HU214600B - Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására - Google Patents

Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU214600B
HU214600B HU9503736A HU9503736A HU214600B HU 214600 B HU214600 B HU 214600B HU 9503736 A HU9503736 A HU 9503736A HU 9503736 A HU9503736 A HU 9503736A HU 214600 B HU214600 B HU 214600B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
acid
trans
formula
compounds
racemic
Prior art date
Application number
HU9503736A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9503736D0 (en
HUT76555A (en
Inventor
Csaba Szántay
Anikó Gere
dr. Paróczai Margit Pellioniszné
István Moldvai
Sándor Farkas
Ferenc Auth
Béla Kiss
János Kreidl
Egon Kárpáti
Erzsébet Lapis
Ádám Sarkadi
András Szekeres
Balázs Mária Zájerné
László Czibula
Jenőné Farkas
Mária Incze
András Vedres
Juhász Ida Deutschné
Original Assignee
Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt. filed Critical Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt.
Priority to HU9503736A priority Critical patent/HU214600B/hu
Publication of HU9503736D0 publication Critical patent/HU9503736D0/hu
Priority to IL12409796A priority patent/IL124097A/en
Priority to AU11669/97A priority patent/AU1166997A/en
Priority to PL96328170A priority patent/PL186626B1/pl
Priority to PCT/HU1996/000075 priority patent/WO1997023481A1/en
Priority to PT96942534T priority patent/PT876367E/pt
Priority to RU98113854/04A priority patent/RU2161157C2/ru
Priority to KR1019980704700A priority patent/KR19990076606A/ko
Priority to EP96942534A priority patent/EP0876367B1/en
Priority to JP09523441A priority patent/JP2000502676A/ja
Priority to DE69623656T priority patent/DE69623656T2/de
Priority to CN96199131A priority patent/CN1072670C/zh
Priority to CZ19981962A priority patent/CZ290383B6/cs
Priority to DK96942534T priority patent/DK0876367T3/da
Priority to UA98052781A priority patent/UA61062C2/uk
Priority to US09/091,260 priority patent/US6093720A/en
Priority to ES96942534T priority patent/ES2181926T3/es
Priority to CA002238635A priority patent/CA2238635A1/en
Priority to AT96942534T priority patent/ATE223914T1/de
Priority to SI9630526T priority patent/SI0876367T1/xx
Priority to TW085115515A priority patent/TW366348B/zh
Priority to ZA9610646A priority patent/ZA9610646B/xx
Priority to ARP960105829A priority patent/AR005182A1/es
Publication of HUT76555A publication Critical patent/HUT76555A/hu
Publication of HU214600B publication Critical patent/HU214600B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D461/00—Heterocyclic compounds containing indolo [3,2,1-d,e] pyrido [3,2,1,j] [1,5]-naphthyridine ring systems, e.g. vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Abstract

A találmány tárgya (I) általánős képletű új racém és őptikailag aktívtransz-apővinkaminsav-észter-származékők ahől a képletben R jelentése hidrőgénatőm, vagy Z–C=O általánős képletű csőpőrt, ahől Zjelentése 1–4 szénatőmős alkilcsőpőrt; adőtt esetben nitrőcsőpőrttal,1–4 szénatőmős alkőxicsőpőrttal vagy halőgénatőmm l szűbsztitűáltfenilcsőpőrt; öt- vagy hattagú, egy nitrőgén- vagy kénatőmőttartalmazó arőmás heterőciklűsős csőpőrt; vagy 14-ebűrnameninilcsőpőrt; n jelentése egész szám, melynek értéke 2–4 lehet– és gyógyászatilag alkalmazható sóik. A találmány szerinti új (I)általánős képletű apővinkaminsav-észter-származékők főkéntantiőxidáns, antiiszkémiás, valamint antiamnéziás hatássalrendelkeznek. ŕ

