HU203045B - Process for stabilizing pharmaceutically active proteins in hydrogels - Google Patents
Process for stabilizing pharmaceutically active proteins in hydrogels Download PDFInfo
- Publication number
- HU203045B HU203045B HU884894A HU489488A HU203045B HU 203045 B HU203045 B HU 203045B HU 884894 A HU884894 A HU 884894A HU 489488 A HU489488 A HU 489488A HU 203045 B HU203045 B HU 203045B
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- water
- emulsion
- hydrogel
- oil
- emulsifier
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/217—IFN-gamma
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
A találmány tárgyát helyileg alkalmazható hidrogclek új stabilizálási eljárása képezi, amelyek egy vagy több gyógyászatilag hatásos proteint, valamint szokásos adalékanyagokat tartalmaznak, és a készítményeket hidrofób anyag hozzáadásával stabilizáljuk.
A gyógyászatilag hatásos proteinek helyi alkalmazásánál az egyik leglényegesebb követelmény ezek stabilizálása a gyógyszerkészítményekben. A stabilitást megfelelő hosszú időtartamon át biztosítani kell, mint a tárolás alatt hűtőszekrényben vagy szobahőmérsékleten, mind testhőmérsékleten, ezenkívül több órán át in situ. Tekintettel ezekre a követelményekre, tökéletesen kielégítő megoldást ezideig nem sikerült találni. Különböző anyagokat javasoltak már interferonok stabilizálására, amikor például hidroxí-etil-celluíózt használtak mint hordozóanyagot interferontartalmú gélek vagy kenőcsök előállítására. Ennél azonban a felhasználási körülmények között az interferonok hatáscsökkenése lépett fel, ami csak egy proteáz-inhibitor hozzáadásával volt csökkenthető (EP-A-142 345. számú európai szabadalmi bejelentés).
Interferonok stabilizálására gélekben, kenőcsökben és hasonlókban javasoltak különböző cukoralkoholokat is, adott esetben cukorsavakkal vagy ezek sóival, enyhe redukálószerekkel, anionos tenzidekkel vagy ezen anyagok kombinációival együtt (EPA-80879. számú európai szabadalmi bejelentés).
Proteinek és polipeptidek, így interferonok, elsősorban az IFN-gamma stabilizálására parenterális beadási formákban javasolták egy fizikailag és kémiailag módosított zselatin felhasználást, mindenekelőtt a humán szérumalbumin helyettesítése szempontjából (EP-A-162 332. számú európai szabadalmi bejelentés).
A JP-A-61-277 633. számú nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés interferonok stabilizálását ismerteti oldatban, bizonyos felületaktív anyagokkal.
Az EP-A-135 171. számú európai szabadalmi bejelentésben olaj/víz mikroemulziókhoz a humán szérumalbumint javasolták megfelelő stabilizátorként.
AzIFN-béta/9-(l,3-dihidroxi-2-propoxi-metil)guanin (DHPG) szinergetikus kombináció helyi alkalmazásához kenőcs alakjában az US-PS-4 606 917. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerint stabilizátorokként albumint, dextrózt és pufferanyagokat javasoltak.
A gyógyászatilag hatásos proteinek stabilizálására eddig javasolt anyagokkal stabilizáló hatást — elsősorban hidrogélekben — a szükséges mértékben nem tudtak elérni.
A találmány feladata gyógyászatilag hatásos proteineknek helyileg alkalmazandó hidrogélekben, olyan stabilizátort rendelkezésre bocsátani, amely fiziológiás elviselhetősége mellett megfelel az összes követelményeknek, amelyeket az ilyen készítményektől elvárunk, mindenekelőtt a hatóanyag optimális felhasználhatóságát és aktivitásának meghatározását, valamint a lehetőség szerint kíméletes előállítási módot tekintve, amely a proteinek nyíróerők elleni érzékenységét számításba veszi.
Ebből a feladatból kiindulva az anyagok különböző osztályait vizsgáltuk meg, hogy mennyire alkalmasak ennek a feladatnak a megoldására.
Meglepő módon azt találtuk, hogy hidrofób anyagok mint adalékanyagok a legfinomabb eloszlásban, elsősorban paraffinolajok, már igen kis mennyiségben stabilizáló hatást fejtenekki a különböző, gyógyászatilag hatásos proteinekre, s ez a hatás az eddig javasolt anyagok hatását felülmúlja. Ez az eredmény annál meglepőbb, mivel a technika állásához tartozó, helyileg alkalmazható gyógyszerkészítmények, így a kenőcsök, amelyekben a hidrofób anyagok mint hordozók megfelelő nagy arányban vannak bekeverve, a stabilizátorok külön hozzáadását igénylik.
A találmány a feladatot úgy oldja meg, hogy a helyi alkalmazásra szolgáló hidrogélekben, a gyógyászatilag hatásos proteinekstabilizálására fiziológiásán elviselhető hidrofób anyagokat, elsősorban paraffinolajokat használ. A stabilizáló mennyiségben alkalmazott, finomeloszlású formában lévő hidrofób anyagok hozzáadásával olyan gyógyszerkészítményeket kapunk, amelyek a felhasználási körülmények között a hatóanyagot hosszú időtartamon át aktív formában tartják. A találmány szerint előállított gyógyszerkészítményekben, 4-8 °C-on tárolva, a proteinek aktivitása legalább 12 hónap időtartamon át lényegileg változatlan marad. A találmány egy további előnye az, hogy az ilyen készítményeknél kisebbek a követelmények a pH-érték pontos betartását illetően, mivel hidrofób anyagok stabilizáló hozzáadása a proteinek érzékenységét a pHérték ingadozásai iránt csökkenti. Ez az előny mindenekelőtt akkor jön számításba, ha olyan alkalmazások vannak előirányozva, amelyek alacsonyabb pH-értéket igényelnek, példáula vagina területén történő alkalmazások.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmények — ha hidrogél formájában vannak jelen — még azt az előnyt is biztosítják, hogy alkalmazásuk igen kellemes. A hidrofób anyagok jelenléte által ugyanis a felhordott réteg a gél beszáradása után is megtartja simulékonyságát, ami mindenekelőtt az ajak területén kiváltképpen előnyös,
A hidrofób anyagok előnyös stabilizáló hatása a proteinekre valószínűleg a hidrofób kölcsönhatásra vezethető vissza, amire eddig nem vagy túlságosan kis mértékben ügyeltek. A proteinek stabilizálásánál a technika állása szerint nyilvánvalóan a két következő funkciós elv alkalmazásából indultak ki: a) az anyag stabilizálása a proteinen komplex kötéssel, és ezáltal a proteinmolekula sztérikus rögzítése; b) a szabad víz (Bulkwasser) megkötése poláris anyagokkal, és így a protein stabilizálása hidrátburkának befolyásolásával. A jelen találmánynál valószínűleg számításba jövő hidrofób kölcsönhatások — ahogyan ezek a micelláris szerkezeteknél is fellépnek — ellenben feltehetően úgy fejtenek ki stabilizáló hatást, hogy a protein hidrofób részeit. — amelyek a hidrofób és hidrofil amínosavesoportok térbeli eloszlása alapján létrejönnek — az olaj/víz fázishatár-felületen fixálják úgy, hogy a hidrofób tartományok az olajcseppekbe, a hidrofil részek pedig a poláris fázisba kerülnek.
A találmány tárgyát tehát a bevezetésben emlí-2HU 203046Β tett gyógyszerkészítmények képezik, amelyek egy vagy több fiziológiásán elviselhető hidrofób anyagot, elsősorban paraffinolajat, a proteint stabilizáló mennyiségben, finom eloszlásban tartalmaznak. Hidrofób anyagokként az előnyösen használt paraffinolajak mellett számításba vehetők még a nagyobb molekulájú zsírsavak, így a linolsav és palmitinsav, nagyobb molekulájú alkoholok, így a mirísztilalkohol vagy zsírsavészterek, így trigliceridek vagy módosított, például polioxietilénezett és glikozilált gliceridek (LabrafilR), egyenként vagy keverékben. A paraffinok jók közül megfelelnek a folyékony, a hígan folyó és a sűrűn folyó paraffinolajok (Ph. Eur. és USP) vagy ezek keverékei. A készítmény a hidrofób anyagokat 0,1-3,0% mennyiségben tartalmazza.
Abból a célból, hogy a stabilizátorok finom eloszlásának kialakítását és ennek az eloszlásnak az állandóságát biztosítsuk, a készítményekhez emulgeátorokat adhatunk. Ezek mennyisége mindenekelőtt a stabilizátor fa jtájától és mennyiségétől, a hordozótól, valamint a hidrogélek esetében ezek viszkozitásától függ, általában legfeljebb 1%. Emulátorokként mindenekelőtt a nem-ionos emulgeátorok, így poliszorbátok (polioxietilén-szorbitán-monolaurát, például TweenR 20), nonoxinol (polioxietilén-nonil-feniléter, például TritonR N101, Triton1'NI 11), Doloxamer (polietilén-polipropilén-glikol, Pluronic1' F68) jönnek számításba. Ha a gyógyszerkészítmény hidrogélként van jelen, akkor az emulgeátorok a stabilizátor finom eloszlatása mellett még a gél fedőképességét is javítják.
A találmány szerinti gyógyszerkészítmények az alábbi emberi és állati proteinek alkalmazására felelnek meg, beleértve ezek szerkezetileg hasonló bioaktív ekvivalenseit (az ilyen ekvivalensek alatt azokat a proteineket értjük, amelyek eltérő aminosavszekvencia mellett lényegileg azonos biológiai hatást mutatnak): citokinek, például interferonok, így a huIFN-alfa, huIFN-béta, huIFN-gamma, huIFNomega, hibridinterferonok, állati interferonok, így az EqlFN-béta, EqlFN-gamma vagy limfokinek, így az interleukin-2, TNF-béta vagy monokinek, így az interleukin-1, TNF-alfa, növekedési faktorok, például epidermális növekedési faktorok (EGF); antikoagulánsok, például vaszkulárisan antiokoaguláló proteinek (például VAC-alfa, VAC-béta), antitrombinok, fibrinoldó anyagok, például tPA, urakináz; allergia elleni proteinek, például az IgE-kötési faktor; gyógyászatilag hatásos enzimek, például a lizozim és szuperoxid-dizmutázok.
