombináns HBsAg/ml jelenlétében tenyésztettük a jelzett időtartamokig és az IL 2, INF-gamma, valamint az IL-4 szekréciót VDA2T scjtvonal alkalmazásával, illetve a kereskedelemben hozzáférhető ELISA készletekkel mértük.
6. táblázat
Különböző MP1 adagok (<100 nanométer) hatása HBsAg-re fajlagos Thl sejtek indukálására
HBsAg adagja (meg/egér) (<100nm) Készítmény In vitro szekréció
IL-2(S1) INF-y(pg/ml)
24. óra 48. óra 72. óra 24. óra 48. óra 72. óra 96. óra
20 0 2,6 28 21,8 <67 <67 <67 <67
20 7,5 207 173 58 <67 <207 522 698
20 15 270 71 36 275 878 1249 1582
20 30 41 59 36 <67 <67 <67 207
7. táblázat MPL-HBV-002
Csoport Vakcina Időzítés N Szerokonvcrzió aránya (%) GMT Szcrológiai védelem aránya (%)
I. MPL-HBsAg Pre 15 0,0 0 0,0
(20 Mg) Pl (7) 15 0,0 0,0
Pl (15) 14 42,9 4 7,1
Pl (30) 15 40,0 13 26,7
PH (37) 15 93,3 41 80,0
PII (45) 15 100,0 42 73,3
PH (60) 15 100,0 25 80,0
PII (90) 15 100,0 44 100,0
II. Engerix B Pre (7) 12 0,0 0 0,0
(20 gg) Pl 12 0,0
Pl(15) 12 33,3 26 25,0
Pl (30) 12 50,0 9 25,0
PII (37) 12 75,0 37 58,3
PII (45) 12 83,3 20 41,7
HU 221 253 Bl
7. táblázat (folytatás)
Csoport Vakcina Időzítés N Szcrokonverzió aránya (%) GMT Szerológiai védelem aránya (%)
PH 12 66,7 36 50,0
PH 12 83,3 31 58,3
Prc: vakcinálás előtt
Pl es PH: vakcinázás után (nap)
8. táblázat
MPL-HBV-003 vizsgálat
Csoport Vakcina Időzítés N SC (%) GMT SP (%)
I. MPL-HBsAg (20 pg) Pre 25 0,0 0 0,0
Pl(l) 23 56,5 10 26,1
Pl(2) 24 66,7 6 16,7
P2(3) 24 100,0 214 95,8
II. Engerix B (20 pg) Pre 25 0,0 0 0,0
Pl(l) 24 41,7 12 29,2
Pl(2) 19 52,6 4 5,3
P2(3) 22 90,9 72 72,7
Pre: vakcinázás előtt
Pl és P2: vakcinálás után (hónap)

