HU220877B1 - Novel olygopeptides, diagnostic methods for use thereof and conjugates for treatment of prostata cancer - Google Patents

Novel olygopeptides, diagnostic methods for use thereof and conjugates for treatment of prostata cancer Download PDF

Info

Publication number
HU220877B1
HU220877B1 HU9603564A HU9603564A HU220877B1 HU 220877 B1 HU220877 B1 HU 220877B1 HU 9603564 A HU9603564 A HU 9603564A HU 9603564 A HU9603564 A HU 9603564A HU 220877 B1 HU220877 B1 HU 220877B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
seq
ser
woman
type
peptide
Prior art date
Application number
HU9603564A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9603564D0 (en
HUT76350A (en
Inventor
Deborah Defeo-Jones
Dong-Mei Feng
Victor M Garsky
Raymond E Jones
Allen I Oliff
Original Assignee
Merck & Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/267,092 external-priority patent/US5599686A/en
Application filed by Merck & Co Inc filed Critical Merck & Co Inc
Publication of HU9603564D0 publication Critical patent/HU9603564D0/hu
Publication of HUT76350A publication Critical patent/HUT76350A/hu
Publication of HU220877B1 publication Critical patent/HU220877B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
    • C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

A találmány új oligopeptidekre, ezek alkalmazásával végzett vizsgálati módszerre, valamint az oligopeptideket tartalmazó, prosztatarák kezelésére alkalmazható konjugátumra vonatkozik.
1994-ben a prosztata- (dülmirigy-) rákot várhatólag 200 000 férfiban diagnosztizálják az Amerikai Egyesült Államokban, és 38 000 amerikai férfi fog meghalni ebben a betegségben [Gamick Μ. B.: The Dilemmas of Prostate Cancer, Scientific American, April, 72-81. (1994)]. Ennélfogva a prosztatarák a leggyakrabban diagnosztizált rosszindulatú tumor (a bőrrákon kívül) az amerikai férfiaknál, és a rák okozta elhalálozás okai között a második helyen áll a tüdőrák mögött ebben a csoportban.
A prosztataspecifikus antigén (PSA) egy egyszálú 33 kD-os glikoprotein, amelyet majdnem kizárólag a humán prosztataepitélium termel, és 0,5-2,0 mg/ml koncentrációban fordul elő a humánspermában [Nadji M., Taber S. Z., Castro A. és munkatársai: Cancer 48, 1229 (1981); Papsidero L., Kuriyama M., Wang M. és munkatársai: JNCI 66, 3Ί. (1981); Qui S. D., Young C. Y. F., Bihartz D. L. és munkatársai: J. Urol. 144, 1550. (1990); Wang M. C., Valenzuela L. A., Murphy G. P. és munkatársai: Invest. Urol. 17, 159. (1979)]. Az egyetlen szénhidrátegység a 45-ös helyzetű aszparaginrészhez kapcsolódik, és a teljes molekulatömegnek 2-3 kD-nyi részét teszi ki. A PSA egy kimotripszinszerű specificitással rendelkező proteáz [Christensson A., Laurell C. B., Lilja H.: Eur. J. Biochem. 194, 755-763. (1990)]. Kimutatták, hogy legnagyobbrészt a PSA a felelős az ejakuláció során képződött gélszerkezet elfolyósításáért az ondót vivő gélben lévő főfehérjék, a Semenogelin I és Semenogelin II, és a fibronektin proteolízise által [Lilja H.: J. Clin. Invest. 76, 1899. (1985); Lilja H., Oldbring J., Rannevik G. és munkatársai: J. Clin. Invest. 80, 281. (1987); McGee R. S„ Herr J. C.: Bioi. Repród. 39, 499. (1988)]. A gél formájú fehéijék PSA által szabályozott proteolízise néhány oldható Semenogelin I és Semenogelin II fragmenst, valamint oldható fibronektinfragmenseket eredményez az ejakulátum cseppfolyósításával, és erőteljesen mozgó spermatozák felszabadulását idézi elő [Lilja
H., Laurell C. B.: Scand. J. Clin. Láb. Invest. 44, 447. (1984); McGee R. S„ Herr J. C.: Bioi. Repród. 37, 431. (1987)]. Továbbá a PSA képes proteolitikusan lebontani az IGFBP-3-at (inzulinszerű növekedési faktort kötő fehérje 3) inzulinszerű növekedési faktorrá (IGF), amely specifikusan stimulálja a PSA növekedését a szekretáló sejtekben [Cohen és munkatársai: J. Clin. Endo. and Méta. 75, 1046-1053. (1992)].
A szérum-PSA túlsúlyban lévő molekuláris formáját a PSA alfa-l-antikimotripszinnel képzett komplexe alkotja, és a mért szérum-PSA 95%-át is képezheti [Christensson A., Björk T., Nilsson O. és munkatársai: J. Urol. 150, 100-105. (1993); Lilja H., Christensson A., Dahlén U.: Clin. Chem. 37, 1618-1625. (1991); Stenman U. H., Leinoven J., Alfthan H. és munkatársai: Cancer Rés. 57, 222-226. (1991)]. A prosztataszövet (normál, jóindulatú hiperplasztikus vagy tumoros szövet) játszik túlnyomórészt szerepet a PSA érett, enzimatikusan aktív formájának felszabadításában, mivel ez a forma szükséges az alfa-l-antikimotripszinnel való komplexképződéshez [Mást A. E, Enghild J. J., Pizzo S. V. és munkatársai: Biochemistry 30, 1723-1730 (1991); Perimutter D. H., Glover G. I., Rivetna M. és munkatársai: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87, 3753-3757. (1990)]. Ezért úgy hisszük, hogy a PSA a prosztata-PSA-t szekretáló sejtek mikrokömyezetében érett, enzimatikusan aktív formájában termelődik és szekretálódik, nem képezve komplexet semmilyen inhibitor molekulával. A PSA stabil komplexeket képez az alfa-2-makroglobulinnal is, de mivel ez a PSA enkapszulációját és a PSA-epitópok teljes elvesztését eredményezi, ennek a komplexképződésnek az in vivő jelentősége még ismeretlen. A PSA szabad, komplexet nem képzett formája a szérum-PSA egy csekély frakcióját alkotja [Christensson A., Björk T., Nilsson O. és munkatársai: J. Urol. 150, 100-105. (1993); Lilja H., Christensson A., Dahlén U.: Clin. Chem. 37, 1618-1625. (1991)]. A szérum-PSA ezen formájának mérete hasonló a PSA méretéhez az ondófolyadékban [Lilja H., Christensson A., Dahlén U.: Clin. Chem. 37, 1618-1625. (1991)], de az még ismeretlen, hogy vajon a szérum-PSA szabad formája egy zimogén-e; az érett PSA-nak egy közbenső helyen hasított, inaktív formája-e; vagy a PSA-t manifesztáló enzimaktivitás lehet-e. Mindenesetre az valószínűtlennek tűnik, hogy a szérum-PSA szabad formája manifesztálja az enzimaktivitást, mivel mind az el nem reagált alfa-l-antikimotripszin, mind az alfa-2-makroglobulin számottevő (100-1000-szeres) moláris feleslegben van jelen a szérumban, összehasonlítva a PSA szabad 33 kD-os formájának detektált szérumszintjével [Christensson A., Björk T., Nilsson O. és munkatársai: J. Urol. 150, 100-105 (1993); Lilja H., Christensson A., Dahlén U.: Clin. Chem. 37, 1618-1625. (1991)].
A PSA-nak a szérumban történő mérését használják fel a prosztata-adenokarcinóma kezelésének nyomonkövetésére [Duffy M. S.: Ann. Clin. Biochem. 26, 379-387 (1989); Brawer Μ. K. és Lángé P. H.: Urol. Suppl. 5, 11 16 (1989); Hara M. és Kimura H. : J. Láb. Clin. Med.: 113, 541-548. (1989)], bár a PSA normál szérumkoncentrációi feletti értékekről számoltak be jóindulatú prosztatahiperpláziában (megnagyobbodás) és a prosztata sebészeti traumáját követően is [Lilja H., Christensson A., Dahlén U.: Clin. Chem. 37, 1618-1625. (1991)]. Az is ismert, hogy a prosztatametasztázisok immunológiailag reaktív PSA-t szekretálnak, mivel a szérum-PSA igen magas szinten detektálható azokban a kiterjedt metasztatikus prosztatarákot mutató személyekben, akikből a prosztatát eltávolították [Ford T. F., Butcher D. N., Masters R. W. és munkatársai: Brit. J. Urology 57, 50-55. (1985)]. Ennélfogva egy citotoxikus vegyületnek, amelyet a PSA proteolitikus aktivitása által lehetne aktiválni, prosztatasejtspecifikusnak, valamint a PSA-t szekretáló prosztatametasztázisokra is specifikusnak kell lennie.
A fentiek alapján a jelen találmány tárgyát új oligopeptidek képezik, melyek szelektíven, enzimatikusan hasíthatok az aktív szabad prosztataspecifikus antigén (PSA) által.
HU 220 877 Bl
A találmány tárgya továbbá egy kvantitatív vizsgálati módszer (assay) az enzimatikusan aktív PSA mérésére, amely felhasználja ezeket az új oligopeptideket.
A találmány még további tárgya egy új rákellenes készítmény a prosztatarák kezelésére, amely az új oligopep- 5 tideket egy citotoxikus szerrel konjugálva tartalmazza.
Az alábbiakban összefoglaljuk a találmányt:
Azonosítottunk néhány hasítási helyet, ahol a szabad PSA szelektíven proteolitikusan hasítja a Semenogelin I-et. Leírtunk oligopeptideket, melyek olyan 10 aminosavszekvenciákat tartalmaznak, melyeket felismer és proteolitikusan hasít a szabad prosztataspecifikus antigén (PSA). Ezek az oligopeptidek felhasználhatók olyan vizsgálati eljárásokban, melyek segítségével a szabad PSA-proteáz-aktivitás in vitro meghatározha- 15 tó. Továbbá az ilyen oligopeptidek beépíthetők terápiás szerekbe, amelyek ezeknek az oligopeptideknek és ismert citotoxikus szereknek a konjugátumait tartalmazzák, és felhasználhatóak a prosztatarák kezelésére.
Az alábbiakban ismertetjük az ábrákat: 20 la. és lb. ábra: Semenogelin I elsődleges aminosavszekvenciája
Az 1. ábrán bemutatjuk a Semenogelin I primer aminosavszekvenciáját (SEQ. ID. NO. 1). A PSA proteolitikus hasítási helyeket („CS”) bejelöltük, és a fehéije- 25 fragmenseket megszámoztuk egymást követően az aminoterminálistól kiindulva.
2. ábra: Szintetikus oligopeptidek hasíhatósága
Szintetikus oligopeptidek egy nested sorozatát készítettük el, és az oligopeptideket enzimatikusan aktív sza- 30 bad PSA-val emésztettük különböző ideig. Az eredményeket a 2. táblázatban mutatjuk be. ND=nem határoztuk meg. Az egybetűs kódokkal az aminosavakat jelöltük: A=Ala, E=Glu, G=Gly, H=His, l=Ile, K=Lys,
L = Leu, N = Asn, Q=Gln, R=Arg, S = Ser, T=Thr, 35 Y=Tyr.
3a. és 3b. ábra: Szintetikus oligopeptidek hasítási affinitása
Szintetikus oligopeptideket állítottunk elő, és az oligopeptideket 4 órán keresztül enzimatikusan aktív szabad 40 PSA-val emésztettük. Ezen időtartam alatt elhasított oligopeptid-mennyiséget százalékban adjuk meg. Az eredményeket a 4. táblázatban mutatjuk be.
4. ábra: A nem hasítható oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok citotoxicitási adatai 45
Ezen az ábrán bemutatjuk a doxorubicin és doxorubicin egy oligopeptidhez (12d példa vegyülete) kovalensen kötött konjugátumának összehasonlító citotoxicitási adatait, amely nem tartalmaz szabad PSA proteolitikus hasítási helyet. A doxorubicin IC50-értéke 0,3 μΜ, míg 50 az acetilezett oligopeptiddel módosított doxorubicin olyan IC50-értékkel rendelkezik, amely több mint 300szor kisebb ennél. Ez a konjugátum nem tartalmaz HPLC-vel kimutatható szennyezést a módosítatlan doxorubicinnel összehasonlítva. Az oligopeptidnek ön- 55 magában nincs detektálható sejtölő aktivitása.
5. ábra: Oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok hasíthatósága szabad PSA-val in vitro Oligopeptid-doxorubicin-konjugátumokat állítottunk elő, és ezeket emésztettük enzimatikusan aktív szabad 60
PSA-val négy órán keresztül. Azt a konjugátummennyiséget, amely ezen időtartam alatt az oligopeptidben enzimesen elhasadt, százalékban adjuk meg. Az eredményeket az 5. táblázatban mutatjuk be.
6. ábra: Oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok sejtkondicionált tápközegben
Oligopeptid-doxorubicin-konjugátumokat reagáltattunk négy órán keresztül sejttenyésztő tápközeggel, amelyet előzőleg kondicionáltunk kitéve azt LNCaP-sejteknek (amelyekről ismert, hogy szabad PSA-t szekretálnak) vagy DuPRO-sejteknek (amelyek nem szekretálnak szabad PSA-t). Ezen időtartam alatt az oligopeptidben enzimesen hasított konjugátum mennyiségét százalékosan adjuk meg. A kapott eredményeket a 6. táblázatban mutatjuk be.
7. ábra: Hasítható oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok citotoxicitási adatai
A 7. táblázatban bemutatjuk egy oligopeptidhez amely egy szabad PSA proteolitikus hasítási helyet tartalmaz - kovalensen kötött doxorubicin konjugátumainak citotoxicitását (mint IC50-et) egy tumorsejtvonallal szemben, amelyről ismert, hogy szabad PSA-t szekretál. Megadjuk néhány kiválasztott konjugátumra a konjugátum citotoxicitását egy olyan sejtvonallal szemben is (DuPRO), amely nem választ ki szabad PSA-t.
Az alábbiakban részletesen ismertetjük a találmányt:
A jelen találmány tehát új oligopeptidekre vonatkozik, amelyeket a szabad prosztataspecifíkus antigén (PSA) felismer és képes proteolitikusan elhasítani a szabad prosztataspecifikus antigén enzimes aktivitása által. Az ilyen oligopeptidek közé tartoznak azok az oligomerek, melyek az alábbi aminosavszekvenciák valamelyikét tartalmazzák:
a) AsnLysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 13),
b) LysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 14),
c) GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnXaaSerIleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 15),
d) GlyLysGlylleSerSerGlnTyr| SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 2),
e) AsnLysIleSerTyrTyr|Ser (SEQ. ID. NO. 127),
f) AsnLysAlaSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 128),
g) SerTyrGln|SerSer
h) LysTyrGln|SerSer
i) hArgTyrGln|SerSer ahol hArg homoarginin, és Xaa egy nem természetes aminosav.
A találmány egyik előnyös kiviteli módja szerint az oligopeptidek közé olyan oligomerek tartoznak, melyek az alábbi aminosavszekvenciák valamelyikét tartalmazzák :
a) AsnLysIleSerTyrGln|SerSer (SEQ. ID. NO. 16),
b) AsnLysIleSerTyrGln|SerAla (SEQ. ID. NO. 130),
c) AsnLysIleSerTyrGln|SerSerSer (SEQ. ID. NO. 17),
d) AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSer (SEQ. ID. NO. 18),
e) LysIleSerTyrGln|SerSerSerThrGlu (SEQ. ID. NO. 19),
f) GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnArgSerIleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 4), (SEQ. ID. NO. 129), (SEQ. ID. NO. 140), (SEQ. ID. NO. 141),
HU 220 877 Bl
g) GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnSerSerIleTyr|SerGlnThrGlu
h) AlaAsnLysIleSerTyrTyr|Ser
i) AlaAsnLysAlaSerTyrGln|Ser
j) SerTyrGln|SerSerThr
k) SerTyrGln|SerSerSer
l) LysTyrGln|SerSerSer
m) hArgTyrGln|SerSerSer
n) SerTyrGln|SerSerLeu (SEQ. ID. NO. 5), (SEQ. ID. NO. 131), (SEQ. ID. NO. 132), (SEQ. ID. NO. 133), (SEQ. ID. NO. 134), (SEQ. ID. NO. 142), (SEQ. ID. NO. 143) és (SEQ. ID. NO. 135).
A találmány még előnyösebb kiviteli módja szerint az oligopeptidek közé olyan oligomerek tartoznak, melyek az alábbi aminosavszekvenciák valamelyikét tartalmazzák:
a) AsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThr (SEQ. ID. NO. 10),
b) AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerAla (SEQ. ID. NO. 136),
c) AsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrGlu (SEQ. ID. NO. 3),
d) AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrGlu (SEQ. ID. NO. 11),
e) GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnArgSerIleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 4),
f) AlaAsnLysIleSerTyrTyrjSerSer (SEQ. ID. NO. 137),
g) AlaAsnLysIleSerTyrTyr|SerAla (SEQ. ID. NO. 138),
h) AlaAsnLysAlaSerTyrGln|SerAla (SEQ. ID. NO. 139),
i) AlaSerTyrGln|SerSerLeu (SEQ. ID. NO. 94).
A találmány egy további előnyös kiviteli módja szerint az oligopeptid olyan oligomer, mely az alábbi aminosavszekvenciát tartalmazza:
a) GlyArgLysAlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrGluGluArgArgLeuHisTyrGlyGluAsnGly (SEQ. ID. NO. 6).
Az „oligomerek, amelyek egy aminosavszekvenciát tartalmaznak” kifejezés, ahogy azt a fentiekben és a leírásban bárhol használjuk, körülbelül 6-körülbelül 100 aminosavrészből álló oligomereket jelentenek, melyek aminosavszekvenciájukban a leírt specifikus aminosavszekvenciákat tartalmazzák, és ennélfogva proteolitikusan hasíthatok az aminosavszekvencián belül szabad PSA-val.
így például a következő oligomer, a SEQ. ID. NO. 20: GlnLeuAspAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrHisGlnSerSer tartalmazza a SEQ. ID. NO. 10: AsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThr aminosavszekvenciát, és így a találmány oltalmi körébe tartozik. Az magától értetődik, hogy a Semenogelin I és Semenogelin II nem tartoznak a találmány szerinti oligomerek közé.
Az is nyilvánvaló, hogy a találmány szerinti oligomerek közé tartoznak azok is, melyek N-terminálisát vagy C-terminálisát vagy mindkettőt módosítottuk. Az ilyen módosítások magukban foglalják, de nem korlátozódnak ezekre, az N-terminális aminocsoportjának acilezését és a C-terminális karboxilcsoportjának helyettesítését egy amidcsoporttal. Az ilyen csoportok bevitelét az oligomer szilárd fázisú szintézise során kivitelezhetjük; így például a C-terminális aminosavat hozzákap10 csolhatjuk a szilárd fázisú gyantához egy aminon keresztül, amely egy amidcsoportot eredményez, amikor az oligomert a gyantáról savval lehasítjuk. Ennélfogva a következő vegyületek is a fenti értelemben úgy tekinthetők, mint „oligomerek, melyek egy aminosavszekvenciát tartalmaznak”, és példaként szolgálnak, de nem korlátozódnak az alábbiakra:
AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 11)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrLeu (SEQ. ID. NO. 70)
Ac-AlaAsnLy sIleSerT yrGln| SerSerSerThrGlu-amid (SEQ. ID.NO. 11)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerSerThrLeu-amid (SEQ. ID. NO. 70)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerAlaSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 73)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerLysThrGlu-amid (SEQ. ID. NO.: 74)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerThrGlu-amid (SEQ. ID.NO.: 75)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerSerGInThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 78)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerAlaLysThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 79)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrGln|SerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 81)
Ac-AlaAsnLysSerTyrGln|SerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 82)
Ac-AlaAsnLy sAlaSerT yrGln| SerAlaSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 84)
Ac-AlaAsnGluIleSerTyrGln|SerAlaSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 85)
Ac-AsnLysIleSerTyrGln|SerSer-amid (SEQ. ID. NO. 16)
Ac-LysIleSerTyrGln|SerSer-amid (SEQ. ID. NO. 86) Ac-SerTyrGln|SerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 87) Ac-AlaSerT yrGln| SerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 89)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrTyr|SerSerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 92)
Ac-AlaAsnLysIleSerTyrTyr|SerAlaSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 93)
AlaSerTyrGln|SerSerLeu-amid (SEQ. ID. NO. 94) Ac-AlaAsnSerTyrGln|SerSerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 95)
Ac-AlaSerT yrGln| SerSerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 96)
Ac-SerTyrGln|SerSerSerThrGlu-amid (SEQ. ID. NO. 97)
Ac-AlaAsnLysAlaSerTyrGln|SerAlaSerCys-amid (SEQ. ID. NO. 98)
A peptidkémiában jártas szakember számára az is nyilvánvaló, hogy egy biológiailag aktív oligopeptidben bizonyos aminosavak helyettesíthetők más homológ, izoszter és/vagy izoelektromos aminosavakkal, ahol az eredeti oligopeptid biológiai aktivitása konzerválódik a módosított oligopeptidben. A következő aminosavhelyettesítések példaként szolgálnak, de nem korlátozódnak az alábbiakra:
HU 220 877 Bl
Eredeti aminosav Helyettesítő aminosav
Alá Gly
Arg Lys, omitin
Asn Gin
Asp Glu
Glu Asp
Gin Asn
Gly Alá
Ile Val, Leu, Met, Nle
Leu Ile, Val, Met, Nle
Lys Arg, omitin
Met Leu, Ile, Nle, Val
Omitin Lys, Arg
Phe Tyr, Trp
Ser Thr
Thr Ser
Trp Phe, Tyr
Tyr Phe, Trp
Val Leu, Ile, Met, Nle
így például a következő oligopeptideket a szakember számára jól ismert technikákkal szintetizálhatjuk, és az várható, hogy ezek proteolitikusan hasíthatok szabad PS A-val:
AsnArgIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID
AsnLysValSerTyrGln|Ser (SEQ. ID,
AsnLysMetSerTyrGln|SerSer (SEQ. ID.
AsnLysLeuSerTyrGln|SerSer (SEQ. ID.
AsnLysIleThrTyrGln|SerSer (SEQ. ID.
AsnLysIleSerPheGln|SerSerSer (SEQ. ID. AsnLysIleSerTrpGln|SerSerSerThr (SEQ. ID AsnLysIleSerTyrAsn|SerSerSerThr (SEQ. ID AsnLysIleSerTyrGln|ThrSerSerThr (SEQ. ID AsnLysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID
GlnLysIleSerTyrGln|SerSer (SEQ. ID,
AsnArgIleThrTyrGln|SerSerSer (SEQ. ID, AsnArgIleSerPheGln|SerSerSerThr (SEQ. ID. AsnArgIleSerTrpGln|SerSerSerThr (SEQ. ID, AsnArgIleSerTyrGln|ThrSerSerThr (SEQ. ID, AsnLysIleThrTyrGln|ThrSerSerThr (SEQ. ID. AsnLysLeuSerTyrGln|ThrSerSerThr (SEQ. ID
NO. 21) NO. 22) NO. 23) NO. 24) NO. 25) NO. 26) NO. 27) NO. 28) NO. 29) NO. 30) NO. 31) NO. 32) NO. 33) NO. 35) NO. 36) NO. 37)
NO. 38)
GlnLysLeuSerTyrGln|SerSerSerThr (SEQ.
AsnArgLeuSerTyrGln|ThrSerSerThr (SEQ.
ID
ID
NO
NO.
39)
40)
AsnLysValSerPheGln|SerSerSerThr (SEQ. ID. NO. 41)
AsnArgValSerTrpGln|SerSerSerThr (SEQ. ID. NO. 42)
GlnLysValSerTyrGln|SerSerSerThr (SEQ. ID. NO. 43) GlnLysIleSerTyrGln|ThrSerSerThr (SEQ. ID. NO. 34) AsnLysIIeSerTyrGln|SerSerSerThr (SEQ. ID. NO. 44) Hasonlóképpen az alábbi oligopeptideket a szakember számára ismert technikákkal állíthatjuk elő és várhatólag proteolitikusan hasíthatok szabad PS A-val: GlyGluGlnGlyValGlnLysAspValSerGlnSerSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 45),
GlyGluAsnGlyLeuGlnLysAspValSerGlnSerSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 47),
GlyGluAsnGlyValAsnLysAspValSerGlnSerSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 48),
GlyGluAsnGlyValGlnArgAspValSerGlnArgSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 49),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnLysSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 50),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspLeuSerGlnThrSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 51),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnSerSerllePhe|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 52),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspMetSerGlnSerSerlleTyr|ThrGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 53),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnArgSerlleTyr|ThrGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 54),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnSerSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 55),
GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnArgSerlleTyr|SerAsnThrGlu (SEQ. ID. NO. 56),
GlyLysAlaIleSerSerGlnTyr|SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 57), GlyArgGlyIleSerSerGlnTyr|SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 59), Gly LysGly IleThrSerGlnT yr| SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 60), Gly LysGly IleSerThrGlnT yr | SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 61), GlyLysGlyIleSerSerAsnTyr|SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 62), AlaLysGlyIleSerSerGlnTyr|SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 63), GlyLysGlyIleSerSerGlnPhe|SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 64), GlyLysGlyIleSerSerGlnTyr|ThrAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 65), GlyLysGlyIleSerSerGlnTyr|SerAsnSerGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 58), GlyLysGlyIleSerSerGlnTyr|SerAsnThrAspGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 46), és hasonlók.
Az aminosavszekvencián belüli „|” szimbólum azt a helyet jelzi, ahol az oligopeptidet a szabad PSA proteolitikusan elhasítja.
A találmány továbbá a proteolítikus szabad PSAaktivitás mérésének módszerére is vonatkozik egy készítményben. Ez jelentős szempontja a találmánynak, amennyiben egy olyan vizsgálati rendszert nyújt, amely lehetővé teszi bizonyos fiziológiai folyadékokban és szövetekben jelen lévő szabad PSA mennyiségének kvantitatív mérését. Egy ilyen vizsgálati módszer nemcsak a szabad PSA izolálásának és tisztításának követésére ad lehetőséget, hanem alapul szolgál a szabad PSA proteolítikus aktivitása inhibitorainak screenelő vizsgálatára is. A vizsgálati módszer általában magában foglalja egy egyszerű meghatározását egy vegyület azon képességének, hogy tartalmaz-e enzimatikusan aktív szabad PSA-t az oligopeptid proteolítikus elhasítására.
Tipikusan a vizsgálati protokollt a fent leírt oligopeptidek egyikének felhasználásával vitelezzük ki. Az assay megszerkesztésében különösen előnyösnek talál5
HU 220 877 Bl tűk, ha a hasítási helyet tartalmazó oligopeptidet jelezzük, például radioaktív jelzéssel úgy, hogy ennek a jelnek a megjelenését mérhetjük mind az el nem hasított oligopeptidben, mind a hasítás után visszamaradó oligopeptidrészben, amely a jelzést hordozza.
A találmány továbbá egy eljárásra is vonatkozik azoknak a vegyületeknek az azonosítására (melyekre az alábbiakban jelölt vegyületként hivatkozunk), melyek gátolják a szabad PSA proteolitikus aktivitását. Úgy tűnik, hogy ez a szelekciós technika használhatónak bizonyul bármely jelölt vegyület általános azonosításában, amely inhibitorként szolgálhat, akár ajelölt vegyület fehérjeszerű vagy peptidszerű struktúrában van, akár nem.
így a jelen találmány tehát egy tesztvegyület szabad PSA proteolitikus aktivitást gátló képességének meghatározására szolgáló eljárásra is vonatkozik, ami abban áll, hogy
a) egy szubsztrátot szabad prosztataspecifikus antigénnel reagáltatunk egy tesztvegyület jelenlétében, ahol a szubsztrát egy olyan aminosavszekvenciát tartalmaz, amelyet a szabad prosztataspecifikus antigén felismer és szelektíven elhasít, és
b) detektáljuk, hogy vajon a szubsztrát elhasadt-e, amikor is a tesztvegyület azon képességét, hogy a prosztataspecifikus antigén proteolitikus aktivitását gátolja, az elhasított szubsztrát mennyiségének a tesztvegyület távollétében mért szubsztráthasításhoz viszonyított csökkenése jelzi.
A jelölt vegyületeket szkrínelő módszert nagyon egyszerű készletezni és kivitelezni, és többféle módon elvégezhető a vizsgálat a proteolitikus aktivitás meghatározására. így például, egy viszonylag tisztított szabad PSA-készítmény kinyerése után egyszerűen összekeverjük a tesztvegyületet a proteolitikus készítménnyel, előnyösen olyan körülmények között, melyek megengedik, hogy a PSA kifejtse hasítási funkcióját, de egy inhibitor vegyületnek a jelenlétében. Ennélfogva általában célszerű, hogy a keverék egy PSAspecifikus hasítási hellyel rendelkező, ismert oligopeptid mennyiségét tartalmazza, mint amilyen oligopeptideket a fentiekben leírtunk. Ilyen körülmények között mérhető a tesztvegyület azon képessége, hogy relatíve csökkenti az oligopeptid hasítását a tesztvegyület jelenlétében.
Ennek megfelelően célszerű megmérni vagy egyéb módon meghatározni a szabad PSA-aktivitását hozzáadott tesztvegyület nélkül összehasonlítva a tesztvegyület jelenlétében mért aktivitással, abból a célból, hogy megállapítsuk a tesztvegyület relatív inhibitor képességét.
A jelen találmány továbbá új rákellenes készítményekre is vonatkozik, melyek felhasználhatók prosztatarák kezelésére. Ezekben a készítményekben a találmány szerinti oligopeptideket kovalensen kötöttük egy citotoxikus szerhez közvetlenül vagy egy kémiai linkeren keresztül. Egy oligopeptidnek és egy citotoxikus szemek az ilyen kombinációját nevezzük konjugátumnak. Ideális esetben a citotoxikus szer citotoxikus aktivitása nagymértékben csökken vagy eltűnik, amikor a
PSA proteolitikus hasítási helyet tartalmazó oligopeptidet közvetlenül vagy egy kémiai linkeren keresztül a citotoxikus szerhez kötjük és az sértetlen. Hasonlóképpen ideális esetben a citotoxikus szer citotoxikus aktivitása jelentősen megnő vagy a módosítatlan citotoxikus szer aktivitásához visszatér a kapcsolt oligopeptid hasítási helyénél végbement hasítás után. A találmány ezen szempontjának legelőnyösebb kiviteli módja egy olyan konjugátum, melyben az oligopeptid és a kémiai linker - ha jelen van - a szabad PSA proteolitikus aktivitása által el vannak választva a citotoxikus szertől, és ezáltal bármely más, a szövet szomszédságában jelen lévő, natív proteolitikus enzim felszabadítja a módosítatlan citotoxikus szert a fiziológiai környezetbe a proteolitikus hasítási helynél.
Magától értetődik, hogy a találmány szerinti oligopeptidnek, melyet a citotoxikus szerhez közvetlenül egy kovalens kötésen vagy közvetve egy kémiai linkeren keresztül konjugáltunk, nem szükséges olyan oligopeptidnek lenni, amelyet a szabad PSA a legjobban felismer és a legkönnyebben hasítható proteolitikusan a szabad PSA által. Ennélfogva az oligopeptidet, melyet egy ilyen rákellenes konjugátumba történő beépítéshez kiválasztunk, a szabad PSA-val szembeni szelektivitása és proteolitikus hasíthatósága alapján, valamint a citotoxikus szer-proteolitikus maradék-konjugátum (vagy amelyben - úgy véljük - ideális esetben a módosítatlan citotoxikus szer van jelen) egy ilyen hasításból eredő citotoxikus aktivitása alapján választjuk ki.
Emiatt a találmány szerinti konjugátumok felhasználhatók egy adott biológiai válasz módosítására, ahol a citotoxikus szer nem korlátozódik a klasszikus kémiai terápiás szerekre. így például a citotoxikus szer lehet egy fehérje vagy egy polipeptid, amely a kívánt biológiai aktivitással rendelkezik. Ilyen fehérjék közé tartozik például egy toxin, mint az abrin, ricin A, Pseudomonas-exotoxin vagy a diftériatoxin; egy fehérje, mint például a tumor-nekrózisfaktor, a-interferon, β-interferon, idegnövekedési faktor, vérlemezke-eredetű növekedési faktor, szöveti plazminogén aktivátor; vagy biológiai válaszmodifikálók, mint például limfokinek, interleukin-1 („IL-1”), interleukin-2 („IL-2”), interleukin-6 („IL—6”), granulocitamakrofág-stimuláló faktor („GM-CSF”), granulocitakolónia-stimuláló faktor („G-CSF”) vagy egyéb növekedési faktorok.
Az előnyös citotoxikus szerek közé tartoznak általában az alkilezőszerek, antiproliferatív szerek, tubulinkötő szerek és hasonlók. A citotoxikus szerek előnyös osztályait alkotják például az antraciklincsalád, vinka alkaloidok, mitomycinek, bleomycinek, citotoxikus nukleozidok, a pteridincsalád, diynenek és a podophyllotoxinok. Ezeknek a családoknak különösen felhasználható tagjai közé tartozik például a doxorubicin, carminomycin, daunorubicin, aminopterin, methotrexat, methopterin, diklór-methotrexat, mitomycin C, porfiromycin, 5-fluor-uracil, 6-merkaptopurin, citozin-arabinozid, podophyllotoxin vagy podophyllotoxin-származékok, mint például etopozid vagy etopozid-foszfát, melfalán, vinblasztin, vinkrisztin, leurozidin, vindezin, leurozin és hasonlók. A felhasználható egyéb citotoxi6
HU 220 877 Bl kus szerek közé tartozik az estramustin, ciszplatin és a ciklofoszfamid. A szakember kémiai módosításokat végezhet a kívánt vegyületen annak érdekében, hogy a vegyület még inkább megfeleljen a találmány szerinti konjugátumok előállítási céljaira.
A találmány szempontjából a citotoxikus szerek legelőnyösebb csoportjait az alábbi képletekkel rendelkező szerek alkotják:
AZ (1) KÉPLETŰ METHOTREXATCSOPORT: amely képletben
R12 jelentése amino- vagy hidroxilcsoport;
R7 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
R8 jelentése hidrogén-, fluor-, klór-, bróm- vagy jódatom;
R9 jelentése hidroxilcsoport vagy egy karbonsavsót képző csoport;
A (2) KÉPLETŰ MITOMYCINCSOPORT: amely képletben
R10 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
A (3) KÉPLETŰ BLEOMYCINCSOPORT: ahol a képletben
R11 jelentése hidroxil-, amino-, 1-3 szénatomos alkil-amino-, di(l-4 szénatomos alkil)-amino-, 4-6 szénatomos polimetilén-amino-csoport vagy (a) vagy (b) képletű csoport;
A (4) KÉPLETŰ MELPHALAN;
AZ (5) KÉPLETŰ 6-MERKAPTOPURIN;
A (6) KÉPLETŰ CITOZIN-ARABINOZID;
A (7) KÉPLETŰ PODOPHYLLOTOXINOK: ahol a képletben
R13 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport;
R14 jelentése metil- vagy tienilcsoport;
vagy ezek foszfátsója;
A (8) KÉPLETŰ VINKA ALKALOIDCSOPORT: ahol a képletben
R15 jelentése H, CH3 vagy CHO; amikor R17 és R18 magában álló;
R18 jelentése H, és R16 és R17 egyike etilcsoport és a másik H vagy OH; amikor R17 és R18 a szomszédos szénatomokkal együtt oxirángyűrűt képeznek, R16 etilcsoportot jelent;
R19 jelentése H, (1-3 szénatomos alkil)-CO vagy klór-szubsztituált (1-3 szénatomos alkil)-CO;
A (9) KÉPLETŰ DIFLUOR-NUKLEOZIDOK: ahol a képletben
R21 egy (c-g) általános képletű bázis, ahol a képletekben
R22 hidrogén-, bróm-, fluor-, klór- vagy jódatomot vagy metilcsoportot jelent;
R23 jelentése -OH vagy -NH2;
R24 hidrogén-, bróm-, klór- vagy jódatomot jelent;
A (10) KÉPLETŰ ANTRACIKLIN ANTIBIOTIKUMOK:
ahol a képletben
R1 jelentése -CH3, -CH2OH,
-CH2OCO(CH2)3CH3 vagy -CH2OCOCH(OC2H5)2;
R3 jelentése -OCH3, -OH vagy -H;
R4 jelentése -NH2, -NHCOCF3, 4-morfolinil-, 3ciano-4-benzil-amino-, dibenzil-amino-, cianometil-amino- vagy l-ciano-2-metoxi-etil-amino-csoport;
R5 jelentése -OH, -OTHP vagy -H; és
R6 jelentése -OH vagy -H, azzal a megkötéssel, hogy amikor R5 -OH vagy -OTHP, akkor R6 más mint —OH;
A (11) KÉPLETŰ ESTRAMUSTIN A (12) KÉPLETŰ CIKLOFOSZFAMID.
A találmány szempontjából legelőnyösebbek az előzőkben leírt, (10) képletű antraciklin antibiotikumok. A szakember számára köztudott, hogy ez a képlet magában foglalja azokat a vegyületeket, amelyek gyógyszerek vagy gyógyszerszármazékok és különbö35 ző generikus vagy triviális néven beszerezhetők. Az 1. táblázatban generikus vagy triviális névvel megadjuk az antraciklin gyógyszerek azon képviselőit, melyek különösen előnyösen felhasználhatók a jelen találmányban.
1. táblázat
A (10) képletű antraciklin antibiotikumok képviselői
Vegyület R> R3 R4 R5 R6
Daunorubicin3 CH3 OCH3 nh2 OH H
Doxorubicinb CH2OH och3 nh2 OH H
Detorubicin CH2OCOCH(OC2H5)2 och3 nh2 OH H
Carminomycin ch3 OH nh2 OH H
Idarubicin ch3 H nh2 OH H
Epirubicin ch2oh och3 nh2 OH OH
THP ch2oh och3 nh2 OTHP OH
AD-32 CH2OCO(CH2)3CH3 och3 NHCOCF3 OH OH
3 „daunomicin” egy alternatív ncv a daunorubicinre b „adriamicin” egy alternatív ncv a doxorubicinre
HU 220 877 Bl
Az 1. táblázatban bemutatott vegyületek közül a legelőnyösebb szer a doxorubicin. A doxorubicin (melyre az alábbiakban mint „DOX” hivatkozunk) az a (10) képletű antraciklin, amelyben R1 jelentése -CH2OH, R3 jelentése -OCH3, R4 jelentése -NH2, R5 jelentése -OH és R6 jelentése -H.
A találmány szerinti oligopeptideket, peptidalegységeket és peptidszármazékokat (közös néven „peptidek”) a megfelelő aminosavakból a szokásos peptidszintézis-technikákkal szintetizálhatjuk, előnyösen szilárd fázisú technológiával. A peptideket ezután reverz fázisú nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával (HPLC) tisztítjuk.
A peptidszintézis standard módszereit az alábbi összefoglaló munkákban ismertetik: Schroeder és munkatársai: „The Peptides”, Vol. I, Academic Press 1965; Bodánsky és munkatársai: „Peptise Synthesis”, Interscience Publishers, 1966; McOmie (ed.) „Protective Groups in Organic Chemistry”, Plenum Press, 1973; Bárány és munkatársai: „The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology” 2, 1. kötet, Academic Press, 1980, és Stewart és munkatársai: „Solid Phase Peptide Synthesis”, 2. kiadás, Pierce Chemical Company, 1984. Ezekben a munkákban található kitanítást a jelen bejelentésbe referenciaként beépítjük.
A találmány szerinti konjugátumokat, melyek a PSA-hasítási helyet hordozó oligopeptidet és egy citotoxikus szert tartalmaznak, hasonlóképpen, a gyógyszerkémiában ismert módszerekkel állíthatjuk elő. így például a citotoxikus szer egy szabad aminocsoportját kovalensen hozzáköthetjük az oligopeptid karboxilcsoportjához, ezáltal egy amidcsoportot képezve. Hasonlóképpen egy amidkötést létrehozhatunk úgy is, hogy az oligopeptid aminocsoportját és a citotoxikus szer egy karboxilcsoportját kapcsoljuk kovalensen össze. Erre a célra szolgáló reagenskombinációk például a 2-(lHbenztriazol-1 -il)-1,3,3-tetrametil-urónium-hexafluorfoszfát (HBTU) és az 1-hidroxi-benztriazol-hidrát (HOBT), diciklohexil-karbodiimid (DCC), N-etil-N(3-dimetil-amino-propil)-karbodiimid (EDC), difenilfoszforil-azid (DPPA), benztriazol-l-il-oxi-trisz(dimetil-amino)-foszfónium-hexafluor-foszfát (BOP) és hasonlók.
Továbbá a találmány szerinti konjugátumokat előállíthatjuk a PSA-hasítási hely és a citotoxikus szer között egy nempetidil kötés létrehozásával is. így például a citotoxikus szert kovalensen hozzáköthetjük az oligopeptid karboxiterminálisához a citotoxikus szer hidroxilcsoportján keresztül, ezáltal egy észterkötést alkotva. Erre a célra szolgáló reagensként a HBTU és HOBT kombinációját, a BOP és imidazol kombinációját, a DCC és DMAP kombinációját és hasonlókat alkalmazhatunk. Aktiválhatjuk a karbonsavat is nitro-fenil-észterek és hasonlók képzésével és DBU (1,8-diaza-biciklo[5.4.0]undec-7-én jelenlétében történő reagáltatásával.
A találmány szerinti konjugátumokat úgy is kialakíthatjuk, hogy egy linkeregységen keresztül kapcsoljuk az oligopeptidet a citotoxikus szerhez. Ilyen linkeregységek közé tartoznak például a biszkarbonil-alkildiradikálok, ahol a citotoxikus szer aminja a linkeregységgel kapcsolódva egy amidkötést képez, és az oligopeptid aminoterminálisa a linkeregység másik végéhez kapcsolódva szintén egy amidkötést alkot. Egyéb ilyen linkeregységek is tervezhetők, melyek a fiziológiás környezetben stabilak, amikor a szabad PSA nincs jelen, de hasíthatok a PSA proteolitikus hasítási helynek a hasításával. Továbbmenően a linkeregységek felhasználhatók a PSA proteolitikus hasítási hely hasítása révén arra, hogy a maradék rész, amely a citotoxikus szerhez kapcsolódik, de nem csökkenti szignifikánsan az ilyen utólagosan hasított citotoxikusszer-származék citotoxikus aktivitását a módosítatlan citotoxikus szerrel összehasonlítva.
A szakember számára magától értetődik, hogy a találmány szerinti vegyületek szintézisében szükséges lehet védeni vagy blokkolni a különböző reakcióképes csoportokat a kiindulási vegyületeken és intermediereken, amíg a kívánt reakciót a molekula másik részein kivitelezzük. A kívánt reakciók lejátszódása után vagy bármely kívánt időben természetesen ezeket a csoportokat el lehet távolítani például hidrolitikus vagy hidrogenolitikus eszközökkel. Az ilyen védési és védőcsoport-eltávolítási lépések szokásosak a szerves kémiában, így hivatkozunk az alábbi referátumokra: McOmie: Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press kiadó, NY, NY (1973); és Greene: Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons kiadó, NY, NY (1981), melyekben ismertetett kitanítás a védőcsoportokról felhasználható a találmány szerinti vegyületek előállításában.
Csak példaképpen említjük, hogy a felhasználható amino-védőcsoportok közé tartoznak például az 1-10 szénatomos alkanoilcsoportok, mint például formil-, acetil-, diklór-acetil-, propionil-, hexánod-, 3,3dietil-hexanoil-, γ-klór-butiril-csoport és hasonlók; 1-10 szénatomos alkoxi-karbonil- és 5-15 szénatomos aril-oxi-karbonil-csoportok, mint például terc-butil-oxikarbonil-, benzil-oxi-karbonil-, allil-oxi-karbonil-, 4nitro-benzil-oxi-karbonil-, fluorenil-metil-oxi-karbonilés cinnamoil-oxi-karbonil-csoport; halogénül-10 szénatomos alkoxi)-karbonil-, mint például 2,2,2-triklóretoxi-karbonil-csoport; és 1-15 szénatomos aril-alkilés alkenilcsoport, mint például benzil-, fenetil-, allil-, tritilcsoport és hasonlók. Más szokásosan alkalmazott amino-védőcsoportok azok, melyeket az enaminok βketo-észterekkel, mint például metil- vagy etil-acetoacetáttal való előállítása során alkalmaznak.
A felhasználható karboxi-védőcsoportok közé tartoznak például az 1-10 szénatomos alkilcsoportok, így például metil-, terc-butil-, decilcsoport; halogén(1-10 szénatomos alkil)-, mint például 2,2,2-triklóretil- és 2-jód-etil-csoport; 5-15 szénatomos aril-alkilmint például benzil-, 4-metoxi-benzil-, 4-nitro-benzil-, trifenil-metil-, difenil-metil-csoport; 1-10 szénatomos alkanoil-oxi-metil-, mint például acetoxi-metil-, propionoxi-metil-csoport és hasonlók; és további csoportok, mint például fenacil-, 4-halogén-fenacil-, allil-, dimetil-allil-, tri-(l-3 szénatomos alkil)-szilil- (például trimetil-szilil-), β-ρ-toluolszulfonil-etil-, β-ρ-nitro-fenil-tio-etil-, 2,4,6-trimetil-benzil-, β-metil-tio-etil-, ftal8
HU 220 877 Bl imido-metil-, 2,4-dinitro-fenil-szulfenil-, 2-nitro-benzhidril- és hasonló csoportok.
Hasonlóképpen az alkalmazható hidroxil-védőcsoportok közé tartoznak például a formil-, klór-acetil-, benzil-, benzhidril-, tritil-, 4-nitro-benzil-, trimetil-szilil-, fenacil-, terc-butil-, metoxi-metil-, tetrahidropiranilcsoport és hasonlók.
Tekintettel arra, hogy az előnyös kiviteli módot egy oligopeptidnek az antraciklin antibiotikum doxorubicinnal való kombinálása képezi, az I-V. reakcióvázlaton mutatjuk be a találmány szerinti konjugátumok szintézisét.
A VI. reakcióvázlat egy találmány szerinti oligopeptid és a vinka alkaloid citotoxikus vinblasztin konjugátumainak előállítását illusztrálja. Bemutatjuk az oligopeptid N-terminálisának kapcsolását a vinblasztinhoz [Kandukuri S. P. és munkatársai: J. Med. Chem. 28, 1079-1088. (1985)]. Azonban az oligopeptid konjugálása a vinblasztin más helyeinél és funkcionális csoportjainál, illetve az oligopeptid C-terminálisánál is várhatóan olyan vegyületeket eredményez, melyek felhasználhatók a prosztatarák kezelésében.
Az is magától értetődik, hogy lehet olyan konjugátumokat előállítani, amelyekben a találmány szerinti oligopeptid N-terminálisa kovalensen kapcsolódik egy citotoxikus szerhez, mint például a vinblasztinhoz, míg a C-terminális egyidejűleg egy másik citotoxikus szerhez kötődik, amely azonos vagy eltérő citotoxikus szer lehet, mint például a doxorubicin. így egy policitotoxikus konjugátum előnyökkel rendelkezhet egy egyetlen citotoxikus szert tartalmazó konjugátummal szemben.
A találmány szerinti oligopeptid-citotoxikus szerkonjugátum, melyben a citotoxikus szer előnyösen a doxorubicin, az (I) általános képlettel írható le, ahol a képletben az „oligopeptid” egy oligopeptid, melyet a szabad prosztataspecifikus antigén (PSA) specifikusan felismer és proteolitikusan hasítható a szabad prosztataspecifikus antigén által;
XL nincs jelen vagy egy aminosav az alábbiak közül:
a) fenil-alanin,
b) leucin,
c) valin,
d) izoleucin,
e) (2-naftil)-alanin,
f) ciklohexil-alanin,
g) difenil-alanin,
h) norvalin és j) norleucin;
R jelentése hidrogén vagy -(C=O)R*, és
R1 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport vagy arilcsoport.
Az oligopeptid-citotoxikus szer-konjugátum egyik előnyös kiviteli alakjában az „oligopeptid” egy olyan oligomer, mely az alábbi aminosavszekvenciák egyikét tartalmazza :
a) AsnLysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 13),
b) LysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 14),
c) GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnXaaSerlleTyr|SerGlnThrGly (SEQ. ID. NO. 15),
d) GlyLysGlyIleSerSerGlnTyr| SerAsnThrGluGluArgLeu (SEQ. ID. NO. 2),
e) AsnLysIleSerTyrTyr|Ser (SEQ. ID. NO. 127),
f) AsnLysAlaSerTyrGlnJSer (SEQ. ID. NO. 128),
g) SerTyrGln|SerSer (SEQ. ID. NO. 129) és
h) hArgTyrGln| SerSer (SEQ. ID. NO. 141);
ahol Xaa egy természetes aminosav;
XL hiányzik vagy egy aminosav az alábbiak közül:
a) leucin,
b) izoleucin,
c) norleucin vagy
d) valin; és
R jelentése acetil-, pivaloil- vagy benzoilcsoport.
Az alábbi (IA) általános képletű vegyületek előnyös példái a találmány szerinti oligopeptid-citotoxikus szerkonjugátumnak. A (IA) képletben
X jelentése
H2N-AsnLysIleSerTyrGlnSer- C(O) (SEQ. ID. NO. 13),
H2N - AsnLysIleSerTyrGlnSerSer- C(O) (SEQ. ID. NO. 16),
IfN-AsnLysIleSerTyrGlnSerSerSer-C(O)(SEQ.ID.NO. 17),
H2N-AsnLysIleSerTyrGlnSerSerSerThr-C(O)(SEQ. ID. NO. 10),
H2N - AsnLy sIleSerT yrGlnSerSerSerThrGlu- C(O)(SEQ. ID. NO. 3),
H2N-AlaAsnLysIleSerTyrGlnSerSerSerThrGlu-C(O)- (SEQ. ID. NO. 11),
AcHN-AlaAsnLysIleSerTyrGlnSerSerSerThr-C(O)(SEQ. ID. NO. 117),
AcHN-AlaAsnLysIleSerTyrGlnSerSerSerThrLeu-C(O)- (SEQ. ID. NO. 70),
AcHN - AlaAsnLy s AlaSerT yrGlnSerAlaSerThrLeu-C(O)- (SEQ. ID. NO. 118),
AcHN - AlaAsnLys AlaSerTyrGlnSerAlaSerLeu-C(O)- (SEQ. ID. NO. 119),
AcHN-AlaAsnLysAlaSerTyrGlnSerSerSerLeu-C(O)- (SEQ. ID. NO. 120),
AcHN-AlaAsnLysAlaSerTyrGlnSerSerLeu-C(O)- (SEQ. ID. NO. 121),
AcHN-SerTyrGlnSerSerSerLeu-C(O)(SEQ. ID. NO. 144),
AcHN-hArgTyrGlnSerSerSerLeu-C(O)(SEQ. ID. NO. 145),
AcHN - LysTyrGlnSerSerSerLeu-C(O)(SEQ. ID. NO. 124),
AcHN - Ly sTyrGlnSerSerNle- C(O) (SEQ. ID. NO. 146).
Az is jól ismert és a jelen találmányban magától értetődő, hogy a peptid-gyógyszerkészítmények, mint például a találmány szerinti oligopeptid-citotoxikus szer-konjugátumok, bármely oligopeptid aminoterminálisán előnyösen védve vannak egy alkalmas védőcsoporttal, így például acetil-, benzoil-, pivaloil- és hasonló csoporttal. Az aminocsoport ilyen védelme csökkenti vagy eliminálja azt a hatást, hogy ezen peptidgyógyszereket a meleg vérű állatok vérplazmájában jelen lévő exogén aminopeptidáz enzimes úton lebontja.
HU 220 877 Β1