Az alkalmazásra kerülő proteinek természetes eredetűek vagy rekombináns úton előállítottak lehetnek. Az indikáció-spektrumot az alkalmazandó protein biológiai aktivitása szabja meg; a mindenkori protein specifikus spektrumán belül valamennyi alkalmazás lehetséges, amely a hatóanyag helyi felhasználását igényli. A gyógyszerkészítmény gyógyászatilag hatásos proteintartalmát természetesen a protein hatóereje, a mindenkori indikáció követelményei, valamint az alkalmazási formák szabják meg. Ez széles mennyiségi tartománt foglalhat magába.
A segédanyagok felhasználását a mindenkori választott alkalmazási forma szabja meg, emellett ügyelni kell arra, hogy ezek fajtája és mennyisége a protein stabilitását ne befolyásolja károsan.
Adalékanyagokként a találmány szerinti gyógyszerkészítmények tartalmazhatnak konzerv5 álószereket, így p-hidroxi-benzoesav-észtereket (nipa-észter, metilparaben), szorbinsavat, klórhexidin-diglükonátot, benzalkonium-kloridot és hexadecil-trimetil-ammónium-bromidot.
A hatóanyag bőrön át való felvételének meggyor10 sítása céljából a gyógyszerkészítményekhez permeációs gyorsítókat, így dimetil-szulfoxidot vagy tauroglikolsavat adhatunk.
Mint hidrogélképzők megfelelnek többek között a zselatin és a cellulóz-származékok, így a metil-cel15 lulóz, hidroxi-propil-cellulóz és kiváltképpen előnyösek a hidroxi-etil-cellulóz, továbbá a szintetikus polimerek, így a polivinilalkoholok. Az alkalmazott hidrogélképzőknek, illetve ezek keverékeinek fajtáját és mennyiségét a mindenkor megkívánt viszkozitás szabja meg. A stabilizátor finom eloszlását tekintve, ebben az összefüggésben ügyelni kell arra, hogy a gél nagyobb viszkozitásánál az emulzió tartósságát bizonyos körülmények között már a hidrogélképző-tartalom kielégítő mértékben bizto25 sít ja, és így egy emulgeátor hozzáadását szükségtelenné teszi.
Az alkalmazott puférrendszereket a mindenkori proteinhez megfelelő optimális pH-értéktől függően, a mindenkori alkalmazással összehangolva kell megválasztani, számításba vehetők szerves és szervetlen puff erők, például szukcinát-, acetát- és foszfát-pufferok.
A használt hordozóanyagot az alkalmazási forma szabja meg, ha a gyógyszerkészítmény hidrogél, akkor a hordozó víz.
Az adott esetben alkalmazott adalékanyagokhoz tartoznak még a nedvesen tartó anyagok, így glicerin, szorbit, 1,2-propilén-glikol, butilén-glikol, valamint a poliolok.
A hidrogél formájú találmány szerinti készítmények az alacsony olajtartalom miatt úgynevezett „alacsonytöltésű” emulziók, amelyek ismert módon könnyen megbomlanak. Az ilyen emulziók tartósságát tekintve tehát ezek előállítása különleges jelentőséggel bír.
Abból a célból, hogy egy stabil emulziónak, amelyben a stabilizátor finom eloszlásának tartóssága és ezzel a hatása hosszú időtartamon át adva van, lehetőleg kíméletes, viszonylag csekély techni50 kai ráfordítással járó előállítását biztosítsuk, a találmány szerinti készítmények, elsősorban a hidrogélek előállításánál előnyösen két műveletes eljárást alkalmazunk.
Az első műveletben a víz (stabilizátor) adott eset55 ben emulgeátor rendszerben fázisváltást hajtunk végre egy víz/olaj emulzióból olaj/víz emulzióba, és az így kapott finom előemulziót a vizes fázis főtömegével egyesítjük.
Kiváltképpen előnyösen járunk el a következő60 képpen: először az ún. „kontinentális” módszerrel előemulziót készítünk: az emulgeátort a paraffinolajban eloszlatjuk és lassan vizet adunk hozzá, amíg igen durva víz/olaj emulzió képződik. Ebben a stádiumban — amit tapasztalat szerint körülbelül
20-40% vízmennyiségnél érünk el — a keverést le3
-3HU 203045Β állítjuk és az emulziót rövid ideig ülepedni hagyjuk.
Ezután az emulziót újra keverjük és körülbelül 50% vízmennyiség eléréséig vizet adunk hozzá, ekkor az emulzió finom olaj/víz emulzióba vált át. A második eljárási művelet során az így kapott előemulziót a 5 pufferoldatba bekeverjük és diszpergáljuk, majd hozzáadjuk a hidrogélképzőt és duzzadni hagyjuk.
A protein-oldat hozzáadásának időpontja nem kritikus, ezt előnyösen utolsó műveletként végezzük. A találmány szerinti előnyös eljárással igen stabil 10 emulziókat kapunk, amelyek szobahőmérsékleten fél évig tárolva sem hajlamosak a krémesedésre.
Kisebb tételeknél, valamint ha műszakilag jobb homogenizátorok, így porlasztó-homogenizá torok állnak rendelkezésre, akkor egy olaj/víz emulzió el- 15 őállítását előemulzió készítése nélkül, egyetlen műveletben is elvégezhetjük, a találmány szerinti előnyös eljárás az emulzió stabilitása mellett egyszerű, csekély energetikai és műszaki ráfordítást igénylő és egyidejűleg kíméletes előállítást tesz le- 20 hetővé.
Az alábbi példák a találmányt gyógyászatilag hatásos proteinekként IFN-alfa, IFN-gamma és TNFalfa proteinekkel készített hidrogél-készítmények alapján szemléltetik. 25
1. példa Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: IFN-gamma | 0,1 g |
metil-paraben | 0,2 g |
nátrium-dihidrogén-foszfát-monohidrát | 0,05 g |
dikálium-hidrogén- -foszfát-trihidrát | 0,04 g |
Natrosol 250 HX (hidroxil-etil -cellulóz) | 1,75 g |
Polisorbat 20 | 0,1 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 1,0 g |
víz, ionmentesített 100 g-ra | 96,76 g |
A hidrogén előállítását az előnyös, kétműveletes |
eljárással végezzük a következőképpen:
a) Az előemulzió előállítása ’C hőmérsékletű vízben (az összmennyiség kb.
90%-a) keverés közben feloldjuk a foszfátokat és a 45 metil-paraben konzerválószert, és ezután az oldatot szobahőmérsékletre lehűtjük. A polisorbat 20 emulgeátort a paraffinolajban gyorsforgású homogenizátorral eloszlatjuk, és lassan, keverés közben annyi vizet adunk hozzá, amíg körülbelül 30%-os 50 durva víz/olaj emulziót kapunk. Ezt az emulziót rövid ideig állni hagyjuk, ekkor szétválik. Ekkor a keverőt újra bekapcsolva az emulziónál fázisváltást idézünk elő, s így igen finom eloszlású olaj/víz emulziót kapunk. 55
b) a hidrogél előállítása
A sterilen szűrt pufferoldatba bekeverjük a paraffinolaj-emulziót és abban finoman eloszlatjuk.
Ezután az emulzióba míkrobiológiailag tiszta hidroxi-etil-cellulózt szórunk és keveréssel eloszlatjuk. 60 Abból a célból, hogy tökéletes duzzadást érjünk el, a gélt 10-15 órán át lamináris áramlással duzzadni hagyjuk. Végül lassan bekeverjük a 4 mg/ml-re beállított IFN-gamma-oldatot. A keveréket laminárisIevegő-áramlási körülmények között steril tubusok- 65 ba töltjük.
A tárolási kísérletek lefolyását az 1. ábra szemlélteti. Amint az a diagrammból látható, a paraffinolaj hozzáadása biztosítja az IFN-gamma aktivitásának megmaradását, amit az ELI&A-teszttel mértünk (az ELISA-tesztben használt antitestek megkötik azokat a biológiailag aktív proteineket, amelyekre specifikusak); a diagrammban látható csekély csökkenés a teszt szórását tekintve nem szignifikáns.
A 2. ábra ábra 0,5% zselatinnal, mint egy hidrogél-készítmény komponensével végzett összehasonlító kísérletet szemléltet, az 1. példa szerinti összetételben, de stabilizátor külön hozzáadása nélkül, amiből a zselatinnak az IFN-gammára kifejtett jelentős destabilizáló hatása kitűnik. Ha a zselatint hidrogélképzőként használjuk, akkor ezek szerint feltétlenül szükséges hatásos stabilizátort hozzáadni.
A 3. ábra a stabilitás alakulását szemlélteti 15 hónap időtartamon át (ezen az ábrán, valamint a 4„
5. és 6. ábrákon is, az ordinátára a gyógyászatilag hatásos protein koncentrációjának természetes logaritmusát vittük fel).
2. példa
Gcl előállítása
100 g gél tartalmaz:
IFN-gamma metilparaben nátrium-dihidrogén-foszfát-monohidrát dikálium-hidrogén-foszfát-trihidrát Natrosol 250HX (hidroxi-etü-cellulóz)
PluronicF68 paraffinolaj, hígan folyó víz, ionmentesített 100 g-ra
A foszfátokat, a metilparaben konzerválószert és a PluronicF68 emulgeátort 80 ’C hőmérsékletű vízben feloldjuk, majd az oldatot szobahőmérsékletre lehűtjük és sterilen szűrjük. Ezután a keverékhez adjuk a paraffinolajat és homogenizátorral eloszlatjuk, majd vákuumban, keverés közben hozzáadjuk a hidroxi-etil-cellulózt és végül a 4 mg/ml-re beállított IFN-gamma-oldatot. A gél letöltését az 1. példa szerint végezzük.
0,1 g 0,2 g 0,05 g ,1
0,04 g «
1,75 g 0,1 g
1,0 g 96,76 g
3. példa | |
Gél előállítása 100 g gél tartalmaz: TNF-alfa | 0,1 g |
metilparaben | 0,213 g |
nátrium-dihidrogén- -foszfát-monohidrát | 0,053 g |
dikálium-hidrogén- -foszfát-trihidrát | 0,0427 g |
Natrosol 250HX (hidroxi-etil-cellulóz) | 1.87 g |
Polysorbat 20 | 0,107 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 1,07 g |
víz, ionmentesített 100 g-ra | 96,5443 g |
A hidrogél előállítását az 1. példában megadott
-4HU 203045Β módon végezzük.
4. példa Gél előállítása 100 g gél tartalmaz:
IFN-alfa | 0,0005 g |
metilparaben | 0,2 g |
nátrium-dihidrogén- | |
-foszfát-monohidrát | 0,5 g |
dikálium-hidrogén- | |
-foszfát-trihidrát | 0,04 g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1,75 g |
Polysorbat20 | 0,1 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 1,0 g |
víz, ionmentesített 100 g-ra | 96,8595 g |
A hidrogél előállítását az 1. példában megadott módon végezzük
Natrosol 250HX (hidroxi-etil-cellulóz) 1.75 g mirisztilalkohol 1,0 g víz, ionmentesített 100 g-ra 96,91 g
A hidrogél előállítását a 2. példa szerint végezzük. Amirisztilalkoholt a körülbelül 60 ’C-ra felmelegített, sterilen szűrt pufferoldatban eloszlatjuk. A pufferoldatot lehűtjük, és a továbbiakban a 2. példában megadott módon járunk el.
5. példa Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: | |
IFN-gamma | 0,100g |
metilparaben | 0,2 g |
nátrium-dihidrogén- | |
-foszfát-monohidrát | 0,05 g |
dikálium-hidrogén- | |
-foszfát-trihidrát | 0,04 g |
tauroglikolsav | 0,01 g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1,75 g |
Polysorbat 20 | 0,1 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 1,0 g |
víz, ionmentesített 100 g-ra | 96,75 g |
A hidrogél előállítását az 1. példa szerint végez- | |
zük, de emellett a pufferoldatba bekeverjük a per- | |
meaciót gyorsító tauroglikolsavat. | |
6. példa | |
Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: | |
IFN-gamma | 0,05 g |
metilparaben | 0,2 g |
nátrium-dihidrogén- | |
-foszfát-monohidrát | 0,05 g |
dikálium-hidrogén- | |
-foszfát-trihidrát | 0,04 g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1,75 g |
Polysorbat 20 | 0,1 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 0,6 g |
paraffinolaj, sűrűn folyó | 0,4 |
víz, ionmentesített 100 g-ra | 96,81 g |
A hidrogél előállítását az 1. példa szerint végezzük.
8. példa Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: | |
IFN-gamma | 0,005 g |
metilparaben | 0,20 g |
szukcinátpuffer, pH=6,00 | 0,0191 g |
nátrium-klorid | 0,1435g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1,75 g |
Polysorbat 20 | 0,0952 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 0,952 g |
víz, ionmentesített | 100 g-ra |
A hidrogél előállítását az 1. példában megadott módon végezzük. A stabilitás alakulását a 4. ábra szemlélteti. Az 5. ábra egy összehasonlító kísérlet lefolyását szemlélteti, amelynél paraffinolaj hozzáadása nélkül ugyanazt a készítményt használtuk Az összehasonlító kísérlet szerint a stabilitás már rövid idővel az előállítás után csökken.
7. példa Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: IFN-gamma | 0,05 g |
metilparaben | 0,2 g |
nátrium-dihidrogén- -foszfát-monohidrát | 0,05 g |
dikálium-hidrogén- -foszfát-trihidrát | 0,04 g |
9. példa Gél előállítása | |
100 gél tartalmaz: | |
IFN-gamma | 0,025 g |
metilparaben | 0,20 g |
szukcinátpuffer, pH=6,2 | 0,2362 g |
nátrium-klorid | 0,8766 g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1,75 g |
Polysorbat 20 | 0,1 g |
LABRAFIL 1944CS | |
(anionos polioxietilén- | |
-glikolizált glicerid) | 1,0 g |
víz, ionmentesített | 100 g-ra |
A hidrogél előállítását az | 1. példában megadott |
módon végezzük. | |
10. példa | |
Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: | |
IFN-gamma | 0,025 g |
metilparaben | 0,20 g |
szukcinátpuffer, pH= 6,2 | 0,2362 g |
nátrium-klorid | 0,8766 g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) 1,75 g | |
Polysorbat 20 | 0,1 g |
LABRAFIL 2735 CS | |
(nemionos polioxietilén- | |
-glikolizált glicerid) | 1,0 g |
víz, ionmentesített | 100 g-ra. |
A hidrogél előállítását az 1. példában megadott |
módon végezzük.
-5HU 203045Β
11. példa | |
Gél előállítása 100 g gél tartalmaz: | |
IFN-gamma | 0,025 g |
metilparaben | 0,20 g |
szukcinátpuffer, pH- 6,2 | 0,2362 g |
nátrium-klorid Natrosol 250 HX | 0,90 g |
(hiodroxi-etil-cellulóz) | 1,75 g |
Polysorbat 20 | 0,1 g |
mirisztilalkohol | i,0g |
víz, ionmentesített | 100,0 g-ra. |
A hidrogél előállítását a következőképpen végez- | |
zük: a mirisztilalkoholt 50- | -60 °C hőmérsékleten |
megolvasztjuk, és elkészítjük az előemulziót az 1. példa szerint, de 50-60 ”C-on. A továbbiakban az 1. | |
példa szerint járunk el. A stabilitás alakulását a 6. | |
ábra szemlélteti. | |
12. példa Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: TFN-béta | 0,05 g |
metilparaben nátrium-dihidrogén- | 0,2 g |
-foszfát-monohidrát | 0,05 g |
dikálium-hidrogén- -foszfát-trihidrát Natrosol 250HX | 0,04 g |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1.75 g |
Polysorbat 20 | 0,2 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 2,0 g |
víz, ionmentesített | 100,0 g-ra |
A hidrogél előállítását az módon végezzük. | 1. példában megadott |
13. példa Gél előállítása | |
lOOggél tartalmaz: | |
lizozim | 2,4 egység (Mio) |
metilparaben nátrium-dihidrogén- -foszfát-monohidrát dikálium-hidrogén- | 0.2 g 0,05 g |
-foszfát-trihidrát Natrosol 250HX | 0,04 g |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1.75 g |
Polysorbat 20 | 0.2 g |
parafflnolaj, hígan folyó | 2,0 g |
víz, ionmentesített | 100 g-ra |
A hidrogél előállítását az 1. példában megadott | |
módon végezzük. | |
14. példa Gél előállítása | |
100 g gél tartalmaz: VAC-alfa | 0,03 g |
metilparaben nátrium-dihidrogén- | 0,2 g |
-foszfát-monohidrát díkálium-hídrogén- | 0,05 g |
-foszfát-trihidrát | 0,04 g |
Natrosol 250HX | |
(hidroxi-etil-cellulóz) | 1.75 g |
Polysorbat 20 | 0,1 g |
paraffinolaj, hígan folyó | 1.0 g |
víz, ionmentesített | 100 g-ra |
A hidrogél előállítását az 1. példában megadott módon végezzük.
Claims (8)
1. Eljárás a citokinek, limfokinek, monokinek, növekedési faktorok, antikoagulánsok, fibrinoliti15 kumok és enzimek csoportjába tartozó, gyógyászatilag hatásos emberi és állati proteineket—beleértve biológiailag aktív szerkezeti ekvivalenseiket — hatóanyagként tartalmazó, helyileg alkalmazható, stabil hidrogélek előállítására a hatóanyagnak hid20 rogélképzó'vel, pufferrel és adott esetben emulgeátorral, konzerválószerrel, nedvesítőszerrel, permeációs gyorsítóval víz jelenlétében való összekeverésével, azzal jellemezve, hogy a készítményt 0,1-3,0 tömeg% hidrofób anyag hozzákeverésével stabili25 záljuk.
2. Az 1. igénypont szerint eljárás, azzal jellemezve, hogy hidrofób anyagként paraffinolajat vagy paraff inolajelegyet alkalmazunk.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal 30 jellemezve, hogy a hidrofób anyag finom eloszlására szolgáló emulgeátort, előnyösen nemionos emulgeátort alkalmazunk.
4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy hidrogélképzőként cel35 lulózszármazékot alkalmazunk.
5. A 4. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy cellulóz-származékként hidroxi-etil-cellulózt alkalmazunk.
6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljá40 rás, azzal jellemezve, hogy fiziológiásán elviselhető konzerválószert, előnyösen p-hidroxi-benzoesavésztert alkalmazunk.
7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a hidrofób anyagból és
45 vízből és adott esetben emulgeátorból keveréssel víz/olaj emulziót képzőnk, ezt fázisváltással olaj/víz emulzióvá alakítjuk, és a kapott emulziót a többi alkotórészt tartalmazó vizes oldathoz keverjük.
8. A 7. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemez50 ve, hogy hidrofób anyaghoz és az abban adott esetben jelenlévő finomeloszlású emulgeátorhoz keverés közben vizet adunk, a keverést a képződött durva víz/olaj emulzió ülepedéséig megszakítjuk, majd további keveréssel és körülbelül 50%-ig víz további
55 hozzáadásával fázisváltással finom olaj/víz emulziót képzünk, ezt az előemulziót az adott esetben konzerválószert és további adalékanyagokat tartalmazó pufferoldatban finoman eloszlatjuk, a hidrogélképzőt belekeverjük, és a gélt duzzadni hagyjuk, vé60 gül a proteint hozzáadjuk.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19873731255 DE3731255A1 (de) | 1987-09-17 | 1987-09-17 | Stabilisierung von therapeutisch wirksamen proteinen in pharmazeutischen zubereitungen |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
HUT47436A HUT47436A (en) | 1989-03-28 |
HU203045B true HU203045B (en) | 1991-05-28 |
Family
ID=6336244
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
HU884894A HU203045B (en) | 1987-09-17 | 1988-09-16 | Process for stabilizing pharmaceutically active proteins in hydrogels |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0307857B1 (hu) |
JP (1) | JP2783552B2 (hu) |
KR (1) | KR970008112B1 (hu) |
AT (1) | ATE126063T1 (hu) |
AU (1) | AU615473B2 (hu) |
CA (1) | CA1329121C (hu) |
DD (1) | DD274562A5 (hu) |
DE (2) | DE3731255A1 (hu) |
DK (1) | DK516288A (hu) |
ES (1) | ES2077559T3 (hu) |
FI (1) | FI95770C (hu) |
GR (1) | GR3017432T3 (hu) |
HU (1) | HU203045B (hu) |
IE (1) | IE70908B1 (hu) |
IL (1) | IL87778A (hu) |
NO (1) | NO179436C (hu) |
NZ (1) | NZ226209A (hu) |
PT (1) | PT88539B (hu) |
RU (1) | RU2093145C1 (hu) |
ZA (1) | ZA886903B (hu) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5332577A (en) * | 1988-12-27 | 1994-07-26 | Dermamed | Transdermal administration to humans and animals |
US5241925A (en) * | 1988-12-27 | 1993-09-07 | Dermamed | Apparatus and techniques for administering veterinary medicaments |
US5130298A (en) * | 1989-05-16 | 1992-07-14 | Ethicon, Inc. | Stabilized compositions containing epidermal growth factor |
US5324521A (en) * | 1989-12-18 | 1994-06-28 | Dermamed | Systems for transdermal administration of medicaments |
JPH0776527A (ja) * | 1993-06-28 | 1995-03-20 | Hayashibara Biochem Lab Inc | 半固形製剤とその製造方法 |
ITMI20031640A1 (it) * | 2003-08-08 | 2005-02-09 | Mipharm S P A | Base per gel bioadesivi. |
CU23432B6 (es) * | 2005-11-02 | 2009-10-16 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Formulaciones estabilizadas que contienen a los interferones gamma y alfa en proporciones potenciadoras |
ES2454776T3 (es) | 2010-05-04 | 2014-04-11 | Viscogel Ab | Composición de quitosano |
CA3066722A1 (en) * | 2017-06-12 | 2018-12-20 | Lakewood Amedex, Inc | Bisphosphocin gel formulations and uses thereof |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5413223A (en) * | 1977-07-01 | 1979-01-31 | Ricoh Co Ltd | Printer unit |
GB2016015B (en) * | 1978-01-22 | 1982-05-06 | Hayashibara Co | Method of preparing interferon and preparations containing interferon |
JPS5598118A (en) * | 1979-01-18 | 1980-07-25 | Hayashibara Takeshi | Preparation of type-2 interferon and drug containing the same |
FR2513124B1 (fr) * | 1981-07-21 | 1989-11-17 | Hayashibara Biochem Lab | Production et applications du facteur de lyse des cellules-cibles |
CA1190148A (en) * | 1981-10-13 | 1985-07-09 | Samuel S. Asculai | Interferon-containing compositions |
JPS5892622A (ja) * | 1981-11-28 | 1983-06-02 | Sunstar Inc | インタ−フエロン安定配合製剤 |
US4659696A (en) * | 1982-04-30 | 1987-04-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use |
JPS5910524A (ja) * | 1982-07-08 | 1984-01-20 | Toray Ind Inc | インタ−フエロン組成物およびその製造法 |
JPS6061535A (ja) * | 1983-08-24 | 1985-04-09 | エフ・ホフマン・ラ・ロシユ・ウント・コンパニ−・アクチエンゲゼルシヤフト | 製薬学的組成物 |
EP0177342A3 (en) * | 1984-10-04 | 1987-12-02 | Genentech, Inc. | Oral formulation of therapeutic proteins |
DE3603444A1 (de) * | 1986-02-05 | 1987-08-06 | Thomae Gmbh Dr K | Pharmazeutische zubereitungsformen zur stabilisierung von interferon alpha |
US4822605A (en) * | 1986-02-18 | 1989-04-18 | Exovir, Inc. | Compositions and methods employing the same for the treatment of viral and cancerous skin lesions and the like |
-
1987
- 1987-09-17 DE DE19873731255 patent/DE3731255A1/de not_active Ceased
-
1988
- 1988-09-13 ES ES88114944T patent/ES2077559T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-13 AT AT88114944T patent/ATE126063T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-09-13 DE DE3854290T patent/DE3854290D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-13 EP EP88114944A patent/EP0307857B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-15 FI FI884240A patent/FI95770C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 JP JP63232113A patent/JP2783552B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 PT PT88539A patent/PT88539B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 ZA ZA886903A patent/ZA886903B/xx unknown
- 1988-09-16 CA CA000577614A patent/CA1329121C/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 DK DK516288A patent/DK516288A/da not_active Application Discontinuation
- 1988-09-16 IL IL87778A patent/IL87778A/xx active Protection Beyond IP Right Term
- 1988-09-16 HU HU884894A patent/HU203045B/hu unknown
- 1988-09-16 KR KR1019880011951A patent/KR970008112B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 AU AU22316/88A patent/AU615473B2/en not_active Expired
- 1988-09-16 DD DD88319876A patent/DD274562A5/de not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 NO NO884123A patent/NO179436C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 IE IE281288A patent/IE70908B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 NZ NZ226209A patent/NZ226209A/en unknown
-
1992
- 1992-04-24 RU SU925011455A patent/RU2093145C1/ru active
-
1995
- 1995-09-18 GR GR950402557T patent/GR3017432T3/el unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL87778A (en) | 1993-05-13 |
NO179436C (no) | 1996-10-09 |
KR970008112B1 (ko) | 1997-05-21 |
ZA886903B (en) | 1990-05-30 |
NO884123L (no) | 1989-03-20 |
PT88539B (pt) | 1992-11-30 |
NO179436B (no) | 1996-07-01 |
NZ226209A (en) | 1991-06-25 |
FI884240A0 (fi) | 1988-09-15 |
JPH01102029A (ja) | 1989-04-19 |
ES2077559T3 (es) | 1995-12-01 |
FI884240A (fi) | 1989-03-18 |
EP0307857B1 (de) | 1995-08-09 |
PT88539A (pt) | 1988-10-01 |
DE3854290D1 (de) | 1995-09-14 |
JP2783552B2 (ja) | 1998-08-06 |
FI95770B (fi) | 1995-12-15 |
KR890004719A (ko) | 1989-05-09 |
NO884123D0 (no) | 1988-09-16 |
DD274562A5 (de) | 1989-12-27 |
ATE126063T1 (de) | 1995-08-15 |
DK516288D0 (da) | 1988-09-16 |
RU2093145C1 (ru) | 1997-10-20 |
CA1329121C (en) | 1994-05-03 |
IE882812L (en) | 1989-03-17 |
IE70908B1 (en) | 1997-01-15 |
AU2231688A (en) | 1989-03-23 |
IL87778A0 (en) | 1989-03-31 |
DK516288A (da) | 1989-03-18 |
DE3731255A1 (de) | 1989-04-06 |
EP0307857A1 (de) | 1989-03-22 |
FI95770C (fi) | 1996-03-25 |
AU615473B2 (en) | 1991-10-03 |
HUT47436A (en) | 1989-03-28 |
GR3017432T3 (en) | 1995-12-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CA1254832A (en) | Interferon administration vehicles | |
US5705485A (en) | Gel formulations containing growth factors | |
US5272135A (en) | Method for the stabilization of methionine-containing polypeptides | |
US5385738A (en) | Sustained-release injection | |
US4647454A (en) | Stable interferon β composition and a method of stabilizing interferon β | |
EP0374257A1 (en) | STABLE INTERFERON $g(b) COMPOSITION | |
EP0618808B1 (en) | Gonadotropin containing pharmaceutical compositions with sucrose stabilizer | |
JP2004285079A (ja) | 徐放性タンパク質製剤 | |
KR20080045300A (ko) | 안정한 비수성 단일상 점성 비히클 및 그 비히클을이용하는 제형물 | |
EP0140255B1 (en) | Sustained-release injections | |
HU203045B (en) | Process for stabilizing pharmaceutically active proteins in hydrogels | |
HU196560B (en) | Process for production of medical plants containing interferon-alpha | |
US6025396A (en) | Stable prostaglandin E1-containing injectable composition | |
EP1424066A1 (en) | Dry compositions comprising hydrophobic stabilisers | |
EP0251001B1 (de) | Stabilisierung eines für therapeutische Zwecke bestimmten Interleukin-2-Präparates | |
US5266310A (en) | Stabilization of therapeutically active proteins in pharmaceutical preparations | |
US4824674A (en) | Stable alpha-interferon dosage forms | |
EP0641216B1 (en) | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING IL-6 stabilized with a non-reducing sugar | |
US4851220A (en) | Stable oleaginous gel | |
JP3608802B2 (ja) | 安定なカルシトニン医薬組成物及びその製造法 | |
KR19990009888A (ko) | 콜로니 자극 인자의 안정한 용액 제형 | |
JPH05331069A (ja) | 腫瘍壊死因子の凍結乾燥製剤 |