Claims (18)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy hepatitisantigént, valamint 3-O-dezacetilált monofoszforil lipid-A-t és egy megfelelő hordozóanyagot tartalmaz.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy hordozóanyagként alumíniumgélt tartalmaz.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy hordozóanyagként egy olaj-avízben típusú emulzió vagy egy lipidalapú vivőanyagot tartalmaz.
  4. 4. A megelőző igénypontok bármelyike szerinti vakcina, azzal jellemezve, hogy hepatitisantigénként egy hepatitis A antigént tartalmaz.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy a hepatitis A antigénként egy a HM175 törzsből származó inaktivált egész sejteket tartalmazó készítményt tartalmaz.
  6. 6. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy hepatitisantigénként egy hepatitis B antigént tartalmaz.
  7. 7. A 6. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy antigénként hepatitis B felületi antigént (HBsAg) vagy annak variánsát tartalmazza.
  8. 8. A 7. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy HBsAg-ként HBsAg S antigénjét tartalmazza (226 aminosav).
  9. 9. A 8. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy a HBsAg egy S szekvenciát megelőző szekvenciát is tartalmaz.
  10. 10. A 8. vagy 9. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy a HBsAg az (L*,S) képlet szerinti összetett részecske, ahol L* a hepatitis B-vírus egy olyan módosított L proteinjét jelöli, amely az L protein 12-52., ezt követően a 133-143., ezt követően a 175-400. aminosavakat tartalmazó aminosavszekvenciájával rendelkezik, S pedig a HbsAg S-proteinjét jelöli.
  11. 11. A 6-10. igénypontok bármelyike szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy ezenkívül egy hepatitis A antigént is tartalmaz.
  12. 12. Az 1-11. igénypontok bármelyike szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy tartalmaz egy vagy több hepatitisantigént, valamint legalább egy, a következő kórokozók ellen védettség kiváltására alkalmas egyéb összetevőt: diphtéria, tetanus, pertussis, Haemophilus influenzáé b (Hib), valamint polio.
  13. 13. A 12. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy a következő kombinációk közül valamelyiket tartalmazza: DTP (diphtéria-tetanus-pertussis) HBsAg kombináció, Hib-HBsAg kombináció, DTP-Hib HBsAg kombináció, valamint IPV (inaktivált polio vakcina)-DTP-Hib-HBsAg kombináció.
  14. 14. A 12. igénypont szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy ezenkívül egy hepatitis A antigént is tartalmaz.
    HU 221 253 Β1
  15. 15. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vakcinakészítmény, azzal jellemezve, hogy hepatitisantigénként egy hepatitis C vagy hepatitis D vagy hepatitis E antigént tartalmaz.
  16. 16. Az 1-15. igénypontok bármelyike szerinti vak- 5 cinakészítmény, azzal jellemezve, hogy a 3-O-dezacetilált monofoszforil lipid-A adagonként 10-100 mikrogramm mennyiségben tartalmazza.
  17. 17. Az 1-16. igénypontok bármelyike szerinti vak cinakészítmény gyógyászati készítményként való alkal mazásra.
  18. 18. hepatitisantigén valamint 3-O-dezacetilált mo nofoszforil lipid-A együttes alkalmazása hepatitis fertő zések megelőzésére vagy kezelésére alkalmas gyógyá szati készítmény előállítására.
HU9402758A 1992-03-27 1993-03-24 Hepatitis vaccines containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a HU221253B1 (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB929206797A GB9206797D0 (en) 1992-03-27 1992-03-27 Vaccine
GB929206786A GB9206786D0 (en) 1992-03-27 1992-03-27 Vaccine
GB929206788A GB9206788D0 (en) 1992-03-27 1992-03-27 Vaccine
GB929206789A GB9206789D0 (en) 1992-03-27 1992-03-27 Vaccine
PCT/EP1993/000712 WO1993019780A1 (en) 1992-03-27 1993-03-24 Hepatitis vaccines containing 3-o-deacylated monophoshoryl lipid a

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9402758D0 HU9402758D0 (en) 1994-12-28
HUT69931A HUT69931A (en) 1995-09-28
HU221253B1 true HU221253B1 (en) 2002-09-28

Family

ID=27450853

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9402758A HU221253B1 (en) 1992-03-27 1993-03-24 Hepatitis vaccines containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a

Country Status (28)

Country Link
EP (1) EP0633784B2 (hu)
JP (1) JP3470719B2 (hu)
KR (1) KR100270134B1 (hu)
CN (1) CN1072963C (hu)
AP (1) AP570A (hu)
AT (1) ATE146678T1 (hu)
AU (4) AU3751693A (hu)
CA (1) CA2132833C (hu)
CZ (1) CZ283424B6 (hu)
DE (1) DE69306940T3 (hu)
DK (1) DK0633784T4 (hu)
ES (1) ES2098029T5 (hu)
FI (1) FI110843B (hu)
GR (1) GR3022174T3 (hu)
HK (1) HK1003218A1 (hu)
HU (1) HU221253B1 (hu)
IL (1) IL105161A (hu)
MA (1) MA22842A1 (hu)
MY (1) MY111880A (hu)
NO (1) NO309458B1 (hu)
NZ (1) NZ249868A (hu)
RU (1) RU2121849C1 (hu)
SA (1) SA93130573B1 (hu)
SG (1) SG48375A1 (hu)
SI (1) SI9300149B (hu)
SK (1) SK280160B6 (hu)
UA (1) UA44688C2 (hu)
WO (1) WO1993019780A1 (hu)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
SG48309A1 (en) * 1993-03-23 1998-04-17 Smithkline Beecham Biolog Vaccine compositions containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a
US6488934B1 (en) 1995-02-25 2002-12-03 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Hepatitis B vaccine
GB9503863D0 (en) * 1995-02-25 1995-04-19 Smithkline Beecham Biolog Vaccine compositions
GB9513261D0 (en) * 1995-06-29 1995-09-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
DE69933200T2 (de) * 1998-03-09 2007-02-22 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Kombinierte impfstoffzusammensetzungen
US6306404B1 (en) 1998-07-14 2001-10-23 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
CA2773698C (en) 1998-10-16 2015-05-19 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvant systems comprising an immunostimulant adsorbed to a metallic salt particle and vaccines thereof
GB9822714D0 (en) * 1998-10-16 1998-12-09 Smithkline Beecham Sa Vaccines
FI108150B (fi) 1999-02-15 2001-11-30 Sulzer Pumpen Ag Menetelmä ja laitteisto massan käsittelemiseksi
US6635261B2 (en) 1999-07-13 2003-10-21 Wyeth Holdings Corporation Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
GB9921147D0 (en) * 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
EP2305294B1 (en) 2004-09-22 2015-04-01 GlaxoSmithKline Biologicals SA Immunogenic composition for use in vaccination against staphylococcei
HUE027837T2 (hu) 2005-03-23 2016-11-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Influenza vírus és olaj-a-vízben emulzió adjuváns alkalmazása CD4 T-sejtes és/vagy javított B-memória sejtes válasz indukálására
AU2006310337B9 (en) 2005-11-04 2013-11-28 Novartis Ag Adjuvanted influenza vaccines including cytokine-inducing agents
NZ567978A (en) 2005-11-04 2011-09-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccine with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant
EP1951299B1 (en) 2005-11-04 2012-01-04 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators
CA2628152C (en) 2005-11-04 2016-02-02 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
GB0607088D0 (en) 2006-04-07 2006-05-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
LT3017827T (lt) 2005-12-22 2019-01-10 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Pneumokokinė polisacharidinė konjuguota vakcina
PL1976559T6 (pl) 2006-01-27 2020-08-10 Novartis Influenza Vaccines Marburg Gmbh Szczepionki przeciw grypie zawierające hemaglutyninę i białka macierzy
EP2357184B1 (en) 2006-03-23 2015-02-25 Novartis AG Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators
JP2009534303A (ja) 2006-03-24 2009-09-24 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス ゲーエムベーハー アンド カンパニー カーゲー 冷蔵しないインフルエンザワクチンの保存
KR101541383B1 (ko) 2006-03-30 2015-08-03 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 면역원성 조성물
US20110206692A1 (en) 2006-06-09 2011-08-25 Novartis Ag Conformers of bacterial adhesins
MX2009000660A (es) 2006-07-17 2009-04-08 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna de influenza.
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
CA2663196A1 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Novartis Ag Making influenza virus vaccines without using eggs
JP2011506264A (ja) 2006-12-06 2011-03-03 ノバルティス アーゲー インフルエンザウイルスの４つの株に由来する抗原を含むワクチン
TW200908994A (en) 2007-04-20 2009-03-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
KR20100045445A (ko) 2007-06-26 2010-05-03 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. 스트렙토코쿠스 뉴모니애 캡슐 다당류 컨쥬게이트를 포함하는 백신
SI2185191T1 (sl) 2007-06-27 2012-12-31 Novartis Ag Cepiva proti influenci z majhnimi dodatki
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
AU2008339631B2 (en) 2007-12-24 2014-07-24 Novartis Ag Assays for adsorbed influenza vaccines
DK2403507T3 (en) * 2009-03-05 2018-06-06 Jenny Colleen Mccloskey TREATMENT OF INFECTION
HRP20220756T1 (hr) 2009-07-15 2022-09-02 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Proteinski pripravci rsv f i postupci za izradu istih
GB0913681D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
GB0913680D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
NZ611176A (en) 2010-12-02 2015-07-31 Bionor Immuno As Peptide scaffold design
US9493514B2 (en) 2011-01-06 2016-11-15 Bionor Immuno As Dimeric scaffold proteins comprising HIV-1 GP120 and GP41 epitopes
TR201908715T4 (tr) 2011-01-26 2019-07-22 Glaxosmithkline Biologicals Sa Rsv immünizasyon rejimi.
PL2707385T3 (pl) 2011-05-13 2018-03-30 Glaxosmithkline Biologicals Sa Prefuzyjne antygeny RSV F
MX2014014683A (es) 2012-06-06 2015-02-24 Bionor Immuno As Peptidos derivados de proteinas virales para usarse como inmunogenos y reactivos de dosificacion.
KR20180035807A (ko) 2015-06-26 2018-04-06 세퀴러스 유케이 리미티드 항원적으로 매치된 인플루엔자 백신
WO2021160887A1 (en) 2020-02-14 2021-08-19 Immunor As Corona virus vaccine

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0175261B1 (en) * 1984-09-12 1991-12-11 Chiron Corporation Hybrid particle immunogens
HU216017B (hu) * 1987-11-18 1999-04-28 Chiron Corp. Eljárás HCV-1 polipeptidek, HCV-1 polinukleotidok, rekombináns vektorok és gazdasejtek, valamint immunesszé kit, hepatitis C vírusfertőzés elleni vakcinák, a fertőzés kimutatására szolgáló diagnosztikumok előállítására, és immunvizsgálati és vírustenyészt
WO1989012641A1 (en) * 1988-06-17 1989-12-28 Genelabs Incorporated Enterically transmitted non-a/non-b hepatitis viral agent
US4912094B1 (en) * 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
DE69031556T2 (de) * 1989-07-25 1998-05-14 Smithkline Beecham Biologicals S.A., Rixensart Antigene sowie Verfahren zu deren Herstellung
CA2065287C (en) * 1989-09-15 1999-12-21 Tatsuo Miyamura New hcv isolates
IL97985A0 (en) * 1990-05-07 1992-06-21 North American Vaccine Inc Improved vaccine compositions
WO1992011291A1 (en) * 1990-12-20 1992-07-09 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Vaccines based on hepatitis b surface antigen

Also Published As

Publication number Publication date
FI944442A0 (fi) 1994-09-26
CA2132833A1 (en) 1993-10-14
HUT69931A (en) 1995-09-28
KR100270134B1 (ko) 2000-10-16
DE69306940T3 (de) 2002-09-19
HU9402758D0 (en) 1994-12-28
RU2121849C1 (ru) 1998-11-20
NO943571D0 (no) 1994-09-26
RU94042386A (ru) 1996-08-20
SI9300149B (sl) 2003-02-28
WO1993019780A1 (en) 1993-10-14
ES2098029T3 (es) 1997-04-16
EP0633784B1 (en) 1996-12-27
FI944442A (fi) 1994-09-26
KR950700757A (ko) 1995-02-20
EP0633784B2 (en) 2001-10-17
AU6445796A (en) 1996-11-07
JPH07505372A (ja) 1995-06-15
AP570A (en) 1996-11-29
JP3470719B2 (ja) 2003-11-25
DE69306940D1 (de) 1997-02-06
NZ249868A (en) 1997-03-24
AU3397499A (en) 1999-08-19
CN1085805A (zh) 1994-04-27
HK1003218A1 (en) 1998-10-16
ATE146678T1 (de) 1997-01-15
MY111880A (en) 2001-02-28
ES2098029T5 (es) 2002-03-16
AU1000802A (en) 2002-02-21
CZ235594A3 (en) 1995-02-15
AU3751693A (en) 1993-11-08
NO309458B1 (no) 2001-02-05
SI9300149A (en) 1993-12-31
CA2132833C (en) 2007-03-06
NO943571L (no) 1994-11-14
EP0633784A1 (en) 1995-01-18
SG48375A1 (en) 1998-04-17
SK115294A3 (en) 1995-06-07
DE69306940T2 (de) 1997-06-26
SK280160B6 (sk) 1999-09-10
UA44688C2 (uk) 2002-03-15
DK0633784T4 (da) 2001-12-31
FI110843B (fi) 2003-04-15
CZ283424B6 (cs) 1998-04-15
MA22842A1 (fr) 1993-10-01
IL105161A (en) 1998-08-16
GR3022174T3 (en) 1997-03-31
IL105161A0 (en) 1993-07-08
AU767755B2 (en) 2003-11-20
SA93130573B1 (ar) 2004-08-31
CN1072963C (zh) 2001-10-17
AP9300502A0 (en) 1993-04-30
DK0633784T3 (da) 1997-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU221253B1 (en) Hepatitis vaccines containing 3-o-deacylated monophosphoryl lipid a
KR100365373B1 (ko) B형간염백신
EP0812593B2 (en) Vaccine compositions containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a
US6893644B2 (en) Hepatitis vaccines containing 3-O-deacylated monophoshoryl lipid A
US6488934B1 (en) Hepatitis B vaccine
EP1107787B1 (en) Salmonella typhi vaccine compositions
AU705739B2 (en) A method of preparing vaccine compositions containing 3-0-deacylated monophosphoryl lipid A