A találmány szerinti oligopeptid-citotoxikus szerkonjugátumokat olyan gyógyászati készítmények formájában adjuk be a betegnek, amelyek hatóanyagként egy (I) általános képletű konjugátumot és egy gyógyászatilag elfogadható hordozót, kötőanyagot vagy hígítószert tartalmaznak. A „gyógyászatilag elfogadható” kifejezés, az itt használt értelemben azokra az anyagokra vonatkozik, melyek a meleg vérű állatok kezelésében és diagnózisában használatosak, beleértve az embert, lovat, sertést, marhát, rágcsálókat, macskaféléket, kutyaféléket vagy egyéb emlősöket, valamint a madarakat vagy más meleg vérű állatokat. A beadás előnyös módja a parenterális, különösen az intravénás, intramuszkuláris, szubkután, intraperitoneális vagy intralimfatikus mód. Ezeket a készítményeket a gyógyszerkészítésben jártas szakember számára ismert hordozókkal, hígítókkal vagy kötőanyagokkal állíthatjuk elő (lásd például Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16. kiadás, 1980, Mack Publishing Company, kiadó: Osol és társai). Ezek a készítmények tartalmazhatnak fehérjéket, így például szérumfehéqéket (humán szérumalbumin), puffereket vagy pufferoló anyagokat, így például foszfátokat, egyéb sókat vagy elektrolitokat és hasonlókat. Alkalmas hígítószerek lehetnek például a steril víz, izotóniás sóoldat, vízzel hígított dextróz, egy polialkohol vagy ilyen alkoholok keveréke, mint például glicerin, propilénglikol, polietilénglikol és hasonlók. A készítmény tartalmazhat tartósítószereket is, mint például fenetil-alkoholt, metil- és propil-parabént, timerozált és hasonlókat. Kívánt esetben a készítmény körülbelül 0,05-körülbelül 0,20 tömeg% antioxidánst is tartalmazhat, mint például nátrium-metabiszulfitot vagy nátrium-biszulfitot.
Intravénás beadás céljára a kompozíciót előnyösen úgy készítjük, hogy a betegnek beadandó mennyiség körülbelül 0,01-körülbelül 1,0 g konjugátum legyen. Előnyösen ez a mennyiség körülbelül 0,2 g és körülbelül 1 g közötti tartományban van. A találmány szerinti konjugátumok széles dózistartományban hatásosak, amely különböző faktoroktól, így a kezelendő beteg állapotától vagy a módosítandó biológiai hatástól függ, a mód pedig, ahogyan a konjugátumot beadjuk, függ a beteg életkorától, testtömegétől és állapotától, valamint egyéb, a kezelőorvos által meghatározott tényezőktől. Ezek alapján egy adott beteg számára a beadandó mennyiséget individuális alapon kell meghatározni.
A szakember számára nyilvánvaló, hogy bár az alábbi példákban specifikus reagenseket és reakciókörülményeket ismertetünk, végezhetők olyan módosítások, melyek a találmány szellemétől nem térnek el és az oltalmi körbe esnek. A következő készítmények és példák ennélfogva csak a találmány illusztrálására szolgálnak és nem korlátozzák az oltalmi kört.
PÉLDÁK
1. példa
A PSA-közvetített hasítási helyek azonosítása a
Semenogelinben
A spermagél cseppfolyósodása párhuzamban áll a Semenogelin I proteolitikus fragmentációjával [Lilja
H., Laurell C. B.: Scand. J. Clin. Láb. Inves. 44, 447-452. (1984)]. Úgy vélik, hogy a Semenogelin proteolitikus fragmentációja vezet főként a prosztataspecifikus antigén proteolitikus aktivitásához [Lilja H.: J. Clin. Invest. 76, 1899-1903. (1985)]. Felhasználva a Semenogelin I publikált szekvenciáját [Lilja H., Abrahamsson P. A., Lundwall A.: J. of Bioi. Chem. 264,1894-1900. (1989)] (1. ábra), polimeráz láncreakció primereket terveztünk a Semenogelin-cDNS klónozásához, melyet egy kereskedelemben beszerezhető prosztata-cDNS-könyvtárból nyertünk (Clonetech, Palo Alto, CA.). A tisztított Semenogelin-cDNS-t behelyeztük a pTAC bakteriális expressziós vektorba [Linemeyer D. L., Kelly L. J., Minké J. G., GimenezGallego G., DeSalvo J. és Thomas K. A.: Bio/Technology 5, 960-965. (1987)]. A Semenogelin-cDNS-t úgy terveztük meg, hogy a tubulinepitóp a Semenogelinfehérje karboxiterminálisán helyezkedjen el. A bakteriálisán kifejezett Semenogelinfehéijét antitubulin antitestoszlopon tisztítottuk. A tisztított Semenogelin I fehérjét 100:1 mólarányban (Semenogelin 1/PSA) 12 mM Tris pH 8,0, 25 mM NaCl-, 0,5 mM CaCl2-oldatban a kereskedelemben kapható prosztataspecifikus antigénnel (PSA) (York Biologicals International, Stiny Brook, NY) kevertük és különböző ideig inkubáltuk. Az emésztett elegyet poliakrilamid-gélelektroforézissel frakcionáltuk és elektroforézissel ProBlott szűrőpapírra (Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA.) CAPS-pufferben [Matsudaira P.: J. Bioi. Chem. 252, 10035-10038. (1987)] vittük át. A ProBlott szűrőpapírt coomassie-kékkel megfestettük, hogy azonosítsuk a Semenogelin I fehérje fragmensek által létrehozott új PSA-t. Az új fragmenseket a szűrőből egy szikével kivágtuk, és szekvenciameghatározásnak vetettük alá. A különböző idejű emésztésekből származó proteolitikus fragmensek azonosítása után egy 10 perces emésztési reakciót végeztünk. A Semenogelin I-ben a PSA-affmitás 5 potenciális hasítási helyre tehető, melyeket a következő helyekként határoztunk meg: 349/350>375/376>289/290=315/316> 159/160. A relatív affinitások a coomassie-blue festés intenzitásából származnak, melyeket a peptidfragmensek egyes PSAira kaptunk. Ezeknek az intenzitásoknak az aránya megközelítőleg 3:1:0,6:0,3.
2. példa
A PSA-közvetitett hasítási helyet tartalmazó oligopeptidek előállítása
Az oligopeptideket szilárd fázisú szintézissel állítottuk elő, felhasználva a kettős kapcsolási protokollt az aminosavak bevitelére az Applied Biosystem model 430A automata peptidszintetizátorban. A védőcsoportokat és az oligopeptidet a gyantahordozóról folyékony hidrogén-fluoriddal távolítottuk el. Az oligopeptideket nagynyomású folyadékkromatográfiával (HPLC) reverz fázisú Cl8 szilikagél oszlopokon végeztük, és ehhez 0,1% trifluor-ecetsav/acetonitril gradienst alkalmaztunk. Az oligopeptidek azonosítását és homogenitásának meghatározását aminosavösszetétel-analízissel, HPLC-vel és gyors atombombázás tömeg-spektroanalí10
HU 220 877 Bl zissel végeztük. Az ezen módszer szerint előállított oligopeptideket a 2. ábrán mutatjuk be.
3. példa
Oligopeptidek felismerésének vizsgálata szabad
PSA-val
A 2. példában leírt módon előállított oligopeptideket egyenként feloldottuk PSA-emésztő pufferben (12 mM Tris, pH 8,0, 25 mM NaCl, 0,5 mM CaCl2), és az oldatot hozzáadtuk a PSA-hoz 100:1 arányban. A reakciót különböző időpontokban trifluor-ecetsav (TFA) hozzáadásával leállítottuk (végkoncentráció: 1% térfogat/térfogat). Ezt a reakcióelegyet analizáltuk HPLC-vel reverz fázisú C18 oszlopon, vizes 0,1% TFA/acetonitril gradiens alkalmazásával. A vizsgálat eredményeit a 2. ábrán mutatjuk be. Egyéb oligopeptideket, melyeket a 2. példában leírtak szerint állítottunk elő, teszteltünk ugyanezzel a módszerrel, amelyben a reakciót a 4. órában állítottuk le. Az így kapott eredményeket a 3. ábrán mutatjuk be. Egy aszparaginmaradék eltávolítása az oligopeptid aminoterminálisáról a PSA-közvetített peptidhidrolízis szignifikáns csökkenését eredményezte, míg a peptid karboxiterminálísán egy glutaminsavmaradék jelenléte úgy tűnik, hogy nem lényeges a PSA általi felismerés szempontjából.
4. példa
Nem hasítható oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok
A 3. táblázatban megadott (III) általános képletű doxorubicinszármazékokat a következő általános eljárással állítottuk elő: doxorubicin (Sigma) és a megfelelő oligopeptid [szilárd fázisú szintézissel előállítható vagy kereskedelemből beszerezhető (Sigma)] keverékét feloldottuk DMSO-ban, majd hozzáadtunk HBTU-t és HOBT-t diizopropil-etil-aminnal együtt, és a reakcióelegyet egy éjszakán át kevertettük. A nyers reakcióelegyet közvetlenül preparatív HPLC-vel reverz fázisú C18 oszlopon tisztítottuk 0,1% trifluor-ecetsav (TFA) acetonitrilben/0,1% TFA vízben gradiens alkalmazásával.
3. táblázat (III) általános képletű doxorubicinszármazékok
Vegyület R MS (szülőion)
12a Alall 615
12b Ala-N-Ac 657
12c Ala-Ala-Ala-N-Ac 799,5
12d Ala-Ser-Ala-Gly-Thr-ProGlyAla-N-Ac (SEQ. ID. NO. 12) 1199
5. példa
A doxorubicin peptidszármazékai citotoxicitásának in vitro vizsgálati módszere
A 4. példa szerint előállított, nem hasítható oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok citotoxicitását egy olyan sejtvonallal szemben mértük Alamar Blue assayvel, amelyről ismert, hogy a módosítatlan doxorubicin megöli. Közelebbről, az LNCaP prosztatatumorsejtek sejttenyészeteit, amelyek egy nyirokcsomóból tűbiopsziával izolált humán metasztatikus prosztata-adenokarcinómából származnak (LNCaP.FGC: American Type Culture Collection, ATCC CRL 1740), vagy DuPRO-sejteket egy 96 mélyedéses lemezen meghígítottunk olyan tápközeggel, amely egy adott konjugátum különböző koncentrációit tartalmazta (a mélyedés végső térfogata 200 pl). A sejteket 3 napon keresztül 37° C-on inkubáltuk, majd a vizsgált mélyedésekhez Alamar Blue-t adtunk. A sejteket tovább inkubáltuk, és a vizsgálati lemezeket EL-310 ELISA leolvasón két hullámhosszon, 570 és 600 nm-en, 4 és 7 órával az Alamar Blue hozzáadása után leolvastuk. A konjugátum különböző koncentrációinál kapott relatív százalékos életképességet ezután a kontroll- (konjugátumot nem tartalmazó) tenyészetekkel szemben kalkuláltuk. A módosítatlan doxorubicin és a módosítatlan oligopeptid citotoxicitását szintén megállapítottuk. A 3. ábrán megadjuk egy jellegzetes vegyület (12d vegyület) citotoxicitási adatait.
6. példa
LNCaP-sejtekből nyert enzimatikusan aktív PSA vizsgálata
Enzimatikus aktivitást mutattunk ki az LNCaPsejtek szérummentes tápközegben (körülbelül 200-szorosra koncentrálva) rekombináns Semenogelin I-gyel történő inkubálása során. Megközelítőleg 0,5 pg immunológiailag reaktív PSA-t koncentrált kondicionált tápközegben [HYBRIDTECH (Tandem E) ELISA-val meghatározva] összekevertünk körülbelül 3 pg rekombináns Semenogelin I-gyel, és 4 órán keresztül 37° Con inkubáltuk. Az inkubálás végén az emésztett keveréket Western-blot eljárással analizáltuk. Az eredmények azt mutatják, hogy az ondó eredetű, tisztított PSA és kondicionált tápközegben az LNCaP-eredetű PSA a rekombináns Semenogelin I fehérje azonos proteolitikus térképét eredményezi. így tehát az LNCaP-sejtek enzimatikusan aktív PSA-t termelnek. Az LNCaP-sejtek meztelen egerekben daganatképzők, és a keringő PSA-t detektálható szinten termelik.
7. példa
Hasítható oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok előállítása
Azokat a doxorubicinszármazékokat, melyekben egy, a szabad PSA által proteolitikusan hasítható oligopeptid kovalensen kapcsolódik a doxorubicin cukorrészének aminjához, a következő általános eljárással állítottuk elő: doxorubicin (Sigma) és a megfelelő oligopeptid (melyet a 2. példa szerint szilárd fázisú szintézissel állítottunk elő) DMSO-ban készített keverékéhez HBTU-t és HOBT-t adtunk diizopropil-etil-aminnal együtt, és a reakcióelegyet egy éjszakán át kevertettük. A nyers reakcióelegyet közvetlenül preparatív HPLCvel tisztítottuk egy reverz fázisú C18 oszlopon, 0,1% TFA acetonitrilben/0,1% TFA vízben gradiens alkalmazásával. Ha reaktív aminocsoportok vannak jelen a
HU 220 877 Bl peptidben, akkor ezeket tipikusan védeni kell fluorenilmetil-oxi-karbonil-adduktok formájában, amelyeket egy szekunder amin, mint például piridin és hasonlók, segítségével eltávolítottunk a doxorubicinnel való konjugációt követően. Az ilyen típusú konjugátumok a (IV) általános képlettel jellemezhetők, és az „Acpeptid-DOX(3’)” kifejezéssel adhatók meg.
Ezzel a módszerrel előállított konjugátumokat az 5. ábrán az 5. táblázatban foglaltuk össze.
8. példa
Oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok szabad
PSA általi felismerésének vizsgálata
A 7. példa szerint előállított konjugátumokat egyenként feloldottuk PSA-emésztő pufferben [12 mM Tris(hidroxi-metil)-amino-metán pH 8,0, 25 mM NaCl, 0,5 mM CaCl2] és az oldathoz PSA-t adtunk 100:1 mólarányban. A reakciót különböző időpontokban trifluor-ecetsav (TFA) hozzáadásával (végkoncentráció 1 térfogat/térfogat%) állítottuk le. A reakcióelegyet HPLC-vel reverz fázisú Cl8 oszlopon analizáltuk, 0,1% TFA/acetonitril gradienst alkalmazva. A vizsgálat eredményeit az 5. ábra 5. táblázatában mutatjuk be.
9. példa
Oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok hasításának vizsgálata sejtkondicionált tápközegben Sejtkondicionált szérummentes MEMa tápközeget (fenolvörös mínusz) gyűjtöttünk 3 nappal azután, hogy a tápközeget hozzáadtuk az LNCaP- vagy a Duprosejtvonalakhoz [melyeket a J. Urology 146, 915-919. (1991) cikkben leírtak szerint állítottunk elő]. A tápközeget 20-szorosára koncentráltuk egy Amicon® Centriprep™ koncentrátor segítségével 10 000 molekulatömeg vágási értékkel. Az LNCaP-kondicionált tápközeg szabad PSA-fehérjét tartalmazott, átlagosan megközelítőleg 100 ng/ml koncentrációban Tandem®-E PSA immunodetektáló kittel (Hybritech®) meghatározva. Nem volt azonban detektálható szabad PSA a Dupro sejtkondicionált tápközegben.
A besűrített kondicionált tápközeg 100 μΐ-es adagjait összekevertük egy, a 7. példa szerint előállított oligopeptid-doxorubicin-konjugátum 35 pg-jával, és a keveréket 37° C-on 0,4 óra és 24 óra időtartamig inkubáltuk. A reakciókat ZnCl2 hozzáadásával (0,01 M végkoncentrációig) állítottuk le, és reverz fázisú Cl8 oszlopon HPLC-vel analizáltuk vizes 0,1% TFA/acetonitril gradiens alkalmazásával, hogy meghatározzuk a peptid-citotoxikusszer-konjugátum százalékos mennyiségét, amely emésztődött. A kapott eredményeket a 6. ábrán a 6. táblázatban adjuk meg.
10. példa
A doxorubicin peptidszármazékai citotoxicitásának in vitro vizsgálati módszere
A hasítható oligopeptid-doxorubicin-konjugátumok, melyeket a 7. példában leírtak szerint állítottunk elő, citotoxicitásait az 5. példában leírt Alamar Blue assay-vel vizsgáltuk egy olyan sejtvonallal szemben, amelyről köztudott, hogy a módosítatlan doxorubicin megöli. Részletesebben, az LNCaP prosztatatumorsejtek vagy a DuPRO-sejtek sejttenyészeteit 96 mélyedéses lemezen meghígítottuk olyan tápközeggel, amely az adott konjugátum különböző koncentrációit tartalmazta (a végső mélyedéstérfogat 200 μΐ). A sejteket 3 napon keresztül 37 °C-on inkubáltuk, majd a vizsgált mélyedésekhez 20 μΐ Alamar Blue-t adtunk. A sejteket tovább inkubáltuk, és a vizsgálati lemezeket EL-310 ELISA leolvasón két hullámhosszon, 570 és 600 nm-en, 4 és 7 órával az Alamar Blue hozzáadása után leolvastuk. A konjugátum különböző koncentrációinál kapott relatív százalékos életképességet ezután a kontroll- (konjugátumot nem tartalmazó) tenyészetekkel szemben kalkuláltuk. A konjugátumok citotoxicitását összehasonlítottuk az ugyanilyen módszerrel vizsgált módosítatlan doxorubicin és módosítatlan oligopeptid citotoxicitásával is. Ennek a vizsgálatnak az eredményeit a 7. ábra 7. táblázatában foglaltuk össze.
SZEKVENCIALISTA (1) Általános információ:
(i) Bejelentő: MERCK & CO., INC.
(ii) Bejelentés címe: Új peptidek (iii) Szekvenciák száma: 146 (iv) Levelezési cím:
(A) Címzett: DÁVID A. MUTHARD (B) Utca: 126 E. Lincoln Avenue, P.O. BOX 2000 (C) Város: RAHWAY (D) Állam: NEW JERSEY (E) Ország: U.S.A.
(F) Irányítószám: 07065 (v) Komputerrel olvasható forma:
(A) Hordozó típusa: Floppy disk (B) Komputer: IBM PC kompatibilis (C) Operátorrendszer: PC-DOS/MS-DOS (D) Software: Patentln Release #1.0, Version #1.30 (vi) A bejelentés adatai:
(A) A bejelentés száma: PCT/US95/08156 (B) A bejelentés napja: 1995. 06. 07.
(C) Osztály: A16K38/00 (viii) A képviselő adatai:
(A) Név: Muthard, Dávid A.
(B) Regisztrálási szám: 35,297 (C) Aktaszám: 19253Y (ix) Telekommunikációs információk:
(A) Telefon: (908) 594-3903 (B) Telefax: (908)594-4720 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 1 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 462 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
HU 220 877 BI
Me t 1 Ly s Pro As n I 1 e 5 Ile Phe Va 1 Leu Ser 10 Le u Leu Leu I 1 e Leu 15 Glu
Ly s Gin Alá Al a Va 1 Me t Gly Gin Ly s Gly Gly Ser Ly s Gly Arg Leu
20 25 30
Pro Ser Glu Phe Ser Gin Phe Pro Hi s Gly Gin Ly s Gly Gin Hi s Tyr
35 40 45
Ser Gly Gin Ly s Gly Ly s Gin Gin Thr Glu Ser Ly s Gly Ser Phe Ser
50 55 60
Ile Gin Tyr Thr Tyr Hi s Val Asp Al a As n As p Hi s As p Gin Ser Arg
65 70 75 80
Ly s Ser Gin Gin Tyr As p Leu As n Al a Leu Hi s Ly s Thr Thr Ly s Ser
85 90 95
Gin Arg Hi s Leu Gly G1 y Ser G1 n Gin Leu Leu Hi s As n Ly s Gin Glu
100 105 110
Gly Arg As p Hi s As p Ly s Ser Ly s Gly Hi s Ph e Hi s Arg Va 1 Val Ile
115 120 125
Hi s Hi s Ly s Gly Gly Ly s Alá Hi s Arg Gly Thr Gin Asn Pro Ser Gin
130 135 140
Asp G1 n Gly Asn Ser Pro Ser Gly Ly s Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser
145 150 155 160
Asn Thr Glu Glu Arg Leu Trp Va 1 Hi s Gly Leu Ser Lys Glu Gin Thr
165 170 175
Ser Va 1 Ser Gly Al a Gin Ly s Gly Arg Ly s G1 n Gly Gly Ser G1 n Ser
180 185 190
Ser Tyr Va 1 Leu Gin Thr Glu Glu Leu Va 1 Al a Asn Ly s Gin Gin Arg
195 200 205
Glu Thr Ly s As n Ser Hi s Gin As n Ly s Gly Hi s Tyr Gin As n Val Va 1
210 215 220
Glu Va 1 Arg Glu Glu Hi s Ser Ser Ly s Va 1 G1 n Thr Ser Leu Cy s Pro
225 230 235 240
Al a Hi s Gin As p Ly s Leu Gin Hi s Gly Ser Ly s As p I le Phe Ser Thr
245 250 255
Gin As p Glu Leu Leu Va 1 Tyr As n Ly s As n Gin Hi s Gin Thr Ly s As n
260 265 270
Leu Asn Gin Asp Gin Gin Hi s Gly Arg Ly s Al a Asn Ly s Ile Ser Tyr
275 280 285
Gin Ser Ser Ser Thr Glu Glu Arg Arg Leu Hi s Tyr Gly Glu Asn Gly
290 295 300
Val Gin Ly s As p Va 1 Ser Gin Ser Ser Ile Tyr Ser Gin Thr Glu Glu
305 310 315 320
Ly s Al a Gin Gly Ly s Ser Gin Ly s Gin I 1 e Thr I le Pro Ser Gin Glu
325 330 335
Gin Glu Hi s Ser Gin Ly s Alá As n Ly s Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser
340 345 350
Thr Glu Glu Arg Arg Leu Hi s Tyr Gly Glu As n Gly Va 1 Gin Ly s Asp
355 360 365
Va 1 Ser G1 n Arg Ser I 1 e Tyr Ser Gin Thr G1 u Lys Leu Val Al a G1 y
370 375 380
Ly s Ser Gin Ile Gin Al a Pro Asn Pro Ly s G1 n Glu Pro Trp Hi s Gly
385 390 395 400
Glu Asn Al a Lys Gly Glu Ser Gly Gin Ser Thr As n Arg Glu Gin Asp
405 410 415
Leu Leu Ser Hi s Glu G1 n Lys Gly Arg Hi s Gin H i s Gly Ser Hi s Gly
420 425 430
Gly Leu Asp I 1 e Val Ile Ile Glu Gin Glu Asp Asp Ser As p Arg Hi s
435 440 445
Leu Al a Gin Hi s Le u Asn As n Asp Arg Asn Pro Leu Phe Thr
450 455 460
HU 220 877 BI (2) Információk a SEQ. ID. NO. 2 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 2:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 3 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 3:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 4 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 4:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val 1 5
Ser Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 5 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 5:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val 1 5
Ser Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 6 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 25 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris
Asn Thr Glu Glu Arg Leu 10 15
Thr Glu 10
Ser Gin Arg Ser Ile Tyr 10 15
Ser Gin Ser Ser Ile Tyr 10 15
HU 220 877 Bl (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 6:
Gly Arg Lys Ala Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 15 10 15
Glu Arg Arg Leu His Tyr Gly Glu Asn Gly
25 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 7 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 7:
Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 8 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 8:
Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 9 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 9:
Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 10 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
HU 220 877 Bl (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 10:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 11 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 11:
Ala Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 12 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 12:
Ala Ser Ala Gly Thr Pro Gly Ala 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 13 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 13:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 14 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 14:
Lys Ile Ser Tyr Gin Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 15 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú
Ser Thr 10
Ser Ser Thr Glu 10
HU 220 877 Bl (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptid (B) Elhelyezkedés: 12 (D) Egyéb információ: Xaa bármely természetes aminosav (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 15:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val Ser Gin Xaa Ser Ile Tyr 15 10 15
Ser Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 16 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 16:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 17 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 17:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 18 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 18:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 19 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem
HU 220 877 Bl (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 19:
Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 20 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 17 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 20:
Gin Leu Asp Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr His Gin 15 10 15
Ser Ser (2) Információk a SEQ. ID. NO. 21 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 21:
Asn Arg Ile Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 22 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa : peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 22:
Asn Lys Val Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 23 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 23:
Asn Lys Met Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5
HU 220 877 Bl (2) Információk a SEQ. ID. NO. 24 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 24:
Asn Lys Leu Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 25 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa : belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 25:
Asn Lys I le Thr Tyr Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 26 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 26:
Asn Lys I le Ser Phe Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 27 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 27:
Asn Lys I le Ser Trp Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 28 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem r Thr 10
HU 220 877 BI (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 28:
Asn Lys Ile Ser Tyr Asn Ser Ser Ser Thr 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 29 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 29:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Thr Ser Ser Thr 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 30 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 30:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 31 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 31:
Gin Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 32 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 32:
Asn Arg Ile Thr Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 33 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav
HU 220 877 Bl (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 33:
Asn Arg Ile Ser Phe Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 34 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 34:
Gin Lys Ile Ser Tyr Gin Thr Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 35 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 35:
Asn Arg Ile Ser Trp Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 36 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 36:
Asn Arg Ile Ser Tyr Gin Thr Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 37 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső r Thr 10 r Thr 10 r Thr 10 r Thr 10
HU 220 877 Bl (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 37:
Asn Lys Ile Thr Tyr Gin Thr Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 38 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzók:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 38:
Asn Lys Leu Ser Tyr Gin Thr Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 39 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 39:
Gin Lys Leu Ser Tyr Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 40 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 40:
Asn Arg Leu Ser Tyr Gin Thr Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 41 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 41:
Asn Lys Val Ser Phe Gin Ser Ser S 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 42 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzók:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú er Thr 10 r Thr 10 er Thr 10 r Thr 10 r Thr 10
HU 220 877 Bl (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 42:
Asn Arg Val Ser Trp Gin Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 43 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 43:
Gin Lys Val Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 44 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 44:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 45 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 45:
Gly Glu Gin Gly Val Gin Lys Asp Val 1 5
Ser Gin Thr G1u (2) Információk a SEQ. ID. NO. 46 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa; peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
Thr
Thr
Thr
Ser Gin Ser 10 r Ile Tyr 15
HU 220 877 Bl (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 46:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser Asn Thr Asp Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 47 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 47:
Gly Glu Asn Gly Leu Gin Lys Asp Val Ser Gin Ser Ser Ile Tyr 15 10 15
Ser Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 48 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 48:
Gly Glu Asn Gly Val Asn Lys Asp Val Ser Gin Ser Ser Ile Tyr 15 10 15
Ser Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 49 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 49:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Arg Asp Val Ser Gin Arg Ser Ile Tyr 15 10 15
Ser Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 50 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 50:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val Ser Gin Lys Ser Ile Tyr 15 10 15
Ser Gin Thr Glu
HU 220 877 Bl (2) Információk a SEQ. ID. NO. 51 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 51:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Leu 1 5
Ser Gin Thr G1u (2) Információk a SEQ. ID. NO. 52 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 52:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val 1 5
Ser Gin Thr G1u (2) Információk a SEQ. ID. NO. 53 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 53:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Met 1 5
Thr Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 54 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 54:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val 1 5
Thr Gin Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 55 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav
Ser Gin Thr Ser 10
I 1 e Tyr 15
Ser Gin Ser Ser 10
I1e Phe 15
Ser Gin Ser Ser 10
I 1 e Tyr 15
Ser Gin Arg Ser 10
I 1e Tyr 15
HU 220 877 Bl
Gin Ser Ser Ile Tyr (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 55:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val Ser 1 5 10
Ser Gin Ser Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 56 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 19 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 56:
Gly Glu Asn Gly Val Gin Lys Asp Val Ser 1 5 10
Ser Asn Thr Glu (2) Információk a SEQ. ID. NO. 57 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 57 :
Gly Lys Alá Ile Ser Ser Gin Tyr Ser Asn 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 58 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 58:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser Asn 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 59 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
Gin Arg Ser Ile Tyr 15
Thr Glu Glu Arg Leu 15
Ser Glu Glu Arg Leu 15
HU 220 877 BI (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 59:
Gly Arg Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser Asn Thr Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 60 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 60:
Gly Lys Gly Ile Thr Ser Gin Tyr Ser Asn Thr Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 61 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 61:
Gly Lys Gly Ile Ser Thr Gin Tyr Ser Asn Thr Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 62 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 62:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Asn Tyr Ser Asn Thr Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 63 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 63:
Alá Lys Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser Asn Thr Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 64 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú
HU 220 877 Β1 (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 64:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Gin Phe Ser Asn Thr Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 65 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők.· (A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 65:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Thr Asn Ser Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 66 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 15 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (ív) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 66:
Gly Lys Gly Ile Ser Ser Gin Tyr Ser Asn Ser Glu Glu Arg Leu 15 10 15 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 67 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 25 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 67:
Ser Gin Lys Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 15 10 15
Glu Arg Arg Leu His Tyr Gly Glu Asn Gly
20 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 68 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
HU 220 877 Bl (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 68:
Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 69 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 69:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 70 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 70:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 71 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 71:
Alá Asn Gly Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 72 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 72:
Alá Asn Pro Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 73 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú
Ser Thr Leu 10
Ser Thr Glu 10
Ser Thr Glu 10
HU 220 877 Bl (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 73:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Alá Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 74 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 74:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Lys Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 75 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 75:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 76 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptid (B) Elhelyezkedés: 5 (D) Egyéb információ: /jelölés=d-szerin /megjegyzés=„nem természetes aminosavkonfiguráció” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 76:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 77 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem
HU 220 877 Bl (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptid (B) Elhelyezkedés: 4 (D) Egyéb információ: /jelölés=d-izoleucin /megjegyzés=„nem természetes aminosavkonfiguráció” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 77:
Alá Asn Lys lle Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 78 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 78:
Alá Asn Lys lle Ser Tyr Gin Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 79 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 79:
Alá Asn Lys lle Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 80 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptid (B) Elhelyezkedés: 3 (D) Egyéb információ: /jelölés=d-lizin /megjegyzés=„nem természetes aminosavkonfiguráció” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 80:
Alá Asn Lys lle Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 81 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris
Ser Ser Thr Glu 10
Ser Gin Thr Glu 10
Alá Lys Thr Glu 10
HU 220 877 Bl (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 81:
Ala Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Thr 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 82 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 82:
Ala Asn Lys Ser Tyr Gin Ser Ser Thr 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 83 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 83:
Ala Asn Lys Ile Tyr Gin Ser Ser Thr 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 84 szekvenciához :
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 84:
Ala Asn Lys Ala Ser Tyr Gin Ser Ala 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 85 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 85:
Ala Asn Glu Ile Ser Tyr Gin Ser Ala 1 5
Glu
Glu
Glu
Ser Thr Glu 10
Ser Thr Glu 10
HU 220 877 Bl (2) Információk a SEQ. ID. NO. 86 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 86:
Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 87 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 87:
Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 88 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 88:
Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 89 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 89:
Alá Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 90 szekvenciához :
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem
HU 220 877 Bl (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 90:
Glu Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 91 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 91:
Ala Asn Glu Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 92 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 92:
Ala Asn Lys Ile Ser Tyr Tyr Ser Ser Ser 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 93 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 93:
Ala Asn Lys Ile Ser Tyr Tyr Ser Ala Ser 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 94 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők·.
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 94:
Ala Ser Tyr Gin Ser Ser Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 95 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav
Thr Glu
Thr Glu
Thr Glu
HU 220 877 Bl (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 95:
Alá Asn Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 96 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 96:
Alá Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 97 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 97:
Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 98 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa : belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 98:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser Alá Ser Cys 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 99 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 5 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
HU 220 877 Bl (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 99:
Gin Ser Ser Thr Glu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 100 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 100:
Tyr Gin Ser Ser Thr Glu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 101 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 101:
Ser Gin Ser Ser Thr Glu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 102 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 102:
Ala Asn Lys Ile Ser Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 103 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 3 (D) Egyéb információ: /jelölés=nem természetes /megjegyzés=„omitin (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 103:
Ala Asn Xaa Ile Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 10
HU 220 877 Β1 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 104 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 2 (D) Egyéb információ: /jelölés=nem természetes /megjegyzés=„3,4-diklór-fenil-alanin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 104:
Ser Xaa Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 105 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (ix) Tulajdonság:
(A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 2 (D) Egyéb információ: /jelölés=nem természetes /megjegyzés=„(3-piridil)-fenil-alanin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 105:
Ser Xaa Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 106 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 106:
Ser Lys Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 107 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 107:
Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Leu
5
HU 220 877 BI (2) Információk a SEQ. ID. NO. 108 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 1 (D) Egyéb információ: /jelölés=nem természetes /megjegyzés=„epszilon-amino-kapronsav” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 108:
Xaa Tyr Gin Ser Ser Ser Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 109 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 4 (D) Egyéb információ: /jelölés=nem természetes /megjegyzés=„N-metil-izoleucin” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 109:
Alá Asn Lys Xaa Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 110 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 110:
Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 111 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 111:
Tyr Gin Ser Ser Thr Glu
5
HU 220 877 Bl (2) Információk a SEQ. ID. NO. 112 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 112:
Ser Tyr Lys Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 113 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 113:
Ser Tyr Tyr Ser Ser Thr Glu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 114 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 114:
Ser Tyr Gin Ser Ser Leu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 115 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 115:
Ser Tyr Gin Ser Ser Leu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 116 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem
HU 220 877 Bl (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 4 (D) Egyéb információ: /jelölés=nem természetes /megjegyzés=„2,3-diamino-propionsav” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 116:
Xaa Tyr Gin Ser Ser Ser Leu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 117 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 117:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 118 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 12 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 118:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser Alá 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 119 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 119:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser Alá 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 120 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 120:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser Ser
5
Ser Thr 10
Ser Thr Leu 10
Ser Leu 10
Ser Leu 10
HU 220 877 Β1 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 121 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 10 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 121:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser Ser Leu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 122 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 7 (D) Egyéb információ: /jelölés=d-leucin /megjegyzés=„nem természetes aminosavkonfiguráció” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 122:
Ser Tyr Gin Ser Ser Thr Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 123 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 11 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 123:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Alá Ser Ser Ser Leu 1 5 10 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 124 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 124:
Lys Tyr Gin Ser Ser Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 125 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav
HU 220 877 Bl (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz : nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 125:
Ser Tyr Gin Ser Ser Lys Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 126 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 7 (D) Egyéb információ: /jelölés=d-leucin /megjegyzés=„nem természetes aminosavkonfiguráció” (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 126:
Ser Tyr Gin Ser Ser Lys Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 127 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 127:
Asn Lys Ile Ser Tyr Tyr Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 128 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 128:
Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 129 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 5 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem
HU 220 877 Bl (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 129:
Ser Tyr Gin Ser Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 130 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 130:
Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Alá 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 131 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 131:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Tyr Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 132 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 8 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 132:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 133 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ, ID. NO. 133:
Ser Tyr Gin Ser Ser Thr 1 5
HU 220 877 Bl (2) Információk a SEQ. ID. NO. 134 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 134:
Ser Tyr Gin Ser Ser Leu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 135 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 135:
Ser Tyr Gin Ser Ser Leu
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 136 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 136:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Gin Ser Alá 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 137 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 137:
Alá Asn Lys Ile Ser Tyr Tyr Ser Ser 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 138 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem
HU 220 877 Bl (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 138:
Alá Asn Lys lle Ser Tyr Tyr Ser Alá 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 139 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 9 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 139:
Alá Asn Lys Alá Ser Tyr Gin Ser Alá 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 140 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 5 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 140:
Lys Tyr Gin Ser Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 141 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 5 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 1 (D) Egyéb információ: /jelölés=homoarginin (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 141:
Xaa Tyr Gin Ser Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 142 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
HU 220 877 Bl (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 142:
Lys Tyr Gin Ser Ser Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 143 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 6 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 1 (D) Egyéb információ: /jelölés=homoarginin (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 143:
Xaa Tyr Gin Ser Ser Ser
5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 144 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 144:
Ser Tyr Gin Ser Ser Ser Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 145 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 1 (D) Egyéb információ: /jelölés=homoarginin (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 145:
Xaa Tyr Gin Ser Ser Ser Leu 1 5 (2) Információk a SEQ. ID. NO. 146 szekvenciához:
(i) Szekvenciajellemzők:
(A) Hossz: 7 aminosav (B) Típus: aminosav (C) Szálszám: egyszálú (D) Topológia: lineáris (ii) Molekula típusa: peptid (iii) Hipotetikus: nem (iv) Antiszensz: nem (v) Fragmens típusa: belső
HU 220 877 Bl (A) Név/kulcs: peptide (B) Elhelyezkedés: 7 (D) Egyéb információ: /jelölés=norleucin (xi) Szekvencia leírása: SEQ. ID. NO. 146:
Lys Tyr Gin Ser Ser Ser Leu

Claims (1)

1. Oligopeptid, amely a következő aminosavszekvenciák valamelyikét tartalmazza:
a) AsnLysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 13),
b) LysIleSerTyrGln|Ser (SEQ. ID. NO. 14),
c) GlyGluAsnGlyValGlnLysAspValSerGlnXaaSerlleTyr|SerGlnThrGlu (SEQ. ID. NO. 15),
d) GlyLysGlylleSerSerGlnTyr|SerAsnThrGluGlu10
f) AlaAsnLysIleSerTyrTyrjSerSer (SEQ. ID. NO. 137),
g) AlaAsnLysIleSerTyrTyr|SerAla (SEQ. ID. NO. 138),
h) AlaAsnLysAlaSerTyrGln|SerAla (SEQ. ID.NO. 139),
i) AlaSerTyrGln|SerSerLeu (SEQ. ID. NO. 94).
4. Az 1. igénypont szerinti oligopeptid, amely a következő aminosavszekvenciát tartalmazza:
HU9603564A 1994-06-28 1995-06-07 Novel olygopeptides, diagnostic methods for use thereof and conjugates for treatment of prostata cancer HU220877B1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/267,092 US5599686A (en) 1994-06-28 1994-06-28 Peptides
US40483395A 1995-03-15 1995-03-15
PCT/US1995/008156 WO1996000503A1 (en) 1994-06-28 1995-06-07 Novel peptides

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9603564D0 HU9603564D0 (en) 1997-02-28
HUT76350A HUT76350A (en) 1997-08-28
HU220877B1 true HU220877B1 (en) 2002-06-29

Family

ID=26952210

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9603564A HU220877B1 (en) 1994-06-28 1995-06-07 Novel olygopeptides, diagnostic methods for use thereof and conjugates for treatment of prostata cancer

Country Status (27)

Country Link
US (1) US6143864A (hu)
EP (1) EP0771209B1 (hu)
JP (1) JPH10502619A (hu)
KR (1) KR100379351B1 (hu)
CN (1) CN1156964A (hu)
AT (1) ATE223224T1 (hu)
AU (1) AU689934B2 (hu)
BG (1) BG63453B1 (hu)
BR (1) BR9508151A (hu)
CA (1) CA2192957A1 (hu)
CZ (1) CZ381096A3 (hu)
DE (1) DE69528064T2 (hu)
DK (1) DK0771209T3 (hu)
ES (1) ES2182908T3 (hu)
FI (1) FI965225A (hu)
HK (1) HK1009038A1 (hu)
HU (1) HU220877B1 (hu)
MX (1) MX9700043A (hu)
NO (1) NO965592L (hu)
NZ (1) NZ290239A (hu)
PL (1) PL186341B1 (hu)
PT (1) PT771209E (hu)
RO (1) RO116198B1 (hu)
RU (1) RU2162855C2 (hu)
SK (1) SK164096A3 (hu)
UA (1) UA55371C2 (hu)
WO (1) WO1996000503A1 (hu)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5502037A (en) * 1993-07-09 1996-03-26 Neuromed Technologies, Inc. Pro-cytotoxic drug conjugates for anticancer therapy
US5866679A (en) * 1994-06-28 1999-02-02 Merck & Co., Inc. Peptides
DK0769967T3 (da) * 1994-08-19 2008-03-31 Wallone Region Konjugater der omfatter et antitumormiddel, og anvendelse heraf
WO1997014416A1 (en) * 1995-10-18 1997-04-24 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of benign prostatic hyperplasia
US5952294A (en) * 1996-07-31 1999-09-14 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Peptidyl prodrugs and methods of making and using the same
US5998362A (en) * 1996-09-12 1999-12-07 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US6177404B1 (en) 1996-10-15 2001-01-23 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of benign prostatic hyperplasia
HRP970566A2 (en) * 1996-10-30 1998-08-31 Jones Deborah Defeo Conjugates useful in the treatment of prostate canser
US5948750A (en) * 1996-10-30 1999-09-07 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
DE69729389D1 (de) * 1996-11-06 2004-07-08 Nasa Protease-aktivierbare pseudomonas exotoxin-a-ähnliche proproteine
AU7582298A (en) 1997-05-19 1998-12-11 Johns Hopkins University School Of Medicine, The Tissue specific prodrug
US6504014B1 (en) 1997-05-19 2003-01-07 The John Hopkins University Tissue specific prodrug
US6545131B1 (en) 1997-05-19 2003-04-08 The Johns Hopkins University Tissue specific prodrug
US6391305B1 (en) * 1997-09-10 2002-05-21 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
KR100580137B1 (ko) * 1997-12-02 2006-05-16 머크 앤드 캄파니 인코포레이티드 전립선 암 치료에 유용한 접합체 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
EP1069906A1 (en) * 1998-03-05 2001-01-24 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostrate cancer
US6174858B1 (en) 1998-11-17 2001-01-16 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US7425541B2 (en) 1998-12-11 2008-09-16 Medarex, Inc. Enzyme-cleavable prodrug compounds
US6649587B1 (en) 1999-04-30 2003-11-18 Slil Biomedical Corporation Polyamine analog conjugates and quinone conjugates as therapies for cancers and prostate diseases
US6482943B1 (en) 1999-04-30 2002-11-19 Slil Biomedical Corporation Quinones as disease therapies
AU4678300A (en) * 1999-04-30 2000-11-17 Slil Biomedical Corporation Novel polyamine analog conjugates and quinone conjugates as therapies for cancers and prostate diseases
DE60032784T2 (de) * 1999-10-07 2007-11-08 Ciphergen Biosystems, Inc., Fremont Markerproteine für prostatakrebs
GB9924759D0 (en) 1999-10-19 1999-12-22 Merck Sharp & Dohme Process for preparing peptide intermediates
PL360826A1 (en) 2000-03-15 2004-09-20 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Peptidase-cleavable, targeted antineoplastic drugs and their therapeutic use
AU2001266853B2 (en) 2000-06-14 2005-02-17 Medarex, Inc. Prodrug compounds with an oligopeptide having an isoleucine residue
EP1219634A1 (en) * 2000-12-27 2002-07-03 Bayer Aktiengesellschaft Cytostatic-glycoconjugates having specifically cleavable peptidic linking units
WO2002081630A2 (en) * 2001-04-06 2002-10-17 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Use of semenogelin in the diagnosis, prognosis and treatment of cancer
DK1567641T3 (da) * 2001-08-24 2012-08-27 Uvic Industry Partnerships Inc Proaerolysin indeholdende proteaseaktiveringssekvenser og fremgangsmåder til anvendelse til behandling af prostatacancer.
WO2003046180A2 (en) * 2001-11-28 2003-06-05 Genset S.A. Human cdnas and proteins and uses thereof
US7108976B2 (en) * 2002-06-17 2006-09-19 Affymetrix, Inc. Complexity management of genomic DNA by locus specific amplification
CA2503730C (en) * 2002-10-31 2011-10-18 Metabasis Therapeutics, Inc. Cytarabine monophosphate prodrugs
WO2005041981A1 (en) * 2003-10-31 2005-05-12 Kurume University Combination therapy of peptide vaccination and estramustine treatment
DE602006020867D1 (de) 2005-06-14 2011-05-05 Protox Therapeutics Inc Verfahren zur behandlung oder prävention gutartiger prostatahyperplasie unter verwendung modifizierter porenbildender proteine
JP5278873B2 (ja) * 2008-05-14 2013-09-04 国立大学法人九州工業大学 癌診断用試薬
US9046529B2 (en) 2009-04-10 2015-06-02 The Regents Of The University Of California Prostatitis-associated antigens and methods of use thereof
KR20110069618A (ko) * 2009-12-17 2011-06-23 주식회사 셀앤바이오 전립선암 진단용 키트 및 진단방법
CN106061984A (zh) 2014-02-13 2016-10-26 配体药物公司 前药化合物及其用途
EP3164136A4 (en) 2014-07-02 2018-04-04 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and uses therof
CA3087932A1 (en) 2018-01-09 2019-07-18 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Acetal compounds and therapeutic uses thereof

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4296105A (en) * 1978-08-03 1981-10-20 Institut International De Pathologie Cellulaire Et Moleculaire Derivatives of doxorubicine, their preparation and use
US4277466A (en) * 1978-08-29 1981-07-07 Institut International De Pathologie Cellulaire Et Moleculaire Complexes of DNA and esters derived from daunorubicine, their preparation and use
US4446122A (en) * 1979-12-28 1984-05-01 Research Corporation Purified human prostate antigen
OA06421A (fr) * 1980-06-10 1981-09-30 Omnium Chimique Sa Procédé de préparation de dérivés N-(vinblastinoyl-23) d'acides aminés et de peptides.
HUT34212A (en) * 1983-04-29 1985-02-28 Omnichem Sa Process for the production of new vindblastin conjugates
FR2546163B1 (fr) * 1983-05-16 1987-10-09 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives acyles hydrosolubles de peptides ou d'amino-acides, leur preparation et leur application
EP0126344A2 (en) * 1983-05-20 1984-11-28 Abbott Laboratories Tripeptide esters of therapeutic agents
FR2583983B1 (fr) * 1985-06-07 1988-05-27 Centre Nat Rech Scient Nouvelles prodrogues macromoleculaires hydrosolubles, leur preparation et leur utilisation comme medicaments notamment antitumoraux et antiparasitaires
EP0232693A3 (fr) * 1985-12-16 1988-04-06 La Region Wallonne Conjugués de la vinblastine et de ses dérivés, procédé pour leur préparation et compositions pharmaceutiques les contenant
FR2626882B1 (fr) * 1988-02-08 1991-11-08 Ire Celltarg Sa Conjugues de derives de vinca comportant une chaine detergente en position c-3
US5391723A (en) * 1989-05-31 1995-02-21 Neorx Corporation Oligonucleotide conjugates
US5220001A (en) * 1989-10-25 1993-06-15 Zaidan Hojim Biseibutsu Dong-A Pharm Co. Anthracycline glycoside derivatives
US5137877B1 (en) * 1990-05-14 1996-01-30 Bristol Myers Squibb Co Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production
SE9002480D0 (sv) * 1990-07-23 1990-07-23 Hans Lilja Assay of free and complexed prostate-specific antigen
FR2678274A1 (fr) * 1991-06-25 1992-12-31 Medgenix Group Sa N-leucyl epirubicine application a titre de medicament antitumoral et procede de preparation.
US5288612A (en) * 1991-07-03 1994-02-22 The Scripps Research Institute Assay methods for detecting serum proteases, particularly activated protein C
US5622929A (en) * 1992-01-23 1997-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Thioether conjugates
DE4233152A1 (de) * 1992-10-02 1994-04-07 Behringwerke Ag Antikörper-Enzym-Konjugate zur Prodrug-Aktivierung
JPH08502889A (ja) * 1992-10-29 1996-04-02 トーマス・ジェファーソン・ユニバーシティ 前立腺癌の微小転移を検出する方法
AU6364094A (en) * 1993-03-12 1994-09-26 Board Of Regents, The University Of Texas System Anthracyclines with unusually high activity against cells resistant to doxorubicin and its analogs
EP0804593A1 (en) * 1994-05-10 1997-11-05 Mayo Foundation For Medical Education And Research Recombinant hk2 polypeptide
US5866679A (en) * 1994-06-28 1999-02-02 Merck & Co., Inc. Peptides
US5599686A (en) * 1994-06-28 1997-02-04 Merck & Co., Inc. Peptides
DK0769967T3 (da) * 1994-08-19 2008-03-31 Wallone Region Konjugater der omfatter et antitumormiddel, og anvendelse heraf
AUPM769394A0 (en) * 1994-08-25 1994-09-15 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Assay for the detection of proteases

Also Published As

Publication number Publication date
EP0771209A4 (en) 2000-04-26
PT771209E (pt) 2002-12-31
JPH10502619A (ja) 1998-03-10
US6143864A (en) 2000-11-07
HU9603564D0 (en) 1997-02-28
NO965592D0 (no) 1996-12-27
NO965592L (no) 1997-02-28
KR970703780A (ko) 1997-08-09
ATE223224T1 (de) 2002-09-15
ES2182908T3 (es) 2003-03-16
WO1996000503A1 (en) 1996-01-11
AU689934B2 (en) 1998-04-09
BG63453B1 (bg) 2002-02-28
AU3092295A (en) 1996-01-25
PL317872A1 (en) 1997-04-28
MX9700043A (es) 1997-04-30
EP0771209A2 (en) 1997-05-07
NZ290239A (en) 1998-11-25
DE69528064D1 (de) 2002-10-10
HK1009038A1 (en) 1999-07-02
KR100379351B1 (ko) 2003-10-30
FI965225A (fi) 1997-02-26
HUT76350A (en) 1997-08-28
CA2192957A1 (en) 1996-01-11
BR9508151A (pt) 1999-03-30
RO116198B1 (ro) 2000-11-30
RU2162855C2 (ru) 2001-02-10
SK164096A3 (en) 1997-06-04
FI965225A0 (fi) 1996-12-27
EP0771209B1 (en) 2002-09-04
UA55371C2 (uk) 2003-04-15
DK0771209T3 (da) 2002-10-07
DE69528064T2 (de) 2003-08-07
CZ381096A3 (en) 1997-04-16
CN1156964A (zh) 1997-08-13
PL186341B1 (pl) 2003-12-31
BG101077A (en) 1998-02-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0771209B1 (en) Novel peptides
US5866679A (en) Peptides
US5599686A (en) Peptides
US5948750A (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US6177404B1 (en) Conjugates useful in the treatment of benign prostatic hyperplasia
AU715632B2 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US6391305B1 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
AU726434B2 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US5998362A (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
AU708475B2 (en) Conjugates useful in the treatment of benign prostatic hyperplasia
US20030232760A1 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US20020115596A1 (en) Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
AU714288B2 (en) Novel peptides
CA2234763A1 (en) Conjugates useful in the treatment of benign prostatic hyperplasia

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee