HRP20040567A2 - Fused heterocyclic succinimide compounds and analogs thereof, modulators of nuclear hormone receptor function - Google Patents

Description

Ova prijava ima pravo prvenstva nad i dijelom je produžetak U.S. Prijave serijski Br. 10/025,116, podnesene 19. prosinca 2001. i nad U.S. Prijavom serijski Br. 60/233,519, koja je podnesena 19. rujna 2000., nad U.S. Prijavom serijski Br. 60/284,730, podnesenom 18. travnja 2001. i, nad U.S. Prijavom serijski Br. 60/284,438, podnesenom 18. travnja 2001., koje su, privremene prijave, ovim patentom obuhvaćene u cijelosti kao referenca i dalje, ima prednost nad i dijelom je nastavak U.S. Prijave serijski Br. 09/885,381, podnesene 20. lipnja 2001. i, nad U.S. Prijavom serijski Br. 09/885,827, podnesenom 20. lipnja 2001. koje su, prijave, ovim patentom obuhvaćene u cijelosti kao reference.

Područje izuma

Ovaj izum se odnosi na spojene ciklične spojeve, postupke upotrebe takvih spojeva u liječenju stanja povezanih sa nuklearnim hormonskim receptorom, kao što je rak i, na farmaceutske smjese koje sadrže takve spojeve.

Pozadina izuma

Nuklearni hormonski receptori (NHR) čine veliku super-porodicu faktora transkripcije koji su ligand-zavisni i specifični za sekvencu. Članovi ove porodice utječu na transkripciju bilo izravno, preko specifičnog vezanja za promoterske ciljne gene (Evans, u: Science 240: 889-895 (1988)) ili neizravno, putem interakcija protein-protein sa drugim faktorima transkripcije (Jonat et al., Cell 62:1189-1204 (1990), Schuele et al., Cell 62:1217-1226 (1990) i Yang-Yen et al., Cell 62:1205-1215 (1990)). Super-porodica nuklearnog hormonskog receptora (također, u struci poznata kao “super-porodica receptora steroidnih/tiroidnih hormona”) obuhvaća receptore za raznovrsne hidrofobne ligande, uključujući: kortizol, aldosteron, estrogen, progesteron, testosteron, vitamin D3, tiroidni hormon i retinoičnu kiselinu (Evans, 1988, supra). Osim ovih konvencionalnih nuklearnih hormonskih receptora, super-porodica obuhvaća brojne proteine koji nemaju poznate ligande, a nazvani su “orphan” nuklearni hormonski receptori (Mangelsdorf et al., Cell 83:835-839 (1995), O’Malley et al., Mol. Endocrinol. 10:1293 (1996), Enmark et al., Mol. Endocrinol. 10:1293-1307 (1996) and Giguere, Endocrin. Rev. 20, 689-725 (1999)). Konvencionalni nuklearni hormonski receptori su općenito transaktivatori u prisutnosti liganda i, mogu biti ili aktivni represori ili transkripcijski inertni u odsutnosti liganda. Neki od orfanskih receptora, ponašaju se kao da su transkripcijski inertni u odsutnosti liganda. Drugi, međutim, ponašaju se bilo kao konstitutivni aktivatori, bilo represori. Ovi orfanski nuklearni hormonski receptori su ili pod kontrolom sveprisutnih liganada, koji nisu identificirani, ili nije neophodno da se vežu za ligand kako bi pokazali ove aktivnosti.

Zajedničko sa drugim faktorima transkripcije, nuklearni hormonski receptori imaju modularnu strukturu, koju čine tri posebne domene: N-terminalna domena promjenljive veličine koja sadrži transkripcijsku aktivacijsku funkciju AF-1, visoko očuvanu DNK vezujuću domenu i srednje očuvanu ligand-vezujuću domenu. Ligand-vezujuća domena nije samo odgovorna za vezanje specifičnog liganda već, također, sadrži transkripcijsku aktivacijsku funkciju, nazvanu AF-2 i dimerizacijsku domenu (Wurtz et al., Nature Struc. Biol. 3, 87-94 (1996), Parker et al., Nature Struc. Biol. 3, 113-115 (1996) i Kumar et al., Steroids 64, 310-319 (1999)). Iako ukupna proteinska sekvenca ovih receptora može značajno varirati, svi dijele kako zajednički strukturni raspored, indikativan za odstupanje od naslijeđenog prototipa, tako i homologiju (osobito, istovjetnost sekvence) u ligand-vezujućoj domeni.

Nuklearni hormonski receptori koji vežu steroide (SB-NHR) uključuju podporodicu nuklearnih hormonskih receptora. Ovi receptori su srodni po tome što dijele jaču homologiju sekvence među sobom, osobito u ligand vezujućoj domeni (LBD), nego sa drugim članovima NHR super-porodice (Evans, 1988, vidi gore) i oni svi koriste ligande na bazi steroida. Neki primjeri ove podporodice NHR su: androgeni receptor (AR), estrogeni receptor (ER), progesteronski receptor (PR), glukokortikoidni receptor (GR), mineralokortikoidni receptor (MR), aldosteronski receptor (ALDR) i receptor za steroide i ksenobiotike (SXR) (Evans et al., WO 99/35246). Na osnovu jake homologije sekvence u LBD-u, nekoliko orfanskih receptora mogu, isto tako, biti članovi SB-NHR podporodice.

U skladu sa visokom homologijom sekvence koja je nađena u LBD za svaki SB-NHR, prirodni ligandi za svaki se izvode od zajedničke steroidne jezgre. Primjeri nekih liganada zasnovanih na steroidima koje koriste članovi SB-NHR uključuju: kortizol, aldosteron, estrogen, progesteron, testosteron i dihidrotestosteron. Specifičnost nekog liganda zasnovanog na steroidima za jedan SB-NHR u odnosu na drugi, postiže se različitom supstitucijom oko steroidne jezgre. Visok afinitet vezanja za posebni SB-NHR zajedno sa visokim nivoom specifičnosti za taj posebni SB-NHR, može se postići sa samo neznatnim strukturnim promjenama oko steroidne jezgre (npr., Waller et al., Toxicol. Appl. Pharmacol. 137, 219-227 (1996) i Mekenyan et al., Environ Sci. Technol. 31,3702-3711(1997), afinitet vezanja za progesteron prema androgenom receptoru u odnosu na testosteron).

Opisani su brojni sintetski izvedeni steroidni i ne-steroidni agonisti i antagonisti za članove SB-NHR porodice. Mnogi od ovih agonističkih i antagonističkih liganada se klinički koriste kod čovjeka u liječenju raznih medicinskih stanja. RU486 je primjer sintetskog agonista za PR, koji se koristi kao sredstvo za kontrolu rađanja (Vegeto et al., Cell 69:703-713 (1992)), a flutamid je primjer antagonista za AR, koji se koristi za liječenje raka prostate (Neri et al., Endo. 91, 427-437 (1972)). Tamoksifen je primjer specifičnog modulatora ER funkcije u tkivima, a koristi se u liječenju raka dojki (Smigel, J. Natl. Cancer Inst. 90, 647-648 (1998)). Tamoksifen može funkcionirati kao antagonist ER-a u tkivu dojki dok djeluje kao agonist ER-a u kosti (Grese et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 14105-14110 (1997)). Zbog tkivno selektivnih učinaka viđenih kod tamoksifena, ovo sredstvo i sredstva slična njemu se uzimaju kao “djelomični agonist” ili “djelomični-antagonist”. Osim sintetski izvedenih ne-endogenih liganada, ne-endogeni ligandi se za NHR mogu dobiti iz izvora hrane (Regal et al., Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 223, 372-378 (2000) i Hempstock et al., J. Med. Food 2, 267-269 (1999)). Flavonoidski fitoestrogeni su primjer neprirodnog liganda za SB-NHR, a mogu se lako dobiti iz izvora hrane kao što je soja (Quella et al., J. Clin. Oncol. 18, 1068-1074 (2000) i Banz et al., J. Med. Food 2, 271-273 (1999)). Mogućnost mijenjanja transkripcijske aktivnosti pojedinačnog NHR dodatkom malog molekulskog liganda, čini ih idealnom metom za razvoj farmaceutskih sredstava za razna bolesna stanja.

Kao što je gore spomenuto, ne-prirodni ligandi mogu biti sintetski konstruirani da služe kao modulatori funkcije NHR. U slučaju SB-NHR, izgrađivanje neprirodnog liganda može uključiti identifikaciju strukture jezgre koja imitira prirodni sustav steroidne jezgre. Ovo se može postići nasumičnim ispitivanjem prema nekolicini SB-NHR ili putem izravnih pristupa, upotrebom dostupnih kristalnih struktura raznih ligand-vežućih domena NHR (Bourguet et al., Nature 375, 377-382 (1995), Brzozowski et al., Nature 389, 753-758 (1997), Shiau et al., Cell 95, 927-937 (1998) i Tanenbaum et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 5998-6003 (1998)). Različita supstitucija oko takve jezgre koja imitira steroid može osigurati sredstva koja imaju selektivnost za jedan receptor u odnosu na druge. Osim toga, takve modifikacije se mogu koristiti za dobivanje sredstava koja imaju agonističku ili antagonističku aktivnost za posebni SB-NHR. Različita supstitucija oko jezgre koja imitira steroid može dovesti do formiranja serija agonista i antagonista visokog afiniteta koji su specifični za, na primjer, ER u odnosu na PR, u odnosu na AR, u odnosu na GR, u odnosu na MR. Takav pristup različitog supstituiranja je, na primjer, bio prijavljen za modulatore na bazi kinolina steroidnog NHR u J. Med. Chem., 41, 623 (1999); WO 9749709; US 5696133; US 5696130; US 5696127; US 5693647; US 5693646; US 5688810; US 5688808 i WO 9619458, koji su svi ovdje obuhvaćeni kao referenca.

Spojevi ovog izuma uključuju jezgru koja služi kao imitacija steroida, a korisni su kao modulatori funkcije nuklearnih hormonskih receptora koji vežu steroide, kao i drugog NHR, kao što je opisano u nastavku.

Sažetak izuma

Ovaj izum omogućuje spojene ciklične spojeve slijedeće formule I i njihove soli, spojevi koji su osobito korisni kao modulatori funkcije nuklearnog hormonskog receptora:

[image]

Kao što su korišteni u formuli I, kao i kroz opis patenta, simboli imaju slijedeća značenja, ukoliko nije drugačije naznačeno i, nezavisno se biraju u svakom pojavljivanju:

G je aril ili heterociklo (npr. heteroaril) grupa, u kojem je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja, poželjno sa: vodikom, alkilom ili supstituiranim alkilom, alkenilom ili supstituiranim alkenilom, alkinilom ili supstituiranim alkinilom, halo, cikloalkilom ili supstituiranim cikloalkilom, cikloalkenilom ili supstituiranim cikloalkenilom, arilom ili supstituiranim arilom, heterociklo ili supstituiranim heterociklo, arilalkilom ili supstituiranim arilalkilom, heterocikloalkilom ili supstituiranim heterocikloalkilom, CN, R1OC=O, R1C=O, R1C=S, R1HNC=O, R1R2NC=O, HOCR3R3’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, NR4R5, SR1, S=OR1, SO2R1, SO2OR1, SO2NR1R1’, (R1O)(R1’O)P=O, okso, (R1)(R1’)P=O ili (R1’)(NHR1)P=O;

Z1 je: O, S, NH ili NR6;

Z2 je: O, S, NH ili NR6;

A1 je CR7 ili N;

A2 je CR7 ili N;

Y je J-J’-J” u kome je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, C=O, OC=O, NR1C=O, CR7R7’, C=CR8R8’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2, OSO2, C=NR7, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo ili aril ili supstituirani aril i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, u kome Y nije veza (t.j. ukoliko je J’ veza, onda barem u jednom od J ili J’ (svaki je definiran kao (CR7R7’)n), n nije nula);

W je: CR7R7’-CR7R7’, CR8=CR8’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’ ili heterociklo ili supstituirani heterociklo, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OC=O, NR1C=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili

kada je W CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika;

Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterociklo (npr. heteroaril) ili supstituirani heterociklo (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5;

Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterociklo (npr. heteroaril) ili supstituirani heterociklo (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5;

L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5, NH(CR7R7’)n ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3;

R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil;

R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil;

R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio;

R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’;

R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’;

R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, HOC=O, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, NH2C=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’ ili gdje A1 ili A2 sadrži grupu R7 i W sadrži grupu R7, navedene R7 grupe A1 ili A2 i W zajedno tvore heterociklični prsten;

R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2OR1,S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; i

R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 iliSO2NR1R1’.

Spojevi u okviru formule I su nova podvrsta koja ima prednost, a čija je slijedeća formula Ia:

[image]

gdje G, L, Z1, Z2, A1, A2, Q1 i Q2 su, kao što su definirani gore;

Y’ je J-J’-J” u kome je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, u kome Y nije veza; i

W’ je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklo ili supstituirani heterociklo ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W’ nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili

kada je W’ CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; ili alternativno,

Y’ je NR7-CR7R7’ i W’ je CR8=CR8’; ili alternativno,

Y’ je CR7R7’-C=O i W’ je NR9-CR7R7’;

gdje R2, R6, R7, R7’, R8, R9 i R9’ su, kao što su definirani gore i, uz uvjet da:

(1) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je –CH2-CH2- i A1 i A2 su CH, onda G-L nije fenil, monosupstituirani fenil ili fenil koji je supstituiran sa dvije ili više slijedećih grupa:

metoksi, halo, NO2, metil, CH3-S-, OH, CO2H, trifluorometil, -C(O)-C6H5, NH2, 4-7-epoksi, heksahidro-1H-izoindol-1,3(2H)dion ili –C(O)-CH3;

(2) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i jedan od A1 i A2 je CH, a drugi je CR7, onda G-L nije nesupstituirani fenil;

(3) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i jedan od A1 i A2 je CH, a drugi je C-CH3, onda G-L nije fenil supstituiran sa kloro i/ili metil;

(4) kada: Y’ je –O- ili –S-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i jedan od A1 i A2 je CH, a drugi je CH ili C-alkil, onda G-L nije N-supstituirani piperazin-alkil- ili N-supstituirani imidazolidin-alkil-;

(5) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i A1 i A2 su CH, onda G-L nije oksazol ili triazol;

(6) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik ili metil, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i A1 i A2 su CH ili C-CH3, onda G-L nije tiazol ili supstituirani tiazol (osim toga, takvi spojevi gdje je G-L po izboru supstituirani tiadiazol ili djelomično zasićeni tiazol se po izboru uklanjaju, uz uvjet gdje su A1 i A2 oba CH);

(7) kada Y’ sadrži grupu J’, odabranu od: S, S=O, SO2, NH, NR7, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHR6, NR6NH ili N=N, W’ je CR7R7’-CR7R7’ i Z1 i Z2 su O, onda G-L nije nesupstituirani fenil;

(8) kada: Y’ je NR7, W’ je nesupstituirani ili supstituirani fenil i, Q1 i Q2 su vodik, onda Z1 i Z2 nisu O;

(9) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je dihidroizoksazol, koji nosi po izboru supstituiranu fenil grupu i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirani fenil ili diklorofenil;

(10) kada: Y’ je O, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je etilen oksid i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije metilfenil ili klorofenil;

(11) kada: Y’ je NR7-CR7R7’, W’ je CR8=CR8’, Q1 i Q2 su vodik, A1 i A2 su CH, C-CH3, C-CH2-C6H5 ili C-CH2-CH3 i, Z1 i Z2 su O, onda G-L nije nesupstituirani fenil, monosupstituirani fenil ili metilpiridinil;

(12) kada: Y’ je CR7R7’-C=O, W’ je NR9-CR7R7’, Q1 i Q2 su vodik, A1 i A2 su CH i, Z1 i Z2 su O, onda G-L nije nesupstituirani fenil;

(13) kada: Y’ je CHR7’-NR7, gdje je R7’ nesupstituirani fenil, metoksi ili etoksi, a R7 je nesupstituirani fenil, metil ili –C(O)-C6H5, W’ je dimetoksifenilen ili nesupstituirani fenilen, Z1 i Z2 su O, Q1 i Q2 su vodik i, A1 i A2 su CH, C-CN, C-C(O)-C6H5 ili -C-(O)-dimetoksifenil onda G-L nije nesupstituirani fenil;

(14) spoj formule Ia nije 6,10-epitio-4H-tieno-[3’,4’:5,6]ciklookt [1,2-f]izoindol-7,9(5H,8H)-dion, 8-(3,5-diklorofenil)-6,6a,9a,10,11,12,-heksa-hidro-1,3,6,10-tetrametil-2,2,13-trioksid, (6R,6aR,9aS,10S);

(15) kada: Y’ je O, W’ je -CH2-CH2-, Q1 i Q2 su metil, Z1 i Z2 su O i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirani fenil, fenil supstituiran sa metoksi, fenil-alkilom ili morfolin-alkilom, niti je spoj, koji je samo premošten putem L grupe koja je alkilen, kako bi nastao bis spoj;

(16) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CR7R7’-CR7R7’ i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirana fenil grupa; i

(17) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je ciklopentil, cikloheksil, 3-fenil-2-izoksazolin ili CR7R7’-CR7R7’, gdje R7 i R7’ su svaki, nezavisno definirani, kao: Cl, Br, H i 4-butirolakton i, R7 i R7’ nisu svi istovremeno H i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirani naftil prsten ili monosupstituirani fenil prsten, gdje je navedeni supstituent: metoksi, Br, Cl, NO2, metil, etil, CH2-fenil, S-fenil, ili O-fenil.

Prednost imaju spojevi formule I koji su monomerni i nisu obuhvaćeni drugim oligomerima ili polimerima.

Još jedna nova podvrsta, koja ima prednost, je slijedeće formule Ib:

[image]

gdje G, Z1, Z2, Q1 i Q2 su, kao što su definirani gore;

Y’ je J-J’-J” u kome je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, u kome Y nije veza; i

W’ je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W’ nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili

kada je W’ CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; ili alternativno,

Y’ je CR7R7’-C=O i W’ je NR9-CR7R7’;

L je veza; i

A1 i A2 su, kao što su gore definirani, posebno gdje su A1 i/ili A2 alkil ili po izboru supstituirani alkil (prednost imaju takvi izborni supstituenti koji su jedna ili više V1 grupa, koje su definirane ispod), uz uvjet da kada Y’=O i W’=-CH2-CH2-, onda barem jedan od A1 ili A2 nije CH;

uz dalje, uvjete pod: (2), (3), (6), (7) i (8), gore.

Spojevi formule I i njihove soli uključuju jezgru koja može služiti kao steroidni imitat (i ne zahtjevaju prisutnost strukture steroidnog tipa (npr. ciklopentanoperhidrofenantrenskog analoga)).

Dalji opis izuma

Ono što slijedi su definicije izraza, korištenih u ovom opisu patenta. Početna definicija, omogućena za grupu ili ovdašnji izraz primjenjuje se na tu grupu ili izraz kroz cijeli ovaj opis patenta pojedinačno ili kao dio druge grupe, ukoliko nije drugačije naznačeno.

Izrazi “alkil” i “alk” se odnose na ravni ili razgranati lanac alkanskog (ugljikovodičnog) radikala koji ima od 1 do 12 atoma ugljika, prednost ima 1 do 6 atoma ugljika. Primjera radi, takve grupe uključuju ali nisu ograničene na: metil, etil, propil, izopropil, n-butil, t-butil, izobutil, pentil, heksil, izoheksil, heptil, 4,4-dimetilpentil, oktil, 2,2,4-trimetilpentil, nonil, decil, undecil, dodecil i slične. “Supstituirani alkil” se odnosi na alkilnu grupu, supstituiranu sa jednim ili više supstituenata, prednost ima 1 do 4 supstituenta, na bilo kojoj dostupnoj točki vezanja. Primjera radi, supstituenti uključuju ali nisu ograničeni na jednu ili više slijedećih grupa: halo (npr. jedan halo supstituent ili više halo supstituenata, koji tvore u kasnijem slučaju, grupe kao što je perfluoroalkil grupa ili alkil grupa koja nosi Cl3 ili CF3), alkoksi, alkiltio, hidroksi, karboksi (t.j. -COOH), alkoksikarbonil, alkilkarboniloksi, amino (t.j. -NH2), karbamoil ili supstituirani karbamoil, karbamat ili supstituirani karbamat, urea ili supstituirana urea, amidinil ili supstituirani amidinil, tiol (t.j. -SH), aril, heterocikl, cikloalkil, heterociklalkil, -S-aril, -S-heterocikl, -S=O-aril, -S=O-heterocikl, arilalkil-O-, -S(O)2-aril, -S(O)2-heterocikl, -NHS(O)2-aril, -NHS(O)2-heterocikl, -NHS(O)2NH-aril, -NHS(O)2NH-heterocikl, -P(O)2-aril, -P(O)2-heterocikl, -NHP(O)2-aril, -NHP(O)2-heterocikl, -NHP(O)2NH-aril, -NHP(O)2NH-heterocikl, -O-aril, -O-heterocikl, -NH-aril, -NH-heterocikl, -NHC=O-aril, -NHC=O-alkil, -NHC=O-heterocikl, -OC=O-aril, -OC=O-heterocikl, -NHC=ONH-aril, -NHC=ONH-heterocikl, -OC=OO-aril, -OC=OO-heterocikl, -OC=ONH-aril, -OC=ONH-heterocikl, -NHC=OO-aril, -NHC=OO-heterocikl, -NHC-OO-alkil, -C=ONH-aril, -C=ONH-heterocikl, -C=OO-aril, -C=OO-heterocikl, -N(alkil)S(O)2-aril, -N(alkil)S(O)2-heterocikl, -N(alkil)S(O)2NH-aril, -N(alkil)S(O)2NH-heterocikl, -N(alkil)P(O)2-aril, -N(alkil)P(O)2-heterocikl, -N(alkil)P(O)2NH-aril, -N(alkil)P(O)2NH-heterocikl, -N(alkil)-aril, -N(alkil)-heterocikl, -N(alkil)C=O-aril, -N(alkil)C=O-heterocikl, -N(alkil)C=ONH-aril, -N(alkil)C=ONH-heterocikl, -OC=ON(alkil)-aril, -OC=ON(alkil)-heterocikl, -N(alkil)C=OO-aril, -N(alkil)C=OO-heterocikl, -C=ON(alkil)-aril, -C=ON(alkil)-heterocikl, -NHS(O)2N(alkil)-aril, -NHS(O)2N(alkil)-heterocikl, -NHP(O)2N(alkil)-aril, NHP(O)2N(alkil)-heterocikl, -NHC=ON(alkil)-aril, -NHC=ON(alkil)-heterocikl, -N(alkil)S(O)2N(alkil)-aril, -N(alkil)S(O)2N(alkil)-heterocikl, -N(alkil)P(O)2N(alkil)-aril, -N(alkil)P(O)2N(alkil)-heterocikl, -N(alkil)C=ON(alkil)-aril i –N(alkil)C=ON(alkil)-heterocikl. U prethodno spomenutim supstituentima za primjer, u svakom slučaju, grupe, kao što su “alkil”, “aril” i “heterocikl” mogu biti same po sebi supstituirane; na primjer, “alkil” u grupi “NCH=OO-alkil” nabrojanoj gore može po izboru biti supstituiran, tako da i “NHC=OO-alkil” i “NHC=OO-supstituirani alkil” jesu supstituenti, koji su primjeri. Tipični “alkil” supstituenti, također, obuhvaćaju grupe, kao što je “T” i “T-R12” (koje su definirane ispod), posebno za supstituirane alkil grupe, u okviru A1 i A2.

Izraz “alkenil” se odnosi na ravni ili razgranati lanac ugljikovodičnog radikala, koji sadrži od 2 do 12 atoma ugljika i najmanje jednu ugljik-ugljik dvostruku vezu. Tipične takve grupe uključuju etenil ili alil. “Supstituirani alkenil” se odnosi na alkenil grupu, koja je supstituirana sa jednim ili više supstituenata, prednost ima 1 do 4 supstituenta, na bilo kojoj dostupnoj točki vezanja. Tipični supstituenti uključuju, ali nisu ograničeni na alkil ili supstituirani alkil, kao i one grupe nabrojane gore, kao primjeri alkil supstituenata.

Izraz “alkinil” se odnosi na ravni ili razgranati lanac ugljikovodičnog radikala, koji sadrži od 2 do 12 atoma ugljika i najmanje jednu ugljik-ugljik trostruku vezu. Tipične takve grupe uključuju etinil. “Supstituirani alkinil” se odnosi na alkinil grupu, koja je supstituirana sa jednim ili više supstituenata, prednost ima 1 do 4 supstituenta, na bilo kojoj dostupnoj točki vezanja. Tipični supstituenti uključuju, ali nisu ograničeni na alkil ili supstituirani alkil, kao i one grupe nabrojane gore, kao primjeri alkil supstituenata.

Izraz “cikloalkil” se odnosi na potpuno zasićenu cikličnu ugljikovodičnu grupu, koja sadrži od 1 do 4 prstena i 3 do 8 ugljika po prstenu. Primjera radi, takve grupe obuhvaćaju: ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i td. “Supstituirani cikloalkil” se odnosi na cikloalkil grupu, supstituiranu sa jednim ili više supstituenata, prednost ima 1 do 4 supstituenta, na bilo kojoj dostupnoj točki vezanja. Tipični supstituenti uključuju, ali nisu ograničeni na: nitro, cijano, alkil ili supstituirani alkil, kao i one grupe, nabrojane gore kao primjeri alkil supstituenata, kao i što je prethodno spomenuto i poželjne aril supstituente u definiciji za G. Primjeri supstituenata, također, uključuju spiro-vezane ili spojene ciklične supstituente, posebno cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil.

Izraz “cikloalkenil” se odnosi na djelomično nezasićenu cikličnu ugljikovodičnu grupu, koja sadrži od 1 do 4 prstena i 3 do 8 ugljika po prstenu. Primjera radi, takve grupe obuhvaćaju: ciklobutenil, ciklopentenil, cikloheksenil i td. “Supstituirani cikloalkenil” se odnosi na cikloalkenil grupu, supstituiranu sa jednim ili više supstituenata, prednost ima 1 do 4 supstituenta, na bilo kojoj dostupnoj točki vezanja. Tipični supstituenti uključuju, ali nisu ograničeni na: nitro, cijano, alkil ili supstituirani alkil, kao i one grupe, nabrojane gore kao primjeri alkil supstituenata, kao i što je prethodno spomenuto i poželjne aril supstituente u definiciji za G. Primjeri supstituenata, također, uključuju spiro-vezane ili spojene ciklične supstituente, posebno cikloalkil ili supstituirani cikloalkil.

Izrazi “alkoksi” ili “alkiltio” se odnose na alkil grupu, kao što je gore opisana, vezanu, pojedinačno, preko kisikove veze (-O-) ili sumporne veze (-S-). Izrazi “supstituiran alkoksi” ili “supstituiran alkiltio” se odnose na supstituiranu alkil grupu, kao što je gore opisana, vezanu preko, pojedinačno, kisikove ili sumporne veze.

Izraz “alkoksikarbonil” se odnosi na alkoksi grupu, vezanu preko karbonilne grupe.

Izraz “alkilkarbonil” se odnosi na alkil grupu, vezanu preko karbonilne grupe. Izraz “alkilkarboniloksi” se odnosi na alkilkarbonil grupu, vezanu preko kisikove veze.

Izrazi “arilalkil”, “supstituirani arilalkil”, “cikloalkilalkil”, “supstituirani cikloalkilalkil”, “cikloalkenilalkil”, “supstituirani cikloalkenilalkil”, “heterociklalkil” i “supstituirani heterociklalkil” se odnose na aril, cikloalkil, cikloalkenil i heterocikl grupe, vezane preko alkil grupe, supstituirane na aril, cikloalkil, cikloalkenil ili heterocikl i/ili alkil grupi su označene kao “supstituirane”.

Izraz “aril” se odnosi na ciklične, aromatične, ugljikovodične grupe, koje imaju 1 do 5 aromatičnih prstenova, posebno monociklične ili biciklične grupe, kao što su: fenil, bifenil ili naftil. Kada sadrže dva ili više aromatičnih prstenova (biciklični i td.), aromatični prstenovi aril grupe mogu biti povezani u jednoj točki (npr. bifenil) ili spojeni (npr. naftil, fenantrenil i slični). “Supstituirani aril” se odnosi na aril grupu, supstituiranu sa jednim ili više supstituenata, poželjno sa 1, 2, 3, 4 ili 5 supstituenata, u bilo kojoj točki vezanja. Tipični primjeri uključuju, ali nisu ograničeni na: nitro, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, cijano, alkil-S(O)m- (m=0, 1 ili 2), alkil ili supstituirani alkil, kao i grupe, koje su pobrojane gore kao primjeri alkil supstituenata i koje su prethodno spomenute kao poželjni aril supstituenti u definiciji za G. Primjeri supstituenata, također, obuhvaćaju spojene ciklične supstituente, kao što su heterocikl ili cikloalkenil ili supstituirane heterocikl ili cikloalkenil grupe (npr. čime formiraju fluoroenil, tetrahidronaftalenil ili dihidroindenil grupu).

“Karbamoil” se odnosi na grupu –CONH- koja je vezana na jednom kraju za ostatak molekule, a na drugom za vodik ili organski dio (kao što je alkil, supstituirani alkil, aril, supstituirani aril, heterocikl, alkilkarbonil, hidroksil i supstituirani dušik). “Karbamat” se odnosi na grupu –O-CO-NH-, koja je na jednom kraju vezana za ostatak molekule i na drugom, za vodik ili organski dio (kao što su oni, koji su navedeni gore). “Urea” se odnosi na grupu –NH-CO-NH- koja je vezana na jednom kraju za ostatak molekule, a na drugom, za vodik ili organski dio (kao što su oni, navedeni gore). “Amidinil” se odnosi na grupu –C(=NH)(NH2). “Supstituirani karbamoil”, “supstituirani karbamat”, “supstituirana urea” i “supstituirani amidinil” se odnose na karbamoil, karbamatne, urea ili amidinil grupe, kao što su gore opisane, a u kojima su jedna ili više vodikovih grupa zamijenjene organskim dijelom (kao što su oni, navedeni gore).

Izrazi “heterocikl”, “heterociklični” i “heterocikl” se odnose na potpuno zasićene ili djelomično ili potpuno nezasićene, uključujući i aromatične (t.j. “heteroaril”), ciklične grupe (na primjer, 3 do 7-eročlane monociklične, 7 do 11-eročlane biciklične ili 10 do 16-eročlane triciklične prstenaste sustave) koje imaju najmanje jedan heteroatom u prstenu, koji sadrži najmanje jedan atom ugljika. Svaki prsten heterociklične grupe koja sadrži heteroatom može imati 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma, odabrana od dušikovih atoma, atoma kisika i/ili atoma sumpora, gdje heteroatomi dušik i sumpor mogu po izboru biti oksidirani, a heteroatomi dušika mogu po izboru biti kvaternizirani. (Izraz “heteroarilij” se odnosi na heteroaril grupu koja nosi kvaterni dušikov atom i time pozitivni naboj.) Heterociklična grupa može biti vezana za ostatak molekule na bilo kojem heteroatomu ili atomu ugljika prstena ili prstenastog sustava. Shvaćeno je da gdje su W ili W’ cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, da A1 i A2 mogu biti odvojeno vezani za različite (kao što su susjedni) atome prstena na navedenim grupama. Tipične monociklične heterociklične grupe obuhvaćaju: etilen oksid, azetidinil, pirolidinil, pirolil, pirazolil, oksetanil, pirazolinil, imidazolil, imidazolinil, imidazolidinil, oksazolil, oksazolidinil, izoksazolinil, izoksazolil, tiazolil, tiadiazolil, tiazolidinil, izotiazolil, izotiazolidinil, furil, tetrahidrofuril, tienil, oksadiazolil, piperidinil, piperazinil, 2-oksopiperazinil, 2-oksopiperidinil, 2-oksopirolodinil, 2-oksoazepinil, azepinil, heksahidrodiazepinil, 4-piperidonil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, triazinil, triazolil, tetrazolil, tetrahidropiranil, morfolinil, tiamorfolinil, tiamorfolinil sulfoksid, tiamorfolinil sulfon, 1,3-dioksolan i tetrahidro-1,1-dioksotienil i slične. Tipične biciklične heterociklične grupe uključuju: indolil, izoindolil, benzotiazolil, benzodioksolil, benzoksazolil, benzoksadiazolil, benzotienil, kinuklidinil, kinolinil, tetrahidroizokinolinil, izokinolinil, benzimidazolil, benzopiranil, indolizinil, benzofuril, benzofurazanil, kromonil, kumarinil, benzopiranil, cinolinil, kinoksalinil, indazolil, pirolopiridil, furopiridinil (kao što je furo[2,3-c]piridinil, furo[3,2-b]piridinil ili furo[2,3-b]piridinil), dihidrobenzodioksinil, dihidrodioksidobenzotiofenil, dihidroizoindolil, dihidroindolil, dihidrokinolinil, dihidrokinazolinil (kao što je 3,4-dihidro-4-okso-kinazolinil), triazinilazepinil, tetrahidrokinolinil i slične. Tipične triciklične heterociklične grupe obuhvaćaju karbazolil, benzidolil, fenantrolinil, dibenzofuranil, akridinil, fenantridinil, ksantenil i slične.

“Supstituirani heterocikl”, “supstituirani heterociklični” i “supstituirani heterocikl” (kao što je “supstituirani heteroaril”) se odnose na heterocikl, heterociklične ili heterocikl grupe, supstituirane sa jednim ili više supstituenata, poželjno sa 1 do 4 supstituenta, na bilo kojoj dostupnoj točki vezanja. Primjeri supstituenata uključuju, ali nisu ograničeni na: cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, nitro, okso (t.j. =O), cijano, alkil-S(O)m- (m = 0, 1 ili 2), alkil ili supstituirani alkil, kao i one grupe, koje su pobrojane gore kao tipični alkil supstituenti i, kako su prethodno navedeni kao heterocikl supstituenti, koji imaju prednost u definiciji za G.

Izraz “kvaterni dušik” se odnosi na četverovalentni pozitivno nabijeni atom dušika, uključujući, na primjer, pozitivno nabijeni dušik u tetraalkilamonij grupi (npr. tetrametilamonij, N-metil-piridinij), pozitivno nabijeni dušik u vrstama protoniranog amonija (npr. trimetilhidroamonij, N-hidropiridinij), pozitivno nabijeni dušik u amin N-oksidima (npr. N-metil-morfolin-N-oksid, piridin-N-oksid) i pozitivno nabijeni dušik u N-amino-amonij grupi (npr. N-aminopiridinij).

Izrazi “halogen” ili “halo” se odnose na klor, brom, fluor ili jod.

Izrazi “hidroksilamin” i “hidroksilamid” se odnose pojedinačno na grupe OH-NH- i OH-NH-CO-.

Kada se funkcionalna grupa označi kao “zaštićena”, to znači da je grupa u promijenjenom obliku kako bi se ublažile, a osobito spriječile, neželjene sporedne reakcije na zaštićenom položaju. Prikladne zaštitne grupe za postupke i spojeve koji su ovdje opisani obuhvaćaju, bez ograničavanja, one, opisane u standardnim udžbenicima, kao što je Greene, T.W. et al., Protective Groups in Organic Syntesis, Wiley, N.Y. (1991).

Kada se koristi izraz, kao što je “(CRR)n”, on označava po izboru supstituirani alkil lanac koji egzistira između dva fragmenta za koje je vezan, dužine lanca, definirane opsegom, opisanim izrazom n. Primjer za ovo je n = 0-3, značeći da od nula do tri (CRR) jedinice postoje između dva fragmenta, koji su vezani za početnu i krajnju (CRR) jedinicu. U slučaju kada je izraz n označen kao nula (n=0), onda veza postoji između dva fragmenta vezana za (CRR).

Ukoliko nije drugačije naznačeno, pretpostavlja se da bilo koji heteroatom sa nezasićenim valencijama ima atome vodika, dovoljne da zasite valencije.

Dvovalentne grupe, kao što su one u definiciji za W (npr. NR9-CR7R7’), mogu biti vezane u bilo kojem pravcu u odnosu na ostatak molekule (npr.

[image] ili [image]

za prethodno spomenutu grupu u okviru definicije za W).

Karboksilat anion se odnosi na negativno nabijenu grupu –COO-.

Spojevi formule I tvore soli, koje su, također, u okviru namjene ovog izuma. Ukoliko nije drugačije naznačeno, upućivanje na spoj formule I, ovdje se podrazumijeva da uključuje upućivanje na njegove soli. Izraz “sol(soli)”, kako je ovdje upotrijebljen, označava kisele i/ili bazne soli, nastale sa anorganskim i/ili organskim kiselinama i bazama. Osim toga, kada spoj formule I sadrži oba, bazni dio, kao što je piridin ili imidazol, ali bez ograničenja na njih i, kiseli dio, kao što je karboksilna kiselina, ali bez ograničenja na nju, mogu se formirati zwitter ioni (“unutrašnje soli”) i obuhvaćene su izrazom “sol(soli)” kako je ovdje upotrijebljen. Prednost imaju farmaceutski prihvatljive (t.j. ne-toksične, fiziološki prihvatljive) soli, mada su druge soli, također, korisne, npr. u koracima izdvajanja ili pročišćavanja, koji mogu biti upotrijebljeni tijekom izrade. Soli spojeva formule I se mogu formirati, na primjer, reakcijom spoja I sa količinom kiseline ili baze, kao što je ekvivalentna količina, u sredini kao što je ona u kojoj se sol taloži ili u vodenoj sredini uz neposrednu liofilizaciju.

Spojevi formule I koji sadrže bazni dio, kao što je amin ili prsten piridina ili imidazola, ali bez ograničenja na njih, mogu tvoriti soli sa raznim organskim ili anorganskim kiselinama. Tipične soli nastale dodatkom kiseline obuhvaćaju: acetate (kao što su oni nastali sa octenom kiselinom ili trihalooctenom kiselinom, na primjer, trifluorooctenom kiselinom), adipate, alginate, askorbate, aspartate, benzoate, benzensulfonate, bisulfate, borate, butirate, citrate, kamforate, kamforosulfonate, ciklopentanpropionate, diglukonate, dodecilsulfate, etansulfonate, fumarate, glukoheptanoate, glicerofosfate, hemisulfate, heptanoate, heksanoate, hidrokloride, hidrobromide, hidrojodide, hidroksietansulfonate (npr. 2-hidroksietansulfonati), laktate, maleate, metansulfonate, naftalensulfonate (npr. 2-naftalensulfonati), nikotinate, nitrate, oksalate, pektinate, persulfate, fenilpropionate (npr. 3-fenilpropionati), fosfate, pikrate, pivalate, propionate, salicilate, sukcinate, sulfate (kao što su oni formirani sa sumpornom kiselinom), sulfonate (kao što su oni spomenuti ovdje), tartarate, tiocijanate, toluensulfonate, kao što su tosilati, undekanoate i slične.

Spojevi formule I koji sadrže kiseli dio, kao što je karboksilna kiselina, ali bez ograničenja na nju, mogu tvoriti soli sa raznim organskim ili anorganskim bazama. Tipične bazne soli obuhvaćaju: amonijeve soli, soli alkalnih metala, kao soli natrija, litija i kalija, soli zemno alkalnih metala, kao soli kalcija i magnezija, soli sa organskim bazama (na primjer, organski amini), kao što su: benzatini, dicikloheksilamini, hidrabamini (formirani sa N,N-bis(dehidroabietil)etilendi-aminom), N-metil-D-glukamini, N-metil-D-glukamidi, t-butil amini i, soli sa aminokiselinama, kao što su arginin, lizin i slične. Bazne grupe koje sadrže dušik mogu biti kvaternizirane sa sredstvima kao što su: niži alkil halidi (npr. metil, etil, propil i butil kloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (npr. dimetil, dietil, dibutil i diamil sulfati), halidi dugog lanca (npr. decil, lauril, miristil i stearil kloridi, bromidi i jodidi), aralkil halidi (npr. benzil i fenetil bromidi) i drugim.

Isto tako, ovdje su razmatrani i prolijekovi i solvati spojeva izuma. Izraz “prolijek”, kako je ovdje upotrebljavan, označava spoj koji, tijekom primjenjivanja ispitaniku, podliježe kemijskoj konverziji putem metaboličkih ili kemijskih procesa kako bi se dobio spoj formule I ili njegova sol i/ili solvat. Solvati spojeva formule I obuhvaćaju, na primjer, hidrate.

Spojevi formule I i njihove soli mogu postojati u njihovom tautomernom obliku (na primjer, kao amid ili imino eter). Svi takvi tautomerni oblici su ovdje razmatrani kao dio ovog izuma.

Svi stereoizomeri ovih spojeva (na primjer, onih koji mogu postojati zahvaljujući asimetričnim ugljicima na raznim supstituentima), uključujući enantiomerne oblike i dijastereomerne forme, razmatrani su u okviru namjene ovog izuma. Pojedinačni stereoizomeri spojeva izuma mogu biti, na primjer, oslobođeni drugih izomera (npr. kao čist ili u biti čist optički izomer, koji ima određenu aktivnost), ili mogu biti pomiješani, na primjer, kao racemati, ili sa svim ostalim, ili drugačije odabranim, stereoizomerima. Kiralni centri u ovom izumu mogu imati S ili R konfiguraciju, kako je definirana po Preporukama IUPAC-a 1974. Racemični oblici se mogu razdvojiti fizičkim postupcima, kao što su, na primjer, frakcijska kristalizacija, razdvajanje ili kristalizacija dijastereomernih derivata ili razdvajanje kromatografijom na kiralnoj koloni. Pojedinačni optički izomeri se mogu dobiti iz racemata bilo kojim prikladnim postupkom, uključujući, bez ograničavanja, konvencionalne postupke, kao što je, na primjer, formiranje soli sa optički aktivnom kiselinom poslije čega slijedi kristalizacija.

Svi konfiguracijski izomeri spojeva ovog izuma su razmatrani, bilo kao pomiješani ili u čistom ili u biti čistom obliku. Definicija spojeva ovog izuma uključuje oba i, cis (Z) i, trans (E) izomer alkena, kao i cis i trans izomere cikličnih ugljikovodičnih ili heterocikl prstenova. U izvjesnim slučajevima, na primjer, prednost može imati egzo ili endo konformacija za sustav spojenih prstenova, koji je vezan za G-L u formuli I. Na primjer, za antagoniste androgenog receptora (ili selektivne modulatore androgenog receptora), gdje Y je O ili NR7, može imati prednost egzo konfiguracija, dok za većinu drugih definicija Y-a, prednost može imati endo konfiguracija. Kao što se može ocijeniti, konfiguracija koja ima prednost može biti funkcija određenog spoja i njegova poželjna aktivnost. Razdvajanje konfiguracijskih izomera se može postići bilo kojim prikladnim postupkom, kao što je kromatografija na koloni.

Kroz opis patenta, mogu se izabrati grupe i njihovi supstituenti kako bi se osigurale stabilne funkcionalne grupe i spojevi.

Ostvarenja, koja su ovdje označena da imaju prednost ili kao tipična imaju ilustrativni smisao i nisu ograničavajuća.

Postupci izrade

Spojevi ovog izuma se mogu proizvesti prema postupcima, kao što su oni, prikazani u slijedećim shemama I do XI. Stručnjak u ovom području može lako odabrati: otapala, temperature, pritiske i druge uvjete reakcija. Početni materijali su komercijalno dostupni ili ih stručnjak može jednostavno pripremiti. Mogu se upotrijebiti kombinirane tehnike u izradi spojeva, na primjer, gdje intermedijeri imaju grupe prikladne za ove tehnike. Vidi slijedeće, što opisuje druge postupke koji se mogu upotrijebiti u izradi spojeva ovog izuma: Li, et al., Eur. J. Org. Chem. 9, 1841-1850 (1998); Li, Y-Q, Synlett. 5, 461-464 (1996); Thiemann, et al., Bull. Chem. Soc. Jpn. 67, 1886-1893 (1994); Tsuge et al., Heterocycles 14, 423-428 (1980); Ward et al., Can J. Chem. 75, 681-693 (1997); Ward et al., Can J. Chem. 69, 1487-1497 (1991); Ward et al., Tetrahedron Lett. 31, 845-848 (1990); Fleming et al., J. Org. Chem. 44, 2280-2282 (1979); Jankowski et al., J. Organomet. Chem. 595, 109-113 (2000); Keglevich et al., J. Organomet. Chem. 579, 182-189 (1999); Keglevich et al., J. Organomet. Chem. 570, 49-539 (1998); Jankowski et al., Hetroat. Chem. 7, 369-374 (1996); Jankowski et al., J. Am. Chem. Soc. 113, 7011-7017 (1991); Quin et al., Tetrahedron Lett. 31, 6473-6476 (1991); Quin et al., J. Org. Chem. 59, 120-129 (1994); Quin et al., J. Org. Chem. 58, 6212-6216 (1993); Quin et al., Phosphorous, Sulfur Silicon Relat. Elem. 63, 349-362 (1991); Quin et al., Hetroat. Chem. 2, 359-367 (1991); Hussong et al., Phosphorus Sulfur. 25, 201-212 (1985); Quin et al., J. Org. Chem. 51, 3341-3347 (1986); Myers et al., J. Am. Chem. Soc. 114, 5684-5692 (1992); Myers et al., J. Am. Chem. Soc. 113, 6682-6683 (1991); Shen et al., US Patent No. 5817679; Cordone et al., J. Am. Chem. Soc. 111, 5969-5970 (1989); Jung et al., J. Chem. Soc. Commun. 630-632 (1984); Lay et al., J. Am. Chem. Soc. 104, 7658-7659 (1982); Gonzalez et al., J. Am. Chem. Soc. 117, 3405-3421 (1995); Kreher et al., Chem. Ber. 125, 183-189 (1992); Simig et al., Synlett. 7, 425-426 (1990); Sha et al., J. Org. Chem. 55, 2446-2450 (1990); Drew et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 7, 1277-1284 (1985); Kreher et al., Anorg. Chem., Org. Chem. 31B, 599-604 (1976); Avalos et al., Tetrahedron Lett. 39, 9301-9304 (1998); Gousse et al., Macromolecules 31, 314-321 (1998); Mikhailyuchenko et al., Khim. Geterotsikl. Soedin. 6, 751-758 (1993); Lubowitz et al., US Patent No. 4476184; Padwa et al., J. Org. Chem. 61, 3706-3714 (1996); Schlessinger et al., J. Org. Chem. 59, 3246-3247 (1994); Buchmeiser et al., WO Publication No. 9827423; Tanabe et al., Japanese Patent Document JP 07144477; Mochizucki et al., Japanese Patent Document JP 63170383; Hosoda et al., Japanese Patent Document JP 62053963; Onaka et al., Japanese Patent Document JP 62053964; Kato et al., Japanese Patent Document JP 53086035; Kato et al., Japanese Patent Document JP 51088631; Tottori et al., Japanese Patent Document JP 49124225; Augustin et al., German Patent Document DD101271; Title et al., French Patent Document FR 2031538; Gousse et al., Polym. Int. 48, 723-731 (1999); Padwa et al., J. Org. Chem. 62, 4088-4096 (1997); Theurillat-Moritz et al., Tetrahedron: Asymmetry 7, 3163-3168 (1996); Mathews et al., J. Carbohydr. Chem. 14, 287-97 (1995); Srivastava et al., Natl. Acad. Sci. Lett. (India) 15, 41-44 (1992); Mayorga et al., Rev. Cubana Quim. 4, 1-6 (1988); Kondoli et al., J. Chem. Res. Synop. 3, 76 (1987); Primelles et al., Cent. Azucar 7-14 (1985); Solov’eva et al., Khim. Geterotsikl. Soedin. 5, 613-15 (1984); Liu et al., Yaoxue Xuebao 18, 752-759 (1983); Joshi et al., Indian J. Chem. Sect. B. 22B, 131-135 (1983); Amos et al., WO Publication No. 9829495; Odagiri et al., US Patent No. 4670536; Gallucci et al., European Patent Document EP 355435; Redmore, D. US Patent No. 3821232; Nakano et al., Heterocycles 35, 37-40 (1993); Tomisawa et al., Chem. Pharm. Bull. 36, 1692-1697 (1988); Krow et al., J. Heterocycl. Chem. 22, 131-135 (1985); Krow et al., J. Org. Chem. 47, 1989-1993 (1982); Liu et al., Yaoxue Xuebao 18, 752-759 (1983); Nishikawa et al., Yaoxue Xuebao JP 01061457; i/ili Rice et al., J. Med. Chem. 11, 183-185 (1968).

Svi dokumenti, koji su navedeni u ovom opisu patenta, kao što su oni citirani u ovim “Postupcima izrade”, kao i u drugim dijelovima ovdje, obuvaćeni su u svojoj cjelosti kao reference. Pozivanje na bilo koji dokument ovdje ne treba biti tumačeno kao priznanje da je takav dokument važniji.

shema I

[image]

Kao što je prikazano u shemi I, dien formule II može reagirati sa dienofilom formule III, pod uvjetima, koje stručnjak ovog područja može lako odabrati (kao što je dodavanje topline (“Δ”)), kako bi se dobio spoj formule IV, koji je spoj formule I. Intermedijerni dien formule II se može dobiti iz komercijalnih izvora ili jednostavno proizvesti od strane stručnjaka, na primjer, u skladu sa slijedećim liteteraturnim dokumentima i referencama koje su u njima nađene: Hofman et al., J. Agric. Food Chem. 45, 898-906 (1997); Baciocchi et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2 8, 821-824 (1975); Wu et al., J. Heterocycles 38, 1507-1518 (1994); Yin et al., Tetrahedron Lett. 38, 5953-5954 (1997); Mic’ovic’ et al., Tetrahedron 20, 2279-2287 (1964); Gorbunova et al., J. Org. Chem. 35, 1557-1566 (1999); Rassu et al., Chem Soc. Rev. 29, 109-118 (2000); Kaberdin et al., Russ. Chem. Rev. 68, 765-779 (1999); Barluenga et al., Aldrichimica Acta 32, 4-15 (1999); Bogdanowicz-Szwed et al., Pol. Wiad. Chem. 52, 821-842 (1998); Casiraghi et al., Adv. Asymmetric Synth. 3, 113-189 (1998); i/ili Baeckvall et al., Chem. Rev. 98, 2291-2312 (1998). Intermedijerni dienofil formule III se može dobiti iz komercijalnih izvora ili jednostavno proizvesti od strane stručnjaka, na primjer, u skladu sa slijedećim liteteraturnim referencama i referencama koje su u njima nađene: Deshpande et al., Heterocycles 51, 2159-2162 (1999); Seijas et al., J. Chem. Res. Synop. 7, 420-421 (1999); Langer et al., Eur. J. Org. Chem. 7, 1467-1470 (1998); Kita et al., Japanese Patent Document JP 09194458; Lopez-Alvarado et al., J. Org. Chem. 61, 5865-5870 (1996); Condon et al., US Patent No. 5523277; Sasakihara et al., Japanese Patent Document JP 04290868; Igarashi et al., Japanese Patent Document JP 04149173; Aoyama et al., Japanese Patent Document JP 04134063; Aoyama et al., Japanese Patent Document JP 04134062; Pastor et al., J. Org. Chem. 53, 5776-5779 (1988); i/ili Takahashi et al., Chem. Lett. 6, 1229-1232 (1987).

shema II

[image]

Kao što je prikazano u shemi II, spojevi formule I mogu se dobiti reakcijom primarnog amina formule V sa supstituiranim, anhidridu-sličnim intermedijerom formule VI, na primjer, u otapalu, kao što je octena kiselina, uz ili bez zagrijavanja, kako bi se dobio spoj formule IV, koji je spoj formule I. Primarni amini formule V se mogu dobiti iz komercijalnih izvora ili jednostavno sintetizirati od strane stručnjaka. Anihidridu-slična sredstva formule VI se mogu dobiti iz komercijalnih izvora ili lako sintetizirati od strane stručnjaka. Nabrojani dokumenti koji slijede opisuju tipične pristupe za sintezu intermedijera formule VI, kao i sintetske pristupe koji se mogu primijeniti na sintezu spojeva formule IV (svi ovdje obuhvaćeni u svojoj cjelosti kao reference): Kohler, E.P.; Tishler, M.; Potter, H.; Thompson, H.T. J. Am. Chem. Soc. 1939, 1057-1061; Yur’ev, Y.K.; Zefirov, N.S. J. Gen. Chem. U.S.S.R. (Engl. Transl.) 1961, 31, 772-5; Norman G. Gaylord US Patent No. 3,995,099; Schueler, P.E.; Rhodes, Y.E. J. Org. Chem. 1974, 39, 2063-9; Ishitobi, H.; Tanida, H.; Tsuji, T. Bull. Chem. Soc. Japan 1971, 44, 2993-3000; Stájer, G.; Virág, M.; Szabó, A.E.; Bernáth, G.; Sohár, P.; Sillanpää, R. Acta. Chem. Scand. 1996, 50, 922-30; Hart, H.; Ghosh, T. Tetrahedron Lett. 1988, 29, 881-884; Kato, M.; Yamamoto, S.; Yoshihara, T.; Furuichi, K.; Miwa, T. Chem. Lett. 1987, 1823-1826; Kottwitz, J.; Vorbrüggen, H. Synthesis 1995, 636-637; Creary, X. J. Org. Chem. 1975, 40, 3326-3331; Alder, K.; Ache, H.-J.; Flock, F.H. Chem. Ber. 1960, 93, 1888-1895; Toder, B.H.; Branca, S.J.; Dieter, R.K.; Smith, A.B. III Synth. Commun. 1975, 5, 435-439; Sprague, P.W.; Heikes, J.E.; Gougoutas, J.Z.; Malley, M.F.; Harris, D.N.; i/ili Greenberg, R. J. Med. Chem. 1985, 28, 1580-1590.

Prethodno spomenuti pristup(i) se može primijeniti na kombinirani način, na primjer, korištenjem reakcijskog bloka sa višestrukim mjestima, kao što je opisano u: Waldemar Ruediger, Wen-Jeng Li, John W., Allen Jr., and Harold N. Weller III, US Patent No. 5,961,925, Apparatus for Synthesis of Multiple Organic Compounds With Pinch Valve Block (Aparat za sintezu višestrukih organskih spojeva sa pritisnutim ventilom) (koji je ovdje u cjelosti obuhvaćen kao referenca). Korištenjem gore-spomenutog reakcijskog bloka sa više mjesta, mogu se, na primjer, izvesti mnogostruke reakcije od 96 u isto vrijeme. Otapalo zatim može biti uklonjeno iz reakcijskih epruveta bez uklanjanja iz reakcijskog bloka, a sirovi proizvodi se mogu istaložiti upotrebom baze, kao što je natrij bikarbonat. Talozi se mogu sakupiti filtracijom reakcijskog bloka i zatim, željeni proizvodi mogu se prenijeti izravno u ploče sa 96 mjesta za testiranje. Na ovaj način, može se sintetizirati široki raspon spojeva formule I i izvesti testovi ako se želi automatskim putem.

shema III

[image]

Shema III opisuje postupak izrade intermedijernog spoja formule VI, koji se može upotrijebiti za sintezu spoja formule I, kao što je opisano u shemi II. Kako je opisano u shemi III, dien formule II može biti podvrgnut reakciji sa dienofilom formule VII kako bi se dobio intermedijer formule VI. Postupci, koji su primijenjeni da bi se postigla takva transformacija su analogni onima, opisanim u shemi I.

shema IV

[image]

shema IV opisuje postupak izrade intermedijernog spoja formule VI, koji se može upotrijebiti za sintezu spoja formule I, kao što je opisano u shemi II. Kako je opisano u shemi IV, dien formule II može biti podvrgnut reakciji sa dienofilom formule VIII kako bi se dobio intermedijer formule IX. Intermedijer formule IX se može dehidrirati u anhidridu-slični intermedijer formule VI. Dehidratacija bis-kiselog intermedijera formule IX može se postići raznim postupcima, kao što su oni, poznati stručnjacima u ovom području i opisanim u slijedećim dokumentima i referencama koje su njima obuhvaćene: Sprague et al., J. Med. Chem. 28, 1580-1590 (1985); i/ili Retemi et al., J. Org. Chem. 61, 6296-6301 (1996).

Sheme I do IV opisuju općenite postupke za sintezu spojeva formule I i njihovih intermedijera, u kojima je supstitucija oko prstenastog sustava izravno inkorporirana, na primjer, na nivou intermedijernog diena, dienofila, anhidridu-sličnog intermedijera i aminskih grupa. Osim ovih pristupa, dodatna supstitucija može biti ugrađena na već pripremljeni spoj formule I raznim postupcima kako bi se proizveli drugi spojevi formule I. Tipični postupci za dalju supstituciju su opisani u shemama V do XI.

shema V

[image]

Shema V opisuje jedan takav pristup za ugrađivanje dodatne supstitucije u strukturu formule I. Kako je prikazano u shemi V, spoju formule X, koji je spoj formule I u kojoj su A1 i A2 CR7, W je NH-CHR7 i Y je CHR7-CHR7, može biti uveden supstituent na slobodnom aminu grupe W, reakcijom sa bilo kojim od raznovrsnih elektrofilnih sredstava, kao što su kiseli halidi ili alkil halidi u prisutnosti baze, na primjer, postupcima poznatim stručnjaku u ovom području. U shemi V, X je odlazeća grupa, a spoj formule XI je spoj formule I u kojoj su A1 i A2 CR7, W je NR7-CHR7 i Y je CHR7-CHR7.

shema VI

[image]

Shema VI opisuje dodatni pristup za dalje uključivanje supstitucije na spoj formule I. Kao što je prikazano u shemi VI, spoj formule XII, koji je spoj formule I u kojoj su A1 i A2 CR7, a W je S-CHR7 i Y je CHR7-CHR7, može biti djelomično oksidiran sa oksidirajućim sredstvom, kao što je mCPBA ili drugim sredstvima koja su poznata stručnjacima, kako bi se dobio sulfoksidni analog formule XIII, koji je spoj formule I u kojoj su A1 i A2 CR7, W je SO-CHR7 i Y je CHR7-CHR7. Daljim tretmanom spoja formule XIII sa oksidirajućim sredstvom, kao što je mCPBA ili drugim sredstvima, poznatim stručnjacima, može se dobiti sulfonski analog formule XIV, koji je spoj formule I u kojoj su A1 i A2 CR7, a W je SO2-CHR7 i Y je CHR7-CHR7. Alternativno, spoj formule XII se može prevesti izravno u spoj formule XIV produženim tretmanom sa oksidirajućim sredstvom, kao što je mCPBA ili sa drugim sredstvima, poznatim stručnjacima.

shema VII

[image]

Shema VII opisuje još jedan pristup za uključivanje dodatne supstitucije na spoj formule I. Kao što je prikazano u shemi VII, dien formule IIa može biti podvrgnut reakciji sa dienofilom formule III, kao što je opisano u shemi I, kako bi se dobio spoj formule IVa, koji je spoj formule I u kojoj je Y O, A2 je CR7 i A1 je C-(CH2)q-T. Spoj formule IVa može biti podvrgnut reakciji sa reagensom formule R12-T’, kako bi se dobio spoj formule IVb ili IVc, koji su spojevi formule I u kojoj: Y je O, A2 je CR7, a A1 je pojedinačno C-(CH2)q-T’-R12 ili C-(CH2)q-T-R12. Reagens R12-T’ se može dobiti iz komercijalnih izvora ili se jednostavno može proizvesti od strane stručnjaka.

U gornjoj shemi, R12 ima istu definiciju kao R7, kako je definiran ranije, q je nula ili cijeli broj od 0-8, a T je definirano ili kao (1) nukleofilni centar, kao što je, ali bez ograničenja, grupa koja sadrži dušik, kisik ili sumpor, koju je moguće podvrgnuti reakciji nukleofilne supstitucije sa odlazećom grupom T’ ili kao (2) odlazeća grupa koju je moguće podvrgnuti reakciji nukleofilne supstitucije sa nukleofilnom grupom T’ (kao što je, bez ograničavanja, nukleofilna grupa koja sadrži dušik, kisik ili sumopr). T’ ima istu definiciju kao i T. U ovom slučaju, na primjer, reakcija nukleofilne supstitucije se javlja kada napadajući reagens (nukleofil) donosi elektronski par supstratu, korištenjem ovog para za formiranje nove veze, a odlazeća grupa (nukleofug) se oslobađa zajedno sa elektronskim parom, odlazeći kao anionski intermedijer. Za detaljno razmatranje mehanizma alifatičnih nukleofilnih supstitucija, kao i pregled specifičnih reakcija alifatične nukleofilne supstitucije, vidi: Advanced Organic Chemistry, Reactions, Mechanisms, and Structure, 4th Addition. Jerry March (Ed.), John Wiley & Sons, New York (1992) 293-500 i tamošnje reference. Spojevi sa formulama IVa, IVb ili IVc mogu, naravno, biti upotrijebljeni u ovdje opisanim postupcima (posebno, u tretmanu stanja povezanih sa nuklearnim hormonskim receptorom) bez podvrgavanja T ili T’ daljoj reakciji.

shema VIII

[image]

Alternativni put do spojeva sa formulama IVa, IVb i IVc je prikazan u shemi VIII. U ovom postupku, za izradu intermedijera formule VIa u kojoj su T i q, kao što su definirani u shemi VII, mogu se primijeniti tehnike, kao što su one, opisane u shemama II, III i IV. Intermedijer formule VIa može reagirati sa supstituiranim aminom formule V, kako je opisano u shemi II, kako bi se dobio spoj formule IVa, koji je spoj formule I u kojoj: Y je O, A2 je CR7 i A1 je C-(CH2)q-T. Spoj formule IVa može biti tretiran na način opisan u shemi VII kako bi se dobili spojevi sa formulama IVb ili IVc koji su spojevi formule I u kojima, pojedinačno: Y je O, A2 je CR7 i A1 je C-(CH2)q-T’-R12 ili C-(CH2)q-T-R12.

shema IX

[image]

Shema IX opisuje drugi pristup za uklapanje dalje supstitucije na spoj formule I. Kao što je ilustrirano shemom IX (gdje je X odlazeća grupa), dien formule IIb može reagirati sa dienofilom formule III, kako je opisano u shemi I, a kako bi se dobio spoj formule IVe, koji je spoj formule I u kojoj: Y je NH, a A1 i A2 su CR7. Spoju formule IVe može se uvesti funkcionalna grupa na slobodni amin reakcijom sa raznovrsnim elektrofilnim sredstvima, kao što su kiseli halidi ili alkil halidi, u prisutnosti baze, na primjer, postupcima poznatim stručnjaku i opisanim u shemi V, kako bi se dobio spoj formule IVf, koji je spoj formule I u kojoj: Y je NR7, a A1 i A2 su CR7.

shema X

[image]

Alternativni put do spojeva sa formulama IVe i IVf je prikazan u shemi X. U ovom postupku, za izradu intermedijera formule VIb mogu se primijeniti tehnike, kao što su opisane u shemama II, III i IV. Intermedijer formule VIb može reagirati sa supstituiranim aminom formule V, kako je opisano u shemi II, kako bi se dobio spoj formule IVe, koji je spoj formule I u kojoj: Y je NH, a A1 i A2 su CR7. Ovaj zadnji intermedijer može biti tretiran na način, opisan u shemi V kako bi se dobio spoj formule IVf koji je spoj formule I u kojoj: Y je NR7, a A1 i A2 su CR7.

shema XI

[image]

Shema XI opisuje drugi pristup za uklapanje dodatne supstitucije na spoj formule I. Kao što je ilustrirano shemom XI, dien formule IIc može reagirati sa dienofilom formule III, kako je opisano u shemi I, a kako bi se dobio spoj formule IVg, koji je spoj formule I u kojoj: Y je SO, a A1 i A2 su CR7. Spoj formule IVg može biti tretiran sa oksidirajućim sredstvom, kao što je mCPBA, kako je opisano u shemi VI, a da bi se dobio spoj formule IVh, koji je spoj formule I u kojoj: Y je SO2, a A1 i A2 su CR7.

shema XII

[image]

Shema XII opisuje drugi pristup za uklapanje dodatne supstitucije na spoj formule I. Kao što je ilustrirano shemom XII, spoj formule XV, koji može biti proizveden u skladu sa gornjim shemama, može biti inkubiran u prisutnosti prikladnog enzima ili mikroorganizma što dovodi do formiranja hidroksiliranog analoga formule XVI. Takav proces se može upotrijebiti kako bi se proizvelo regiospecifično, kao i enantiospecifično ugrađivanje hidroksilne grupe u molekulu formule XV pomoću specifičnog mikroorganizma ili serija različitih mikroorganizama. Takvi mikroorganizmi mogu, na primjer, biti prema prirodi bakterijski, kvasci ili gljivični i mogu se dobiti od distributera, kao što je ATCC ili biti određeni za upotrebu u ovom postupku, kao što je to moguće postupcima poznatim stručnjaku. Spoj XVI je spoj formule I u kojoj je Y, kao što je opisan gore, a A1 i A2 su poželjno CR7.

shema XIII

[image]

Shema XIII opisuje još jedan pristup za uklapanje dodatne supstitucije na spoj formule I. Kao što je ilustrirano shemom XIII, spoj formule XVII, koji može biti proizvedeno u skladu sa gornjim shemama, može biti inkubiran u prisutnosti prikladnog enzima ili mikroorganizma što dovodi do formiranja diolnog analoga formule XVIII. Takav proces se može upotrijebiti kako bi se proizvela regiospecifična, kao i enantiospecifična transformacija spoja formule XVII u 1-2 diol formule XVIII pomoću specifičnog mikroorganizma ili serija različitih mikroorganizama. Takvi mikroorganizmi mogu, na primjer, biti prema prirodi bakterijski, kvasci ili gljivični i mogu se dobiti od distributera, kao što je ATCC ili biti određeni za upotrebu u ovom postupku, kao što je to moguće postupcima poznatim stručnjaku. Spoj XVIII je spoj formule I u kojoj je Y, kao što je opisan gore, a A1 i A2 su poželjno CR7.

Ovaj izum, također, omogućuje postupke shema XII i XIII.

Tako, u jednom ostvarenju, ovaj izum omogućuje postupak za izradu spoja slijedeće formule XVI ili njegove soli:

[image]

u kojoj su simboli, kao što su ovdje definirani,

koji obuhvaća korake dovođenja u kontakt spoja slijedeće formule XV ili njegove soli:

[image]

u kojoj su simboli, kao što su definirani gore;

sa enzimom ili mikroorganizmom koji može katalizirati hidroksilaciju navedenog spoja XV kako bi se formirao navedeni spoj XVI i koji proizvodi navedenu hidroksilaciju.

U drugom ostvarenju koje ima prednost, ovaj izum omogućuje postupak izrade spoja slijedeće formule XVIII ili njegove soli:

[image]

u kojoj su simboli, kao što su ovdje definirani,

koji obuhvaća korake dovođenja u kontakt spoja slijedeće formule XVII ili njegove soli:

[image]

u kojoj su simboli, kao što su gore definirani;

sa enzimom ili mikroorganizmom koji može katalizirati otvaranje epoksidnog prstena spoja XVII kako bi se formirao diol navedenog spoja XVIII i koji proizvodi navedeno otvaranje prstena i formiranje diola.

Sve stereokonfiguracije nespecifičnih kiralnih centara spoja formula XV, XVI, XVII i XVIII su razmotrene u postupcima u ovom izumu, bilo same (oslobođene drugih stereoizomera), bilo u mješavini s drugim stereoizomernim oblicima. Ostvarenje izuma, koje ima prednost, je konverzija jednog izomera selektivno (npr. u prednosti hidroksilacija egzo izomera u odnosu na hidroksilaciju endo izomera) pri kontaktu sa izomernom mješavinom. Konverzija jednog izomera selektivno (npr. u prednosti hidroksilacija na egzo strani “egzo” izomera u odnosu na endo stranu “endo” izomera ili regioselektivno otvaranje epoksida kako bi se formirao samo jedan od dva moguća regioizomera trans diola) je ostvarenje izuma koje ima prednost. Isto tako, poželjno ostvarenje izuma je i hidroksilacija akiralnog intermedijera kako bi se formirao jedan optički izomer hidroksiliranog produkta. Razdvajanje racemske smjese intermedijera selektivnom hidroksilacijom ili otvaranje epoksidnog prstena i formiranje diola, kako bi se stvorio jedan od dva moguća optička izomera je, također, poželjno ostvarenje izuma. Izraz “razdvajanje” se ovdje koristi da označi djelomično, kao i potpuno razdvajanje, koje ima prednost.

Izrazi “enzimski proces” ili “enzimski postupak”, kako su ovdje korišteni, označavaju proces ili postupak ovog izuma u kojem se koristi enzim ili mikroorganizam. Izraz “hidroksilacija”, kako je ovdje korišten, označava dodavanje hidroksilne grupe na metilensku grupu, kao što je gore opisano. Hidroksilacija se može postići, na primjer, kontaktom sa molekulskim kisikom u skladu sa postupcima ovog izuma. Formiranje diola se može postići, na primjer, kontaktom sa vodom, a u skladu sa postupcima ovog izuma. Upotreba “enzima” ili “mikroorganizma” u ovim postupcima podrazumijeva korištenje dva ili više, kao i jednog, enzima ili mikroorganizma.

Enzim ili mikroorganizam koji se koristi u ovom izumu može biti enzim ili mikroorganizam koji može katalizirati enzimske konverzije, koje su ovdje opisane. Enzimski ili mikrobni materijali, nezavisno od porijekla ili čistoće, mogu se upotrijebiti u slobodnom stanju ili imobilizirani na nosaču, kao što je putem fizičke adsorpcije ili zarobljavanja. Mikroorganizmi ili enzimi, koji su prikladni za upotrebu u ovom izumu mogu se odabrati ispitivanjem na željenu aktivnost, na primjer, dovođenjem u kontakt kandidata mikroorganizma ili enzima sa polaznim spojem XV ili XVII ili njihove soli i, označavanjem konverzije u odgovarajući spoj XVI ili XVIII ili njihovu sol. Enzim može biti, na primjer, u obliku životinjskih ili biljnih enzima ili njihovih mješavina, stanica mikroorganizama, smrvljenih (liziranih) stanica, ekstrakata stanica ili može biti sintetskog porijekla.

Tipični mikroorganizmi uključuju one, koji su u okviru rodova Streptomyces ili Amycolatopsis. Mikroorganizmi, koji imaju posebnu prednost su oni, koji su u okviru vrsta Streptomyces griseus posebno, Streptomyces griseus ATCC 10137 i, Amycolatopsis orientalis, kao što je ATCC 14930, ATCC 21425, ATCC 35165, ATCC 39444, ATCC 43333, ATCC 43490, ATCC 53550, ATCC 53630 i, posebno, ATCC 43491. Izraz “ATCC”, kako je ovdje korišten, odnosi se na broj priraštaja American Type Culture Collection, 10801 University Blvd., Manassas Virginia 20110-2209, skladišta za organizam o kome je riječ. Treba razumijeti da su mutanti ovih organizama, također, razmatrani ovim izumom za upotrebu u postupcima koji su ovdje opisani, kao što su oni, modificirani upotrebom kemijskih, fizičkih (npr. X-zrake) ili bioloških puteva (npr. putem tehnika molekularne biologije).

Enzimi koji imaju prednost obuhvaćaju one, koji potječu od mikroorganizama, posebno onih mikroorganizama koji su gore opisani. Enzimi mogu biti izolirani, npr. postupcima ekstrakcije i pročišćavanja, kao što je to postupcima poznatim prosječnim stručnjacima. Enzim se može, npr. koristiti u svom slobodnom stanju ili u imobiliziranoj formi. Jedno ostvarenje izuma je to gdje je enzim adsorbiran na prigodan nosač, npr. dijatomejsku zemlju (porozni Celite Hyflo Supercel), mikroporozni polipropilen (Enka Accurel® polipropilenski prašak) ili anionski polimerni adsorbens, kao što je Amberlite® XAD-2 (polistiren) ili XAD-7 (poliakrilat) od Rohm and Haas Co. Kada se koristi da imobilizira enzim, nosač može kontrolirati veličinu enzimskih čestica i spriječiti agregaciju enzimskih čestica kada se upotrebljavaju u organskom otapalu. Imobilizacija se može postići, npr. taloženjem vodene otopine enzima sa hladnim acetonom u prisutnosti Celite Hyflo Supercel, a zatim, vakuumskim sušenjem ili, u slučaju anionskog polimernog adsorbensa, putem inkubacije enzimskih otopina sa adsorbensom na mućkalici, uklanjanja viška otopine i sušenja enzim-adsorbens smola pod vakuumom. Dok je poželjno koristiti najmanju moguću količinu enzima, količina enzima koja se zahtijeva će varirati zavisno od specifične aktivnosti upotrijebljenog enzima.

Hidroksilacija, kako je gore opisana, može se javiti in vivo. Npr. jetreni enzim može selektivno u odnosu na endo izomer, hidroksilirati egzo izomer spoja ovog izuma. U izvođenju postupaka ovog izuma izvan tijela, može se upotrijebiti jetrena mikrosomalna hidroksilaza kao enzim za kataliziranje.

Ovi procesi se mogu, isto tako, izvesti upotrebom stanica mikroba, koje sadrže enzime koji mogu katalizirati konverzije. Kada se koristi mikroorganizam da bi se izvela konverzija, ove procedure se konvencionalno izvode dodavanjem stanica i početnog materijala u željeni reakcijski medij.

Gdje se upotrebljavaju mikroorganizmi, stanice se mogu koristiti u obliku intaktnih vlažnih stanica ili osušenih stanica, kao liofiliziranih, osušenih raspršivanjem ili stanica osušenih zagrijavanjem ili, u obliku tretiranog staničnog materijala, kao što su rupturirane stanice ili stanični ekstrakti. Isto tako se mogu upotrijebiti i stanični ekstrakti imobilizirani na Celite® ili Accurel® polipropilenu, kao što je opisano ranije. Također, razmotrena je i upotreba genetski osmišljenih organizama. Stanica domaćin može biti bilo koja stanica, npr. Escherichia coli, modificirana da sadrži gen ili gene za ekspresiju jednog ili više enzima koji su sposobni za katalizu kakva je ovdje opisana.

Gdje se upotrebljavaju jedan ili više mikroorganizama, enzimski postupci ovog izuma se mogu izvesti odmah po fermentaciji mikroorganizama (dvo-stupanjska fermentacija i konverzija) ili, istovremeno sa tim, to jest, u zadnjem slučaju putem in situ fermentacije i konverzije (jedno-stupanjska fermentacija i konverzija).

Stručnjak može postići rast mikroorganizama upotrebom odgovarajućeg medija. Odgovarajući medij za rast mikroorganizama uključuje one, koji omogućuju nutrijente neophodne za rast stanica mikroba. Tipični medij za rast obuhvaća neophodne izvore ugljika, izvore dušika i elemente (npr. u količinama u tragu). Mogu se, isto tako, dodati induktori. Izraz “induktor”, kako je ovdje korišten, uključuje bilo koji spoj koji povećava nastanak željene enzimske aktivnosti u okviru stanice mikroba.

Izvori ugljika mogu uključiti šećere, kao: maltozu, laktozu, glukozu, fruktozu, glicerol, sorbitol, saharozu, škrob, manitol, propilenglikol i slično; organske kiseline, kao: natrij acetat, natrij citrat i slične; i alkohole, kao: etanol, propanol i slične.

Izvori dušika mogu uključiti: N-Z amin A, kukuruzom prožetu tekućinu, brašno od zrna soje, goveđe ekstrakte, ekstrakte kvasca, melasu, pekarski kvasac, tripton, nutrisoju, pepton, amin kvasca, amino kiseline, kao natrij glutamat i slične, natrij nitrat, amonij sulfat i slično.

Elementi u tragu mogu uključiti soli: magnezija, mangana, kalcija, kobalta, nikla, željeza, natrija i kalija. Fosfati, isto tako, se mogu dodati u tragu ili, poželjno, više od količina u tragu.

Medij koji se koristi može sadržavati više od jednog izvora ugljika ili dušika ili drugih nutrijenata.

Medij za rast, koji ima prednost obuhvaća vodene medije.

Mućkanje i provjetravanje reakcijske smjese utječe na količinu dostupnog kisika tijekom procesa konverzije kada se izvodi, npr. u kulturama u tikvicama koje se mućkaju ili fermentacijskim tankovima tijekom rasta mikroorganizama.

Prednost ima inkubacija reakcijskog medija na temperaturi između otprilike 4 i oko 60°C. Reakcijsko vrijeme može odgovarajuće varirati u zavisnosti od količine enzima koji se koristi i njegove specifične aktivnosti. Reakcijska vremena se mogu smanjiti povećavanjem reakcijske temperature i/ili povećavanjem količine enzima koji se dodaje u reakcijsku otopinu.

Isto tako, prednost ima korištenje vodene tekućine kao reakcijskog medija, iako se može upotrijebiti i organska tekućina ili, mješavine organsko/vodene tekućine koje se miješaju ili se ne miješaju (bifazne). Količina enzima ili mikroorganizma koji se koristi, u odnosu na početni materijal, bira se tako da omogući katalizu enzimskih konverzija u ovom izumu.

Otapala za organsku fazu sustava bifaznih otapala mogu biti bilo koje organsko otapalo, koje se ne miješa s vodom, kao što su: toluen, cikloheksan, ksilen, triklorotrifluoroetan i slični. Vodena faza je prikladno od vode, prednost ima deionizirana voda ili, pogodna vodena puferiran otopina, posebno, otopina fosfatnog pufera. Sustav bifaznih otapala poželjno sadrži između oko 10 do 90 zapreminskih postotaka organske faze i između oko 90 do 10 zapreminskih postotaka vodene faze i, najpoželjnije, sadrži točno ili otprilike oko 20 zapreminskih postotaka organske faze i točno ili otprilike oko 80 zapreminskih postotaka vodene faze.

Tipično ostvarenje takvih procesa započinje pripremom vodene(ih) otopine enzima ili mikroba koji će se koristiti. Npr. poželjni enzim(i) ili mikrobi se mogu dodati u odgovarajuću količinu vodenog otapala, kao što je fosfatni pufer ili slični. Prednost ima prilagođavanje mješavine na željeni pH i održavanje na željenom pH.

Spojevi XVI i XVIII, proizvedeni procesima ovog izuma, se mogu izolirati i pročistiti, npr. postupcima, kao što su: ekstrakcija, destilacija, kristalizacija i kromatografija na koloni.

Spojevi koji imaju prednost

Podvrsta spojeva ovog izuma, koja ima prednost, obuhvaća Spojeve formule I ili njihove soli, u kojoj su jedan ili više, poželjno svi, slijedeći supstituenti, kao što su definirani ispod:

G je aril ili heterocikl (npr. heteroaril) grupa, u kojem je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja, poželjno sa: vodikom, alkilom ili supstituiranim alkilom, alkenilom ili supstituiranim alkenilom, alkinilom ili supstituiranim alkinilom, halo, cikloalkilom ili supstituiranim cikloalkilom, cikloalkenilom ili supstituiranim cikloalkenilom, arilom ili supstituiranim arilom, heterocikl ili supstituiranim heterocikl, arilalkilom ili supstituiranim arilalkilom, heterociklalkilom ili supstituiranim heterociklalkilom, CN, R1OC=O, R1C=O, R1HNC=O, R1R2NC=O, HOCR3R3’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, NR4R5, S=OR1, SO2R1, SO2NR1R1’, (R1)(R1’)P=O ili (R1’)(NHR1)P=O;

Z1 je: O, S, NH ili NR6;

Z2 je: O, S, NH ili NR6;

A1 je CR7 ili N;

A2 je CR7 ili N;

Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, OC=O, C=O, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil ili heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza;

W je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N;

Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5;

Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5;

L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5 ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3;

R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil;

R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil;

R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio;

R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O ili SO2NR1R1’;

R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; i

R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O iliSO2NR1R1’;

osobito, gdje grupe W i Y ove podvrste koja ima prednost su, također, u okviru definicija W’ i Y’ formule Ia uz uvjete (1) do (14) navedene formule Ia gdje odgovaraju ovoj podvrsti i, najpoželjnije, gdje (i) kada Y’ je –O- i W’ je CR7R7’-CR7R7’, A1 i A2 nisu istovremeno CH; i (ii) kada je L veza, G nije nesupstituirana fenil grupa.

Druga, poželjnija podvrsta spojeva izuma obuhvaća Spojeve formule I ili njihove soli, gdje jedan ili više, poželjno svi, slijedeći supstituenti su, kao što su definirani ispod:

G je aril ili heterocikl (npr. heteroaril) grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja, poželjno sa: vodikom, alkilom ili supstituiranim alkilom, alkenilom ili supstituiranim alkenilom, alkinilom ili supstituiranim alkinilom, halo, cikloalkilom ili supstituiranim cikloalkilom, cikloalkenilom ili supstituiranim cikloalkenilom, arilom ili supstituiranim arilom, heterocikl ili supstituiranim heterocikl, arilalkilom ili supstituiranim arilalkilom, heterociklalkilom ili supstituiranim heterociklalkilom, CN, R1C=O, R1HNC=O, HOCR3R3’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, NR4R5, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

Z1 je O;

Z2 je O;

A1 je CR7;

A2 je CR7;

Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza;

W je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N;

Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5;

Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5;

L je: veza;

R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterocikloalkil ili supstituirani heterocikloalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil;

R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil;

R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, alkiltio ili supstituirani alkiltio;

R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O ili SO2NR1R1’;

R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’;

R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, amino, NHR4, NR2R5, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1(C=O)O, R1NHC=O, SO2R1, R1R1’NC=O ili SO2NR1R1’;

R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’; i

R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O iliSO2NR1R1’;

osobito, gdje su grupe W i Y ove poželjne podvrste , također, u okviru definicija W’ i Y’ formule Ia uz uvjete (1) do (14) navedene formule Ia gdje odgovaraju ovoj podvrsti i, najpoželjnije, gdje (i) kada Y’ je –O- i W’ je CR7R7’-CR7R7’, A1 i A2 nisu istovremeno CH; i (ii) kada je L veza, G nije nesupstituirana fenil grupa.

Podvrsta spojeva izuma koja ima posebnu prednost obuhvaća Spojeve formule I ili njihove soli gdje su jedan ili više, poželjno svi, supstituenti, kao što su definirani ispod:

G je aril (posebno, fenil ili naftil) ili heterocikl (posebno one heterocikl grupe G spoja koje su Primjerima) grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja, poželjno sa supstituentima, kao što su prikazani u bilo kojem od spoja Primjera;

L je veza, (CR7R7’)n (gdje je n 1 i R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil) ili –CH2-NH-;

A1 i A2 su svaki, nezavisno CR7, gdje R7 (i) je: vodik, alkil ili supstituirani alkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkenil ili supstituirani alkenil (npr. alkenil supstituiran sa arilom (osobito, fenilom ili naftilom) ili, supstituirani aril ili, alkenil supstituiran sa heterocikl ili supstituiranim heterocikl), aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, gdje su za svaki, supstituenti koji imaju prednost jedna ili više grupa, koje su odabrane od V1 (osobito A1 i A2 grupe formule CR7 gdje je R7 za svaki od A1 i/ili A2 nezavisno odabran od nesupstituiranih C1-4alkila ili C1-4 alkila gdje je alkil supstituiran sa jednom ili više grupa V1) ili (ii) tvori zajedno sa R7 grupe W (osobito gdje W je CR7R7’-CR7R7’) heterociklični prsten;

V1 je: OH, CN, halo, -O-aril, -O-supstituirani aril, -O-heterocikl (npr. -O-(po izboru supstituirani piridinil) ili –O-(po izboru supstituirani pirimidinil)), -O-supstituirani heterocikl, -O-CO-alkil, -O-CO-supstituirani alkil, -O-(alkilsilil), -O-arilalkil, -O-supstituirani arilalkil, -O-CO-alkil, -O-CO-supstituirani alkil, -O-CO-arilalkil, -O-CO-supstituirani arilalkil, -O-CO-aril, -O-CO-supstituirani aril, -O-CO-heterocikl, -O-CO-supstituirani heterocikl, -S-(po izboru supstituirani aril)-NH-CO-(po izboru supstituirani alkil), -SO-(po izboru supstituirani aril)-NH-CO-(po izboru supstituirani alkil), -SO2-(po izboru supstituirani aril)-NH-CO-(po izboru supstituirani alkil), -NH-SO2-aril, -NH-SO2-supstituirani aril, -NH-CO-O-(po izboru supstituirani arilalkil), -NH-CO-O-alkil, -NH-CO-O-supstituirani alkil, -NH-CO-alkil, -NH-CO-supstituirani alkil, -NH-CO-aril, -NH-CO-supstituirani aril, -NH-CO-(po izboru supstituirani arilalkil), -NH-CO-(po izboru supstituirani alkil)-O-(po izboru supstituirani aril), -N(po izboru supstituirani alkil)(po izboru supstituirani aril), -N(po izboru supstituirani alkil)(po izboru supstituirani arilalkil), -COH, -COOH, -CO-O-alkil, -CO-O-supstituirani alkil, -CO-O-po izboru supstituirani arilalkil, -CO-aril, -CO-supstituirani aril, -O-CO-NH-aril, -O-CO-NH-supstituirani aril, -CO-NH-aril, -CO-NH-supstituirani aril, -CO-NH-arilalkil, -CO-NH-supstituirani arilalkil, -O-(po izboru supstituirani aril)-NH-CO-(po izboru supstituirani alkil);

Y je: -O-, -SO-, -N(V2)-, -CH2-N(V2)-, -CO-N(alkil)-, -CH2-S-, -CH2-SO2-;

V2 je: vodik, alkil, arilalkil, -CO-alkil, -CO-O-aril, -CO-O-arilalkil;

W je CR7R7’-CR7R7’ (gdje su R7 i R7’, svaki nezavisno, odabrani od: H, OH, alkila ili supstituiranog alkila (kao što je hidroksialkil) ili gdje R7 tvori heterociklični prsten zajedno sa R7 sa A1 ili A2), CR8=CR8’ (gdje su R8 i R8’, svaki nezavisno, odabrani od: H, alkila ili supstituiranog alkila (kao što je hidroksialkil)), CR7R7’-C=O (gdje su R7 i R7’ svaki vodik ili, gdje R7 tvori heterociklični prsten zajedno sa R7 sa A1 ili A2), N=CR8 (gdje je R8 alkil), cikloalkil ili supstituirani cikloalkil ili heterocikl ili supstituirani heterocikl;

Z1 i Z2 su O; i

Q1 i Q2 su H.

G-L grupe, koje imaju prednost su: po izboru supstituirani fenil, po izboru supstituirani naftil i po izboru supstituirane spojene biciklične heterociklične grupe, kao što su po izboru supstituirane benzo-spojene heterociklične grupe (npr. povezane sa ostatkom molekule preko benzenskog dijela), posebno takve grupe u kojima heterociklični prsten, vezan za benzen ima 5 članova, a objašnjene primjerom bi bile: benzoksazol, benzotiazol, benzotiadiazol, benzoksadiazol ili benzotiofen, npr.:

[image]

[image]

[image]

[image]

[image]

[image]

gdje

X = halo (osobito F), OH, CN, NO2 ili

[image]

X’ = halo (posebno Cl, F ili J), CH3, CF3, CN ili OCH3;

U je O ili S (gdje S može po izboru biti oksidiran, npr. u SO);

U1 je CH3 ili CF3;

svaki U2 je nezavisno: N, CH ili CF;

U3 je N, O ili S;

U4 i U5, zajedno sa atomima za koje su vezani formiraju po izboru supstituirani 5-eročlani heterociklični prsten, koji može biti djelomično nezasićen ili aromatičan i koji sadrži 1 do 3 heteroatoma prstena;

svaki U6 je nezavisno CH ili N; i

[image] označava dvostruku vezu(e) u okviru prstena, koji formiraju U3, U4 i U5.

Podvrsta koja ima naročitu prednost obuhvaća Spojeve formule I, koja ima slijedeću strukturu, ili njihove soli:

[image]

gdje je G po izboru supstituirani fenil, naftil ili benzo-spojena biciklična heterociklična grupa, R7 je CH3 ili C1-4alkil supstituiran sa V1 i jedan R7’ je H ili hidroksil, a drugi je H.

Spojevi izuma koji imaju prednost obuhvaćaju:

[3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-piridinkarbonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(2,1,3-benzoksadiazol-5-il)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3,4-dimetil-2-piridinkarbonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3,4-dimetil-2-piridinkarbonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(7-kloro-2,1,3-benzoksadiazol-4-il)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

metil ester (3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksa-hidro-6-cijano-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline;

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7,8-trimetil-1,3-diokso-4,7-imino-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dikloro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dikloro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[difluorometil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[fenilmetoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[propiloksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[ciklopropilmetiloksi]karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[metoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2,3-diklorobenzonitril;

[3aR-(3aα,4β,4aα,5aα,6β,7aα)]-4-(oktahidro-4a-hidroksi-4,6-dimetil-1,3-diokso-4,6-epoksicikloprop[f]izoindol-2(1H)-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N,N-dimetil-1H-izoindol-5-karboksamid;

[3aR-(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-kloro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-kloro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi]metil] -4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[5-kloro-2-piridinil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[[fenilamino]karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(1-metiletiloksi)karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[5-fluoro-4-pirimidinil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[etiloksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

4-piridinilmetil ester [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil) fenil)-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[4-piridinilmetoksikarbonil] amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril;

3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[2-metil-5-(trifluorometil)-2H-pirazol-3-il] oksi]metil]-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

metil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-ciklopropilmetoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[((fenilmetil)amino)karbonil]oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; i

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-ciklopropiloksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvate, prolijekove ili stereoizomere.

Poželjniji spojevi izuma obuhvaćaju:

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-jodofenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)piridinil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-metoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-metoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril;

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksa-hidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksa-hidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion;

(3aα,4β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

metil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksa-hidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline;

[3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-etilsulfonamido-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(4-fluorofenilamino)karbonil] oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(1-metiletilamino)karbonil]oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(1-metiletoksi)karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N-metil-N-fenil-1H-izoindol-5-karboksamid;

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-kloro-3-metilbenzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[etoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[2-metil-5-(trifluorometil)-2H-pirazol-3-il]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

metil ester [3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi] metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-metoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karbonitril;

[3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[[(ciklopropilmetil)amino]karbonil] amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(dimetilamino)sulfonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-benzensulfonamido-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

[3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

metil ester [3aR-(3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; i

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(dimetilamino)sulfonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvate, prolijekove ili stereoizomere.

Spojevi u kojima je R7’ hidroksil mogu omogućiti povećanje topljivosti u vodi i metaboličku stabilnost u odnosu na odgovarajuće spojeve u kojima je R7’ H, pored toga što imaju dobru permeabilnost i visoke nivoe u sistemskoj cirkulaciji. Ovi spojevi koji nose hidroksil, se mogu dobiti in vivo, metabolizmom odgovarajućih spojeva u kojima je R7’ H, kao i sintetskim proizvodnim postupcima, kao što su oni koji su ovdje opisani.

Upotreba i iskoristljivost

Spojevi ovog izuma mijenjaju funkciju nuklearnih hormonskih receptora (NHR) i obuhvaćaju spojeve koji su, npr. agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti: androgenog receptora (AR), estrogenog receptora (ER), progesteronskog receptora (PR), glukokortikoidnog receptora (GR), mineralokortikoidnog receptora (MR), receptora steroida i ksenobiotika (SXR), drugih NHRa koji vežu steroide, Orfanovih receptora ili drugih NHRa. Prednost ima selektivno moduliranje jednog takvog NHR-a u odnosu na druge u okviru NHR porodice. “Mijenjanje” (“modulacija”) obuhvaća, npr. aktivaciju (npr. agonistička aktivnost, kao što je selektivna agonistička aktivnost prema androgenom receptoru) ili inhibiciju (npr. antagonistička aktivnost).

Ovi spojevi su zbog toga korisni u liječenju stanja koja su u vezi sa NHR. “Stanja koja su u vezi sa NHR”, kako se ovdje koristi, označava stanje ili poremećaj koji se može liječiti mijenjanjem funkcije NHR kod pojedinca, gdje liječenje obuhvaća: prevenciju (npr. profilaktički tretman), djelomično ublažavanje ili izliječenje stanja ili poremećaja. Promjena se može javiti lokalno, npr. u okviru izvjesnih tkiva pojedinca ili, daleko sveobuhvatnije za vrijeme liječenja takvog stanja poremećaja kod pojedinca.

Spojevi ovog izuma su korisni za liječenje raznovrsnih stanja i poremećaja, uključujući, ali se ne ograničavajući na one, koji su opisani u nastavku:

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti estrogenog receptora, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje estrogenog receptora. Primjene navedenih spojeva obuhvaćaju, ali nisu ograničene na: osteoporozu, toplotne valunge, vaginalnu suhoću, rak prostate, rak dojki, rak endometrijuma, rak koji ekspresuju estrogeni receptori, kao što su gore spomenuti tumori i drugi, kontracepciju, završetak trudnoće, menopauzu, amenoreju i dismenoreju.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti progesteronskog receptora, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje progesteronskog receptora. Primjene navedenih spojeva obuhvaćaju, ali nisu ograničene na: rak dojki, druge tumore koji sadrže progesteronski receptor, endometriozu, kaheksiju, kontracepciju, menopauzu, usklađivanje ciklusa, meniginom, dismenoreju, tumore materice, završetak trudnoće, indukciju porođaja i osteoporozu.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti glukokortikoidnog receptora, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje glukokortikoidnog receptora. Primjene navedenih spojeva obuhvaćaju ali nisu ograničene na: inflamatorne bolesti, autoimune bolesti, rak prostate, rak dojki, Alzheimerovu bolest, psihotičke poremećaje, ovisnost o lijekovima, ne-inzulin zavisni dijabetes melitus i, kao blokirajuća sredstva dopaminskog receptora ili na drugi način, kao sredstva za liječenje poremećaja posredovanih dopaminskim receptorom.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti mineralokortikoidnog receptora, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje mineralokortikoidnog receptora. Primjene navedenih spojevi obuhvaćaju ali nisu ograničene na: sindrom povlačenja lijeka i inflamatorne bolesti.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti aldosteronskog receptora, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje aldosteronskog receptora. Jedna primjena navedenih spojeva obuhvaća ali nije ograničena na kongestivnu srčanu slabost.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti androgenog receptora, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje androgenog receptora. Primjene navedenih spojeva obuhvaćaju ali nisu ograničene na: hirzutizam, akne, seboreju, Alzheimerovu bolest, androgenu alopeciju, hipogonadizam, hiperpilozu, benignu hipertrofiju prostate, adenome i neoplazije prostate (kao što je uznapredovali metastatski rak prostate), liječenje benignih ili malignih tumorskih stanica koje sadrže androgeni receptor, kao što je slučaj za rak: dojki, mozga, kože, ovarija, mokraćnog mjehura, limfe, jetre i bubrega, pankreasne tumore, promjenu ekspresije VCAM i primjenu u tom pogledu za liječenje srčane bolesti, upale i imuno modulacije, promjenu ekspresije VEGF i primjenu u okviru toga za upotrebu kao antiangiogena sredstva, osteoporozu, supresiju spermatogeneze, libido, kaheksije, endometrioze, sindrom policističnih jajnika, anoreksiju, androgenu dopunu za snižene nivoe testosterona koji su u vezi sa starenjem, mušku menopauzu, zamjenu muških hormona, mušku i žensku seksualnu disfunkciju i inhibiciju atrofije mišića kod pokretnih pacijenata. Npr. razmotrene su sve promene AR, pri čemu naročitu prednost ima prostata selektivna AR promjena (“SARM”), kao za liječenje ranog stadija raka prostate.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao (poželjno, selektivni) antagonisti mutiranog androgenog receptora, primjera radi, nađenog u brojnim tumorskim lozama. Primjeri takvih mutanata su oni, nađeni u reprezentativnim lozama prostatičnih tumorskih stanica, kao što su: LNCap, (T877A mutacija, Biophys. Acta, 187, 1052 (1990)), PCa2b, (L701H & T877A mutacije, J. Urol., 162, 2192 (1999)) i CWR22, (H874Y mutacija, Mol. Endo., 11, 450 (1997)). Primjene ovih spojeva obuhvaćaju ali nisu ograničene na: adenome i neoplazme prostate, rak dojki i rak endometrija.

Spojevi formule I se mogu primijeniti kao agonisti, djelomični agonisti, antagonisti ili djelomični antagonisti receptora steroida i ksenobiotika, poželjno selektivno za taj receptor, u grupi medicinskih stanja koja uključuju promjenu putanje receptora steroida i ksenobiotika. Primjene navedenih spojeva obuhvaćaju ali nisu ograničene na: liječenje disregulacije homeostaze kolesterola, smanjivanje metabolizma farmaceutskih sredstava istovremenom primjenom sredstva (spoj ovog izuma) koje mijenja P450 regulatorne učinke SXR-a.

Pored gore spominjanih NHRa, također, postoje brojni NHRi za koje možda nisu opisani aktivirajući ili deaktivirajući ligandi. Ovi proteini se klasificiraju kao NHRi zahvaljujući snažnoj homologiji sekvence sa drugim NHRa i, poznati su kao Orfan receptori. Kako Orfan receptori pokazuju snažnu homologiju sekvence sa drugim NHRa, Spojevi formule I uključuju one, koji služe kao modulatori funkcije Orfan NHR. Orfan receptori, koji su promijenjeni NHR modulatorima, kao što su spojevi u okviru formule I, prikazani su primjerom ali, nisu ograničeni na one nabrojane u Tablici 1. Tipične terapeutske primjene modulatora Orfan receptora su, isto tako, navedene u Tablici 1, ali nisu ograničene na te primjere.

Tablica 1. Tipični Orfan nuklearni hormonski receptori, oblik (M=monomerni, D=heterodimerni, H=homodimerni), tkivna ekspresija i ciljne terapijske primjene. (CNS=centralni nervni sustav)

[image]

Tako ovaj izum omogućuje postupke za liječenje stanja povezanih sa NHR, obuhvaćajući korak primjenjivanja pojedincu kojem je to potrebno najmanje jednog Spoja formule I u djelotvornoj količini. Druga terapeutska sredstva, kao što su ona opisana ispod, mogu biti upotrijebljena sa spojevima izuma u ovim postupcima (primjera radi, odvojeno ili, formulirani zajedno kao fiksna doza). U postupcima ovog izuma, takvo drugo terapeutsko sredstvo(a) može biti primjenjeno prije, istovremeno sa ili poslije primjene spojeva ovog izuma.

Ovaj izum, također, omogućuje farmaceutske smjese koje sadrže najmanje jedan od Spojeva formule I koji može liječiti stanje povezano sa NHR, u količini djelotvornoj za to i, farmaceutski prihvatljiv nosač (vehikul ili razrjeđivač). Smjese ovog izuma mogu sadržavati druga terapeutska sredstva, kao što je opisano ispod i, mogu biti formulirane, primjera radi, upotrebom konvencionalnih čvrstih ili tekućih vehikula ili razrjeđivača, kao i farmaceutskih aditiva one vrste koja je odgovarajuća za način željenog primjenjivanja (npr. podloge, vežuća sredstva, konzervansi, stabilizatori, arome i td.), a u skladu sa tehnikama, kao što su one, dobro poznate u praksi farmaceutskog formuliranja.

Treba naglasiti da su spojevi ovog izuma, bez ograničenja u pogledu njihovog mehanizma učinka, korisni u liječenju bilo kojeg od stanja ili poremećaja koja su ovdje nabrojana ili opisana, kao što su inflamatorne bolesti ili tumori ili druge proliferativne bolesti i, u smjesama za liječenje takvih stanja ili poremećaja. Takva stanja i poremećaji obuhvaćaju, bez ograničavanja, bilo koje od prethodno opisanih, kao i ona koja su opisana u nastavku, kao što su: održavanje jačine i funkcije muskulature (npr. kod starijih); preokret ili prevenciju slabosti ili funkcionalnog propadanja povezanog sa starenjem (“ARFD”) kod starijih (npr. sarkopenija); liječenje kataboličkih sporednih efekata glukokortikoida; prevencija i/ili liječenje smanjene koštane mase, gustoće ili rasta (npr. osteoporoza i osteopenija); liječenje sindroma kronične iscrpljenosti (CFS); kronična malagija; liječenje sindroma akutne iscrpljenosti i gubitka mišića poslije operacije (npr. post-kirurška rehabilitacija); ubrzavanje zarastanja rane; pospješivanje obnavljanja koštanog prijeloma (kao što je ubrzavanje oporavka pacijenata sa prijelomom bedra); ubrzavanje zarastanja složenih prijeloma, npr. distrakcijska osteogeneza; kod zamjene zgloba; sprječavanje formiranja postkirurške adhezije; pospješivanje obnavljanja rasta zuba; održavanje senzorne funkcije (npr. sluha, vida, mirisa i okusa); liječenje periodontalne bolesti; liječenje slabljenja poslije prijeloma i slabljenja u vezi sa kroničnom opstruktivnom bolesti pluća (COPD), kronične bolesti jetre, AIDS-a, bestežinskog stanja, kaheksije kao poslijedice raka, oporavak opekotine i povrede, kroničnog kataboličkog stanja (npr. kome), poremećaja uzimanja hrane (npr. anoreksije) i kemoterapija; liječenje kardiomiopatije; liječenje trombocitopenije; liječenje zaostajanja rasta u vezi sa Chronovom bolesti; liječenje sindroma kratkog crijeva; liječenje sindroma iritabilnog kolona; liječenje inflamatorne bolesti crijeva; liječenje Chronove bolesti i ulcerativnog kolitisa; liječenje komplikacija udruženih sa transplantacijom; liječenje fiziološkog niskog rasta, uključujući djecu sa deficijencijom hormona rasta i niski rast kao poslijedicu kroničnih bolesti; liječenje gojaznosti i zaostajanja rasta udruženog sa gojaznošću; liječenje anoreksije (npr. udružene sa kaheksijom ili starenjem); liječenje hiperkortizolizma i Cushingovog sindroma; Pagetove bolesti; liječenje osteoartritisa; indukcija pulzatilnog oslobađanja hormona rasta; liječenje osteohondrodiplazije; liječenje depresije, nervoze, razdražljivosti i stresa; liječenje smanjene mentalne energije i niskog stupnja samopoštovanja (npr. motivacija/sigurnost); poboljšanje kognitivne funkcije (npr. liječenje demencije, uključujući Alzheimerovu bolest i kratkotrajan gubitak pamćenja); liječenje katabolizma u vezi sa plućnom disfunkcijom i zavisnosti od ventilatora; liječenje srčane disfunkcije (npr. udružene sa bolešću zalistaka, miokardijalni infarkt, srčana hipertrofija ili kongestivna srčana slabost); snižavanje krvnog pritiska; zaštita od ventrikularne disfunkcije ili sprječavanje reperfuzionih ispada; liječenje odraslih kod kronične dijalize; preokret ili usporavanje kataboličkog stanja u starenju; ublažavanje ili preokret proteinskih kataboličkih odgovora po traumi (npr. preokret kataboličkog stanja povezanog sa kirurgijom, kongestivna srčana slabost, srčana miopatija, opekotine, rak, COPD i td.); smanjivanje kaheksije i gubitka proteina kao poslijedice kroničnih bolesti, kao što je rak ili AIDS; liječenje hiperinzulinemije, uključujući nezidioblastozu; liječenje imunosupresivnih pacijenata; liječenje slabljenja koje je u vezi sa multiplom sklerozom ili drugim neurodegenerativnim poremećajima; pospješivanje obnavljanja mijelina; održavanje zategnutosti kože; tretman metaboličke homeostaze i bubrežne homeostaze (npr. kod starijih slabog zdravlja); stimulacija osteoblasta, koštanog preoblikovanja i rasta hrskavice; regulacija unosa hrane; liječenje inzulinske rezistencije, uključujući NIDDM, kod sisavaca (npr. ljudi); liječenje inzulinske rezistencije u srcu; poboljšanje kvaliteta spavanja i korekcija relativnog hiposomatotropizma starenja, kao poslijedice visokog porasta kod REM sna i pada u REM latentnom periodu; liječenje hipotermije; liječenje kongestivne srčane slabosti; liječenje lipodistrofije (npr. kod pacijenata koji su na HIV ili AIDS terapiji i uzimaju preparate kao što su inhibitori proteaza); liječenje mišićne atrofije (npr. kao poslijedice fizičke neaktivnosti, ležanja ili u uvjetima smanjenog dobivanja na težini); liječenje muskuloskeletnog slabljenja (npr. kod starih); poboljšanje ukupne plućne funkcije; liječenje poremećaja spavanja; i liječenje kataboličkog stanja u prolongiranim kritičnim bolestima; liječenje hirzutizma, akni, seboreje, androgene alopecije, anemije, hiperpiloze, benigne hipertrofije prostate, adenoma i neoplazmi prostate (npr. uznapredovali metastatski rak prostate) i stanica malignog tumora koje sadržavaju androgeni receptor, kao što je to u slučaju raka: dojki, mozga, kože, jajnika, mokraćnog mjehura, limfe, jetre i bubrega; tumori kože, pankreasa, endometrija, pluća i kolona; osteosarkom; hiperkalcemija koja prati malignitet; metastatska koštana bolest; liječenje spermatogeneze, endometrioze i sindroma policističnih jajnika; sprečavanje preeklampsije, eklampsije u trudnoći i preuranjenog porođaja; liječenje premenstrualnog sindroma; liječenje vaginalne suhoće; sniženje nivoa testosterona kod muškaraca, a koje je u vezi sa starenjem, muška menopauza, hipogonadizam, zamjena muških hormona, muška i ženska seksualna disfunkcija (npr. erektilna disfunkcija, smanjen seksualni nagon, seksualno zadovoljstvo, snižen libido), muška i ženska kontracepcija, gubitak kose, Reavenov sindrom i uvećanje koštane i mišićne mogućnosti/snage; i stanja, bolesti i bolesti koje se zajednički vode kao “sindrom X” ili metabolički sindrom, kao što je detaljno opisano u: Johannsson J. Clin. Endocrinol. Metab., 82, 727-34 (1997).

Spojevi izuma imaju terapeutsku upotrebljivost u moduliranju aktivacije/proliferacije imunih stanica, npr. kao kompetitivni inhibitori reakcije intrastaničnog vezanja ligand/receptor obuhvaćajući i CAMs (Cellular Adhesion Molecules) (molekule stanične adhezije) i leukointegrine. Primjera radi, ovi spojevi mijenjaju LFA-ICAM 1, a posebno su korisni kao antagonisti LFA-ICAM 1 i u liječenju svih stanja povezanih sa LFA-ICAM 1, kao što su imunološki poremećaji. Poželjna upotreba ovih spojeva obuhvaća, ali nije ograničena na: inflamatorna stanja, kao što su ona koja su poslijedica odgovora ne-specifičnog imunog sustava kod sisavaca (npr. respiratorni distres sindrom odraslih, šok, trovanje kisikom, sindrom povrede više organa po septikemiji, sindrom povrede više organa po traumi, reperfuzijska povreda tkiva zahvaljujući kardiopulmonalnom bajpasu, miokardijalni infarkt ili upotreba sa trombolitičkim sredstvima, akutni glomerulonefritis, vaskulitis, reaktivni artritis, dermatoze sa komponentom akutne upale, moždani udar, povrede toplotom, hemodijaliza, leukofereza, ulcerativni kolitis, nekrotizirajući enterokolitis i sindrom udružen sa transfuzijom granulocita i stanja koja proizilaze iz odgovora specifičnog imunog sustava kod sisavaca (npr. psorijaza, odbacivanje transplanta organa/tkiva, reakcije domaćin protiv kalema i autoimune bolesti, uključujući Raynaudov sindrom, autoimuni tireoiditis, dermatitis, multiplu sklerozu, reumatoidni artritis, inzulin-zavisni dijabetes melitus, uveitis, inflamatorna bolest crijeva, uključujući Chronovu bolest i ulcerativni kolitis i sistemski lupus eritematozus). Ovi spojevi se mogu koristiti za liječenje astme ili kao dodatak za minimiziranje toksičnosti sa terapijom citokinima u liječenju raka. Ovi spojevi se mogu upotrijebiti za liječenje svih bolesti koje se danas mogu liječiti steroidnom terapijom. Ovi spojevi se mogu upotrijebiti za liječenje ovih i drugih bolesti, sami ili zajedno sa drugim imunosupresivnim ili antiinflamatornim sredstvima. U skladu sa izumom, Spojevi formule I se mogu primijeniti prije otpočinjanja upale (tako da suprimiraju i anticipiraju upalu) ili poslije početka upale. Kada se daje profilaktički, imunosupresivni spoj se, poželjno, omogućuje unapred u odnosu na bilo koji upalni odgovor ili simptom (npr. prije, uz ili neposredno odmah po vremenu transplantacije organa ili tkiva ali, prije bilo kojeg od simptoma ili odbacivanja organa). Profilaktička primjena Spojeva formule I sprečava ili ublažava bilo koji upalni odgovor koji slijedi (kao što je, npr. odbacivanje transplantiranog organa ili tkiva i td.). Primjena Spojeva formule I ublažava bilo koju upalu (kao što je, npr. odbacivanje transplantiranog organa ili tkiva).

Spojevi formule I se mogu primijeniti za bilo koju od ovdje opisanih upotreba, bilo kojim prikladnim načinom, npr. oralno, što bi bilo u obliku tableta, kapsula, granula ili praškova; sublingvalno; bukalno; parenteralno, što bi bilo putem subkutanih, intravenskih, intramuskularnih ili intrasternalnih injekcija ili infuzijskih tehnika (npr. kao sterilne injektabilne vodene ili nevodene otopine ili suspenzije); nazalno, uključujući primjenjivanje na nazalne membrane, kao što bi bilo inhalacijskim sprejom; površinski, kao što bi bilo u obliku krema ili masti; ili rektalno, kao što bi bilo u obliku supozitorija; u dozno-jediničnim formulacijama koje sadržavati ne-toksične, farmaceutski prihvatljive vehikulume ili razrjeđivače. Ovi spojevi se mogu, primjera radi, primjeniti u obliku pogodnom za momentalno oslobađanje ili produženo oslobađanje. Neposredno oslobađanje ili produženo oslobađanje može se postići upotrebom pogodnih farmaceutskih smjesa koje sadržavaju ove spojeve ili, osobito u slučaju produženog oslobađanja, upotrebom uređaja, kao što su subkutani implatanti ili osmotske pumpe. Ovi spojevi se mogu, isto tako, primjeniti liposomalno.

Tipične smjese za oralno primjenjivanje uključuju suspenzije, koje mogu sadržavati, npr. mikrokristalnu celulozu za omogućavanje oblikovanja, alginsku kiselinu ili natrij alginat kao suspendirajuće sredstvo, metilcelulozu kao sredstvo za uvećanje viskoziteta i zaslađivače ili sredstva za aromu, kao što su ona koja su poznata u praksi; i tablete za neposredno oslobađanje, koje sadržavaju, primjera radi: mikrokristalnu celulozu, dikalcij fosfat, škrob, magnezij stearat i/ili laktozu i/ili druge podloge, vežuća sredstva, sredstva za bubrenje, sredstva za raspadanje, razrjeđivače i lubrikanse, kao što su oni poznati u praksi. Spojevi formule I mogu, isto tako, biti preuzeti kroz usnu šupljinu putem sublingvalne i/ili bukalne primjene. Oblikovane tablete, kompresne tablete ili smrznuto-osušene tablete su tipični oblici koji se mogu koristiti. Primjeri smjesa obuhvaćaju one u kojima se formulira spoj(evi) izuma sa brzo otapajućim razrjeđivačem, kao što je: manitol, laktoza, saharoza i/ili ciklodekstrini. Isto tako, takvim formulacijama mogu biti obuhvaćene i podloge koje imaju veliku molekulsku težinu, kao što je celuloza (avicel) ili polietilen glikoli (PEG). Da bi se olakšala mukozna adhezija takve formulacije mogu, također, da obuhvate podlogu, kao što je: hidroksi propil celuloza (HPC), hidroksi propil metil celuloza (HPMC), natrij karboksi metil celuloza (SCMC), maleinski anhidridni kopolimer (npr. Gantrez) i sredstva za kontrolu oslobađanja, kao što je poliakrilni kopolimer (npr. Carbopol 934). Kako bi se olakšala proizvodnja i upotreba, mogu, isto tako, biti dodati: lubrikansi, sredstva za klizenje, arome, sredstva za bojenje i stabilizatori.

Primjeri smjesa za nazalni aerosol ili inhalacijsko primjenjivanje uključuju otopine u fiziološkoj otopini, koje mogu sadržavati, primjera radi, benzil alkohol ili druge pogodne konzervanse, induktore apsorpcije kako bi se povećala biorapoloživost i/ili druga solubilizirajuća ili dispergirajuća sredstva, kao što su ona poznata u praksi.

Primjeri smjesa za parenteralno primjenjivanje uključuju injektabilne otopine ili suspenzije, koje mogu sadržavati, npr. prikladne ne-toksične, parenteralno prihvatljive razrjeđivače ili otapala, kao što su: manitol, 1,3-butandiol, voda, Ringerova otopina, izotonična otopina natrij klorida ili druga pogodna dispergirajuća ili vlažeća i suspendirajuća sredstva, uključujući sintetske mono- ili digliceride i masne kiseline, uključujući oleinsku kiselinu ili Cremaphor.

Primjeri smjesa za rektalno primjenjivanje obuhvaćaju supozitorije, koji mogu sadržavati, primjera radi, pogodnu ne-nadražujuću podlogu, kao što su: kakao maslac, sintetski gliceridni esteri ili polietilen glikoli, a koja je čvrsta na uobičajenim temperaturama, a tali se i/ili se otapa u rektalnoj šupljini da bi oslobodila lijek.

Primjeri smjesa za površinsko primjenjivanje obuhvaćaju površinski nosač, kao što je Plastibase (mineralno ulje želirano sa polietilenom).

Djelotvornu količinu spojeva ovog izuma može odrediti stručnjak, a obuhvaća tipične dozne količine za odraslog čovjeka od otprilike 1 do 100 (npr. 15 ili niže, osobito 1 do 3 ili manje) mg/kg tjelesne težine aktivnog spoja na dan, koja može biti primjenjena u jednoj dozi ili u obliku pojedinačnih podijeljenih doza, kao od 1 do 4 puta dnevno. Specifični dozni nivo i učestalost doziranja za svakog pojedinca može varirati i zavisi od raznovrsnih faktora, uključujući: aktivnost specifičnog spoja koji se koristi, metaboličku stabilnost i dužinu učinka tog spoja, vrstu, starost, tjelesnu težinu, općenito zdravlje, spol i ishranu pojedinca, način i vrijeme primjenjivanja, brzinu izlučivanja, kombinaciju lijekova i ozbiljnost stanja. Poželjni objekti za liječenje uključuju životinje, osobito imaju prednost vrste sisavaca kao što je čovjek i domaće životinje, kao što su: psi, mačke i slične, a koji imaju NHR-udružena stanja.

Kako je prethodno spomenuto, spojevi ovog izuma se mogu upotrijebiti sami ili u kombinaciji jedni sa drugima i/ili drugim pogodnim terapeutskim sredstvima, korisnim u liječenju NHR-udruženih stanja, npr. antibioticima ili drugim farmaceutski aktivnim materijalom.

Primjera radi, spojevi ovog izuma se mogu kombinirati sa sredstvima koja podtiču rast, kao što su, ali nisu njima ograničena: TRH, dietilstilbestrol, teofilin, enkefalini, prostaglandini serija E, spojevi izloženi u U.S. Patentu Br. 3,239,345, npr. zeranol i spojevi izloženi u U.S. Patentu Br. 4,036,979, npr. sulbenoks ili peptidi izloženi u U.S. Patentu Br. 4,411,890.

Spojevi izuma mogu, isto tako, se upotrijebiti u kombinaciji sa sekretagozima hormona rasta, kao što su: GHRP-6, GHRP-1 (kako je opisano u U.S. Patentu Br. 4,411,890 i publikacijama WO 89/07110 i WO 89/07111), GHRP-2 (kako je opisano u WO 93/04081), NN703 (Novo Nordisk), LY444711 (Lilly), MK-677 (Merck), CP424391 (Pfizer) i B-HT920 ili, sa oslobađajućim faktorom hormona rasta i njegovim analozima ili hormonom rasta i njegovim analozima ili somatomedinima, uključujući IFG-1 i IFG-2 ili, sa alfa-adrenergičnim agonistima, kao što je klonidin ili serotoninskim 5-HTD agonistima, kao što je sumatriptan ili, sredstvima koja inhibiraju somatostatin ili njegovo oslobađanje, kao što su fizostigmin i piridostigmin. Dalje, upotreba izloženenih spojeva izuma je i u kombinaciji sa paratiroidnim hormonom, PTH(1-34) ili biofosfonatima, kao što je MK-217 (alendronat).

Dalja upotreba spojeva izuma je u kombinaciji sa estrogenom, testosteronom, selektivnim modulatorom estrogenog receptora, kao što je tamoksifen ili raloksifen ili, drugim modulatorima androgenog receptora, kao što su oni izloženi u: Edwards, J.P. et al., Bio. Med. Chem. Let., 9, 1003-1008 (1999) i Hamann, L.G. et al., J. Med. Chem., 42, 210-212 (1999).

Dalja upotreba spojeva izuma je u kombinaciji sa agonistima progesteronskog receptora (“PRA”), kao što su levonorgestrel, medroksiprogesteron acetat (MPA).

Spojevi ovog izuma se mogu upotrijebiti sami ili u kombinaciji jedan sa drugim i/ili sa drugim modulatorima nuklearnih hormonskih recepata ili drugim prikladnim terapeutskim sredstvima, korisnim za liječenje gore spomenutih poremećaja, uključujući: anti-dijabetična sredstva; sredstva protiv osteoporoze; sredstva protiv gojaznosti; anti-inflamatorna sredstva; sredstva protiv anksioznosti; anti-depresivna sredstva; anti-hipertenzivna sredstva; anti-trombocitna sredstva; sredstva protiv tromboze i trombolitična sredstva; srčane glikozide; sredstva za snižavanje kolesterola/lipida; antagoniste mineralokortikoidnog receptora; inhibitore fosfodiesteraze; inhibitore proteinske tirozin kinaze; tiroidne mimetike (uključujući agoniste tiroidnog receptora); anabolična sredstva; terapije za HIV ili AIDS; terapije korisne za liječenje Alzheimerove bolesti i drugih kognitivnih poremećaja; terapije korisne u liječenju poremećaja spavanja; anti-proliferativna sredstva; i anti-tumorska sredstva.

Primjeri pogodnih anti-dijabetskih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: bigvanide (npr. metformin), inhibitore glukozidaze (npr. akarboza), inzuline (uključujući inzulinske sekretagoge ili inzulinske senzitizere), meglitinide (npr. rapaglinid), sulfonilureje (npr. glimepirid, gliburid i glipizid), kombinacije bigvanida/gliburida (npr. Glucovance®), tiazolidindione (npr. troglitazon, roziglitazon i pioglitazon), agoniste PPAR-alfa, agoniste PPAR-gama, dual agoniste PPAR alfa/gama, inhibitore SGLT2, inhibitore glikogen fosforilaze, inhibitore proteina koji vežu masne kiseline (aP2), kao što su oni izloženi u: U.S. Serial No. 09/519,079, prijavljen 6. 3. 2000., glukagonu-sličan peptid-1 (GLP-1) i inhibitore dipeptidil peptidaze IV (DP4).

Primjeri pogodnih sredstava protiv osteoporoze za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: alendronat, rizedronat, PTH, PTH fragment, raloksifen, kalcitonin, steroidne ili ne-steroidne agoniste progesteronskog receptora, antagoniste RANK liganda, antagoniste receptora osetljivog za kalcij, inhibitore TRAP, selektivne modulatore estrogenog receptora (SERM), inhibitore estrogena i AP-1.

Primjeri pogodnih sredstava protiv gojaznosti za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: aP2 inhibitore, kao što su oni izloženi u: U.S. Serial No. 09/519,079, prijavljen 6. 3. 2000., antagoniste PPAR gama, agoniste PPAR delta, beta 3 adrenergične agoniste, kao što su: AJ9677 (Takeda/Dainippon), L750355 (Merck) ili CP331648 (Pfizer) ili drugi poznati beta 3 agonisti, kao što je izloženo u U.S. Patentu Brojevi: 5,541,204, 5,770,615, 5,491,134, 5,776,983 i 5,488,064, inhibitor lipaze, kao što je orlistat ili ATL-962 (Alizyme), inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina (i dopamina), kao što su: sibutramin, topiramat (Johnson&Johnson) ili aksokin (Regeneron), lijek tiroidnog receptora beta, kao što je ligand tiroidnog receptora, kako je izloženo u: WO 97/21993 (U. Cal SF), WO 99/00353 (KaroBio) i GB98/284425 (KaroBio) i/ili anorektična sredstva, kao što su: deksamfetamin, fentermin, fenilpropanolamin ili mazindol.

Primjeri pogodnih anti-inflamatornih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: prednizon, deksametazon, Enbrel®, inhibitore ciklooksigenaze (t.j. COX-1 i/ili COX-2 inhibitore, kao što su: NSAIDs (nesteroidni lijekovi protiv upale), aspirin, indometacin, ibuprofen, piroksikam, Naproxen®, Celebrex®, Vioxx®), CTLA4-Ig agoniste/antagoniste, CD40 ligand antagoniste, inhibitore IMPDH, kao što su mikofenolat (CellCept®) integrinski antagonisti, alfa-4 beta-7 integrinski antagonisti, inhibitori stanične adhezije, interferon gama antagonisti, ICAM-1, antagonisti tumor nekrozis faktora (TNF) (npr. infliksimab, OR1384), inhibitori sinteze prostaglandina, budezonid, klofazimin, CNI-1493, CD4 antagonisti (npr. priliksimab), inhibitori p38 mitogen-aktivirane protein kinaze, inhibitori proteinske tirozin kinaze (PTK), IKK inhibitori i terapije za liječenje sindroma iritabilnog kolona (npr. Zelmac® i Maxi-K® otvarači, kao što su oni izloženi u U.S. Patentu Br. 6,184,231 B1).

Primjeri pogodnih sredstava protiv anksioznosti za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: diazepam, lorazepam, buspiron, oksazepam i hidroksizin pamoat.

Primjeri pogodnih anti-depresivnih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: citalopram, fluoksetin, nefazodon, sertralin i paroksetin.

Primjeri pogodnih anti-hipertenzivnih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: beta adrenergične blokatore, blokatore kalcijskih kanala (L-tip i T-tip; npr. diltiazem, verapamil, nifedipin, amlodipin i mibefradil), diuretike (npr. klorotiazid, hidroklorotiazid, flumetiazid, hidroflumetiazid, bendroflumetiazid, metilklorotiazid, triklorometiazid, politiazid, benztiazid, trikrinafen etakrinske kiseline, klortalidon, furosemid, muzolimin, bumetanid, triamteren, amilorid, spironolakton), inhibitore renina, ACE inhibitore (npr. kaptopril, zofenopril, fozinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, kinapril, ramipril, lizinopril), antagoniste AT-1 receptora (npr. lozartan, irbezartan, valzartan), antagoniste ET receptora (npr. sitaksentan, atrsentan i spojevi izložena u U.S. Patentu Br. 5,612,359 i 6,043,265), antagoniste dual ET/AII (npr. spojevi izložena u WO 00/01389), inhibitore neutralne endopeptidaze (NEP), inhibitore vazopeptidaze (dual NEP-ACE inhibitori) (npr. omapatrilat i gemopatrilat) i nitrate.

Primjeri pogodnih anti-trombocitnih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: GPIIb/IIIa blokatore (npr. abciksimab, eptifibatid, tirofiban), P2Y12 antagoniste (npr. klopidogrel, tiklopidin, CS-747), antagoniste tromboksanskog receptora (npr. ifetroban), aspirin i PDE-III inhibitori (npr. dipiridamol) sa ili bez aspirina.

Primjeri pogodnih srčanih glikozida za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju digitalis i uabain.

Primjeri pogodnih sredstava za snižavanje kolesterola/lipida za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: inhibitore HMG-CoA reduktaze (npr. pravastatin, lovastatin, atorvastatin, simvastatin, NK-104 (a.k.a. itavastatin ili nisvastatin ili nisbastatin) i ZD-4522 (a.k.a. rosuvastatin ili atavastatin ili vizastatin)), inhibitore skvalen sintetaze, fibrate, sekvestrante žučnih kiselina, ACAT inhibitore, MTP inhibitore, inhibitore lipooksigenaze, inhibitore apsorpcije kolesterola i inhibitore transfernog proteina kolesterol estera (npr. CP-529414).

Primjeri pogodnih antagonista mineralokortikoidnog receptora za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju spironolakton i eplerinon.

Primjeri pogodnih inhibitora fosfodiesteraze za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju PDEIII inhibitore, kao što je cilostazol i PDEIV inhibitore, kao što je sildenafil.

Primjeri pogodnih tiroidnih mimetika za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: tireotropin, politiroid, KB-130015 i dronedaron.

Primjeri pogodnih anaboličkih sredstva za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: testosteron, TRH dietilstilbestrol, estrogene, β-agoniste, teofilin, anaboličke steroide, dehidroepiandrosteron, enkefaline, prostaglandine E-serija, retinsku kiselinu i spojevi, kako su izloženi u U.S. Pat. Br. 3,239,345, npr. Zeranol®; U.S. Patentu Br. 4,036,979, npr. Sulbenox® ili, peptide, kako su izloženi u U.S. Pat. Br. 4,411,890.

Primjeri pogodnih terapija HIV-a ili AIDS-a za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: indinavir sulfat, sakvinavir, sakvinavir mezilat, ritonavir, lamivudin, zidovudin, kombinacije lamivudin/zidovudin, zalcitabin, didanozin, stavudin i megestrol acetat.

Primjeri pogodnih terapija za tretman Alzheimerove bolesti i kognitivnih poremećaja za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: donepezil, takrin, revastigmin, 5HT6, inhibitore gama sekretaze, inhibitore beta sekretaze, blokatore SK kanala, Maxi-K blokatore i KCNQs blokatore.

Primjeri pogodnih terapija za tretman poremećaja spavanja za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: analoge melatonina, antagoniste melatoninskog receptora, ML1B agoniste i antagoniste GABA/NMDA receptora.

Primjeri pogodnih anti-proliferativnih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: ciklosporin A, paklitaksel, FK 506 i adriamicin.

Primjeri pogodnih anti-tumorskih sredstava za upotrebu u kombinaciji sa spojevima ovog izuma obuhvaćaju: paklitaksel, adriamicin, epotilone, cisplatin i karboplatin.

Spojevi ovog izuma mogu se upotrijebiti u kombinaciji sa nutricionim dodacima, kao što su oni opisani u U.S. 5,179,080, osobito u kombinaciji sa proteinom sirutke ili kazeinom, amino kiselinama (kao što su: leucin, razgranate amino kiseline i hidroksimetilbutirat), trigliceridima, vitaminima (npr. A, B6, B12, folat, C, D i E), mineralima (npr. selen, magnezij, cink, krom, kalcij i kalij), karnitinom, tioktinskom kiselinom, kreatinom i koenzimom Q10.

Osim toga, spojevi ovog izuma se mogu upotrijebiti u kombinaciji sa terapeutskim sredstvima koja se koriste u liječenju seksualne disfunkcije, uključujući, ali se ne ograničavajući na: PDE5 inhibitore, kao što je sildenafil ili IC-351; sa antiresorptivnim sredstvom, terapijama zamjene hormona, analozima vitamina D, kalcitoninima, elementarnim kalcijem i kalcijevim suplementima, inhibitorima katepsina K, MMP inhibitorima, antagonistima vitronektinskog receptora, Src SH2 antagonistima, inhibitorima vaskularne-H+-ATPaze, agonistima progesteronskog receptora, ipriflavonom, fluoridom, RANK antagonistima, PTH i njegovim analozima i fragmentima, Tibolonom, inhibitorima HMG-CoA reduktaze, SERM-ovima, p38 inhibitorima, prostanoidima, inhibitorima 17-beta hidroksisteroid dehidrogenaze i inhibitorima Src kinaze.

Spojevi ovog izuma se mogu koristiti u kombinaciji sa muškim kontraceptivima, kao što je nonoksinol 9 ili terapeutskim sredstvima za liječenje gubitka kose, kao što je minoksidil i finasterid ili hemoterapeutskim sredstvima, kao što su sa LHRH agonisti.

Za njihovu upotrebu kao antitumorskih ili sredstava protiv angiogeneze, a koje imaju prednost, spojevi ovog izuma se mogu primijeniti bilo sami, bilo u kombinaciji sa drugim antitumorskim i citotoksičnim sredstvima i tretmanima koji su korisni u liječenju raka ili drugih proliferativnih bolesti, npr. gdje drugi lijek ima isti ili različit mehanizam učinka od spojevi izuma formule I. Primjeri grupe anti-tumorskih i citotoksičnih sredstava, korisnih u kombinaciji sa spojevima izuma obuhvaćaju, ali nisu ograničeni na: alkilirajuća sredstva, kao što su: nitrogen mustardi, alkil sulfonati, nitrozoureje, etilenimini i triazini; EGFR inhibitori, kao EGFR inhibitori male molekule; EGFR antitela, kao C225 (Erbitux); antimetaboliti, kao: folatni antagonisti, analozi purina i analozi pirimidina; antibiotici, kao: antraciklini, bleomicini, mitomicin, daktinomicin i plikamicin; enzimi, kao L-asparginaza; inhibitori farnezil-protein transferaze; inhibitori 5α reduktaze; inhibitori 17β-hidroksi steroid dehidrogenaze tip 3 ili tip 1; hormonska sredstva, kao: glukokortikoidi, estrogeni/antiestrogeni, androgeni/antiandrogeni, progestini i antagonisti hormona oslobađanja luteinizirajućeg hormona, oktreotid acetat; sredstva za raskidanje mikrotubula, kao ekteinascidini ili njihovi analozi i derivati; sredstva za stabiliziranje mikrotubula, kao taksani, npr. paklitaksel (Taxol®), docetaksel (Taxotere®) i njihovi analozi i epotiloni, kao epotiloni A-F i njihovi analozi; proizvodi porijeklom iz bilja, kao: vinka alkaloidi, epipodofilotoksini, taksani; i inhibitori topoizomeraze; inhibitori prenil-protein transferaze; i razna sredstva, kao: hidroksiurea, prokarbazin, mitotan, heksametilmelamin, platina-raspoređujući kompleksi, kao cisplatin i karboplatin; i druga sredstva koja se koriste kao anti-tumorska i citotoksična sredstva, kao što su: modifikatori biološkog odgovora, faktori rasta; imuni modulatori i monoklonska antitijela, Spojevi izuma mogu, isto tako, se upotrijebiti zajedno sa terapijom zračenja.

Tipični primjeri ovih grupa anti-tumorskih i citotoksičnih sredstava uključuju, ali nisu ograničeni na: meklortamin hidroklorid, ciklofosfamid, klorambucil, melfalan, ifosfamid, busfulan, karmustin, lomustin, semustin, streptozocin, tiotepa, dakarbazin, metotreksat, tiogvanin, merkaptopurin, fludarabin, pentastatin, kladribin, citarabin, fluorouracil, doksorubicin hidroklorid, daunorubicin, idarubicin, bleomicin sulfat, mitomicin C, aktinomicin D, safracini, saframicini, kinokarcini, diskodermolidi, vinkristin, vinblastin, vinorelbin tartarat, etopozid, etopozid fosfat, tenipozid, paklitaksel, tamoksifen, esteramustin, esteramustin fosfat natrij, flutamid, buzerelin, leuprolid, pteridini, diineze, levamizol, aflakon, interferon, interleukini, aldesleukin, filgrastim, sargramostim, rituksimab, BCG, tretinoin, irinotekan hidroklorid, betametazon, gemcitabin hidroklorid, altretamin i topotekan i bilo koji njihovi analozi ili derivati.

Član ovih grupa koji ima prednost, obuhvaća, ali nije ograničen na: paklitaksel, cisplatin, karboplatin, doksorubicin, karminomicin, daunorubicin, aminopterin, metotreksat, metopterin, mitomicin C, ekteinaskidin 743 ili porfiromicin, 5-fluorouracil, 6-merkaptopurin, gemcitabin, citozin arabinozid, podofilotoksin ili derivati podofilotoksina, kao što su: etopozid, etopozid fosfat ili tenipozid, melfalan, vinblastin, vinkristin, leurozidin, vindezin i leurozin.

Primjeri anti-tumorskih i drugih citotoksičnih sredstava obuhvaćaju slijedeće: derivate epotilona, kako su nađeni u German Patent No. 4138042.8; WO 97/19086, WO 98/22461, WO 98/25929, WO 98/38192, WO 99/01124, WO 99/02224, WO 99/02514, WO 99/03848, WO 99/07692, WO 99/27890, WO 99/28324, WO 99/43653, WO 99/54330, WO 99/54318, WO 99/54319, WO 99/65913, WO 99/67252, WO 99/67253 i WO 00/00485; inhibitore ciklin zavisne kinaze, kao što su nađeni u WO 99/24416 (vidi isto tako: U.S. Patent No. 6,040,321); i inhibitore prenil-protein transferaze, kao što su nađeni u WO 97/30992 i WO 98/54966; i sredstva, kao što su ona, opisana generički i specifično u U.S. Patentu No. 6,011,029 (spojevi, od kojih spojevi U.S. Patenta se mogu upotrijebiti zajedno sa bilo kojim NHR modulatorom (uključujući, ali se ne ograničavajući na NHR modulatore ovog izuma), kao što su AR modulatori, ER modulatori, sa LHRH modulatorima ili sa kirurškom kastracijom, osobito u liječenju raka).

Kombinacije ovog izuma mogu biti, isto tako, formulirane ili istovremeno primjenjene sa drugim terapeutskim sredstvima koja su odabrana zbog svoje posebne koristi u primjenjivanju terapija za gore spomenuta stanja. Npr. spojevi izuma se mogu formulirati sa sredstvima za sprečavanje mučnine, hiperosjetljivosti i želučanog nadražaja, kao što su antiemetici i H1 i H2 antihistaminici.

Kao što važi za tretman raka, spojevi ovog izuma se najpoželjnije koriste sami ili u kombinaciji sa anti-tumorskim tretmanima, kao što je terapija zračenjem i/ili citostaticima i/ili citotoksičnim sredstvima, kao što su, ali nisu ograničeni na DNK interaktivna sredstva, kao što su cisplatin ili doksorubicin; inhibitori farnezil protein transferaze, kao što je ona, opisana u U.S. Patentu Br. 6,011,029; inhibitori topoizomeraze II, kao etopozid; inhibitori topoizomeraze I, kao CPT-11 ili topotekan; tubulin stabilizirajuća sredstva, kao paklitaksel, docetaksel, drugi taksani ili epotiloni; hormonska sredstva, kao tamoksifen; inhibitori timidilat sintaze, kao 5-fluorouracil; antimetaboliti, kao metotreksat; antiangiogena sredstva, kao angiostatin, ZD6474, ZD6126 i komberstatin A2; inhibitori kinaze, kao her2 specifična antitijela, Iressa i CDK inhibitori; inhibitori histondeacetilaze, kao C1-994 i MS-27-275. Takvi spojevi se mogu, također, kombiniarti sa sredstvima koja guše proizvodnju cirkulirajućeg testosterona, kao što su LHRH agonisti ili antagonisti ili kirurškom kastracijom. Tipična kombinacija terapija (npr. za liječenje raka prostate) koja se koristi sa spojevima ovog izuma uključuje LHRH modulator ili prednizon.

Ovaj izum, također, razmatra komplete, npr. za liječenje raka prostate, koji uključuju prvi kontejner (kao što je boca) koji sadrži farmaceutsku formulaciju koja uključuje spoj ovog izuma, navedeni spoj po izboru u farmaceutski prihvatljivom nosaču i, drugi kontejner (kao što je boca) koji sadrži farmaceutsku formulaciju koja obuhvaća jedno ili više sredstava (kao što je LHRH modulator) da bi se koristilo(a) u kombinaciji sa navedenim spojem ovog izuma, navedeno sredstvo(a) po izboru u farmaceutski prihvatljivom nosaču.

Npr. poznate terapije za uznapredovali metastatski rak prostate uključuju “terapiju potpunog uklanjanja androgena” u kojoj se tumorski rast inhibiše kontrolom snabdevanja tkiva prostate androgenom putem kemijske kastracije (kastracija služi da inhibira proizvodnju cirkulirajućeg testosterona (T) i dihidrotestosterona (DHT)), a zatim, primjenom antagonista androgenog receptora (AR) (koji inhibiraju funkciju T/DHT, koji je dobijen konverzijom cirkulirajućeg androgenskog prekursora u T/DHT u tkivu prostate). Spojevi ovog izuma se mogu upotrijebiti kao AR antagonisti u terapiji potpunog uklanjanja, sami ili u kombinaciji sa drugim AR antagonistima, kao što su: Flutamid, Casodex, Nilutamid ili Cyproteron acetat.

Ovaj izum omogućuje spojeve, koji se mogu koristiti za liječenje pacijenata koji pate od raka prostate rezistentnog na antagoniste androgenog receptora koji nisu u okviru formule I izuma (ili njenih soli), kao što je bikalutimid. Izum tako dalje razmatra postupak za liječenje raka prostate rezistentnog na antagonista androgenog receptora različitog od onih formule I ili njenih soli, koji obuhvaća korak primjenjivanja pacijentu gdje je to potrebno spoja, koji može smanjiti brzinu rasta tumorske mase navedenog raka, u količini koja je za to djelotvorna. Izraz “smanjivanje brzine rasta navedene tumorske mase” označava snižavanje porasta brzine (uključujući, naravno, stabilizaciju ili smanjivanje veličine) navedene tumorske mase tijekom tretmana u odnosu na brzinu rasta tijekom tretmana sa navedenim antagonistom androgenog receptora koji je različit od onih formule I ili njenih soli. Spojevi formule I i njihove farmaceutski prihvatljive soli ovog izuma su takvi spojevi koji imaju prednost.

Ovaj izum, također, razmatra upotrebu antiestrogena i/ili inhibitora aromataze u kombinaciji sa spojem ovog izuma, npr. kao pomoć u umirivanju sporednih učinaka koja su u vezi sa antiandrogenom terapijom, kao što je ginekomastija. Tipični antiestrogen i/ili inhibitori aromataze obuhvaćaju: anastrozol (Arimidex), tamoksifen citrat (Nolvadex), egzemestan (Aromasin), toremifen citrat (Fareston), letrozol (Femara), raloksifen hidroklorid (Evista), Faslodex ili 923 (Wyeth Ayerst).

Spojevi ovog izuma se mogu upotrijebiti kao pomoć kirurgiji.

Još jedna primjena ovih spojeva je u kombinaciji sa terapijom antitijelima, kao što je, ali ne ograničavajući se na terapiju antitijelima protiv PSCA. Dodatna primjena je u vezi sa vakcinom / imuno modulirajućim sredstvima za liječenje raka.

Spojevi ovog izuma se mogu upotrijebiti u skladu sa postupcima opisanim u U.S. Provisional Patent Application Serial No. 60/284,438, naslovljenoj “Selective Androgen Receptor Modulators and Methods for Their Identification, Design and Use” (“Selektivni modulatori androgenog receptora i postupci za njihovu identifikaciju, dizajn i upotreba”), koju su prijavili 18. 4. 2001. Mark E. Salvati i sur. (Attorney Docket No. LD0250(PSP)), pri čemu je Privremena patentna prijava ovdje u cjelini obuhvaćena kao referenca (uključujući, ali se ne ograničavajući na, referencu za sve specifične spojeve u okviru formule I ovog izuma) i U.S. Patent Application Serial No. 09/885,827, naslovljenoj “Selective Androgen Receptor Modulators and Methods for Their Identification, Design and Use” (“Selektivni modulatori androgenog receptora i postupci za njihovu identifikaciju, dizajn i upotreba”), koju su prijavili 20. 6. 2001. Mark E. Salvati i sur. (Attorney Docket No. LD0250(NP)), pri čemu je Patentna prijava ovdje obuhvaćena u cjelini kao referenca (uključujući, ali se ne ograničavajući na, referencu za sve specifične spojeve u okviru formule I ovog izuma)

Za racemate spojeva ovog izuma, jedan enantiomer može, npr. biti potupuni AR antagonist dok drugi može biti AR antagonist u tkivu tumora, a da u netumoroznom tkivu koje ima androgeni receptor nema aktivnosti ili agonističke aktivnosti.

Gornja druga terapeutska sredstva, kada se upotrebljavaju u kombinaciji sa spojevima ovog izuma, se mogu koristiti, primjera radi, u onim količinama naznačenim u Physicians’ Desk Reference (PDR) ili, na drugi način kako je odredio stručnjak.

Slijedeći testovi se mogu upotrijebiti za utvrđivanje aktivnosti spojeva kao NHR modulatora. Prednost imaju oni spojevi koji imaju aktivnost veću od 20 μm za vezanje ili transaktivaciju u bilo kojem od ovih testova. Korištenjem transaktivacijskog testa i testa standardnog AR vezanja, kako je opisano u nastavku, za razne spojeve ovog izuma je određeno da imaju AR modulatorsku aktivnost.

Transaktivacijski testovi:

AR specifični test:

Spojevi ovog izuma su testirani testom transaktivacije sa transfektovanim prijenosnim sklopom i upotrebom endogenog androgenog receptora stanica domaćina. Transaktivacijski test omogućuje postupak za identificiranje funkcionalnih agonista i djelomičnih agonista koji imitiraju ili, antagonista koji inhibiraju učinak prirodnih hormona, u ovom slučaju, dihidrotestosterona (DHT). Ovaj test može se koristiti za predviđanje in vivo aktivnosti jer postoji dobra korelacija u obje serije podataka. Vidi, npr. T. Berger et al., J. Steroid Biochem. Molec. Biol. 773 (1992), izlaganje, koje je ovdje obuhvaćeno kao referenca.

Za transaktivacijski test, prijenosni plazmid se uvodi transfekcijom (postupak da stanice otpočnu preuzimati strane gene) u pojedinačne stanice. Ovaj prijenosni plazmid, koji obuhvaća cDNK za prijenosni protein, kao što je sekretna alkalna fosfataza (SEAP), kontroliran je ushodnim sekvencama prostata specifičnog antigena (PSA) koje sadržava elemente androgenog odgovora (AREs). Ovaj prijenosni plazmid funkcionira kao prijenosnik za transkripcijski-modulirajuću aktivnost AR. Tako, prijenosnik djeluje kao surogat za proizvode (mRNK zatim, protein) koje normalno ekspresira gen pod kontrolom AR i njegovog nativnog hormona. U cilju otkrivanja antagonista, transaktivacijski test se izvodi u prisutnosti konstantne koncentracije prirodnog AR hormona (DHT) za koji se zna da otpočinje određen prijenosni signal. Porast koncentracija predpostavljenih antagonista smanjiće prijenosni signal (npr. proizvodnju SEAP-e). S druge strane, izlaganje transfektiranih stanica povećanju koncentracija predpostavljenih agonista će povećati proizvodnju prijenosnog signala.

Za ovaj test, nabavljene su LNCaP i MDA 453 stanice od American Type Culture Collection (Rockville, MD) i, održavane su u RPMI 1640 ili DMEM mediju obogaćenom sa 10% fetalnim goveđim serumom (FBS; Gibco), pojedinačno. Pojedinačne stanice su kratko transfektirane elektroporacijom u skladu sa optimiziranim postupkom koji je opisao Heiser, 130 Methods Mol. Biol. 117 (2000), sa pSEAP2/PSA540/Enhancer reporter plazmidom. Prijenosni plazmid je konstruiran kako slijedi: komercijalna DNK humanog placentnog genoma je upotrijebljena da se stvori Lančanom reakcijom polimeraze (PCR) fragment koji sadrži Bg1II mesto (položaj 5284) i Hind III mesto na položaju 5831 promotora humanog prostata specifičnog antigena (Accession#U37672), Schuur, et al., J. Biol. Chem., 271(12):7043-51 (1996). Ovaj fragment je subkloniran u pSEAP2/bazni (Clontech), koji je prethodno asimiliran sa Bg1II i HindIII da bi se stvorio pSEAP2/PSA540 sklop. Onda je fragment koji nosi fragment humane PSA ushodne sekvence između položaja -5322 i -3873 amplificiran PCR-om iz DNK humanog placentalnog genoma. XhoI i Bg1II mesta su uvedena sa primerima. Nastali fragment je subkloniran u pSEAP2/PSA540, asimiliran pojedinačno sa XhoI i Bg1II, kako bi se dobio pSEAP2/PSA540/Enhancer sklop. LNCaP i MDA 453 stanice su sakupljene u mediju koji sadrži 10% ugljenom pročišćeni FBS. Svaka suspenzija stanica je podijeljena u dvije Gene Pulser Cuvetts (Bio-Rad) koje su onda primile 8 μg prijenosnog sklopa i, izvršena je elektroporacija upotrebom Bio-Rad-ovog Gene Pulser na 210 volti i 960 μFarada. Po transfekcijama, stanice su isprane i inkubirane sa medijom koji sadrži ugljenom pročišćen fetalni goveđi serum u odsutnosti (slijepa) ili prisustvu (kontrola) 1 nM dihidrotestosterona (DHT; Sigma Chemical) i u prisutnosti ili odsustvu standardnog anti-androgena bikalutamida ili spojevi ovog izuma u koncentracijama u opsegu od 10-10 do 10-5 M (uzorak). Za svaki uzorak su upotrijebljeni duplikati. Razrijeđenja spojevi su izvedena na Biomek 2000 laboratorijskoj radnoj jedinici. Poslije 48 sati, frakcija supernatanta je testirana na SEAP aktivnost korištenjem Phospha-Light Chemiluminescent Reporter Gene Assay System-a (Tropix, Inc.). Sposobnost življenja preostalih stanica je određena upotrebom CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (Vodeni ne-radioaktivni test stanične proliferacije) (MTS Assay, Promega). Ukratko, stanicama je dodata mješavina tetrazolijum spoja (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolijum, unutrašnja sol; MTS) i elektron spajajući reagens (fenazin metosulfat; PMS). MTS (Owen-ov reagens) su stanice (bio)reducirale u formazan, koji je topljiv u mediju tkivne kulture i, zbog toga, njegova apsorbanca može se na 490 nm mjeri izravno iz 96 reakcijskih mjesta na test ploči bez dodatnog postupanja. Količina formazanskog proizvoda, kada se mjeri veličinom apsorbance na 490 nm, izravno je proporcionalna broju živih stanica u kulturi. Za svaki replikat SEAP čitanje je normalizirno pomoću Abs490 vrijednosti dobivenom u MTS testu. Za oblik antagonista, % inhibicije je računat kao:

% inhibicije = 100 x (1-[srednja vrijednost kontrole – srednja vrijednost slijepe / srednja vrijednost uzorka – srednja vrijednost slijepe])

Podaci su grafički prikazani i izmerena je koncentracija spojevi koja je inhibirala 50% normaliziranog SEAP, (IC50).

Za oblik agonista % kontrole je uzet kao učinak ispitivanog spoja u odnosu sa maksimalnim učinkom koje se dobija sa prirodnim hormonom, u ovom slučaju sa DHT i, izračunat je kao:

% kontrole = 100 x srednja vrijednost uzorka – srednja vrijednost slijepe / srednja vrijednost kontrole – srednja vrijednost slijepe

Podaci su grafički prikazani i izmerena je koncentracija spojeva koja aktivira do nivoa 50% normaliziranog SEAP za kontrolu, (EC50).

Test GR specifičnosti:

Prijenosni plazmid koji se koristio, sastojao se od cDNK za prijenosni SEAP protein, kako je opisano za AR specifični transaktivacijski test. Ekspresiju prijenosnog SEAP proteina su kontrolirale ponavljajuće (MMTV LTR) sekvence dugačkog kraja tumora dojki miša koje sadržavati tri elementa hormonskog odgovora (HREs) koji može biti reguliran i GR-om i PR-om, vidi, npr. G. Chalepakis et al., Cell, 53(3), 371 (1988). Ovaj plazmid je transfektiran u A549 stanice, koje ekspresiraju endogeni GR da bi se dobio GR specifični transaktivacijski test. A549 stanice su dobijene od American Type Culture Collection (Rockville, MD) i održavane su u RPMI 1640 obogaćenom sa 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS; Gibco). Određivanje GR specifične antagonističke aktivnosti spojevi ovog izuma je identično onom, opisanom za AR specifični transaktivacijski test, osim što je DHT zamijenjen sa 5 nM deksametazonom (Sigma Chemicals), specifičnim agonistom za GR. Određivanje GR specifične agonističke aktivnosti spojeva ovog izuma je izvedeno kako je opisano za AR transaktivacijski test, gdje se mjeri aktivacija GR specifičnog prijenosnog sustava dodavanjem test spojeva u odsutnosti poznatog liganda GR specifičnih agonista.

PR specifični test:

Prijenosni plazmid koji se koristio, sastojao se od cDNK za prijenosni SEAP protein, kako je opisano za AR specifični transaktivacijski test. Ekspresiju prijenosnog SEAP proteina su kontrolirale ponavljajuće (MMTV LTR) sekvence dugačkog kraja tumora dojki miša koje sadržava tri elementa hormonskog odgovora (HREs) koji može biti reguliran i GR-om i PR-om. Ovaj plazmid je transfektiran u T47D, koji ekspresira endogeni PR da bi se dobio PR specifični transaktivacijski test. T47D stanice su dobijene od American Type Culture Collection (Rockville, MD) i održavane su u DMEM mediju, obogaćenom sa 10% fetalnim goveđim serumom (FBS; Gibco). Određivanje PR specifične antagonističke aktivnosti spojeva ovog izuma je identično onom, opisanom za AR specifični transaktivacijski test, osim što je DHT zamijenjen sa 1 nM Promegastonom (NEN), specifičnim agonistom za PR. Određivanje PR specifične agonističke aktivnosti spojeva ovog izuma je izvedeno kako je opisano za AR transaktivacijski test, gdje se mjeri aktivacija PR specifičnog prijenosnog sustava dodavanjem test spojeva u odsutnosti poznatog liganda PR specifičnih agonista.

Test AR vezanja:

Za test vezanja cijele stanice, humane LNCaP stanice (T877A mutant AR) ili MDA 453 (divlji tip AR) u mikrotitarskim pločama sa 96 reakcijskih mjesta koje pojedinačno sadržavaju RPMI 1640 ili DMEM obogaćen sa 10% ugljenom pročišćenog CA-FBS (Cocaleco Biologicals), inkubirane su na 37°C da bi se uklonio svaki endogeni ligand, koji bi mogao se kompleksirati sa receptorom u stanici. Poslije 48 sati, izvedene su bilo analize zasićenja kako bi se odredila Kd za tricijumom obilježeni dihidrotestosteron, [3H]-DHT, bilo kompetitivni test vezanja kako bi se ispitala sposobnost test spojeva u kompeticiji sa [3H]-DHT. Za analize zasićenja, stanicama je dodat medij (RPMI 1640 ili DMEM – 0.2% CA-FBS), koji sadrži [3H]-DHT (u koncetracijama raspona od 0.1 nM do 16 nM), u odsutnosti (ukupno vezanje) ili prisustvu (ne-specifično vezanje) 500-puta molarnog viška neobilježenog DHT. Poslije 4 sata na 37oC, uklonjeni su alikvoti medija za ukupno vezanje pri svakoj koncentraciji [3H]-DHT da bi se izmjerila količina slobodnog [3H]-DHT. Zaostali medij je uklonjen, stanice su isprane tri puta sa PBS-om i sakupljene na UniFilter GF/B pločama (Packard), dodat je Microscint (Packard) i ploče su izbrojane u Top-Counter-u (Packard) kako bi se ispitala količina vezanog [3H]-DHT.

Za analize zasićenja, razlika između ukupnog vezanja i ne-specifičnog vezanja je definirana kao specifično vezanje. Specifično vezanje je ispitano Scatchard analizom da bi se odredila Kd za [3H]-DHT. Vidi, npr. D. Rodbard, Mathematics and statistics of ligand assays: an illustrated guide: In: J. Langon and J. J. Clapp, eds., Ligand Assay, Masson Publishing U.S.A., Inc., New York, pp. 45-99, (1981), izlaganje koje je ovdje uključeno kao referenca.

Za ispitivanja kompeticije, stanicama je dodat medij koji sadrži 1nM [3H]-DHT i spojevi izuma (“test spojevi”) u koncentracijama opsega od 10-10 do 10-5 M. Za svaki uzorak su korištena dva replikata. Poslije 4 sata na 37oC, stanice su isprane, sakupljene i izbrojane kako je gore opisano. Podaci su prikazani grafički kao količina [3H]-DHT (% kontrole u odsutnosti test spojevi) koja ostaje iznad opsega krive doznog odgovora za dati spoj. Koncentracija test spojevi koja inhibira 50% količine [3H]-DHT, koja je vezana u odsutnosti kompetitivnog liganda, izmjerena je kao (IC50) poslije log-logit transformacije. KI vrijednosti su određene primjenom Cheng-Prusoff-ove jednadžbe na IC50 vrijednosti, gdje:

[image]

Poslije korekcije za ne-specifično vezanje, određene su IC50 vrijednosti. IC50 se definira kao koncentracija kompetitivnog liganda koja je potrebna za smanjivanje specifičnog vezanja za 50%. KdS za [3H]-DHT pojedinačno za MDA 453 i LNCaP su 0.7 i 0.2 nM.

Test proliferacije stanica humane prostate

Spojevi ovog izuma su testirani (“test spojevi”) na proliferaciju staničnih loza raka humane prostate. Za to, MDA PCa2b stanice, stanična loza dobivena iz metastaza pacijenta koji nije kastriran, Navone et al., Clin. Cancer Res., 3, 2493-500 (1997), inkubirane su sa ili bez test spojeva tijekom 72 sata i količina [3H]-timidina, koji se inkorporirao u DNK, izmjerena je kao način da se ispita broj stanica i time proliferacija. MDA PCa2b stanična loza je održavana u BRFF-HPC1 mediju (Biological Research Faculty & Facility Inc., MD) obogaćenom sa 10% FBS. Za test, stanice su postavljene u Biocoated mikroploče sa 96 reakcijskih mjesta i inkubirane na 37oC u 10% FBS (pročišćenom ugljem)/ BRFF-BMZERO (bez androgena). Poslije 24 sata, stanice su tretirane u odsutnosti (slijepa) ili prisustvu 1nM DHT (kontrola) ili sa test spojevima (uzorak) ovog izuma u koncentracijama raspona od 10-10 do 10-5 M. Duplikati su korišteni za svaki uzorak. Razrijeđenja spojeva su izvedena na Biomek 2000 laboratorijskoj radnoj stanici. 72 sata kasnije, u svako reakcijsko mjesto dodato je 0.44 uCi. [3H]-timidina (Amersham) i inkubirano je još 24 h poslije čega je uslijedila tripsinizacija, sakupljanje stanica na GF/B filtere. Dodat je Micro-scint PS u filtere prije njihovog brojanja na Beckman TopCount-u.

%Inhibicije se računa kao:

%Inhibicije = 100 x (1 – [srednja vrijednostkontrole – srednja vrijednostslijepe / srednja vrijednostuzorka – srednja vrijednostslijepe])

Podaci su grafički prikazani i izmjerena je koncentracija spojeva koja inhibira 50% ugrađivanja [3H]-timidina (IC50).

Test transaktivacije C2C12 mišjeg mioblasta

Da bi se ispitala efikasnost androgenih agonista u miljeu mišićne stanice, razvijena su dva funkcionalna transaktivacijska testa koja koriste prijenosnika luciferaze. Prvi test (ARTA Stable 1) koristi staničnu liniju Stable 1 (clone#72), koja trajno ekspresira androgeni receptor štakora u punoj dužini ali zahtijeva kratkotrajnu transfekciju pojačivača/ prenosioca. Ova stanična linija je dobijena od C2C12 mioblastnih stanica miša. Drugi test (ARTA Stable 2) koristi staničnu liniju Stable 2 (clone#133), dobijenu od Stable 1, koja trajno ekspresira oba rAR i pojačivača/luciferaznog prenosioca.

Sklop pojačivača/prenosioca koji se koristio u ovom sustavu je pGL3/2XDR-1/luciferaza. Izneseno je da je 2XDR-1 element AR specifičnog odgovora u CV-1 stanicama, Brown et al., The Journal of Biological Chemistry 272, 8227-8235, (1997). Razvijen je nasumičnom mutagenezom AR/GR konsenzusne pojačivač sekvence.

ARTA Stable 1:

Stable 1 stanice su postavljene u format sa 96 reakcijskih mjesta, pri 6,000 stanica/reakcijskom mjestu, u visoko glukoznom DMEM bez fenol crvenog (Gibco BRL, Cat.No.: 21063-029), koji sadrži 10% FBS tretiranog sa ugljenom i dekstranom (HyClone Cat.No.: SH30068.02), 50 mM HEPES pufera (Gibco BRL, Cat.No.: 15630-080), 1X MEM Na piruvat (Gibco BRL, Cat.No.: 11360-070), 0.5X antibiotik-antimikotik i, 800 μg/ml geneticina (Gibco BRL, Cat.No.: 10131-035).

48 sati kasnije, stanice su transfektirane sa pGL3/2XDR-1/luciferazom, upotrebom LipofectAMINE PlusTM Reagent-a (Gibco BRL, Cat.No.: 109-013). Specifično, razrijeđeno je 5 ng/reakcijskom mjestu pGL3/2XDR-1/luciferaza DNK i 50 ng/reakcijskom mjestu Salmon Sperm DNK (kao nosač) sa 5 μl/reakcijskom mjestu Opti-MEM medija (Gibco BRL, Cat.No.: 31985-070). U ovo je dodato 0.5 μl/reakcijskom mjestu Plus reagensa. Ova mješavina je inkubirana u toku 15 minuta na sobnoj temperaturi. U posebnoj posudi je razrijeđeno 0.385 μl/reakcijskom mjestu LipofectAMINE reagensa sa 5 μl/reakcijskom mjestu Opti-MEM. DNK smjesa se onda spaja sa LipofectAMINE mješavinom i inkubira još dodatnih 15 minuta na sobnoj temperaturi. Tijekom tog vremena, medij se uklanja od stanica i zamjenjuje sa 60 μl/reakcijskom mjestu Opti-MEM-a. U ovo se dodaje 10 μl/reakcijskom mjestu DNK/LipofectAMINE transfekcijske smjese. Stanice se inkubiraju tijekom 4 sata.

Transfekcijska smjesa se uklanja od stanica i zamijenjuje sa 90 μl medija kao u #1 gore.

U svako reakcijsko mjesto se smjesti 10 μl/reakcijskom mjestu odgovarajućeg razrijeđenja lijeka.

24 sata kasnije, za otkrivanje aktivnosti se upotrebljava Steady-GloTM Luciferase Assay System, a u skladu sa uputstvima proizvođača (Promega, Cat.No.: E2520).

ARTA Stable 2:

Stable 2 stanice su postavljene u format sa 96 reakcijskih mjesta, pri 6,000 stanica/reakcijskom mjestu, u visoko glukoznom DMEM bez fenol crvenog (Gibco BRL, Cat.No.: 21063-029), koji sadrži 10% FBS tretiranog sa ugljenom i dekstranom (HyClone Cat.No.: SH30068.02), 50 mM HEPES pufera (Gibco BRL, Cat.No.: 15630-080), 1X MEM Na piruvat (Gibco BRL, Cat.No.: 11360-070), 0.5X antibiotik-antimikotik, 800 μg/ml geneticina (Gibco BRL, Cat.No.: 10131-035) i 800 μg/ml higromicina β (Gibco BRL, Cat.No.: 10687-010).

48 sati kasnije, medij na stanicama se uklanja i zamijenjuje sa 90 μl svežeg. U svako reakcijsko mjesto se dodaje 10 μl/reakcijskom mjestu odgovarajućeg razrijeđenja lijeka.

24 sata kasnije, za otkrivanje aktivnosti se upotrebljava Steady-GloTM Luciferase Assay System, a u skladu sa uputstvima proizvođača (Promega, Cat.No.: E2520).

Vidi: U.S. Patentnu prijavu serijski br. 09/885,831, naslovljenu “Cell Lines and Cell-BasedAssays for Identification of Androgen Receptor Modulators” (“Stanične linije i na stanicama zasnovani testovi za identifikaciju modulatora androgenog receptora”), koju je 20. 6. 2001. prijavio Jacek Ostrowski i sur., (Attorney Docket No. D0177), pri čemu je Patentna prijava ovdje u cjelosti obuhvaćena putem reference.

Testovi proliferacije

Test proliferacije stanica mišje dojke

Sposobnost spojeva ovog izuma (“test spojevi”) da mijenjaju funkciju AR-a je određena testiranjem navedenih spojeva testom proliferacije, korištenjem stanične linije mišjih dojki koja ispoljava odgovor na androgen, a koja je dobijena iz Shionogi tumora, Hiraoka et al., Cancer Res., 47, 6560-6564 (1987). Trajno AR zavisni klonovi matične Shionogi linije su izgrađeni podvrgavanjem fragmenata tumora općim procedurama, koje su prvobitno opisali Teuto i sur., Cancer Research 25, 1168-1175 (1965). Gornjom procedurom je izolirana jedna stabilna linija, SC114, koja je opisana i korištena za ispitivanje spojeva primjera. SC114 stanice su inkubirane sa ili bez test spojeva tijekom 72 sata i izmjerena je količina [3H]-timidina ugrađenog u DNK kao surogatna završna točka kako bi se odredio broj stanica i na taj način brzina proliferacije, kako je opisao Suzuki i sur., J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 37, 559-567 (1990). SC114 stanična linija je održavana u MEM koji sadrži 10-8 M testosterona i 2% DCC-om tretiranog FCS. Za test, stanice su smještene u mikroploče sa 96 reakcijskih mjesta u mediju za održavanje i inkubirane su na 37oC. Slijedećeg dana, medij je promenjen u medij bez seruma [Ham’s F-12:MEM (1;1,v/v) koji sadrži 0.1% BSA] i sa (antagonistički način) ili bez (agonistički način) 10-8 M testosterona i, test spojevima ovog izuma u koncentracijama raspona od 10-10 do 10-5 M. Za svaki uzorak su korišteni duplikati. Razrijeđenja spojeva su izvedena na Biomek 2000 laboratorijskoj radnoj stanici. 72 sata kasnije, dodato je 0.44uCi [3H]-timidina (Amersham) po reakcijskom mjestu i inkubirano još 2 h, a zatim je uslijedila tripsinizacija i sakupljanje stanica na GF/B filtere. U filtere je dodat Micro-scint PS prije njihovog brojanja na Beckman TopCount-u.

Za antagonistički način, %inhibicije je izračunat kao:

%inhibicije = 100 x (1 – [srednja vrijednostuzorak – srednja vrijednostslijepa / srednja vrijednostkontrola – srednja vrijednostslijepa])

Podaci su grafički prikazani i određena je koncentracija spojeva koja inhibira 50% ugrađivanja [3H]-timidina (IC50).

Za agonistički način, %kontrole je uzet kao učinak testiranog spoja u odnosu sa maksimalnim učinkom koji se dobiva sa prirodnim hormonom, u ovom slučaju DHT-om i, izračunato je kao:

%kontrole = 100 x (srednja vrijednostuzorak – srednja vrijednostslijepa) / srednja vrijednostkontrola – srednja vrijednostslijepa)

Podaci su grafički prikazani i određena je koncentracija spojeva koja inhibira 50% ugrađivanja [3H]-timidina (EC50).

In vitro test za mjerenje GR-om inducirane AP-1 transrepresije:

AP-1 test je stanični zasnovan test prijenosnika luciferaze. A549 stanice, koje sadržava endogeni glukokortikoidni receptor, bile su trajno transfektirane sa AP-1 DNK veznim mjestom koje je povezano sa genom luciferaze. Stanice su onda rasle u RPMI + 10% fetalnog telećeg seruma (tretiranog ugljenom) + penicilin/streptomicin sa 0.5 mg/ml geneticina. Stanice se smještaju dan prije testiranja na otprilike 40000 stanica/reakcijskom mjestu. Na dan testiranja, medij se uklanja aspiracijom, a u svako reakcijsko mjesto se dodaje 20 μl test pufera (RPMI bez fenol crvenog + 10% FCS (tretiran ugljenom) + pen/strep). U ovom momentu se u svako reakcijsko mesto dodaje bilo 20μl test pufera (kontrolni eksperimenti), spojeva ovog izuma (“test spojevi”) (otopina u DMSO i dodata u raznim koncentracijama) ili, deksametazon (100 nM u DMSO, pozitivna kontrola). Ploče se onda pre-inkubiraju tijekom 15 minuta na 37oC, a zatim, slijedi stimulacija stanica sa 10 ng/ml PMA. Ploče se onda inkubiraju tijekom 7 h na 37oC poslije čega se u svako reakcijsko mesto doda 40 μl supstrata luciferaze. Aktivnost se mjeri analizom u luminometru usporedbom sa kontrolnim eksperimentima tretiranim puferom ili deksametazonom. Aktivnost se označava kao %inhibicije prijenosnog sustava u odnosu sa puferskom kontrolom sa 10 ng/ml samog PMA. Kontrola, deksametazon, u koncentraciji od ≤10 μM obično suprimira aktivnost za 65%. Test spojevi, koji pokazuju inhibiciju PMA indukcije od 50% ili veću pri koncentraciji test spojeva od ≤10 μM smatraju se aktivnim.

Test AR antagonista testom težine vlažne prostate:

Aktivnost spojeva ovog izuma kao AR antagonista je istražena na modelu nezrelih mužjaka štakora, standardnim, priznatim testom antiandrogene aktivnosti datog spoja, kako je opisao L.G. Hershberger i sur., u Proc. Soc. Expt. Biol. Med., 83, 175 (1953); P.C. Walsh and R.F. Gittes, “Inhibition of extratesticular stimuli to prostate growth in the castrated rat by antiandrogens” (“Inhibicija antiandrogenima vantestikularnih stimulusa na rast prostate kod kastriranih štakoraa”), Endocrinology, 86, 624 (1970); and B.J. Furr et al., “ICI 176,334: A novel non-steroid, peripherally selective antiandrogen” (“Novi ne-steroidni, periferno selektivni antiandrogen”), J. Endocrinol., 113, R7-9 (1987), izlaganja, koja su ovdje obuhvaćena kao referenca.

Osnova ovog testa je činjenica da dopunski spolni organi mužjaka, kao što su prostata i testisi, igraju važnu ulogu u reproduktivnoj funkciji. Žlijezde se stimuliraju da rastu i održavaju veličinu i sekretornu funkciju kontinuiranom prisutnošću serumskog testosterona (T), koji je glavni serumski androgen (>95%), koji proizvode Leydigove stanice u testisu pod kontrolom hipofiznog luteinizirajućeg hormona (LH) i folikulostimulirajućeg hormona (FSH). Testosteron se, u prostati, prevodi u daleko aktivniji oblik, dihidrotestosteron (DHT), pomoću 5α-reduktaze. Adrenalni androgeni, također, doprinose sa oko 20% od ukupnog DHT u prostati štakoraa, u odnosu sa 40% onog, kod 65-godišnjeg čovjeka. F. Labrie et al. Clin. Invest. Med., 16, 475-492 (1993). Ipak, ovo nije glavni put, jer i kod životinja i kod čovjeka kastracija vodi do skoro potpune involucije prostate i sjemenih vrećica bez popratne adrenalektomije. Zbog toga, pod normalnim uvjetima, adrenalke ne doprinose značajno rastu tkiva prostate. M.C. Luke and D.S. Coffey, “The Physiology of Reproduction” ed. By E. Knobil and J. D. Neil, 1, 1435-1487 (1994). Pošto su spolni organi mužjaka tkiva koja najviše odgovaraju na promjene androgene aktivnosti, ovaj model se koristi za određivanje androgeno zavisnog rasta dopunskih spolnih organa kod nezrelih kastriranih štakora.

Mužjaci nezrelih štakoraa (19-20 dana stari, Sprague-Dawley, Harlan Sprague-Dawley) su kastrirani u metofanskoj anesteziji. Pet dana poslije kirurške intervencije, ovi kastrirani štakori (60-70 g, 23-25 dana stari) su dozirani u toku 3 dana. Životinje su dozirane subkutano (s.c.) sa 1 mg/kg testosteron propionata (TP) u vehikulumu od kikirikijevog ulja, a anti-androgeni test spojevi (spojevi ovog izuma) su dozirani oralno preko sonde (p.o.) kao otopina/suspenzije od 80% PEG 400 i 20% Tween 80 (PEGTW). Životinje su dozirane (v/tež) pri 0.5 ml vehikuluma / 100 g tjelesne težine. Eksperimentalne grupe su bile kako slijedi:

kontrolni vehikulum

testosteron propionat (TP) (3 mg/štakoru/danu, subkutano)

TP i Casodex (primjenjeno p.o. u PEGTW, QD), priznati antiandrogen, kao referentni spoj.

Da bi se prikazala antagonistička aktivnost, spoj ovog izuma (“test spoj”) je primjenjen (p.o. u PEGTW, QD) sa TP (s.c. kao što je primjenjeno grupi 2) u rasponu doza.

Da bi se prikazala agonistička aktivnost, spoj ovog izuma (“test spoj”) je primjenjen samo (p.o. u PEGTW, QD) u rasponu doza.

Na kraju 3. dana tretmana, životinje su žrtvovane i izmjerena je trbušna prostata. Da bi se usporedili podaci iz različitih eksperimenata, težine spolnih organa su prvo standardizirane kao mg na 100 g tjelesne težine, a porast težine organa induciran TP-om je smatran kao maksimalni porast (100%). Za statističku analizu korišten je ANOVA, a zatim, jedno-“repi” Student ili Fišerov egzaktni test.

Povećanje ili gubitak težine spolnog organa reflektira promjene broja stanica (DNK sadržaja) i stanične mase (sadržaj proteina) u zavisnosti od koncentracije serumskog androgena. Vidi: Y. Okuda et al., J. Urol., 145, 188-191 (1991), izaganje, koje je ovdje obuhvaćeno kao referenca. Zbog toga, mjerenje vlažne težine organa je dovoljno da ukaže na bioaktivnost androgena i androgenih antagonista. Kod nezrelih kastriranih štakora, zamjena egzogenim androgenima povećava sjemene vrećice (SV) i trbušnu prostatu (VP) na dozno-zavisni način.

Maksimum porasta u težini organa je bio 4 do 5-puta kada se doziralo sa 3 mg/štakoru/danu testosterona (T) ili 1 mg/štakoru/danu testosteron propionata (TP) u toku 3 dana. EC50 T-a i TP-a su otprilike, pojedinačno 1 mg i 0.03 mg. Porast težine VP-e i SV-a, također je u korelaciji sa porastom koncentracija T i DHT u serumu. Iako je primjena T-a pokazala 5-puta veće koncentracije T i DHT u serumu 2 sata po subkutanoj injekciji, nego što je primjena TP-a, iza toga, ovi visoki nivoi veoma brzo opadaju. Suprotno, serumske koncentracije T i DHT kod životinja tretiranih TP-om bile su sasvim konzistentne tijekom 24 sata i zato, TP pokazuje oko 10-30-puta veću moć od slobodnog T.

U ovom modelu nezrelog kastriranog štakora, poznati AR antagonist (Casodex) bio je, također, primjenjen istovremeno sa 0.1 mg TP-a (ED80), inhibirajući testosteronom posredovan porast težina VP i SV na dozno zavisni način. Antagonistička učinka su slična kada se dozira oralno ili subkutano. Spojevi izuma, isto tako, pokazju AR antagonističku aktivnost tako što suprimiraju testosteronom posredovan porast u težinama VP i SV.

Test AR agonista testom Levator Ani & težine vlažne prostate:

Aktivnost spojeva ovog izuma kao AR agonista je istražena na modelu nezrelih mužjaka štakora, priznatim testom anaboličkih efekata na muskulaturu i efektima održavanja u spolnim organima za dati spoj, kako je opisao L.G. Hershberger i sur., u Proc. Soc. Expt. Biol. Med., 83, 175 (1953); B.L. Beyler et al., “Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animals” (“Postupci za ispitivanje anaboličkih i kataboličkih sredstava na laboratorijskim životinjama”), J. Amer. Med. Women’s Ass., 23, 708 (1968); H. Fukuda et al., “Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay” (“Istraživanja mišića levator ani kao test anaboličkih steroida”), Nago Dai. Yak. Ken. Nem., 14, 84 (1966), izlaganja, koja su ovdje obuhvaćena kao referenca.

Osnova ovog testa leži u dobro definiranom učinku androgenih sredstava na održavanje i rast mišićnih tkiva i dopunskih spolnih organa kod životinja i čovjeka. Androgeni steroidi, kao testosteron (T), dobro su opisani u svojoj mogućnosti da održavaju mišićnu masu. Treman životinja ili ljudi poslije kastracije sa egzogenim izvorima T-a dovodi do povlačenja mišićne atrofije. Učinka T-a na mišićnu atrofiju kod mišića levator ani štakora je dobro opisano. M. Masuoka et al., “Constant cell population in normal, testosterone deprived and testosterone stimulated levator ani muscles” (“Konstantna stanična populacija kod normalnih, testosterona lišenih i testosteronom stimuliranih mišića levator ani”) Am. J. Anat., 119, 263 (1966); Z. Gori et al., “Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats. I. Quantitative data” (“Testosteronska hipertrofija mšića levator ani kod kastriranih štakora. I. Kvantitativni podaci”), Boll.–Soc. Ital. Biol. Sper., 42, 1596 (1966); Z. Gori et al., “Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats. II. Electron-microscopic observations” (“Testosteronska hipertrofija mišića levator ani kod kastriranih štakora. II. Zapažanja eloktronske-mikroskopije”), Boll.–Soc. Ital. Biol. Sper., 42, 1600 (1966); A. Boris et al., Steroids 15, 61 (1970). Kao što je gore opisano, učinci androgena na održavanje dopunskih spolnih organa mužjaka, kao prostate i sjemenih vrećica, dobro je opisano. Kastracija dovodi do brze involucije i atrofije prostate i sjemenih vrećica. Ovaj učinak se može poništiti egzogenim dodavanjem androgena. Pošto su i mišić levator ani i muški spolni organi tkiva, koja najviše podliježu odgovoru na učinka androgenih sredstava, ovaj model se koristi za određivanje androgen zavisnog povlačenja atrofije mišića levator ani i dopunskih spolnih organa kod nezrelih kastriranih štakora. Seksualno zreli štakori (200-250 g, 6-8 tjedana stari, Sprague-Dawley, Harlan) su nabavljeni već kastrirani (Taconic). Štakori su podeljeni u grupe i tretirani dnevno tijekom 7 do 14 dana sa jednim od slijedećeg:

kontrolni vehikulum

testosteron propionat (TP) (3 mg/štakoru/danu, subkutano)

TP i Casodex (primjenjeno p.o. u PEGTW, QD), priznati antiandrogen, kao referentni spoj.

Da bi se prikazala antagonistička aktivnost, spoj ovog izuma (“test spoj”) je primjenjen (p.o. u PEGTW, QD) sa TP (s.c. kao što je primjenjeno grupi 2) u rasponu doza.

Da bi se prikazala agonistička aktivnost, spoj ovog izuma (“test spoj”) je primjenjen samo (p.o. u PEGTW, QD) u rasponu doza.

Na kraju 7-14-odnevnog tretmana, životinje su žrtvovane pomoću ugljik dioksida i izmjereni su levator ani, sjemena vrećica i ventralna prostata. Kako bi se usporedili podaci iz različitih eksperimenata, težine mišića levator ani i spolnog organa su prvo standardizirane kao mg na 100 g tjelesne težine, a porast u težini organa induciran TP-om je smatran kao maksimalni porast (100%). Za statističku analizu je upotrijebljen Super-anova (jedan faktor).

Povećanje i gubitak težine spolnog organa odražava promjene broja stanica (DNK sadržaja) i stanične mase (sadržaj proteina) u zavisnosti od koncentracije serumskog androgena. Vidi: Y. Okuda et al., J. Urol., 145, 188-191 (1991), izaganje, koje je ovdje obuhvaćeno kao referenca. Zbog toga, mjerenje vlažne težine organa je dovoljno da ukaže na bioaktivnost androgena i androgenih antagonista. Kod nezrelih kastriranih štakora, zamena egzogenim androgenima povećava: levator ani, sjemene vrećice (SV) i prostatu na dozno-zavisni način.

Maksimum porasta u težini organa je bio 4 do 5-puta kada se doziralo sa 3 mg/štakoru/danu testosterona (T) ili 1 mg/štakoru/danu testosteron propionata (TP) u toku 3 dana. EC50 T-a i TP-a su otprilike, pojedinačno 1 mg i 0.03 mg. Porast težine VP-e i SV-a, također je u korelaciji sa porastom koncentracija T i DHT u serumu. Iako je primjena T-a pokazala 5-puta veće koncentracije T i DHT u serumu 2 sata po subkutanoj injekciji, nego što je primjena TP-a, iza toga, ovi visoki nivoi veoma brzo opadaju. Suprotno, serumske koncentracije T i DHT kod životinja tretiranih TP-om bile su sasvim konzistentne tijekom 24 sata i zato, TP pokazuje oko 10-30-puta veću moć od slobodnog T.

Zenograft test MDA PCa2b humane prostate:

In Vivo antitumorsko testiranje: MDA-PCa-2b tumori humane prostate su održavani u Balb/c nu/nu golim miševima. Tumori su proširivani u vidu subkutanih transplanta kod odraslih mužjaka golih miševa (4-6 tjedana starih), upotrebom tumorskih fragmenata dobijenih od miševa donora. Tumorski prijenos se javljao svakih 5-6 tjedana.

Za istraživanje antitumorskog učinka, zahtijevani broj životinja potrebnih za otkrivanje odgovora koji ima smisla, grupiran je na početku eksperimenta i svakoj je dat subkutani implant tumorskog fragmenta (č50mg) iglom za punktiranje promjera-13. Tumorima je dozvoljeno da rastu do otpr. 100-200 mg (tumori koji su bili van opsega su isključeni) i životinje su ravnomjerno raspoređene u grupe sa raznim tretmanima i kontrolne grupe. Tretman svake životinje se zasnivao na individualnoj tjelesnoj težini. Tretirane životinje su svakog dana provjeravane na toksičnost/smrtnost koje su u vezi sa tretmanom. Svaka grupa životinja je izmjerena prije otpočinjanja tretmana (Wt1) i ponovo, poslije poslijednje doze tretmana (Wt2). Razlika u tjelesnoj težini (Wt2-Wt1) omogućuje mjeru toksičnosti koja je u vezi sa tretmanom.

Tumorski odgovor je određen mjerenjem tumora kaliperom (šestar za mjerenje šupljina, prim. prev.) dva puta u toku tjedna, sve dok tumori nisu dostigli predodređenu “ciljnu” veličinu od 0.5 gm. Težine tumora (mg) su određene iz formule:

Težina tumora = (dužina x širina2) / 2.

Završna točka tumorskog odgovora je izražena u obliku inhibicije tumorskog rasta (%T/C), a koja je definirana kao odnos srednjih vrijednosti težina tumora tretiranih tumora (T) i onih kontrolne grupe (C).

Za određivanje ubijanja stanica tumora, prvo se izračunava vrijeme udvostručavanja zapremine tumora pomoću formule:

TVDT = srednje vrijeme (dani) za kontrolne tumore da dostignu ciljnu veličinu – srednje vrijeme (dani) za kontrolne tumore da dostignu polovinu ciljne veličine.

I, Log ubijanja stanica = (T - C) ÷ (3.32 x TVDT)

Statističko ispitivanje podataka je izvedeno upotrebom Gehan-ovog uopćenog Wilcoxon-ovog testa.

Upozoravajući tumor prostate:

Upozoravajući R3327H tumor prostate je spontani adenokarcinom prostate, koji je dobro diferenciran i odgovara na androgen (Smolev JK, Heston WD, Scott WW, and Coffey DS, Cancer Treat Rep. 61, 273-287 (1977)). Odabran je rast R3327H podlinije zbog njegove visoke androgen-zavisnosti i reproducibilnog rasta kod intaktnih mužjaka štakora. Zbog toga se ovaj model i druge podlinije ovog tumora široko koriste u ispitivanju in vivo antitumorskih aktivnosti antiandrogena, kao što su flutamid i bacilutamid/Casodex (Maucher A., and von Angerer, J. Cancer Res. Clin. Oncol., 119, 669-674 (1993), Furr B.J.A. Euro. URL. 18 (suppl. 3), 2-9 (1990), Shain S.A. and Hout R.I. J. Steroid Biochem. 31, 711-718 (1988)).

Na početku ispitivanja, komadići upozoravajućeg tumora (oko 4 x 4 mm) su transplantirani subkutano u slabinu zrelog mužjaka Copenhagen štakora (6-7 tjedana starih, Harlan-Sprague Dawley, Indianapolis, MD). Otprilike 6 tjedana poslije implantacije, životinje sa tumorima mjerljive veličine (oko 80-120 mm2) se nasumično rasporede u grupe za liječenje (8-10 štakora/grupi) i započinju se tretmani. Jedna grupa štakora se kastrira da služi kao negativna kontrola tumorskog rasta. Životinje se tretiraju dnevno spojevima ovog izuma, standardnim antiandrogenima, kao što je bacilutamid ili vehikulom (kontrola) prosječno od 10 do 14 tjedana. Test spojevi su otopljeni u vehikulumu (2.5 ml/kg tjelesne težine) 10% spolietilen glikola i 0.05% Tween-80 u 1% karboksimetil celuloze, PEG/CMC, (Sigma, St Louis, MO). Tipični terapijski eksperimenti bi obuhvatili tri grupe tri eskalirajuće doze za svaki standardni ili test spoj (u opsegu od 300-3 mg/kg).

Tumori u vehikulum (kontrola) grupi dostižu veličinu od 1500 do 2500 mm3, dok kastrirana grupa životinja obično pokazuje stazu tumora tijekom 14 tjedana promatranja. Očekuje se da životinje tretirane oralno sa 20 mg/kg bikalutamida ili flutamida pokažu 40%-tno sniženje zapremine tumora u odnosu sa kontrolom poslije 14 tjedana tretmana. Veličina tumora se mjeri tjedno nonijusnim kaliperom (Froboz, Switzerland), uzimajući uspravna mjerenja dužine i širine. Zapremine tumora se mjere u mm3 upotrebom formule: Dužina x širina x Visina = Zapremina. Statističke razlike između liječenih grupa i kontrola su ispitane upotrebom ANOVA analize, a zatim, jedno-“repim” ne-parameterskim Student t testom.

Test težine prostate zrelih štakora:

Aktivnost spojeva ovog izuma je istraživana na modelu zrelih mužjaka štakora, što je varijacija Testa težine levator ani & vlažne prostate, koji je gore opisan. Gornji in vivo testovi su priznati testovi za određivanje anaboličkih efekata na muskulaturu i efekata održavanja u spolnim organima za dati spoj, kako je opisao L.G. Hershberger i sur., u 83 Proc. Soc. Expt. Biol. Med., 175 (1953); B.L. Beyler et al., “Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animals” (“Postupci za ispitivanje anaboličkih i kataboličkih sredstava na laboratorijskim životinjama”), 23 J. Amer. Med. Women’s Ass., 708 (1968); H. Fukuda et al., “Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay” (“Istraživanja mišića levator ani kao test anaboličkih steroida”), 14 Nago Dai. Yak. Ken. Nem., 84 (1966), izlaganja, koja su ovdje obuhvaćena kao referenca. Osnova ovog testa leži u dobro definiranom učinku androgenih sredstava na održavanje i rast mišićnih tkiva i dopunskih spolnih organa kod životinja i čovjeka.

Dopunski muški spolni organi, kao što su prostata i sjemene vrećice, igraju važnu ulogu u reproduktivnoj funkciji. Žlijezde se stimuliraju da rastu i održavaju veličinu i sekretornu funkciju kontinuiranom prisutnošću serumskog testosterona (T), koji je glavni serumski androgen (>95%), koji proizvode Leydigove stanice u testisu pod kontrolom hipofiznog luteinizirajućeg hormona (LH) i folikulostimulirajućeg hormona (FSH). Testosteron se, u prostati, prevodi u daleko aktivniji oblik, dihidrotestosteron (DHT), pomoću 5α-reduktaze. Adrenalni androgeni, također, doprinose sa oko 20% od ukupnog DHT u prostati štakora, u odnosu sa 40% onog, kod 65-godišnjeg čovjeka. F. Labrie et al. 16 Clin. Invest. Med., 475-492 (1993). Ipak, ovo nije glavni put, pošto i kod životinja i kod čovjeka kastracija vodi do skoro potpune involucije prostate i semenih kesica bez propratne adrenalektomije. Zbog toga, pod normalnim uvjetima, adrenalke ne doprinose značajno rastu tkiva prostate. M.C. Luke and D.S. Coffey, “The Physiology of Reproduction” ed. By E. Knobil and J. D. Neil, 1, 1435-1487 (1994). Pošto su muški spolni organi i levator ani tkiva, koja najviše odgovaraju na promjene androgene aktivnosti, ovaj model se koristi za određivanje aktivnosti spojeva koja mjenjaju putanju androgenog receptora kod zrelih štakora.

Osim svojih mitogenih aktivnosti na tkiva, kao što su prostata, sjemene vrećice i muskulatura, testosteron, isto tako, služi kao negativni regulator za svoju biosintezu. Produkcija testosterona u Leydigovim stanicama testisa, kontrolirana je nivoom cirkulirajućeg LH, koji je oslobođen iz hipofizne žlijezde. Nivoi LH su sami kontrolirani nivoom LHRH kojeg proizvodi regija hipotalamusa. Nivoi testosterona u krvi služe da inhibiraju sekreciju LHRH i poslijedično snize nivoe LH i na kraju nivoe cirkulirajućeg testosterona. Mjerenjem nivoa LH u krvi, pošto na njih utječu spojevi ovog izuma (“test spojevi”), moguće je odrediti nivo agonističke ili antagonističke aktivnosti navedenih spojeva na hipotalamičku os ovog endokrinog ciklusa.

Grupe Harlan Sprague-Dawely štakora (40-42 dana stari, 180-220 g), koje se usporede, dozirane su, u toku 14 dana, oralno putem sonde (p.o.) sa test spojevima u vidu otopina/suspenzija 80%-tnog PEG-a 400 i 20%-tnog Tween-a 20 (PEGTW). Dvije kontrolne grupe, jedna intaktna, druga kastrirana, dozirane su oralno samo sa PEGTW vehikulumom. Životinje su bile dozirane (v/tež) na 0.5 ml vehikuluma / 100 g tjelesne težine. Eksperimentalne grupe su kako slijedi:

1. Intaktni vehikulum (p.o., PEGTW, QD)

2. Kontrolni vehikulum (p.o., PEGTW, QD)

3. Bikalutamid (Casodex, priznati antiandrogen, kao referentni spoj) ili spoj ovog izuma, p.o. u PEGTW QD. (u rasponu doza).

Na kraju 14-odnevnog tretmana, životinje su žrtvovane i, kirurški su uklonjeni: ventralna prostata, sjemene vrećice i levator ani i, izmjereni. Kako bi se usporedili podaci iz različitih eksperimenata, težine organa su prvo standardizirane kao mg na 100 g tjelesne težine i izražene kao postotak od vrijednosti pojedinačnog organa u intaktnoj grupi.

Luteinizirajući hormon štakora (rLH) se kvantitativno određuje sa Biotrak-ovim [125J] kompletom (Amersham Pharmacia Biotek), poštujući uputstva proizvođača. Test je zasnovan na kompeticiji LH prisutnog u serumu sa [125J]rLH za vezanje na suspenziju Amerlex-M kuglice/antitijelo. Radioaktivnost koja zaostaje po inkubaciji sa serumom i kasnijim ispiranjima se ekstrapolira na standardnu krivulju kako bi se dobilo čitanje u ng/ml.

Povećanje i gubitak težine spolnog organa i levatora ani odražava promjene broja stanica (DNK sadržaja) i stanične mase (sadržaj proteina) u zavisnosti od koncentracije serumskog androgena. Vidi: Y. Okuda et al., J. Urol., 145, 188-191 (1991), izaganje, koje je ovdje obuhvaćeno kao referenca. Zbog toga, mjerenje vlažne težine organa je dovoljno da ukaže na bioaktivnost androgena i androgenih antagonista. U testu zrelih štakora, aktivna agonistička sredstva neće imati efekta ili će uvećati težinu jednog ili više organa koji odgovaraju na androgen (levator ani, prostata, sjemene vrećice) i neće imati efekta ili će imati supresivni efekat na LH sekreciju. Spojevi sa antagonističkom aktivnošću će umanjiti težinu jednog ili više organa koji odgovaraju na androgen (levator ani, prostata, sjemene vrećice) i neće imati efekta ili će imati umanjeni supresivni efekat na LH sekreciju.

Zenograft test CWR22 humane prostate:

In Vivo antitumorsko testiranje: CWR22 tumori humane prostate su održavani u Balb/c nu/nu golim miševima. Tumori su proširivani u vidu subkutanih transplanta kod odraslih mužjaka golih miševa (4-6 tjedana starih), upotrebom tumorskih fragmenata dobijenih od miševa donora. Tumorski prijenos se javljao svakih 5-6 tjedana.

Za istraživanje antitumorskog učinka, zahtjevani broj životinja potrebnih za otkrivanje odgovora koji ima smisla, grupiran je na početku eksperimenta i svakoj je dat subkutani implant tumorskog fragmenta (č50mg) iglom za punktiranje promjera-13. Tumorima je dozvoljeno da rastu do otprilike 100-200 mg (tumori koji su bili van opsega su isključeni) i životinje su ravnomjerno raspoređene u grupe sa raznim tretmanima i kontrolne grupe. Tretman svake životinje se zasnivao na individualnoj tjelesnoj težini. Tretirane životinje su svakog dana provjeravane na toksičnost/smrtnost koje su u vezi sa tretmanom. Svaka grupa životinja je izmjerena prije otpočinjanja tretmana (Wt1) i zatim ponovo, poslije poslijednje doze tretmana (Wt2). Razlika u tjelesnoj težini (Wt2-Wt1) omogućuje mjeru toksičnosti koja je u vezi sa tretmanom.

Tumorski odgovor je određen mjerenjem tumora kaliperom dva puta u toku tjedna, sve dok tumori nisu dostigli predodređenu “ciljnu” veličinu od 0.5 gm. Težine tumora (mg) su određene iz formule:

Težina tumora = (dužina x širina2) ÷ 2.

Završna točka tumorskog odgovora je izražena u obliku inhibicije tumorskog rasta (%T/C), a koja je definirana kao odnos srednjih vrijednosti težina tumora tretiranih tumora (T) i onih kontrolne grupe (C).

Za određivanje ubijanja stanica tumora, prvo se izračunava vrijeme udvostručavanja zapremine tumora pomoću formule:

TVDT = srednje vrijeme (dani) za kontrolne tumore da dostignu ciljnu veličinu – srednje vrijeme (dani) za kontrolne tumore da dostignu spolovinu ciljne veličine.

I, Log ubijanja stanica = (T - C) / (3.32 x TVDT)

Statističko ispitivanje podataka je izvedeno upotrebom Gehan-ovog uopćenitenog Wilcoxon-ovog testa.

Slijedeći Primjeri ilustriraju ostvarenja ovog izuma i, nemaju svrhu da ograniče smisao patentnih zahtjeva. U okviru Primjera, jedan spoj formule I se pripremi i zatim, upotrebi za dalje izrade jednog ili više dopunskih Spojeva formule I ili njihovih soli. Postupci, koji su korišteni za izradu jednog Spoja formule I ili njegove soli se mogu upotrijebiti za izradu drugih spojeva.

Skraćenice

Ovdje su korištene slijedeće skraćenice:

DBU = 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en

4-DMAP = 4-dimetilaminopiridin

ee = enantiomerni višak

DMF = dimetilformamid

EtOAc = etil acetat

LDA = litij diizopropilamid

Hünig’s Base = N,N-diizopropiletilamin

Me = metil

RT = retencijsko vrijeme

TFA = trifluorooctena kiselina

THF = tetrahidrofuran

TLC = tankoslojna kromatografija

TMS = trimetilsilil

pTSA = para-toluensulfonska kiselina

������������������������ = toplina

t-Bu = terc-butil

PhCH3 = toluen

Pd/C = paladij na aktiviranom ugljiku

TsCl = tosil klorid

TBSOTf = terc-butildimetilsilil trifluorometan sulfonat

TBS = terc-butildimetilsilan

MeJ = metil jodid

(BOC)2O = di-terc-butil dikarbonat

TEA = trietilamin

n-BuLi = n-butillitij

rt = sobna temperatura

LC = tekućinska kromatografija

Ts = tosil

Ph = fenil

EtOH = etanol

DCE = dikloroetan

DMSO = dimetilsulfoksid

Ra-Ni = Raney Nickel

MS = molekularna sita

MS(ES) = elektro-sprej masena spektrometrija

mCPBA = m-kloroperoksibenzojeva kiselina

sat = zasićen

AcOH = octena kiselina

MeOH = metanol

Et2O = dietil eter

Ac = acetil

DEAD = dietil azodikarboksilat

h = sati

Et = etil

WSDCC = u vodi topljiv dikarbonil diimid, 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidroklorid

TBAF = tetrabutilamonij fluorid

DBAD = di-terbutilazodikarboksilat

DCC = dicikloheksilkarbodiimid

Wilkinson’s catalyst = RhCl(PPh)3

ADDP = 1,1-[azodikarbonitril]dipiperidin

DMA = dimetilacetamid

DME = 1,2-dimetoksietan

BOP =benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)-fosfonij heksafluorofosfat

HRMS = masena spektrometrija visoke rezolucije

TBME = MTBE = metil terc-butil eter (t.j. 2-metoksi-2-metil-propan)

TiCl2Cp2 = bis(ciklopentadienil)titanium diklorid

DPPA = difenilfosforil azid

HMPA = heksametilfosforil amid

V% = zapreminski postotak

BH3 • DMS = boran dimetilsulfat

vvm = zapremina plina prema zapremini tekućine po minuti

Primjer 1

(3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-bromo-3-metilfenil)tetrahidro-4,7-etanotiopirano[3,4-c]pirol-1,3,8(2H,4H)-trion (1C)

[image]

A. 4-(terc-butildimetilsiloksi)-2H-tiopiran (1A)

[image]

2,3-dihidro-4H-tiopiran-4-on (1.50 g, 13.1 mmol, sintetiziran kao što je opisano u Richards et al. J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) je otopljen u CH2Cl2 (130 mL) i dodat je trietilamin (5.47 mL, 39.4 mmol). Zatim je dodat terc-butildimetilsilil trifluorometansulfonat (3.62 mL, 15.8 mmol). Poslije 10 minuta, isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo na 25°C. Nastalo žuto ulje je propušteno kroz kratku kolonu SiO2, uz eluaciju sa 3% TFA u heksanima, da bi se dobilo 1.82 g (7.97 mmol, 61%) spoja 1A, u obliku narančastog ulja.

B. 1-[4-bromo-3-metilfenil]-1H-pirol-2,5-dion (1B)

[image]

4-bromo-3-metilanilin (1.55 g, 8.33 mmol) i maleinski anhidrid (0.898 g, 9.16 mmol) su otopljeni u octenoj kiselini (10 mL) i zagrijavani na 115°C tijekom 12 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena do 25°C, a octena kiselina je uklonjena in vacuo. Stvoreni ostatak je suspendiran u 5% K2CO3 (100 mL), miješan je tijekom 25 minuta, filtriran i ispran vodom. Materijal je, zatim, osušen in vacuo, da bi se dobilo 1.65 g (6.20 mmol, 74%) spoja 1B, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 2.96 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-bromo-3-metilfenil)tetrahidro-4,7-etanotio-pirano[3,4-c]pirol-1,3,8(2H,4H)-trion (1C)

Spoj 1A (0.313 g, 1.41 mmol) i spoj 1B (0.250 g, 0.940 mmol) su otopljeni u toluenu i zagrijavani do refluksa tijekom 5 h. Toluen je, zatim, uklonjen propuštanjem struje argona kroz reakcijsku tikvicu. Ostatak je, zatim, pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 20% heksanom u kloroformu. Ovim je proizvedeno 0.168 g enol eterskog intermedijera, u obliku žute čvrste mase. Enol eterski intermedijer je otopljen u dikloroetanu (2.0 mL) i dodata je TFA (0.25 mL). Poslije 0.5 h, reakcija je ugašena zasićenim vodenim NaHCO3 i ekstrahirana sa CH2Cl2 (2 x 30 mL). Organski dijelovi su sušeni preko bezvodnog natrij sulfata i upareni, da bi se dobilo 0.079 g (0.21 mmol, 22%) spoja 1C, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.010 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju, sa 10-90% vodenim metanolom, u toku 4 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 396.9 [M+NH4]+.

Primjer 2

(3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-bromo-3-metilfenil)tetrahidro-4,7-etanotiopirano[3,4-c] pirol-1,3,8(2H,4H)-trion 5,5-dioksid (2)

[image]

Spoj 1C (0.040 g, 0.11 mmol) je otopljen u CH2Cl2 (4.0 mL) i ohlađen do 0°C. Dodata je m-CPBA (60% čistoća, 0.061 g, 0.21 mmol), a reakcijska smjesa je, zatim, zagrijana do 25°C. Poslije 1 h, dodata je, uz snažno miješanje, mješavina 1:1 zasićenog NaHCO3 i zasićenog natrij sulfita (20 mL). Poslije 15 minuta, mješavina je ekstrahirana sa CH2Cl2 (2 x 30 mL), a organski dijelovi su sušeni preko bezvodnog natrij sulfata, da bi se dobilo 0.031 g (0.075 mmol, 71%) spoja 2, u obliku bijele čvrste mase. Pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 78% na 2.290 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 429.8 [M+NH4]+.

Primjer 3

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(3-klorofenil)heksahidro-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (3)

[image]

3-kloroanilin (0.100 g, 0.787 mmol) i 3,6-endokso-3-metilheksahidroftalni anhidrid (0.172 g, 0.945 mmol) su otopljeni u AcOH (2.0 mL) i zagrijavani na 110°C tijekom 11 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena do 25°C, ulivena u hladni zasićeni vodeni K2CO3 i snažno miješana tijekom 10 minuta. Otopina je, zatim, filtrirana i isprana vodom. Nastali filtrat je sušen in vacuo, da bi se dobilo 0.118 g (0.404 mmol, 51%) spoja 3 u obliku bijele čvrste mase. Dalje pročišćavanjenije nije potrebno. HPLC: 99% na 2.510 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 292.32 [M+NH4]+.

Primjer 4

(3aα,4α,7α,7aα)- i (3aα,4β,7β,7aα)-4-[(acetiloksi)metil]-3a,4,7,7a-tetrahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (4i i 4ii, pojedinačno)

[image]

2-acetoksimetilfuran (0.599 mL, 4.78 mmol) i 1-[3-(trifluorometil)-fenil]-1H-pirol-2,5-dion (0.500 g, 2.39 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) su otopljeni u metilen kloridu (3.0 mL), na 25°C. Poslije 22 h, isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a nastali ostatak je pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 0-15% acetonom u metilen kloridu, da bi se dobilo 0.438 g (1.15 mmol, 48%) žutog ulja, kao mješavine, u odnosu 2:1, spoja 4i i spoja 4ii, koji nije odvojen. HPLC: 100% na 3.093 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 398.9 [M+NH4]+.

Primjer 5

(3aα,4α,7α,7aα)- i (3aα,4β,7β,7aα)-4-[(acetiloksi)metil]-heksahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (5i i 5ii, pojedinačno)

[image]

2:1 mješavina spoja 4i i 4ii (0.361 g, 0.948 mmol) je otopljena u etil acetatu (25 mL) i dodat je Pd/C (10% Pd, 0.2 g). Preko balona je uveden vodik i reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 4 h, nakon čega je slijedila filtracija preko celita i ispiranje etil acetatom. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.348 g (0.908 mmol, 96%) žutog ulja, za koje je utvrđeno da je 2:1 mješavina spoja 5i i spoja 5ii (koja nije odvojena). HPLC: 100% na 2.900 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 401.0 [M+NH4]+.

Primjer 6

(3aα,4α,7α,7aα)- i (3aα,4β,7β,7aα)-3a,4,7,7a-tetrahidro-5-(hidroksimetil)-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (6i i 6ii, pojedinačno)

[image]

1-[3-(trifluorometil)fenil]-1H-pirol-2,5-dion (0.500 g, 2.39 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) i 3-furanmetanol (0.412 mL, 4.78 mmol) su otopljeni u metilen kloridu (3.0 mL) i miješani na 25°C tijekom 20 h. Isparljivi dijelovi su zatim uklonjeni in vacuo, a stvoreni materijal je pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa kloroform/acetonom, da bi se dobilo 0.379 g (1.12 mmol, 47%) spoja 6i i 0.220 g spoja 6ii, oba u obliku bijelih čvrstih masa. Spoj 6i: HPLC: 100% na 2.197 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 338.0 [M-H]-. Spoj 6ii: HPLC: 100% na 2.477 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 338.0 [M-H]-.

Primjer 7

(3aα,4α,7α,7aα)-3a,4,7,7a-tetrahidro-5-(hidroksimetil)-4-metil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (7)

[image]

2-metil-3-furanmetanol (0.537 g, 4.78 mmol) i 1-[3-(trifluorometil)-fenil]-1H-pirol-2,5-dion (0.500 g, 2.39 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) su otopljeni u dikloroetanu (2.0 mL) i miješani na 25°C, tijekom 20 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ukoncentrirana in vacuo i pročišćena flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa etil acetat/metilen kloridom, da bi se dobilo 0.317 g (0.897 mmol, 37.5%) spoja 7, u obliku bijele čvrste mase. Drugi mogući izomer nije izoliran poslije podvrgavanja kromatografiji. HPLC: 100% na 2.197 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, u toku 4 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 351.9 [M-H]-.

Primjer 8

(3aα,4β,7β,7aα)-2-[3,5-bis(trifluorometil)fenil]-heksahidro-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (8)

[image]

3,5-bis(trifluorometil)anilin (0.017 g, 0.075 mmol) je otopljen u octenoj kiselini (0.300 mL) i prenesen je u konusnu bočicu od 1.5 mL, sa septa poklopcem. Gotove otopine dodatnih 95 amina pripremljene su kao što je prethodno opisano. U svaku od prethodnih bočica dodato je 0.40 mL (0.12 mmol) gotove otopine egzo-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilnog anhidrida u octenoj kiselini. Bočice su zatim zatvorene i grijane na 110°C, tijekom 11 h. Po hlađenju do 25°C, sa bočica su ukolonjeni poklopci, a octena kiselina je uklonjena in vacuo. U svaku bočicu je dodat 1 mL 2:1 aceton/metilen klorida i bočice su zagrijane na 40°C tijekom 1 h. Kada su svi proizvodi u otopini, oni su preneseni preko robota u filter epruvete, sa krupnim fritom, prethodno navlaženim sa 0.2 mL vode. Kroz svaku epruvetu je propuštan dušik, sve dok isparljivi organski dijelovi nisu odstranjeni. Zatim je u svaku epruvetu dodat 1.5 mL 10% vodenog K2CO3, uz snažno mućkanje, na 25°C tijekom 15 minuta. Epruvete su zatim isušene, ponovno zatvorene i u svaku je dodato, uz mućkanje 1.0 mL vode. Epruvete su, zatim, ponovo isušene i isprane vodom drugi put. Stvoreni ostaci u svakoj epruveti su, poslije toga, sušeni in vacuo, tijekom 48 h. Po sušenju, u svaku epruvetu je dodat 1.0 mL 20% TFA u metilen kloridu, a stalci su mućkani tijekom 30 minuta. Epruvete su, zatim, isušene u ploči od 96 otvora-reakcijskih mjesta, sa prisutnim prethodno-tariranim običnim mikro-epruvetama. Svaka epruveta je ispitana na čistoću proizvoda (analitička LC) i identitet sadržaja (LC-MS). Epruvete su, zatim, ukoncentrirane in vacuo i izmjerene, da bi se odredili prinosi. U epruveti, u kojoj je sadržana reakcija 3,5-bistrifluorometilanilina i egzo-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilnog anhidrida, dobiveno je 0.022 g (0.058 mmol, 77%) spoja 8, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 94% na 4.03 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 434.2 [M+Na+MeOH]+. Od 95 preostalih reakcijskih hodova dobiveno je ukupno 80 konačnih spojeva sa čistoćom >70% i prinosom >5 mg. Nekoliko uzoraka je zahtjevalo dalje pročišćavanje, koje je izvedeno na kratkoj SiO2 koloni, uz eluaciju sa metilen klorid/acetonom. Vidi Tabelu 2, u nastavku.

Primjer 9

Fenilni ester (3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-bromofenil)oktahidro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pirolo[3,4-c]piridin-5-karboksilne kiseline (9)

[image]

1-[4-bromofenil]-1H-pirol-2,5-dion (0.250 g, 0.992 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) i fenilmetil ester 1(2H)-piridinkarboksilne kiseline (0.299 g, 1.49 mmol, sintetiziran kao što je opisano u Richard et al. J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) su otopljeni u toluenu i zagrijavani na 85°C, tijekom 1 h. Poslije hlađenja do 25°C, toluen je uklonjen in vacuo. Stvoreni ostatak je otopljen u minimalnoj količini kloroforma, a proizvod je precipitiran dodavanjem heksana. Poslije 1 h na 25°C, proizvod je filtriran i ispran hladnim 20% heksanima u kloroformu, dajući 0.243 g (0.536 mmol, 54%) spoja 9, u obliku bijele čvrste mase (jedan izomer). HPLC: 100% na 3.393 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 454.98 [M+H]+.

Primjer 10

Fenilmetil ester (3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-bromofenil)oktahidro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pirolo[3,4-c]piridin-5-karboksilne kiseline (10)

[image]

1-[3-(trifluorometil)fenil]-1H-pirol-2,5-dion (3.78 g, 15.7 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) i fenilmetil ester 1(2H)-piridinkarboksilne kiseline (4.00 g, 18.8 mmol, sintetiziran kao što je opisano u Richard et al. J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) su otopljeni u toluenu i zagrijavani na 80°C, tijekom 3 h. Poslije hlađenja do 25°C, toluen je uklonjen in vacuo, a nastali ostatak je pročišćen flash kromatografijom na SiO2 koloni, uz eluaciju sa metanol/metilen kloridom, da bi se dobilo 3.20 g (7.01 mmol, 45%) spoja 10, u obliku žutog ulja. HPLC: 95% na 3.510 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 457.2 [M+H]+.

Primjer 11

(3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-etano-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3(2H)-dion trifluoroacetat (11)

[image]

Spoj 10 (3.20 g, 7.01 mmol) je otopljen u 100 mL MeOH i dodat je 10% Pd/C Degussa katalizator (2.00 g, kat.). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 1 h, reakcijska smjesa je filtrirana preko celita i isprana sa MeOH. Isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a nastali sirovi materijal je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC, da bi se dobilo 2.50 g (5.70 mmol, 81%) spoja 11, u obliku TFA soli (bijela čvrsta masa). HPLC: 99% na 1.843 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 325.12 [M+H]+.

Primjer 12

(3aα,4α,7α,7aα)-5-acetilheksahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-etano-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3(2H)-dion (12)

[image]

Spoj 11 (0.10 g, 0.23 mmol) je suspendiran u THF (5.0 mL) i dodat je TEA (0.097 mL, 0.46 mmol), dajući homogenu otopinu. Zatim je dodat acetil klorid (0.033 mL, 0.46 mmol). Poslije 2 h, reakcija je ugašena sa zasićenim vodenim NaHCO3 i ekstrahirana je metilen kloridom (3 x 15 mL). Sirovi materijal je pročišćen preparativnom TLC, uz eluaciju sa kloroform/acetonom, da bi se dobilo 0.067 g (0.18 mmol, 79%) spoja 12, u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 99% na 2.66 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 367.0 [M+H]+.

Primjer 13

(3aα,4α,7α,7aα)-5-benzoilheksahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-etano-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3(2H)-dion (13)

[image]

Spoj 11 (0.10 g, 0.23 mmol) je suspendiran u THF (5.0 mL) i dodat je TEA (0.097 mL, 0.46 mmol), stvarajući homogenu otopinu. Zatim je dodat benzoil klorid (0.053 mL, 0.46 mmol). Poslije 2 h, reakcija je ugašena zasićenim vodenim NaHCO3 i ekstrahirana metilen kloridom (3 x 15 mL). Sirovi materijal je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC, da bi se dobilo 0.020 g (0.047 mmol, 20%) spoja 13, u obliku bijele pene. HPLC: 99% na 3.183 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 429.1 [M+H]+.

Primjer 14

(3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-5-metil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-etano-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3(2H)-dion (14)

[image]

Spoj 11 (0.10 g, 0.23 mmol) je suspendiran u THF (5.0 mL) i dodat je TEA (0.097 mL, 0.46 mmol), stvarajući homogenu otopinu. Zatim je dodat dimetil sulfat (0.043 mL, 0.46 mmol) i reakcijska smjesa je miješana na 25°C. Poslije 14 h, reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo, a sirovi materijal je pročišćen preparativnom TLC, uz eluaciju sa 10% MeOH u metilen kloridu, da bi se dobilo 0.030 g (0.088 mmol, 39%) spoja 14, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.797 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 339.21 [M+H]+.

Primjer 15

(3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-5-(fenilmetil)-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-etano-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3(2H)-dion trifluoroacetat (15)

[image]

Spoj 11 (0.10 g, 0.23 mmol) je otopljen u DMF (5.0 mL) i dodat je K2CO3 (0.063 g, 0.46 mmol). Zatim je dodat benzil bromid (0.041 mL, 0.35 mmol). Reakcijska mješavina je miješana na 25°C, tijekom 1 h, filtrirana je i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC, da bi se dobilo 0.055 g (0.10 mmol, 43%) spoja 15, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.31 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 415.36 [M+H]+.

Primjer 16

(3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-5-propil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-etano-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3(2H)-dion trifluoroacetat (16)

[image]

Spoj 11 (0.10 g, 0.23 mmol) je otopljen u DMF (5.0 mL) i dodat je K2CO3 (0.079 g, 0.57 mmol), a zatim 1-bromopropan (0.031 mL, 0.34 mmol). Reakcijska mješavina je miješana na 25°C, tijekom 6 h, a zatim je filtrirana je i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC, da bi se dobilo 0.070 g (0.15 mmol, 63%) spoja 16, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.907 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 340.22 [M+H]+.

Primjer 17

Fenilmetil ester (3aα,4α,4aβ,5aβ,6α,6aα)-2-[4-cijano-3-(trifluoro-metil)fenil]dekahidro-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cikloprop[f]izoindol-7-karboksilne kiseline (17)

[image]

1-metil-3-nitro-1-nitrozogvanidin (2.5 g, 17 mmol) je dodavan, dio po dio, otopini 40% KOH/H2O (15 mL) i Et2O (25 mL), na 0°C. Eterski sloj je poprimio žutu boju, čim je završeno dodavanje. Poslije 30 minuta na 0°C, eterski sloj je uliven u otopinu fenilmetil estera (3aα,4α,7α,7aα)-2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]-oktahidro-1,3-diokso-4,7-eteno-5H-pirolo[3,4-c] piridin-5-karboksilne kiseline (0.500 g, 1.09 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 10) i Pd(OAc)2 (0.010 g) u THF (10 mL), na 0°C. Reakcijska mješavina je zatim polagano zagrijavana do 25°C, miješana je tijekom 24 h, a zatim je filtrirana preko celita, uz ispiranje sa THF. Sirovi materijal je zatim, pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa MeOH/CH2Cl2, da bi se dobilo 0.34 g (0.69 mmol, 63%) spoja 17, u obliku bijele čvrste mase i kao jedinog izomera. HPLC: 100% na 3.61 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 496.25 [M+H]+.

Primjer 18

(3aα,4α,4aβ,5aβ,6α,6aα)-4-[dekahidro-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cikloprop[f]izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (18)

[image]

Spoj 17 (0.200 g, 0.404 mmol) je otopljen u MeOH (20 mL) i dodat je 5% Pd/C (0.200 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 3 h, reakcijska smjesa je filtrirana preko celita i isprana sa MeOH, a isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, da bi se dobilo 0.130 g (0.360 mmol, 89%) spoja 18, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.80 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 362.09 [M+H]+.

Primjer 19

(3aα,4α,4aβ,5aβ,6α,6aα)-4-[dekahidro-7-metil-1,3-diokso-4,6-(iminometano)cikloprop[f]izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (19)

[image]

Spoj 18 (0.100 g, 0.277 mmol) je otopljen u CH3CN (2.0 mL). Zatim su dodati TEA (0.19 mL, 1.4 mmol) i MeJ (0.052 mL, 0.83 mmol) i reakcijska mješavina je miješana na 25°C, tijekom 14 h. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, sirovi materijal je raspodeljen između CH2Cl2/vode, a vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2 (3 x 15 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su sušeni iznad bezvodnog Na2SO4. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom, uz eluaciju sa 3% MeOH/CH2Cl2, da bi se dobilo 0.030 g (0.080 mmol, 29%) spoja 19, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 100% na 1.720 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 376.11 [M+H]+.

Primjer 20

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (20B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (20A)

[image]

Svježe destilirani dimetil furan (1.60 mL, 15.3 mmol) je otopljen u CH2Cl2 (2.0 mL) i dodat je maleinski anhidrid (1.00 g, 10.2 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 16 h, a zatim je ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila žuta čvrsta masa. Ova čvrsta masa je otopljena u etil acetatu (30 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.200 g, kat). Zatim je, preko balona, uveden vodik i reakcijska mješavina je miješana tijekom 24 h. Reakcijska smjesa je filtrirana preko celita, uz ispiranje sa EtOAc, nakon čega slijedi koncentriranje in vacuo, da bi se dobilo 1.69 g (8.61 mmol, 84%) spoja 20A, u obliku bijele čvrste mase. 2-dimenzionalni NOE eksperimenti su potvrdili da strukturna oznaka pripada spoju 20A.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (20B)

Otopina spoja 20A (603 mg, 3.21 mmol), 5-amino-2-cijanobenzotrifluorida (640 mg, 3.44 mmol) i TsOH (10 mg, kat.) u toluenu (5 mL) je zagrijavana u zapečaćenoj epruveti, tijekom 2 dana. Reakcijska smjesa je ohlađena do sobne temperature, a zatim ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksanima, dobiveno je 400 mg (1.10 mmol, 34%) spoja 20B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.04 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 382.2 [M+NH4]+.

Primjer 21

(3aα,4β,7β,7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]tio]fenil]acetamid (21E)

[image]

A. 5-metil-2-furanetanol (21A)

[image]

Otopina n-BuLi (83.0 mL, 133 mmol, 1.6 M u heksanima) je dodana izmješanoj otopini 2-metilfurana (10.0 mL, 111 mmol) u THF (85 mL), na 0°C, pod inertnom atmosferom. Reakcijska mješavina je miješana tijekom 4 h, na sobnoj temperaturi, a zatim je ohlađena do 0°C. Dodat je, kap po kap, etilen oksid (8.30 mL, 166 mmol), a reakcijska mješavina je ostavljena da se zagrije do sobne temperature preko noći. Poslije gašenja zasićenim vodenim NH4Cl, nastali slojevi su izdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahiran sa Et2O (2 X 250 mL). Sjedinjeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Destilacijom pod atmosferskim pritiskom (170-185°C) dobijen je 10.1 g (80.3 mmol, 72%) spoja 21A, u obliku svijetlo žutog ulja.

B. 2-(2-bromoetil)-5-metilfuran (21B)

[image]

Ph3Br2 (3.68 g, 8.72 mmol) je dodat otopini spoja 21A (1.00 g, 7.93 mmol) u DMF (8 mL) i reakcijska mješavina je miješana na sobnoj temperaturi tijekom 1 h. Reakcijska mješavina je dodata u H2O i ekstrahirana je sa EtOAc (3 X). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa H2O (2 X), sušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% EtOAc/heksanima, dobiveno je 0.507 g (2.68 mmol, 34%) spoja 21B.

C. N-[4-[[2-(5-metil-2-furanil)etil]tio]fenil]acetamid (21C)

[image]

Otopini 4-acetamidotiofenola (442 mg, 2.64 mmol) u THF (1 mL), na 0°C, pod inertnom atmosferom, je dodata otopina n-BuLi (2.00 mL, 3.17 mmol, 1.6 M u heksanima) u THF (1 mL). Reakcijska otopina je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 10 minuta, a zatim je dodata otopina spoja 21B (500 mg, 2.64 mmol) u THF (3 mL). Kada je polazni materijal potrošen (što je utvrđeno pomoću TLC-a), reakcija je ugašena sa H2O, mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (2X), sušena preko Na2SO4 i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksanima dobiveno je 0.644 g (2.34 mmol, 88%) spoja 21C. MS (ESI): m/z 276.09 [M+H]+.

D. (3aα,4β,7β,7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,3,3a,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]tio] fenil]acetamid (21D)

[image]

Otopina spoja 21C (195 mg, 0.708 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (377 mg, 1.416 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) u CH2Cl2 (1.5 mL) je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom dva dana. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se proizveo spoj 21D, kao što je utvrđeno pomoću NMR analize. Spoj 21D je u idućem koraku korišten izravno, bez pročišćavanja.

E. (3aα,4β,7β,7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]okta-hidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]tio]fenil]acetamid (21E)

Otopina sirovog spoja 21D (0.708 mmol) i 10% Pd/C (200 mg) u MeOH (20 mL) je miješana pod atmosferom vodika, preko noći. Pročišćavanjem reverzno faznom HPLC [34.4 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 20 x 250 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 30 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 10 mL/min, praćenje na 220 nm)], a zatim flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 1% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 29 mg (0.053 mmol, 7.5%) spoja 21E, u obliku žutog praška. HPLC: 99% na 3.44 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 544.01 [M+H]+.

Primjer 22

(3aα,4β,7β,7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]sulfinil]fenil]acetamid (22)

[image]

mCPBA (12 mg, 0.050 mmol) je dodavan, dio po dio, otopini sirovog spoja 21E (65 mg, 0.12 mmol) u CH2Cl2 (6 mL), dok polazni materijal nije potrošen. Pročišćavanjem reverzno faznom HPLC [30.5 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 30 x 250 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 30 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 25 mL/min, praćenje na 220 nm)] dobiveno je 27.5 mg (0.0491 mmol, 41%) spoja 22, u obliku žutosmeđe čvrste mase (~1:1 mješavina dijastereomera). HPLC: 96% na 2.88 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 559.97 [M+H]+.

Primjer 23

(3aα,4β,7β,7aα)-N-[4-[[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]sulfonil]fenil]acetamid (23)

[image]

mCPBA (26 mg, 0.11 mmol) je dodata otopini spoja 21E (19 mg, 0.035 mmol) u CH2Cl2 (6 mL), a reakcijska mješavina je miješana na rt dok polazni materijal i intermedijer sulfoksid (spoj 22) nisu potrošeni, što je očigledno prema TLC. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC [53.3 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 30 x 250 mm, 0-70% vodeni metanol, tijekom 45 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 25 mL/min, praćenje na 220 nm)] dobiveno je 8.0 mg (0.014 mmol, 40%) spoja 23, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.94 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 575.95 [M+H]+.

Primjer 24

(3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-N-[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il] etil]benzensulfonamid (24Ci i 24Cii, pojedinačno)

[image]

A. 5-metil-2-furanetanol 4-metilbenzensulfonat (24A)

[image]

4-metilbenzensulfonil klorid (907 mg, 4.76 mmol) je dodat otopini spoja 21A (500 mg, 3.96 mmol) u 6 mL suhog piridina. Reakcija je miješana na sobnoj temperaturi tijekom 4 h, a zatim je ugašena ledom. Reakcijska smjesa je ekstrahirana sa CH2Cl2, a sjedinjeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim natrij bikarbonatom i vodom, osušeni i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 900 mg (81%) spoja 24A, u obliku žutog ulja.

B. N-[2-(5-metil-2-furanil)etil]benzensulfonamid (24B)

[image]

Benzensulfonamid (157 mg, 1.00 mmol) je dodat 10%-tnoj vodenoj otopini natrij hidroksida (0.40 mL, 1.0 mmol). Zatim je dodata otopina spoja 24A (280 mg, 1.00 mmol) u acetonu (1 mL). Reakcijska smjesa je zagrijavana na 90°C, tijekom 8 h, a zatim je ohlađena do sobne temperature. Dodat je led i mješavina je ekstrahirana sa CH2Cl2. Sjedinjeni organski slojevi su isprani vodom, osušeni i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa CH2Cl2, dobiveno je 60 mg (0.23 mmol, 23%) spoja 24B, u obliku žutog ulja.

C. (3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-N-[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]benzensulfonamid (24Ci i 24Cii, pojedinačno)

4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (129 mg, 0.485 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) je dodat otopini spoja 24B (60 mg, 0.23 mmol) u CH2Cl2 (2 mL). Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 2 dana, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom i pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 70% EtOAc/heksanima, da bi se dobilo 20 mg (0.038 mmol, 16%) nezasićenog Diels-Alder proizvoda. Nezasićeni proizvod (20 mg) je odmah otopljen u etanolu (2 mL) i dodat je 10% Pd/C (10 mg, kat.). Otopina je miješan na sobnoj temperaturi preko noći, pod atmosferom vodika. Mješavina je filtrirana, a filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC dobiveno je 7.0 mg (0.013 mmol, 34%) spoja 24Ci i 2.0 mg (0.0037 mmol, 10%) spoja 24Cii. Spoj 24Ci: HPLC: 96% na 3.17 min (retencijsko vrijeme) (YMC ODSA S5 C18 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 533.99 [M+H]+. Spoj 24Cii: HPLC: 99% na 38.95 min (retencijsko vrijeme) (YMC ODS S5 20X250 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 533.99 [M+H]+.

Primjer 25

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (25B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-4-[1,3,3a,4,7,7a-heksa-hidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (25CAi i 25Aii, pojedinačno)

[image]

Otopina spoja 21A (252 mg, 2.00 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (798 mg, 3.00 mmol) u CH2Cl2 (10 mL) je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 2 dana. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 65% EtOAc/heksanima, dobiveno je 217 mg čistog spoja 25Ai, 73 mg čistog spoja 25Aii i 310 mg smjese spoja 25Ai i 25Aii. Sve tri frakcije su izolirane u obliku bijelih čvrsth masa, sa ukupnim izoliranim prinosom od 600 mg (1.53 mmol, 76.5%). Spoj 25Ai: HPLC: 90% na 2.56 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Spoj 25Aii: HPLC: 90% na 2.56 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (25B)

Otopina spoja 25Ai (0.20 g, 0.51 mmol) i 10% Pd/C (43 mg, kat.) u EtOH (12 mL) je miješana pod atmosferom vodika, na sobnoj temperaturi, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je filtrirana preko celita i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 0.20 g (0.51 mmol, 100%) spoja 25B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95% na 2.59 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 394.97 [M+H]+.

Primjer 26

(3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-N-[4-[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il] etoksi]fenil]acetamid (26Ci i 26Cii, pojedinačno)

[image]

A. 2-[4-[2-(5-metil-2-furanil)etoksi]fenil]acetamid (26A)

[image]

Trifenilfosfin (681 mg, 2.60 mmol) je dodat otopini spoja 21A (252 mg, 2.00 mmol) i 4-acetamidofenola (302 mg, 2.00 mmol) u CH2Cl2 (4 mL). Dodat je THF (5 mL) da bi reakcijska smjesa postala homogena, a zatim je mješavina ohlađena do 0°C. DEAD (0.41 mL, 2.6 mmol) je dodat, kap po kap, i reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, preko noći, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 60% EtOAc/heksanima, a, zatim, podvrgavanjem reverzno faznoj preparativnoj HPLC, dobiveno je 270 mg (1.04 mmol, 52%) spoja 26A, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. MS (ESI): m/z 260.09 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-N-[4-[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]-1,2,3,3a,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etoksi]fenil]acetamid (26Bi i 26Bii, pojedinačno)

[image]

Otopina spoja 26A (40 mg, 0.15 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (88 mg, 0.31 mmol) u CH2Cl2 (2 mL) je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 2 dana. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 75% EtOAc/heksanima, dobiveno je 55 mg (0.105 mmol, 68%) 5:1 mješavine spoja 26Bi i 26Bii, u obliku bijele čvrste mase, koja je korištena izravno u idućem koraku. HPLC: 90% na 3.28 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-N-[4-[2-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etoksi]fenil]acetamid (26Ci i 26Cii, pojedinačno)

Otopina mješavine spoja 26Bi i 26Bii (55 mg, 0.105 mmol) i 10% Pd/C (12 mg, kat.) u EtOH (3 mL) je miješana pod atmosferom vodika, na sobnoj temperaturi, preko noći. Reakcijska smjesa je filtrirana preko celita i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 50 mg sirovog proizvoda. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 70% EtOAc/heksanima, dobiveno je 18 mg (0.034 mmol, 32%) spoja 26Ci [HPLC: 96% na 3.33 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 528.01 [M+H]+]; i 2.3 mg (0.0044 mmol, 4%) 85:15 mješavine spoja 26Cii i spoja 26Ci, pojedinačno, kao što je utvrđeno prema 1H NMR. HPLC: 90% na 3.35 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 528.12 [M+H]+.

Primjer 27

(3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-2-(2-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (27D)

[image]

A. (endo,endo)-7-oksabiciklo[2.2.1]hept-5-en-2,3-dikarboksilna kiselina (27A)

[image]

Spojevi 27A, 27B i 27C su sintetizirani u skladu sa pristupima, opisanim u Sprague et al. J. Med. Chem. 28, 1580-1590 (1985). Mješavina furana (100 mL, 1.38 mol) i maleinske kiseline (160 g, 1.38 mol) u H2O (340 mL) je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 5 dana. Smjesa je stavljena u lijevak za odvajanje i vodeni sloj je odvojen od sloja, koji sadrži furan, koji nije reagirao. Vodeni sloj je obrađen ugljenom, filtriran kroz celit i stavljen u frižider. Željeni proizvod, iskristaliziran iz otopine nakon cijepljenja, filtriran je, ispran hladnom vodom i osušen preko P2O5, da bi se dobilo 70 g (0.38 mol, 28%) spoja 27A, u obliku bijele čvrste mase.

B. (endo,endo)-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilna kiselina (27B)

[image]

Otopini spoja 27A (69.0 g, 0.375 mol) u EtOH (700 mL) dodat je 10% Pd/C (4.5 g, kat.) i smjesa je mućkana pod atmosferom vodika od 55 psi, dok prihvaćanje plina nije završeno. Mješavina je filtrirana preko celita i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobilo 66.0 g (0.355 mol, 95%) spoja 27B, u obliku bijele čvrste mase.

C. (3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (27C)

[image]

Otopina spoja 27B (66.0 g, 355 mol) u acetil kloridu (300 mL) je podvrgnuta refluksu tijekom 1 h. Reakcijska otopina je ukoncentrirana in vacuo, a nastali ostatak je rekristaliziran iz benzena, da bi se dobilo 49.2 g (0.292 mol, 82%) spoja 27C, u obliku bijele čvrste mase (>99% endo prema 1H NMR).

D. (3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-2-(2-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (27D)

Spoj 27C (45 mg, 0.30 mmol) je sjedinjen sa 2-aminonaftalenom (47 mg, 0.33 mmol) u octenoj kiselini (1 mL) i zagrijavano na 115°C, preko noći. Pošto je reakcijska mješavina ohlađena do rt, dodata je kap vode, a nastali precipitat je filtriran. Materijal je ispran metanolom i osušen, da bi se dobilo 65.7 mg (0.224 mmol, 74.7%) spoja 27D, u obliku bijele, kristalne čvrste mase. HPLC: 99% na 2.68 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 294.0 [M+H]+.

Primjer 28

(1aα,2β, 2aα,5aα,6β,6aα)-heksahidro-4-(2-naftalenil)-2,6-epoksi-3H-oksireno[f]izoindol-3,5(4H)-dion (28B)

[image]

A. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-tetrahidro-2,6-epoksioksireno[f]izo-benzofuran-3,5(2aH,5aH)-dion (28A)

[image]

Kao što je opisano u Yur’ev et al. J. Gen. Chem. U.S.S.R. (Engl. Transl.) 31, 772-775 (1961), otopina egzo-7-oksabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilnog anhidrida (5.00 g, 30.1 mmol), mravlje kiseline (10 mL) i vodik peroksida (6 mL) je miješana na sobnoj temperaturi. Poslije 30 min, reakcijska mješavina je stavljena u ledenu kupelj (reakcija je postala egzotermna, uz istovremeno razvijanje plina) i ostavljena je da se polako zagrije do sobne temperature. Poslije miješanja preko noći, stvoreni precipitat je sakupljen filtracijom, ispran glacijalnom octenom kiselinom i osušen da bi se dobilo 3.02 g bijelog praška. Sirova čvrsta masa je kuhana u acetil kloridu (100 mL) tijekom 10 sati, a mješavina je ukoncentrirana do ~20 mL, pod smanjenim pritiskom. Nastali precipitat je filtriran, ispran dioksanima i osušen, da bi se dobilo 2.37 g (13.0 mmol, 43%) spoja 28A, u obliku bijelog praška.

B. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-heksahidro-4-(2-naftalenil)-2,6-epoksi-3H-oksireno[f]izoindol-3,5(4H)-dion (28B)

Spoj 28A (100 mg, 0.520 mmol) je sjedinjen sa 2-aminonaftalenom (62.1 mg, 0.434 mmol) u octenoj kiselini (2 mL) i zagrijavano na 115°C, preko noći. Pošto je reakcija ostavljena da se ohladi do rt, dodata je voda, a nastali precipitat je filtriran. Materijal je uzastopno ispran vodenim K2CO3 i vodom, a zatim je osušen u vakuumskoj sušnici, da bi se dobilo 113.7 mg (0.371 mmol, 85.5%) spoja 28B, u obliku zatvoreno bijele, kristalne čvrste mase. HPLC: 99% na 1.76 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 308.0 [M+H]+.

Primjer 29

(3aα,4α,7α,7aα)-2-[4-bromo-3-(trifluorometil)fenil]-3a,4,7,7a-tetrahidro-4,7-dimetil-4,7-epitio-1H-izoindol-1,3(2H)-dion 8-oksid (29)

[image]

2,5-dimetiltiofen (0.048 mL, 0.42 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (0.290 g, 0.625 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) su otopljeni u CH2Cl2 (8.0 mL) i ohlađeni do -20°C. polako je dodat BF3•Et2O (0.412 mL, 3.36 mmol), a zatim je uslijedilo dodavanje mCPBA (~50%, 0.29 g, 0.84 mmol). Poslije 2 h na -20°C, reakcijska smjesa je ulivena u zasićeni vodeni NaHCO3 i ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 20 mL), a organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog Na2SO4. Sirovi proizvod je pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 5%-10%-20% EtOAc u CH2Cl2, da bi se dobilo 0.119 g (0.265 mmol, 63%) spoja 29, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 91% na 3.303 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 480.2 [M+H]+.

Primjer 30

(3aα,4α,7α,7aα)-2-[4-bromo-3-(trifluorometil)fenil]-3a,4,7,7a-tetrahidro-4,7-epitio-1H-izoindol-1,3(2H)-dion 8-oksid (30)

[image]

Tiofen (0.375 mL, 4.69 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (0.100 g, 0.313 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) su otopljeni u CH2Cl2 (50 mL), dodata je mCPBA (~50%, 1.62 g, 4.69 mmol), a nastala mješavina je miješanaa na 25°C, tijekom 3 h. Zatim je dodat trifenilfosfin (2.0 g). Poslije 15 min, isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a stvoreni ostatak je otopljen u CH2Cl2 (200 mL) i ispran zasićenim vodenim NaHCO3 (3 x 50 mL) i osušen preko Na2SO4. Sirovi materijal je, zatim, pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 1%-3%-5% metanolom u CH2Cl2, da bi se dobilo 0.059 g (0.14 mmol, 45%) spoja 30, u obliku bijelog praška. NMR i LC analiza je pokazala postojanje jednog dijastereomera. HPLC: 100% na 3.437 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 443.2 [M+H]+.

Primjer 31

(3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-imino-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (31D)

[image]

A. 2,3-dimetil 7-(1,1-dimetiletil) ester 7-azabiciklo[2.2.1]hepta-2,5-dien-2,3,7-trikarboksilne kiseline (31A)

[image]

Svježe destilirani dimetil ester acetilendikarboksilne kiseline (6.7 mL, 54 mmol) i N-(terc-butiloksikarbonil)-1H-pirol (9.0 mL, 54 mmol) su sjedinjeni i grijani na 120°C, tijekom 3 h. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/CH2Cl2, dobiveno je 8.3 g (27 mmol, 50%) spoja 31A, u obliku žute čvrste mase.

B. 7-(1,1-dimetiletil) ester (egzo,endo)-7-azabiciklo[2.2.1]hepta-2,5-dien-2,3,7-trikarboksilne kiseline (31B)

[image]

Spoj 31A (1.0 g, 3.5 mmol) je otopljen u MeOH (2.0 mL) i dodat je vodeni KOH (1 g u 5 mL H2O). Reakcijska mješavina je zagrijavana na 50°C, tijekom 1 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena do 25°C, dodat je Pd/C (0.5 g, kat.) i reakcijska mješavina je stavljena u Parr-ov aparat, tijekom 14 h na 25°C. Reakcijska smjesa je zatim filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa vodom. Vodeni otopina je zakiseljen do pH 2, dodavanjem 1N HCl, a zatim je ekstrahiran sa EtOAc (2 x 100 mL). Koncentriranjem organskih dijelova dobiven je spoj 31B, u obliku blijedo žute čvrste mase.

C. 1,1-dimetiletil ester (3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-1,3-diokso-4,7-iminoizobenzofuran-8-karboksilne kiseline (31C)

[image]

Sirov spoj 31B je zagrijavan do 120°C in vacuo u komori za sublimaciju, što dovodi do sublimacije 0.051 g (0.19 mmol, 5.4%) spoja 31C, u obliku bijele čvrste mase, koja je izravno sakupljena i korištena u slijedećem koraku bez daljeg pročišćavanja.

D. (3aα,4α,7α,7aα)-heksahidro-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-imino-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (31D)

Spoj 31C (0.050 g, 0.19 mmol) i 1-amino-3-(trifluorometil)benzen (0.030 g, 0.19 mmol) su otopljeni u AcOH (2.5 mL) i zagrijavani na 115°C, tijekom 4.5 h. Reakcija je ugašena dodatkom zasićenog vodenog NaHCO3, a mješavina je ekstrahirana metilen kloridom (3 x 15 mL). Sirovi materijal je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC, da bi se dobilo 0.030 g (0.097 mmol, 51%) spoja 31D, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.33 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 311.15 [M+H]+.

Primjer 32

(3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-3a,4,7,7a-tetrahidro-4,7-dimetil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (32i i 32ii, pojedinačno)

[image]

Svježe destilirani 2,5-dimetilfuran (0.32 mL, 2.6 mmol) je otopljen u CH2Cl2 (2.0 mL) i dodat 1-[3-(trifluorometil)fenil]-1H-pirol-2,5-dion (0.5 g, 2.5 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 16 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 0.5% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 250 mg (0.741 mmol, 30%) spoja 32i, i 50 mg (0.15 mmol, 6%) spoja 32ii, u obliku bijelih čvrstih masa. Spoj 32i: HPLC: 98% na 3.080 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 338.30 [M+H]+. Spoj 32ii: HPLC: 92% na 3.047 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 338.15 [M+H]+.

Primjer 33

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (33)

[image]

Spoj 32i (0.080 g, 0.24 mmol) je otopljen u EtOAc (2 mL) i EtOH (1 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.050 g, kat.). Zatim je preko balona uveden vodik i reakcijska smjesa je miješana tijekom 24 h. Mješavina je filtrirana preko celita, isprana sa EtOAc i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobilo 0.075 g (0.22 mmol, 93%) spoja 33, u obliku bijele čvrste mase. Nije potrebno dalje pročišćavanje. HPLC: 90% na 3.233 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 340.40 [M+H]+.

Primjer 34

(3aα,4β,7β,7aα)-tetrahidro-5-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-eteno-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3,6(2H,5H)-trion (34B)

[image]

A. 4,5,7,7a-tetrahidro-5-metil-4,7-etenofuro[3,4-c]piridin-1,3,6(3aH)-trion (34A)

[image]

Spoj 34A je sintetiziran prema modifikaciji postupaka, opisanih u Tomisawa et al. Heterocycles 6, 1765-1766 (1977) & Tetrahedron Lett. 29, 2465-2468 (1969). Maleinski anhidrid (2.00 g, 20.4 mmol) i 1-metil-2-piridon (2.22 g, 20.4 mmol) su suspendirani u 30 mL bezvodnog toluena. Reakcijska posuda je opremljena Dean Stark-ovim zaliskom i podvrgnut je refluksu tijekom 48 sati. Tamno obojena otopina je ostavljena da se ohladi do rt, a zatim su isparljivi dijelovi uklonjeni in vacuo. Stvorena smeđa pasta (4 g) je otopljena u 10 mL ključalog toluena, a vruća otopina je filtriran pod tijekom dušika, kako bi se uklonile čestice. Stajanjem na 25°C, željeni proizvod je istaložen iz otopine. Čvrsta masa je izdvojena filtracijom i isprana hladnim toluenom, da bi se dobilo 1.0 g (4.8 mmol, 24%) spoja 34A, koji je korišten bez daljeg pročišćavanja.

B. (3aα,4α,7α,7aα)-tetrahidro-5-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-eteno-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1,3,6(2H,5H)-trion (34B)

1-amino-4-nitronaftalen (0.094 g, 0.50 mmol) i spoj 34A (0.130 g, 0.627 mmol) su otopljeni u AcOH (2.0 mL) i grijani na 110°C, tijekom 11 h. Reakcijska mješavina je zatim ohlađena do 25°C, ulivena u hladni zasićeni vodeni K2CO3 i snažno miješana tijekom 10 minuta. Otopina je filtrirana i isprana vodom. Stvoreni filtrat je ukoncentriran in vacuo i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 4:6 EtOAc/heksanima, da bi se dobilo 0.172 g (0.456 mmol, 91%) spoja 34B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 92% na 2.472 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378.29 [M+H]+.

Primjer 35

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-(4-fluorofenoksi)etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (35)

[image]

DEAD (0.060 mL, 0.38 mmol) je dodat otopini trifenilfosfina (100 mg, 0.38 mmol) u THF (1.3 mL), na sobnoj temperaturi, pod inertnom atmosferom. Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je, odjednom 4-fluorofenil (43 mg, 0.380 mmol). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 5 minuta, dodat je spoj 25B (100 mg, 0.254 mmol), a miješanje je nastavljeno tijekom 3.5 h. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksanima, a zatim podvrgavanjem reverzno faznoj preparativnoj HPLC [11.93 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 20 x 100 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm)], dobiveno je 72 mg (58%) spoja 35, u obliku čvrste mase. HPLC: 99% na 3.74 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 487.1 [M-H]-.

Primjer 36

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-(2-bromoetil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (36)

[image]

Otopina spoja 25B (495 mg, 1.26 mmol) i piridina (100 μL, 1.26 mmol) u CH2Cl2 (2 mL) je dodata otopini Ph3PBr2 (636 mg, 1.51 mmol) u CH2Cl2 (2 mL), na 0°C. Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 3 h, a zatim je otapalo uklonjeno pod smanjenim pritiskom. Nastali ostatak je ispran 2X sa 10 mL dijelom EtOAc-heksana (6:4), a sjedinjeni isprani dijelovi su pročišćeni flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 60% EtOAc/heksanom, da bi se dobilo 390 mg (0.853 mmol, 67.7%) spoja 36, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.51 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 456.7 [M-H]-.

Primjer 37

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(3-metil-4-nitrofenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (37)

[image]

Kombinacija 4-nitro-3-metilanilina (0.050 g, 0.33 mmol), spoja 20A (0.083 g, 0.43 mmol), TEA (0.2 mL), MgSO4 (0.075 g) i toluena (0.8 mL) je sjedinjena u zapečaćenoj epruveti i mješavina je zagrijavana na 120°C, tijekom 14 h. Poslije hlađenja do 25°C, reakcijska smjesa je filtrirana, isprana sa CH2Cl2 i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod je pročišćen preparativnom TLC, na SiO2, uz eluaciju sa CH2Cl2, da bi se dobilo 0.075 g (0.23 mmol, 69%) spoja 37, u obliku blijedo žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.733 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm; 10-90% MeOH/H2O gradijent,+0.1% TFA; 4 mL/min, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 348.2 [M+NH4]+.

Primjeri 38 do 121

Dodatni spojevi ovog izuma pripremljeni su postupcima, koji su analogni, onima koji su prethodno opisani. Spojevi iz Primjera 38 do 121 imaju slijedeću strukturu (L je veza):

[image]

gdje su G, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i korištena procedura, navedeni u Tablici 2. Kromatografske tehnike, korištene za određivanje retencijskih vremena spoja iz Tablice 2, su slijedeće: LCMS=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Kada je data, molekulska masa spojeva navedenih u Tablici 2, određena je pomoću MS (ES), prema formuli m/z.

Tablica 2

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

Primjeri 122 do 164

Slijedeći spojevi ovog izuma su proizvedeni postupcima koji su analogni onima, opisanim gore. Za spojeve Primjera 122 do 164, Tablica 3 daje nazive spoja i strukturu, retencijsko vrijeme, kao i broj Primjera za postupak na kojem je izrada u Tablici 3 zasnovana. Kromatografske tehnike koje su korištene za određivanje retencijskih vremena spojeva u Tablici 3 su, kao što slijedi:

LCMS = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, eluiranje sa 10-90% MeOH/H2O sa 0.1% TFA, tijekom 4 minute; 4 mL/min, praćenje na 220 nm.

LC = YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, eluiranje sa 10-90% MeOH/H2O sa 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm.

Tablica 3

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

Primjeri 165 do 203

Dodatni spojevi ovog izuma su proizvedeni i, opisani su dalje ispod u Tablici 4. Tablica 4 objašnjava naziv spoja i strukturu, kao i broj Primjera procedure na kojoj je izrada u Tablici 4 zasnovana, za spojeve Primjera 165 do 203.

Tablica 4

[image] [image] [image] [image] [image] [image]

Primjer 204

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (204D/25B)

[image]

A. 2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-5-metilfuran (204A)

[image]

Otopini spoja 21A (2.00 g, 15.9 mmol) u DMF-u (50 mL) je dodat imidazol (1.62 g, 23.9 mmol), a nakon toga terc-butildimetilsili klorid (2.63 g, 17.5 mmol). Poslije 2 h na 25°C, reakcijska smjesa je ulivena u dietil eter (300 mL), isprana je vodom (1 x 100 mL), 1N HCl (1 x 100 mL), vodom (1 x 100 mL) i slanom otopinom (1 x 50 mL) i osušena preko bezvodnog MgSO4. Sirov spoj 204A je analiziran posredstvom LCMS i NMR i utvrđeno je da je dovoljno čisto biti izravno preneseno u naredni korak. HPLC: 100% na 4.347 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju, tijekom 4 minute, sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]-oksi]etil]heksahidro-7-metil-4,7-epoksi-1H-izobenzofuran-1,3(2H)-dion (204B)

[image]

Spoj 204A (4.0 g, 18.9 mmol) i maleinski anhidrid (1.42 g, 14.5 mmol) su otopljeni u dikloroetanu (10 mL) i miješani na 25°C, tijekom 60 sati. Isparljivi dijelovi su, zatim, uklonjeni in vacuo, a nastalo narančasto ulje je otopljeno u apsolutnom etanolu (50 mL) i dodat je 10% Pd/C (1.00 g, kat.). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 3 h, reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc i ukoncentrirana je in vacuo. Sirovi anhidrid je pročišćen brzom flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa aceton/kloroformom (0 – 2 – 4% aceton), da bi se dobilo 1.30 g (3.82 mmol, 20%) spoja 204B, u obliku bistrog ulja, pored 3.00 g (12.5 mmol, 66%) polaznog spoja 204A. Opis pomoću proton NMR spektroskopije pokazao je jedino egzo izomer. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ=3.83 (2H, t, J=6.0 Hz), 3.22 (1H, d, J=8.2 Hz), 3.06 (1H, d, J=8.2 Hz), 1.70 – 2.25 (6H, m), 1.55 (3H, s), 0.82 (9H, s), 0.00 (6H, s).

C. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]-oksi]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil) benzonitril (204C)

[image]

Spoj 204B (0.250 g, 0.734 mmol) i 4-amino-2-trifluorometil-benzonitril (0.124 g, 0.668 mmol) su suspendirani u suhom toluenu (2.0 mL), u zapečaćenoj epruveti. Zatim su dodati MgSO4 (0.200 g) i trietilamin (0.5 mL), a epruvete su zapečaćene i stavljene u uljanu kupelj na 125°C. Poslije 40 h, reakcijska mješavina je ohlađena do 25°C, filtrirana i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom, na SiO2, uz eluaciju sa CH2Cl2, da bi se dobilo 0.111 g (0.281 mmol, 30%) spoja 204C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 92% na 4.203 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 531.1 [M+Na]+.

D. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (204D)

Spoj 204C (0.031 g, 0.061 mmol) je otopljen u THF (0.5 mL) i prenesen u propilenski kontejner, nakon čega je uslijedilo hlađenje do 0°C. Zatim je dodat HF•piridin (~47% HF, 0.1 mL). Poslije 15 minuta, reakcija je završena, što je utvrđeno posredstvom LC, i ulivena u hladni zasićeni vodeni NaHCO3. Mješavina je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 10 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 1N HCl (1 x 20 mL) i osušeni preko bezvodnog Na2SO4. Spoj 204D je izdvojeno u obliku žutog ulja i upoređeno sa materijalom, pripremljenim u Primjeru 25. Nije bilo potrebno pročišćavanje.

Primjer 205

(3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-(fenilmetil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (205Ci i 205Cii, pojedinačno)

[image]

A. 2-metil-5-(fenilmetil)-furan (205A)

[image]

n-BuLi (1.8 mL, 4.51 mmol, 2.5 M u heksanu) je dodat otopini 2-metilfurana (0.37 mL, 4.10 mmol) u bezvodnom THF (3 mL), na -25°C. Nastala otopina je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 3 h, a zatim je ohlađena do -15°C. Dodat je benzil bromid (0.59 mL, 4.92 mmol), koji je propušten kroz podlogu od aluminij oksida, a otopina je zagrijana do rt i miješana preko noći. Dodata je zasićena otopina NH4Cl (5 mL) i smjesa je miješana tijekom 1 h. Reakcijska mješavina je, zatim, ekstrahirana eterom (2 x 5 mL), a sjedinjeni organski ekstrakti su osušeni i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa heksanima, dobiveno je 323 mg (1.88 mmol, 46%) spoja 205A, u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 95% na 3.72 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm) i oko 400 mg mješavine proizvoda i benzil bromida (~2:1 prema HPLC).

B. (3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-(fenilmetil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (205Bi i 205Bii, pojedinačno)

[image]

Otopina spoja 205A (124 mg, 0.72 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (290 mg, 1.09 mmol) u CH2Cl2 (2 mL) je miješana na sobnoj temperaturi. Poslije 4 dana, reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa CH2Cl2, dobiveno je 62 mg (0.14 mmol, 20%) mješavine spoja 205Bi i spoja 205Bii, u obliku bijele čvrste mase, koja je korištena izravno u idućem koraku. HPLC: 93% na 3.69 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm)

C. (3aα,4β,7β,7aα)- i (3aα,4α,7α,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-(fenilmetil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (205Ci i 205Cii, pojedinačno)

Otopina mješavine spoja 205Bi i 205Bii (62 mg, 0.14 mmol) i 10% Pd/C (12 mg, kat.) u EtOH (3.5 mL) je miješana pod atmosferom vodika, na sobnoj temperaturi, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 35% EtOAc/heksanima, dobiveno je 22 mg (0.05 mmol, 35%) spoja 205Ci i 12 mg (0.027 mmol, 19%) spoja 205Cii. Spoj 205Ci: HPLC: 98% na 3.75 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 458.2 [M+NH4]+. Spoj 205Cii: HPLC: 97% na 3.78 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 473.45 [M+CH3OH]+.

Primjer 206

(3aα,4β,7β,7aα)-2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso- 4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril (206)

[image]

Otopina spoja 36 (34 mg, 0.074 mmol) i NaCN (24 mg, 0.49 mmol) u DMSO (1 mL) je zagrijavana na 100°C, tijekom 0.5 h. Poslije hlađenja, reakcijska mješavina je ulivena u H2O (5 mL), a vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc (2 x 5 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa H2O (2 x 5 mL), osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksanima, a zatim podvrgavanjem reverzno faznoj preparativnoj HPLC [30.41 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 30 X 250 mm, 10-90% vodeni metanol, u toku 30 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 25 mL/min, praćenje na 220 nm)] dobiveno je 6.6 mg (0.016 mmol, 22%) spoja 206, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.89 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 402.1 [M-H]-.

Primjer 207

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-7-[2-(4-morfolinil)etil]-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril, trifluoroacetat (1:1) (207)

[image]

Otopina spoja 36 (15.6 mg, 0.0341 mmol) i morfolina (6.0 μL, 0.068 mmol) u toluenu (1 mL) je zagrijavana na 100°C, tijekom noći. Po hlađenju, reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 10% MeOH/CH2Cl2, a zatim podvrgavanjem reverzno faznoj preparativnoj HPLC [23.96 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 30 x 250 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 30 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 25 mL/min, praćenje na 220 nm)] dobiveno je 8.7 mg (0.015 mmol, 44%) spoja 207 (TFA so), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.02 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 464.3 [M+H]+.

Primjer 208

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-fluoro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (208C)

[image]

A. 1-fluoro-5-nitronaftalen (208A)

[image]

Otopini 6N HCl (12 mL) je dodato 1.47 g (7.83 mmol) fino praškastog 5-nitro-1-naftilamina, kao što je opisano u J. Chem. Soc. 1187 (1949). Mješavina je ohlađena do 0°C, a hladna otopina NaNO2 (547 mg, 7.93 mmol) u 2 mL H2O je dodavana polako, tako da je temperatura držana blizu 0°C. Po završetku dodavanja, reakcijska smjesa je miješana tijekom 30 minuta i filtrirana. Filtrat je ohlađen do 0°C i obrađen hladnom 4.5 M otopinom NaBF4 (5 mL), da bi se izvela kompletna precipitacija diazonij borofluoroida. Smjesa je čuvana na 0°C, tijekom 30 minuta prije nego što je filtrirana, a precipitati su isprani hladnim 4.5 M otopinom NaBF4 (5 mL), ledeno hladnim etanolom (10 mL) i Et2O (20 mL). Dobijeni čvrsti dijelovi su sušeni na zraku, da bi se dobilo 1.74 g (77%) odgovarajuće diazonij soli.

U 1.70 g (5.92 mmol) gornjeg diazonij borofluorida, dodato je 5 g peska i komponente su u potpunosti izmješane. Reakcijska mješavina je pažljivo zagrijavana, pod smanjenim pritiskom, dok ne nastupi razgradnja. Prema kraju reakcije, tikvica je dalje zagrijavana tijekom 30 minuta na 130°C, da bi se osigurala kompletna konverzija. Po hlađenju, reakcijska mješavina je otopljena u acetonu, a sadržaji su preapsorbirani na silika gel. Pročišćavanje je izvedeno flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju sa 0 do 10% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo 449 mg (2.35 mmol, 40%) spoja 208A, u obliku bijele čvrste mase.

B. 1-amino-5-fluoronaftalen (208B)

[image]

Otopina spoja 208A (62 mg, 0.32 mmol) u 1 mL EtOH, koji sadrži 0.1 mL 12 N HCl, je zagrijavana do refluksa. Dodavano je, u malim porcijama, usitnjeno željezo (62 mg, 1.11 mmol), i zagrijavanje je nastavljeno tijekom 2 h. Smjesa je ohlađena i neutralizirana sa 1N otopinom NaOH, a vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2. Sjedinjene organske faze su osušene preko MgSO4 i ukoncentrirane in vacuo, da bi se dobio ostatak, koji je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40 do 80% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo 42 mg (0.26 mmol, 80%) spoja 208B, u obliku žute čvrste mase.

C. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-fluoro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (208C)

Spoj 208B (42 mg, 0.26 mmol), spoj 20A (54 mg, 0.27 mmol), MgSO4 (69 mg, 0.58 mmol) i trietilamin (191 μL, 1.37 mmol) su pokupljeni u 2 mL toluena i stavljeni u zapečaćenu epruvetu. Zapečaćena epruveta je zagrijavana na 135°C, tijekom 14 h. Ohlađena reakcijska mješavina je filtrirana kroz kratki sloj celita, uz eluaciju sa CH2Cl2, a otapalo je odstranjeno pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min) da bi se dobilo 15 mg (0.044 mmol, 17%) spoja 208C, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 16% na 2.96 min & 77% na 3.06 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 340.2 [M+H]+.

Primjer 209

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-fluoro-4-nitro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (209C)

[image]

A. N-(5-fluoro-1-naftalenil)acetamid (209A)

[image]

Otopina od 141 mg (0.74 mmol) spoja 208A u 2 mL AcOH je zagrijavana do refluksa i obrađena malim porcijama praška željeza (118 mg, 2.11 mmol). Mješavina je držana pod refluksom tijekom 15 minuta prije nego što je dodato 73 μL (0.78 mmol) Ac2O. Poslije dodatnih 15 minuta pod refluksom, mješavina je ohlađena i filtrirana, uz eluaciju sa CH2Cl2. Filtrat je, zatim, ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, a ostatak je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20 do 50% EtOAc, da bi se dobilo 145 mg (0.71 mmol, 97%) spoja 209A, u obliku bijele čvrste mase.

B. 1-amino-5-fluoro-4-nitronaftalen (209B)

[image]

Spoj 209A (133 mg, 0.645 mmol) je otopljen u 1 mL AcOH, a nastala otopina je ohlađena do 10°C. Na ovoj temperaturi, dodato je 80.0 μL (2.00 mmol) crvene dimeće HNO3 i miješanje je nastavljeno tijekom 15 minuta prije nego što je reakcija ugašena dodatkom izlomljenog leda. Vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2, a sjedinjene organske faze su osušene iznad MgSO4 i ukoncentrirane in vacuo. Nastali ostatak je otopljen u 3 mL EtOH, zagrijan do refluksa i obrađen sa 0.5 mL 40% vodene otopine NaOH. Miješanje je nastavljeno tijekom 15 minuta, prije nego što je reakcija ohlađena i razrijeđena sa H2O. Vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2, a sjedinjene organske faze su osušene preko MgSO4 i ukoncentrirane in vacuo. Nastali ostatak je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40 do 70% EtOAc u heksanu, da bi se dobilo 36 mg (0.17 mmol, 27%) spoja 209B, u obliku žute čvrste mase.

C. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-fluoro-4-nitro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (209C)

Spoj 209B (36 mg, 0.18 mmol) je, u zapečaćenoj epruveti, reagirao sa spojem 20A (38 mg, 0.19 mmol), MgSO4 (46 mg, 0.39 mmol) i Et3N (128 μL, 0.920 mmol) u 250 μL toluena, u skladu sa gornjim postupkom, opisanim u primjeru 208C, da bi se dobio, po pročišćavanju reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min), 27 mg (0.070 mmol, 39%) spoj 209C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 8% na 2.88 min & 84% na 3.06 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 402.0 [M+H]+.

Primjer 210

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(1,1-dioksidobenzo[b]tiofen-3-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (210)

[image]

mCPBA (160 mg, 0.641 mmol, 70% čistoća) je dodata otopini spoja 134 (70.0 mg, 0.214 mmol) u CH2Cl2 (2 mL), na rt. Pošto je polazni materijal potrošen, reakcija je ugašena zasićenim NaHCO3 i ekstrahirana sa CH2Cl2. Organski sloj je ispran sa 1N NaOH, osušen iznad Na2SO4 i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 63.9 mg (0.178 mmol, 83%) spoja 210, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.81 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 360.0 [M+H]+.

Primjer 211

4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,6,7-trimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (211)

[image]

2,4,5-trimetil oksazol (0.48 mL, 4.14 mmol) je otopljen u toluenu (2.0 mL) i dodat je 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluoro-metilbenzonitril (1.00 g, 3.76 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 75°C, pod dušikom, tijekom 2.5 sati. Otopina je ohlađena do sobne temperature, a stvoreni talog je filtriran i ispran toluenom, da bi se dobilo 0.51 g (35%) spoja 211, u obliku svijetlo sive čvrste mase. NMR analiza je pokazala da je spoj 211 bilo jedan izomer (egzo/endo), međutim identitet izomera nije mogao biti određen NMR analizom. HPLC: 100% na 2.85 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378.42 [M+H]+.

Primjer 212

(3aα,4β,7β,7aα)-tetrahidro-4,7-dimetil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3,5(2H,4H)-trion & (3aα,4α,7α,7aα)-tetrahidro-4,7-dimetil-2-[3-(trifluorometil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3,5(2H,4H)-trion (212i & 212ii, pojedinačno)

[image]

2,2-dimetil-3(H)-furanon (0.500 g, 4.46 mmol) i 1-[3-(trifluorometil)fenil]-1H-pirol-2,5-dion (1.07 g, 4.46 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 1B) su suspendirani u toluenu (20 mL), u zapečaćenoj epruveti. Smjesa je grijana na 110°C tijekom 4 h, a zatim je ohlađena do 25°C, poslije čega je slijedilo koncentriranje in vacuo. Nastali ostatak je pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa metilen kloridom, da bi se dobilo 0.411 g (26%) spoja 212i, u obliku bijele čvrste mase, i 0.193 g (12%) spoja 212ii, u obliku bijele čvrste mase. Strukturne karakteristike su potvrđene 1-D NOE proton NMR eksperimentima. Spoj 212i: HPLC: 100% na 2.817 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 376.0 [M+Na]+. Spoj 212ii: HPLC: 100% na 3.013 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 354.02 [M+H]+.

Primjer 213

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-kloro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (213B)

[image]

A. 1-amino-5-kloronaftalen (213A)

[image]

Otopini 1.74 g (6.06 mmol) diazonij borofluorida (opisanog u Primjeru 208A) u acetonu (7 mL) dodato je 693 mg (7.00 mmol) CuCl u malim porcijama. Pošto je prestalo razvijanje dušika, uklonjen je aceton, pod smanjenim pritiskom, a ostatak je pokupljen u CH2Cl2 (30 mL). Organska faza je isprana sa H2O (30 mL), osušena preko MgSO4, ukoncentrirana in vacuo i konačno pročišćena flash kromatografijom (silika gel, EtOAc u heksanu 0 do 15%), da bi se dobilo 754 mg (70%) 1-kloro-5-nitronaftalena.

Prethodno sintetizirani 1-kloro-5-nitronaftalen (540 mg, 2.6 mmol) je otopljen u 10 mL AcOH, a nakon toga je obrađen sa 415 mg (7.43 mmol) praha željeza i kasnije acilovan sa Ac2O (0.26 mL, 2.73 mmol), u skladu sa postupkom, opisanim u Primjeru 209A, da bi se dobilo 543 mg (95%) 1-acetamino-5-kloronaftalena.

Otopina gore sintetiziranog 1-acetamino-5-kloronaftalena (52 mg, 0.24 mmol) u 3 mL EtOH je zagrijavana do refluksa i obrađena sa 0.5 mL 40% vodenog otopine NaOH. Smjesa je podvrgnuta refluksu, sve dok se polazni materijal nije više mogao detektirati, ohlađena je i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pokupljen u CH2Cl2 (50 mL) i ispran sa H2O (25 mL). Organski sloj je sušen preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo 41 mg (98%) spoja 213A, u obliku bijele čvrste mase.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-kloro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (213B)

Spoj 213A (24 mg, 0.14 mmol) je reagirao, u zapečaćenoj epruveti, sa spojem 20A (29 mg, 0.15 mmol), MgSO4 (36 mg, 0.30 mmol) i Et3N (100 μL, 0.710 mmol) u 250 μL toluena, u skladu sa postupkom, opisanim u primjeru 208C, da bi se dobilo, poslije pročišćavanja reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min) 27 mg (40%) spoja 213B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 1.82 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 TurboPack kolona 4.6 x 33 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 356.4 [M+H]+.

Primjer 214

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-kloro-4-nitro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (214B)

[image]

A. 1-amino-5-kloro-4-nitronaftalen (214A)

[image]

1-acetamino-5-kloronaftalen (150 mg, 0.68 mmol, pripremljen kao što je opisano u Primjeru 213A) je otopljen u 1 mL AcOH i obrađen je sa 82 μL crvene dimeće HNO3, a zatim je deaciliran sa 1 mL 40% vodene otopine NaOH u 3 mL EtOH, u skladu sa postpkom, opisanim u Primjeru 209A, da bi se dobilo 49 mg (32%) spoja 214A, u obliku žute čvrste mase.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(5-kloro-4-nitro-1-naftalenil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (214B)

Spoj 214A (27 mg, 0.12 mmol) je, u zapečaćenoj epruveti, reagirao sa spojem 20A (26 mg, 0.13 mmol), MgSO4 (32 mg, 0.27 mmol) i Et3N (88 μL, 0.63 mmol) u 250 μL toluena, u skladu sa postupkom, opisanim u primjeru 208C, da bi se dobilo, po pročišćavanju reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS kolona 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min) 22 mg (45%) spoja 214B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 24% na 3.06 min & 76% na 3.25 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 418.0 [M+NH4]+.

Primjer 215

(3aα,4β,7β,7aα)-4-etilheksahidro-7-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (215B)

[image]

A.(3aα,4β,7β,7aα)-4-etilheksahidro-7-metil-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (215A)

[image]

2-etil-5-metilfuran (1.89 mL, 15.3 mmol) je otopljen u metilen kloridu (10 mL) i dodat je maleinski anhidrid (1.00 g, 10.2 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 18 h, a zatim je ukoncentrirana in vacuo. Stvoreni sirovi bicikl je otopljen u EtOAc (50 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.40 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 4 h, reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je sirovo spoj 215A (1.93 g), u obliku bijele čvrste mase. Ovaj materijal je preuzet izravno u slijedećoj reakciji, bez pročišćavanja.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-etilheksahidro-7-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (215B)

Spoj 215A (0.168 g, 0.798 mmol) i 1-amino-4-nitronaftalen (0.10 g, 0.53 mmol) su suspendirani u toluenu (0.8 mL) i dodati su TEA (0.2 mL) i magnezij sulfat (0.1 g). Smjesa je grijana na 135°C, u zapečaćenoj epruveti, tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena do rt i filtrirana, uz ispiranje sa kloroformom. Koncentriranjem je dobijen sirovi proizvod, koji je pročišćen preparativnom TLC, na SiO2, uz eluaciju sa metilen kloridom. Ovim je dobiveno 0.077 g (0.20 mmol, 38%) spoja 215B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 3.260 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.05 [M+H]+.

Primjer 216

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-N-(4-fluorofenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-acetamid (216B)

[image]

A. N-(4-fluorofenil)-5-metil-2-furanacetamid (216A)

[image]

5-metil-2-furanoctena kiselina (1.00 g, 7.14 mmol, sintetizirana kao što opisuje WO 9507893, Primjer 19) je otopljena u CH3CN/DMF (4:1, 25 mL), a zatim su dodati 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilkarbodiimid (1.37 g, 7.14 mmol) i 1-hidroksi-7-azabenzotriazol (0.972 g, 7.14 mmol), a poslije toga 4-fluoroanilin (0.676 mL, 7.14 mmol). Poslije 3 h, reakcijska mješavina je razrijeđena sa EtOAc (150 mL), isprana sa 1N HCl (1 x 30 mL), zasićenim vodenim NaHCO3 (1 x 30 mL) i slanom otopinom (1 x 40 mL) i osušena preko natrij sulfata. Spoj 216A (1.58 g, 95%) je izolirano u obliku žute pjene, nakon koncentriranja in vacuo. Dalje pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 78% na 2.647 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-N-(4-fluorofenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-acetamid (216B)

Spoj 216A (0.200 g, 0.858 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (0.164 g, 0.616 mmol) su otopljeni u benzenu i zagrijavani na 60°C, tijekom 14 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena i ukoncentrirana in vacuo. Stvoreno narančasto ulje je otopljeno u EtOAc (15 mL) i dodat je Pd/C (0.050 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 3 h, reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc, i ukoncentrirana je in vacuo. Nastali sirovi materijal je pročišćen preparativnom TLC, na siliki, uz eluaciju sa 5% acetonom u metilen kloridu, da bi se dobilo 0.166 g (54%) spoja 216B, u obliku bijele čvrste mase. NMR spektroskopija je pokazala samo jedan izomer, za koji je utvrđeno, NOE eksperimentima, da je egzo. HPLC: 95% na 3.200 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 484.0 [M+H]+.

Primjer 217

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4-metil-2-(2-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, enantiomer, koji se brže eluira & (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4-metil-2-(2-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, enantiomer, koji se sporije eluira (217i & 217ii, pojedinačno)

[image]

Racemski spoj 137 je odvojen na pojedinačne antipode kiralnom reverzno faznom tekućinskom kromatografijom. Korištena je Ckiralpak AD-R kolona (4.6 x 250 mm), uz eluaciju sa 70% acetonitril/30% voda, pri 1 mL/min. Korištena je UV detekcija na 220 nm. Analitičkom kiralnom reverzno faznom kromatografijom je utvrđeno da je izomer, koji se brže eluira, spoj 217i (retencijsko vrijeme = 15.66 min) bio 99.9% ee, a da je izomer, koji se sporije eluira, spoj 217ii (retencijsko vrijeme = 15.66 min) bio 99.6% ee.

Primjer 218

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(4-fluorofenil)metil]metilamino]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (218B)

[image]

A. (4-fluorobenzil)metilamin i bis(4-fluorobenzil)metilamin (218A i 218A’)

[image]

Spojevi 218A i 218A’ su izrađeni u skladu sa postupkom, koji su opisali Singer i sar. J. Med. Chem. 29, 40-44 (1986). 4-fluorobenzil bromid (189 mg, 1.00 mmol) je podvrgnut refluksu u otopini etanola (1.5 mL) i metilamina (5 mL, 2M otopina u MeOH), tijekom 3 h. Dodata je dodatna porcija metilamina (2 mL) i mješavina je podvrgnuta refluksu tijekom dodatnih sat vremena. Otopina je ohlađen i ukoncentriran in vacuo, a ostatak je otopljen u mješavini 2N HCl (3 mL) i etera (1.5 mL). Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran dodatnom porcijom etera. Vodena otopina je smrznuta do 0°C, titrirana sa NaOH, do pH 11, i ekstrahirana sa CH2Cl2. Ekstrakti su sušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo 120 mg 2.5:1 mješavine spoja 218A i spoja 218A’. Sirova smjesa je je preuzeta bez daljeg pročišćavanja.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(4-fluorofenil)metil]-metilamino]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil) benzonitril (218B)

Otopina spoja 36 (34.3 mg, 0.075 mmol) i spoja 218A i 218A’ (21 mg, ~0.088 mmol (218A)) u toluenu (0.4 mL) je zagrijavana na 100°C, preko noći. Reakcijska smjesa je ohlađena do sobne temperature, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 25% aceton/75% CH2Cl2, dobiveno je 30 mg (0.058 mmol, 78%) spoja 218B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 2.46 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 516.26 [M+H]+.

Primjer 219

(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,5,6,7-teterametil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (219D)

[image]

A. 2,3,4,5-teterametilfuran (219A)

[image]

Spoj 219A je izrađen u skladu sa postupcima, koji su opisani u Hancock et al. J. Org. Chem. 42, 1850-1856 (1977) & Amarnath et al. J. Org. Chem., 60, 301-307 (1995). 2-propanon (100 mL, 1.1 mol) je podvrgnut refluksu preko PbO2 (26.7 g, 0.112 mol) tijekom 28 h. Po hlađenju do rt, reakcijska smjesa je filtrirana, a ostatak je ispran acetonom. Filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, da bi se uklonio aceton, a zatim je destiliran na 20 Tora. Frakcije koje su prelazile između 100-120°C sakupljene su, da bi se dobilo 6.75 g (42.5%) 3,4-dimetilheksan-2,5-diona, u obliku svijetlo žutog ulja.

Otopina 3,4-dimetilheksan-2,5-diona (3.00 g, 21.1 mmol) i p-toluensulfonske kiseline (401 mg, 2.11 mmol) u benzenu (30 mL) je zagrijavana do refluksa u Dean-Stark trapu, preko noći. Reakcijska smjesa je destilirana na atmosferskom pritisku, da bi se uklonio višak benzena. Preostala mješavina je prenesena u manju tikvicu i destilirana je na atmosferskom pritisku. Frakcije, koje su prelazile između 80-100°C, sakupljene su, da bi se dobilo 509 mg (19%) spoja 219A, u obliku svijetlo žutog ulja.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-etil-3a,4,7,7a-teterahidro-4,5,6,7-teterametil-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (219B)

[image]

Otopina spoja 219A (400 mg, 3.22 mmol) i maleinskog anhidrida (442 mg, 4.51 mmol) u Et2O (1.5 mL) je miješana na rt, preko noći. Reakcijska smjesa je, zatim, stavljena u zamrzivač, tijekom 5 dana, nakon kojeg vremena su stvoreni kristali sakupljeni i osušeni da bi se dobilo 0.26 g (37%) spoja 219A, u obliku žutosmeđih kristala. Sirov spoj 219B je prenesen u idući korak bez daljeg pročišćavanja.

C. (3aα,4β,5α,6α,7β,7aα)-4-etilheksahidro-4,5,6,7-teterametil-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (219C)

[image]

Otopina spoja 219B (120 mg, 0.545 mmol) i 10% Pd/C (24 mg, kat.) u EtOAc (2 mL) je miješana pod balonom vodika, na sobnoj temperaturi, preko noći. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 100 mg (0.446 mmol, 82%) spoja 219C, u obliku bijele čvrste mase, koja je prenesena bez daljeg pročišćavanja.

D. (3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,5,6,7-teterametil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (219D)

Otopina spoja 219C (44.4 mg, 0.2 mmol), 5-amino-2-cijanobenzotrifluorida (45 mg, 0.24 mmol), TEA 90.04 mL) i MgSO4 (20 mg) u toluenu (0.2 mL) je zagrijavana na 135°C, preko noći. Reakcijska smjesa je ohlađena do sobne temperature i filtrirana, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40% EtOAc/heksanima, nakon čega je slijedilo ispiranje stvorene čvrste mase sa MeOH, dobiveno je 17 mg (0.043 mmol, 22%) spoja 219D, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 90% na 3.11 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 391.2 [M-H]-.

Primjer 220

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluorometil)fenoksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril, antipod koji se brže eluira & (3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluorometil)fenoksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril, enantiomer koji se sporije eluira (220i & 220ii, pojedinačno)

[image]

Racemski spoj 35 je odvojen na pojedinačne antipode kiralnom tekućinskom kromatografijom normalne faze. Korištena je Ckiralpak AD kolona (50 x 500 mm), uz eluaciju sa 85% heksani/7.5% metanol/7.5% etanol, pri 50 mL/min. Korištena je UV detekcija na 220 nm. Analitičkom kiralnom kromatografijom normalne faze utvrđeno je da izomer, koji se brže eluira, spoj 220i (retencijsko vrijeme = 55.86 min) ima 95.89% ee ([α]D25 = -53.02°, C = 3.134 mg/cc u CH2Cl2) a da je izomer, koji se sporije eluira, spoj 220ii (retencijsko vrijeme = 62.86 min) bio 86% ee ([α]D25 = +48.74°, C = 2.242 mg/cc u CH2Cl2).

Primjer 221

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (221B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (221Ai) & (3aα,4α,7α,7aα)-4-(heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (221Aii)

[image]

Otopina 2,5-dimetilfurana (0.800 mL, 7.51 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (sintetiziranog kao što je opisano u Primjeru 1B, koristeći 4-cijano-3-trifluorometilanilin umjesto 4-bromo-3-metilanilina) (1.00 g, 3.75 mmol) u benzenu (4 mL) je zagrijavana na 60°C, preko noći. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom i stavljena na pumpu visokog vakuuma, dok ulje nije očvrslo, kako bi se dobila 3:1 mješavina (određeno pomoću LC i NMR) spoja 221Ai & spoja 221Aii, pojedinačno, u obliku smeđe čvrste mase, koja u idućem koraku upotrijebljena izravno, bez daljeg pročišćavanja.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (221B)

BH3•THF (3.75 mL, 3.75 mmol, 1M u THF) je dodat otopini sirovih spojeva 221Ai & 221Aii (3.75 mmol) u THF (12.5 mL), na 0°C. Pošto je polazni materijal potrošen, reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Stvoreni ostatak je, zatim, otopljen u toluenu (12.5 mL), dodat je Me3NO (845 mg, 11.2 mmol) i mješavina je zagrijavana do refluksa tijekom noći. Reakcijska mješavina je zatim, ohlađena do rt, dodata je u H2O i ekstrahirana je sa EtOAc (3X). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 75% EtOAc/heksani, dobiveno je 0.354 g (25%) spoja 221B, u obliku žutosmeđeg praška. HPLC: 90% na 2.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+.

Primjer 222

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (222D)

[image]

A. 3-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]-2,5-dimetilfuran (222A)

[image]

2,5-dimetil-3(3H)-furanon (2.00 g, 17.8 mmol) je otopljen u metilen kloridu (180 mL). Dodata je TEA (7.43 mL, 53.5 mmol), a zatim TBSOTf (4.92 mL, 21.4 mmol), na 25°C. Poslije 1 h, reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo, a stvorena žitka masa je puštena kroz kolonu od silika gela, koja je kondicionirana sa 3% TEA u heksanima. Proizvod je eluiran sa 3% TEA/heksani, da bi se dobilo 3.6 g (89%) spoja 222A, u obliku narančastog ulja, koje je korišteno izravno u kasnijim reakcijama.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (222B)

[image]

4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (1.00 g, 3.85 mmol) je otopljen u benzenu (5.0 mL) i dodat je spoj 222A (1.30 g, 5.77 mmol). Reakcijska smjesa je zagrijana do 60°C tijekom 2 h, a zatim je ohlađena do 25°C. Otopina je, zatim, ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio spoj 222B, u obliku žutog ulja, koje je preneseno u sledeću reakciju bez pročišćavanja. HPLC: 60% na 4.013 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil) benzonitril (222C)

[image]

Sirov spoj 222B (3.85 mmol) je otopljen u etil acetatu (75 mL) i dodat je 10% Pd/C (1.20 g). Zatim je uveden, preko balona, vodik. Poslije 24 h, reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa etil acetatom, i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobilo žuto ulje. Sirovi proizvod je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa metilen klorid/acetonom (0% - 1% - 2% aceton), da bi se dobilo 0.710 g (35%) spoja 222C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 4.160 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 517.6 [M+Na]+.

D. (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (222D)

Spoj 222C (0.040 g, 0.081 mmol) je otopljen u THF (1.0 mL) i dodat je HF•piridin (0.5 mL). Poslije 2 h, reakcijska smjesa je pažljivo ulivena u hladni zasićeni vodeni NaHCO3. Mješavina je, zatim, ekstrahirana metilen kloridom (3 x 10 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su isprani sa 1N HCl (1 x 10 mL) i osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.031 g (10%) spoja 222D, u obliku žute čvrste mase. NOE eksperimenti su potvrdili naznačeni izomer. HPLC: 99% na 2.777 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 403.06 [M+Na]+.

Primjer 223

2-[(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil ester (αR)-α-metoksibenzenoctene kiseline (223C)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (223A)

[image]

Otopina 4-amino-1-naftalenkarbonitrila (19.2 g, 114 mmol) i maleinskog anhidrida (14.0 g, 113 mmol) u AcOH (230 mL) je grijana na 115°C, tijekom 12 h. Po hlađenju do rt, reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, a zatim je razrijeđena sa CH2Cl2 (2.5 L). Organski sloj je ispran 3X sa H2O (3L), 1X sa zasićenim vodenim Na2CO3 (1L) i 1X slanom otopinom (1L), osušen je preko MgSO4 i ukoncentriran do ~200 mL, pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na kationskoj izmenjivačkoj smoli (60 g, CUBX13M6 od United Chemical Technologies), uz eluaciju sa CH2Cl2, dobiveno je 25.0 g (88%) 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-naftalenkarbonitrila, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 96% na 2.48 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 249.25 [M+H]+.

4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitril (1.00 g, 4.03 mmol) je suspendiran u benzenu (6.0 mL) u zapečaćenoj epruveti, i dodat je spoj 204A (1.11 g, 5.24 mmol). Reakcijska mješavina je zagrijavana na 60°C tijekom 16 h, a zatim je ohlađena do 25°C. Benzen je odstranjen in vacuo, da bi se dobila žuta čvrsta masa. Čvrsta masa je otopljena u etil acetatu (40 mL) i dodat je Pd/C (10% Pd, 0.300 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 4 h, reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa etil acetatom. Koncentriranjem in vacuo dobijena je blijedo žuta čvrsta masa, koja je pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa aceton/kloroformom (0% - 1.5% - 3% aceton) da bi se dobilo 1.53 g (77%) spoja 223A, u obliku žute pene. HPLC: 86% na 4.173 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (223B)

[image]

Spoj 223A (1.37 g, 2.97 mmol) je otopljen u THF (8.0 mL), prenesen u spolipropilensku bocu i ohlađen do 0°C. Zatim je dodat HF•piridin (2.0 mL). Poslije 20 minuta, reakcijska smjesa je pažljivo ulivena u hladni zasićeni vodeni natrij bikarbonat i ekstrahirana je metilen kloridom (3 x 30 mL). Organski dijelovi su, zatim, isprani sa 1N HCl i sušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.99 g (89%) spoja 223B, u obliku žute pjene, koji nije dalje pročišćavan. HPLC: 96% na 2.443 i 2.597 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 399.02 [M+Na]+.

C. 2-[(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil ester (αR)-α-metoksibenzenoctene kiseline (223C)

Spoj 223B (0.200 g, 0.575 mmol) je dodat otopini WSDCC (0.138 g, 0.719 mmol) i (R)-bademove kiseline (0.096 g, 0.57 mmol) u diklorometanu (6.0 mL). Zatim je dodat 4-DMAP (0.005 g) i reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 4 h. Mješavina je, zatim, razrijeđena diklorometanom, isprana 1N HCl (2 x 10 mL), a zatim natrij bikarbonatom (1 x 10 mL) i osušena preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.220 g (71%) spoja 223C, u obliku žute čvrste mase, koja nije dalje pročišćavana. HPLC: 100% na 3.283 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 547.26 [M+Na]+.

Primjer 224

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(metiltio)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)benzonitril (224)

[image]

4-amino-2-(metiltio)benzonitril (100 mg, 0.609 mmol, sintetiziran kao što je opisano u EP 40931 A1) je reagirao, u zapečaćenoj epruveti, sa spojem 20A (131 mg, 0.668 mmol), MgSO4 (161 mg, 1.34 mmol) i Et3N (0.440 mL, 3.17 mmol) u 0.50 mL toluena, u skladu sa postupkom, opisanim u Primjeru 208C, da bi se dobilo, nakon pročišćavanja reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min), 137 mg (0.400 mmol, 66%) spoja 224, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.73 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 401.0 [M-H+OAc]-.

Primjer 225

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(metilsulfinil)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)benzonitril (225)

[image]

Ledeno hladnoj suspenziji spoja 224 (30 mg, 0.088 mmol) u 2 mL H2O/MeOH (1:1) odjednom je dodat okson (80 mg, 0.26 mmol), u čvrstom obliku. Stvorena mješavina je miješana tijekom 4 h, na 0°C, prije nego što je razrijeđena sa H2O (10 mL) i ekstrahirana sa CH2Cl2 (2 x 20 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobio ostatak, koji je pročišćen filtriranjem materijala kroz kratku podlogu od silika gela, uz eluaciju sa CH2Cl2, da bi se dobilo 32 mg (0.088 mmol, 100%) spoja 225, u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 99% na 2.01 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 376.0 [M+NH4]+.

Primjer 226

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(metilsulfonil)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)benzonitril (226)

[image]

Otopini spoja 225 (48 mg, 0.14 mmol) u CH2Cl2 (2 mL) odjednom je dodata mCPBA (145 mg, 50% mješavina, 0.420 mmol) u čvrstom stanju. Nastala mješavina je ostavljena da se zagrije do sobne temperature i miješana je tijekom 60 h, poslije kojeg vremena se polazni materijal više nije mogao dokazati posredstvom HPLC. Reakcija je ugašena dodatkom zasićene otopine NaHCO3 (5 mL), izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2 (20 mL). Sjedinjene organske faze su osušene preko MgSO4 i ukoncentrirane in vacuo. Preostali ostatak je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min), da bi se dobilo 48 mg (0.13 mmol, 92%) spoja 226, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.07 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 392.0 [M+NH4]+.

Primjer 227

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]heksahidro-5-hidroksi-4-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (227B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-3a,4,7,7a-teterahidro-7-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (227A)

[image]

Otopina spoja 204A (455 mg, 1.89 mmol) i 1-[4-nitronaftalen]- 1H-pirol-2,5-diona (254 mg, 0.947 mmol, pripremljen kao što je opisano za 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitril, Primjer 223A) u benzenu (2 mL) je zagrijavana na 60°C, preko noći. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo sirov spoj 227A, u obliku smeđe čvrste mase, koja je, u idućem koraku, korištena izravno, bez daljeg pročišćavanja.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil] heksahidro-5-hidroksi-4-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (227B)

BH3•THF (0.95 mL, 0.95 mmol, 1M u THF) je dodat otopini sirovog spoja 227A (0.48 g, 0.95 mmol) u THF (2 mL), na 0°C. Pošto je spoj 227A potrošen, što je dokazano posredstvom HPLC, reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Stvoreni ostatak je, zatim, otopljen u toluenu (2 mL), dodat je Me3NO (71.0 mg, 2.84 mmol) i mješavina je zagrijavana do refluksa preko noći. Reakcijska mješavina je zatim, ohlađena do rt, dodata je u H2O i ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 75% EtOAc/heksanima, dobiveno je 130 mg (26%) spoja 227B, u obliku smeđe čvrste mase. HPLC: 94% na 3.92 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 527.5 [M+H]+.

Primjer 228

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-heksahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-1,3(2H)-dion (228)

[image]

Mješavina TBAF (0.3 mL, 0.3 mmol, 1 M otopina u THF) i HF (0.3 mL, 50% u H2O) u CH3CN (6 mL) je dodata otopini spoja 227 (104 mg, 0.197 mmol) u THF (2 mL), na 0°C. Reakcijska smjesa je miješana preko noći, na rt. Pošto je polazni materijal potrošen, a što je dokazano posredstvom TLC, dodati su H2O i EtOAc i izdvojeni su slojevi. Vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc (1X), a sjedinjeni organski slojevi su isprani sa H2O (1X) i slanim otopinom (1X), osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 5% MeOH/CH2Cl2, dobijen je 61 mg (75%) spoja 228, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 2.47 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 411.2 [M-H]-.

Primjer 229

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-7-[2-(4-fluorofenoksi)etil]heksahidro-5-hidroksi-4-metil-2-(4-nitro-1-naftalenil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (229)

[image]

DBAD (37.7 mg, 0.164 mmol) je dodat otopini PPh3 (43.0 mg, 0.164 mmol) u THF (1 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-fluorofenol (18.3 mg, 0.164 mmol) i reakcijska mješavina je miješana tijekom daljih 5 minuta. Dodata je otopina spoja 228 (45.0 mg, 0.109 mmol) u THF (1 mL) i smjesa je miješana na rt tijekom noći. HPLC je pokazala da sirova reakcijska smjesa najvećim dijelom sadrži polazni diol (spoj 228), tako da je ova smjesa dodata preformuliranoj mješavini, kao prije, od PPh3 (86 mg), DBAD (75.4 mg) i fenola (36.6 mg) u THF (4 mL), na rt. Miješanje je nastavljeno, dok sva količina spoja 228 nije potrošena. Reakcijska mješavina je, zatim, ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC [15.2 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS A kolona 20 x 100 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm)] dobiveno je 25.0 mg (45%) spoja 229, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 99% na 3.53 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 505.2 [M-H]-.

Primjer 230

(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & (3aα,4β,5α,6α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (230Bi & 230Bii, pojedinačno)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (230A)

[image]

2,5-dimetil furan (1.23 mL, 11.5 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (2.00 g, 7.69 mmol) su otopljeni u benzenu (10 mL) i zagrijavani na 60°C, tijekom 18 h. Isparljivi organski dijelovi su, zatim, odstranjeni in vacuo. Stvoren sirov spoj 230A je prenesen bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 71% na 3.007 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril &

(3aα,4β,5α,6α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (230Bi & 230Bii)

Spoj 230A (0.100 g, 0.281 mmol) je otopljen u acetonu i dodat je N-metilmorfolin-N-oksid (50% vodeni otopina, 0.10 mL, 0.42 mmol). Zatim je dodat OsO4 (4% vodeni otopina, 0.014 mmol). Poslije 3 h na 25°C, reakcija je završena i dodat je, uz snažno miješanje, natrij sulfit (0.250 g). Poslije 15 minuta, dodata je slana otopina (10 mL) i otopina je ekstrahirana sa EtOAc (3 x 15 mL). Organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog natrij sulfata, a zatim ukoncentrirani in vacuo. Sirova diol mješavina je pročišćena preparativnom TLC, uz eluaciju sa 18% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.038 g (34%) spoja 230Bi (beta oblik) i 0.012 g (11%) spoja 230Bii (alfa oblik), u obliku blijedo žutih čvrstih materija. Spoj 230Bi: HPLC: 100% na 2.567 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 397.08 [M+H]+. Spoj 230Bii: HPLC: 100% na 2.417 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 397.08 [M+H]+.

Primjer 231

(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5,6-dihidroksi-4-(hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (231C)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (231A)

[image]

Spoj 204A (29.0 g, 120 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitril (20.0 g, 80.6 mmol) su suspendirani u benzenu (80 mL) i zagrijavani na 60°C, tijekom 14 h. Mješavina je, potom, ukoncentrirana in vacuo, na 40°C, tijekom 40 minuta. Stvorena žitka masa je ohlađena do 25°C, a zatim je suspendirana u MeOH (200 mL) i miješana na rt, tijekom 30 minuta. Otopina je zatim, ohlađena do 0°C, tijekom 30 minuta, a onda, filtrirana, uz ispiranje sa hladnim MeOH. Nastala čvrsta masa je osušena in vacuo, da bi se dobilo 26.1 g (55%) sirovog spoja 231A, u obliku bijele čvrste mase. Metanolna otopina je ukoncentrirana in vacuo, resuspendirana u MeOH (50 mL) i ohlađena do -20°C, tijekom 4 h. Otopina je, zatim, filtrirana, uz ispiranje sa hladnim MeOH. Stvorena čvrsta faza je osušena in vacuo, da bi se dobilo 3.8 g (10%) spoja 231A, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95% na 4.227 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] etil]oktahidro-5,6-dihidroksi-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (231B)

[image]

Spoj 231A (0.400 g, 0.851 mmol) je otopljen u acetonu (9.0 mL) i dodat je N-metilmorfolin-N-oksid (50% vodeni otopina, 0.150 mL, 1.28 mmol). Zatim je dodat OsO4 (4% vodena otopina, 0.043 mmol). Poslije 3 h na 25°C, reakcija je završena i dodat je, uz snažno miješanje, natrij sulfit (1.0 g). Nakon 15 minuta, dodata je slana otopina (30 mL) i otopina je ekstrahirana sa EtOAc (3 x 50 mL). Organski dijelovi su sušeni preko bezvodnog natrij sulfata, a zatim ukoncentrirani in vacuo. Sirovi diol je pročišćen flash kromatografijom na siliki, uz eluaciju sa 5-25% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.355 g (80%) spoja 231B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 93% na 3.903 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 522.00 [M+H]+.

C. (3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5,6-dihidroksi-4-(hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (231C)

Spoj 231B (0.400 g, 0.766 mmol) je otopljen u THF (5.0 mL), prenesen u spolipropilensku bocu i ohlađen do 0°C. Zatim je dodat HF•piridin (1.0 mL). Poslije 20 minuta, reakcijska mješavina je pažljivo ulivena u hladni zasićeni vodeni natrij bikarbonat i ekstrahirana je metilen kloridom (3 x 30 mL). Organski dijelovi su isprani jednom sa 1N HCl i osušeni su preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.290 g (93%) spoja 231C (0.290 g), u obliku žute pjene, koja nije dalje pročišćavana. HPLC: 92% na 2.273 i 2.423 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 409.10 [M+H]+.

Primjer 232

(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5,6-dihidroksi-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluorometil)fenoksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril, (232C)

[image]

A. 2-metil-5-[2-[4-(trifluorometil)fenoksi]etil]furan (232A)

[image]

Otopini trifenilfosfina (1.56 g, 5.95 mmol) u THF (40 mL) je dodat DBAD (1.37 g, 5.95 mmol). Poslije 10 minuta, dodat je trifluorometilfenol (0.964 g, 5.95 mmol). Nakon dodatnih 10 minuta, dodat je spoj 21A (0.500 g, 3.97 mmol). Poslije 14 h na 25°C, reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena flash kromatografijom na siliki, uz eluaciju sa kloroformom, da bi se dobilo 0.713 g (44%) spoja 232A, u obliku bistrog ulja.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluorometil)fenoksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (232B)

[image]

Spoj 232A (0.301 g, 1.15 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (0.220 g, 0.846 mmol) su suspendirani u benzenu (1.5 mL) i zagrijavani na 60°C tijekom 14 h. Mješavina je, zatim ukoncentrirana in vacuo, na 40°C, tijekom 40 minuta. Sirovi proizvod je pročišćen flash kromatografijom na siliki, uz eluaciju sa 10 – 0% heksanima u metilen kloridu, da bi se dobilo 0.199 g (44%) spoja 232B, u obliku žute čvrste mase. Spoj 232B je opisan, prema NOE eksperimentima, kao egzo dijastereomer. HPLC: 94% na 3.993 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5,6-dihidroksi-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[4-(trifluorometil)fenoksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril, (232C)

Spoj 232B (0.075 g, 0.14 mmol) je otopljen u acetonu (2.0 mL) i dodat je N-metilmorfolin-N-oksid (50% vodeni otopina, 0.025 mL, 0.21 mmol). Zatim je dodat OsO4 (4% vodeni otopina, 0.007 mmol). Poslije 3 h na 25°C, reakcija je završena i dodat je, uz snažno miješanje, natrij sulfit (0.25 g). Poslije 15 minuta, dodana je slana otopina (5 mL) i otopina je ekstrahirana sa EtOAc (3 x 10 mL). Organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog natrij sulfata, a zatim ukoncentrirani in vacuo. Sirovi diol je pročišćen preparativnom TLC na silika gelu, uz eluaciju sa 10% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.038 g (48%) spoja 232C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 98% na 3.747 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 593.08 [M+Na]+.

Primjer 233

(3aα,4β,5β,5aβ,8aβ,8bα)-4-(dekahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,8a-epoksi-2H-furo[3,2-e]izoindol-2-il)-1-naftalenkarbonitril, (233)

[image]

Otopini trifenilfosfina (0.072 g, 0.28 mmol) u THF (3.0 mL) je dodat DBAD (0.063 g, 0.28 mmol). Poslije 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (0.033 g, 0.28 mmol). Poslije dodatnih 10 minuta, dodat je spoj 231C (0.075 g, 0.18 mmol). Nakon 3 h na 25°C, reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena preparativnom TLC na silika gelu, uz eluaciju sa 15% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.068 g (95%) spoja 233, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95% na 2.430 i 2.560 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 391.09 [M+H]+.

Primjer 234

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-octena kiselina, (234B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-1,2,3,3a,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-octena kiselina (234A)

[image]

5-metil-2-furanoctena kiselina (0.500 g, 3.57 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitril (0.899 g, 3.57 mmol) su otopljeni u benzenu (3.0 mL) i zagrijavani na 60°C tijekom 2 h, a zatim su ohlađeni do 25°C. Poslije 12 h, bijela čvrsta masa, istaložena iz otopine, sakupljena je i isprana dietil eterom, da bi se dobilo 1.20 g (87%) spoja 234A, u obliku svijetlo žute čvrste mase. NMR analiza je pokazala samo jedan dijastereomer. HPLC: 86% na 2.767 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 389.45 [M+H]+.

B.(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-octena kiselina, (234B)

Spoj 234A (1.10 g, 2.82 mmol) je otopljen u EtOH/EtOAc (1:1, 50 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.4 g, kat.). H2 je uveden preko balona. Poslije 5 h na 25°C, reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc, i ukoncentrirana je in vacuo, da bi se dobilo 1.00 g (91%) spoja 234B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 80% na 2.84 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 391.1 [M+H]+.

Primjer 235

Metil ester (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-octene kiseline, (235)

[image]

Spoj 234B (0.050 g, 0.13 mmol) je otopljen u acetonitrilu (2.0 mL), zatim je dodat DCC (0.025 g, 0.13 mmol), a poslije toga HOAc (0.018 g, 0.13 mmol). Onda je dodat 4-fluorobenzil alkohol (0.014 mL, 0.13 mmol) i reakcijska mješavina je miješana tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm). Pročišćavanjem je dobiveno 0.040 g (82%) spoja 235, u obliku bijele čvrste mase, prije nego očekivanog benzil estera. Nijedan od predviđenih benzil estera nije zapažen pomoću NMR ili LC-MS. HPLC: 100% na 3.033 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 405.51 [M+H]+.

Primjer 236

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-N-[(4-fluorofenil)metil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-acetamid, (236)

[image]

Spoj 234B (0.10 g, 0.27 mmol) je otopljen u acetonitrilu (4.0 mL). Zatim su dodati HOAc (0.035 g, 0.27 mmol) i DCC (0.049 g, 0.27 mmol), a poslije toga 4-fluorobenzilamin (0.030 mL, 0.27 mmol). Poslije 4 h na 25°C, reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 0.085 g (67%) spoja 236, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.277 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 498.43 [M+H]+.

Primjer 237

(3aα,4β,7β,7aα)-N-[2-[2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]-4-fluorobenzamid, (237B)

[image]

A. 4-fluoro-N-[2-(5-metil-2-furanil)etil]benzamid (237A)

[image]

4-fluorofenilacetil klorid (0.290 mL, 2.44 mmol) je dodat, kap po kap, otopini β-(5-metil-2-furanil)etanamina (300 mg, 2.44 mmol, izrađen u skladu sa postupkom Yur’eva i sur. J. Gen. Chem. USSR (Engl. Transl.) 33, 3444-8 (1963)) u THF (2.5 mL), na rt, poslije čega je uslijedilo dodavanje, kap po kap, Et3N (0.340 mL, 2.44 mmol). Čim je polazni materijal potrošen, što je utvrđeno posredstvom HPLC, reakcija je ugašena sa H2O i ekstrahirana sa CH2Cl2. Sjedinjeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom 0-50% EtOAc/heksan, dobiveno je 523 mg (95%) spoja 237A, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.84 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 248.15 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-N-[2-[2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]-4-fluorobenzamid, (237B)

Otopina spoja 237A (221 mg, 0.896 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (222 mg, 0.896 mmol) u benzenu (4 mL) je zagrijavana na 60°C, preko noći. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom i otopljena u EtOAc (30 mL). Dodat je 10% Pd/C (50 mg) i smjesa je miješana pod balonom vodika, preko noći. Reakcijska mješavina je filtrirana kroz sloj celita i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 25%-75% EtOAc/heksan (gradijent) dobiveno je 160 mg (36%) spoja 237B, u obliku zatvoreno bijele čvrste mase. HPLC: 97% na 3.13 & 3.23 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 498.11 [M+H]+.

Primjer 238

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril &

[3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (238i & 238ii)

[image]

Racemski spoj 223B je izdvojen u svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CKIRALPAK AD 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski), pri 50 mL/min, praćenja na 220 nm), da bi se dobio spoj 238i, koje se brže eluira (Kiralna HPLC: 13.54 min; CKIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min) i spoj 238ii, koji se sporije eluira (Kiralna HPLC: 14.99 min; CKIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). Apsolutna konformacija za spojeve 238i & 238ii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 238i ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 238ii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobijene iz spoja 238i ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobijene iz spoja 238ii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

Primjer 239

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-(3-fluorofenoksi)etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril &

[3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-(3-fluorofenoksi)etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (239i & 239ii)

[image]

Otopini trifenilfosfina (0.052 g, 0.20 mmol) u THF (2.0 mL) dodat je DBAD (0.046 g, 0.20 mmol). Poslije 10 minuta, dodat je 3-fluorofenol (0.018 mL, 0.20 mmol). Poslije još 10 minuta, dodat je spoj 238i (0.050 g, 0.13 mmol). Nakon 3 h na 25°C, reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 0.031 g (33%) spoja 239i, u obliku bijele čvrste mase. Ovaj proces je ponovljen sa spojem 238ii, da bi se dobio spoj 239ii. Spoj 239i: HPLC: 100% na 3.80 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 471.65 [M+H]+, [α]D25 = -47.371 (c = 4.412 mg/cc, CH2Cl2). Spoj 239ii: HPLC: 100% na 3.80 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 471.65 [M+H]+, [α]D25 = +24.3 (c = 4.165 mg/cc, CH2Cl2).

Primjer 240

2-[(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil ester (4-fluorofenil)karbaminske kiseline, (240)

[image]

Spoj 223B (0.100 g, 0.279 mmol) je otopljen u dikloroetanu (3.0 mL) i dodat je 4-fluorofenilizocijanat (0.048 mL, 0.42 mmol), nakon čega je uslijedilo zagrijavanje do 60°C. Poslije 2 h, reakcijska mješavina je ohlađena do 25°C i razrijeđena metilen kloridom. Smjesa je jednom isprana zasićenim vodenim natrij bikarbonatom (20 mL), a zatim su organski dijelovi sušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 15% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.098 g (68%) spoja 240, u obliku žute pjene. HPLC: 98% na 3.320 & 3.457 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 514.13 [M+H]+.

Primjer 241

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (241D)

[image]

A. 2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]furan (241A)

[image]

2-(2-hidroksietil)furan (1.00 g, 8.93 mmol, Primjer 255A) je otopljen u DMF na 25°C i dodat je imidazol (0.790 g, 11.6 mmol). Zatim je, tijekom 5 minuta, dodavan, dio po dio, TBSCl (1.35 g, 8.93 mmol). Poslije 2 h, reakcijska mješavina je ulivena u dietil eter (300 mL) i isprana je naizmjenično, vodom (1 x 100 mL), 1N HCl (1 x 100 mL) i slanom otopinom (1 x 100 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su, zatim, osušeni preko magnezij sulfata i ukoncentrirani in vacuo. Spoj 241A je izdvojeno u obliku bistrog ulja (1.77 g) i preuzeto je bez pročišćavanja. HPLC: 100% na 4.233 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (241B)

[image]

4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitril (0.721 g, 3.40 mmol) je suspendiran u benzenu (5.0 mL) u zapečaćenoj epruveti i dodat je spoj 241A (1.00 g, 4.42 mmol). Reakcijska smjesa je zagrijavana na 60°C, tijekom 16 h, a zatim je ohlađena do 25°C. Benzen je uklonjen in vacuo, da bi se dobila žuta čvrsta masa. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 1-5% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 1.37 g (85%) spoja 241B, u obliku žute čvrste mase. NMR eksperimenti su potvrdili prenos egzo izomera. HPLC: 100% na 4.030 & 4.110 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (241C)

[image]

Spoj 241B (0.500 g, 1.14 mmol) je otopljen u etil acetatu (40 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.200 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 4 h, reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, isprana etil acetatom i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila blijedo žuta čvrsta masa, koja je pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa aceton/kloroformom (0% - 1.5% - 3% aceton), da bi se dobilo 0.450 g (83%) spoja 241C, u obliku žute pjene.

D. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (241D)

Spoj 241C (0.283 g, 0.594 mmol) je otopljen u otopini 2% conc. HCl u apsolutnom etanolu (10 mL). Poslije 1 h, reakcija je ugašena zasićenim vodenim natrij bikarbonatom i ekstrahirana metilen kloridom (4 x 20 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko natrij sulfata i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo 0.211 g (98%) spoja 241D, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.14 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 363.45 [M+H]+.

Primjer 242

(3aα,4β,6β,7β,7aα)-4-[4-[2-(4-cijanofenoksi)etil]oktahidro-6-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (242C)

[image]

A. (3aα,4β,6β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] etil]oktahidro-6-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (242A)

[image]

Spoj 241B (1.00 g, 2.28 mmol) i Wilkinsonov katalizator (0.105 g, 0.114 mmol) su brzo miješani pod vakuumom, na 25°C, tijekom 1 h, a zatim su očišćeni sa N2. Zatim je dodat THF (30 mL), a iza njega kateholbor (0.487 mL, 4.57 mmol), nakon što je olefin kompletno otopljen. Poslije 1 h, reakcijska mješavina je ohlađena do 0°C i dodat je fosfatni pufer pH 7.2 (33 mL), a zatim EtOH (13 mL) i H2O2 (30% vodeni otopina, 3.0 g). Poslije 3 h, na 0°C, reakcija je završena, prema LC-i, a smjesa je ekstrahirana metilen kloridom (3 x 50 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su isprani 1:1 mješavinom 10% natrij sulfit/1N NaOH (50 mL) i jednom slanom otopinom (50 mL). Sve vodene faze su sakupljene i ekstrahirane metilen kloridom (50 mL), a organska faza je sjedinjena sa prethodnim ekstraktima. Svi organski dijelovi su, zatim, osušeni preko bezvodnog natrij sulfata, a poslije toga, ukoncentrirani in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10-20% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.634 g spoja 242A, u obliku bijele pjene. HPLC: 96% na 3.797 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 493.13 [M+H]+.

B. (3aα,4β,6β,7β,7aα)-4-[oktahidro-6-hidroksi-4-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (242B)

[image]

Spoj 242A (0.400 g, 0.813 mmol) je otopljen u otopini 2% 12N HCl u apsolutnom alkoholu (10 mL). Poslije 1 h, reakcija je ugašena zasićenim vodenim natrij bikarbonatom i ekstrahirana sa EtOAc (4 x 20 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su sušeni preko natrij sulfata i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo 0.305 g spoja 242B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 90% na 2.043 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 379.09 [M+H]+.

C. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[4-[2-(4-cijanofenoksi)etil]oktahidro-6-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (242C)

Otopini trifenilfosfina (0.054 g, 0.207 mmol) u THF (2.0 mL) je dodat DBAD (0.048 g, 0.207 mmol). Poslije 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (0.025 g, 0.207 mmol). Poslije dodatnih 10 minuta, dodat je spoj 242B (0.050 g, 0.138 mmol). Nakon 3 h na 25°C, reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena preparativnom TLC na siliki, uz eluaciju sa 25% aceton/kloroform, da bi se dobilo 0.056 g spoja 242C, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 90% na 2.987 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 480.10 [M+H]+.

Primjer 243

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (243Di & 243Dii)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (243A)

[image]

4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitril (18.3 g, 68.7 mmol) je dodat otopini spoja 204A (26.6 g, 110.6 mmol) u benzenu (75 mL) i zagrijavan je na 60°C, preko noći. Poslije hlađenja do rt, reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je obrađen sa MeOH (250 mL) uz miješanje, na 0°C, tijekom 10 minuta. Nastala čvrsta masa je filtrirana, isprana hladnim MeOH (2 X 10 mL) i osušena, da bi se dobilo 26.7 g (79.5%) spoja 243A, u obliku žute čvrste mase. HPLC analiza gornje čvrste mase pokazala je da je 95%-tne čistoće (HPLC uvjeti: 95% na 2.48 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). Filtrat je, zatim, ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, a nastala čvrsta masa je podvrgnuta kromatografiji, uz eluaciju sa 3% aceton/CHCl3, da bi se dobilo dodatnih 4.36 g spoja 243A (13%), dajući ukupni konačni prinos od 92.5%.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (243B)

[image]

Smjesa spoja 243A (10 g, 20.46 mmol) i RhCl(PPh3)3 (0.947 mg, 1.02 mmol) je ispražnjena i ispunjena argonom (3X). Dodat je THF (200 mL) i čim su sve čestice otopljene, polako je, kap po kap, dodavan kateholboran (4.4 mL, 40.93 mmol). Kada je stvaranjej produkta završeno, što je utvrđeno posredstvom HPLC, reakcijska mješavina je ohlađena do 0°C i ugašena fosfatnim puferom (330 mL, pH 7.2), a zatim su dodati EtOH (130 mL) i H2O2 (300 mL, 30% vodeni otopina). Čim je borat potrošen, mješavina je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3X), a sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 1N NaOH, 10% vodenim NaHSO3 (1:1, 1X) i slanom otopinom (1X). Sjedinjeni ispirci su ekstrahirani sa CH2Cl2 (1X), a sjedinjeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% do 30% aceton/CHCl3 gradijentom, tijekom 25 min, dobiveno je 7.1 g (68%) spoja 243B, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC uvjeti: 98% na 3.82 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm).

C. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil] oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil) dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (243Ci & 243Cii)

[image]

Racemski spoj 243B je odvojen u pojedinačne enantiomere kiralnom tekućinskom kromatografijom normalne faze. Upotrijebljena je Chiralpak OD kolona (50 x 500 mm), uz eluaciju sa 13% EtOH/heksani, tijekom 99 min, pri 50 mL/min, uz detekciju na 220 nm. Izomer koji se brže eluira, spoj 243Ci, imao je retencijsko vrijeme = 45 min, a izomer, koji se sporije eluira, spoj 243Cii, imao je retencijsko vrijeme = 66 min.

D. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (243Di & 243Dii)

Spoj 243Ci (0.84 g, 2.14 mmol) je otopljen u 2% 12N HCl/EtOH (20 mL), miješan tijekom 5 minuta i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5-10% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 0.57 g (88%) spoja 243Di. Za spoj 243Di, koji je potekao od izomera, koji se brže eluira (243Ci) utvrđeno je, analitičkom kiralnom kromatografijom normalne faze, da je 99.7% ee. HPLC uvjeti: 99.7% na 2.17 min (retencijsko vrijeme) (Chiralcel OJ 44.6 X 250 mm, 10 mikrona, 40°C, izokratski, 80% heptan/20% EtOH/MeOH (1:1), 1.0 mL/min., detekcija na 288 nm).

Spoj 243Cii (0.86 g, 2.19 mmol) je otopljen u 2% 12N HCl/EtOH (20 mL), miješano tijekom 5 minuta i ukoncentrirano pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5-10% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 0.60 g (90%) spoja 243Dii. Za spoj 243Dii, koje je poteklo od izomera, koji se sporije eluira (243Cii) utvrđeno je, analitičkom kiralnom faznom kromatografijom, da je 87.1% ee. HPLC uvjeti: 87.1% na 18.4 min (retencijsko vrijeme) (Chiralcel OJ 44.6 X 250 mm, 10 mikrona, 40°C, izokratski, 80% heptan/20% EtOH/MeOH (1:1), 1.0 mL/min., detekcija na 288 nm).

Apsolutna konformacija za spojeve 243Di & 243Dii nije određena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 243Di ovdje je navedeno da ima “S” konfiguraciju, a za spoj 243Dii da ima “R” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobijene iz spoja 243Di ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobijene iz spoja 243Dii ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju.

Primjer 244

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(4-cijanofenoksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(4-cijanofenoksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (244i & 244ii)

[image]

DBAD (26 mg, 0.115 mmol) je dodat otopini PPh3 (30 mg, 0.115 mmol) u THF (0.65 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (13.6 mg, 0.115 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom još 5 minuta. Dodat je spoj 243Di (30 mg, 0.076 mmol) i mješavina je miješana na rt, tijekom 1 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% aceton/70% CH2Cl2, dobiveno je 23.1 mg (0.047 mmol, 61.7%) spoja 244i. HPLC uvjeti: 95% na 3.06 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 494.09 [M+H]+. [α]D = 53.30°, C = 4.5 mg/cc u THF, @ 589 nm).

DBAD (26 mg, 0.115 mmol) je dodat otopini PPh3 (30 mg, 0.115 mmol) u THF (0.65 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (13.6 mg, 0.115 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom još 5 minuta. Dodat je spoj 243Dii (30 mg, 0.076 mmol) i smjesa je miješana na rt, tijekom 1 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% aceton/70% CH2Cl2, dobiveno je 20.3 mg (0.041 mmol, 54.2%) spoja 244i. HPLC uvjeti: 90% na 3.07 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 494.09 [M+H]+. [α]D = -42.87°, C = 6.6 mg/cc u THF, @ 589 nm).

Primjer 245

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-7-etiloktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (245D)

[image]

A. 2-etil-5-(2-hidroksietil)furan (245A)

[image]

n-BuLi (2.5 M u heksanu, 4.4 mL, 11 mmol) je dodat otopini 2-etilfurana (1.05 mL, 10 mmol) u THF (10 mL) na -25°C. Otopina je zagrijana do rt i miješan tijekom 3 h. Na -78°C dodat je etilen oksid (0.75 mL). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 0.5 h na -15°C i tijekom noći na rt. Dodat je vodeni zasićeni NH4Cl i mješavina je ekstrahirana sa eterom (3X). Sjedinjeni ekstrakti su isprani vodom (1X) i slanom otopinom (1X) i osušeni preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% EtOAc/70% heksan, dobiveno je 1.12 g (8.02 mmol, 80.2%) spoja 245A, u obliku žutog ulja.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-etil-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (245B)

[image]

Otopina spoja 245A (280 mg, 2.00 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (496 mg, 2.00 mmol) u benzenu (2 mL) zagrijavana je na 60°C, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. žuta čvrsta masa, spoj 245B, korištena je izravno u idućem koraku.

C. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-etiloktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (245C)

[image]

Mješavina spoja 245B (764 mg, 1.97 mmol) i 10% Pd/C (115 mg, kat.) u EtOAc (36 mL) je miješana pod atmosferom vodika, na rt, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 779 mg sirovog spoja 245C. Pročišćavanjem ovog sirovog proizvoda flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 70% EtOAc/30% heksanom, dobiveno je 235 mg (0.6 mmol, 30.1%) spoja 245C. HPLC uvjeti: 99% na 2.84 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 391.12 [M+H]+.

D. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-7-etiloktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (245D)

DBAD (44.2 mg, 0.192 mmol) je dodat otopini PPh3 (50.4 mg, 0.192 mmol) u THF (1 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (23 mg, 0.192 mmol) i reakcijska mješavina je miješana tijekom dodatnih 5 minuta. Dodat je spoj 245C (50 mg, 0.128 mmol) i smjesa je miješana na rt, tijekom 2 h. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40% EtOAc/60% heksanom, dobiveno je 43 mg (0.087 mmol, 68.4%) spoja 245D, u obliku bijele čvrste mase. HPLC uvjeti: 99% na 3.65 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 492.16 [M+H]+.

Primjer 246

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[2-(acetiloksi)etil]-2-(4-cijano-1-naftalenil)heksahidro-7-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, (246)

[image]

Spoj 223B (0.100 g, 0.279 mmol) je otopljen u metilen kloridu (3.0 mL), na 25°C i dodati su piridin (0.071 mL, 0.837 mmol) i 4-DMAP (1.0 mg). Zatim je dodat octeni anhidrid (0.053 mL, 0.559 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom 20 h na 25°C. Poslije 20 h, dodat je zasićeni vodeni natrij bikarbonat i reakcijska mješavina je miješana tijekom 30 minuta. Mješavina je, zatim, ekstrahirana metilen kloridom (2 x 20 mL). Organski dijelovi su zatim, isprani, jednom, sa 1N HCl (10 mL), a zatim su osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Poslije koncentriranja in vacuo sirovi materijal je pročišćen preparativnom TLC, na siliki, uz eluaciju sa 12% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.073 g spoja 246, u obliku žute pjene. HPLC: 95% na 2.837 i 3.027 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 441.10 [M+Na]+.

Primjer 247

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-(2-oksoetil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (247)

[image]

Oksalil klorid (2.0 M otopina, 1.73 mL, 3.5 mmol) je dodat suhom metilen kloridu (10 mL) i ohlađen do -78°C. Zatim je dodavan, kap po kap, uz razvijanje plina, DMSO (0.283 mL, 3.99 mmol). Poslije 15 minuta, dodat je spoj 223B (1.00 g, 2.66 mmol) u metilen kloridu (10 mL). Poslije 15 minuta, dodata je TEA (1.10 mL, 7.98 mmol), a reakcijska smjesa je polako zagrijavana do 25°C. Zatim je dodata voda (30 mL) i mješavina je razrijeđena metilen kloridom (100 mL). Organski dijelovi su, zatim, isprani jednom, sa 1N HCl (30 mL), jednom vodom (30 mL) i jednom slanom otopinom (30 mL), a zatim su osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Sirovi proizvod je izdvojen koncentriranjem in vacuo, da bi se dobio spoj 247, u obliku narančaste pjene. Sirovo spoj 247 je izravno preuzeto u idućoj reakciji. HPLC: 100% na 2.70 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 483.65 [M+H]+.

Primjer 248

[3aα,4β(E),7β,7aα]-4-[4-[3-(4-cijanofenil)-2-propenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aα,4β(Z),7β,7aα]-4-[4-[3-(4-cijanofenil)-2-propenil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (248i & 248ii)

[image]

(4-cijanobenzil)-trifenilfosfonijum klorid (0.072 g, 0.174 mmol) je suspendiran u THF (2.0 mL) i ohlađen do 0°C. Zatim je dodat, kap po kap, n-BuLi (1.6 M otopina, 0.092 mL, 0.147 mmol), što dovodi do stvaranja homogene otopine. Otopina je zagrijavana do 25°C, tijekom 15 minuta, a zatim je ohlađen do 0°C. Zatim je dodan spoj 247 (0.050 g, 0.134 mmol) u THF. Poslije 1 h, reakcija je ugašena zasićenim vodenim amonij kloridom, a zatim je ekstrahirana metilen kloridom (3 x 20 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog natrij sulfata, a zatim su ukoncentrirani in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen preparativnom TLC, uz eluaciju sa 5% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 0.010 g mješavine spoja 248i & 248ii, u obliku bijele čvrste mase. 1:1 mješavina E i Z olefinskih izomera opisana je NMR spektroskopijom. HPLC: 100% na 3.517 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 474.2 [M+H]+.

Primjer 249

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[3-(4-cijanofenil)propil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (249)

[image]

Smjesa spojeva 248i & 248ii (0.008 g, 0.017 mmol) je otopljena u EtOH (3.0 mL) i dodat je Pd/C (10% Pd, 0.008 g). Zatim je, preko balona, uveden H2. Poslije 18 h, reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa EtOAc, a potom je uslijedilo koncentriranje in vacuo. Spoj 249 je izdvojen kao bijela čvrsta masa (0.007 g). HPLC: 90% na 3.520 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 476.13 [M+H]+.

Primjer 250

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[(6-kloro-1,2-benzizoksazol-3-il)oksi]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (250)

[image]

Otopini PPh3 (52 mg, 0.20 mmol) u 0.5 mL THF dodat je, odjednom, DBAD (46 mg, 0.20 mmol) u čvrstom stanju. Stvorena mješavina je miješana tijekom 10 minuta, prije nego što je dodat 6-kloro-3-hidroksi-1,2-benzizoksazol (34 mg, 0.20 mmol). miješanje je nastavljeno tijekom 10 minuta, prije nego što je, preko kanile, uvedena otopina spoja 223B (50 mg, 0.13 mmol) u 0.5 mL THF. Nastala smjesa je miješana na temperaturi sredine tijekom 24 h, ukoncentrirana je in vacuo i pročišćena reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolona; eluacija sa 30-100% vodenim MeOH, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 10 minuta, pri 20 mL/min), da bi se dobila bijela čvrsta masa. Dobijeni čvrsti dijelovi su otopljeni u CH2Cl2, isprani zasićenim otopinom NaHCO3, osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo 50 mg (71%) spoja 250, u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 3.89 min & 4.02 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, balistička, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 528.4 [M+H]+.

Primjer 251

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4-metil-7-[2-[(6-nitro-1H-indazol-3-il)oksi]etil]-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (251)

[image]

Otopini spoja 223B (50 mg, 0.13 mmol) u toluenu (1 mL) je dodat ADDP (50 mg, 0.20 mmol), 6-nitro-3-indazolinon (36 mg, 0.20 mmol) i n-Bu3P (50 μL, 0.2 mmol). Nastala mješavina je grijana na 80°C, tijekom 24 h, ukoncentrirana in vacuo i pročišćena kombinacijom reverzno fazne preparativne HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolona; uz eluaciju sa 30-100% vodenim MeOH, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 10 minuta, pri 20 mL/min) i flash kromatografije (silika gel, 25% aceton u CHCl3), da bi se dobilo 17 mg (25%) spoja 251, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 3.60 min & 3.74 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, balistička, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 537.6 [M+H]+.

Primjer 252

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(1,2-benzizoksazol-3-iloksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (252)

[image]

PPh3 (47 mg, 0.18 mmol), DBAD (41 mg, 0.18 mmol), 3-hidroksi-1,2-benzizoksazol (24 mg, 0.18 mmol) i spoj 243Di (35 mg, 0.09 mmol) su reagirali u skladu sa postupkom, datim za spoj 250. Pročišćavanje je izvedeno reverzno faznom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolona; uz eluaciju sa 30-100% vodenim MeOH, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 10 minuta, pri 20 mL/min), da bi se dobila bijela čvrsta masa. Dobijeni čvrsti dijelovi su otopljeni u CH2Cl2, isprani zasićenom otopinom NaHCO3, osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se osiguralo 29 mg (64%) spoja 252, u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 96% na 3.29 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 0-100% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 510.2 [M+H]+.

Primjer 253

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(1,2-benzizoksazol-3-iloksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (253)

[image]

PPh3 (47 mg, 0.18 mmol), DBAD (41 mg, 0.18 mmol), 3-hidroksi-1,2-benzizoksazol (24 mg, 0.18 mmol) i spoj 243Dii (35 mg, 0.09 mmol) su reagirali u skladu sa postupkom, datim za spoj 250. Pročišćavanje je izvedeno reverzno faznom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm kolona; uz eluaciju sa 30-100% vodenim MeOH, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 10 minuta, pri 20 mL/min), da bi se dobila bijela čvrsta masa. Dobijeni čvrsti dijelovi su otopljeni u CH2Cl2, isprani zasićenom otopinom NaHCO3, sušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se osiguralo 23 mg (51%) spoja 253, u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 95% na 3.29 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 0-100% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 510.4 [M+H]+.

Primjer 254

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril, (254i & 254ii)

[image]

Racemski spoj 221B je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CKIRALPAK AD 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski), pri 50 mL/min), da bi se dobio spoj 254i, koje se brže eluira (Kiralna HPLC: 10.02 min; CKIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min) i spoj 254ii, koje se sporije eluira (Kiralna HPLC: 14.74 min; CKIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). (Nazivi naslovljenih spojeva zasnovani su na određivanju apsolutne stereokemije.)

Primjer 255

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-1,3-diokso-7-[2-(fenilmetoksi)etil]-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril & (3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-1,3-diokso-7-[2-(fenilmetoksi)etil]-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril, (255Hi & 255Hii)

[image]

A. 2-(2-hidroksietil)furan (255A)

[image]

2-(2-hidroksietil)furan je izrađen u skladu sa slijedećom referencom: Harmata,M, et al. J. Org. Chem. 60, 5077-5092 (1995). n-BuLi (2.5 M u heksanu, 44 mL, 110 mmol) je dodat otopini furana (8 mL, 110 mmol) u 100 mL THF, na -78°C. Otopina je miješana na 0°C, tijekom 4 h, a zatim je, na -78°C, dodat etilen oksid (7.5 mL). Reakcijska mješavina je miješana na -15°C tijekom 1 h, a zatim preko noći, na rt. Reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahirana eterom (3X). Sjedinjeni ekstrakti su isprani vodom (1X) i slanom otopinom (1X). Eterska otopina je osušena preko Na2SO4 i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40% EtOAc/60% heksanom, dobiveno je 5.4 g (48.2 mmol, 43.8%) spoja 255A, u obliku svijetlo smeđeg ulja.

B. 2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]furan (255B)

[image]

Imidazol (3.65 g, 53.6 mmol) i TBSCl (6.47 g, 42.9 mmol) su dodati otopini spoja 255A (4.00 g, 35.7 mmol) u 50 mL DMF-a. Smjesa je miješana na rt, tijekom 2 h, a zatim je reakcijska mješavina ulivena u eter. Eterska otopina je ispran vodom (1X), 1N HCl (1X), vodom (1X) i slanom otopinom (1X). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% CH2Cl2/70% heksanom, dobiveno je 7.4 g (32.7 mmol, 91.7%) spoja 255B, u obliku bezbojnog ulja.

C. 2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-5-(2-hidroksietil)furan (255C)

[image]

t-BuLi (1.2 M u pentanu, 10 mL, 16.99 mmol) je dodat izmješanoj otopini spoja 255B (3.49 g, 15.44 mmol) u 13 mL THF, kap po kap, na -78°C. Smjesa je miješana tijekom dodatna 4 h, na 0°C. Na -78°C, reakcijskoj otopini je dodat etilen oksid (1.05 mL). Mješavina je zagrijana do rt i miješana tijekom noći. Dodat je vodeni zasićeni NH4Cl, a najveći dio THF-a je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Smjesa je ekstrahirana eterom (3X), a sjedinjeni organski slojevi su isprani vodom (1X) i slanom otopinom (1X) i sušeni preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5% EtOAc/95% CH2Cl2, dobiveno je 2.8 g (10.4 mmol, 67%) spoja 255C, u obliku žutog ulja.

D. 2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-5-[2-(fenilmetoksi)etil] furan (255D)

[image]

Alkohol 255C (1.00 g, 3.7 mmol) u 12 mL THF je obrađen sa 60% NaH (177.8 mg, 4.44 mmol), benzil bromidom (0.53 mL, 4.44 mmol) i teterabutilamonij jodidom (50 mg, 5%), tijekom 3 h, na rt. Dodata je voda i mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su isprani vodom (1X) i slanom otopinom (1X) i osušeni preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20% heksan/80% CH2Cl2, dobiveno je 1.10 g (3.05 mmol, 82.6%) spoja 255D, u obliku žutog ulja.

E. 2-(2-hidroksietil)-5-[2-(fenilmetoksi)etil]furan (255E)

[image]

Teterabutilamonij fluorid (1.00 M u THF, 3.06 mL, 3.06 mmol) je dodat otopini spoja 255D (1.1 g, 3.06 mmol) u 10 mL THF, na 0°C. Reakcijska smjesa je miješana na rt tijekom 10 minuta, ugašena je zasićenim NH4Cl i ekstrahirana eterom (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% EtOAc/90% CH2Cl2, dobiveno je 750 mg (3.05 mmol, 99.6%) spoja 255E, u obliku svijetlo žutog ulja.

F. 5-[2-(fenilmetoksi)etil]furan-2-propannitril (255F)

[image]

DEAD (1.285 mL, 8.17 mmol) je dodat izmješanom otopini Ph3P (2.14 g, 8.17 mmol) u 12 mL suhog THF, na 0°C. Otopina je miješana tijekom 30 minuta na rt i dodat je spoj 255E (670 mg, 2.72 mmol). Reakcijska mješavina je miješana tijekom 15 minuta i dodat je, na -15°C, aceton cijanohidrin (0.745 mL, 8.17 mmol). Reakcijska mješavina je miješana tijekom 30 minuta na -15°C, a zatim preko noći na rt. Mješavina je, zatim, ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 100% CH2Cl2, dobiveno je 180 mg (0.705 mmol, 26%) spoja 255F, u obliku bezbojnog ulja.

G. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-1,2,3,3a,7,7a- heksahidro-1,3-diokso-7-[2-(fenilmetoksi)etil]-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril (255G)

[image]

Otopina spoja 255F (180 mg, 0.706 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (263 mg, 1.06 mmol) u CH2Cl2 (3 mL) je miješana na rt, tijekom 3 dana. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5% EtOAc/CH2Cl2, dobiveno je 318 mg (0.63 mmol, 89.6%) spoja 255G, u obliku svijetlo sive čvrste mase, koja je upotrijebljena izravno u slijedećem koraku.

H. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-1,3-diokso-7-[2-(fenilmetoksi)etil]-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril & (3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-1,3-diokso-7-[2-(fenilmetoksi)etil]-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril, (255Hi & 255Hii)

Mješavina spoja 255G (318 mg, 0.63 mmol) i 10% Pd/C (64 mg) u EtOH (10 mL) i EtOAc (5 mL) je miješana pod atmosferom vodika, na rt, preko noći. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 320 mg sirovih spojeva 255Hi & 255Hii. Pročišćavanjem 25 mg ovog sirovog proizvoda flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 55% EtOAc/heksanom, dobiveno je 6.5 mg (0.013 mmol, 26% (na osnovu 25 mg) spoja 255Hi & 8.1 mg (0.016 mmol, 32.4% (na osnovu 25 mg) spoja 255Hii. Spoj 255Hi: HPLC uvjeti: 98% na 3.57 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm, MS (ES): m/z 506.15 [M+H]+. Spoj 255Hii: HPLC uvjeti: 98% na 3.51 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 506.15 [M+H]+.

Primjer 256

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril & (3aα,4α,7α,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril, (256i & 256ii)

[image]

Mješavina spojeva 255Hi & 255Hii (200 mg, 0.396 mmol) i PdCl2 (8.4 mg, kat.) u EtOH (1 mL) i EtOAc (3 mL) je miješana pod atmosferom vodika (30 psi), na rt, preko noći. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5% MeOH/CH2Cl2, a zatim na drugoj koloni, uz eluaciju sa 100% EtOAc, dobiveno je 28.9 mg (0.0696 mmol, 17.6%) spoja 256ii i 26.5 mg (0.0639 mmol, 16.1%) spoja 256i. Spoj 256ii: HPLC uvjeti: 90% na 2.44 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 416.11 [M+H]+. Spoj 256i: HPLC uvjeti: 99% na 2.47 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 416.11 [M+H]+.

Primjer 257

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-7-[2-(4-fluorofenoksi)etil]oktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-propannitril, (257)

[image]

DBAD (15 mg, 0.065 mmol) je dodat otopini PPh3 (17 mg, 0.065 mmol) u THF (0.8 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-fluorofenol (7.33 mg, 0.065 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom još 5 minuta. Dodat je spoj 256i (18.1 mg, 0.044 mmol) i mješavina je miješana na rt, tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 60% EtOAc/30% heksanom, dobiveno je 5.9 mg (0.0116 mmol, 26.34%) spoja 257. HPLC uvjeti: 98% na 3.59 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 510.14 [M+H]+.

Primjer 258

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-kloro-2,1,3-benzoksadiazol-4-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, (258)

[image]

A. 4-amino-7-kloro-2,1,3-benzoksadiazol (258A)

[image]

Otopina od 1.0 g (5.02 mmol) 4-kloro-7-nitrobenzofurazana u 20 mL AcOH, 10 mL EtOAc i 2 mL H2O je zagrijavana na 50°C i obrađena je praškom željeza (1.4 g, 251 mmol). Smjesa je zagrijavana na 80°C tijekom 30 minuta, a zatim je ostavljena da se ohladi do rt. Mješavina je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa EtOAc. Filtrat je ispran zasićenim vodenim NaHCO3, osušen preko MgSO4 i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, da bi se dobio spoj 258A (0.80 g, 94%) u obliku crvene čvrste mase.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-kloro-2,1,3-benzoksadiazol-4-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, (258B)

Spoj 258A (42 mg, 0.25 mmol) je reagirao, u zapečaćenoj epruveti, sa spojem 20A (73.5 mg, 0.375 mmol), MgSO4 (75 mg, 0.625 mmol) i Et3N (170 μL, 1.25 mmol) u 250 μL toluena, u skladu sa prethodnim postupkom, opisanim u primjeru 208C, da bi se dobilo, po pročišćavanju reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluacija sa 30-100% vodenim metanolom, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 12 minuta, 20 mL/min) 23 mg (26%) spoja 258B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 97.6% na 2.87 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (DCI): m/z 347.9 [M]+.

Primjer 259

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-kloro-2-metil-4-benzofuranil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, (259)

[image]

7-kloro-2-metil-4-benzofuranamin (38 mg, 0.25 mmol, pripremljen u skladu sa postupkom, opisanim od strane Enomota i Takemure u EP 0476697 A1) reagirao je, u zapečaćenoj epruveti, sa spojem 20A (73.5 mg, 0.375 mmol), MgSO4 (75 mg, 0.625 mmol) i Et3N (170 μL, 1.25 mmol) u 250 μL toluena, u skladu sa postupkom, opisanim u primjeru 208C, da bi se dobilo, po pročišćavanju reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 12 minuta, 20 mL/min), 42 mg (47%) spoja 259, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 3.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (DCI): m/z 359.9 [M]+.

Primjer 260

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-kloro-2-metilbenzo[b]tiofen-4-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, (260)

[image]

A. 1-kloro-2-(2-kloro-alilsulfanil)-4-nitro-benzen (260A)

[image]

Otopina 2-kloro-5-nitro-benzentiola (1.0 g, 5.27 mmol, pripremljena u skladu sa postupkom, opisanim od strane Stilla i sur. Synth. Comm. 13, 1181 (1983)) u 15 mL DMF-a je obrađen sa 2,3-dikloropropenom (693 μL, 7.52 mmol) i K2CO3 (433 mg, 3.13 mmol). Smjesa je zagrijavana na 80°C tijekom 2 h, a zatim je ostavljena da se ohladi do rt. Dodati su EtOAc (200 mL) i H2O (100 mL). Organska faza je isprana sa H2O (2 x 250 mL) i zasićenim vodenim NaCl (100 mL), osušena preko MgSO4 i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na koloni, na silika gelu, uz eluaciju sa 20% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 260A (1.09 g, 89%) u obliku narančastog ulja.

B. 4-amino-7-kloro-2-metilbenzo[b]tiofen (260B)

[image]

Otopina 1.09 g (4.67 mmol) spoja 260A u 20 mL AcOH sa 10 mL EtOAc i 2 mL H2O, zagrijavana je do 80°C i obrađena praškom željeza (1.3 g, 23.4 mmol). Smjesa je zagrijavana na 80°C tijekom 40 minuta, a zatim je ostavljena da se ohladi do rt. Mješavina je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa EtOAc. Filtrat je ispran zasićenim vodenim NaHCO3, osušen preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo. Dodat je N,N-dietilanilin (10 mL) i reakcijska smjesa je zagrijavana na 215°C tijekom 6 h. Poslije hlađenja do rt, dodat je 1N vodeni HCl (20 mL) i reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 2 h. Mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (3 x 30 mL). Organska faza je isprana zasićenim vodenim NaHCO3, osušena preko MgSO4 i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na koloni, na silika gelu, uz eluaciju sa 25% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 260B (320 mg, 35%) u obliku čvrste mase bež boje.

C. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-kloro-2-metilbenzo[b]tiofen-4-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion, (260C)

Spoj 260B (49 mg, 0.25 mmol) je reagirao, u zapečaćenoj epruveti, sa spojem 20A (73.5 mg, 0.375 mmol), MgSO4 (75 mg, 0.63 mmol) i Et3N (170 μL, 1.25 mmol) u 250 μL toluena, u skladu sa prethodnim postupkom, opisanim u primjeru 208C, da bi se dobilo, po pročišćavanju reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 12 min, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min) 28 mg (30%) spoja 260C, u obliku blijedo žute čvrste mase. HPLC: 96% na 3.18 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (DCI): m/z 376.0 [M]+.

Primjer 261

Fenilmetil ester [3aα,4β(E),7β,7aα)]-4-[2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]-2-butenske kiseline, (261)

[image]

Spoj 247 (0.500 g, 1.34 mmol) je otopljen u THF (20 mL) i dodat je benzil(trifenilfosforaniliden) (0.55 g, 1.34 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 67°C tijekom 2 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 5% aceton/95% CHCl3, dobiveno je 0.65 g spoja 261, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 3.717 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 507.1 [M+H]+.

Primjer 262

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-butanska kiselina, (262)

[image]

Spoj 261 (0.60 g, 1.19 mmol) je otopljen u EtOH/EtOAc (5 mL/5 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.30 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 8 h, reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, a zatim ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobio spoj 262 (0.47 g), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 2.81 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 419.1 [M+H]+.

Primjer 263

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)-N-(4-fluorofenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-butanamid, (263)

[image]

Spoj 262 (0.030 g, 0.072 mmol) je otopljen u CH3CN (1 mL). Zatim su dodati DCC (0.014 g, 0.072 mmol) i HOAc (0.0098 g, 0.072 mmol), a poslije toga 4-fluoroanilin (0.007 mL, 0.072 mmol). Reakcijska smjesa je miješana pod argonom, tijekom 14 h, a sirovi materijal je otopljen u MeOH i pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC VP-ODS kolona, 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 20%B do 100%B u 15 minuta i zadržavanje @ 100%B za 10 minuta). Spoj 263 (0.020 g) je izdvojen u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.217 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 512.1 [M+H]+.

Primjer 264

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(acetiloksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (264 & 243Dii)

[image]

Racemska smjesa spojeva 243Di & 243Dii (1.90 grama) je otopljena u 100 mL bezvodnog THF u balonu od 2 L. Bezvodni terc-butil-metil eter (900 mL) i vinil acetat (40 mL) su preneseni u balon, uz miješanje, i dodana je lipaza (20 g, tip II, sirova, iz gušterače svinje; Sigma, Cat# L3126). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 21 h, na rt, kada je dodato još 5 grama lipaze i 20 mL vinil acetata. Reakcijska smjesa je miješana na rt, tijekom dodatnih 19 h, držana je na 4°C, bez miješanja, tijekom 36 h, a zatim je miješana na rt, još 22 h (dok željeni % ee nije očigledan prema kiralnoj HPLC). Kako bi se pratila reakcija, 200 uL mješavine je izvučeno i centrifugirano. Supernatant (100 uL) je osušen pod dušikom, a nastali ostatak je otopljen u 100 uL EtOH i podvrgnut HPLC analizi:

1) Reverzno fazna HPLC: Kolona, YMC-ODS AQ 150x4.6; brzina protoka, 1.2 mL/min; veličina uzorka, 10 uL

otapalo A,: 1 mM HCl u vodi; otapalo B, MeCN; praćeno na 300 nm

Gradijent

Vrijeme (min) 0 8 8.5 9.5 10 12

B% 30 60 85 85 30 30

2) Kiralna HPLC: Kolona, CHIRALCEL OJ 4.6 x 250 mm

mobilna faza, heksani/MeOH/EtOH (8:1:1)

brzina protoka, 1 mL/min; veličina uzorka, 20 uL

praćeno i na 220 i na 300 nm

izvedeno na 25°C & 40°C.

(za određivanje ee% reakcijske mješavine)

Enzim je odstranjen filtracijom, a filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Stvorena smjesa je otopljena u CHCl3 i adsorbirana na silika gel (63-200 mikrona). Ove čvrste mase su aplicirane na VLC lijevak (3 cm I.D., VLC je vakuum tekuća kromatografija, koja koristi staklene lijevke, koji imaju 24/40 usjeka na dnu), koji sadrži sloj silika gela visine 5 cm (25-40 mikrona) i izveden je postepeni gradijent. Gradijent je bio 100% CHCl3, u prve 3 frakcije, a zatim CHCl3-1% MeOH (3 frakcije), CHCl3-2% MeOH (3 frakcije), CHCl3-3% MeOH (3 frakcije), CHCl3-4% MeOH (3 frakcije) i završno sa CHCl3-5% MeOH (3 frakcije). Zapremina frakcija je bila 100 mL, dok se ne dosegne CHCl3-3% MeOH, a od tog trenutka je bila 200 mL. Spoj 264 se eluira u posljednje dvije frakcije 100%-tnog CHCl3 i do prve frakcije CHCl3-2% MeOH. Spoj 243Dii se eluira počevši sa drugom frakcijom CHCl3-2% MeOH i nastavlja se do prve frakcije CHCl3-5% MeOH. Sirov spoj 243Dii je sadržavao malu količinu obojenih onečišćenja, koja su odstranjene pomoću Sephadex kolone [LH-20, koja je nabubrila u CHCl3-MeOH (2:1), kolona (2.5 cm I.D. & 90 cm duga) da bi se dobilo 632 mg spoja 243Dii. Spoj 264: HPLC uvjeti: 98% na 7.2 min (retencijsko vrijeme) (metod 1), uvjeti kiralne HPLC: 29.0 min @ 25°C (metod 2). Spoj 243Dii: HPLC uvjeti: 98% na 4.6 min (retencijsko vrijeme) (metod 1), uvjeti kiralne HPLC: 96% ee na 25.7 min (retencijsko vrijeme) (@ 25°C) & 19.8 min (retencijsko vrijeme) (@ 40°C) (metod 2).

Primjer 265

(3aα,4β,7β,7aα(E)]-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-(4-okso-4-fenil-2-butenil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (265)

[image]

Spoj 247 (0.050 g, 0.134 mmol) je otopljen u THF (1.5 mL) i dodat je (fenaciliden)trifenilfosforan (0.051 g, 0.134 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 67°C, tijekom 24 h, a zatim je ohlađena do 23°C i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je, zatim, pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC. (YMC VP-ODS kolona, 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 20%B do 100%B u 15 minuta i zadržavanje @ 100%B za 10 minuta). da bi se dobio spoj 265 (0.040 g), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.503 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 477.1 [M+H]+.

Primjer 266

(3aα,4β,7β,7aα(E)]-4-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-(4-hidroksi-4-fenil-2-butil)-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (266)

[image]

Spoj 265 (0.010 g, 0.021 mmol) je otopljen u EtOH (2.0 mL) i dodat je Pd/C (10% Pd, 0.005). Zatim je, preko balona, uveden vodik i reakcijska mješavina je miješana na 25°C tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je, zatim, filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio spoj 266, u obliku žutosmeđe čvrste mase (0.009 g). Pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 100% na 3.38 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 503.2 [M+Na]+. (Kada je ova reakcija protekla za 1 sat, nastali proizvod je bio spoj 455.)

Primjeri 267 do 378

Dodatni spojevi ovog izuma su pripremljeni postupcima, koji su analogni onima, koji su prethodno opisani. Spojevi iz Primjera 267 do 378 imaju slijedeću strukturu (L je veza):

[image]

gdje su G, R7, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i korišteni postupak, navedeni u Tablici 5. Apsolutna konfiguracija za slijedeće spojeve nije određena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 238i ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 238ii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 238i ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 238ii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

Kromatografske tehnike, korištene za određivanje retencijskih vremena spojeva iz Tablice 5, su slijedeće: LCMS=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS*=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Molekulska masa spojeva navedenih u Tablici 5 određena je prema MS (ES), pomoću formule m/z.

Tablica 5

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

Primjeri 379 do 381

Dodatni spojevi ovog izuma su pripremljeni postupcima, analognim onima, koji su gore opisani. Ovi spojevi, Primjera 379 do 381, imaju slijedeću strukturu (L je veza):

[image]

gdje su G, R7, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i postupak koji je upotrijebljen objašnjeni u Tablici 6. Kromatografske tehnike koje su korištene za određivanje retencijskih vremena spoja u Tablici 6 su, kao što slijede: LCMS = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 4 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS* = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 4 minuta, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Molekularne mase spojeva nabrojanih u Tablici 6 su određene MS-om (ES-om), pomoću formule m/z.

Tablica 6

[image]

Primjeri 382 do 383

Dodatni spojevi ovog izuma proizvedeni su procedurama koje su analogne onima, opisanim gore. Spojevi Primjera 382 do 383 imaju strukturu, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulsku masu i proizvedeni su putem upotrijebljene procedure, kao što je sve objašnjeno u slijedećoj Tablici 7. Kromatografske tehnike, koje se koriste za određivanje retencijskih vremena spojeva Tablice 7, su kao što slijede: LCMS = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 4 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS* = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 4 minuta, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Molekularne mase spojeva nabrojanih u Tablici 7 su određene MS-om (ES-om), pomoću formule m/z.

Tablica 7

[image]

Primjeri 384 do 421

Dodatni spojevi ovog izuma su proizvedeni procedurama koje su analogne onima, opisanim gore. Spojevi Primjera 384 do 421 imaju slijedeću strukturu (L je veza):

[image]

gdje su G, R7, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i upotrijebljena procedura, kao što su objašnjeni u Tablici 8. Apsolutna konfiguracija za slijedeće spojeve nije određena. Da bi se pojednostavila nomenklatura, spoj 243Di je ovdje označen kao da ima “S” konfiguraciju, a spoj 243Dii kao da ima “R” konfiguraciju. Enantiomerno čisti proizvodi, dobijeni od spoja 243 Di su označeni ovdje kao da imaju “S” konfiguraciju i enantiomerno čisti proizvodi izvedeni od spoja 243Dii su ovdje označeni kao da imaju “R” konfiguraciju.

Kromatografske tehnike, koje su korištene za određivanje retencijskih vremena spojeva Tablice 8, su kao što slijede: LCMS = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 4 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS* = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm eluirajući sa 10-90% MeOH/H2O u toku 4 minuta, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Molekulske mase spojeva nabrojanih u Tablici 8 su određene MS-om (ES-om), pomoću formule m/z.

Tablica 8

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

Primjer 422

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-bromo-2,1,3-benzoksadiazol-4-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (422C)

[image]

A. 4-bromo-7-nitrobenzofurazan (422A)

[image]

Otopini 2,6-dibromoanilina (1.0 g, 4.0 mmol) u CHCl3 (8 mL) dodata je suspenzija mCPBA (70% HPLC-om, 1.4 g, 8.0 mmol) u CHCl3 (8 mL), a nastala smjesa je miješana tijekom 24 h, na rt. Reakcijska mješavina je razrijeđena sa CHCl3 i isprana, uzastopno, 2%-tnom otopinom Na2S2O3, 5%-tnom otopinom Na2CO3 i slanom otopinom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, da bi se dobila čvrsta masa, koja je suspendirana u DMSO

(15 mL). Ovoj suspenziji je dodata otopina NaN3 (272 mg, 4.19 mmol) u DMSO (15 mL), na rt. Stvorena smjesa je miješana na rt, sve dok nije razvijen najveći dio dušika, a zatim je brzo zagrijana do 120°C, u toku 3 minuta. Reakcijska mješavina je ohlađena i izlivena na izlomljeni led (100 g). Poslije stajanja od 1 sata, talozi su otfiltrirani, osušeni in vacuo i ponovo otopljeni u koncentriranoj H2SO4 (5 mL). Ovoj otopini je dodata otopina NaNO3 (400 mg, 4.7 mmol) u 50% H2SO4 (1.6 mL), a temperatura je održavana na 60°C. Po završetku dodavanja, smjesa je zagrijavana na 85°C, tijekom 30 minuta, ohlađena do rt i izlivena na izlomljeni led (40 g). Dodat je EtOAc, izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobila čvrsta masa, koja je pročišćena flash kromatografijom (silika gel, EtOAc (20%) u heksanima), dajući spoj 422A (785 mg, 81%) u obliku žutosmeđe čvrste mase.

B. 4-bromo-7-aminobenzofurazan (422B)

[image]

Otopina spoja 422A (563 mg, 2.31 mmol) u AcOH (5 mL) je zagrijavana do 70°C i dodat je, odjednom, Fe0 prašak (258 mg, 4.62 mmol). Nastala tamna reakcijska smjesa je miješana tijekom 15 minuta, ohlađena do rt i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pokupljen u EtOAc, a nastala otopina je isprana zasićenom otopinom Na2CO3. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, ukoncentriran in vacuo i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10-60% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo 470 mg (95%) spoja 422B, u obliku crvene čvrste mase.

C. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-bromo-2,1,3-benzoksadiazol-4-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (422C)

Mješavina spoja 422B (43 mg, 0.20 mmol), spoja 20A (45 mg, 0.23 mmol), MgSO4 (60 mg, 0.50 mmol), Et3N (139 μL, 1.0 mmol) i 1,2-dimetoksietana (300 μL) je stavljena u zapečaćenu epruvetu i zagrijavana na 135°C, tijekom 14 h. Poslije hlađenja do rt, mješavina je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa MeOH, da bi se dobila tamna čvrsta masa, koja je pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5-40% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo 42 mg (54%) spoja 422C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 2.96 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). 1H NMR (aceton-d6, 400 MHz): δ=8.00 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.5 Hz, 1H), 3.31 (s, 2H), 1.98-1.93 (m, 2H), 1.74-1.69 (m, 2H), 1.57 (s, 6H).

Primjer 423

(3aα,4β,7β,7aα)-7-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzoksadiazol-4-karbonitril (423)

[image]

Otopini spoja 422C (42 mg, 0.11 mmol) u DMA (1 mL) dodat je CuCN (20 mg, 0.22 mmol), a nastala smjesa je grijana na 150° tijekom 5 h. Mješavina je ostavljena da se ohladi do rt i raspodjeljena je između EtOAc i vodene otopine NaCN (5 g/50 mL). Odvojeni su slojevi, a vodeni sloj je jednom ekstrahiran sa EtOAc. Sjedinjene organske faze su osušene preko Na2SO4, ukoncentrirane in vacuo i pročišćene flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20-70% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo 13 mg (35%) spoja 423, u obliku žutog ulja. HPLC: 99% na 2.66 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 396.9 [M-H+OAc]-.

Primjer 424

(3aα,4β,7β,7aα)-7-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (424B)

[image]

A. 4-cijano-7-amino-benzotiadiazol (424A)

[image]

Otopina 2-cijano-5-nitrofenilendiamina (78 mg, 0.44 mmol, pripremljena kao što je opisano u WO 0076501) u SOCl2 (2 mL) je zagrijavana do refluksa, tijekom 3 h. Nastala smjesa je ostavljena da se ohladi do rt, a zatim je ulivena u led/vodu. Dodat je CH2Cl2, slojevi su odvojeni, a vodeni sloj je dva puta ekstrahiran sa CH2Cl2. Sjedinjene organske faze su sušene preko MgSO4, ukoncentrirane in vacuo i pročišćene flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc u heksanima, da bi se dobio 4-cijano-7-nitrobenzotiadiazol. Ovaj materijal je otopljen u AcOH (2 mL), koji sadrži EtOAc (1 mL) i H2O (0.2 mL), i zagrijavan do 70°C. Na ovoj temperaturi, dodat je, odjednom, čvrsti Fe0 prašak (78 mg, 1.41 mmol) i tamna smjesa je miješana tijekom 20 minuta, a zatim je ohlađena do rt. Reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa EtOAc, isprana zasićenom otopinom Na2CO3, sušena preko MgSO4 i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20-70% EtOAc u heksanima, dobiveno je 47 mg (67%) spoja 424A, u obliku smeđe čvrste mase.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-7-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (424B)

Mješavina spoja 424A (35 mg, 0.20 mmol), spoja 20A (45 mg, 0.23 mmol), MgSO4 (60 mg, 0.50 mmol), Et3N (139 μL, 1.0 mmol) i DME (300 μL) je stavljena u zapečaćenu epruvetu i zagrijavana na 135°C, tijekom 14 h. Poslije hlađenja do rt, mješavina je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa MeOH, da bi se dobila tamna čvrsta masa, koja je pročišćena kombinacijom flash kromatografije na silika gelu, uz eluaciju sa 10-50% EtOAc u heksanima i reverzno fazne preparativne HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 27-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min), da bi se dobilo 36 mg (51%) spoja 424B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 98% na 2.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (DCI): m/z 355.0 [M+H]+.

Primjer 425

(3aα,4β,7β,7aα)-N-[2-[2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]-4-fluoro-N-metilbenzamid (425B)

[image]

A. 4-fluoro-N-metil-N-[2-(5-metil-furan-2-il)-etil]-benzamid (425A)

[image]

NaH (60%-tna disperzija u ulju, 65 mg, 1.63 mmol) je dodavan, dio po dio, otopini 4-fluoro-N-[2-(5-metil-2-furanil)etil]benzamida (269 mg, 1.09 mmol, 237A) u THF (5 mL). Po prestanku razvijanja plina, dodat je, kap po kap, jodometan (0.14 mL, 2.18 mmol). Čim je HPLC analiza pokazala da je reakcija završena 50%, smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom i ponovno podvrgnuta gornjim uvjetima. Nakon što je sav polazni materijal potrošen, dodata je H2O, a stvorena mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (2 X 5 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20% aceton/CHCl3 dobiveno je 238 mg (84%) spoja 425A. HPLC: 98% na 2.94 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z [M+H]=262.38.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-N-[2-[2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-il]etil]-4-fluoro-N-metilbenzamid (425B)

Otopina spoja 425A (183 mg, 0.75 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (174 mg, 0.75 mmol) u benzenu (1 mL) zagrijavana je na 60°C, tijekom 15 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 357 mg sirovog intermedijera. Sirovi intermedijer (156 mg) je otopljen u EtOAc (6 mL), dodat je 10% Pd/C (16 mg) i smjesa je miješana pod balonom vodika, preko noći. Reakcijska mješavina je filtrirana kroz sloj celita i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm) dobiveno je 160.3 mg (72%) spoja 425B, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.23 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z [M+H]=512.19.

Primjer 426

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[4-(2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (426B)

[image]

A. 1-(4-amino-fenil)-2,2,2-trifluoro-etanol (426A)

[image]

Spoj 426A je izrađen u skladu sa postupkom, opisanim u Stewart,R. et al. Can. J. Chem. 58, 2491-2496 (1980). NaBH4 (47 mg, 1.235 mmol) je dodat otopini p-aminotrifluoroacetofenona (155.7 mg, 0.823 mmol, sintetiziran kao što su opisali Klabunde,K.J. i sur. J. Org. Chem. 35, 1711-1712 (1970)) u izopropanolu (3 mL), na rt. Poslije 30 minuta, reakcija je ugašena fosfatnim puferom (pH 7.2), razrijeđena sa H2O i ekstrahirana sa EtOAc (2 X 10 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 154 mg (98%) spoja 426A, u obliku žutosmeđe čvrste mase. Materijal je, u idućem koraku, korišten izravno, bez pročišćavanja. HPLC: 99% na 0.42 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z [M+H]=192.13.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[4-(2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (426B)

Mješavina spoja 426A (75.3 mg, 0.394), spoja 20A (51.5 mg, 0.262 mmol), trietilamina (0.15 mL) i MgSO4 (50 mg) u toluenu (1 mL) je zagrijavana u zapečaćenoj epruveti do 135°C tijekom 15 h. Smjesa je filtrirana i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm) dobiveno je 63.1 mg (65%) spoja 426B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 2.49 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z [M+H]=370.16.

Primjer 427

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril & (3aα,4α,7α,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (427i & 427ii)

[image]

Spoj 204A (2.00 g, 8.50 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (1.50 g, 5.60 mmol) su miješani u benzenu (5.0 mL) i grijani na 60°C, tijekom 14 h, a zatim su ohlađeni do 25°C. Otapalo je uklonjeno na 40°C, pod vakuumom, tijekom 1 h, da bi se dobio sirovi materijal, koji je pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 0.5% EtOAc/CH2Cl2, da bi se dobilo 2.0 g spoja 427i i 1.3 g spoja 427ii, oba u obliku svijetlo smeđih čvrstih masa. Spoj 427i: HPLC: 95% na 4.200 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 507.1 [M+H]+. Spoj 427ii: HPLC: 95% na 4.20 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 507.1 [M+H]+.

Primjer 428

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (428i & 428ii)

[image]

Spoj 427i (1.40 g, 2.77 mmol) i RhCl(PPh3)3 (0.128 g, 0.14 mmol) su miješani u tikvici. Tikvica je, zatim, ispražnjena i punjena argonom tri puta, a potom je preko šprica dodat THF (3.0 mL). Čim su sve čestice otopljene, dodavan je, kap po kap, kateholboran (0.59 mL, 5.54 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, pod argonom, tijekom 30 minuta, a zatim je ohlađena do 0°C. Dodat je fosfatni pufer (pH 7, 20 mL), a zatim EtOH (10 mL) i 30% H2O2/H2O (2 mL). Reakcijska smjesa je miješana na 0°C, tijekom 3 h, a zatim je ekstrahirana diklorometanom (3 x 25 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 1N NaOH (25 mL), 10% Na2SO3 (25 mL) i slanom otopinom (25 mL). Sirovi materijal je, zatim, ukoncentriran in vacuo i pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 2% EtOAc/CH2Cl2 do 10% EtOAc/CH2Cl2, da bi se dobilo 0.63 g racemske smjese spojeva 428i & 428ii, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 99% na 3.867 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 525.1 [M+H].

Racemska smjesa spojeva 428i & 428ii je odvojena preparativnom kiralnom HPLC normalne faze, korištenjem Chiracel OD kolone (5cmx50cm), uz eluaciju sa 13% otapala B (EtOAH) u otapalu A (heksani), sa brzinom protoka: 50 mL/min. Spoj 428i je eluiran od 34 min do 38 min, a spoj 428ii je eluiran od 44 min do 49 min. Enantiomerni višak je određen pomoću kiralne HPLC. Spoj 428i: >99% ee (12.576 min (retencijsko vrijeme) (Chiralcel OJ kolona 4.6 x 250 mm, uz eluaciju sa izokratskim 85% heptan / 15% MeOH / etanol (1:1), 1 mL/min, praćenje na 220 nm, 40°C). Spoj 428ii: 99% ee (18.133 min (retencijsko vrijeme) (Chiralcel OJ kolona 4.6 x 250 mm, uz eluaciju sa izokratskim 85% heptan/15% MeOH/etanol (1:1), 1 mL/min, praćenje na 220 nm, 40°C).

Apsolutna konformacija za spojeve 428i & 428ii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 428i ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 428ii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 428i ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 428ii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

Primjer 429

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (429i & 429ii)

[image]

Spoj 428i (180 mg, 0.34 mmol) je otopljen u 2% HCl/EtOH (5.0 mL). Poslije 30 minuta, dodat je zasićeni NaHCO3, a vodeni sloj je ekstrahiran diklorometanom (20 mL x 3), ispran slanom otopinom i osušen preko Na2SO4, da bi se dobilo 135 mg spoja 429i, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.257 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 411.1 [M+H]+.

Prethodni postupak je ponovljen sa spojem 428ii, da bi se dobilo željeni diol spoj 429ii, u sličnom prinosu.

Primjer 430

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5- hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (430)

[image]

Trifenilfosfin (0.026 g, 0.098 mmol) i DBAD (0.023 g, 0.098 mmol) su miješani u THF-u (0.5 mL). Pošto je prethodna mješavina ostavljena reagirati tijekom 15 minuta, dodat je 2-hidroksi-6-kloropiridin (0.016 g, 0.100 mmol), mješavina je ostavljena da se miješa tijekom 10 minuta i dodat je spoj 429i (0.020 g, 0.049 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 2 h, a zatim je sirovi materijal pročišćen preparativnom TLC, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3, da bi se dobilo 0.014 g spoja 430, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.370 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 522.08 [M+H]+.

Primjer 431

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5- hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (431)

[image]

Trifenilfosfin (0.026 g, 0.098 mmol) i DBAD (0.023 g, 0.098 mmol) su miješani u THF-u (0.5 mL). Pošto je prethodna mješavina ostavljena reagirati tijekom 15 minuta, dodat je 2-hidroksi-6-kloropiridin (0.016 g, 0.100 mmol), mješavina je ostavljena da se miješa tijekom 10 minuta i dodat je spoj 429ii (0.020 g, 0.049 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 2 h, a zatim je sirovi materijal pročišćen preparativnom TLC, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3, da bi se dobilo 0.015 g spoja 431, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.370 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 522.08 [M+H]+.

Primjer 432

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-N-(2-hidroksifenil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-butanamid (432)

[image]

Spoj 262 (0.100 g, 0.239 mmol) je otopljen u DMF (bezvodn, 1.5 mL), dodat je BOP (0.211 g, 0.478 mmol), a zatim 2-aminofenol (0.052 g, 0.478 mmol) i N-metil morfolin (0.052 mL, 0.478 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, pod argonom, tijekom 3 h, a zatim je sirovi materijal pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 0.060 g spoja 432, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.037 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 510.34 [M+H]+.

Primjer 433

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[3-(2-benzoksazolil)propil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (433)

[image]

Trifenilfosfin (0.031 g, 0.118 mmol) i DBAD (0.027 g, 0.118 mmol) su miješani u THF-u (0.5 mL). Pošto je prethodna mješavina ostavljena reagirati tijekom 15 minuta, dodat je spoj 432 (0.030 g, 0.059 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 2 h, a zatim je sirovi materijal pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 0.018 g spoja 433, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.357 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 492.37 [M+H]+.

Primjer 434

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[4-etiloktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (434C)

[image]

A. terc-butil-[2-(5-etil-furan-2-il)-etoksi]-dimetil-silan (434A)

[image]

Imidazol (255 mg, 3.75 mmol) i TBSCl (414 mg, 2.75 mmol) su dodati otopini spoja 245A (350 mg, 2.5 mmol) u DMF-u (4 mL). Smjesa je miješana na rt, tijekom 15 h, a zatim je dodato 100 mg (0.66 mmol) dodatnog TBSCl, da usmjeri reakciju k završavanju. Nakon miješanja tijekom dodatnih sat vremena, reakcijska mješavina je razrijeđena dietileterom (100 mL) i isprana vodom (20 mL), 1N HCl (20 mL), vodom (20 mL) i slanom otopinom (20 mL). Organski sloj je osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 509 mg spoja 434A (80.3%), u obliku žutog ulja.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]oksi]etil]-4-etil-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (434B)

[image]

Otopina spoja 434A (509 mg, 2.00 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (498 mg, 2.00 mml) u benzenu (2 mL) je zagrijavana na 60°C, tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 992 mg (99%) sirovog spoja 434B, koje je u idućem koraku korišten izravno, bez daljeg pročišćavanja.

C. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]oksi]etil]-4-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (434C)

[image]

Mješavina spoja 434B (992 mg, 1.98 mmol) i RhCl2(PPh3)3 (183 mg, 0.198 mmol) je ispražnjena i punjena argonom (3X). Dodat je THF (20 mL) i čim su sve čestice otopljene, dodavan je, polako, kap po kap, kateholboran (0.42 mL, 3.96 mmol). Kada je prestalo stvaranje proizvoda, što je utvrđeno HPLC-om, reakcijska mješavina je ohlađena do 0°C i ugašena fosfatnim puferom (34 mL, pH 7.2), a zatim je uslijedilo dodavanje EtOH (19 mL) i 30% H2O2 (2.9 mL). Poslije 2 h, dodati su dodatni fosfatni pufer (6.8 mL, pH 7.2), EtOH (3.8 mL) i H2O2 (0.6 mL). Reakcijska smjesa je miješana na rt, tijekom 3 h. Čim je potrošen boratni intermedijer, mješavina je ekstrahirana sa CH2Cl2 (300 mL), a sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 1N NaOH, 10% vodenim NaHSO3 i slanom otopinom, a zatim su osušeni preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 75 mg (9.3%) spoja 434C, u obliku sive čvrste mase. HPLC uvjeti: 97% na 2.43 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona, 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 407.18 [M+H]+.

D. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[4-etiloktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (434D)

Spoj 434C (24 mg, 0.046 mmol) je otopljen u 2% conc. HCl/EtOH (0.8 mL) i smjesa je miješana na rt, tijekom 20 minuta. Hladni zasićeni NaHCO3 je dodavan mješavini dok otopina nije postala bazna (pH 8). Reakcijska smjesa je ekstrahirana sa EtOAc (3 x 2 mL), a sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom (2 x 5 mL) i osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 14 mg (75%) spoja 434D, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95% na 2.40 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm).

Primjer 435

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-4-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (435)

[image]

DBAD (39.6 mg, 0.172 mmol) je dodat otopini PPh3 (45.1 mg, 0.172 mmol) u THF (0.8 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (20.5 mg, 0.172 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom još 5 minuta. Dodat je spoj 434C (25.0 mg, 0.062 mmol) i mješavina je miješana na rt, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem preparativnom TLC, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3, dobiveno je 18.1 mg (0.036 mmol, 57.6%) spoja 435. HPLC uvjeti: 96% na 3.15 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 508.14 [M+H]+.

Primjer 436

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-1-naftalenil)oktahidro-N-(2-hidroksifenil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-4H-izoindol-4-etanamid (436)

[image]

Spoj 234B (0.100 g, 0.256 mmol) je otopljen u DMF (bezvodni, 1.5 mL), dodat je BOP (0.225 g, 0.51 mmol), a zatim 2-aminofenol (0.056 g, 0.51 mmol) i N-metil morfolin (0.056 mL, 0.51 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, pod argonom, tijekom 3 h, a zatim je sirovi materijal pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 0.078 g spoja 436, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.037 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 482.34 [M+H]+.

Primjer 437

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-(2-benzoksazolilmetil)oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (437)

[image]

Trifenilfosfin (0.082 g, 0.312 mmol) i DBAD (0.072 g, 0.312 mmol) su miješani u THF-u (0.5 mL). Pošto je prethodna mješavina ostavljena reagirati tijekom 15 minuta, dodat je spoj 436 (0.075 g, 0.156 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C, tijekom 2 h, a zatim je sirovi materijal pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 0.052 g spoja 437, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.443 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 464.18 [M+H]+.

Primjer 438

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[4-[2,2,2-trifluoro-1-hidroksi-1-(trifluorometil)etil]fenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (438)

[image]

Mješavina 2-(4’-aminofenil)-1,1,1,3,3,3-heksafluoro-2-propanola (95.7 mg, 0.369), spoja 20A (48.3 mg, 0.246 mmol), trietilamina (0.15 mL) i MgSO4 (50 mg) u toluenu (1 mL) je grijana na 135°C, preko noći, u zapečaćenoj epruveti. Smjesa je filtrirana i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, 20-100% vodeni metanol, tijekom 15 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm) dobiveno je 44.0 mg (41%) spoja 438, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.10 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z [M+H]=438.14.

Primjeri 439 do 454

Dodatni spojevi ovog izuma su pripremljeni postupcima, koji su analogni onima, koji su prethodno opisani. Spojevi iz Primjera 439 do 454 imaju slijedeću strukturu (L je veza):

[image]

gdje su G, R7, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i korišteni postupak, navedeni u Tablici 9. Apsolutna konfiguracija za slijedeće spojeve nije određena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 243Di ovdje je navedeno da ima “S” konfiguraciju, a za spoj 243Dii da ima “R” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 243Di ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 243Dii ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju. Isto tako, za spoj 428i ovdje je navedeno da ima “S” konfiguraciju, a za spoj 428ii da ima “R” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 428i ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 428ii ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju.

Kromatografske tehnike, korištene za određivanje retencijskih vremena spojeva iz Tablice 9, su slijedeće: LCMS=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS*=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC=YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Molekulska masa spojeva navedenih u Tablici 9 određena je pomoću MS (ES), pomoću formule m/z.

Tablica 9

[image] [image] [image] [image]

Primjeri 455 do 457

Još neki spojevi ovog izuma su proizvedeni prema postupcima, koji su analogni onima, opisanim gore. Spojevi Primjera 455 do 457 imaju slijedeću strukturu (L je veza):

[image]

gdje su: G, R7, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i upotrijebljena procedura objašnjeni u Tablici 10. Apsolutna konfiguracija za slijedeće spojeve nije određena. Radi pojednostavljenja u nomenklaturi, spoj 238i je ovdje označeno kao da ima “R” konfiguraciju, a spoj 238ii kao da ima “S” konfiguraciju. Enantiomerno čisti proizvodi izvedeni od spoja 238i su ovdje označeni kao da imaju “R” konfiguraciju, a enantiomerno čisti proizvodi izvedeni od spoja 238ii su ovdje označeni kao da imaju “S” konfiguraciju.

Kromatografske tehnike, koje su upotrijebljene za određivanje retencijskih vremena spojeva iz Tablice 10 su, kao što slijedi: LCMS = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm uz eluiranje sa 10-90% MeOH/H2O tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS* = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm uz eluiranje sa 10-90% MeOH/H2O tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC = YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm uz eluiranje sa 10-90% MeOH/H2O tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. Molekulska masa spojeva, nabrojanih u Tablici 10, određena je putem MS (ES), pomoću formule m/z.

Tablica 10

[image]

Primjer 458

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (221B & 222D)

[image]

Spoj 20B je biotransformacijom preveden u spojeve 221B i 222D (također, sintetizirani kao spojevi 221B i 222D).

Spoj 20B je hidroksiliran pomoću Amycolatopsis orientalis (ATCC 43491). 1 mL kulture iz zamrznute bočice upotrijebljen je za inokulaciju 100 mL medija u Erlenmeyerovoj tikvici od 500 mL, a tikvica je inkubirana na 28°C, na 200 rpm tijekom 3 dana. 10 mililitarski dio ove kulture upotrijebljen je za inokulaciju 100 mL medija u Erlenmeyerovoj tikvici od 500 mL, a tikvica je inkubirana na 28°C, na 200 rpm tijekom 1 dana. 10 mililitarski dijelovi 1-dnevne kulture su raspoređeni u svaku od tri tikvice od 50 mL. Spoj 20B (3 mg u 0.1 mL metanola) je dodat svakoj kulturi, a inkubacije su nastavljene tijekom 3 dana. Kultura bujona u svakoj tikvici je ekstrahirana sa 20 mL etila acetata, a onda su sjedinjeni (pool) etil acetatni ekstrakti upareni do suha, na 40°C, pod strujom dušika. Ostatak je otopljen u 1.2 mL metanola i analiziran pomoću HPLC, LC/MS i LC/NMR. Otopina je sadržavala 2.5 mg preostalog spoja 20B, 1.6 mg spoja 221B i 1.3 mg spoja 222D. MS i NMR analize su bile u saglasnosti sa gore prikaznim strukturama.

Medij: 0.5% pržene nutrisoje, 2% glukoze, 0.5% ekstrakta kvasca, 0.5% K2HPO4, 0.5% NaCl, doteran do pH 7, sa HCl (R.V. Smith i J.P. Rosazza, Arch. Biochem. Biophys., 161, 551-558 (1974)

HPLC analiza

Kolona: Phenomenex Luna C18, 150x2 mm, 5 μ

mobilna faza: otapalo A: 95% 20 mM amonij acetat pH 5.1, 5% acetonitril

otapalo B: 95% acetonitril, 5% 20 mM amonij acetat pH 5.1

linearni gradijent, koji kreće od 100% otapala A do 5% otapala A tijekom 25 minuta, nakon čega je uslijedilo uravnotežavanje sa 100% otapala A tijekom 8 minuta.

temperatura: 40°C

detekcija: 250 nm

injekcijski volumen: 1 μL

retencijska vremena: spoj 20B, 20.8 min; spoj 221B, 16.5 min; spoj 222D, 17.8 min

HPLC uvjeti

Uvjeti kiralne HPLC su upotrijebljeni za odvajanje enantiomera, a uvjeti akiralne HPLC su korišteni za odvajanje dijastereomera hidroksiliranih analoga spoja 20B (tj., spojeva 221B i 222D i spojeva 254i i 254ii).

Dva postupka su korištena pod uvjetima kiralne HPLC, reverzna faza (RP) za kiralnu analizu proizvoda biotransformacije u biološkim uzorcima i normalna faza (NP) za ne-biološke uzorke.

Uvjeti kiralne RP-HPLC

[image]

Uvjeti kiralne NP-HPLC

[image]

Pod ovim uvjetima spojevi 254i i 254ii su imali retencijska vremena od 8.5 minuta, odnosno 9.85 minuta.

Reverzno fazna HPLC je upotrijebljena za odvajanje dijastereomernih spojeva 221B i 222D:

Mobilna faza:

otapalo A: 95% 20 mM amonij acetat pH 5.1, 5% acetonitril

otapalo B: 95% acetonitril, 5% 20 mM amonij acetat pH 5.1

Gradijent:

Linearni gradijent, koji kreće od 100% otapala A do 5% otapala A tijekom 25 minuta, nakon čega je uslijedilo uravnotežavanje sa 100% otapala A tijekom 8 minuta. Ukupno vrijeme rada 36 minuta.

Brzina protoka:

0.2 mL/min

Kolona:

Phenomenex Luna 5 mikrona C18 150X2.0 mm id

Detekcija:

UV mjerenje na 242 nm.

Pod ovim uvjetima spoevi 221B i 222D su imali retencijska vremena od 18.983 min, odnosno 20.362 min.

Primjer 459

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalekarbonitril (459)

[image]

Spojevi 223A i 331 su, biotransformacijom, prevedeni u spoj 459.

Hidroksilacija mikrorganizmima spoja 223A

1. Reakcija

U tikvicu od 500 mL, koja sadrži 100 mL medija za transformaciju, dodata je jedna zamrznuta bočica (približno 2 mL) Streptomyces griseus ATCC 10137. Medij za transformaciju pripremljen je na slijedeći način: u plastičnu posudu od 2 L dodato je 20 g dekstroze, 5.0 g ekstrakta kvasca, 5.0 g sojinog brašna, 5.0 g natrij klorida, 5.0 g kalij fosfata (dvobaznog) i 1L deionizirane vode, i smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tijekom 3 do 30 minuta. pH smjese je zatim dotjeran do 7.0, sa 1N HCl ili 1N NaOH. Stvorena mješavina je raspodijeljena u tikvice od 500 mL (100 mL po tikvici). Tikvice su pokrivene Bio/Wrap-om, autoklavirane na 121°C tijekom 15 minuta i ohlađene do sobne temperature prije upotrebe.

Kultura je inkubirana na 28°C i 250 rpm tijekom 24 sata. Deset mL stvorene kulture je preneseno u tikvicu od 50 mL, u koju je dodat 1 mg spoja 223A u 0.2 mL etanola. Tikvica je inkubirana na 28°C i na 250 rpm tijekom 24 sata, a reakcijska kultura je ekstrahirana sa EtOAc (10 mL). EtOAc ekstrakt je osušen pod N2, a ostatak je otopljen u 1 mL MeOH (reakcijski ekstrakt).

2. Analiza produkta

10 μL reakcijskog ekstrakta je injicirano na HPLC kolonu (YMC ODS-AQ C-18 kolona, 150 x 6.0 mm i.d.). Kolona je eluirana sa 1mM HCl u vodi/CH3CN, pri brzini protoka od 1.2 mL/min: 30 do 60% CH3CN tijekom 8 min, 60 do 85% CH3CN tijekom 0.5 min, 85% CH3CN tijekom 1 min, 85 do 30% CH3CN tijekom 0.5 min. Eluenti su praćeni na 300 nm. Zapažena su dva glavna pika sa odnosom površina otprilike 1 prema 1, koji su imali iste UV spektre, kao što su oni spojeva 459 i 331, a imali su retencijska vremena od 4.55 min, odnosno 7.23 min, koja se podudaraju sa retencijskim vremenima autentičnih uzoraka spoja 459 (4.53 min) i spoja 331 (7.2 min).

LC/MS

Reakcijski ekstrakt: dva glavna UV pika.

Pik 1, Tr 4.68 min: 391 [M+H]+, 343, 319, 303, 289

Pik 2, Tr 5.35 min: 375 [M+H]+, 345

Autentični uzorci

Spoj 459, Tr 4.82 min: 391 [M+H]+, 343, 319, 289

Spoj 331, Tr 5.48 min: 375 [M+H]+, 345

Hidroksilacija mikrorganizmima spoja 331

U tikvicu od 500 mL, koja sadrži 100 mL medija za transformaciju, dodata je jedna zamrznuta bočica (približno 2 mL) Streptomyces griseus ATCC 10137. Medij za transformaciju pripremljen je na slijedeći način: u plastičnu posudu od 2 L dodato je 20 g dekstroze, 5.0 g ekstrakta kvasca, 5.0 g sojinog brašna, 5.0 g natrij klorida, 5.0 g kalij fosfata (dvobaznog) i 1L deionizirane vode, i smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tijekom 3 do 30 minuta. pH mješavine je zatim dotjeran do 7.0, sa 1N HCl ili 1N NaOH. Stvorena mješavina je raspodijeljena u tikvice od 500 mL (100mL po tikvici). Tikvice su pokrivene Bio/Wrap-om, autoklavirane na 121°C tijekom 15 minuta i ohlađene do sobne temperature prije upotrebe.

Kultura je inkubirana na 28°C i 250 rpm tijekom 3 dana. Jedan mL stvorene kulture je dodat u tikvicu od 500 mL, koja sadrži 100 mL medija za transformaciju i tikvica je inkubirana na 28°C i 250 rpm tijekom 24 sata. Deset mL stvorene kulture je preneseno u tikvicu od 50 mL, u koju je dodat 1 mg spoja 331 u 0.2 mL etanola. Tikvica je inkubirana na 28°C i 250 rpm tijekom 23 sata. HPLC analiza je pokazala da je odnos površine pika spoja 459 prema spoju 331, u reakcijskoj kulturi bio oko 1.1/1.

Primjer 460

(1aα,2β,2aα,5aα,6βb,6aα)-4-[2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-6-metil-3,5-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno-f]izoindol-4-il]-1-naftalenkarbonitril (460)

[image]

Spoj 231A (2.00 g, 4.10 mmol) je otopljen u diklorometanu (40 mL) i ohlađen do 0°C. Dodata je mCPBA (2.36 g, 8.20 mmol). Reakcijska smjesa je, zatim, zagrijana do sobne temperature i miješana pod argonom, tijekom 18 sati, poslije čega je uslijedilo dodavanje 10% Na2SO3 (25 mL) i zasićenog NaHCO3 (25 mL). Nakon miješanja tijekom 20 minuta, izdvojen je organski sloj, a vodeni sloj je ekstrahiran diklorometanom (3 x 50 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 2.0 g spoja 460, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 99% na 4.00 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex-prime S5-C18 kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z [M+H]=505.19.

Primjer 461

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-etiloktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril & [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-etiloktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (461i & 461ii)

[image]

Racemska smjesa spoja 245C je odvojena preparativnom kiralnom HPLC normalne faze, korištenjem Chiracel AD kolone (5 cm x 50 cm), uz eluaciju sa 20% otapala B (50% MeOH/EtOH) u otapalu A (heptan), sa brzinom protoka: 50 mL/min. Spoj 461i je eluirano od 80 min do 100 min, a spoj 461ii je eluirano od 125 min do 150 min.

Apsolutna konfiguracija za spojeve 461i i 461ii nije određena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 461i ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 461ii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 461i ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 461ii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

Primjer 462

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-7-etiloktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (462)

[image]

DBAD (29.5 mg, 0.128 mmol) je dodat otopini PPh3 (33.6 mg, 0.128 mmol) u THF (0.5 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (15.2 mg, 0.128 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom još 5 minuta. Dodat je spoj 461i (18.3 mg, 0.047 mmol) i mješavina je miješana na rt, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40% EtOAc/heksanom, dobiveno je 16.9 mg (0.034 mmol, 73.2%) spoja 462. HPLC uvjeti: 98% na 3.64 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 492.23 [M+H]+.

Primjer 463

[3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-7-etiloktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (463)

[image]

DBAD (29.5 mg, 0.128 mmol) je dodat otopini PPh3 (33.6 mg, 0.128 mmol) u THF (0.5 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 4-cijanofenol (15.2 mg, 0.128 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom dodatnih 5 minuta. Dodat je spoj 461i (18.3 mg, 0.047 mmol) i mješavina je miješana na rt, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 40% EtOAc/heksanom, dobiveno je 18.1 mg (0.037 mmol, 78.4%) spoja 463. HPLC uvjeti: 97% na 3.63 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, detekcija na 220 nm). MS (ES): m/z 492.17 [M+H]+.

Primjer 464

(1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-5-[2-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-6-metil-3,5-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno[f]izoindol-4-il]-8-kinolinkarbonitril (464H)

[image]

A. 8-bromo-5-nitro-kinolin (464A)

[image]

8-bromokinolin (25.00 g, 120.2 mmol) je otopljen u sumpornoj kiselini (82.5 mL), na rt, a zatim je ohlađen do 0°C. Zatim je polako, tijekom perioda od 10 minuta, dodata HNO3 (dimeća, 32.5 mL). Reakcijska smjesa je, poslije toga, zagrijana do rt, a zatim do 65°C. Poslije 48 h na 65°C, reakcijska smjesa je ohlađena do rt i izlivena na 500 g leda. Ova otopina je ekstrahirana metilen kloridom (5 x 200 mL). Organski slojevi su jednom isprani slanom otopinom i osušeni su preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem je dobiven sirov spoj 464A, u obliku svijetlo žute čvrste mase (28.6 g, 94%). HPLC: 98% na 2.717 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosfornu kiselinu, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. 5-nitro-kinolin-8-karbonitril (464B)

[image]

Spoj 464A (15.0 g, 59.3 mmol) je otopljen u DMF (120 mL) i dodat je cink cijanid (4.20, 35.9 mmol). Zatim su dodati bis(difenilfosfino)ferocen (3.00g, 5.40mmol) i tris(benzilidinaceton)dipaladij (3.00 g, 3.30 mmol) i reakcijska smjesa je zagrijavana na 100°C, tijekom 1.5 h. Reakcijska smjesa je ohlađena do 22°C, a zatim je ulivena u koncentrirani amonij hidroksid (900 mL), što dovodi do stvaranja narančastog precipitata, koji je filtriran i ispran hladnom vodom (1L). Nastali talog je otopljen u metilen kloridu, ispran slanom otopinom (1 x 300mL), a zatim osušen preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiven je sirovi materijal, u obliku narančaste čvrste mase, koji je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa metilen kloridom, kako bi se dobilo 6.01 g (51%) spoja 464B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 1.900 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. 5-amino-kinolin-8-karbonitril (464C)

[image]

Spoj 464B (6.00 g, 30.1 mmol) je otopljen u THF (150 mL) pod refluksom, sa mehaničkim miješanjem. Zatim je dodat EtOH (150 mL), a potom vodeni amonij klorid (2.4 g/225 mL vode). Mješavina je zagrijana na 70°C, a zatim je dodat prašak željeza (325 sito, 6.75 g, 120 mmol), uz snažno mehaničko miješanje. Poslije 1 h, reakcijska smjesa je ohlađena do 22°C i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa metilen kloridom. Filtrat je, zatim, ukoncentriran do ~250 mL, a pH je dotjeran do 10, dodavanjem 1N NaOH. Otopina je, nakon toga, ekstrahirana etil acetatom (5 x 150 mL). Sjedinjeni organski slojevi su jednom isprani slanom otopinom (250 mL), a zatim su osušeni preko bezvodnog magnezij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 5.09 g (100%) spoja 464C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 1.143 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 170.16 [M+H]+.

D. 5-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-kinolin-8-karbonitril (464D)

[image]

Spoj 464C (7.00 g, 41.4 mmol) i maleinski anhidrid (6.00 g, 62.1 mmol) su sjedinjeni u zapečaćenoj epruveti i dodat je THF (10 mL). Reakcijska smjesa je grijana na 115°C, tijekom 15 minuta, a zatim je ohlađena do sobne temperature, što izaziva taloženje intermedijera kiselog amida. Čvrsta masa je filtrirana i isprana hladnim THF-om, da bi se dobilo 11.0 g kiselog proizvoda, u obliku žute čvrste mase. Prethodnom kiselom amidu dodat je, u zapečaćenoj epruveti, Ac2O (25 mL), mješavina je grijana na 100°C, tijekom 15 minuta, a zatim je ohlađena do sobne temperature. Nastala čvrsta masa je filtrirana i isprana hladnim dietil eterom, da bi se dobilo 8.30 g (80%) spoja 464D, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 97% na 1.783 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

E. (3aα,4β,7β,7aα)-5-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (464E)

[image]

Spoj 464D (6.00 g, 24.1 mmol) je otopljen u mješavini benzena (80 mL) i acetona (20 mL), potom je slijedilo dodavanje spoja 204A (14.46 g, 60.15 mmol). Smjesa je zagrijavana na 80° tijekom 14 h, a zatim ohlađena do 22°C. Poslije koncentriranja in vacuo na 40°C, uslijedilo je dodavanje acetona (40 mL) i ponovno koncentriranje na 40°C. Stvoreno žuto ulje je pročišćeno flash kromatografijom na koloni, na silika gelu, uz eluaciju sa 0 – 10% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 9.98 g (85%) spoja 464E, u obliku žutog ulja. NMR spektroskopija je pokazala da je spoj 464E jedan izomer. HPLC: 97% na 3.853 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 490.35 [M+H]+.

F. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-5-[2-[2-[[(1,1-dimetiletil) dimetilsilil] oksi]etil] oktahidro-6-metil-3,5-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno[f]izoindol-4-il]-8- kinolinkarbonitril (464F)

[image]

Otopini spoja 464E (0.050 g, 0.10 mmol) u diklorometanu (2 mL) dodata je mCPBA (60%-tna smjesa, 0.063 g, 0.22 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 16 h, a zatim su dodati dodatni diklorometan (20 mL), zasićeni NaHCO3 (10 mL) i 10% Na2SO3 (10 mL). Smjesa je snažno miješana tijekom 40 minuta, organski sloj je, zatim, izdvojen, ispran jednom slanom otopinom i osušen preko Na2SO4. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 48 mg (96%) spoja 464F, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 98% na 3.783 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 506.25 [M+H]+.

G. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-5-[oktahidro-2-(2-hidroksietil)-6-metil-3,5-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno[f]izoindol-4-il]-8-kinolinkarbonitril (464G)

[image]

Spoj 464F (1.30 g, 2.57 mmol) je otopljen u 2% conc. HCl/EtOH (50 mL). Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 1 h, a zatim su dodati zasićeni NaHCO3 (50 mL) i diklorometan (100 mL). Organski sloj je izdvojen, jednom ispran slanom otopinom i osušen preko Na2SO4. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 930 mg (93%) spoja 464G, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 98% na 1.863 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 392.20 [M+H]+.

H. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-5-[2-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] oktahidro-6-metil-3,5-diokso-2,6-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno[f]izoindol-4-il]-8-kinolinkarbonitril (464H)

Trifenilfosfin (25 mg, 0.096 mmol) i DBAD (22 mg, 0.096 mmol) su miješani u THF-u (0.5 mL), pod argonom. Poslije 5 minuta, dodat je 5-kloro-2-piridinol (13 mg, 0.096 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 22°C, tijekom dodatnih 10 minuta, a zatim je dodat spoj 464G (25 mg, 0.064 mmol). Reakcijska mješavina je miješana na 22°C, pod argonom, tijekom 3 h, a zatim je ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen preparativnom TLC na silika gelu, uz eluaciju sa 10% acetonom u kloroformu, da bi se dobilo 11 mg (23%) spoja 464H, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.177 (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 503.14 [M+H]+.

Primjer 465

(3aα,4β,7β,7aα)-5-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (465)

[image]

Spoj 464E (2.40 g, 4.91 mmol) je otopljen u etil acetatu i dodat je Pd/C (10% Pd, 0.50 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 3 h, reakcijska smjesa je očišćena dušikom i filtrirana kroz celit, uz ispiranje etil acetatom. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 2.39 g (99%) spoja 465, u obliku žutog ulja. HPLC: 95% na 4.013 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 492.22 [M+H]+.

Primjer 466

(3aα,4β,7β,7aα)-5-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (466)

[image]

Spoj 465 (1.40 g, 2.85 mmol) je otopljen u 2% conc. HCl/MeOH (20 mL) i miješan je na 22°C, tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ukoncentrirana do ~5 mL zapremine, a reakcija je ugašena minimalnom količinom zasićenog vodenog natrij bikarbonata. Ova otopina je, zatim, ekstrahirana metilen kloridom (3 x 30 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.893 g (93%) spoja 466, u obliku žute čvrste mase. Ovaj materijal je preuzet bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 98% na 2.140 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378.25 [M+H]+.

Primjer 467

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (467Bi) & [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (467Bii)

[image]

A. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (467Ai) & [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil] oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (467Aii)

[image]

Spojevi 465 su odvojena na svoje pojedinačne antipode, preparativnom kiralnom HPLC normalne faze. Korištena je Chiralcel OD kolona (50 x 500 mm) sa brzinom protoka od 50 mL/min (16% EtOH/heksani) i praćenjem na 220 nm. Antipodni spoj 467Ai, koje se brže eluira, imao je retencijsko vrijeme od 40.85 min (>99% ee), a sporije antipodni spoj 467Aii, imao je retencijsko vrijeme od 62.81 min (>99% ee). Oba antipoda su izolirana, poslije separacije, kao bijele čvrste mase. Apsolutna konfiguracija za spojeve 467Ai & 467Aii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 467Ai ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 467Aii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 467Ai ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 467Aii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

B. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (467Bi) & [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (467Bii)

Oba antipoda su oslobođena zaštite, kao što je opisano u primjeru 464G, da bi se dobili odgovarajući alkoholi, spojevi 467Bi i 467Bii, u obliku bijelih čvrstih masa:

Spoj 467Bi: HPLC: 98% na 2.110 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378.21 [M+H]+.

Spoj 467Bii: HPLC: 98% na 2.117 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378.20 [M+H]+.

Primjer 468

(3aα,4β,7β,7aα)-8-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-5-kinoksalinkarbonitril (468C)

[image]

A. 8-nitro-kinoksalin-5-karbonitril (468A)

[image]

2,3-diamino-4-nitro-benzonitril (0.050 g, 0.28 mmol, kao što je pripremljen u WO-98/32439) je dodat otopini glioksala (40% u vodi, 0.032 mL, 0.28 mmol) u octenoj kiselini (0.75 mL) i miješan je na 22°C, tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je ohlađena do 0°C, dodata je voda (2.0 mL), a pH je dotjeran do 9.0 dodavanjem amonij hidroksida, koji izaziva precipitaciju proizvoda. Mješavina je, zatim filtrirana i isprana hladnom vodom. Sušenjem in vacuo dobiveno je 0.039 g (70%) spoja 468A, u obliku narančaste čvrste mase. HPLC: 100% na 2.037 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. 8-amino-kinoksalin-5-karbonitril (468B)

[image]

Spoj 468A (0.200 g, 1.00 mmol) je suspendiran u octenoj kiselini (5.0 mL) i dodat je prašak željeza (sito 325, 0.112 g, 2.00 mmol). Reakcijska smjesa je zatim, zagrijavana na 70°, u toku 20 minuta, a zatim je ohlađena do 22°C. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa etil acetatom. Etil acetatni isprani dio je sakupljen i ispran zasićenim vodenim K2CO3. Vodeni sloj je ekstrahiran etil acetatom (3 x 20 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko bezvodnog magnezij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.170 g (100%) spoja 468B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 88% na 1.677 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 171.29 [M+H]+.

C. (3aα,4β,7β,7aα)-8-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-5-kinoksalinkarbonitril (468C)

Spoj 468B (0.060 g, 0.35 mmol) je suspendiran u toluenu (1.0 mL) sa magnezij sulfatom (0.060 g) i spojem 20A (0.104 g, 0.529 mmol). Zatim je dodata TEA (0.2 mL), a mješavina je zagrijavana do 145°C, u zapečaćenoj epruveti. Poslije 16 h, reakcijska smjesa je ohlađena do 22°C i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa acetonom. Mješavina je ukoncentrirana in vacuo, a zatim je pročišćena preparativnom TLC, na silika gelu, uz eluaciju sa 7% etil acetat/metilen kloridom. Ovim je dobiveno 0.018 g (15%) spoja 468C, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.040 i 2.133 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 349.33 [M+H]+.

Primjer 469

(3aα,4β,7β,7aα)-1,2,3,4-teterahidro-8-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-5-kinoksalinkarbonitril (469B)

[image]

A. 8-amino-1,2,3,4-teterahidro-kinoksalin-5-karbonitril (469A)

[image]

Spoj 468A (0.037 g, 0.18 mmol) je otopljen u mješavini etil acetat (1.0 mL)/etanol (1.0 mL) i dodat je 10% Pd/C (0.050 g). Zatim je, preko balona, uveden vodik. Poslije 2 h, reakcijska mješavina je očišćena dušikom i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa etil acetatom. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 0.029 g (90%) spoja 469A, u obliku crvenog ulja, koje je preuzeto bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 97% na 3.217 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-1,2,3,4-teterahidro-8-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-5-kinoksalinkarbonitril (469B)

Spoj 469A (0.029 g, 0.17 mmol) je suspendiran u toluenu (1.0 mL) sa magnezij sulfatom (0.030 g) i spojem 20A (0.050 g, 0.256 mmol). Zatim je dodata TEA (0.2 mL), a mješavina je zagrijavana do 145°C, u zapečaćenoj epruveti. Poslije 48 h, reakcijska smjesa je ohlađena do 22°C i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa acetonom. Mješavina je ukoncentrirana in vacuo, a zatim je pročišćena preparativnom TLC, uz eluaciju sa 20% acetonom u kloroformu. Ovim je dobiveno 0.014 g (24%) spoja 469B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 85% na 2.267 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 353.19 [M+H]+.

Primjer 470

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-1-izokinolinkarbonitril (470E)

[image]

A. 4-bromo-izokinolin 2-oksid (470A)

[image]

Otopina 4-bromoizokinolina (4.16 g, 18.6 mmol) u 100 mL kloroforma dodavan je, kap po kap, tijekom 1 h, otopini 70% mCPBA (12.4 g, 50.3 mmol) u 100 mL kloroforma, na sobnoj temperaturi. Poslije miješanja tijekom 16 h, reakcijska smjesa je isprana sa 1N NaOH (2 x 150 mL), osušena preko magnezij sulfata i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobilo 4.23 g (94%) spoja 470A, u obliku zatvoreno bijele čvrste mase. 1H NMR-400 MHz (CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.09 (d, 1H, J=8 Hz), 7.70 (m, 3H).

B. 4-bromo-izokinolin-1-karbonitril (470B)

[image]

1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (1.67 mL, 11.2 mmol) je dodat mješavini spoja 470A (1.12 g, 5.00 mmol) i cijanotrimetilsilana (0.75 mL, 5.5 mmol) u 35 mL THF. Nastala homogena smjesa je podvrgnuta refluksu tijekom 20 minuta. Po ukoncentriravanju in vacuo, ostatak je pročišćen flash kromatografijom na 5 x 15 cm koloni silika gela, uz eluaciju sa 3:1 heksan:etil acetatom, da bi se dobilo 0.95 g (82%) spoja 470B, u obliku bijelog praška. 1H NMR (400 MHz,CDCl3): δ 8.85 (s, 1H), 8.36 (d, 1H, J=8.5 Hz), 8.28 (d, 1H, J=8.5 Hz), 7.96 (t, 1H, J=8.5 Hz), 7.89 (t, 1H, J=8.5 Hz).

C. 4-(2,4-dimetoksi-benzilamino)-izokinolin-1-karbonitril (470C)

[image]

Mješavina spoja 470A (699 mg, 3.00 mmol) i 2,4-dimetoksibenzilamina (4.8 mL, 30 mmol) u 15 mL acetonitrila je podvrgnuta refluksu, tijekom 16 h. Po ukoncentriravanju in vacuo, ostatak je pročišćen na 5 x 15 cm silika gel koloni, uz eluaciju sa 3:2 heksan:etil acetatom, da bi se dobilo 290 mg (30%) spoja 470C, u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 1.76 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex C-18, 5 mikrona kolona, 4.6 x 30 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm).

D. 4-amino-izokinolin-1-karbonitril (470D)

[image]

Spoj 470C (50 mg, 0.16 mmol) je obrađen trifluorooctenom kiselinom (0.5 mL), tijekom 1 h. Vrlo obojena mješavina je raspodijeljena između etil acetata (30 mL) i 1N NaOH (30 mL). Po ispiranju slanom otopinom (15 mL), organski sloj je osušen iznad magnezij sulfata i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo 24 mg (92%) spoja 470D, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 99% na 1.09 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex C-18, 5 mikrona kolona, 4.6 x 30 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm). MS (ES+): m/z 170.2 [M+H]+.

Alternativni put do sinteze spoja 470D je slijedeći. Mješavina spoja 470B (1.17 g, 5.02 mmol), benzofenon imina (1.05 mL, 6.26 mmol), paladij acetata (25 mg, 0.11 mmol), rac-2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftila (100 mg, 0.161 mmol) i cezij karbonata (2.30 g, 7.06 mmol) u 20 mL toluena je grijana na 100°C, tijekom 20 h. Reakcijska mješavina je razrijeđena etil eterom (200 mL) i filtrirana kroz celit. Poslije koncentriranja filtrata, ostatak je razrijeđen u 120 mL THF-a i obrađen je sa 40 mL 1N HCl. Poslije stajanja na sobnoj temperaturi, tijekom 2 h, smjesa je raspodijeljena između etil acetata (150 mL) i 0.25 N NaOH (160 mL). Po ispiranju slanom otopinom (100 mL), organski sloj je osušen preko magnezij sulfata. Organski sloj je filtriran i ~50 g celita je dodato filtratu. Nakon koncentriranja in vacuo, praškasti ostatak je pročišćen flash kromatografijom na 5 x 15 cm silika gel koloni, uz eluaciju sa 1L svakog od 1:1 etil acetat:heksan, 6:4 etil acetat:heksan i 8:2 etil acetat:heksan, da bi se dobilo 450 mg (53%) spoja 470D, u obliku žutog praška.

E. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-1-izokinolinkarbonitril (470E)

Mješavina spoja 470D (24 mg, 0.14 mmol), spoja 20A (55 mg, 0.28 mmol), trietilamina (0.1 mL), magnezij sulfata (100 mg), 2-metoksietiletera (0.5 mL) i DMF (0.1 mL) je grijana u zapečaćenoj posudi, do 250°C, tijekom ukupno 2.5 h, koristeći mikrovalno sredstvo za zagrijavanje. Poslije raspodjeljivanja reakcijske mješavine između etil acetata (25 mL) i vode (25 mL), organski sloj je osušen preko magnezij sulfata i ukoncentriran in vacuo. Približno polovina ostatka je pročišćena reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min). Koncentriranjem čiste frakcije dobiveno je 6 mg (12%) spoja 470E, u obliku bijelog praška. HPLC: 99% na 1.42 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex C-18, 5 mikrona kolona, 4.6 x 30 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm). MS (ES+): m/z 348.23 [M]+.

Primjer 471

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (471Di) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (471Dii)

[image]

A. 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitril (471A)

[image]

Mješavina 3-trifluorometil-4-cijano-anilina (24.0 g, 129 mmol) i maleinskog anhidrida (14.0 g, 143 mmol) u 50 mL octene kiseline grijana je preko noći na 115°C. Tijekom perioda zagrijavanja dobiven je precipitat. Reakcijska smjesa je ostavljena da stoji na rt, tijekom dodatnog perioda tijekom noći. Čvrsta masa je odstranjena filtracijom, a filterska masa je isprana dietil eterom i osušena, kako bi se dobio 21 g (79 mmol, 61%) spoja 471A, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.11 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (471B)

[image]

Suspenzija spoja 471A (13.0 g, 48.8 mmol) i 2,5-dimetilfurana (10.5 mL, 98.6 mmol) u 50 mL toluena je zagrijana na 60°C, pod argonom. Otopina je dobivena na početku zagrijavanja, a talog je zapažen poslije otprilike 1 h. Grijanje je nastavljeno preko noći. Nakon hlađenja do rt, suspenzija je ostavljena da stoji na 4°C, preko noći. Nastala čvrsta masa je filtrirana, a filterska masa je isprana hladnim toluenom, poslije čega je slijedilo sušenje na zraku, kako bi se dobilo 13.2 g čistog spoja 471B, u obliku bijele čvrste mase. Zapremina filtrata je smanjena in vacuo za oko polovinu, a nastala otopina je obrađena, kao prethodno, da bi se dobilo dodatnih 2.8 g čistog spoja 471B (ukupno 16.0 g, 90%). HPLC: 90% na 3.65 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (471C)

[image]

Otopina spoja 471B (25 mg, 69 mmol) u 125 mL THF-a, u suhom balonu, pod dušikom, ohlađena je do 10°C, pomoću ledene kupelji. Ovoj otopini je dodavan, kap po kap, tijekom 10 minuta, čisti bor-dimetilsulfid kompleks (13.0 mL, 138 mmol), uz održavanje temperature reakcije <15°C. Reakcijska mješavina je miješana tijekom 30 minuta, na rt, a zatim je u ledenoj kupelji ohlađena do 10°C. Hladnoj otopini je polako dodato 480 mL fosfatnog pufera pH 7, što je dovelo do jake egzotermne reakcije i snažnog razvijanja plina. Tijekom dodavanja temperatura otopine je održavana na <21°C, pomoću ledene kupelji. Nastaloj otopini je dodato 240 mL etanola, a stvorena mješavina je ohlađena do 5°C, pomoću ledene kupelji. Ohlađenoj otopini je dodato 50 mL 30% vodik peroksida, a stvorena mješavina je miješana na 10-20°C, tijekom 1.5 h. Smjesa je ekstrahirana etil acetatom (2 x 1 L), a sjedinjeni organski slojevi su isprani 10%-tnim natrij sulfitom (1 x 500 mL) i slanom otopinom (2 x 300 mL) i osušeni preko MgSO4. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 29 g sirovog proizvoda, u obliku bijele čvrste mase. Ovaj materijal je podvrgnut flash kromatografiji na 1.2 L koloni od silika gela, koja je uravnotežena sa 100% CH2Cl2. Materijal je apliciran na kolonu kao otopina, koji je sastavljen od 100 mL EtOAc (toplog) i 400 mL CH2Cl2. Početnom eluacijom sa CH2Cl2 (3 L), koju slijedi eluacija sa 25% EtOAc/75% CH2Cl2 (3 L) i konačno 50% EtOAc/50% CH2Cl2 (6 L), dobiveno je 11.8 g (45%) spoja 471C, koji je racemska smjesa.

Alternativno, spoj 471C može biti izrađen slijedećim pristupom: Suhi balon, koji sadrži spoj 471B (8.90 g, 24.6 mmol) i Wilkinsonov katalizator (0.57 mg, 0.62 mmol) je oslobođen plina 4 x sa vakuum/argonom. U balon je dodat THF (40 mL) i smjesa je miješana, dok se ne dobije bistri smeđi otopina. Zatim je dodavan, kap po kap, tijekom 20 minuta, kateholboran (49 mL, 49 mmol, 1M u THF), i zapažen je blagi egzoterm. Miješanje je nastavljeno tijekom 45 minuta, a zatim je uslijedilo hlađenje reakcijske mješavine pomoću ledene kupelji. polako je dodat fosfatni pufer pH 7 (175 mL), a zatim je slijedilo uzastopno dodavanje etanola (87 mL) i 30% vodik peroksida (18 mL). Nastavljeno je miješanje, uz hlađenje, a tok reakcije je praćen pomoću HPLC-a, tijekom 4 h. Reakcijska smjesa je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 250 mL). Sjedinjeni ekstrakti su isprani 1:1 mješavinom 1N NaOH:15% natrij sulfit (300 mL) i slanom otopinom i osušeni preko MgSO4, a otapalo je odstranjeno in vacuo, da bi se dobilo 8.5 g žutosmeđe čvrste mase. Sirovi proizvod je podvrgnut flash kromatografiji na silika gel koloni od 500 cm2, uz eluaciju sa gradijentom 25-50% EtOAc/CH2Cl2, da bi se dobilo 6.00 g spoja 471C (15.8 mmol, 64%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 90% na 2.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+.

D. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (471Di) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (471Dii)

Pojedinačni antipodi spoja 471C izdvojeni su preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK AD, 5 x 50 cm kolona). Porcija od 2.5 g spoja 471C otopljena je u 25 mL toplog acetona i razrijeđena do 50-75 mL sa heksanom za injekcije. Izokratskom eluacijom sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 50 mL/min, dobiven je spoj 471Di, koji se brže eluira (Kiralna HPLC: 10.02 min; CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min) i spoj 471Dii, koji se sporije eluira (Kiralna HPLC: 14.74 min; CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). Spojevi 471Di & 471Dii: HPLC: 90% na 2.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spojeva 471Di & 471Dii određena je ispitivanjima difrakcije X zraka jednog kristala i, bila je kao što je opisana navedenom nomenklaturom.

Nastale HPLC-om pročišćene frakcije spojeva 471Di & 471Dii dalje su pročišćene kristalizacijom, korištenjem bilo kojeg od dolje opisanih postupaka.

1) Iz etil acetata

Količina od 700 mg spoja 471Di, dobivena po kiralnoj kromatografiji, kao što je gore opisano, otopljena je u etil acetatu (10 mL), na rt. Otopina je razrijeđena malim porcijama heksana (20 mL), dok se ne primjeti zamućenje. Otopina je ostavljena da stoji preko noći na rt. Nastala bijela čvrsta masa je filtrirana i sušena na zraku, da bi se dobilo 430 mg spoja 471Di, u obliku bijelog praška. Ovaj uzorak je dalje sušen na 60°C (3 h, 0.5 Tor), a zatim na 70° (12 h, 0.5 Tor).

2) Iz acetona

Količina od 500 mg spoja 471Di, dobivena poslije kiralne kromatografije, kao što je gore opisano, otopljena je u minimalnoj količini acetona (3 mL) i polako razrijeđena sa heksanom (1 mL). Bistra bezbojna otopina je ostavljena da stoji preko noći na rt. Nastala bijela čvrsta masa je filtrirana i sušena na zraku, da bi se dobilo 440 mg spoja 471Di, u obliku bijelog praška. Ovaj uzorak je dalje sušen na 60°C (3 h, 0.5 Tor), a zatim na 70° (12 h, 0.5 Tor).

3) Iz metanola

Količina od 500 mg spoja 471Di, dobivena nakon kiralne kromatografije, kao što je gore opisano, otopljena je u 5 mL vrućeg (parna kupelj) metanola. Bistra bezbojna otopina je ostavljena da stoji na rt, tijekom 2 h, a zatim na 4°C preko noći. Nastala čvrsta masa je filtrirana, isprana minimalnom količinom hladnog metanola i sušena na zraku, da bi se dobilo 360 mg spoja 471Di, u obliku bijelog praška. Ovaj uzorak je dalje sušen na 70° (12 h, 0.5 Tor).

4) Iz CH2Cl2

Količina od 7.00 g spoja 471Di, dobivena poslije kiralne kromatografije, kao što je gore opisano, otopljena je u 75 mL CH2Cl2, na rt. Bistra i bezbojna otopina je polako razrijeđena heksanom (48 mL), dok se ne zapazi kristalizacija. Otopina je ostavljena da stoji na rt, tijekom 1 h, a zatim na 4°C preko noći. Stvoreni kristalni materijal je filtriran, a zatim je ispran minimalnom količinom hladne mješavine 2:1 CH2Cl2:heksan. Veliki kristali su usitnjeni do finog praška i sušeni na 50° (12 h, 0.5 Tor), da bi se dobilo 5.96 g spoja 471Di, u obliku bijelog praška.

Primjer 472

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (472)

[image]

Otopina spoja 471B (500 mg, 1.38 mmol) u etil acetatu (10 mL), koji sadrži 10% Pd/C (25 mg, kat.) je miješana na rt, pod atmosferom vodika, uvedenog putem balona. Poslije 2h, reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, a filterski sloj je ispran sa EtOAc. Bistri, bezbojni filtrat je ukoncentriran in vacuo, da bi se dobio 501 mg (1.38 mmol, 100%) spoja 472, u obliku bijele čvrste mase. Nije zahtjevano dalje pročišćavanje. HPLC: 99% na 3.04 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 382.2 [M+NH4]+.

Primjer 473

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[5-(acetiloksi)oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (473)

[image]

Otopini spoja 471C (1.50 g, 3.95 mmol) u 10 mL piridina, ohlađenom do 0°C, pod argonom, je dodavan, kap po kap, octeni anhidrid (0.42 mL, 4.4 mmol), a zatim DMAP (5 mg, 0.04 mmol). Miješanje je nastavljeno na rt, tijekom 4 h. Otopina je ukoncentrirana in vacuo, a nastali ostatak je razrijeđen etil acetatom i ispran uzastopno sa 1N HCl (2x), slanom otopinom (2x), zasićenim NaHCO3 i slanom otopinom (2x). Organski sloj je osušen preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo. Nastala čvrsta masa je sušena na 60°C (20 h, 0.5 Tor), da bi se dobilo 1.55 g (3.67 mmol, 93%) spoja 473, u obliku bijele kristalne čvrste mase. HPLC: 99% na 2.10 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex Luna C18 kolona, 2 x 30 mm, 0-100% vodeni acetonitril, tijekom 3 minuta, koji sadrži 10 mM NH4OAc, pri 1 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 421.4 [M-H]-.

Primjer 474

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(2-metil-4-benzoksazolil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (474F)

[image]

A. 2-metil-4-nitrobenzoksazol (474A)

[image]

2-amino-3-nitrofenolu (6.17 g, 40.0 mmol) je dodat trietilortoacetat (25.96 g, 160.0 mmol) i mješavina je grijana na 100°C, tijekom 12 h, da bi se dobila tamno crvena otopina. Hlađenjem do sobne temperature proizvedena je kristalna masa, koja je filtrirana i isprana heksanom, da bi se dobio spoj 474A (6.78 g, 95%), u obliku svijetlo kestenjastih iglica. HPLC: 98.1% na 1.86 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 179.08 [M+H]+.

B. 4-amino-2-metilbenzoksazol (474B)

[image]

Spoj 474A (6.78 g, 38.1 mmol) je otopljen u mješavini 1:1 10% octena kiselina/etil acetat (ukupni volumen 100 mL) i zagrijan do 65°C. Dodavan je, dio po dio, prašak željeza (10.63 g, 190.2 mmol). Poslije miješanja, tijekom 3 h, TLC je pokazala kompletan utrošak polaznog materijala. Ohlađena reakcijska mješavina je filtrirana kroz podlogu od celita, a podloga je isprana sa 50 mL etil acetata. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom (2 x 25 mL) i slanom otopinom (1 x 25 mL), osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 25% eter/CH2Cl2, da bi se dobilo 3.90 g (69%) spoja 474B, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 95.8% na 2.43 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 149.11 [M+H]+.

C. 4-amino-7-bromo-2-metilbenzoksazol (474C)

[image]

Spoj 474B (3.90 g, 26.3 mmol) je otopljen u DMF-u (45 mL), ohlađeno do -5°C, i dodavan je, u malim porcijama, N-bromosukcinimid (4.68 g, 26.3 mmol), a reakcijska mješavina je miješana tijekom 5 h. Smjesa je ulivena u 150 mL ledene vode, da bi se dobila krem obojena čvrsta masa, koja je filtrirana, isprana vodom, otopljena u CH2Cl2, sušena preko MgSO4, filtrirana i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem sirovog materijala flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20% eter/CH2Cl2, dobiveno je spoj 474C (3.36 g, 56%), u obliku bež čvrste mase. HPLC: 95.4% na 2.583 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 228.03 [M+H]+.

D. 1-(7-bromo-2-metil-benzoksazol-4-il)-pirol-2,5-dion (474D)

[image]

Spoj 474C (1.40 g, 6.17 mmol) je otopljen u 20 mL octene kiseline, dodat je maleinski anhidrid (0.635 g, 6.47 mmol) i reakcijska mješavina je grijana pod refluksom, pod dušikom, tijekom 5 h. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a sirovi proizvod je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% eter/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 474D (1.73 g, 91%), u obliku blijedo žute čvrste mase. HPLC: 93.6% na 1.36 min (Phenomenex kolona, 30 x 4.6 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 5 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 308.02 [M+H]+.

E. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-bromo-2-metil-4-benzoksazolil)-3a,4,7,7a-teterahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (474E)

[image]

Spoj 474D (0.307 g, 1.00 mmol) je otopljen u benzenu (2 mL) i dodat je, preko šprica, 2,5-dimetilfuran (0.154 g, 1.60 mmol). Reakcijska smjesa je grijana do 60°C tijekom 12 h. Ohlađena reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo, na 40°C, da bi se dobio spoj 474E, u obliku sivobijele pjene, koja je, u idućem koraku, korištena izravno, bez pročišćavanja.

F. (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(2-metil-4-benzoksazolil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (474F)

Spoj 474E (0.403 g, 1.00 mmol) je otopljen u EtOH/EtOAc (4 mL/4mL) i dodat je 10% Pd/C (100 mg). Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, tijekom 6 h, pod atmosferom H2, koja je omogućena pomoću balona, a zatim je filtrirana kroz celit. Koncentriranjem filtrata in vacuo dobivena je smeđa čvrsta masa. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3 (250 mL), 15% aceton/CHCl3 (250 mL) i 20% aceton/CHCl3 (250 mL) dobiveno je spoj 474F (0.089 g, 27%), u obliku bijele pjene. HPLC: 91% na 2.28 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 328.34 [M+H]+.

Primjer 475

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(7-bromo-2-metil-4-benzoksazolil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (475)

[image]

Spoj 474E (0.202 g, 0.501 mmol) je otopljen u 1/1 EtOAc/EtOH (10 mL) i dodat je 10% Pt/C (100 mg). Reakcijska smjesa je miješana na sobnoj temperaturi, pod balonom H2, tijekom 6 h. Reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% eter/CH2Cl2, dobiveno je 0.063 g (31%) spoja 475, u obliku bezbojnog ulja, koje je očvrslo stajanjem, dajući bijelu čvrstu masu. HPLC: 92.5% na 2.83 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 406.21 [M+H]+.

Primjer 476

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[2-(trifluorometil)-4-benzoksazolil]- 4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (476D)

[image]

A. 4-nitro-2-trifluometilbenzoksazolil (476A)

[image]

2-amino-3-nitrofenol (10.00 g, 64.88 mmol) je dodat u 100 mL trifluorooctenog anhidrida, koji se snažno miješa, a stvorena smjesa je miješana na sobnoj temperaturi tijekom 12 h. Otapalo je uklonjen in vacuo, da bi se dobila tamno plava čvrsta masa, koja je otopljena u 200 mL CH2Cl2 i isprana uzastopno sa 10% NaOH (2 x 100 mL), vodom (100 mL) i slanom otopinom (100 mL) i osušena preko MgSO4. Filtriranjem i koncentriranjem in vacuo dobiven je spoj 476A (10.78 g, 72%) u obliku smeđe čvrste mase. Dalje pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 92.9% na 2.43 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. 4-amino-2-trifluorometilbenzoksazol (476B)

[image]

Spoj 476A (10.75 g, 46.30 mmol) je otopljen u 1:1 mješavini EtOAc/10% HOAc (250 mL) i zagrijan do 65°C. Dodavan je, dio po dio, prašak željeza (12.93 g, 231.5 mmol), a reakcijska mješavina je miješana tijekom 6 h na 65°C. Po hlađenju, mješavina je filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran sa H2O (3 x 100 mL) i slanom otopinom (100 mL), osušen preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo smeđe ulje. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 70/30 CH2Cl2/heksani, da bi se dobio spoj 476B (7.02 g, 75%), u obliku žute kristalne čvrste mase. HPLC: 96.7% na 2.68 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. 1-(2-trifluorometil-benzoksazol-4-il)-pirol-2,5-dion (476C)

[image]

Spoj 476B (0.500 g, 2.48 mmol) je otopljen u octenoj kiselini (10 mL) i dodat je maleinski anhidrid (0.267 g, 2.72 mmol). Smjesa je grijana pod refluksom, tijekom 3 h i ohlađena, a otapalo je odstranjeno in vacuo, da bi se dobila žutosmeđa čvrsta masa. Sirovi proizvod je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 2% MeOH/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 476C (0.40 g, 57%), u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 89.7% na 2.38 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 283.21 [M+H]+.

D. (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[2-(trifluorometil)-4-benzoksazolil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (476D)

Spoj 476C (0.24 g, 0.85 mmol) i 2,5-dimetilfuran (0.132 g, 1.37 mmol) su sjedinjeni u 3 mL benzena, u zapečaćenoj epruveti, i grijani su na 60°C, tijekom 12 h. Smjesa je ohlađena i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobilo žuto ulje, koje je otopljeno u 1/1 EtOAc/EtOH (6 mL). Dodat je 10% Pd/C (100 mg) i mješavina je miješana pod balonom H2, tijekom 3.5 h. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, a otapalo je uklonjeno in vacuo, da bi se dobio sirovi proizvod, u obliku blijedo žutog ulja. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 2% Et2O/CH2Cl2, dobiveno je 0.107 g (33%) spoja 476D, u obliku bijele pjene. HPLC: 96.5% na 2.80 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.17 [M+H]+.

Primjer 477

(3aα,4β,7β,7aα)-2-metil-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-7-benzoksazolkarbonitril (477E)

[image]

A. 2-cijano-5-nitrofenol (477A)

[image]

3,4-metilendioksinitrobenzen (1.67 g, 10.0 mmol) je otopljen u 20 mL HMPA i dodat je natrij cijanid (0.49 g, 10.0 mmol). Reakcijska smjesa je grijana do 150°C, pod dušikom, i dodate su, tri porcije natrij cijanida (0.245 g, 5.00 mmol, ukupno), tijekom 15 minuta. Temperatura reakcije je održavana na 150°C, tijekom 45 minuta, reakcijska smjesa je ohlađena i ulivena u 50 mL H2O, poslije čega je uslijedilo dodavanje 50 mL 5% NaOH. Vodeni sloj je ekstrahiran eterom (2 x 25 mL), a organski sloj je uklonjen. Bazični vodeni sloj je pažljivo zakiseljen do pH 4, dodavanjem 10% HCl, i ekstrahiran je eterom (3 x 25 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom (25 mL), sušeni preko natrij sulfata i ukoncentrirani in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 1.05 g (64%) spoja 477A, u obliku žuto-smeđe čvrste mase. HPLC: 91.6% na 1.03 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex kolona, 30 x 4.6 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 5 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 165.23 [M+H]+.

B. 2-amino-4-cijano-3-hidroksinitrobenzen (477B)

[image]

Spoj 477A (0.438 g, 2.67 mmol) je otopljen u 25 mL DMSO i dodat je trimetilhidrazinij jodid (0.534 g, 2.67 mmol). Dodavan je, pod N2, natrij pentoksid (0.880 g, 8.01 mmol), da bi se dobila otopina intenzivno crvene boje, a miješanje je nastavljeno tijekom noći, na rt. Reakcijska smjesa je ulivena u 50 mL 10% HCl i ekstrahirana je sa EtOAc (2 x 25 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani vodom (25 mL) i slanom otopinom (25 mL), osušeni preko natrij sulfata i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobio spoj 477B, u obliku masne crvene čvrste mase, koja je u slijedećem koraku korištena izravno, bez daljeg pročišćavanja.

C. 7-cijano-2-metil-4-nitrobenzoksazol (477C)

[image]

Spoj 477B (0.360 g, 2.01 mmol) i trietil ortoacetat (1.30 g, 8.04 mmol) su sjedinjeni i grijani pod refluksom, pod dušikom, tijekom 1 h. Otapalo je odstranjeno in vacuo, a nastali ostatak je pročišćen flash kromatografijom, uz eluaciju sa 5% eter/CH2Cl2, da bi se dobilo 0.255 g (63%) spoja 477C, u obliku smeđe čvrste mase. HPLC: 98.4% na 1.80 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 204.28 [M+H]+.

D. 4-amino-7-cijano-2-metilbenzoksazol (477D)

[image]

Spoj 477C (0.156 g, 0.77 mmol) je otopljen u 1:1 mješavini EtOAc/10% HOAc (20 mL) i zagrijano do 65°C. Dodat je prašak željeza (325 sito, 0.214 g, 3.83 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom 4 h. Ohlađena mješavina je filtrirana kroz celit, a stvoreni filtrat je ispran vodom (25 mL) i slanom otopinom (25 mL), osušen preko MgSO4 i ukoncentriran, da bi se dobio spoj 477D (0.118 g, 89%), u obliku narančaste čvrste mase. HPLC: 87% na 2.03 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 174.05 [M+H]+.

E. (3aα,4β,7β,7aα)-2-metil-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-7-benzoksazolkarbonitril (477E)

Spoj 477D (0.060 g, 0.35 mmol) i spoj 20A (0.071 g, 0.37 mmol) su sjedinjeni u zapečaćenoj epruveti sa toluenom (2 mL), trietilaminom (0.24 mL, 1.7 mmol) i MgSO4 (0.104 g, 0.866 mmol). Zapečaćena epruveta je grijana na 135°C, tijekom dva dana. Ohlađena reakcijska smjesa je razrijeđena sa EtOAc, filtrirana i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio sirovi proizvod, u obliku smeđeg ulja. Pročišćavanjem flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju sa 1/1 EtOAc/heksani, dobiveno je 0.014 g (12%) spoja 477E, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 96.5% na 2.27 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 352.23 [M+H]+.

Primjer 478

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-(4-cijanofenoksi)etil]oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, enantiomer koji se sporo eluira (478)

[image]

n-BuLi (0.050 mL, 1.6 M, 0.075 mmol) je dodat otopini spoja 244ii (33.7 mg, 0.0683 mmol) u THF (1.0 mL), na -78°C, pod argonom. Reakcijska smjesa je zagrijana do sobne temperature i dodat je, kap po kap, metil fluorosulfonat (0.010 mL, 0.12 mmol). Čim je polazni materijal potrošen, što je utvrđeno HPLC-om, reakcija je ugašena sa H2O, a stvorena vodena mješavina je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 5 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC [22.09 min (YMC S5 ODS kolona, 20 x 100 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 25 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm)], dobiveno je 13.0 mg (38%) spoja 478, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 93% na 3.35 min (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 508.17 [M+H]+.

Primjer 479

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(2-metil-6-benzoksazolil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (479B)

[image]

A. 2-metil-6-aminobenzoksazol (479A)

[image]

Otopini 2-metil-6-nitrobenzoksazola (100 mg, 0.560 mmol) u AcOH (2 mL) je dodato željezo u prahu (sito 325, 63.0 mg, 1.12 mmol), na 70°C, u jednoj porciji. Poslije 15 minuta na 70°C, dodat je dodatni prašak željeza (sito 325, 63.0 mg, 1.12 mmol) i miješanje je nastavljeno u toku 15 minuta. Mješavina je ohlađena i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Nastali ostatak je pokupljen u EtOAc i ispran zasićenim Na2CO3, a zatim sa H2O. Organski sloj je osušen preko MgSO4, ukoncentriran pod smanjenim pritiskom i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom od 0 do 25% EtOAc u CH2Cl2, da bi se dobilo 69 mg (83%) spoja 479A, u obliku čvrste mase. HPLC: 97% na 0.24 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 149.2 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(2-metil-6-benzoksazolil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (479B)

Spoj 479A (30 mg, 0.20 mmol), MgSO4 (60 mg, 0.50 mmol), trietilamin (140 μL, 1.00 mmol) i spoj 20A (45 mg, 0.23 mmol) su uvedeni u 0.25 mL toluena i stavljeni u zapečaćenu epruvetu. Zapečaćena epruveta je grijana na 135°C, tijekom 14 dana, a reakcijska mješavina je ostavljena da se ohladi do rt. Mješavina je filtrirana kroz kratki sloj celita, uz eluaciju sa MeOH, a otapalo je uklonjen in vacuo. Ostatak je pročišćen flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom od 0 do 50% EtOAc u CH2Cl2, da bi se dobilo 49 mg (65%) spoja 479B, u obliku žuto-smeđe čvrste mase. HPLC: 98% na 2.30 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 326.9 [M+H]+.

Primjer 480

(3aα,4β,7β,7aα)-2-(2,1,3-benzoksadiazol-5-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (480B)

[image]

A. 5-amino-2,1,3-benzoksadiazol (480A)

[image]

Otopini 2,1,3-benzoksadiazol-5-karboksilne kiseline (102 mg, 0.621 mmol) u THF (3 mL) je dodat trietilamin (103 μL, 0.739 mmol), a zatim DPPA (160 μL, 0.739 mmol), na sobnoj temperaturi. Smjesa je miješana tijekom 4 h, razrijeđena sa CH2Cl2 i isprana vodom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, ukoncentriran i pročišćen flash kromatografijom, na silika gelu, sa 0 do 50% EtOAc u CH2Cl2. Nastali materijal je otopljen u AcOH (2 mL) i dodata je, kap po kap, voda (0.7 mL), što je dovelo do stvaranja blago zamućene otopine, koja je grijana na 105°C, tijekom 30 minuta. Mješavina je ohlađena, prevedena u alkalnu reakciju, sa zasićenom otopinom Na2CO3, i ekstrahirana nekoliko puta sa THF. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4, ukoncentrirani i pročišćeni flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 0 do 15% MeOH u CH2Cl2, da bi se dobilo 34 mg (41%) spoja 480A, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 1.27 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 136.0 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(2,1,3-benzoksadiazol-5-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (480B)

Spoj 480A (34 mg, 0.25 mmol), MgSO4 (76 mg, 0.63 mmol), trietilamin (180 μL, 1.26 mmol) i spoj 20A (74 mg, 0.38 mmol) su otopljeni u 0.25 mL toluena i stavljeni u zapečaćenu epruvetu. Zapečaćena epruveta je grijana na 135°C, tijekom 14 h. Ohlađena reakcijska mješavina je filtrirana kroz kratku podlogu od celita, uz eluaciju sa acetonom, a otapalo je odstranjeno in vacuo. Ostatak je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min). Koncentriranjem željenih frakcija dobiven je ostatak, koji je raspodijeljen između CH2Cl2 i zasićene otopine NaHCO3. Vodeni sloj je jednom ekstrahiran sa CH2Cl2, a sjedinjene organske faze su osušene preko Na2SO4. Koncentriranjem pod smanjenim pritiskom dobiveno je 42 mg (53%) spoja 480B, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.62 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ=7.91 (d, 1H), 7.90 (dd, 1H), 7.37 (dd, 1H), 3.09 (s, 2H), 1.85 (s, 4H), 1.67 (s, 6H).

Primjer 481

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] heksahidro-5-hidroksi-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481D) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] heksahidro-5-hidroksi-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481E)

[image]

A. 1-benzotiazol-6-il-pirol-2,5-dion (481A)

[image]

Mješavina 5-aminobenzotiazola (2.00 g, 13.3 mmol) i maleinskog anhidrida (1.96 g, 20.0 mmol) u AcOH (27 mL) je grijana na 115°C, tijekom 20 h. Smjesa je ohlađena i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Ostatak je pokupljen u THF i ispran zasićenim Na2CO3. Vodeni sloj je nekoliko puta ekstrahiran sa THF, a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju 0 do 50% EtOAc u CH2Cl2, dobiveno je 1.37 g (45%) spoja 481A, u obliku blijedo žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.62 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 231.0 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(6-benzotiazolil)-4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-3a,4,7,7a-teterahidro-7-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481B)

[image]

Suspenzija spoja 481A (445 mg, 1.93 mmol) i spoja 204A (929 mg, 3.87 mmol) u benzenu (2 mL) je zagrijana do 60°C, i dodavan je aceton dok se ne dobije bistra otopina. Stvorena smjesa je miješana na 60°C, tijekom 24 h, a zatim je polako ukoncentrirana in vacuo. Nastali ostatak je otopljen u acetonu i polako ukoncentriran in vacuo. Ovaj postupak je ponovljen ukupno tri puta. Pročišćavanjem flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju 0 do 30% acetonom u heksanima, dobiveno je 820 mg (90%) spoja 481B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.62 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 471.3 [M+H]+.

C. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)-7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]heksahidro-5-hidroksi-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481Ci) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)-7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]heksahidro-5-hidroksi-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481Cii)

[image]

Otopini spoja 481B (75 mg, 0.16 mmol) u THF-u (1 mL) dodat je Wilkinson-ov katalizator (32 mg, 0.030 mmol) i kateholboran (1.0 M u THF, 1.6 mL, 1.6 mmol), na sobnoj temperaturi, pod dušikom. Stvorena mješavina je miješana tijekom 2.5 h, prije nego što je ohlađena do 0°C. Redom su dodati: EtOH (5 mL), 3N NaOH (2 mL) i H2O2 (30%, 1 mL), i smjesa je miješana tijekom 2 h na 0°C. Reakcija je prekinuta dodatkom hladnog 10% otopine Na2SO3 (višak), a zatim vode. Vodeni sloj je ekstrahiran nekoliko puta sa CH2Cl2, a sjedinjeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4. Koncentriranjem pod smanjenim pritiskom, a zatim pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, dobiveno je 13 mg (17%) racemske smjese spoja 481Ci & 481Cii, u obliku žuto-smeđe čvrste mase. HPLC: 96% na 3.58 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 489.3 [M+H]+. Racemska mješavina je odvojena na svoje pojedinačne enantiomere pomoću preparativne kiralne HPLC normalne faze (CHIRALPAK AD 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski), pri 50 mL/min), da bi se dobio spoj 481Ci, enantiomer, koji se brže eluira: (Kiralna HPLC: 9.40 min; CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min) i spoj 481Cii, enantiomer, koji se sporije eluira: (Kiralna HPLC: 10.47 min; CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). Apsolutna konformacija za spojeve 481Ci & 481Cii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 481Ci ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 481Cii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 481Ci ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 481Cii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

D. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]heksahidro-5-hidroksi-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481D)

Spoj 481Ci (84 mg, 0.17 mmol) je suspendiran u EtOH (2 mL) i dodata je conc. HCl (40 μL) na sobnoj temperaturi. Smjesa je miješana tijekom 15 minuta, prije nego što je dodato nekoliko kapi zasićene otopine NaHCO3. Koncentriranjem pod smanjenim pritiskom, dobiven je ostatak, koji je raspodijeljen između CH2Cl2 i zasićene otopine NaHCO3. Vodeni sloj je nekoliko puta ekstrahiran sa CH2Cl2, i na kraju sa EtOAc. Sjedinjene organske faze su osušene preko Na2SO4, ukoncentrirane i pročišćene preparativnom TLC, uz eluaciju sa 50% acetonom u CHCl3. Ovaj postupak je služio da se ukloni TBS grupa sa spoja 481Ci, dajući slobodni primarni alkohol. Porcija od 12 mg (0.03 mmol) slobodnog alkohola spoja 481Ci je reagirala sa 5-kloro-2-piridinolom (8 mg, 0.06 mmol), PPh3 (17 mg, 0.060 mmol) i di-terc-butilazodikarboksilatom (15 mg, 0.060 mmol) u THF (0.5 mL), u skladu sa općim postupkom, opisanim u Primjeru 244. Smjesa je miješana tijekom 24 h, na sobnoj temperaturi i razrijeđena sa 1N NaOH, a vodeni sloj je ekstrahiran nekoliko puta sa CH2Cl2. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, ukoncentrirani i pročišćeni preaparativnom TLC, uz eluaciju sa 25% acetonom u CHCl3, da bi se dobilo 9 mg (58%) spoja 481D, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 2.94 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 486.2 [M+H]+.

E. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]heksahidro-5-hidroksi-4-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (481E)

Kao što je opisano u Primjeru 481D, spoj 481Cii (58 mg, 0.12 mmol) je obrađen sa EtOH (2 mL), koji sadrži 12 N HCl (40 μL), da bi se dobio proizvod, slobodni primarni alkohol spoja 481Cii. 15 mg (0.040 mmol) slobodnog alkohola spoja 481Cii je reagirao sa 5-kloro-2-piridinolom (10 mg, 0.080 mmol), PPh3 (21 mg, 0.080 mmol) i di-terc-butilazodikarboksilatom (18 mg, 0.080 mmol) u THF (0.5 mL), na način, opisan prethodno, a nastali proizvod je pročišćen kao što je prethodno opisano, da bi se dobilo 8 mg (41%) spoja 481E, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.93 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 486.2 [M+H]+.

Primjer 482

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482F) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482G)

[image]

A. 7-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-benzo[1,2,5]tiadiazol-4-karbonitril (482A)

[image]

Maleinski anhidrid (667 mg, 6.80 mmol) je dodat otopini spoja 424A (600 mg, 3.41 mmol) u THF (9 mL). Mješavina je grijana na 110°C, tijekom 10 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, a ostatku je dodat octeni anhidrid (1 mL). Reakcijska smjesa je zagrijavana tijekom 30 minuta na 75°C, a zatim je ohlađena do rt. Pročišćavanjem flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju sa 3% aceton/CHCl3, dobiveno je 758 mg (2.96 mmol, 67%) spoja 482A. HPLC: 97% na 1.98 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 257.01 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-7-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482B)

[image]

Otopina spoja 482A (758 mg, 2.96 mmol) i spoja 204A (711 mg, 2.96 mmol) u benzenu (2 mL) i acetonu (2 mL) je zagrijavana na 60°C, tijekom 6 h. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo, na 42°C, tijekom 40 minuta, da bi se dobilo 1.5 g sirovog spoja 482B, koji je, u idućem koraku, upotrijebljen izravno, bez daljeg pročišćavanja.

C. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-7-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482C)

[image]

Boran-dimetilsulfidni kompleks (0.66 mL, 6.96 mmol) je dodat otopini spoja 482B (1.15 g, 2.32 mmol) u THF (6 mL), na 0°C. Poslije miješanja na 0°C, tijekom 2 h, reakcijska smjesa je ugašena fosfatnim puferom (60 mL, pH 7.2), a zatim su dodati: EtOH (35 mL), H2O2 (8 mL, 30% vodeni) i THF (4 mL). Reakcijska mješavina je miješana na 0°C, tijekom 1 h, a zatim je ekstrahirana sa CH2Cl2 (4 x 100 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 10% vodenim Na2SO3 (1 x 160 mL), a zatim slanom otopinom (1 x 160 mL), i osušeni su preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom, na silika gelu, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3, dobiveno je 250 mg (0.486 mmol, 21%) spoja 482C, u obliku narančaste čvrste mase. HPLC: 85% na 3.70 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 515.27 [M+H]+.

D. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil] oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482Di & 482Dii)

[image]

Racemski spojevi 482C su odvojeni pomoću preparativne kiralne HPLC normalne faze, korištenjem Chiracel OD kolone (5 cm x 50 cm), uz eluaciju sa 10% EtOH u heksanu, pri 50 mL/min, da bi se dobio spoj 482Di, koji se brže eluira (Kiralna HPLC: 11.89 min; CHIRALCEL OD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 12% EtOH u heksanu, pri 2 mL/min) i spoj 482Dii, koji se sporije eluira (Kiralna HPLC: 16.10 min; CHIRALCEL OD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 12% EtOH u heksanu, pri 2 mL/min). Apsolutna konformacija za spojeve 482Di & 482Dii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 482Di ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 482Dii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 482Di ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 482Dii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

E. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482Ei) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482Eii)

[image]

Spoj 482Di (91 mg, 0.18 mmol) je otopljen u 2% 12N HCl/EtOH (3.0 mL), a smjesa je miješana na rt, tijekom 20 minuta. Mješavini je dodavan hladni zasićeni NaHCO3, dok ne postane alkalna (pH 8). Reakcijska mješavina je ekstrahirana sa EtOAc. Organski slojevi su, zatim, isprani slanom otopinom i osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobivena su 73 mg (0.18 mmol, 100%) spoja 482Ei, u obliku žute čvrste mase, koja nije dalje pročišćavana. HPLC: 95% na 1.73 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 401.13 [M+H]+.

Spoj 482Dii (90 mg, 0.17 mmol) je otopljen u 2% 12N HCl/EtOH (3.0 mL) i smjesa je miješana na rt, tijekom 20 minuta. Mješavini je dodavan hladni zasićeni NaHCO3, dok ne postane alkalna (pH 8). Reakcijska smjesa je ekstrahirana sa EtOAc. Organski slojevi su, zatim, isprani slanom otopinom i sušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 70 mg (0.17 mmol, 100%) spoja 482Eii, u obliku žute čvrste mase, koja nije dalje pročišćavana. HPLC: 90% na 1.74 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 401.14 [M+H]+.

F. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482F)

DBAD (21 mg, 0.090 mmol) je dodat otopini PPh3 (24 mg, 0.090 mmol) u THF (0.4 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 5-kloro-2-piridinol (12 mg, 0.090 mmol), a reakcijska smjesa je miješana tijekom dodatnih 5 minuta. Dodat je spoj 482Ei (18 mg, 0.045 mmol) i mješavina je miješana na rt, tijekom 1 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem preparativnom TLC, uz eluaciju sa 20% aceton/CHCl3, dobiveno je 12 mg (0.023 mmol, 52%) spoja 482F. HPLC: 98% na 3.15 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 512.11 [M+H]+.

G. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzotiadiazol-4-karbonitril (482G)

DBAD (21 mg, 0.090 mmol) je dodat otopini PPh3 (24 mg, 0.090 mmol) u THF (0.4 mL). Poslije miješanja tijekom 10 minuta, dodat je 5-kloro-2-piridinol (12 mg, 0.090 mmol), a reakcijska smjesa je miješana tijekom dodatnih 5 minuta. Dodat je spoj 482Eii (18 mg, 0.045 mmol) i smjesa je miješana na rt, tijekom 1 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem preparativnom TLC, uz eluaciju sa 20% aceton/CHCl3, dobiveno je 11 mg (0.021 mmol, 47.0%) spoja 482G. HPLC: 98% na 3.15 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 512.15 [M+H]+.

Primjer 483

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-il ester (1S,4R)-4,7,7-trimetil-3-okso-2-oksabiciklo[2.2.1]heptan-1-karboksilne kiseline (483)

[image]

Otopini spoja 471Di (25 mg, 0.066 mmol) u 0.25 mL CH2Cl2, na rt, pod argonom, dodata je otopina (1S)-(-)-kamfanske kiseline (20 mg, 0.10 mmol) u 0.2 mL CH2Cl2. Zatim je dodata otopina DCC (20 mg, 0.10 mmol) u 0.25 mL CH2Cl2, a poslije toga DMAP (4.0 mg, 0.034 mmol). Odmah je dobiven bijeli talog i miješanje je nastavljeno preko noći. Precipitat je odstranjen filtracijom, a filtrat je razrijeđen sa EtOAc. Nastala otopina je isprana sa 1N HCl, slanom otopinom, zasićenim NaHCO3 i slanom otopinom, a zatim je osušena preko MgSO4. Koncentriranjem in vacuo dobiven je viskozni masni ostatak. Sirovi materijal je podvrgnut flash kromatografiji na 20 cm3 koloni od silika gela, uz eluaciju sa 50% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo 32 mg bijele čvrste mase. Rekristalizacijom iz CH2Cl2/heksana dobiveno je 20 mg (86%) spoja 483, u obliku velikih kristala. Ovaj materijal je podvrgnut ispitivanjima difrakcije X-zraka kristala, da bi se razjasnila egzaktna stereokemija spoja 471Di, kao što je to navedeno za poznatu fiksiranu stereokemiju privjeska (1S)-(-)-kamfanske kiseline. LCMS: 100% na 1.9 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex Luna C18 kolona, 2 x 30 mm, 0-100% vodeni acetonitril, tijekom 3 minuta, koji sadrži 10 mM NH4OAc, pri 1 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 559.3 [M-H]-.

Primjer 484

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-5-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (484)

[image]

U suhu 25 mL posudu okruglog dna sa 3 grla, dodat je TiCl2Cp2 (0.500 g, 2.01 mmol) i THF (4 mL), da bi se dobila tamno crvena otopina. Dodat je aktivirani prah cinka (0.392 g, 6 mmol, pripremljen, kao što je opisano u Fieser i Fieser, dio 1, str. 1276) i suspenzija je miješana 30 minuta, tijekom kog vremena je boja promenjena od cigla-crvene do smaragdno zelene. Cinkov prah koji nije reagirao ostavljen je da se rasprši. U zasebnoj 25 mL tikvici okruglog dna sa 3 grla, dodat je spoj 464F (0.202 g, 0.399 mmol), THF (1 mL) i 1,4-cikloheksadien (0.380 mL, 4.02 mmol). Preko lijevka za dodavanje, sa pamučnim čepom na dnu, dodat je Ti(III) reagens (0.90 mL, 0.45 mmol), uz ispiranje sa THF (1 mL). Poslije 1 h, HPLC je pokazala ~50% konverziju i dodato je još 0.9 mL (0.45 mmol) titanij reagensa. Nakon 1 h, HPLC je pokazala potpuni utrošak polaznog materijala. Dodat je zasićeni amonij klorid (5 mL), a zatim 10 mL EtOAc. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom (5 mL), osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobio sirovi proizvod u obliku narančaste spolučvrste mase. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% CH2Cl2/48% EtOAc/2% MeOH, da bi se dobilo 0.10 g (59%) spoja 484, u obliku svijetlo žute pjene. HPLC: 91% na 3.65 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 508.27 [M+H]+.

Primjer 485

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (485i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (485ii)

[image]

Racemski spoj 484 je odvojen na svoje pojedinačne antipode pomoću preparativne kiralne HPLC normalne faze. Korištena je Chiralcel OD kolona (50 x 500 mm), sa brzinom protoka od 50 mL/min (20% EtOH/heksani) i praćenjem na 220 nm. Spoj 485i, antipod, koji se brže eluira, imao je retencijsko vrijeme od 35.8 minuta, a spoj 485ii, antipod, koji se sporije eluira, imao je retencijsko vrijeme od 49.7 minuta. Oba antipoda su izdvojena u obliku bijelih čvrstih masa, nakon separacije. Spoj 485i: HPLC: 100% na 4.980 min (retencijsko vrijeme) (Chiralcel OD kolona (5 x 50 mm), 2.0 mL/min, 20% EtOH/heksani, praćenje na 220 nm), >99% ee. MS (ES): m/z 508.23 [M+H]+. Spoj 485ii: HPLC: 98.6% na 7.357 min (retencijsko vrijeme) (Chiralcel OD kolona (5 x 50 mm), 2.0 mL/min, 20% EtOH/heksani, praćenje na 220 nm), 97.2% ee. MS (ES): m/z 508.21 [M+H]+. Apsolutna konformacija za spojeve 485i & 485ii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 485i ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 485ii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 485i ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 485ii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

Primjer 486

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (486i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (486ii)

[image]

Spojevi 485i & 485ii su prevedeni u proizvode, slobodne primarne alkohole, kao što je opisano u primjeru 466, da bi se dobili spojevi 486i i 486ii, u obliku bijelih čvrstih masa.

Spoj 486i: HPLC: 98% na 1.650 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 394.21 [M+H]+.

Spoj 486ii: HPLC: 98% na 1.663 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 394.20 [M+H]+.

Primjer 487

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (487)

[image]

DBAD (0.088 g, 0.38 mmol) je dodat otopini trifenilfosfina (0.100 g, 0.382 mmol) u THF-u (1.0 mL), na 22°C i miješan je tijekom 10 minuta. Dodat je 5-kloro-2-piridinol (0.049 g, 0.38 mmol) u čvrstom stanju, i miješanje je nastavljeno tijekom 10 minuta. Reakcijska smjesa je dodata spoju 486i (0.100 g, 0.250 mmol) u THF-u (1.0 mL). Poslije miješanja tijekom 3 h, reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20-50% aceton/kloroformom, da bi se dobilo 0.080 g (63%) spoja 487, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.023 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 505.16 [M+H]+.

Primjer 488

[3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (488)

[image]

DBAD (0.088 g, 0.38 mmol) je dodat otopini trifenilfosfina (0.100 g, 0.382 mmol) u THF-u (1.0 mL), na 22°C i miješan je tijekom 10 minuta. Dodat je 5-kloro-2-piridinol (0.049 g, 0.38 mmol) u čvrstom stanju, i miješanje je nastavljeno tijekom 10 minuta. Reakcijska mješavina je dodata spoju 486ii (0.100 g, 0.250 mmol) u THF-u (1.0 mL). Poslije miješanja od 3 h, reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo i pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10-50% aceton/kloroformom, da bi se dobilo 0.080 g (63%) spoja 488, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95% na 3.030 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 505.12 [M+H]+.

Primjer 489

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489Gi) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489Gii)

[image]

A. 2-jodo-4-nitro-fenilamin (489A)

[image]

Mješavini joda (46.0 g, 0.180 mol) i srebro sulfata (56.3 g, 0.180 mol) u bezvodnom etanolu (500 mL) dodat je 4-nitroanilin (25.0 g, 0.180 mol), a reakcijska smjesa je miješana tijekom 5 h, na rt. Nastala žuta otopina je filtriran i ukoncentriran in vacuo. Stvoreni ostatak je otopljen u 400 mL etil acetata, ispran sa 1N otopinom natrij hidroksida (2 x 250 mL), osušen preko natrij sulfata, filtriran i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo 45.5 g (95%) spoja 495A, u obliku žute čvrste mase. HPLC: 98% na 2.837 min (retencijsko vrijeme) (Shimadzu VP-ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% trifluorooctene kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 265.08 [M+H]+.

B. 2-jodo-4-nitro-benzonitril (489A)

[image]

Spoj 489A (10.0 g, 37.9 mmol) je otopljen u mješavini 20 mL 12 N HCl/40 mL voda, a zatim je ohlađeno do 0°C. Ovoj mješavini je polako dodata otopina natrij nitrita (5.23 g, 75.8 mmol) u 10 mL vode, dok je temperatura reakcije održavana na 0°C. Reakcijska mješavina je miješana tijekom 1 h, na 0°C, a zatim je polako dodata mehanički izmješanoj otopini svježe pripremljenog bakar cijanida (3.0 g, 33 mmol, pripremljen kao što je opisano u Vogelovoj Textbook of Practical Organic Chemistry, 5. izdanje, str. 429) i kalij cijanida (6.30 g, 96.7 mmol) u vodi (50 mL), na 50°C. Reakcijska mješavina je miješana tijekom 1 h, na 50°C, ohlađena je do 25°C i ekstrahirana metilen kloridom (2 x 200 mL). Organski dio je sušen preko natrij sulfata, filtriran i ukoncentriran in vacuo. Nastali ostatak je pročišćen kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 4:1 heksan:etil acetatom, da bi se dobilo 4.6 g (44%) spoja 489B, u obliku narančaste čvrste mase. HPLC: 98% na 2.647 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. 4-amino-2-jodo-benzonitril (489C)

[image]

Mješavina spoja 489B (4.60 g, 16.8 mmol), teterahidrofurana (75 mL), etanola (100 mL), otopine amonij klorida (1.51 g, 28.3 mmol, otopljen u 100 mL vode) i željeza (sito 325, 4.21 g, 75.4 mmol) je mehanički miješana. Reakcijska smjesa je zagrijavana do refluksa, tijekom 3 h, ili dok sav polazni materijal nije potrošen. Reakcijska smjesa je ohlađena, filtrirana kroz celit i ukoncentrirana in vacuo. Nastali ostatak je otopljen u etil acetatu (200 mL), ispran sa 1N natrij hidroksidom (2 x 150 mL), osušen preko natrij sulfata, filtriran i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo 3.97 g (97%) spoja 489C, u obliku tamne čvrste mase. HPLC: 95% na 1.877 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 245.13 [M+H]+.

D. 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-jodo-benzonitril (489D)

[image]

Spoj 489C (3.97 g, 16.3 mmol) i maleinski anhidrid (2.41 g, 24.4 mmol) su podvrgnuti refluksu u ledenoj octenoj kiselini (15 mL) u toku 5 h. Reakcijska mješavina je ohlađena do 25°C, a zatim je izlivena na led (100 mL). Nastali precipitat je izdvojen filtracijom, ispran vodom (2 x 25 mL) i osušen pod vakuumom, da bi se dobilo 4.78 g (90%) spoja 489D, u obliku žutosmeđe čvrste mase. HPLC: 82% na 2.68 min (retencijsko vrijeme) C Shimadzu VP-ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% trifluorooctene kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 325.04 [M+H]+.

E. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489E)

[image]

Otopina spoja 489D (0.40 g, 1.2 mmol) u 2,5-dimetilfuranu (2.0 g) je miješana na 75°C, tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je dekantiranjem odvojena od svih netopljivih materijala, a čestice su isprane dietil eterom. Sakupljeni dekant i eterski ispirci su sjedinjeni i ukoncentrirani in vacuo, dok je temperatura održavana <50°C. Nastali ostatak je usitnjen sa heksanima, da bi se dobilo 0.56 g (94%, na osnovu čistoće) spoja 489E, u obliku žutosmeđe čvrste mase. Zbog sklonosti proizvoda da uđe u retro-Diels-Alderovu reakciju, nije poduzimano dalje pročišćavanje. HPLC: 85% na 3.01 min (retencijsko vrijeme) (Shimadzu VP-ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% trifluorooctene kiseline, 4 mL/min, praćenje na 254 nm). MS (ES): m/z 421.05 [M+H]+.

F. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489F)

[image]

Otopini spoja 489E (0.40 g, 0.95 mmol) u suhom THF (5 mL), ohlađenom do 0°C, dodat je bor-dimetilsulfid kompleks (0.2 mL, 1.9 mmol, 10M), a reakcijska otopina je ostavljena da se zagrije do 25°C. Poslije miješanja tijekom 30 minuta, reakcijska mješavina je ohlađena do 0°C, i polako je dodat fosfatni pufer pH 7 (6.6 mL), nakon čega je slijedilo dodavanje 30% vodik peroksida (0.7 mL). Reakcijska smjesa je miješana na 25°C tijekom 1 h, a zatim je raspodijeljena između etil acetata (100 mL) i vode (100 mL). Organski dio je izdvojen, osušen preko natrij sulfata, filtriran i ukoncentriran in vacuo. Nastali ostatak je pročišćen na silika gelu, uz eluaciju sa 3:1 metilen klorid:etil acetatom, da bi se dobilo 0.11 g (25%) spoja 489F, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.527 min (retencijsko vrijeme) (Shimadzu VP-ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% trifluorooctene kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 439.09 [M+H]+.

G. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489Gi) &

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489Gii)

Racemski spojevi 489F su odvojeni u svoje pojedinačne antipode pomoću preparativne kiralne HPLC normalne faze. Korištena je Chiralcel AD kolona (50 x 500 mm), sa brzinom protoka od 50 mL/min (70% izopropanol/heksani) i praćenjem na 220 nm. Spoj 489Gi, antipod koji se brže eluira, imao je retencijsko vrijeme od 4.587 minuta, a spoj 489Gii, antipod koji se sporije eluira, imao je retencijsko vrijeme od 6.496 minuta. Oba antipoda su izolirana u obliku bijelih čvrstih masa, poslije separacije. Apsolutna konformacija za spojeve 489Gi & 489Gii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 489Gi ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 489Gii da ima “S” konfiguraciju.

Primjer 490

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (490B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (490A)

[image]

Mješavina trifenilfosfina (166 mg, 0.633 mmol) i DBAD (146 mg, 0.633 mmol) je otopljena u THF-u (4 mL), pod dušikom, a žuta otopina je miješana tijekom 10 minuta. Dodat je 5-kloro-piridin-2-ol (82 mg, 0.63 mmol), a mješavina je miješana tijekom 5 minuta, poslije čega je dodat spoj 242B (165 mg, 0.327 mmol). Smjesa je miješana tijekom 12 h, a otapalo je uklonjeno pod strujom dušika. Nastalo ulje je adsorbirano na silika gel (1 g) i pročišćeno flash kromatografijom na Jones Chromatography silika kertridžu (5 g/25 mL), uz eluaciju sa gradijentom 0-50%-tnog acetona u kloroformu, kako bi se dobilo 79.4 mg (47%) spoja 490A, u obliku bijele pjene. HPLC: 99% na 3.48 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 504.17 [M+H]+.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (490B)

Spoj 490A (24 mg, 0.048 mmol) je osušen u bočici od 1 drama, sa magnetnom mešalicom. Pod dušikom su dodati srebro oksid (57 mg, 0.24 mmol), CH3CN (500 μL) i jodometan (20 μL, 0.32 mmol), a mješavina je stavljena u zagrijani blok (82°C) i miješana je tijekom 14 h. Mješavina mijenja boju u smeđe nakon 20 minuta, a zatim u zeleno. Mješavina je filtrirana kroz celit i florisil i pročišćena je reverzno faznom preparativnom HPLC (Shimadzu Shimpac VP ODS kolona, 20 x 50 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 6 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, praćenje na 220 nm), da bi se dobilo 6.9 mg (28%) spoja 490B, u obliku bijele pjene. HPLC: 99% na 3.64 min, 3.76 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 518.19 [M+H]+.

Primjer 491

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, (491Ci) & [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(5-kloro-2-okso-1(2H)-piridinil)etil]oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (491Cii)

[image]

A. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil] oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (491A)

[image]

Spoj 243Cii (142 mg, 0.280 mmol) je osušen u bočici od 1 drama, koja je opremljena magnetnom mešalicom i kapicom, punjenom teflonom. Pod dušikom su dodati srebro oksid (324 mg, 1.40 mmol), CH3CN (3 mL) i jodometan (90 μL, 1.4 mmol), a mješavina je stavljena u zagrijani blok (82°C). Reakcijska mješavina je miješana preko noći, a zatim je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana in vacuo. Nastali ostatak je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom 0-50%-tnog acetona u kloroformu, da bi se dobilo 62.2 mg (43%) spoja 491A. HPLC: 99% na 3.87 & 3.95 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 521.37 [M+H]+.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[oktahidro-7-(2-hidroksietil)-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (491B)

[image]

Spoj 491A (62.2 mg, 0.119 mmol) je otopljen u etanolu (2 mL), dodata je 12N klorovodična kiselina (50 μL) i smjesa je miješana tijekom 10 minuta. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a proizvod je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom 0-20%-tnog acetona u kloroformu, da bi se dobilo 40.3 mg (83%) spoja 491B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 96% na 2.30 & 2.45 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 407.22 [M+H]+.

C. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, enantiomer koji se sporo eluira (491Ci) &

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(5-kloro-2-okso-1(2H)-piridinil)etil]oktahidro-5-metoksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (491Cii)

Trifenilfosfin (40 mg, 0.15 mmol) i DBAD (35 mg, 0.15 mmol) su otopljeni u THF-u, pod dušikom, i miješani su tijekom 10 minuta. Dodat je 5-kloropiridin-2-ol (20 mg, 0.15 mmol), a mješavina je miješana tijekom 5 minuta. Dodat je spoj 491B (40.3 mg, 0.0991 mmol), a stvorena smjesa je miješana tijekom 2.5 h. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a nastali ostatak je pročišćen kromatografijom preko florisila (1.3 g), uz eluaciju sa gradijentom 0-40%-tnog acetona u kloroformu, kako bi se dobilo 140 mg mješavine spoja 491Ci, 491Cii i DBAD-a. Ulje je suspendirano u diklorometanu (3 mL) i dodata je trifluorooctena kiselina (2 mL). Poslije 45 minuta, Otapalo je uklonjeno in vacuo, a nastalo ulje je raspodijeljeno između zasićenog natrij bikarbonata (20 mL) i EtOAc (20 mL). Vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc (2 x 20 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko magnezij sulfata. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC (Shimadzu Shimpac VP ODS kolona, 20 x 50 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 6 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, praćenje na 220 nm) dobiveno je 22 mg (44%) spoja 491Ci, i 4.6 mg (9% prinos) spoja 491Cii. Spoj 491Ci: HPLC: 95% na 3.50 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 518.27 [M+H]+. Spoj 491Cii: HPLC: 85% na 2.94 & 3.07 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 518.27 [M+H]+.

Primjer 492

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[5-(acetiloksi)-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, enantiomer koji se sporo eluira (492)

[image]

Acetil klorid (25 μL, 0.35 mmol) je dodat otopini spoja 490A (30 mg, 0.060 mmol) u piridinu (600 μL). Mješavina je miješana preko noći, razrijeđena klorovodičnom kiselinom (0.5N, 10 mL) i ekstrahirana kloroformom (3 x 7 mL). Organski slojevi su sjedinjeni, isprani vodom (3 x 4 mL) i slanom otopinom (4 mL), osušeni preko magnezij sulfata i ukoncentrirani in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom 0-50%-tnog acetona u kloroformu, dobiveno je 17 mg (53%) spoja 492. HPLC: 99% na 3.48 & 3.63 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 546.15 [M+H]+.

Primjer 493

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]-2-(4-cijano-1-nafalenil)oktahidro-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-il ester dimetilkarbaminske kiseline, enantiomer koji se sporo eluira (493)

[image]

Otopini spoja 490A (30 mg, 0.060 mmol) u piridinu (300 μL) dodat je dimetilkarbamil klorid (28 μl, 0.30 mmol), a smjesa je miješana na 25°C, tijekom 12 h. Dodata je dodatna količina dimetilkarbamil klorida (28 μL, 0.30 mmol) i reakcijska mješavina je grijana na 70°C tijekom 12 h. Dodata je treća porcija dimetilkarbamoil klorida (28 μL, 0.30 mmol), kao i piridin (300 μL), a smjesa je miješana na 100°C, tijekom 24 h. Otopina je razrijeđena sa 0.5N HCl (10 mL) i ekstrahirana sa kloroformom (3 x 7 mL). Organski slojevi su sjedinjeni, isprani vodom (3 x 7 mL) i slanom otopinom (4 mL), osušeni preko magnezij sulfata i ukoncentrirani in vacuo. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC (Shimadzu Shimpac VP ODS kolona, 20 x 50 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 6 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, praćenje na 220 nm) dobiveno je 15.7 mg (46%) spoja 493, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.52 min & 3.69 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 575.10 [M+H]+.

Primjer 494

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-4-metil-5-[[(metilamino)karbonil]oksi]-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril, enantiomer koji se sporo eluira (494)

[image]

Metil izocijanat (36 μL, 0.60 mmol) je dodat otopini spoja 490A (30 mg, 0.060 mmol) u dioksanu (600 μL) i zagrijavan je na 80°C, preko noći. Dodata je dodatna količina metil izocijanata (36 μL, 0.60 mmol) i smjesa je grijana na 100°C tijekom 24 h. Dodata je treća porcija metil izocijanata (36 μL, 0.60 mmol) i smjesa je miješana na 100°C, tijekom 24 h. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a ulje je pročišćeno reverzno faznom preparativnom HPLC (Shimadzu Shimpac VP ODS kolona, 20 x 50 mm, 0-100% vodeni metanol, tijekom 6 minuta, koji sadrži 0.1% TFA, praćenje na 220 nm) da bi se dobilo 20 mg (59%) spoja 494, u obliku prozirnog stakla. HPLC: 99% na 3.33 min & 3.42 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 561.08 [M+H]+.

Primjer 495

[3aR(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (495Ai) & [3aS(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (495B)

[image]

A. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (495Ai) &

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[2-(acetiloksi)etil]-2-(4-cijano-1-naftalenil)heksahidro-metil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (495Aii)

[image]

Racemski spoj 223B (10.26 g, 27.26 mmol) je otopljen u bezvodnom THF (500 mL), u boci od 10 L. Dodati su: terc-butil metil eter (4.86 L), vinil acetat (216 mL) i lipaza (108 g, [Sigma, lipaza tip II, sirova, iz svinjske gušterače; proizvod Br. L3126, Lot Br. 021K1445]). Reakcijska mješavina je sazrijevala tijekom 24 h, na rt, a reakcija je praćena HPLC-om, korištenjem slijedećih uvjeta: 200 μL uzorka reakcijske mješavine je filtrirano, osušeno pod strujom dušika i podvrgnuto HPLC analizi (YMC ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Reakcija je prekinuta, nakon što je 60% polaznog materijala potrošeno. Enzim je odstranjen filtracijom, a filtrat je ukoncentriran in vacuo. Nastali ostatak je otopljen u CHCl3 i adsorbiran na silika gel. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom 1-5%-tnog MeOH u CHCl3, dobiveno je 3.78 g (37%) spoja 495Ai i 6.84 g (60%) spoja 495Aii, oba u obliku bijelih čvrstih masa. Spoj 495Ai: HPLC: 99% na 3.47 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 377.09 [M+H]+. Preparativna kiralna HPLC normalne faze: 37.8 min (retencijsko vrijeme) (CHIRALPAK AD kolona, 4.6 x 250 mm, 10 mikrona, 40°C, izokratska eluacija sa 8% EtOH/MeOH (1:1) u heptanu, praćenje na 220 nm), 99% ee. Spoj 495Aii: HPLC: 99% na 2.92 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (495B)

Lipaza (134 g, [Sigma, lipaza tip II, sirova, iz svinjske gušterače; proizvod Br. L3126, Lot Br. 021K1445]) je dodata u 3.5 L deionizirane vode. Mješavina je centrifugirana, kako bi se uklonio najveći dio suspendiranog materijala. pH supernatanta je dotjeran do 7.06 sa 1N natrij hidroksidom, i dodat je otopina spoja 495Aii (8.04 g, 19.2 mmol) u TBME (1.5 L). pH je povećan do 7.16 dodavanjem 1N natrij hidroksida. Reakcijska smjesa je sazrijevala na rt, a reakcija je praćena analitičkom HPLC, kao što je opisano u Primjeru 495A. Poslije 30 minuta, reakcijska mješavina je filtrirana kroz celit, a filtrat je ekstrahiran sa etil acetatom (4 x 1L), dok HPLC nije pokazala da je sav alkohol uklonjen. Organske frakcije su sjedinjene, osušene preko magnezij sulfata, filtrirane i ukoncentrirane in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu (Jones, 50 g kolona), korištenjem gradijenta 0-70%-tnog acetona u kloroformu, a zatim 5%-tni MeOH u kloroformu, dobiveno je 2.44 g (33%) spoja 495B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 2.89 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 377.09 [M+H]+. Preparativna kiralna HPLC normalne faze: 11.1 min (retencijsko vrijeme) (CHIRALPAK AD kolona, 4.6 x 250 mm, 10 mikrona, 40°C, izokratska eluacija sa 8% EtOH/MeOH (1:1) u heptanu, praćenje na 220 nm), 95% ee.

Primjer 496

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (496Bi) & [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-(5-kloro-2-okso-1(2H)-piridinil)etil]oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (496Bii)

[image]

A. Izrada čvrstog nosača (496A)

[image]

Mješavina bezvodnog CH2Cl2 (10 mL) i piridina (10 mL) je dodata, pod dušikom, klorosulfonilpolistirenu (Argonaut, 1.70 mmol/g, 3.0 g, 5.1 mmol) i spoju 495Ai (3.78 g, 10.0 mmol) u epruveti za sintezu polimera. Mješavina je prešla u žuti gel i energično je mućkana (tijekom 4 h na ručnoj mućkalici). Smola je adsorbirala sva otapala i izgledala je suha. Smola je isprana u dijelovima, sa CH2Cl2 (200 mL), a ispirci su sjedinjeni i ekstrahirani sa 200 mL 1N HCl. HCl frakcija je re-ekstrahirana sa etil acetatom (200 mL). Organske frakcije su sjedinjene i ekstrahirane vodom (50 mL) i slanom otopinom (50 mL), a organske frakcije su osušene preko natrij sulfata, filtrirane i ukoncentrirane, da bi se dobio 2.1 g spoja 496A, vezanog na smolu (89% napunjena, na osnovu obnovljenog nevezanog spoja 495Ai). Smola je uzastopno isprana sa DMF (5X), DMF:vodom (3:1, 5X), THF (3X) i CH2Cl2 (3X) (~30 mL svako ispiranje). Smola je sušena in vacuo, tijekom 1 h, da bi se dobilo 5.35 g smole. Smola je bila još vlažna i ponovo je obrađena alkoholom. Gore opisani postupak punjenja je ponovljen, korištenjem obnovljenog spoja 495Ai, iz prethodnog postupka, koji nije reagirao. Obnovljeni spoj 495Ai (2.1 g, 5.6 mmol), bezvodni diklorometan (15 mL), piridin (15 mL) i smola su sjedinjeni i podvrgnuti, gore opisanim, reakcijskim uvjetima. Nastala smola je isprana kao što je prethodno opisano i osušena in vacuo, preko noći, da bi se dobilo 4.49 g smole (87% napunjena, na osnovu obnovljenog nevezanog spoja 495Ai). polazni alkohol je obnovljen iz mješavine diklorometan:piridin, kao što je prethodno opisano (2.04 g bijele čvrste mase, što bi pretpostavilo 92% punjenje, na osnovu obnovljenog alkohola). Povećanje težine smole je uglavnom točnije za procjenu punjenja. Izračunato je da je punjenje smole 0.87 (određeno na osnovu povećanja težine smole) X 1.08 mmol/g (izračunato 100% punjenje) = 0.94 mmol/g. Smola je korištena kao takva u idućem koraku.

B. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil] oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (496Bi) & [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-(5-kloro-2-okso-1(2H)-piridinil)etil] oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (496Bii)

Procedura, koja slijedi, opisuje opći postupak, kojim mogu biti izrađeni nizovi spoja sa Formulom I, korištenjem automatiziranog pristupa. Dodatne informacije o takvim automatiziranim sintetskim pristupima mogu biti nađene u Primjeru 8. Spojevi 496Bi & 496Bii su primjer spojeva, izrađenih takvom procedurom. Za spojeve 496Bi & 496Bii 4-kloropiridinol predstavlja nukleofilni reagens. Šira definicija izraza nukleofil je sadržana u glavnom dijelu ovog dokumenta i stručnjak ovog područja je dobro razumije. Korišten je Bohdan MiniReactor, opremljen blokom za grijanje/hlađenje, sa bočicama od 0.5 drama, složenih jedna iznad druge, kao bi se postigao isti nivo kao i reaktor epruveta. Smola (spoj 496A) je izmjerena u zasebne bočice, korištenjem jednom svake Bohdan smola Transfer module ploče “10 mg” i “20 mg”. Težine oslobođene smole su se kretale od 17-23 mg (0.016-0.022 mmol). Dodat je cezij karbonat, korištenjem Bohdan “20 mg” ploče, koja je oslobađala ~57-60 mg (0.17-0.18 mmol). Nukleofili su odmjereni u bočice od 1 drama i razrijeđeni u THF, do 0.06 M, korištenjem Tecan tekućeg hendlera sa osam kanala. Napravljene otopine (250 μL, 0.015 mmol) su dodate ručno, preko mikropipete, svakoj od reakcijskih bočica, koje sadržavaju smolu, a stvoreni nizovi reakcijskih bočica su stavljeni u Bohdan reaktor. Kad su nukleofili amini, ~13 μL diizopropilamina je dodato THF otopini amina. Bočice su poklopljene (teflonom postavljene), a reakcije su zagrijavane, uz orbitalno mućkanje (kratki zamah 500 rpm), na 70°C, tijekom 24 h. Reakcije su ohlađene do 25°C i dodat je 1 mL mješavine heptana i etil acetata (1:1), a zatim 0.5 mL vode. Organski sloj je ručno ekstrahiran i pojedinačno prenesen u epruvetu sa sintetskim blokom, koja sadrži magnezij sulfat (~150 mg). Niz sintetskih blok epruveta je simultano filtriran, a filtrati su zasebno sakupljeni u mikroepruvete (blok sa 96 okanaca-položaja). Vodeni sloj je re-ekstrahiran sa 1 mL mješavine heptana i etil acetata (1:1), organski sloj je filtriran, kao što je prethodno opisano, a filtrat je zasebno sakupljen, kao što je prethodno opisano, u postojeće mikroepruvete.

Analiza nizova spojeva, koji su pripremljeni prethodnom procedurom, izvedena je korištenjem automatskog pristupa. Količina od 120 μL svake od gornjih reakcija (filtratata) alikvotno je dodata u dva bloka za analizu od 96 dubokih mjesta. Otapalo je ukoncentrirano in vacuo, a ploče su ponovno razrijeđene metanolom (500 μL). Jedna ploča je analizirana pomoću LCMS (Phenomenex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, 4 mL/min, gradijent 0% A do 100% B (A: 90% voda, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% voda, 0.1% TFA), a druga pomoću protočne-NMR (Varian Inova-500 MHz, MeOH, WET otapalo supresijske puls sekvence, 128 snimaka, 60 μL probe flow stanica). Kriterij za podvrgavanje je bio: prisutnost točnog molekulskog iona i HPLC/NMR čistoća >70%. Spojevi koji nisu zadovoljavali željene kriterije pročišćeni su reverzno faznom preparativnom HPLC (Shimadzu UP-ODS kolona, 20 x 50 mm, 20 mL/min, gradijent 40% B do 100% B tijekom 6 minuta sa 2 minuta zadržavanja (A: 90% voda, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% voda, 0.1% TFA). HPLC pročišćavanjem dobiveno je 3.4 mg (21%) spoja 496Bi, u obliku staklaste čvrste mase, i 6.8 mg (41%) spoja 496Bii, u obliku staklaste čvrste mase. Spoj 496Bi: HPLC: 96% na 3.47 min & 3.62 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenominex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, 4 mL/min, gradijent 0% A do 100% B (A: 90% voda, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% voda, 0.1% TFA), praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 487.94 [M+H]+. Spoj 496Bii: HPLC: 96% na 3.00 min & 3.12 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenominex ODS kolona, 4.6 x 50 mm, 4 mL/min, gradijent 0% A do 100% B (A: 90% voda, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% voda, 0.1% TFA), praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 488.12 [M+H]+. Dodatni spojevi, pripremljeni ovim postupkom, navedeni su u Tablici 17.

Primjer 497

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(7-metil-6-benzotiazolil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (497B)

[image]

A. 6-amino-7-metilbenzotiazol (497A)

[image]

7-metil-6-nitrozobenzotiazol je pripremljen iz 6-nitrobenzotiazola, prema općenitom postupku, opisanom u Bartoli et al. Synlett 270 (1976). Otopini 7-metil-6-nitrozobenzotiazola (889 mg, 5.00 mmol) u AcOH (40 mL) na 70°C je dodat prašak željeza (325 sito, 559 mg, 10.0 mmol) u jednoj količini. Nastala tamna reakcijska mješavina je miješana tijekom 15 minuta, prije nego što je ohlađena i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio ostatak, koji je raspodijeljen između 1N HCl (50 mL) i CH2Cl2 (50 mL). Izdvojeni su slojevi, a organski sloj je ispran jednom sa 1N HCl (25 mL). Sjedinjeni vodeni slojevi su prevedeni u alkalnu reakciju, dodatkom čvrstog NaHCO3, i ekstrahirani su dva puta sa EtOAc. Organske faze su sakupljene, osušene preko MgSO4 i ukoncentrirane in vacuo, da bi se dobilo 534 mg (65%) spoja 497A, u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 96% na 0.55 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 165.0 [M+H]+.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-(7-metil-6-benzotiazolil)-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (497B)

6-amino-7-metilbenzotiazol (29 mg, 0.18 mmol), MgSO4 (54 mg, 0.45 mmol), trietilamin (125 μL, 0.897 mmol) i spoj 20A (52 mg, 0.26 mmol) su pokupljeni u 0.18 mL DME i stavljeni u zapečaćenu epruvetu. Zapečaćena epruveta je grijana na 135°C, tijekom 14 h. Ohlađena reakcijska mješavina je filtrirana preko kratke podloge od celita, uz eluaciju sa EtOAc, a otapalo je uklonjeno in vacuo. Ostatak je pročišćen reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS kolona, 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 30-100% vodenim metanolom, tijekom 10 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 20 mL/min, praćenje na 220 nm). Koncentriranjem željenih frakcija dobiven je ostatak, koji je raspodijeljen između CH2Cl2 (10 mL) i zasićene otopine NaHCO3 (10 mL). Vodeni sloj je jednom ekstrahiran sa CH2Cl2, a sjedinjene organske faze su osušene preko Na2SO4 i ukoncentrirane in vacuo, da bi se dobilo 42 mg (68%) spoja 497B, u obliku žutosmeđe čvrste mase. HPLC: 2.36 min & 2.55 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosfornu kiselinu, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 343.3 [M+H]+.

Primjer 498

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-5-[oktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (498i) & (3aα,4β,5β,7β,7aα)-5-[oktahidro-5-hidroksi-4-(2-hidroksietil)-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (498ii)

[image]

Spoj 464E (0.500 g, 1.02 mmol) je otopljen u THF (5.00 mL) i ohlađen do 0°C. Zatim je, polako, dodat BH3•DMS (0.193 mL, 2.04 mmol), nakon čega je uslijedilo zagrijavanje do 25°C. Poslije 1 h, reakcijska smjesa je ohlađena do 0°C i dodat je fosfatni pufer pH 7 (15.0 mL), što je dovelo do razvijanja plina. Onda su dodati EtOH (7.0mL) i vodik peroksid (30%, 1.5 mL), a reakcijska mješavina je zagrijavana do 25°C, tijekom 2 h. Poslije 3 h, smjesa je ekstrahirana sa metilen kloridom (3 x 50 mL). Sjedinjeni organski slojevi su jednom isprani slanom otopinom i osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Proizvod je, po izradi, vezan u kompleks sa borom. Svi pokušaji da se razgradi ovaj kompleks nisu uspjeli dati slobodni proizvod. Sirovi materijal je prenesen u slijedeći korak, bez daljeg pročišćavanja.

Sirova reakcijska mješavina je otopljena u 2% conc. HCl/MeOH (5.0 mL), na rt. Poslije 1 h, isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a nastali ostatak je otopljen u metilen kloridu, ispran jednom sa zasićenim vodenim natrij bikarbonatom i osušen preko bezvodnog natrij sulfata. Odstranjivanjem otapala in vacuo, dobivena je sirova mješavina spojeva 498i i 498ii, u obliku žute čvrste mase. Mješavina spojeva je odvojena reverzno faznom preparativnom HPLC: Spoj 498i: HPLC 17.994 min (retencijsko vrijeme) & spoj 498ii: 19.767 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 30 x 250 mm, 25 mL/min, 10-90% vodeni metanol, tijekom 35 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, praćenje na 220 nm). Uklanjanjem otapala in vacuo dobiveno je 0.012 g (3%) spoja 498i, u obliku bijele čvrste mase i 0.009 g (2%) spoja 498ii, u obliku bijele čvrste mase. Spoj 498i: HPLC: 85% na 1.843 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 394.21 [M+H]+. Spoj 498ii: HPLC: 98% na 1.650 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 394.21 [M+H]+.

Primjer 499

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-4-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (499i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-4-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (499ii)

[image]

Racemski spoj 434C je odvojen na svoje pojedinačne antipode pomoću preparativne kiralne HPLC normalne faze, korištenjem Chiracel AD kolone (5 cm x 50 cm), uz eluaciju sa 8% EtOH u heksanu, pri 50 mL/min, da bi se dobio spoj 499i, koji se brže eluira, (Kiralna HPLC: 6.74 min; CHIRALCEL AD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 10% EtOH u heksanu pri 2 mL/min) i spoj 499ii, koji se sporije eluira, (Kiralna HPLC: 9.99 min; CHIRALCEL AD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 10% EtOH u heksanu, pri 2 mL/min). Za spoj 499i ili 499ii: HPLC: 100% na 3.96 min (retencijsko vrijeme) (YMC CombiSreen ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 521.25 [M+H]+. Apsolutna stereokemija za spojeve 499i & 499ii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 499i ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 499ii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 499i ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 499ii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

Primjer 500

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[4-etiloktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (500i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[4-etiloktahidro-5-hidroksi-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (500ii)

[image]

Spoj 499i (24.0 mg, 0.0461 mmol) je otopljen u 2% conc. HCl/EtOH (0.8 mL) i smjesa je miješana na rt, tijekom 20 minuta. Mješavini je dodavan hladni zasićeni NaHCO3, dok otopina ne postigne pH 8, a zatim je ekstrahiran sa EtOAc. Organski slojevi su sjedinjeni, isprani slanom otopinom i osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 14.7 mg (78%) spoja 500i, u obliku bijele čvrste mase, koje nije zahtjevalo dalje pročišćavanje. HPLC: 95% na 2.40 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm).

Spoj 499ii (18.0 mg, 0.0346 mmol) je otopljen u 2% conc. HCl/EtOH (0.6 mL) i mješavina je miješana na rt, tijekom 20 minuta. Smjesi je dodavan hladni zasićeni NaHCO3, dok otopina ne postigne pH 8, a zatim je ekstrahiran sa EtOAc. Organski slojevi su sjedinjeni, isprani slanom otopinom i osušeni preko bezvodnog natrij sulfata. Koncentriranjem in vacuo dobiveno je 14.1 mg (99%) spoja 500ii, u obliku bijele čvrste mase, kojoj nije bilo potrebno dalje pročišćavanje. HPLC: 95% na 2.40 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 4 min, gradijent sa 0.2% H3PO4, praćenje na 220 nm).

Primjer 501

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-1,3-diokso-7-propil-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (501D)

[image]

A. 2-(5-propil-furan-2-il)-etanol (501A)

[image]

Otopini 2-propilfurana (3.00 g, 31.2 mmol) u THF-u (31 mL), na -78°C, dodavan je, kap po kap, tijekom 10 minuta, n-BuLi (15.0 mL, 2.5 M, 37.4 mmol). Reakcijska smjesa je zagrijana do rt i miješana tijekom 3.5 h. Poslije hlađenja do 0°C, dodat je etilen oksid (2.33 mL, 46.8 mmol), reakcijska mješavina je zagrijana do rt, a miješanje je nastavljeno tijekom 19 h. Reakcija je, zatim, ohlađena do 0°C i ugašena zasićenim NH4Cl (20 mL), nakon čega je uslijedila ekstrakcija sa Et2O (2 x 50 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, sušeni preko Na2SO4, filtrirani i ukoncentrirani, da bi se dobilo 4.38 g (91%) spoja 501A, u obliku jasno narančastog ulja. Ovaj materijal je korišten bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 94% na 2.91 min (retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 137.13 [M-H2O+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4-(2-hidroksietil)- 1,3-diokso-7-propil-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (501B)

[image]

Suspenzija 2-(5-propil-furan-2-il)-etanola (2.50 g, 16.2 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (4.02 g, 16.2 mmol) u benzenu (16 mL) je zagrijana do 60°C. Poslije 3 h, reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila smeđa pjena. Dodat je metanol (17 mL), a mješavina je ozvučena kako bi se dobila fina bež čvrsta masa, sa smeđim supernatantom. Filtracijom je dobiveno 1.75 g (27%) spoja 501B, u obliku sivobijele čvrste mase. Ovaj materijal je korišten bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 85% na 3.02 min & 3.14 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 403.31 [M+H]+.

C. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-7-propil-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (501Ci) & [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-7-propil-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (501Cii)

[image]

Suspenziji spoja 501B (1.60 g, 3.97 mmol) u etil acetatu (79.5 mL) dodat je 10% Pd/C (0.422 g, 0.397 mmol). Plin vodika je propušten kroz reakcijsku mješavinu tijekom nekoliko minuta i reakcijska mješavina je ostavljena da se miješa pod atmosferom vodika, tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz celit, a filtrat je ukoncentriran in vacuo, da bi se dobila bijela čvrsta masa (1.74 g). Sirovi materijal je otopljen u minimalnoj količini metilen klorida i napunjen na ISCO kartridž od 120 g silika gela. Eluacijom sa postepenim gradijentom 0 do 100% etil acetat/heksana dobiveno je 1.06 g (66%) racemske smjese spojeva 501Ci & 501Cii, u obliku bijele pjene. Količina od 500 mg racemske smjese je odvojena preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK AD; 5 x 50 cm kolona; izokratska eluacija sa 13% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 50 mL/min, praćenje na 220 nm) da bi se dobilo 245 mg spoja 501Ci, enantiomera koji se brže eluira, i 245 mg spoja 501Cii, enantiomera koji se sporije eluira, oba u obliku bijelih pjena. Spoj 501Ci: Preparativna kiralna HPLC normalne faze: 28.0 min (retencijsko vrijeme), >95% ee (CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 12% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1.0 mL/min). HPLC: 99% na 3.04 & 3.17 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C24H23N2O4 [M-H]-: 403.1658. Nađeno: 403.1644. Spoj 501Cii: Kiralna HPLC: 65.7 min (retencijsko vrijeme), >95% ee (Kiralna HPLC: 65.7 min; >95% ee; CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 12% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1.0 mL/min). HPLC: 98% na 3.02 & 3.15 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Apsolutna stereokemija za spojeve 501Ci & 501Cii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 501Ci ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 501Cii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 501Ci ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 501Cii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

D. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-1,3-diokso-7-propil-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (501D)

Otopini DBAD (17.1 mg, 0.0741 mmol) u THF (0.5 mL) je dodat PPh3 (19.4 mg, 0.0741 mmol). Poslije 10 minuta, dodat je 5-kloro-2-piridinol (9.6 mg, 0.74 mmol). Poslije 5 minuta, dodat je spoj 501Ci (20.0 mg, 0.0494 mmol). Nakon 1 h, dodati su DBAD (17.1 mg, 0.0741 mmol), PPh3 (19.4 mg, 0.074 mmol) i 5-kloro-2-piridinol (9.6 mg, 0.074 mmol). Poslije 3 h, otapalo je uklonjeno in vacuo, da bi se dobio žuti ostatak. Preparativnom reverzno faznom HPLC (YMC ODS kolona, 20 x 100 mm, uz eluaciju sa 40-100% vodenim metanolom, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 30 minuta, 25 mL/min, praćenje na 220 nm) dobijeno je 9.5 mg (37%) trifluorooctene soli spoja 501D, u obliku bistrog, bezbojnog ostatka. HPLC: 99% na 7.88 & 8.11 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Zorbax SB C18 4.6 x 75 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 8 minuta, 2.5 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C29H27N3O4Cl [M+H]+: 516.1690. Nađeno: 516.1676.

Primjer 502

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-butil-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (502D)

[image]

A. 2-(5-butil-furan-2-il)-etanol (502A)

[image]

Otopini 2-butilfurana (3.00 g, 24.2 mmol) u THF-u (24 mL), na -78°C, dodat je, kap po kap, tijekom 10 minuta, n-BuLi (11.6 mL, 2.5 M, 29.0 mmol). Reakcijska smjesa je zagrijana do rt i miješana tijekom 3.5 h. Poslije hlađenja do 0°C, dodat je etilen oksid (1.81 mL, 36.2 mmol), reakcijska mješavina je zagrijana do rt, a miješanje je nastavljeno tijekom 19 h. Reakcijska mješavina je, zatim, ohlađena do 0°C i ugašena zasićenim NH4Cl (20 mL), poslije čega je uslijedila ekstrakcija sa dietil eterom (2 x 50 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo 4.07 g (100%) spoja 502A, u obliku jasno narančastog ulja. Ovaj materijal je korišten bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 96% na 3.23 min (retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 169.22 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[4-butil-1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (502B)

[image]

Suspenzija spoja 502A (2.50 g, 14.9 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-diokso-1H-1-il)-1-naftalenkarbonitrila (3.70 g, 14.9 mmol) u benzenu (15 mL) je zagrijana do 60°C. Poslije 3h, reakcijska mješavina je ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila smeđa pjena. Dodat je metanol (17 mL), a mješavina je ozvučena kako bi se dobila fina bež čvrsta masa, sa narančasto-smeđim supernatantom. Filtracijom taloga je dobiveno 2.64 g (44%) spoja 502B, u obliku sivobijele čvrste mase. Ovaj materijal je korišten bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 95% na 3.25 min & 3.35 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 417.29 [M+H]+.

C. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-butiloktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (502Ci) & [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-butiloktahidro-7-(2-hidroksietil)-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (502Cii)

[image]

Suspenziji spoja 502C (1.47 g, 3.52 mmol) u etil acetatu (70 mL) dodat je 10% Pd/C (0.375 g, 0.352 mmol). Plin vodika je propušten kroz reakcijsku mješavinu tijekom nekoliko minuta i reakcijska mješavina je ostavljena da se miješa pod atmosferom vodika, tijekom 3 h. Reakcijska smjesa je filtrirana kroz Celite®, uz ispiranje sa etil acetatom (2 x 70 mL). Filtrat je ukoncentriran in vacuo, da bi se dobila bijela pjena (1.50 g). Sirovi materijal je otopljen u minimalnoj količini metilen klorida i napunjen na ISCO kartridž od 120 g silika gela. Eluacijom sa postepenim gradijentom, 0 do 100% etil acetat/heksana dobiveno je 1.05 g (74%) racemske smjese spoja 502Ci & 502Cii, u obliku bijele pjene. Količina od 438 mg racemske smjese spoja 502Ci & 502Cii je izdvojena preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (Chirapak AD kolona, 5 x 50 cm, uz izokratsku eluaciju sa 12% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 50 mL/min, praćenje na 220 nm) da bi se dobilo 178 mg spoja 502Ci, enantiomera koji se brže eluira, u obliku bijele pjene, i 132 mg spoja 502Cii, enantiomera koji se sporije eluira, u obliku bistrog, viskoznog ulja. Spoj 502Ci: Kiralna HPLC: 25.5 min (retencijsko vrijeme), >95% ee (Kiralna HPLC: CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona, uz eluaciju sa 12% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1.0 mL/min) i HPLC: 99% na 6.50 & 6.71 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C25H25N2O4 [M-H]-: 417.1814. Nađeno: 417.1800. Spoj 502Cii: HPLC: 55.6 min (retencijsko vrijeme), >95% ee (Kiralna HPLC: CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 12% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1.0 mL/min). HPLC: 99% na 3.26 min & 3.38 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC Combiscreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Apsolutna stereokemija za spojeve 502Ci & 502Cii nije ustanovljena. Zbog jednostavnosti u nomenklaturi, za spoj 502Ci ovdje je navedeno da ima “R” konfiguraciju, a za spoj 502Cii da ima “S” konfiguraciju. Za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 502Ci ovdje je navedeno da imaju “R” konfiguraciju, a za enantiomerno čiste proizvode, dobivene iz spoja 502Cii ovdje je navedeno da imaju “S” konfiguraciju.

D. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[4-butil-7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi] etil]oktahidro-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (502D)

Otopini spoja 502Ci (20.0 mg, 0.0478 mmol), PPh3 (37.6 mg, 0.143 mmol) i 5-kloro-2-piridinola (18.6 mg, 0.143 mmol) u THF (0.5 mL) dodat je DBAD (33.0 mg, 0.143 mmol). Nastala otopina je miješana na rt, tijekom 15.5 h. Otapalo je uklonjeno in vacuo, da bi se dobio žuti ostatak. Preparativnom HPLC (Shimadzu VP ODS kolona, 20 x 250 mm, uz eluaciju sa 40-100% vodenim metanolom, koji sadrži 0.1% TFA, tijekom 30 minuta i 100% tijekom 25 minuta, 25 mL/min, praćenje na 220 nm) dobiveno je 9.4 mg (37%) trifluorooctene soli spoja 502D, u obliku bistrog, bezbojnog ostatka. HPLC: 99% na 8.14 & 8.36 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Zorbax SB C18 kolona, 4.6 x 75 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 8 minuta, 2.5 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C30H29N3O4Cl [M+H]+: 530.1847. Nađeno: 530.1855.

Primjer 503

(3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[4-(5-oksazolil)-1-naftalenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (503E)

[image]

A. terc-butil ester (4-cijano-naftalen-1-il)-karbaminske kiseline (503A)

[image]

Otopini 4-amino-1-naftalenkarbonitrila (9.67 g, 57.5 mmol) u THF (100 mL) dodavan je, na rt, tijekom 10 minuta, natrij heksametildisilazan (1.0M u THF-u, 133mL, 133mmol). Poslije miješanja tijekom 15 minuta, dodata je otopina di-t-butildikarbonata (15.1 g, 69.0 mmol) u THF (20 mL). Poslije miješanja u toku 18 h, na rt, reakcijska mješavina je raspodijeljena između Et2O (400 mL) i zasićene otopine kalij bisulfata (200 mL). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfata (200 mL), zasićenom otopinom natrij bikarbonta (200 mL) i slanom otopinom (100 mL). Sušenjem preko bezvodnog magnezij sulfata, obradom sa ugljikom za otklanjanje boje i koncentriranjem in vacuo, proizveden je ostatak, koji je djelomično pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20% etil acetatom u heksanu. Djelomično pročišćeni materijal je iskristaliziran iz etil acetat/heksana, kako bi se dobilo 5.26 g spoja 503A, u obliku bezbojnih kristala. Matična tekućina je ukoncentrirana i iskristalizirana iz etil acetat/heksana, da bi se dobilo dodatnih 2.8 g spoja 503A, kako bi bilo dobiveno ukupno 8.06 g (52%) spoja 503A. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.81 (s, 1H), 8.36 (d, 1H, J=8.5 Hz), 8.11 (m, 2H), 7.92 (d, 1H, J=8 Hz), 7.78 (m, 1H), 7.67 (m, 1H), 1.53 (s, 9H).

B. terc-butil ester (4-formil-naftalen-1-il)-karbaminske kiseline (503B)

[image]

Mješavina spoja 503A (4.02 g, 15.0 mmol), Raney nikla (1.5 g), natrij hipofosfita (9.00 g, 86.5 mmol), piridina (50 mL), vode (25 mL) i octene kiseline (25 mL) je miješana na 45°C, tijekom 5 h. Smjesa je filtrirana kroz celit, a filterski sloj je ispran toplim etanolom (100mL). Poslije dodavanja vode (600 mL) filtratu i stajanja tijekom 1 h, stvoreni talog je filtriran i ispran vodom. Sušenjem in vacuo proizvedeno je 3.38 g bijele čvrste mase, koja je bila 3:1 mješavina spoja 503B & 503A. Materijal je korišten u idućem koraku bez daljeg pročišćavanja. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.28 (s, 1H), 9.77 (s, 1H), 9.27 (d, 1H, J=8.5 Hz), 8.31 (m, 1H), 8.13 (m, 1H), 8.00 (d, 1H, J=8 Hz), 7.80 (m, 1H), 7.70 (m, 1H), 1.54 (s, 9H).

C. terc-butil ester (4-oksazol-5-il-naftalen-1-il)-karbaminske kiseline (503C)

[image]

Prethodna mješavina spoja 503A & 503B (3.37 g, 10.0 mmol; korigirana za prisutnost spoja 503A), toluen-sulfonilizocijanida (2.15 g, 11.0 mmol) i kalij karbonata (1.66 g, 12.0 mmol) u 50 mL metanola je podvrgnuta refluksu tijekom 4 h. Reakcijska smjesa je raspodijeljena između vode (200 mL) i kloroforma (200 mL). Poslije ekstrakcije vodenog sloja sa kloroformom (100 mL), sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko magnezij sulfata i ukoncentrirani in vacuo. Sirovi ostatak je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa gradijentom 10-40% etil acetata u heksanu, kako bi se dobilo 1.35 g (44%) spoja 503C, u obliku bijele čvrste mase. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.45 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.20 (m, 2H), 7.76 (m, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.62 (m, 2H), 1.51 (s, 9H).

D. 4-oksazolil-5-il-naftalen-1-ilamin (503D)

[image]

Spoj 503C (1.34g, 4.3mmol) je otopljen u trifluorooctenoj kiselini (10 mL), a nastala mješavina je ostavljena da stoji tijekom 1 h na sobnoj temperaturi. Po uklanjanju isparljivih dijelova in vacuo, ostatak je koevaporiran iz etil acetat/heptana (2 x 50 mL), kako bi se uklonili tragovi trifluorooctene kiseline. Poslije raspodjeljivanja ostatka između etil acetata (100 mL) i 1N NaOH (75 mL), organski sloj je ispran slanom otopinom (50 mL), osušen preko magnezij sulfata i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo 900 mg (99%) spoja 503D, u obliku žute kristalne čvrste mase. HPLC uvjeti: 95% na 0.92 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex 5 mikrona, ODS kolona, 4.6 x 30 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 254 nm). MS (ES): m/z 211.22 [M+H]+.

E. (3aα,4β,7β,7aα)-heksahidro-4,7-dimetil-2-[4-(5-oksazolil)-1-naftalenil]-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (503E)

Mješavina spoja 503D (42 mg, 0.020 mmol) i 20A (78 mg, 0.40 mmol) u octenoj kiselini (1.0 mL) je podvrgnuta refluksu tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je ohlađena do rt i ukoncentrirana in vacuo, a ostatak je raspodijeljen između etil acetata (30 mL) i zasićene otopine natrij bikarbonata (30 mL). Organski sloj je izdvojen, osušen preko magnezij sulfata i ukoncentriran in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na 2.5 x 15 cm silika gel koloni, korištenjem gradijent 40-60% etil acetata u heksanu, dobiveno je 28 mg (37%) spoja 503E, u obliku bijelog praška. HPLC: 99% na 1.46 min & 1.36 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex 5 mikrona, ODS 4.6 x 30 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 254 nm). MS (ES): m/z 389.10 [M+H]+.

Primjer 504

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-4-etiloktahidro-5-metoksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (504C)

[image]

A. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil] oksi]etil]-4-etiloktahidro-5-metoksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (504A)

[image]

Otopini spoja 499ii (0.235 g, 0.451 mmol) u CH3CN (6 mL) je dodat srebro oksid (0.523 g, 2.26 mmol) i jodometan (0.56 mL, 9.0 mmol, miješan preko K2CO3, prije dodavanja). Nastala suspenzija je stavljena u prethodno zagrijanu uljnu kupelj (80°C). Poslije 24 h, reakcijska smjesa je ohlađena do rt, razrijeđena sa CH3CN (20 mL), filtrirana kroz sloj celita i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila smeđa guma. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% etil acetat/heksani, dobiveno je 0.156 g (65%) spoja 504A, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95% na 4.17 min & 4.25 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC CombiSreen ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 521.25 [M+H]+.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[4-etiloktahidro-7-(2-hidroksietil)-5-metoksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (504B)

[image]

Otopini spoja 504A (0.156 g, 0.292 mmol) u etanolu (6 mL) je dodata 1N HCl (0.44 mL, 0.44 mmol). Poslije 20 minuta, reakcija je ohlađena do 0°C i ugašena zasićenim vodenim NaHCO3 (2 mL), da bi se dobila bijela suspenzija. Dodata je H2O, dok se ne otopi čvrsta masa. Smjesa je ekstrahirana etil acetatom (3 x 30 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom (20 mL), osušeni preko Na2SO4, filtrirani i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobila bijela čvrsta masa. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5% MeOH/CH2Cl2, dobiveno je 120 mg (99%) spoja 504A, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 5.17 i 5.44 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC CombiSreen ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 8 minuta, 2.5 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C24H24N2O5 [M - H]+: 419.1607. Nađeno 419.1611.

C. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[7-[2-(4-cijanofenoksi)etil]-4-etiloktahidro-5-metoksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (504C)

Otopini spoja 504B (20 mg, 0.048 mmol) u bezvodnom THF (0.5 mL) su dodati PPh3 (37.0 mg, 0.143 mmol), para-cijanofenol (17.0 mg, 0.143 mmol) i DBAD (32.0 mg, 0.143 mmol). Poslije 30 minuta, otopina je ukoncentrirana, da bi se dobila smeđa guma. Pročišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC (YMC S5 ODS kolona, 20 x 250 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 35 minuta, 20 mL/min, praćenje na 220 nm) dobiveno je 16 mg (64%) spoja 504C, u obliku bistrog, bezbojnog ulja. HPLC: 98% na 6.84 i 7.10 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Zorbax SB C18 kolona, 4.6 x 75 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 8 minuta, 2.5 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C31H27N3O5 [M+NH4]+: 539.2295 Nađeno: 539.2302.

Primjer 505

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-4-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (505Bi) & (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-7-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (505Bii)

[image]

A. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,7aα)-4-[2-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil] oksi]etil]-6-etiloktahidro-3,5-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno[f]izoindol-4-il]-1-naftalenkarbonitril (505A)

[image]

Otopini spoja 434B (1.01 g, 2.01 mmol) u metilen kloridu (20 mL) je dodata 60% m-CPBA (0.863 g, 3.00 mmol). Poslije 48 h, reakcijska smjesa je razrijeđena metilen kloridom (50 mL) i isprana zasićenim Na2SO3 (20 mL) i zasićenim NaHCO3 (20 mL). Sjedinjeni vodeni slojevi su ekstrahirani sa CH2Cl2 (20 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom (30 mL), osušeni preko Na2SO4, filtrirani i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo 1.01 g (97%) spoja 505A, u obliku žute čvrste mase. Ovaj materijal je korišten bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 95% na 4.22 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex Luna C18 kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). HRMS m/z izračunato za C29H34N2O5Si [M-H]+: 517.2159. Nađeno 517.2163.

B. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[7-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-4-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (505Bi) & (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[4-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]etil]-7-etiloktahidro-5-hidroksi-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (505Bii)

Crvenoj otopini titanocen diklorida (0.500 g, 2.00 mmol) u bezvodnom THF (4.0 mL) je dodat cink prah (0.392 g, 6.00 mmol). Stvorena suspenzija je snažno miješana tijekom 1 h, pod atmosferom argona, kako bi se dobila zelena suspenzija. Višak cinka je uklonjen filtracijom preko 0.45 μm mikrofiltra, da bi se dobila zelena otopina diciklopentadienil titanij (III) klorida. Otopini spoja 505A (0.207 g, 0.399 mmol) i 1,4-cikloheksadiena (0.380 mL, 4.02 mmol) u bezvodnom THF (1 mL) je dodavaan, kap po kap, 0.5 M otopina gore opisanog diciklopentadienil titanijum (III) klorida (0.9 mL, 0.45 mmol). Poslije 1 h, dodat je dodatni alikvot 0.5 M otopine diciklopentadienil titanij (III) klorida (0.9 mL, 0.45 mmol) i miješanje je nastavljeno tijekom 1 h. Reakcija je, zatim, ugašena vodom (2 mL) i razrijeđena etil acetatom (10 mL). Izdvojeni su slojevi, a organski sloj je ispran slanom otopinom (5 mL), osušen preko Na2SO4, filtriran i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobila žuta guma. Sirovi materijal je otopljen u minimalnoj količini metilen klorida i napunjen na ISCO kolonu od 35 g silika gela. Gradijent eluacijom sa 0-80% etil acetata u heksanu, dobiveno je 0.043 g (21%) spoja 505Bi, u obliku bijele čvrste mase, i 0.023 g (11%) spoja 505Bii, u obliku bijele čvrste mase. Spoj 505Bi: HPLC: 3.92 min (retencijsko vrijeme) (YMC CombiSreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 521.36 [M+H]+. Spoj 505Bii: HPLC: 91% na 3.97 min (retencijsko vrijeme) (YMC CombiScreen ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 521.34 [M+H]+.

Primjer 506

4-[[(3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(α-D-glukopiranoziloksi)oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (506B)

[image]

A. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-5-[[2,3,4,6-tettumoris-O-(fenilmetil)-α-D-glukopiranozil]oksi]-4,7-epoksi-2H- izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (506A)

[image]

2,3,4,6-tetera-O-benzil-α-D-glukopiranozil bromid je izrađen u skladu sa postupkom iz Spohr et al. Can. J. Chem. 71, 1928-42 (1993). Oksalil bromid (0.48 mL, 0.95 mmol, 2M u CH2Cl2) je dodat, kap po kap, otopini 2,3,4,6-tetera-O-benzil-D-glukopiranoze (412 mg, 0.763 mmol) u CH2Cl2 (5 mL) i DMF (0.28 mL), na rt, pod Ar. Reakcijska smjesa je miješana tijekom 20 minuta, izlivena je na mješavinu leda i vode (1:1, 30 mL) i razrijeđena sa CH2Cl2 (30 mL). Izdvojeni su slojevi, a organski sloj je ispran hladnom H2O (2 x 30 mL) i slanom otopinom (1 x 30 mL) i osušen preko MgSO4. Koncentriranjem in vacuo dobiven je željeni bromid u obliku smeđeg ulja. Ovo ulje je pokupljeno u CH2Cl2 (2 mL) i DMF (1 mL). Spoj 471Dii (100 mg, 0.763 mmol), teterabutilamonij bromid (111 mg, 0.526 mmol) i sita od 4 Å (600 mg) dodati su ovom otopini i reakcijska smjesa je miješana pod Ar, tijekom 4 d. Reakcija je ugašena sa MeOH (2 mL), miješana tijekom 0.5 h i razrijeđena sa CH2Cl2 (10 mL), a zatim filtrirana kroz srednje porozni lijevak, uz ispiranje sa CH2Cl2 (5 mL). Otapalo je odstranjeno in vacuo, a nastali ostatak je otopljen u CH2Cl2 (25 mL). Organska otopina je isprana zasićenim vodenim NaHCO3 (1 x 20 mL) i H2O (1 x 20 mL) i osušen je preko MgSO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksani, dobiveno je 79 mg (33%) spoja 506A, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 4.56 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 902 [M+H]+.

B. 4-[[(3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(α-D-glukopiranoziloksi)oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (506B)

Paladij hidroksid (62 mg, 20 tež% Pd (suha baza) na ugljiku, vlažan) je dodat otopini spoja 506A (65 mg, 0.07 mmol) u EtOAc (2 mL) i smjesa je miješana pod atmosferom vodika, uvedenog preko balona. Poslije 5 h, reakcija je završena, što je utvrđeno HPLC-om, tako da je mješavina filtrirana kroz lijevak srednje poroznosti, uz ispiranje sa MeOH (2 mL), i ukoncentrirana je in vacuo. Nastali ostatak je otopljen u MeOH (2 mL) i filtriran kroz Gelman Acrodisc CR 13 mm špric filter sa 0.45 μM PTFE membranom. Koncentriranjem je proizvedeno 38 mg spoja 506B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 90% na 2.16 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 543.20 [M+H]+. Količina od 10 mg je rekristalizirana iz MeOH:H2O, da bi se dobili kristali, pogodni za ispitivanje difrakcije X-zraka kristala, kako bi se razjasnila egzaktna stereokemija spoja 506B, u odnosu na poznatu fiksnu stereokemiju D-glukozidnog dodatka.

Primjer 507

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (507)

[image]

U 25 g (94.2 mmol) spoja 471A dodat je čisti 2,5-dimetilfuran (30 mL, 280 mmol), a stvorena žitka masa je grijana do 60°C, tijekom 1 do 3 h, uz mehaničko miješanje. Nastala žitka masa je ohlađena do 0-5°C i razrijeđena hladnim toluenom (25 mL, 0-10°C). Hladna žitka masa je filtrirana pod vakuumom. Tikvica i filterski sloj su isprani hladnim toluenom (2 x 25 mL), a filterski sloj je oslobođen tekućine sa kućnim vakuumom (za odsisavanje). Talog je osušen in vacuo, da bi se dobilo 31.3 g (91.6%) spoja 507, u obliku žutosmeđe čvrste mase. HPLC: 99.6%, 19.43 min (retencijsko vrijeme) (Kolona: ZorbaxTM SB-C18, 4.6 x 15 cm; Mobilna faza: 40% CH3CN/60% H2O w/0.1% v/v TFA, izokratski; Brzina protoka: 1 mL/min; Mjerenje: λmax 210 nm; Temperatura: 30°C; Injekcijski volumen: 5 μL).

Primjer 508

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (508)

[image]

U THF (275 mL) koji je bio ohlađen do -3°C, dodat je spoj 507 (55.0 g, 152 mmol), što je dovelo do stvaranja žitke mase. Žitkoj masi je dodavan boran metilsulfid (14.4 mL, 152 mmol), takvom brzinom da temperatura nije prelazila 0°C. Reakcijska mješavina je polagano zagrijavana do 20°C, tijekom 2.5 h. Temperatura reakcijske smjese je, zatim, vraćena do 0°C, tijekom pažljivog dodavanja fosfatnog pufera (1056 mL, pH 7), takvom brzinom da se prati razvijanje plina, a temperatura održava ≤ 20°C. Nastala suspenzija je otopljena dodatkom etanola (528 mL, jačine 190). Na 15°C dodat je vodik peroksid (55 mL, 30 tež%), tako da se temperatura održava ≤ 20°C. Homogena otopina je ostavljena da se miješa tijekom 12 h, na 20°C i pri pH 7.8, pri čemu se dešava kristalizacija. Stvorena žitka masa je sakupljena filtracijom i isprana vodom (4 X 100 mL) i metil-terc-butil eterom (2 X 100 mL). Sušenjem in vacuo proizvedeno je 37.3 g (64.6 %) spoja 508. Vodena matična tekućina je ekstrahirana etil acetatom (3 X 500 mL). Sjedinjeni obilni organski dijelovi su isprani sa 10 tež% vodenim natrij sulfitom (1 X 100 mL) i 25 tež% vodenim natrij kloridom (1 X 100 mL). Organski dijelovi su osušeni preko natrij sulfata, filtrirani i ukoncentrirani da bi se vratilo 8.9 g (15.4 %) spoja 508, a treća frakcija od 11.5 g (20%) spoja 508 je obnovljena ispiranjem metil-terc-butil eterskog filterskog sloja. Prethodna tri čvrsta uzorka sirovog materijala su zasebno rekristalizirana iz etanola jačine 190 (1 g/ 10 mL), da bi se dobilo ukupno 35.6 g (61.7%) spoja 508, koji ima nivo čistoće od 98.7%, što je određeno HPLC analizom (uvjeti kao u nastavku). Druga količina spoja 508 je izdvojena iz matične tekućine, kako bi se dobilo 9.3 g (16.1%) čvrste mase, koja ima nivo čistoće od 98.4%, što je određeno HPLC analizom. Preostala matična tekućina je pročišćena kromatografijom na silika gelu, korištenjem 200 g SiO2 i uz eluaciju sa 4 L 50 V% etil acetata i 50 V% heptana, kako bi se dobilo 5.6 g (9.7%) spoja 508, koji ima nivo čistoće od 94.0%, što je određeno HPLC analizom. HPLC uvjeti: 9.74 minuta retencijsko vrijeme na YMC S5 ODS-AQ koloni (4.6 x 150 mm), korištenjem gradijenta eluacije od 100% otapaloa A do 100% otapaloa B, tijekom 15 minuta, pri 1.0 mL/min. Otapalo A=95 V% voda (0.01 M NH4OAc); 5 V% acetonitril. Otapalo B=5 V% voda (0.01 M NH4OAc); 95 V% acetonitril. Detektor na dvije valne dužine postavljen je na 210 nm i 245 nm. MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+.

Primjer 509

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (509)

[image]

Spoj 471A (0.37 g, 1.4 mmol) i 2,5-dimetilfuran (0.73 mL, 6.9 mmol) su sjedinjeni kako bi stvorili žitku masu, koja je zagrijavana do 60°C u toku 1 h. Reakcijska mješavina je ohlađena do -10°C i dodat je THF (1.0 mL), nakon čega je slijedilo dodavanje boran teterahidrofurana (2.1 mL, 1 M). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 30 minuta, na 0°C, i tijekom 30 minuta na +10°C. Reakcijskoj smjesi je dodat aceton (3.0 mL), a nastala mješavina je zagrijavana do 20°C i držana na temperaturi od 20°C, tijekom 1 h. Ovoj otopini je dodat natrij bikarbonat (1.5 mL, pH 9, 8 tež%), a mješavina je potom, ohlađena do 5°C, prije dodavanja vodik peroksida (0.3 mL, 30 tež%). Dodatak vodik peroksida je bio egzoterman, dovodeći temperaturu do 20°C. Na 20°C je dodata otopina natrij sulfita (4.0 mL, 10 tež%), što je izazvalo egzoterm do 30°C. Dvofazna mješavina je ostavljena da stoji na 25°C, tijekom 12 h. Pošto su faze izdvojene, vodeni otpad je ekstrahiran nazad dva puta sa etil acetatom (5 mL), a sjedinjeni organski slojevi su isprani vodom (2 mL), a zatim natrij kloridom (2 mL, 25 tež%). Organski slojevi su ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobilo žuto ulje, koje je brzo kristaliziralo. Sirovom proizvodu je dodat etanol jačine 190 (5.0 mL), a mješavina je zagrijavana do 60°C, da bi se postiglo potpuno otapanje. Hlađenje do 20°C, tijekom 17 h, dovelo je do kristalizacije. Kristalna žitka masa je sakupljena filtracijom, isprana heptanom (5 mL) i osušena na 60°C, pod vakuumom (30 in/Hg), kako bi se dobilo 0.23 g (44%) spoja 509, koji ima 93.1% HPLC površine. HPLC uvjeti: 9.74 minuta retencijsko vrijeme na YMC S5 ODS-AQ koloni (4.6 x 150 mm), korištenjem gradijenta eluacije od 100% otapala A do 100% otapala B, tijekom 15 minuta, pri 1.0 mL/min. Otapalo A=95 V% voda (0.01 M NH4OAc); 5 V% acetonitril. Otapalo B=5 V% voda (0.01 M NH4OAc); 95 V% acetonitril. Detektor je postavljen na 245 nm. MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+.

Primjer 510

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (510i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[5-(acetiloksi)oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (510ii)

[image]

Spoj 509 (4 mg), vinil acetat (0.1 mL) i toluen (2 mL) su sjedinjeni i dodato je 20 mg svakog od enzima, prikazanih u Tablici 12. Smjesa je miješana magnetnom mješalicom, na rt, u zatvorenoj epruveti 16 x 100 mm, tijekom vremenskog perioda, navedenog u Tablici 12. Enantioselektivna acetilacija racemske smjese dovela je do stvaranja spoja 510i i aciliranog spoja 510ii. Enantiomerna čistoća spoja 510i određena je kiralnom HPLC (postupak ispod), a rezultati za svaki enzim su prikazani u Tablici 12. Dobivene informacije su upotrijebljene za pripremu serije širokog raspona spojeva 510i & 510ii, kao što je opisano ispod.

Tablica 12.

[image]

U omotanu tikvicu od 500 mL dodani su: Amano lipaza AK20 iz Pseudomonas fluoroscens (25 g), spoj 509 (25 g), metil-izobutil-keton (475 mL) i vinil acetat (25 mL). Temperatura tikvice je održavana na 25°C, pomoću cirkulirajuće vodene kupelji i miješana je magnetnom mješalicom. Inkubacija je nastavljena tijekom 42 h, u kom trenutku je enantiomerni višak spoja 510i dostigao 100%. Otopina je filtrirana kroz filter papir Whatman 4, kako bi se uklonio enzim, a filterski sloj je ispran sa 50 mL metil izobutil ketona. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, a nastali ostatak je otopljen u EtOAc (50 mL), nakon čega je slijedilo dodavanje heptana (50 mL). Ovom otopinom je napunjena Phenomenex kartridž kolona (silika 800 g) u Biotage 75L sustavu, i kolona je eluirana sa 75% EtOAc/heptan pri brzini protoka od 110 mL/min. Sakupljene su frakcije (500 mL) koje su sadržavale spoj 510ii, a zatim je otapalo za eluaciju promijenjeno do 100% EtOAc, kako bi se izeluiralo spoj 510i. Željene frakcije su sjedinjene, a otapalo je uklonjeno in vacuo, kako bi se dobilo 11.0 g spoja 510i (44%, 100% ee) i 12.10 g spoja 510ii (44%). Spoj 510i je re-kristaliziran iz 95% EtOH (5 mL/g) u dvije količine, kako bi se dobilo 9.61 g (38%) spoja 510i, u obliku bijele kristalne čvrste mase. Spoj 510i: Kiralna HPLC: 10.02 min (retencijsko vrijeme) (CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). HPLC: 99% na 2.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+.

Primjer 511

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (511i) & mono[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-[2-[4-cijano-3-(trifluorometil)fenil]oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-il]ester butandionske kiseline (511ii)

[image]

Mješavina racemskog spoja 509 (10 mg), sukcinskog anhidrida (100 mg) i lipaze AK-20 Amano (50 mg) u toluenu ili MTBE (5 mL) je miješana na rt, tijekom 20 sati. Poslije 16 i 20 h, uzorci (0.1 mL) su izvučeni iz svake reakcijske smjese, upareni, ponovo otopljeni u acetonitrilu (1 mL) i analizirani pomoću reverzno fazne HPLC (YMC Pro-pack ODS-A, 3μ, 15 X 0.6 cm, acetonitril:voda 20:80 do 90:10 za 12 minuta), da bi se odredio odnos površine proizvoda, spoja 511i (RT=8.8 min) i spoja 511ii (RT=9.9 min). Drugi uzorak (0.1 mL) svake reakcijske mješavine je izdvojen, uparen, ponovo otopljen u 1 mL izopropil alkohol-heptana (1:1) i analiziran pomoću kiralne HPLC (CHIRALPAK AD, 25 X 0.46 cm, 20°C, heptan:etanol, 85:15, 0.5 mL/min, UV 210 nm), kako bi se odredio %ee spoja 511i (RT=32.2 min) i spoja 471Dii (RT=34.8 min). Poslije 20 h, reakcijska smjesa je otfiltrirana, da bi se izdvojile netopljive komponente (enzim, itd.). Filtrati su isprani sa 5% vodenim NaHCO3 (3 X 1 zapremina) i vodom (3 X 1 zapremina), upareni in vacuo i analizirani pomoću HPLC-a, kao što je prethodno opisano. Rezultati su pokazali prosječan prinos od 48% (teoretski maksimalni prinos je 50%) i 100% ee za spoj 511i. Potpuna separacija spoja 511i je izvedena preko gore opisane NaHCO3 ekstrakcije. Tablica 13 daje detalje svake reakcije, kao što je utvrđeno gore opisanim postupcima. Spoj 511i: Kiralna HPLC: 10.02 min; CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm kolona; izokratska eluacija sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min, 100% ee. HPLC: 99% na 2.45 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 381.11 [M+H]+.

Tablica 13.

[image]

Primjer 512

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[5-(acetiloksi)oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (512i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (512ii)

[image]

Poredane su serije tikvica od 50 mL i u svaku su odmjereni enzimi (vidi Tablicu 14 za vrstu i količine enzima), a zatim je slijedilo dodavanje fosfatnog pufera (BF45, 5 mL, 100 mM, pH 7). U svaku tikvicu je dodata otopina spoja 473 (5 mg) u DMSO (50 μL). Tikvice su mućkane na 200 rpm, na 28°C, tijekom 24 sata. Poslije 24 sata, reakcijske mješavine su ekstrahirane sa EtOAc (10 mL). dio EtOAc ekstrakta (1 mL) je uparen, otopljen dva puta u acetonitrilu (1 mL) i analiziran reverzno faznom HPLC (C-18, acetonitril:voda 20:80 do 90:10 u 12 minuta) kako bi se odredio odnos površine spoja 512i (RT= 11.0 min) i spoja 512ii (RT=8.9 min). Druga količina EtOAc ekstrakta (4 mL) je uparena, dva puta otopljena u 1 mL mješavine izopropil alkohol:heptan (1:1) i analizirana kiralnom HPLC (CHIRALPAK AD, heptan:etanol 85:15, 0.5 mL/min) da bi se odredio % ee spoja 512ii (RT=34.8 min) i spoja 471Di (RT=32.2 min) u ovom sustavu. Tablica 14 pruža detalje za nizove različitih ispitivanih enzima i rezultirajuće prinose i % ee za željene proizvode.

Tablica 14.

[image]

Primjer 513

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (513i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & (513ii) & (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (513iii)

[image]

Postavljene su serije reakcija biotransformacije mikrorganizmima, da bi se proizveli spojevi 513i, 513ii & 513iii. Detalji reakcija za nekoliko mikrorganizama su prikazani u Tablici 15, a opći postupak je opisan ispod. Jedna odmrznuta bočica mikroba (1 mL kultura) je inokulirana u sterilni medij soja-glukoza (10 mL) u tikvici od 50 mL. Mikrobi su porasli uz mućkanje na 200 rpm, na 28°C, tijekom 40 h. U svaku tikvicu je dodata otopina spoja 472 (10 mg u 100 μL DMSO) i tikvice su mućkane na 200 rpm, na 28°C. Poslije 24 i 48 sati, 5 mL reakcijskih mješavina je ekstrahirano pomoću EtOAc (10 mL). dio EtOAc ekstrakta (1 mL) je uparen, ponovljeno otopljen u acetonitrilu (1 mL) i analiziran reverzno faznom HPLC (C-18, acetonitril:voda 20:80 do 90:10 u 12 minuta) kako bi se odredio odnos površine spoja 472 (RT= 11.2 min) i proizvoda, spoja 513i (RT=8.9 min), 513ii (RT=8.9 min) & 513iii (RT=9.6 min). Druga količina EtOAc ekstrakta (4 mL) je uparena, dva puta otopljena u mješavini izopropil alkohol:heptana (1:1, 1 mL) i analizirana kiralnom HPLC (CHIRALPAK AD, heptan:etanol 85:15, 0.5 mL/min) da bi se odredio % ee spoja 513i (RT=32.2 min) i spoja 513ii (RT=34.8 min) u ovom sustavu.

Tablica 15.

[image]

Primjer 514

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (514i) & [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (514ii) & (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (514iii)

[image]

Postavljene su serije reakcija biotransformacije mikrorganizmima, da bi se proizveli spojevi 514i, 514ii & 514iii. Detalji reakcija za nekoliko mikrorganizama su prikazani u Tablici 16, a opći postupak je opisan ispod. 1 mL kulture Streptomyces griseus SC13971 iz zamrznute bočice je upotrijebljen za inokulaciju 100 mL medija (0.5% pržene nutrisoje, 2% glukoze, 0.5% ekstrakta kvasca, 0.5% K2HPO4, 0.5% NaCl, dotjeran do pH 7 sa 1N HCl (R.V. Smith i J.P. Rosazza, Arch. Biochem. Biophys., 161, 551-558 (1974)) u Erlenmajerovoj tikvici od 500 mL i tikvica je inkubirana na 28°C, na 200 rpm, u toku 3 dana. 10 mL ove kulture je upotrijebljeno za inokulaciju 100 mL medija (kao gore) u Erlenmajerovoj tikvici od 500 mL i tikvica je inkubirana na 28°C, na 200 rpm, u toku 1 dana. Za filamentozne gljive Mucor rouxii i Cunninghamella echinulata, 1 mL suspenzije spora, pripremljene ispiranjem kosine (slant) sa 10 mL vode, je upotrijebljen za inokulaciju 100 mL medija (kao prethodno) u Erlenmajerovoj tikvici od 500 mL i tikvica je inkubirana na 28°C, na 200 rpm, u toku 1 dana. Svakoj kulturi je dodati spoj 472 (30 mg u 1 mL metanola) i inkubacije su nastavljene tijekom 6 do 10 dana. Uzeti su uzorci od 10 mL kulture bujona u svakoj tikvici i ekstrahirane su etil acetatom (20 mL). Uzorci od 10 mL organskih slojeva su svaki zasebno upareni do suha na 40°C, pod strujom dušika. Ostaci su otopljeni u 1.2 mL izopropanola i analizirani reverzno faznom HPLC (YMC Pak ODS 150 x 6 mm, 3 μ C-18, acetonitril:voda 20:80 do 90:10 u 12 minuta, 1 mL/min, 40°C) kako bi se odredila koncentracija spoja 472 (RT= 11.2 min) i proizvoda, spoja 514i (RT=8.9 min), 514ii (RT=8.9 min) & 514iii (RT=9.6 min). Isti uzorci su analizirani kiralnom HPLC (CHIRALPAK AD, heptan:etanol 85:15, 0.5 mL/min) da bi se odredio % ee spoja 514i (RT=32.2 min) i spoja 514ii (RT=34.8 min) u ovom sustavu.

Tablica 16.

[image]

Primjer 515

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (515)

[image]

Mikrobna transformacija spoja 472 u spoj 515 je izvedena na 3 L skali u fermentoru od 5 L, korištenjem Cunninghamella echinulata SC 16027 (ATCC 9244) i medija, koji se sastoji od slijedećeg: 0.5% pržene nutrisoje, 2% glukoze, 0.5% ekstrakta kvasca, 0.5% K2HPO4, 0.5% NaCl, dotjeran do pH 7 sa 1N HCl (R.V. Smith i J.P. Rosazza, Arch. Biochem. Biophys., 161, 551-558 (1974)). prije sterilizacije, fermentor je napunjen sa 0.05% SAG antipjenećim sredstvom. Inokulum spora je pripremljen ispiranjem spora iz 10-dnevne kulture kosine (slanta) Cunninghamella echinulata SC 16027 (ATCC 9244) sa mješavinom 0.9% slana otopina/0.1% Tween 80. Stadij inokuluma je pripremljen dodavanjem 1 mL inokuluma spora u 100 mL medija u tikvici od 500 mL, a zatim su kulture rasle na 28°C, na 200 rpm, u toku 1 dana. 10% inokulum iz tikvice je miješan u sterilnoj Waring mješalici i upotrijebljen je za inokulaciju sterilnog fermentora, koji sadrži 3 L sterilnih medija. Fermentor je radio na 28°C na 600 rpm i sa 1 vvm aeracijom. Fermentoru je, po inokulaciji, dodata sterilna otopina tri antibiotika: 12 mg teteraciklin klorida, 12 mg kanamicin sulfata i 60 mg cefaleksin hidrata u 10 mL deionizirane vode. Poslije 22 sata rasta u fermentoru, dodat je sterilna supstratna otopina, koja sadrži 0.75 g spoja 472, otopljenog u 30 mL metanola, ovaj korak je ponovljen dva sata kasnije, do ukupne količine od 0.05 g/L spoja 472 u biokonverziji. Uvjeti fermentacije su održavani na 28°C, na 600 rpm i sa 1 vvm aeracijom. pH 6.5 je održavan automatskim dodavanjem 10% H2SO4 ili 10% NaOH. Povremeno su uzimani 10 mL aseptični uzorci i ekstrahirani su sa dvije 10 mL količine etil acetata. Etil acetatni sloj je izdvojen i osušen pod strujom dušika na 40°C, a ostatak je otopljen u 2.0 mL izopropilnog alkohola. Uzorci su analizirani pomoću reverzno fazne HPLC (postupak ispod), da bi se odredio odnos spoja 472 i proizvoda, spoja 515. Dodatno, svaki uzorak je analiziran pomoću kiralne HPLC (postupak ispod), kako bi se odredio % ee spoja 515. Tijekom procesa biokonverzije, u reakciju je ubacivana sterilna otopina 30% cereloze i 1.5% ekstrakta kvasca, pri ~5 mL/sat. Nakon 114 h od vremena dodavanja supstrata, reverzno faza HPLC analiza je pokazala proizvodnju spoja 515 sa 78% prinosom. Kiralnom HPLC analizom je izmjeren % e.e. spoja 515 od 94.9%. Prethodni postupak je ponovljen u druge 3 L biokonverzije, a reakcija je izvedena na 28°C, na 600 rpm, sa 1 vvm aeracijom i sa ubačenih 0.5 g/L spoja 472. Poslije 44 h, ovom reakcijom je dobiven 80%-tni prinos spoja 515 sa 95% e.e. Bujon je filtriran kroz sloj HyFloTM, da bi se dobio pročišćeni fermentacijski bujon. Bujon je filtriran kroz podlogu od HyFloTM, da bi se dobio pročišćeni fermentacijski bujon. Spoj 515 je potpuno adsorbiran na 55 g XAD-16 i ekstrahiran nazad u mješavinu 1:1 EtOAc i acetona (3 X 100 mL) ili metil-terc-butil eter (3 X 100 mL). Otapalo je uklonjeno in vacuo, a stvoreni ostatak je pročišćen pomoću silikatne podloge (5 g), uz eluaciju sa EtOAc. Željene frakcije su sakupljene i obrađene aktiviranim ugljikom (0.5 g), da bi se odstranila boja otopine, a otapalo je odstranjeno in vacuo, da bi se dobilo 1.27 g spoja 515. Rekristalizacijom ovog materijala iz EtOAc/heptana (10 mL/20 mL) dobiveno je 950 mg kristalnog spoja 515, koji ima 95% čistoću prema reverzno faznoj HPLC i 95% ee prema kiralnoj HPLC. Reverzno fazna HPLC: YMC Pak ODS-A C18 kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa gradijentom: 0 min 20% acetonitril/80% 0.1% TFA u vodi, 12 min 90% acetonitril/10% 0.1% TFA u vodi, 12.01-15 min 20% acetonitril/80% 0.1% TFA u vodi, praćenje na 250 nm, 40°C, 5 μL injekcijski volumen). Spoj 515: RT=8.86 min. Kiralna HPLC: CHIRALPAK OD 25x0.46 cm kolona; uz izokratsku eluaciju sa 15% etanol / 85% heptan pri 0.5 mL/min, 18°C, praćenje na 220 nm, injekcijski volumen: 20 μL. Spoj 515: RT=36.5 min.

U alternativnom procesu obnavljanja, fermentacijski bujon (1L) iz prethodne reakcije biohidroksilacije je filtriran, a filterski sloj stanica je ispran sa 100 mL vode. Bistri bujon je ekstrahiran sa etil acetatom (2 X 600 mL), a sloj stanica je ekstrahiran sa 400 mL etil acetata. Sakupljeni etil acetatni slojevi su ukoncentrirani, a nastali ostatak je otopljen u 5 mL 1:1 mješavine heptan/etil acetat i napunjen na silika gel podlogu (70 g u 250 mL fritovanog staklenog filtra). Silika gel podloga je eluirana sa gradijentom 80 do 90% EtOAc/heptan. Sakupljene su frakcije, a frakcije, koje sadržavati spoj 515 su sjedinjene. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a nastali proizvod je iskristaliziran iz EtOAc/heptana, da bi se dobio 90% prinos spoja 515, sa 98% čistoćom prema reverzno faznoj HPLC i 95% ee prema kiralnoj HPLC. Reverzno fazna HPLC: YMC Pak ODS-A C18 kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa gradijentom: 0 min 20% acetonitril/80% 0.1% TFA u vodi, 12 min 90% acetonitril/10% 0.1% TFA u vodi, 12.01-15 min 20% acetonitril/80% 0.1% TFA u vodi, praćenje na 250 nm, 40°C, 5 μL injekcijski volumen). Spoj 472: RT=11.12 min. Spoj 515: RT=8.86 min. Kiralna HPLC: CHIRALPAK OD 25x0.46 cm kolona; uz izokratsku eluaciju sa 15% etanol/85% heptan, pri 0.5 mL/min, 18°C, praćenje na 220 nm, injekcijski volumen: 20 μL. Spoj 472: RT=27.4 min. Spoj 515: RT=36.5 min. Spoj (514iii) RT=39.1 min.

Primjer 516

4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (516B)

Slijedeći Primjer demonstrira izradu intermedijera, korisnog za pripremu spoja sa formulom I ovog izuma.

[image]

A. 3-(4-cijano-3-trifluorometilfenilkarbamoil)akrilna kiselina (516A)

[image]

U tikvicu od 250 mL, sa okruglim dnom, dodati su 5-amino-2-cijanobenzotrifluorid (210.6 mmol; 40.00 g) i butil acetat (80 mL), nakon čega je slijedilo dodavanje maleinskog anhidrida (231.9 mmola, 23.20 g). Nastala suspenzija je zagrijavana do 60°C, tijekom 3.5 h. Reakcijska mješavina je ohlađena do 25°C, a zatim je, tijekom vremenskog perioda od 25 minuta, dodavan, kap po kap, heptan (160 mL). Stvorena suspenzija je filtrirana i isprana mješavinom 4:1 heptan:butil acetat (30 mL) i heptanom (45 mL). Sloj je osušen in vacuo, da bi se dobilo 60 g (95% prinos) spoja 516A.

B. 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitril (516B)

Spoj 516A (17.42 mmola, 5.000 g) je dodat u reakcijsku tikvicu, nakon čega je slijedilo dodavanje cink bromida (17.58 mmola, 3.960 g), a zatim je mješavini dodat toluen (50.00 mL, 43.25 g). Nastala suspenzija je miješana tijekom 20 minuta. Heksametildisilazan (26.35 mmola, 5.560 mL, 4.253 g) je dodat ovoj suspenziji, koja je, zatim, grijana do 60°C, tijekom 4.5 h. Reakcijska smjesa je razrijeđena sa EtOAc (25 mL), a zatim je ulivena u 1N otopinu HCl (30 mL), na 25°C. Sakupljena je organska faza, a vodena faza je ekstrahirana sa EtOAc (15 mL). Organska faza je izdvojena, sjedinjena sa ranijom organskom fazom i isprana uzastopno zasićenim NaHCO3 (15 mL), 1:1 mješavinom voda : slana otopina (15 mL) i slanom otopinom (15 mL). Nastala otopina je osušena nad MgSO4, filtriran i ukoncentriran in vacuo do 50 mL-ske suspenzije. U ovu suspenziju je, u obliku kapi, dodat heptan (125 mL) uz mućkanje. Dobivena gušća suspenzija je filtrirana i isprana mješavinom 2 : 1 heptan : toluen (15 mL) i zatim, heptanom (15 mL) da bi se dobilo 4 g (85%-tni prinos) spoja 516B. HPLC: 100% na 2.11 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, eluirajući sa 10-90% vodenim metanolom u toku 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

Primjeri 517 – 746

Dodatni spojevi ovog izuma su pripremljeni postupcima, koji su analogni onima, opisanim gore. Spojevi Primjera 517 do 746 imaju strukture, prikazane u slijedećoj Tablici 17. Tablica 17, isto tako, daje naziv spoja, retencijsko vrijeme / molekulsku masu i upotrijebljenu proceduru za izradu ovih spojeva. Kromatografske tehnike korištene za određivanje retencijskih vremena spojeva Tablice 17 su, kao što slijedi: LC i LCMS su opisane u Primjerima 439 do 454 (Tablica 9). Molekulske mase spojeva nabrojanih u Tablici 17, koje su prikazane, određene su MS-om (ES-om) pomoću formule m/z.

Tablica 17

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

Primjer 747

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-4-metil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-naftalenkarbonitril (747)

[image]

Dess-Martin perjodinan (122 mg, 0.29 mmol, pripremljen kao što je opisano u Ishiharaa, J., T. Fukuzakia, i sur. Teterahedron Letters 40(10), 1907-1910 (1999)) je dodat otopini spoja 490A (120 mg, 0.24 mmol) u diklorometanu (2.5 mL), pod dušikom, i smjesa je miješana tijekom 4 h. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana na polovinu, pod strujom dušika, aplicirana je na flash kartridž (Jones 2 g), sa celitom na vrhu, i eluirana je kloroform:heptanom (9:1) do kloroform:acetonom (4:1), da bi se dobilo 148 mg još onečišćene bijele čvrste mase. Čvrsta masa je otopljena u diklorometanu (5 mL) i heptanu (3 mL), a talog je filtriran preko 1 g silike i eluiran sa diklorometanom do kloroform:acetonom (4:1). Frakcije 3-9 (58.8 mg bijele čvrste mase) su gotovo čiste, a frakcije 10-13 (68 mg bijele pjene) su još onečišćene. Frakcije 3-9 su pročišćene preko silike (1 g), korištenjem, kao eluenta heptan do heptan:etil acetat (1:1), da bi se dobilo 35.8 mg (30% prinos) spoja 747, u obliku bijele čvrste mase. Frakcije 10-13 su pročišćene dodatkom ~400 mg silike u višak otopine sirovog spoja 747 u etil acetatu i heptanu i koncentrirajućiga. Silika je, zatim, stavljena na vrh prekondicionirane (heptan) silika kolone (1 g) i eluirana je gradijentom od heptana do heptan etil acetata (1:1), da bi se dobilo dodatnih 36.7 mg (31% prinos) spoja 747, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 94% na 3.46 & 3.59 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, 4 mL min, 4 min gradijent 100% A do 100% B, (A: 10% metanol, 89.1% voda, 0.1% TFA; B: 10% voda, 89.1% metanol, 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 502.11 [M+H]+.

Primjer 748

(3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-izokinolinkarbonitril (748D)

[image]

A. 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-izokinolin-1-karbonitril (748A)

[image]

Mješavina spoja 470D (200 mg, 1.18 mmol) i maleinskog anhidrida (470 mg, 4.7 mmol) u glacijalnoj octenoj kiselini (5 mL) je zagrijavana do refluksa tijekom 4 sata. Poslije odstranjivanja isparljivih dijelova in vacuo, ostatak je raspodijeljen između etil acetata (50 mL) i vode (50 mL). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom natrij bikarbonata (2 x 50 mL) i slanom otopinom (50 mL). Poslije sušenja preko magnezij sulfata, organski sloj je filtriran kroz podlogu od silika gela dimenzija 1 x 5 cm. Filtrat je ukoncentriran kako bi se dobilo 263 mg (90%) spoja 748a, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 99% na 1.12 min (Phenomenex 5 mikrona ODS 4.6 X 30 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 254 nm). MS (ES): m/z 250.2 [M+H]+.

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-1-izokinolinkarbonitril (748B)

[image]

Mješavina spoja 748A (250 mg, 1 mmol) i 2,5-dimetilfurana (4 mL) je zagrijavana do 60°C, tijekom 2 h. Za 15 minuta reakcijska mješavina je postala homogena. Talog je formiran za 45 minuta. Poslije hlađenja do 25°C, reakcijska smjesa je razrijeđena heksanom, a filterski sloj je ispran etil eter:heksanom, 1:1. Sušenjem pod visokim vakuumom dobiveno je 270 mg (78%) spoja 748B, u obliku svijetlo žute čvrste mase. 1H NMR-400 MHz (CDCl3): δ 8.55 (s, 1H), 8.54 (m, 1H), 7.86 (m, 3H), 6.45 (s, 2H), 3.18 (s, 2H), 1.81 (s, 6H).

C. (1aα,2β,2aα,5aα,6β,6aα)-4-[oktahidro-2,6-dimetil-3,5-diokso-2,6-epoksi-4H-oksireno[f]izoindol-4-il]-1-izokinolinkarbonitril (748C)

[image]

m-CPBA (70%, 110 mg, 0.45 mmol) je dodata otopini spoja 748B (100 mg, 0.29 mmol) u 3 mL diklorometana na 25°C. Poslije 1 h, dodata je dodatna m-CPBA (70%, 110 mg, 0.45 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom dodatnih 18 h. Poslije raspodjeljivanja reakcijske smjese između etil acetata (30 mL) i vode (30 mL), organski sloj je ispran zasićenom otopinom natrij bisulfita (30 mL), zasićenom otopinom natrij bikarbonata (2 x 30 mL) i slanom otopinom (30 mL). Uzorak je osušen preko magnezij sulfata i ukoncentriran kako bi se dobilo 103 mg (98%) spoja 748C, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 99% na 1.09 & 1.22 min (atropizomeri, retencijsko vrijeme) (Phenomenex 5 mikrona ODS 4.6 X 30 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 254 nm). MS (ES): m/z 362.07 [M+H]+.

D. (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-izokinolinkarbonitril (748D)

0.5 M otopina bis(ciklopentadienil)titanij klorida u THF (1.2 mL, 0.6 mmol) je dodavana kap po kap, tijekom 20 minuta, dobro izmješanoj suspenziji spoja 748C (103 mg, 0.29 mmol) u THF (2.5 mL) i 1,4-cikloheksadiena (1.2 mL), na 60°C. Poslije miješanja tijekom 1 h na 60°C, reakcijska mješavina je raspodijeljena između 1N HCl (40 mL) i etil acetata (50 mL). pH vodenog sloja je dotjeran do 7 sa čvrstim natrij bikarbonatom. Po ekstrakciji vodenog sloja sa etil acetatom, sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko natrij karbonata. Dodat je ugljik za otklanjanje boje (~1 g), a smjesa je ostavljena stajati 18 h. Filtracijom i koncentriranjem filtrata in vacuo, dobiveno je žuto ulje, koje je podvrgnuto kromatografiji na 2.5 x 15 cm silika gel koloni, korištenjem dikloro-metan:acetona, 6:4, kao mobilne faze. Koncentriranjem frakcija, koje sadržavaju proizvod, in vacuo, dobiven je djelomično pročišćen ostatak, koji je podvrgnut preparativnoj tankoslojnoj kromatografiji na silika gelu, koristeći diklorometan:aceton, 6:4, kao mobilnu fazu. Ekstrakcijom željene grupe sa CH2Cl2, filtracijom i koncentriranjem filtrata in vacuo, dobivena su 3 mg (31%) spoja 748D, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC uvjeti: 95% na 1.46 min (Phenomenex 5 mikrona ODS 4.6 X 30 mm, 10%-90% vodeni metanol, tijekom 2 minuta, gradijent sa 0.1% TFA, praćenje na 254 nm). MS (ES): m/z 364.19 [M+H]+.

Primjer 749

(3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-tiofenkarbonitril (749C)

[image]

A. 2-cijano-4-nitrotiofen (749Ai) & 2-cijano-5-nitrotiofen (749ii)

[image]

Dimeća dušična kiselina (21 mL) je polako dodata glacijalnoj octenoj kiselini (105 mL), a mješavina je, zatim, ohlađena u ledenoj kupelji. 2-cijanotiofen (7.98 g, 73.1 mmol) je otopljen u 20 mL octenog anhidrida i dodavan je, kap po kap, gornjoj mješavini kiselina, tako da temperatura nije prelazila 25°C. Kada je dodavanje završeno, reakcijska mješavina je zagrijana do 22°C i miješana tijekom 48 h. Reakcijska smjesa je izlivena preko 400 mL leda i ekstrahirana sa 200 mL dietiletera. Eterski sloj je izdvojen, ispran vodom, a zatim slanom otopinom i osušen preko MgSO4. Filtriranjem i koncentriranjem in vacuo dobiven je ljepljiv, narančasti ostatak, koji je pročišćen kromatografijom na koloni, korištenjem, kao eluenta, 1:1 heksani/metilen klorid, kako bi se dobilo 1.69 g (15%) spoja 749Ai, u obliku bijele čvrste mase i 1.71 g (15%) spoja 749Aii, u obliku žute kristalne supstance. Spoj 749Ai: HPLC: 0.73 minuta (retencijsko vrijeme) (Phenomenex kolona 30 X 4.6 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 5 mL/min, praćenje na 220 nm). Spoj 749Aii: HPLC: 99% na 0.89 minuta (retencijsko vrijeme) (Phenomenex kolona 30 X 4.6 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 5 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. 4-amino-2-cijanotiofen (749B)

[image]

U tikvicu od 100 mL sa 3 grla je dodat spoj 749Ai (1.42 g, 9.21 mmol), otopljeno u etil acetatu (20 mL), a zatim 10% otopina octene kiseline (20 mL). Dvofazna mješavina je zagrijana do 65°C, a zatim je dodavan, dio po dio, tijekom 5 minuta, prah željeza (2.95 g, 52.9 mmol). Poslije miješanja tijekom 1.5 h, na 65°C, reakcijska smjesa je filtrirana kroz sloj celita, a filtratni sloj je ispran etil acetatom. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom (3 x 20 mL) i slanom otopinom i osušen preko MgSO4. Filtriranjem i koncentriranjem in vacuo, dobiven je tamni jantarni ostatak, koji je pročišćen kromatografijom na koloni, korištenjem, kao eluenta, 30% dietil eter/metilen klorid, kako bi se dobilo 84 mg (73%) spoja 749B, u obliku smeđe čvrste mase. HPLC: 93.4% na 0.26 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

C. (3aα,4β,7β,7aα)-4-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-tiofenkarbonitril (749C)

U pireks epruvetu je dodat spoj 749B (0.06 g, 0.5 mmol), toluen (1 mL), trietilamin (0.25 g, 0.35 mL, 2.5 mmol), MgSO4 (0.15 g, 1.3 mmol) i spoj 20A. Epruveta je začepljena teflonskim poklopcem i zagrijavana preko noći na 145°C. Reakcijska smjesa je ohlađena, razrijeđena metilen kloridom i filtrirana kroz celit. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, a ostatak je pročišćen kromatografijom na koloni, koristeći, kao eluent, 10% eter/metilen klorid, kako bi se dobilo 14 mg (95%) spoja 749C, u obliku svijetlo žute kristalne čvrste mase. HPLC: 94.6% na 2.6 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 303.05 [M+H]+.

Primjer 750

(3aα,4β,7β,7aα)-5-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-tiofenkarbonitril (750B)

[image]

A. 5-amino-2-cijanotiofen (750A)

[image]

U tikvicu od 100 mL sa 3 grla je dodat spoj 749Ai (1.63 g, 10.1 mmol), otopljeno u etil acetatu (20 mL), a zatim 10% otopina octene kiseline (20 mL). Dvofazna mješavina je zagrijana do 65°C, a zatim je dodavan, dio po dio, tijekom 5 minuta, prah željeza (2.95 g, 52.9 mmol). Poslije miješanja tijekom 1.5 h, na 65°C, reakcijska smjesa je filtrirana kroz sloj celita, a filtratni sloj je ispran etil acetatom. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom (3 x 20 mL) i slanom otopinom i osušen preko MgSO4. Filtriranjem i koncentriranjem in vacuo, dobiven je tamni jantarni ostatak, koji je pročišćen kromatografijom na koloni, koristeći, kao eluent 10% dietil eter/metilen klorid, kako bi se dobilo 87 mg (66%) spoja 750A, u obliku smeđe čvrste mase. HPLC: 94.2% na 1.05 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-5-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-tiofenkarbonitril (750B)

U pireks epruvetu je dodat spoj 750A (0.06 g, 0.5 mmol), toluen (1 mL), trietilamin (0.25 g, 0.35 mL, 2.5 mmol), MgSO4 (0.15 g, 1.3 mmol) i spoj 20B. Epruveta je začepljena teflonskim poklopcem i zagrijavana preko noći na 145°C. Reakcijska smjesa je ohlađena, razrijeđena metilen kloridom i filtrirana kroz celit. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, a ostatak je pročišćen kromatografijom na koloni, korištenjem, kao eluenta, 10% eter/metilen klorid, kako bi se dobilo 143 mg (96%) spoja 750B, u obliku svijetlo žute kristalne čvrste mase. HPLC: 92.7% na 2.93 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 303.21 [M+H]+.

Primjer 751

[3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (751)

[image]

Otopini spoja 471Dii (2.36 g, 6.21 mmol) u teterahidrofuranu (THF, 20 mL), ohlađenom u ledenoj kupelji (~5°C), dodata je, odjednom, vodena 1M otopina NaOH (10 mL, 10 mmol). Nastala svijetlo žuta reakcijska smjesa je miješana tijekom 30 minuta, a zatim je zakiseljena dodatkom vodene 1M otopine HCl (12 mL, 12 mmol) i raspodijeljena između vode (100 mL) i EtOAc (40 mL). Vodeni sloj je izdvojen i ekstrahiran sa EtOAc (25 mL). Organske faze su sjedinjene, brzo osušene preko natrij sulfata i filtrirane, uz ispiranje sa vrućim THF, kako bi se otopilo nešto precipitiranog čvrstog proizvoda. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, da bi se dobio sirovi aminokiselinski intermedijer otvorenog prstena, u obliku bijele čvrste mase. Žitka masa sirovog materijala je suspendirana u 60 mL suhog THF i 5 mL glacijalne octene kiseline i zagrijavana je, uz miješanje, do 60°C, tijekom kojeg vremena je mješavina postala homogena. Poslije 9 h, reakcijska smjesa je ohlađena i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila blijedo žuta čvrsta masa. Čvrsta masa je usitnjena sa 30 mL toluena, zagrijana je (~50°C), a zatim je ostavljena da se ohladi do rt. Netopljivi proizvod je sakupljen na Buchnerovom lijevku, ispran je toluenom i osušen pod vakuumom, da bi se dobio spoj 751 (75%) u obliku bijele čvrste mase. 400 MHz 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.34 (s, 3H), 1.34 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 2.32 (dd, J=7.3, 13.1, 1H), 3.20 (d, J=7.3, 1H), 3.28 (d, J=7.2, 1H), 3.79 (m, 1H), 5.11 (d, J=6.1, 1H); 100 MHz 13C NMR (DMSO-d6) δ 169.6, 86.7, 82.3, 72.8, 52.9, 50.3, 46.5, 16.0, 11.2. Apsolutna stereokemija spoja 751 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 47Dii i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici.

Primjer 752

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (752)

[image]

Spoj 752 je sintetiziran kao što je opisano u primjeru 751, sa izuzetkom što je polazni spoj 471Di upotrijebljen kao polazni materijal prije nego spoj 471Dii. 400 MHz 1H NMR (DMSO-d6) δ 1.34 (s, 3H), 1.34 (m, 1H), 1.45 (s, 3H), 2.32 (dd, J=7.3, 13.1, 1H), 3.20 (d, J=7.3, 1H), 3.28 (d, J=7.2, 1H), 3.79 (m, 1H), 5.11 (d, J=6.1, 1H); 100 MHz 13C NMR (DMSO-d6) δ 169.6, 86.7, 82.3, 72.8, 52.9, 50.3, 46.5, 16.0, 11.2. Apsolutna stereokemija spoja 752 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 47Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici.

Primjer 753

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (753G)

[image]

A. 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitril (453A)

[image]

Mješavina 3-trifluorometil-4-cijano-anilina (24.0 g, 129 mmol) i maleinskog anhidrida (14.0 g, 143 mmol) u 50 mL octene kiseline je grijana na 115°C, preko noći. Talog je dobiven tijekom perioda zagrijavanja. Reakcijska mješavina je ostavljena da stoji na rt tijekom dodatnog perioda, tijekom noći. Čvrsta masa je odstranjena filtracijom, a filterski sloj je ispran dietil eterom i osušen, kako bi se dobilo 21 mg (79 mmol, 61%) spoja 753A, u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.11 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,7β,7aα)-4-(1,3,3a,4,7,7a-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (753B)

[image]

Žitka masa 4-(2,5-dihidro-2,5-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitrila (15.0 g, 56.35 mmol) i 2,5-dimetilfurana (32.5 g, 338 mmol) je miješana na 60°C, tijekom 3 h, a zatim je miješanje nastavljeno tijekom dodatnih 14 h na 23°C. Smjesa je razrijeđena hladnim (~ 5°C) toluenom (15 mL), a nastala sivo bijela čvrsta masa je sakupljena filtracijom dok je hladna. Filterski sloj je ispran hladnim toluenom (20 mL) i sušen na 23°C u vakuumskoj sušnici, tijekom 24 h, da bi se dobio spoj 753B (18.6 g, 91% prinos) sa čistoćom od 98.7%, što je određeno HPLC-om.

C. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (753C)

[image]

Žitka masa spoja 753B (5.0 g, 13.81 mmol), alilpaladij klorid dimera (10 mg, 0.027 mmol i (R)-2-metoksi-2’-difenilfosfino-1,1’-binaftila (R-MOP, 26 mg, 0.055 mmol) u THF (14 mL) je očišćena dušikom i ohlađena do 10°C. Gornjoj smjesi je polako, tijekom perioda od 10 minuta, dodavan triklorosilan (3.7 g, 27.62 mmol), a nastala homogena smjesa je miješana tijekom 24 h, na 10°C. Mješavina je razrijeđena sa THF (85 mL) i dalje ohlađena do -20°C. Prethodnoj smjesi je polako dodata otopina trietilamina (9.76 g, 96.67 mmol) u etanolu (6.35 g, 138.1 mmol), održavajući temperaturu <25°C i smjesa je miješana tijekom dodatna 2 h na rt. Bijela čvrsta masa je filtrirana, filterski sloj je ispran sa THF (50 mL), a filtrat je uparen pod smanjenim pritiskom. Uljani ostatak je otopljen u etil acetatu (100 mL) i miješan je na 23°C, u prisutnosti tritiocijanurične kiseline (TMT, 500 mg) i ugljena (500 mg) tijekom 5 h. Žitka masa je filtrirana kroz sloj celita i silika gela, a filtrat je uparen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je otopljen u mješavini THF (175 mL) i metanola (125 mL), a ovoj smjesi je dodat bezvodni kalij fluorid (2.0 g, 34.5 mmol), kalij hidrogenkarbonat (6.9 g, 69 mmol), a zatim urea-vodik peroksid spoj (6.5 g, 69 mmol). Ova suspenzija je miješana na rt tijekom 14 h i dodata je dodatna količina kalij fluorida (800 mg, 13.81 mmol), kalij hidrogenkarbonata (1.38 g, 13.81 mmol) i spoja urea-vodik peroksid (2.59 g, 27.62 mmol). Miješanje je nastavljeno tijekom dodatnih 12 h, žitka masa je filtrirana, a filterski sloj je ispran etil acetatom (100 mL). Filtrat je ispran uzastopno sa 10% vodenim natrij hidrogensulfitom (50 mL x 2), vodom (50 mL) i slanom otopinom (50 mL). Otapalo je upareno pod smanjenim pritiskom kako bi se dobila svijetlo smeđa pjena. Podvrgavanjem ove pjene kromatografiji na koloni, koristeći silika gel i EtOAc-heptan (2:3), dobiven je spoj 753C (4.72 g, 90%, >96% čistoća prema HPLC), u obliku sivobijele čvrste mase. Materijal ima enantiomernu čistoću >96% ee, prema kiralnoj HPLC i LC-MS:m/z 379(M+H-). Apsolutna stereokemija spoja 753C je ustanovljena usporedbom sa postojećim materijalom poznate stereokemije, kao što je opisano u Primjeru 483.

D. [1S-(1β,2α,3α,4β,6β)]-3-[[(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)amino]karbonil]-6-hidroksi-1,4-dimetil-7-oksa-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina & [1R-(1β,2α,3α,4β,5β)]-3-[[(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)amino]karbonil]-5-hidroksi-1,4-dimetil-7-oksa-biciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilna kiselina (753Di & 753Dii)

[image]

Spoj 753C (25.0 g, 65.7 mmol) je otopljen u THF (100 mL), na 22°C, i dodat je 1N NaOH (100 mL). Poslije 1 h, dodati su THF (100 mL), 1N HCl (110 mL) i slana otopina (100 mL). Smjesa je, zatim, ekstrahirana, jednom, sa EtOAc (200 mL) i dva puta sa 1:1 THF/EtOAc (200 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog MgSO4, filtrirani su i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobili spoevi 753Di i 753Dii (1:1, prema HPLC), u obliku bijele čvrste mase. Pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 100% na 2.217 i 2.413 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

E. [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksiizobenzofuran-1,3-dion (753E)

[image]

Spojevi 753Di i 753Dii su suspendirani u mješavini THF (500 mL) i AcOH (200 mL) i grijani su do 60°C, tijekom 16 h. Reakcija je, poslije 4 h, postala homogena. Reakcijska mješavina je ohlađena do 22°C i ukoncentrirana in vacuo. Zatim je dodat toluen (200 mL), a mješavina je grijana do 90°C tijekom 4 h, dok se sav proizvod nije otopio. Smjesa je, zatim, ohlađena do 22°C i ostavljena da stoji tijekom 20 h. Spoj 753E se istaložio iz otopine tijekom perioda od 20 h. Nastala čvrsta masa je filtrirana i isprana toluenom, nakon čega je slijedilo sušenje in vacuo. Dobiven je prinos od 11.93 g sirovog spoja 753E, u obliku sivobijele čvrste mase. Sirov spoj 753E (10 g) je otopljen u 350 mL toplog EtOAc (otopina je bila mutna), zatim je dodato 5 g ugljika za otklanjanje boje, i smjesa je miješana na rt, tijekom 40 minuta. Poslije filtriranja kroz celit, filterski sloj je ispran vrućim EtOAc (2 x 50 ml). Koncentriranjem filtrata je dobivena sivobijela čvrsta masa, koja je otopljena u 40 mL vrućeg acetonitrila. Poslije pažljivog dodavanja 200 ml etil etera, dodato je 300 ml heksana, a tikvica je ostavljena da stoji tijekom 18 h na rt. Filtracijom i sušenjem je dobiveno 8.32 g spoja 753E, u obliku bezbojne kristalne čvrste mase. 1H NMR (DMSO-d6): δ= 5.11 (d, 1H, J=6.0 Hz), 3.78 (dd, 1H, J=7.2, 30.6 Hz), 3.27 (d, 1H, J=7.2 Hz), 3.20 (d, 1H, J=7.3 Hz), 2.27 (dd, 1H, J=7.3, 13.1 Hz), 1.44 (s,3H), 1.33 (s, 3H) i 1.32 ppm (m, 1H).

F. 4-amino-2-jodo-benzonitril (753F)

[image]

2-jodo-4-nitro-benzonitril (1.00 g, 3.65 mmol, je pripremljen postupkom, datim u J. Med. Chem. 2000, 43, 3344-47) je otopljen u THF (20 mL) na 60°C, uz mehaničko miješanje. Zatim je dodat EtOH (25 mL), a potom vodeni NH4Cl (0.293 g, 5.48 mmol u 20 mL H2O). Zatim je, uz snažno miješanje, dodat prašak željeza (325 sito, 0.815 g, 14.6 mmol). Reakcija je završena poslije 2 h. Ohlađena je do 22°C i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc. Mješavina je, zatim, ukoncentrirana do ~20 mL, a zatim je razrijeđena sa EtOAc (200 mL i isprana jednom sa 1N NaOH (50 mL) i jednom sa slanom otopinom (50 mL) i osušena preko bezvodnog MgSO4, da bi se dobio spoj 753F (0.710 g) u obliku svijetlo žute čvrste mase. Dodatno pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 99% na 2.147 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

G. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (753G)

Smjesa spoja 753E (1.60 g, 7.57 mmol), spoja 753F (1.32 g, 5.41 mmol) i molekularnih sita od 4 Å (2.0 g) u dimetilacetamidu (8 mL) je miješana u uljnoj kupelji na 175°C, tijekom 4 h. Nastala tamna mješavina je ohlađena i razrijeđena sa EtOAc (50 mL), a zatim je filtrirana kako bi se uklonila sita i isprana sa EtOAc. Filtrat je raspodijeljen između EtOAc (50 mL) i vode (75 mL). Organska faza je izdvojena, isprana vodom (2 x 75 mL) i slanom otopinom (50 mL), a zatim je razrijeđena sa teterahidrofuranom (20 mL), osušena preko natrij sulfata i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila čvrsta pjena. Sirovi materijal je usitnjen s dietil eterom (100 mL), a zatim je miješana tijekom 1.5 h. Čvrsti precipitat je sakupljen na Buchnerovom lijevku, a zatim je suspendiran u dietil eteru (50 mL) i miješan tijekom 16 h. Nastala čvrsta masa je sakupljena na Buchnerovom lijevku, isprana dietil eterom i osušena pod vakuumom (90°C), da bi se dobio spoj 753G (67%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 96% na 3.00 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 438.90 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 753G je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 753C i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici.

Primjer 754

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (754)

[image]

Smjesa spoja 751 (850 mg, 4.01 mmol), 4-cijano-3-jodo-anilina (975 mg, 4.01 mmol) i molekularnih sita od 4 Å (1.2 g) u dimetilacetamidu (4.5 mL) je miješana u uljnum kupatilu na 175°C, tijekom 4 h. Nastala tamna mješavina je ohlađena, filtrirana, kako bi se uklonila sita, i isprana sa EtOAc. Filtrat je raspodijeljen između EtOAc (50 mL) i vode (50 mL). Organska faza je izdvojena, isprana vodom (2 x 50 mL) i slanom otopinom (25 mL), a zatim je osušena preko natrij sulfata i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je otopljen u teterahidrofuranu i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 1:4 aceton/metilen klorid, da bi se dobila onečišćena bijela čvrsta masa. Onečišćeni materijal je suspendiran u dietil eteru (75 mL) i miješan tijekom 18 h, a zatim je sakupljen na Buchnerovom lijevku, da bi se dobilo 650 mg (37%) spoja 754, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.90 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 438.95 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 754 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 755

[image]

Otopina spoja 471Di (80 mg, 0.21 mmol), etil izocijanata (30 mg, 0.43 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (5 mg, 0.04 mmol) u suhom teterahidrofuranu (1 mL) je zagrijavana do 55°C, tijekom 2 h, a zatim je dodat dodatni etil izocijanat (30 mg) i zagrijavan je tijekom još 2 h. Dodata je završna količina EIC (30 mg), a zatim je, nakon 16 h, reakcijska mješavina ohlađena, ukoncentrirana in vacuo i pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa 2:1 EtOAc/heptanom, da bi se dobilo 80 mg (86%) spoja 755, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 94% na 3.51 minuta (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 452.29 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 755 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 756

[image]

Otopina spoja 471Dii (80 mg, 0.21 mmol), etil izocijanata (100 mg, 1.4 mmol) i 4-dimetilaminopiridina (8 mg, 0.07 mmol) u suhom teterahidrofuranu (2 mL) je zagrijavana do 60°C, tijekom 16 h, a zatim je ohlađena, dodat je MeOH a otopina je ukoncentrirana in vacuo. Reakcijska smjesa je pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 2:1 EtOAc/heptanom, da bi se dobilo 84 mg (90%) spoja 756, u obliku bijele čvrste pjene. HPLC: 94% na 3.54 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 452.34 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 756 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Dii i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 757

[image]

A. (757A)

[image]

Mješavina spoja 471Di (620 mg, 1.63 mmol), srebro(I) oksida (3.78 g, 16.3 mmol), alil jodida (2.74 g, 16.3 mmol) i suhog MeCN (15 mL) je brzo miješana na 75-80°C, tijekom 7.5 h. Nastala smjesa je ohlađena i filtrirana kroz sloj celita, uz ispiranje sa EtOAc. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, a sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa 1:1 EtOAc/heptanom, da bi se dobilo 570 mg (83%) spoja 757A, u obliku stakla. HPLC: 96% na 3.72 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 421.27 [M+H]+.

B. (757B)

[image]

Mješavini spoja 757A (85 mg, 0.20 mmol), 4-metilmorfolin-N-oksida (26 mg, 0.22 mmol) i acetona (1.6 mL), na rt je dodata voda (0.4 mL), a zatim 2.5% otopina osmij tetroksida u t-butanolu (17 mg, 0.002 mmol). Reakcijska mješavina je miješana tijekom 5 h, a zatim je filtrirana kroz podlogu od Florosila. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, a ostatak je raspodijeljen između EtOAc i 1M vodene otopine HCl. Organska faza je izdvojena, osušena preko natrij sulfata i ukoncentrirana in vacuo, a sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa 2:1 aceton/heptanom, da bi se dobio spoj 757B (52 mg, 55%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.11 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 455 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 757B je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 758

[image]

Otopini spoja 757A (45 mg, 0.11 mmol), ugljik teteraklorida (0.50 mL), acetonitrila (0.5 mL) i vode (0.75 mL), na rt, je dodat natrij perjodat (94 mg, 0.44 mmol), a zatim, poslije nekoliko minuta, rutenij(III) klorid hidrat (50 mg, 0.24 mmol). Poslije 30 minuta, tamna smjesa je raspodijeljena između metilen klorida (20 mL) i vode (20 mL). Mješavina je filtrirana, kako bi se uklonili čvrsti dijelovi, a zatim je organska faza odvojena, osušena preko natrij sulfata i ukoncentrirana in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa 1:20 MeOH/EtOAc, a zatim sa 1:5:100 HOAc/MeOH/EtOAc, da bi se dobio spoj 758 (19 mg, 36%), u obliku bijele čvrste pjene. HPLC: 99% na 3.31 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 437.23 [M-H]-. Apsolutna stereokemija spoja 758 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 759

[image]

Otopini spoja 471Di (100 mg, 0.26 mmol) i trietilamina (50 mg, 0.50 mmol) u suhom metilen kloridu (3 mL), ohlađenoj u ledenoj kupelji, dodat je etil kloroformat (40 μ, 0.40 mmol). Reakcijska mješavina je zagrijana do rt, tijekom 2 h, i dodata je dodatna količina etil kloroformata (40 μL), trietilamina (50 mg) i 4-dimetilaminopiridina (10 mg, 0.08 mmol). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 18 h, na rt, a zatim je raspodijeljena između 25 mL EtOAc i 25 mL 1M vodene otopine HCl. Organska faza je izdvojena, isprana 1M vodenom HCl (2 x 25 mL) i slanom otopinom (1 x 25 mL), osušena (natrij sulfat) i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 1:1 EtOAc/heptanom, a zatim rekristalizacijom (EtOAc/heptan), dobiveno je 76 mg (65%) spoja 759, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.85 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 453.01 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 759 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 760

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro- 5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (760D)

[image]

A. N-(4-kloro-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetilpropionamid (760A)

[image]

Otopini komercijalno dostupnog 4-kloro-3-(trifuorometil)anilina (15.0 g, 76.7 mmol) u bezvodnom THF (200 mL), ohlađenom do 0-5°C, dodat je trietilamin (11.7 mL, 84.4 mmol), a zatim pivaloil klorid (10.4 mL, 84.4 mmol), tijekom 30 minuta. Ledena kupelj je uklonjena, a mješavina je miješana na rt, tijekom 1 h. Smjesa je razrijeđena eterom i filtrirana. Filtrat je ispran vodom (2X) i slanom otopinom, osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran. Ostatak je usitnjen sa heksanima, a čvrsta masa je filtrirana i osušena in vacuo, da bi se dobio spoj 760A (20.4 g, 95%); MS (ES): m/z = 280 [M+H]+.

B. N-(4-kloro-2-metil-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetilpropionamid (760B)

[image]

Otopini N-(4-kloro-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetilproionamida (2.29 g, 8.19 mmol) u bezvodnom THF (25 mL), ohlađenoj do 0-5°C, polako je dodavana otopina 1.6M n-butillitija u heksanima (12.3 mL, 19.7 mmol), tako da je temperatura reakcije održavana ispod 5°C. Otopina je miješana na 0-5°C, tijekom 1.5 h. Otopina jodometana (0.56 mL, 9.01 mmol) u petrolej eteru (2 mL) je dodavana tijekom 20 minuta, dok je temperatura održavana ispod 5°C. Suspenzija je miješana na 0-5°C tijekom 1 h i razrijeđena je vodom i eterom. Vodeni sloj je ekstrahiran eterom, a sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i ukoncentrirani. Ostatak je podvrgnut kromatografiji (silika gel), uz eluaciju sa CH2Cl2, da bi se dobio spoj 760B (1.60 g, 67%). MS (ES): m/z = 294 [M+1]+.

C. 4-kloro-2-metil-3-trifluorometilanilin (760C)

[image]

N-(4-kloro-2-metil-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetil-propionamid (1.0 g, 3.4 mmol) je dodat mješavini 1:1 (15 mL) koncentrirane HCl i etanola i zagrijavan je pod refluksom tijekom noći. Reakcijska mješavina je ohlađena i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila žutosmeđa čvrsta masa, koja je, zatim, raspodijeljena između EtOAc i zasićenog NaHCO3. Organski sloj je izdvojen, ispran vodom i slanom otopinom, osušen (Na2SO4), filtriran i ukoncentriran, da bi se dobio spoj 760C (0.54 g, 76%) u obliku smeđe masne čvrste mase.

D. [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (760D)

U pireks epruvetu, koja se može zapečatiti, dodati su: 4-kloro-2-metil-3-trifluorometilanilin (0.1 g, 0.48 mmol), spoj 751 (0.15 g, 0.72 mmol), TEA (0.24 g, 0.33 mL, 2.4 mmol), MgSO4 (0.14 g, 1.2 mmol) i toluen (0.5 mL). Reakcijska mješavina je zagrijavana u zapečaćenoj epruveti na 150°C, tijekom 18 h. Ohlađena reakcijska smjesa je razrijeđena sa EtOAc, filtrirana, ukoncentrirana i pročišćena posredstvom prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 760D (0.078 g, 40%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 90% na 3.26 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 404.01 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 760D je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 761

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro- 5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (761)

[image]

U pireks epruvetu, koja se može zapečatiti, dodati su: spoj 760C (0.1 g, 0.48 mmol), spoj 752 (0.15 g, 0.72 mmol), TEA (0.24 g, 0.33 mL, 2.4 mmol), MgSO4 (0.14 g, 1.2 mmol) i toluen (0.5 mL). Reakcijska smjesa je zagrijavana u zapečaćenoj epruveti na 150°C, tijekom 18 h. Ohlađena reakcijska mješavina je razrijeđena sa EtOAc, filtrirana, ukoncentrirana i pročišćena posredstvom SiO2 prep-TLC, koristeći, kao eluent, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 761 (0.056 g, 29%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 90% na 3.27 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 403.91 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 761 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 762

[image]

A. 3-metoksipiridin-1-oksid (762A)

[image]

3-metoksipiridin (20.08 g, 209 mmol) je otopljen u 100 mL octene kiseline. Dodat je 30% H2O2 (28.3 mL, 275 mmol) i reakcijska smjesa je grijana na 70°C tijekom šest sati. Ohlađena reakcijska mješavina je ukoncentrirana, a ostatak je otopljen u CH2Cl2 i miješan je preko noći sa 20 g čvrstog kalij karbonata. Smjesa je filtrirana i ukoncentrirana, kako bi se dobio spoj 762A (25.2 g, 100%) u obliku svijetlo žute čvrste mase, koja je opisana pomoću 1H NMR i prenesena u idući korak.

B. 2-cijano-3-metoksipiridin (762B)

[image]

3-metoksipiridin-1-oksid (25.2 g, 209 mmol) je otopljen u acetonitrilu (260 mL). Dodati su trimetilsilicijanid (66.35 g, 669 mmol) i trietilamin (45.13 g, 446 mmol), a reakcijska smjesa je zagrijavana do refluksa tijekom noći. Ohlađena otopina je ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobila smeđa čvrsta masa, koja je raspodijeljena između CH2Cl2 i 3M Na2CO3. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen (MgSO4), filtriran i ukoncentriran in vacuo. Ostatak je pročišćen kromatografijom na silika gelu, korištenjem, kao eluenta, 1:1 EtOAc/heksani. Spoj 762B je izoliran (17.63 g, 63%) u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 96.2% na 1.37 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 134.88 [M+H]+.

C. 2-cijano-3-metoksi-5-nitropiridin (762C)

[image]

2-cijano-3-metoksipiridin (17.63 g, 131.4 mmol) je otopljen u CH2Cl2 (400 mL) i ohlađen u ledenoj kupelji. Teterabutilamonij nitrat (52.02 g, 170.8 mmol) i trifluoroocteni anhidrid (35.88 g, 170.8 mmol) su otopljeni u 200 mL CH2Cl2 i dodati u tankom nizu, preko lijevka za dodavanje. Smjesa je zagrijavana do 23°C i miješana je tijekom 60 h. Reakcijska smjesa je miješana u toku jednog h, sa zasićenim natrij bikarbonatom. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen (MgSO4), filtriran, ukoncentriran in vacuo i pročišćen kromatografijom na silika gel koloni, korištenjem, kao eluenta, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 762C (18.07 g, 79%) u obliku svijetlo žute kristalne čvrste mase. HPLC: 100% na 1.67 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 179.93 [M+H]+.

D. 5-amino-2-cijano-3-metoksipiridin (762D)

[image]

2-cijano-3-metoksi-5-nitropiridin (1.0 g, 5.6 mmol) je otopljen u 1:1 EtOAc/AcOH (10 mL) i zagrijavan do 65°C. Dodat je prašak željeza (1.61 g, 28 mmol, sito 325) i smjesa je miješana tijekom dva h. Smjesa je filtrirana kroz celit, a filtrat je ukoncentriran in vacuo. Ostatak je raspodijeljen između EtOAc i zasićenog vodenog natrij bikarbonata. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen (MgSO4), filtriran, ukoncentriran. Ostatak je pročišćen preko SiO2 prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 762D (0.805 g, 97%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.31 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 149.90 [M+H]+.

E. (762E)

5-amino-2-cijano-3-metoksipiridin (0.1 g, 0.67 mmol), molekularna sita od 4 Å (0.4 g), spoj 751 (0.142 g, 0.67 mmol) i N,N-dimetilacetamid (0.67 mL) su sjedinjeni u zapečaćenoj pireks epruveti i zagrijavani na 170°C, tijekom 1 h. Ohlađena reakcijska mješavina je razrijeđena sa EtOAc i filtrirana. Filtrat je ispran 3x sa mješavinom 1:1 zasićeni NH4Cl/voda, a zatim slanom otopinom. Filtrat je sušen preko Na2SO4, filtriran, ukoncentriran i pročišćen prep-TLC-om, korištenjem, kao eluenta, 4:1 kloroform/aceton, da bi se dobio spoj 762E (0.062 g, 27%) u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 94% na 1.85 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 344.02 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 762E je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 763

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril (763F)

[image]

A. 3-bromopiridin-1-oksid (763A)

[image]

3-bromopiridin (11.06 g, 70 mmol), 30% H2O2 (14 mL, 140 mmol) i metiltrioksorenij (0.035 g, 0.14 mmol) su dodati u 28 mL CH2Cl2 i miješani na rt, preko noći. Dodata je količina od 25 mg mangan dioksida, a reakcijska smjesa je miješana dok se ne završi razvijanje kisika (~ 1h). Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobio spoj 673A (9.84 g (81%) u obliku žutog ulja.

B. 3-bromo-2-cijanopiridin (763B)

[image]

3-bromopiridin-1-oksid je preveden u spoj 763B, kao što je opisano u primjeru 762B. Sirovi proizvod je pročišćen kromatografijom na silika gelu, koristeći, kao eluent, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 763B (6.64 g, 65%) u obliku sivobijele čvrste mase. Produkt je opisan pomoću 1H NMR.

C. 3-bromo-2-cijano-5-nitropiridin (763C)

[image]

3-bromo-2-cijanopiridin je preveden u spoj 763C, kao što je opisano u primjeru 762C. Sirovi produkt je pročišćen kromatografijom na silika gelu, koristeći, kao eluent, 20% heksani/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 763C (1.27 g, 16%) u obliku sivobijele čvrste mase. Proizvod je opisan pomoću 1H NMR.

D. 2-cijano-5-nitro-3-trifluorometilpiridin (763D)

[image]

3-bromo-2-cijano-5-nitropiridin (0.23g, 1mmol) je otopljen u DMF (3 mL). Dodati su bakar jodid (0.023 g, 0.12 mmol) i metil 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acetat (0.1 g, 0.5 mmol), a reakcijska smjesa je miješana na 80°C, tijekom 7 h. Dodat je dodatni metil 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acetat (0.05 g, 0.25 mmol) i zagrijavanje na 80°C je nastavljeno tijekom dodatnih 8 h. Ohlađena reakcijska smjesa je ulivena u vodu, da bi s dobilo tamno ulje. Voda je dekantirana, a ulje je otopljeno u EtOAc i isprano vodom i slanom otopinom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran in vacuo. Ostatak je pročišćen kromatografijom na silika gelu, korištenjem, kao eluenta, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 763D (0.065 g, 43%) u obliku žutog ulja. HPLC: 90% na 2.09 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm.

E. 5-amino-2-cijano-3-trifluorometilpiridin (763E)

[image]

2-cijano-5-nitro-3-trifluorometilpiridin (0.065 g, 0.3 mmol) je reagirao na isti način kao što je opisano u primjeru 762D, da bi se dobio željeni spoj 763E (0.046 g, 82%), u obliku zlatno obojene čvrste mase, poslije usitnjavanja sa eterom. HPLC: 100% na 2.07 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 187.82 [M+H]+.

F. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril (763F)

5-amino-2-cijano-3-trifluorometilpiridin (0.044 g, 0.24 mmol) je reagirao sa spojem 752 (0.087 g, 0.41 mmol), u skladu sa postupkom, opisanim za sintezu spoja 762. Sirovi proizvod je pročišćen posredstvom SiO2 prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 15% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 763F (0.058 g, 65%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 92% na 2.58 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 382.33 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 763F je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 764

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril (764)

[image]

5-amino-2-cijano-3-trifluorometilpiridin (0.2g, 1.07mmol) je reagirao sa spojem 751 (0.386 g, 1.82 mmol), u skladu sa postupkom, opisanim u primjeru 763F. Sirovi proizvod je pročišćen posredstvom SiO2 prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 15% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 764 (0.293 g, 72%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 92% na 2.58 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 382.23 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 764 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 765

(765D)

[image]

A. 2-hidroksi-3-jodo-5-nitropiridin (765A)

[image]

2-hidroksi-5-nitropiridin (7.0 g, 50 mmol) je suspendiran u 100 mL 20% sumporne kiseline, a zatim je obrađen kalij jodatom (4.2 g, 19.6 mmol), otopljenim u 10 mL vode. Mješavina je zagrijavana do 100°C i dodavan je, kap po kap, tijekom jednog h, kalij jodid (8.0 g, 48.2 mmol), otopljen u 20 mL vode. Reakcijska smjesa postaje rumeno-crvena i tvori se precipitat. Poslije 0.5 h, reakcijska smjesa je ohlađena i filtrirana. Čvrsta masa je miješana tijekom 15 minuta sa 10% otopinom natrij meta-bisulfita, filtrirana je, isprana vodom i osušena na 80°C, preko noći, na vakuumskoj pumpi, kako bi se dobilo željeno spoj 765A (12.32 g, 92%), u obliku žute čvrste mase. Proizvod je opisan pomoću 1H NMR.

B. 2-kloro-3-jodo-5-nitropiridin (765B)

[image]

2-hidroksi-3-jodo-5-nitropiridin (2.55g, 9.5mmol), fosforni pentaklorid (2.60 g, 12 mmol) i fosforni oksiklorid (2 mL) su sjedinjeni u tikvici, pod dušikom, i zagrijavani su do 140°C, tijekom 45 minuta. Ohlađena reakcijska smjesa je izlivena preko leda, da bi se dobila čvrsta masa, koja je raspodijeljena između CH2Cl2 i vode. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen (MgSO4) i filtriran, a Otapalo je odstranjeno in vacuo, da bi se dobio spoj 765B (2.25 g, 83%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 98.5% na 2.75 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm.

C. 5-amino-2-kloro-3-jodopiridin (765C)

[image]

2-kloro-3-jodo-5-nitropiridin (0.25 g, 0.88 mmol) je reagirao sa praškom željeza (0.25 g, 4.4 mmol), na način, opisan u primjeru 762D. Uklanjanjem otapala in vacuo dobiven je spoj 765C (0.172 g, 77%) u obliku zlatno žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.32 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 255.03 [M+H]+.

D. (765D)

5-amino-2-kloro-3-jodopiridin (0.06 g, 0.24 mmol) i spoj 752 (0.085 g, 0.4 mmol) su reagirali kao što je prethodno opisano u primjeru 762E. Sirovi proizvod, dobiven nakon izrade, pročišćen je pomoću SiO2 prep-TLC, koristeći, kao eluent, 10% aceton/CHCl3, kako bi se dobio spoj 765D (0.067 g, 62%), u obliku sivobijele pjene. HPLC: 95% na 2.65 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 448.96 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 765D je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 766

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)piridinil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (766C)

[image]

A. 2-kloro-5-nitro-3-trifluorometilpiridin (766A)

[image]

2-kloro-3-jodo-5-nitropiridin (1.0 g, 3.5 mmol), metil 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acetat (0.35 g, 1.82 mmol) i bakar jodid (0.083 g, 0.44 mmol) su reagirali u DMF (10 mL), u skladu sa postupkom, opisanim u primjeru 763D. Sirovi proizvod je pročišćen kromatografijom na silika gelu, koristeći, kao eluent, 30% CH2Cl2/heksan, kako bi se dobio spoj 766A (0.278 g, 35%), u obliku bezbojnog ulja. Proizvod je opisan pomoću 1H NMR i 19F NMR.

B. 5-amino-2-kloro-3-trifluorometilpiridin (766B)

[image]

2-kloro-5-nitro-3-trifluorometilpiridin (0.16 g, 0.68 mmol) i prašak željeza (0.2 g, 3.42 mmol, sito 325) su reagirali kao što je opisano u primjeru 762D. Pročišćavanjem sirovog proizvoda posredstvom prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 10% eter/CH2Cl2, dobiven je spoj 766B (0.098 g, 735) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 89% na 2.52 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 197.01 [M+H]+.

C.[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)piridinil) heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (766C)

5-amino-2-kloro-3-trifluorometilpiridin (0.045 g, 0.23 mmol) i spoj 751 (0.085 g, 0.4 mmol) su reagirali kao što je opisano u primjeru 762E. Nakon izrade, sirovi proizvod je pročišćen posredstvom prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 10% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 766C (0.038 g, 42%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.92 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 391.06 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 766C je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 767

[image]

5-amino-2-kloro-3-jodopiridin (0.06 g, 0.24 mmol) i spoj 752 (0.085 g, 0.4 mmol) su reagirali kao što je opisano u primjeru 762E. Sirovi reakcijski proizvod je pročišćen posredstvom prep-TLC, koristeći, kao eluent, 20% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 767 (0.061 g, 58%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.64 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 449.02 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 767 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 768

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)piridinil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (768)

[image]

6-kloro-5-trifluorometil-piridin-3-ilamin (0.045 g, 0.23 mmol) i spoj 752 (0.085 g, 0.4 mmol) su reagirali kao što je opisano u primjeru 762E. Sirovi proizvod je pročišćen posredstvom SiO2 prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 10% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 768 (0.048 g, 54%) u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.91 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 391.21 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 768 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 769

[image]

A. 5-amino-3-bromo-2-cijanopiridin (769A)

[image]

3-bromo-2-cijano-5-nitropiridin (0.4 g, 1.75 mmol) i prašak željeza (0.51 g, 8.8 mmol, sito 325) su reagirali kao što je opisano u primjeru 762D. Sirova čvrsta masa, dobivena usitnjavanjem sa eterom, pročišćena je posredstvom SiO2 prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 4:1 CH2Cl2/eter, da bi se dobio spoj 769A (0.16 g, (65%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.77 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 197.93 [M+H]+.

B. (769B)

5-amino-3-bromo-2-cijanopiridin (0.06 g, 0.3 mmol) i spoj 752 (0.096 g, 0.45 mmol) su reagirali kao prethodno, u primjeru 762E. Sirovi proizvod je pročišćen posredstvom SiO2 prep-TLC, korištenjem, kao eluenta, 20% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 769B (0.036 g, 30%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.29 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 393.33 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 769B je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 770

[image]

5-amino-3-bromo-2-cijanopiridin (0.06 g, 0.3 mmol) i spoj 751 (0.096 g, 0.45 mmol) su reagirali kao prethodno u primjeru 762E. Sirovi proizvod je pročišćen posredstvom SiO2 prep-TLC, koristeći 20% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 770 (0.038 g, 31%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 99.2% na 2.28 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 392.27 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 770 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 771

[image]

A. 3-fluoropiridin-1-oksid (771A)

[image]

3-fluoropiridin (9.71 g, 100 mmol), 30% H2O2 (20 mL, 200 mmol) i metiltrioksorenij (0.13 g, 0.5 mmol) su reagirali u 40 mL CH2Cl2, u skladu sa postupkom, koji je istovjetan onome, opisanom u primjeru 760C. Filtriranjem i koncentriranjem otapala in vacuo, dobiven je spoj 771A (8.79 g, 78%) u obliku žute čvrste mase.

B. 2-cijano-3-trifluoropiridin (771B)

[image]

3-fluoropiridin-1-oksid (10.0 g, 88.4 mmol), trimetilsililcijanid (26.32 g, 265.3 mmol) i trietilamin (17.89 g, 177 mmol) su reagirali u 90 mL acetonitrila, korištenjem postupka, opisanog u primjeru 762B. Pročišćavanjem sirovog proizvoda kromatografijom na silika gelu, korištenjem, kao eluenta, CH2Cl2, dobiven je spoj 771B (7.5 g, 70%) u obliku svijetlo žute čvrste mase.

C. 2-cijano-3-fluoro-5-nitropiridin (771C)

[image]

2-cijano-3-fluoropiridin (6.5 g, 53.2 mmol), teterabutilamonij nitrat (21.07 g, 69.2 mmol) i trifluoroocteni anhidrid (14.53 g, 69.2 mmol) su reagirali u 245 mL CH2Cl2, korištenjem postupka, opisan u primjeru 762C. Pročišćavanjem sirovog proizvoda kromatografijom na silika gelu, korištenjem, 20% heksani/CH2Cl2, dobiven je spoj 771C (0.12 g, 1.3%) u obliku žutog ulja.

D. 5-amino-2-cijano-3-fluoropiridin (771D)

[image]

2-cijano-3-fluoro-5-nitropiridin (0.12 g, 0.72 mmol) i prašak željeza (0.21 g, 3.6 mmol, sito 325) su reagirali u 1:1 EtOAc/AcOH (10 mL), koristeći postupak, opisan u primjeru 762D. Usitnjavanjem sirovog proizvoda s eterom, dobiven je spoj 771D (0.093 g, 94%) u obliku blijedo žutog ulja. HPLC: 99% na 1.27 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 138.02 [M+H]+.

E. (771E)

5-amino-2-cijano-3-fluoropiridin (0.45 g, 0.33 mmol) i spoj 752 (0.104 g, 0.49 mmol) su reagirali u 0.33 mL dimetilacetamida, korištenjem postupka, opisanog u primjeru 762E. Sirovi ostatak je pročišćen posredstvom prep-TLC, koristeći, kao eluent, 20% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 771E (0.026 g, 23%) u obliku čvrste mase boje blijede breskve. HPLC: 90.2% na 1.97 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 332.2 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 771E je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 772

[image]

A. 2-cijano-3-metil-5-nitropiridin (772A)

[image]

Komercijalno rapoloživi 2-cijano-3-metilpiridin (2.36 g, 20 mmol), teterabutilamonij nitrat (6.7 g, 22 mmol) i trifluoroocteni anhidrid (4.20 g, 20 mmol) su reagirali u 65 mL CH2Cl2, koristeći postupak, opisan u primjeru 762B. Pročišćavanjem sirovog proizvoda kromatografijom na silika gelu, korištenjem, kao eluenta, 20% heksani/CH2Cl2, dobiven je spoj 772A (1.05 g, (32%) u obliku svijetlo žute čvrste mase.

B. 5-amino-2-cijano-3-metilpiridin (772B)

[image]

2-cijano-3-metil-5-nitropiridin (0.2 g, 1.23 mmol) je otopljen u 6 mL 90%-tnog etanola i dodat je kalcij klorid (0.07 g, 0.64 mmol), a zatim prašak željeza (0.62 g, 11.1 mmol, 325 sito). Heterogena smjesa je miješana tijekom jednog h. Smjesa je filtrirana kroz celit i ukoncentrirana, da bi se dobio spoj 772B (0.13 g, 81%) u obliku svijetlo-smeđe čvrste mase.

C. (772C)

5-amino-2-cijano-3-metilpiridin (0.067 g, 0.5 mmol), spoj 20A (0.103 g, 0.53 mmol), MgSO4 (0.15 g, 1.25 mmol), trietilamin (0.25 g, 2.5 mmol) i 1 mL toluena su sjedinjeni u zapečaćenoj epruveti i zagrijavani na 145°C, tijekom 16 h. Ohlađena mješavina je razrijeđena sa CH2Cl2, filtrirana i pročišćena kromatografijom na silika gelu, koristeći, kao eluent, 5% eter/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 772C (0.055 g, 35%) u obliku čvrste mase sivobijele boje. HPLC: 100% na 2.49 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 312.2 [M+H]+.

Primjer 773

[image]

A. 2-cijano-3,4-dimetil-5-nitropiridin (773A)

[image]

2-cijano-3-metil-5-nitropiridin (0.33 g, 2 mmol) je otopljen u 10 mL THF i ohlađen u suhi led/aceton kupelji, pod dušikom. Preko šprica je, u toku pet minuta, dodavan metilmagnezij bromid (1.33 mL, 4 mmol). Reakcijska mješavina je miješana tijekom 2 h, na -70°. Dodat je DDQ (0.068 g, 3 mmol) u 7 mL THF i mješavina je zagrijana do 25°C. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a ostatak je pročišćen kromatografijom na silika gelu, korištenjem kao eluenta, CH2Cl2, kako bi se dobio spoj 773A (0.15 g, 42%) u obliku crvenog ulja.

B. 5-amino-2-cijano-3,4-dimetilpiridin (773B)

[image]

2-cijano-3,4-dimetil-5-nitropiridin (0.15 g, 0.85 mmol), kalcij klorid (0.05 g, 0.42 mmol) i prašak željeza (0.44 g, 7.8 mmol, sito 325) su reagirali kao što je opisano u primjeru 772B. Pročišćavanjem sirovog proizvoda kromatografijom na silika gelu, koristeći kao eluent, 1:1 eter/CH2Cl2, dobiven je spoj 773B (0.054 g, 50%) u obliku žute čvrste mase.

C. (773C)

5-amino-2-cijano-3,4-dimetilpiridin (0.05 g, 0.34 mmol) i spoj 20A (0.1 g, 0.5 mmol) su reagirali, kao što je opisano u primjeru 772C. Sirovi proizvod, dobiven nakon filtracije kroz celit, pročišćen je kromatografijom na silika gelu, koristeći kao eluent, 10% eter/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 773C (0.33 g, 30%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 90% na 2.58 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 326.22 [M+H]+.

Primjer 774

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (774Bi i 774Bii)

[image]

A. [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil) benzonitril & [3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi] oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (774Ai & 774Aii)

[image]

Racemski spoj 222C je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK AD 5x50 cm kolona; uz eluaciju sa 7% EtOH u heksanima (izokratski) pri 50 mL/min) da bi se dobio spoj 774Ai, koji se brže eluira (18 minuta) i spoj 774Aii, koji se sporije eluira.

B. [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & 3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (774Bi i 774Bii)

Svaki od spojeva 774Ai i 774Aii (0.12 g, 0.25 mmol) je otopljen u 2 mL THF, dodato je 2 mL 10% HCl/MeOH, i reakcijske mješavine su miješane preko noći na rt. Dodati su zasićeni natrij bikarbonat i EtOAc, a organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen (Na2SO4), filtriran i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobio spoj 774Bi (0.084 mg, 88%) i spoj 774Bii (0.076 g, 82%) u obliku bijelih čvrstih faza. Spoj 774Bi: HPLC: 100% na 2.89 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 381.19 [M+H]. Spoj 774Bii: HPLC: 100% na 2.89 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 381.16 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spojeva 774Bi & 774Bii nije ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 775

(775F)

[image]

A. 3-kloropiridin-1-oksid (775A)

[image]

Komercijalno rapoloživi 3-kloropiridin (11.36 g, 100 mmol) je otopljen u 60 mL octene kiseline i dodat je 30% vodik peroksid (15 mL). Reakcijska smjesa je zagrijavana do 70°C tijekom 16 h. Ohlađena reakcijska smjesa je razrijeđena kloroformom i miješana sa čvrstim kalij karbonatom. Mješavina je filtrirana, a otapalo je odstranjeno in vacuo, da bi se dobio spoj 775A (10.21 g, 79%) u obliku žuto-zelenog ulja.

B. 3-kloro-2-cijanopiridin (775B)

[image]

3-kloropiridin-1-oksid (2.59 g, 20 mmol), trimetilsilil cijanid (5.95 g, 60 mmol) i trietilamin (4.05 g, 40 mmol) su sjedinjeni u 40 mL acetonitrila i reagirali su kao što je opisano u primjeru 763A. Otapalo je uklonjeno in vacuo, a ostatak je raspodijeljen između CH2Cl2 i 3M kalij karbonata. Organski sloj je izdvojen, ispran slanom otopinom, osušen (MgSO4) i ukoncentriran in vacuo. Pročišćavanjem sirovog proizvoda kromatografijom na silika gelu, koristeći, kao eluent, 5% eter/CH2Cl2, dobiven je spoj 775B (1.84 g, 67%), u obliku bijele kristalne čvrste mase. HPLC: 100% na 1.64 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 139.0 [M+H]+.

C. 3-kloro-2-cijano-5-nitropiridin (775C)

[image]

3-kloro-2-cijanopiridin (1.75 g, 12.7 mmol), teterabutilamonij nitrat (5.02 g, 16.5 mmol) i trifluoroocteni anhidrid (3.15 g, 150 mmol) su sjedinjeni u 65 mL CH2Cl2, i reagirali su kao što je opisano u primjeru 762C. Sirovi proizvod je pročišćen kromatografijom na silika gelu, koristeći, kao eluent, CH2Cl2, da bi se dobio spoj 775C (0.43 g, 16%) u obliku blijedo žute čvrste mase.

D. 5-amino-3-kloro-2-cijanopiridin (775D)

[image]

3-kloro-2-cijano-5-nitropiridin (0.35 g, 1.9 mmol), prašak željeza (0.56 g, 10 mmol, 325 sito) i kalcij klorid (0.06 g, 0.55 mmol) su sjedinjeni u 10 mL 90%-tnog etanola i kao što je opisano u primjeru 772B. Pročišćavanjem sirovog proizvoda putem silika gel kromatografije, koristeći, kao eluent, 10% eter/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 775D (0.14 g, 43%) u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 95.5% na 1.69 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 154.03 [M+H]+.

E. (775E)

5-amino-3-kloro-2-cijanopiridin (0.05 g, 0.33 mmol) i spoj 20A (0.07 g, 0.36 mmol) su reagirali kao što je opisano u primjeru 772C. Sirovi proizvod, dobiven nakon izrade, pročišćen je kromatografijom na silika gelu, korištenjem, kao eluenta, 5% eter/CH2Cl2, da bi se dobio spoj 775E (0.054 g, 50%) u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 97.6% na 2.86 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. MS (ES): m/z 332.16 [M+H]+.

Primjer 776

[image]

Bistroj otopini spoja 741Di (190 mg, 0.5 mmol) u bezvodnom dioksanu (3.5 mL) je dodat Burgessov reagens (143 mg, 0.6 mmol), na rt, pod argonom. Pošto je smjesa miješana na rt, tijekom 70 minuta, dodat je bis(ciklopentadienil) titanij diklorid (137 mg, 0.55 mmol). Smjesa je miješana na 100°C, tijekom 1 dana, a zatim je ohlađena do rt. Dodati su H2O i zasićena vodena otopina KHSO4. Mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:4 do odnosa 1:0), dobiven je spoj 776 (170 mg, 74%) u obliku žute staklaste čvrste mase. HPLC: 99% na 3.27 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 458 [M-H]-. Apsolutna stereokemija spoja 776 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 741Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 777

[image]

A. Etil ester pirazolo[1,5-a]piridin-4-karboksilne kiseline (777A)

[image]

Bistroj otopini etil estera 2-metil-nikotinske kiseline (50.6 g, 306 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (200 mL) je dodat, dio po dio, na 0°C, O-mezitilensulfonilhidroksilamin (73 g, 337 mmol; pripremljen u skladu sa postupkom iz literature, opisanim u Krause; J.G., Synthesis 1972, 140). Dobivena otopina je miješana na 0°C, tijekom 15 minuta, a zatim na rt, tijekom 1 h. Koncentriranjem pod smanjenim pritiskom dobivena je žuta čvrsta masa. Pošto je čvrsta masa otopljena u bezvodnom DMF (300 mL), dodat je, na 0°C, N,N-dimetilformamid dimetil acetal (122 mL, 918 mmol). Smjesa je miješana na 0°C, tijekom 15 minuta, a zatim na 90°C, tijekom 3 h. Reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, izmješana sa H2O (200 mL) i ekstrahirana sa Et2O (3 x 180 mL). Sjedinjene organske otopine su uzastopno isprane slanom otopinom (50 mL), 1N vodenom HCl (50 mL) i slanom otopinom (50 mL) i osušene su preko Na2SO4. Filtriranjem kroz SiO2 kolonu, koja je, zatim, eluirana sa 30% EtOAc u heptanu, dobiven je spoj 777A (43.3 g, 74%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 80% na 3.20 min (retencijsko vrijeme) plus 20% odgovarajućeg metil estera na 2.83 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 191 [M+H]+.

B. Pirazolo[1,5-a]piridin-4-karboksilna kiselina (777B)

[image]

Izmješanoj smjesi estera pirazolo[1,5-a]piridin-4-karboksilne kiseline (35.1 g, 185 mmol), KOH (85%, 25 g, 379 mmol) i MeOH (200 mL), ohlađenoj do rt, u vodenoj kupelji, polako je dodata H2O. Dobivena reakcijska smjesa je miješana na rt, tijekom 1.5 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se uklonio MeOH. Ostatku je dodata minimalna količina H2O, da bi se dobila bistra otopina, koja je, zatim, zakiseljena do pH=1, na 0°C, sa vodenom HCl (koncentrirana HCl, 11 mL; 5N HCl, 10 mL, zatim 2N i 1N HCl). Poslije zagrijavanja u parnoj kupelji, smjesa je ohlađena. Čvrsta masa je filtrirana, isprana sa H2O i osušena pod vakuumom, da bi se dobio spoj 777B (29 g, 97%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.14 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 163 [M+H]+.

B. 7-jodo-pirazolo[1,5-a]piridin-4-karboksilna kiselina (777C)

[image]

Izmješanoj suspenziji pirazolo[1,5-a]piridin-4-karboksilne kiseline (29 g, 179 mmol) u bezvodnom THF (1000 mL), ohlađenoj do 0°C, dodata je otopina litij heksametildisilazida (1M u THF, 200 mL, 200 mmol). Pošto je mješavina miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, dodata je, na -4°C, dodatna otopina LHMDS (1M u THF, 320 mL, 320 mmol). Poslije miješanja smjese u toku 10 minuta, dodavan je, dio po dio, jod (55 g, 215 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na -4°C, tijekom 1.5 h, i na rt, tijekom 1 h, a zatim je ohlađena do 0°C. Dodati su vodena HCl (5N, 40 mL) a otopina NaS2O3 (10 g u 40 mL H2O). Smjesa je miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Preostala mješavina je miješana sa zasićenom otopinom NaHCO3 (100 mL), etil eterom (150 mL) i H2O (130 mL). Eterska otopina je izdvojena i ekstrahirana sa H2O (50 mL). Sjedinjene vodene otopine su isprane etil eterom (150 mL), zakiseljene do pH=1 sa zasićenom vodenom otopinom KHSO4, grijane u parnoj kupelji, a zatim su ohlađene. Čvrsta masa je filtrirana, isprana sa H2O, a zatim osušena, da bi se dobio spoj 777C (50 g, 97%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 2.88 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 289 [M+H]+.

D. Terc-butil ester (7-jodo-pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)-karbaminske kiseline (777D)

[image]

Bistroj otopini 7-jodo-pirazolo[1,5-a]piridin-4-karboksilne kiseline (23.4 g, 81.2 mmol) i diizopropiletilamina (65 mL) u terc-butanolu (250 mL) i bezvodnom toluenu (200 mL), dodat je difenil fosforil azid (25 mL, 114 mmol), pod argonom. Pošto je mješavina miješana na rt, tijekom 30 minuta, temperatura je polako rasla do 90°C. Smjesa je miješana na 90°C, preko noći, i ukoncentrirana je pod smanjenim pritiskom, da bi se odstranila otapala. Ostatak je raspodijeljen između EtOAc (200 mL) i vodene otopine NaOH (2N, 75 mL). Vodena otopina je izdvojena i ekstrahirana sa EtOAc (100 mL). Sjedinjene organske otopine su isprane vodenom otopinom NaOH (1N, 75 mL), osušene preko Na2SO4 i ukoncentrirane pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 0:1 do odnosa 1:1) dobivena je smečkasta čvrsta masa. Rekristalizacijom u heptanu sa nešto EtOAc dobiven je spoj 777D (19.6 g, 67%) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 95% na 3.83 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 360 [M+H]+.

E. Terc-butil ester (7-cijano-pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)-karbaminske kiseline (777E)

[image]

Mješavina terc-butil estera (7-jodo-pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)-karbaminske kiseline (36 mg, 0.1 mmol), cink cijanida (24 mg, 0.2 mmol), tettumoris(trifenilfosfin) paladija (0) (23 mg, 0.02 mmol) i bezvodnog DMF (1 mL) je oslobođena plina argonom. Zatim je mješavina miješana na 80°C, tijekom 4.5 h, ohlađena do rt, miješana sa EtOAc (6 mL) i filtrirana. Filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:4 do odnosa 1:2) dobiven je spoj 777E (24 mg, 93%) u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 93% na 3.64 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A, kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 259 [M+H]+.

F. 4-amino-pirazolo[1,5-a]piridin-7-karbonitril (777F)

[image]

Bistroj otopini terc-butil estera (7-cijano-pirazolo[1,5-a]piridin-4-il)-karbaminske kiseline (3 g, 11.6 mmol) u metilen kloridu (40 mL) je dodata TFA (8 mL). Smjesa je miješana na rt tijekom 3 h, a zatim je ukoncentrirana pd smanjenim pritiskom. Ostatak je raspodijeljen između EtOAc (100 mL) i zasićene otopine NaHCO3 (50 mL). Vodena otopina je izdvojena i ekstrahirana sa EtOAc (2x50 mL). Sjedinjene organske otopine su osušene preko Na2SO4, filtrirane kroz SiO2 podlogu i ukoncentrirane pod smanjenim pritiskom. Kristalizacijom u EtOAc i 95% EtOH dobiven je spoj 777F (1.07 g, 58%), u obliku tamno žute čvrste mase. HPLC: 97% na 1.96 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 159 [M+H]+.

G. (777G)

Mješavina 4-amino-pirazolo[1,5-a]piridin-7-karbonitrila (135 mg, 0.85 mmol), spoja 752 (225 mg, 1.06 mmol), prašak 4Å molekularnih sita (850 mg) i DMA (0.85 mL) je miješana pod argonom, na rt, tijekom 10 minuta, i na 170°C tijekom 3 h, a zatim je ohlađena do rt. Prašak molekulskih sita je odfiltriran, a filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc (gradijent sa MeOH od 0% do 5%) dobiven je spoj 777G (98 mg, 33%) u obliku žućkaste čvrste mase. HPLC: 99% na 2.28 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 353 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 777G je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je, kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 778

[image]

Mješavina 4-amino-pirazolo[1,5-a]piridin-7-karbonitrila (60 mg, 0.38 mmol), spoja 751 (110 mg, 0.52 mmol), MgSO4 (360 mg, 3 mmol), diizopropiletilamina (0.35 mL, 2 mmol) i bezvodnog toluena (0.6 mL) je miješana na 135°C, pod argonom, tijekom 20 h. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc (gradijent sa MeOH od 0% do 5%) dobiven je spoj 778 (115 mg, 86%) u obliku sivkaste čvrste mase. HPLC: 98% na 2.28 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 353 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 778 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 779

[image]

Bistra otopina spoja 20A (50 mg, 0.25 mmol), p-aminoacetofenona (68 mg, 0.5 mmol) i N,N-dimetilformamid dimetil acetala (0.065 mL, 0.49 mmol) u bezvodnom N,N-dimetilformamidu (0.2 mL) je miješana na 100°C, pod argonom, tijekom 18 h, a zatim je ukoncentrirana. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:4 do odnosa 1:0) dobivena je čvrsta masa, koja je kristalisala u mješavini EtOAc i heptana, da bi se dobio spoj 779 (11 mg, 14%) u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 2.89 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 314 [M+H]+.

Primjer 780

[image]

A. 7-terc-butil ester 2,3-dimetil ester 1,4-dimetil-7-aza-biciklo[2.2.1]hepta-2,5-dien-2,3,7-trikarboksilne kiseline (780A)

[image]

Mješavina sirovog terc-butil estera 2,5-dimetil-pirol-1-karboksilne kiseline (pripremljene u skladu sa literaturom (Haiser, H.-P.; i sur., J. Org. Chem. 1984 49 (22) 4203-4209); 500 mg) i dimetil acetilendikarboksilata (0.5 mL, ca 4 eq) je miješana na 120°C, pod argonom, tijekom 2 h. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:20 do odnosa 1:2) dobiven je spoj 780A (166 mg, 50% prinos), u obliku bezbojne tekućine. HPLC: 90% na 3.67 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (780B)

[image]

Bistroj otopini 7-terc-butil estera 2,3-dimetil estera 1,4-dimetil-7-aza-biciklo[2.2.1]hepta-2,5-dien-2,3,7-trikarboksilne kiseline (1.5 g, 4.4 mmol) u MeOH (10 mL) i H2O (5 mL), ohlađenoj u ledenoj vodi, dodat je, dio po dio, KOH (2.9 g, 44 mmol). Zatim je dodato još H2O (5 mL). Pošto je reakcijska smjesa miješana na rt, tijekom 1 h, dodavani su redom, na 0°C, hidrazin (1.4 mL, 44 mmol), HCl (2N vodena otopina, 17 mL, 34 mmol) i vodik peroksid (50% vodena otopina, 1.27 mL, 22 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na rt, tijekom 3 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se odstranio MeOH. Dobivena vodena otopina je zakiseljena do pH=1, sa zasićenom vodenom otopinom KHSO4, i ekstrahiran je sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobila žuta čvrsta masa. Ova žuta čvrsta masa je otopljena u octenom anhidridu (15 mL). Otopina je miješana na 100°C tijekom 1 h. Koncentriranjem pod smanjenim pritiskom dobiveno je 1.3 g (100%) spoja 780B, u obliku narančaste čvrste mase.

C. (780C)

Mješavina spoja 780B (0.8 g, 2.7 mmol), 4-amino-2-trifluorometilbenzonitrila (0.5 g, 2.7 mmol), MgSO4 (2.6 g, 22 mmol), diizopropiletilamina (2.35 mL, 13.5 mmol) i bezvodnog toluena (2.9 mL) je miješana na 135°C, pod argonom, tijekom 15 h. Čvrsta masa je filtrirana i isprana sa EtOAc. Filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:4 do odnosa 1:2) dobiven je spoj 780C (1.03 g, 82%) u obliku staklaste čvrste mase. HPLC: 100% na 4.26 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 462.34 [M-H]-.

Primjer 781

[image]

Otopini spoja 780C (770 mg, 1.66 mmol) u metilen kloridu (10 mL) je dodata trifluorooctena kiselina (5 mL). Reakcijska mješavina je miješana na rt, tijekom 40 minuta. Smjesa je, zatim, ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, alkalizirana sa zasićenom otopinom NaHCO3 i ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, kako bi se dobio spoj 781 (600 mg, 99%), u obliku narančaste čvrste mase. HPLC: 100% na 2.55 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 364 [M+H]+.

Primjer 782

[image]

Bistroj otopini spoja 781 (27 mg, 0.074 mmol) i trietilamina (0.061 mL, 0.44 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (3 mL) je dodat acetil klorid (0.016 mL, 0.22 mmol), na 0°C, pod argonom. Pošto je smjesa miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, i na rt tijekom 30 minuta, dodata je zasićena otopina NaHCO3. Poslije miješanja smjese u toku 15 minuta, organska otopina je izdvojena, osušena preko Na2SO4 i filtrirana kroz podlogu od SiO2, a zatim je isprana sa EtOAc. Filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Kristalizacijom u mješavini EtOAc i heptana dobiven je spoj 782 (19 mg, 63%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.56 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 406 [M+H]+.

Primjer 783

(3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7,8-trimetil-1,3-diokso-4,7-imino-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (783)

[image]

Mješavina spoja 781 (180 mg, 0.5 mmol), formaldehida (37% vodena otopina, 0.11 mL, 1.5 mmol), NaHB(OAc)3 (318 mg, 1.5 mmol) i 1,2-dikloroetana (9 mL) je miješana na rt, pod argonom, preko noći, a zatim je osušena preko Na2SO4. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc (gradijent sa trietilaminom od 2% do 10%) dobiven je spoj 783 (160 mg, 84%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.46 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378 [M+H]+.

Primjer 784

[image]

Bistroj otopini spoja 781 (20 mg, 0.055 mmol) i trietilamina (0.04 mL, 0.24 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (1 mL), ohlađenom na 0°C, je dodat metansulfonil klorid (0.01 mL, 0.13 mmol). Pošto je reakcijska smjesa miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, dodata je zasićena otopina NaHCO3 (0.1 mL). Mješavina je miješana tijekom 10 minuta, osušena je preko Na2CO3 i filtrirana kroz sloj SiO2, koji je, zatim, ispran sa EtOAc. Filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Kristalizacijom u mješavini EtOAc i heptana dobiven je spoj 784 (14 mg, 58%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 3.58 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 440 [M-H]-.

Primjer 785

[image]

Izmješanoj otopini spoja 230Bi (50 mg, 0.13 mmol) i trietilamina (0.09 mL, 0.65 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (5 mL) dodavan je, kap po kap, fosgen (20% u toluenu, 0.25 mL, 0.48 mmol). Pošto je reakcija završena, dodata je zasićena otopina NaHCO3. Mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4, filtrirani kroz podlogu od SiO2 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Kristalizacijom u mješavini EtOAc i H2O dobiven je spoj 785 (40 mg, 73%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.55 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 377 [M-CO2-H]-.

Primjeri 786i & 786ii

[3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dikloro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dikloro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (786i & 786ii)

[image]

Izmješanoj smjesi spoja 230Bi (544 mg, 1.5 mmol), acetona (10 mL), octene kiseline (2 mL) i slane otopine (2 mL), ohlađenoj na 0°C, dodavano je, kap po kap, sredstvo za bijeljenje (5 mL). Dobivena bistra otopina je miješana na rt, tijekom 1 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Preostala mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:9 do odnosa 1:2), dobivena je bijela čvrsta masa, koja je kristalizirana u mješavini EtOAc i heptana, da bi se dobilo 301 mg (46%) racemske smjese spoja 786i & 786ii, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 4.11 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 395 [M-HCl-H]-.

Separacijom racemske smjese kiralnom HPLC dobivena su dva enantiomera: spoj 786i & spoj 786ii.

Uvjeti kiralne HPLC, koji su korišteni za separaciju:

Uvjeti kiralne HPLC

[image]

Uvjeti kiralne HPLC, upotrijebljeni za analizu:

Uvjeti kiralne HPLC

[image]

RT: Spoj 786i 10.6 min

Spoj 786ii 7.0 min

Apsolutna stereokemija spojeva 785i & 785ii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 787i & 787ii

[3aR-(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-kloro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aS-(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-kloro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (787i & 787ii)

[image]

Izmješanoj otopini spoja 230Bi (181 mg, 0.5 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (4 mL), ohlađenom na -78°C, pod argonom, dodavan je, kap po kap, kromil klorid (0.048 mL, 0.6 mmol). Pošto je reakcijska mješavina miješana na -78°C, tijekom 1 h, temperatura reakcije je polagano rasla do rt. Reakcijska smjesa je miješana na rt, tijekom 2 h. Zatim je, na 0°C, uz snažno miješanje, dodata zasićena otopina NaHCO3 (10 mL). Mješavina je ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:4 do odnosa 1:0), dobiveno je 98 mg (47%) racemske mješavine spojeva 787i & 787ii, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.32 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 377 [M-HCl-H]-.

Separacijom racemata kiralnom HPLC dobivena su dva enantiomera: spoj 787i & spoj 787ii.

Uvjeti kiralne HPLC, koji su korišteni za separaciju:

Uvjeti kiralne HPLC

[image]

RT: Spoj 787i 41 min

Spoj 787ii 51 min

Apsolutna stereokemija spojeva 787i & 787ii nije bila ustanovljena. Iako svako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 788

(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (788B)

[image]

A. (3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (788A)

[image]

Izmješanoj otopini spoja 222B (1.49 g, 3 mmol) u bezvodnom THF (31 mL) dodavan je kompleks bor-metil sulfid (0.61 mL, 6.1 mmol), kap po kap, na rt, pod argonom. Pošto je reakcijska smjesa miješana na rt, tijekom 1.5 h, polako je dodat, na 0°C, EtOH (20 mL), a zatim fosfatni pufer (pH=7.2, 39 mL) i H2O2 (30% vodeni, 12 mL). Smjesa je snažno miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, i na rt, tijekom 21 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, na rt, da bi se uklonio THF. Ostatak je raspodijeljen između EtOAc (160 mL) i slanog otopine (160 mL). Organski sloj je izdvojen, ispran 5% otopinom Na2SO3 (120 mL), osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:8 do odnosa 1:0), dobiven je spoj 788A (1.15 g, 75%), u obliku pjenaste čvrste mase.

B. [3aS-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (788B)

Izmješanoj otopini spoja 788A (0.67 g, 1.3 mmol) u EtOH (100%, 19 mL) je dodata koncentrirana HCl (3.7 mL). Smjesa je miješana na rt, tijekom 21 h, i na 40°C, tijekom 3 h, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:1 do odnosa 1:0), dobiven je spoj 788B (0.47 mg, 92%), u obliku staklaste čvrste mase. HPLC: 98% na 3.07 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 397 [M+H]+. Spoj 788B predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 789

[image]

Izmješanoj otopini spoja 788B (40 mg, 0.1 mmol) i trietilamina (0.16 mL, 1.1 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (1 mL) je dodat metansulfonil klorid (0.042 mL, 0.54 mmol), na 0°C, pod argonom. Reakcijska smjesa je miješana na 0°C, tijekom 10 minuta, i na rt, tijekom 30 minuta. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:2 do odnosa 1:0) dobiven je spoj 789 (50 mg, 90%) u obliku staklaste čvrste mase. HPLC: 100% na 3.66 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 575 [M+Na]+. Spoj 789 predstavlja racemsku mješavinu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 790

[image]

Bistra otopina spoja 788B (40 mg, 0.1 mmol), piridina (0.04 mL, 0.49 mmol) i metansulfonil klorida (0.032 mL, 0.41 mmol) u bezvodnom metilen kloridu (1 mL) je miješana na rt, u toku 1 dana. Pročišćavanjem preparativnom HPLC (YMC S5 ODS kolona, 20 x 100 mm, 20 mL/min, praćenje na 245 nm, gradijent eluacija sa 10-100% otapala B tijekom 10 minuta. Otapalo A: 10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA. Otapalo B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA.) dobiven je spoj 790 (23 mg, 48%), u obliku staklaste čvrste mase. HPLC: 98% na 3.46 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 min, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 475 [M+H]+. Spoj 790 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 791

[3aS-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (791i & 791ii)

[image]

Racemski spoj 788B (1 g) je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski) + 0.1% dietilamina pri 50 mL/min) da bi se dobilo 296 mg spoja 791i, koji se brže eluira (Kiralna HPLC: 8.92 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu + 0.1% dietilamina, pri 1 mL/min); HPLC: 95% na 1.25 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 397.37 [M+H]+ i 274 mg spoja 791ii, koji se sporije eluira (Kiralna HPLC: 11.25 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu + 0.1% dietilamina, pri 1 mL/min); HPLC: 95% na 1.25 min (retencijsko vrijeme) (Phenomenex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 397.43 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spojeva 791i & 791ii nije bila ustanovljena. Iako svako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 792

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilna kiselina (792B)

[image]

A. (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)teterahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilna kiselina (792A)

[image]

Mješavina 2,5-dimetil-3-furoične kiseline (11.2 g; 80 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (5.32g; 20mmol) u 20 mL THF je grijana do 65°C, tijekom 2 h. Poslije hlađenja do rt, čvrsti ostatak je preveden u žitku masu u EtOAc i napunjen na silika gel kolonu, dimenzija 5 x 30 cm, pakovanu u heksanima. Kolona je eluirana sa 2L EtOAc, a zatim sa 1.5 L 1% AcOH/EtOAc. Frakcije, koje sadržavaju željenu akrilnu kiselinu, su ukoncentrirane, a ostatak je ko-evaporiran iz EtOAc/heptana (3 x 100 mL). Poslije otapanja čvrstog ostatka u ~15 mL EtOAc, dodat je heptan (~50 mL) i smjesa je ukoncentrirana do ~25 mL zapremine. Suspenzija je filtrirana, a filterski sloj je ispran heksanom. Uklanjanjem otapala in vacuo dobiven je spoj 792A (1.5 g, 16%) u obliku bijelog praška.

B. (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilna kiselina (792B)

Spoj 792A (220 mg; 0.54 mmol) je hidrogeniziran na 1 atm, u EtOAc (5 mL), preko 10% Pd/C (20 mg), tijekom 4 sata. Poslije filtriranja kroz celit, filtrat je ukoncentriran, a ostatak je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 2.5 x 15 cm, uz eluaciju sa EtOAc:heptanom, 1:1 + 0.5% AcOH. Čiste frakcije su ukoncentrirane kako bi se dobio spoj 792B (173 mg, 79%), u obliku bezbojnog stakla. HPLC: 95.7% na 1.64 min (retencijsko vrijeme) (Phenomonex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 409.23 [M+H]+.

Primjer 793

Metil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (793B)

[image]

A. Metil ester (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil) fenil)teterahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (793A)

[image]

Mješavina metil-2,5-dimetil-3-furoata (30 mL; 200 mmol) i 4-(2,5-dihidro-2,5-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrila (13.3g; 50mmol) je grijana do 120°C, tijekom 5 h. Poslije polaganog hlađenja do rt, tijekom 18 h, dodat je etil eter (~150 mL), a nastala gusta suspenzija je filtrirana. Temeljnim ispiranjem etil eterom i sušenjem dobiven je spoj 793A (11.3 g, 54%) u obliku bijelog praška.

B. Metil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil) fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (793B)

Spoj 793A (1 g; 2.38 mmol) je hidrogeniziran na 1 atm, u EtOAc (25 mL), preko 10% Pd/C (100 mg), tijekom 2 h. Poslije filtriranja kroz celit, filtrat je ukoncentriran, a ostatak je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 2.5 x 15 cm, uz eluaciju sa EtOAc:heksanom, 1:3. Čiste frakcije su ukoncentrirane kako bi se dobio spoj 793B (665 mg, 65%) u obliku žutog praška. HPLC: 99% na 1.67 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 423.27 [M+H]+. Spoj 793B predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu sterokemiju spoja.

Primjer 794B

[image]

A. (794A)

[image]

Jedna kap DMF-a je dodata otopini spoja 792B (160 mg; 0.4 mmol) i oksalil klorida (0.09 mL; 1 mmol) u metilen kloridu (4 mL), na rt. Poslije miješanja tijekom 1 h na rt, isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je otopljen u 2 mL THF-a, da bi se dobila 0.2M otopina spoja 794A u THF.

C. (794B)

0.2M otopina spoja 794A u THF (1 mL; 0.2 mmol) je dodata 0.5M otopini amonijaka u dioksanu (5 mL; 2.5 mmol), na rt. Poslije stajanja tijekom 1 h na rt, reakcijska smjesa je raspodijeljena između EtOAc (25 mL) i vode (25 mL). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfita (25 mL) i slanom otopinom (25 mL). Sušenjem preko MgSO4, a zatim koncentriranjem in vacuo, dobiven je čvrsti ostatak, koji je usitnjen sa etil eterom, kako bi se dobio spoj 794B (60 mg, 74%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 95.6% na 1.41 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 408.03 [M+H]+. Spoj 794B predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu sterokemiju spoja.

Primjer 795

[image]

0.2M otopina spoja 794A u THF (1 mL; 0.2 mmol) je dodata 2.0M otopini dimetilamina u dioksanu (2.5 mL; 5 mmol), na rt. Poslije stajanja tijekom 1 h, na rt, reakcijska mješavina je raspodijeljena između EtOAc (25 mL) i vode (25 mL). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfita (25 mL) i slanom otopinom (25 mL). Sušenjem preko MgSO4, a zatim koncentriranjem in vacuo, dobiven je ostatak, koji je pročišćen preparativnom TLC (EtOAc:heksan, 3:2), da bi se dobio spoj 795 (45 mg, 52%), u obliku bijelog praška. HPLC: 99% na 1.52 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 435.10 [M+H]+. Spoj 795 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu sterokemiju spoja.

Primjer 796

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (796)

[image]

Spoj 471Di (0.10 g, 0.263 mmol) je otopljen u mješavini CH2Cl2 (1.0 mL) i THF (2.0 mL), na 22°C. Dodat je Dess-Martin perjodinan (0.279 g, 0.658 mmol) uz miješanje. Poslije 3 h, reakcija je ugašena mješavinom 1 : 1 zasićenog vodenog NaHCO3 i zasićenog vodenog NaHSO3 (5 mL). Poslije miješanja od 15 minuta, smjesa je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 10 mL), a sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko Na2SO4. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 5 – 10 – 20% acetonom u kloroformu, da bi se dobio spoj 796 (0.090 g), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.170 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS (ES): m/z 379.11 [M+H]+. Kiralnom analitičkom HPLC, koristeći Chiracel OD kolonu, 4.6X250 mm, uz eluaciju sa 20% (1:1) EtOH/MeOH u heksanima, pri 2.0 mL/min i sa praćenjem na 220 nm, dobiveno je retencijsko vrijeme od 9.097 minuta. Apsolutna stereokemija spoja 796 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 741Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 797

[3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (797)

[image]

Spoj 471Dii (0.10 g, 0.263 mmol) je otopljen u mješavini CH2Cl2 (1.0 mL) i THF (2.0 mL), na 22°C. Dess-Martin perjodinan (0.279 g, 0.658 mmol) je dodat, uz miješanje. Poslije 3 h, reakcija je ugašena mješavinom 1 : 1 zasićenog vodenog NaHCO3 i zasićenog vodenog NaHSO3 (5 mL). Po miješanju od 15 minuta, smjesa je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 10 mL), a sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko Na2SO4. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 5 – 10 – 20% acetonom u kloroformu, da bi se dobio spoj 797 (0.094 g), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.170 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS (ES): m/z 379.11 [M+H]+. Kiralnom analitičkom HPLC, koristeći Chiracel OD kolonu, 4.6X250 mm, uz eluaciju sa 20% (1:1) EtOH/MeOH u heksanima, pri 2.0 mL/min i sa praćenjem na 220 nm, dobiveno je retencijsko vrijeme od 5.710 minuta. Apsolutna stereokemija spoja 797 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Dii i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 798

[3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]teterahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-[5-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oksi]teterahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzonitril (798i i 798ii)

[image]

Pojedinačni enantiomeri spoja 222B izdvojeni su preparativnom kiralnom HPLC, korištenjem Chiracel OD kolone, 50X500 mm, uz eluaciju sa 12% EtOH u heksanima, pri 50 mL/min i sa praćenjem na 220 nm. Spoj 798i je imao retencijsko vrijeme od 22 min (>99% ee analitički), a spoj 798ii je imao retencijsko vrijeme od 40 minuta (95% ee analitički). Apsolutna stereokemija je potvrđena kiselom hidrolizom silil enol etera u odgovarajući keton (spojevi 796 & 797). Usporedba prema kiralnoj analitičkoj HPLC jasno je pokazala da je ketonski proizvod, dobiven iz spoja 798i imao identično retencijsko vrijeme, kao ono koje je nađeno kod spoja 796, a da je ketonski proizvod, dobiven iz spoja 798ii imao retencijsko vrijeme, koje je identično onome koje je nađeno kod spoja 797. Na ovaj način, apsolutna konfiguracija spoja 798i & 798ii može biti izvedena na osnovu poznate apsolutne konfiguracije spoja 796 & 797. Spoj 798i: HPLC: 100% na 4.211 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Spoj 798ii: HPLC: 100% na 4.210 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

Primjer 799

[3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (799)

[image]

Spoj 798i (2.20 g, 4.47 mmol) je otopljen u acetonitrilu (45 mL) i ohlađen do 0°C. Zatim je, uz snažno miješanje, dodat 1-fluoro-4-hidroksi-1,4-diazonijabiciklo[2.2.2]oktan bis-(teterafluoro-borat) (50% tež/tež na aluminiju, 5.75 g, 8.94 mmol). Poslije 0.5 h, reakcija je ugašena zasićenim vodenim NaHCO3 (20 mL) i slanom otopinom (20 mL). Nastala smjesa je ekstrahirana sa EtOAc (3 x 50 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog MgSO4 i ukoncentrirani in vacuo. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa 0 – 35% acetonom u kloroformu, kako bi se dobila mješavina ketona i hidrata. Smjesa je otopljena u CH3CN (50 mL) i dodata je voda (5.0 mL). Smjesa je miješana tijekom 3 h, zatim je ukoncentrirana in vacuo, poslije čega je slijedio azeotropni postupak sa dodatnim CH3CN, tri puta, a poslije toga je sušena in vacuo, na 50°C, tijekom 12 h, da bi se dobio spoj 799 (1.09 g), u obliku čvrste mase bijele boje. Posredstvom 1H i 19F NMR spektroskopije pokazalo se da je spoj 799 samo hidrat. HPLC: 100% na 2.687 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS (ES): m/z 413.27 [M-H]+. Apsolutna stereokemija spoja 799 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 798i i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 800

[3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (799Ci i 799Cii)

[image]

A. (800A)

[image]

2-metil furan (5.33 mL, 59.1 mmol) je dodat 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitrilu (1.50 g, 5.91 mmol) i mješavina je zagrijavana na 60°C, tijekom 3 h. Uslijed zagrijavanja, reakcijska mješavina je postala homogena, što je uskoro praćeno izdvajanjem proizvoda iz otopine. Smjesa je ohlađena do 22°C, razrijeđena sa heptanom (25 mL) i filtrirana, uz ispiranje sa hladnim heptanom. Koncentriranjem in vacuo dobiven je spoj 800A (1.76 g), u obliku bijele čvrste mase. Ovaj spoj je prenesen dalje bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 100% na 2.250 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (3aα,4β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (800B)

[image]

Spoj 800A (0.500 g, 1.49 mmol) je otopljen u suhom THF (15 mL) i dodat je Wilkinsonov katalizator (0.028 g, 0.029 mmol). Poslije miješanja u toku 10 minuta, dodavan, je tijekom perioda od 5 minuta, kateholboran (1.0 M otopina u THF, 3.00 mL, 3.00 mmol). Poslije 1 h, reakcija je ohlađena do 0°C, nakon čega je uslijedilo uzastopno dodavanje: EtOH (7.0 mL), fosfatnog pufera pH 7.4 (16.0 mL) i 30% vodenog H2O2 (1.5 g). Smjesa je polako zagrijavana do 22°C, a poslije 2 h je ekstrahirana sa CH2Cl2 (3 x 50 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su jednom isprani 1:1 mješavinom 1N NaOH/zasićeni vodeni NaHSO3 (50 mL) i jednom slanom otopinom i osušeni su preko bezvodnog Na2SO3. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa 5 – 10 – 20 – 40% acetonom u kloroformu, kako bi se dobio spoj 800B (0.344 g) u obliku bijele pjene. NMR spektroskopija je potvrdila prijenos i da nema prisustva drugih izomera. HPLC: 94% na 2.460 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 367.22 [M+H]+.

C. [3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril & [3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (800Ci & 800Cii)

Pojedinačni enantiomeri spoja 800B izdvojeni su preparativnom kiralnom HPLC, korištenjem Chiralcel OD kolone (50 x 500 mm), uz eluaciju sa 17% EtOH/heksanima, pri 50 mL/min i sa praćenjem na 220 nm. Spoj 800Ci je imao retencijsko vrijeme od 69.4 min, a spoj 800Cii je imao retencijsko vrijeme od 84.1 minute. Apsolutna stereokemija nije određena. Spoj 800Ci: HPLC: 100% na 2.460 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Spoj 800Cii: HPLC: 100% na 2.460 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Apsolutna sterokemija spojeva 800Ci & 800Cii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 801

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-jodofenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (801C)

[image]

A. 1-kloro-2-jodo-4-nitro-benzen (801A)

[image]

2-amino-5-nitro-jodobenzen (10.00 g, 37.9 mmol) je suspendiran u 12 N HCl (25 mL) i vodi (40 mL) i miješan je tijekom 30 minuta na 22°C. Smjesa je zatim, ohlađena do 0°C, i dodavan je, tijekom perioda od 10 minuta, NaNO2 (5.23 g, 75.8 mmol u 18 mL H2O). Poslije 1 h, ova otopina je prenesena u otopinu CuCl (3.75 g, 37.9 mmol) u vodi (50 mL), na 60°C. Poslije 2 h, smjesa je ohlađena do 22°C i ekstrahirana sa EtOAc (3 x 150 mL), a organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog MgSO4. Sirovi proizvod je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10 – 20% CH2Cl2 u heksanima, da bi se dobio spoj 801A (4.20 g) u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 3.447 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. 4-kloro-3-jodo-fenilamin (801B)

[image]

1-kloro-2-jodo-4-nitro-benzen (2.00 g, 7.09 mmol) je otopljen u THF (30 mL), na 60°C, i dodat je EtOH (35 mL), a zatim NH4Cl (0.569 g, 10.6 mmol u 30 mL vode) i prašak željeza (1.58 g, 28.4 mmol). Ova smjesa je snažno miješana tijekom 3 h, a zatim je ohlađena do 22°C i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc. Otopina je zatim ukoncentrirana do ~ 30 mL in vacuo, a zatim je ulivena u 1:1 otopinu 1N NaOH/slana otopina (100 mL). Ova smjesa je, zatim, ekstrahirana sa EtOAc (3 x 50 mL), a organski dijelovi su osušeni preko bezvodnog MgSO4. Filtriranjem i koncentriranjem dobiven je spoj 801B, u obliku žute čvrste mase. Pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 100% na 2.310 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 517.6 [M+Na]+.

C. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-jodofenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (801C)

Spoj 801B (0.300 g, 1.19 mmol) i spoj 752 (0.229 g, 1.08 mmol) su dodati u DMA (1.2 mL) u reakcijskoj posudi pod visokim pritiskom. Zatim su dodata molekularna sita od 4Å (0.300 g), a posuda je zapečaćena i zagrijana do 190°C. Poslije 45 minuta, reakcijska mješavina je ohlađena i ulivena u EtOAc (50 mL). Otopina je, zatim, isprana jedanput vodom (20 mL) i tri puta zasićenim vodenim NH4Cl (20 mL) i osušena preko bezvodnog MgSO4. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10 – 20 – 30% acetonom u kloroformu, da bi se dobio spoj 801C (0.217 g) u obliku žućkastosmeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 3.000 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS (ES): m/z 448.18 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 801C je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 802

[image]

A. (802A)

[image]

4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitril (0.200g, 0.79 mmol) i 2-(N,N-dimetilaminometil)-5-metilfuran (0.548 g, 3.94 mmol) su otopljeni u THF (0.5 mL) i zagrijavani do 60°C, tijekom 3 h. Smjesa je, zatim, ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio spoj 802A, u obliku smeđeg ulja. Sirovi materijal je korišten bez daljeg pročišćavanja.

B. (802B)

Spoj 802A (~ 0.4 mmol) je otopljen u EtOAc (5.0 mL) i dodat je Pd/C (10% Pd, 0.020 g), nakon čega je slijedilo uvođenje H2 preko balona. Poslije 3 h, reakcijska mješavina je očišćena sa N2 i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10 – 20 – 30% acetonom u kloroformu, da bi se dobio spoj 802B (0.080 g) u obliku žućkastosmeđeg ulja. HPLC: 95% na 2.040 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS (ES): m/z 408.31 [M+H]+. Spoj 802B predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 803

[image]

A. 2-metoksietoksimetil ester 2,5-dimetilfuran-3-karboksilne kiseline (803A)

[image]

2L tikvica okruglog dna, opremljena mehaničkom mješalicom, napunjena je sa 2,5-dimetil-3-furoinskom kiselinom (81.0 g, 0.58 mol) i kalij karbonatom (95.9 g, 0.69 mol) u DMF (500 mL). Ledena kupelj je korištena da bi se ohladila reakcija kako se dodavao, dio po dio, 2-metoksietoksimetil klorid (72.2 g, 0.58 mol). Reakcijska mješavina je miješana na rt, tijekom 5 h. Smjesa je zatim razrijeđena vodom (1.5 L) i ekstrahirana sa EtOAc (2 x 600 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su isprani vodom (2 x 900 mL) i zasićenom otopinom natrij klorida (1 L), osušeni preko MgSO4, filtrirani i ukoncentrirani da bi se dobio spoj 803A (103 g, 82%) u obliku žutog ulja. 1H NMR (CDCl3): δ=6.23 (s, 1H), 5.47 (s, 1H), 3.84 (m, 2H), 3.56 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 2.51 (s, 3H) i 2.20 ppm (s, 3H).

B. (803B)

[image]

250 mL tikvica okruglog dna, napunjena je sa 4-(2,5-diokso-2,5-dihidropirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitrilom (15.0 g, 0.056 mol) i 2-metoksietoksimetil esterom 2,5-dimetilfuran-3-karboksilne kiseline (22.8 g, 0.10 mol). Smjesa je zagrijavana do 125°C, tijekom 1.5 h, a zatim je miješana na rt, preko noći. Sirovi proizvod je otopljen u EtOAc i adsorbiran na silika gel. Pročišćavanjem kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% EtOAc u heksanima, dobiven je spoj 803B (8.21 g, 30%) u obliku viskoznog ulja. 1H NMR (CDCl3): δ=7.95 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.86 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.13 (s, 1H), 5.44 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 3.57 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.19 (d, J=6.5 Hz, 1H), 3.09 (d, J=6.5 Hz, 1H), 2.04 (s, 3H) i 1.91 ppm (s, 3H).

C. (803C)

[image]

Parr-ova boca za hidrogenaciju od 250 mL je napunjena spojem 803B (7.75 g, 0.015 mol), EtOAc (80 mL) i paladijom na ugljiku (0.40 g, 10% Pd, 50% vlažan). Boca je stavljena u Parr-ov aparat za hidrogenaciju, izložena je pritisku vodika od 5 psi i mućkana dok se ne završi prihvaćanje vodika. Filtracijom sadržaja preko celita i koncentriranjem dobiveno je žuto ulje. Pročišćavanjem kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% EtOAc u heksanima, dobiven je spoj 803B (3.92 g, 50%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 14.5 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka od 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta). Rf=0.61 (SiO2, 60% EtOAc u heksanima). Mpt >300°C. 1H NMR (CDCl3): δ=7.94 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.84 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.74 (m, 1H), 5.46 (d, J=6.1 Hz, 1H), 5.34 (d, J=6.1 Hz, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.57 (t, J=4.5 Hz, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.33 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.19 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.04 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 2.05 (t, J=12.2 Hz, 1H), 1.78 (s, 3H) i 1.64 ppm (s, 3H). m/z=496 [M+H]+.

D. (803Di i 803Dii).

Racemski spoj 803C je odvojen na svoja dva enantiomera preparativnom kiralnom HPLC, korištenjem Chiracel OD kolone (50X500 mm), uz eluaciju sa 50% EtOH u heptanu, pri 100 mL/min i sa detekcijom na 290 nm. Spoj 803Di je imao retencijsko vrijeme od 6.68 min i [α]25D=+28.7° (c=1.0, MeOH). Spoj 803Dii je imao retencijsko vrijeme od 13.9 min i [α]25D=-29.2° (c=1.0, MeOH). Apsolutna stereokemija spojeva 803Di & 803Dii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 804

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilna kiselina (804)

[image]

250 mL tikvica okruglog dna je napunjena spojem 803Di (9.85 g, 19.8 mmol) i THF-om (60 mL). Dodata je otopina 3N klorovodične kiseline (50 mL), a reakcijska mješavina je miješana tijekom 16 h na rt. Zatim je dodata voda (60 mL), a vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc (3 x 120 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko natrij sulfata, filtrirani i ukoncentrirani, da bi se dobio spoj 804 (8.00 g, 98%), koji se pokazalo identičnim sa spojem 791. HPLC: 100% na 13.3 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 409 [M+H]+. Rf=0.41 (SiO2, 10% MeOH u CH2Cl2). Mpt >300°C. [α]25D=-28.5° (c=1.0, MeOH). 1H NMR (CD3OD): δ=8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.82 (dd, J=8.3 i 2.0 Hz, 1H), 3.39 (t, J=6.7 Hz, 1H), 3.30 (d, J=6.7 Hz, 1H), 3.00 (dd, J=12.0 i 5.2 Hz, 1H), 2.23 (dd, J=12.0 i 5.2 Hz, 1H), 2.01 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.70 (s, 3H) i 1.57 ppm (s, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 804 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 805

[3S-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilna kiselina (805)

[image]

Spoj 805 je pripremljen na identičan način, kao što je opisano u primjeru 804, sa izuzetkom što je, umjesto spoja 803Di, spoj 803Dii bilo polazni materijal. Spoj 805 je dobiven u 98% prinosu. [α]25D=+28.0° (c=1.0, MeOH). Apsolutna stereokemija spoja 805 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 806

[image]

50 mL tikvica okruglog dna je napunjena dioksanom (6 mL), spojem 804 (400 mg, 0.984 mmol), difenilfosforil azidom (334 mg, 1.21 mmol), trietilaminom (123 mg, 1.22 mmol) i sprašenim molekularnim sitima od 4Å (400 mg). Nastala suspenzija je zagrijavana na 50°C, tijekom 1.5 h, temepratura je zatim podignuta do 75°C i dodat je 2-(trimetilsilil)etanol (590 mg, 5.02 mmol). Zagrijavanje je nastavljeno tijekom dodatnih 1.5 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena i filtrirana kroz sloj celita, a filtrat je ukoncentriran pod sniženim pritiskom. Pročišćavanjem ostatka kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20%, a zatim 40% EtOAc u heksanima, dobiven je spoj 806 (400 mg, 78%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 15.3 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 524 [M+H]+. Rf=0.79 (SiO2, 50% EtOAc u heksanima). Mpt >300°C. [α]25D=-1.8° (c=1.0, MeOH). 1H NMR (CDCl3): δ=7.96 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.73 (dd, J=8.3 i 2.0 Hz, 1H), 4.72 (bs, 1H), 4.19 (t, J=12.0 Hz, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.45 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.12 (dd, J=8.3 Hz, 1H), 2.36 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.61 (s, 6H), 1.04 (t, J=12.0 Hz, 2H) i 0.05 ppm (s, 6H). Apsolutna stereokemija spoja 806 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 807

[image]

Spoj 807 je pripremljen na identičan način, kao što je opisano u primjeru 806, sa izuzetkom što je, umjesto spoja 804, spoj 805 bilo polazni materijal. Spoj 807 je dobiven u 80% prinosu. [α]25D=+1.1° (c=1.0, MeOH). Apsolutna stereokemija spoja 807 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 808

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-amino-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (808)

[image]

Otopina spoja 806 (400 mg, 0.76 mmol) u metilen kloridu (10 mL) je obrađena trifluorooctenom kiselinom (2 mL), a mješavina je miješana na rt tijekom 2 h. Poslije ovog vremena reakcija je vraćena u alkalnu reakciju (pH=9) dodavanjem zasićene vodene otopine natrij karbonata (20 mL) i čvrstog kalij karbonata. Organska faza je, zatim, odvojena, a vodeni sloj je ekstrahiran metilen kloridom (3 x 40 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko natrij sulfata, filtrirani i ukoncentrirani, da bi se dobio spoj 808 (283 mg, 99%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 10.5 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 380 [M+H]+. Rf=0.59 (SiO2, 5% MeOH u CH2Cl2). [α]25D=-26.7° (c=1.0, MeOH). Mpt=150-152°C. 1H NMR (CD3OD): δ=8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.83 (dd, J=8.3 i 2.0 Hz, 1H), 3.66 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.21 (m, 4H), 2.16 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.49 (s, 3H) i 1.42 ppm (dd, J=12.0 i 5.0 Hz, 1H). Apsolutna stereokemija spoja 808 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 809

[3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-amino-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (809)

[image]

Spoj 809 je pripremljen na identičan način, kao što je opisano u primjeru 808, sa izuzetkom što je, umjesto spoja 806, spoj 807 bilo polazni materijal. Spoj 809 je izoliran u 94%-tnom ukupnom prinosu. [α]25D=+27.3° (c=1.0, MeOH). Apsolutna stereokemija spoja 809 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 810

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-etilsulfonilamido-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (810)

[image]

25 mL tikvica okruglog dna je napunjena racemskom smjesom spojeva 808 & 809 (102 mg, 0.27 mmol) i metilen kloridom (10 mL). Dodati su etansulfonil klorid (54.3 mg, 0.42 mmol) i trietilamin (43.6 mg, 0.43 mmol), a nastala smjesa je miješana na rt, preko noći. Analiza reakcijske mješavine TLC-om (SiO2, EtOAc) je pokazala prisutnost polaznog materijala, tako da je dodat dodatni ekvivalent etansulfonil klorida (54.3 mg, 0.42 mmol) i miješanje je nastavljeno na rt, tijekom 4 h. Reakcijska smjesa je, zatim, razrijeđena sa CH2Cl2 (25 mL) i isprana vodom (10 mL). Sušenjem preko magnezij sulfata, filtracijom i koncentriranjem dobiveno je žuto ulje. Pročišćavanjem ovog ulja kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 25% EtOAc u heksanima, zatim 50% EtOAc u heksanima i konačno EtOAc-om, dobiven je spoj 810 (55.9 mg, 44%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 13.8 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 472 [M+H]+. Rf=0.72 (EtOAc). Mpt=189-192°C. 1H NMR (CDCl3): δ=7.94 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.74 (dd, J=8.3 i 2.0 Hz, 1H), 5.72 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.71 (m, 1H), 3.51 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.18 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.11 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.37 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.67 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.61 (s, 3H) i 1.40 ppm (t, J=7.2 Hz, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 810 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 811

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[((fenilmetil)amino)karbonil]oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (811)

[image]

25 mL tikvica okruglog dna je napunjena spojem 222D (102 mg, 0.27 mmol) i THF-om (2 mL). Dodat je benzil izocijanat (37.7 mg, 0.28 mmol), a nastala mješavina je miješana na rt, tijekom 1.5 h, a zatim je zagrijavana na 60°C, tijekom dodatnih 1.5 h. Zatim je dodat je natrij hidrid (50 mg, 60%-tna disperzija u mineralnom ulju), a zatim dodatni benzil izocijanat (37.7 mg, 0.28 mmol). Zagrijavanje je nastavljeno tijekom noći na 60°C. Zatim su dodati benzil izocijanat (75.4 mg, 0.56 mmol) i THF (2 mL) i reakcijska mješavina je ponovo zagrijavana do 60°C, tijekom dodatna 3 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena do rt i ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, kako bi se dobila sivobijela čvrsta masa. Potom je dodat eter (20 mL) i stvoren je precipitat. Smjesa je filtrirana, a filtrat je ukoncentriran do bijele čvrste mase, koja je dalje pročišćena preparativnom HPLC. Frakcije koje sadržavaju željeni proizvod su ukoncentrirane i dodata je otopina zasićenog natrij bikarbonata (15 mL). Vodeni sloj je ekstrahiran metilen kloridom (3 x 25 mL), osušen preko magnezij sulfata, filtriran i ukoncentriran, da bi se dobio spoj 811 (119 mg, 80%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 15.3 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 514 [M+H]+. Rf=0.58 (SiO2, 50%EtOAc u heksanima). Mpt>300°C. 1H NMR (CDCl3): δ=7.94 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.36-7.34 (m, 5H), 5.07 (bs, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.39 (bs, 2H), 3.59 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.35 (t, J=12.0 Hz, 1H) i 1.61 ppm (s, 6H). Apsolutna stereokemija spoja 811 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 812

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N-metil-N-fenil-1H-izoindol-5-karboksamid (812)

[image]

U suhu, dušikom očišćenu 100 mL tikvicu okruglog dna, dodat je spoj 804 (100 mg, 0.245 mmol) i CH2Cl2 (10 mL). Otopina je miješana na rt i dodati su oksalil klorid (311 mg, 2.45 mmol) i N,N-dimetilformamid (28.0 mg, 0.387 mmol). Zapaženo je oslobađanje plina i reakcijska mješavina je miješana na rt, tijekom 1 h. Nastala otopina je zatim, ukoncentrirana do suha pod smanjenim pritiskom i dodat je CH2Cl2 (10 mL). Dodat je N-metilanilin (262 mg, 2.45 mmol) i reakcijska smjesa je miješana tijekom 15 h na rt. Po ukoncentriravanju nastale otopine pod smanjenim pritiskom, stvoreno ulje je podvrgnuto kromatografiji na silika gelu, korištenjem kao eluenta, 50% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo narančasto ulje, koje je kontaminirano sa N-metilanilinom. Materijal je ponovo podvrgnut kromatografiji na silika gelu, korištenjem, kao eluenta, 40% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 812 (115 mg, 94%), u obliku bijele pjene. HPLC: 100% na 18.7 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 498 [M+H]+. Rf=0.37 (SiO2, 40%EtOAc u heksanima). Mpt>300°C. [α]25D=-30.0° (c=1.0, MeOH). 1H NMR (CDCl3): δ=7.92 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.84 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.73 (dd, J=8.3 i 2.0 Hz, 1H), 7.52-7.35 (m, 3H), 7.17 (d, J=7.1 Hz, 2H), 4.24 (d, J=7.3 Hz, 1H), 3.30 (s, 3H), 3.28 (d, J=7.3 Hz, 1H), 3.09-2.96 (m, 1H), 2.10-1.99 (m, 1H), 1.81 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H) i 1.41 ppm (s, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 812 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 813

[image]

25 mL tikvica okruglog dna je napunjena dioksanom (3 mL), spojem 805 (76.3 mg, 0.187 mmol), difenilfosforil azidom (62.6 mg, 0.227 mmol), trietilaminom (23.2 mg, 0.230 mmol) i usitnjenim molekulskim sitima od 4Å (200 mg), a nastala suspenzija je zagrijavana na 50°C tijekom 1.5 h. Temepratura je zatim podignuta do 75°C i dodat je fenol (93.0 mg, 0.988 mmol). Zagrijavanje je nastavljeno tijekom dodatnih 1.5 h. Reakcijska smjesa je, zatim, ohlađena i filtrirana kroz sloj celita, a filtrat je ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem ostatka kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10%-50% EtOAc u heksanima, dobiven je spoj 813 (71.5 mg, 77%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 15.9 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), Rf=0.70 (SiO2, 50% EtOAc u heksanima). [α]25D=+13.0° (c=1.0, MeOH). Mpt>300°C. HPLC: Rf=15.9 min. 1H NMR (CD3OD): δ=8.14 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.85 (dd, J=8.3 i 2.0 Hz, 1H), 7.41-7.12 (m, 5H), 4.06 (dd, J=12.0 i 5.0 Hz, 1H), 3.55 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.29 (d, J=7.2 Hz, 1H), 2.29 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.71 (dd, J=12.0 i 5.0 Hz, 1H), 1.56 (s, 3H) i 1.54 ppm (s, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 813 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 814

[image]

Spoj 814 je pripremljen na identičan način, kao što je opisano u primjeru 813, sa izuzetkom što je, umjesto spoja 805, spoj 804 bilo polazni materijal. Spoj 814 je izoliran u 62% ukupnom prinosu. [α]25D=-11.7° (c=1.0, MeOH). Apsolutna stereokemija spoja 814 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 815

[image]

Spoj 807 (0.060 g, 0.15 mmol) je otopljen u 2 mL CH2Cl2 i dodati su trietilamin (0.020 g, 0.16 mmol) i katalitička količina DMAP-a, a zatim izobutiril klorid (0.02 g, 0.16 mmol). Reakcijska mješavina je miješana tijekom 1 h na 23°C, kada je HPLC pokazala potpuni utrošak polaznog materijala. Reakcijska smjesa je razrijeđena sa CH2Cl2, redom je isprana sa 1N HCl, zasićenim natrij bikarbonatom i slanom otopinom, osušena je (MgSO4), filtrirana i ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio spoj 815 (0.06 g, 83%), u obliku bijele čvrste mase. Pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 100% na 3.12 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 min, gradijent, praćenje na 220 nm. LC/MS - [M+H]=450.12. Apsolutna stereokemija spoja 815 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 816

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[[(ciklopropilmetil)amino]karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (816)

[image]

50 mL tikvica okruglog dna je napunjena spojem 815 (0.052 mg, 0.10 mmol), metil sulfoksidom (2 mL) i aminometilciklopropanom (10 μL, 8.2 mg, 0.11 mmol). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 4 h, nakon kojeg vremena je reakcijska smjesa razrijeđena vodom (9 mL) i zasićenom otopinom NaHCO3 (1 mL). Ekstrakcijom sa CH2Cl2 (1 x 20 mL, a zatim 1 x 10 mL), sušenjem preko MgSO4, filtracijom i koncentriranjem je dobiven sirovi produkt, u obliku žutog ulja. Pročišćavanjem kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20% do 50% EtOAc u heksanima, dobiven je spoj 816 (33.6 mg, 67%). HPLC: 100% na 12.9 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 477 [M+H]+. Rf=0.42 (SiO2, 50%EtOAc u heksanima). Mpt>300°C. [α]25D=-31.5° (c=1.0, MeOH). 1H NMR (CDCl3): δ=8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.84 (d, J=8.3 Hz, 1H) 4.12-4.06 (m, 1H), 3.46 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.34 (bs, 1H), 3.22 (d, J=8.3 Hz, 1H), 1.41 (t, J=12.3 Hz, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.50 (s, 3H), 1.01-0.92 (m, 1H), 0.51-0.45 (m, 2H) i 0.21-0.17 ppm (m, 2H). Apsolutna stereokemija spoja 816 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 817

[image]

50 mL tikvica okruglog dna je napunjena spojem 809 (0.057 g, 0.15 mmol) i fenil izocijanatom (0.1 mL, 0.9 mmol). Poslije zagrijavanja tijekom 3 h, na 65-70°C, analiza reakcije HPLC-om je pokazala potpuni utrošak polaznog materijala. Razrijeđivanjem sa EtOAc (0.5 mL) i pročišćavanjem kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 60% EtOAc u heksanima, dobiven je spoj 817 (39 mg, 52%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 14.2 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 499 [M+H]+. Rf=0.17 (50%EtOAc u heksanima). Mpt>300°C. [α]25D=+30.7° (c=1.0, MeOH). 1H NMR (CDCl3): δ=8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.84 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.26 (t, J=7.7 Hz, 2H), 6.99 (t, J=7.1 Hz, 1H), 4.19-4.14 (m, 1H), 3.51 (d, J=7.1 Hz, 1H), 3.27-3.25 (m, 2H), 2.31 (t, J=12.3 Hz, 1H), 1.63-1.61 (m, 1H), 1.56 (s, 3H) i 1.55 ppm (s, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 817 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 818

[3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(dimetilamino)sulfonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (817)

[image]

50 mL tikvica okruglog dna je napunjena spojem 808 (100 mg, 0.28 mmol), metilen kloridom (2 mL), trietilaminom (28.3 mg, 0.28 mmol) i dimetilsulfamoil kloridom (40.2 mg, 0.28 mmol). Reakcijska smjesa je, zatim, miješana na rt, tijekom 3 h, nakon kojeg vremena je ugašena vodom (10 mL) i ekstrahirana sa CH2Cl2 (2 x 20 mL). Organski sloj je ispran još jednom vodom (10 mL), osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran do žutog ulja. Pročišćavanjem kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 20% EtOAc u heksanima do 100% EtOAc, dobiven je spoj 818 (64.2 mg, 47%). HPLC: 100% na 14.2 min (retencijsko vrijeme) (Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent od 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta), MS (ES): m/z 487 [M+H]+. Rf=0.19 (SiO2, 50%EtOAc u heksanima). [α]25D=-22.8° (c=1.0, MeOH). Mpt=262-269°C. 1H NMR (CDCl3): δ=8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.84 (d, J=8.2 Hz, 1H), 3.61 (m, 1H), 3.54 (d, J=7.2 Hz, 1H), 3.35 (s, 1H), 3.22 (d, J=7.2 Hz, 1H), 2.79 (s, 6H), 2.27 (t, J=12.4 Hz, 1H), 1.68 (m, 1H), 1.54 (s, 3H) i 1.53 ppm (s, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 818 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 819

[image]

Mješavina 4-(2,5-diokso-2,5-dihidro-pirol-1-il)-izokinolin-1-karbonitrila (1 g, 4 mmol), 2,5-dimetil-2,3-dihidrofuran-3-ona (0.45 g, 4 mmol), DMAP (20 mg, 0.16 mmol), bezvodnog metilen klorida (10 mL) i THF (20 mL) je miješana na 80°C, preko noći, a zatim je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, na SiO2, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:4 do odnosa 1:0), dobivena je čvrsta masa, koja je kristalizirana u mješavini EtOAc i heptana, da bi se dobilo 0.4 g (28%) spoja 819, u obliku žućkaste čvrste mase. HPLC: 90% na 3.37 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 362 [M+H]+. Spoj 819 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 820

[image]

Izmješanoj otopini spoja 819 (36 mg, 0.1 mmol) u bezvodnom THF (1 mL), ohlađenom na 0°C, pod argonom, dodat je MeMgBr (1.4 M THF otopina, 0.3 mL, 0.4 mmol), kap po kap. Pošto je mješavina miješana na 0°C, tijekom 1 h, i na rt, tijekom 10 minuta, dodata je, uz miješanje, zasićena vodena otopina NH4Cl. Smjesa je ekstrahirana sa EtOAc (3X). Sjedinjeni ekstrakti su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa EtOAc/heptanom (gradijent od odnosa 1:2 do odnosa 1:0), dobivena je čvrsta masa, koja je kristalizirana u mješavini EtOH i H2O, da bi se dobio spoj 820 (8 mg, 21%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 97% na 3.36 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 378 [M+H]+. Spoj 820 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 821

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-piridinkarbonitril (821)

[image]

Mješavina spoja 772B (20 mg, 0.14 mmol), spoja 751 (48 mg, 0.20 mmol) i molekulskih sita od 4 Å (100 mg) u DMA (0.2 mL) je grijana u zapečaćenoj epruveti, na 70°C, tijekom 5 h. Reakcijska smjesa je filtrirana, a ostatak je ispran sa EtOAc. Filtrati su sjedinjeni i isprani sa H2O (2 x 5 mL) i slanom otopinom (1 x 5 mL). Sjedinjeni vodeni slojevi su ekstrahirani sa EtOAc (2 x 5 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% aceton/CHCl3 dobiveno je 55 mg proizvoda, koji je kontaminiran sa spojem 751. Daljim pročišćavanjem silika gel flash kromatografijom na SiO2, uz eluaciju sa 90% EtOAc/heksanima dobiven je spoj 821 (46 mg, 62%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.27 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 328.2 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 821 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 822

[3aR-(3aα,4β,4aα,5aα,6β,7aα)]-4-(oktahidro-4a-hidroksi-4,6-dimetil-1,3-diokso-4,6-epoksicikloprop[f]izoindol-2(1H)-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (822)

[image]

Otopina spoja 222B (114 mg, 0.231 mmol) u 1,2-dikloroetanu (2.30 mL) u suhoj tikvici, pod argonom, je ohlađena do 0°C, pomoću ledene kupelji. Ovoj otopini je dodata otopina Et2Zn (0.460 mL, 0.462 mmol, 1M u heksanima), a zatim je slijedilo dodavanje, kap po kap, klorojodometana (70.0 μL, 0.926 mmol). Reakcijska mješavina je miješana na 0°C, tijekom 1 h, a zatim na rt, tijekom 18 h. Pošto je, TLC-om i HPLC-om, procijenjeno da je reakcija 50% završena, dodato je još Et2Zn (0.469 mL) i klorojodometana (70 μL) i mješavina je miješana na rt tijekom 2.5 h. Reakcijska smjesa je ugašena zasićenim NH4Cl i ekstrahirana t-butil metil eterom (2 x 10 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4 i in vacuo. Sirovi materijal (174 mg) je otopljen u mješavini EtOH (5 mL) i conc. HCl (2 mL) i miješan je na rt tijekom 1 h. Smjesa je, zatim, razrijeđena sa H2O i ekstrahirana sa EtOAc (1 X 25 mL). Organski sloj je ispran slanom otopinom (1 X 25 mL), osušen i ukoncentriran pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 30% aceton/CHCl3, dobiven je spoj 822 (9.1 mg, 10%) u obliku žućkasto smeđe čvrste mase. HPLC: 90% na 3.15 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 393.03 [M+H]+. Spoj 822 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 823

[3’aR-(3’aα,4’β,7’β,7’aα)]-teterahidro-4’,7’-dimetil-2’-[4-cijano-3(trifluorometil)fenil]-spiro[1,3-dioksolan-2,5’-4,7-epoksi(5H)izoindol]-1’,3’(2’H,4’H)-dion (823)

[image]

Mješavina spoja 796 (44.3 mg, 0.117 mmol), etilen glikola (0.065 mL, 1.17 mmol) i p-toluensulfonske kiseline (2.2 mg, 0.012 mmol) u benzenu (3 mL) je podvrgnuta refluksu tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je, zatim, razrijeđena benzenom, isprana sa 5% Na2CO3 (1 X 10 mL) i H2O (1 X 10 mL), osušena (Na2SO4) i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3, dobiven je spoj 823 (44.5 mg, 90%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.11 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 423.01 [M+H]+. Spoj 823 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 824

[3’aR-(3’aα,4’β,6’β,7’β,7’aα)]-teterahidro-6’-hidroksi-4’,7’-dimetil-2’-[4-cijano-3(trifluorometil)fenil]-spiro[1,3-dioksolan-2,5’-4,7-epoksi(5H)izoindol]-1’,3’(2’H,4’H)-dion (824B)

[image]

A. (824A)

[image]

Otopina dimetildioksirana (32 mL, 1.588 mmol, 0.05 M) je dodata otopini spoja 222B (521.6 mg, 1.059 mmol) u acetonu (1 mL), na rt. Poslije 2.5 h, HPLC-om se pokazalo da je reakcija završena i reakcijska mješavina je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, da bi se dobilo 559 mg (kvant.) sirovog spoja 824A, u obliku žute čvrste mase.

B. [3’aR-(3’aα,4’β,6’β,7’β,7’aα)]-teterahidro-6’-hidroksi-4’,7’-dimetil-2’-[4-cijano-3(trifluorometil)fenil]-spiro[1,3-dioksolan-2,5’-4,7-epoksi(5H)izoindol]-1’,3’(2’H,4’H)-dion (824B)

Mješavina spoja 824A (57.5 mg, 0.113 mmol), etilen glikola (0.100 mL, 1.13 mmol) i p-toluensulfonske kiseline (11.0 mg, 0.057 mmol) u benzenu (5 mL) je podvrgnuta refluksu tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 30% aceton/CHCl3, dobiven je spoj 824B (43 mg, 88%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 2.87 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 439.07 [M+H]+. Spoj 824B predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 825

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-3-kloro-2-metilbenzonitril (825)

[image]

Mješavina 4-amino-3-kloro-2-metil-benzonitrila (23 mg, 0.14 mmol), spoja 752 (44 mg, 0.21 mmol) i molekulskih sita od 4 Å (100 mg) u DMA (0.2 mL) je grijana u zapečaćenoj epruveti, na 135°C, tijekom 18 h. Pročišćavanjem posredstvom preparativne TLC (SiO2), uz eluaciju sa 30% aceton/CHCl3 dobiven je spoj 825 (5.0 mg, 10%), u obliku žutog filma. HPLC: 90% na 2.37 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 360.97 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 825 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 826

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-(trifluorometil)benzenkarbotioamid (826)

[image]

Plin H2S je kondenziran u pireks epruveti na -78°C, dok ne bude 5 mL tekućine. Dodati su, na -78°C, spoj 471Di (108 mg, 0.284 mmol), Et3N (50.0 μL, 0.341 mmol) i DMF (1 mL) i epruveta je zapečaćena. Reakcijska smjesa je ostavljena da se zagrije do rt, uz miješanje, iza štitnika od eksplozije, a poslije toga je grijana na 90°C, tijekom 50 minuta, u kom trenutku se boja promijenila u zelenu. Reakcijska smjesa je ponovno ohlađena do -78°C, da bi se pratio tok posredstvom HPLC. Sav polazni materijal je potrošen, tako da je smjesa ostavljena da se zagrije do rt, da bi se odstranio H2S, razrijeđena je sa EtOAc i isprana sa H2O (4 X 10 mL). Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% aceton/CHCl3 dobiven je spoj 826 (116 mg, 98%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 98% na 1.90 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 415.23 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 826 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 827

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-[3-(trifluorometil)-4-(2-tiazolil)fenil]-5-(acetoksi)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (827i) & [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-[3-(trifluorometil)-4-(2-tiazolil)fenil]heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (827ii)

[image]

Otopina spoja 826 (61.6 mg, 0.149 mmol), bromoacetaldehid dietil acetala (30.0 μL, 0.186 mmol) i p-toluen sulfonske kiseline (1 mg, kat.) u AcOH (1 mL) je grijana na 100°C, tijekom 1 h. Reakcijska smjesa je ohlađena do rt i razrijeđena sa H2O. Smjesa je ekstrahirana sa EtOAc (1 X 10 mL), a nastali organski sloj je ispran sa H2O (1 X 10 mL), zasićenim NaHCO3 (1 X 10 mL) i slanom otopinom (1 X 10 mL), a zatim je osušen preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo. Pročišćavanjem posredstvom preparativne TLC (SiO2), uz eluaciju sa 30% aceton/CHCl3, dobivena su dva proizvoda, od koji su oba podvrgnuta daljem pročišćavanju. Manje polarni proizvod je pročišćen dalje, flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksani, da bi se dobio spoj 827i (30.0 mg, 42%), u obliku bijele čvrste mase. Proizvod koji je više polaran, pročišćen je dalje, flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 10% aceton/CHCl3, da bi se dobio spoj 827ii (4.6 mg, 7%), u obliku bijele čvrste mase. Spoj 827i: HPLC: 99% na 3.12 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 481.04 [M+H]+. Spoj 827ii: HPLC: 99% na 2.62 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 439.02 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spojeva 827i & 827ii je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 828

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3,4-dimetil-2-piridinkarbonitril (828)

[image]

Mješavina 5-amino-3,4-dimetilpiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.20 mmol), spoja 752 (65 mg, 0.31 mmol) i molekularnih sita od 4 Å (200 mg) u DMA (1 mL) je grijana u zapečaćenoj epruveti, na 160°C, tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je filtrirana, ostatak je ispran sa EtOAc, a sjedinjeni filtrati su ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem posredstvom preparativne TLC (SiO2), uz eluaciju sa 90% EtOAc/heksani, dobiven je spoj 828 (42 mg, 40%), u obliku svijetlo ružičaste čvrste mase. HPLC: 94% na 1.92 & 2.00 min (retencijsko vrijeme-atropizomeri) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 342.21 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 828 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 829

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3,4-dimetil-2-piridinkarbonitril (829)

[image]

Mješavina 5-amino-3,4-dimetilpiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.20 mmol), spoja 751 (65 mg, 0.31 mmol) i molekularnih sita od 4 Å (200 mg) u DMA (0.25 mL) je grijana u zapečaćenoj epruveti, na 160°C, tijekom 18 h. Reakcijska smjesa je filtrirana, ostatak je ispran sa EtOAc, a sjedinjeni filtrati su isprani sa H2O (2 X 10 mL) i slanom otopinom (1 X 10 mL), osušeni (Na2SO4) i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 90% EtOAc/heksani, a zatim preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 90% EtOAc/heksani, dobiven je spoj 829 (35 mg, 33%), u obliku svijetlo ružičaste čvrste mase. HPLC: 98% na 1.92 & 2.00 min (retencijsko vrijeme-atropizomeri) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 342.21 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 829 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 830

[image]

Otopina spoja 791B (41 mg; 0.1 mmol), 2.0M metilamina u THF (0.2 mL; 0.4 mmol), 1-hidroksi-7-azabenzotriazola (17 mg; 0.12 mmol), EDCI (40 mg; 0.2 mmol) i diizopropiletilamina (0.075 mL; 0.4 mmol) u 0.5 mL DMF je zagrijavana do 55°C tijekom 3 h. Poslije raspodjeljivanja reakcijske smjese između EtOAc (20 mL) i vode (20 mL), organski sloj je ispran sa 1N NaOH (2 x 20 mL), zasićenom otopinom kalij bisulfata (2 x 20 mL) i slanom otopinom (20 mL). Sušenjem (MgSO4) i koncentriranjem in vacuo dobiven je ostatak, koji je iskristaliziran iz etil etera, da bi se dobio spoj 830 (30 mg, 71%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 97.5% na 1.48 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 422.30 [M+H]+. Spoj 830 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 831

Ime 831

[image]

Jedna kap DMF-a je dodata otopini spoja 792B (60 mg; 0.15 mmol) i oksalil klorida (0.026 mL; 0.3 mmol) u metilen kloridu (1 mL), na rt. Poslije miješanja u toku 2 h, na rt, isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je otopljen u ~2 mL izopropanola. Poslije stajanja tijekom 30 minuta na rt, isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je otopljen u mješavini EtOAc:izopropanol, 9:1 (20 mL). Otopina je ostavljena da stoji 15 minuta preko ugljika za uklanjanje boje. Filtracijom kroz celit i koncentriranjem filtrata dobiven je spoj 831 (56 mg, 83%), u obliku svijetlo žute pjene. HPLC: 96.9% na 1.52 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 451.08 [M+H]+. Spoj 831 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 832

Ime 832i & 832ii

[image]

Racemski spoj 831 (0.4 g) je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 25% MeOH/EtOH (1:1) u heksanu (izokratski), pri 50 mL/min) da bi se dobilo 170 mg enantiomera, koji se brže eluira, spoja 832i (Kiralna HPLC: 8.97 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heksanu, pri 1 mL/min); HPLC: 99% na 1.84 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 451.06 [M+H]+i 190 mg enantiomera, koji se sporije eluira, spoja 832ii (Kiralna HPLC: 14.79 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 20% MeOH/EtOH (1:1) u heksanu, pri 1 mL/min); HPLC: 99% na 1.85 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 451.03 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spojeva 832i & 832ii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 833

[image] -

Otopina spoja 792B (45 mg; 0.11 mmol), metan sulfonamida (27 mg; 0.28 mmol), 4-dimetilaminopiridina (34 mg; 0.28 mmol) i EDCI (24 mg; 0.12 mmol) u 1 mL diklorometana je miješana na rt, tijekom 18 h. Poslije raspodjeljivanja reakcijske smjese između EtOAc (25 mL) i vode (25 mL), organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfata (25 mL), vodom (25 mL) i slanom otopinom (25 mL). Sušenjem (MgSO4) i koncentriranjem dobiven je ostatak, koji je usitnjen sa etil eterom, kako bi se dobio spoj 833 (29 mg, 55%) u obliku sivo bijelog praška. HPLC: 98% na 1.44 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 485.94 [M+H]+. Spoj 833 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 834

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karb (834)

[image]

Mješavina spoja 792B (100 mg; 0.24 mmol), (metoksikarbonilsulfamoil)trietilamonij hidroksida, unutrašnje soli (125 mg; 0.5 mmol) i trietilamina (0.15 mL; 1 mmol) u 2.5 mL THF je miješana na rt, tijekom 2 h. Poslije raspodjeljivanja reakcijske smjese između etil etera (30 mL) i vode (30 mL), organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfata (30 mL), zasićenom otopinom natrij bikarbonata (30 mL) i slanom otopinom (30 mL). Sušenjem (MgSO4) i koncentriranjem in vacuo dobiven je spoj 834 (80 mg, 97%), u obliku bijelog praška. HPLC: 99% na 1.51 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 390.03 [M+H]+. Spoj 834 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 835

[image]

Mješavina spoja 793A (121 mg; 0.29 mmol) i benzilamina (0.032 mL; 0.29 mmol) u 0.6 mL THF je miješana na rt, tijekom 18 h. Poslije dodatka ~5 mL heksana, nastala suspenzija je filtrirana i osušena da bi se dobio spoj 835 (135 mg, 89%), u obliku bijelog praška. HPLC: 99% na 1.42 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 528.39 [M+H]+. Spoj 835 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 836

[image]

Mješavina spoja 793A (190 mg; 0.45 mmol) i 2.0M amonijaka u THF (0.3 mL; 0.6 mmol) u 0.7 mL THF je miješana na rt. Poslije 1 h, dodata je dodatna količina 2.0M amonijaka u THF (0.7 mL; 1.4 mmol) i reakcijska smjesa je miješana na rt, tijekom 18 h. Isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a ostatak je trituriran iz heksana, da bi se dobio spoj 835 (145 mg, 74%), u obliku zatvoreno bijelog praška. HPLC: 95.1% na 1.28 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 438.26 [M+H]+. Spoj 830 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 837

[image]

Mješavina spoja 793A (42 mg; 0.1 mmol) i 2.0M dimetilamina u MeOH (0.1 mL; 0.1 mmol) u 0.5 mL THF je miješana na rt, u toku 18 h. Isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je filtriran kroz 0.5 x 5 cm podlogu od silika gela, i eluiran sa ~50 mL EtOAc. Poslije koncentriranja filtrata, svijetlo žuti ostatak je otopljen u etil eteru i dodato je 0.3 mL 1M HCl u etil eteru. Isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a čvrsti ostatak je trituriran iz etil etera, da bi se dobio spoj 837 (25 mg, 50%), u obliku kremasto obojenog praška. HPLC: 99% na 1.31 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 466.33 [M+H]+. Spoj 837 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 838

[image]

Mješavina spoja 793A (42 mg; 0.1 mmol) i 2.0M dimetilamina u THF (0.1 mL; 0.1 mmol) u 0.5 mL THF je zagrijavana na rt, tijekom 18 h. Isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je filtriran kroz 0.5 x 5 cm podlogu od silika gela, i eluiran sa ~50 mL EtOAc. Poslije koncentriranja filtrata, žuti ostatak je otopljen u etil eteru i dodato je 0.3 mL 1M HCl u etil eteru. Isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a čvrsti ostatak je trituriran iz etil etera, da bi se dobio spoj 838 (22 mg, 46%), u obliku žutog praška. HPLC: 99% na 1.28 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 452.31 [M+H]+. Spoj 838 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 839

[image]

A. 4-metil-benzo[1,2,5]tiadiazol (839A)

[image]

Otopini 2,3-diaminotoluena (5.0 g, 40.9 mmol) u piridinu (40 mL), na 0°C je dodat, kap po kap, tionil klorid (7.0 mL, 98.2 mmol). Reakcijska smjesa je miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, a zatim je dodata voda (200 mL). Otopina je ekstrahiran sa diklorometanom (2 x 250 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobio spoj 839A (5.57 g) u obliku tamno smeđe tekućine.

B. 4-metil-5-nitro-benzo[1,2,5]tiadiazol (839B)

[image]

Otopini 4-metil-benzo[1,2,5]tiadiazola (5.57g, 37.1mmol) u conc. H2SO4 (14.5 mL), na 0°C je polako dodavana HNO3/H2SO4 (3.25 mL/4.25 mL). Reakcijska smjesa je miješana na 0°C, tijekom 20 minuta, a zatim na rt, tijekom 30 minuta, a poslije toga je ulivena u ledom ohlađenu vodu (200 mL). Nastali talog je izdvojen filtracijom, ispran vodom i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa CHCl3, da bi se dobio spoj 839B (1.5 g), u obliku žute čvrste mase i 4-metil-7-nitro-benzo[1,2,5]tiadiazol (2.0 g), u obliku žute čvrste mase.

C. 4-metil-benzo[1,2,5]tiadiazol-5-ilamin (839C)

[image]

4-metil-5-nitro-benzo[1,2,5]tiadiazol (1.4 g, 7.18 mmol) je otopljen u THF (10 mL), octenoj kiselini (1 mL) i vodi (21 mL) i dodat je prašak željeza (1.4 g, 25.0 mmol, sito 325). Reakcijska smjesa je grijana na 80°C, tijekom 1.5 h, ohlađena je do rt i filtrirana kroz celit, da bi se uklonio prašak željeza. Otopina je ekstrahirana sa CHCl3 (2 x 250 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, osušeni preko Na2SO4 i ukoncentrirani in vacuo da bi se dobio spoj 839C (1.1 g), u obliku svijetlo smeđe čvrste mase.

D. (839D)

4-metil-benzo[1,2,5]tiadiazol-5-ilamin (0.10 g, 0.610 mmol), 4 Å molekularno sito (0.46 g) i spoj 752 (0.128 g, 0.610 mmol) su otopljeni u DMA (0.60 mL) u zapečaćenoj epruveti. Reakcijska smjesa je grijana na 190°C, tijekom 1 h, a zatim je ohlađena do rt. Otopina je filtrirana kroz celit, da bi se uklonila sita, a zatim je filtrat ispran zasićenim NH4Cl (10 mL), a poslije toga slanom otopinom (10 mL). Organski sloj je, zatim, osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo žuto ulje. Nastali materijal je pročišćen preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 20% acetonom u CHCl3, kako bi se dobio spoj 839D (70 mg), u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 98% na 2.87 min (retencijsko vrijeme) (YMC S-5 ODS-A kolona 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 360.19 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 752 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 839D i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 840

[image]

4-metil-benzo[1,2,5]tiadiazol-5-ilamin (0.078 g, 0.47 mmol), molekularno sito od 4 Å (0.46 g) i spoj 751 (0.100 g, 0.47 mmol) su otopljeni u DMA (0.50 mL), u zapečaćenoj epruveti. Reakcijska smjesa je grijana na 190°C, tijekom 1 h, a zatim je ohlađena do rt. Otopina je filtriran kroz celit, da bi se uklonila sita, a zatim je filtrat ispran zasićenim NH4Cl (10 mL), a poslije toga slanom otopinom (10 mL). Organski sloj je, zatim, osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo žuto ulje. Nastali materijal je pročišćen preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 20% acetonom u CHCl3, kako bi se dobio spoj 840 (20 mg), u obliku svijetlo žute čvrste mase. HPLC: 97% na 2.87 min (retencijsko vrijeme) (YMC S-5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 360.30 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 840 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 841

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-(trifluorometil)benzonitril (841E)

[image]

A. N-(4-kloro-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetilpropionamid (841A)

[image]

Otopini komercijalno dostupnog 4-kloro-3-(trifluorometil)anilina (15.0 g, 76.7 mmol) u bezvodnom THF (200 mL), ohlađenom do 0-5°C, dodat je trietilamin (11.7 mL, 84.4 mmol), a zatim pivaloil klorid (10.4 mL, 84.4 mmol), tijekom 30 minuta. Ledena kupelj je uklonjena, a mješavina je miješana na rt, tijekom 1 h. Smjesa je razrijeđena eterom i filtrirana. Filtrat je ispran vodom (2 X) i slanom otopinom, osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran. Ostatak je usitnjen sa heksanima, a čvrsta faza je filtrirana i osušena in vacuo, da bi se dobio spoj 841A (20.4 g, 95%). MS (ES): m/z=280 [M+1]+.

B. N-(4-kloro-2-metil-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetil-propionamid (841B)

[image]

Otopini N-(4-kloro-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetilpropionamid (2.29 g, 8.19 mmol) u bezvodnom THF (25 mL), ohlađenom do 0-5°C, dodata je 1.6 M otopina n-butillitija u heksanima (12.3 mL, 19.7 mmol), polaganim dodavanjem tako da se reakcijska temperatura održava ispod 5°C. Otopina je miješana na 0-5°C, tijekom 1.5 h. Otopina jodometana (0.56 mL, 9.01 mmol) u petrolej eteru (2 mL) je dodavana tijekom 20 minuta, uz održavanje temperature ispod 5°C. Suspenzija je miješana na 0-5°C, tijekom 1 h i razrijeđena je vodom i eterom. Vodeni sloj je ekstrahiran sa eterom, a sjedinjeni organski slojevi su isprani slanom otopinom, osušeni preko MgSO4, filtrirani i ukoncentrirani in vacuo. Ostatak je podvrgnut kromatografiji (silika gel), uz eluaciju sa CH2Cl2, da bi se dobio spoj 841B (1.60 g, 67%). MS (ES): m/z=294 [M+1]+.

C. N-(4-cijano-2-metil-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetil-propionamid (841C)

[image]

Suspenzija N-(4-kloro-2-metil-3-trifluorometilfenil)-2,2-dimetil-propionamida (8.36 g, 28.5 mmol) i CuCN (4.33 g, 65.5 mmol) u bezvodnom N-metilpirolidinonu (85 mL) je podvrgnuta refluksu tijekom 38 h. Poslije hlađenja do rt, suspenzija je, uz miješanje, ulivena u ledenu vodu. Nastala čvrsta masa je filtrirana, isprana vodom i osušena, da bi se dobila 85:15 mješavina (7.55 g) spojeva 841C i 841D. Stvorena mješavina je korištena u idućem koraku.

D. 4-amino-3-metil-2-trifluorometilbenzonitril (841D)

[image]

Otopina miješanog proizvoda iz primjera 841C (7.53 g, 26.5 mmol) je otopljena u 120 mL koncentrirana HCl/EtOH (1:1) i podvrgnuta refluksu tijekom 14 h. Poslije hlađenja do rt, otopina je ukoncentrirana in vacuo. Nastali ostatak je otopljen u EtOAc, ispran zasićenim vodenim NaHCO3 (2X) i slanom otopinom (1X), osušen preko MgSO4, filtriran i ukoncentriran in vacuo. Ostatak je podvrgnut kromatografiji (silika gel), uz eluaciju sa kloroform/metanolom (98:2), da bi se dobio spoj 841D (4.62 g, 87%). MS (ES): m/z=201 [M+1]+.

E. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-(trifluorometil)benzonitril (841E)

4-amino-3-metil-2-trifluorometilbenzonitril (0.051 g, 0.25 mmol), molekularno sito od 4 Å (0.20 g) i spoj 752 (0.059 g, 0.28 mmol) su otopljeni u DMA (0.30 mL), u zapečaćenoj epruveti. Reakcijska smjesa je grijana na 175°C, tijekom 30 minuta, a zatim je ohlađena do rt. Otopina je filtrirana kroz celit, da bi se uklonila sita, a zatim je filtrat ispran zasićenim NH4Cl (10 mL), a potom slanom otopinom (10 mL). Organski sloj je, zatim, osušen preko Na2SO4 i ukoncentriran in vacuo, da bi se dobilo žuto ulje. Nastali materijal je pročišćen preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 25% acetonom u CHCl3, kako bi se dobio spoj 841E (40 mg), u obliku svijetlo smeđe čvrste mase. HPLC: 97% na 3.18 min (retencijsko vrijeme) (YMC S-5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 393.18 [M-H]-. Apsolutna stereokemija spoja 841E je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 842

[3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-kloro-2-piridinkarbonitril (842)

[image]

Spoj 752 (500 mg, 2.36 mmol), molekularna sita od 4 Å (1.5 g), 5-amino-3-kloro-2-cijanopiridin (357 mg, 2.34 mmol) i DMA (2 mL) su sjedinjeni u zapečaćenoj epruveti. Smjesa je grijana u prethodno zagrijanoj uljnoj kupelji, na 170°C, tijekom 25 minuta, ohlađena je, a sita su uklonjena filtracijom, uz eluaciju sa EtOAc. Organski dijelovi su isprani 3x vodom, a zatim slanom otopinom. Nastali organski dijelovi su osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani in vacuo. Ostatak je prethodno adsorbiran na Celit i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 40% acetonom u CH2Cl2, kako bi se dobio spoj 842 (480 mg, 63%), u obliku žućkasto smeđe čvrste mase. HPLC: 97% na 2.66 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 348.30 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 842 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 843

[image]

A. 5-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (843A)

[image]

2-metil-3-nitro-6-amino piridin (63 mg, 0.41 mmol) je suspendiran u 1.3 mL EtOH, koji sadrži 0.3 mL conc. HCl. Dodat je 2-bromo-1,1-dimetoksi-etan (73 μL, 0.62 mmol) i reakcijska smjesa je podvrgnuta refluksu tijekom 8 h, u kom trenutku je dodat dodatni 2-bromo-1,1,-dimetoksi-etan (0.1 mL, 0.85 mmol). Smjesa je miješana pod refluksom u toku noći, ohlađena je i razrijeđena sa CH2Cl2. Organski dijelovi su isprani zasićenom otopinom NaHCO3, osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani in vacuo. Ostatak je otopljen u 4 mL AcOH/EtOAc (1:1), a nastala otopina je zagrijana do 75°C. Dodat je prašak željeza (46 mg, 0.82 mmol, sito 325) i mješavina je miješana tijekom 20 minuta. Dodat je dodatni prašak željeza (46 mg, 0.82 mmol, 325 sito) i miješanje je nastavljeno tijekom 30 minuta. Smjesa je ohlađena do sobne temperature i ukoncentrirana. Stvoreni ostatak je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, sa 20% MeOH u CH2Cl2, kako bi se dobio spoj 843A (51 mg, 85%), u obliku žuto-smeđe čvrste mase. HPLC: 72% na 0.18 min i 28% na 0.27 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 147.85 [M+H]+.

C. (843B)

U zapečaćenu epruvetu je stavljen 5-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (46 mg, 0.31 mmol), spoj 20A (92 mg, 0.47 mmol), 250 mg mol sita od 4 Å i 0.3 mL DMA. Epruveta je zapečaćena i grijana u uljnoj kupelji, prethodno zagrijanoj do 170°C, tijekom 30 minuta. Mješavina je ohlađena i filtrirana, uz eluaciju sa EtOAc. Filtrat je ispran 3x vodom, a zatim slanom otopinom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, ukoncentriran in vacuo i pročišćen preparativnom TLC (SiO2) sa 50% acetonom u CHCl3 kako bi se dobio spoj 843B (32 mg, 32%), u obliku blijedo žute čvrste mase. HPLC: 99% na 1.47 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 326.39 [M+H]+.

Primjer 844

[image]

U zapečaćenoj epruveti su sjedinjeni 5-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (50 mg, 0.34 mmol), spoj 752 (108 mg, 0.51 mmol), MgSO4 (102 mg, 0.85 mmol), Et3N (0.24 mL, 1.7 mmol) i 0.3 mL 1,2-dimetoksi-etana. Epruveta je zapečaćena i grijana do 135°C, tijekom 14 h. Mješavina je ohlađena do rt, filtrirana da bi se uklonilo sito, uz eluaciju sa MeOH, i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem nastalog ostatka flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 10% MeOH u CH2Cl2 dobiven je spoj 844 (86 mg, 74%), u obliku žućkastosmeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 0.85 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 342.20 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 844 je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 845

[image]

U skladu sa procedurom iz Primjera 843, 5-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (50 mg, 0.34 mmol), spoj 751 (108 mg, 0.51 mmol), MgSO4 (102 mg, 0.85 mmol), Et3N (0.24 mL, 1.7 mmol) su reagirali u 0.3 mL 1,2-dimetoksi-etana. Pročišćavanjem je dobiven spoj 845 (79 mg, 68%), u obliku žućkastosmeđe čvrste mase. HPLC: 100% na 0.85 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A, kolona 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 342.20 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 845 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 846

[image]

A. Imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (846A)

[image]

2-amino-5-nitro piridin je suspendiran u 40 mL otopine EtOH/conc. HCl (3:1). Ovoj suspenziji je dodat 2-bromo-1,1-dimetoksi-etan (6.37 mL, 53.91 mmol) i nastala smjesa je zagrijana do refluksa tijekom 8 h, poslije čega je dodat dodatni 2-bromo-1,1-dimetoksi-etan (6.37 mL, 53.91 mmol). Smjesa je zagrijavana pod refluksom, u toku noći, ohlađena je do rt i stavljena u frižider tijekom 24 h. Precipitati su sakupljeni, isprani ledeno hladnim EtOH, osušeni na zraku i prevedeni u oblik slobodne baze, korištenjem standardne procedure, da bi se dobila žuta čvrsta masa. Nastala sirova žuta čvrsta masa (404 mg) je otopljena u 150 mL THF/MeOH (1:1), a nastala otopina je hidrogenizirana tijekom 4 h preko Pd/C (250 mg, 10%), korištenjem balona vodika. Smjesa je filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa THF/MeOH (1:1), a filtrat je ukoncentriran. Pročišćavanje je izvedeno korištenjem flash kromatografije na silika gelu, sa 20% MeOH u CH2Cl2, kako bi se dobio spoj 846A (241 mg, 75%), u obliku bezbojnog ulja, koje stajanjem potamni.

B. (846B)

U zapečaćenoj epruveti su sjedinjeni imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (64 mg, 0.48 mmol), spoj 752 (148 mg, 0.71 mmol), MgSO4 (146 mg, 1.21 mmol), Et3N (0.34 mL, 2.40 mmol) i 0.4 mL 1,2-dimetoksi-etana. Epruveta je zapečaćena i zagrijavana do 135°C, tijekom 14 h. Mješavina je ohlađena, filtrirana kroz celit, uz eluaciju sa MeOH i ukoncentrirana. Pročišćavanje je izvedeno flash kromatografijom na silika gelu, sa 10% MeOH u CH2Cl2 da bi se dobio spoj 846B (107 mg, 64%), u obliku blijedo žute čvrste mase. HPLC: 40% na 0.19 min i 60% na 0.38 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 328.16 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 846B je ustanovljena na osnovu poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 847

[image]

U skladu sa procedurom, datom u Primjeru 846, imidazo[1,2-a]piridin-6-ilamin (50 mg, 0.38 mmol), spoj 751 (119 mg, 0.56 mmol), MgSO4 (114 mg, 0.95 mmol), Et3N (0.26 mL, 1.9 mmol) su reagirali u 0.35 mL 1,2-dimetoksi-etana. Pročišćavanjem je dobiven spoj 847 (87 mg, 70%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 32% na 0.20 min i 68% na 0.37 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 328.12 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 847 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 751 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 848

[image]

A. 4-amino-2-metoksi-benzonitril (848A)

[image]

2-metoksi-4-nitro-benzonitril (500 mg, 2.81 mmol) je suspendiran u 4 mL AcOH/EtOAc (1:1), a nastala mješavina je zagrijana do 75°C, da bi se dobila bistra otopina. Dodat je Fe prašak (313 mg, 5.61 mmol, sito 325) i smjesa je miješana tijekom 30 minuta, poslije čega je uveden dodatni Fe prašak (313 mg, 5.61 mmol, 325 sito). Smjesa je miješana na 75°C, tijekom dodatnih 30 minuta, a zatim je ohlađena do rt i filtrirana, uz eluaciju sa EtOAc. Filtrat je ukoncentriran in vacuo, ponovo je otopljen u EtOAc, filtriran (uz eluaciju sa EtOAc) i ukoncentriran. Pročišćavanje je izvedeno flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 10% MeOH u CH2Cl2, kako bi se dobio spoj 848A, u obliku žutosmeđe čvrste mase.

B. (848B)

U zapečaćenoj epruveti su sjedinjeni 4-amino-2-metoksi-benzonitril (40 mg, 0.27 mmol), spoj 752 (86 mg, 0.41 mmol), MgSO4 (81 mg, 0.68 mmol), Et3N (0.19 mL, 1.4 mmol) i 0.25 mL 1,2-dimetoksi-etana. Epruveta je zatvorena i zagrijavana do 135°C, tijekom 14 h. Mješavina je ohlađena do rt, filtrirana (uz eluaciju sa MeOH) i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem nastalog ostatka flash kromatografijom na silika gelu, korištenjem 0 do 100% EtOAc u CH2Cl2 dobiven je spoj 848B (36 mg, 39%), u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.36 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 341.23 [M-H]-. Apsolutna stereokemija spoja 848B je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 849

[image]

A. 6-amino-2-metil-nikotinonitril (849A)

[image]

Mješavina 6-amino-2-metil-nikotinonitrila (500 mg, 2.67 mmol), CuCN (478 mg, 5.34 mmol) i DMA (2 mL) je miješana pod dušikom, tijekom 20 h, na 170°C. Reakcijska smjesa je ohlađena i dodata u 50 mL 20% vodene otopine etan-1,2-diamina. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran 3x sa EtOAc. Sjedinjeni organski dijelovi su isprani vodom, a zatim slanom otopinom, osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani in vacuo. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 100% EtOAc u CH2Cl2, dobiven je spoj 849A (199 mg, 56%), u obliku bijele čvrste mase.

B. (849B)

U zapečaćenu epruvetu su stavljeni: 6-amino-2-metil-nikotinonitrill (50 mg, 0.38 mmol), spoj 752 (119 mg, 0.56 mmol), MgSO4 (114 mg, 0.95 mmol), Et3N (0.26 mL, 1.9 mmol) i 0.3 mL 1,2-dimetoksi-etana. Epruveta je zapečaćena i zagrijavana do 135°C, tijekom 14 h. Mješavina je ohlađena do rt, filtrirana (uz eluaciju sa MeOH) i ukoncentrirana in vacuo. Filtrat je ukoncentriran i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, koristeći 0 do 100% EtOAc u CH2Cl2 da bi se dobio spoj 849B (36 mg, 29%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.99 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 328.04 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 849B je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 850

[image]

A. 6-amino-4,5-dimetil-nikotinonitril (850A)

[image]

Mješavina 5-bromo-3,4-dimetil-piridin-2-ilamina (500 mg, 2.49 mmol), CuCN (445 mg, 4.97 mmol) i DMA (3.5 mL) je miješana pod dušikom, tijekom 20 h, na 170°C. Reakcijska smjesa je ohlađena i dodata u 50 mL 20% vodene otopine etan-1,2-diamina. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran 3x sa EtOAc. Sjedinjeni organski dijelovi su isprani vodom, a zatim slanom otopinom i osušeni preko MgSO4. Koncentriranjem in vacuo dobiven je spoj 850A (362 mg, 99%), u obliku bijele čvrste mase.

B. (850B)

U zapečaćenoj epruveti su sjedinjeni: 6-amino-4,5-dimetil-nikotinonitrill (50 mg, 0.34 mmol), spoj 752 (108 mg, 0.50 mmol), MgSO4 (102 mg, 0.85 mmol), Et3N (0.24 mL, 1.7 mmol) i 0.3 mL 1,2-dimetoksi-etana. Epruveta je zatvorena i zagrijavana do 135°C, tijekom 14 h. Smjesa je ohlađena do rt, filtrirana (uz eluaciju sa MeOH) i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanjem nastalog ostatka flash kromatografijom na silika gelu, koristeći 0 do 100% EtOAc u CH2Cl2 dobiven je spoj 850B (68 mg, 59%), u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 10% na 2.15 min i 82% na 2.31 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 342.06 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 850B je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 851

[image]

A. 6-amino-4-metil-nikotinonitril (851A)

[image]

Mješavina 5-bromo-4-metil-piridin-2-ilamina (500 mg, 2.67 mmol), CuCN (478 mg, 5.34 mmol) i DMA (2 mL) je miješana pod dušikom, tijekom 20 h, na 170°C. Reakcijska smjesa je ohlađena i dodata u 50 mL 20% vodene otopine etan-1,2-diamina. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran 3x sa EtOAc. Sjedinjeni organski dijelovi su isprani vodom, a zatim slanom otopinom i osušeni preko MgSO4. Koncentriranjem in vacuo dobiven je spoj 851A (309 mg, 87%), u obliku bijele čvrste mase.

B. (851B)

U zapečaćenu epruvetu su stavljeni: 6-amino-4-metil-nikotinonitrill (50 mg, 0.38 mmol), spoj 752 (119 mg, 0.56 mmol), MgSO4 (114 mg, 0.95 mmol), Et3N (0.26 mL, 1.9 mmol) i 0.3 mL 1,2-dimetoksi-etana. Epruveta je zapečaćena i zagrijavana do 135°C, tijekom 14 h. Mješavina je ostavljena da se ohladi do rt i filtrirana je, uz eluaciju sa MeOH. Filtrat je ukoncentriran in vacuo i pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, korištenjem 0 do 100% EtOAc u CH2Cl2, kako bi se dobio spoj 851B (67 mg, 54%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 1.95 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 328.04 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 851B je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 852

[image]

A. terc-butil-(2,5-dimetil-furan-3-ilmetoksi)-dimetil-silan (852A)

[image]

U suhoj tikvici od 100 mL, sa okruglim dnom, pripremljena je otopina metil 2,5-dimetil-3-furoata (2.00 g, 13.0 mmol) u bezvodnom Et2O (10 mL), pod inertnom atmosferom. Ovoj otopini je, kap po kap, dodata 1.0M otopina LiAlH4 u Et2O (13 mL, 13 mmol), na 0°C. Nastala suspenzija je miješana na 0°C, tijekom 30 minuta, a zatim je ostavljena da se zagrije do rt, gdje je čuvana tijekom 4 h. Reakcija je ugašena pažljivim dodavanjem čvrstog Na2SO4•10 H2O (višak) i celita (višak). Da bi se olakšalo miješanje, Et2O je dodat koliko je potrebno. Nastala smjesa je miješana preko noći, filtrirana je i pažljivo ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobio isparljivi alkohol, koji je otopljen u bezvodnom DMF (5 mL), pod inertnom atmosferom. Ovoj otopini je dodat imidazol (1.32 g, 19.5 mmol) i TBSCI (2.05 g, 13.6 mmol) i smjesa je miješana tijekom 6 h. Reakcijska smjesa je razrijeđena sa EtOAc i dodata je voda. Odvojeni su slojevi, a organski sloj je ispran nekoliko puta vodom. Organski dijelovi su osušeni preko MgSO4, ukoncentrirani in vacuo i pročišćeni flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 50% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 852A (3.08 g, 99%), u obliku bezbojnog ulja.

B. (852B)

[image]

U zapečaćenoj epruveti su sjedinjeni: terc-butil-(2,5-dimetil-furan-3-ilmetoksi)-dimetil-silan (2.60 g, 10.8 mmol), 4-(2,5-dihidro-2,5-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometilbenzonitril (1.44 g, 5.41 g) i THF (1 mL). Epruveta je zapečaćena i brzo zagrijana do 95°C, kako bi se dobila gotovo bistra otopina. Mješavina je, zatim, ostavljena da se ohladi do rt i miješana je na rt, preko noći. Pročišćavanje je izvedeno flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 852B (2.37 g, 86%), u obliku bijele čvrste mase.

C. (852C)

[image]

Otopina spoja 852B (1.4 g, 2.8 mmol) u EtOAc (50 mL) je hidrogenizirana preko Pd/C (10%, 800 mg), tijekom 6 h, korištenjem balona vodika. Smjesa je filtrirana, uz eluaciju sa EtOAc i ukoncentrirana in vacuo. Pročišćavanje je izvedeno korištenjem flash kromatografije na silika gelu, sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 852C (0.9 g, 64%), u obliku bijele pjene.

D.

Spoj 852C (0.9 g, 1.8 mmol) je otopljen u 7 mL EtOH, koji sadrži 2% conc. HCl na rt, a nastala smjesa je miješana tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je pažljivo ulivena u zasićenu otopinu NaHCO3, a vodeni sloj je ekstrahiran dva puta sa EtOAc. Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko MgSO4, ukoncentrirani in vacuo i pročišćeni flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 100% EtOAc u CH2Cl2, da bi se dobila racemska smjesa spojeva 852Di & 852Dii (0.7 g, 100%), u obliku bijele čvrste mase. Racemski materijal je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 30% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski), pri 50 mL/min) da bi se dobio enantiomer koji se brže eluira, spoj 852Di (Kiralna HPLC: 5.56 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 30% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, koji sadrži 0.1% DEA, pri 1 mL/min), i enantiomer, koji se sporije eluira, spoj 852Dii (Kiralna HPLC: 7.01 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 30% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, koji sadrži 0.1% , pri 1 mL/min). Apsolutna stereokemija spojeva 852Di & 852Dii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 853

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi]metil]- 4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (853)

[image]

Trifenilfosfin (0.066 g, 0.254 mmol) i di-terc-butil-azodikarboksilat (0.058 g, 0.254 mmol) u THF (0.5 mL) su miješani na rt, pod N2, tijekom 10 minuta, a zatim je dodat 6-trifluorometil-4-pirimidinol (0.042 g, 0.254 mmol). Reakcijska smjesa je miješana pod N2, tijekom dodatnih 15 minuta, a zatim je uslijedilo dodavanje racemske smjese spojeva 852Di & 852Dii (0.050 g, 0.127 mmol). Reakcija je ostavljena da teče tijekom 2 h, u kojem momentu je dodat CH2Cl2 (15 mL). Organski sloj je odvojen, a zatim je uzastopno ispran sa 1N NaOH (15 mL) i slanom otopinom (15 mL), osušen je preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo. Nastala čvrsta masa je pročišćena silika gel kromatografom, uz eluaciju sa EtOAc u heksanu, od 0% do 100%, kako bi se dobio spoj 853 (60 mg), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 4.083 min (retencijsko vrijeme) (YMC S-5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 541.06 [M+H]. Spoj 853 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 854

[image]

U zapečaćenoj epruveti je pripremljena smjesa spoja 852Di (150 mg, 0.38 mmol), MeJ (0.24 mL, 3.8 mmol) i Ag2O (881 mg, 3.8 mmol) u 2 mL CH3CN. Epruveta je zapečaćena i grijana do 80°C, preko noći. Smjesa je ohlađena do rt, filtrirana, uz eluaciju sa EtOAc i ukoncentrirana. Pročišćavanje je izvedeno flash kromatografijom na silika gelu, sa 0 do 1005 EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 854 (49 mg, 32%), u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 97% na 3.58 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 407.20 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 854 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 855

[image]

Spoj 852Dii (150 mg, 0.38 mmol), MeJ (0.24 mL, 3.8 mmol) i Ag2O (881 mg, 3.8 mmol) su reagirali u 2 mL CH3CN i reakcijska smjesa je pročišćena, kao što je opisano u Primjeru 854, da bi se dobio spoj 855 (45 mg, 29%), u obliku bezbojnog ulja. HPLC: 98% na 3.58 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 407.19 [M-H]-. Apsolutna stereokemija spoja 855 nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 856

[image]

Otopini spoja 852B (835 mg, 1.65 mmol) u 10 mL THF je dodat 1.0M otopina BH3•THF (3.3 mL, 3.30 mmol), kap po kap, na 0°C. Nastala smjesa je miješana na 0°C, tijekom 2 h, nakon čega je dodato: 15 mL EtOH, 5 mL THF, 30 mL fosfatnog pufera pH 7 i 2.1 mL 30% H2O2. Nastala mješavina je miješana 2 h na 0°C, poslije čega su dodati voda i EtOAc. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ponovo ekstrahiran sa EtOAc. Sjedinjene organske faze su isprane 10% otopinom Na2S2O3, a zatim slanom otopinom. Organski dijelovi su osušeni preko MgSO4, ukoncentrirani i pročišćeni flash kromatografijom sa 0 do 25% EtOAc u CH2Cl2. Materijal je otopljen u 8 mL EtOH, koji sadrži 2% conc. HCl, a nastala smjesa je miješana tijekom 2 h. Reakcijska smjesa je razrijeđena sa EtOAc i pažljivo ulivena u zasićenu otopinu NaHCO3. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ponovo ekstrahiran sa EtOAc. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4 i ukoncentrirani in vacuo. Nastali racemski materijal je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK OD 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 15% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski), pri 50 mL/min) da bi se dobio spoj 856i, koji se brže eluira (128 mg) (Kiralna HPLC: 13.64 min; CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 15% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, koji sadrži , pri 1 mL/min), i spoj 856ii, koji se sporije eluira (137 mg, 39% sjedinjeni prinos) (Kiralna HPLC: 16.31 min; CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 15% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). MS (ES): m/z 411.01 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spojeva 856i & 856ii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 857

[image]

A. (857A)

[image]

Spoj 798i je preveden u spoj 857A, postupkom opisanim u Primjeru 774. HPLC: 95% na 4.307 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (857B)

[image]

Spoj 857A je preveden u spoj 857B, postupkom opisanim u Primjeru 774. HPLC: 100% na 2.89 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): 381.16 [M+H]+.

C. (857C)

Spoj 857B (0.100 g, 0.26 mmol), MeJ (0.163 mL, 2.6 mmol), Ag2O (0.603 g, 2.60 mmol) i acetonitril (2.5 mL) su dodati u reakcijsku posudu pod visokim pritiskom. Posuda je zapečaćena i zagrijana do 75°C. Poslije 16 h, reakcijska mješavina je ohlađena do rt, razrijeđena sa EtOAc i filtrirana kroz celit, uz ispiranje sa EtOAc. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 0 – 5 – 8% acetonom u kloroformu, da bi se dobio spoj 857C, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 90% na 2.887 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 395.07 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 857C nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 858

[image]

A. (858Ai & 858Aii)

[image]

Spoj 857B (2.50 g, 6.57 mmol) je otopljen u THF (10.0 mL), na 22°C, i dodat je 1N NaOH (10.0 mL). Poslije 1 h, dodati su THF (10.0 mL), 1N HCl (1.10 mL) i slana otopina (10.0 mL). Smjesa je, zatim, ekstrahirana, jednom, sa EtOAc (20.0 mL) i dva puta, sa 1:1 THF:EtOAc (20.0 mL). Sjedinjeni organski dijelovi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i ukoncentrirani in vacuo, da bi se dobili spojevi 858Ai i 858Aii (1:1, prema HPLC), u obliku bijele čvrste mase. Pročišćavanje nije potrebno. HPLC: 100% na 2.383 i 2.573 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

B. (858B)

Spojevi 858Ai i 858Aii su suspendirani u smjesi THF (50.0 mL) i AcOH (20.0 mL) i zagrijavani do 60°C, tijekom 16 h. Reakcijska smjesa je postala homogena poslije 4 h. Reakcijska mješavina je ohlađena do 22°C i ukoncentrirana in vacuo. Zatim je dodat toluen (20.0 mL) i smjesa je zagrijavana do 90°C, tijekom 4 h, dok sav produkt nije otopljen. Smjesa je, zatim, ohlađena do 22°C, i ostavljena da stoji tijekom 20 h. Spoj 858B se istaloži iz otopine, tijekom perioda od 20 h. Proizvod je filtriran i ispran toluenom, nakon čega je slijedilo sušenje in vacuo. Spoj 858B (1.10 g) je izdvojen u obliku sivobijele čvrste mase i korišten je bez daljeg pročišćavanja. 1H NMR (DMSO-d6): δ=4.91 (d, 1H, J=6.2 Hz), 3.97 (dd, 1H, J=3.9, 6.2 Hz), 3.82 (d, 1H, J=7.6 Hz), 3.31 (d, 1H, J=7.6 Hz), 2.27 (dd, 1H, J=10.2, 12.8 Hz), 1.77 (s, 3H), 1.49 (m, 1H) i 1.47 ppm (s, 3H). Apsolutna stereokemija spoja 858B nije bila ustanovljena. Iako spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 859

Metil ester (3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-6-cijano-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (859)

[image]

Mješavina spoja 792A (84 mg; 0.2 mmol), KCN (15 mg; 0.22 mmol) i amonij klorida (12 mg; 0.22 mmol) u 1 ml DMF i 0.25 ml vode je miješana na rt, tijekom 18 h. Stajanjem tijekom noći stvoren je talog. Poslije dodatka dodatnih 10 ml vode, suspenzija je filtrirana, a filterski sloj je ispran vodom. Sušenjem i usitnjavanjem sa heksanom dobiven je spoj 859 (25 mg, 28%), u obliku žutosmeđeg praška. HPLC: 95% na 1.67 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 448.29 [M+H]+. Spoj 859 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 860

[image]

Mješavina spoja 792A (44 mg; 0.1 mmol) i octenog anhidrida (0.25 ml) je zagrijavana do 60°C, tijekom 2 h. Isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je ko-evaporisan iz heptana (3 x 2 ml), da bi se dobio spoj 860 (47 mg, 99%), u obliku bijelog praška. HPLC: 95.8% na 1.49 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 480.35 [M+H]+. Spoj 860 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 861

[image]

Natrij hidrid, 60%-tni u mineralnom ulju (120 mg; 3 mmol), je dodavan u dijelovima, tijekom 10 minuta, otopini spoja 792A (1.9 g; 4.5 mmol) i aceton oksima (667 mg; 9 mmol) u THF, na rt. Poslije miješanja tijekom 45 minuta, reakcijska smjesa je raspodijeljena između slane otopine (100 mL) i EtOAc (150 mL). Organski sloj je ispran vodom (50 mL), osušen (MgSO4) i ukoncentriran in vacuo. Ostatak je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 5 x 20 cm, uz eluaciju sa 1000 ml 25% EtOAc/heksana i 500 ml 40% EtOAc/heksana. Koncentriranjem čistih frakcija in vacuo dobiven je spoj 861 (1.75 mg, 80%), u obliku bijelog praška. HPLC: 98% na 1.82 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 494.05 [M+H]+. Spoj 861 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 862

Metil ester (3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (862)

[image]

Mješavina spoja 861 (1.75 g; 3.5 mmol) i praha cinka (6.07 g, 87.50 mA) u 19 ml mravlje kiseline je podvrgnuta refluksu tijekom 20 minuta. Poslije hlađenja do rt, reakcijska smjesa je razrijeđena sa ~50 ml EtOAc i filtrirana kroz celit. Filtrat je razrijeđen sa ~200 ml EtOAc, a organski sloj je ispran vodom (200 ml), 0.5M NaOH (2 x 200 ml), vodom (200 ml) i slanom otopinom (100 ml). Sušenjem preko MgSO4 i koncentriranjem in vacuo dobiven je ostatak, koji je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 2.5 x 20 cm, uz eluaciju sa 1000 ml 40% EtOAc/heksana i 500 ml 50% EtOAc/heksana. Koncentriranjem čistih frakcija in vacuo dobiven je spoj 862 (820 g, 54%), u obliku bezbojne pjene. HPLC: 99% na 1.47 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 438.99 [M+H]+. Spoj 862 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 863

Metil ester [3aS-(3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (863i) & Metil ester [3aS-(3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (863ii)

[image]

Racemski spoj 862 (0.8 g) je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK OD 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 15% EtOH u heksanima (izokratski), pri 50 mL/min) da bi se dobilo 355 mg spoja 863i, koji se brže eluira (Kiralna HPLC: 8.89 min; CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 15% EtOH u heksanima, pri 2 mL/min); HPLC: 99% na 2.91 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z 471.00 [M+MeOH]+i 330 mg spoja 863ii, koji se sporije eluira (Kiralna HPLC: 12.30 min; CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 15% EtOH u heksanima, pri 2 mL/min); HPLC: 99% na 2.89 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z 471.99 [M+MeOH]+. Apsolutna stereokemija spojeva 863i & 863ii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 864

Metil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (864)

[image]

Mješavina spoja 792A (210 mg; 0.5 mmol), fenilsilana (0.13 ml, 1 mmol) i Mn(acac)2 (5 mg; 0.01 mmol) u 2.5 ml izopropanola i 0.25 ml THF je miješana 3 dana na rt na otvorenom. Po dodavanju 5% otopine natrij bisulfita (5 ml) i miješanja tijekom 30 minuta, reakcijska smjesa je raspodijeljena između EtOAc (30 ml) i vode (30 ml). Ispiranjem organskog sloja slanom otopinom (20 ml), a zatim sušenjem preko MgSO4 i koncentriranjem in vacuo, dobiven je ostatak, koji je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 2.5 x 15 cm, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksanom. Koncentriranjem čistih frakcija in vacuo dobiven je spoj 864 (109 mg, 50%), u obliku bijelog praška. HPLC: 98.6% na 1.18 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 438.98 [M+H]+. Spoj 864 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 865

(1-metiletil) ester (3aα,4β,5a,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (865C)

[image]

A. Izopropilni ester 2,5-dimetil-furan-3-karboksilne kiseline (865A)

[image]

Izopropanol (5 ml) je dodat otopini 2,5-dimetilfuran-3-karbonilklorida (1.64 g; 10.3 mmol) u 15 ml metilen klorida, na rt. Pošto je reakcijska smjesa ostavljena da stoji na rt tijekom 30 minuta, isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a ostatak je ko-evaporiran iz izopropanola, da bi se dobio spoj 865A (1.8 g, 96%), u obliku svjetle jantarne tekućine. 1H NMR (CDCl3): δ 1.30 (d, j=6.5 Hz, 6H), 2.23 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 5.14 (m, 1H), 6.21 (s, 1H).

B. (1-metiletil) ester (3aα,4β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil) fenil)teterahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (865B)

[image]

Mješavina 4-(2,5-dihidro-2,5-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitrila (851 mg; 3.2 mmol) i spoja 865A (1.7 g; 9.4 mmol) je zagrijavana do 140°C, tijekom 4 h. Pošto je smjesa ostavljena da se ohladi do rt i stoji tijekom 4 dana, reakcijska smjesa je podvrgnuta kromatografiji na silika gel koloni 5 x 25 cm, uz eluaciju sa 25% EtOAc/heksanom. Koncentriranjem čistih frakcija in vacuo dobiven je spoj 865B (869 mg, 60%), u obliku gustog žutog ulja. Zbog nestabilnosti ovog spoja, on je čuvan na –20°C i odmah upotrijebljen.

C. (1-metiletil) ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-

(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (865C)

Spoj 865B (224; 0.5 mmol) je preveden u spoj 865C, korištenjem postupka, opisanog u Primjeru 791B, da bi se dobio spoj 865C (82 mg, 35%), u obliku bijelog praška. HPLC: 98.4% na 1.18 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 466.98 [M+H]+. Spoj 865C predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 866

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N,N-dimetil-1H-izoindol-5-karboksamid (866C)

[image]

A. Dimetilamid 2,5-dimetil-furan-3-karboksilne kiseline (866A)

[image]

Otopina 2,5-dimetilfuran-3-karbonilklorida (2.19 g; 13.8 mmol) u 10 ml THF je dodata 2M otopini dimetilamina u dioksanu (21 ml; 42 mmol), u 80 ml THF, na rt. Poslije miješanja tijekom 1 h, isparljivi dijelovi su uklonjeni in vacuo, a ostatak je raspodijeljen između EtOAc (100 ml) i vode (100 ml). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfata (100 ml), 1N NaOH (50 ml) i slanom otopinom (50 ml). Sušenjem preko MgSO4 i koncentriranjem in vacuo, dobiven je spoj 866A (1.84 g, 80%), u obliku jantarne tekućine. 1H NMR (CDCl3): δ 2.23 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 3.04 (s, 6H), 5.96 (s, 1H).

B. (866B)

[image]

Mješavina 4-(2,5-dihidro-2,5-2,5-diokso-1H-pirol-1-il)-2-trifluorometil-benzonitrila (1.45 mg; 5.4 mmol) i spoja 866A (1.82 g; 10.9 mmol) je zagrijavana točno do 125°C, tijekom 1 h. Pošto je smjesa ostavljena da se ohladi do rt preko noći, reakcijska smjesa je otopljena u ~75 ml EtOAc. Obradom sa ugljikom za uklanjanje boje, filtracijom kroz celit i koncentriranjem filtrata in vacuo, dobiven je ostatak koji je otopljen u ~20 ml etil etera. Dodavanjem ~30 ml heksana, a zatim filtracijom i sušenjem dobiven je spoj 866B (1.89 mg, 81%), u obliku svijetlo ružičaste čvrste mase.

C. (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N,N-dimetil-1H-izoindol-5-karboksamid (866C)

Spoj 866C (433; 1 mmol) je preveden u spoj 866C, korištenjem postupka, opisanog u Primjeru 792B, da bi se dobio spoj 866C (85 mg, 18%), u obliku bijelog praška. HPLC: 97.9% na 1.39 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 452.00 [M+H]+. Spoj 866C predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 867

[image]

Jedna kap DMF-a je dodata otopini spoja 792B (50 mg; 0.125 mmol) i oksalil klorida (0.03 mL; 0.36 mmol) u metilen kloridu (1 mL), na rt. Poslije miješanja u toku 1.5 h, na rt, isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo. Ostatak je obrađen sa 1 ml 1,3-heksafluoro-2-propanola, a zatim sa 0.04 ml piridina i 2 mg 4-dimetilpiridina. Poslije miješanja tijekom 18 h, na rt, reakcijska smjesa je raspodijeljena između EtOAc (20 ml) i zasićene otopine natrij bikarbonata (20 ml). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom kalij bisulfata (20 ml) i slanom otopinom (20 ml). Sušenjem preko MgSO4 i koncentriranjem in vacuo, dobiven je ostatak, koji je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 2.5 x 15 cm, uz eluaciju sa 25% EtOAc/heksan. Koncentriranjem čistih frakcija in vacuo dobiven je spoj 867 (36 mg, 52%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 1.96 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 558.00 [M+H]+. Spoj 867 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 868

Propil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (868B)

[image]

A. (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilna kiselina (868A)

[image]

1N NaOH (2.2 ml; 2.2 mmol) je dodat otopini spoja 867 (238 mg; 0.54 mmol) u 5 ml metanola, na rt. Poslije miješanja u toku 5 h, na rt, isparljivi dijelovi su odstranjeni in vacuo, a ostatak je obrađen sa 2 ml trifluorooctene kiseline, tijekom 18 h. Koncentriranjem reakcijske smjese in vacuo, a zatim ko-evaporiranjem iz toluena (3 x 8 ml) dobiven je ostatak, koji je raspodijeljen između EtOAc (40 ml) i slane otopine (20 ml). Sušenjem preko MgSO4 i koncentriranjem in vacuo, dobivena je čvrsta masa, koja je usitnjena sa heksanom, da bi se dobio spoj 868A (120 mg, 53%), u obliku kremasto obojene čvrste mase. HPLC: 93% na 1.35 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 425.08 [M+H]+.

B. Propil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil) fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline (868B)

Oksalilklorid (0.18 ml, 2 mmol) je dodat otopini spoja 868A (135 mg; 0.32 mmol) u 4 ml THF, na sobnoj temperaturi. Odmah je zapaženo pjenušanje. Dodata je jedna kap DMF-a i reakcijska smjesa je miješana 4 h. Poslije dodavanja 2 ml n-propanola i miješanja na rt, tijekom 18 h, reakcijska smjesa je raspodijeljena između EtOAc (30 ml) i vode (30 ml). Organski sloj je ispran zasićenom otopinom natrij bikarbonata (30 ml), osušen preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo. Ostatak je podvrgnut kromatografiji na silika gel koloni 2.5 x 15 cm, uz eluaciju sa 25% EtOAc/heksan. Čiste frakcije su ukoncentrirane in vacuo, da bi se dobio spoj 868B (78 mg, 52%), u obliku bijelog praška. HPLC: 95.4% na 1.63 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 467.10 [M+H]+. Spoj 868B predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 869

[image]

30% vodik peroksid (0.1 ml) je dodat otopini spoja 748 (36 mg; 0.1 mmol) u 1 ml AcOH, na 100°C. Reakcijskoj smjesi su dodata četiri dodatna 0.1 mililitarska alikvota 30% vodik peroksida u 30 minutnim intervalima. 30 minuta nakon poslijednjeg dodavanja 30% vodik peroksida, reakcijskoj smjesi je dodata voda (8 ml). Poslije hlađenja do rt i stajanja tijekom 2 dana, nastala suspenzija je filtrirana, a filterski sloj je ispran vodom. Po sušenju, čvrsta masa je otopljena u ~2 ml acetona, a otopina je aplicirana na SiO2 ploču preparativne tankoslojne kromatografije. Eluacijom s 30% aceton/kloroformom, ekstrakcijom polarnije grupe, filtracijom i koncentriranjem, dobiven je spoj 869 (6 mg, 16%), u obliku sivobijele čvrste mase. HPLC: 99% na 1.06 min (retencijsko vrijeme) (Phenominex S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 2 minuta, a koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 254 nm); MS (ES): m/z 380.43 [M+H]+. Spoj 869 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 870

[image]

Racemska smjesa spojeva 852Di & 852Dii (150 mg, 0.38 mmol) je otopljena u THF (2 mL), pod dušikom, i dodat je 2-nitrofenil selenocijanat (202 mg, 0.89 mmol), a zatim PBu3 (0.22 mL, 0.89 mmol). Nastala smjesa je miješana tijekom 20 h, ukoncentrirana i pročišćena flash kromatografijom, sa 0 do 100% EtOAc u heksanima. Nastali proizvod je otopljen u THF (11 mL) i obrađen sa 2 mL 30% H2O2, na 0°C. Reakcijska smjesa je miješana tijekom 10 minuta, a zatim je zagrijana do rt i miješana preko noći. Reakcija je ugašena dodatkom 5% otopine Na2S2O3 i slane otopine. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran 2X sa CH2Cl2. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4, ukoncentrirani in vacuo i pročišćeni flash kromatografijom sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 870 (114 mg, 80%), u obliku žute čvrste mase. HPLC: 100% na 3.67 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 375.23 [M-H]-. Spoj 870 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 871

(871Bi & 871Bii)

[image]

A. (871A)

[image]

Otopini racemske smjese spojeva 852Di & 852Dii (33 mg, 0.09 mmol) u 0.5 mL aceton/0.4 mL voda je dodata 50% tež. otopina NMO u vodi (22 μL, 0.11 mmol), a zatim 4% tež. otopina OsO4 u vodi (54 μL, 8.7 μmol). Nastala smjesa je miješana tijekom 12 h i reakcija je ugašena dodatkom 5% otopine Na2S2O3. Dodat je CH2Cl2, slojevi su odvojeni, a vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2. Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4, ukoncentrirani in vacuo i pročišćeni SiO2 preparativnom TLC, sa 40% acetonom u CH2Cl2, da bi se dobilo Racemski spoj 871A (30 mg, 83%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 2.91 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 469.26 [M+OAc]-. Spoj 871A predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

B. (871Bi & 871Bii)

Racemski spoj 871A je odvojen na svoje enantiomere preparativnom kiralnom HPLC normalne faze (CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm kolona; uz eluaciju sa 30% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu (izokratski), pri 50 mL/min) da bi se dobio antipod, koji se brže eluira, spoj 871Bi (Kiralna HPLC: 7.35 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 30% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min) i antipod, koji se sporije eluira, spoj 871Bii (Kiralna HPLC: 11.49 min; CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm kolona; uz eluaciju sa 30% MeOH/EtOH (1:1) u heptanu, pri 1 mL/min). Apsolutna stereokemija spojeva 871Bi & 871Bii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 872

(3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[difluorometil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (872)

[image]

Racemska smjesa spoeva 852Di & 852Dii (50 mg, 0.13 mmol) je otopljena pod dušikom, u 1 mL CH3CN i dodat je CuJ (2 mg, 8.9 μmol). Ova smjesa je zagrijana do 45°C i dodata je, preko šprica, 2-(fluorosulfonil)difluorooctena kiselina (27 mg, 0.15 mmol). Reakcijska smjesa je miješana tijekom 1.5 h, na 45°C, a zatim je ostavljena da se ohladi do rt. Reakcija je ugašena dodatkom vode i CH2Cl2. Izdvojeni su slojevi, a vodeni sloj je ekstrahiran sa CH2Cl2. Sjedinjene organske faze su osušene preko MgSO4, ukoncentrirane in vacuo i pročišćene dva puta, SiO2 flash kromatografijom sa 0 do 100% EtOAc u heksanima, da bi se dobio spoj 872 (10 mg, 18%), u obliku bijele pjene. HPLC: 92% na 3.72 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 443.22 [M-H]-. Spoj 872 predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 873

(873i & 873ii)

[image]

Spoj 471Di (50 mg, 0.13 mmol), CuJ (2 mg, 8.9 μmol) i 2-(fluorosulfonil)difluorooctena kiselina (28 mg, 0.16 mmol) su reagirali u 1 mL CH3CN i pročišćeni su, kao što je opisano u Primjeru 872. Spojevi 873i & 873ii (15 mg, 0.03 mmol) su dobiveni u obliku mješavine 6:1, koja se ne može odvojiti, što je određeno pomoću 1H-NMR. HPLC: 91% na 3.64 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, Ballistic, 10-90% vodeni metanol, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% H3PO4, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 489.22 [M+OAc]-. Svaki od spojeva 873i & 873ii predstavlja racemsku smjesu antipoda. Nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 874

(874i & 874ii)

[image]

Trifenilfosfin (0.067 g, 0.254 mmol) i di-terc-butil-azodikarboksilat (0.059 g, 0.254 mmol) u THF (1 mL) su miješani na rt, pod N2, tijekom 10 minuta, a zatim je dodat saharin (0.047 g, 0.254 mmol). Reakcijska smjesa je miješana pod N2, tijekom dodatnih 15 minuta, a zatim je uslijedilo dodavanje spoja 429i (0.050 g, 0.127 mmol). Reakcija je ostavljena da teče tijekom 24 h, u kojem momentu je dodat CH2Cl2 (15 mL). Organski sloj je odvojen, a zatim je uzastopno ispran sa 1N NaOH (15 mL) i slanom otopinom (15 mL), osušen je preko MgSO4 i ukoncentriran in vacuo. Nastala čvrsta masa je pročišćena SiO2 preparativnom TLC, uz eluaciju sa 25% acetonom u CHCl3, da bi se dobio spoj 874i (18 mg, 25%), u obliku bijele čvrste mase. (HPLC: 91% na 2.96 min (retencijsko vrijeme) (YMC S-5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 559.42 [M+H]+) i spoj 874ii (18 mg, 25%) u obliku bijele čvrste mase (HPLC: 93% na 2.85 min (retencijsko vrijeme) (YMC S-5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ESI): m/z 557.12 [M-H]-) Apsolutna stereokemija spojeva 874i & 874ii nije bila ustanovljena. Iako svaki spoj predstavlja jedan antipod, nomenklatura i prikazana struktura ne odražavaju apsolutnu stereokemiju spoja.

Primjer 875

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-ciklopropiloksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (875B)

[image]

A. (875A)

[image]

Otopina spoja 471Di (300 mg, 0.79 mmol), merkuri trifluoroacetata (17 mg, 0.04 mmol) u teterahidrofuranu (THF, 1.5 mL) i etil vinil etera (3 mL) u zapečaćenoj epruveti debelih zidova je zagrijana do 45°C, tijekom 48 h. Epruveta je ohlađena i otvorena, a reakcijska smjesa je ukoncentrirana in vacuo, da bi se dobilo ulje. Sirovi materijal je pročišćen flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 1:4:4 EtOAc/metilen klorid/heptan, da bi se dobio spoj 875A (115 mg, 36%) u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 99% na 3.80 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 407.09 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 875A ustanovljena je pomoću stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njima. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i naznačena nomenklaturom.

B. [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-ciklopropiloksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (875B)

[image]

Otopini spoja 875A (100 mg, 0.25 mmol) u suhom metilen kloridu (5 mL), ohlađenom do 5°C, dodata je, kap po kap, otopina dietilcinka (1.0M u heksanima, 1.4 mL, 1.4 mmol). Reakcijska smjesa je zagrijana do rt, a zatim je uveden dijodometan (80 mL, 1.0 mmol). Poslije 3 h, HPLC je pokazala da je reakcija 2/3 završena. Naizmjenično su dodate dvije dodatne količine dietilcinka i dijodometana, a zatim je reakcijska smjesa ohlađena u ledenoj kupelji, ugašena vodom i raspodijeljena između 1M otopine HCl (20 mL) i EtOAc (20 mL). Organska faza je odvojena, osušena preko natrij sulfata, ukoncentrirana in vacuo i pročišćena flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 2:3 EtOAc/heptan, da bi se dobio spoj 875B, u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.72 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 421.08 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 875A ustanovljena je pomoću stereokemije intermedijernog spoja 471Di i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i naznačena nomenklaturom.

Primjer 876

(876)

[image]

Racemska smjesa spojeva 808 & 809 (0.057 mg, 0.15 mmol) je otopljena u 2 mL CH2Cl2. Dodati su: trietilamin (0.018 g, 0.18 mmol), katalitička količina DMAP-a i 4-fluorobenzoil klorid (0.075 g, 0.48 mmol) i reakcijska mješavina je miješana u toku 6 h. Reakcijska smjesa je razrijeđena sa CH2Cl2 i naizmjenično je isprana sa 1N HCl, 10% K2CO3 i slanom otopinom, osušena je preko MgSO4, filtrirana i ukoncentrirana in vacuo. Ostatak je pročišćen preparativnom TLC na silika gelu, koristeći, kao eluent, 2:1 EtOAc/heksani. Uklanjanjem otapala dobiven je spoj 876 (0.066 g, 70%), u obliku bijele čvrste mase. HPLC: 100% na 3.94 min (YMC S5 ODS kolona), uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, tijekom 4 minute, gradijent, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 552.11 [M+H]+.

Primjer 877

(877)

[image]

A. (877A)

[image]

1.6M otopina n-BuLi (54.6 mL, 87.4 mL) je dodata, kap po kap, otopini diizopropilamina (12.8 mL, 91.6 mmol) u THF (40 mL), na -20°C. Reakcijska mješavina je ohlađena do -78°C, i dodata je, kap po kap, otopina benzofurazana (10.0 g, 83.3 mmol) u THF (34 mL). Poslije miješanja tijekom 35 minuta, smjesa je ulivena u otopinu DMF (10.3 mL, 133.2 mmol) u THF (34 mL), na -78°C, i dodata je otopina 3:1 H2O:AcOH (80 mL). Poslije miješanja na rt, tijekom 12 h, dodat je toluen (150 mL) i odvojeni su slojevi. Organski sloj je ukoncentriran do ~30 mL i usitnjen je sa heksanima (150 mL). Nastala čvrsta masa je filtrirana i isprana heksanima. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksani, dobiven je spoj 877A (7.77 g, 63%), u obliku žutosmeđe čvrste mase. HPLC: 99% na 1.22 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 149.08 [M+H]+.

B. (877B)

[image]

NaBH4 (2.00 g, 52.5 mmol) je dodavan dio po dio, otopini spoja 877A (7.77 g, 52.5 mmol) u MeOH (100 mL), na 0°C. Poslije 5 minuta, smjesa je raspodijeljena između H2O (100 mL) i CH2Cl2 (100 mL). Vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc (2 X 100 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgSO4) i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobio sirovi spoj 877B (7.55 g, 96%), koji je preuzet bez daljeg pročišćavanja. HPLC: 99% na 1.63 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 133.05 [M+H-H2O]+.

C. (877C)

[image]

Dimeća HNO3 (4.25 mL, 100.58 mmol) je dodata, kap po kap, otopini sirovog spoja 877B (7.55 g, 50.29 mmol) u H2SO4 (50 mL), na 0°C. Smjesa je miješana na rt, tijekom 20 minuta, izlivena na led (1L) i zagrijana do rt, a zatim je ekstrahirana sa EtOAc (3 X 250 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgSO4) i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Nastala čvrsta masa je isprana sa H2O i osušena na zraku, da bi se dobio spoj 877C (6.0 g), u obliku narančaste čvrste mase. Dodatnih 2.7 g je obnovljeno iz vodenog ispiraka, ekstrakcijom sa EtOAc, do ukupnog prinosa od 8.7 g (83%). HPLC: 99% na 1.63 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 210.18 [M+H]+.

D. (877D)

[image]

Urea (29.3 mg, 0.488 mmol) je dodavana dio po dio, otopini spoja 877C (100 mg, 0.488 mmol) u dimećoj H2SO4 (2 mL), na 50°C, uz snažno miješanje. Smjesa je zatim zagrijana do 100°C, tijekom 30 minuta, ohlađena do rt i izlivena na led (100 mL). Nastala vodena smjesa je ekstrahirana sa EtOAc (3 X 50 mL), a sjedinjeni organski slojevi su isprani sa H2O (1 X 100 mL), osušeni (MgSO4) i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksani, dobiven je spoj 877D (76.3 mg, 77%), u obliku žuto-narančaste čvrste mase. HPLC: 96% na 1.39 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 209.17 [M+H]+.

E. (877E)

[image]

Mješavina spoja 877D (1.01 mg, 4.85 mmol) i P2O5 (2.75 g, 9.70 mmol) u toluenu (24 mL) je podvrgnuta refluksu tijekom 30 minuta. Dodata je H2O (50 mL), a nastala smjesa je ekstrahirana sa EtOAc (3 X 100 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni (MgSO4) i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom, da bi se dobio spoj 877E (0.90 g, 98%), u obliku smeđe čvrste mase, koja je preuzeta bez pročišćavanja. HPLC: 90% na 1.78 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

F. (877F)

[image]

Prašak željeza (0.53 g, 9.47 mmol, sito 325) je dodat, odjednom, otopini spoja 877E (0.90 g, 4.73 mmol) u AcOH (24 mL), na 70°. Reakcija je završena poslije 30 minuta, a što je procijenjeno HPLC-om. Smjesa je ukoncentrirana pod smanjenim pritiskom, otopljena u EtOAc (50 mL) i isprana zasićenim NaHCO3 (2 X 50 mL). Vodeni sloj je ekstrahiran sa EtOAc (4 X 20 mL), a sjedinjeni organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i ukoncentrirani pod smanjenim pritiskom. Pročišćavanjem flash kromatografijom na silika gelu, uz eluaciju sa 50% EtOAc/heksani, dobiven je spoj 877F (0.62 g, 82%), u obliku tamno narančaste čvrste mase. HPLC: 94% na 1.94 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 161.00 [M+H]+.

G. (877G)

Mala boca je napunjena spojem 752 (22.1 mg, 0.104 mmol), spojem 877F (11.1 mg, 0.069 mmol) i MgSO4 (21 mg, 0.173 mmol). Dodat je DME (0.07 mL), a zatim Et3N (0.05 mL) i boca je zapečaćena teflonskom trakom i zagrijavana na 135°C, tijekom 18 h. Pročišćavanjem preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 30 aceton/CHCl3 dobiven je spoj 877G (6.3 mg, 17%), u obliku smeđe čvrste mase. HPLC: 98% na 2.15 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS-A kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 337.16 [M+H-H2O]+. Apsolutna stereokemija spoja 877G je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjer 878

[3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-[oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2-kloro-3-metilbenzonitril (878)

[image]

Mješavina 4-amino-2-kloro-3-metil-benzonitrila (54.5 mg, 0.327 mmol), spoja 752 (104 mg, 0.491 mmol), MgSO4 (98 mg, 0.818 mmol) i diizopropiletil amina (0.28 mL, 1.64 mmol) u DME (0.33 mL) je zagrijavana na 150°C, u zapečaćenoj epruveti, tijekom 18 h. Pročišćavanjem preparativnom TLC (SiO2), uz eluaciju sa 30% aceton/CHCl3 dobiveno je 53.0 mg (45%) spoja 878, u obliku žutosmeđe čvrste mase. HPLC: 95% na 2.63 min (retencijsko vrijeme) (YMC S5 ODS kolona, 4.6 x 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% vodenim metanolom, tijekom 4 minute, a koji sadrži 0.2% fosforne kiseline, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS (ES): m/z 361.03 [M+H]+. Apsolutna stereokemija spoja 878 je ustanovljena pomoću poznate stereokemije intermedijernog spoja 752 i zadržavanja konfiguracije u njemu. Apsolutna stereokemija je kao što je prikazana na gornjoj slici i izražena nomenklaturom.

Primjeri 879 do 1020

Dodatni spojevi ovog izuma su pripremljeni postupcima, koji su analogni onima, koji su prethodno opisani. Spojevi iz Primjera 879 do 1020 imaju slijedeću strukturu (L je veza):

gdje su struktura, naziv spoja, retencijsko vrijeme, molekulska masa i korišteni postupak, navedeni u Tablici 18. Apsolutna konfiguracija za navedene spojeve nije određena. Za spojeve koji imaju jedan ili više optičkih centara, navedeno je da su racemični ili kiralni. Racemski spojevi predstavljaju mješavinu oba moguća antipoda. Kiralno se odnosi na spoj, koji predstavlja jedan antipod mogućeg para. Za spojeve koji su kiralna, ali apsolutna stereokemija nije poznata, struktura ne odražava apsolutnu stereokemiju. Za spojeve koji su kiralni, a apsolutna stereokemija je poznata u odnosu na polazni materijal, tada prikazana struktura odražava apsolutnu stereokemiju spoja.

Kromatografske tehnike, korištene za određivanje retencijskih vremena spojeva iz Tablice 18, su slijedeće: LCMS=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 4 minute, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LCMS*=YMC S5 ODS kolona, 4.6 X 50 mm, uz eluaciju sa 10-90% MeOH/H2O, tijekom 2 minuta, koji sadrži 0.1% TFA; 4 mL/min, praćenje na 220 nm. LC*=Hypersil C18 BDS kolona, 250 x 4.6 mm, 5 μm, valna dužina mjerenja 254 nm i brzina protoka 1 mL/min. Korišten je linearni gradijent 90% 0.1% trifluorooctene kiseline u vodi, 10% acetonitrila (start) do 100% acetonitrila tijekom 15 minuta, a zatim 100% acetonitrila tijekom 5 minuta. LC=YMC S5 ODS kolona, 4.6

Tablica 18.

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

[image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image] [image]

Claims (26)

1. Spoj slijedeće formule: [image] naznačen time, što simboli imaju slijedeća značenja i, nezavisno se biraju u svakom pojavljivanju: G je aril ili heterocikl grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y’ je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; i W’ je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W’ nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili kada je W’ CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5, NH(CR7R7’)n ili NR5(CR7R7’)n, gdje je n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, HOC=O, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, NH2C=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’ ili gdje A1 ili A2 sadrži grupu R7 i W sadrži grupu R7, navedene R7 grupe A1 ili A2 i W zajedno tvore heterociklični prsten; R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2OR1,S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; i R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 iliSO2NR1R1’; uz uvjete da: (1) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je –CH2-CH2- i A1 i A2 su CH, onda G-L nije fenil, monosupstituirani fenil ili fenil koji je supstituiran sa dvije ili više slijedećih grupa: metoksi, halo, NO2, metil, CH3-S-, OH, CO2H, trifluorometil, -C(O)-C6H5, NH2, 4-7-epoksi, heksahidro-1H-izoindol-1,3(2H)dion ili –C(O)-CH3; (2) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i jedan od A1 i A2 je CH, a drugi je CR7, onda G-L nije nesupstituirani fenil; (3) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i jedan od A1 i A2 je CH, a drugi je C-CH3, onda G-L nije fenil supstituiran sa kloro i/ili metil; (4) kada: Y’ je –O- ili –S-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i jedan od A1 i A2 je CH, a drugi je CH ili C-alkil, onda G-L nije N-supstituirani piperazin-alkil- ili N-supstituirani imidazolidin-alkil-; (5) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i A1 i A2 su CH, onda G-L nije oksazol ili triazol; (6) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik ili metil, Z1 i Z2 su O, W’ je CH2-CH2 i A1 i A2 su CH ili C-CH3, onda G-L nije tiazol ili supstituirani tiazol; (7) kada Y’ sadrži grupu J’, odabranu od: S, S=O, SO2, NH, NR7, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHR6, NR6NH ili N=N, W’ je CR7R7’-CR7R7’ i Z1 i Z2 su O, onda G-L nije nesupstituirani fenil; (8) kada: Y’ je NR7, W’ je nesupstituirani ili supstituirani fenil i, Q1 i Q2 su vodik, onda Z1 i Z2 nisu O; (9) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je dihidroizoksazol, koji nosi po izboru supstituiranu fenil grupu i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirani fenil ili diklorofenil; (10) kada: Y’ je O, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je etilen oksid i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije metilfenil ili klorofenil; (11) kada: Y’ je NR7-CR7R7’, W’ je CR8=CR8’, Q1 i Q2 su vodik, A1 i A2 su CH, C-CH3, C-CH2-C6H5 ili C-CH2-CH3 i, Z1 i Z2 su O, onda G-L nije nesupstituirani fenil, monosupstituirani fenil ili metilpiridinil; (12) kada: Y’ je CR7R7’-C=O, W’ je NR9-CR7R7’, Q1 i Q2 su vodik, A1 i A2 su CH i, Z1 i Z2 su O, onda G-L nije nesupstituirani fenil; (13) kada: Y’ je CHR7’-NR7, gdje je R7’ nesupstituirani fenil, metoksi ili etoksi, a R7 je nesupstituirani fenil, metil ili –C(O)-C6H5, W’ je dimetoksifenilen ili nesupstituirani fenilen, Z1 i Z2 su O, Q1 i Q2 su vodik i, A1 i A2 su CH, C-CN, C-C(O)-C6H5 ili -C-(O)-dimetoksifenil onda G-L nije nesupstituirani fenil; (14) spoj formule Ia nije 6,10-epitio-4H-tieno-[3’,4’:5,6]ciklookt [1,2-f]izoindol-7,9(5H,8H)-dion, 8-(3,5-diklorofenil)-6,6a,9a,10,11,12,-heksa-hidro-1,3,6,10-teterametil-2,2,13-trioksid, (6R,6aR,9aS,10S); (15) kada: Y’ je O, W’ je -CH2-CH2-, Q1 i Q2 su metil, Z1 i Z2 su O i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirani fenil, fenil supstituiran sa metoksi, fenil-alkil ili morfolin-alkil, niti je spoj, koji je samo premošten putem L grupe koja je alkilen, kako bi nastao bis spoj; (16) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je CR7R7’-CR7R7’ i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirana fenil grupa; i (17) kada: Y’ je –O-, Q1 i Q2 su vodik, Z1 i Z2 su O, W’ je ciklopentil, cikloheksil, 3-fenil-2-izoksazolin ili CR7R7’-CR7R7’, gdje R7 i R7’ su svaki, nezavisno definirani, kao: Cl, Br, H i 4-butirolakton i, R7 i R7’ nisu svi istovremeno H i, A1 i A2 su CH, onda G-L nije nesupstituirani naftilni prsten ili monosupstituirani fenilni prsten, gdje je navedeni supstituent: metoksi, Br, Cl, NO2, metil, etil, CH2-fenil, S-fenil, ili O-fenil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat, prolijek ili stereoizomer.

2. Spoj kao u patentnom zahtjevu 1, naznačen time, što je: G arilna ili heterocikl grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y’ je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; i W’ je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W’ nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili kada je W’ CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5 ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O iliSO2NR1R1’; uz uvjete (1) do (17) navedene formule Ia i, dalje, gdje (i) kada Y’ je –O- i W’ je CR7R7’-CR7R7’, A1 i A2 nisu istovremeno CH; i (ii) kada je L veza, G nije nesupstituirana fenilna grupa; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat, prolijek ili stereoizomer.

3. Spoj kao u patentnom zahtjevu 1, naznačen time, što je: G arilna ili heterocikl grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O; Z2 je: O; A1 je CR7; A2 je CR7; Y’ je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; W’ je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W’ nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili kada je W’ CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2 ili NR4R5; L je veza; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, alkiltio ili supstituirani alkiltio; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, amino, NHR4, NR2R5, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1(C=O)O, R1NHC=O, SO2R1, R1R1’NC=O ili SO2NR1R1’; R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2R1 ili SO2NR1R1’; i R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O iliSO2NR1R1’; uz uvjete (1) do (17) navedene formule Ia i, dalje, gdje (i) kada Y’ je –O- i W’ je CR7R7’-CR7R7’, A1 i A2 nisu istovtremeno CH; i (ii) kada je L veza, G nije nesupstituirana fenilna grupa; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat, prolijek ili stereoizomer.

4. Spoj, naznačen time, što je izabran iz grupe, koja se sastoji od: (3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-[oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-1-izokinolinkarbonitril (748D); [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (771Di) ili [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril (771Dii); [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[[3-kloro-5-(trifluorometil)-2-piridinil]oksi] etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (744); [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-(3-fluorofenoksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (745); [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-(1,3-benzodioksol-5-iloksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-(4-fluorofenoksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-(1,2-benzizoksazol-3-iloksi)etil]oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[(5-kloro-1,2-benzizoksazol-3-il)oksi]etil] oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (737); [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[4-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-7- metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (577); [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (579); [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[4-[2-[(5-kloro-1,2-benzizoksazol-3-il)oksi]etil] oktahidro-7-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (581); [3aS-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-4-metil-7-[2-(5-metil-2H-1,2,3-benzotriazol-2-il)etil]-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (589); [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-[oktahidro-5-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-7-[2-[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi]etil]-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (689); [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-[7-[2-[(5-kloro-2-piridinil)oksi]etil]oktahidro-5- hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-8-kinolinkarbonitril (487); [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489Gi); [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril (489Gii); (3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-1,2-benzendikarbonitril (313); (3aα,4β,7β,7aα)-2-metoksi-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)benzonitril (328); (3aα,4β,7β,7aα)-5-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-8-kinolinkarbonitril (345); (3aα,4β,7β,7aα)-2-(metiltio)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)benzonitril (224); (3aα,4β,7β,7aα)-2-(6-benzotiazolil)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (368); (3aα,4β,7β,7aα)-7-[oktahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il]-2,1,3-benzoksadiazol-4-karbonitril (423); i (3aα,4β,7β,7aα)-2-(2,1,3-benzoksadiazol-5-il)heksahidro-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion (480B); ili njihova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat ili prolijek.

5. Spoj, naznačen time, što je odabran iz grupe, koja se sastoji od: [3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-piridinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(2,1,3-benzoksadiazol-5-il)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3,4-dimetil-2-piridinkarbonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3,4-dimetil-2-piridinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(6-benzotiazolil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(7-kloro-2,1,3-benzoksadiazol-4-il)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; metilni ester (3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksa-hidro-6-cijano-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; (3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7,8-trimetil-1,3-diokso-4,7-imino-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dikloro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dikloro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,7β,7aα)-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[difluorometil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[fenilmetoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[propiloksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[ciklopropilmetiloksi]karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[metoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2,3-diklorobenzonitril; [3aR-(3aα,4β,4aα,5aα,6β,7aα)]-4-(oktahidro-4a-hidroksi-4,6-dimetil-1,3-diokso-4,6-epoksicikloprop[f]izoindol-2(1H)-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N,N-dimetil-1H-izoindol-5-karboksamid; [3aR-(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-kloro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-kloro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi]metil] -4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[5-kloro-2-piridinil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[[fenilamino]karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(1-metiletiloksi)karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[5-fluoro-4-pirimidinil]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[etiloksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; 4-piridinilmetilni ester [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil) fenil)-heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[4-piridinilmetoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; 3aα,4β,5β,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[2-metil-5-(trifluorometil)-2H-pirazol-3-il] oksi]metil]-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; metilni ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-ciklopropilmetoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[((fenilmetil)amino)karbonil]oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; i [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-ciklopropiloksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; ili njihova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat ili prolijek.

6. Spoj, naznačen time, što je izabran iz grupe, koja se sastoji od: [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-jodofenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-hidroksi-4-metil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-3-(trifluorometil)piridinil)heksahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-metoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-5-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-metoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,7β,7aα)]-5-(oktahidro-4,7-dimetil-1,3,5-triokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-(trifluorometil)-2-piridinkarbonitril; [3aS-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksa-hidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-2-(4-kloro-2-metil-3-(trifluorometil)fenil)heksa-hidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-4,7-epoksi-1H-izoindol-1,3(2H)-dion; (3aα,4β,6β,7β,7aα)-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; metil ester (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksa-hidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; [3aS-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-etilsulfonamido-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(4-fluorofenilamino)karbonil] oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(1-metiletilamino)karbonil]oksi]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(1-metiletoksi)karbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-jodobenzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-N-metil-N-fenil-1H-izoindol-5-karboksamid; [3aR-(3aα,4β,5β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-kloro-3-metilbenzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[etoksikarbonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[2-metil-5-(trifluorometil)-2H-pirazol-3-il]oksi]metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; metil ester [3aS-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-[[[6-(trifluorometil)-4-pirimidinil]oksi] metil]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-metoksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)heksahidro-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karbonitril; [3aR-(3aα,4β,5β,6α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5,6-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-3-metil-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[[(ciklopropilmetil)amino]karbonil] amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil) benzonitril; [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(dimetilamino)sulfonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; (3aα,4β,5α,7β,7aα)-4-(oktahidro-5-benzensulfonamido-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; [3aR-(3aα,4β,6β,7β,7aα)]-4-(oktahidro-6-fluoro-5,5-dihidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; metil ester [3aR-(3aα,4β,5α,6β,7β,7aα)]-2-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-heksahidro-6-hidroksi-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-1H-izoindol-5-karboksilne kiseline; i [3aR-(3aα,4β,5α,7β,7aα)]-4-(oktahidro-5-[[(dimetilamino)sulfonil]amino]-4,7-dimetil-1,3-diokso-4,7-epoksi-2H-izoindol-2-il)-2-(trifluorometil)benzonitril; ili njihova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat ili prolijek.

7. Farmaceutska smjesa, koja može liječiti NHR-udružena stanja, naznačena time, što obuhvaća najmanje jedan spoj slijedeće formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu sol, solvat ili prolijek i, farmaceutski prihvatljiv nosač: [image] u kojoj simboli imaju slijedeća značenja i, u svakom pojavljivanju su nezavisno odabrani: G je arilna ili heterocikl grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, C=O, OC=O, NR1C=O, CR7R7’, C=CR8R8’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2, OSO2, C=NR7, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; W je: CR7R7’-CR7R7’, CR8=CR8’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OC=O, NR1C=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili kada je W CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5, NH(CR7R7’)n ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, HOC=O, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, NH2C=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’ ili gdje A1 ili A2 sadrži grupu R7 i W sadrži grupu R7, navedene R7 grupe A1 ili A2 i W zajedno tvore heterociklični prsten; R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2OR1,S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; i R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 iliSO2NR1R1’.

8. Farmaceutska smjesa, kao u patentnom zahtjevu 7, naznačena time, što dalje obuhvaća drugo antitumorsko sredstvo.

9. Farmaceutska smjesa koja može liječiti NHR-udružena stanja, naznačena time, što obuhvaća najmanje jedan spoj, kako je definiran u patentnom zahtjevu 2, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu sol i, farmaceutski prihvatljiv nosač.

10. Farmaceutska smjesa, kao u patentnom zahtjevu 9, naznačena time, što dalje obuhvaća drugo antitumorsko sredstvo.

11. Farmaceutska smjesa koja može liječiti NHR-udružena stanja, naznačena time, što obuhvaća najmanje jedan spoj, kako je definiran u patentnom zahtjevu 3, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu sol i, farmaceutski prihvatljiv nosač.

12. Farmaceutska smjesa, kao u patentnom zahtjevu 11, naznačena time, što dalje obuhvaća drugo antitumorsko sredstvo.

13. Postupak mijenjanja funkcije nuklearnog hormonskog receptora, naznačen time, što uključuje primjenu, vrstama sisavaca kojima je to potrebno, djelotvorne količine najmanje jednog spoja slijedeće formule I za moduliranje nuklearnog hormonskog receptora: [image] u kojoj simboli imaju slijedeća značenja i, u svakom pojavljivanju su nezavisno odabrani: G je arilna ili heterocikl grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, C=O, OC=O, NR1C=O, CR7R7’, C=CR8R8’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2, OSO2, C=NR7, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; W je: CR7R7’-CR7R7’, CR8=CR8’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OC=O, NR1C=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili kada je W CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5, NH(CR7R7’)n ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, HOC=O, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, NH2C=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’ ili gdje A1 ili A2 sadrži grupu R7 i W sadrži grupu R7, navedene R7 grupe A1 ili A2 i W zajedno tvore heterociklični prsten; R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2OR1,S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; i R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 iliSO2NR1R1’.

14. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor nuklearni hormonski receptor koji veže steroide.

15. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor androgeni receptor.

16. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor estrogeni receptor.

17. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor progesteronski receptor.

18. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor glukokortikoidni receptor.

19. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor mineralokortikoidni receptor.

20. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor aldosteronski receptor.

21. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor RORbeta receptor.

22. Postupak, kao u patentnom zahtjevu 13, naznačen time, što je navedeni nuklearni hormonski receptor COUP-TF2 receptor.

23. Postupak za liječenje stanja ili poremećaja, koji uključuje primjenu, vrstama sisavaca kojima je to potrebno, djelotvorne količine najmanje jednog spoja slijedeće formule: [image] ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvata, prolijeka ili stereoizomera, gdje simboli imaju slijedeća značenja i, u svakom pojavljivanju su nezavisno odabrani: G je arilna ili heterocikl grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, C=O, OC=O, NR1C=O, CR7R7’, C=CR8R8’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2, OSO2, C=NR7, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; W je: CR7R7’-CR7R7’, CR8=CR8’, CR7R7’-C=O, C=O-C=O, CR7R7’-C=CH2, C=CH2-C=CH2, CR7R7’-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, S-CR7R7’, SO-CR7R7’, SO2-CR7R7’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OC=O, NR1C=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili kada je W CR7R7’-CR7R7’, R7 i R7’ supstituenti, u svakom pojavljivanju, mogu zajedno formirati supstituirani ili nesupstituirani karbociklični ili supstituirani ili nesupstituirani heterociklični prstenasti sustav, koji se može stvoriti bilo kojom kombinacijom R7 i R7’ koji su vezani za isti atom ugljika; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl (npr. heteroaril) ili supstituirani heterocikl (npr. supstituirani heteroaril), halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5, NH(CR7R7’)n ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R3 i R3’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, hidroksilamin, hidroksamid, alkoksi ili supstituirani alkoksi, amino, NR1R2, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, HOC=O, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, NH2C=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’ ili gdje A1 ili A2 sadrži grupu R7 i W sadrži grupu R7, navedene R7 grupe A1 ili A2 i W zajedno tvore heterociklični prsten; R8 i R8’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, alkiltio ili supstituirani alkiltio, C=OSR1, R1OC=O, R1C=O, R1NHC=O, R1R1’NC=O, SO2OR1,S=OR1, SO2R1, PO3R1R1’ ili SO2NR1R1’; i R9 i R9’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 iliSO2NR1R1’; pri čemu je spomenuto stanje ili poremećaj izdvojen iz grupe, koja se sastoji od: proliferativnih bolesti, raka, benigne hiperplazije prostate, adenoma i neoplazmi prostate, benignih ili malignih tumorskih stanica koje sadrže androgeni receptor, srčane bolesti, angiogenih stanja ili poremećaja, hirzutizma, akni, hiperpiloze, upale, imune modulacije, seboreje, endometrioze, sindroma policističnih jajnika, androgene alopecije, hipogonadizma, osteoporoze, supresije spermatogeneze, libida, kaheksije, anoreksije, inhibicije muskularne atrofije kod pokretnih pacijenata, nadoknada androgena kod sniženih nivoa testosterona muškaraca što je u vezi sa starenjem, raka koji ekspresiraju estrogeni receptor, raka prostate, raka dojki, raka endometrijuma, toplotnih valunga, vaginalne suhoće, menopauze, amenoreje, dismenoreje, kontracepcije, okončavanja trudnoće, raka koji sadrži progesteronski receptor, endometrioze, kaheksije, menopauze, sinkronizacije ciklusa, meniginoma, tumora materice, indukcije porođaja, autoimunih bolesti, Alzheimerove bolesti, psihotičnih poremećaja, ovisnosti od lijekova, ne-inzulin zavisnog dijabetes melitusa, poremećaja posredovanih dopaminskim receptorom, kongestivne srčane slabosti, disregulacije homeostaze kolesterola i oslabljenog metabolizma farmaceutskih sredstava.

24. Postupak izrade spoja slijedeće formule XVI ili njegove soli [image] gdje G je arilna ili heterociklička grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OC=O, NR1C=O, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5 ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; pri čemu je postupak naznačen time, što obuhvaća korake dovođenja u kontakt spoja slijedeće formule XV ili njegove soli: [image] u kojoj su simboli, kao što su gore definirani; s enzimom ili mikroorganizmom koji može katalizirati hidroksilaciju navedenog spoja XV u navedeni spoj XVI i omogući spomenutu hidroksilaciju.

25. Postupak izrade spoja slijedeće formule XVIII ili njegove soli: [image] gdje G je arilna ili heterociklička grupa, gdje je navedena grupa mono- ili policiklična i, koja je po izboru supstituirana na jednom ili više položaja; Z1 je: O, S, NH ili NR6; Z2 je: O, S, NH ili NR6; A1 je CR7 ili N; A2 je CR7 ili N; Y je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OC=O, NR1C=O, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3; Q1 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; Q2 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, arilalkil ili supstituirani arilalkil, alkinil ili supstituirani alkinil, aril ili supstituirani aril, heterocikl ili supstituirani heterocikl, halo, CN, R1OC=O, R4C=O, R5R6NC=O, HOCR7R7’, nitro, R1OCH2, R1O, NH2, C=OSR1, SO2R1 ili NR4R5; L je: veza, (CR7R7’)n, NH, NR5 ili NR5(CR7R7’)n, gdje n=0-3; R1 i R1’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R2 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil; R4 je: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2OR1, SO2R1 ili SO2NR1R1’; R5 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R6 je: alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, CN, OH, OR1, R1C=O, R1NHC=O, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; R7 i R7’ su svaki, nezavisno: H, alkil ili supstituirani alkil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkenil ili supstituirani alkenil, alkinil ili supstituirani alkinil, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl, cikloalkilalkil ili supstituirani cikloalkilalkil, cikloalkenilalkil ili supstituirani cikloalkenilalkil, heterociklalkil ili supstituirani heterociklalkil, aril ili supstituirani aril, arilalkil ili supstituirani arilalkil, halo, CN, OR4, nitro, hidroksilamin, hidroksilamid, amino, NHR4, NR2R5, NOR1, tiol, alkiltio ili supstituirani alkiltio, R1C=O, R1(C=O)O, R1OC=O, R1NHC=O, SO2R1, SOR1, PO3R1R1’, R1R1’NC=O, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1 ili SO2NR1R1’; pri čemu je postupak naznačen time, što obuhvaća korake dovođenja u kontakt spoja slijedeće formule XVII ili njegove soli: [image] u kojoj su simboli, kao što su gore definirani; s enzimom ili mikroorganizmom koji može katalizirati otvaranje epoksidnog prstena spoja XVII kako bi nastao diol navedenog spoja XVIII, i omogućiti spomenuto otvaranje prstena i formiranje diola.

26. Spoj slijedeće formule Ib [image] naznačen time, što G, Z1, Z2, Q1 i Q2 su, kao što su definirani gore; Y’ je J-J’-J” gdje je J (CR7R7’)n i n=0-3, J’ je veza ili: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, CR7R7’, R2P=O, R2P=S, R2OP=O, R2NHP=O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl i, J” je (CR7R7’)n i n=0-3, gdje Y nije veza; i W’ je: CR7R7’-CR7R7’, CR7R7’-C=O, NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’, cikloalkil ili supstituirani cikloalkil, cikloalkenil ili supstituirani cikloalkenil, heterocikl ili supstituirani heterocikl ili aril ili supstituirani aril, gdje, kada W’ nije: NR9-CR7R7’, N=CR8, N=N, NR9-NR9’ ili heterocikl ili supstituirani heterocikl, onda J’ mora biti: O, S, S=O, SO2, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSO2, NHNH, NHNR6, NR6NH ili N=N; ili alternativno, Y’ je CR7R7’-C=O i W’ je NR9-CR7R7’; L je veza; i A1 i A2 su, kao što su gore definirani uz uvjet da, kada Y’ = O i W’ = -CH2-CH2-, onda najmanje jedan od A1 ili A2 nije CH; uz dalje uvjete: (2), (3), (6), (7) i (8), kao u patentnom zahtjevu 1; ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol, solvat, prolijek ili stereoizomer.