Description

A találmány tárgya I általános képletű új racém és optikailag aktív transz-apovinkaminsav-észter-származékok és gyógyászatilag alkalmazható sóik
- ahol a képletben
R jelentése hidrogénatom, vagy Z-C=O általános képletű csoport, ahol Z jelentése 1—4 atomos alkilcsoport, adott esetben nitrocsoporttal, 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált fenilcsoport; öt- vagy hattagú, egy nitrogén- vagy kénatomot tartalmazó aromás heterociklusos csoport; vagy 14-ebumameninilcsoport;
n jelentése egész szám, melynek értéke 2-4 lehet - valamint eljárás ezek előállítására oly módon, hogy valamely II általános képletű racém vagy optikailag aktív transz-apovinkaminsav-észter-származékot - ahol R] jelentése metil- vagy etilcsoport - valamilyen megfelelő glikolban, bázis katalizátor jelenlétében átészterezzük, és !
kívánt esetben, az R helyén Z-C=O általános képletű vegyületek előállítása esetén a kapott, R helyén hidrogénatomot tartalmazó vegyületet acilezzük, és kívánt esetben a kapott I általános képletű vegyületeket gyógyászatilag alkalmazható sókká alakítjuk.
A találmány szerinti vegyületek újak és jelentős biológiai aktivitással, nevezetesen főként antioxidáns, antiiszkémiás és antiamnéziás hatással rendelkeznek, így a találmány oltalmi körébe tartoznak az I általános képletű vegyületeket vagy sóikat hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények, valamint ezek előállítási eljárása is.
Az I általános képletben R jelentésében Z 1-4 szénatomos alkilcsoportként egyenes vagy elágazó láncú csoportokat, így például metil-, etil-, η-propil-, i-propil-, η-butil-, szek-butil-, terc-butil-, i-butil- stb. csoportokat jelenthet, az öt- vagy hattagú, egy nitrogén- vagy kénatomot tartalmazó aromás heterociklusos csoport például tienil, piridilcsoport lehet.
A találmány szerinti I általános képletű vegyületek gyógyászatilag alkalmazható sói savaddiciós és kvaterner sók lehetnek.
A II általános képletű kiindulási apovinkaminsavszármazékokat a GB 2 124 214 számú szabadalmi leírásban ismertettek szerint valamilyen megfelelő hidroxiimino-oktahidro-indolo[2,3-a]kinolizin-szárma zék savas kezelésével állíthatjuk.
Az irodalomból ismerünk a találmány szerinti I általános képletű vegyületekhez szerkezetileg hasonló vegyületeket. A 186 891 számú magyar szabadalmi leírás transz apovinkaminsav-észtereket ismertet, gyulladásgátló, antikonvulziv, antiparkinson és aetherosclerosis ellenes hatással. A 187733 számú magyar szabadalmi leírás az oldalláncban eltérő apovinkaminsav-származékokat ismertet, antihipoxiás, illetve értágító hatással.
Az irodalomból ismert fenti vegyületektől eltérően, a találmány szerint új transz apovinkaminsav-származékok jelentős antioxidáns, antiiszkémiás és antiamnéziás hatással rendelkeznek.
A vérkeringés folyamatos fenntartása feltétlenül szükséges a központi idegrendszer normális működéséhez. Ez biztosítja az agyszövet rendkívüli glükóz- és oxigénigényének megfelelő mértékű ellátását.
Iszkémia és reperfüzió következtében a kognitív fúnkciók károsodnak. Az iszkémia súlyosságától és időtartalmától függően reverzibilis, illetve irreverzíbilis károsodások jöhetnek létre. A neuronális sejtmembrán szerkezetének és fúnkciójának károsodása az idegsejt elhalásához vezethet.
Iszkémia következtében számos patológiás folyamatjöhet létre, ezek közé tartozik a szabadgyökök képződése. A szabadgyökképződés a telítetlen zsírsavak amelyek a membránok fontos alkotórészei - oxidációjához (lipidperoxidációhoz) vezet. Ez egy alacsony specifitású, sejtpusztító folyamat, amely megváltoztatja vagy megrongálja a biomolekulákat. A sejtek, szervek vagy az egész szervezet különböző szintű fúnkciói károsodhatnak.
A szabadgyök-reakciók valószínűleg oki szerepet játszanak az iszkémia által okozott olyan károsodások patogenezisében, mint az iszkémiás bélbetegségek, miokardiális iszkémia, hemorrágiás sokk, iszkémiás eredetű cerebrovaszkuláris funkciózavarok, a máj iszkémiás károsodása, renáloi iszkémia, stb.
Az antioxidáns vegyületek lipidperoxidációt gátló hatásuk következtében védelmet nyújthatnak a szabadgyökök okozta károsodások ellen iszkémiás körülmények között, ezért az antioxidánsok mint antiiszkémiás vegyületek felhasználhatók ilyen kórképek kezelésében.
A vegyületek antioxidáns hatását a következő in vitro vizsgálatokkal igazoltuk.
1. NADPH-indukált lipidperoxidáció agy mikroszómában:
J. M. Braughler; J. F. Pregenzer, R. L. Chase; L. A. Duncan; E. J. Jacobsen; J. M. McCall: Növel 21-Amino Steroids as Potent Inhibitors of Iron-dependent Lipid Peroxidation.
J. Bioi. Chem. 262:10438-10440. (1987).
T. J. Player; A. A. Horton: Enzymic Lipid Peroxidation in the Microsomal Fraction of Rat Brain.
J. Neurochem. 37:422-426. (1981).
A mikroszóma preparálásához 150-250 g-os hím Hannover-Wistar patkányokat használtunk. A patkányok dekapitálása után a teljes agyat eltávolítottuk és tízszeres térfogatú, jéghideg 0,25 M-os szaharóz oldatban homogenizáltuk. A homogenátumot 15000 g-vel 10 percig +4 °C-on centrifúgáltuk Hitachi CR 26H centrifúgán, majd a felülúszót összegyűjtöttük és 78000 gvel 60 percig +4 °C-on centrifúgáltuk Hitachi SCP 85H centrifugán. A csapadékot 0,15 M-os KC1 oldatban szuszpendáltuk. Ezután meghatároztuk az oldat fehérjetartalmát, amelyet 10 mg/ml-re állítottunk be. Az ily módon előállított mikroszómát szárazjég-acetonban lefagyasztottuk, majd felhasználásig -70 °C-on tároltuk.
Az inkubációs elegy összetétele a következő volt: 50 mM TRIS-HC1, pH: 6,8; 0,2 mM FeCl3; 1 mM KH2PO4; 0,5 mM ADP; 0,2 mg mikroszóma, valamint a vizsgálandó vegyületek. Az inkubációs végtérfogat 1 ml, az inkubációs idő 20 perc, az inkubációs hőmérséklet 37 °C volt. A lipidperoxidációt 0,4 mM NADPH
HU 214 600 Β adásával indukáltuk. (A vak minták nem tartalmaztak NADPH-t). A reakció leállítását 0,375 ml leállító oldattal végeztük, melynek összetétele a következő: 40% triklórecetsav: 5 M HC1=2:1.
A malondialdehid-képződést tiobarbitursav segítségével határoztuk meg. A reakció leállítása után a mintákhoz 1 ml 1%-os tiobarbitursavat mértünk és 10 percre kb. 100 °C-os vízfürdőbe tettük. Ezután a mintákat 2000 g-vel, 10 percig, +4 °C-on centrifugáltuk Janetzki K70 centrifugán. A színes felülúszó abszorbanciaértékeit 535 nm-en, Hitachi 150-20 spektrofotométeren mértük meg. Standardként malondialdehid-bisz-dietil-acetált használtunk.
2. Fe2-indukált lipidperoxidáció agy homogenátumban:
150-220 g-os Hannover-Wistar patkányokat dekapitáltunk, majd a teljes agyat kilencszeres térfogatú, jéghideg Krebs-Ringer pufferben (melyben összetétele a következő: 15 mM HEPES, pH: 7,4; 140 mM NaCl; 3,6 mM KC1; 1,5 mM CaCl2; 0,7 mM MgCl2; 1,4 mM KH2PO4; 10 mM glukóz) homogenizáltuk. Ezután meghatároztuk az oldat fehérjetartalmát, amelyet 10 mg/ml-re állítottunk be.
A gátlószereket 5 μΐ térfogatban adtuk a 200 μΐ homogenátumhoz, majd az így kapott inkubációs elegyet 37 °C-on 20 percig inkubáltuk. A Fe2+-indukált lipidperoxidációt 5 μΐ 8 mM Fe2(NH4)2(SO4)2 oldat adásával hoztuk létre. Az inkubációs idő letelte után a reakciót 1 ml leállító oldat (melynek összetétele a következő: 0,8 M HCl; 12,5% triklórecetsav) adásával állítottuk le, majd a mintákat 2000 g-vel 10 percig, +4 °C-on centrifugáltuk Janetzki K70 centrifügán.
A felülúszó 0,5 ml-es részletéhez 1 ml 1%-os tiobarbitursav oldatot adtunk és a mintákat 20 percre, 100 °C-os vízfürdőbe helyeztük. A kialakult színintenzitást 535 nm-en határoztuk meg Hitachi 150-20 spektrofotométeren. Standardként malondialdehid-biszdietil-acetált használtunk.
A vegyületek koncentráció-hatás összefüggésének vizsgálata alapján meghatároztuk a vegyületek IC50 értékeit (50%-os gátló konc.), melyet az 1. táblázatban tüntettünk fel mindkét módszer esetében.
Rövidítések:
- NADPH: β-Nikotin-amid-adenin-dinukleotid-foszfát, redukált
- TRIS: Trisz(hidroxi-metil)amino-metán
- ADP: Adenozin-5-difoszfát
- idebenone: 6-(10-hidroxi-decil)-2,3-dimetoxi-5-metil-1,4-benzokinon
- DL-a-tocopherol: [2,5,7,8-tetrametil-2-(4·,8.,12.-trimetil-tridecil)-6-kromanol
- ellagin sav: 2,3,7,8-Tetrahidroxil[l]benzopirano[5,4,3-cde] [ 1 ]benzopirán-5,10-dion
- silymarin: a következő három különböző fenilkromanon szerkezetű izomer keveréke: silibinin + silidianin + silikrisztin (Martin Negver: Organic-chemical drugs and their synonims, Volume III p. 2345)
- AEJ: enzimatikusan indukált (NADPH) lipidperoxidációs teszt
- ANI: nem-enzimatikusan indukált (Fe2+) lipidperoxidációs teszt
1. táblázat
Vegyület jele példa AEI (IC50 μΜ) ANI (IC50mM)
2705279 2 6,3 4,8
1010885 1 9,7 15,5
1010962 8 7,5 5,7
1010960 6 7,4 5,7
1010961 7 5,9 5,3
1011005 9 10,3 11,9
2705283 3 11,2 6,8
2705284 4 20,4 6,8
1011008 10 6,0 21,2
1010887 13 12,6 7,2
1010886 18 7,6 7,7
1011038 16 8,4 8,7
1011036 14 7,7 9,3
1011037 13 3,2 11,4
1011047 17 5,9 16,1
Idebenon 1,2 18,9
E-vitamin 406,3 12,1
Slymarin 191,0 54,9
Az 1. táblázat adataiból látható, hogy a különböző példák szerint előállított vegyületek mindegyike rendelkezik antioxidáns (lipidperoxidációt gátló) aktivitással.
Az antioxidáns hatás vizsgálatát egy enzimatikus (NADPH indukált lipidperoxidáciő) és egy nemenzimatikus (Fe2 indukált lipidperoxidáciő) módon kiváltott lipidperoxidációs teszten végeztük el. A vegyületek antioxidáns aktivitásának nagyságát az IC50 értékkel jellemeztük. Referenciavegyületeink a következő antioxidánsok voltak: cerebroprotektív idebenon, természetes antioxidáns E-vitamin (DL-a-tocopherol) és a hepatoprotektív hatású silymarin.
Az 1. táblázat adatai szerint a vizsgált molekulák a referenciavegyületeknél jóval hatékonyabban gátolják a NADPH-val (enzimatikus módon) indukált lipidperoxidációt, ugyanis IC5o értékei jóval kisebbek, mint a DL-a-tocopherol és a silymarin IC50 értékei. Az igen hatékonynak mutatkozó vegyületek a következők voltak: 2705279, 1011085, 1011087, 1010961,
1011008, 1011037, 1011047, 1011049 és a 1011070 jelű molekulák, ugyanis ezen vegyületek antioxidáns aktivitása megközelíti az idebenon hatékonyságát. Ezen kívül a következő vegyületek bizonyultak jelentős hatásúnak: 1011086, 1010885, 1010962, 1010960, 1011005, 1010887, 1010886, 1011038, 1011036, 1011009, 1011010, 2705283 és 1011035 jelű vegyületek, ugyanis ezen molekulák a silymarinnál mintegy 20-szor erősebben gátolják a NADPH-val kiváltott lipidperoxidációt. Emellett számottevő lipidperoxidáció gátló hatással rendelkező vegyületek a 2705284,
HU 214 600 Β
1011007, 1011034, 1011071 és a 1011033 jelű vegyületek.
Az 1. táblázatban szereplő molekulák nagy többsége a referenciavegyületekhez képest nagyobb mértékben gátolja a Fe2 (nem-enzimatikus módon) indukált lipidperoxidációt. Különösen hatékonynak a következő vegyületek bizonyultak: 2705279, 2705283, 2705284, 1010962, 1010960, 1010961, 1010887, 1010886, 1011038, 1011036, 1011087, 1011086, 1011049, 1011007, 1011009, 1011010, 1011035 és a 1011070, amelyek mintegy kétszer hatékonyabbak az idebenonnál és a DL-a-tocopherolnál. A 1011005, 1011037, 1011011, 1010011, 1011033, 1011034 és a 1011072 jelű molekulák a DL-a-tocopherolhoz hasonló hatásúnak bizonyultak. A 1010885, 1011047 és a 1011006 jelű molekulák az idebenonnál hatékonyabban gátolták a Fe2+ ionokkal kiváltott lipidperoxidációt. A 1011008, 1011032, 1011071, 1011050 és a 1011048 számú vegyületek antioxidáns aktivitása is meghaladja a silymarin hatékonyságát.
Mindkét in vitro teszten nyert adatokat összehasonlítva azt mondhatjuk, hogy a 2705279, 1011087, 1010962, 1010960, 1010961, 1010886, 1011038, 1011036, 1011049 és a 1011070 jelű molekulák igen jelentős mértékben gátolják a különböző módon kiváltott (Fe2+ ionokkal, illetve NADPH-val) lipidperoxidációt, ugyanis a vegyületek IC5o értékei 10 μΜ alatti értéknek bizonyultak. Mivel referenciavegyületeink egyike sem volt képes mindkét teszten ilyen hatást mutatni (különböző mértékben gátolták a Fe2+-vel, illetve NADPH-val indukált lipidperoxidációt), ezért ezeket a molekulákat a referenciavegyületeknél hatékonyabbnak tekinthetjük.
A vizsgált vegyületeink mindegyike jelentős antioxidáns hatással rendelkezik, ugyanis a Fenton-reakcióban (Fe2+ katalizált) képződött vagy a NADPHcitokróm-c-reduktáz enzim működése során keletkező szabadgyökök által kiváltott lipidperoxidációs folyamatokat képes gátolni.
Az in vitro hatékonynak bizonyult antioxidáns lipidperoxidáxiót gátló hatású vegyületek antiiszkémiás hatását a következő in vivő vizsgálattal igazoltuk.
7. Antiiszkémiás hatás (két-érlekötéses modell)
Himori, N.; H. Watanabe; N. Akaiké; M. Kurasawa; J. Itoh; Y. Tanaka:
Cerebral ischemia model with conscious mice. Involvement of NMDA receptor activation and derangement of leaming and memory ability.
J. Pharmacol. Meth. 23:311-327. (1990).
Altatott (450 mg/kg i. p. klorálhidrát) egerek (30-32 g) mindkét oldali carotis artériáját kipreparáltuk, a szimpatikus és a vagus idegeket leválasztottuk, majd egy laza ligatúrát helyeztünk mindkét oldali carotis artéria alá. A ligatúra két végét a fül mögött a háton kivezettük. A következő nap éber állapotban a ligatúra két végét meghúztuk, amelynek eredményeként a carotis artériákon megszűnik a vérellátás. Ezt 5 percig tartottuk fenn, majd felengedtük, ami biztosítja a reperfúziót. Az 5 perc alatt és a következő 24 óra alatt elpusztult állatok számát regisztráltuk. Szignifíkanciaszámítás χ2 teszttel történt. A vegyületekkel történt előkezelés i. p. 30 perccel a lekötés előtt történik. A vegyületek hatása a két-érlekötéses iszkémia okozta mortalitásra 2 mg/kg i. p. dózisban:
2. táblázat
Vegyület jele Példa Mortalitás%
2705279 2 10*
1010885 1 60
1010960 6 20
1010961 7 60
1010962 8 40
1011005 9 70
1010887 13 30
1010886 18 30
1011036 14 50
1011037 15 50
1011038 16 60
1011047 17 50
Idebenon 40
E-vitamin 70
Kontroll 70
A referenciavegyületek, valamint a legaktívabb vegyület ED50 értéke intraperitoneális adás mellett:
3. táblázat
Vegyület i. p. EDS0 (mg/kg)
Idebenon 4,50 (0,96-9,38)
E-vitamin 17,80 (8,46-41,8)
2705279 0,76 (0,2-1,27)
Fz in vitro teszteken jelentős antioxidáns hatást mutató (IC50<10 μΜ) vegyületek in vivő biológiai aktivitását a két-érlekötéssel kiváltott agyi iszkémia modellen vizsgáltuk. Az agyi vérellátás átmeneti drasztikus csökkenése, majd a lekötés megszüntetésével a reperfüzió megindítása a rendkívül toxikus oxigén szabadgyök (szuperoxidgyök, hidrogénperoxid) képződést idézi elő. A felszabaduló gyökök, valamint azok toxikus hatásainak kivédésében az antioxidáns tulajdonsággal rendelkező vegyületek igen hatékonyak. A kétoldali a. carotis 5 percig tartó lekötése 70%-os mortalitást eredményez. A találmány szerinti vegyületek közül a legaktívabbak (2705279; 1010960; 1010887; 1010886) 10-30%-ra csökkentették a mortalitást 2 mg/kg i. p. dózisban, míg a referenciavegyületként alkalmazott ismert antioxidáns hatású szerek, mint az idebenon vagy E-vitamin ugyanebben a dózisban kevésbé hatékonyak. A leghatásosabbnak talált 2705279 jelű vegyület kiemelkedő aktivitása még szembetűnőbb, ha a vegyületek ED50 értékeit hasonlítjuk össze [ED50 érték az a dózis (mg/kg), mely a kezeletlen kontrollcsoporthoz képest 50%-kal csökkenti a mortalitást]. Az idebenon esetében az i. p.
HU 214 600 Β
ED5o = 4,5 mg/kg, míg a 2705279 jelű vegyület esetében ez az érték 0,76 mg/kg i. p. A vegyület antiiszkémiás hatása orális adás mellett is mérhető. Más kísérletekben kimutattuk, hogy a vegyület nemcsak az egész agy állományára kiterjedő globális iszkémia modelleken, hanem az agy egy jól meghatározott területén előidézett úgynevezett “focalis” iszkémia modelleken is hatékony.
A találmány szerinti vegyületek antiamnéziás hatását a következő in vivő vizsgálattal bizonyítottuk:
2. Diazepám-indukált anterográd amnézia Broekkamp, C. L.; M. Le. Pichon; K. Loyd:
The comparative effects of benzodiazepines, progabide and PK 9084 on acquisition of passive avoidance in mice.
Pdychopharmalogy (Berlin) 83:122-125. (1984). 25-28 g súlyú NMRI egereken végeztük a memóriavizsgálatot passzív elhárítás metodika alkalmazásával, amely módszer a rágcsálók genetikusán determinált sötétségkedvelő magatartásán alapszik. Az előszelektált állatokat (az egér a megvilágított térből 30 másodpercen belül belép a sötét térbe) a tanítás során a megvilágított térbe helyeztük. Amikor a sötét térbe átlépett az állat, kellemetlen érzést keltő áramütést (1 mA 3 másodpercig) kapott a talpára 30 másodpercen belül, és mértük a sötét térbe való belépés idejét (látenciaidő). Az ellenőrzés során 24 óra múlva ismét a megvilágított térbe helyeztük az állatokat, és mértük a sötét térbe való átlépésig eltelt időt (retenciós idő = T), (limit idő = 300 másodperc). Anterográd amnézia előidézésére az állatokat a tanulás előtt 30 perccel 3 mg/kg i. p. diazepámmal kezeltük. A vegyületekkel való kezelés orálisan 0,1 és 10 mg/kg dózisokban a tanítás előtt 1 órával történt. A %-os protektív hatást (P%) az alábbi képlet alapján számoltuk:
Tkezelt + DIATplacebo + DIA P%=- x 100
T T 1 placebo1 placebo + DIA
A vegyületek hatása diazepám-indukált anterográd amnézia modellen
4. táblázat
Vegyület jele Példa Diazepám-indukált amnézia gátlása %
0,1 mg/kg p. 0. 10,0 mg/kg p. 0.
1010885 1 74 65
2705279 2 79 119
1010960 6 0 0
1010961 7 3 15
1010962 8 16 4
1010887 13 50 56
1010886 18 72 44
1011038 16 64 24
1011036 14 23 16
Vinpocetin 0 123
Az antioxidáns aktivitással rendelkező vegyületek jelentős protektív hatást fejtenek ki agyi iszkémiás történésekben [tranziaent ischemic attack (TIA) = átmeneti agyi érgörcs; stroke], melyekben a különböző súlyosságú neurológiai tünetek mellett a tanulás és a memória károsodása is bekövetkezhet. A találmány szerinti vegyületek antiamnéziás hatását a diazepám-indukált anterográd amnézia modellen vizsgáltuk, referenciavegyületként a klinikumban használt és szerkezetében hasonló Vinpocetint alkalmaztuk. Mind az α-, mind a β-etil-transz-apovinkaminsav-szánnazékok között található aktív vegyület, így különösen hatékonyak a 2705279; 1010886; 1011038; 1010885 és
1010887 jelű vegyületek. Leghatékonyabbnak a 2705279 jelű vegyület bizonyult, amely mindkét alkalmazott dózisban jelentős protektív hatást mutatott, s aktivitása a Vinpocetinét jóval felülmúlja. Ennek a vegyületnek az antiamnéziás hatása más amnéziamodelleken is bebizonyosodott. Elektrosokk-indukált retrográd amnézia modellen p. o. 0,110 mg/kg dózistartományban dózisfüggő protektív hatást mutatott, az iszkémia-indukált memóriakárosodást 1-10 mg/kg p. o. dózistartományban védte ki. Antiamnéziás aktivitása patkányon is jól mérhető.
Összefoglalva:
A találmány szerinti új transz-apovinkaminsav-származékok jelentős antioxidáns és antiiszkémiás hatással rendelkeznek. A legaktívabbnak talált 2705279 jelű vegyület antioxidáns hatása in vitro és in vivő is felülmúlja a referenciavegyületként alkalmazott idebenonét, illetve Vinpocetinét. A találmány szerinti vegyületek antioxidáns és antiiszkémiás aktivitásuk mellett különböző mértékű antiamnéziás hatással is bírnak, leghatékonyabb ezen a hatásterületen is a 2705279 jelű vegyület.
A találmány szerinti vegyületek antioxidáns, antiiszkémiás és antiamnéziás hatásuk következtében felhasználhatók olyan kórképek kezelésére, amelyekben a szabadgyökök, mint kóroki tényezők szerepelnek mind a betegség akut szakaszában, mind a késői következmények kialakulásában. Ezek a következők: cerebrovaszkuláris iszkémiás károsodás, sztrók, agyvérzés, agyi és gerincvelői trauma, szubarachnoidális és intracerebrális vérzés, valamint különböző neurodegeneratív megbetegedések, mint Alzheimer-kór. A vegyületek antiiszkémiás hatásuk révén nemcsak az agy, hanem más szervek, mint a máj, szív, izom iszkémiás károsodásának kezelésére is alkalmasak lehetnek.
A vegyületek várható terápiás dózisa 0,1-40 mg/kg/testsúlykg, orálisan vagy parenterálisan naponta egyszer vagy többször.
A találmányt az alábbiakban ismertetjük részletesen.
Az R helyén hidrogénatomot tartalmazó I általános képletű vegyületek előállítása esetén a II általános képletű kiindulási vegyületeket átészterezési reakcióval alakítjuk át a kívánt célvegyületekké. Az átészterezési reakciót az átészterező alkohol, valamilyen megfelelő glikol, előnyösen etilén-glikol feleslegében hajtjuk végre, célszerűen vízmentes körülmények között, katalitikus mennyiségű valamilyen erős bázis jelenlétében. Bázisként alkálifém-hidrideket, alkálifém-alkoholátokat,
HU 214 600 Β célszerűen tercier alkoholátokat, így például előnyösen kálium-tere-butilátot alkalmazhatunk. Az átészterezési reakciót 80-140 °C, előnyösen 110-120 °C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre. A reakció lejátszódása után kapott vegyületet kívánt esetben izolálás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben, vagy kívánt esetben kinyerhetjük úgy, hogy a reakcióelegyet vízre öntjük és a kivált terméket kiszűrés után kívánt esetben átkristályosítással tisztítjuk, vagy a vízzel hígított reakcióelegyet valamilyen közömbös, vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel, így például diklór-metánnai, klórbenzollal extraháljuk és a terméket bepárlással vagy sóképzéssel izoláljuk. Az R helyén hidrogénatomot tartalmazó I általános képletű vegyületeket acilezési reaki cióval alakíthatjuk át az R helyén Z-C=O általános képletű csoportokat tartalmazó I általános képletű vegyületekké.
Az acilezési reakciót bármilyen, a megfelelő acilcsoportot tartalmazó szerves karbonsavval vagy annak reakcióképes származékával, így karbonsavhalogenidekkel, előnyösen savkloridokkal, savanhidridekkel, stb. hajthatjuk végre, ismert módon kívánt esetben valamilyen savmegkötő szer jelenlétében.
Ha az acilezési reakciót valamilyen megfelelő karbonsavval végezzük, a reakciót előnyösen valamilyen közömbös szerves oldószerben, így valamilyen dipoláros-aprotikus oldószerben, mint amilyen a dimetilfomamid, dimetil-szulfoxid, acetonitril, stb. hajtjuk végre, valamilyen kondenzálószer jelenlétében. Kondenzálószerként valamilyen karbodiimid-származékot, így diciklohexil-karbodimidet, karboxil-diimidazolt alkalmazhatunk. A reakciót 0 °C és 4 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen szobahőmérsékleten végezzük.
Ha az acilezési reakciót valamilyen savhalogeniddel, célszerűen savkloriddal hajtjuk végre, közömbös szerves oldószerként valamilyen alifás vagy gyűrűs éter oldószerben, így például dietil-éterben, tetrahidrofuránban, vagy klórozott szénhidrogénekben, így kloroformban, valamilyen aromás szénhidrogénben, így például benzolban, klór-benzolban, toluolban, vagy valamilyen szerves fázisban, így piridinben végezzük a reakciót, előnyösen valamilyen savmegkötő szer jelenlétében. Savmegkötő szerként szervetlen bázisokat, így például alkálifém-karbonátokat, vagy szerves tercier bázisokat, így piridint, trietil-amint használhatunk. A reakcióban alkalmazott szerves bázisok, így a piridin egyidejűleg oldószerként és savmegkötő szerként is szolgálhatnak. !
Az acilezési reakcióban kapott, R helyén Z-C=O általános képletű vegyületek kinyerése az oldószerből úgy történhet, hogy az oldószert, illetve adott esetben a reagens feleslegét, valamint a savmegkötő szert, eltávolítjuk, majd a kapott maradékot valamilyen vízzel nem elegyedő oldószer, így például etil-acetát, kloroform, diklór-metán, benzol, dietil-éter stb. és víz elegyében feloldjuk, kívánt esetben az elegy kémhatását például vizes ammónium-hidroxid oldattal vagy vizes alkálifém-hidrogénkarbonát oldattal enyhén lúgosra (pH = 8-9 érték) állítjuk, majd a fázisokat elválasztjuk.
A szerves fázis vízzel való mosása, szárítása majd az oldószer vákuumban történő eltávolítása után kapjuk meg a kívánt célvegyületet.
A találmány szerinti I általános képletű vegyületeket kívánt esetben kvatemer sókká alakíthatjuk. A kvatemer sóképzéshez előnyösen valamilyen alkil-halogenid, így klorid, bromid jodid, vagy valamilyen alkilszulfát ekvimolárisnál kissé nagyobb mennyiségét alkalmazzuk. A reakciót valamilyen közömbös szerves dipoláros-aprotikus oldószerben hajtjuk végre.
A találmány szerinti I általános képletű vegyületeket kívánt esetben ismert módon, valamilyen gyógyászatilag alkalmazható só képzésére alkalmas sav segítségével savaddíciós sókká is alakíthatjuk.
A találmány szerinti eljárással kapott I általános képletű vegyületeket vagy sóikat kívánt esetben további tisztítási műveleteknek, így például átkristályosításnak is alávethetjük. Az átkristályosításra alkalmas oldószerek körét a kristályosítani kívánt vegyületek oldhatósági és kritályosodási tulajdonságai határozzák meg.
A találmány szerinti I általános képletű új transz apovinkaminsav-észter-származékok racém és optikailag aktív vegyületek lehetnek. Ha optikailag aktív II általános képletű vegyületeket alkalmazunk kiindulási anyagként, akkor optikailag aktív I általános képletű vegyületeket, ha racém II általános képletű vegyületeket alkalmazunk, akkor racém I általános képletű vegyületeket kapunk.
Az I általános képletű új racém vagy optikailag aktív transz apovinkaminsav-észter-származékokat vagy sókat a gyógyászatban szokásos, parenterális vagy enterális adagolásra alkalmas, nem toxikus, inért szilárd vagy folyékony hordozóanyagokkal összekeverve gyógyászati készítményekké alakíthatjuk. Hordozóanyagként a gyógyszertechnológiában szokásosan alkalmazott szilárd vagy folyékony anyagokat alkalmazhatjuk. A hatóanyagot a szokásos gyógyászati készítmények formájában, így különösen szilárd alakban, például tabletta, drazsé, kapszula stb. formájában készíthetjük ki. A szilárd vivőanyag mennyisége széles tartományon belül változhat, előnyösen körülbelül 25 mg és 1 mg közötti érték. A készítmények adott esetben szokásos gyógyászati segédanyagokat is tartalmazhatnak. Elkészítésük szokásos gyógyszertechnológiai módszerekkel történhet, a készítményeket kívánt esetben további szokásos műveleteknek, így például sterilezésnek is alávethetjük.
Az alább következő példák a találmány oltalmi körébe tartozó vegyületek előállítását szemléltetik anélkül, hogy igényünket ezekre a példákra korlátoznánk.
1. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter (3β, 16α) g (0,045 -mól) (-)-apovinkaminsav-metil-észtert (3β, 16α) 300 ml etilénglikolban 1 g kálium-tercierbutilát jelenlétében 5 órán keresztül 120 °C-on keverünk. A szobahőmérsékletre hűtött reakcióelegyet 1 1 jeges vízhez öntjük, s a kiváló kristályokat kiszűijük, 2x50 ml vízzel mossuk, megszárítjuk.
HU 214 600 Β
A cím szerinti termék tömege: 15,9 g
Termelés: 97%
Olvadáspont: 82-87 °C a$: -138,7° (c = 0,2; kloroform) 'H-NMR-spektrum (CDC13)5: 0,65 (3H, t, CH3CH2);
0,66-3,2 (14H, m, vázprotonok, OH); 3,85 (2H, m,
HOC/A); 4,43 (2H, m, CT/2O-C = O)
6,35 (1H, s, H-15); 7,00-7,55 (4H, m, aromás protonok).
Elemanalízis eredmények a C22H26H2O3 (móltömeg: 366,44) összegképlet alapján; számított: C = 72,10; H = 7,15; N = 7,65%;
mért: C = 71,89; H = 7,15; N = 7,62%.
2. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(acetoxi)-etil-észter-monohidroklorid (3β, 16α)
3,66 g (0,01 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert (3β, 1 6α) 50 ml vízmentes pridinben oldunk és az oldathoz csepegtetünk 5 ml (0,052 mól) ecetsavanhidridet és a reakcióelegyet másnapig szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot 100 ml etil-acetát, 30 ml víz és 50 ml nátrium-hidrogénkarbonát oldat elegyében feloldjuk, a kapott fázisokat szétválasztjuk. Az organikus részt 3x20 ml vízzel mossuk, izzított nátrium-szulfáton megszárítjuk.
A bepárlási maradékot 30 ml izopropanolban oldjuk és az oldatot pH = 4-ig sósavas etanollal savanyítjuk, majd másnapig hűtőszekrényben állni hagyjuk, a kivált kristályokat kiszűijük, megszárítjuk.
A cím szerinti tennék tömege: 2,8 g.
Termelés: 62%
Olvadáspont: 179-189 °C a2/': -118,9° (c = 0,2 metanol) iH-NMR-spk,™ (CDCl3)p: 0,75 (3H, t, C773CH2);
2,1 (3H, s, CH3CO); 4,28 (1H, s, H-3); 6,28 (1H, s, H-15); 4,30-4,70 (4H, m, -OCH2 CH2CH2O-); 7,05-7,60 (4H. m. aromás protonok).
3. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(2-tiofén-karbonil-oxi)-etil-észter-mono-hidrogénklorid (3-β, 16α)
3,66 g (0,01 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert (3β, 1 6α) 50 ml vízmentes pridinben szobahőmérsékleten oldunk és az oldathoz csepegtetünk 4,8 ml (0,045 mól) tiofén-2-karbonsavkloridot és a reakcióelegyet 24 órán keresztül állni hagyjuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A bepárlási maradékhoz 100 ml diklór-metánt és 20 ml vizet adunk és az elegy pH-ját 20 ml telített nátriumhidrogénkarbonát oldattal 9-re állítjuk. A fázisokat szétválasztjuk, az organikus részt vízzel mossuk, izzított nátriumszulfáton megszárítjuk. A leszűrt oldatot vákuumban szárazra pároljuk, s a maradékot 50 ml izopropanolban oldjuk és az oldat pH-ját sósavas etanollal 4-re állítjuk. Az oldatot másnapig hűtőszekrényben állni hagyjuk, a kivált kristályokat kiszűijük, hideg iropropanollal mossuk, így 2,9 g cím szerinti terméket kapunk.
Termelés: 57% a2D°: -113,9° (c = 0,2, kloroform)
Olvadáspont: 178-183 °C
4. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(4-nitro-benzoiloxi)-etil-észter (3β, 16α)
3,66 g (0,01 -mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert (3β, 16α) 20 ml vízmentes pridinben szobahőmérsékleten oldunk és az oldathoz adunk 4,2 g (0,0225 -mól) 4-nitro-benzoil-kloridot és a reakcióelegyet másnapig állni hagyjuk. A reakcióelegyet 150 ml etil-acetáttal hígítjuk, majd 50 ml vizet és 3 ml tömény vizes ammónium-hidroxid oldatot adunk hozzá. A kapott fázisokat szétválasztjuk, az organikus részt 4x25 ml vízzel mossuk, izzított nátrium-szulfáton megszárítjuk.
A leszűrt oldatot vákuumban szárazra pároljuk, a maradék olajos anyagot 50 ml izopropanolban forrón oldjuk, csontszénnel derítjük, s a leszűrt oldatot néhány óráig állni hagyjuk. A kivált kristályokat kiszűrjük, 10 ml izopropanollal mossuk, megszárítjuk.
A cím szerinti termék tömege: 2,6 g
Termelés: 58% a2[J: -86,7° (c = 0,2 kloroform)
Olvadáspont: 139-142 °C
5. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(nikotinoiloxi)-etil-észter-dihidrogénklorid (3β, 16α)
2,4 g (0,0065 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert (3β, 16α) 20 ml vízmentes pridinben oldunk és az oldathoz csepegtetünk 2,15 g (0,015 mól) 10 ml nikotinsavklorid piridines oldatát és a reakcióelegyetet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keveijük, majd vákuumban szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot 150 ml etil-acetát és 50 ml telített nátrium-hidrogénkarbonát oldat elegyében feloldjuk, a kapott fázisokat szétválasztjuk. Az organikus részt 2x20 ml vízzel mossuk, izzított nátrium-szulfáton megszárítjuk.
A leszűrt oldatot vákuumban szárazra pároljuk, s a bepárlási maradékot 30 ml izopropanolban oldjuk és az oldatot sósavas etanollal pH — 4-ig savanyítjuk, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 50 ml etilacetátból kristályosítjuk.
A cím szerinti termék tömege: 1,30 g
Termelés: 36%
Olvadáspont: 158-164 °C a2D°: -69,5° (c = 0,2 kloroform)
Elemanalízis eredmények a C28H29H3O4 2HC1 (M = 544,47) összegképlet alapján: számított: C = 61,76; H = 5,73; N = 7,71; Cl = 13,02% mért: C = 61,73; H = 6,05; N = 7,69; Cl = 12,90%
6. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(benzoiloxi)-etil-észter-hidroklorid (3β, 16α)
4,44 g (0,012 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert 60 ml klórbenzolban oldtunk, 1,83 g (0,018 mól) trietil-amint és 2,5 g (0,018 mól)
HU 214 600 Β benzoilkloridot adunk hozzá. Az elegyet 40 °C-on 30 percen át keverjük, majd 15 ml 10%-os nátriumhidrogénkarbonát oldattal pH = 8 értékre lúgosítjuk. Elválasztás után a szerves fázist kétszer 20 ml vízzel mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk. A szárítószert kiszűqük, amelyet kétszer 3 ml klórbenzollal mosunk. A szűrlethez pH 3-4 értékig sósavas dioxánt adunk, majd a kivált kristályokat 0 °C-on kiszűqük és acetonnal pépesítve hidegen mossuk, szárítjuk.
A cím szerinti anyag tömege: 4,8 g (79%), Olvadáspontja: 216-217,5 °C, a2D°: -86,6° (c = 1, metanol).
7. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(4-klór-benzoiloxi)-etil-észter metánszulfonsavas só (3β, 16α)
4,4 g (0,012 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert 60 ml diklórmetánban oldunk, 1,83 g (0,018 mól) trietil-amint és 3,15 g (0,018 mól)
4-klór-benzoilkloridot adunk hozzá és 15 ml 10%-os nátrium-hidrogénkarbonát oldattal pH 8 értékre lúgosítjuk. Elválasztás után a szerves fázist kétszer 20 ml vízzel mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk. A szárítószert kiszűrjük, amelyet kétszer 5 ml diklórmetánnal mosunk. A szerves fázist oldószermentesre pároljuk, a maradékot 35 ml acetonban oldjuk és pH 4 értékig metánszulfonsavat adunk hozzá. A kivált kristályokat 0 °C-on szűrjük, hideg acetonnal mossuk, szárítjuk.
A cím szerinti anyag tömege: 5,85 g (81%), Olvadáspont: 197-199 °C, ajj: -73,3° (c = 1, metanol).
8. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-propionil-oxi-etil-észter-hidroklorid (3β, 16α) 4,4 g (0,012 mól) (+)-Transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert
100 ml klórbenzolban oldunk, 5,33 g (0,04 mól) propionsavanhibridet és 1,4 g (0,014 mól) trietilamint adunk hozzá és 80 °C-on négy órán át keveqük. Ezután vákuumban 40 ml klórbenzolt és a feleslegben alkalmazott propionsavanhidridet ledesztilláljuk. A maradékhoz szobahőmérsékleten 25 ml vizet adunk és 20 ml 10%-os nátrium-hidrogénkarbonát oldattal pH 8 értékre lúgosítunk. Elválasztás után a szerves fázist kétszer 20 ml vízzel mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk. A szárítószert kiszűqük, amelyet kétszer 3 ml klórbenzollal mosunk. A szerves fázist vákuumban oldószermentesre pároljuk, a maradékot 40 ml acetonban oldjuk és sósavas dioxánnal pH 4 értékre savanyítjuk. A kristályokat 5 °C-on kiszűqük, acetonnal mossuk, szárítjuk.
A cím szerinti anyag tömege: 4,2 g (76%),
Olvadáspont: 219-220 °C, a2/ -111,9° (c = 1, metanol).
9. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(3,4,5-trimetoxi)-benzoiloxi-etil-észter/hidroklorid (3β, 16α)
5,1 g (0,014 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2hidroxi-etil-észtert 80 ml diklóretánban oldunk 2 g (0,02 mól) trietilamint és 4,6 g (0,02 mól) 3,4,5trimetoxi-benzoilkloridot adunk hozzá. Az elegyet 50 °C-on 1 órán át keveqük, majd szobahőmértékleten 50 ml vizet adunk hozzá és 20 ml 10%-os nátriumhidrogénkarbonát oldattal pH 8 értékre lúgosítunk. Elválasztás után a szerves fázist kétszer 25 ml vízzel mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk. A szárítószert kiszűqük, kétszer 5 ml diklór-etánnal mossuk. A szűrletet vákuumban oldószermentesre pároljuk, a maradékot 25 ml etil-acetátban oldjuk és sósavas dioxánnal pH 4 értékre savanyítjuk. A kivált kristályokat 10 °C-on szűrjük, acetonnal mossuk.
A cím szerinti anyag tömege: 6,2 g (76%),
Olvadáspont: 191-194 °C, a2D°: -96,2° (c = 1, metanol).
10. példa (-)-Bisz-(transz-apovinkaminsav)-etilénglikol-észter-dihidroklorid (3β, 16α)
5,1 g (0,014 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert 100 ml diklór-etánban oldunk, 6 g (0,06 mól) trietil-amint és hűtés mellett 7,54 g (0,02 mól) (-)-transz-a-etil-apovinkaminsavklorid HCl-t adunk hozzá, majd szobahőmérsékleten további két órát keveijük. Az elegyhez ezután 50 ml vizet és 20 ml 10%-os nátriumhidrogénkarbonát oldatot adunk pH 8 értékig. Elválasztás után szerves fázist kétszer 25 ml vízzel mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk, szűqük a szárítószertől, amelyet kétszer 5 ml diklór-etánnal mosunk. A szerves fázist oldószermentesre pároljuk, 60 ml acetonban oldjuk és sósavas dioxánnal pH 3,5-re savanyítjuk. A kivált kristályokat 5 °C-on szűqük, acetonnal mossuk.
A cím szerinti anyag tömege: 6,55 g (63%), Olvadáspont: 222-225 °C, ajj: -131,5° (c = 1, metanol).
11. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(acetoxi)-etil-észter metánszulfonsavas só (3β, 16α)
7,3 g (0,02 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert 100 ml diklór-etánban oldunk, 2,2 g (0,0022 mól) trietü-amint és 2,42 g (0,03 mól) acetil-kloridot adunk hozzá. Az elegyet 50 °C-on 15 percen át keveqük, majd szobahőmérsékleten 50 ml vizet adunk hozzá és 20 ml 10%-os nátrium-hidrogénkaibonát oldattal pH 8 értékre lúgosítunk. Elválasztás után a szerves fázist kétszer 25 ml diklór-etánnal mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk. A szárítószert kiszűqük, amelyet kétszer 5 ml diklór-etánnal mosunk. A szűrletet vákuumban oldószermentesre pároljuk, a maradékot 40 ml etil-acetátban oldjuk és metánszulfonsavval pH 3 értékre savanyítjuk. A kivált kristályokat 0 °C-on szűrjük, etil-acetáttal mossuk, szárítjuk.
A cím szerinti anyag tömege: 7,75 g (77%), Olvadáspont: 130-133 °C, ajj: -92,2° (c = 1, metanol).
12. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-2-(acetoxi)-etil-észter benzonszulfonsavas só (3β, 16α)
HU 214 600 Β
Mindenben a 11. példában leírtak szerint járunk el, de a sóképzést metánszulfonsav helyett benzonszulfonsawal végezzük pH 3,5 értéken.
A cím szerinti anyag tömege: 7,9 g (70%),
Olvadáspont: 180,5-183 °C, aj?: -90,3° (c = 1, metanol).
13. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(hidroxi)-etil-észter (3-β, 16α)
16,8 g (0,05 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-metil-észtert (3α, 16β) 100 ml 335 ml etilén-glikolban, 1 g kálium-tere-butilát jelenlétében öt órán át 120 °C-on keverünk. Ezután a szobahőmérsékletre visszahűtött reakcióelegyet 1 1 jeges vízhez csurgatjuk. A kivált terméket kiszűrjük, 3x500 ml vízzel mossuk, szárítjuk.
A cím szerinti anyag tömege: 17,6 g (96%), Olvadáspont: 85-90 °C, aj?:+131,2° (c= 1,CHC13).
14. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(benzoil-oxi)-etil-észter-hidroklorid (3β, 16a)
Mindenben a 6. példában leírtak szerint járunk el, de a 4,4 (0,012 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter helyett 4,4 g (0,012 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 4,7 g (77%),
Olvadáspont: 217-219 °C, aj?: +84,9° (c = 1, metanol).
15. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(4-klór-benzoiloxi)-etil-észter metánszulfonsavas só (3β, 16α)
Mindenben a 7. példában leírtak szerint járunk el, de a
4,4 g (0,012 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter helyett 4,4 g (0,012 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 5,5 g (76%),
Olvadáspont: 199-200 °C, aj?: +73,3° (c = 1, metanol).
16. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(propioniloxi)-etil-észter hidroklorid (3 β, 16α)
Mindenben a 8. példában leírtak szerint járunk el, de a
4,4 g (0,012 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter helyett 4,4 g (0,012 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 4,35 g (79%), Olvadáspont: 220-221 °C, aj?: +109,7° (c = 1, metanol).
17. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(3,4,5-trimetoxi-benzoiloxi)-etil-észter-hidroklorid (3β, 16α)
Mindenben a 9. példában leírtak szerint járunk el, de a
5,1 g (0,014 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter helyett 5,1 g (0,014 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 6,2 g (76%),
Olvadáspont: 192-195 °C, aj?: +95,3° (c = 1, metanol).
18. példa (+)-Transz-apovinkaminsav-2-(acetoxi)-etil-észter-hidroklorid (3β, 16α)
7,3 g (0,02 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert 100 ml diklóretánban oldunk 2,2 g (0,022 mól) trietil-amint és 2,42 g (0,03 mól) acetil-kloridot adunk hozzá. Az elegyet 40 °C-on 25 percen át keveijük, majd szobahőmérsékleten 50 ml vizet adunk hozzá és 20 ml 10%-os nátrium-hidrogénkarbonát oldattal pH 8 értékre lúgosítunk. Elválasztás után a szerves fázist kétszer 25 ml vízzel mossuk, izzított magnézium-szulfáton szárítjuk. A szárítószert kiszűrjük, amelyet kétszer 5 ml diklór-etánnal mosunk. A szűrletet vákuumban oldószermentesre pároljuk, a maradékot 40 ml etil-acetátban oldjuk és sósavas dioxánnal pH 4 értékre savanyítunk. A kivált kristályokat 0 °C-on szűrjük, etil-acetáttal mossuk, szárítjuk.
A cím szerinti anyag tömege: 6,95 g (78%), Olvadáspont: 221-224 °C, aj?: +107,4 C° (c - 1, metanol).
19. példa
Racém-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter-hidroklorid
Mindenben a 13. példában leírtak szerint járunk el, de a 16,8 g (0,05 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-metil-észter helyett 16,8 g (0,05 mól) racém-transz-apovinkaminsav-metil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 17,4 g (95%), Olvadáspont: 97-101 °C.
20. példa
Racém-transz-apovinkaminsav-2-(acetoxi)-etil-észter-hidroklorid
Mindenben a 18. példában leírtak szerint járunk el, de a 7,3 g (0,02 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter helyett 7,3 g (0,02 mól) racémtransz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 7,1 g (80%),
Olvadáspont: 187-189 °C.
21. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-3-hidroxi-propil-észter(3^, 16a)
Mindenben az 1. példában leírtak szerint járunk el, de 300 ml etilén-glikol helyett 300 ml propilén-glikolt használunk. A vízreöntés után a vizes fázistól elváló olajat kapunk, amelyet 100 ml diklór-metánban oldunk és kétszer 20 ml vízzel mosunk. A szerves fázist izzított magnézium-szulfáton szárítjuk, kiszűrjük a szárítószert, amelyet kétszer 5 ml diklór-metánnal mosunk, a szűrletet vákuumban oldószermentesre pároljuk. A maradék cím szerinti anyag súlya 16,8 g (világossárga, viszkózus olaj).
A hidroklorid só fizikai adatai acetonból:
HU 214 600 Β
Olvadáspont: 216-218 °C, ajj: +122,2° (c = 1, metanol).
22. példa (-)-Transz-apovinkaminsav-3-(acetoxi)-propiletil-észter-hidroklorid (3β, 16α)
Mindenben a 18. példában leírtak szerint járunk el, de
7,3 g (0,02 mól) (+)-transz-apovinkaminsav-2-hidroxi-etil-észter helyett 7,6 g (0,02 mól) (-)-transz-apovinkaminsav-3-hidroxi-propil-észtert használunk.
A cím szerinti anyag tömege: 7,0 g (76%),
Olvadáspont: 205-207 °C, ag: +113,2° (c = 1, metanol).

Claims (4)

1. (I) általános képletű racém és optikailag aktív transz-apovinkaminsav-észter-származékok - ahol
R jelentése hidrogénatom, vagy Z-C=O általános képletű csoport, ahol Z jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport; adott esetben nitrocsoporttal, 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált fenilcsoport; öt- vagy hattagú, egy nitrogén- vagy kénatomot tartalmazó aromás heterociklusos csoport; vagy 14-ebumameninilcsoport;
n jelentése egész szám, melynek értéke 2-4 lehet és gyógyászatilag alkalmazható sóik.
2. Az 1. igénypont szerinti (-)-transz-a-etilapovinkaminsav-2-(acetoxi)-etil-észter és sói.
3. Gyógyszerkészítmény, amely hatóanyagként valamilyen (I) általános képletű racém vagy optikailag aktív transz-apovinkaminsav-észter-származékot -ahol
R jelentése hidrogénatom, vagy Z-C=O általános képletű csoport, ahol Z jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport, adott esetben nitrocsoporttal, 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált fenilcsoport; öt- vagy hattagú, egy nitrogén- vagy kénatomot tartalmazó aromás heterociklusos csoport; vagy 14-ebumaminilcsoport;
n jelentése egész szám, melynek értéke 2-4 lehet vagy gyógyászatilag alkalmazható sóját tartalmazza, a gyógyászatban szokásos hordozó és/vagy egyéb segédanyagok mellett.
4. Eljárás (I) általános képletű racém és optikailag aktív transz-apovinkaminsav-észter-származékok és gyógyászatilag alkalmazható sóik előállítására - ahol
R jelentése hidrogénatom, vagy Z-C=O általános képletű csoport, ahol Z jelentése 1-4 szénatomos alkilcsoport adott esetben nitrocsoporttal, 1-4 szénatomos alkoxicsoporttal vagy halogénatommal szubsztituált fenilcsoport; öt vagy hattagú, egy nitrogén vagy kénatomot tartalmazó aromás heterociklusos csoport, vagy 14abumameninilcsoport;
n jelentése egész szám, melynek értéke 2-4 lehet azzal jellemezve, hogy valamely (Π) általános képletű racém vagy optikailag aktív transz-apovinkaminsavészter-származékot - ahol R) jelentése metil- vagy etilcsoport - valamilyen megfelelő glikolban, bázis katalizátorjelenlétében átészterezzük, és ι
kívánt esetben, az R helyén Z-C=O általános képletű vegyületek előállítása esetén a kapott, R helyén hidrogénatomot tartalmazó vegyületet acilezzük, és kívánt esetben a kapott (I) általános képletű vegyületeket gyógyászatilag alkalmazható sókká alakítjuk.
HU9503736A 1995-12-22 1995-12-22 Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására HU214600B (hu)

Priority Applications (23)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9503736A HU214600B (hu) 1995-12-22 1995-12-22 Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására
SI9630526T SI0876367T1 (en) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminic acid ester derivatives as drugs
DE69623656T DE69623656T2 (de) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminsäure-esterderivate als arzneimittel
CZ19981962A CZ290383B6 (cs) 1995-12-22 1996-12-13 Racemické a opticky aktivní estery trans-apovinkaminové kyseliny jako léčiva
PL96328170A PL186626B1 (pl) 1995-12-22 1996-12-13 Nowe racemiczne i optycznie czynne pochodne estrowe kwasu trans apowinkaminowego, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie oraz kompozycja farmaceutyczna i sposób jej wytwarzania
PCT/HU1996/000075 WO1997023481A1 (en) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminic acid ester derivatives as drugs
PT96942534T PT876367E (pt) 1995-12-22 1996-12-13 Derivados de esteres do acido trans-apovincaminico utilizados como farmacos
RU98113854/04A RU2161157C2 (ru) 1995-12-22 1996-12-13 Рацемические или оптически активные эфирные производные трансаповинкаминовой кислоты
KR1019980704700A KR19990076606A (ko) 1995-12-22 1996-12-13 의약으로서의 트랜스 아포빈카민산 에스테르 유도체
EP96942534A EP0876367B1 (en) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminic acid ester derivatives as drugs
JP09523441A JP2000502676A (ja) 1995-12-22 1996-12-13 薬剤としてのトランスアポビンカミン酸エステル誘導体
IL12409796A IL124097A (en) 1995-12-22 1996-12-13 History of trans-avincaminic acid esters, their preparation, pharmaceutical preparations containing them and their use as medicines
CN96199131A CN1072670C (zh) 1995-12-22 1996-12-13 作为药物的反式阿朴长春蔓宁酸酯衍生物
AU11669/97A AU1166997A (en) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminic acid ester derivatives as drugs
DK96942534T DK0876367T3 (da) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminsyreesterderivater som lægemidler
UA98052781A UA61062C2 (en) 1995-12-22 1996-12-13 Racemic and optically active trans apovincaminic acid ester derivatives
US09/091,260 US6093720A (en) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminic acid ester derivatives
ES96942534T ES2181926T3 (es) 1995-12-22 1996-12-13 Derivados ester de acido trans-apovincaminico en calidad de farmacos.
CA002238635A CA2238635A1 (en) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminic acid ester derivatives as drugs
AT96942534T ATE223914T1 (de) 1995-12-22 1996-12-13 Trans apovincaminsäure-esterderivate als arzneimittel
TW085115515A TW366348B (en) 1995-12-22 1996-12-16 Novel trans apovincaminic acid ester derivatives, pharmaceutical composition containing same, and their preparation processes
ZA9610646A ZA9610646B (en) 1995-12-22 1996-12-18 Novel trans apovincaminic acid ester derivatives
ARP960105829A AR005182A1 (es) 1995-12-22 1996-12-20 Derivados de esteres del acido trans-apovincaminico, composicion que los contiene y procesos para preparar dichos derivados y composicion.

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9503736A HU214600B (hu) 1995-12-22 1995-12-22 Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9503736D0 HU9503736D0 (en) 1996-02-28
HUT76555A HUT76555A (en) 1997-09-29
HU214600B true HU214600B (hu) 1998-04-28

Family

ID=10987512

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9503736A HU214600B (hu) 1995-12-22 1995-12-22 Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására

Country Status (22)

Country Link
US (1) US6093720A (hu)
EP (1) EP0876367B1 (hu)
JP (1) JP2000502676A (hu)
KR (1) KR19990076606A (hu)
CN (1) CN1072670C (hu)
AR (1) AR005182A1 (hu)
AT (1) ATE223914T1 (hu)
AU (1) AU1166997A (hu)
CA (1) CA2238635A1 (hu)
CZ (1) CZ290383B6 (hu)
DE (1) DE69623656T2 (hu)
DK (1) DK0876367T3 (hu)
ES (1) ES2181926T3 (hu)
HU (1) HU214600B (hu)
IL (1) IL124097A (hu)
PL (1) PL186626B1 (hu)
PT (1) PT876367E (hu)
RU (1) RU2161157C2 (hu)
TW (1) TW366348B (hu)
UA (1) UA61062C2 (hu)
WO (1) WO1997023481A1 (hu)
ZA (1) ZA9610646B (hu)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006054536A1 (ja) * 2004-11-16 2006-05-26 Nippon Shinyaku Co., Ltd. 尿路結石症治療剤
JP2008017734A (ja) * 2006-07-11 2008-01-31 Memory Secret Inc 精神的機能を改善するための栄養補助及び栄養摂取食品用の口経投与組成物
CN102485723A (zh) * 2010-12-02 2012-06-06 江苏斯威森生物医药工程研究中心有限公司 一锅法半合成长春西汀及其水溶性盐制备
CN114920743B (zh) * 2022-05-09 2023-08-04 南京中医药大学 一种吲哚生物碱及其制备方法与应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2531108A1 (de) * 1975-07-11 1977-02-03 Synthelabo Vincaminderivate, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende arzneimittel
HU186891B (en) * 1981-06-12 1985-10-28 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing esters of apovincaminic acid
IT1142026B (it) * 1981-07-21 1986-10-08 Ausonia Farma Srl Nuovo composto ad attivita' eumetabolica cerebrale
HU187733B (en) * 1982-06-30 1986-02-28 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt,Hu Process for preparing apovincaminic acid derivatives
JPS60248688A (ja) * 1984-05-24 1985-12-09 Sanwa Kagaku Kenkyusho:Kk 新規のアポビンカミン酸エステルおよびその酸付加塩並びにその製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
HU9503736D0 (en) 1996-02-28
CA2238635A1 (en) 1997-07-03
ATE223914T1 (de) 2002-09-15
EP0876367B1 (en) 2002-09-11
DE69623656D1 (en) 2002-10-17
PL328170A1 (en) 1999-01-18
AU1166997A (en) 1997-07-17
CZ196298A3 (cs) 1998-10-14
TW366348B (en) 1999-08-11
WO1997023481A1 (en) 1997-07-03
DE69623656T2 (de) 2003-05-22
IL124097A (en) 2001-12-23
EP0876367A1 (en) 1998-11-11
PL186626B1 (pl) 2004-02-27
JP2000502676A (ja) 2000-03-07
PT876367E (pt) 2003-01-31
KR19990076606A (ko) 1999-10-15
CZ290383B6 (cs) 2002-07-17
CN1072670C (zh) 2001-10-10
HUT76555A (en) 1997-09-29
AR005182A1 (es) 1999-04-14
RU2161157C2 (ru) 2000-12-27
ZA9610646B (en) 1997-06-24
DK0876367T3 (da) 2002-12-30
UA61062C2 (en) 2003-11-17
US6093720A (en) 2000-07-25
ES2181926T3 (es) 2003-03-01
CN1205701A (zh) 1999-01-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4076819A (en) Thieno-pyridine derivatives and therapeutic composition containing same
PL190034B1 (pl) Nowe pochodne heterocykliczne i kompozycje farmaceutyczne zawierające nowe pochodne heterocykliczne
EP2675813A1 (en) Anti-thrombotic compounds
SU719499A3 (ru) Способ получени производных 1,2,3,4,6,7-гексагидро-11 в н-бензо( )-хинолизина или их солей
SK96995A3 (en) 3-hydroxyanthranile acid derivatives, methods and intermediates products for their production, pharmaceutical compositions and their use
HU214600B (hu) Transz-apovinkaminsav-észter-származékok, az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására
JPH064616B2 (ja) ２−（ピペラジニル）−２−オキソエチレン−置換フラボノイド誘導体、その製法およびそれを含有する医薬組成物
ES2285775T3 (es) Compuestos heterociclicos sustituidos, su procedimiento de preparacion y composiciones farmaceuticas que los contienen.
PT94467A (pt) Processo de preparacao de indeno-indolos e de composicoes farmaceuticas que os contem e processo para a estabilizacao de compostos
EP0745584A1 (fr) Composés arylalkyl(thio) carboxamides ayant une affinité pour des récepteurs mélatoninergiques, leurs procédés de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
HU177370B (en) Process for producing new bracket-cross-bracket-vincaminol-esters
CA2238625A1 (en) Delocalisation of stitch errors in the writing of gratings
AP339A (en) Indenoindoles compounds.
US4762839A (en) Quinazolinone copmpounds useful for the prophyloxis and treatment of diabetic complications
US4167569A (en) Pyrimido[1,2-a ]benzimidazole derivatives
US6602865B1 (en) Pyridazino(4,5-b)(1,5)oxazepinone, -thiazepinone and -diazepinone compounds
US4983603A (en) Tricyclic cholinergic receptor agonists
CA2350560C (en) Novel type condensed pyridazinone compounds
EP0032856A1 (fr) Nouveaux dérivés de dihydro-2,3-imidazo(1,2-b)pyridazines, leur procédé de préparation et leur application en thérapeutique
US4732906A (en) Dioxolobenzizoxazole derivatives
KR820001930B1 (ko) 프탈라진-4-일아세트산 유도체의 제조방법
HU201760B (en) Process for producing 14-spiroheterocyclic-14,15-dihydroeburnamenin derivatives and pharmaceutical compositions comprising same
JPS6017789B2 (ja) ５−（ω−アミノアシル）−３−カルボアルコキシアミノ−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ−〔ｂ，ｆ〕−アゼピン、その塩及びそれらの製造方法
HU212571B (en) Process for producing pyrimido[6,1-d]isoquinoline derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
IE64369B1 (en) New amino-chromanol derivatives process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them

Legal Events

Date Code Title Description
HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee