MXPA04005876A - Compuestos de succinimida heterociclicos fusionados y analogos de los mismos, moduladores de la funcion del receptor de la hormona nuclear. - Google Patents

Compuestos de succinimida heterociclicos fusionados y analogos de los mismos, moduladores de la funcion del receptor de la hormona nuclear.

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Abstract

Se describen compuestos ciclicos fusionados, metodos de uso de tales compuestos en el tratamiento de condiciones asociadas con el receptor de la hormona nuclear tal como el cancer y padecimientos inmunes, y composiciones farmaceuticas que contienen tales compuestos.

Description

COMPUESTOS DE SUCCINIMIDA HETEROCICLICOS FUSIONADOS Y ANALOGOS DE LOS MISMOS, MODULADORES DE LA FUNCION DEL RECEPTOR DE LA HORMONA NUCLEAR.
Campo de la Invención. La presente invención se refiere a compuestos cíclicos fusionados, a métodos de uso de tales compuestos en e,l tratamiento de condiciones asociadas con el receptor de la hormona nuclear tal como el cáncer, y a composiciones farmacéuticas que contienen tales compuestos.
Antecedentes de la Invención. Los receptores de la hormona nuclear (NHR's) constituyen una gran super- familia de factores de transcripción específicos de la secuencia y que dependen de los ligandos. Los miembros de esta familia, tienen influencia en la transcripción directamente, a través de enlace específico a los genes objetivo del promotor (Evans, en Science 240: 889-895 (1988)), o indirectamente, por medio de interacciones proteína-proteína con otros factores de transcripción (Jonat et al., Cell 62: 1189-1204 (1990), Schuele et al., Cell 62: 1217-1226 (1990), y Yang-Yen et al., Cell 62: 1205-1215 (1990)). La super-familia del receptor de la hormona nuclear (también conocida en la técnica como "super-familia del receptor de la hormona esteroide/tiroide" ) , incluye Ref . :156312 receptores para una diversidad de ligandos hidrofóbicos, incluyendo cortisol, aldosterona, estrógeno, progesterona , testosterona, vitamina D3 , hormona tiroides y ácido retinóico (Evans, 1988, supra) . Además de estos receptores convencionales de la hormona nuclear, la super-familia contiene diversas proteínas que no tienen ligandos conocidos, denominados receptores huérfanos de la hormona nuclear (Mangelsdorf et al., Cell 83: 835-839 (1995), O'Malley et al., Mol. Endocrinol . 10: 1293 (1996). Enmark et al., Mol. Endocrinol . 10, 1293-1307 (1996) y Giguere, Endocrin. Rev. 20, 689-725 (1999)). Los receptores convencionales de la hormona nuclear, son generalmente transactivadores en presencia de ligando y pueden ser represores activos o transcripcionalmente inertes en ausencia de un ligando. Algunos de los receptores huérfanos, se comportan como si fueran transcripcionalmente inertes en ausencia de ligandos. Otros, sin embargo, se comportan como activadores o represores constitutivos. Estos receptores de la hormona nuclear huérfanos, están bajo el control de ligandos particulares que no se han identificado, o no necesitan enlazarse a ligandos para ejercer estas actividades. En común con otros factores de transcripción, los receptores de la hormona nuclear tienen una estructura modular, que comprende tres diferentes dominios: un dominio en la terminal N de tamaño variable, que contiene una función de activación transcripcional AF-1, un dominio de enlace de ADN altamente conservado y un dominio de enlace de ligando moderadamente conservado. El dominio de enlace de ligando no solamente es responsable del enlace del ligando específico sino que también contiene una función de activación transcripcional denominada AF-2 y un dominio de dimerización (Wurtz et al., Nature Struc. Biol. 3, 87-94 (1996), Parker et al., Nature Struc. Biol. 3, 113-115 (1996) y Kumar et al., Steroids 64, 310-319 (1999)). Aunque la secuencia global de proteína de estos receptores puede variar significativamente, todos comparten una distribución estructural común, indicativa de la divergencia de un arquetipo ancestral, una homología substancial (especialmente, identidad de secuencia) en el dominio de enlace al ligando. Los receptores esteroides de la hormona nuclear de enlace (SB-NHR's) comprenden una sub-familia de receptores de la hormona nuclear. Estos receptores se relacionan en que comparten una homología de secuencia más fuerte una con la otra, particularmente en el dominio de enlace del ligando (LBD) , que los otros miembros de la super-familia NHR (Evans, 1988, supra) y utilizan todos ligandos basados en esteroides. Algunos ejemplos de esta sub-familia de NHR son el receptor de andrógeno (AR) , el receptor de estrógeno (ER) , el receptor de progesterona (PR) , el receptor glucocorticoide (GR) , el receptor mineralocorticoíde (MR) , el receptor de aldoesterona (ALDR) y el receptor esteroide y xenobiotico (SXR) (Evans et al., WO 99/35246) . Con base en una homología de secuencia fuerte en el LBD, diversos receptores huérfanos también pueden ser miembros de la sub- familia SB-NHR. Consistente con la alta homología de secuencia que se encuentra en el LBD para cada uno de los SB-NHR' s, los ligandos naturales para cada uno se derivan de un núcleo esteroide común. Los ejemplos de algunos de los ligandos de base esteroide utilizados por los miembros de SB-NHR' s, incluyen cortisol, aldosterona, estrógeno, progesterona, testosterona y dihidrotestosterona . La especif cidad de un ligando de base esteroide particular para uno de SB-NHR contra otro, se obtiene por la substitución diferencial alrededor del núcleo esteroide. Una alta afinidad enlazada a un SB-NHR particular, acoplado con una especificidad de alto nivel para ese SB-NHR en particular, se puede alcanzar con solamente cambios estructurales menores alrededor del núcleo esteroide (por ejemplo, Waller et al., Toxicol . Ap l . Pharmacol. 137, 219-227 (1996) y Mekenyan et al., Environ. Sci. Technol . 31, 3702-3711 (1997), afinidad de enlace para la progesterona hacia el receptor de andrógeno en comparación con la testosterona) . Se han descrito diversos agonistas y antagonistas esteroidales y no esteroidales sintéticamente derivados, para los miembros de la familia SB-NHR. Muchos de estos ligandos agonistas y antagonistas se usan clínicamente en el hombre para tratar una diversidad de condiciones médicas. El RU486, es un ejemplo de un agonista sintético del PR, que se utiliza como un agente de control de la natalidad (Vegeto et al., Cell 69: 703-713 (1992)), y la flutamida, es un ejemplo de un antagonista del AR, que se utiliza para el tratamiento del cáncer de próstata (Neri et al, Endo . 91, 427-437 (1972)). El Tamoxifen es un ejemplo de un modulador específico de los tejidos de la función ER, que se utiliza en el tratamiento del cáncer de mama (Smigel, J. Nati. Cáncer Inst . 90, 647-648 (1998) ) . El tamoxifen puede funcionar como un antagonista del ER en el tejido del pecho mientras actúa como un agonista del ER en el hueso (Grese et al., Proc . Nati. Acad. Sci . USA 94, 14105-14110 (1997)). Debido a los efectos selectivos del tejido observado en el tamoxifen, este agente y agentes similares se refieren como "agonista parcial" o "antagonista parcial". Además de los ligandos no endógenos derivados sintéticamente, se pueden obtener ligandos no endógenos para NHR de fuentes de alimentos (Regal et al., Proc. Soc . Exp . Biol. Med. 223, 372-378 (2000) y Hempstock et al., J. Med. Food 2, 267-269 (1999)). Los fitoestrógenos flavanoides, son un ejemplo de un ligando no natural para SB-NHR que se obtienen fácilmente de una fuente alimenticia tal como la soya (Quella et al., J. Clin. Oncol . 18, 1068-1074 (2000) y Banz et al., J. Med. Food 2, 271-273 (1999)). La capacidad de modular la actividad transcripcional del NHR individual por la adición de un ligando de molécula pequeña, los hacen objetivos ideales para el desarrollo de agentes farmacéuticos para una diversidad de estados de enfermedad. Como se menciona arriba, los ligandos no naturales se pueden preparar sintéticamente por ingeniería para servir como moduladores de la función de NHR. En el caso de SB-NHR, la ingeniería de un ligando no natural puede incluir la identificación de una estructura de núcleo que imite el sistema de núcleo esteroide natural . Esto se puede lograr por una separación por exclusión aleatoria contra diversos SB-NHR, o a través de enfoques dirigidos usando las estructuras de cristal disponibles de una variedad de dominios de enlace de ligando NHR (Bourguet et al., Nature 375, 377-382 (1995), Brzozowski, et al., Nature 389,753-758 (1997), Shiau et al., Cell 95, 927-937 (1998) y Tanenbaum et al., Proc . Nati. Acad. Sci. USA 95,5998-6003 (1998)). La substitución diferencial alrededor de tal núcleo de imitación esteroide, puede suministrar agentes con selectividad para un receptor contra otro. Además, tales modificaciones se pueden emplear para obtener agentes con actividad agonista o antagonista para un NHR-SB particular. La substitución diferencial acerca del núcleo de imitación de esteroides, puede resultar en la formación de una serie de agonistas y antagonistas de alta afinidad con especificidad para, por ejemplo, ER contra PR contra AR contra GR contra MR. Tal enfoque de substitución diferencial se ha reportado por ejemplo, para los moduladores de base quinolina del NHR esteroide en J. Med. Chem. , 41, 623 (1999); WO 9749709; US 5696133; US 5696130; US 5696127; US 5693647; US 5693646; US 5688810; US 5688808 y WO 9619458, todas se incorporan en la presente como referencia. Los compuestos de la presente invención comprenden un núcleo que sirve como una imitación esteroide, y son útiles como moduladores de la función de los receptores de hormonas nucleares de enlace esteroide, así como otros NHR como se describen a continuación.
Breve Descripción de la Invención. La presente invención proporciona compuestos cíclicos fusionados de la fórmula I siguiente y sales de los mismos, los compuestos son especialmente útiles como moduladores de la función del receptor de la hormona nuclear: Como se usa en la fórmula I, y a través de la especificación, los símbolos tienen los siguientes significados salvo que se indique lo contrario, y son, cada que se presentan, seleccionados independientemente: G es un grupo arilo o heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) , donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones, preferiblemente con hidrógeno, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, halo, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, CN, ^00=0, R1C=0, R1C=S, F^HNOO, RXR2NC=0, HOCR3R3' , nitro, I^OCHa, Rx0, NH2 , NR R5, SR1, S=0R1, SO2R1, SOZNRV , ( ?0) (R1O) P=0, oxo, (R1) (R1' ) P=0, o (R1' ) (NHR1) P=0; ¾ es O, S, NH, o NR6; Z2 es O, S, NH, o NR6 ; Ai es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y es J-J'-J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u O, S, S=0, S02, NH, NR7, C=0, 0C=0, NR1C=0, CR7R7' , C=CR8R8' , R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0P=0R2, 0S02, C=NR7, NHNH, NHNR6 , NRÉNH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido o arilo o arilo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace (esto es, si J' es un enlace, entonces en al menos uno de J o J" (cada uno definido como (CR7R7')n) , n no es cero) ; W es CR CR7'-CR7R7' , CR8=CR8', CR7CR7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , N=N, NR9—NR9', S—CR7R7', SO-CR7R7' , S02-CR7R7' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde cuando W no es NR9—CR7R7 , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , S-CR7R7' , SO—CR7R7' , S02—CR7R7' , o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR7, OC=0, NR1C=0, OP=OOR2, OP=ONHR2, OS02 , NHNH, NHNR6 , NRSNH , O N=N; O cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes R7 y R7' cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono ; i es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, ^00=0, R4C=0, R5R6NC=0, H0CR7R7' , nitro, R^CHz, R1^ NH2, C=0SR1, SO2R1 O NR4R5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, R10C=0, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7' , nitro, R^CHz , L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NR5, NH(CR7R7')n, o NR5 (CR7R7' ) n, donde n = 0 -3 R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R2 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3 y R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido halo, CN, hidroxilamina, hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR1R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; ;s H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclp substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido ^0=0, ^00=0, ^«=0, SO2OR1, SO2R1 O S02NR1R1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido R1C=0, R1NHC=0, SO2R1, SO2OR1, o SOsNRV ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, RxC=0, RxNHC=0, SO2R1, SO2OR1, o SOsNRV; R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina , hidroxilamida, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, OR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, HOC=0, R1C=0, R1(C=0)0, R1OC=0, R1NHC=0, NH2C=0, S02R\ SOR1, POBRV , R^'NC^O, O0SR1, SO2R1, SO2OR1, o S02NR1R1', o, en donde Ax o A2 contiene un grupo R7 y W contiene un grupo R7, los grupos R7 de Ax o A2 y W forman juntos un anillo heterocíclico ; R8 y R8 son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, OR1, alquiltio o alquiltio substituido, SO2OR1 , S=OR1, SO2R1 , PO3RV , o SOzNR'R1'; y R9 y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido CN, OH, OR1, R1C=0, R1OC=0, R1NHC=0, SO2R1 , SO2OR1 , o SOs R^1' .
Los compuestos dentro de la fórmula I son novedos subgénero preferido del cual es la siguiente fórmula la donde G, L, Z1( Z2, A1( A2, Qi y Q2 son como se define arriba; Y' es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02, NH, NR7, CR7R7' , R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHNR6 , NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; y W es CR7R7'—CR7R7', CR7R7'-C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2- C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CRR7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9', cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser 0, S, S=0, S02, NH , NR7, OP=0OR2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHNR6, NRSNH, o N=N; o cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; o alternativamente Y' es NR7R7'-CR7R7' y W es CR8=R8'; o, alternativamente, Y' es CR7R7'—C=0 y W es NR9—CR7R7' ; donde R2, R6, R7, R7' , R8 , R9 y R9' son como se define arriba y con la condición de que (1) cuando Y' es -O-, Q± y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son 0, W es -CH2-CH2-, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es fenilo, fenilo monosubstituido o fenilo que está substituido con dos o más de los siguientes grupos: metoxi, halo, N02, metilo, CH3-S-, OH, C02H, trifluorometilo, -C(0)-C6H5, NH2/ 4-7-epoxi, hexahidro- lH-isoindol-1, 3 (2H)diona, o -C(0)-CH3; (2) cuando Y' es -0-, Qi y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es CH2-CH2, y uno de Ai y A2 es CH y el otro es CR7, entonces G-L no es fenilo insubstituido ; (3) cuando Y' es -O-, Qi y Q2 son hidrógeno, ZL y Z2 son O, W es CH2-CH2, y uno de Ai y A2 es CH y el otro es C-CH3, entonces G-L no es fenilo substituido con cloro y/o metilo; (4) cuando Y' es -0- o -S-, Qi y Q2 son hidrógeno, Z y Z2 son 0, W es CH2-CH2, y uno de Ai y A2 es CH y el otro es CH o C-alquilo, entonces G-L no es piperazin-alquilo N-substituido o imidazolidin-alquilo N-substituido; (5) cuando Y' es -O- ; Qi y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es CH2-CH2, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es oxazol o triazol; (6) cuando Y' es -0-; Qi y Q2 son hidrógeno o metilo, Zi y Z2 son 0, W es CH2-CH2, y x y A2 son CH o C-CH3, entonces G-L no es tiazol o tiazol substituido (además, tales compuestos donde G-L es tiadiazol opcionalmente substituido o tiazol parcialmente saturado se remueven opcionalmente por la condición donde Ai y A2 ambos son CH) ; (7) cuando Y' contiene un grupo J' seleccionado de S, S=0, S02, NH, NR7 , R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHR6 , NRSNH o N=N, W es CR7R7'-CR7R7' , y Zi y Z2 son 0, entonces G-L no es fenilo insubstituido; (8) cuando Y' es NR7, W es fenilo insubstituido o substituido, y Qi y Q2 son hidrógeno, entonces Zx y Z2 no son 0; (9) cuando Y' es -0-, Q y Q2 son hidrógeno, Zx y Z2 son 0, W es dihidroisoxazol que porta un grupo fenilo opcionalmente substituido, y Ax y A2 son CH, entonces G-L no es fenilo insubstituido o diclorofenilo; (10) cuando Y' es O, Qx y Q2 son hidrógeno, Z y Z2 son 0, W es óxido de etileno, y ? y A2 son CH, entonces G-L no es metilfenilo o clorofenilo; (11) cuando Y' es NR7—CR7R7' , W es CR8=CR8' , Qx y Q2 son hidrógeno, Ai y A2 son CH, C-CH3, C-CH2-C6H5 o C-CH2-CH3, y ? y Z2 son 0, entonces G-L no es fenilo insubstituido, fenilo monosubstituido o metilpiridinilo ; (12) cuando Y' es CR7R7'—C=0, W es NR9—CR7R7' , Q y Q2 son hidrógeno, Ax y A2 son CH, y Zx y Z2 son 0, entonces G-L no es fenilo insubstituido; (13) cuando Y' es CHR7'—NR7 donde R7' es fenilo insubstituido, metoxi o etoxi y R7 es fenilo insubstituido, metilo o -C(0)-C6H5, W es dimetoxifenileno o fenileno insubstituido, i y Z2 son 0, Qi Y Q2 son hidrógeno, y Ax y A2 son CH, C-CN, C-C(0)-CgH5, o -C (0) -dimetoxifenilo , entonces G-L no es fenilo insubstituido ; (14) el compuesto de la fórmula la no es 6, 10-epitio-4H-tieno- [3' , 4 ' : 5, 6] ciclooct [1, 2-f] isoindol -7, 9 (5H, 8H) - diona, 8- ( 3 , 5-diclorofenil ) -6, 6a, 9a, 10, 11, 12, -hexahidro- 1,3,6, 10-tetrametil-2 , 2 , 13 -trióxido, (6R, 6aR, 9aS, 10S) ; (15) cuando Y' es O, W es -CH2-CH2-, Qi y Q son metilo, Zx y Z2 son O, y A y A2 son CH, entonces G-L no es fenilo insubstituido, fenilo substituido con metoxi, fenil -alquilo , o morfolin-alquilo, ni es el compuesto conectado a sí mismo a través de un grupo L que es alquileno para formar un compuesto bis; (16) cuando Y' es -O-, Qi y Q2 son hidrógeno, Zx y Z2 son 0, W es CR7R7'—CR7R7', y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es un grupo fenilo insubstituido; y (17) cuando Y' es -0-, Qi y Q2 son hidrógeno, Z y Z2 son O, W es ciclopentilo , ciclohexilo, 3-fenil-2- isoxazolina o CR7R7'—CR7R7' donde R7 y R7' son cada uno independientemente definidos como Cl , Br, H y 4- butirolactona y R7 y R7' no son todos simultáneamente H, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es un anillo naftilo insubstituido o un anillo fenilo monosubstituido, donde el substituyente es me oxi, Br, Cl , N02, metilo, etilo, CH2-fenilo, S-fenilo, u 0-fenilo. Preferiblemente, los compuestos de la fórmula I son monoméricos, y no están comprendidos dentro de otros oligómeros o polímeros.
Otro subgénero preferido novedoso es el de la siguiente fórmula Ib: donde G, ??, Z2, Qi y Q2 son como se define arriba; Y' es J-J'-J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u O, S, S=0, S02, NH, NR7, CR7R7', R2P=0, R2P=S, R2OP=0, R2NHP=0, OP=OOR2, OPONHR2, OS02, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; y W es CR7R7'—CR7R7', CR7R7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , OCH2- C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser 0, S, S=0, S02, NH, NR7, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHNR6 , NR6NH, o N=N; o cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; o alternativamente Y' es CR7R7'-C=0 y W es NR9-CR7R7'; L es un enlace; y ?? y A2 son como se define arriba, especialmente donde A2 y/o A2 son alquilo o alquilo opcionalmente substituido (se prefiere que tales substituyentes opcionales sean uno o más grupos V1 definidos a continuación) , con la condición de que, cuando Y' = O y W = -CH2-CH2-, entonces al menos uno de Ax o A2 no es CH; con las estipulaciones adicionales (2), (3), (6), (7) y (8) de arriba. Los compuestos de la fórmula I y sales de los mismos comprenden un núcleo que puede servir como un esteroide mimético (y no requiere la presencia de una estructura (por ejemplo análogo de ciclopentanoperhidrofenantreno) tipo esteroide) .
Descripción Adicional de la Invención Las siguientes son definiciones de los términos usados en la presente especificación. La definición inicial proporcionada para un grupo o término en la presente, aplica a tal grupo o término a través de la presente especificación individualmente o como parte de otro grupo, salvo que se indique lo contrario. Los términos "alquilo" y "alq" se refieren a un radical alcano de cadena recta o ramificada (hidrocarburo) que contiene desde 1 hasta 12 átomos de carbono, preferiblemente 1 hasta 6 átomos de ca bono. Ejemplarmente tales grupos incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4 , 4-dimetilpentilo, octilo, 2,2,4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, y similares. "Alquilo substituido" se refiere a un grupo alquilo substituido con uno o más substituyentes, preferiblemente 1 hasta 4 substituyentes, en cualquier punto de enlace disponible. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, uno o más de los siguientes grupos: halo (por ejemplo, un substituyente halo sencillo o substituyentes halo múltiples que forman, en el último caso, grupos tales como un grupo perfluoroalquilo o un grupo alquilo que porta Cl3 o CF3) , alcoxi, alquiltio, hidroxi, carboxi (esto es, -COOH) , alcoxicarbonilo , alquilcarboniloxi , amino (esto es, -NH2) , carbamoilo o carbomoilo substituido, carbamato o carbamato substituido, urea o urea substituida, amidinilo o amidinilo substituido, tiol (esto es, -SH) , arilo, heterociclo, cicloalquilo, heterocicloalquilo , -S- arilo, -S-heterociclo, -S=0-arilo, - S=0-heterociclo , arilalquilo-O- , -S (0) 2-arilo, -S (O) 2-heterociclo, -NHS(0)2-arilo, -NHS (0) 2-heterociclo, -NHS (O) 2NH-arilo, -NHS(0)2NH-heterociclo, -P (0) 2-arilo, -P (0) 2-heterociclo, -NHP (O) 2-arilo, -NHP (0) 2-heterociclo, -NHP (0) 2NH-arilo , -NHP(0)2NH-heterociclo, -0-arilo, -O-heterociclo , -NH-arilo, -NH-heterociclo, -NHC=0-arilo, -NHC=0-alquilo, -NHC=0-heterociclo, -0C=0-arilo, -0C=0-heterociclo, -NHC=0NH-arilo, -NHC=0NH-heterociclo, -0C=00-arilo, -0C=00-heterociclo, 0C=0NH-arilo, -0C=0NH-heterociclo, -NHC=00-arilo, -NHC=00-heterociclo, -NHC=00-alquilo, -C=0NH-arilo, -C=0NH-heterociclo, -C=00-arilo, -C=00-heterociclo, N (alquilo) S (0) 2-arilo, -N (alquilo) S (0) 2 -heterociclo , (alquilo) S (0) 2NH-arilo, - (alquilo) S (0) 2NH-heterociclo, (alquilo) P (0) 2-arilo, - (alquilo) P (0) 2-heterociclo, (alquilo) P (0) 2NH-arilo, - (alquilo) P (0) 2NH-heterociclo, N (alquilo) -arilo , - (alquilo) -heterociclo, -N (alquilo) C=0-arilo, - (alquilo) C=0-heterociclo, -N (alquilo) C=0NH-arilo, N (alquilo) C=0NH-heterociclo, -0C=0 (alquilo) -arilo, 0C=0N (alquilo) -heterociclo, - (alquilo) C=00-arilo, N (alquilo) C=00-heterociclo, -C=0 (alquilo) -arilo , C=ON (alquilo) -heterociclo, -NHS (0) 2 (alquilo) -arilo, NHS (0) 2N(alquilo) -heterociclo, -NHP (0) 2N(alquilo) -arilo, NHP (0) 2 (alquilo) -heterociclo, -NHC=0N (alquilo) -arilo, NHC=0 (alquilo) -heterociclo, - (alquilo) S (O) 2N (alquilo) - arilo, -N (alquilo) S (0) 2N (alquilo) -heterociclo, N (alquilo) P (0) 2 (alquilo) -arilo, - (alquilo) P (0) 2N (alquilo) -heterociclo, - (alquilo) C=0 (alquilo) -arilo, y N (alquilo) C=0N (alquilo) -heterociclo . En los substituyentes ejemplares arriba mencionados, en cada caso, los grupos tales como "alquilo" , "arilo" y "heterociclo" pueden por sí mismos estar opcionalmente substituidos; por ejemplo, "alquilo" en el grupo "NCH=00-alquilo" mencionado arriba, puede estar opcionalmente substituido de tal manera que tanto "NHC=00-alquilo" como "NHC=00-alquilo substituido" son substituyentes ejemplares. Los substituyentes alquilo ejemplares también incluyen grupos tales como "T" y »T-R12" (que se definen a continuación) , especialmente para grupos alquilo substituido dentro de Ai o A2. El término "alquenilo" se refiere a un radical hidrocarburo de cadena recta o ramificada que contiene desde 2 hasta 12 átomos de carbono y al menos un enlace doble carbono-carbono. Ejemplarmente, tales grupos incluyen etenilo o alilo. "Alquenilo substituido" se refiere a un grupo alquenilo substituido con uno o más substituyentes, preferiblemente 1 hasta 4 substituyentes, en cualquier punto de enlace disponible. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, alquilo o alquilo substituido, así como aquellos grupos mencionados arriba como substituyentes alquilo ejemplares. El término "alquinilo" se refiere a un radical hidrocarburo de cadena recta o ramificada que contiene desde 2 hasta 12 átomos de carbono y al menos un enlace triple carbono a carbono. Ejemplarmente, tales grupos incluyen etinilo. "Alquinilo substituido" se refiere a un grupo alquinilo substituido con uno o más substituyentes, preferiblemente 1 hasta 4 substituyentes, en cualquier punto de enlace disponible. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, alquilo o alquilo substituido, así como aquellos grupos mencionados arriba como substituyentes alquilo ejemplares. El término "cicloalquilo" se refiere a un grupo hidrocarburo cíclico completamente saturado que contiene desde 1 hasta 4 anillos y 3 hasta 8 carbonos por anillo. Ejemplarmente, tales grupos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, etc. "Cicloalquilo substituido" se refiere a un grupo cicloalquilo substituido con uno o más substituyentes, preferiblemente 1 hasta 4 substituyentes, en cualquier punto de enlace disponible. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, nitro, ciano, alquilo o alquilo substituido, así como aquellos grupos mencionados arriba como substituyentes alquilo ejemplares, y como se mencionó previamente como substituyentes arilo preferidos en la definición para G. Los substituyentes ejemplares también incluyen substituyentes cíclicos fusionados o enlazados a espiro, especialmente cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido. El término "cicloalquenilo" se refiere a un grupo hidrocarburo cíclico parcialmente insaturado que contiene 1 hasta 4 anillos y 3 hasta 8 carbonos por anillo. Ejemplarmente, tales grupos incluyen ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo, etc. "Cicloalquenilo substituido" se refiere a un grupo cicloalquenilo substituido con uno o más substituyentes, preferiblemente 1 hasta 4 substituyentes, en cualquier punto de enlace disponible. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, nitro, ciano, alquilo o alquilo substituido, así como aquellos grupos mencionados arriba como substituyentes alquilo ejemplares, y como se mencionó previamente como substituyentes arilo preferidos en la definición para G. Los substituyentes ejemplares también incluyen substituyentes cíclicos enlazados o fusionados a espiro, especialmente cicloalquilo o cicloalquilo substituido. Los términos "alcoxi" o "alquiltio" se refieren a un grupo alquilo como se describe arriba enlazado a través de un enlace oxígeno (-0-) o un enlace azufre (-S-) , respectivamente. Los términos "alcoxi substituido" o "alquiltio substituido" se refieren a un grupo alquilo substituido como se describe arriba enlazado a través de un enlace oxígeno o azufre, respectivamente. El término "alcoxicarbonilo" se refiere a un grupo alcoxi enlazado a través de un grupo carbonilo. El término "alquilcarbonilo" se refiere a un grupo alquilo enlazado a través de un grupo carbonilo. El término "alquilcarboniloxi" se refiere a un grupo alquilcarbonilo enlazado a través de un enlace oxígeno. Los términos "arilalquilo" , "arilalquilo substituido", "cicloalquilalquilo" , "cicloalquilalquilo substituido", "cicloalquenilalquilo" , "cicloalquenilalquilo substituido" , "heterocicloalquilo" y "heterocicloalquilo substituido" se refieren a grupos arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo y heterociclo enlazados a través de un grupo alquilo, substituidos en el grupo arilo, cicloalquilo, cicloalquenilo o heterociclo y/o alquilo donde se indica como "substituido" .
El término "arilo" se refiere a grupos hidrocarburo cíclicos, aromáticos, que tienen 1 hasta 5 anillos aromáticos, especialmente grupos monocíclicos o bicíclicos tales como fenilo, bifenilo o naftilo. Donde contienen dos o más anillos aromáticos (bicíclico, etc.), los anillos aromáticos del grupo arilo pueden enlazarse en un punto sencillo (por ejemplo, bifenilo) , o fusionarse (por ejemplo, naftilo, fenantrenilo y similares) . "Arilo substituido" se refiere a un grupo arilo substituido por uno o más substituyentes, preferiblemente 1, 2, 3, 4 ó 5 substituyentes, en cualquier punto de enlace. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, nitro, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, ciano, alquil -S(0)m- (m=0, 1 6 2) , alquilo o alquilo substituido, así como aquellos grupos mencionados arriba como substituyentes alquilo ejemplares y como se mencionó previamente como substituyentes arilo preferidos en la definición para G. Los substituyentes ejemplares también incluyen substituyentes cíclicos fusionados, tales como grupos heterociclo o cicloalquenilo, o heterociclo substituido o cicloalquenilo, (por ejemplo, formando por ello un grupo fluoroenilo, tetrahidronaftalenilo, o dihidroindenilo) . "Carbamoilo" se refiere al grupo -CONH- que está enlazado en un extremo al resto de la molécula y en el otro a hidrógeno o una porción orgánica (tal como alquilo, alquilo substituido, arilo, arilo substituido, heterociclo, alquilcarbonilo, hidroxilo y nitrógeno substituido) . "Carbamato" se refiere al grupo -O-CO-NH- que está enlazado en un extremo al resto de la molécula y en el otro a hidrógeno o una porción orgánica (tal como aquellas enlistadas arriba) . "Urea" se refiere al grupo -NH-CO-NH- que está enlazado en un extremo al resto de la molécula y en el otro a hidrógeno o una porción orgánica (tal como aquellas enlistadas arriba) . "Amidinilo" se refiere al grupo C(=NH) (NH2). "Carbamoilo substituido", "carbamato substituido", "urea substituida" y "amidinilo substituido" se refiere a grupos carbamoilo, carbamato, urea o amidinilo como se describe arriba en el cual uno o más de los grupos hidrógeno son reemplazados por una porción orgánica (tal como aquellas enlistadas arriba) . Los términos "heterociclo", "heterocíclico" y "heterociclo" se refieren a grupos cíclicos completamente saturados, o parcialmente o completamente insaturados, incluyendo aromáticos (esto es, "heteroarilo") (por ejemplo, sistemas de anillo monocíclico de 3 hasta 7 miembros, bicíclico de 7 hasta 11 miembros, o tricíclico de 10 hasta 16 miembros) que tienen al menos un heteroátomo en al menos un anillo que contiene un átomo de carbono. Cada anillo del grupo heterocíclico que contiene un heteroátomo, puede tener 1, 2, 3, ó 4 heteroátomos seleccionados de átomos de nitrógeno, átomos de oxígeno y/o átomos de azufre, donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden opcionalmente oxidarse y el heteroátomo de nitrógeno puede opcionalmente cuaternizarse . (El término "heteroarilio" se refiere a un grupo heteroarilo que porta un átomo de nitrógeno cuaternario y de esta manera una carga positiva) . El grupo heterocíclico puede enlazarse al resto de la molécula en cualquier heteroátomo o átomo de carbono del anillo o del sistema de anillo. Se entenderá que, donde W o W son cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, que Al y A2 pueden enlazarse separadamente a diferentes (tales como adyacentes) átomos en el anillo en tales grupos. Los grupos monocíclicos heterocíclicos ejemplares incluyen óxido de etileno, azetidinilo, pirrolidinilo, pirrolilo, pirazolilo, oxetanilo, pirazolinilo, imidazolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolinilo , isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, tiazolidinilo , isotiazolilo , isotiazolidinilo, furilo, tetrahidrofurilo, tienilo, oxadiazolilo, piperidinilo, piperazinilo , 2 -oxopiperazinilo, 2 -oxopiperidinilo , 2 -oxopirrolodinilo, 2 -oxoazepinilo , azepinilo, hexahidrodiazepinilo, 4-piperidonilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, triazinilo, triazolilo, tetrazolilo, tetrahidropiranilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, sulfóxido de tiamorfolinilo, tiamorfolinil sulfona, 1 , 3 -dioxolano y tetrahidro- 1 , 1 -dioxotienilo, y similares. Los grupos bicíclicos heterocíclicos ejemplares incluyen indolilo, isoindolilo, benzotiazolilo, benzodioxolilo, benzoxazolilo, benzoxadiazolilo , benzotienilo, quinuclidinilo , quinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, isoquinolinilo, bencimidazolilo, benzopiranilo, indolizinilo, benzofurilo, benzofurazanilo, cromonilo, cumarinilo, benzopiranilo, cinolinilo, quinoxalinilo , indazolilo, pirrolopiridilo, furopiridinilo (tales como furo [2 , 3 -c] piridinilo, furo [3 , 2 -b] piridinilo] o furo [2 , 3 -b] piridinilo) , dihidrobenzodioxinilo , dihidrodioxidobenzotiofenilo, dihidroisoindolilp, dihidroindolilo, dihidroquinolinilo, dihidroquinazolinilo (tales como 3 , 4 -dihidro-4 -oxo-quinazolinilo) , triazinilazepinilo, tetrahidroquinolinilo y similares. Los grupos tricíclicos heterocíclicos ejemplares incluyen carbazolilo, bencidolilo, fenantrolinilo, dibenzofuranilo, acridinilo, fenantridinilo, xantenilo y similares. "Heterociclo substituido", "heterocíclico substituido" y "heterociclo substituido" (tal como "heteroarilo substituido") se refiere a grupos heterociclo, heterocíclico o heterociclo substituidos con uno o más substituyentes, preferiblemente 1 hasta 4 substituyentes, en cualquier punto de enlace disponible. Los substituyentes ejemplares incluyen, pero no se limitan a, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, nitro, oxo (esto es, = O), ciano, alquilo-S (O) m- (m = 0, 1 ó 2), alquilo o alquilo substituido, así como aquellos grupos mencionados arriba como substituyentes alquilo ejemplares, y como se mencionó previamente como substituyentes heterociclo preferidos en la definición para G. El término "nitrógeno cuaternario" se refiere a un átomo de nitrógeno cargado positivamente tetravalente que incluye, por ejemplo, el nitrógeno cargado positivamente en un grupo tetraalquilamonio (por ejemplo, tetrametilamonio, N-metilpiridinio) , el nitrógeno positivamente cargado en especies de amonio protonadas (por ejemplo, trimetil-hidroamonio, N-hidropiridinio) , el nitrógeno positivamente cargado en N-óxidos de amina (por ejemplo, N-metil -morfolin-N-óxido, piridin-N-óxido) , y el nitrógeno positivamente cargado en un grupo N-amino-amonio (por ejemplo, N-aminopiridinio) . Los términos "halógeno" o "halo" se refieren a cloro, bromo, flúor o yodo. Los términos "hidroxilamina" e "hidroxilamida" se refieren a los grupos OH- H- y OH-NH-CO-, respectivamente. Cuando un grupo funcional se llama "protegido" , esto significa que el grupo está modificado en forma para mitigar, especialmente evitar, reacciones laterales indeseadas en el sitio protegido. Los grupos protectores apropiados para los métodos y los compuestos descritos en la presente incluyen, sin limitación, aquellos descritos en libros de texto estándar, tales como Greene T. . et al., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, N.Y. (1991) .
Cuando un término tal como " (C R) n" se usa, significa una cadena alquilo opcionalmente substituida que existe entre los dos fragmentos a los cuales está enlazada, la longitud de cuya cadena se define por el rango descrito para el término n. Un ejemplo de esto es n=0-3, que implica desde cero hasta tres unidades (CRR) que existen entre los dos fragmentos, que se enlazan a las unidades primaria y terminal (CRR) . En la situación donde el término n se coloca hasta cero (n = 0) entonces existe un enlace entre los dos fragmentos enlazados a (CRR) . Salvo que se establezca lo contrario, cualquier heteroátomo con valencias insatisfactorias se asume que tiene átomos de hidrógeno suficientes para satisfacer las valencias . Los grupos divalentes, tales como aquellos en la definición de W (por ejemplo, NR9-CR7R7'), pueden enlazarse en cualquier dirección al resto de la molécula (por ejemplo, -A1-NR9-CR7R7' -A2 ó -Ai-CR7R7'-N 9-A2- para el grupo arriba mencionado dentro de la definición de W) . Anión carboxilato se refiere a un grupo negativamente cargado -COO" . Los compuestos de la fórmula I forman sales que también están dentro del alcance de esta invención. La referencia a un compuesto de la fórmula I en la presente se entenderá que incluye la referencia a sales, salvo que se indique lo contrario. El término "sal (es)", como se emplea en la presente, significa sales ácidas o básicas formadas con ácidos y bases orgánicas e inorgánicas. Además, cuando un compuesto de la fórmula I contiene tanto una porción básica, tal como, pero no limitándose a piridina o imidazol, y una porción acida tal como, pero no se limita a, ácido carboxílico, pueden formarse zwitteriones ("sales inertes") y se incluyen dentro del término "sal (es) " como se usa en la presente. Se prefieren sales farmacéuticamente aceptables (esto es, no tóxicas, fisiológicamente aceptables), no obstante que otras sales también son útiles, por ejemplo en etapas de aislado o purificación que puede emplearse durante la preparación. Las sales de los compuestos de la fórmula I pueden formarse, por ejemplo, haciendo reaccionar el compuesto I con una cantidad de ácido o base, tal como una cantidad equivalente, en un medio tal como uno en el cual la sal se precipita o en un medio acuoso seguido por liofilización . Los compuestos de la formula I que contienen una porción básica, tal como, pero no se limita a amina o un anillo piridina o imidazol, pueden formar sales con una variedad de ácidos orgánicos e inorgánicos. Las sales de adición ácidas ejemplares incluye acetatos (tales como aquellos formados con ácido acético o ácido trihaloacético, por ejemplo, ácido trifluoroacético) , adipatos, alginatos, ascorbatos, aspartatos, benzoatos, bencenesulfonatos , bisulfatos, boratos, butiratos, citratos, canforatos, canforsulfonatos , ciclopentanpropionatos , digluconatos , dodecilsulfatos , etansulfonatos , fumaratos, glucoheptanoatos , glicerofosfatos , hemisulfatos, heptanoatos, hexanoatos, clorohidratos , bromohidratos , yodohidratos , hidroxietansulfonatos (por ejemplo, 2 -hidroxietansulfonatos) , lactatos, maleatos, metansulfonatos , naftalensulfonatos (por ejemplo, 2-naftalensulfonatos) , nicotinatos, nitratos, oxalatos, pectinatos, persulfatos, fenilpropionatos (por ejemplo, 3-fenilpropionatos) , fosfatos, picratos, pivalatos, propionatos, salicilatos, succinatos, sulfatos (tales como aquellos formados con ácido sulfúrico) , sulfonatos (tales como aquellos mencionados en la presente), tartratos, tiocianatos, toluensulfonatos tales como tosilatos, undecanoatos , y similares. Los compuestos de la fórmula I que contienen una porción ácida, tales como, pero no limitándose a, ácido carboxílico, pueden formar sales con una variedad de bases orgánicas e inorgánicas. Las sales básicas ejemplares incluyen sales de amonio, sales de metal alcalino tales como sales de sodio, litio y potasio, sales de metales alcalinotérreos tales como sales de calcio y magnesio, sales con bases orgánicas (por ejemplo, aminas orgánicas) tales como benzatinas, diciclohexilaminas , hidrabaminas (formadas con N,N-bis (dehidroabietil) etilendiamina) , N-metil -D-glucaminas , N-metil -D-glicamidas , t-butil aminas, y sales con aminoácidos tales como arginina, lisina y similares. Los grupos que contienen nitrógeno básicos pueden cuaternizarse con agentes tales como haluros de alquilo inferior (por ejemplo cloruros, bromuros y yoduros de metilo, etilo, propilo, y butilo) , sulfatos dialquilo (por ejemplo sulfatos de dimetilo, dietilo, dibutilo, y diamilo) , haluros de cadena larga (por ejemplo cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, mirestilo y estearilo) , haluros de aralquilo (por ejemplo bromuros de bencilo y fenetilo) , y otros. Los profármacos y solvatos de los compuestos de la invención también se contemplan en la presente. El término "profármaco" como se emplea en la presente, significa un compuesto que, durante la administración a un sujeto, experimenta la conversión química por procesos metabolicos o químicos para producir un compuesto de la fórmula I, o una sal y/o solvato del mismo. Los solvatos de los compuestos de la fórmula I incluyen, por ejemplo, hidratos. Los compuestos de la fórmula I y sales de los mismos, pueden existir en su forma tautomérica (por ejemplo, como una amida o éter imino) . Todas la formas tautoméricas están contempladas en la presente como parte de la presente invención. Todos los estereoisómeros de los presentes compuestos (por ejemplo, aquellos que pueden existir debido a los carbonos asimétricos en varios substituyentes) , incluyendo formas enantioméricas y formas diaestereoméricas , están contemplados dentro del alcance de esta invención. LQS estereoisómeros individuales de los compuestos de la invención pueden, por ejemplo, estar substancialmente libres de otros isómeros (por ejemplo, como un isómero óptico puro o substancialmente puro que tiene una actividad específica) , o pueden mezclarse, por ejemplo, como racematos o con todos los otros, u otros estereoisómeros seleccionados. Los centros quirales de la presente invención pueden tener la configuración S o R como se define por las recomendaciones IUPAC 1974. Las formas racémicas pueden resolverse por los métodos físicos, tales como, por ejemplo, cristalización fraccional, separación o cristalización de derivados diaestereoméricos o separación por cromatografía de columna quiral. Los isómeros ópticos individuales pueden obtenerse de los racematos por cualquier método apropiado, que incluyen sin limitación, métodos convencionales, tales como, por ejemplo, formación de sal con un ácido ópticamente activo seguido por la cristalización.
Todos los isómeros configuracionales de los compuestos de la presente invención están contemplados, ya sea en mezcla o en forma pura o substancialmente pura. La definición de los compuestos de la presente invención abarca isómeros de alqueno tanto cis (Z) como trans (E) , así como isómeros cis y trans de hidrocarburo cíclico o anillos heterociclos . En ciertos casos, por ejemplo, la conformación exo o endo puede preferirse para el sistema de anillo fusionado enlazado a G-L en la fórmula I. Por ejemplo, para antagonistas del receptor andrógeno (o moduladores del receptor andrógeno selectivo) , donde Y es O ó NR7, la configuración exo puede preferirse, aunque para la mayoría de las otras definiciones de Y, la configuración endo puede preferirse. Como puede apreciarse, la configuración preferida puede estar en función del compuesto particular y su actividad preferida. La separación de los isómeros configuracionales puede realizarse por cualquier método apropiado, tal como cromatografía de columna . A través de las especificaciones, los grupos y substituyentes de los mismos pueden elegirse para proporcionar porciones y compuestos estables. Las modalidades indicadas en la presente como ejemplares o preferidas, se pretende que sean ilustrativas y no limitantes .
Métodos de Preparación . Los compuestos de la presente invención pueden prepararse por métodos tales como aquellos ilustrados en los siguientes Esquemas de Reacción I hasta XI. Los solventes, temperaturas, presiones, y otras condiciones de reacción pueden seleccionarse fácilmente por alguien de experiencia ordinaria en la técnica. Los materiales de partida están comercialmente disponibles o se preparan fácilmente por alguien de experiencia ordinaria en la técnica. Pueden emplearse técnicas de combinación en la preparación de los compuestos, por ejemplo, donde los grupos poseen intermediarios apropiados para estas técnicas. Ver lo siguiente que describe otros métodos que pueden emplearse en la preparación de los compuestos de la presente invención: Li, et al., Eur. J. Org. Chem. 9, 1841-1850 (1998); Li, Y-Q, Synlett. 5,461-464 (1996); Thiemann, et al., Bull. Chem. Soc . Jpn. 67, 1886-1893 (1994); Tsuge et al., Heterocycles 14, 423-428 (1980); Ward et al., Can J. Chem. 75,681-693 (1997); ard et al., Can J. Chem. 69, 1487-1497 (1991); Ward et al., Tetrahedron Lett. 31, 845-848 (1990); Fleming et al., J. Org. Chem. 44, 2280-2282 (1979); Jankowski et al., J. Organomet . Chem. 595, 109-113 (2000); Keglevich et al., J. Organomet. Chem. 579, 182-189 (1999); Keglevich et al., J. Organomet. Chem. 570, 49-539 (1998); Jankowski et al., Hetroat . Chem. 7, 369-374 (1996); Jankowski et al., J. Am. Chem. Soc. 113, 7011-7017 (1991); Quin et al., Tetrahedron Lett. 31, 6473- 6476 (1990); Quin et al., J. Org . Chem. 59, 120-129 (1994); Quin et al., J. Org. Chem. 58, 6212-6216 (1993); Quin et al., Phosphorous, Sulfur Silicon Relat. Elem. 63, 349-362 (1991); Quin et al., Hetroat . Chem. 2, 359-367 (1991); Hussong et al., Phosphorus, Sulfur. 25,201-212 (1985); Quin et al., J. Org. Chem. 51, 3341-3347 (1986); Myers et al., J. Am. Chem. Soc. 114, 5684-5692 (1992); Myers et al., J. Am. Chem. Soc . 113, 6682-6683 (1991); Shen et al., Patente E.U.A. No. 5817679; Cordone et al., J. Am. Chem. Soc. 111, 5969-5970 (1989) ; Jung et al., J. Chem. Soc. Commun. 630-632 (1984); Lay et al., J. Am. Chem. Soc. 104, 7658-7659 (1982); González et al., J. Am. Chem. Soc. 117, 3405-3421 (1995); Kreher et al., Chem Ber. 125, 183-189 (1992); Simig et al., Synlett. 7,425-426 (1990); Sha et al., J. Org. Chem. 55, 2446-2450 (1990) ; Drew et al., J. Chem. Soc, Perkin Trans . 1 7, 1277-1284 (1985); Kreher et al., Anorg. Chem., Org Chem. 31B, 599-604 (1976); Avalos et al., Tetrahedron Lett. 39,9301-9304 (1998); Gousse et al., Macromolecules 31, 314-321 (1998); Mikhailyuchenko et al., Khim. Geterotsikl . Soedin. 6, 751-758 (1993); Lubowitz et al., patente E.U.A No. 4476184; Padwa et al., J. Org. Chem. 61, 3706-3714 (1996); Schlessinger et al., J. Org. Chem. 59, 3246-3247 (1994); Buchmeiser et al., publicación WO No. 9827423; Tanabe et al., Documento de Patente Japonesa JP 07144477; Mochizucki et al., Documento de Patente Japonesa JP 63170383; Hosoda et al., Documento de Patente Japonesa JP 62053963; Onaka et al., Documento de Patente Japonesa JP 62053964; Kato et al., Documento de Patente Japonesa JP 53086035; Kato et al., Documento de Patente Japonesa JP 51088631; Tottori et al., Documento de Patente Japonesa JP 49124225; Augustin et al., Documento de Patente Alemana DD101271; Title et al., documento de Patente Francesa FR 2031538; Gousse et al., Polym. Int. 48, 723-731 (1999); Padwa et al., J. Org. Chem. 62, 4088-4096 (1997); Theurillat-Moritz et al., Tetrahedron: Asymmetry 7, 3163-3168 (1996); athews et al., J. Carbohydr . Chem. 14, 287-97 (1995); Srivastava et al., Nati. Acad. Sci . Lett . (India) 15, 41-44 (1992); Mayorga et al., Rev. Cubana Quim. 4, 1-6 (1988); Kondoli et al., J. Chem. Res., Synop . 3,76 (1987); Primelles et al., Cent. Azúcar 7-14 (1985); Solov' eva et al., Khim. Geterotsikl . Soedin. 5, 613-15 (1984); Liu et al., Yaoxue Xuebao 18, 752-759 (1983); Joshi et al., Indian J. Chem, Sect.B. 22B, 131-135(1983); Amos et al., publicación WO No. 9829495; Odagiri et al., Patente E.U.A. No. 4670536; Gallucci et al., documento de Patente Europea EP 355435; Redmore, D. Patente E.U.A. No. 3821232; Nakano et al., Heterocycles 35,37-40 (1993); Tomisawa et al., Chem. Pharm. Bull. 36, 1692-1697 (1988); Krow et al., J. Heterocycl . Chem. 22, 131-135 (1985); Krow et al., J. Org. Chem. 47, 1989-1993 (1982); Liu et al., Yaoxue Xuebao 18, 752-759 (1983); Nishikawa et al., Yaoxue Xuebao JP 01061457; y/o Rice et al., J. Med. Chem. 11, 183-185 (1968). Todos los documentos citados en la presente especificación, tales como aquellos citados en estos "Métodos de Preparación" asi como otras secciones en la presente, se incorporan en la presente para referencia en su totalidad. _La referencia a cualquier documento en la presente no deberá constituirse como una admisión de que tal documento es el arte previo Esquema de Reacción I II III IV Como se ilustra en Esquema de Reacción I, un dieno de la fórmula II puede reaccionar con un dienófilo de la fórmula III, bajo condiciones fácilmente seleccionadas por alguien experto en la técnica (tal como por la adición de calor ("?") ) , para obtener un compuesto de la fórmula IV, el cual es un compuesto de la fórmula I. Un dieno intermediario de la fórmula II puede obtenerse de proveedores comerciales o hacerse fácilmente por alguien experto en la técnica, por ejemplo, de conformidad con los siguientes documentos y referencias de la literatura encontrados en la presente: Hofman et al., J. Agrie. Food Chem. 45, 898-906 (1997); Baciocchi et al., J. Chem. Soc . , Perkin Trans . 2 8, 821-824 (1975); Wu et al., J. Heterocycles 38, 1507-1518 (1994); Yin et al., Tetrahedron Lett. 38, 5953-5954 (1997); Mic'ovic' et al., Tetrahedron 20, 2279-2287 (1964); Gorbunova et al., J. Org. Chem.. 35, 1557-1566 (1999); Rassu et al., Chem. Soc. Rev. 29, 109-118 (2000); Kaberdin et al., Russ. Chem. Rev,. , 68,765-779 (1999); Barluenga et al., Aldrichimica Acta 32,4-15 (1999); Bogdanowicz-Sz ed et al., Pol. Wiad. Chem. 52, 821-842 (1998); Casiraghi et al., Adv. Asymmetric Synth. 3, 113-189 (1998); y/o Baeckvall et al; Chem. Rev. 98, 2291-2312 (1998) . Un dienófilo intermediario de la fórmula III puede obtenerse de proveedores comerciales o hacerse fácilmente por alguien experto en la técnica, por ejemplo, de conformidad con las siguientes referencias de la literatura y las referencias encontradas en la presente: Deshpande et al., Heterocycles 51, 2159-2162 (1999); Seijas et al., J. Chem. Res., Synop. 7, 420-421 (1999); Langer et al., Eur. J. Org. Chem. 7, 1467-1470 (1998); Kita et al., Documento de Patente Japonesa JP 09194458; López-Alvarado et al., J. Org. Chem. 61, 5865-5870 (1996); Condón et al., Patente E.U.A. No. 5523277; Sasakihara et al., Documento de Patente Japonesa JP 04290868; Igarashi et al., Documento de Patente Japonesa JP 04149173; Aoyama et al., Documento de Patente Japonesa JP 04134063; Aoyama et al., Documento de Patente Japonesa JP 04134062; Pastor et al., J. Org. Chem. 53, 5776-5779 (1988); y/o Takahashi et al., Chem. Lett. 6, 1229-1232 (1987).
Esquema de Reacción II v VI IV Como se ilustra en el Esquema de Reacción II, los compuestos de la fórmula I puede obtenerse por la reacción de una amina primaria de la fórmula V con un intermediario tipo anhidro substituido de la fórmula VI, por ejemplo, en un solvente tal como ácido acético con o sin calor, para producir un compuesto de la fórmula IV, el cual es un compuesto de la fórmula I. Las aminas primarias de la fórmula V pueden obtenerse de proveedores comerciales o sintetizarse fácilmente por alguien experto en la técnica. Los agentes tipo anhídridos de la fórmula VI pueden obtenerse de proveedores comerciales o sintetizarse fácilmente por alguien experto en la técnica. Los documentos listados a continuación describen enfoques ejemplares para la síntesis de intermediarios de la fórmula VI así como enfoques sintéticos que pueden aplicarse a la síntesis de los compuestos de la fórmula IV (todos incorporados en la presente para referencia en su totalidad): Kohler, E. P.; Tishler, M. ; Potter, H. ; Thompson, H. T. J. Am. Chem. Soc . 1939, 1057-1061; Yur'ev, Y. K. ; Zefirov, N. S. J. Gen. Chem. U.S.S.R. (Engl. Transí.) 1961, 31, 772-5; Norman G. Gaylod Patente E.U.A. No. 3,995,099; Schueler, P. E . ; Rhodes, Y. E. J. Org. Chem. 1974, 39, 2063-9; Ishitobi, H. ; Tañida, H; Ts j i , T. Bull. Chem. Soc. Japan 1971, 44, 2993-3000; Stájer, G.; Virág, M . ; Szabó. A. E . ; Bernáth, G. ; Sohár, P.; Sillanpáá, R. Acta. Chem. Scand. 1996, 50, 922-30; Hart, H.; Ghosh, T. Tetrahedron Lett. 1988,29,881-884; Kato, M . ; Yamamoto, S.; Yoshihara, T.; Furuichi, K; Miwa . T. Chem. Lett. 1987, 1823-1826; Kottwitz, J.; Vorbrüggen, H. Synthesis 1995,636-637; Creary, X. J. Org. Chem. 1975,40, 3326-3331; Alder, K. ; Ache, H.-J.; Flock, F. H. Chem. Ber . 1960,93. 1888-1895; Toder. B. H.; Branca, S. J.; Dieter, R. K. ; Smith, A. B. III Synth. Commun. 1975, 5, 435-439; Sprague, P. W.; Heikes, J. E.; Gougoutas, J. Z.; Malley, . F.; Harris, D. N. ; y/o Greenberg, R. J. Med. Chem. 1985,28, 1580-1590. Los enfoques arriba mencionados pueden aplicarse en una manera en combinación, por ejemplo, al utilizar un bloque de reacción de pozos múltiples tal como el descrito en Waldemar Ruediger, en-Jeng Li , John W. , Alien Jr . , y Harold N. Weller III, Patente E.U.A. No. 5,961,925, Apparatus for Synthesis of Múltiple Oganic Compounds With Pinch Valve Block (incorporado en la presente para referencia en su totalidad) . Al utilizar el bloque de reacción de pozos múltiples antes mencionado, se pueden, por ejemplo, realizar múltiplos de 96 reacciones al mismo tiempo. El solvente puede removerse después de los tubos de reacción sin removerlo del bloque de reacción, y los productos crudos pueden precipitarse con el uso de una base tal como bicarbonato de sodio. Los precipitados pueden colectarse por filtración del bloque de reacción y después los productos deseados pueden transferirse directamente a las placas de 96 pozos para separación. De esta manera, puede sintetizarse una configuración grande de compuesto de la fórmula I, y las pruebas conducirse como se desea por un enfoque automatizado.
Esquema de Reacción El Esquema de Reacción III describe un método para preparar un compuesto intermediario de la fórmula VI el cual puede usarse para sintetizar un compuesto de la fórmula I, como se describe en el Esquema de Reacción II. Como se describe en el Esquema de Reacción III, un dieno de la fórmula II puede hacerse reaccionar con un dienófilo de la fórmula VII para producir el intermediario de la fórmula VI. Los métodos aplicados para obtener tal transformación son análogos a aquellos descritos en el Esquema de Reacción I.
Esquema de Reacción El Esquema de Reacción IV describe un método para preparar un compuesto intermediario de la fórmula VI el cual puede usarse para sintetizar un compuesto de la fórmula I, como se describe en el Esquema de Reacción II. Como se muestra en el Esquema de Reacción IV, un dieno de la fórmula II puede hacerse reaccionar con un dienófilo de la fórmula VIII para producir el intermediario de la fórmula IX. El intermediario de la fórmula IX puede deshidratarse hasta un intermediario tipo anhídrido de la fórmula VI. La deshidratación del intermediario bis-ácido de la fórmula IX puede realizarse por una variedad de métodos, tal como aquellos conocidos por alguien experto en la técnica y descritos en los siguientes documentos y las referencias abarcadas en la presente: Sprague et al., J. Med. Chem. 28, 1580-1590 (1985); y/o Retemi et al., J. Org. Chem. 61, 6296-6301 (1996) . Los Esquemas de Reacción I a IV describen métodos generales para la síntesis de los compuestos de la fórmula I, e intermediarios de los mismos, en cuya substitución alrededor del sistema de anillo se incorpora directamente, por ejemplo, al nivel del dieno intermediario, dienófilo, intermediario tipo anhídrido y grupos amina. Además de estos enfoques, la substitución adicional puede incorporarse en un compuesto ya preparado de la fórmula I por una variedad de enfoques para preparar otros compuestos de la fórmula I. Los métodos ejemplares para la substitución adicional se describen en los Esquemas de Reacción V a XI.
Esquema de Reacción V El Esquema de Reacción V describe uno de tales enfoques para incorporar una substitución adicional en una estructura de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción V, un compuesto de la fórmula X, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Ai y A2 son CR7, W es NH—CHR7 e Y es CHR7—CHR7, puede funcionalizarse en la amina libre del grupo W por la reacción con cualesquiera de una variedad de agentes electrofilicos tales como haluros ácidos o haluro de alquilo en presencia de una base, por ejemplo, por métodos conocidos por alguien experto en la técnica. En el Esquema de Reacción V, X es un grupo de partida, y un compuesto de la fórmula XI es un compuesto de la fórmula I donde Ai y 2 son CR7, es NR7—CHR7 e Y es CHR7—CHR7.
Esquema de Reacción VI El Esquema de Reacción VI describe un enfoque adicional para la substitución incorporada adicional en el compuesto de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción VI, un compuesto de la fórmula XII, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Ai y A2 son CR7, W es S—CHR7 e Y es CHR7—CHR7, puede oxidarse parcialmente con un agente oxidante tal como mCPBA u otros agentes tales como aquellos conocidos por alguien experto en la técnica, para dar el análogo sulfóxido de la fórmula XIII, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Ai y A2 son CR7, W es SO—CHR7 e Y es CHR7—CHR7. El tratamiento adicional de un compuesto de la fórmula XIII con un agente oxidante tal como mCPBA u otros agentes tales como aquellos conocidos por alguien experto en la técnica, puede producir el análogo de sulfona de la fórmula XIV, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Ai y A2 son CR7, W es S02—CHR7 e Y es CHR7—CHR7. Alternativamente, un compuesto de la fórmula XII puede convertirse directamente a un compuesto de la fórmula XIV por el tratamiento prolongado con un agente oxidante, tal como mCPBA, o con otros agentes tales como aquellos conocidos por alguien experto en la técnica.
Esquema de Reacción VII IVc El Esquema de Reacción VII describe otro enfoque para incorporar una substitución adicional en un compuesto de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción VII, un dieno de la fórmula lía puede hacerse reaccionar con un dienófilo de la fórmula III, como se describe en el Esquema de Reacción I, para producir un compuesto de la fórmula IVa, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es O, A2 es CR7 y A1 es C— (CH2)q-T. El compuesto de la fórmula IVa puede hacerse reaccionar con un reactivo de la fórmula R12—?" para obtener un compuesto de la fórmula IVb o IVc los cuales son compuestos de la fórmula I donde Y es O, A2 es CR7 y i es C— (CH2)q—?"—R12 o C-(CH2)q-T-R12, respectivamente. El reactivo R12—T' puede obtenerse de proveedores comerciales o puede prepararse fácilmente por alguien experto en la técnica. En el Esquema de Reacción anterior, R12 tiene la misma definición como R7 definido previamente, q es cero o un entero desde 0-8, y T es como se define previamente como (1) un centro nucleofílico tal como, pero no limitándose a, un grupo que contiene nitrógeno, oxígeno o azufre, capaz de experimentar una reacción de substitución nucleofílica con el grupo de partida T" o (2) un grupo de partida capaz de experimentar una reacción de substitución nucleofílica con el grupo nucleofílico ?" (tal como, pero no limitándose a, un grupo nucleofílico que contiene nitrógeno, oxígeno o azufre) . T' tiene la misma definición como T. En el presente caso, por ejemplo, una reacción de substitución nucleofílica ocurre cuando el reactivo de ataque (el nucleófilo) enlaza un electrón par al substrato, usando este par para formar el enlace nuevo, y el grupo de partida (el nucleófugo) se retira con el par electrón, quedando como un intermediario aniónico. Para una discusión detallada del mecanismo de substituciones nucleofilicas alifáticas y una revisión de reacciones de substitución nucleofilicas alifáticas especificas, ver Advanced Organic Chemestry, Reactions, Mechanisms, and Structure, 4th Addition. Jerry March (Ed.), John Wiley & Sons, New York (1992) 293-500 y las referencias en la presente. Los compuestos de las fórmulas IVa, IVb, o IVc pueden, por supuesto, emplearse en los métodos descritos en la presente (especialmente, en el tratamiento de condiciones asociadas con el receptor de hormona nuclear) sin experimentar una reacción adicional de T o ?" .
Esquema de Reacción VIII IVc Un enfoque alternativo a los compuestos de la fórmula IVa, IVb y IVc se ilustra en el Esquema de Reacción VIII.
Para este enfoque, las técnicas tales como aquellas descritas en los Esquemas de Reacción II, III y IV pueden aplicarse para la preparación de un intermediario de la fórmula Vía, donde T y q son como se define en el Esquema de Reacción VII. El intermediario de la fórmula Vía puede hacerse reaccionar con una amina substituida de la fórmula V, como se describe en el Esquema de Reacción II, para producir el compuesto de la fórmula IVa, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es 0, A2 es CR7 y A: es C-(CH2)q-T. El compuesto de la fórmula IVa puede tratarse en la manera descrita en el Esquema VII para obtener compuestos de la fórmula IVb o IVc los cuales son compuestos de la fórmula I donde Y es 0, A2 es CR7 y A1 es C— (CH2) q—T'—R12 o C— (CH2 ) q—T—R12 , respectivamente . Esquema de Reacción IX El Esquema de Reacción IX describe otro enfoque para incorporar una substitución adicional en un compuesto de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción IX (donde X es un grupo de partida) , un dieno de la fórmula Ilb puede hacerse reaccionar con un dienófilo de la fórmula III, como se describe en el Esquema de Reacción I, para producir un compuesto de la fórmula IVe, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es NH, y Ai y A2 son CR7. El compuesto de la fórmula IVe puede funcionalizarse en la amina libre al hacerlo reaccionar con una variedad de agentes electrofilicos tales como haluros ácidos o haluros de alquilo en presencia de una base, por ejemplo por métodos conocidos por alguien experto en la técnica y descritos en el Esquema de Reacción V, para producir un compuesto de la fórmula IVf, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es NR7 y Ai y A2 son CR7.
Esquema de Reacción X Un enfoque alternativo a los compuestos de la fórmula IVe y IVf se ilustra en el Esquema de Reacción X. Para este enfoque, las técnicas como se describen en los Esquemas de Reacción II, III y IV pueden aplicarse para la preparación de un intermediario de la fórmula VIb. El intermediario de la fórmula VIb puede hacerse reaccionar con una amina substituida de la fórmula V, como se describe en el Esquema de Reacción II, para producir un compuesto de la fórmula IVe, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es NH, y Ax y A2 son CR7. El último intermediario puede tratarse en jLa manera descrita en el Esquema de Reacción V para obtener un compuesto de la fórmula IVf, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es NR7, y ?? y A2 son CR7.
Esquema de Reacción XI El Esquema de Reacción XI describe otro enfoque para incorporar una substitución adicional en un compuesto de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción XI, un dieno de la fórmula líe puede hacerse reaccionar con un dienófilo de la fórmula III, como se describe en el Esquema de Reacción I, para producir un compuesto de la fórmula IVg, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y es SO y Ai y A2 son CR . Un compuesto de la fórmula IVg puede tratarse con un agente oxidante tal como mCPBA, como se describe en el Esquema de Reacción VI, para producir un compuesto de la fórmula IVh, el cual es un compuesto de la fórmula I donde Y Esquema de Reacción XII El Esquema de Reacción XII describe otro enfoque para incorporar una substitución adicional en un compuesto de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción XII, un compuesto de la fórmula XV, el cual puede prepararse de conformidad con los Esquemas de Reacción anteriores, puede incubarse en presencia de una enzima o microorganismo apropiado lo que resulta en la formación de un análogo hidroxilado de la fórmula XVI. Tal proceso puede emplearse para producir la incorporación regioespecifica asi como enantioespecifica de un grupo hidroxilo en una molécula de la fórmula XV por un microorganismo especifico o por una serie de diferentes microorganismos. Tales microorganismos pueden, por ejemplo, ser bacterianos, de levadura o fúngales por naturaleza y pueden obtenerse de distribuidores tal como ATCC o identificados para su uso en este método tal como por los métodos conocidos por alguien experto en la técnica. El Compuesto XVI es un compuesto de la fórmula I donde Y es como se describe arriba y ñi y A¡ son preferiblemente CR7.
Esquema de Reacción XIII El Esquema de Reacción XIII describe otro enfoque para incorporar una substitución adicional en un compuesto de la fórmula I. Como se ilustra en el Esquema de Reacción XIII, un compuesto de la fórmula XVII, el cual puede prepararse de conformidad con los Esquemas anteriores, puede incubarse en presencia de una enzima o microorganismo apropiado lo que resulta en la formación de un análogo diol de la fórmula XVIII. Tal proceso puede emplearse para producir la transformación regioespecifica asi como enantioespecifica de un compuesto de la fórmula XVII a un diol 1-2 de la fórmula XVIII por un microorganismo especifico o por una serie de microorganismos diferentes. Tales microorganismos pueden, por ejemplo, ser bacterianos, de levadura o fúngales por naturaleza y pueden obtenerse de distribuidores tales como ATCC o identificarse para su uso en este método tales como por métodos conocidos por alguien experto en la técnica. El Compuesto XVIII es un compuesto de la fórmula I donde Y es como se describe arriba y Ax y A2 son preferiblemente CR7. La presente invención también proporciona los métodos de los Esquemas de Reacción XII y XIII. De esta manera, en una modalidad, la presente invención proporciona un método para la preparación de un compuesto de la siguiente fórmula XVI, o una sal del mismo: XVI donde los símbolos son como se define en la presente, que comprende las etapas de poner en contacto un compuesto de la siguiente fórmula XV, o una sal del mismo: donde los símbolos son como se define arriba; con un enzima o microorganismo capaz de catalizar la hidroxilación de tal compuesto XV para formar el compuesto XVI, y efectuar la hidroxilación.
En otra modalidad preferida, la presente invención proporciona un método para la preparación de un compuesto de la siguiente fórmula XVIII, o una sal del mismo: donde los símbolos son como se define en la presente, que comprende las etapas de poner en contacto un compuesto de la siguiente fórmula XVII, o una sal del mismo: XVII donde los símbolos son como se define arriba; con un enzima o microorganismo capaz de catalizar la abertura del anillo epóxido del compuesto XVII para formar el diol de tal compuesto XVIII, y efectuar la abertura del anillo y la formación de diol . Todas las estereoconfiguraciones de los centros quirales no específicos de los compuestos de la fórmula XV, XVI, XVII y XVIII se contemplan en los métodos de la presente invención, ya sea solos (esto es, substancialmente libres de otros isómeros) o en mezcla con otras formas estereoisoméricas . La conversión de un isómero selectivamente (por ejemplo, la hidroxilación del isómero exo preferencialmente para la hidroxilación del isómero endo) cuando se pone en contacto una mezcla isomérica es una modalidad preferida de la invención. La conversión a un isómero selectivamente (por ejemplo, hidroxilación en la cara exo del "isómero exo" preferencialmente a la cara endo del "isómero endo" o la abertura regioselectiva de un epóxido para formar solo uno de dos posibles regioisomeros de un diol trans) es una modalidad preferida de la invención. La hidroxilación de un intermediario aquiral para formar un isómero óptico sencillo del producto hidroxilado, también es una modalidad preferida de la invención. La resolución de una mezcla racémica de un intermediario por la hidroxilación selectiva, o la abertura del anillo epóxido y la formación de diol, para generar uno de dos isómeros ópticos posibles, también es una modalidad preferida de la invención. El término "resolución" como se usa en la presente, significa resolución parcial, así como, preferiblemente, completa. Los términos "proceso enzimático" o "método enzimático", como se usan en la presente, significan un proceso o método de la presente invención que emplea una enzima o microorganismo. El término "hidroxilación", como se usa en la presente, significa la adición de un grupo hidroxilo a un grupo metileno como se describe arriba. La hidroxilación puede realizarse, por ejemplo, por el contacto con un oxígeno molecular de conformidad con los métodos de la presente invención. La formación de diol puede realizarse, por ejemplo, por el contacto con agua de conformidad con los métodos de la presente invención. El uso de "una enzima o microorganismo" en los presentes métodos, incluye el uso de dos o más, así como una enzima o microorganismo sencillo. La enzima o microorganismo empleado en la presente invención puede ser cualquier enzima o microorganismo capaz de catalizar las conversiones enzimáticas descritas en la presente. Los materiales enzimáticos o microbianos, independientemente del origen o pureza, pueden emplearse en el estado libre o inmovilizarse en un soporte tal como por adsorción física o la operación de entrampar. Los microorganismos o enzimas apropiados para usarse en la presente invención pueden seleccionarse por separación por exclusión para la actividad deseada, por ejemplo, al poner en contacto un microorganismo o enzima candidato con un compuesto de partida XV o XVII o una sal del mismo, y notar la conversión al correspondiente compuesto XVI o XVIII o una sal del mismo. La enzima puede, por ejemplo, estar en forma de enzimas de animal o planta o mezclas de los mismos, células de microorganismos, células molidas, extractos de células, o de origen sintético.
Los microorganismos ejemplares incluyen aquellos dentro del género: Streptomyces o A ycolatopsis . Los microorganismos particularmente preferidos son aquellos dentro de la especie Streptomyces griseus, especialmente Streptomyces griseus ATCC 10137, y Amycolatopsis orientalis tales como ATCC 14930, ATCC 21425, ATCC 35165, ATCC 39444, ATCC 43333, ATCC 43490, ATCC 53550, ATCC 53630, y especialmente ATCC 43491. El término "ATCC" como se usa en la presente, se refiere al número de acceso del American Type Culture Collection, 10801 University Blvd. , Manassas Virginia 20110-2209, del depositario para el organismo referido. Se entenderá que los mutantes de estos organismos también se contemplan por la presente invención, para usarse en los métodos descritos en la presente, tales como aquellos modificados por el uso de medios químicos, físicos (por ejemplo, rayos X) o biológicos (por ejemplo, por técnicas de biología molecular) . Las enzimas preferidas incluyen aquellas derivadas de microorganismos, particularmente aquellos microorganismos descritos arriba. Las enzimas pueden aislarse, por ejemplo, por métodos de extracción y purificación tales como por métodos conocidos por aquellos de experiencia ordinaria en la técnica. Una enzima puede, por ejemplo, usarse en su estado libre o en forma inmovilizada. Una modalidad de la invención es que donde una enzima se adsorbe en un portador apropiado, or ejemplo, tierra diatomácea (Celite Hyflo Supercel porosa) , polipropileno microporoso (polvo de polipropileno Enka Accurel®) , o un adsorbente polimérico no iónico tal como Amberlite® XAD-2 (poliestireno) o XAD-7 (poliacrilato) de Rohm and Haas Co. Cuando se emplea para inmovilizar una enzima, el portador puede controlar el tamaño de partícula de la enzima y prevenir la agregación de las partículas de la enzima cuando se usan en un solvente orgánico. La inmovilización puede realizarse, por ejemplo, al precipitar una solución acuosa de la enzima con acetona fría en presencia de Celite Hyflo Supercel seguido por secado al vacío, o en el caso de un adsorbente polimérico no iónico, incubar las soluciones de enzima con un adsorbente en un agitador, remover el exceso de solución y secar las resinas adsorbentes de enzima bajo vacío. Aunque es deseable usar la menor cantidad posible de enzima, la cantidad de enzima requerida variará dependiendo de la actividad específica de la enzima usada. La hidroxilación como se describe arriba, puede ocurrir in vivo. Por ejemplo, la enzima del hígado puede hidroxilar, con relación al isómero endo, selectivamente el isómero exo del compuesto de la presente invención. Al conducir los métodos de la presente invención fuera del cuerpo, la hidroxilasa microsomal del hígado puede emplearse como la enzima para la catálisis.
Estos procesos también pueden llevarse a cabo con el uso de células microbianas que contienen una enzima que tiene la capacidad de catalizar las conversiones. Cuando se usa un microorganismo para realizar la conversión, estos procedimientos se llevan a cabo convenientemente al agregar las células y el material de partida al medio de reacción deseado . Donde se emplean microorganismos, las células pueden usarse en la forma de células húmedas intactas o células secas tales como liofilizadas , secadas por rocío o células secadas por calor, o en forma de material celular tratado tal como células rotas o extractos de células. Los extractos de células inmovilizados en polipropileno Celite® o Accurel® como se describe anteriormente, también pueden emplearse. El uso de organismos genéticamente modificados también se contempla. La células hospedadora puede ser cualquier célula, por ejemplo, Escherichia coli, modificada para contener un gen o genes para expresar una o más enzimas capaces de catalizar como se describe en la presente. Donde se emplean uno o más microorganismos, los métodos enzimáticos de la presente invención pueden llevarse a cabo posterior a la fermentación del microorganismo (dos etapas de fermentación y conversión) , o concurrentemente con esto, esto es, en el último caso, por fermentación y conversión in situ (fermentación y conversión de etapa sencilla) .
El crecimiento de los microorganismos puede realizarse por alguien de experiencia ordinaria en la técnica por el uso de un medio apropiado. El medio apropiado para el crecimiento de microorganismos incluye aquellos que proporcionan los nutrientes necesarios para el crecimiento de las células microbianas. Un medio típico para el crecimiento incluye necesariamente fuentes de carbono, fuentes de nitrógeno, y elementos (por ejemplo en cantidades en trazas) . También se pueden agregar inductores. El término "inductor", como se usa en la presente, incluye cualquier compuesto que aumenta la formación de la actividad enzimática deseada dentro de la célula microbiana. Las fuentes de carbono pueden incluir azúcares tales como maltosa, lactosa, glucosa, fructosa, glicerol, sobitol, sacarosa, almidón, manitol, propilen glicol, y similares; ácidos orgánicos tales como acetato de sodio, citrato de sodio, y similares; y alcoholes tales como etanol, propanol y similares . Las fuentes de nitrógeno pueden incluir N-Z amina A, licor primario de maíz, harina de fríjol de soya, extractos de carne, extractos de levadura, melazas, levadura de panadería, triptona, nutrisoya, peptona, levastamina, aminoácidos tales como glutamato de sodio y similares, nitrato de sodio, sulfato de amonio y similares.
Los elementos en trazas incluyen sales de magnesio, manganeso, calcio, cobalto, níquel, hierro, sodio y potasio. Los fosfatos también pueden agregarse en trazas o, preferiblemente, mayor que las cantidades trazas. El medio empleado puede incluir más de una fuente de carbono o nitrógeno u otro nutriente . El medio preferido para el crecimiento incluye el medio acuoso . La agitación y aireación de la mezcla de reacción afecta la cantidad de oxígeno disponible durante el proceso de conversión cuando se conduce, por ejemplo, en cultivos de matraz agitado o tanques fermentadores durante el crecimiento de microorganismos. La incubación del medio de reacción es preferiblemente a una temperatura entre alrededor de 4 y alrededor de 60 °C. El tiempo de reacción puede variar apropiadamente dependiendo de la cantidad de enzima usada y su actividad específica. Los tiempos de reacción pueden reducirse al incrementar la temperatura de reacción y/o incrementar la cantidad de enzima agregada a la solución de reacción. También se prefiere emplear un líquido acuoso como el medio de reacción, no obstante que también puede emplearse un líquido orgánico, o una mezcla de líquido orgánico/acuoso miscible o inmiscible (bifásico) . La cantidad de enzima o microorganismo empleado con relación al material de partida se selecciona para permitir una catálisis de las conversiones enzimáticas de la presente invención. Los solventes para la fase orgánica de un sistema solvente bifásico pueden ser cualquier solvente orgánico inmiscible en agua, tales como tolueno, ciclohexano, xileno, triclorotrifluoroetano y similares. La fase acuosa es convenientemente de agua, preferiblemente agua desionizada, o una solución amortiguadora acuosa apropiada, especialmente una solución amortiguadora de fosfato. El sistema solvente bifásico comprende preferiblemente entre alrededor de 10 hasta 90 por ciento por volumen de fase orgánica, y entre alrededor de 90 hasta 10 por ciento por volumen de fase acuosa, y más preferiblemente contiene o alrededor de 20 por ciento por volumen de fase orgánica y a, o alrededor de 80 por ciento por volumen de la fase acuosa. Una modalidad ejemplar de tal proceso inicia con la preparación de una solución acuosa de las enzimas o microbios a usarse. Por ejemplo, las enzimas preferidas o microbios pueden agregarse a una cantidad apropiada de un solvente acuoso, tal como solución amortiguadora de fosfato o similares. Esta mezcla se ajusta preferiblemente hasta, y se mantiene al pH deseado. Los compuestos XVI y XVIII producidos por los procesos de la presente invención, pueden aislarse y purificarse, por ejemplo, por métodos tales como extracción, destilación, cristalización, y cromatografía de columna.
Compuestos Preferidos. Un subgénero preferido de los compuestos de la presente invención incluye compuestos de la fórmula I o sales de los mismos en donde uno o más, preferiblemente todos, de los siguientes substituyentes son como se definen a continuación: G es un grupo arilo o heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) , donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones, preferiblemente con hidrógeno, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, halo, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo ' substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, CN, R1OC=0, R1C=0, RxHNC=0, R1R2NC=0, HOCR3R3' , nitro, R^CHz, R10, NH2 , NR4R5, SOZ RV, (R1) (R1') P=0, o (R1' ) (NHR1) P=0; Zi es 0, S, NH, O NR6 ; Z2 es O, S, NH, O NR6; ?? es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u O, S, S=0, S02, NH, OC=0, C=0, NR7, CR7R7' , R2P=0, R2P=S, R2OP=0, R2NHP=0, OP=OOR2, OP=ONHR2, OP=OR2 , OS02, NHNH, NHNR5, NRSNH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace ,-W es CR7CR7'—CR7R7', CR7R7'—C=0, NR9—CR7R7' , N=CRa , N=N, NR9— R9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9— R9' , o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR7, OP=00R2 , OP=ONHR2, OS02/ NHNH, NHNR6, NR6NH, o N=N; Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, ^00=0, R C=0, R5RsNC=0, HOCR7R7' , nitro, R^CHz, ???, N¾, O NR4R5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, R10C=0, R4C=0, R5R6NC=0, H0CR7R7' , nitro, R^CHz, R^-O, NH2, O NR4R5; L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NRS o NR5 (CR7R7 ) n, donde n = 0- 3; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, hidroxilamina, hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR1R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, 1^0=0, ????- ^?, o SOz ^R1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, o S02NR1R1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, 0R1, R1C=0, R1NHC=0, SOzR1, o S02NR1R1'; R7 y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, ¦ heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN , OR4 , nitro, hidroxilamina, hidroxilamida, amino, NHR4 , NR2R5, OR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0, R1(C=0)0, SOzNR^1' ; R8 y R8' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN , OR1, amino, NHR4 , NR2R5 , ÑOR1, alquiltio o alquiltio substituido, POsR^-R1' , o S02NR1R1' ; R9 y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido; cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, R1C=0, R10C=0, R^ÍK^O, O SOsNR^1' ; especialmente donde los grupos W e Y de este subgénero preferido están también dentro de las definiciones de W e Y' de la fórmula la, con las condiciones (1) hasta (14) de tal fórmula la donde sea apropiado a este subgénero, y más preferiblemente donde (i) cuando Y' es -0- y W es CR7R7'—CR7R7' , Ai y A2 no son simultáneamente CH; y (ii) cuando L es un enlace, G no es un grupo fenilo insubstituido . Otro subgénero más preferido de los compuestos de la invención incluye compuestos de la fórmula I o sales de los mismos en donde uno o más, preferiblemente todos, de los siguientes substituyentes son como se definen a continuación: G es un grupo arilo o heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) , donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones, preferiblemente con hidrógeno, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, halo, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, CN, 1^0=0, R1HNC=0, o SOí R^1' ; Z2 es O; Ai es CR7; A2 es CR7; Y es J-J' -J" donde J es (CR7R7' ) n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02, NH, NR7, CR7R7' , R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0P=0R2, 0S02, NHNH, NHNR6 , NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7 )n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; CRV—CR7R7', CR7R7'—C=0, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9— R9' , o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, 0S02, NHNH, NHNR6, NR6NH, o N=N; H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7' , nitro, R^CHz, R^, NH2, o NR4R5; H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7', nitro, R1OCH2, R10, NH2, O NRR5; L es un enlace; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R2 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo' substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, alcoxi o alcoxi substituido, amino, Ní^R2, alquiltio o alquiltio substituido ; H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0, o S02NR1R1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, ^0=0, R1NHC=0, SO2 1, o S02NR1R1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenil substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, 0R1, R^O, R1NHC=0, SO2R1, o SC^NR^-R1'; R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4, nitro, amino, HR4, NR2R5, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0, R1(C=0)0( R1NHC=0, SO2R1, R1R1'NC=0, O SOZ R^1' ; R8 y R8' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0, R1NHC=0, R1R1'NC=0, SO2R1, O SOs R^1' ; y R9 y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalguilo substituido, CN, OH, OR1, F^OO, R1NHC=0, o SOsNR^1' ; especialmente donde los grupos e Y de este subgénero preferido están también dentro de las definiciones de W e Y' de la fórmula la, con las condiciones (1) hasta (14) de tal fórmula la donde es apropiado a este subgénero, y más preferiblemente donde (i) cuando Y' es -0- y W es CR7R7'—CR7R7' , Ai y A2 no son simultáneamente CH; y (ii) cuando L es un enlace, G no es un grupo fenilo insubstituido . Un subgénero particularmente preferido de los compuestos de la invención, incluye compuestos de la fórmula I o sales de los mismos en donde uno o más, preferiblemente todos, de los substituyentes son como se define a continuación: G es un grupo arilo (especialmente, fenilo o naf ilo) o heterociclo (especialmente aquellos grupos heterociclo G de los compuestos de los Ejemplos en la presente), donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones, preferiblemente con substituyentes como se ejemplifica en cualesquiera de los compuestos de los Ejemplos en la presente ,· L es un enlace, (CRR7')n (donde n es 1 y R7 y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido) , o -CH2- H-; A2 son cada uno independientemente CR7 donde R7 (i) es hidrógeno, alquilo o alquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido (por ejemplo, alquenilo substituido con arilo (especialmente, fenilo o naftilo) o arilo substituido, o alquenilo substituido con heterociclo o heterociclo substituido) , arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, donde, para cada uno, los substituyentes preferidos son uno o más grupos seleccionados de V1 (especialmente grupos Ai y A2 de la fórmula CR7 donde R7 para cada uno de Ai y/o A2 es seleccionado independientemente de alquilo C1-4 insubstituido , o alquilo C1- cuyo alquilo está substituido por uno o más grupos V1) , o (ii) forma, junto con R7 de un grupo W (especialmente donde W es CR7R7'—CR7R7'), un anillo heterocíclico ; s OH, CN, halo, -O-arilo, -O-arilo substituido, -O-heterociclo (por ejemplo, -O- (piridinilo opcionalmente substituido) u -O- (pirimidinilo opcionalmente substituido) ) , -O-heterociclo substituido, -0-CO-alquilo, -O-CO-alquilo substituido, -O- (alquilsililo) , -O-arilalquilo, -O-arilalquilo substituido, -0-CO-alquilo, -O-CO-alquilo substituido, -O-CO-arilalquilo, -O-CO-arilalquilo substituido, -O-CO-arilo, -O-CO-arilo substituido, -0-CO-heterociclo, -0-CO-heterocicl substituido, -S- (arilo opcionalmente substituido) -NH-CO (alquilo opcionalmente substituido) , -SO- (aril opcionalmente substituido) -NH-CO- (alquilo opcionalment substituido), -S02- (arilo opcionalmente substituido) -NH C0- (alquilo opcionalmente substituido), -NH-S02 -arilo, NH-S02-arilo substituido, -NH-CO-0- (arilalquil< opcionalmente substituido) , -NH-CO-0-alquilo, -NH-CO-0 alquilo substituido, -NH-CO-alquilo , -NH-CO-alquil< substituido, -NH-CO-arilo, -NH-CO-arilo substituido, NH-CO- (arilalquilo opcionalmente substituido) , -NH-CO (alquilo opcionalmente substituido) -O- (arilo opcionalmente substituido), - (alquilo opcionalmente substituido) (arilo opcionalmente substituido) , (alquilo opcionalmente substituido) (arilalquilo opcionalmente substituido) , -COH, -COOH, -CO-0-alquilo, -CO-0-alquilo substituido, -CO-0-arilalquilo opcionalmente substituido, -CO-arilo, -CO-arilo substituido, -0-CO-NH-arilo, -0-CO-NH-arilo substituido, -CO-NH-arilo, -CO-NH-arilo substituido, -CO-NH-arilalquilo, -CO-NH-arilalquilo substituido, -O- (arilo opcionalmente substituido) -NH-CO- (alquilo opcionalmente substituido) ; -O-, -SO-, -N(V2)-, -CH2-N(V2)-, -CO-N(alquilo) - , -CH2-S-, -C¾-S02-; V2 es hidrógeno, alquilo, arilalquilo, -CO-alquilo, -C0-0- arilo, -CO-0-arilalquilo; W es CRR7'—CR7R7' (donde R7 y R7' son cada uno independientemente seleccionados de H, OH, alquilo o alquilo substituido (tal como hidroxialquilo) , o donde R7 forma un anillo heterocíclico junto con R7 de Ax. o A2) , CR8=CR8' (donde R8 y R8' son cada uno independientemente seleccionados de H, alquilo o alquilo substituido (tal como hidroxialquilo) ) , CRR7'—C=0 (donde R7 y R7' son cada uno hidrógeno, o donde R7 forma un anillo heterocíclico junto con R7 de Ai o A2) , N=CR8 (donde R8 es alquilo) , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido; Zi y Z2 son 0; y Los grupos preferidos G-L son grupos fenilo opcionalmente substituido, naftilo opcionalmente substituido y heterocíclico bicíclico fusionado opcionalmente substituido tales como grupos heterocíclicos fusionados a benzo opcionalmente substituidos (por ejemplo, enlazados al resto de la molécula a través de la porción benceno) , especialmente tales grupos en donde el anillo heterocíclico enlazado al benceno tiene 5 miembros ejemplificados por benzoxazol, benzotiazol, benzotiadiazol, benzoxadiazol o benzotiofeno, por ejemplo: 25 donde X = halo (especialmente F), OH, CN, N02 o (por ejemplo X' = halo (especialmente Cl, F, o I), CH3, CF3, CN o 0CH3; U es O u S (donde S puede opcionalmente oxigenarse, por ejemplo, para SO); U1 es CH3 o CF3; cada U2 es independientemente N, CH o CF; U3 es N, O u S; U4 y U5, junto con los átomos a los cuales se enlazan, forman un anillo heterocíclico de 5 miembros opcionalmente substituido que puede ser parcialmente insaturado o aromático y que contiene de 1 hasta 3 heteroátomos en el anillo ; cada U6 es independientemente CH o N; y enlaces dobles opcionales dentro del anillo formados por U3, U4 y U5. Un subgénero especialmente preferido incluye compuestos de la fórmula I que tienen la siguiente estructura, o sales de los mismos: donde G es fenilo opcionalmente substituido, un grupo heterocíclico bicíclico fusionado a benzo o naftilo, 7 es CH3 o alquilo Ci- substituido por V1, y un R7' es H o hidroxilo y el otro es H. Los compuestos preferidos de la invención incluyen: [3aS- (3aoc, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 6 -hidroxi -4 -metil - 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aoc) ] -4- (Octahidro-6 -hidroxi -4 -metil -1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi-4, 7 -dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isomdol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -3metil-2-piridincarbonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (2 , 1, 3 -Benzoxadiazol -5 -il ) hexahidro- 5-hidroxi-4 , 7 -dimetil -4 , 7 -epoxi -1H- isoindol-1, 3 (2H) -diona; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il ) -3 , 4 -dimetil- 2 -piridincarbonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -3 , 4 -dimetil -2 -piridincarbonitrilo; [3 S- (3acc, 4ß, 5ß, 7ß, 7aot) ] -2- ( 6 -Benzotiazolil ) hexahidro- 5-hidroxi-4 , 7 -dimetil -4 , 7-epoxi-lH-isoindol-l , 3 (2H) -diona; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (7-Cloro-2, 1, 3 -benzoxadiazol -4-il) hexahidro- 5 -hidroxi - , 7 -dimetil -4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, (2H) -diona; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro- 5 -hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3-(trifluorometil ) -2 -piridincarbonitrilo ; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi- , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , -epoxi-2H-isoindol-2 -il ) -2-yodobenzonitrilo; éster de metilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil ) fenil) hexahidro-6-ciano-4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol -5-carboxílico ¦ (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7 , 8-trimetil-l , 3-dioxo-4 , 7 -imino-2H-isoindol -2 -il ) -2 - (trifluorometil ) benzonitrilo ; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 , 6-dicloro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 - il ) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 , 6 -dicloro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol -2 - il ) -2 -(trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4 - (Octahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 , 5-trioxo- 4 , 7 -epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -2 -yodobenzonit ilo ; (3aa, 4ß, 5a, 7ß , 7aa) -4- (Octahidro-5 -[ [ [difluorometil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro- 5- [ [fenilmetoxicarbonil] amino] - , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi- H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [propiloxicarbonil] amino] -4 , 7 -dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ t [ciclopropilmetiloxi] carbonil ] amino] -4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [metoxicarbonil] amino] -4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aR- (33a,4ß,5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 -il) -2,3-diclorobenzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 4aa, 5aa, 6ß, 7aa) ] -4- (0ctahidro-4a-hidroxi-4 , 6-dimetil -1 , 3 -dioxo- , 6-epoxicicloprop [f] isoindol -2 (1H) -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (33a,4ß,5a,7ß,73a)-2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7 -epoxi -N, N-dimetil-lH- isoindol -5 -carboxamida; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-cloro-6-hidroxi-4 , 7 -dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 -il ) -2 -(trifluorometil ) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-cloro-6-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 -il ) -2 -(trifluorometil ) benzonitrilo; -4- (Octahidro-5- [ [ [6- (trifluorometil ) 4 -pirimidinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [5-cloro-2-piridinil] oxi] metil] -4 , 7-dime il -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ [fenilamino] carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (33a,4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (1-metiletiloxi) carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi 2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [5-fluoro-4-pirimidinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [etiloxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; éster de 4-piridinilmetilo del ácido [3aR (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) -hexahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico ; [3aR- (3a , ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 - [ [4-piridinilmetoxicarbonil] amino] - , 7-dimetil-l ; 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; 3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [2-metil-5- (trifluorometil) -2H-pirazol-3 -il] oxi] metil] -5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; éster de metilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß , 7aa) -2 - (4 -Ciano-3 - (trifluorometil ) fenil ) hexahidro-4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-ciclopropilmetoxi -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ ( (fenilmetil) amino) carbonil] oxi] -4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; y [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 -ciclopropiloxi -4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(trifluorometil ) benzonitrilo; o sales, solvatos, profármacos o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos más -preferidos de la invención incluyen: [3aR- (3aa,40, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi -2H- isoindol -2 - il ) -3- (trifluorometil ) -2 -piridincarbonitrilo ; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7a ) ] -5- (0ctahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3- (trifluorometil) -2 -piridincarbonitrilo; [3aR- (33 ,4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Cloro-3-yodofenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi-4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol -2 -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo ; [3aR- (33a,4ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 , 5-trioxo- , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- {3?a,4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi- , 7-dimetil-1 , 3-dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol -2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 6ß, 1^,'la ) ] -4- (Octahidro-6-hidroxi-4-metil-1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-2H- soindol -2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo ; [3aR- (3aa,4P,5p,7P,7aa)] -2- (4-Cloro-3- (trifluorometil ) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7 epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-yodobenzonitrilo ; [3aR- (3? ,4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (0ctahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol -2- il ) -2-yodobenzonitrilo ; [3aS- (3aa,4p, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4 -Cloro- 3- (trifluorometil) piridinil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil 4 , 7 -epoxi-??- isoindol -1 , 3 (2H) -diona; [3aR- (33 ,4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H- isoindol -2-il) -3-metil-2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-metoxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-( trifluorometil) benzonit ilo; [3aR- (2a ,4 , 5a, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H- isoindol -2-il) -3-(trifluorometil ) -2 -piridincarbonitrilo ; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7P,'7aa) ] -4- (Octahidro-.5-metoxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa,4p, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-fluoro-5 , 5-dihidroxi-4, 7-dimetil- 1 , 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 - (trifluorometil ) benzonitrilo ; [3aR- (3aa,4p, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-4 , 7-dimetil - 1 , 3,5-trioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3- (trifluorometil ) -2-piridincarbonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Cloro-2-metil-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona; [3aR- (3aa^^,7p,7aa) ] -2- (4-Cloro-2-metil-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona; (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7a ) -4- (Octahidro-6-fluoro-5 , 5-dihidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il ) -2-yodobenzonitrilo ; éster de metilo del ácido (3acc, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) -hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi- 1H- isoindol-5-carboxílico; [3aS- (3aot, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-fluoro-5 , 5-dihidroxi-4, 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 -yodobenzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -'4- (Octahidro-5-etilsulfonamido-4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa,4 , 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (4-fluorofenilamino) carbonil] oxi] -4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3a ,4 , 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (1-metiletilamino) carbonil] oxi] -4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aS- (3aa,4p, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (1-metiletoxi ) carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-fluoro-5 , 5-dihidroxi-4 , 7-dimetil -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -yodobenzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil ) hexahidro-4 , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-N-metil -N-fenil -lH-isoindol -5-carboxamida ; [3R- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -cloro-3-metilbenzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-[ [etoxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) 4- (Octahidro-5- [ [ [2-metil-5-(trifluorometil) -2H-pirazol-3-il] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4 , -epoxi -2H-isoindol-2 -il ) -2 - (trifluorometil ) benzonitrilo ; éster de metilo del ácido [3aS- (3aa, 4ß, 5a, 6ß , 7ß , 7aa) ] -2 - (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) -hexahidro-6-hidroxi-4 , 7-dimetil-1 , 3-dioxo- , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxilico; (3aa,4 , 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [6- (trifluorometil) -4 -pirimidinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ,· [3aR- (33a,4ß,5a,7ß,73a)]-4- (Octahidro-5-metoxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a( 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil ) fenil) -hexahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carbonitrilo; [3aR- (33a,4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi- 4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol-2 -il) -3 -metil -2 - (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ [ (ciclopropilmetil ) amino] carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol -2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (33a,4ß, 5a, 7ß; 7aa) ] -4- (Octahidro-5-[ [ (dimetilamino) sulfonil] amino] -4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) enzonitrilo ; (3aa, 4ß, 5a,-7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-benzenesulfonamido-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il ) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] - 4- (Octahidro-6 - fluoro- 5 , 5-dihidroxi-4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol -2 -il ) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo ; éster de metilo del ácido [3aR- (3acc, 4ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) -hexahidro-6-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxilico; y [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (dimetilamino) sulfonil] amino] -4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; o sales, solvatos, profármacos o estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos donde R7 es hidroxilo pueden proporcionar una solubilidad al agua incrementada y estabilidad metabólica, con relación a los compuestos correspondientes donde R7' es H, además de que tienen buena permeabilidad y altos niveles sanguíneos sistémicos. Estos compuestos que portan hidroxilo pueden obtenerse in vivo por el metabolismo del correspondiente compuesto donde R7' es H, así como por métodos preparativos sintéticos tales como aquellos descritos en la presente.
Uso y utilidad Los compuestos de la presente invención modulan la función de los receptores de hormona nuclear (NHR) , e incluyen compuestos que son por ejemplo, agonistas, agonistas parciales, antagonistas o antagonistas parciales del receptor andrógeno (AR) , el receptor de estrógeno (ER) , el receptor de progesterona (PR) , el receptor glucocorticoide (GR) , el receptor mineralocorticoide (MR) , el receptor esteroide xenobiótico (SXR) , otros NHR de enlace esteroides, los receptores huérfanos u otros NHR. La modulación selectiva de uno de tales NHR con relación a los otros dentro de la familia NHR se prefiere. La "modulación" incluye por ejemplo, activación (por ejemplo actividad agonista tal como la actividad agonista del receptor andrógeno selectivo) o la inhibición (por ejemplo, actividad antagonista). Los compuestos actuales son entonces útiles en el tratamiento de condiciones asociadas con NHR. Una "condición asociada con NHR", como se usa en la presente, denota una condición o trastorno que se puede tratar al modular la función de un NHR en un sujeto, en donde el tratamiento comprende la prevención (por ejemplo, tratamiento profiláctico) , alivio parcial o cura de la condición o trastorno. La modulación puede suceder localmente, por ejemplo, dentro de ciertos tejidos del sujeto o más ampliamente a través de un sujeto que se trata por tal trastorno de la condición. Los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de una diversidad de condiciones y trastornos que incluyen, pero no se limitan a, aquellos descritos a continuación : Los compuestos de fórmula I se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas o antagonistas parciales del receptor estrógeno, preferiblemente selectivamente con ese receptor, en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor estrógeno. Las aplicaciones de los compuestos incluyen, pero no se limitan a: osteoporosis , bochornos, sequedad vaginal, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de endometrio, cánceres que expresan el receptor estrógeno tal como los cánceres antes mencionados y otros, anticonceptivo, terminación del embarazo, menopausia, amenorrea, y dismenorrea. Los compuestos de fórmula I se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas, o antagonistas parciales del receptor de progesterona, preferiblemente de forma selectiva con ese receptor, en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor de la progesterona. Las aplicaciones de tales compuestos incluyen, pero no se limitan a, cáncer de mama, otros cánceres que contienen el receptor de progesteron , endometriosis , caquexia, anticoncepción, menopausia, ciclosincronía, meniginoma, dismenorrea, fibroides, terminación del embarazo, inducción del parto, y osteoporosis . Los compuestos de fórmula I, se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas, o antagonistas parciales del receptor glucocorticoide, preferiblemente de forma selectiva a ese receptor, en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor glucocorticoide. Las aplicaciones de los compuestos incluyen, pero no se limitan a: enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, cáncer de próstata, cáncer de mama, enfermedad de Alzheimer, trastornos psicóticos, dependencia de drogas, diabetes mellitus no dependiente de la insulina, y como agentes de bloqueo del receptor de la dopamina, o de otra manera como agentes para el tratamiento de trastornos mediados por el receptor de la dopamina . Los compuestos de la fórmula I se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas o antagonistas parciales del receptor mineralocorticoide , preferiblemente de forma selectiva con ese receptor en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor mineralocorticoide . Las aplicaciones de los compuestos incluyen, pero no se limitan a: síndrome de retiro de fármacos y enfermedades inflamatorias. Los compuestos de fórmula I se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas o antagonistas parciales del receptor de la aldosterona, preferiblemente de forma selectiva con ese receptor, en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor de la aldosterona. Una aplicación de los compuestos incluye, pero no se limita a: insuficiencia cardiaca congestiva. Los compuestos de fórmula I se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas o antagonistas parciales del receptor andrógeno, preferiblemente de forma selectiva con ese receptor, en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor andrógeno. Las aplicaciones de los compuestos incluyen, pero no se limitan a: hirsutismo, acné, seborrea, enfermedad de Alzheimer, alopecia androgénica, hipogonadismo, hiperpilosidad, hipertrofia benigna de la próstata, adenomas y neoplasias de la próstata (tal como cáncer avanzado metastático de la próstata) , tratamiento de células de tumores benignos o malignos, que contienen el receptor andrógeno, tal como el caso de cáncer de mama, cerebro, piel, ovarios, vejiga, linfático, hígado y de riñon, cánceres pancreáticos, modulación de la expresión de VCAM y aplicaciones en. ellas para el tratamiento de enfermedad del corazón, modulaciones inmunes y de inflamación, modulación de la expresión VEGF y las aplicaciones en ella para su uso como agentes anti -angiogénicos , osteoporosis, espermatogénesis supresora, libido, caquexia, endometriosis , síndrome poliquístico de ovarios, anorexia, complemento de andrógenos para niveles de testosterona disminuidos relacionados con la edad en los hombres, menopausia masculina, reemplazo de hormonas masculinas, disfunción sexual masculina y femenina, e inhibición de la atrofia muscular en pacientes ambulatorios. Por ejemplo, la modulación de depósito AR se contempla, siendo particularmente preferida la modulación AR selectiva de la próstata ( "SARM" ) , tal como para el tratamiento de cánceres de etapa temprana de la próstata. Los compuestos de la fórmula I se pueden aplicar como antagonistas del receptor andrógeno mutado (preferiblemente, selectivos) , por ejemplo, que se encuentra en muchas líneas de tumor. Los ejemplos de tales mutantes son aquellos que se encuentran en líneas celulares de tumor de próstata representativas, tales como LNCap, (mutación T877A, Biophys . Acta, 187, 1052 (1990)), PCa2b . (mutaciones L701H y T877A, J. Urol., 162, 2192 (1999)) y CWR22, (mutaciones H874Y, Mol. Endo., 11.450 (1997)). Las aplicaciones de dichos compuestos incluyen, pero no se limitan a: adenomas y neoplasias de cáncer de mama, próstata y cáncer del endometrio.
Los compuestos de fórmula I se pueden aplicar como agonistas, agonistas parciales, antagonistas o antagonistas parciales del receptor esteroide xenobiotico, preferiblemente de forma selectiva con ese receptor, en una configuración de condiciones médicas que involucran la modulación de la trayectoria del receptor esteroide y xenobiotico. Las aplicaciones de los compuestos incluyen, pero no se limitan a: tratamiento de la desregulación de la homeostasis por colesterol, atenuación del metabolismo de agentes farmacéuticos por co-administración de un agente (compuesto de la presente invención) que modula los efectos del regulador P450 de SXR. Junto con el NHR antes mencionado, existen también diversos NHR para los cuales no se pueden caracterizar los ligandos activadores o desactivadores. Estas proteínas se clasifican como NHR, debido a una homología fuerte de secuencia, a otros NHR, y se conocen como los receptores huérfanos. Debido a que los receptores huérfanos demuestran una homología de secuencia fuerte con otros NHR, los compuestos de fórmula I incluyen aquellos que sirven como moduladores de la función del NHR huérfano. Los receptores huérfanos que se modulan por los moduladores NHR, tales como los compuestos dentro del alcance de la fórmula I, se ejemplifican, pero no se limitan a, aquellos enlistados en la Tabla 1. Las aplicaciones terapéuticas ejemplares de los moduladores de los receptores huérfanos también se enlistan en la Tabla 1, pero no se limitan a los ejemplos en la presente .
Tabla 1. Receptores de hormonas nucleares huérfanos ejemplares, forma (M= monomérica, D= heterodimérica, H= homodimérica) , expresión de tejidos y aplicaciones terapéuticas objetivo (SNC= sistema nervioso central) . Receptor Forma Expresión del tejido Aplicación terapéutica objetivo NURR1 M/D Neuronas dopaminérgicas Enfermedad de Parkinson RZRP M cerebro (pituitaria) , Trastornos del dormir músculo RORa M Cerebelo, células artritis, ataxia Purkinje Cerebelar NOR-1 M cerebro, músculo, trastornos de CNS, corazón, adrenal, timo cáncer NGFI-?ß M/D cerebro trastornos de SNC COUP-Tfa H cerebro trastornos de SNC COUP-TFP H cerebro trastornos de SNC COUP-TFyx H cerebro trastornos de SNC Nur77 H cerebro, timo, trastornos de SNC adrenales Rev-ErbAa H músculo, Obesidad cerebro (ubicuo) HNF4a H hígado, riñon, Diabetes intestino SF-1 M gónadas, pituitaria trastornos metabólicos LXRa, ß D Riñon (ubicuo) trastornos metabólicos GCNF /H ovario, testículos Infertilidad ERRa, ß M hueso, placenta infertilidad, Osteoporosis FXR D hígado, riñon trastornos metabólicos CARa H hígado, riñon trastornos metabólicos PXR H intestino, hígado trastornos metabólicos COUP-TF2 D testículos oncología angiogénesis (ARP1) RORbeta M SNC, retina, glándula Trastornos metabólicos pineal La presente invención proporciona así métodos para el tratamiento de condiciones asociadas con NHR, que comprende la etapa de administrar a un sujeto que necesita del mismo, al menos un compuesto de fórmula I en una cantidad efectiva para ello. Se pueden emplear otros agentes terapéuticos tales como aquellos abajo descritos, con los - compuestos de la invención en los métodos actuales (por ejemplo, separadamente o formulados juntos con una dosis fija) . En l<¾s métodos de la presente invención, tales u otros agentes terapéuticos se pueden administrar previo a, simultáneamente con o después de la administración de los compuestos de la presente invención.
La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas, que comprenden al menos uno de los compuestos de fórmula I capaces de tratar una condición asociada con NHR en una cantidad efectiva para ello, y un portador farmacéuticamente aceptable (vehículo o diluyente) . Las composiciones de la presente invención pueden contener otros agentes terapéuticos como se describen abajo, y se pueden formular por ejemplo, al emplear vehículos o diluyentes sólidos o líquidos convencionales, así como aditivos farmacéuticos de un tipo adecuado para el modo de administración deseado (por ejemplo, excipientes, aglutinantes, conservadores, estabilizadores, sabores, etc.) según las técnicas tales como aquellas en el arte de la formulación farmacéutica. Se debe observar que los compuestos de la presente invención son, sin limitaciones en cuanto a su mecanismo de acción, útiles en el tratamiento de cualquiera de las condiciones o trastornos enlistados o descritos en la presente, tales como enfermedades inflamatorias o cánceres, u otras enfermedades proliferativas , y en composiciones para el tratamiento de tales- condiciones o trastornos. Tales condiciones o trastornos incluyen, sin limitaqión, cualquiera de aquellas previamente descritas, así como aquellas que se describen a continuación tales como: mantenimiento de la resistencia y función del músculo (por ejemplo, en la edad avanzada) inversión o prevención de la debilidad o declinación funcional relacionada con la edad ("ARFD") en la edad avanzada (por ejemplo, sarcopenia) ; tratamiento de efectos laterales catabólicos de los glucocorticoides ; prevención y/o tratamiento de masa ósea reducida, densidad o crecimiento (por ejemplo, osteoporosis y osteopenia) ; tratamiento del síndrome de fatiga crónica (CFS) ,- malagia crónica; tratamiento de síndrome de fatiga aguda y pérdida muscular que sigue a una cirugía electiva (por ejemplo, rehabilitación post-quirúrgica) ; aceleración de la cicatrización de heridas; aceleración de la reparación de fracturas de hueso (tal como la aceleración de la recuperación de pacientes con fractura de cadera) ; aceleración de la cicatrización de fracturas complicadas, por ejemplo, osteogénesis de distracción en el reemplazo de articulaciones, prevención de la formación de adhesión post-quirúrgica; aceleración de la reparación o crecimiento de los dientes; mantenimiento de la función sensora (por ejemplo, oído, vista, olfato, y gusto) ; tratamiento de enfermedad periodontal; tratamiento de desgaste secundario a fracturas y desgaste en conexión con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPO) , enfermedad crónica del hígado., SIDA, pérdida de peso, caquexia de cáncer, recuperación de trauma y de quemaduras, estado catabólico crónico (por ejemplo, coma), trastornos del comer (por ejemplo, anorexia) y quimioterapia; tratamiento de la cardiomiopatía, tratamiento de la trombocitopenia ; tratamiento del retardo del crecimiento en conexión con la enfermedad de Crohn, tratamiento de síndrome de intestino corto, tratamiento del síndrome del intestino irritable, tratamiento de la enfermedad inflamatoria del intestino, tratamiento de la enfermedad de Crohn y colitis ulcerante; tratamiento de complicaciones asociadas con el transplante; tratamiento de estatura corta fisiológica incluyendo niños deficientes en la hormona del crecimiento y estatura corta asociada con enfermedad crónica; tratamiento de la obesidad; y retardo en el crecimiento asociado con la obesidad; tratamiento de la anorexia (por ejemplo, asociado con caquexia o envejecimiento) ; tratamiento de hipercortisolismo y síndrome de Cushing; enfermedad de Paget; tratamiento de osteroartritis ; inducción de la liberación de la hormona de crecimiento pulsátil; tratamiento de osteocondrodisplasias ; tratamiento de la depresión; nerviosidad, irritabilidad y estrés; tratamiento de energía mental reducida y baja auto-estima (por ejemplo, motivación/afirmatividad) ; mejora de función cognitiva (por ejemplo, el tratamiento de la demencia, incluyendo enfermedad de Alzheimer y pérdida de la memoria de . corto plazo) ; tratamiento del. catabolismo en conexión con la disfunción pulmonar y dependencia de ventilador; tratamiento de la disfunción cardiaca (por ejemplo, asociada con la enfermedad valvular, infarto al miocardio, hipertrofia cardiaca o insuficiencia cardiaca congestiva) ; disminución de la presión sanguínea; protección contra la disfunción ventricular o prevención de eventos de reperfusión; tratamiento de adultos con diálisis crónica; inversión o disminución de estado catabólico del envejecimiento; atenuación o inversión de respuestas catabólicas de proteínas que siguen al trauma (por ejemplo, inversión del estado catabólico asociado con la cirugía, insuficiencia cardiaca congestiva, miopatía cardiaca, quemaduras, cáncer, COPD, etc.); reducción de caquexia y pérdida de proteína debida a enfermedad crónica tal como el cáncer o el SIDA; tratamiento de hiperinsulinemia incluyendo nesidioblastosis ; tratamiento de pacientes inmunodeprimidos ; tratamiento del desgaste en conexión con esclerosis múltiple u otros trastornos neurodegenerativos; promoción de la reparación de mielina; mantenimiento del grosor de la piel; tratamiento de homeostasis metabólica y homeostasis renal (por ejemplo, en la debilidad de edad avanzada) ; estimulación de osteoblastos , remodelación de huesos, crecimiento de cartílagos; regulación de la ingesta de alimento; tratamiento de la resistencia a la insulina, incluyendo NIDDM, en mamíferos, (por ejemplo, humanos) ; tratamiento de la resistencia a la insulina en el corazón; mejora de la calidad del sueño y corrección del hiposomatotropismo relativo de la senectud, debido a un alto incremento en el sueño RE y una disminución en la latencia REM; tratamiento de hipotermia; tratamiento de insuficiencia cardiaca congestiva; tratamiento de lipodistrofia (por ejemplo, en pacientes que toman terapias de VIH o SIDA tales como inhibidores de la proteasa) ; tratamiento de la atrofia muscular (por ejemplo, debido a la inactividad física, reposo en cama o condiciones reducidas de soporte de peso) ; tratamiento de la incapacidad musculoesqueletal (por ejemplo, en la edad avanzada); mejora de la función pulmonar global; tratamiento del trastornos del dormir; y en el tratamiento del estado catabólico de enfermedades críticas prolongadas; tratamiento de hirsutismo, acné, seborrea, alopecia, androgénica, anemia, hiperpilosidad, hipertrofia benigna de próstata, adenomas y neoplasias de la próstata (por ejemplo, cáncer avanzado metastático de próstata) y células de tumores malignos que contienen el receptor andrógeno, tal como en el caso de cánceres de mama cerebro, piel, ovarios, vejiga, linfático, hígado y de riñon; cánceres de la piel, páncreas, endometrio, pulmón y colon; osteosarcoma; hipercalcemia de malignidades; enfermedad metastática 'de los huesos; tratamiento de la espermatogénesis, endometriosis , y síndrome policístico de ovarios; contraatacar la preclampsia, eclampsia del embarazo y parto prematuro; tratamiento del síndrome premenstrual; tratamiento de sequedad vaginal; niveles de testosterona disminuidos en los hombres con relación a la edad, menopausia masculina, hipogonadismo, reemplazo de hormonas masculinas, disfunción sexual masculina y femenina (por ejemplo, disfunción eré^til, apetito sexual disminuido, bienestar sexual, libido disminuido) , anticonceptivos masculinos y femeninos, pérdida del cabello, síndrome de Reaven, y aumento del desempeño/ fortaleza de músculos y huesos; y condiciones, enfermedades y malestares ref renciados colectivamente como "Síndrome X" o síndrome metabólico como se detalla en Johannsson J. Clin. Endocrinol . etab., 82, 727-34 (1997). Los compuestos actuales tienen utilidad terapéutica en la modulación de la activación/proliferación de células inmunes, por ejemplo, como inhibidores competitivos de las reacciones de enlace intercelular ligando/receptor que involucran CAMs (moléculas de adhesión celular) y leucointegrinas . Por ejemplo, los compuestos actuales modulan LFA-ICAM 1, y son particularmente útiles como antagonistas LFA-ICAM 1, y en el tratamiento de todas las condiciones asociadas con LFA-ICAM 1 tal como trastornos inmunológicos . Las utilidades preferidas para los compuestos actuales incluyen pero no se limitan a: condiciones inflamatorias tales como aquellas que resultan de una respuesta de un sistema inmune no específico de un material mamífero (por ejemplo, síndrome de distensión respiratoria en adultos, choque, toxicidad al oxígeno, síndrome de lesión múltiple en órganos secundaria a la septicemia, síndrome de lesión múltiple en órganos secundaria al trauma, lesión por reperfusión de tejido debido a una derivación cardiopulmonar, infarto al miocardio o uso con agentes de trombólisis, glomerulonefritis aguda, vasculitis, artritis reactiva, dermatosis con componentes inflamatorios agudos, apoplejía, lesión térmica, hemodiálisis , leucaferesis , colitis ulcerante, enterocolitis necrotizante y síndrome asociado con la transfusión de granulocitos) y condiciones que resultan de una respuesta del sistema inmune específico en un mamífero (por ejemplo, psoriasis, rechazo de transplantes de órgano/tejido, reacciones de injerto contra huésped y enfermedades autoinmunes incluyendo el síndrome de Raynaund, tiroiditis autoinmune, dermatitis, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, diabetes mellitus dependiente de la insulina, uveitis, enfermedad inflamatoria del intestino incluyendo enfermedad de Crohn y colitis ulcerante, y lupus eritematoso sistémico) . Los compuestos actuales se pueden usar en el tratamiento del asma, o como un adyuvante para minimizar la toxicidad con terapia de- citocinas en el tratamiento de cánceres. Los compuestos actuales se pueden emplear en el tratamiento de todas las enfermedades que se tratan actualmente a través de terapias de esteroides . Los compuestos actuales se pueden emplear para el tratamiento de estos y otros trastornos solos o con otros agentes inmunodepresores o anti-inflamatorios . De conformidad con la invención, se puede administrar un compuesto de la fórmula I previo al comienzo de la inflamación (de manera de suprimir una inflamación anticipada) o después del inicio de la inflamación. Cuando se suministran profilácticamente, los compuestos inmunodepresores, se suministran preferiblemente por adelantado de cualquier respuesta o síntoma inflamatorio (por ejemplo, previo al, en el, o poco después del momento de un transplante de órganos o tejidos, pero por adelantado de cualesquiera de los síntomas o rechazo de órganos) . La administración profiláctica de un compuesto de la fórmula I, evita o atenúa cualquier respuesta inflamatoria posterior (tal como por ejemplo, rechazo de un órgano o tejido transplantado, etc) . La administración de un compuesto de la fórmula I atenúa cualquier inflamación actual (tal como por ejemplo, el rechazo de un órgano o tejido transplantado) . Los compuestos de la fórmula I, se pueden administrar para cualquiera de los usos descritos en la presente por cualesquiera de los métodos adecuados, por ejemplo, oralmente tal como en forma de tabletas, cápsulas, gránulos o polvos; sublingualmente ; bucalmente; parenteralmente ; tal como por técnicas de inyección o infusión subcutánea, e intravenosa. intramuscular, o intraesternal (por ejemplo, como soluciones o suspensiones estériles inyectables acuosas o no acuosas) ; nasalmente, incluyendo la administración a las membranas nasales, tal como por un rocío de inhalación; tópicamente tal como en forma de una crema o ungüento; o rectalmente tal como en forma de supositorios; en formulaciones de dosis unitaria que contienen vehículos o diluyentes no tóxicos, farmacéuticamente aceptables. Los compuestos actuales pueden, por ejemplo, administrarse en una forma adecuada para liberación inmediata o liberación prolongada. La liberación inmediata o liberación prolongada, se puede alcanzar por el uso de composiciones farmacéuticas adecuadas que comprenden los compuestos actuales, o particularmente en el caso de la liberación prolongada, por el uso de dispositivos tales como implantes subcutáneos o bombas osmóticas. Los compuestos actuales también se pueden administrar por liposomas. Las composiciones ejemplares para la administración oral, incluyen suspensiones que pueden contener por ejemplo, celulosa microcristalina para impartir volumen, ácido algínico o alginato de sodio, como un agente se suspensión, metilcelulosa como un aumentador de la viscosidad, y edulcorantes o agentes saborizantes tales como aquellos conocidos en el arte: y las tabletas de liberación inmediata que pueden contener, por ejemplo, celulosa microcristalina, fosfato de bicalcio, almidón, estearato de magnesio y/o lactosa y/u otxos excipientes, aglutinantes, agentes de dilución, desintegrantes, diluyentes y lubricantes tales como aquellos conocidos en la técnica. Los compuestos de fórmula I también se pueden suministrar a través de la cavidad oral por administración sublingual y/o bucal. Se pueden usar tabletas moldeadas, tabletas comprimidas, o tabletas secadas por congelación como formas ejemplares. Las composiciones ejemplares incluyen aquellas que formulan los compuestos actuales, con diluyentes de disolución rápida tales como manitol, lactosa, sacarosa, y/o ciclodextrinas . También se incluyen en tales formulaciones excipientes de alto peso molecular tales como celulosas (avicel) o polietilen glicoles (PEG) . Tales formulaciones pueden también incluir un excipiente para ayudar a la adhesión mucosal tal como hidroxi propil celulosa (HPC) , hidroxi propil metil celulosa (HPMC) , carboxi metil celulosa de sodio (SCMC) , copolímero de anhídrido maléico (por ejemplo, Gantrez) , y agentes para controlar la liberación tales como copolímero poliacrílico (por ejemplo, Carbopol 934) . Se pueden también agregar lubricantes, agentes mej oradores del flujo, sabores, agentes colorantes y estabilizadores para facilitar la fabricación y uso . Las composiciones ejemplares para la administración nasal por aerosol o inhalación, incluyen soluciones salinas que pueden contener por ejemplo, alcohol bencílico u otros conservadores adecuados, promotores de la absorción para aumentar la biodisponibilidad, y/u otros agentes dispersantes o de solubilización tales como aquellos que se conocen en el arte . Las composiciones ejemplares para la administración parenteral incluyen soluciones o suspensiones inyectables que pueden contener, por e emplo, diluyentes o solventes no tóxicos parenteralmente aceptables, tal como manitol, 1,3-butanodiol, agua, solución de Ringer, una solución isotónica de cloruro de sodio, u otros agentes adecuados de dispersión o humectantes o de suspensión, incluyendo mono o digliceridos sintéticos, y ácidos grasos incluyendo ácido oleico o Cremafor . Las composiciones ejemplares para la administración rectal, incluyen supositorios que pueden contener por ejemplo, un excipiente adecuado no irritante tal como manteca de cacao, ésteres sintéticos de glicéridos o polietilenglicoles, que son sólidos a temperatura ordinaria, pero que se licúan o se disuelven en la cavidad rectal para liberar el fármaco. Las composiciones ejemplares para administración tópica incluyen un portador tópico tal como Plastibase (aceite mineral gelificado con polietileno) . La cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención, se puede determinar por alguien, experto en la técnica, e incluye cantidades de dosis ejemplares para un adulto humano desde alrededor de 1 hasta 100 (por ejemplo, 15 o menos, especialmente 1 a 3 o menos) mg/kg de peso corporal de compuesto activo por día, que se puede administrar en una dosis simple o en forma de dosis divididas individuales tales como desde 1 a 4 veces por día. Se entenderá que el nivel específico de dosis y la frecuencia de dosificación para algún sujeto en particular, se puede variar y dependerá de una diversidad de factores incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la estabilidad metabólica y longitud de acción de ese compuesto, la especie, edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del sujeto, el modo y tiempo de administración, tasa de excreción, combinación de fármacos y severidad de la condición particular. Los sujetos preferidos para el tratamiento incluyen animales, más preferiblemente especies mamíferas tales como humanos, y animales domésticos tales como perros, gatos y similares, sujetos a condiciones asociadas con NHR. Como se mencionó anteriormente, los compuestos de la presente invención se pueden emplear solos o en combinación uno con el otro, y/u otros agentes terapéuticos adecuados, útiles en el tratamiento de condiciones asociadas con NHR, por ejemplo, un antibiótico u otro material farmacéuticamente activo.
Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con agentes promotores del crecimiento, tales como, pero no limitados a TRH, dietilestilbesterol , teofilina, encefalinas, prostaglandinas de la serie E, compuestos descritos en la patente de E.U.A. No. 3,239,345, por ejemplo, zeranol, y compuestos descritos en la patente E.U.A. No. 4,036,979, por ejemplo, sulbenox o péptidos descritos en la patente E.U.A. No. 4,411,890. Los compuestos de la invención también se pueden usar en combinación con secretagogos de la hormona del crecimiento tales como GHRP-6, GHRP-1 (como se describe en la patente de E.U.A. No. 4,411,890 y las publicaciones WO 89/07110 y WO 89/07111), GHRP-2 (como se describe en WO 93/04081), NN703 (Novo Nordisk) , LY444711 (Lilly) , MK-677 (Merck) , CP424391 (Pfizer) y B-HT920, o con el factor liberador de la hormona del crecimiento y sus análogos o la hormona del crecimiento y sus análogos o somatomedinas incluyendo IGF-1 y IGF-2, o con agonistas alfa-adrenérgicos tal como la clonidina o agonistas de la serotonina 5-HTD tal como el sumatriptan, o agentes que inhiben la somatostatina o su liberación, tal como la fisostigmina y la piridostigmina. Un uso todavía adicional de los compuestos descritos de la invención, es en combinación con la hormona paratiroides , PTH (1-34)· o bisfosfonatos , tales como MK-217 (alendronato) .
Un uso todavía adicional de los compuestos de la invención, es en combinación con estrogenos, testosterona, un modulador receptor selectivo de estrogenos, tal como el tamoxifen o raloxifen, u otros moduladores receptores andrógenos, tales como aquellos descritos en Edwards, J. P. et al., Bio. Med. Chem. Let . , 9, 1003-1008 (1999) y Hamann, L. G. et al., J. Med. Chem., 42, 210-212 (1999). Un uso adicional de los compuestos de esta invención, es en combinación con los agonistas receptores de la progesterona ( "PRA" ) , tal como el levonorgestrel , acetato de medroxiprogesterona (MPA) . Los compuestos de la presente invención se pueden emplear solos o en combinación uno con el otro y/u otros moduladores de los receptores de hormona nuclear, u otros agentes terapéuticamente adecuados útiles en el tratamiento de los padecimientos antes mencionados incluyendo: agentes antidiabéticos; agentes anti-osteoporosis; agentes anti-obesidad, agentes anti- inflamatorios, agentes anti-ansiedad, anti -depresores, agentes anti-hipertensivos, agentes anti-plaquetas, agentes anti-trombóticos y trombolíticos , glicósidos cardiacos; agentes que disminuyen los lípidos/colesterol ; antagonistas del receptor mineralocorticoide ; inhibidores de la fosfodiesterasa,-inhibidores de la proteína de tirosina cinasa; miméticos tiroides (incluyendo agonistas del receptor tiroide) ; agentes anabólicos; terapias de VIH o SIDA; terapias útiles en el tratamiento de enfermedad de Alzheimer y otros padecimientos cognitivos; terapias útiles en el tratamiento de trastorno del dormir; agentes anti-proliferativos y agentes anti- tumor. Los ejemplos de los agentes antidiabéticos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen biguanidas (por ejemplo, metformina) , inhibidores de la glucosidasa (por ejemplo, acarbosa) , insulinas (incluyendo secretagogos de la insulina o sensibilizadores de la insulina) , meglitinidas (por ejemplo, repaglinida) , sulfonilureas (por ejemplo, glimepirida, gliburida y glipizida) , combinaciones de biguanida/gliburida (por ejemplo, Glucovance®) , tiazolidindionas (por ejemplo, troglitazona , rosiglitazona , y pioglitazona) , agonistas PPAR-alfa, agonista PPAR-gamma, agonistas duales alfa/gamma PPAR, inhibidores SGLT2 , inhibidores de la glicogen fosforilasa, inhibidores de proteínas de enlace de ácidos grasos (aP2) tales como aquellos descritos en el E.U.A. No. de serie 09/519,079 presentado el 6 de marzo de 2000, inhibidores del péptido-1 del tipo glucagón (GLP-1) , y de la dipeptidil peptidasa IV (DP4) . Los ejemplos de agentes adecuados anti -osteoporosis para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen alendronato, risedronato, PTH, fragmento PTH, raloxifen, calcitonin, agonistas receptores de la progesterona esteroidales o no esteroidales , antagonistas del ligando RA K, antagonistas receptores sensibilizados al calcio, inhibidores TRAP, moduladores receptores de estrógeno selectivos (SERM) , estrógeno e inhibidores AP-1. Los ejemplos de agentes anti -obesidad adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen inhibidores aP2 , tales como aquellos descritos en el E.U.A. No. de serie 09/519,079 presentada el 6 de marzo de 2000, antagonistas gamma PPAR, agonistas delta PPAR, agonistas beta 3 adrenérgicos , tales como AJ9677 (Takeda/Dainippon) , L750355 (Merck) , o CP331648 (Pfizer) u otros agonistas beta 3 conocidos, como se describen en las patentes E.U.A. Nos. 5,541,204, 5,770,615, 5,491,134, 5,776,983 y 5,488,064, un inhibidor de la lipasa tal como el orlistat o como ATL-962 (Alizyme) , un inhibidor de la reabsorción de serotonina (y dopamina) , tal como sibutramina, topiramato (Johnson & Johnson) o axoquina (Regeneron) , un fármaco beta receptor de la tiroides, tal como un ligando receptor de la tiroides como se describe en WO 97/21993 (U. Cal SF) , WO 99/00353 (KaroBio) y GB98/284425 (KaroBio) , y/o un agente anoréctico, tal como la dexamfetamina , fentermina, fenilpropanolamina o mazindol . Los ejemplos de los agentes anti -inflamatorios adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen prednisona, dexametag na , Enbrel® , inhibidores de la ciclooxigenasa (esto es, inhibidores COX-1 y/o COX-2 tal como NSAIDs, aspirina, indometacina, ibuprofen, piroxicam, Naproxen®, Celebrex®, Vioxx®) , agonistas/antagonistas CTLA4-Ig, agonistas del ligando CD40, inhibidores de la IMPDH, tal como antagonistas de integrina de micofenolato (CellCept®) , antagonistas de la alfa-4 beta-7 integrina, inhibidores de adhesión de célula, antagonistas del gamma interferón, ICAM-1, antagonistas del factor de necrosis de tumor (TNF) (por ejemplo, infliximab, OR1384), inhibidores de la síntesis de prostaglandina, budesonida, clofazimina, CNI-1493, antagonistas CD4 (por ejemplo, priliximab) , inhibidores de la proteína cinasa activados por el mitógeno p38, inhibidores de la proteína tirosina cinasa (PTK) , inhibidores IKK, y terapias para el tratamiento de síndrome de intestino irritable (por ejemplo, agentes de abertura Zelmac® y Maxi-K® tales como aquellos descritos en la patente de E.U.A. No. 6,184,231 Bl) . Los ejemplos de los agentes adecuados anti -ansiedad para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen diazepam, lorazepam, buspirona, oxazepam, y pamoato de hidroxizina. Los ejemplos de los antidepresivos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen citalopram, fluoxetina, nefazodona, sertralina, y paroxetina.
Ejemplos de. los agentes anti-hipertensión adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen bloqueadores beta adrenérgicos , bloqueadores del canal del calcio (tipo-L y tipo-T; por ejemplo, diltiazem, verapamil, nifedipina, amlodipino y mibefradil) , diuréticos (por ejemplo, clorotiazida, clorohidrotiazida , flumetiazida, hidroflumetiazida, bendroflumetiazida, metilclorotiazida, triclorometiazida , politiazida, benztiazida, tricrinafen de ácido etacrínico, clortalidóna, furosemida, musolimina, bumetanida, triamtreneno, amilorida, espironolactona) , inhibidores de la renina, inhibidores ACE (por ejemplo, captopril, zofenopril, fosinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, quinapril, ramipril, lisinopril) , antagonistas del receptor AT-1 (por ejemplo, losartan, irbesartan, valsartan) , antagonistas del receptor ET (por ejemplo, sitaxsentan, atrsentan y los compuestos descritos en la patentes E.U.A. Nos. 5,612,359 y 6,043,265), antagonista Dual ET/AII (por ejemplo, los compuestos descritos de WO 00/01389) , inhibidores neutrales de la endopeptidasa (NEP) , inhibidores de la vasopepsidasa (inhibidores duales NEP-ACE) (por ejemplo, omapatrilat y gemopatrilat) , y nitratos. Los ejemplos de los agentes anti -plaquetas adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen bloqueadores GPIIb/lIIa. (por ejemplo. abciximab, eptifibatide , tirofiban) , antagonistas P2Y12 (por ejemplo, clopidogrel, ticlopidine, CS-747) , antagonistas del receptor de tromboxano (por ejemplo, ifetroban) , aspirina, e inhibidores PDE-III (por ejemplo, dipiridamol) con o sin aspirina. Los ejemplos de los glicosidos cardiacos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen digitalis y ouabain. Los ejemplos de los agentes que disminuyen los lípidos/colesterol adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen inhibidores de la HMG-CoA reductasa (por ejemplo, pravastatina, lovastatina, atorvastatina, simvastatina, NK-104 (a.k.a. itavastatina, o nisvastatina o nisbastatina) y ZD-4522 (a.k.a. rosuvastatina, o atavastatina o visastatina) ) , inhibidores de la escualeno sintetasa, fibratos, secuestrantes del ácido biliar, inhibidores ACAT, inhibidores MTP, inhibidores de la lipooxigenasa, inhibidores de la absorción del colesterol, e inhibidores de la proteína de transferencia del éster del colesterol (por ejemplo, CP-529414) . Los ejemplos de los antagonistas del_ receptor mineralocorticoide adecuado para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen espironolactona y eplerinona.
Los ejemplos de los inhibidores adecuados de la fosfodiesterasa , para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen inhibidores PDEIII tales como cilostazol, e inhibidores PDE V tales como el sildenafil . Ejemplos de los miméticos de tiroides adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen tirotropina, politiroide, KB-130015, y dronedarona . Los ejemplos de los agentes anabólicos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen testosterona , TRH dietilestilbesterol , estrógenos, ß-agonistas, teofilina, esteroides anabólicos, deshidroepiandrosterona, encefaliñas, prostaglandinas de la serie E, ácido retinóico y compuestos como se describen en la patente de E.U.A. No. 3,239,345, por ejemplo, Zeranol®; patente de E.U.A. No. 4,036,979, por ejemplo, Sulbenox® o péptidos como se describen en la patente de E.U.A. No. 4,411, 890. Los ejemplos de terapia para el VIH o SIDA adecuadas para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen sulfato de indinavir, saquinavir, mesilato de saquinavir, ritonavir, lamivüdina, zidovudina, combinaciones de la lamivüdina/zidovudina, zalcitabina, didanosina, stavudina, y acetato de megestrol .- Ejemplos de, la terapias adecuadas para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y trastornos cognitivos para su uso en combinación con los. compuestos de la presente invención, incluyen donepezil, tacrina, revastigmina, 5HT6, inhibidores de secretasa gama, inhibidores de la secretasa beta, bloqueadores del canal SK, bloqueadores Maxi-K, y bloqueadores KCNQs . Los ejemplos de la terapias adecuadas para el tratamiento de trastornos del dormir para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen análogos de menatonina, antagonistas del receptor de melatonina, agonistas, agonistas ML1B, y antagonistas del receptor GABA/NMDA. Ejemplos de agentes anti-proliferativos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención, incluyen ciclosporina A, paclitaxel, FK 506, y adriamicina . Ejemplos de los agentes anti -tumor adecuados para su uso en combinación de los compuestos de la presente invención, incluyen paclitaxel, adriamicina, epotilonas, cisplatina y carboplatina . Los compuestos de la presente invención se pueden usar además en combinación con complementos nutricionales tales como aquellos descritos en la patente de E.U.A. 5,179,080, especialmente en combinación con proteína de suero de la leche o caseína, aminoácidos (tal como leucina, aminoácidos ramificados e hidroximetilbutirato) , triglicéridos , vitaminas (por ejemplo, A, B6, B12, folatos, C, D y E) , minerales (por ejemplo, selenio, magnesio, zinc, cromo, calcio y potasio) , carnitina, ácido lipóico, creatina, y coenzima Q-10. Además, se pueden usar los compuestos de la presente invención en combinación con agentes terapéuticos usados en el tratamiento de la disfunción sexual, incluyendo pero no limitado a inhibidores PDE5 , tal como inhibidores sildenafil o IC-351; con un agente anti-resorción, terapias de reemplazo de hormonas, análogos de vitamina D, calcitoninas , complementos de calcio y calcio elemental, inhibidores de la catepsina K, inhibidores M P, antagonistas receptores de la vitronectina, antagonistas Src SH2, inhibidores vaculares de la -H+- ATPasa, agonistas receptores de progesterona, ipriflavona, fluoruro, antagonistas RA K, PTH y sus análogos y fragmentos, Tibolona, inhibidores de la HMG-CoA reductasa, SERM's, inhibidores p38, prostanoides , inhibidores de la 17-beta hidroxiesteroide deshidrogenasa e inhibidores de la Src cinasa . Los compuestos de la presente invención se pueden usar en combinación con anticonceptivos masculinos tales como el nonoxinol 9, o agentes terapéuticos para el tratamiento de la pérdida del cabello tal como el minoxidil y finasteride o agentes quimioterapéuticos tales como los agonistas LHRH.
Por su uso .preferido anti-cáncer o anti-angiogénico, los compuestos de la presente invención se pueden administrar solos o en combinación con otros agentes anti-cáncer y citotóxicos y tratamientos útiles en el tratamiento del cáncer o de otras enfermedades proliferativas , por ejemplo, en donde el segundo fármaco tiene un mecanismo de acción igual o diferente que los compuestos actuales de fórmula I. Los ejemplos de las clases de agentes anti-cáncer y citotóxicos útiles en combinación con los compuestos actuales, incluyen pero no se limitan a: agentes alquilantes tales como mostaza de nitrógeno, sulfonatos de alquilo, nitrosoureas , etileniminas y triazenos; inhibidores EGFR tales como inhibidores EGFR de molécula pequeña, anticuerpos EGFR tales como C225 (Erbitux) ; antimetabolitos tales como antagonistas de folato, análogos de purina y análogos de pirimidina; antibióticos tales como antraciclinas , bleomicinas, mitomicina, dactinomicina, y plicamicina ; enzimas tales como L-asparaginasa ; inhibidores de la transferasa de la proteína de farnesilo; inhibidores de la 5a reductasa; inhibidores de la deshidrogenasa 17p-hidroxi esteroide tipo 3 o tipo 1; agentes hormonales tales como glucocorticoides , estrógenos o anti -estrógenos , andrógenos/anti -andrógenos , progestinas, y antagonistas de la hormona liberadora de la hormona luteinizante, acetato de octreótido agentes disruptores de microtúbulos , tales como ecteinascidinas o análogos y derivados; agentes estabilizantes de microtúbulos tales como taxanos, por ejemplo, paclitaxel (Taxol®) , docetaxel (Taxotere®) , y sus análogos, y epotilonas, tales como las epotilonas A-F y sus análogos; productos derivados de plantas tales como alcaloides vinca, epipodofilotoxinas , taxanos; e inhibidores de la topoisomerasa; inhibidores de la prenil -proteína transferasa; y agentes diversos tales como hidroxiurea, procarbazina, mitotano, hexametilmelamina , complejos de coordinación de platino tales como cisplatina y carboplatina ; y otros agentes usados como agentes citotoxicos y anti-cáncer tales como los modificadores de la respuesta biológica, factores de crecimiento; moduladores inmunes y anticuerpos monoclonales . Los compuestos de la invención también se pueden usar en conjunto con terapia de radiación. Los ejemplos representativos de esta clases de agentes anti-cáncer y citotoxicos, incluyen pero no se limitan a clorohidrato de mecloretamina, ciclofosfamida , clorambucil, melfalan, ifosfamida, busulfan, carmustin, lomustina, semustina, estreptozocina, tiotepa, dacarbazina, metotrexato, tioguanina, mercaptopurina , fludarabina, pentastatin, cladribin, citarabina, fluorouracil , - clorohidrato de doxorubicina, daunorubicina, idarubicina, sulfato de bleomicina, mitomicina C, actinomicina D, safracinas, saframicinas , quinocarcinas , discodermolidos , vincristina, vinblastina, tartrato de vinorelbina, etopósido, fosfato de etopósido, tenipósido, paclitaxel, tamoxifen, estramustina, fosfato sodio estramustina, flutamida, buserelin, leuprolide, pteridinas, diyneses, levamisol, aflacón, interferón, interleucinas , aldesleucina, filgrastim, sargramostim, rituximab, BCG, tretinoin, clorohidrato de irinotecan, betametosona, clorohidrato de gemcitabina , altretamina , y topoteca y cualesquiera de los análogos o derivados de los mismos. Los miembros preferidos de estas clases incluyen, pero no se limitan a paclitaxel, cisplatin, carboplatin, doxorubicina, carminomicina , daunorubicina, aminopterin, metotrexato, metopterina, mitomicina C, ecteinascidin 743, o pofiromicina, 5-fluorouracil, 6-mercaptopurina, gemcitabina, arabinósido de citosina, podofilotoxina o derivados de la podofilotoxina tales como el etopósido, fosfato de etopósido o tenipósido, melfalan, vinblastina, vincristina, leurosidina, vindesina y leurosina. Los ejemplos de los agentes anti-cáncer y otros citotóxicos, incluyen los siguientes: derivados de la epotilona como se encuentran en la patente alemana No. 4138042.8; WO 97/19086, WO 98/22461, WO 98/25929, WO 98/38192, WO 99/01124, WO 99/02224, WO 99/02514, WO 99/03848, O 99/07692, WO 99/27890, WO 99/28324, WO 99/43653, WO 99/54330, WO 99/.54318, WO 99/54319, WO 99/65913, WO 99/67252, WO 99/67253 y WO 00/00485; inhibidores de la cinasa dependientes de la ciclina como se encuentran en WO 99/24416 (ver también la patente de E.U.A. No. 6,040,321); e inhibidores de la prenil-proteína transferasa como se encuentran en WO 97/30992 y WO 98/54966; y agentes tales como aquellos descritos genéricamente y específicamente en la patente de E.U.A No. 6,011,029 (los compuestos de cuya patente de E.U.A. se pueden emplear junto con cualesquiera moduladores NHR (incluyendo pero no limitado a aquellos de la presente invención) tales como moduladores AR, moduladores ER, con moduladores LHRH o con castración quirúrgica especialmente en el tratamiento del cáncer) . Las combinaciones de la presente invención, también se pueden formular o co-administrar con otros agentes terapéuticos que se seleccionan por su utilidad particular en la administración de terapias asociadas con las condiciones antes mencionadas. Por ejemplo, los compuestos de la invención se pueden formular con agentes para evitar náusea, hipersensibilidad e irritación gástrica, tales como los antieméticos, y antihistamínicos Hi y ¾ . En cuanto a lo que se refiere al tratamiento del cáncer, los compuestos de esta invención se usan preferiblemente solos o en combinación con tratamientos anti-cáncer tales como terapia de radiación y/o con agentes cátostáticos y/o citotóxicos , tales como, pero no limitados a agentes interactivos del ADN, tal como cisplatina o doxorubicina ; inhibidores de la farnesil proteína transferasa, tales como aquellos descritos en la patente de E.U.A. No. 6,011,029; inhibidores de la topoisomerasa II, tales como el etopósido, inhibidores de topoisomerasa I, tal como CPT-11 o topotecan; agentes estabilizantes tales como paclitaxel, docetaxel, otros taxanos, o epotilonas; agentes hormonales, tales como el tamoxifen; inhibidores de la timidilato sintasa, tal como el 5-fluorouracil ; antimetabolitos , tal como el metatotrexato; agentes antiangiogénicos , tal como la angiostatina, ZD6474, ZD6126 y comberstatina A2 ; inhibidores de la cinasa, tales como anticuerpos específicos her2 , inhibidores Iressa y CDK; inhibidores de la histona desacetilasa, tal como CI-994 y MS-27-275. Tales compuestos se pueden combinar con agentes que suprimen la producción de testosterona en circulación tales como los agonistas o antagonistas de LHRH o con castración quirúrgica. Las terapias de combinación ejemplares (por ejemplo, para el tratamiento del cáncer de próstata) para su uso con un compuesto de la presente invención incluyen un modulador LHRH o prednisona. La presente invención también contempla kit(s), por ejemplo, para el tratamiento del cáncer de próstata que comprenden un primer recipiente (tal como, un vial) que contiene una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención, el compuesto opcionalmente en un portador farmacéuticamente aceptable, y un segundo recipiente (tal como un vial) que contiene una formulación farmacéutica que comprende uno o más agentes (tal como un modulador LHRH) para usarse en combinación con el compuesto de la presente invención, los agentes opcionalmente en un portador armacéuticamente aceptable. Por ejemplo, las terapias conocidas para el cáncer avanzado metastático de la próstata, incluyen una "terapia de ablación de andrógeno completa" en donde se inhibe el crecimiento del tumor al controlar el suministro de andrógeno a los tejidos de próstata por medio de castración química (la castración sirve para inhibir la producción de la testosterona en circulación (T) y la dihidrotestosterona (DHT) ) seguido por la administración de antagonistas del receptor andrógeno (AR) (que inhibe la función T/DHT derivada de la conversión de los precursores de andrógeno en circulación a T/DHT por el tejido de la próstata) . Los compuestos de la presente invención, se pueden emplear como antagonistas AR en una terapia completa de ablación, solos o en combinación con otros antagonistas AR tales como Flutamida, Casodex, Nilutamide, o acetato de Ciproterona. La presente invención proporciona compuestos que se pueden usar para tratar pacientes que padecen de cáncer de próstata, resistente a los antagonistas receptores de andrógenos que no están dentro de la fórmula I de la invención (o sales de los mismos), tal como la bicalutimida . La invención contempla así además, un método para el tratamiento de cáncer de próstata resistente a un antagonista receptor de andrógeno, diferente de aquellos de la fórmula I o sales de los mismos, que comprende la etapa de administrar a un paciente que necesita del mismo un compuesto capaz de reducir la tasa de crecimiento de la masa de tumor del cáncer en una cantidad efectiva del mismo. El término "reducir la tasa de crecimiento de la masa de tumor" denota la reducción en la tasa de crecimiento (incluyendo, por supuesto, la estabilización o reducción en el tamaño) de la masa de tumor con tratamiento con relación a la tasa de crecimiento con tratamiento con el ' antagonista receptor del andrógeno, diferente a aquellos de fórmula I o sales de los mismos. Los compuestos de la fórmula I y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos de la presente invención, se prefieren tales compuestos. La presente invención también contempla el uso de un inhibidor anti-estrógeno y/o de aromatasa, en combinación con un compuesto de la presente invención, por ejemplo, para ayudar a mitigar los efectos laterales- asociados con la terapia antiandrógeno · tal como la ginecomastia . Los inhibidores ejemplares anti-estrógenos y/o aromatasa incluyen el anastrozol (Arimidex) , citrato de tamoxifen (Nolvadex) , exemestano (Aromasin) , citrato de toremifen (Fareston) , letrozol (Femara) , clorohidrato de raloxifen (Evista) , Faslodex, o 923 (Wyeth Ayerst) . Los compuestos de la presente invención se pueden emplear adyuvantes con la cirugía. Otra aplicación de los compuestos actuales es en combinación con la terapia de anticuerpos tal como pero no limitada a terapia de anticuerpos contra PSCA. Una aplicación adicional es en conjunto con agentes moduladores inmunes/vacunas para el tratamiento del cáncer. Los compuestos de la presente invención se pueden emplear de conformidad con los métodos descritos en la solicitud de patente provisional de E.U.A. No. de serie 60/284,438, titulada "Moduladores receptores de andrógenos selectivos y métodos para su identificación, diseño y uso" presentada el 18 de abril del 2001 por Mark E. Salvati et al., (Archivo del agente No. LD0250 (PSP) ) , la solicitud de patente provisional se incorpora en la presente como referencia en su totalidad (incluyendo pero no limitándose a la referencia a todos los compuestos específicos dentro de la fórmula I de la presente invención) y la solicitud de patente E.U.A. No. de serie 09/885,827, titulada "Moduladores receptores de andrógeno selectivos y métodos para su identificación, diseño y uso" presentada el 2J0 Junio de 2001 por Mark E. Salvati et al., (Archivo del agente No. LD0250 (NP) ) , la solicitud de patente se incorpora en la presente como referencia en su totalidad (incluyendo pero no limitado a, la referencia a todos los compuestos específicos dentro de la fórmula I de la presente invención) . Para los racematos de los compuestos de la presente invención, un enantiómero puede por ejemplo, ser un antagonista completo AR mientras que el otro pueden ser un antagonista AR en tejido de tumor, mientras que no tenga actividad o actividad agonista en tejidos que no son de tumor que contienen el receptor andrógeno. Los otros agentes terapéuticos anteriores, cuando se emplean en combinación con los compuestos de la presente invención, se pueden usar por ejemplo, en aquellas cantidades indicadas en Physicians' Desk Reference (PDR) o como se determine de otra manera por alguien experto en la técnica. Se pueden emplear los siguientes ensayos para determinar la actividad de un compuesto como un modulador NHR. Se prefieren aquellos compuestos con una actividad superior a 20µ?? para el enlace o transactivación en cualquiera de estos ensayos. Se determinaron diversos compuestos de la presente invención por tener una actividad del modulador AR, utilizando el ensayo de transactivación ' y los ensayos de enlace estándar AR como se describen a continuación.
Ensayos de transactivación: Ensayos específico de AR: Se probaron los compuestos de la presente invención, en ensayos de transactivación de un constructo reportero transfectado y usando el receptor andrógeno endógeno de las células hospedadoras . El ensayo de transactivación, proporciona un método para la identificación de agonistas funcionales y agonistas parciales que imitan, o antagonistas que inhiben, el efecto de las hormonas de origen, en este caso, la dihidrotestoterona (DHT) . Este ensayo se puede usar para predecir la actividad in vivo, ya que hay una buena correlación en ambas series de datos. Ver por ejemplo, T. Berger et al., J. Steroid Biochem. Molec. Biol . 773 (1992), la descripción de la cual se incorpora en la presente como referencia. Para el ensayo de transactivación, se introduce un plásmido reportero por transfección (un procedimiento para inducir a las células a tomar genes externos) dentro de las células respectivas. Este plásmido reportero, comprende el ADNc para una proteína reportera, tal como la fosfatasa alcalina secretada (SEAP) , controlada por las secuencias en la dirección ascendente del oxígeno específico de la próstata (PSA) que contiene elementos de respuesta de andrógenos (AREs) . Este plásmido reportero funciona como un reportero para la actividad moduladora de la transcripción del AR. Así, el reportero actúa como un substituto para los productos (mARN después proteína) que se expresan normalmente por un gen bajo el control del AR y su hormona de origen. Con objeto de detectar los antagonistas, se lleva a cabo el ensayo de transactivación en presencia de una concentración constante de la hormona natural AR (DHT) que se conoce que induce una señal reportera definida. Las concentraciones crecientes del antagonista sospechoso, disminuirán la señal del reportero (por ejemplo, la producción SEAP) . Por otro lado, al exponer las células transíectadas a concentraciones crecientes de un agonista sospechoso se incrementará la producción de la señal de1 reportero . Para este ensayo, se obtuvieron células LNCaP y MDA 453 de American Type Culture Collection (Rockville, MD) , y se mantuvieron en RPMI 1640 o en un medio DMEM complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS; Gibco) respectivamente. Las células respectivas se transíectaron transitoriamente por electroporación según el procedimiento optimizado descrito por Heiser, 130 Methods Mol. Biol . , 117 (2000), con el plásmido reportero potenciador/pSEAP2/PSA540. El plásmido reportero se construyó como sigue: se utilizó ADN genómico de placenta humana comercial, para generar la reacción del ciclo de polimerasa (PCR) un fragmento que contenía el sitio BglII (posición 5284) y el sitio Hind III en la posición 5831 del promotor del antígeno específico de la próstata humana (número de acceso U37672) , Schuur, et al., J. Biol . Chem. , 271 (12) : 7043-51 (1996) . Este fragmento se sub-clonó en un pSEAP2/básico (Clontech) digerido previamente con BglII y Hindlll para generar el constructo pSEAP2/PSA540. Después, se amplificó un fragmento que soportaba al fragmento de la secuencia en la dirección ascendente de PSA humana entre las posiciones -5322 y -3873 por PCR, a partir del ADN genómico de placenta humana. Se introdujeron los sitios Xhol y a BglII con los cebadores. El fragmento resultante se sub-clonó en pSEAP2/PSA540 digerido con Xhol y BglII respectivamente, para generar el constructo pSEAP2/PSA540/potenciador . Se recolectaron células LNCaP y MDA 453 en medios que contenían 10% de carbón mineral agotado en FBS . Cada suspensión de célula se distribuyó en dos cubas Gene Pulser (Bio-Rad) que recibieron después 8 µg del constructo reportero y se trataron por electroforesis usando un pulsador de genes Bio-Rad a 210 voltios y 960 µ Faraday. Después de la transfección se lavaron e incubaron las células con medios que contenían suero de bovino fetal agotado con carbón mineral, en ausencia (blanco) o presencia (control) de dihidrotetosterona 1 nM (DHT; Sigma Chemical) y en presencia o ausencia de la bicalutamida anti-andrógeno estándar, o compuestos de la presente invención en concentraciones que van desde 10-10 a 10-5 M (muestra) . Se usaron los duplicados para cada muestra.
Las diluciones _ del compuesto se llevaron a cabo en una estación de trabajo de laboratorio Biomek 2000. Después de 48 horas, se ensayó una fracción del sobrenadante para la actividad SEAP usando el sistema de ensayo de gen reportero quimioluminiscente Phospha-Light (Tropix, Inc) . Se determinó la viabilidad de las células restantes usando el ensayo de proliferación de célula no radioactivo acuoso CellTiter 96 (MTS Assay, Promega) . Brevemente, se agregó a las células una mezcla de un compuesto de tetrazolio (3 - (4 , 5-dimetiltiazol -2 -il) -5- (3-carboximetoxifenil) -2- (4-sulfofenil) -2H-tetrazolio, sal interior; MTS) y un reactivo de acoplamiento de electrones (metosulfato de fenazina; PMS) . El MTS (reactivo de Owen) se bioredujo por las células en formazan que es soluble en un medio de cultivo de tejido, y por lo tanto se puede medir la absorbancia a 490nm directamente de placas de ensayo de 96 pozos sin procesamiento adicional . La cantidad de producto de formazan como se mide por la cantidad de la absorbancia de 490nm es directamente proporcional al número de células vivas en cultivo. Para cada replicado, se normalizó la lectura SEAP por el valor Abs490 derivado del ensayo MTS. Para el modo antagonista, se calculó el porcentaje de inhibición como: % Inhibición = 100 x (1 - [control promedio - blanco promedio / muestra promedio - blanco promedio] ) Se graficar.on los datos y la concentración del compuesto que inhibía al 50% del SEAP normalizado se cuantificó (ICS0) .
Para el modo agonista, el porcentaje de control se refirió como el efecto del compuesto de prueba en comparación con el efecto máximo observado con la hormona natural, en este caso DHT, y se calculó como: % Control = 100 x muestra promedio - blanco promedio / control promedio - blanco promedio. Se graficaron los datos y la concentración del compuesto que activa hasta niveles del 50% del SEAP normalizado para el control se cuantificó (EC¾o) .
Ensayo de Especificidad GR: El plásmido reportero utilizado comprendía el ADNc para la proteína reportera SEAP, como se describe para el ensayo de transactivación específico de AR. Se controló la expresión de la proteína reportera SEAP por las secuencias de repetición de la terminal larga del virus del tumor mamario de ratón (MMTV LTR) que contienen 3 elementos de respuesta a hormonas (HREs) que se pueden regular por GR y PR ver, por ejemplo, G. Chalepakis et al., Cell, 53(3), 371 (1988). Este plásmido se transfectó en células A549, que expresan el GR endógeno, para obtener un ensayo de transactivación específico de GR. Se obtuvieron las células A549 de American Type Culture Collection (Rockville, MD) , y se, mantuvieron en RPMI 1640 complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS; Gibco) . La determinación de la actividad antagonista específica de GR de los compuestos de la presente invención, fue idéntica con aquella descrita para el ensayo de transactivación específico de AR, excepto de que el DHT se reemplazó con dexametasona 5 nM (Sigma Chemicals) , un agonista específico para GR. La determinación de la actividad agonista específica de GR de los compuestos de la presente invención, se llevó a cabo como se describe en el ensayo de transactivación de AR, en donde se mide la activación del sistema reportero específico GR por la adición de un compuesto de prueba, en ausencia de un ligando agonista específico de GR conocido.
Ensayo específico PR: El plásmido reportero utilizado comprendía del ADNc para la proteína reportera SEAP, como se describe para el ensayo de transactivación específico de AR. La expresión de la proteína reportera SEAP se controló por la secuencia de la repetición de la terminal larga del virus del tumor mamario de ratón (MMTV LTR) que contiene 3 elementos de respuestas de hormonas (HREs) que se pueden regular por GR y PR. Este plásmido se transfectó en T47D, que expresa el PR endógeno para obtener un ensayo de transactivación específico PR. Las células T47D se obtuvieron de American. Type Culture Collection (Rockville, MD) , y se mantuvieron en medio de DMEM complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS; Gibco) . La determinación de la actividad antagonista específica de PR de los compuestos de la presente invención, fue idéntica con aquella descrita para el ensayo de transactivación específico de AR, excepto que el DHT se reemplazó con Promegastona 1 nM (NEN) , un agonista específico para PR. La determinación de la actividad agonista específica de PR de los compuestos de la presente invención, se llevó a cabo como se describe el ensayo de transactivación AR, en donde se mide la activación del sistema reportero específico PR por la adición de un compuesto de prueba, en ausencia de un ligando de agonista conocido específico PR.
Ensayo de Enlace AR: Para el ensayo de enlace de célula completa, las células humanas LNCaP (T877A imitante AR) o MDA 453 (AR de tipo silvestre) en placas de microtitulación de 96-pozos que contienen RP I 1640 o DMEM complementado con CA-FBS agotado con carbón mineral al 10% (Cocaleco Biologicals) respectivamente, se incubaron a 37°C para eliminar cualquier ligando endógeno que pudiera formar complejos con los receptores en las células. Después de 48 horas se efectuaron, un análisis de saturación para determinar la ¾ para la dihidrotestosterona titulada, [3H] -DHT, o un ¾nsayo de enlace competitivo para evaluar la capacidad de los compuestos de prueba para competir con [3H]-DHT. Para el análisis de saturación, se agregaron a la células medios (RPMI 1640 o DMEM - 0.2% CA-FBS) que contenían [3H] -DHT (en concentraciones que van de 0.1 nM a 16 nM) en ausencia (enlace total) o presencia (enlace no específico) de un exceso molar de 500 -veces de DHT sin etiquetar. Después de 4 horas a 37°C, se separó una alícuota de los medios de enlace totales en cada concentración de [3H] -DHT para estimar la cantidad de [3H] -DHT libre. Los medios restantes se separaron, se lavaron las células 3 veces con PBS y se cosecharon sobre placas UniFilter GF/B (Packard) , Microscint (Packard) se agregó y la placas se contaron en un Top-Counter (Packard) para evaluar la cantidad de [3H] -DHT enlazado. Para el análisis de saturación, se definió como un enlace específico la diferencia entre el enlace total y el enlace no específico. El enlace específico se evaluó por análisis Scatchard para determinar la ¾ para [3H]-DHT. Ver por ejemplo, D. Rodbard, athematics y statistics of ligand assays: an illustrated guide : In: J. Langon y J. J. Clapp, eds . , Ligand Assay, Masson Publishing U.S.A., Inc. New York, pp. 45-99, (1981), la descripción de la cual se incorpora en la presente como referencia. Para los estudios- de competencia se agregaron a las células medios que contenían [3H] -DHT 1 nM y. los compuestos de la invención, ("compuestos de prueba") en concentraciones que iban desde 10~10 hasta 10"5 . Se utilizaron dos réplicas para cada muestra. Después de 4 horas a 37°C, se lavaron las células, se cosecharon y cortaron como se describe arriba. Se graficaron los datos como la cantidad de [3H] -DHT (% de control en ausencia del compuesto de prueba) que restaba sobre el rango de respuesta de la prueba de dosis para un compuesto dado. La concentración de un compuesto de prueba que inhibió 50% de la cantidad de [3H] -DHT enlazada en ausencia de un ligando en competencia, se cuantificó (IC50) después de una transformación log-logit. Los valores ¾ se determinaron por aplicaciones de la ecuación de Cheng-Prusoff a los valores IC50, en donde: (1 + (3H-DHT) / ¾ por 3H-DHT) Después de corregir por el enlace no específico, se determinaron los valores IC50. El IC5o se define como la concentración del ligando en competencia necesaria para reducir el enlace específico por 50%. Las K¿ para [3H] -DHT para MDA 453 y LNCaP fueron 0.7 y 0.2 nM respectivamente.
Ensayo de proliferación de células de próstata humana Los compuestos de la presente invención se probaron ("compuestos de prueba") en la proliferación de las líneas celulares de cáncer de próstata humana. £?ara ello, las células MDA PCa2b, una línea celular derivada de la metástasis de un paciente que falló en la castración, Navone et al., Clin. Cáncer Res., 3, 2493-500 (1997), se incubaron con o sin los compuestos de prueba por 72 horas y se cuantificó la cantidad de [3H] -timidina incorporada en el ADN como una manera de evaluar el número de células y por lo tanto la proliferación. La línea celular MDA PCa2b se mantuvo en medios BRFF-HPC1 (Biological Research Faculty & Facility Inc., MD) complementados con FBS al 10%. Para el ensayo se colocaron células en microplacas de 96-pozos biorecubiertas y se incubaron a 37°C en FBS al 10% (agotado con carbón mineral) /BRFF-BMZERO (sin andrógenos) . Después de 24 horas, las células se trataron en ausencia (blanco) o presencia de DHT 1 nM (control) o con compuesto de prueba (muestra) de la presente invención en concentraciones que van desde 10"10 a 10"5 M. Se usaron los duplicados para cada muestra. Las diluciones del compuesto se llevaron a cabo en una estación de trabajo del laboratorio Biomek 2000. 72 horas después se agregaron 0.44 uCi de [3H] -Timidina (Amersham) por pozo, y se incubaron por otras 24 horas seguidas por la tripsinizacion, cosechando las células en filtros GF/B. Se agregó PS de micro-escintilación a los filtros, antes de contarlos en un contador TopCount Beckman. El % de inhibición se calculó como: % de Inhibición . = 100 x (1 - [promediocontroi - promediobianco / promediomuestra - promediObiancol ) Se graficaron los datos y la concentración del compuesto que inhibía 50% de la incorporación de [3H] -Timidina se cuantificó (IC50) .
Ensayo de transactivación de los Mioblastos de ratón C2C12: Se desarrollaron 2 ensayos de transactivación funcional para evaluar la eficacia de los agonistas de andrógenos en un respaldo de células de músculo usando un reportero de luciferasa. El primer ensayo (ARTA estable 1) utiliza una línea de célula, estable 1 (clon #72) , que expresa establemente el receptor andrógeno de rata de longitud completa, pero requiere de la transfección transitoria de un potenciador/reportero . Esta línea celular se derivó de células de mioblasto de ratón C2C12. El segundo ensayo (ARTA estable 2) utiliza una línea celular, estable 2 (clon #133), derivada de estable 1 que expresa establemente el rAR y el reportero de luciferasa/potencionador . El constructo de reportero/potenciador usado en este sistema es pGL3/2XDR-l/luciferasa . Se reportó el 2XDR-1 por ser un elemento de respuesta específico de AR en células CV-1. Brown et . al., The Journal of Biological Chemistry 272, 8227-8235, (1997) . Se desarrolló por mutagénesis aleatoria de una secuencia potenciadora de consenso AR/GR.. estable 1: Se colocaron en placas células estables 1 en un formato de 96 pozos a 6,000 células/pozo en DMEM de alta glucosa sin rojo de fenol (Gibco BRL, Cat . No.: 21063-029) que contenía 10% de carbón mineral y dextrano tratado con FBS (HyClone Cat. No.: SH30068.02), solución amortiguadora HEPES 50 mM (Gibco BRL , Cat. No.: 15630-080), IX MEM de Piruvato de sodio (Gibco BRL, Cat. No.: 11360-070), 0.5X Antibiótico-Antimicótico , y 800 9/?t?1 Geneticina (Gibco BRL, Cat. No.: 10131-035). 48 horas después se transfectaron las células con pGL3/2XDR-l/luciferasa usando un reactivo LipofectAMINE Plus™ (Gibco BRL, Cat. No.: 10964-013). Específicamente, 5 ng/pozo pGL3/2XDR-l/luciferasa ADN y 50 ng/pozo de ADN de esperma de salmón (como portador) se diluyeron con 5 µ?/???? de medios Opti-MEMem (Gibco BRL, Cat. No.: 31985-070) . A esto se le agregó 0.5 µ?/???? de reactivo plus. Esta mezcla se incubó por 15 minutos a temperatura ambiente. En un recipiente separado, se diluyeron 0.385 µ?/???? de reactivo de LipofectAMINE con 5 µ?/???? de Opti-MEM. La mezcla de ADN se combinó después con la mezcla del lipofectAMINE y se incubó por 15 minutos adicionales a temperatura ambiente. Durante este tiempo, se separaron los medios de las células y se reemplazaron con 60 µ1/-???? de Opti-MEM. A esto se le agregó 10 µ?/???? de una mezcla de transfección de ADN/LipofectAMINE . Las células se incubaron por 4 horas. 3. La mezcla de transfección se separó de las células y se reemplazó con 90 µ? de medios como en el número 1 arriba . 4. Se colocaron en cada pozo 10 µ?/???? de una dilución apropiada de fármacos . 5. 24 horas después se usó el sistema de ensayo de luciferasa Steady-Glo™ para detectar la actividad según las instrucciones.de los fabricantes (Promega, Cat . No.: E2520) .
ARTA estable 2 1. Se colocaron en placas células estables 2 en un formato de 96 pozos a 6,000 células/pozo en DMEM de alta glucosa sin rojo de fenol (Gibco BRL, Cat. No.: 21063-029) que contenía 10% de carbón mineral y dextrano tratado con FBS (HyClone Cat. No.: SH30068.02), solución amortiguadora HEPES 50 mM (Gibco BRL, Cat. No.: 15630- 080), IX MEM de Piruvato de sodio (Gibco BRL, Cat. No.: 11360-070), 0.5X . Antibiótico-Antimicótico , 800 µg/ml Geneticina (Gibco BRL, Cat. No.: 10131-035) y 800 µg/ml de Higromicina ß (Gibco, BRL, Cat. No.: 10687-010). 2. 48 horas después, se separaron los medios en la célula y se reemplazaron con 90 µ? de solución fresca. Se colocaron 10 µ?/???? de una dilución adecuada de fármaco en cada pozo. 3. 24 horas después, se usó el sistema de ensayo de luciferasa Steady-GloTM para detectar la actividad de conformidad con la instrucciones del fabricante (Promega, Cat . No.: E2520) . Ver la solicitud No. de serie de patente E.U.A. 09/885,831, titulada "Líneas celulares y ensayos basados en células para la identificación de moduladores receptores de andrógeno" presentada el 20 junio de 2001 por Jacek Ostrowski et al., (archivo del abogado No. D0177) , cuya solicitud de patente se incorpora en la presente como referencia en su totalidad.
Ensayos de proliferación Ensayo de proliferación de células de mama murino; La capacidad de los compuestos de la presente invención ("compuestos de prueba") para modular la función del AR, se determinó al probar los compuestos en un ensayo de proliferación usando la línea de célula de mama de- murino con respuestas a andrógenos derivada del tumor de Shionogi, Hiraoka et al., Cáncer Res., 47, 6560-6564 (1987). Se establecieron clones estables dependientes de AR de la línea de Shionogi parental, al pasar fragmentos de tumor bajo los procedimientos generales descritos generalmente en Tetuo, et . al., Cáncer Research 25, 1158-1175 (1965). Del procedimiento anterior se aisló en una línea estable, SC114, caracterizada y utilizada para la prueba de los compuestos del ejemplo. Se incubaron las células SC114 con o sin los compuestos de prueba por 72 horas, y se cuantificó la cantidad de [3H] -timidina incorporada en el ADN, como un punto final substituto para evaluar el número de células, y por lo tanto la tasa de proliferación como se describe en Suzuki et . al., J. Steroid Biochem. Mol. Biol . 37,559-567 (1990). La línea celular SC114 se mantuvo en MEM que contenía 10"B M de testosterona y FCS tratado con DCC al 2%. Para el ensayo, las células se colocaron en microplacas de 96-pozos en los medios de mantenimiento y se incubaron a 37°C. Al día siguiente se cambió el medio a un medio libre de suero [Ham F-12:MEM (1;1, v/v) que contenía 0.1% BSA] con (modo antagonista) o sin (modo agonista) testosterona 10"3 M y los compuestos de prueba de la presente invención en concentraciones que iban desde 10"10 a 10"5 M. Se usaron duplicados para cada muestra. Las diluciones de compuestos se llevaron a cabo en una estación de trabajo de laboratorio Biomek 2000. 72· horas después, se agregaron 0.44 uCi de [3H] -Timidina (Amersham) por pozo y se incubaron por otras 2 horas después de la tripsinización, y se cosecharon las células sobre filtros GF/B. Se agregó el PS de micro-escintilación a los filtros antes de contarlos en un contador TopCount Beckman. Para el modo antagonista, se calculó el % de inhibición como : % Inhibición = 100 x ( 1 - [promediomuestra - promediojanco / promediocontroi - promediobianco] ) Se graficaron los datos y se cuantificó la concentración del compuesto que inhibió el 50% de la incorporación de [3H] -timidina (IC50) . Para el modo agonista, se refirió el % de control como el efecto del compuesto probado en comparación con el efecto máximo observado con la hormona natural, en este caso de DHT, y se calculó como: % Control = 100 x (promediomuestra - promediObianco) / (promediocontroi - promedio blanco) Se graficaron los datos y la concentración del compuesto que inhibió el 50% de la incorporación de [3H] -Timidina se cuantificó (EC50) .
Ensayo in vitro para medir la transrepresión de AP-1 inducida por GR : El ensayo AP-1 es un ensayo del reportero de luciferasa basado en células. Las células A549, que contienen al receptor glucocorticoide endógeno, se . transíectaron establemente con un sitio de enlace de ADN AP-1 colocado al gen de luciferasa. Las células se hacen crecer después en RPMI + suero de becerro fetal al 10% (tratado con carbón mineral) + Penicilina/Estreptomicina con 0.5 mg/ml de geneticina. Se colocan en placas las células el día anterior al ensayo a aproximadamente 40000 células/pozo. El día del ensayo, se separan los medios por aspiración, y se agregan 20 µ? de solución amortiguadora de ensayo (RPMI sin rojo de fenol + 10% PCS (carbón mineral tratado) + Pen/Strep) a cada pozo. En este punto, se agregan a cada pozo 20 µ? de solución amortiguadora de ensayo (experimentos de control) , los compuestos de la presente invención ("compuestos de prueba") (disueltos en DMSO y se agregaron a concentraciones variables) o dexametasona (100 nM en DMSO, control positivo) . Las placas se pre incuban después por 15 minutos a 37°C, seguido por la estimulación de las células con PMA 10 ng/ml . Las placas se incuban después por 7 horas a 37°C después de lo cual, se agrega a cada pozo un reactivo de sustrato de luciferasa en 40 µ? . Se mide la actividad por análisis en un medidor de luminosidad en comparación con los experimentos de control tratados con solución amortiguadora o dexametasona. La actividad se designa como el porcentaje de inhibición del sistema reportero en comparación con el control de solución amortiguadora con PMA solo con 10 ng/ml. El control, dexametasona, a una concentración de <10 µ?, suprime típicamente la actividad por 65%. Los compuestos de prueba que demuestran una inhibición de la inducción del PMA del 50% o superior a una concentración del compuesto de prueba de <10 µ? se consideran activos.
Ensayo antagonista AR del ensayo de peso de próstata en húmedo : La actividad de los compuestos de la presente invención como antagonistas AR, se investigó en un modelo inmaduro de rata macho, una prueba estándar reconocida de la actividad anti-andrógeno de un compuesto dado como se describe en L. G. Hershberger et al., Proc . Soc . Expt . Biol . Med. , 83, 175 (1953); P. C. Walsh y R. P. Gittes, "Inhibition of extratesticular stimuli to prostate growth in the castrated rat by ant androgens" , Endocrinology, 86, 624 (1970); y B. J. Furr et al., "ICI 176,334: A novel non-steroid, peripherally selective antiandrogen" , J. Endocrinol . , 113, R7-9 (1987), las descripciones de las cuales se incorporan en la presente como referencia. La base de este ensayo es el hecho de que los órganos accesorios sexuales masculinos, tales como la próstata y las vesículas seminales, juegan un papel importante en la función reproductora. Estas glándulas se estimulan para crecer y se mantienen en tamaño y la función secretora por la presencia continua de testosterona de suero (T) que es el andrógeno principal de suero (>95%) producido por la células Leydig en los testículos bajo el control de la hormona pituitaria luteinizante (LH) y la hormona estimuladora del folículo (FSH) . La testosterona se convierte a la forma más activa, dihidrotestosterona, (DHT) , dentro de la próstata por la 5a-reductasa. Los andrógenos adrenales también contribuyen a alrededor de 20% del DHT en la próstata de la rata, en comparación con el 40% de aquella en hombres de 65 años de edad. F. Labrie et al., Clin. Invest . Mod., 16, 475-492 (1993) . Sin embargo, esta no es una trayectoria principal, ya que tanto en los animales como en los humanos, la castración produce una involución casi completa de la próstata y de las vesículas seminales sin una adrenalectomía concomitante. Por lo tanto bajo condiciones normales, las adrenales no soportan un crecimiento importante de los tejidos de la próstata. M. C. Luke and D. S. Coffey, "The Physiology of Reproduction" ed. por E. Knobil y J. D. Neill, 1, 1435-1487 (1994) . Ya que los órganos masculinos sexuales son los tejidos más responsables de la modulación de la actividad de los andrógenos, se usa este modelo para determinar el crecimiento dependiente de los andrógenos de los ' órganos sexuales accesorios en ratas inmaduras castradas.
Ratas macho inmaduras (19-20 días de edad Sprague-Dawley, Harían Sprague-Dawely) se castraron bajo anestesia de metofanos . Cinco días después de la cirugía, se dosificaron estas ratas castradas (60-70g, 23-25 días de edad) por 3 días. Se dosificaron los animales subcutáneamente (s.c.) con 1 mg/kg con proprionato de testosterona (TP) en aceite de cacahuete como vehículo, y los compuestos de prueba anti-andrógenos (los compuestos de la presente invención) se dosificaron oralmente por gavage (p.o.) en suspensiones disueltas de PEG 400 al 80% y Tween 80 (PEGTW) al 20%. Se dosificaron los animales (v/p) con un 0.5 mi de vehículo /l00g de peso corporal. Los grupos experimentales fueron como sigue : 1. Vehículo de control 2. Propionato de testosterona (TP) (3 mg/rata/día, subcutáneo) 3. TP plus Casodex (administrado p.o. en PEGTW, QD) , un antiandrógeno reconocido como compuesto de referencia. 4. Para demostrar la actividad al antagonista, se administró un compuesto de la presente invención ("compuesto de prueba") (p.o. en PEGTW, QD) con TP (s.c. como se administra en el grupo 2) en un rango de dosis. 5. Para demostrar la actividad agonista, se administró solamente un compuesto de la presente invención ("compuesto, de prueba") (p.o., en PEGTW, QD) en un rango de dosis. Al final del tratamiento de 3 días, se sacrificaron los animales, y se pesó la próstata central. Para comparar los datos de experimentos diferentes, los pesos de los órganos sexuales se estandarizaron primero como mg por 100 g de peso corporal , y el incremento en el peso de los órganos inducido por TP, se consideró como el incremento máximo (100%) . El ANOVA, seguido por una prueba exacta de Fischer o de Student de una hilera, se usó para el análisis estadístico. La ganancia y pérdida de los pesos de los órganos sexuales, refleja los cambios de números de células (contenido de ADN) y masa celular (contenido de proteínas) , dependiendo de la concentración de androgeno en el suero. Ver Y. Okuda et al., J. Urol . , 145, 188-191 (1991), la descripción de la cual se incorpora en la presente como referencia. Por lo tanto, la medición del peso húmedo del órgano es suficiente para indicar la bioactividad de los andrógenos y de los antagonistas de andrógenos . En ratas castradas inmaduras, el reemplazo de los andrógenos exógenos, incrementa las vesículas seminales (SV) y la próstata ventral (VP) en una forma dependiente de la dosis. El incremento máximo en el peso de los órganos fue de 4 a 5 veces cuando se dosifican 3 mg/rata/día de testosterona (T) o 1 mg/rata/día de propionato de testostejrona (TP) por 3 días. La EC50 de. T y TP, fueron alrededor de 1 mg y 0.03 mg, respectivamente. El incremento del peso en VP y SV, también se correlaciona con el incremento en la concentración de suero T y DHT. Aunque la administración de T muestra concentraciones de suero 5 veces superior desde T y DHT a las 2 horas después de la inyección subcutánea que aquellas de TP, por lo tanto, estos altos niveles declinaron rápidamente. En contraste, las concentraciones de suero de T y DHT en animales tratados con TP, fueron justamente consistentes durante las 24 horas, y por lo tanto, la TP mostró alrededor de 10-30 veces de potencia superior que la T libre. En este modelo inmaduro de rata castrada, se administró también simultáneamente un antagonista conocido AR (Casodex) con 0.1 mg de TP (ED80) , inhibiendo el incremento mediado por testosterona en los pesos de VP y SV en una forma dependiente de la dosis. Los efectos del antagonista fueron similares cuando se dosifican oralmente o subcutáneamente. Los compuestos de la invención también muestran una actividad antagonista AR, al suprimir el incremento mediado por testosterona en los pesos de VP y SV.
Ensayo agonista AR; ensayo de peso de próstata en húmedo y Elevador del Ano : La actividad de los compuestos de la presente invención como agonistas AR se investigó en un modelo, de ratas macho inmaduras, una prueba reconocida de efecto anabólico en el músculo y de los efectos sostenibles en órganos sexuales para un compuesto dado como se describe en L. G. Hershberger et al., Proc. Soc . Expt . Biol . Med. , 83, 175 (1953); B. L. Beyler et al, "Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animáis", J. Amer. Med. Women's Ass., 23,708 (1968); H. Fukuda et al., "Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay" , Nago Dai . Yak. Ken. Nem. 14, 84 (1966), las descripciones de las cuales se incorporan en la presente como referencia. La base de este ensayo se encuentra en la acción bien definida de los agentes androgénicos en el mantenimiento y crecimiento de tejidos de músculo y los órganos sexuales accesorios en los animales y en el hombre. Los esteroides androgénicos tales como la testosterona (T) se han caracterizado bien por su capacidad para mantener la masa muscular. El tratamiento de animales o humanos después de las castraciones con una fuente exógena de T, resulta en una inversión de la atrofia muscular. Los efectos de T en la atrofia muscular en el músculo elevador del ano de la rata se han caracterizado bien. M. Masuoka et al., "Constant cell population in normal, testosterone deprived and testosterone stimulated levator ani muscles" Am. J. Ana . 119,263 (1966); Z. Gori et al., "Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats. I. Quantitative data" Boíl. -Soc.
Ital. ' Biol. Sper. 42, 1596 (1966); Z. Gori et al . , "Testosterone hypertrophy of levator ani muscle of castrated rats . II. Electron-microscopic observations" Boll. -Soc. Ital. Biol . Sper. 42, 1600 (1966); A. Boris et al . , Steroids 15, 61 (1970) . Como se describe arriba, los efectos de los andrógenos en el mantenimiento de los órganos sexuales masculinos accesorios, tales como la próstata y las vesículas seminales, está bien descrita. La castración resulta en una involución rápida y en la atrofia de la próstata y las vesículas seminales. Este efecto se puede invertir por la adición exógena de los andrógenos. Ya que el músculo elevador del ano y los órganos sexuales masculinos son los tejidos más responsables de los defectos de los agentes androgénicos , se usa este modelo para determinar la inversión dependiente del andrógeno de la atrofia en el músculo elevador del ano y en los órganos accesorios sexuales en ratas castradas inmaduras. Se adquirieron ratas castradas sexualmente maduras (200-250 g, 6-8 semanas de edad, Sprague-Dawley, Harían) del vendedor (Taconic) . Se dividieron las ratas en grupos y se trataron diariamente por 7 a 14 días con uno de los siguientes: 1. Vehículo de control 2. Propionato de testosterona (TP) (3 mg/rata/d£a, subcutáneo) 3. Casodex TP plus, (administrado p.o. en PEGTW, QD) , un antiandrogeno reconocido como compuesto de referencia. 4. Para .demostrar la actividad antagonista, se administró un compuesto de la presente invención ("compuesto de prueba") (p.o. en PEGT , QD) con TP (s.c. subcutáneo como se administra en el grupo 2) en un rango de dosis. 5. Para demostrar la actividad agonista, se administró solo un compuesto de la presente invención ("compuesto de prueba") (p.o. en PEGTW, QD) en un rango de dosis. Al final del tratamiento de 7-14 días, se sacrificaron los animales por dióxido de carbono, y se pesaron el elevador del ano, vesícula seminal y próstata ventral. Para comparar los datos de los diferentes experimentos, se estandarizaron primero el músculo elevador del ano y los pesos de los órganos sexuales como mg por 100 g de peso corporal, y el incremento en el peso de los órganos inducido por TP se consideró como el incremento máximo (100%) . Se usó la Super-anova (un factor) para el análisis estadístico. La ganancia y pérdida de peso en los órganos sexuales, refleja los cambios del número de células (contenido de ADN) y masa celular (contenido de proteínas) , dependiendo de la concentración de androgenos del suero. Ver Y. Okuda et al., J. Urol . , 145, 188-191 (1991), la descripción de la cual se incorpora en la presente como referencia: Por lo tanto, la medición del peso en húmedo de los órganos es suficiente para indicar la bioactividad de los androgenos y el antagonista de androgenos. En ratas castradas inmaduras, el reemplazo de los androgenos exógenos incrementa el elevador del ano, vesículas seminales (SV) y próstata en una forma dependiente de la dosis . El incremento máximo en el peso de los órganos fue de 4 a 5 veces cuando se dosificaban 3 mg/rata/día de testosterona (T) o 1 mg/rata/día de propionato de testosterona (TP) por 3 días. El EC50 de T y TP, fue de alrededor de 1 mg y 0.03 mg, respectivamente. El incremento en el peso de VP y SV, también se correlacionó con el incremento en la concentración de suero en T y DHT. Aunque la administración de T mostró concentraciones de suero 5 veces superiores de T y DHT, a las 2 horas después de la inyección subcutánea, que con aquella de TP, por lo tanto, estos altos niveles declinaron muy rápidamente. En contraste, las concentraciones de suero de T y DHT de animales tratados con TP, fueron bastante consistentes durante las 24 horas, y por lo tanto, la TP mostró alrededor de una 10-30 veces de potencia superior que el T libre.
Ensayo de zenoinjerto de próstata humana MDA PCa2b; Prueba antitumor in vivo: los tumores de próstata humana MDA-PCa-2b se mantuvieron en ratones desnudos Balb/c nu/nu. Se propagaron los tumores como transplantes subcutáneos en ratones macho desnudos adultos (4-6 semanas de edad) usando fragmentos de tumor obtenidos de ratones donadores . El paso de tumor sucedió cada 5-6 semanas. Para el ensayo de la eficacia antitumor, se acumuló en número requerido de animales necesario para detectar una respuesta significativa al comienzo del experimento, y se le dio a cada uno, un implante subcutáneo de un fragmento de tumor (~50 mg) con un trocar calibre 13. Se dejaron crecer los tumores hasta aproximadamente 100-200 mg (los tumores fuera del rango se excluyeron) y se distribuyeron uniformemente los animales para los diversos grupos de tratamiento y de control . El tratamiento de cada animal se basó en el peso corporal individual. Se verificaron diariamente los animales tratados para una toxicidad diagonal/mortalidad relacionada con el tratamiento. Cada grupo de animales se pesó antes del inicio del tratamiento (Wtl) y después nuevamente al seguir la última dosis de tratamiento (Wt2) . La diferencia en el peso corporal (Wt2-Wtl) proporciona una medida de la toxicidad relacionada con el tratamiento. Se determinó la respuesta de tumor al medir los tumores con un calibrador 2 veces por semana, hasta que los tumores alcanzaron un tamaño "objetivo" predeterminado de, 0.5 m. Se estimaron los pesos de tumor (mg) de l fórmula: Peso de tumor = (longitud x ancho 2) ÷ 2 .
El punto final de respuesta de tumor se expresó en términos de la inhibición del crecimiento del tumor (%T/C) , definido como la relación de los pesos medianos de tumor de los tumores tratados (T) con aquel del grupo de control (C) .
Para estimar la exterminación de las células de tumor, se calculó primero el tiempo de doblaje del volumen de tumor con la fórmula: TVDT = tiempo mediano (días) para controlar los tumores para alcanzar su tamaño objetivo - tiempo mediano (días) para controlar los tumores para alcanzar la mitad del tamaño objetivo s y, exterminio de células Log = (T- C)÷(3.32 x TVDT) Las evaluaciones estadísticas de los datos se llevaron a cabo usando una prueba Wilcoxon generalizada de Gehan.
Tumor de próstata de Dunning: El tumor de próstata Dunning R3327H es un adenocarcinoma derivado espontáneamente con respuesta a los andrógenos bien diferenciada de la próstata (Smolev JK, Heston WD, Scott WW, y Coffey DS, Cáncer Treat Rep. 61, 273-287 (1977)). El crecimiento de la sublínea R3327H se ha seleccionado por su crecimiento reproducible y altamente dependiente de andrógeno en ratas macho intactas. Por lo tanto, este modelo y otras sublíneas de este tumor, se han usado ampliamente para evaluar actividades antitumor in vivo de an iandrógenos tales como la flutamida y bacilutamida/Casodex (Maucher A., and von Angerer, J. Cáncer Res. Clin. Oncol . , 119, 669-674(1993), Furr B.J.A. Euro. URL. 18 (suppl. 3), 2-9 (1990), Shain S.A. and Huot RI . J. Steriod Biochem. 31, 711-718 (1988)). Al comienzo del estudio, se transplantaron subcutáneamente la piezas de tumor Dunning (alrededor de 4 x 4 mm) al costado de las ratas Copenhagen macho maduras (6-7 semanas de edad, Harlan-Sprague Dawley, Indianápolis , MD) . Alrededor de 6 semanas posteriores al implante, los animales con tumores de tamaño que se mide (alrededor de 80 -120 mm2) se formaron aleatoriamente en grupos de tratamiento (8-10 ratas/grupo) y se iniciaron los tratamientos. Se castró un grupo de las ratas para servir como control negativo del crecimiento del tumor. Los animales se trataron diariamente con los compuestos de la invención actual, antiandrógenos estándar tales como la bacilutamida o vehículo (control) para un promedio de 10 a 14 semanas. Se disolvieron los compuestos de prueba en un vehículo de (2.5 ml/kg de peso corporal) 10% de polietilen glicol y en 1% de carboxi metil celulosa 0.05% Tween-80, PEG/CMC, (Sigma, St Louis, MO) . Los experimentos terapéuticos típicos, incluirían 3 grupos de las 3 dosis escaladas para cada estándar o compuesto de prueba (en un rango de 300-3 mg/kg) . Los tumores en el grupo del vehículo (control) alcanzaron un tamaño de 1500 a 2500 mm3, mientras que el grupo de animales castrados, muestra típicamente una estasis de tumor después de 14 semanas de observación. Los animales tratados oralmente con 20 mg/kg de bicalutamida o flutamida, se esperaría que mostraran una reducción del 40% en los volúmenes de tumor, en comparación con el control después de 14 semanas de tratamiento. El tamaño de los tumores se midió semanalmente por un calibrador vernier (Froboz, Suiza), tomando mediciones perpendiculares de longitud y ancho. Los volúmenes de tumor se miden en mm3 usando la fórmula: Longitud x ancho x altura = Volumen. Las diferencias estadísticas entre los grupos de tratamiento y de control se evalúan usando un análisis múltiple ANOVA seguido por una prueba t de Student no paramétrica de una hilera.
Ensayo de peso de próstata de rata madura: La actividad de los compuestos de la presente invención se investigó en un modelo de rata macho madura, que es una variación del ensayo de peso de próstata en húmedo y elevador del ano antes descrita. Los ensayos anteriores in vivo son ensayos reconocidos para determinar los efectos anabólicos en el músculo y los efectos de sostenimiento en los órganos sexuales para un compuesto dado como se describe en L. G. Hershberger et al., 83 Proc . Soc . Expt-. Biol . Med., 175 (1953) ,· B. L. Beyler et- al, "Methods for evaluating anabolic and catabolic agents in laboratory animáis", 23 J. Amer. Med.
Women's Ass., 7D8 (1968); H. Fukuda et al., "Investigations of the levator ani muscle as an anabolic steroid assay" , 14 Nago Dai. Yak. Ken. Nem. 84 (1966), las descripciones de la cual se incorporan en la presente como referencia. La base de este ensayo yace en la acción bien definida de los agentes androgénicos , en el mantenimiento y crecimiento de los tejidos de músculo y los órganos sexuales accesorios en los animales y el hombre. Los órganos sexuales accesorios masculinos, tales como la próstata y las vesículas seminales, juegan un papel importante en la función reproductora. Estas glándulas se estimulan para crecer, y se mantienen en su tamaño y función secretora, por la presencia continua de testosterona de suero (T) , que es un andrógeno principal del suero (>95%) producido por las células Leydig en los testículos, bajo el control de la hormona pituitaria luteinizante (LH) y la hormona estimuladora del folículo (FSH) . La testosterona se convierte a una forma más activa, la dihidrotestosterona (DHT) , dentro de la próstata por la 5 -reductasa . Los andrógenos adrenales también contribuyen con alrededor de 20% del DHT total en la próstata de la rata, en comparación con un 40% de aquel en hombres de 65 años de edad. F. Labrie et . al, 16 Clin. Invest . Med. , 475-492 (1993) . Sin embargo, esta no es una trayectoria principal, ' ya que tanto en animales como en humanos, la castración conduce a una involución casi completa de la próstata y de las vesículas seminales sin una adrenalectomía concomitante. Por lo tanto bajo condiciones normales, las adrenales no soportan un crecimiento importante de los tejidos de próstata. M. C. Luke y D. S. Coffey, "The Physiology of Reproduction" ed. By E. Knobil and J. D. Neill, 1, 1435-1487 (1994). Ya que los órganos sexuales masculinos y el elevador del ano son los tejidos más responsables en la modulación de la actividad de los andrógenos, se usa este modelo para determinar la actividad de los compuestos que modulan la trayectoria del receptor andrógeno en las ratas maduras . Junto con su actividad mitogénica en los tejidos tales como la próstata, vesícula seminal y músculo, la testosterona sirve también como un regulador negativo para su propia biosíntesis. La producción de testosterona en las células Leydig de los testículos, se controla por el nivel de LH en circulación liberado de la glándula pituitaria. Los niveles de LH se controlan por sí mismos por el nivel de LHRH producidos en la región hipotalámica . Los niveles de testosterona en la sangre sirven para inhibir la secreción de LHRH y reduce posteriormente los niveles de LH y finalmente los niveles de testosterona en circulación. Al _ medir los niveles de sangre de LH como se efectúan por los compuestos de la presente invención ("compuestos de prueba"), es posible determinar el nivel de la actividad agonista o antagonista de los compuestos en el eje hipotalámico de su ciclo endocrino.
Los conjuntos correspondientes de ratas Harían Sprague- Dawely (40-42 días edad, 180-220 g) , se dosificaron oralmente por gavage (p.o.) con los compuestos de prueba en suspensiones/disueltas de 80% PEG 400 y 20% Tween 20 (PEGT ) por 14 días. Se dosificaron oralmente 2 grupos de control uno intacto y uno castrado, solamente con el vehículo PEGTW. Se dosificaron los animales (v/p) a 0.5 mi de vehículo/100g de peso corporal. Los grupos experimentales fueron como sigue: 1. Vehículo intacto (p.o., PEGTW, QD) 2. Vehículo de control (p.o., PEGTW, QD) 3. Bicalutamida (Casodex, un antiandrógeno reconocido como compuesto de referencia) o un compuesto de la presente invención, p.o. en PEGTW QD. (en un rango de dosis) . Al final de tratamiento de 14 días, se sacrificaron los animales, se separaron quirúrgicamente la próstata ventral, las vesículas seminales y el elevador del ano y se pesaron. Para comparar los datos de diferentes experimentos, los pesos de los órganos se estandarizaron primero como mg por 100 g de peso corporal, y se expresaron como un porcentaje del valor del órgano respectivo en el grupo intacto. La hormona luteinizante de rata (rLH) se determina cuantitativamente con el kit Biotrak [125. I] (Amersham Pharmacia Biotek) , siguiendo las direcciones del fabricante. El ensayo se basa en la competencia por LH presente en el suero de enlace de [125 I] rLH con una suspensión de perlas Amerlex-M/anticuerpos . La radioactividad que permanece después de la incubación con el suero, y los lavados posteriores se extrapolan en una curva estándar para obtener una lectura en ng/ml . La ganancia y pérdida de peso de órganos sexuales y del elevador del ano, refleja los cambios del número de células (contenido ADN) y masa celular (contenido de proteínas) , dependiendo de la concentración de andrógeno de suero, ver Y. Okuda et al, J. Urol . , 145, 188-191 (1991), la descripción de la cual se incorpora como referencia en la presente. Por lo tanto la medición del peso de los órganos en húmedo, es suficiente para indicar la bioactividad de los andrógenos y del antagonista de andrógenos. En el ensayo con ratas maduras, los agentes agonistas activos no tendrán efecto o incrementarán el peso de uno o más de los órganos responsables de los andrógenos (elevador del ano, próstata, vesícula seminal) y no tendrán efecto o un efecto supresor en la secreción del LH. Los compuestos con actividad antagonista, disminuirán el peso de uno o más de los órganos responsables de los andrógenos (elevador del ano, próstata, vesícula seminal) y no- tendrán efecto o un efecto supresor reducido en la secreción LH .
Ensayo de zenoinjerto de próstata humana CWR22 : Prueba antitumor in vivo: Se mantuvieron tumores de próstata humanos C R22 en ratones desnudos Balb/c nu/nu. Se propagaron los tumores como transplantes subcutáneos en ratones macho adultos desnudos (4-6 semanas de edad) usando f agmentos de tumor obtenidos de ratones donadores . El paso de los tumores sucedió cada 5-6 semanas. Para un ensayo de eficacia anti-tumor, se acumuló el número requerido de animales necesario para detectar una respuesta significativa al comienzo del experimento, y se le dio a cada uno un implante subcutáneo de un fragmento de tumor (~50 mg) con un trocar de calibre 13. Se dejaron crecer los tumores hasta aproximadamente 100-200 mg (tumores fuera del rango fueron excluidos) y se distribuyeron uniformemente los animales en diversos grupos de control y de tratamiento. El tratamiento de cada animal se basó en su peso corporal e individual. Los animales tratados se verificaron diariamente para la toxicidad/mortalidad relacionada con el tratamiento. Cada grupo de animales se pesó antes del inicio del tratamiento (Wtl) y después siguiendo la última dosis de tratamiento (Wt2) . La diferencia en el peso corporal (Wt2-Wtl) proporciona una medida de la toxicidad relacionada con el tratamiento. La respuesta de tumor se determinó por la medición de los tumores con un calibrador dos veces por semana, hasta que los tumores alcanzaron un tamaño predeterminado "objetivo" de 0.5 gm. Se estimaron los pesos de tumor (mg) a partir de la fórmula: peso de tumor =: (longitud x ancho 2 ) ÷2. El punto terminal de respuesta de tumor, se expresó en términos de la inhibición del crecimiento de tumor (%T/C) , definido como la relación de los pesos medianos de tumor de los tumores tratados (T) con aquel del grupo de control (C) .
Para estimar la eliminación de células de tumor, el tiempo de doblaje de volumen de tumor se calculó primero con la fórmula: TVDT = tiempo mediano (días) para los tumores de control para que alcancen el tamaño objetivo - tiempo mediano (días) para los tumores de control para alcanzar la mitad del tamaño objetivo y exterminio de células Log = (T-C)÷(3.32 x TVDT) Las evaluaciones estadísticas de los datos se efectuaron usando una prueba Wilcoxon generalizada de Gehan. Los siguientes ejemplos ilustran modalidades de la presente invención, y no se pretende que limiten el alcance de las reivindicaciones. Dentro de ciertos ejemplos, se prepara un compuesto de fórmula I y se emplea después para preparar además uno o. más compuestos adicionales de fórmula I o sales de los mismos. Los métodos empleados para preparar un compuesto de la fórmula I o una sal del mismo como se describen en la. resente se pueden emplear como sea adecuado para preparar otros compuestos de la invención.
Abreviaturas : Las siguientes abreviaturas se usan en la presente: DBU = 1, 8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-ena 4-DMAP = 4 -dimetilaminopiridina ee = exceso enantiomérico DMF = dimetilformamida EtOAc = acetato de etilo LDA = diisopropilamida de litio Base Hünig = N, -diisopropiletilamina Me = metilo RT = tiempo de retención TFA = ácido trifluoroacético THF = tetrahidrofurano CCD = cromatografía de capa delgada TMS = trimetilsililo pTSA = ácido para-toluensulfónico ? = calor t-Bu = tert-butilo PhCH3 = tolueno Pd/C = paladio sobre carbón mineral activado TsCl = cloruro de tosilo TBSOTf = tert-butildimetilsilil trifluorometan sulfonato TBS =. tert-butildimetilsilano el = yoduro de metilo (BOC)20 = di-tert-butil dicarbonato TEA = trietiloamina n-BuLi = n-butillitio rt = temperatura ambiente CL = cromatografía líquida Ts = tosilo Ph = fenilo EtOH = etanol DCE = dicloroetano DMSO = dimetilsulfóxido Ra-Ni = Níquel Raney MS = mallas moleculares EM(ES) = espectrometría de masa por electro-rociado mCPBA = ácido m-cloroperoxibenzóico sat = saturado AcOH = ácido acético MeOH = metanol Et20 = éter de dietilo Ac = acetilo DEAD = azodicarboxilato de dietilo h = horas Et = etilo ¦ SDCC =. diimida de dicarbonilo soluble en agua, clorohidrato de 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilocarbodiimida TBAF = fluoruro de tetrabutilamonio DBAD = di-terbutilazodicarboxilato DCC = Diciclohexilcarbodiimida Catalizador de ilkinson = RhCl(PPh3)3 ADDP = 1 , 1- [azodicarbonil] dipiperidina DMA = dimetilacetamida DME = 1 , 2 -dimetoxietano BOP = hexafluorofosfato de benzotriazol-1- iloxitris (dimetilamino) -fosfonio HRMS = espectrometría de masa de alta resolución TBME = MTBE = metil tert-butil éter (esto es, 2-metoxi-2- metil-propano) TiCl2Cp2 = dicloruro de bis (ciclopentadienil) titanio DPPA = azida de difenilfosforilo HMPA = amida de hexametilfosforilo v% = por ciento en volumen BH3«DMS = dimeti1sulfato de borano wm = volumen de gas por volumen de líquido por minuto .
Ejemplo 1 (3aot, 4a, 7a, 7aa) -2- (4-Bromo-3-metilfenilo) tetrahidro-4 , 7 - etanotiopirano [3 , 4-c] pirrol-1, 3 , 8 (2H, 4H) -triona (CL) A. 4- ( tert-Butildimetilsiloxi) -2H-tiopirano (1A) La 2 , 3-Dihidro-4H-tiopiran-4-ona (1.50 g, 13.1 mmol, sintetizada como se describe en Richards et al., J. Org. Chem. 46,4836-4842 (1981)) se disolvió en CH2Cl2 (130 mL) y se agregó trietilamina (5.47 mL, 39.4 mmol). Se agregó después tert-butildimetilsilil trifluorometansulfonato (3.62 mL, 15.8 mmol) . Después de 10 minutos, se separaron los volátiles in vacuo a 25°C. El aceite amarillo resultante se pasó a través de una columna corta de Si02 eluyendo con 3% TEA en hexanos para resultar 1.82 g (7.97 mmol, 61%) del compuesto 1A como un aceite color naranja.
B. 1- [4-bromo-3-metilofenil] -lH-pirrol-2, 5-diona (1B) Se disolvieron 4-Bromo-3-metilanilina (1.55 g, 8.33 mmol) y anhídrido maleico (0.898 g, 9.16 mmol) en ácido acético (10 mL) y se calentaron a 115°C por 12 h. La reacción se enfrió después hasta 25°C y el ácido acético se separó in vacuo. El residuo resultante se suspendió en 5% K2C03 (100 mL) , se agitó por 25 minutos, se filtró y se lavó con agua. El material se secó después in vacuo para dar 1.65 g (6.20 mmol, 74%) del compuesto IB como un sólido café claro. CLAR: 100% a 2.96 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
C. (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- (4 -Bromo-3 -metilfenil) tetrahidro-4 , 7-etanotiopirano [3 , 4-c] pirrol-1, 3 , 8 (2H,4H) -triona(lC) El compuesto 1A (0.313 g, 1.41 mmol) y el compuesto IB (0.250 g, 0.940 mmol) se disolvieron en tolueno y se calentaron hasta reflujo por 5 h. El tolueno, se separó después al pasar una corriente de argón á través del matraz de reacción. El residuo' se purificó después por cromatografía instantánea en Si02 eluyendo con 20% de hexan© en cloroformo.
Esto dio 0.168 g del intermediario del éter de enol como un sólido amarillo. El intermediario del éter de enol se disolvió en dicloroetano (2.0 mL) y se agregó TFA (0.25 mL) . Después de 0.5 h, la reacción se apagó con NaHC03 acuoso saturado y se extrajo con CH2C12 (2 x 30 mL) . Se secaron los compuestos orgánicos sobre sulfato de sodio anhidro y se evaporaron para dar 0.079 g (0.21 mmol, 22%) del compuesto 1C como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.010 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 396.9 [M+ NH4]+.
Ejemplo 2 5,5-dióxido de (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- (4 -Bromo-3- metilfenil) tetrahidro-4, 7-etanotiopirano [3,4-c] pirrol- 1,3,8(2H,4H) -triona (2) El compuesto 1C (0.040 g, 0.11 mmol) se disolvió en CH2C12 (4.0 mL) y se enfrió hasta 0°C. Se agregó m-CPBA (60% pureza, 0.061 g, 0.21 mmol) y la reacción se calentó después hasta 25°C. Después de 1 h, se agregó una- mezcla 1 ·.1 de NaHC03 saturado y sulfito de sodio saturado (20 mL) con agitación vigorosa. Después de 15 minutos, la mezcla se extrajo con CH2C12 (2 x 30 mL) y los compuestos orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro para dar 0.031 g (0.075 mmol , 71%) del compuesto 2 como un sólido blanco. No fue necesaria purificación. CLAR: 78% a 2.290 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA, 4 mL/min., observando a 220 nra) . EM (ES): m/z 429.8 [M+NR4]+.
Ej emplo 3 (3aa,4p, 7p,7aa) -2- (3-Clorofenil) hexahidro-4-metil- , 7-epoxi- lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona(3) Se disolvieron 3 -Cloroanilina (0.100 g, 0.787 mmol) y anhídrido 3 , 6-endoxo-3-metilhexahidroftálico (0.172 g, 0.945 mmol) en AcOH (2.0 mL) y se calentaron a 110°C por 11 h. La reacción se enfrió después hasta 25°C, se vació en K2C03 acuoso saturado frío y se agitó vigorosamente por 10 min. La solución se filtró después y se lavó con agua. El filtrado resultante se filtró in vacuo para dar 0.118 g (0.404 mmol , 51 %) del compuesto 3 como un sólido blanco. No fue necesaria purificación adicional. CLAR: 99% a 2.510 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 292.32 [M+H] +.
Ej emplo 4 (3aa, 4a, 7a, 7aa) - y (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -4- [ (Acetiloxi) metil] - 3a, 4 , 7 , 7a- tetrahidro-2 [3 - (trifluorometil) fenil] -4 , 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona (4i y 4ii, respectivamente) Se disolvieron 2 -Acetoximetilfurano (0.599 mL, 4.78 mmol) y 1- [3- (trifluorometil) -fenil] -lH-pirrol-2 , 5-diona (0.500 g, 2.39 mmol, preparado como se describe en el Ejemplo IB) se disolvió en cloruro de metileno (3.0 mL) a 25°C. Después de 22 h, se separaron los volátiles in vacuo y el residuo resultante se purificó por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 0-15% acetona en cloruro de metileno I para dar 0.438 g (1.15 mmol, 48%) de un aceite amarillo como una mezcla 2:1 del compuesto 4i y del compuesto 4ii, que no se separó. CLAR: 100% a 3.093 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/ z 398.9 [M+NH4] + .
Ejemplo 5 (3aa, 4a, 7a, 7aa) - y (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [ (Acetiloxi)metil] - Hexahidro-2- [3- (trifluorometil) fenil] -4, 7-epoxi-lH-isoindol- 1, 3 (2H) -diona (5i y 5ii, respectivamente) La mezcla 2:1 de los compuestos 4i y 4ii (0.361 g, 0.948 mmol) se disolvió en acetato de etilo (25 mL) y se agregó Pd/C (10% Pd, 0.2 g) . Se introdujo hidrógeno por medio de un globo y la reacción se agitó a 25°C por 4 h, seguida por filtración a través de Celite y enjuagando con acetato de etilo. La concentración in vacuo dio 0.348 g (0.908 mmol, 96%) de un aceite amarillo que se determinó que era una mezcla 2:1 del compuesto 5i y compuesto 5ii (que no se separó) . CLAR: 100% a 2.900 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 401.0 [M+NH ]+.
Ejemplo 6 (3aa, 4a, 7a, 7aa) - y (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -3a, 4, 7, 7a-Tetrahidro-5- (hidroximetil) - 2 - [3- (trifluorometil) fenil] -4, 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona (6i y 6ii, respectivamente) 2,5-diona (0.500 g, 2.39 mmol, preparada como se describe en el Ejemplo IB) y 3 -furanmetanol (0.412 mL, 4.78 mmol) en cloruro de metileno (3.0 mL) y se agitó a 25°C por 20 h. Los volátiles se separaron después in vacuo y el material resultante se purificó por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con cloroformo/acetona para dar 0.379 g (1.12 mmol, 47%) del compuesto 6i y 0.220 g del compuesto 6ii, ambos como sólidos blancos. Compuesto 6i: CLAR: 100% a 2.197 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 338.0 [M-H] " . Compuesto 6ii: CLAR: 100% a 2.477 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 338.0 [M-H] " .
Ejemplo 7 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -3a, 4,7, 7a-Tetrahidro-5- (hidroximetil) -4- metil-2- [3- ( trifluorometil) fenil] -4, 7-epoxi-lH-isoindol- 1,3 (2H) -diona(7) Se disolvieron 2-Metil-3-furanmetanol (0.537 g, 4.78 mmol) y 1- [3- (trifluorometil) -fenil] -lH-pirrol-2.5-diona (0.500 g, 2.39 mmol, preparado como se describe en el Ejemplo IB) se disolvió en dicloroetano (2.0 mL) y se agitó a 25°C por 20 h. La reacción se concentró después in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea en SiC eluyendo con acetato de etilo/cloruro de metileno para dar 0.317 g (0.897 mmol, 37.5%) del compuesto 7 como un sólido blanco. No se pudo aislar otro isómero posible después de la cromatografía. CLAR : 100% a 2.197 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 351.9 [M-H] " .
Ejemplo 8 (3a , 4ß, 7ß, 7aa) -2- [3 , 5-Bis (trifluorometil) fenil] hexahidro- 4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (8) La 3 , 5-Bis (trifluorometil) anilina (0.017 g, 0.075 mmol) se disolvió en ácido acético (0.300 mL) y se transfirió a un vial cónico de 1.5 mL con una tapa de septo. Las soluciones de reserva de 95 aminas adicionales se prepararon como se describe arriba. A cada uno de los viales anteriores se le agregó 0.40 mL (0.12 mmol) de una solución de reserva de anhídrido exo-7-oxabiciclo [2.2.1] heptano-2 , 3 -dicarboxílico en ácido acético. Los viales se sellaron después y se calentaron a 110°C por 11 h. Con el enfriamiento a 25°C, se separaron las tapas de los viales, se separó el ácido acético in vacuo. A cada vial se le agregó 1 mL de 2:1 acetona/cloruro de metileno y se calentaron los viales a 40°C por 1 h. Una vez que estuvieron todos los productos en solución, se transfirieron por medio de un robot a tubos de filtrado con fritas gruesas prehumedecidas con 0.2 mL de agua. Se circuló nitrógeno a través de cada tubo hasta que se eliminaron los compuestos orgánicos volátiles. Se agregó después 1.5 mL de 10% de K2C03 acuoso a cada tubo, seguido por una agitación vigorosa a 25°C por 15 tnin. Se drenaron después los tubos, se volvieron a sellar y se agregó 1.0 mL de agua a cada tubo, seguido de agitación. Los tubos se drenaron nuevamente y se lavaron por segunda vez con agua. Los residuos resultantes en cada tubo se secaron después in vacuo por 48 h. Después de secar, se agregó 1.0 mL de 20% TFA en cloruro de metileno a cada tubo y se agitaron las rejillas por 30 min. Se drenaron después los tubos en una placa de 96 pozos con micro-tubos presentes a la medida previamente tarados. Cada tubo se ensayó para la pureza del producto (CL analítica) e identidad (CL-EM) . Se concentraron después los tubos in vacuo y se pesaron para los rendimientos. El tubo conteniendo la reacción de 3 , 5-bestrifluorometilanilina y anhídrido exo-7-oxabiciclo [2.2.1] heptano-2 , 3 -dicarboxílico, produjo 0.022 g (0.058 mmol, 77%) del compuesto 8 como un sólido blanco. CLAR: 94% a 4.03 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 434.2 [M+Na+MeOH] + . Del resto de las 95 reacciones adicionales restantes corridas, se obtuvieron un total de 80 compuestos finales en >70% pureza y >5 mg de rendimiento. Diversas muestras requirieron de purificación adicional, que se llevó a cabo en una columna corta de Si02 eluyendo con cloruro de metileno/acetona . Ver Tabla 2 a continuación.
Ejemplo 9 Ester de fenilo del ácido (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2 - (4 - Bromofenil) octahidro-1, 3-dioxo-4, 7-eteno-5H-pirrolo [3 c] piridina-5-carboxílico (9) La 1- [4 -Bromofenilo] - lH-pirrol -2 , 5-diona (0.250 g, 0.992 mmol, preparada como se describe en el Ejemplo IB) y el éster de fenilmetilo del ácido 1 (2H) -piridincarboxí1 ico (0.299 g, 1.49 mmol, sintetizado como se describe en Richard et al. J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) se disolvieron en tolueno y se calentaron a 85°C por 1 h. Al enfriar a 25°C, se separó el tolueno in vacuo. El residuo resultante se disolvió en una cantidad mínima de cloroformo y el producto se precipitó por la adición de hexanos . Después de 1 h a 25°C, el producto se filtró y se lavó con 20% hexanos en frío en cloroformo para dar 0.243 g (0.536 mmol, 54%) del compuesto 9 como un sólido blanco (isómero sencillo) . CLAR: 100% a 3.393 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 454.98 [M+H]+.
Ejemplo 10 Ester de fenilmetilo del ácido (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2 - [4 - Bromofenil) octahidro-1, 3 -dioxo- 4, 7 -eteno-5H-pirrolo [3,4- c] piridina-5-carboxílico (10) La 1- [3- (Trifluorometil) fenil] - lH-pirrol -2 , 5-diona (3.78 g, 15.7 mmol, preparada como se describe en el Ejemplo IB) y el éster de fenilmetilo del ácido 1 (2H) -piridincarboxílico (4.00 g, 18.8 mmol, sintetizado como se describe en Richard et al. J. Org. Chem. 46, 4836-4842 (1981)) se disolvieron en tolueno y se calentaron a 80 °C por 3 h. Después de enfriar a 25°C, se separó el tolueno in vacuo y el residuo resultante se purificó por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con metanol /cloruro de metileno para dar 3.20 g (7.01 mmol , 45%) del compuesto 10 como un aceite amarillo. CLAR: 95% a 3.510 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 457.2 [M+H] +.
Ejemplo 11 Trifluoroacetato de (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-2 - [3 - (trifluorometil) fenil] -4 , 7 -etano-lH-pirrol [3 , 4 -c] iridina- 1, 3 (2H) -diona (11) El compuesto 10 (3.20 g, 7.01 mmol) se disolvió en 100 mL de MeOH y se agregó 10% de catalizador Pd/C de Degussa (2.00 g, cat . ) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo. Después de 1 h, se filtró la reacción a través de Celite y se enjuagó con MeOH. Se separaron los volátiles in vacuo y el material crudo resultante se purificó por CLAR preparativa de fase inversa para dar 2.50 g (5.70 mmol. 81%) del compuesto 11 como la sal de TFA (sólido blanco) . CLAR: 99% a 1.843 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 325.12 [M+H] + .
Ejemplo 12 (3aa, 4ot, 7a, 7aa) -5-Acetilhexahidro-2 - [3 - ( rifluorometil) fenil] -4 , 7 -etano-lH-pirrolo [3 , 4 -c] piridina- 1, 3 (2H) -diona (12) El compuesto 11 (0.10 g, 0.23 mmol) se suspendió en THF (5.0 mL) y se agregó TEA (0.097 mL, 0.46 mmol) , resultando en una solución homogénea. Se agregó después cloruro de acetilo (0.033 mL, 0.46 mmol) . Después de 2 h, la reacción se apagó con NaHC03 acuoso saturado y se extrajo con cloruro de metileno (3 x 15 mL) . El material crudo se purificó por CCD preparativa eluyendo con cloroformo/acetona para dar 0.067 g (0.18 mmol, 79%) del compuesto 12 como un aceite incoloro. CLAR: 99% a 2.66 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 367.0 [M+H]+.
Ejemplo 13 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -5-Benzoilhexahidro-2- [3- trifluorometil) fenil] -4, 7-etano-lH-pirrolo [3 , 4 -c] piridin- 1,3 (2H) -diona (13) El compuesto 11 (0.10 g, 0.23 mmol) se suspendió en THF (5.0 mL) y se agregó TEA (0.097 mL, 0.46 mmol) resultando en una solución homogénea. Se agregó después cloruro de benzoilo (0.053 mL, 0.46 mmol). Después de 2 h, la reacción se apagó con NaHC03 saturado acuoso y se extrajo con cloruro de metileno (3 x 15 mL) . El material crudo se purificó por CLAR preparativa de fase inversa para dar 0.020 g (0.047 mmol, 20%) del compuesto 13 como una espuma blanca. CLAR: 99% a 3.183 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 429.1 [M+H] + .
Ejemplo 14 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-5-metil-2- [3 (trifluorometil) fenil] - 4 , 7-etano-lH-pirrolo [3 , 4-c] iridina-1, 3 (2H) -diona (14) El compuesto 11 (0.10 g, 0.23 mmol) se suspendió en THF (5.0 mL) y se agregó TEA (0.097 mL, 0.46 mmol) resultando en una solución homogénea. Se agregó sulfato de dimetilo (0.043 mL, 0.46 mmol) y la reacción se agitó a 25 °C. Después de 14 h, la reacción se concentró in vacuo y el material crudo se purificó por CCD preparativa eluyendo con 10% MeOH en cloruro de metileno para dar 0.030 g (0.088 mmol, 39%) del compuesto 14 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 1.797 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 339.21 [M+H] +.
Ejemplo 15 Trifluoroacetato de (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro- 5 - (fenilmetil) 2 - [3- (trifluorometil) fenil] -4, 7-etano-lH-pirrolo [3,4- c] piridina-1, 3 (2H) -diona (15) El compuesto 11 (0.10 g, 0.23 mmol) se disolvió en DMF (5.0 mL) y se agregó K2C03 (0.063 g. 0.46 mmol). Se agregó después bromuro de bencilo (0.041 mL, 0.35 mmol) . La reacción se agitó a 25°C por 1 h, se filtró y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó por CLAR preparativa de fase inversa para dar 0.055 g (0.10 mmol, 43%) del compuesto 15 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.31 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 415.36 [M+H]\ Ejemplo 16 Trifluoroacetato de (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro- 5 -propil - 2 - [3- (trifluorometil) fenil] -4, 7-etano-lH-pirrolo [3,4- c] piridina-l, 3 (2H) -diona (16) El compuesto 11 (0.10 g, 0.23 mmol) se disolvió en DMF (5.0 mL) y se agregó K2C03 (0.079 g, 0.57 mmol), seguido por 1 -bromopropano (0.031 mL, 0.34 mmol) . La reacción se agitó a 25°C por 6 h, después se filtró y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó por CLAR preparativa de fase inversa para dar 0.070 g (0.15 mmol, 63%) del compuesto 16 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 1.907 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 340.22 [ +H] +.
Ejemplo 17 Ester de fenilmetilo del ácido (3aa, 4a, 4aP, 5aP, 6a, 6aa) - 2 [4 -Ciano-3 - ( trifInorómetil) fenil] decahidro- 1 , 3 -dioxo-4 , 6 - Se agregó la l-Metil-3-nitro-l-nitrosoguanidina (2.5 g, 17 mmol) en porciones a una solución de 40% KOH/H20 (15 mL) y Et20 (25 mL) a 0°C. La capa de éter se hizo amarilla una vez que se terminó la adición. Después de 30 min. a 0°C, la capa de éter se vació en una solución del éster de fenilmetilo del ácido (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- [4 -ciano-3- (trifluorometil) fenil] - octahidro-1 , 3 -dioxo-4 , 7 -eteno-5H-pirrólo [3,4-c]piridina-5- carboxílico (0.500 g, 1.09 mmol, preparado como se describe en el Ejemplo 10) y Pd (OAc) 2 ( 0.010 g) en THF (10 mL) a 0°C. La reacción se calentó después lentamente a 25°C, se agitó por 24 h y se filtró después a través de Celite enjuagando con THF. El material crudo se purificó después por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con MeOH/CH2Cl2 para dar 0.34 g (0.69 mmol, 63%) del compuesto 17 como un sólido blanco y un isómero sencillo. CLAR: 100% a 3.61 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 496.25 [M+H] +.
Ejemplo 18 (3aa, 4a, 4aP, 5ap, 6a, 6aa) -4- [decahidro-1, 3-dioxo-4 , 6 ¦ (iminometano) cicloprop [f] isoindol-2-il] -2- ( trifluorometil) enzonitrilo (18) El compuesto 17 (0.200 g, 0.404 mmol) se disolvió en MeOH (20 mL) y se agregó 5% Pd/C (0.200 g) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo. Después de 3 h, la reacción se filtró a través de Celite, se enjuagó con MeOH y se separaron los volátiles in vacuo para dar 0.130 g (0.360 mmol, 89%) del compuesto 18 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 1.80 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TTA. 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 362.09 [M+H]+.
Ejemplo 19 (3aa,4a,4aP, 5a , 6a, 6aa) -4- [Decahidro-7 -metil-1 , 3-dioxo-4, 6- (iminometano) cicloprop [f3 isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (19) El compuesto 18 (0.100 g, 0.277 mmol) se disolvió en CH3CN (2.0 mL) . Se agregaron después TEA (0.19 mL, 1.4 mmol) y Mel (0.052 mL, 0.83 mmol) y la reacción se agitó a 25°C por 14 h. La reacción se concentró bajo presión reducida y el material crudo se dividió entre CH2Cl2/agua y la capa acuosa se extrajo con CH2C12 (3 x 15 mL) . Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea eluyendo con 3% MeOH/CH2Cl2 para dar 0.030 g (0.080 mmol, 29%) del compuesto 19 como un sólido amarillo claro. CLA : 100% a 1.720 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220nm) . EM (ES): m/z 376.11 [ +H]+.
Ejemplo 20 (3a , 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi- 2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (20B) A. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4 , 7 -epoxiisobenzofuran- 1, 3 -diona Se disolvió dimetil furano recientemente destilado (1.60 mL, 15.3 mmol) en CH2Cl2 (2.0 mL) y se agregó anhídrido maleico (1.00 g, 10.2 mmol). La reacción se agitó a 25°C por 16 h y se concentró después in vacuo para dar un sólido amarillo. Este sólido se disolvió en acetato de etilo (30 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.200 g, cat . ) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo y la reacción se agitó por 24 h. La mezcla de la reacción se filtró a través de Celite, enjuagando con EtOAc seguido por concentración in vacuo para dar 1.69 g (8.61 mmol, 84%) del compuesto 20A como un sólido blanco. Los experimentos de NOE bi -dimensional , confirmaron la asignación estructural que era la del compuesto 20A.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7 -dimetilo- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (20B) Una solución del compuesto 20A (603 mg, 3.21 mmol) , 5-amino-2 -cianobenzotrifluoruro (640 mg, 3.44 mmol) y TsOH (10 mg, cat . ) en tolueno (5 mL) , se calentó en un tubo sellado por 2 días. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró después bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 50% EtOAc/hexanos dio 400 mg (1.10 mmol, 34%) del compuesto 20B como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.04 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) , EM (ESI): m/z 382.2 [M+NH4]+.
Ejemplo 21 (3aa,4p,73,7aa) -N- [4- [ [2- [2- [4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil] octahidro-7 -metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- 4H-isoindol-4-il] etil] tio] fenil] acetamida (21E) A. 5-Metil-2-furanoetanol (21A) Una solución de n-BuLi (83.0 mL, 133 mmol, 1.6 M en hexanos) se agregó a una solución agitada de 2 -metilfurano (10.0 mL, 111 mmol) en THF (85 mL) a 0°C bajo atmósfera inerte. La mezcla de reacción se agitó por 4 h a temperatura ambiente y después se enfrió hasta 0°C. Se agregó óxido de etileno (8.30 mL, 166 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. Después de apagar con NH4C1 acuoso saturado, se separaron las capas resultantes y la capa acuosa se extrajo con Et20 (2 X 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron bajo presión reducida. La destilación a presión atmosférica (170-185 °C) dio 10.1 g (80.3 mmol, 72%) del compuesto 21A como un aceite amarillo ligero .
B. 2- (2 -Bromoetil) - 5 -metilfurano (21B) Se agregó Ph3Br2(3.68 g, 8.72 mmol) a una solución del compuesto 21A (1.00 g, 7.93 mmol) en DMF (8 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La mezcla de reacción se le agregó a H20 y se extrajo con EtOAc (3 X) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20 (2 X) , se secaron sobre Na2S04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% EtOAc/hexanos dio 0.507 g (2.68 mmol, 34%) del compuesto 21B.
C. N- [4 [ [2- (5-Metil-2-furanil) etil] tio] fenil] acetamida (21C) A una solución de 4 -acetamidotiofenol (442 mg, 2.64 mmol) en THF (1 mL) a 0°C bajo atmósfera inerte, se le agregó una solución de n-BuLi (2.00 mL, 3.17 mmol, 1.6 M en hexanos) en THF (1 mL) . La solución de reacción se agitó a temperatura ambiente por 10 min., después se agregó una solución del compuesto 21B (500 mg, 2.64 mmol) en THF (3 mL) . Después de que se consumió el material de partida (como se determina por CCD) , la reacción se apagó con H20 y la mezcla se extrajo con EtOAc (2X) , se secó sobre Na2S0 y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 50% EtOAc/hexanos dio 0.644 g (2.34 mmol, 88%) del compuesto 21C. EM (ESI) : m/z 276.09 [M+H] +.
D. (33a,4ß,7ß,73a) -N- [4- [ [2- [2- [4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil] - 1,2,3, 3a, 7 , 7a-hexahidro-7 -metil - 1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-4H-isoindol-4 - il] etilo] io] fenilo] acetamida (2ID) Una solución del compuesto 21C (195 mg, 0.708 mmol) y 4- (2, 5-dihidro-2, 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (377 mg, 1.416 mmol, preparada como se describe para el Ejemplo IB) en CH2C12 (1.5 mL) se agitó a temperatura ambiente por dos días. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto 2 ID como se determina por los análisis de RMN . El compuesto 2 ID se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.
E. (3aa,4p,7 ,7aa) -N- [4- [ [2- [2- [4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil] -octahidro-7 -metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4-il] etil] tio] -fenil] acetamida (21E) Una solución del compuesto crudo 2 ID (0.708 mmol) y 10% Pd/C (200 mg) en MeOH (20 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante la noche. La purificación por CLAR de fase inversa [34.4 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 20 x 250 mm 0-100% de metanol acuoso durante 30 minutos conteniendo 0.1% TFA, 10 mL/min. , observando a 220 nm) ] seguida por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 1% MeOH/CH2Cl2 dio 29 mg (0.053 mmol, 7.5%) del compuesto 21E como un polvo amarillo. CLAR: 99% a 3.44 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm. 10- 90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% de ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 544.01 [M+H]+.
Ejemplo 22 (3aa,43,73,7aa) -N- [4- [ [2- [2- [4-ciano-3- ( trifluorometil) fenil] octahidro-7 -metil-1, 3-dioxo-4/ 7 -epoxi - 4H-isoindol-4-il] etil] sulfinil] fenil] acetamida (22) Se agregó en porciones mCPBA (12 mg, 0.050 mmol) a una solución del compuesto crudo 21E (65 mg, 0.12 mmol) en CH2C12 (6 mL) hasta que se consumió el material de partida. La purificación por CLAR de fase inversa [30.5 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 30 x 250 mm. 0-100% de metanol acuoso durante 30 minutos conteniendo 0.1% 7FA, 25 mL/min., observando a 220 nm) ] dio 27.5 mg (0.0491 mmol . 41%) del compuesto 22 como un sólido beige (-1:1 mezcla de diastereómeros) . CLAR: 96% a 2.88 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 559.97 [M+H]+.
Ejemplo 23 (3aoc, 4ß, 7ß, 7aoc) -N- [4- [[2- [2- [4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil] octahidro-7 -metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi- 4H- isoindol-4-il] etil] sulfonil] fenil] acetamida (23 ) Se agregó el mCPBA (26 mg, 0.11 mmol) a una solución del compuesto 21E (19 mg, 0.035 mmol) en CH2C12 (6 mL) y la reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que el material de partida y el sulfóxido intermediario (compuesto 22) se consumieron como fue evidente por la CCD. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa [53.3 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 30 x 250 mm, 0- 70% metanol acuoso durante 45 minutos conteniendo 0.1% TFA, 25 mL/min., observando a 220 nm) ] dio 8.0 mg (0.014 mmol , 40%) del compuesto 23 como un sólido blanco. CLAR : 99% a 2.94 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 575.95 [M+H] + .
Ejemplo 24 (3aa,43, P,7aa) - y (3ßa,4a, 7a, 7a ) -N- [2- [2- [4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil] octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 4H-isoindol-4-il] etil] benzensulfonamida (24Ci y 24Cii, respectivamente) A. 5-Metil-2-furanoetanol 4-metilbencensulfonato (24A) Se agregó cloruro de 4 -Metilbencensulfonilo (907 mg, 4.76 mmol) a una solución del compuesto 21A (500 mg, 3.96 mmol) en 6 mL de piridina seca. La reacción se agitó a temperatura ambiente por 4 h y después se apagó con hielo. La mezcla de reacción se extrajo con CHC12 y las capas orgánicas combinadas se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso saturado y agua, se secaron y se concentraron bajo presión reducida para dar 900 mg (81%) del compuesto 24A como un aceite amarillo.
B. N- [2- ( 5 -Metil - 2 - furanil) etil] bencensulfonamida (24B) Se agregó bencensulfonamida (157 mg, 1.00 mmol) a una solución acuosa al 10% de hidróxido de sodio (0.40 mL, 1.0 mmol). Una solución del compuesto 24A (280 mg, 1.00 mmol) en acetona (1 mL) se agregó después. La mezcla de reacción se calentó a 90 °C por 8 h después se enfrió a temperatura ambiente. Se agregó hielo y la mezcla se extrajo con CH2C12. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con CH2Cl2 dio 60 mg (0.23 mmol, 23%) del compuesto 24B como aceite amarillo.
C. (3aoc,4 ,7p,7aa) - y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -N- [2 - [2 - [4-Ciano-3 - (trifluorometil) fenil] octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4., 7-epoxi- 4H-isoindol-4-il] etil] bencensulfonamida (24Ci y 24Cii, respectivamente) El 4- (2 , 5-Dihidro-2 , 5 -dioxo- ??-pirrol - 1 - il ) -2 -trifluorometilbenzonitrilo (129 mg, 0.485 mmol , preparado como se describe en el Ejemplo IB) se agregó a una solución del compuesto 24B (60 mg, 0.23 mmol) en CH2C12 (2 mL) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 2 días, se concentró bajo presión reducida y se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con 70% EtOAc/hexanos, para dar 20 mg (0.038 mmol, 16%) del producto insaturado de Diels-Alder. El producto insaturado (20 mg) se disolvió inmediatamente en etanol (2 mL) y se agregó 10% Pd/C (10 mg, ca . ) . La solución se agitó a temperatura ambiente durante la noche bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró bajo presión reducida. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa dio 7.0 mg (0.013 mmol, 34%) del compuesto 24Ci y 2.0 mg (0.0037 mmol, 10%) del compuesto 24Cii. Compuesto 24Ci: CLAR: 96% a 3.17 min. (tiempo de retención) (YMC ODSA S5 C18 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. gradiente con 0.1% TFA, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z: 533.99 [M+H]+. Compuesto 24Cii : CLAR: 99% a 38.95 min. (tiempo de retención) (YMC ODS S5 20X250 mm, 10%-90% de metanol acuoso durante 40 min. gradiente con 0.1% TFA, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 533.99 [M+H]+.
Ejemplo 25 (3aoc, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro-4- [2-hidroxietil) -7-metil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (25B) A. (3aa,4p,7p,7aa) - y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4 - [1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 - ( 2 -hidroxietil ) -7 -metil- 1,3-dioxo-4,7-epoxi - 2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (25Ai y 25Aii, respectivamente) Una solución del compuesto 21A (252 mg, 2.00 mmol) y 4- (2, 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (798 mg, 3.00 mmol) en CH2C12 (10 mL) se agitó a temperatura ambiente por 2 días. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 65% EtOAc/hexanos dio 217 mg del compuesto puro 25Ai( 73 mg del compuesto puro 25Aii y 310 mg de una mezcla de ambos compuestos 25Ai y 25ii. Todas las tres fracciones se aislaron como sólidos blancos con un rendimiento total aislado de 600 mg (1.53 mmol , 76.5%) . Compuesto 25Ai: CLAR: 90% a 2.56 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . Compuesto 25Aii: CLAR: 90% a 2.56 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. (3aa,4 , 7ß, 7aa) -4- [0ctahidro-4- (2-hidroxietil) -7-metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (25B) Una solución del compuesto 25Ai (0.20 g, 0.51 mmol) y 10% Pd/C (43 mg, cat . ) en EtOH (12 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente por 2 h. La mezcla de la reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida para dar 0.20 g (0.51 mmol, 100%) del compuesto 25B como un sólido blanco. CLAR: 95% a 2.59 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 394.97 [ +H] +.
Ejemplo 26 (3aa,43,7 , 7aa) - y ( 3aa, 4a, 7a, 7aa) -N- [4 - [2 - [2 - [4 -Ciano- 3 - (trifluorometil) fenil] octahidro-7 -metil -1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi 4H-isoindol-4-il] etoxi] fenil] acetamida (26Ci y 26Cii. respectivamente) A. 2- [4- [2- (5-Metil-2-furanil) etoxi] fenil] acetamida (26A) Se agregó trifenilfosfina (681 mg, 2.60 mmol) a una solución del compuesto 21A (252 mg, 2.00 mmol) y 4-acetamidofenol (302 mg, 2.00 mmol) en CH2C12 (4 mL) . Se agregó THF (5 mL) para hacer la mezcla de reacción homogénea y la mezcla se enfrió después a 0°C. Se agregó gota a gota DEAD (0.41 mL, 2.6 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, se concentró después bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 60% EtOAc/hexanos seguida por CLAR preparativa de fase inversa dio 270 mg (1.04 mmol , 52%) del compuesto 26A como un sólido café claro. EM (ESI): m/z 260.09 [M+H]+.
B. (3aa, ß, 7ß, 7aa) y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -N- [4 - [2 - [2 - [4 -Ciano-3 - ( trifluorometil) fenil] -1,2, 3, 3a, 7, 7a-hexahidro-7-metil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4-il] etoxi] fenil] acetamida (26Bi y Una solución del compuesto 26A (40 mg, 0.15 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5 -dioxo- ??-pirrol - 1 - il ) -2-trifluorometilbenzonitrilo (88 mg, 0.31 mmol) en CH2C12 (2 mL) se agitó a temperatura ambiente por 2 días. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 75% EtOAc/hexanos dio 55 mg (0.105 mmol, 68%) de una mezcla 5:1 de los compuestos 26Bi y 26Bii como un sólido blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa. CLAR: 90% a 3.28 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
C. (3aa,4p,7p,7aa) - y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -N- [4- [2 - [2- [4-Ciano-3 - (trifluorometil) fenil] octahidro-7 -metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-4H-isoindol-4-il] etoxi] fenil] acetamida (26Ci y 26Cii, respectivamente) Una solución de una mezcla de los compuestos 26Bi y 26Bii (55 mg, 0.105 mmol) y 10% Pd/C (12 mg, cat . ) en EtOH (3 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de la reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida para dar 50 mg del producto crudo. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 70% EtOAc/hexanos dio 18 mg (0.034 mmol, 32%) del compuesto 26Ci [CLAR: 96% a 3.33 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 528.01 [M+H] +] ; y 2.3 mg (0.0044 mmoles, 4%) de una mezcla 85:15 de 26Cii y 26Ci respectivamente como se determina por 1H RMN. CLAR: 90% a 3.35 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 528.12 [M+H] + .
Ejemplo 27 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-2 - (2-naf alenil) -4 , 7 -epoxi-lH- isoindol - 1 , 3 (2H) -diona (27D) A. ácido (endo, endo) -7 -Oxabiciclo [2.2.1] hept- 5-eno-2 , 3 -dicarboxílico (27A) Los compuestos 27A, 27B y 27C fueron sintetizados de acuerdo con los métodos descritos en Sprague et al. J. Med. Chem. 28, 1580-1590 (1985) . Una mezcla de furano (100 mL, 1.38 mol) y ácido maleico (160 g, 1.38 mol) en H20 (340 mL) se agitó a temperatura ambiente por 5 días. La mezcla se colocó en un embudo separador y la capa acuosa se separó de la capa que contenía el furano sin reaccionar. La capa acuosa se trató con carbón mineral, se filtró a través de Celite y se colocó en el refrigerador. El producto deseado cristalizado de la solución al recolectarse, se filtró, se lavó con agua fría y se secó sobre P205 para dar 70 g (0.38 mol, 28%) del compuesto 27A como un sólido blanco.
B. Ácido (endo , endo) -7 -Oxabiciclo [2.2.1] heptano-2 , 3-dicarboxílico (27B) A una solución del compuesto 27A (69.0 g, 0.375 mol) en EtOH (700 mL) se agregó 10% Pd/C (4.5 g, cat . ) y la mezcla se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a 55 psi (3.87 kg/cm2) hasta que cesó la absorción de gas. La mezcla se filtró a través de Celite y se concentró in vacuo para dar 66.0 g (0.355 mol, 95%) del compuesto 27B como un sólido blanco. (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-4 , 7-epoxiisobenzofuran-l, 3-diona 7C) Una solución del compuesto 27B (66.0 g, 355 mol) en cloruro de acetilo (300 mL) se puso a reflujo por 1 h. La solución de reacción se concentró in vacuo y el residuo resultante se recristalizo de benceno para dar 49.2 g (0.292 mol, 82%) del compuesto 27C como un sólido blanco (>99% endo por ¾ RMN) .
D. (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-2 - (2 -naftalenilo) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (27D) El compuesto 27C (45 mg, 0.30 mmol) se combinó con 2-aminonaftaleno (47 mg, 0.33 mmol) en ácido acético (1 mL) y se calentó a 115°C durante la noche. Después de que la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se agregó una gota de agua, y se filtró el precipitado resultante. El material se lavó con metanol y se secó para proporcionar 65.7 mg (0.224 mmol, 74.7%) del compuesto 27D como un sólido cristalino blanco. CLAR: 99% a 2.68 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 294.0 [M+H]+.
Ejemplo 28 (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -Hexahidro-4- (2-naftalenil) -2 , 6-epoxi- 3H-oxireno [f] isoindol-3 , 5 (4H) -diona (28B) A. (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -Tetrahidro-2 , 6-epoxioxireno [f] isobenzofuran- 3 , 5 (2aH, 5aH) -diona (28A) Como se describe en Yur'ev et al . J. Gen. Chem. U.S.S.R. (Trad. Al Inglés) 31, 772-775 (1961) , una solución de anhídrido exo-7-oxabiciclo [2.2.1] heptano-2 , 3 -dicarboxílico (5.00 g, 30.1 mmol) , ácido fórmico (10 mL) y peróxido de hidrógeno (6 mL) se agitó a temperatura ambiente. Después de 30 min. , la reacción se colocó en un baño de hielo (se volvió exotérmica con la evolución del gas) y se dejó calentar a temperatura ambiente lentamente. Después de agitar durante la noche, se colectó el precipitado resultante por filtración y se lavó con ácido acético glacial y se secó para dar 3.02 g de un polvo blanco. El sólido crudo se puso a ebullición en cloruro de acetilo (100 mL) por 10 horas y la mezcla se concentró a alrededor de 20 mL bajo presión reducida. El precipitado resultante se filtró, se lavó con dioxanos y se secó para dar 2.37 g (13.0 mmol, 43%) del compuesto 28A como un polvo blanco.
B. (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -Hexahidro-4- (2 -naftalenil) -2,6-epoxi-3H-oxireno [f] isoindol-3 , 5 (4H) -diona (28B) El compuesto 28A (100 mg, 0.520 mmol) se combinó con 2-aminonaftaleno (62.1 mg, 0.434 mmol) en ácido acético (2 mL) y se calentó a 115 °C durante la noche. Después de que la reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se agregó agua, y el precipitado resultante se filtró. El material se lavó secuencialmente con K2C03 acuoso y agua y se secó después en un horno a vacío para proporcionar 113.7 mg (0.371 mmol, 85.5%) del compuesto 28B como un sólido cristalino blanco apagado. CLAR: 99% a 1.76 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 308.0 [M+H]+.
Ejemplo 29 8-óxido de (3aa,4a, 7a, 7aa) -2- [4-Bromo-3- ( trifluorometil) fenil] -3a, , 7 , 7a- tetrahidro-4 , 7 -dimetil-4 , 7- epitio-lH-isoindol-1, 3- (2H) -diona (29) El 2 , 5-Dimetiltiofeno (0.048 mL, 0.42 mmol) y 4-(2.5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (0.290 g, 0.625 mmol, preparado como se describe por el Ejemplo IB) se disolvieron en CH2C12 (8.0 mL) y se enfriaron a -20°C. Se agregaron lentamente BF3»Et20 (0.412 mL, 3.36 mmol ) seguido por la adición de mCPBA (-50%, 0.29 g, 0.84 mmol). Después de 2 horas a -20 °C, la mezcla de reacción se vació en NaHC03 acuoso saturado y se extrajo con CH2C12, (3 x 20 mL) y los compuestos orgánicos se secaron sobre Na2S0 anhidro. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 5%-10%-20% EtOAc en CH2C12 para dar 0.119 g (0.265 mmol, 63%) del compuesto 29 como un sólido blanco. CLAR: 91% a 3.303 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 480.2 [M+H]+.
Ejemplo 30 8-óxido de (3aa,4a, 7a, 7aot) -2- [4-Bromo-3- ( trifluorometil) fenil] -3a, 4, 7 , 7a- tetrahidro-4 , 7-epitio-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona (30) Tiofeno (0.375 mL, 4.69 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (0.100 g, 0.313 mmol , preparado como se describe en el Ejemplo IB) se disolvieron en CH2C12 (50 mL) , se agregó mCPBA (-50%, 1.62 g, 4.69 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 25°C por 3 h. Se agregó después trifenilfosfina (2.0 g) . Después de 15 min-., se separaron los volátiles in vacuo y el residuo resultante se disolvió en CH2C12 (200 mL) y se lavó con NaHC03 saturado acuoso (3 x 50 mL) y se secó sobre Na2S0 . El material crudo se purificó después por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 1% - 3% - 5% metanol en CH2C12 para dar 0.059 g (0.14 mmol, 45%) del compuesto 30 como un polvo blanco. Los análisis de RMN y CL mostraron un diastereómero sencillo. CLAR: 100% a 3.437 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 443.2 [M+H]+.
Ejemplo 31 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-2 - [3- ( trifluorornetil) fenil] -4,7- imino-lH-isoindol-1 , 3 (2H) -diona (31D) A. Ester de 7- (1, 1-dimetiletil) 2 , 3 -dimetilo del ácido 7-Azabiciclo [2.2.1] hepta-2 , 5-dieno-2 , 3 , 7 - tricarboxílico (31A) El éster de dimetilo del ácido acetilendicarboxíÜGO recientemente destilado (6.7 mL, 54 mmol) y N- (tert-butiloxicarbonil) -lH-pirrol (9.0 mL, 54 mmol) se combinaron y se calentaron a 120°C por 3 h. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con EtOAc/CH2Cl2 dio 8.3 g (27 mmol, 50%) del compuesto 31A como un sólido amarillo .
B. Ester de 7- (1, 1-dimetiletilo) del ácido (exo, endo) -7 -Azabiciclo [2.2.1] hept-2 , 5-dieno-2 , 3 , 7 - tricarboxílico (3 IB) El compuesto 31A (1.0 g, 3.5 mmol) se disolvió en MeOH (2.0 mL) y se agregó KOH acuoso (1 g en 5 mL de H20) . La reacción se calentó a 50 °C por 1 h. La reacción se enfrió después hasta 25°C y se agregó 10% Pd/C (0.5 g, cat . ) y la mezcla se colocó en un aparato Parr por 14 h a 25°C. La reacción se filtró después a través de Celite enjuagando con agua. La solución acuosa se acidificó hasta un pH de 2 por la adición de HCl 1 N y después se extrajo con EtOAc (2 x 100 mL) . La concentración de los orgánicos dio el compuesto 3 IB como un sólido amarillo pálido.
C. Ester de 1, 1-dimetiletilo del ácido (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-1,3-dioxo-4 , 7 -iminoisobenzofuran-8-carboxí1ico El compuesto crudo, 31B, se calentó hasta 120°C in vacuo en una cámara de sublimación, resultando en una sublimación de 0.051 g (0.19 mmol , 5.4%) del compuesto 31C como un sólido blanco, que se recolectó directamente y se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
D. (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Hexahidro-2 - [3- (trifluorometil) fenil] -4,7-imino-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (31D) El compuesto 31C (0.050 g, 0.19 mmol) y el l-amino-3-(trifluorometil ) benceno (0.030 g, 0.19 mmol) se disolvieron en AcOH (2.5 mL) y se calentaron a 115°C por 4.5 h. La reacción se apagó por la adición de NaHC03 saturado acuoso y la mezcla se extrajo con cloruro de metileno (3 x 15 mL) . El material crudo se purificó por CLAR preparativa de fase inversa para dar 0.030 g (0.097 mmol , 51%) del compuesto 31D como un sólido blanco. CLAR : 99% a 2.33 min . (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 311.15 [M+H]+.
Ejemplo 32 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) - y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -3a, 4 , 7 , 7a, Tetrahidro- , 7 - dimetil-2- [3- ( trifluorometil) fenil] -4, 7 -epoxi - 1H- isoindol - 1, 3 (2H) -diona (32i y 32ii respectivamente) 2 , 5 -dimetilfurano recientemente destilado (0.32 mL, 2.6 mmol) se disolvió en CH2C12 (2.0 mL) y se agregó l-[3- (trifluorometil) fenil] - lH-pirrol -2 , 5-diona (0.5 g, 2.5 mmol, preparada como se describe en el Ejemplo IB) . La reacción se agitó a 25°C por 16 h y se concentró después bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 0.5% MeOH/CH2Cl2 dio 250 mg (0.741 mmol, 30%) del compuesto 32i, y 50 mg (0.15 mmol , 6%) del compuesto 32ii como sólidos blancos. Compuesto 32i: CLAR: 98% a 3.080 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 X 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 338.30 [M+H]+. Compuesto 32ii: CLAR: 92% a 3.047 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z : 338.15 [M+H] +.
Ejemplo 33 (3aa,4P,7P,7aa) -Hexahidro-4 , 7-dimetil-2 - [3- trifluorometil) fenil] -4 , 7 -epoxi- 1H- iaoindol - 1, 3 (2H) -diona (33 ) El compuesto 32i (0.080 g, 0.24 mmol) se disolvió en EtOAc (2 mL) y EtOH (1 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.050 g, cat . ) . Se introdujo después hidrógeno por un globo y la reacción se agitó por 24 h. La mezcla se filtró a través de Celite, se enjuagó con EtOAc y se concentró in vacuo para dar 0.075 g (0.22 mmol, 93%) del compuesto 33 como un sólido blanco. No fue necesaria purificación adicional. CLAR: 90% a 3.233 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 340.40 [M+H] +.
Ejemplo 34 (3aa,4 ,7 ,7aa) -Tetrahidro-5-metil-2 - (4-nitro-l-naftalenil) - 4, 7-eteno-lH-pirrol [3 , 4-c] iridina- 1, 3 , 6 (2H, 5H) - triona (34B) A. 4 , 5, 7 , 7a-Tetrahidro-5-metil-4 , 7 -etenofuro [3 , 4-c] piridina- 1, 3 , 6 (3aH) -triona (34A) El compuesto 34A fue sintetizado por una modificación de los métodos descritos por Tomisawa et al. Heterocycles 6, 1765-1766 (1977) & Tetrahedron Lett. 29, 2465-2468 (1969) . Se suspendieron anhídrido maleico (2.00 g, 20.4 mmol) y 1-metil- 2-piridona (2.22 g, 20.4 mmol) en 30 mL de tolueno anhidro.
El recipiente de reacción se acopló con una trampa Dean Stark y se puso a reflujo por 48 horas. La solución obscura coloreada se dejó enfriar a temperatura ambiente y después se separaron los volátiles in vacuo. La pasta café resultante (4 g) se disolvió en 10 mL de tolueno en ebullición y la solución caliente se filtró bajo un flujo de nitrógeno para eliminar los materiales en partículas. Al reposar a 25°C se precipitó el producto deseado de la solución. Se aisló el sólido por filtración y se lavó con tolueno frío para dar 1.0 g (4.8 mmol, 24%) del compuesto 34A, que se usó sin purificación adicional.
B. (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Tetrahidro-5-metil-2- (4 -nitro- 1-naftalenilo) -4, 7-eteno-lH-pirrol [3 , 4 -c] piridina-1, 3 , 6 (2H,5H) -triona (34B) Se disolvieron el l-Amino-4 -nitronaftaleno (0.094 g, 0.50 mmol) y el compuesto 34A (0.130 g, 0.627 mmol) en AcOH (2.0 mL) y se calentaron a 110°C por 11 h. La reacción se enfrió después hasta 25°C y se vació en K2C03 saturado acuoso frío y se agitó vigorosamente por 10 min. La solución se filtró y se lavó con agua. El filtrado resultante se concentró in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 4:6 EtOAc/hexanos para dar 0.172 g (0.456 mmol, 91%) del compuesto 34B como un sólido blanco. CLAR : 92% a 2.472 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 378.29 [M+H]+.
Ejemplo 35 (3aa, 4ß, 7 7aa) -4- [4- [2- [4-Fluorofenoxi) etil] octahidro-7 -- metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (35) Se agregó DEAD (0.060 mL, 0.38 mmol) a una solución de trifenilfosfina (100 mg, 0.380 mmol) en THF (1.3 mL) a temperatura ambiente bajo una atmósfera inerte. Después de agitar por 10 min., se agregó 4-fluorofenol (43 mg, 0.380 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se agitó por 5 min., se agregó el compuesto 25B (100 mg, 0.254 mmol) y se continuó la agitación por 3.5 h. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 50% EtOAc/hexanos seguida por CLAR preparativa de fase inversa [11.93 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 20 x 100 mm, 0-100% de metanol acuoso durante 10 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) ] dio 72 mg (58%) del compuesto 35 como un sólido. CLAR: 99% a 3.74 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . E (ESI) : m/z 487.1 [M-H] +.
Ejemplo 36 (3aoc, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [4- (2-Bromoetil] octahidro-7 -metil-1, 3 - dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (36) Una solución de 25B (495 mg, 1.26 mmol) y piridina (100 µ???, 1.26 mmol) en CH2C12 (2 mL) se agregó a una solución de Ph3PBr2 (636 mg, 1.51 mmol) en CHC1 (2 mL) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 3 horas, después se separó el solvente bajo presión reducida. El residuo resultante se lavó 2X con porciones de 10 mL de EtOAc-hexano (6:4) y los lavados combinados se purificaron por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 60% EtOAc/hexano para dar 390 mg (0.853 mmol, 67.7%) del compuesto 36 como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.51 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 1 90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0. ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI m/z 456.7 [M-H] " .
Ejemplo 37 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7-dimetil-2- (3 -metil-4- Una combinación de 4 -nitro-3 -metilanilina (0.050 g, 0.33 mmol) , compuesto 20A (0.083 g, 0.43 mmol) , TEA (0.2 mL) , MgS04 (0.075 g) y tolueno (0.8 mL) se combinaron en un tubo sellado y la mezcla se calentó a 120°C por 14 h. Después de enfriar hasta 25°C, la reacción se filtró, se enjuagó con CH2C12 y se concentraron bajo presión reducida. El producto crudo se purificó por CCD preparativa sobre Si02 eluyendo con CH2C12 para dar 0.075 g (0.23 mmol, 69%) del compuesto 37 como un sólido amarillo pálido. CLAR: 100% a 2.733 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 X 50 mm; 10-90% MeOH/H20 gradiente, + 0.1% TFA; 4 mL/min., detección a 220 nm) . EM (ES): m/z 348.2 [M+NH41+- Ejemplos 38 al 121 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 38 al 121 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde G, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado, son establecidos en la Tabla 2. Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 2 son como sigue: CLEM = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA; 4 mL/min., observando a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 2, en donde se proporciona, se determinó por EM (ES) por la fórmula m/z.
Tabla 2 Tiempo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa EL Molecular 38 (3aoc, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (2- 3.72 8 fluorenil ) hexahidro- , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 332.20 diona [M+H] + 39 (3aa, 4ß,7ß, 7aa) -2- [3-cloro-4- 3.20 8 (4- CLEM/ morfolinil) fenil] hexahidro- 363.20 4 , 7-epoxi-lH-isoindol- [M+H] + 1,3 (2H) -diona 40 (33<?,4ß, 7ß,73a)-2-(2,3- 3.26 8 dihidro-lH-inden-5- CLEM/ il) hexahidro-4, 7-epoxi-lH- 284.22 isoindol-1 , 3 (2H) -diona [M+H] + 41 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-bromo-l- 3.73 8 XX naftalenil) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - 404.11 diona [M+CH3OH+H] + 42 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-cloro-l- 3.63 8 naftalenil ) hexahidro- , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 328.14 diona [M+H] + Tienpo de Pro. Retención de o. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa £L Molecular 43 (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -2- ( 5-amino-l- 1.64 8 naftalenil ) hexahidro- , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - H2 ^^^ diona 44 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2-hexahidro- 2.54 8 2- (7-hidroxi-l-naftalenil) - CLEM/ 4 , 7-epoxi-lH-isoindol- 308.23 1,3 (2H) -diona [M-H] " 45 (3aa, ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 3.117 8 (4-nitro-l-naftalenil) - 4,7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-l , 3 (2H) - 404.11 diona [M+CH3OH+H]+ 46 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.39 8 (lH-indol-5-il) -4, 7-epoxi-lH- CLEM/ isoindol-1, 3 (2H) -diona 283.23 [M+H] + 47 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.35 8 ( lH-indazol-6-il) - , 7-epoxi- CLEM/ N-NH lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona 282.23 [M+H] + Tienpo de Pro. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa SL Molecular 5 48 (3acc, 4ß, 7ß, 7a ) -2- (1,3- 2.47 8 benzodioxol-5-il ) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) -diona 288.20 [M+H] + 49 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- [4-amino-3- 2.71 8 10 ( trifluorometil ) fenil] hexahidro- CLEM/ 4, 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - 327.20 diona [M+H] + 50 (3aa, ß,7ß, 7aa) -2- ( 3-cloro-4- 3.70 8 yodofenil ) hexahidro-4 , 7-epoxi- CLEM/ lH-isoindol-1 , 3 (2H) -diona 435.2 15 CI [M+CH3OH] + 51 (3aa, ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- (8- 2.28 8 quinolinil)-4, 7-epoxi-1H- CLEM/ isoindol-1 , 3 (2H) -diona 295.22 [M+H] + 20 52 (3acc, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (2 , 3-dihidro- 2.55 8 1, -benzodioxin-6-il) hexahidro- CLEM/ 4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) - 302.23 diona [M+H]+ 25 Tienpo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa SÍ. Molecular 53 (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -hexahidro-2- 3.38 8 °??? [2-OXO-4- (trifluorometil) -2H- CLEM/ l-benzopiran-7-il ] -4, 7-epoxi- 412.17 CF, lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona [M+CH3OH+H] + 54 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.74 8 (4-metil-2-oxo-2H-l- CLEM/ benzopiran-7-il ) -4, 7-epoxi- 326.20 lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona [ +H] + CH3 55 (33a,4ß,7ß,73a)-2-(2,5- 2.70 8 dimetoxi-4- CLEM/ nitrofenil ) hexahidro-4 , 7- 349.23 epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - [M+H]+ diona 56 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2,3,5,6- 2.97 8 tetrafluoro-4- (octahidro-1 , 3- CLEM dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol- F 2-il ) benzonitrilo Tiempo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa SL Molecular 77 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-amino-3- 2.34 8 nitrofenil ) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2?) - 302.27 diona [M-H] " 78 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 3.02 8 (4-metil-3-nitrofenil) - 4,7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 335.20 diona [M+CH3OH+H] + 79 (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -2- (3, 4- 2.35 8 dimetoxifenil ) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 304.25 OCH3 diona [M+H] + 80 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 0.98 8 ( 3-hidroxi-4-metoxifenil ) - CLEM/ 4, 7-epoxi-lH-isoindol- 321.19 OH 1,3 (2H) -diona [M+CH3OH]+ 81 (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -hexahidro-2- 0.54 8 ( 4-metil-5-nitro-2- CLEM/ piridinil ) -4 , 7-epoxi-lH- 304.20 isoindol-1, 3 (2H) -diona [M+H]+ Tiempo de Pro.
Ej. Retención de No . G Nombre del Compuesto (Min. ) Masa Molecular 82 (3a , 4ß, 7ß, 7aa) -2-cloro-4- 3.67 8 (octahidro-1, 3-dioxo-4 , 7- CLEM/ epoxi-2H-isoindol-2-il) -a- 423.8 [M+CH3OH] * fenilbencenacetonitrilo 83 (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -hexahidro-2- 3.66 8 (2-metoxi-3-dibenzofuranil) - CLEM/ 4 , 7-epoxi-lH-isoindol- 364.25 1,3 (2H) -diona [M+H] + 84 (3aa, ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 3.06 8 (2,3, 4-trifluorofenil) -4,7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - 298.14 F diona [M+H] + 85 (3a , 4ß, ?ß,?& ) -2- (2, 3- 2.70 8 dihidro-2-metil-l , 3-dioxo-lH- CLEM/ isoindol-5-il ) hexahidro-4 , 7- 359.22 epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - [M+CH3OH+H] * diona 86 (3aot, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-bromo- 3.72 8 2,3,5,6- CLEM/ tetrafluorofenil) hexahidro-4, 7- 426.07 F epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona [M+CH3OH+H] * Tiempo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min.) Masa Molecular 87 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.52 8 (2-hidroxi-l-naftalenil) - CLEM/ 4, 7-epoxi-lH-isoindol- 308.26 1,3 (2H) -diona [M-H] " 88 C! (3aa, 4ß,7ß, 7aa) -2- [2, 5- 3.70 8 dicloro-4- ( lH-pirrol-1- CLEM/ j¿r il) fenil] hexahidro-4, 7-epoxi- 376.64 IH-isoindol-l, 3 (2H) -diona [M-H] " 89 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.79 8 [4- (metoximetil ) -2-oxo-2H-l- CLEM/ benzopiran-7-il ] -4 , 7-epoxi- 356.26 IH-isoindol-l, 3 (2H) -diona [M+H] + 90 (3aa, 4ß,7ß,78a) -2- (6- 2.46 8 benzotiazolil ) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 301.19 diona [M+H] + 91 Éster de metílico del ácido 2.75 8 (3acc, 4ß, 7ß, 7aa) -2-metoxi-4- CLEM/ (octahidro-1 , 3-dioxo-4 , 7- 332.25 epoxi-2H-isoindol-2- [M+H] + il ) benzoico Tienpo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa L Molecular 97 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 3.05 8 (3-metoxi-4-metilfenil) -4, 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 288.23 OCH3 diona [M+H] + 98 (3aa, ß,7ß, 7aa) -N-etil-2- 3.56 8 metil-5- (octahidro-1 , 3-dioxo- CLEM/ 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) - 441.26 N-fenilbencensulfonamida [M+H]+ 99 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2, 6-dibromo- 2.25 8 4- (octahidro-1, 3-dioxo-4 , 7- CLEM epoxi-2H-isoindol-2- il ) bencensulfonamida 100 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2, 4-dimetil- 2.75 8 6- (octahidro-1, 3-dioxo-4 , 7- CLEM/ epoxi-2H-isoindol-2-il ) -3- 298.23 CH3 piridincarbonitrilo [M+H] + 101 3.00 8 rr (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -2- (2, 3- dimetil-lH-indol-5- CLEM/ il ) hexahidro-4 , 7-epoxi-lH- 311.26 H3C CH3 isoindol-1 , 3 (2H) -diona [M+H] + Tienpo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa Ej. Molecular 102 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (3- 3.72 8 dibenzofuranil ) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - 366.23 diona [M+CH3OH+H] + 103 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 3.70 8 (2'-hidroxi[l, V :3'1"- CLEM/ terfenil] -5' -il ) - 4,7-epoxi- 412.23 lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona [M+H] + 104 (3aa, ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 3.24 8 (5,6,7, 8-tetrahidro-3- CLEM/ hidroxi-2-naftalenil ) -4, 7- 312.32 epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - [M+H] + diona 105 (33a,4ß,7ß,73a)-2-(2,3- 2.42 8 dihidro-lH-indol-6- CLEM/ il) hexahidro-4 , 7-epoxi-lH- 285.29 ?? isoindol-1 , 3 (2H) -diona [M+H] + 06 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (1, 3-dihidro- 1.99 8 2,2-dióxidobenzo [c] tiofen-5- CLEM/ il) hexahidro-4, 7-epoxi-lH- 366.26 o isoindol-1, 3 (2H) -diona [M+H]+ Tiempo de Pro.
Ej. Retención de No. G Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa EL Molecular 107 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.78 8 (2-hidroxi-4 , 5-dimetilfenil ) - CLEM/ 4 , 7-epoxi-lH-isoindol- 286.32 1, 3 (2?) -diona [M-H] " 108 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (2, 3- 3.82 8 dihidro-2 ,2,3, 3-tetrafluoro- CLEM/ 1, 4-benzodioxin-6- 406.19 F il ) hexahidro-4 , 7-epoxi-lH- [M+CH3OH+H] + isoindol-1, 3 (2H) -diona 109 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.13 8 ( lH-indazol-5-il ) - , 7-epoxi- CLEM/ lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona 284.23 [M+H] + 110 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-amino- 2.60 8 2, 3, 5, 6-tetrafluorofenil ) - CLEM/ hexahidro-4, 7-epoxi-lH- 363.22 isoindol-1 , 3 (2H) -diona [M+CH3OH+H] + 11 (3aa, ß, 7ß, 7aa) -2- (4-bromo-3- 3.64 8 clorofenil) hexahidro-4, 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - 389.64 Cl diona [M+H] + Tienpo de Pro. Retención de 6 Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa. Ej. Molecular (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.48 8 ( 5-hidroxi-l-naftalenil) - CLEM/ , 7-epoxi-lH-isoindol- 308.27 1,3 (2H) -diona [M-H] " (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (octahidro- 3.28 8 1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H- CLEM/ isoindol-2-il) -2- 337.16 CF3 ( trifluorometil) benzonitrilo [M+H] + Ester de metilo del ácido 2.72 8 (33a,4ß,7ß,7&a)-2- (4- CLEM/ morfolinil) -5- (octahidro-1 , 3- 387.17 dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol- [M+H] + 2-il ) benzoico (3act, 4ß, 7ß, 7aa) -2-fluoro-5- 2.69 8 (octahidro-1 , 3-dioxo-4 , 7- CLEM/ epoxi-2H-isoindol-2- 319.26 C il) benzonitrilo [M+CH3OH+H] + {3aa, 4ß, 7ß,7ßa) -2- (4- 5.80 8 bromofenil ) hexahidro-4 , 7- CLEM/ epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - 393.0 diona [M+H] + Ejemplos 122 al 164 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por los procedimientos análogos a aquellos antes descritos. La Tabla 3 proporciona el nombre del compuesto y estructura, tiempo de retención, así como el número de Ejemplo del procedimiento sobre el cual se basa la preparación de la Tabla 3, para los compuestos de los Ejemplos 122 al 164. Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 3 son como siguen : CLEM = Columna YMC S5 ODS de 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% eOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA; 4 mL/min, observando a 220 nm. CL = Columna YMC S5 ODS de 4.6.x 50 mm eluyendo con 10- 90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm Tabla 3 Tienpo de Pro, Ej. Estructura del Retención de No . compuesto Nombre del Compuesto ( in. ) /Masa Ej. Molecular 127 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- ( 9-etil-9H- 3.73 8 carbazol-3-il) -3a, , 7, 7a- CLEM tetrahidro- , 7-epoxi-lH- isoindol-1 , 3 (2H) -diona 128 (3aa, 4ß, 7ß, 7acc) -2- [ 4-fluoro- 3.40 8 3- (trifluorometil ) fenil ] - CLEM 3a, 4 , 7 , 7a-tetrahidro-4 , 7- epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona 129 (3acc, 4ß, 7ß, 7aa) -2-[l,2- 3.14 8 dihidro-8-metil-2-oxo-4- CLEM (trifluorometil) -7- quinolinil ] -3a, 4,7,7a- tetrahidro-4 , 7-epoxi-lH- isoindol-1 , 3 (2H) -diona 130 (3aoc, 4a, 7a, 7aa) -4- 2.95 4 [ (acetiloxi)metil] -2- (4- CL bromo-3-metilfenil) - 3a, 4, 7 , 7a-tetrahidro- 4,7- epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona Tiempo de Pro.
Ej. Estructura del Retención de No. compues o Nombre del Compuesto (Min. ) Masa Ej. Molecular 131 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- 2.97 5 CH, [ (acetiloxi)metil] -2- (4- CLEM bromo-3-metilfenil) - 3a, , 7 , 7a-tetrahidro-4 , 7- epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona 132 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro- 3.08 20 4, 7-dimetil-2- [3- CL (trifluorometil ) fenil ] -4,7- epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - diona 133 (3act, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (octahidro- 3.00 20 4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7- CL epoxi-2H-isoindol-2-il ) -1- naftalencarbonitrilo 134 (3aa, 4ß,7ß, 7aa) - 3.61 20 (benzo [b] tiofen-3- CL il ) hexahidro-4 , 7-dimetil-4, 7- epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona Tienpo de Pro, Estructura del Retención de No. compuesto Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa L Molecular 135 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro- 3.21 20 4, 7-dimetil-2- [4-nitro-3- CL (trifluorometil) fenil-4 , 7- epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona 136 (3ac, 4ß, 7ß, 7aa) -4- 2.94 32 (1, 3, 3a, 4 , 7, 7a-hexahidro- , 7- CL LX ( dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il) -1- naftalencarbonitrilo 137 (3aa, ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-4- 2.88 3 metil-2- (2-naftalenil) -4,7- CL epoxi-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona 138 3.11 3 CH3 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-bromo-3- metilfenil ) hexahidro-4-metil- CL 4 , 7-epoxi-lH-isoindol- 1, 3 (2H) -diona 139 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-4-metil- 2.90 3 2- [3- (trifluorometil) fenil] -4,7- CL epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona Tienpo de Pro.
Ej. Estructura del Retención de No. compuesto Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa E¿. Molecular 145 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- [ 3-cloro-4- 2.81 3 (2-tiazolil) fenil ] hexahidro- CL 4-meti1-4 , 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona 146 li (3aa,4a,7a,7aa)-2-(3,5- 2.72 31 N diclorofenil ) hexahidro-4 , 7- CL imino-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - diona 147 (3aa, 4 ,7a,7aa)-2- (4-bromo-l- 2.95 31 naftalenil ) hexahidro-4 , 7- CL imino-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - Br diona 148 (3aa, a, 7a, 7aa) -2- (4-bromo-3- 2.65 31 metilfenil ) hexahidro-4 , 7- CL imino-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - Br diona 149 H N (3aa, a, 7a, 7aa) -hexahidro-2- 2.49 31 ( 4 -nitro-1-naftalenil) -4,7- CL imino-lH-isoindol-1 , 3 (2H) - N0 diona Tienpo de Pro.
Ej. Estructura del Retención de No. compuesto Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa Ej. Molecular 150 ( 3aa, 4a, 7a, 7aa) -8-acetil-2- 3.53 31, N (3, 5-diclorofenil ) hexahidro- CL 12 , 7-imino-lH-isoindol- c> 1,3 (2H) -diona 151 Ester de fenílico del ácido 3.397 9 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -octahidro- CL 1, 3-dioxo-2- [3- (trifluorometil ) fenil ] -4,7- etaño-5H-pirrolo [3,4- c] piridin-5-carboxilico 152 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4- (octahidro- 1.74 11 1, 3-dioxo-4, 7-etano-2H- CL pirrolo [3, 4-c]piridin-2-il) - 1-naftalencarbonitrilo 153 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4- (octahidro- 1.71 14 5-metil-l , 3-dioxo-4 , 7-etano- CL 2H-pirrolo [3,4-c]piridin-2- il) -1-naftalencarbonitrilo Tietipo de Pro.
Ej . Estructura del Retención de No. compuesto Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa 11: Molecular 154 Ester de f enilmetilico del ácido 3.40 10 (3aa, 4a, 7a,7aa) -2- (4-ciano-l- CL naftalenil) octahidro-1, 3-dioxo- 4, 7-eteno-5H-pirrolo [3, 4- c] piridin-5-carboxilico 155 ( 3aa, 4a, 7a, 7aa) -4- (octahidro-1 , 3- 1.74 11 HNI II 0 dioxo-4, 7-etano-2H-pirrolo [3, 4- CL c [piridin-2-il) -2- (trif luorometil) enzonitrilo 156 (3aa, 4a, a, 7aa) -4- (octahidro-5-metil- 1.65 14 1 , 3-dioxo-4 , 7-etano-2-h-pirrolo [3,4- CL ¾CF5 c] piridin-2-il-2- (trif luorometil) enzonitrilo 157 Ester de f enilmetilico del ácido 3.53 10 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- [4-ciano-3- CL (trifluorometil) fenil] octahidro- 1, 3-dioxo-4, 7-eteno-5H- pirrolo [3, 4-c]piridin-5- carboxilico Tiempo de E j . Estructura Retención No . del compuesto Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa Molecular 158 (3acc, 4a, 7a, 7aa) -2- [4-bromo-3- 2.95 (trif luorometil) fenil] tetrahidro- CLEM 5-metil-4 , 7-eteno-lH-pirrolo [3,4- c] iridin-1 , 3, 6 (2H, 5H) -triona 159 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -tetrahidro-5- 2.53 metil-2- [3- CLEM (trif luorometil) fenil] -4, 7-eteno- lH-pirrolo [3, 4-c]piridin- 1,3, 6 (2H, 5H) -triona 160 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -tetrahidro-5- 2.58 metil-2- (2-naf talenil) -4, 7-eteno- CLEM lH-pirrolo [ 3 , -c] piridin- 1,3,6 (2H, 5H) -triona 161 (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -hexahidro-4- 1.80 [3- (trifluorometil) fenil] -2, 6-epoxi- CLEM 3H-oxireno [f ] isoindol-3, 5- (4H) -diona 162 (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -4- (3, 5- 1.45 diclorofenil ) -hexahidro-2 , 6- CLEM epoxi-3H-oxireno [ f ] isoindol- 3, 5 (4H) -diona Tienpo de Pro.
E . Estructura del Retención de No . compuesto Nombre del Compuesto (Min. ) /Masa Ej. Molecular 163 (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) - 1.52 28 hexahidro-4- (4-nitro-l- CLEM naftalenil) -2, 6-epoxi-3H- oxireno [f] isoindol-3, 5 (4H) - diona 164 (1ßa,2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -4- 3.21 28 (3, 4-diclorofenil ) -hexahidro- CLEM 2, 6-epoxi-3H- ?? ? oxireno [f ] isoindol-3, 5- (4H) - diona Ejemplos 165 al 203 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon y se describen además a continuación en la Tabla 4. La Tabla 4 proporciona el nombre del compuesto y estructura, asi como el número de Ejemplo del procedimiento sobre el cual se basa la preparación de la Tabla 4, para los compuestos de los Ejemplos 165 al 203.
Tabla 4 Pro.
Estructura del compuesto Nombre del Compuesto de Ü. 2- [4- (4-bromo- 32 fenoxi)fenil]-3a,4,7,7a- tetrahidro-4-metil- , 7- epoxi-lH-isoindol- Br 1, 3 (2H) -diona 3a , 4 , 7 , 7a-tetrahidro-2- 32 (2-metoxifenil) -4,7- dimetil-4 , 7-epoxi-lH- CH, O isoindol-1, 3 (2H) -diona Ester de (3,5- 21-26 dimetoxifenil)metílico del ácido [ (1,2, 3, 3a, 7,7a- hexahidro-2-fenil-4, 7-epoxi- 4H-isoindol-4- il)metil] carbámico 2- (2, 4-dimetilfenil) - 21-26 3a, 4 , 7, 7a-tetrahidro-4- (hidroximetil ) -4 , 7-epoxi- lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona 2- ( 1 , 3-benzodioxol-5-il ) - 32 3a, 4,7, 7a-tetrahidro—4- metil-4 , 7-epoxi-lH- CH, O ° isoindol-1, 3 (2H) -diona Pro. ?3· Estructura del compuesto Nombre del Compuesto de No. Ej. 170 4-[bis(acetiloxi)metil]- 21-26 2- ( 3-bromofenil ) - 3a, 4 , 7 , 7a-tetrahidro-4 , 7- epoxi-lH-isoindol- 1,3 (2H) -diona 171 0 CH3 N-[ [l,2,3,3a,7,7a-hexa idro- 21-26 2(2,4, 6-trimetilfenil) -4,7- epoxi-4H-isoindol-4-il]metil] - 2, 2-dimetilpropanamida CH5 172 3a, 4, 7, 7a-tetrahidro-4- 21-26 (hidroximetil-2- [2- (trifluorometil) fenil] - 4,7- epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - diona 173 3a, 4 , , 7a-tetrahidro-4- 21-26 (hidroximetil) -2- (1- naftalenil ) -4 , 7-epoxi-lH- HO isoindol-1, 3 (2H) -diona 174 Ester de metilo del ácido 32 2-cloro-5- (1,3, 3a, 4, 7, 7a- hexahidro- , -dimetil- 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2- CH3 0 il ) -benzoico Pro.
Ej. Estructura del compuesto Nombre del Compuesto de No. 175 4- [bis (acetiloxi)metil] - 21-26 2- (4-bromo-2-nitrofenil) - 3a, , 7 , 7a-tetrahidro-4 , 7- epoxi-lH-isoindol- 1, 3 (2H) -diona 176 3a, 4 , 7, 7a-tetrahidro-4- 32 rr L _°! metil-2- (4-metil-3- nitrofenil) -4, 7-epoxi-lH- CH3 0 isoindol-1 , 3 (2H) -diona 177 2- [2-cloro-5- 32 (trifluorometil ) fenil] - 3a, , 7 , 7a-tetrahidro-4- metil-4, 7-epoxi-lH- isoindol-1 , 3 (2H) -diona 178 2- [4-cloro-3- 32 (trifluorometil ) fenil] - 3a, 4, 7, 7a-tetrahidro-4 , 7- epoxi-lH-isoindol- CH3 0 1, 3 (2H) -diona 179 2- (1, 3, 3a, , 7, 7a- 32 hexahidro-4-metil-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- CH3 0 CN il)benzonitrilo Pro, Ej . Estructura del compuesto Nombre del Compuesto de No. 180 2- (4-fluorofenil) - 32 3a , 4 , 7 , 7a-tetrahidro-4- metil- , 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona 181 2, 2, 2-trifluoro-N- 21-26 [ (1,2, 3, 3a, 4, 7, 7a- hexahidro-2-fenil-4 , 7- epoxi-4H-isoindol-4-il ) - metil ] acetamida 182 3a, 4, 7, 7a-tetrahidro-4 , 7- 32 dimetil-2- ( -metil-3- nitrofenil) -4, 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona 183 Ácido 2-cloro-5- 21-26 [ 1 , 3 , 3a , 4 , 7 , 7a-hexahidro— 4- (hidroximetil ) -4,7- epoxi-2H-isoindol-2- il]benzóico 184 3a, 4, 7, 7a-tetrahidro-4, 7- 32 dimetil-2- (4-nitrofenil) - 4, 7-epoxi-lH-isoindol- 1, 3 (2H) -diona Pro.
Ej . Estructura del compuesto Nombre del Compuesto de No. SL 185 3a, 4, 7, 7a-tetrahidro-2 (2- 32 mercaptofenil ) -4 , 7-epoxi- lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona 186 3a, 4, 7, 7a-tetrahidro-2- [2- 32 o [ (fenilmetil) tio] fenil] -4,7- epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - o diona 187 Ester de 2-metilpropilo del 21-26 ácido [ [2- (4-clorofenil) - 1, 2, 3, 3a, 4, 7, 7a-hexahidro-4,7- epoxi-4H-isoindol-4- il]metil] carbámico 188 4- (1, 1-dimetiletil) -N- 21-26 [[1,2, 3, 3a, 4, 7, 7a-hexahidro-2- (4-metilfenil) -4, 7-epoxi-4H- H3CÍH., isoindol-il]metil] benzamida 189 2,4-dicloro-N- 21-26 [[1,2,3, 3a, 4, 7, 7a-hexahidro-2- (4-nitrofenil) -4, 7-epoxi-4H- isoindol-4-il]metil]benzamida Pro, Ej . Estructura del compuesto Nombre del Compuesto de No. Ej. 202 Ácido ( 3aoc, 4ß, 7ß, 7aa) - 8 4- [ [ [ (octahidro-1, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2- 0 é¾ il ) metil ] amino] benzoico 203 (3aa, 4ß, ß, 7aa) - 8 hexahidro-2 - ( 4- morfolinilmetil ) -4,7- epoxi-lH-isoindol- 1, 3 (2H) -diona Ejemplo 204 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro-4- (2 -hidroximetil) -7-metil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (204D/25B) A. 2- [2- [ [1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -5-metilfuran (204A) A una solución del compuesto 21A (2.00 g, 15.9 mmol) en DMF (50 mL) se le agregó imidazol (1.62 g, 23.9 mmol), seguida por cloruro de tert-butildimetilsililo (2.63 g, 17.5 mmol) . Después de 2 h a 25°C, la reacción se vació en éter de dietilo (300 mL) y se lavó con agua (1 x 100 mL) , HC1 1N (1 x 100 mL) , agua (1 x 100 mL) , salmuera (1 x 50 mL) y se secó sobre MgS04 anhidro. El compuesto crudo 204A se analizó por CLEM y RMN y se determinó que era lo suficientemente puro para llevarse directamente a la siguiente etapa. CLAR: 100% a 4.347 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min.( observando a 220 nm) .
B. (3aa, 4ß, 7 ,7aa) -4- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] -oxi] etil] hexahidro-7-metil-4,7-epoxi-lH-isobenzofuran-l, 3- (2H) -diona (204B) El compuesto 204A (4.0 g, 18.9 mmol) y anhídrido maleico (1.42 g, 14.5 mmol) se disolvieron en dicloroetano (10 mL) y se agitaron a 25°C por 60 horas. Los volátiles se separaron después in vacuo y el aceite de color naranja resultante se disolvió en etanol absoluto (50 mL) y se agregó 10% Pd/C (1.00 g, cat . ) . Se introdujo después el hidrógeno por medio de un globo. Después de 3 h, la reacción se filtró a través de Celite enjuagando con EtOAc y se concentró in vacuo. El anhídrido crudo se purificó por cromatografía instantánea rápida sobre Si02 eluyendo con acetona/cloroformo (0 - 2 - 4% acetona) para dar 1.30 g (3.82 mmol, 20%) del compuesto 204B como un aceite transparente, además de 3.00 g (12.5 mmol, 66%) del compuesto de partida 204A. La caracterización por espectroscopia por RMN de protones mostró solamente al isómero exo. 1H RMN (400 MHz , CDC13) d = 3.83 (2H, t, J = 6.0 Hz), 3.22 (1H, d, J = 8.2 Hz) , 3.06 (1H, d, J = 8.2 Hz) , 1.70 - 2.25 (6H, m) , 1.55 (3H, s) , 0.82 (9H, s) , 0.00 (6H, s) .
C. (3aa,4p,73,7aa) -4- [4- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] -oxi] etil] octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (204C) El compuesto 204B (0.250 g, 0.734 mmol) y el 4-amino-2-trifluorometil -benzonitrilo (0.124 g, 0.668 mmol) se suspendieron en tolueno seco (2.0 mL) en un tubo sellado. Se agregaron después MgS04 (0.200 g) y trietilamina (0.5 mL) y el tubo se selló y se colocó en un baño de aceite a 125°C. Después de 40 h, la reacción se enfrió a 25°C, se filtró y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con CH2C12 para dar 0.111 g (0.281 mmol, 30%) del compuesto 204C como un sólido amarillo. CLAR: 92% a 4.203 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 531.1 [M+Na]+.
D. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro-4 - (2-hidroxietil) -7-metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2-( rifluorometil) benzonitrilo (204D) El compuesto 204C (0.031 g, 0.061 mmol) se disolvió en THF (0.5 mL) y se transfirió a un recipiente de polipropileno seguido por enfriamiento a 0°C. Se agregó después HF»piridina (-47% HF, 0.1 mL) . Después de 15 min. , la reacción estuvo completa como se determina por CL y se vació en NaHC03 acuoso frío saturado. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3 x 10 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con HCl 1 N (1 x 20 mL) y se secaron sobre Na2S0 anhidro. El compuesto 204D se aisló como un aceite amarillo y se comparó con el material preparado en el Ejemplo 25. No fue necesaria purificación.
Ejemplo 205 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4- [Octah.idro-4-metil-l, 3- dioxo-7- (fenilometil) -4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2-trifluorometil) benzonitrilo (205CÍ y 205CÜ. respectivamente) A. 2-Metil-5- (fenilmetil) -furano (205A) Se agregó n-BuLi (1.8 mL, 4.51 mmol, 2.5 en hexano) a una solución de 2 -metilf rano (0.37 mL, 4.10 mmol) en THF anhidro (3 mL) a -25 °C. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente por 3 h y se enfrió después a -15°C. Se agregó bromuro de bencilo (0.59 mL, 4.92 ramol) , que se pasó a través de un tapón de óxido de aluminio, y la solución se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Se agregó la solución saturada de NH4C1 (5 mL)y la mezcla se agitó por 1 h. La mezcla de reacción se extrajo después con éter (2 x 5 mL) y los extractos orgánicos combinados se secaron y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con hexanos dio 323 mg (1.88 mmol , 46%) del compuesto 205A como un aceite incoloro. CLAR: 95% a 3.72 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) y alrededor de 400 mg de una mezcla de producto y bromuro de bencilo (-2:1 por CLAR) .
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) - y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4 - [Octahidro-4-metil-1, 3-dioxo-7- ( fenilmetil) -4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (205BÍ y 205BÜ, respectivamente) Una solución del compuesto 205A (124 mg, 0.72 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2, 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (290 mg, 1.09 mmol) en CH2C12 (2 mL) se agitó a temperatura ambiente. Después de 4 días, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con CH2CI2 dio 62 mg (0.14 mmol, 20%) de una mezcla de los compuestos 205BÍ y 205BÜ como un sólido blanco, que se usó directamente en la siguiente etapa. CLAR : 93% a 3.69 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
C. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) - y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4- [Octahidro-4-metil-1, 3-dioxo-7- ( fenilmetil) -4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- ( triflurorometil) -benzonitrilo (205ci y 205CÜ, respectivamente) Una solución de una mezcla de los compuestos 205Bi y 205BÜ (62 mg, 0.14 mmol) y 10% Pd/C (12 mg, ca . ) en EtOH (3.5 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente por 2 h. La mezcla de la reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 35% EtOAc/hexanos dio 22 mg (0.05 mmol, 35%) del compuesto 205CÍ y 12 mg (0.027 mmoles, 19%) del compuesto 205CÜ. Compuesto 205CÍ: CIAR: 98% a 3.75 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 458.2 [ +NH4]+. Compuesto 205CÜ: CLAR: 97% a 3.78 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 473.45 [M+CH30H] + .
Ejemplo 206 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- [4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil] octahidro- 7-metil-l, 3-dioxo-4,7-epoxi-4H- isoindo1-4 -propanonitri1o (206) Una solución del compuesto 36 (34 mg, 0.074 mmol) y NaCN (24 mg, 0.49 mmol) en DEMO (1 mL) se calentó -a 100°C por 0.5 h. Después del enfriamiento, la mezcla de reacción se vació en H20 (5 mL) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20 (2 5 mL) , se secaron sobre Na2S0 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 50% EtOAc/hexanos seguida por CLAR preparativa de fase inversa [30.41 mm (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 30 X 250 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 30 minutos conteniendo 0.1% TFA, 25 mL/min., observando a 220 nm) ] dio 6.6 mg (0.016 mmol , 22%) del compuesto 206 como un sólido blanco. CLAR: 99% a 2.89 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4 6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) EM (ES) : m/z 402.1 [M-H] " .
Ejemplo 207 Trifuoroacetato de (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 -metil-7- [2 - (4-morfolinil) etil] -1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2- ( trifluorometil) benzonitrilo, (207) Una solución del compuesto 36 (15.6 mg, 0.0341 mmol) y morfolina (6.0 µ?,, 0.068 mmol) en tolueno (1 mL) se calentó a 100°C durante la noche. Después del enfriamiento, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 10% MeOH/CH2Cl2, seguida por CLAR preparativa de fase inversa [23.96 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 30 x 250 mra, 10-90% de metanol acuoso durante 30 minutos conteniendo 0.1% TFA, 25 mL/min. , observando a 220 nm) ] dio 8.7 mg (0.015 mmol, 44%) del compuesto 207 (sal de TFA) como un sólido blanco. CLAR: 99% a 2.02 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) EM (ES): m/z 464.3 [M+H] + .
Ejemplo 208 (3aa, 4ß, 7ß, 7a3) -2- (5-fluoro-l-naftalenilo) hexahidro-4, 7¦ dimet.il-4 , 7-epoxi-lH-iBoindol-l, 3 - (2H) -diona (208C) A. 1-Fluoro- 5 -nitronaftaleno (208A) A una solución de HC1 6N (12 mL) se agregaron 1.47 g (7.83 mmol) de 5-nitro-l-naftilamina finamente pulverizada, como se describe en J. Chem. Soc . 1187 (1949) . La mezcla se enfrió hasta 0°C y se agregó lentamente una solución fría de NaN02 (547 mg, 7.93 mmol) en 2 mL H20, de manera que la temperatura se mantuvo cercana a 0°C. Después de que se terminó la adición, la mezcla de reacción se agitó por 30 min. y se filtró. Se enfrió el filtrado a 0°C y se trató con una solución fría NaBF4 4.5 M (5 mL) para dar la precipitación completa del borofluoruro de diazonio. La mezcla se mantuvo a 0°C por 30 min. antes de que se filtrara y los precipitados se lavaron con una solución fría NaBF4 4.5 M (5 mL) , etanol enfriado con hielo (10 mL) y Et20 (20 mL) . Los sólidos obtenidos se secaron con aire para resultar en 1.74 g (77%) de la sal de diazonio correspondiente. A 1.70 g (5.92 mmol) del borofluoruro de diazonio se le agregaron 5 g de arena y se mezclaron completamente los componentes. La mezcla de reacción se calentó cuidadosamente bajo presión reducida hasta que se presentó la descomposición. Hacia el final de la reacción se calentó además por 30 min. a 130°C para asegurar la conversión completa. Después de enfriar la mezcla dj= reacción se disolvió en acetona y se preabsorbieron los contenidos en gel de sílice. La purificación se aCLanzó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con 0 hasta 10% de EtOAc en hexanos para dar 449 mg (2.35 mmol , 40%) del compuesto 208A como un sólido blanco.
B. l-Amino-5-fluoronaftaleno (208B) Una solución del compuesto 208A (62 mg, 0.32 mmol) en 1 mL de EtOH conteniendo 0.1 mL de HC1 12 N se calentó hasta reflujo. Se agregó polvo de hierro (62 mg, 1.11 mmol) en porciones pequeñas y se continuó el calentamiento por 2 h. La mezcla se enfrió, se neutralizó con una solución NaOH 1 N y la capa acuosa se extrajo con CH2C12. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre gS04 y se concentraron in vacuo para dejar un residuo que se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 40 a 80% de EtOAc en hexanos para dar 42 mg (0.26 mmol, 80%) del compuesto 208B como un sólido amarillo.
C. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (5-Fluoro-l-naf alenilo) hexahidro-4 , 7 -dimetil-4,7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (208C) El compuesto 208B (42 mg, 0.26 mmol) , compuesto 20A (54 mg, 0.27 mmol), MgS0 (69 mg, 0.58 mmol) y trietilamina (191 µ?-? , 1.37 mmol) se tomaron en 2 mL de tolueno y se colocaron en un tubo sellado. El tubo sellado se calentó a 135°C por 14 h. La mezcla de reacción enfriada se filtró a través de una almohadilla corta de Celite eluyendo con CH2C12 y el solvente se separó bajo presión reducida. El residuo se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.) para dar 15 mg (0.044 mmol, 17%) del compuesto 208C como un sólido amarillo claro. CLAR: 16% a 2.96 min. y 77% a 3.06 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 340.2 [M+H]+.
Ejemplo 209 (3aa,4P,73,7aa)-2-(5-Fluoro-4-nitro-l-naftaleni1 ) hexahidro- 4,7-dimetil-4,7-epoxi-lH-isoindol-l/ 3 (2H) -diona (209C) ?. ?- (5-Fluoro-l-naftalenil) acetamida (209A) Una solución de 141 mg (0.74 mmol) del compuesto 208A en 2 mL de AcOH se calentó hasta reflujo y se trató con porciones pequeñas de polvo de hierro (118 mg, 2.11 mmol). La mezcla se conservó a reflujo por 15 min. antes de que se agregaran 73 µ]1? (0.78 mmol) de Ac20. Después de 15 min. adicionales a reflujo, la mezcla se enfrió y se filtró eluyendo con CH2C12. El filtrado se concentró después bajo presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20 a 50% de EtOAc para dar 145 mg (0.71 mmol, 97%) del compuesto 209A como un sólido blanco.
B. l-Amino-5-fluoro-4 -nitronaf aleno (209B) El compuesto 209A (133 mg, 0.645 mmol) se disolvió en 1 mL de AcOH y la solución resultante se enfrió hasta 10 °C. A esta temperatura, se agregaron 80.0 µL (2.00 mmol) de HN03 rojo fumante y la agitación continuó por 15 min. antes de que se apagara la reacción por la adición de hielo triturado. La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 y las fases orgánicas V combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo. El residuo resultante se disolvió en 3 mL de EtOH, se calentó hasta reflujo y se trató con 0.5 mL de solución acuosa de NaOH al 40%. La agitación se continuó por 15 min. antes de 5 que la reacción se enfrió y se diluyó con H20. La capa acuosa se extrajo con CH2C12 y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo. El residuo resultante se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice, eluyendo con 40 a 70% de EtOAc en hexano para 10 resultar 36 mg (0.17 mmol, 27%) del compuesto 209B como un sólido amarillo.
C. 3aa,4p,7P,7aa) -2- (5-Fluoro-4 -nitro-1- naftalenilo) hexahidro-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol- 15 1,3 (2H) -diona (209C) El compuesto 209B (36 mg, 0.18 mmol) reaccionó en un tubo sellado con el compuesto 20A (38 mg, 0.19 mmol), MgS04 (46 mg, 0.39 mmol) y Et3N (128 µL, 0.920 mmol) en 250 µL de tolueno según el procedimiento anterior descrito en el 20 Ejemplo 208C para dar, después de la purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.), 27 mg (0.070 mmol, 39%) del compuesto 209C como un sólido amarillo'. CLAR: 8% a 2.88 min. y 84% a 3.06 min. (atropisóme.ros, tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 402.0 [M+H]+.
Ejemplo 210 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (1, 1-Dioxidobenzo [b] tiofen- 3 -il) hexahidro- 4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona(210) Se agregó mCPBA (160 mg, 0.641 mmol, 70% pura) a una solución del compuesto 134 (70.0 mg, 0.214 mmol) en CH2C12 (2 mL) a temperatura ambiente. Después de que el material de partida se consumió, la reacción se apagó con NaHC03, saturado y se extrajo con CH2C12. La capa orgánica se lavó con NaOH 1 N, se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida para dar 63.9 mg (0.178 mmol, 83%) del compuesto 210 como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.81 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a '220 nm) . EM (ES) : m/z 360.0 [M+H]+.
Ejemplo 211 4- (1,3, 3a, 4, 7, 7a-Hexahid.ro-4 , 6, 7-trimetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-pirrol [3,4-c] piridin-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (211) El 2 , 4, 5-Trimetil oxazol (0.48 mL, 4.14 mmol) se disolvió en tolueno (2.0 mL) y se agregó 4 - (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2 -trifluorometilbenzonitrilo (1.00 g, 3.76 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 75°C bajo nitrógeno por 2.5 hrs . La solución se enfrió a temperatura ambiente y el precipitado resultante se filtró y se lavó con tolueno para dar 0.51 g (35%) del compuesto 211 como un sólido gris claro. Los análisis RMN revelaron que el compuesto 211 fue un isómero (exo/endo) sin embargo, no se pudo determinar la identidad del isómero por análisis de RMN. CLAR: 100% a 2.85 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 378.42 [M+H]+.
Ejemplo 212 (3aa, 4ß, 7P,7aa) -Tetrahidro-4, 7-dimetil-2 - [3- ( trifluorometil) fenil-4, 7-epoxi-lH-isoindol- 1, 3 , 5 (2H, H) - triona y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -Tetrahidro-4, 7-dimetil-2 - [3 - (trifluorometil) fenil] - , 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 , 5 (2H, 4H) - triona (212i y 212ii, respectivamente) Se suspendieron 2, 2-Dimetil-3 (H) -furanona (0.500 g, 4.46 mmol) y 1- [3- (trifluorometil) fenil] -lH-pirrol-2 , 5-díona (1.07 g, 4.46 mmol, preparado como se describe en el Ejemplo IB) en tolueno (20 mL) en un tubo sellado. La mezcla se calentó a 110°C por 4 h y se enfrió después hasta 25°C seguida por concentración in vacuo. El residuo resultante se purificó por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con cloruro de metileno para dar 0.411 g (26%) del compuesto 212i como un sólido blanco y 0.193 g (12%) del compuesto 212ii como un sólido blanco. Se confirmaron las asignaciones estructurales por experimentos de RM de protones 1-D NOE . Compuesto 212i: CLAR: 100% a 2.817 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 376.0 [M + Na]+. Compuesto 212ii: CLAR: 100% a 3.013 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 ram eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 354.02 [M+H] +.
Ejemplo 213 (3aa,4 <73/7aa) -2- (5-Cloro-l-naftalenilo) hexahidro- , 7 - dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona(213B) A. l-Amino-5-cloronaftaleno (213A) A una solución de 1.74 g (6.06 mmol) del borofluoruro de diazonio (descrito en el Ejemplo 208A) en acetona (7 mL) , se agregaron 693 mg (7.00 mmol) de CuCl en porciones pequeñas. Después de que había cesado la evolución del nitrógeno, se eliminó la acetona bajo presión reducida y se tomó, el residuo en CH2C12 (30 mL) . La fase orgánica se lavó con H20 (30 mL) , se secó sobre MgS04, se concentró in vacuo y se purificó finalmente por cromatografía instantánea (gel de sílice, EtOAc en hexano. 0 hasta 15%) para dar 754 mg (70%) de 1-cloro- 5-nitronart leño . El l-cloro-5-nitronaf aleno antes sintetizado (540 mg, 2.6 mmol) se disolvió en 10 mL de AcOH, seguido por tratamiento con 415 mg (7.43 mmol) de polvo de hierro y posteriormente acilado con AC2O (0.26 mL, 2.73 mmol) según el procedimiento descrito en el Ejemplo 209A para dar 543 mg (95%) de 1 -acetamino- 5 -cloronaftaleno. Una solución del l-acetamino-5-cloronaftaleno antes sintetizado (52 mg, 0.24 mmol) en 3 mL de EtOH se calentó hasta reflujo y se trató con 0.5 mL de solución acuosa al 40% de NaOH. La mezcla se puso a reflujo hasta que no se pudo detectar más material de partida, se enfrió y se concentró bajo presión reducida. El residuo se absorbió en CH2C12 (50 mL) y se lavó con H20 (25 mL) . La capa orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró in vacuo para dejar 41 mg (98%) del compuesto 213A como un sólido blanco.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (5-Cloro-l-naftalenil) hexahidro-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (213B) El compuesto 213A (24 mg, 0.14 mmol) reaccionó en un tubo sellado con el compuesto 20A (29 mg, 0.15 mmol), MgS04 (36 mg, 0.30 mmol) y Et3N (100 µL, 0.710 mmol) en 250 µL de tolueno de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 208C para dar, después de la purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC 85 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% de metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.), 27 mg (40%) del compuesto 213B como un sólido blanco. CLAR: 98% a 1.82 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 TurboPack Pro 4.6 x 33 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 2 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/ z 356.4 [M+H]+.
Ejemplo 214 (3aa,43,73,7aa) -2 - (5-cloro-4 -nitro-1-naftalenilo) hexahidro- 4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3- (2H) -diona (214B) A. l-Amino-6-cloro-4-nitronaftaleno (214A) El 1 -Acetamino- 5 -cloronaftaleno (150 mg, 0.68 mmol , preparado como se describe en el Ejemplo 213A) se disolvió en 1 mL de AcOH y se trató con 82 µ?.. de HN03 rojo fumante y se desaciló posteriormente con 1 mL 40% de una solución acuosa de NaOH en 3 mL de EtOH según el procedimiento descrito en el Ejemplo 209A para resultar 49 mg (32%) del compuesto 214A como un sólido amarillo.
B. (3aa,4p,7 ,7aa) -2- (5-Cloro-4-nitro-l-naftalenil) Hexahidro-4,7-dimetil-4,7-epoxi-lH-isoindol-l#3 (2H) -diona (214B) El compuesto 214A (27 mg, 0.12 mmol) reaccionó en un tubo sellado con el compuesto 20A (26 mg, 0.13 mmol), MgS04 (32 mg, 0.27 mmol) y Et3N (88 µL, 0.63 mmol) en 250 µL de tolueno según el procedimiento descrito en el Ejemplo 208C para dar, después de la purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 tnm eluyendo con 30-100% de metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.) 22 mg (45%) del compuesto 214B como un sólido amarillo. CLAR: 24% a 3.06 min. y 76% a 3.25 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 418.0 [M+NH4]+.
Ejemplo 215 (3ag,4P,7P,7aa) -4-Etilhexahidro-7-metil-2- [4-nitro-l- naftalenil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l,3 (2H) -diona (215B) A. (3acc, 4ß, 7ß, 7aa) -4-Etilhexahidro-7-metil-4 , 7-epoxiisobenzofuran-1, 3 -diona (215A) El 2-Etil-5-metilfurano (1.89 mL, 15.3 mmol) se disolvió en cloruro de metileno (10 mL) y se agregó anhídrido maleico (1.00 g, 10.2 mmol) . La reacción se agitó a 25°C por 18 h y después se concentró in vacuo. El biciclo crudo resultante se disolvió en EtOAc (50 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.40 g) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo. Después de 4 h, la reacción se filtró a través de Celite, enjuagando con EtOAc . La concentración in vacuo dio el compuesto crudo 215A (1.93 g) como un sólido blanco. Este material se llevó directamente a la siguiente reacción sin purificaci-ón .
B. (3aa# 4ß,7ß, 7aa) -4-Etilhexahidro-7-me il-2- (4-nitro-l-naftalenil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (215B) El compuesto 215A (0.168 g, 0.798 mmol) y l-amino-4-nitronaftaleno (0.10 g, 0.53 mmol) se suspendieron en tolueno (0.8 mL) y TEA (0.2 mL) y se agregó sulfato de magnesio (0.1 g) . La mezcla se calentó a 135°C en un tubo sellado por 18 h. La reacción se enfrió después hasta temperatura ambiente y se filtró, enjuagando con cloroformo. La concentración dio el producto crudo que se purificó por CCD preparativa sobre Si02 eluyendo con cloruro de metileno. Esto dio 0.077 g (0.20 mmol, 38%) del compuesto 215B como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 3.260 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 381.05 [M+H]+.
Ejemplo 216 (3a<x,4P,7P,7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) -N- [4- fluorofenil) octahidro-7 -metil - 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -4H- isoindol-acetamida (216B) A. N- (4-Fluorofenil) -5-metil-2-furanacetamida (216A) El ácido 5-Metil-2-furanacético (1.00 g, 7.14 mmol , sintetizado como se describe en O 9507893, Ejemplo 19) se disolvió en CH3CN/DMF (4:1, 25 mL) , se agregó después l-[3- (dimetilamino) ropil] -3-etiCLarbodiimida (1.37 g, 7.14 mmol) y l-hidroxi-7-azabenzotriazol (0.972 g, 7.14 mmol) seguido por 4-fluoroanilina (0.676 mL, 7.14 mmol) . Después de 3 h, la reacción se diluyó con EtOAc (150 mL) y se lavó con HCl 1 N (1 x 30 mL) , NaHC03 acuoso saturado (1 x 30 mL) , salmuera (1 x 40 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio. El compuesto 216A (1.58 g, 95%)) se aisló como una espuma amarilla después de concentración in vacuo. No fue necesaria purificación adicional. CLAR: 78% a 2.647 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. 3aa, 4ß, 7ß, 7aoc) -2- (4-Ciano-l-naftalenilo) -N- (4-fluorofenil) octahidro-7 -metil -1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-4H-isoindol-4-acetamida (216B) El compuesto 216A (0.200 g, 0.858' mmol) y 4- (2,5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (0.164 g, 0.616 mmol) se disolvieron en benceno y se calentaron a 60 °C por 14 h. La reacción se enfrió después y se concentró in vacuo. El aceite color naranja resultante se disolvió en EtOAc (15 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.050 g) . Se introdujo el hidrógeno por medio de un globo. Después de 3 h, la reacción se filtró a través de Celite enjuagando con EtOAc y se concentró in vacuo. El material crudo resultante se purificó por CCD preparativa sobre sílice eluyendo con 5% de acetona en cloruro de metileno para dar 0.166 g (54%) del compuesto 216B como un sólido blanco. La espectroscopia de RMN mostró solamente un isómero sencillo que se determinó que era exo por los experimentos NOE. CLAR : 95% a 3.200 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) -m/z 484.0 [M+H]+.
Ejemplo 217 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4 -metil-2 - (2-naftalenil) -4 , 7 -epoxi-lH-isondol-1, 3 (2H) -diona, enantiómero de elución más rápida y (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4-metil-2- (2-naftalenil) -4,7-epoxi- 1H- isoindol - 1 , 3 (2H) -diona, enantiómero de elución más lenta (217i y 217ii, respectivamente) El compuesto racémico 137 se separó en antípodos individuales por cromatografía líquida de fase inversa quiral. Se usó una columna Chiralpak AD-R (4.6 x 250 mm) eluyendo con 70% acetonitrilo/30% agua a 1 mL/min. Se usó la detección UV a 220 nm. El isómero de elución más rápida, compuesto 217i (tiempo de retención = 15.66 min.), se encontró que fue 99.9% ee y el isómero de elución más lenta, compuesto 217ii (tiempo de retención = 15.66 min.) fue 99.6% ee por cromatografía de fase inversa quiral analítica.
Ejemplo 218 (33a,43,7ß,7 a) -4- [4 - [2 - [ [ (4- FluorofeniDmetil] metilamino] etil] octahidro-7 -metil -1, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (218B) A. (4-Fluorobencil)metilamina y Bis (4-fluorobencil)metilamina (218A y 218A' ) 218A 218A' Los compuestos 218A y 218A' se elaboraron de conformidad con el procedimiento descrito por Singer et al. J. Med. Chem. 29, 40-44 (1986) . Se puso a reflujo el bromuro de 4-Fluorobencilo (189 mg, 1.00 mmol) en una solución de etanol (1.5 mL) y metilamina (5 mL, solución 2M en MeOH) por 3 h. Se agregó una porción adicional de metilamina (2 mL) y la mezcla se puso a reflujo por una hora adicional. La solución se enfrió y se concentró in vacuo, y el residuo se disolvió en una mezcla de HCl 2 N (3 mL) y éter (1.5 mL) . Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con una porción adicional de éter. La solución acuosa se enfrió hasta 0°C, se tituló hasta un pH de 11 con NaOH y se extrajo con CH2C12. Los extractos se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo para dar 120 mg de una mezcla 2.5:1 del compuesto 218A y compuesto 218A' respectivamente. La mezcla cruda se recuperó sin purificación adicional .
B. (3ßa,4ß,7ß,7aa) -4- [4- [2- [ [ (4-Fl orofenil)metil] -metilamino] etil] octahidro-7 -metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (218B) Una solución del compuesto 36 (34.3 mg, 0.075 mmol) y de los compuestos 218A y 218A' (21 mg, alrededor de 0.088 mmol (de 218A) ) en tolueno (0.4 mL) se calentó a 100°C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y después se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 25% acetona/75% CH2Cl2 dio 30 mg (0.058 mmol , 78%) del 218B como un sólido amarillo. CLAR: 99% a 2.46 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 516.26 [ + H]+.
Ejemplo 219 (3aa, 4 , 5ß, 6ß, 7 , 7aot) -4- (Octahidro-4, 5, 6, 7 - tetrametil -1, 3 - dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (219D) A. 2,3,4,5-Tetrametilfurano (219A) Se hizo el compuesto 219A de conformidad con los procedimientos descritos en Hancock et al.' J. Org. Chem. 42, 1850-1856 (1977) y Amarnath et al. J. Org. Chem., 60, 301-307 (1995) . Se puso a reflujo 2-Propanona (100 mL,- 1.1 mol) sobre Pb02 (26.7 g, 0..112 mol) por 28 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se filtró y el residuo se lavó con acetona. El filtrado se concentró bajo presión reducida para eliminar la acetona y después se destiló a 20 Torr. La fracción que apareció entre 100-120°C se recolectó para dar 6.75 g (42.5%) de 3, 4-dimetilhexano-2,5-diona como un aceite amarillo ligero. Una solución de 3, 4-dimetilhexano-2 , 5-diona (3.00 g, 21.1 mmol) y ácido p-toluensulfónico (401 mg, 2.11 mmol) en benceno (30 mL) se calentó hasta reflujo en una trampa Dean-Stark durante la noche. La mezcla de reacción se destiló a presión atmosférica para eliminar el exceso de benceno. La mezcla restante se transfirió a un matraz más pequeño y se destiló a presión atmosférica. La fracción que apareció entre 80-100°C se recolectó para dar 509 mg (19%) del compuesto 219A como un aceite amarillo ligero.
B . (3aa, 4ß , 7ß , 7aa) -4-Etil-3a, 4 , 7 , 7a-tetrahidro-4 ,5,6,7-tetrametilo-4 , 7-epoxiisobenzofuran-1 , 3-diona (219B) Una solución del compuesto 219A (400' mg, 3.22 mmol) y anhídrido maleico (442 mg, 4.51 mmol) en Et20 (1.5 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche-. La mezcla de reacción se colocó después en un refrigerador por 5 días, tiempo después del cual, se recolectaron los cristales resultantes y se secaron para dar 0.26 g (37%) del compuesto 219B como cristales café claro. El compuesto crudo 219B se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.
C. (3a, 4ß, 5a, 6a, 7ß, 7aa) -4-Etilhexahidro-4 , 5, 6, 7-tetrametil -4, 7-epoxiisobenzofuran-l, 3 -diona (219C) Una solución del compuesto 219B (120 mg, 0.545 mmol) y 10% Pd/C (24 mg, cat . ) en EtOAc (2 mL) se agitó bajo un globo de hidrógeno a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida para dar 100 mg (0.446 mmol, 82%) del compuesto 219C como un sólido blanco, que se llevó sin purificación adicional .
D. (3aa,4p,5P,6p,7p,7aa) -4- (Octahidro-4, 5, 6,7-tetrametilo- 1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 -( trifluorometil) benzonitrilo (219D) Una solución del compuesto 219C (44.4 mg, 0.2 mmol), 5-amino-2 -cianobenzotrifluoruro (45 mg, 0.24 mmol), TEA (0.04 mL) y MgS04 (20. mg) en tolueno (0.2 mL) se calentó a 135°C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y se concentró después bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 40% EtOAc/hexanos seguida por lavado del sólido resultante con MeOH dio 17 mg (0.043 mmol, 22%) del compuesto 219D como un sólido blanco. CLAR : 90% a 3.11 min. (tiempo de retención) (YMC 85 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 391.2 [M-H] " .
Ejemplo 220 (380,43,73,780) -4- [Octahidro-4 -metil-1, 3 -dioxo-7- [2- [4- (trifluorometil) fenoxi] etil] -4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo, antípodo de elución más rápida y (3aa, 4ß,73/ 7aa) -4- [Octahidro-4 -metil-1, 3 -dioxo-7- [2- [4- ( trifluorometil) fenoxi] etil] -4 , 7 -epoxi -2H-isoindol-2 -il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo, enantiómero de elución más lenta (220i y 220ii, respectivamente) El compuesto racémico 35 se separó en antípodos individuales por cromatografía líquida de fase inversa quiral. Se usó una columna Chiralpak AD (50 x 500 mm) eluyendo con 85% hexanos/7.5% metanol/7.5% etanol, a 50mL/min. Se usó una detección UV a 220 nm. El compuesto isómero de elución más rápida 220i (tiempo de retención = 55.86 min.) se encontró que tenía 95.8% ee ( [a] D25 = -53.02°, C = 3.134 mg/cc en CH2C12) y el compuesto isómero de elución más lenta 220ii (tiempo de retención = 62.86 min.) tuvo 86% ee ([a]D25 = +48.74°, C = 2.242 mg/cc en CH2C12) por cromatografía en fase normal quiral analítica.
Ejemplo 221 (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l, 3 - dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (221B) A. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (hexa idro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (221Ai) y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -4- (hexahidro-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (221AÜ) Una solución de 2 , 5-dimetilfurano (0.800 mL, 7.51 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2 -trifluorometil benzonitrilo (sintetizado como se describe en el Ejemplo IB, usando 4-ciano-3-trifluorometilanilina en lugar de 4-bromo-3-metilanilina) (1.00 g, 3.75 mmol) en benceno (4 mL) se calentó a 60 °C durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se colocó en una bomba de alto vacío hasta que se solidificó el aceite para dar una mezcla 3:1 (determinada por CL y RMN) de los compuestos 221AÍ y 221AÜ, respectivamente, como un sólido café, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional . ?. (3ßa,4ß,5ß., 7p,7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetilo- 1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (221B) Se agregó BH3«THF (3.75 mL, 3.75 mmol , 1M en THF) a una solución de compuestos crudos 221AÍ y 221AÜ (3.75 mmol) en THF (12.5 mL) a 0°C. Después de que el material de partida se consumió, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió después en tolueno (12.5 mL) , Me3NO (845 mg, 11.2 mmol) y la mezcla se calentó hasta reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió después a temperatura ambiente, se agregó al H20 y se extrajo con EtOAc (3X) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 75% EtOAc/hexanos dio 0.354 g (25%) del compuesto 221B como un polvo café claro. CLAR: 90% a 2.45 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 381.11 [M+H]+.
Ejemplo 222 (3aot, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) - 2 - ( trifluorometil) benzonitrilo (222D) A. 3 - [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] -2 , 5-dimetilfurano La 2 , 5-Dimetilo-3 (3H) -furanona (2.00 g, 17.8 mmol) se disolvió en cloruro de metileno (180 mL) . Se agregó TEA (7.43 mL, 53.5 mmol) seguido por TBSOTf (4.92 mL, 21.4 mmol) a 25°C. Después de 1 , la reacción se concentró in vacuo y la suspensión espesa resultante se corrió a través de una columna de gel de sílice acondicionada con 3% de TEA en hexanos . El producto se eluyó con 3% TEA/hexanos para dar 3.6 g (89%) del compuesto 222A como un aceite color naranja que se usó directamente en reacciones posteriores.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [5- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] -1, 3 , 3a, 4, 7 , 7a-hexahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2- ( trifluorometil)benzonitrilo (222B) El 4- (2 , 5-Dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (1.00 g, 3.85 mmol) se disolvió en benceno (5.0 mL) y el compuesto 222A (1.30 g, 5.77 mmol) se agregó. La mezcla de reacción se calentó hasta 60 °C por 2 h y después se enfrió hasta 25°C. La solución se concentró después in vacuo para dar el compuesto 222B como un aceite amarillo que se llevó a la siguiente reacción sin purificación. CLAR: 60% a 4.013 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
C. (3ßa,4ß,5a,7ß,73<?) -4- [5- [ [ (1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] octahidro-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2-( trifluorometil) benzonitrilo (222C) El compuesto 222B (3.85 mmol) se disolvió en acetato de etilo (75 mL) y se agregó 10% Pd/C (1.20 g) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo. Después de 24 h, la reacción se filtró a través de Celite enjuagando con acetato de etilo y se concentró in vacuo para dar un aceite amarillo. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con cloruro de metileno/acetona (0% -1% - 2% acetona) para dar 0.710 g (35%) compuesto 222C como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 4.160 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 517.6 [M+Na]+.
D. (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro- 5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-( trifluorometil) benzonitrilo (222D) El compuesto 222C (0.040 g, 0.081 mmol) se disolvió en THF (1.0 mL) y se agregó HF«Piridina (0.5'mL) . Después de 2 h, la reacción se vacío" cuidadosamente en NaHC03 frío acuoso saturado. La mezcla se extrajo después con cloruro de metileno (3 x 10 mL) . Los orgánicos combinados se lavaron con HC1 1 N (1 x 10 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 0.031 g (10%) del compuesto 222D como un sólido amarillo. Los experimentos NOE confirmaron el isómero asignado. CLAR: 98% a 2.777 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 403.06 [M+Na]+.
Ejemplo 223 -2 - (4-ciano-l-naftalenil) octahidro-7 metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4-il] etilo del ácido (aR) -a-Metoxibencenacético (223C) A. (3aa,4p,7P,7aa)-4-[4-[2-[[(l,l-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-7-metil-l, 3-dioxo- , 7 -epoxi - 2H- isoindol - 2 - il] - 1-naftalencarboni'trilo (223A) Una solución de 4 -amino- 1-naftalencarbonxtrilo (19.2 g, 114 mmol) y anhídrido maleico (14.0 g, 113 mrnol) en AcOH (230 mL) se calentó a 115°C por 12 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se diluyó después con CH2C12 (2.5 L) . La capa orgánica se lavó 3X con H20 (3 L) , IX con Na2C03 acuoso sat . (1 L) y IX con salmuera (1 L) , se secó sobre MgS04 y se concentró hasta ~200 mL bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre resina de intercambio de cationes (60 g, CUBX13M6 de United Chemical Technologies) eluyendo con CH2C12, dio 25.0 g (88%) del 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo como un sólido amarillo. CLAR: 96% a 2.48 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 249.25 [M+H]+. El 4- (2,5-Dihidro-2,5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (1.00 g, 4.03 mmol) se suspendió en benceno (6.0 mL) en un tubo sellado y se agregó el compuesto 204A (1.11 g, 5.24 mmol). La reacción se calentó a 60°C por 16 h y se enfrió después hasta 25°C. El benceno se separó in vacuo para dar un sólido amarillo. El sólido se disolvió en acetato de etilo (40 mL) y se agregó Pd/C (10% Pd, 0.300 g) . Se introdujo después el hidrógeno por medio de un globo. Después de 4 h, la reacción se filtró a través de Celite enjuagando con acetato de etilo. La concentración in vacuo dio un sólido amarillo pálido que se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con acetona/cloroformo (0% - 1.5% - 3% acetona) para dar 1.53 g (77%) del compuesto 223A como una espuma amarilla. CLAR: 86% a 4.173 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -7-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo El compuesto 223A (1.37 g, 2.97 mmol) se disolvió en THF (8.0 mL) y se transfirió a una botella de polipropileno y se enfrió hasta 0°C. Se agregó después HF*Piridina (2.0 mL) . Después de 20 min., la reacción se vació cuidadosamente en bicarbonato de sodio acuoso saturado frío y se extrajo con cloruro de metileno (3 x 30 mL) . Los compuestos orgánicos se lavaron después con HCl 1 N y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 0.99 g (89%) del compuesto 223B como una espuma amarilla que no se purificó adicionalmente . CLAR: 96% a 2.443 y 2.597 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 399.02 [M+Na]+.
C. Ester de 2 - [ (3aa, 4ß, 7ß, 7act) -2 - (4-ciano-l-naftalenil) octahidro-7-metil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4-il] etilo del ácido (aR) -a-Metoxibenceneacético, (223C) El compuesto 223B (0.200 g, 0.575 mmol) se agregó a una solución de SDCC (0.138 g, 0.719 mmol) y ácido (R) -mandélico (0.096 g, 0.57 mmol) en diclorometano (6.0 mL) . El 4-DMAP (0.005 g) se agregó después y la reacción se agitó a 25°C por 4 h. La mezcla se diluyó después con diclorometano, se lavó con HCl 1 N (2 x 10 mL) seguida por bicarbonato de sodio (1 x 10 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 0.220 g (71%) del compuesto 223C como un sólido amarillo que no se purificó adicionalmente. CLAR: 100% a 3.283 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 547.26 [M+Na]+.
Ejemplo 224 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (Metiltio) -4- (octahidro-4 , 7-dimetil-l, 3- dioxo-4,7-epoxi-2H- isoindol -2 -i1 ) benzonitrilo (224) El 4-Amino-2- (metiltio) benzonitrilo (100 mg, 0.609 mmol, sintetizado como se describe en EP 40931 Al) reaccionó en un tubo sellado con el compuesto 20A (131 mg, 0.668 mmol), MgS04 (161 mg, 1.34 mmol) y Et3N (0.440 mL, 3.17 mmol) en 0.50 mL de tolueno según el procedimiento descrito en el Ejemplo 208C para dar, después de la purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% de metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.), 137 mg (0.400 mmol, 66%) del compuesto 224 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.73 min. (tiempo de . retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyéndo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% de ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/ z 401.0 [M-H+OAc]".
Ejemplo 225 (3aa,4P,7p,7aa) -2- (Metilsulfinil) -4- (Octahidro-4 , 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-ÍBOindol-2-il)benzonitrilo (225) A una suspensión enfriada con hielo del compuesto 224 (30 mg, 0.088 mmol) en 2 mL de H20/ eOH (1:1) se agregó oxona (80 mg, 0.26 mmol) en una porción sólida. La mezcla resultante se agitó por 4 h a 0°C antes de que se diluyera con H20 (10 mL) y se extrajo con CH2C12 (2 x 20 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron in vacuo para dejar un residuo que se purificó al filtrar el material a través de una almohadilla corta de gel de sílice eluyendo con CH2C12, para dar 32 mg (0.088 mmol, 100%) del compuesto 225 como un aceite incoloro. CLAR: 99% a 2.01 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eljuyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% de ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 376.0 [M+NH4]+.
Ejemplo 226 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (Metilsulfonil ) -4- (Octahidro-4 , 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) benzonitrilo (226) A una solución del compuesto 225 (48 mg. 0.14 mmol) en CH2C12 (2 mL) se le agregó mCPBA (145 rag, 50% mezcla, 0.420 mmol) en una porción sólida. La mezcla resultante se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó por 60 h, tiempo en el cual no se pudo detectar más material de partida por CLAR. La reacción se apagó por la adición de una solución saturada de NaHC03 (5 mL) , las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2C12 (20 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo. El residuo restante se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% de metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.) para resultar en 48 mg (0.13 mmol, 92%) del compuesto 226 como un sólido blanco. CLAR: 100% a^ 2.07 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2%. ácido fosfórico, 4 tnL/min. , observando a 2 nm) . EM (ES): m/z 392.0 [M+NH4]+. (3aa,4P,5p,7p,7aa) -7- [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dintetilsilil] oxi] etil] hexahidro-5-hidroxi-4- metil-2- (4-nitro-l-naftalenilo) -4, 7-epoxi-lH-isoindol- 1,3 (2H) -diona (227B) A. (3aa,4p,7p, 7aa) -4- [2- [ [(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -3a, 4 , 7 , 7a- tetrahidro-7-metil-2- (4-nitro-l-naftalenil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (227A) Una solución del compuesto 204A (455 mg, 1.89 mmol) y 1- [4 -nitronaftalen] -lH-pirrol-2 , 5-diona (254 mg, 0.947 mmol, preparada como se describe para el 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) - 1 -naftalencarbonitrilo , Ejemplo 223A) en benceno (2 mL) se calentó a 60°C durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto crudo 227A como un sólido café, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional.
B. (3aa,4p, 5ß,7ß,7pa) -7 - [2 -[[(1,1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] hexahidro-5-hidroxi-4-metil-2- (4-nitro-l-naftalenilo) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-1,3 (2H) -diona (227B) Se agregó BH3»THF (0.95 mL, 0.95 mmol , 1M en THF) a una solución del compuesto crudo 227A (0.48 g, 0.95 mmol) en THF (2 mL) a 0°C. Después de que el compuesto 227A se consumió, como fue evidente por CLAR, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió después en tolueno (2 mL) , se agregó Me3NO (71.0 mg, 2.84 mmol) y la mezcla se calentó hasta reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió después a temperatura ambiente, se agregó al H20 y se extrajo con EtOAc (3X) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 75% EtOAc/hexanos , dio 130 mg (26%) del compuesto 227B como un sólido café. CLAR: 94% a 3.92 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con- 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% de ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 527.5 [M+H]+.
Ejemplo 228 (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -4-metil-2 - (4-nitro-l-naftalenil) -4 , 7-epoxi-lH-isonidol-l, 3 (2H) - Una mezcla de TBAF (0.3 mL, 0.3 mmol, 1 M solución en THF) y HF (0.3 mL, 50% en H20) en CH3CN (6 mL) se agregó a una solución de 227B (104 mg, 0.197 mmol) en THF (2 mL) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Después de que el material de partida se consumió, como fue evidente por CCD, se agregaron H20 y EtOAc y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (IX) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20 (IX) y salmuera (IX), se secaron sobre Na2S04, y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 5% MeOH/CH2Cl2, dio 61 mg (75%) del compuesto 228 como un sólido amarillo. CLAR: 99% a 2.47 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de · 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 411.2 [M-H] " .
Ejemplo 229 (3aa,43,5P,7P,7aa) -7- [2- (4 -Fluorofenoxi ) etil] hexahidro-5 - hidroxi-4-metil-2- (4-nitro-l-naftalenil) -4, 7-epoxi-lH- Se agregó DBAD (37.7 mg, 0.164 mmol) a una solución de PPh3 (43.0 mg, 0.164 mmol) en THF (1 mL) . Después de agitar por 10 min. , se agregó 4 -fluorofenol (18.3 mg, 0.164 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. Una solución del compuesto 228 (45.0 mg, 0.109 mmol) en THF (1 mL) se agregó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La CLAR mostró que la mezcla de reacción cruda contiene principalmente el diol de partida (compuesto 228) , entonces se agregó esta mezcla a una mezcla preformada como antes de PPh3 (86 mg) , DBAD (75.4 mg) y fenol (36.6 mg) en THF (4 mL) a temperatura ambiente. Se continuó la agitación hasta que todo el compuesto 228 se consumió. La reacción se concentró después bajo presión reducida. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa [15.2 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS A de 20 x 100 mm, 10-90% de metano! acuoso durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) dio 25.0 mg (45%) del compuesto 229 como un sólido amarillo ligero. CLAR: 99% a 3.53 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 505.2 [M-H] " .
Ejemplo 230 (3aa,4P, 5ß, 6ß, 7 ,7aa) -4- (Octahidro-5, 6 -dihidroxi-4, 7 -dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 - (trifluorometiDbenzonitrilo y (3aa, 4ß, 5a, 6a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5, 6 -dihidroxi-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (230BÍ y 230Bii, Respectivamente) A. (33a,4ß,7ß,7ßa) -4- (1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 , 7 -dimetil 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-( trifluorometil) benzonitrilo (230A) 2,5-Dimetil furano (1.23 mL, 11.5 mmol) y 4- (2,5-dihidro-2, 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (2.00 g, 7.69 mmol) se disolvieron en benceno (10 mL) y se calentaron a 60°C por 18 h. Los orgánicos volátiles se separaron in vacuo. El compuesto crudo resultante 230A se llevó sin purificación. CLAR: 71% a 3.007 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. (3ßa,4ß,5ß,6ß,7ß,73a) -4- (Octahidro- 5 , 6 -dihidroxi-4 , 7 -dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo y (3aa, 4ß, 5a, 6a, 7ß, 7aa) -4 -(Octahidro-5, 6 -dihidroxi-4, 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (230BÍ y 230BÜ) El compuesto 230A (0.100 g, 0.281 mmol) se disolvió en acetona y se agregó N-metilmorfolina-N-óxido (50% solución acuosa, 0.10 mL, 0.42 mmol) . Se agregó después Os04 (4% solución acuosa,. 0.014 mmol) . Después de 3 h a 25°C, la reacción estuvo completa y se agregó sulfito de sodio (0.250 g) con agitación vigorosa. Después de 15 min. , se agregó salmuera (10 mL) y la solución se extrajo con EtOAc (3 x 15 mL) . Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron después in vacuo. La mezcla cruda de diol se purificó por CCD preparativa eluyendo con 18% de acetona en cloroformo para dar 0.038 g (34%) del compuesto 230BÍ (cara beta) y 0.012 g (11%) del compuesto 230BÜ (cara alfa) como sólidos amarillo pálido. Compuesto 230BÍ: CLAR: 100% a 2.567 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 397.08 [M+H] + . Compuesto 230BÜ: CLAR: 100% a 2.417 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 397.08 [M+H]+.
Ejemplo 231 (3aa,4P, 5ß, 6P,73,7aa) -4- [Octahidro-5, 6-dihidroxi-4- (hidroxietil) -7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo, (231C) A. (3aoc,4P,7p,7aa) -4 - [4 -[2 -[[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -1,3, 3a, 4 , 7 , 7a-hexahidro-7-metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (231A) El compuesto 204A (29.0 g, 120 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (20.0 g, 80.6 mmol) se suspendieron en benceno (80 mL) y se calentó a 60°C por 14 h. La mezcla se concentró después in vacuo a 40°C por 40 min. La suspensión espesa resultante se enfrió hasta 25 °C y después se suspendió en MeOH (200 mL) y se agitó a temperatura ambiente por 30 min. La solución se enfrió después a 0°C por 30 min. y después se filtró enjuagando con MeOH frío. El sólido resultante se secó in vacuo para dar 26.1 g (55%) del compuesto crudo 231A como un sólido blanco. La solución de metanol se concentró in vacuo y se volvió a suspender en MeOH (50 mL) y se enfrió a -20°C por 4 h. La solución se filtró después enjuagando con MeOH frío. El sólido resultante se secó in vacuo para dar 3.8 g (10%) del compuesto 231A como un sólido blanco. CLAR: 95% a 4.227 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) B. (33a,4ß,5ß,6ß,7ß,7 a) -4- [4- [2- [ [1(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5, 6 -dihidroxi-7 -metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (231B) El compuesto 231A (0.400 g, 0.851 mmol) se disolvió en acetona (9.0 mL) y se agregó N-metilmorfolina-N-óxido (50% solución acuosa, 0.150 mL, 1.28 mmol). Se agregó después 0s04 (4% solución acuosa, 0.043 mmol). Después de 3 h a 25°C, la reacción estuvo completa y se agregó sulfito de sodio (1.0 g) con agitación vigorosa. Después de 15 minutos, se agregó salmuera (30 mL) y la solución se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL) . Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y después se concentraron in vacuo. El diol crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre sílice eluyendo con 5-25% acetona en cloroformo para dar 0.355 g (80%) del compuesto 231B como un sólido amarillo. CLAR: 93% a 3.903 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 522.00 [M+H]+.
C. (3aa,4p,5P,6P,7P,7aa) -4- [Octahidro-5, 6-dihidroxi-4- (hidroxietil) -7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (231C) El compuesto 231B (0.400 g, 0.766 mmol) se disolvió en THF (5.0 mL) y se transfirió a una botella de polipropileno y se enfrió hasta 0°C. Se agregó después HF»Piridino (1.0 mL) . Después de 20 min. , la reacción se vació cuidadosamente en bicarbonato de sodio acuoso, saturado, frío y se extrajo con cloruro de metileno (3 x 30 mL) . Los orgánicos se lavaron después una vez con HC1 1 N y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 0.290 g (93%) del compuesto 231C (0.290 g) como una espuma amarilla que no se purificó adicionalmente . CLAR: 92% a 2.273 y 2.423 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo . 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 409.10 [M+H]+. - Ejemplo 232 (3aa,4 , 5ß, 6ß, 7ß,7ßa) -4- [Octahidro-5 , 6 -dihidroxi -4 -metil -1 , 3 - dioxo-7- [2- [4- (trifluorometil) fenoxi] etil] -4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo, (232C) A. 2 -Metil-5- [2- [4- (trifluorometil) fenoxi] etil] furano (232A) A una solución de trifenilofosfina (1.56 g, 5.95 mmol) en THF (40 mL) se agregó DBAD (1.37 g, 5.95 mmol) . Después de 10 min. , se agregó 4 -trifluorometilfenol (0.964 g, 5.95 mmol) . Después de 10 minutos adicionales, se agregó el compuesto 21A (0.500 g, 3.97 mmol) . Después de 14 h a 25°C, la reacción se concentró in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea sobre sílice eluyendo con cloroformo para dar 0.713 g (44%) del compuesto 232A como un aceite transparente.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-hexahidro-4 ^metil-l, 3 - dioxo-7- [2- [4- (trifluorometil) fenoxi] etil] -4 , 7 -epoxi-2H- isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (232B) El compuesto 232A (0.301 g, 1.15 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro- 2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2 -trifluorometilbenzonitrilo (0.220 g, 0.846 mmol) se suspendieron en benceno (1.5 mL) y se calentaron a 60°C por 14 h. La mezcla se concentró después in vacuo a 40°C por 40 minutos. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre sílice eluyendo con 10 -0% hexanos en cloruro de metileno para dar 0.199 g (44%) del compuesto 232B como un sólido amarillo. El compuesto 232B se caracterizó como el diastereómero exo por los experimentos NOE. CLAR: 94% a 3.993 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
C. (33a,4ß,5ß,6ß,7ß,7 a) -4- [Octahidro-5, 6-dihidroxi-4-metil-1, 3-dioxo-7- [2- [4- (trifluorometil) fenoxi] etil] -4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil)benzonitrilo, (232Q) El compuesto 232B (0.075 g, 0.14 mmól) se disolvió en acetona (2.0 mL) y se agregó N-metilmorfolina-N-óxido (50% solución acuosa, 0.025 mL, 0.21 mmol) . Se agregó después el Os0 (4% solución acuosa, 0.007 mmol) . Después de 3 h a 25 °C, la reacción se completó y se agregó sulfito de sodio (0.25 g) con agitación vigorosa. Después de 15 minutos, se agregó salmuera (5 mL) y la solución se extrajo con EtOAc (3 x 10 mL) . Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y después se concentraron in vacuo. El diol crudo se purificó por CCD preparativa sobre gel de sílice, eluyendo con 10% de acetona en cloroformo para dar 0.038 g (48%) del compuesto 232C como un sólido amarillo. CLAR: 98% a 3.747 min. (tiempo de retención) (YMC 85 ODS columna 4.6 x 50 tntti eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 593.08 [M+Na]+.
Ejemplo 233 (3aa, 4ß, 5ß, 5ß, 8aP, 8ba) -4- (Decahidro-5-hidroxi-4-ntetil-l, 3- dioxo-4 , 8a-epoxi-2H- furo [3 , 2-e] isoindol-2 -il) - 1- naftalencarbonitrilo, (233) A una solución de trifenilfosfina (0.072 g, 0.28 mmol) en THF (3.0 mL) se agregó DBAD (0.063 g, 0.28 mmol). Después de 10 min., se agregó 4-cianofenol (0.033 -g, 0.28 mmol) .
Después de 10 minutos adicionales, se agregó el compuesto 231C (0.075 g, 0.18 mmol ) . Después de 3 h a 25°C, la reacción se concentró in vacuo y se purificó por CCD preparativa sobre gel de sílice, eluyendo con 15% acetona en cloroformo para dar 0.068 g (95%) del compuesto 233 como un sólido blanco. CLAR: 95% a 2.430 y 2.560 min. (atropisomeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 391.09 [M+H]+.
Ejemplo 234 Ácido (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-7 - metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-4H-isoindol-4-acético, (234B) A. Ácido (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) - 1, 2 , 3 , 3a, 7 , 7a-hexahidro-7-metil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-4H-isoindol-4-acético (234A) Se disolvieron el ácido 5 -Metil -2 -furanacético (0.500 g, 3.57 mmol) y 4 - (2 , 5 -dihidro-2 , 5-dioxo- 1H- 1 - il ) - 1 - naf alencarbonitrilo (0.899 g, 3.57 mmol) en benceno (3.0 mL) y se calentaron a 60°C por 2 h y después se enfriaron a 25°C. Después de 12 h, se precipitó un sólido blanco de la solución, el cual se recolectó y enjuagó con éter de dietilo para dar 1.20 g (87%) del compuesto 234A como un sólido amarillo ligero. El análisis RMN mostró solamente un diastereómero . CLAR: 86% a 2.767 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 389.45 [M+H]+.
B. Ácido (3aa, 4ß, 7ß, 7act) -2 - (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-7-metil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-4H-isoindol-4-acético, (234B) El compuesto 234A (1.10 g, 2.82 mmol) se disolvió en EtOH/EtOAc (1:1, 50 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.4 g, cat . ) . Se introdujo H2 por medio de un globo. Después de 5 h a 25°C, la reacción se filtró a través de Celite enjuagando con EtOAc y se concentró in vacuo para dar 1.00 g (91%) del compuesto 234B como un sólido amarillo. CLAR: 80% a 2.84 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm,, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos contéñiendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 391.1 [M+H]+.
Ejemplo 235 Ester de metilo del ácido (3aoc, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-l- naftalenil) octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoii.dol- 4-acético, (235) El compuesto 234B (0.050 g, 0.13 mmol) se disolvió en acetonitrilo (2.0 mL) , después se agregó DCC (0.025 g, 0.13 mmol) seguido por HOAc (0.018 g, 0.13 mmol). El aCLohol de 4-fluorobencilo (0.014 mL, 0.13 mmol) se agregó después y la reacción se agitó por 3 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo y se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (Y C S5 ODS 20 x 100 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 15 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) . La purificación produjo 0.040 g (82%) del compuesto 235 como un sólido blanco, más que el éster de bencilo esperado. No se observó nada del éster de bencilo anticipado por RMN o CL-EM. CLAR: 100% a 3.033 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 405.51 [M+H]+.
Ejemplo 236 (3aa<4P,73/7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) -N- [ (4- fluorofenil) metil] octahidro-7 -metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H- El compuesto 234B (0.10 g, 0.27 mmol) se disolvió en acetonitrilo (4.0 mL) . HOAc (0.035 g, 0.27 mmol) y DCC (0.049 g, 0.27 mmol) se agregaron después seguido por 4-fluorobencilamina (0.030 mL, 0.27 mmol). Después de 4 h a 25°C, la reacción se concentró in vacuo y se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min. , observando a 220 nm) para dar 0.085 g (67%) del compuesto 236 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.277 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% de ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nml . EM (ES) : m/z 498.43 [M+H] +.
Ejemplo 237 (3aa,4P,7P,7aa) -N- [2- [2- (4 -Ciano- 1-naftalenil) octahidro-7 ¦ metil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-4H-isoindol-4-ilj etil] -4- A. 4-Fluoro-N- [2- (5-metil-2-furanil)etil]benzamida (237A) Se agregó cloruro de 4 -Fluorofenilacetilo (0.290 mL, 2.44 tnmol) gota a gota a una solución de ß- (5-metil-2-furanil) etanamina (300 mg, 2.44 mmol , elaborado según el procedimiento de Yur'ev et al. J. Gen. Chem. USSR (Trad. Inglés) 33, 3444-8 (1963)) en THF (2.5 mL) a temperatura ambiente, seguido por la adición gota a gota de Et3N (0.340 mL, 2.44 mmol) . Una vez que se consumió el material de partida, como fue evidente por CLAR, la reacción se apagó con H20 y se extrajo con CH2Cl2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo . con un gradiente de 0-50% EtOAc/hexano dio 523 mg (95%) del compuesto 237A como un sólido blanco. CLAR: 99% a 2.84 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 248.15 [M+H]+.
B. (3acc,4p,7p,7aa) -N- [2- [2- (4 -Ciano- 1-naftalenil) octahidro-7 -metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4-il] etilo] -4-fluorobenzamida, (237B) Una solución del compuesto 237A (221 mg, 0.896 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (222 mg, 0.896 mmol) en benceno (4 mL) se calentó a 60°C durante la noche. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se disolvió en EtOAc (30 mL) . Se agregó 10% Pd/C (50 mg) y la mezcla se agitó bajo un globo de hidrógeno durante la noche. La mezcla de la reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 25%-75% EtOAc/hexano (gradiente) dio 160 mg (36%) del compuesto 237B como un sólido blanco apagado. CLAR: 97% a 3.13 y 3.23 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2%. ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 498.11 [M+H]+.
Ejemplo 238 [3aR- (3aa,4P,73,7aa) -4- [Octahidro- - (2 -hidroxietil) -7-ntetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo y [3aS- (3aa,4p,7p,7ap3 -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -7- metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo, (238i y 238ii) El compuesto racémico 223B se separó en sus enantiomeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (Columna CHIRALPAK AD 5 x 50 cm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrática) a 50 mL/min., observando a 220 nm) para dar el compuesto de elución más rápida 238i (CLAR quiral: 13.54 min. ; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm ; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) y el compuesto de elución más lenta 238ii (CLAR quiral: 14.99 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) . La conformación absoluta de los compuestos 238i y 238ii'no se estableció. Por simplicidad en nomenclatura, el. compuesto 238i se designó en la presente por tener una configuración "R" y el compuesto 238ii por tener una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 238i se designan en la presente por tener una configuración "R" , y productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 238ii se designan en la presente por tener una configuración "S" .
Ejemplo 239 [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -4- [4- [2- (3 -Fluorofenoxi) etil] octahidro- 7 -metil- 1, 3-dioxo-4>7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1- naftalencarbonitrilo y [3aS- (- (3aa, 4ß, 7ß, 7aot) ] -4- [4- [2 - (3- Fluorofenoxi) etil] octahidro-7 -metil- 1 , 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H- A una solución de trifenilfosfina (0.052 g, 0.20 mmol) en THF (2.0 mL) se agregó DBAD (0.046 g, 0.20 mmol). Después de 10 min., se agregó 3-fluorofenol (0.018 mL, 0.20 mmol). Después de 10 minutos adicionales, se agregó el compuesto 238i (0.050 g, 0.13 mmol) . Después de 3 h a 25°C, la reacción se concentró in vacuo y se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 15 minutos conteniendo 0.2%_TFA, 20 mL/min. , observando a 220 nm) para dar 0.031 g (33%) del compuesto 239i como un sólido blanco. Este proceso se repitió con el compuesto 238ii para resultar el compuesto 239ii. Compuesto 239i: CLA : 100% a 3.80 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 471.65 [M+H]+, [ ]D25= -47.371 (c = 4.412 mg/cc, CH2Cl2) . Compuesto 239ii: CLAR: 100% a 3.80 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 471.65 [M+H]+, [<x]D25= +24.3 (c = 4.165 mg/cc, CH2C12) .
Ejemplo 240 Ester del 2- [ (3acc,4P, 7P,7aa) -2- (4-ciano-l-naftalenil) octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol- 4-] etilo del Ácido (4-Fluorofenil) carbámico . (240) El compuesto 223B (0.100 g, 0.279 mmol) se disolvió en dicloroetano (3.0 mL) y se agregó 4-fluorofenilisocianato (0.048 mL, 0.42 mmol) seguido por calentamiento a 60 °C. Después de 2 h, la reacción se enfrió hasta 25°C y se diluyó con cloruro de metileno. La mezcla se lavó una vez con bicarbonato de sodio acuoso saturado (20 mL) y después los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 15% acetona en cloroformo para dar 0.098 g (68%) del compuesto 240 como una espuma amarilla. CLAR : 98% a 3.320 y 3.457 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm, 10-90% de metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 514.13 [M+H]+.
Ejemplo 241 (3aa, 43,73,780.) -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -1, 3-dioxo-4,7- epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo . (241D) A. 2- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] furano (241A) El 2- (2 -Hidroxietil) furano (1.00 g, 8.93 mmol. Ejemplo 255A) se disolvió en DMF a 25°C y se agregó imidazol (0.790 g, 11.6 mmol). Se agregó después TBSC1 (1.35 g, 8.93 mmol) en porciones durante 5 minutos. Después de 2 h, la reacción se vació en dietil éter (300 mL) y se lavó secuencialmente con agua ( 1. x 100 mL) , HC1 1N (1 x 100 mL) , y salmuera (1 x 100 mL) . Los orgánicos combinados se secaron después sobre sulfato de magnesio y se concentraron in vacuo. El compuesto 241A se aisló como un aceite transparente (1.77 g) y se llevó sin purificación. CLAR: 100% a 4.233 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. (3aa,4ß,7ß,73a) -4- [4- [2- [ [ (1, 1 Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -1,3, 3a, , 7 , 7a-hexahidro-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo Se suspendió 4- (2 , 5-Dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (0.721 g, 3.40 mmol) én benceno (5.0 mL) en un tubo sellado y se agregó el compuesto 241A (1.00 g, 4.42 mmol) . La reacción se calentó a 60°C por- 16 h y después se enfrió hasta .25°C. El benceno se separó in vacuo para dar un sólido amarillo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 1- 5% acetona en cloroformo para dar 1.37 g (85%) de compuesto 24 IB como un sólido amarillo. Los experimentos por RMN confirmaron la asignación del isómero exo. CLAR: 100% a 4.030 y 4.110 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
C. (3aa,4p,7p, 7aa) -4- [4 - [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro- 1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (241C) El Compuesto 241B (0.500 g, 1.14 mmol) se disolvió en acetato de etilo (40 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.200 g) . Se introdujo hidrógeno por medio de un globo. Después de 4 h, la reacción se filtró a través de Celite, se enjuagó con acetato de etilo y se concentró in vacuo para dar un sólido amarillo pálido, que se purificó por cromatografía' instantánea sobre gel de sílice eluyendo con acetona/cloroformo (0% - 1.5% - 3% acetona) para dar 0.450 g (83%) de compuesto 241C como una espuma amarilla.
D. (3aa,4p,7P,7aa) -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -1,3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo, (241D) El compuesto 241C (0.283 g, 0.594 mmol) se disolvió en una solución de HCl al 2% conc . en etanol absoluto (10 mL) . Después de 1 h, la reacción se apagó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con cloruro de metileno (4 x 20 mL) . Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron in vacuo para dar 0.211 g (98%) de compuesto 24 ID como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.14 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 363.45 [M+H]+.
Ejemplo 242 (3aa, 43,63,73,730) -4- [4- [2- (4-Cianofenoxi) etil] octahidro-6- hidroxi-1, 3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo . (242C) A. (33a,4ß,6ß,7ß,7¾a) -4- [4- [2- [[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-6-hidroxi-l, 3- dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo El compuesto 24 IB (1.00 g, 2.28 mmol) y catalizador de Wilkinson (0.105 g, 0.114 mmol) se agitaron rápidamente bajo vacío a 25 °C por 1 h y después se purgaron con N2. Se agregó después THF (30 mL) seguido por catecolborano (0.487 mL, 4.57 mmol) después de que la olefina se había disuelto completamente. Después de 1 h, la reacción se enfrió hasta 0°C y se agregó una solución amortiguadora de fosfato de pH 7.2 (33 mL) seguido por EtOH (13 mL) y H202, (30% solución acuosa, 3.0 g) . Después de 3 h a 0°C la reacción se completó por CL y la mezcla se extrajo con cloruro de metileno (3 x 50 mL) . Los orgánicos combinados se lavaron con una .mezcla 1:1 de sulfito de sodio al 10%/NaOH 1N (50 mL) y una vez con salmuera (50 mL) . Se combinaron y extrajeron todas las fases acuosas con cloruro de metileno (50 mL) y la fase orgánica combinada con las extracciones previas . Todos los orgánicos se secaron después sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron después in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10-20% acetona en cloroformo para dar 0.634 g de compuesto 242A como una espuma blanca. CLAR: 96% a 3.797 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 493.13 [M+H]+.
B. (3aa,4p, 6p,7p,7aa) -4- [Octahidro-6-hidroxi-4-hidroxietil) -1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (242B) El compuesto 242A (0.400 g, 0.813 mmol) se disolvió en una solución de 2% de HC1 12 N en etanol absoluto (10 mL) . Después de 1 h, la reacción se apagó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (4 x 20 mL) . Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de jsodio y se concentraron in vacuo para dar 0.305 g de compuesto 242B como un sólido blanco. CLAR: 90% a 2.043 min. ' (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, -10-90% metanol acuoso durante 4. minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 379.09 [M+H]+.
C. (3ßa,4ß, 5 ,7p,7aa) -4 [4- [2- (4-Cianofenoxi) etil] octahidro- 6 -hidroxi-l,3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo, (242C) A una solución de trifenilfosfina (0.054 g, 0.207 mmol) en THF (2.0 mL) se agregó DBAD (0.048 g, 0.207 mmol). Después de 10 min. , se agregó 4-cianofenol (0.025 g, 0.207 mmol). Después de 10 minutos adicionales, se agregó el compuesto 242B (0.050 g, 0.138 mmol). Después de 3 h a 25°C, la reacción se concentró in vacuo y se purificó por CCD preparativa sobre sílice eluyendo con 25% acetona/cloroformo para dar 0.056 g de compuesto 242C como un sólido blanco. CLA : 90% a 2.987 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 480.10 [M+H]+.
Ejemplo 243 [3aS- (3aa,43,53,73,7aa) -4- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2- hidroxietil) -4 -metil- 1, 3 -dioxo- , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 1- naftalencarbonitrilo y [3aR- (3act, 4ß, 53 7 , aa) 3 -4 - [Octahidro- 5-hidroxi-7- (2-hidroxieti ) -4-metil-l, 3-dioxo-4/ 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo. (243DÍ y 243DÜ) A. (330,43,73,730) -4- [4- [2- [[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etilo] -1,3, 3a, 4 , 7 , 7a-hexahidro-1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo Se agregó el 4- (2 , 5-Dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (18.3 g, 68.7 ramol) a una solución del compuesto 204A (26.6 g, 110.6 mmol) en benceno (75 raL) y se calentó a 60 °C durante la noche. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se trató con MeOH (250 mL) con agitación a 0°C por 10 min. El sólido resultante se filtró, se lavó con MeOH frío (2 X 10 mL) y se secó para dar 26.7 g (79.5%) de compuesto 243A como un sólido amarillo. Los análisis CLAR del sólido anterior revelaron que era 95% puro (Condiciones CLAR: 95% a 2.48 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex-prime S5-C18, 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3PO4, detectando a 220 nm) ) . El filtrado se concentró después bajo presión reducida y el sólido resultante se cromatografió, eluyendo con 3% acetona/CHCl3 , para dar 4.36 g adicionales de compuesto 243A (13%) , para dar un rendimiento final total de 92.5%.
B. (3aa, 4ß,5ß, 7ß,7ßa) -4- [7- [2- [ [ (1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (243B) Una mezcla de 243A (10 g, 20.46 mmol) y RhCl ( PPh3 ) 3 (0.947 mg, 1.02 mmol) se evacuó y se llenó con argón (3X) . Se agregó THF (200 mL) y una vez que se habían disu.elto todos los materiales en partículas, se agregó catecolborano (4.4 mL, 40.93 mmol) lentamente gota a gota. Cuando se detuvo la formación de producto, como se determinó por CLAR, la mezcla de reacción se .enfrió hasta 0°C y se apagó con solución amortiguadora de fosfato (330 mL, pH 7.2) después se agregaron EtOH (130 mL) y H202, (300 mL, 30% sol. acuosa) . Una vez que se consumió el boronato, la mezcla se extrajo con CH2C12 (3X) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con 1 N NaOH, 10% NaHS03 acuoso (1:1, IX) y salmuera (IX) . Los lavados combinados se extrajeron con CH2C12 (IX) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% hasta 30% gradiente acetona/CHCl3 durante 25 min. dio 7.1 g (68%) de 243B como un sólido amarillo claro. Condiciones CLAR: 98% a 3.82 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, detectando a 220 nm) .
C. [3aR- (3aa,4P#5p,7p,7aa) ] -4- [7- [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-1, 3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [7- [2 -[ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4 -metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol -2 -il] - 1-naftalencarbonitrilo (243Ci y 243CÜ) El compuesto racémico 243B se separó en enantiómeros individuales por cromatografía líquida en fase normal quiral . Se usó una columna Chiralpak OD (50 x 500 mm) , eluyendo con 13% EtOH/hexanos durante 99 min. a 50mL/min. detectando a 220 nra. El compuesto isómero de elución más rápida 243CÍ tuvo un tiempo de retención = 45 min. y el compuesto isómero de elución más lenta 243CÜ tuvo un tiempo de retención = 66 min .
D. [3aS- (3aa,4p,5p,7 ,7aa) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2-hidroxietil) -4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo y [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo, (243DÍ y 243DÜ) El compuesto 243CÍ (0.84 g, 2.14 mmol) se disolvió en 2% de HCl 12N/EtOH (20 mL) , se agitó por 5 minutos y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5-10% MeOH/CH2Cl2; dio 0.57 g (88%) de 243DÍ. El compuesto 243DÍ que procedía del isómero de elución más rápida (243CÍ) se encontró que era 99.7% ée por cromatografía analítica quiral en fase normal. .Condiciones CLAR : 99.7% a 2.17 min. (tiempo de retención) (ChiraCLel OJ 44.6 X 250 mm, 10 mieras, 40°C, isocrática 80% Heptano / 20% EtOH/ eOH (1:1), 1.0 mL/min. , detección a 288 nm) . El compuesto 243CÜ (0.86 g, 2.19 mmol) se disolvió en 2% de HC1 12N/EtOH (20 mL) , se agitó por 5 minutos y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5-10% MeOH/CH2Cl2 dio 0.60 g (90%) de 243DÜ. El compuesto 243DÜ que procede del isómero de elución más lenta (243CÜ) se encontró que tiene 87.1% ee por cromatografía quiral de fase analítica. Condiciones CLAR: 87.1% a 18.4 min. (tiempo de retención) (ChiraCLel OJ 44.6 X 250 mm, 10 mieras, 40°C, isocrática 80% heptano / 20% EtOH/MeOH (1:1), 1.0 mL/min., detección a 288 nm) . La conformación absoluta de los compuestos 243DÍ y 243DÜ no se determinó. Por simplicidad en nomenclatura, el compuesto 243DÍ se designa en la presente como que tiene una configuración "S" y el compuesto 243DÜ como que tiene una configuración "R" . Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 243DÍ se designan en la presente como que tienen una configuración "S" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 243DÜ se designan en la presente como que tienen una configuración "R" .
Ejemplo 244 [3aS- (3aa,43,53,7p,7aa) -4- [7- [2- (4- Cianofenoxi) etil] octahidro-5-hidroxi-4-nietil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo y [3aR- (3aa,43, 5ß,7ß, 7aa) ] -4- [7- [2- (4-Cianofenoxi) etil] octahidro-5- hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo . (244i y 244ii) Se agregó DBAD (26 mg, 0.115 mmol) a una solución de PPh3 (30 mg, 0.115 mmol) en THF (0.65 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 4-cianofenol (13.6 mg, 0.115 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. El compuesto 243DÍ (30 mg, 0.076 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 30% acetona/70% CHC13, dio 23.1 mg (0.047 mmol, 61.7%) de compuesto 244i. Condiciones CLAR: 95% a 3.06 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 494.09 [M+H] +. [a]D = 53.30°, C = 4.5 mg/cc en THF, @ 589 nm) Se agregó DBAD (26 mg, 0.115 mmol) a una solución de PPh3 (30 mg, 0.115 mmol) en THF (0.65 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 4 -cianofenol (13.6 mg, 0.115 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. El compuesto 243DÜ (30 mg, 0.076 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 30% acetona/70% CHC13 dio 20.3 mg (0.041 mmol, 54.2%) de compuesto 244ii. Condiciones CLAR: 90% a 3.07 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 494.09 [M+H]+. [ce] D = -42.87°, C = 6.6 mg/cc en THF, @ 589 nm) Ejemplo 245 (3aa, 4ß, 7ß, 7act) -4- [4- [2- (4-Cianofenoxi) ebil] -7-etiloctahidro-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo. (245D) A. 2-Etil-5- (2-hidroxietil) furano (245A) Se agregó n-BuLi (2.5 M en hexano, 4.4 mL, 11 mmol) a una solución de 2-etilfurano (1.05 mL, 10 mmol) en THF (10 mL) a -25 °C. La solución se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó por 3 h. Se agregó óxido de etileno (0.75 mL) a -78°C. La reacción se agitó por 0.5 h a -15°C y durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó NHC1 acuoso saturado y la mezcla se extrajo con éter (3X) . Los extractos combinados se lavaron con agua (IX) y salmuera (IX) y se secaron sobre Na2S04. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 30% EtOAc/70% hexano dio 1.12 g (8.02 mmol, 80.2%) de compuesto 245A como un aceite amarillo.
B. (3aa,4 ,7p,7aa) -4- [4-Etil-l, 3, 3a, 4, 7, 7a-hexahidro-7- (2-hidroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (245B) Una solución del compuesto 245A (280 mg, 2.00 mmol) y el 4 - (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-1H-1 -il) -1-naftalencarbonitrilo (496 mg, 2.00 mmol) en benceno (2 mL) se agitó a 60°C por 2 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El sólido amarillo, compuesto 245B, se usó directamente en la siguiente etapa.
C. (3aa,4p, 7p,7aa) -4- [4-Etiloctahidro-7- (2 -hidroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarboni.trilo (245C) Una mezcla de compuesto 245B (764 mg, 1.97 mmol) y 10% Pd/C (115 mg, cat . ) en EtOAc (36 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente por 2 h. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida para dar 779 mg de compuesto crudo 245C. La purificación de este producto crudo por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 70% EtOAc/30% hexano dio 235 mg (0.6 mmol, 30.1%) de compuesto 245C. Condiciones CLAR: 99% a 2.84 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 391.12 [M+H]+.
D. (3-aa,4P,7p,7aa) -4- [4- [2- (4-Cianofenoxi) etil] -7-etiloctahid.ro- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 1-naftalencarbonitrilo (245D) Se agregó DBAD (44.2 mg, 0.192 mmol) a una solución de PPh3 (50.4 mg, 0.192 mmol) en THF (1 mL) . Después de agitar por 10 min. , se agregó 4-cianofenol (23 mg, 0.192 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. El compuesto 245C (50 mg, 0.128 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 40% EtOAc/60% hexano dio 43 mg (0.087 mmol, 68.4%) de compuesto 245D como un sólido blanco. Condiciones CLAR: 99% a 3.65 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 tura, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3PO4, detectando a 220 nm) . EM (ES): m/z 492.16 [M+H]+.
Ejemplo 246 (3aa<43,73,7aa) -4- [2- (Acetiloxi) etil] -2- (4-ciano-l- naftalen.il) hexahidro-7 -metil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) diona, (246) El compuesto 223B (0.100 g, 0.279 mmol) se disolvió en cloruro de metileno (3.0 mL) a 25°C y se agregaron piridina (0.071 mL, 0.837 mmol) y 4-DMAP (1.0 mg) . Se agregó después anhídrido acético (0.053 mL, 0.559 mmol) y la reacción se agitó por 20 h a 25°C. Después de 20 h, se agregó bicarbonato de sodio saturado acuoso y la reacción se agitó por 30 min. La mezcla se extrajo después con cloruro de metileno (2 x 20 mL) . Los orgánicos se lavaron después una vez con HC1 1N (10 mL) y después se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. Después de la concentración in vacuo, el material crudo se purificó por CCD preparativa sobre sílice eluyendo con 12% acetona en cloroformo para dar 0.073 g de compuesto 246 como una espuma amarilla. CLAR: 95% a 2.837 y 3.027 min (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 441.10 [M+Na]+.
Ejemplo 247 (3aa, 4ß, 7ß, 7atx) -4- [Octahidro-4-metil-l, 3-dioxo-7- (2-oxoetil) - 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1 -naftalencarbonitrilo, (247) Se agregó cloruro de oxalilo (solución 2.0 M, 1.73 mL, 3.5 mmol) a cloruro de metileno seco (10 mL) y se enfrió hasta -78°C. Se agregó después DEMO (0.283 mL, 3.99 mmol) gota a gota con la evolución de gas. Después de 15 min., se agregó después el compuesto 223B (1.00 g, 2.66 mmol) en cloruro de metileno (10 mL) . Después de 15 min., se agregó TEA (1.10 mL, 7.98 mmol) y la reacción se calentó lentamente hasta 25°C. Se agregó después agua (30 mL) y la mezcla se diluyó con cloruro de metileno (100 mL) . Los orgánicos se lavaron después una vez con HCl 1 N (30 mL) , una vez con agua (30 mL) y una vez con salmuera (30 mL) y después se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. El producto crudo se aisló por concentración in vacuo para dar el compuesto 247 como una espuma color naranja. El compuesto crudo 247 se llevó directamente a la siguiente reacción. CLAR: 100% a 2.70 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90%. metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 483.65 [M+H]+.
Ejemplo 248 [3aa, 4ß, 7ß, 7aa] -4 [4- [3- (4 -Cianofenilo) -2 -propenil] octahidro- 7-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 1- naftalencarbonitrilo y [3aa, 4ß, 7ß, 7aa] -4- [4- [3- (4-Cianofenil) -2-propenil] octahidro-7-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (248i y 248ii) Se suspendió cloruro de (4 -cianobencil ) -trifenilfosfonio (0.072 g, 0.174 mmol) en THF (2.0 mL) y se enfrió hasta 0°C. Se agregó después n-BuLi (solución 1.6 , 0.092 mL, 0.147 mmol) gota a gota resultando en una solución homogénea. La solución se calentó hasta 25°C por 15 min. y después se enfrió hasta 0°C. El compuesto 247 (0.050 g, 0.134 mmol) se agregó después en THF. Después de 1 h, la reacción se apagó con cloruro de amonio acuoso saturado y después se extrajo con cloruro de metileno (3 x 20 mL) . Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y después se concentraron in vacuo. El material crudo se purificó por CCD preparativa eluyendo con 5% acetona en cloroformo para dar 0.010 g de una mezcla de compuestos 248i y 248ii como un sólido blanco. Una mezcla 1:1 de los isómeros de olefinas caracterizada por espectroscopia RMN. CLAR: 100% a 3.517 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM(ES) : m/ z 474.2 [M+H] +.
Ejemplo 249 (3aa, 4ß, 7ß, 7act) -4- [4- [3- (4-Cianofenil)propil] octahidro-7- metil-l, 3-dioxo-4>7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo, (249) La mezcla de compuestos 248i y 248ii (0.008 g, 0.017 mmol) se disolvió en EtOH (3.0 mL) y se agregó Pd/C (10% Pd, 0.008 g) . Se introdujo después ¾ por medio de un globo. Después de 18 h, la reacción se filtró a través de Celite, eluyendo con EtOAc, seguido por la concentración in vacuo. Se aisló el compuesto 249 como un sólido blanco (0.007 g) . CLAR: 90% a 3.520 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante A minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min.', observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 476.13 [M+H] + .
Ejemplo 250 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [4- [2 - [ ( 6 -Cloro- 1, 2 -bencisoxazol - 3 - il) oxi] etil] octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7 -epoxi - 2H- isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo, (250) A una solución de PPh3 (52 mg, 0.20 mmol) en 0.5 mL de THF, se agregó DBAD (46 mg, 0.20 mmol) como una porción sólida. La mezcla resultante se agitó por 10 min. antes de que se agregara 6-cloro-3-hidroxi-l , 2 -bencisoxazol (34 mg, 0.20 mmol) . Se continuó la agitación por 10 min. antes de que se introdujera una solución del compuesto 223B (50 mg, 0.13 mmol) en 0.5 mL de THF por medio de una cánula. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 24 h, se concentró in vacuo y se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (Columna YMC S5 ODS 20 x 100 mm; eluyendo con 30-100% MeOH acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 10 min. a 20 mL/min) para resultar un sólido blanco. Los sólidos obtenidos se disolvieron en CH2C12, se lavaron con solución saturada de NaHC03, se secaron sobre Na2S0 y se concentraron in vacuo para dar 50 mg (71%) de compuesto 250 como un aceite incoloro. CLAR: 3.89 min. y .02 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm. Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% H3P04, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM S) : m/z 528.4 [M+ H] + .
Ejemplo 251 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro- -metil -7 - [2- [ (6-nitro-lH-indazol-3 - il) oxi] etil] -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-i3oiiidol-2-il] 1-naftalencarbonitrilo . (251) A una solución del compuesto 223B (50 mg, 0.13 mmol) en tolueno (1 mL) se agregó ADDP (50 mg, 0.20 mmol), 6-nitro-3-indazolinona (36 mg, 0.20 mmol) y n-BU3P (50 µL, 0.2 mmol). La mezcla resultante se calentó a 80°C por 24 h, se concentró in vacuo y se purificó por una combinación de CLAR preparativa de fase inversa (Columna Y C S5 ODS 20 x 100 mm; eluyendo con 30-100% MeOH acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 10 min. a 20 mL/min.) y cromatografía instantánea (gel de sílice, 25% acetona en CHC13) para dar 17 mg (25%) de compuesto 251 como un sólido amarillo. CLAR: 3.60 min. y 3.74 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna -YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% H3P04( 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 537.6 [M+H]+.
Ejemplo 252 [3aS- (3aa,4P, 5ß, 7P,7aa) -4- [7- [2- (1, 2 -Bencisoxazol-3 - iloxi) etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- Se hicieron reaccionar PPh3 (47 mg, 0.18 mmol), DBAD (41 mg, 0.18 mmol), 3 -hidroxi-1 , 2 -bencisoxazol (24 mg, 0.18 mmol) y el compuesto 243Di (35 mg, 0.09 mmol) de acuerdo con el procedimiento dado para el compuesto 250. La purificación se aCLanzó por CLAR de fase inversa (Columna YMC S5 ODS 20 x 100 mm; eluyendo con 30-100% MeOH acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 10 min. a 20 mL/min.) para dar un sólido blanco. Los sólidos obtenidos se disolvieron en CH2CI2, se lavó con una solución saturada de NaHC03, se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida para lograr 29 mg (64%) de compuesto 252 como un aceite incoloro. CLAR: 96% a 3.29 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm Ballistic, 0-100% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2%. H3P04, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 510.2 [M+H] +.
Ejemplo 253 [3aR- (33a,4ß,5ß,7ß,7 a)] -4- [7- [2 - (1, 2 -Bencisoxazol- 3 - iloxi) etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi- Se hicieron reaccionar el PPh3 (47 rag, 0.18 mmol) , DBAD (41 mg, 0.18 mmol), 3-hidroxi-l , 2 -bencisoxazol (24 mg, 0.18 mmol) y compuesto 243DÜ (35 mg, 0.09 mmol) de acuerdo con el procedimiento dado por el compuesto 250. La purificación se aCLanzó por CLAR de fase inversa (Columna YMC S5 ODS 20 x 100 mm; eluyendo con 30-100% de MeOH acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 10 min. a 20 mL/min.) para resultar un sólido blanco. Los sólidos obtenidos se disolvieron en CH2C12, se lavaron con una solución saturada de NaHC03, se secaron sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida para lograr 23 mg (51%) de compuesto 253 como un aceite incoloro. CLAR: 95% a 3.29 min. (atropisómeros . tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm Ballistic, 0-100% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% H3P04( 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 510.4 [M+ H] + .
Ejemplo 254 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7P,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-iBoindol-2 -il) -2 - (trifluorometiDbenzonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) 3 -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometiDbenzonitrilo, (254i y 254ii) El compuesto racémico 22 IB se separó en sus enantiomeros por CIAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK AD 5 x 50 cm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrática) a 50 mL/min.) para dar el compuesto de elución más rápida 254i (Chiral CLAR: 10.02 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) y el de elución más lenta 254ii (CLAR quiral: 14.74 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min). (Los nombres de los compuestos del título se basan en la determinación de la estereoquímica absoluta) .
Ejemplo 255 (3act, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4 -Ciano-1 -naftalenil) octahidro-1, 3 -dioxo- 7- [2- (fenilmetoxi) etil] -4,7-epoxi-4H-isoindol-4- propanonitrilo y (3aa, 4a, 7a, 7aa) - 2 - (4 -Ciano- 1 - naftalenil) octahidro-1, 3-dioxo-7- [2- ( fenilmetoxi) etil] -4,7- epoxi-4H-isoindol-4-propanonitrilo. (255H1 y 255HÜ ) A. 2- (2-Hidroxietil) furano (255A) Se preparó el 2 - (2 -Hidroxietil ) furano de acuerdo con la siguiente referencia: Harmata, M, et al. J. Org. Chem. 60, 5077-5092 (1995) . Se agregó n-BuLi (2.5 M en hexano, 44 mL, 110 mmol) a una solución de furano (8 mL, 110 mmol) en 100 mL de THF a -78°C. La solución se agitó a 0°C por 4 h y después se agregó óxido de etileno (7.5 mL) a -78°C. La mezcla de reacción se agitó a -15°C por 1 h y después durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se apagó - con NH4C1 saturado y se extrajo con éter (3X) . Los extractos combinados se lavaron con agua (IX) y salmuera (IX) . La solución de éter se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 40% EtOAc/60% hexano dio 5.4 g (48.2 mmol , 43.8%) de compuesto 255A como un aceite café claro.
B. 2- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil)dimetilsilil] oxi] etil] furano (255B) Se agregaron imidazol (3.65 g, 53.6 mmol) y TBSCl (6.47 g, 42.9 mmol) a la solución del compuesto 255A (4.00 g, 35.7 mmol) en 50 mL de DMF. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h y después la mezcla de reacción se vació en éter. La solución de éter se lavó con agua (IX), HC1 1N (IX), agua (IX) y salmuera (IX) . La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 30% CH2Cl2/70% hexano dio 7.4 g (32.7 mmol, 91.7%) de 255B como un aceite incoloro.
C. 2- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -5- (2-hidroxietil) furano (255C) Se agregó t-BuLi (1.2 en pentano, 10 mL, 16.99 mmol) a una solución agitada de 255B (3.49 g, 15.44 mmol) en 13 mL de THF a -78°C gata a gota. La mezcla se agitó por 4 h adicionales a 0°C. Óxido de etileno (1.05 mL) se agregó a - 78°C a la solución de reacción. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Se agregó NHC1 saturado acuoso y se separó la mayor parte del THF bajo presión reducida. La mezcla se extrajo con éter (3X) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (IX) y salmuera (IX) y se secaron sobre Na2S04. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5% EtOAc/95% CH2C12 dio 2.8 g (10.4 mmol , 67%) de compuesto 255C como un aceite amarillo.
D. 2- [2- [ [ (1, l-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -5- [2- (fenilmetoxi) etil] furano(255D) El alcohol 255C (1.00 g, 3.7 mmol) en 12 mL de THF se trató con 60% de NaH (177.8 mg, 4.44 mmol), bromuro de bencilo (0.53 mL, 4.44 mmol) y yoduro de tetrabutilamonio (50 mg, 5%) por 3 h a temperatura ambiente. Se agregó agua y la mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se lavaron con agua (IX) y salmuera (IX) y se secaron sobre Na2S04. La purificación por cromatografía - instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20% hexano/80% CH2C12 dio 1.10 g (3.05 mmol, 82.6%) de compuesto 255D como un aceite amarillo.
E. 2- (2-Hidroxietil) -5- [2- (fenilmetoxi) etil] furano (255E) agregó fluoruro de tetrabutilamonio (1.0 M en THF, 3.06 mL, 3.06 mmol) a la solución del compuesto 255D (l.l g, 3.06 mmol) en 10 mL de THF a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 10 minutos, se apagó con NH4C1 saturado y se extrajo con éter (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% EtOAc/90% CH2C12 dio 750 mg (3.05 mmol, 99.6%) de compuesto 255E como un aceite amarillo claro.
F. 5- [2- (Fenilmetoxi) etil] furan-2 -propanonitrilo (255F) Se agregó DEAD (1.285 mL, 8.17 mmol) a una solución agitada de Ph3P (2.14 g, 8.17 mmol) en 12 mL de THF seco a 0°C. La solución se agitó por 30 min. a temperatura ambiente y se agregó el compuesto 255E (670 mg, 2.72 mmol) . La reacción se agitó por 15 min. y se agregó acetona cianohidrina (0.745 mL, 8.17 mmol) a -15°C. La reacción se agitó por 30 min. a -15°C, después a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró después bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 100% CH2C12 dio 180 mg (0.705 mmol, 26%) de compuesto 255F como un aceite incoloro.
G. (3aa,4p,7p,7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) -1, 2, 3 , 3a, 7, 7a-hexahidro-1, 3 -dioxo-7 - [2 - ( fenilmetoxi) etil] -4 , 7 -epoxi-4H- Una solución del compuesto 255F (180 mg, 0.706 mmol) y 4- (2, 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (263 mg, 1.06 mmol) en CH2C12 (3 mL) se agitó a temperatura ambiente por 3 días. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5% EtOAc/CH2Cl2 , dio 318 mg (0.63 mmol, 89.6%) del compuesto 255G como un sólido gris claro que se usó directamente en la siguiente etapa .
H. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro- 1, 3-dioxo-7- [2- (fenilmetoxi) etil] -4, 7-epoxi-4H-isoindoj-4-propanonitrilo y (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-1, 3-dioxo-7- [2- (fenilmetoxi) etil] -4,7-epoxi-4H-isoindol-4 -propanonitrilo (255?? y 255HÜ) Una mezcla de compuesto 255G (318 mg, 0.63 mmol) y 10% Pd/C (64 mg) en EtOH (10 mL) y EtOAc (5 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida para dar 320 mg de los compuestos crudos 255HÍ y 255HÜ. La purificación de 25 mg de este producto crudo por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 55% EtOAc/hexano dio 6.5 mg (0.013 mmol, 26% (basado en 25 mg) ) de compuesto 255HÍ y 8.1 mg (0.016 mmol, 32.4% (basado en 25 mg) ) de compuesto 255HÜ. Compuesto 255HÍ: Condiciones CLAR: 98% a 3.57 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, detectando a 220 nm, EM(ES) : m/z 506.15 [M+H]+. Compuesto 255HÜ: Condiciones CLAR: 98% a 3.51 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04 detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 506.15 [M+H] + .
Ejemplo 256 (3aa,43,73,7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-7- (2-hidroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-4H-isoindol-4-propanonitrilo y (3aa,4a,7a,7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-7- (2- hidroxieti1-1 , 3 -dioxo-4,7-epoxi -4H- isoindol -4 -propanonitrilo, Una mezcla de compuestos 255HÍ y 255HÜ (200 mg, 0.396 mmol) y PdCl2 (8.4 mg, cat . ) en EtOH (1 mL) y EtOAc (3 mL) se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno (30 psi-2.11 kg/cm2) a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5% MeOH/CH2Cl2 seguida por una segunda columna eluyendo con 100% EtOAc dio 28.9 mg (0.0696 mmol, 17.6%) de compuesto 256ii y 26.5 mg (0.0639 mmol, 16.1%) de compuesto 256i. Compuesto 256ii: Condiciones CLAR: 90% a 2.44 min. (tiempo de retención) (Y C S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%- 90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3PO4, detectando a 220 nm. ) . EM(ES) : m/z 416.11 [ +H]+. Compuesto 256i: Condiciones CLAR: 99% a 2.47 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%- 90% metanol acuoso durante un gradiente de 4' minutos con 0.2% H3PO4, detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 416.11 [M+H]+.
Ejemplo 257 (3aa,4P,7P,7aa) -2- (4-Ciano-l-naf alenil) -7- [2- (4- fluorofenoxi) etil] octahidro-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol- 4-propanonitrilo . (257) Se agregó DBAD (15 mg, 0.065 mmol) a una solución de PPh3 (17 mg, 0.065 mmol) en THF (0.3 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 4-fluorofenol (7.33 mg, 0.065 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. Se agregó el compuesto 256i (18.1 mg, 0.044 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 3 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 60% EtOAc/30% hexano dio 5.9 mg (0.0116 mmol, 26.34%) de compuesto 257. Condiciones CLAR: 98% a 3.59 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04( detectando a 220 nm) . EM (ES): m/z 510.14 [ +H]+.
Ejemplo 258 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (7-Cloro-2 , 1, 3 -benzoxadiazol-4 - il) hexahidro-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona, Una solución de 1.0 g (5.02 mmol) de 4 -cloro- 7-nitrobenzofurazano en 20 mL de AcOH, 10 mL de EtOAc y 2 mL de H20 se calentó a 50 °C y se trató con polvo de hierro (1.4 g, 251 mmol) . La mezcla se calentó a 80°C por 30 min. y después se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de Celite eluyendo con EtOAc. El filtrado se lavó con NaHC03 acuoso saturado, se secó sobre MgS04, y se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto 258A (0.80 g, 94%) como un sólido rojo.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (7 -Cloro-2 , 1, 3 -benzoxadiazol-4 -il) hexahidro-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona, (258B) El compuesto 258A (42 mg, 0.25 mmol) reaccionó en un tubo sellado con el compuesto 20A (73.5 mg, 0.375 mmol), MgS04 (75 mg, 0.625 mmol) y Et3N (170 µ]_?, 1.25 mmol) en 250 µ?-, de tolueno según el procedimiento anterior descrito en el ejemplo 208C para dar después de la purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% metanol acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 12 min., 20 mL/min.) 23 mg (26%) de compuesto 258B como un sólido amarillo. CIAR: 97.6% a 2.87 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 minutos, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (DCI) : m/ z 347.9 [M]+.
Ejemplo 259 (3aa, 4ß, 7ß, 7aoc) - 2 - (7 -Cloro-2-metil-4-benzofuranil) hexahidro- 4,7-dimetil-4/ 7-epoxi-lH-isoindol-l , 3 (2H) -diona. (259) La 7-Cloro-2-metil-4-benzofuranamina (38 mg, 0.25 mmol, preparada según el procedimiento descrito por Enomoto y Takemura en EP 0476697 Al) reaccionó en un tubo sellado con compuesto 20A (73.5 mg, 0.375 mmol), MgS0 (75 mg, 0.625 mmol) y Et3N (170 L , 1.25 mmol) en 250 µL- de tolueno de acuerdo con el procedimiento descrito en ejemplo 208C para dar, Después de purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100 metanol acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 12 min. , 20 mL/min.), 42 mg (47%) de compuesto 259 como un sólido blanco. CLAR: 98% a 3.45 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (DCI) :m/z 359.9 [M]+.
Ejemplo 260 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (7 -Cloro-2 -metilbenzo [b] tiofen-4-il) hexahidro-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona, A. l-Cloro-2- (2 -cloro-alilsulfañil) -4-nitro-benceno (260A) Una solución de 2-cloro-5-nitro-bencenotiol (1.0 g, 5.27 mmol , preparada según el procedimiento descrito por Still et al. Synth. Comm. 13, 1181 (1983)) en 15 mL de DMF, se trató con 2 , 3-diclorop-ropeno (693 µ??, 7.52 mmol) y K2C03 (433 mg, 3.13 mmol) . La mezcla se calentó a 80°C por 2 h y se dejó después enfriar a temperatura ambiente. Se agregaron EtOAc (200 mL) y H20 (100 mL) . La fase orgánica se lavó con H20 (2 x 250 mL) , NaCl acuoso saturado (100 mL) , se secó sobre MgS04, y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea en columna sobre gel de sílice eluyendo con 20% EtOAc en hexanos para dar el compuesto 260A (1.09 g, 89%) como un aceite color naranja.
B. 4 -Amino-7 -cloro-2-metilbenzo [b] tiofeno (260B) Una solución de 1.09 g (4.67 mmol) de compuesto 260A en 20 mL de AcOH con 10 mL de EtOAc y 2 mL de H20 se calentó hasta 80°C y se trató con polvo de hierro (1.3 g, 23.4 mmol). La mezcla se calentó a 80°C por 40 min. y después se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de Celite eluyendo con EtOAc. El filtrado se lavó con NaHC03 saturado acuoso, se secó sobre gS0 , y se concentró in vacuo. Se agregó N, -dietilanilina (10 mL) , y la reacción se calentó a 215 °C por 6 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se agregó HCl ¦ 1 N acuoso (20 mL) , y la reacción se agitó a temperatura ambiente por 2 h. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 30 mL) . La fase orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado, se secó sobre MgS04, y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea en columna sobre gel de sílice eluyendo con 25% EtOAc en hexanos para dar el compuesto 260B (320 mg, 35%) como un sólido color beige.
C. (3aco,4P,7P,7aa) -2- (7 -Cloro- 2 -metilbenzo [b] tiofen-4-il) hexahidro-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona, (260C) El compuesto 260B (49 mg, 0.25 mmol) reaccionó en un tubo sellado con el compuesto 20A (73.5 mg, 0.38 mmol), MgS04 (75 mg, 0.63 mmol) y Et3N (170 µ?^, 1.25 mmol) en 250 µ?. de tolueno según el procedimiento descrito en el ejemplo 208C para dar, después de la purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con 30-100% metanol acuoso durante 12 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.), 28 mg (30%) de compuesto 260C como un sólido amarillo pálido. CLAR: 96% a 3.18 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (DCI): m/z 376.0 ~[M]+.
Ejemplo 261 Ester de fenilmetílico del ácido [3aa, 4ß (E) , 7ß, 7aa] -4- [2- (4- ciano- 1 -naftalenil ) octahidro-7 -metil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -4H- El compuesto 247 (0.500 g, 1.34 mmol) se disolvió en THF (20 mL) y se agregó bencil (trifenilfosforanilideno) (0.55 g, 1.34 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 67°C por 2 h y después se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 5% acetona/95% CHC13 dio 0.65 g de compuesto 261 como un sólido amarillo. CLAR : 99% a 3.717 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 507.1 [M+H]+.
Ejemplo 262 Ácido (3aa,43, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-7 - metil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-4H-isoindol-4 -butanoico, (262) El compuesto 261 (0.60 g, 1.19 mmol) se disolvió en EtOH/EtOAc (5mL/5mL) y se agregó 10% Pd/C (0.30 g) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo. Después de 8 h la reacción se filtró a través de Celite y después se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto 262 (0.47 g) como un sólido blanco. CLAR: 98% a 2.81 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min.( observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 419.1 [M+H]+.
Ejemplo 263 (3aa,4P,7p,7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) -N- (4- fluorofenil) octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H- isoindol-4-butanamida (263) El compuesto 262 (?.030 g, 0.072 mmol) se disolvió en CH3CN (1 mL) . Se agregaron después DCC (0.014-g, 0.072 mmol) y HOAc (0.0098 g, 0.072 mmol) , seguido por 4 - fluoroanilina (0.007 mL, 0.072 mmol) . La mezcla de reacción se agitó bajo argón por 14 h y el material crudo se disolvió en MeOH, se purificó por CLAR preparativa de fase inversa (YMC VP-ODS columna, 20 x 100 mm, eluyendo con 20% B hasta 100% B en 15 minutos y se mantuvo @ 100% B por 10 minutos) . Se aisló el compuesto 263 (0.020 g) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.217 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 512.1 [M+H]+.
Ejemplo 264 [3aS- ^a,4ß,5ß,7ß^a)] -4- [7- [2- (Acetiloxi) etil] octahidro-5- hidroxi-4-metil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 1-naftalencarbonitrilo y [3aR- (3aoc, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [Octahidro- 5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo. (264 y 243Dii) Una mezcla racémica de los compuestos 243Di y 243DÍ 90 gramos) se disolvió en 100 mL de THF anhidro en u: matraz de 2 L. .Se transfirieron éter de metil tert-butilo anhidro (900 mL) y acetato de vinilo (40 mL) en el matraz con agitación, y se agregó lipasa (20 g, tipo II, cruda, de páncreas porcino; Sigma, Cat# L3126) . La mezcla de reacción se agitó por 21 hr a temperatura ambiente, punto en el cual se agregaron 5 gramos adicionales de la lipasa y 20 mL de acetato de vinilo. La reacción se agitó a temperatura ambiente por 19 h adicionales, se almacenó a 4°C sin agitación por 36 h y después se agitó a temperatura ambiente por otras 22 h (hasta que el % ee deseado fue evidente por CLAR quiral) . Para observar la reacción, se retiraron 200 uL de la mezcla y se centrifugaron. Se secó el sobrenadante (100 uL) bajo nitrógeno y el residuo resultante se disolvió en 100 uL de EtOH y se sometió a un análisis por CLAR: 1) CLAR de fase inversa: Columna, YMC-ODS AQ 150x4.6; relación de flujo, 1.2 mL/min. ; tamaño de muestra, 10 uL solvente A, : HC1 1 mM en agua; solvente B, MeCN; observado a 300 nm Gradiente : Tiempo (min.) 0 8 8.5 9.5 10 12 B% 30 60 85 85 30 30 2) CLAR quiral: Columna, CHIRACLEL OJ 4.6 x 250 mm fase móvil, hexanos/MeOH/EtOH (8:1:1) ¦ relación de flujo, 1 mL/min. ; tamaño de muestra, 20 uL observado a 220 y 300 nm llevado a cabo a 25°C y 40°C. (para la determinación del lee de la mezcla de reacción) La enzima se separó por filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida. La mezcla resultante se disolvió en CHCl3 y se absorbió sobre gel de sílice (63-200 mieras) . Estos sólidos se aplicaron a un embudo VCL (3 cm D.I., VCL es cromatografía líquida a vacío usando embudos de vidrio que tienen uniones 24/40 en el fondo) conteniendo una altura de lecho de 5 cm de gel de sílice (25-40 mieras) y se llevó a cabo un gradiente por etapas. El gradiente fue de 100% CHC13 en las primeras 3 fracciones, seguido por CHC13-1% MeOH (3 fracciones) , CHCl3-2% MeOH (3 fracciones) , CHCl3-3% MeOH (3 fracciones) , CHCl3-4% MeOH (3 fracciones) , y finalmente con CHCl3-5% MeOH (3 fracciones) . El volumen de las fracciones fue de 100 mL hasta aCLanzar CHCl3-3% MeOH y desde ese punto fue 200 mL. El compuesto 264 eluye en al menos dos fracciones de 100% CHC13 y hasta la primera fracción de CHC3-2% MeOH. El compuesto 243DÜ eluye partiendo con la segunda fracción de CHCl3-2% MeOH, y continua a la primera fracción de CHCl3-5% MeOH. El compuesto crudo 243DÜ contiene una cantidad pequeña de una impureza coloreada que se elimina por una columna Sephadex [LH-20 aumentada en CHCl3-MeOH (2:1), columna (2.5 cm D . I . y 90 cm de largo) para dar 632 mg del compuesto 243DÜ. Compuesto 264: Condiciones CLAR: 98% a 7.2 min. (tiempo de retención) (método 1) , Condiciones CLAR quiral: 29.0 min. @ 25°C (método 2) . Compuesto 243DÜ : Condiciones CLAR: 98% a 4.6 min. (tiempo de retención) (método 1), Condiciones CLAR quiral: 96% ee a 25.7 min. (tiempo de retención) (@ 25°C) y 19.8 min. (tiempo de retención) (@ 40°C) (método 2) .
Ejemplo 265 (3aot,43,7P,7aa(E) ] -4- [Octahidro-4 -metil- 1 , 3-dioxo-7- (4-oxo-4- fenil-2 -butenil) -4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) - 1- naftalencarbonitrilo . (265) El compuesto 247 (0.050 g, 0.134 mmol) se disolvió en THF (1.5 mL) y se agregó (fenaciliden) trifenilfosforano (0.051 g, 0.134 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 67°C por 24 h y después se enfrió hasta 23 °C y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó después por CLAR preparativa de fase inversa. (Columna YMC VP-ODS, 20 x 100 mm, eluyendo con 20% B hasta 100%B en 15 minutos y se mantiene @ 100%B por 10 minutos.) para dar el compuesto 265 (0.040 g) como un sólido blanco. CLAR: '100% a 3.503 min. (tiempo de retención) · (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2%. ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM(ES) : m/z 477.1 [M+H] + .
Ejemplo 266 (3act,43, 73, 7aa(E) ] -4-Octahidro-4-metil-l, 3 -dioxo-7 - (4- hidroxi-4-fenil-2-butil) -4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo. (266) El compuesto 265 (0.010 g, 0.021 mmol) se disolvió en EtOH (2.0 mL) y se agregó Pd/C (10% Pd, 0.005 g) . Se introdujo después el hidrógeno por medio de un globo y la reacción se agitó a 25°C por 3 h. La reacción se filtró después a través de Celite enjuagando con EtOAc y se concentró in vacuo para dar el compuesto 266 como un sólido café claro (0.009 g) . No fue necesaria purificación. CLAR: 100% a 3.38 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 503.2 [M+Na] + . (.Donde esta reacción se corrió por 1 hora, el producto' resultante fue el compuesto 455.) Ejemplos 267 a 378 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 267 al 378 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde G, R7, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado, son establecidos en la Tabla 5. La configuración absoluta para los siguientes compuestos no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 238i se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 238ii como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 238i se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 238ii se designan en la presente por tener una configuración "S" . Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 5 son como siguen: CLEM = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante · 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA; 4 mL/min. , observando a 220 nm. CLEM* = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 2 minutos conteniendo 0.1% TFA 4 mL/min., observando a 220 nm. CL = Columna Y C S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 5 se determinaron por EM(ES) por la fórmula m/z. Tabla 5.
Tienpo de Ej. Nctribre del retención Proced. No. G Compuesto Min./Masa del Ej. Molecular 273 Ester de metilo del 3.77 204, 35 ácido CLEM (3aa, 4ß,7ß,7ßa) -4- 529.12 G3 [2-[2-[4-ciano-3- [M+H] + (trifluorometil) fen il] octahidro-7- metil-1, 3-dioxo- 4,7-epoxi-4H- isoindol-4-il] - etoxi]benzoico 274 (3ßa,4ß, 7ß,7ßa)- 2.44 204, 35 hexahidro-4-(2- CL ? 3 hidroxietil) -7- °2NrSi metil-2- (3-metil-4- nitrofenil)- 4,7- epoxi-lH-isoindol- 1,3 (2H)-diona Tiempo de Ej. Nombre del Compuesto retención Proced.
No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 275 (3aa, 4ß,7ß, 7aa) -4- [octahidro- 3.97 204, 35 4-metil-l, 3-dioxo-7- [2- [4- CL (trifluorometoxi) fenoxi] etil] - 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo 276 CH3 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (3, 5- 3.31 20 diclorofenil) hexahidro-4, 7- CLEM dimetil-4,7-epoxi-lH-isoindol- 341.2 l,3(2H)-diona [M+H] + 277 CH3 (3aa, 4ß, 7ß,7a ) -hexahidro-4, 7- 3.04 20 dimetil-2- (4-nitro-l- CLEM naftalenil) -4, 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona 278 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [octahidro- 4.06 204, 35 f3 4-metil-l, 3-dioxo-7- [2-[4- CL (fenilmetoxi) fenoxi] etil] -4,7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo Tiempo de Ej. Ncnibre del retención Proced.
No. G Compuesto Min. /Masa del Ej. Molecular 287 H (3aa,4p,7p,7aa)- 1.16 3 hexahidro-2- [4- (1H- CL imidazol-l- il) fenil] -4-metil- 4,7-epoxi-lH- isoindol-l,3(2H)- diona 288 H (3act, 4ß, 7ß, 7aa) -2- 2.81 3 [3-cloro-4-(2- CL tiazolil) fenil] hexa c, X hidro-4-metil-4, 7- epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona 89 CH3 (33a,4ß,7ß,73a)- 2.74 20 CH-, hexa idro- , 7- CL dimetil-2- (3-metil- 4-nitrofenil) -4, 7- epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona Tiempo de Ej. Ncmbre Hoi Ccnpuesto retención Proced.
No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 290 CH3 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro- 2.71 20 4,7-dimetil-2- (2-metil-4- CL nitrofenil) -4, 7-epoxi-lH- CH3 isoindol-1, 3 (2H) -diona 291 (3aa, 4ß,7ß,7ßa) -2- (3, 5- 2.98 204 OH diclorofenil)hexahidro-4- (2- CL hidroxietil) -7-metil- , 7- epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) - diona 292 (3aa, 4ß,7ß,73a) -2- (3, 5- 4.03 204, 35 diclorofenil) -4- [2- (4- CL fluorofenoxi) etil] hexahidro- 7-metil-4, 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona 293 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- 3.25 204, 35 [octahidro-4- [2- (4- CL NA hidroxifenoxi) etil] -7-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-2- . (trifluorometil)benzonitrilo Tiempo de Ej. Nonibre del Conpuesto retención Proced.
No. G 5l Min./Masa del Ej. Molecular 305 CH3 (3act, 4ß, 7ß,7ßa) -2-(5- 2.96 y 20 fluoro-1- 3.06 naftalenil) hexahidro- isómeros 4,7-dimetil-4,7- rotacionales F epoxi-lH-isoindol- CL l,3(2H)-diona 306 CH3 (3aa,4p, 7p,7aa)- 2.60 y 20 hexahidro-4, 7- 2.73 dimetil-2-(l- isómeros naftalenil)-4,7- rotacionales epoxi-lH-isoindol- CL 1, 3(2H)-diona 07 CH3 (3aa,4P,7p,7aa)- 2.62 20 hexahidro-2- [3- CL metoxi-4- (5- oxazolil) fenil] -4,7- dimetil-4, 7-epoxi-lH- isoindol-l,3(2H)- - diona Tienpo de Ej. Ncmbre del Ccnpuesto retención Prooed.
No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 311 CH3 (3aa,4p,7p,7aa) -2- 1.89 20 (l,6-dihidro-l,4- CL dimetil-6-oxo-3- piridinil) hexahidro- 4,7-dimetil-4,7- epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona 312 (3aa, 4ß,7ß,7ßa) -4- 3.63 204, 35 [octahidro-7-metil-2- CL ( -nitro-1- naftalenil) -1, 3- N02 dioxo- , 7-epoxi-4H- NC isoindol-4- il] etoxi]benzonitrilo 313 CH3 (3aa, 4p,7p,7aa) -4- 2.38 20 (octahidro-4,7- CL dimetil-l, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- CN isoindol-2-il)-l,2- bencendicarbonitrilo Tienpo de Ej. Ncnbre del Cctnpuesto retención Proced.
No. G in. Masa del Ej. Molecular 337 CH3 (3a ,4p,7 ,7aa)- 2.06 20 hexahidro-4,7- CL d±metil-2-[4-(lH- l,2,4-triazol-3- il) fenil] -4, 7-epoxi- lH-isoindol-l,3(2H)- diona 338 CH3 (3aa, 4ß,7ß, 7aoc)-2-[4- 2.42 20 (4, 5-dihidro-5-oxo- CL 1,2, 4-oxadiazol-3- il) fenil] hexahidro- 4,7-dimetil-4,7- epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona 339 CH3 (3a ,4p,7 ,7aa)- 2.51 20 hexahidro-2- [3- CL metoxi-4- (2- oxazolil) fenil] -4, 7- ?. CH3 dimetil- 4,7-epoxi- lH-isoindol-1,3 (2H) - diona Tienpo de Ej. Nctribre del Ccnpuesto retención Proced.
No. G *¿ Min. Masa del Ej. Molecular 344 CH3 (3ßa,4ß,7ß,73 ) -5- 2.18 20 (octahidro-4,7- CL dimetil-1, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il)-2- piridincarbonitrilo 345 CH3 (3aa,4p,73,7aa)-5- 2.31 20 (octahidro-4,7- CL dimetil-1, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- CN ' isoindol-2-il) -8- quino carbonitrilo 346 CH3 (3aa, 4ß,7ß,73a) -2-(5- 3..10 y 20 1 11 bromo-4-nitro-1- 3.29 naftalenil) hexahidro- isómeros N02 Br 4,7-dimetil-4,7- rotacionales epoxi-lH-isoindol- CL l,3(2H)-diona 1 Tienpo de Ej. Norrihre del Coepuesto retención Prooed.
No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 350 Ester 2- 3.53 y 223 [ (3aa,43,7p,7aa) -2- 3.67 (4-ciano-l- isómeros CN naftalenil) octahidro- rotacionales u 7-metil-l, 3-dioxo- CL 4,7-epoxi-4H- isoindol-4-il] etil del ácido bencenacético 351 I Ester de 2- 3.53 y 223 [(3a ,4 ,7 ,7aa) -2- 3.66 (4-ciano-l- isómeros CN naftalenil) octahidro- rotacionales 7-metil-l, 3-dioxo- CL 4,7-epoxi-4H- isoindol-4-il] etilo del ácido 4- fluorobencenacético Tierrpo de Ej. Ncrtore del Cccrpuesto retención Proced.
No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 352 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-4- 3.31 204, 35 metil-7-[2-[4- CL (metilsulfonil) fenoxi] etil] - N02 2- (4-nitro-l-naftalenil) - 4, 7-epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona 353 CH3 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -hexahidro-2- 2.94 20 • (2-naftalenil) -4, 7-dimetil- CL 4, 7-epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona 354 CH3 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-cloro- 3.22 y 20 1-naftalenil) hexahidro-4, 7- 3.34 dimetil- 4, 7-epoxi-lH- isómeros Cl isoindol-1, 3 (2H) -diona rotacionales CL 355 (33a, ß,7ß,73a) -N-[ (4- 3.52 237 clorofenil)metil] -2- (4- CL ciano-1- naftalenil) octahidro-7- CN metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 4H-isoindol-4-acetamida.
Tiempo de Ej. Ncmbre del Ccnpuesto retención Pr oed.
No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 356 Ester de 2- [ (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- 3.45 223 (4-ciano-l- CL naftalenil) octahidro-7-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H- CN isoindol-4-il] etilo del ácido 4,7, 7-trimetil-3-oxo-2- oxa iciclo [2.2.1] heptano-1- carboxilico 357 Ester 2- [ (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4- 3.91 223 ciano-l-naftalenil) octahidro-7- CL metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H- isoindol-4-il] etílico del ácido CN (ctS-a-metoxi-a- (trifluorometil) bencenacético 358 Ester de 2-[ (33a,4ß,7ß,73a)-2- 2.00 223 (4-ciano-l- CL naftalenil) octahidro-7-metil- 1, 3-dioxo- , 7-epoxi-4H- CN isoindol-4-il] etilo del ácido ( R) -a-metoxi-oc- (trifluorometil) bencenacético Tiempo de Ej. Nombre del Compuesto retención Prooed. No. G Min. /Masa del Ej. Molecular 361 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [2- 3.51 y 223 (benzoiloxi) etil] -2- (4-ciano- 3.66 o 1-naftalenil) hexahidro-7- isómeros metil-4, 7-epoxi-lH-isoindol- rotacionales l,3(2H)-diona CL 362 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-ciano-l- 3.52 y 223 naftalenil)-4-[2-[ (4- 3.67 nitrobenzoil) oxi] etil] hexahidr isómeros o rotacionales CN o-7-metil-4, 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona CL 363 Ester de 2- [ (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- 3.79 223 (4-ciano-l- CL naftalenil) octahidro-7-metil- CN o 1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-4H- isoindol-4-il] etílico del ácido 4-clorobenzóico 364 [3aa, 4ß,7ß,73a(?)]-4- 4.14 248 [octahidro-4-metil-7- [3- (1- CL CN naftalenil) -2-propenil] -1, 3- 499.13 dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2- [M+H] + i il] -1-naftaleno carbonitrilo Ejemplos 379 a 381 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 379 al 381 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde G, R7, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado, son establecidos en la Tabla 6. Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 6 son como siguen: CLEM = Columna Y C S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/h O durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA; 4 mL/min., observando a 220 nm. CLEM* = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 2 minutos conteniendo 0.1% TFA; 4 mL/min., observando a 220 nm. CL = Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 6 se determinó por EM(ES) por la fórmula m/z.
Tabla 6 Ej. G R Nombre del Compuesto Tiempo de Procedimiento No. retención del Ej. Min. /Masa Molecular 379 (3aot,4cc, 7<x,7aa) -4-[4-[ (4- 3.75 205 f3 fluorofenil)metil] octahidro- CL 7-métil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo Ej. G R' Ncmbre del Conpuesto Tiempo de Procedimiento No. retención del Ej. Min./Masa Molecular 380 CH3 (3aa, 4a, 7a, 7aa) - 1.88 27 hexahidro-4, 7-dimetil-2- CL (l-metil-6-oxo-3- O piperidinil) -4, 7-epoxi- lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona 381 CH3 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- (1, 6- 1.91 27 dihidro-1, 4-dimetil-6- CL oxo-3- 0 piridinil) hexahidro-4, 7- dimetil-4, 7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona Ejemplos 382 a 383 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 382 al 383 tienen la estructura, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y se prepararon por el procedimiento empleado, establecido en la Tabla 7. · Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 7 son como liguen: CLEM = Columna YMC S5 QDS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA 4 mL/min., observando a 220 nm. CLEM* = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 2 minutos conteniendo 0.1% TFA; 4 mL/min., observando a 220 nm. CL = Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 7 se determinó por EM(ES) por la fórmula m/ z .
Tabla 7 Ej. Eatn.ieti.ira Nombre del Conpuesto Tiempo de Procedimiento No. Retención del Ejemplo Min. 382 (3aa, 4a, 7a, 7aa) -2- 3.63 255 [4-ciano-3- CL (trifluoranetil) feni 1] octahidro-1, 3- dioxo-7-[2- (fenilmetoxi-etil] - 4, 7-epoxi-4H- isoindol-4- propanonitrilo 383 (3aa, 4a,7a, 7aa) -2- 3.64 255 [4-ciano-3- CL (trifluorametil) feni 1] octa idro-1,3- dioxo-7- [2- (fenilmetoxi-etil] - 4, 7-epoxi-4H- isoindol-4- propanonitrilo Ejemplos 384 a 418 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 384 al 418 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde G, R7, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado, son establecidos en la Tabla 8. La configuración absoluta para los siguientes compuestos no se determinó .· Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 243DÍ se designa en la presente como que tiene una configuración "S" y el cpmpuesto 243DÜ como que tiene una configuración "R" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 243Di se designan en la presente por tener una configuración "S" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 243DÜ se designan en la presente por tener una configuración "R" . Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 8 son como siguen: CLE = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.1 % TFA; 4 mL/min. , observando a 220 nm. CLEM* = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 2 minutos conteniendo 0.1% TFA; 4 mL/min., observando a 220 nm. CL = Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 8 se determinó por EM(ES) por la fórmula m/z.
Tabla 8 Ej. G R' Nombre del Comp. Tiempo de Procedim No retención iento Min. /Masa del Ej. molecular 397 [3aS-(3aa, 4P,7P,7aa)]- 3.39 CL 243Di, 4- [Octahidro-5- 537.13 244i hidroxi-4-metil-l, 3- [M+H] + dioxo-7-[2-[ (5,6,7,8- G?G tetrahidro-5-oxo-l- CN ¥ naftalenil) oxi] etil] - o 4 , 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il]-l- naftalencarbonitrilo. 398 [3aR-(3aot,4P,7P,7aa)]- 3.29 CL 243DÜ, 4-[Octahidro-5- 537.13 244ii hidroxi-4-metil-l, 3- [M+H] + dioxo-7-[2-[ (5,6,7,8- tetrahidro-5-oxo-l- CN 0 naftalenil) oxi] etil] - 4, 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il]-l- naftalencarbonitrilo.
R7 Nombre del Comp. Tiempo de Procedim | retención iento Min. /Masa del Ej. molecular 399 [3aS-(3aa, 4p,7p,7aa)]- 3.28 CL 243DÍ, 4- [7- [2- (4- 487.11 244i Fluorofenoxi) etil] octa [M+H] + hidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo. 400 [3aR-(3aa,4p,7p,7aa) ]- 3.27 CL 243DÜ, 4-[7-[2-(4- 487.11 244ii Fluorofenoxi) etil] octa [M+H] + hidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo .
R7 Nombre del Comp. Tiempo de Procedim | retención iento Min. /Masa del Ej. molecular 403 [3aS-(3aa, 4p,7p,7aa) ]- 3.28 CL 243DÍ, 4- [7- [2- (3, 5- 529.19 244i Dimetoxifenoxi) etil] oc [ +H] + tahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo. 404 [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] - 3.26 CL 243DÜ, 4- [7- [2- (3, 5- 529.12 244ii Dimetoxifenoxi) eti1] oc [M+H] + tahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo .
Ej. G R7 Nombre del Comp. Tiempo de Procedim No retención iento Min. /Masa del Ej. molecular 405 [3aR-(3aa, 4ß,7ß,73a) ]- 3.68 CL 243DÜ, 4-[7-[2-(4-Cloro-3- 517.33 244ii metilfenoxi) etil] octah [M+H] + idro-5-hidroxi-4- CN metil-1, 3-dioxo-4, 7- a epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo. 06 [3aR-(3aa, 4ß,7ß,73a) ]- 3.23 CL 243DÜ, 4-[7-[2-(4-Ciano-2,3- 530.13 244ii difluorofenoxi) etil] oc [M+H] + tahidro-5-hidroxi-4- CN metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo .
Ej. G R' Nombre del Comp. Tiempo de Procedim No retención iento Min. /Masa del Ej. molecular 411 [3aS-(3aa, 4ß, 73,7aa) ]- 2.52 CL 243DÍ, 4-[7-[2-[(7-Cloro-4- 554.13 244i quinolinil) oxi] etil] oc [M+H] + tahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- CN CJ N epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo, trifluoroacetato (1:1) 12 [3aR-(3aot,4p,7p,7aa)]- 2.53 CL 2 3DÜ, 4-[7-[2-[ (7-Cloro-4- 554.27 244ii quinolinil) oxi] etil] oc [M+H] + tahidro-5-hidroxi-4- CN metil-1, 3-dioxo-4,7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo, trifluoroacetato (1:1) Ej. G R1 Nombre del Cortp. Tiempo de Procedim No retención iento in. /Masa del Ej. molecular 421 [3aR- 3.02 CL 243DÜ, (33a,4ß,5ß, 7ß, aa) ] -4- 244Ü [7-[2-[ (6-Cloro-2- metil-4- CN pirimidinil) oxi] etil] o ctahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4 , 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo Ejemplo 422 (3aa,4p, 7ß,7?a) -2- (7-bromo-2 , 1 , 3-benzoxadiazol-4-il)hexahidro-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-l , 3 (2H) - diona(422C) 4-Bromo-7-nitrobenzofurazan (422A) A una solución de 2 , 6-dibromoanilina (1.0 g, 4.0 mmol) en CHC13, (8 mL) se agregó una suspensión de mCPBA (70% por HPCL, 1.4 g, 8.0 mmol) en CHC13; (8 mL) y la mezcla resultante se agitó por 24 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con CHC13, y se lavó sucesivamente con una solución de 2% a2S203, solución de 5% Na2C03 y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida para dejar un sólido que se suspendió en DEMO (15 mL) . A esta suspensión se le agregó una solución de NaN3 (272 mg, 4.19 mmol) en DEMO (15 mL) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente hasta que la mayoría del nitrógeno había evolucionado y después se calentó rápidamente hasta 120°C por 3 min. La mezcla de reacción se enfrió y se vació en hielo triturado (100 g) . Después de reposar por 1 h los precipitados se filtraron, se secaron in vacuo y se volvieron a disolver en H2S04 concentrado (5 mL) . A esta solución se le agregó una solución de aN03 (400 mg, 4.7 -mmol) en 50% H2S04 (1.6 mL) y la temperatura se mantuvo a 60 °C. Después de que la adición se terminó, la mezcla se calentó a a 85°C por 30 min, se enfrió a temperatura ambiente y se vació sobre hielo triturado (40 g) . Se agregó EtOAc, se separaron las capas y se extrajo la capa acuosa con EtOAc . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 y se concentraron bajo presión reducida para dejar un sólido que se purificó por cromatografía instantánea (gel de sílice, EtOAc (20%) en hexanos) resultando el compuesto 422A (785 mg, 81%) como un sólido café claro.
B. 4-Bromo-7-aminobenzofurazan (422B) Una solución del compuesto 422A (563 mg, 2.31 mmol) en AcOH (5 mL) , se calentó a 70°C y se agregó polvo de Fe0 (258 mg, 4.62 mmol) en una porción. La mezcla de reacción oscura resultante se agitó por 15 min. , se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. Se recuperó el residuo en EtOAc y la solución resultante se lavó con solución saturada de Na2C03. La capa orgánica se secó sobre Na2S04, se concentró in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea en gel de sílice eluyendo con 10-60% EtOAc en hexanos para dar 470 mg (95%) del compuesto 422B como un sólido rojo.
C. (3aa,4p,7p,7aa) -2- (7-Bromo-2 , 1, 3 -benzoxadiazol-4 -il) hexa idro-4 , 7-dimetil-4,7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (422C) Se colocó una mezcla del compuesto 422B (43 mg, 0.20 ramol) , compuesto 20A (45 mg, 0.23 mmol) , MgS0 (60 mg, 0.50 mmol) , Et3N (139 µ?,, 1.0 mmol) y 1 , 2 -dimetoxietano (300 µ?,) , en un tubo sellado y se calentó a 135°C por 14 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se filtró la mezcla a través de Celite eluyendo con MeOH, para producir un sólido oscuro que se purificó por cromatografía instantánea en gel de sílice eluyendo con 5-40% EtOAc en hexanos para dar 42 mg (54%) del compuesto 422C como un sólido amarillo. CLAR: 99% a 2.96 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS columna 4.6 x 50 mm Ballistic, metanol acuoso 10-90% durante 4 minutos que contenían 0.2% H3P0 , 4 mL/min. , monitoreando a 220 nm) . 1H RM (acetona-ds, 400 MHz) : d = 8.00 (d, J = 7.5 Hz, 1H) , 7.45 (d, J = 7.5 Hz, 1H) , 3.31 (s, 2H) , 1.98-1.93 (m, 2H) , 1.74-1.69 (m, 2H) , 1.57 (s, 6H) .
Ejemplo 423 (3 a,4 , ,7?a)-7- [Octahidro-4,7-dimeti1-1,3-dioxo-4,7-epoxi- 2H-isoindol-2 -il] -2,1,3 -benzoxadiazol-4 -carbonitrilo (423) A una solución de compuesto 422C (42 mg, 0.11 mmol) en DMA (1 mL) se agregó CuCN (20 mg, 0.22 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 150°C por 5 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc y solución acuosa de NaCN (5 g/50 mL) . Las capas se separaron y se extrajo la capa acuosa una vez con EtOAc . Se secaron las fases orgánicas combinadas sobre Na2S04, se concentraron in vacuo y se purificaron por cromatografía instantánea en gel de sílice eluyendo con 20-70% EtQAc en hexanos para dar 13 mg (35%) del compuesto 423 como un aceite amarillo. CLAR: 99% a 2.66 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS columna 4.6 x 50 mm Ballistic, metanol acuoso 10-90% durante 4 minutos conteniendo 0.2% H3P04, 4 mL/min. , monitoreado a 220 nm) . EM (ES) : m/z 396.9 [M-H+OAc]".
Ejemplo 424 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -7-Octahidro-4 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 2H-isoindol-2 -il] -2,1, 3-benzotiadiazol-4-carbonitrilo (424B) A. 4-Ciano-7-amino-benzotiadiazol (424A) Una solución de 2 -ciano-5-nitrofenilendiamina (78 mg, 0.44 mmol , preparada como se describe en WO 0076501) en SOCl2 (2 mL) , se calentó a reflujo por 3 h. La mezcla resultante se dejó enfriar a temperatura ambiente y se vació después en hielo/agua. Se agregó CH2CL2, se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo dos veces con CH2C12. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se concentraron in vacuo y se purificaron por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 50% EtOAc en hexanos para dar 4-ciano-7-nitrobenzotiadiazol . Este material se disolvió en AcOH (2 mL) conteniendo EtOAc (1 mL) y H20 (0.2 mL) y calentado a 70°C. Se agregó a esta temperatura polvo de Fe0 (78 mg, 1.41 mmol) en una porción sólida y la mezcla oscura se agitó por 20 min. y después se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite eluyendo con EtOAc, se lavó con una solución sat . de Na2C03, se secó sobre MgS04 y se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20-70% EtOAc en hexanos para dar 47 mg (67%) del compuesto 424A como un sólido café. ?. (3 a,4ß,7ß-, 7aa) -7- [Octahidro-4,7-dimetil-l,3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2,1,3 -benzotiadiazol-4-carbonitrilo (424B) Una mezcla del compuesto 424A (35 mg, 0.20 mmol), compuesto 20A (45 mg, 0.23 mmol), MgS04 (60 mg, 0.50 mmol), Et3N (139 µ?,, 1.0 mmol) y DME (200 µ?^ , se colocó en un tubo sellado y calentó a 135°C por 14 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, se filtró la mezcla a través de Celite eluyendo con MeOH para resultar un sólido oscuro que se purificó por una combinación de cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10-50% EtOAc en hexanos, CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm eluyendo con metanol acuoso 27-100% sobre 10 min. que contenía 0.1% TFA, 20 mL/min.) para dar 36 mg (51%) del compuesto 424B como un sólido amarillo. CLAR: 98% a 2.45 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS columna 4.6 x 50 mm Balístico, metanol acuoso 10-90% durante 4 minutos que contenían 0.2% H3P04, 4 mL/min., monitoreando a 220 nm) . EM (DCI) : m/z 355.0 [M+H] +.
Ejemplo 425 (3aa, 4ß, 7p,7aa) -N- [2- [2- (4-Ciano- 1-naftalenil) octahidro-7-metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4-il] etil] -4-fluoro-N- metilbenzamida (425B) A. 4-Fluoro-N-metil-N- [2- (5-metil-furan-2-il) -etil] -benzamida (425A) Se agregó en porciones NaH (dispersión al 60% en aceite, 65 mg, 1.63 mmol) a una solución de 4-fluoro-N- [2- (5-metil-2-furanil) etil] benzamida (269 mg, 1.09 mmol, 237A) en THF (5 mL) . Después de que cesó la evolución de gas, se agregó gota a gota yodometano (0.14 mL, 2.18 mmol) . Una vez que el análisis CLAR mostró que la reacción estaba completa al 50%, se concentró la mezcla bajo presión reducida y se volvió a someter a las condiciones anteriores. Después de que se consumió todo el material de partida, se agregó H20 y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2X5 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea en gel de sílice eluyendo con 20% acetona/CHCl3 dio 238 mg (84%) del compuesto 425A. CLAR: 98% a 2.94 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10^90% durante 4 minutos conteniendo ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min. , monitoreando a 220 nm) . EM (ES): m/z [M+H] = 262.38.
B . ( 3 aa, 4p,7P, 7aoc) -N- [2 - [2 - ( -Ciano- 1-naftalenil) octahidro- 7 -metil- 1 , 3-dioxo- 4 , 7-epoxi- 4H-isoindol- 4-il] etil] - 4-fluoro-N-metilbenzamida ( 425B) Una solución del compuesto 425A (183 mg, 0.75 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) - 1 -naftalencarbonitrilo (174 mg, 0.75 mmol) en benceno (1 mL) se calentó a 60°C por 15 hr . Se concentró la mezcla de reacción bajo presión reducida para dar 357 mg de intermediario crudo. El intermediario crudo (156 mg) se disolvió en EtOAc (6 mL) y 10% Pd/C (16 mg) se agregó y la mezcla se agitó bajo un globo de hidrógeno durante la noche. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite y se concentró bajo presión reducida. La purificación por CLAR de fase inversa preparativa (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, metanol acuoso 20-100% durante 15 minutos que contenía 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) dio 160.3 mg (72%) del compuesto 425B como un sólido blanco apagado. CLAR: 99% a 3.23 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante, 4 minutos conteniendo ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z [M+H] = 512.19.
Ejemplo 426 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7 -dimetil -2- [4- (2 , 2 , 2 - trifluoro- 1-hidroxietil) fenil] -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona El compuesto 426A se preparó según el procedimiento descrito en Stewart, R. et al. Can. J. Chem. 58, 2491-2496 (1980). Se agregó NaBH4 (47 mg, 1.235 mmol) a una solución de p-aminotrifluoroacetofenona (155.7 mg, 0.823 mmol, sintetizada como se describe por Klabunde, K. J. et al. J. Org. Chem. 35, 1711-1712 (1970)) en isopropanol (3 mL) a temperatura ambiente. Después de 30 min. , se apagó la reacción con solución amortiguadora de fosfato (pH 7.2), se diluyó con H20 y se extrajo con EtOAc (2 X 10 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y se concentraron bajo presión reducida para dar 154 mg (98%) del. compuesto 426A como un sólido café claro. El material se utilizó directamente en la siguiente etapa sin purificación. CLAR: 99% a 0.42 min. (tiempo de retención) (columna- Y C S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos que contenían ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z [M+H] = 192.13.
B. (3aa,4 ,7 ,7aa) -Hexahidro-4 , 7 -dimetil-2 - [4- (2,2,2-trifluoro-l-hidroxietil) fenil] -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (426B) Una mezcla del compuesto 426A (75.3 mg, 0.394), compuesto 20A (51.5 mg, 0.2S2 mmol) , trietilamina (0.15 mL) y MgS04 (50 mg) en tolueno (1 mL) se calentó en tubo sellado hasta 135°C por 15 hr. La mezcla se filtró y se concentró bajo presión reducida. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, metanol acuoso al 20-100% sobre 15 minutos que contenían 0.1% TFA, 20 mL/min., se observó a 220 nm) dando 63.1 mg (65%) del compuesto 426B como un sólido blanco. CLAR: 98% a 2.49 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex-prime S5-C18 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z [M+H] = 370.16.
Ejemplo 427 (3aa,4p,73,7aa) -4 - [4- [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -1, 3 , 3a, 4, 7 , 7a-hexahic.ro-7 - metil-1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo y (3act, 4a, 7a, 7aa) -4 - [4- [2 - [ [1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -1,3, 3a, 4, 7, 7a-hexahidro-7- metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (427i y 427ii) El compuesto 204A (2.00 g, 8.50 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (1.50 g, 5.60 mmol) se mezclaron en benceno (5.0 mL) y se calentaron a 60°C por 14 h, después se enfriaron a 25°C. Se separó el solvente a 40°C bajo vacío por 1 h para dar el material crudo que se purificó por cromatografía instantánea en Si02 eluyendo con 0.5% EtOAc/CH2Cl2 para dar 2.0 g del compuesto 427i y 1.3 g del compuesto 427ii, ambos como sólidos café claro. Compuesto 427i: CLAR : 95% a 4.200 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos que contenía ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 507.1 [M+H] + . Compuesto 427ii: CLAR: 95% a 4.20 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos que contenía ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 507.1 [M+H]+.
Ejemplo 428 [3aR- (3aa/43/53,73,7aa) 3 -4 - [7 - [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil)benzonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [7- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5- hidroxi-4 -metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il] -2 - ( trifluorometil) benzonitrilo (428i y 428ii) El compuesto 427i (1.40 g, 2.77 mmol) y RhCl(PPh3)3 (0.128 g, 0.14 mmol) se mezclaron en un matraz. El matraz se evacuó después y se llenó con argón tres veces, seguido por la adición con una jeringa de THF (3.0 mL) . Una vez que se disolvieron todos los materiales en partículas, se agregó gota a gota catecolborano (0.59 mL, 5.54 mmol) . Se agitó la mezcla de reacción a 25°C bajo argón por 30 min., después se enfrió a 0°C. Se agregó solución amortiguadora de fosfato (pH 7, 20 mL) , seguida por EtOH (10 mL) , 30% H202/H20 (2 mL) . La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 3 h, se extrajo después con diclorometano (3 x 25 mL) . Se lavaron las capas orgánicas combinadas con NaOH 1 N (25 mL) , 10% Na2S03 (25 mL) y salmuera (25 mL) . Se concentró después el material crudo in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea sobren Si02 eluyendo con 2% EtOAc/CH2Cl2 hasta 10% EtOAc/CH2Cl2 para dar 0.63 g de una mezcla racémica de los compuestos 428i y 428ii como un sólido amarillo claro. CLAR: 99% a 3.867 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos que contenía ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 525.1 [M+H] La mezcla racémica de los compuestos 428i y 428ii se separó por CLAR quiral preparativa de fase normal usando una columna Chiracel OD (5 cm x 50 cm) , eluyendo con 13% de solvente B (EtOH) en solvente A (hexanos) , relación de flujo: 50 mL/min. El compuesto 428i se eluyó por 34 min. a 38 min. y el compuesto 428ii se eluyó desde 44 min. a 49 min. Se determinó el exceso enantiomérico por CLAR quiral. El compuesto 428i: >99% ee (12.576 min. (tiempo de retención) (columna ChiraCLel OJ de 4.6 x 250 mm eluyendo con 85% de heptano isocrático/15% de MeOH/etanol (1:1), 1 mL/min., observando a 220 nm, 40°C) . Compuesto 428ii: 99% ee (18.133 min. (tiempo de retención) (columna ChiraCLel OJ 4.6 x 250 mm eluyendo con 85% de heptano /15% MeOH/etanol (1:1) isocrático, 1 mL/min. , observando a 220 nm, 40°C) . No se establecieron las configuraciones absolutas para los compuestos 428i y 428ii. Por simplicidad en la nomenclatura, se designa el compuesto 428i como que tiene una configuración "R" y el compuesto 428ii como que tiene una configuración "S". Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 428i se designan en la presente como que tienen una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 428ii se designan en la presente como que tiene una configuración "S" .
Ejemplo 429 [3a - (3aa,43, 53,7(3,7aa) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2-hidroxietil) -4-metil-l, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2- ( trifluorometil) benzonitrilo y [3aS- (3aa, 4(3, 5ß, 7ß, 7aot) ] -4-[Octahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (429i y 429ii) El compuesto 428i (180 mg, 0.34 mmol) se disolvió en 2% HCl/EtOH (5.0 mL) . Después de 30 min., se agregó NaHC03 saturado y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (20 mL x 3) , se lavó con salmuera y se secó sobre Na2S0 para dar 135 mg del compuesto 429i como un sólido blanco. CLA : 99% a 2.257 min. (tiempo de retención) (columna Y C S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos que contenía ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 411.1 [M+H]+. El procedimiento anterior se repitió con el compuesto 428ii para producir el compuesto deseado de diol 429ii en un rendimiento similar.
Ejemplo 430 [3aR- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ] -4- [7- [2- [5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi - 2H- isoindol -2 - il] - 2 - (trifluorometil) benzonitrilo (430) CN Se mezcló trifenilfosfina (0.026 g, 0.098 mmol) y DBAD (0.023 g, 0.098 mmol) en THF (0.5 mL) . Después de permitir que reaccionara la mezcla previa por 15 min., se agregó 2- hidroxi-6-cloropiridina (0.016 g, 0.100 mmol), se dejó agitar la mezcla por 10 min. y se agregó el compuesto 429i (0.020 g, 0.049 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 25°C por 2 h, y después el material crudo se purificó por CCD preparativa, eluyendo con 10% acetona/CHC3 , para dar 0.014 g del compuesto 430 como un sólido café claro. CLA : 100% a 3.370 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos que contenía 0.1% de TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 522.08 [M+H] +.
Ejemplo 431 [3aS- (3aa,43, 53,73,7aa) ] -4- [7- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (431) Se mezclaron trifenilfosfina (0.026 g, 0.098 mmol) y DBAD (0.023 g, 0.098 mmol) en THF (0.5 mL) . Después de permitir que la mezcla previa reaccionara por 15 min., se agregaron 2 -hidroxi - 6 -cloropiridina (0.016 g, 0.100 mmol), la mezcla se dejó agitar por 10 min. y el compuesto 429ii (0.020 g, 0.049 mmol) se agregó. Se agitó la mezcla de reacción a 25°C por 2 h y después se purificó el material crudo por CCD preparativa, eluyendo con 10% acetona/CHCl3 , para dar 0.015 g del compuesto 431 como un sólido café claro. CLAR: 100% a 3.370 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo TFA al 0.1%, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 522.08 [M+H]+.
Ejemplo 432 (3a ,43,7p,7aa) -2- (4-Ciano-l-naftalenil) octahidro-N- (2- hidroxifenil) -7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-4H-isoindol-4- butanamida (432) Se disolvió el compuesto 262 (0.100 g, 0.239 mmol) en DMF (anhidro, 1.5 mL) , se agregó BOP (0.211 g, 0.478 mmol) seguido por 2-aminofenol (0.052 g, 0.478 mmol) y N-metil morfolina (0.052 mL, 0.478 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C bajo argón por 3 h, después se purificó el material crudo por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, metanol acuoso 20-100% durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) para dar 0.060 g del compuesto 432 como un sólido café claro. CLAR: 100% a 3.037 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 510.34 [M+H]+.
Ejemplo 433 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [4- [3- (2-Benzoxazolil) ropil] octahidro-7- metil-1, 3-dio3-o-4f 7-epoxi-2H-iaoindol-2-ilJ -1- naftalencarbonitrilo (433) Se mezclaron trifenilfosfina .031 g, 0.118 mmol) y DBAD (0.027 g, 0.118 mmol) en THF (0.5 mL) . Después de permitir que la mezcla previa reaccionara por 15 min., se agregó el compuesto 432 (0.030 g, 0.059 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a 25°C por 2 h y después se purificó el material crudo por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, metanol acuoso al 20-100% durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) para dar 0.018 g del compuesto 433 como un sólido café claro. CLAR: 100% a 3.357 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . E (ES): m/z 492.37 [M+H]+.
Ejemplo 434 (3aa 43,53,7P,7aa) -4- C4-Etiloctahidro-5-hidroxi-7- (2- hidroxietil) -1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1- naftalencarbonitrilo (434C) A. Tert-Butil- [2- (5-etil-furan-2-il) -etoxi] -dimetil-silano (434A) Se agregaron imidazol (255 mg, 3.75 mmol) y TBSCl (414 mg, 2.75 mmol) a una solución de 245A (350 mg, 2.5 mmol) en DMF (4 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 15 hr y después se agregaron 100 mg (0.66 mmol) de TBSCl adicional para llevar la reacción hasta su terminación. Después de agitar por una hora adicional, se diluyó la mezcla de reacción con éter de dietilo (100 mL) y se lavó con agua (20 mL) , HC1 1N (20 mL) , agua (20 mL) y salmuera (20 mL) . La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo presión reducida para dar 509 mg del compuesto 434A (80.3%) como un aceite amarillo.
B. (3aa,4p,7 ,7aa) -4- [4- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) -dimetilsilil] oxi] etil] -4-etil-l, 3 , 3a, 4, 7 , 7a-hexahidro-l, 3-dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (434B) Una solución del compuesto 434A (509 mg, 2.00 mmol ) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-dioxo-lH-l-il) -1-naftalencarbonitrilo (498 mg, 2.00 mmol) en benceno (2 mL) se calentó a 60°C por 18 h. Se concentró la mezcla de reacción bajo presión reducida para dar 992 mg (99%) del compuesto crudo 434B, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional .
C. (3aa,4 #5p,7 ,7aa) -4- [7- [2- [[ (1, 1-Dimetiletil) -dimetilsilil] oxi] etil] -4-etiloctahidro-5- idroxi-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (434C) Se evacuó una mezcla del compuesto 434B (992 mg, 1.98 mmol) y RhCl2(PPh3)3 (183 mg, 0.198 mmol) y se llenó con argón (3X) . Se agregó THF (20 mL) y una vez que todos los materiales particulados se habían disuelto, se agregó lentamente gota a gota el catecolborano (0.42 mL, 3.96 mmol). Cuando terminó la formación de producto, como se determina por CLAR, se enfrió la mezcla de reacción a 0°C y se apagó con solución amortiguadora de fosfato (34 mL, pH 7.2), seguida por la adición de EtOH (19 mL) y 30% H202 (2.9 mL) . Después de 2 h, se agregaron una solución adicional amortiguadora de fosfato (6.8 mL, pH 7.2), EtOH (3.8 mL) y H202 (0.6 mL) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 3 h. Una vez que se consumió el intermediario de boronato, se extrajo la mezcla con CH2C12 (300 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaOH 1N, NaHS03 al 10% ac . y salmuera y después se secaron sobre Na2S04. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% MeOH/C¾Cl2 dio 75 mg (9.3%) del compuesto 434C como un sólido gris. Condiciones CLAR: 97% a 2.43 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex-prime S5-C18 de 4.6 x 50 mm, metanol acuoso al 10%-90% sobre un gradiente de 4 minutos con 0.2% HL3P04, detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 407.18 [ +H] + .
D. (3aa,4p,5p,7P,7aa) -4- [4-Etiloctahidro-5-hidroxi-7- (2-hidroxietil) -1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (434D) Se disolvió el compuesto 434C (24 mg, 0.046 mmol) en 2% de HCl/EtOH (0.8 mL) concentrado y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 min. Se agregó NaHC03 frío saturado a la mezcla, hasta que se hizo básica la solución (pH 8) . Se extrajo la reacción con EtOAc (3x2 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2x5 mL) y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 14 mg (75%) del compuesto 434D como un sólido blanco. CLAR: 95% a 2.40 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, metanol acuoso al 10%-90% sobre un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) .
Ejemplo 435 (3?(?,4ß,5ß,7ß,7ßa) -4- [7- [2- (4-Cianofenoxi) etil-4- etiloctahidro-5-hidroxi-lf 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2- il] - 1-naf alencarbonitrilo (435) DBAD (39.6 a una solución de PPh3 (45.1 mg, 0.172 mmol) en THF (0.8 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 4-cianofenol (20.5 mg, 0.172 mmol) y se agitó la mezcla de reacción por 5 min. adicionales. El compuesto 434C (25.0 mg, 0.062 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por CCD preparativa eluída con 10% acetona/CHCl3 dio 18.1 mg (0.036 mmol, 57.6%) del compuesto 435. condiciones CLAR : 96% a 3.15 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, metanol acuoso al 10%-90% sobre un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04/ detectado a 220 nm) . EM (ES) : m/z 508.14 [M+H] + .
Ejemplo 436 (3act, 4ß, 7ß, 7acc) -2- (4 -Ciano-l-naftialenil) octahidro-N- (2- hidroxifenil) - 7 -metil - 1 , 3-dioxo-4, 7-expoxi-4H-isoindol-4- etanamida (436) El compuesto 234B (0.100 g, 0.256 mmol) se disolvió en DMF (anhidro, 1.5 mL) , BOP (0.225 g, 0.51 mmol) se agregó seguido por 2-aminofenol (0.056 g, 0.51 mmol) y N-metil morfolina (0.056 mL, 0.51 mmol). Se agitó la mezcla de reacción a 25°C bajo argón por 3 h, después se purificó el material crudo por CLAR preparativa de fase inversa (Y C S5 ODS 20 X 100 rara, metanol acuoso al 20-100% durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min. , observando a 220 nm) para dar 0.078 g del compuesto 436 como un sólido café claro. CLAR: 100% a 3.037 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 482.34 [M+H]+.
Ejemplo 437 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [4- (2 -Benzoxazolilmetil) octahidro-7-metil- 1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1- naftalencarbonitrilo (437) Se mezclaron trifenilfosfina (0.082 g, 0.312 mmol) y DBAD (0.072 g, 0.312 mmol) en THF (0.5 mL) . Después de permitir que la mezcla previa reaccionara por 15 min., se agregó el compuesto 436 (0.075 g, 0.156 mmol) . Se agitó la mezcla de reacción a 25°C por 2 h y después se purificó el material crudo por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, metanol acuoso al 20-100% durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nra) para dar 0.052 g del compuesto 437 como un sólido café claro. CLAR: 100% a 3.443 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 464.18 [M+H]+.
Ejemplo 438 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7-dimetil -2- [4- [2 , 2 , 2- trifluoro- 1-hidroxi-l- ( trifluorometil) etil] fenil] -4 , 7 -epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona (438) Se calentó una mezcla de 2 - (4 ' -aminofenil) -1 , 1 , 1 , 3 , 3 , 3 -hexafluoro- 2 -propanol (95.7 mg, 0.369), compuesto 20A (48.3 mg, 0.246 mmol), trietilamina (0.15 mL) y MgS04 (50 mg) en tolueno (1 mL) en un tubo sellado a 135 °C durante la noche. La mezcla se filtró y se concentró bajo presión reducida. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 X 100 mm, metanol acuoso al 20-100% durante 15 minutos conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) dio 44.0 mg (41%) del compuesto 438 como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.10 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex-prime S5-C18 de 4.6 x 50 mm eluyendo con metanol acuoso al 10-90% durante 4 minutos conteniendo ácido fosfórico 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z [ +H] = 438.14.
Ejemplos 439 al 454 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 439 a 454 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde G, R7, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado, se establecen en la Tabla 9. La configuración absoluta para los siguientes compuestos no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 243Di se designa en la presente como que tiene una configuración "S" y el compuesto 243DÜ como que tiene una configuración "R" . Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 243DÍ se designan en la presente como que tienen una configuración "S" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 243DÜ se designan en la presente como .que tiene una configuración "R" . Similarmente , el compuesto 428i se designa como que tiene una configuración "S" y el compuesto 428ii como que tiene una configuración "R" . Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 428 i se designan en la presente como que tienen una configuración "S", y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 428ii se designan en la presente como que tienen una configuración "R". Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención del compuesto de la Tabla 9 son como sigue: columna CLEM = Y C S5 ODS, 4.6 X 50 rom eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos que contiene 0.1% TFA 4 mL/min., observando a 220 nm. CLEM* = columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 2 minutos que contiene 0.1% TFA; 4 mL/min., observando a 220 nm. CL = columna YMC S5 ODS de 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos conteniendo ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min., observando a 220 nm. El peso molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 9, se determinaron por EM (ES) por la fórmula m/z.
Tabla 9 Ej. G R7 Nombre del Comp. Tiempo de Procedim No retención iento Min . /Masa del Ej. molecular 449 [3aR- 3.15 CL 243DÜ, X (3aa, 4ß,5ß,7ß,73a)]- 553.23 244ii 4-[Octahidro-5- [M+H] + 1 hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-7-[2-[4- (1,2,3- tiadiazol-5- il) fenoxi]etil]-4,7- N=N epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo 450 [3aR- 3.70 CL 243DÜ, (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7a ) ] - 588.26 244ii 4-[7-[2-[(5,7- [M+H] + Dicloro-8- Cl quinolinil) oxi]etil]o CN ctahidro-5-hidroxi-4- metil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo, trifluoroacetato (1:1) Ejemplos 455 a 457 Los compuestos de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 455 a 457 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde G, R7, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado, se establecen en la Tabla 10. No se determinó la configuración absoluta para los siguientes compuestos. Para simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 238i se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 238ii como que tiene una configuración "S". Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 238i se designan en la presente como que tienen una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 238ii se designan en la presente como que tienen una "S". Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención del compuesto en la Tabla 10 son como sigue: CLEM = columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos que contiene 0.1 % TFA; 4 mL/min, observando a 220 nm. CLEM* = columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm eluyendo con 10-90% eOH/H20 durante 2 minutos conteniendo 0.1 % TFA; 4 mL/min, observando a 220 nm. CL = columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% MeOH/H20 durante 4 minutos que contiene ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min, observando a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 10 se determina por EM(ES) por la fórmula m/z . Tabla 10 Ej. G R7 Nombre del Comp. Tieirpo de Procedim No retención iento Min. /Masa del Ej. molecular 455 (3aa, 4ß, 5ß,7ß,7ßa) -4- 3.53 CL 265, 266 [Octahidro-4-metil-l, 3- 479.35 dioxo-7- (4-OXO-4- [M+H] + fenilbutil) -4, 7-epoxi-2H- CN isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 456 (3aa, 4ß,5ß,7ß,73a)-4- 3.547 CL 248, 249 [Octa idro-4-metil-7- [3- 482.28 [5-(l-metiletil)-2- [M+H] + oxazolil] -2-propil] -1, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo Ejemplo 458 (3aa, 4 , 5 , 7ß , aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3- dioxo- , 7 ,epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo y (3aa, 4ß , 5a, 7ß , 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (221B y 222D) El compuesto 20B se convirtió a los compuestos 221B y 222D (también sintetizados como compuestos 221B y 222D) por biotransformación .
El compuesto 20B se hidroxiló por Amycolatopsis orientalis (ATCC 43491) . Se utilizó un cultivo de 1 mL de un vial congelado, para inocular 100 mL de medio en un matraz Erlenmeyer en porciones de 500 mL, y el matraz se incubó a 28 °C, a 200 rpm por 3 días. Se utilizó una porción de 10 mL de este cultivo para inocular 100 mL de medio en un matraz Erlenmeyer de 500 mL, y el matraz se incubó a 28°C, a 200 rpm por 1 día. Se distribuyeron porciones de 10 mL del cultivo de 1 día en cada uno de los tres matraces de 50 mL. Se agregó el compuesto 20B (3 mg en 0.1 mL de metanol) a cada cultivo y se continuaron las incubaciones por 3 días. El caldo de cultivo en cada matraz se extrajo con 20 mL de acetato de etilo, y los extractos acumulados de acetato de etilo se evaporaron hasta sequedad a 40°C bajo una corriente de nitrógeno. El residuo se disolvió en 1.2 mL de metanol y se analizó por CLAR, CL/EM y CL/RM . La solución contenía 2.5 mg del compuesto restante 20B, 1.6 mg del compuesto 22 IB, y 1.3 mg del compuesto 222D. Los análisis EM y RMN estuvieron de acuerdo con las estructuras antes mostradas. Medio : nutrisoya tostada 0.5%, glucosa al 2%, extracto de levadura 0.5%, K2HP04 al 0.5%, NaCl al 0.5%, ajustado hasta un pH de 7 con HC1 (R. V. Smith y J. P. Rosazza, Arch. Biochem. Biophys., 161, 551-558 (1974) Análisis CLAR Columna.- Fenomenex Luna C18, 150x2 mm, 5µ Fase móvil: solvente A: 95% de acetato de amonio 20 mM pH 5.1, acetonitrilo al 5% solvente B: acetonitrilo al 95%, 5% de acetato de amonio 20 mM pH 5.1. El gradiente lineal va desde el solvente A al 100% hasta el solvente A al 5% en 25 minutos, seguido por equilibrio en el solvente A al 100% por 8 minutos, temperatura: 40 °C Detección: 250 nm Volumen de inyección: 1 ? Tiempos de retención: compuesto 20B, 20.8 min; compuesto 221B, 16.5 min; compuesto 222D, 17.8 min. Condiciones CLAR Las condiciones quirales de CLAR se emplearon para la separación de los enantiómeros y las condiciones no quirales de CLAR se emplearon para la separación de los diastereomeros de los análogos hidroxilados del compuesto 20B (esto es, compuestos 221B y 222D y compuestos 254i y 254ii) Se utilizaron dos métodos bajo condiciones quirales de CLAR, fase inversa (RP) para el análisis quiral de los productos de biotransformación en muestras biológicas y de fase normal (NP) para muestras no biológicas. Condición quiral RP-CLAR Columna: CHIRALPAK AD-R 4.6 x 250 mm, 10 µ Temperatura: 40°C Volumen de inyección: 5 o 20 µ?_ Fase Móvil: A: MeCN B: H20 Isocrático, 30% de A, 18 min. Relación de flujo: lmL/min. Detección UV: 242 nm Condición quiral NP-CLAR Columna: CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm, 10 µ Temperatura: 25°C Volumen de inyección: 5 ó 20 µ?_ Fase Móvil: A: Heptano B: eOH/Etanol (1:1) Isocrático, 80% de A, 20 min. Relación de flujo: 1 mL/min. Detección UV: 242 nm Bajo estas condiciones, los compuestos 254i y 254ii tuvieron tiempo de retención de 8.5 minutos y 9.85 minutos, respectivamente . La CLA.R de fase inversa se empleo para la separación de los compuestos diastereoméricos 221B y 222D: Fase Móvil : Solvente A: Acetato de amonio 20 niM al 95% pH 5.1,5% acetonitrilo Solvente B: Acetonitrilo al 95%, acetato de amonio 20 mM al 5% pH 5.1 Gradiente : El gradiente lineal va desde un solvente A al 100% hasta un solvente A al 5% en 25 minutos, seguido por un equilibrio en el solvente A al 100% por 8 minutos. El tiempo total de la corrida de 36 minutos. Relación de flujo: 0.2 mL/min Columna : Fenomenex Luna 5 mícron C18 150 X 2.0 mm id Detección: detección UV a 242 nm Bajo estas condiciones los compuestos 221B y 222D tuvieron tiempos de retención de 18.983 min y 20.362 min, respectivamente . Ejemplo 459 (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) - 4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo (459) Los compuestos 223A y 331 se convirtieron al compuesto 459 por biotransformación . Hidroxilacion microbiana del compuesto 223A 1. Reacción A un matraz de 500 mL conteniendo 100 mL del medio de transformación se le agregó un vial congelado (aproximadamente 2 mL) de Streptomyces griseus ATCC 10137. El medio de transformación se preparó como sigue: a una cuba de plástico de 2 L se le agregó 20 g de dextrosa, 5.0 g de •extracto de levadura, 5.0 g harina de soya, 5.0 g de cloruro de sodio, 5.0 g de fosfato de potasio (dibásico) y 1 L de agua desíonizada, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 hasta 30 min. El pH de la mezcla se ajustó después hasta 7.0 con HCl 1N o NaOH 1N. La mezcla resultante se dispensó en matraces de 500 mL (100 mL por matraz) . Los matraces se cubrieron con Bio/Wrap y se colocraron en autoclave a 121°C durante 15 min. y se enfriaron hasta temperatura ambiente antes de usarse . El cultivo se incubó a 28°C y a 250 rpm durante 24 horas. Se transfirieron diez mL del cultivo resultante a un matraz de 50 mL, al cual se le agregó 1 mg del compuesto 223A en 0.2 mL de etanol . El matraz se incubó a 28°C y 250 rpm durante 24 horas, y el cultivo de reacción se extrajo con EtOAc (10 mL) . El extracto de EtOAc se secó bajo N2 y el residuo se disolvió en 1 mL de MeOH (extracto de reacción) . 2. Análisis del Producto CLAR : Se inyectaron 10 µL del extracto de la reacción en la Columna CLAR (Columna YMC ODS-AQ C-18, 160 x 6.0 mm d.i.). La columna se eluyó con 1 mM HCl en agua/CH3CN a una relación de flujo de 1.2 mL/min. : 30 hasta 60% CH3CN durante 8 min., 60 hasta 85% CH3CN durante 0.5 min., 85% CH3CN por 1 min., 85 hasta 30% CH3CN durante 0.5 min. Los eluyentes se observaron a 300 mn. Se observaron dos picos principales con un área de alrededor de 1 a 1 , que tenían los mismos espectros UV que aquellos de los compuestos 459 y 331, y tuvieron tiempos de retención de 4.55 min. y 7.23 min., respectivamente, acoplando el tiempo de retención de las muestras auténticas del compuesto 459 (4.53 min.) y del compuesto 331 (7.2 min.).
CL/EM El extracto de la reacción: dos picos principales UV. Pico 1, Tr 4.68 min.: 391 [M+H]+, 343, 319, 303, 289 Pico 2, Tr 5.35 min.: 375 [M+H]+, 345 Muestras Auténticas Compuesto 459, Tr 4.82 min.: 391 [M+H]+, 343, 319, 289 Compuesto 331, Tr 5.48 min.: 375 [M+H]+, 345 Hidroxilación microbiana del Compuesto 331 Se agregó a un matraz de 500 mL conteniendo 100 mL del medio de transformación, un vial congelado (aproximadamente 2 mL) de Strepto/nyces griseus ATCC 10137. El medio de transformación se preparó como sigue: a un vaso de precipitados de plástico de 2 L, se agregaron 20 g de dextrosa, 5.0 g de extracto de levadura, 5.0 g de harina de soya, 5.0 g de cloruro de sodio, 5.0 g de fosfato de potasio (dibásico) y un L de agua desionizada, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 3 hasta 30 min. El pH de la mezcla se ajustó después hasta 7.0 con HCl 1N o NaOH 1N. La mezcla resultante se dosificó en matraces de 500 mL (100 mL por matraz) . Se cubrieron los matraces con Bio/Wrap y se procesaron en autoclave a 121°C por 15 min. y se enfriaron hasta temperatura ambiente antes de su uso. El cultivo se incubó a 28°C y 250 rpm por 3 días. Se agregó un mL del cultivo resultante a un matraz de 500 mL conteniendo 100 mL del medio de transformación y el matraz se incubó a 28°C y 250 rpm por 24 horas. Se transfirieron diez mL del cultivo resultante a un matraz de 50 mL, al cual se agregó 1 mg del compuesto 331 en 0.2 mL de etanol . El matraz i se incubó a 28°C y 250 rpm por 23 horas. El análisis CLAR mostró que la relación de área pico del compuesto 459 al C18 4.6 x 50 mra eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z [M+H] =505.19.
Ejemplo 461 [3aR- (3aa,4P, 7P,7aa) ] -4- [4-Etiloctahidro-7- (2 -hidroxietil) - 1, 3 -dioxo-4# 7-epoxi-2H-i3QÍndol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) 3 -4- [4-Etiloctahidro-7- (2 -hidroxietil) - 1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (461i y 461ii) La mezcla racémica de compuestos 245C se separó por CLAR quiral preparativa en fase normal usando una columna Chiracel AD (5 cm x 50 cm) , eluyendo con 20% del solvente B (50% MeOH/EtOH) en solvente A (Heptano) , relación de flujo-, 50 mL/min. El compuesto 461i se eluyó desde 80 min. hasta 100 min. y el compuesto 461ii se eluyó desde 125 min. hasta 150 min. La conformación absoluta de los compuestos 461i y 461ii no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 461i se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 461ii como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 4Sli se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 461ii se designan en la presente por tener una configuración "S" .
Ejemplo 462 [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -4- [4- [2- (4 -Cianofenoxi ) etil] -7- etiloctahidro-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo (462) Se agregó DBAD (29.5 mg, 0.128 mmol) a una solución de PPh3 (33.6 mg, 0.128 mmol) en THF (0.5 mL) . Después de agitar por 10 min. , se agregó 4-cianofenol (15.2 mg, 0.128 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min., adicionales. Se agregó el compuesto 461i (18.3 mg, 0.047 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 40% EtOAc/hexano dio 16.9 mg (0.034 mmol, 73.2%) de compuesto 462. Condiciones CLAR: 98% a 3.64 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3PO4, detectando a 220 ran) . EM (ES): m/z 492.23 [M+H] + .
Ejemplo 463 [3aS- (33a,4ß,7ß,7ßa) ] -4- [4- [2- (4 -Cianofenoxi ) etil] -7- etiloctahidro-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- Se agregó D una solución de PPh3 (33.6 mg, 0.128 mmol) en THF (0.5 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 4-cianofenol (15.2 mg, 0.128 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. Se agregó el compuesto 461ii (18.3 mg, 0.047 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. La reacción se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 40% EtOAc/hexano dio 18.1 mg (0.037 mmol, 78.4%) de compuesto 463. Condiciones CLAR: 97% a 3.63 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 4 minutos con 0.2% H3P04, detectando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 492.17 [M+H] + .
Ejemplo 464 (laa, 2ß, 2aa, 5a , 6ß, 6aa) -5- [2- [2- [ ( 5 -Cloro- 2- piridinil) oxi] etil] octahidro-6-metil-3 , 5-dioxo-2 , 6-epoxi-4H- oxireno [f] isoindol-4-il] -8-quinolinocarbonibrilo (464H) A. 8-Bromo-5-nitro-quinolina (464A) La 8 -bromoquinolina (25.00 g, 120.2 mmol) se disolvió en ácido sulfúrico (82.5 mL) a temperatura ambiente y se enfrió después hasta 0°C. Se agregó después lentamente HN03 (fumante, 32.5 mL) durante un periodo de 10 minutos. La reacción se calentó después a temperatura ambiente y después hasta 65°C. Después de 48 h a 65°C, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se vació sobre 500 g de hielo. Esta solución se extrajo con cloruro de metileno (5 x 200 mL) . Las capas orgánicas se lavaron una vez con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración dio el compuesto crudo 464A como un sólido amarillo ligero (28.6 g, 94%). CLAR: 98% a 2.717 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
B. 5-Nitro-quinolino- 8 -carbonitrilo (464B) El compuesto 464A (15.0 g, 59.3 mmol) se disolvió en DMF (120 mL) y se agregó cianuro de zinc (4.20 g, 35.9 mmol) . Se agregaron después bis (difenilfosfino) ferroceno (3.00 g, 5.40 mmol) y tris (bencilidinacetona) dipaladio (3.00 g, 3.30 mmol) y la reacción se calentó a 100°C por 1.5 h. La reacción se enfrió hasta 22 °C y después se vació en hidróxido de amonio concentrado (900 mL) resultando en un precipitado color naranja que se filtró y enjuagó en agua fría (1 L) . El precipitado resultante se disolvió en cloruro de metileno, se lavó con salmuera (1 x 300 mL) y después se secó sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio el material crudo como un sólido color naranja que fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con cloruro de metileno para dar 6.01 g (51%) de compuesto 464B como un sólido amarillo. CLAR: 99% a 1.900 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS . 4.6 x 50 tran, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
C. 5-Amino-quinolino-8-carbonitrilo (464C) El compuesto 464B (6.00 g, 30.1 mmol) se disolvió en THF (150 mL) a reflujo con agitación mecánica. Se agregó después EtOH (150 mL) seguido por cloruro de amonio acuoso (2.4 g/225 mL agua) . La mezcla se calentó a 70 °C y después se agregó polvo de hierro (malla 325, 6.75 g, 120 mmol) con agitación mecánica vigorosa. Después de 1 h, la reacción se enfrió hasta 22 °C y se filtró a través de Celite enjuagando con cloruro de metileno. El filtrado se concentró después hasta ~250 mL y se ajustó el pH hasta 10 por la adición de 1N NaOH. La solución se extrajo después con acetato de etilo (5 x 150 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera (250 mL) y después se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro. La concentración in vacuo dio 5.09 g (100%) de compuesto 464C como un sólido amarillo. CLAR: 99% a 1.143 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 170.16 [ +H] +.
D. 5- (2 , 5-Dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il) -quinolino-carbonitrilo (464D) El compuesto 464C (7.00 g, 41.4 mmol) y anhídrido maléico (6.00 g, 62.1 mmol) se combinaron en un tubo sellado y se agregó THF (10 mL) . La mezcla de reacción se calentó a 115 °C por 15 min. después se enfrió hasta temperatura ambiente, resultando en la precipitación de la amida ácida intermediaria. El sólido se filtró y se enjuagó con THF frío para dar 11.0 g del ácido como un sólido amarillo. A la amida ácida anterior, se agregó Ac20 (25 mL) en un tubo sellado y la mezcla se calentó a 100°C por 15 min., después se enfrió hasta temperatura ambiente. El sólido resultante se filtró y se enjuagó con éter de dietilo frío para dar 8.30 g (80%) de compuesto 464D como un sólido amarillo. CLAR : 97% a 1.783 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
E. (3aa,4P,7p,7aa) - 5- [ -[2 -[[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -1, 3 , 3a, 4 , 7, 7a-hexahidro-7-metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolinocarbonitrilo (464E) El compuesto 464D (6.00 g, 24.1 mmol) se disolvió en una mezcla de benceno (80 mL) y acetona (20 mL) seguido por la adición del compuesto 204A (14.46 g, 60.15 mmol) . La mezcla se calentó a 80°C por 14 h y después se enfrió hasta 22 °C. La concentración in vacuo a 40°C seguida por la adición de acetona (40 mL) y concentración nuevamente a 40°C. El aceite amarillo resultante fue purificado por cromatografía instantánea en columna sobre gel de sílice eluyendo con 0-10% acetona en cloroformo para dar 9.98 g (85%) de compuesto 464E como un aceite amarillo. El compuesto 464E demostró ser un isómero sencillo por espectroscopia RMN. CLAR: 97% a 3.853 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. ( observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 490.35 [ +H] +.
F. (1&a,2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -5- [2- [2- [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro- 6 -metil- 3 , 5-dioxo-2, 6-epoxi-4H-oxireno [f] isoindol-4 -il] -8-quinolincarbonitrilo (464F) A una solución de compuesto 464E (0.050 g, 0.10 mmol) en diclorometano (2 mL) , se agregó mCPBA (mezcla al 60%, 0.063 g, 0.22 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 16 h y después se agregaron adicionalmente diclorometano (20 mL) , NaHC03 saturado (10 mL) y 10% de Na2S03 (10 mL) . La mezcla se agitó vigorosamente por 40 min., la capa orgánica se separó después, se lavó una vez con salmuera, y se secó sobre Na2SO,j. La concentración in vacuo dio 48 mg (96%) de compuesto 464F como un sólido amarillo claro. CLAR: 98% a 3.783 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 506.25 [M+H]+.
G. (1ßa,2ß ,2aa, 5aa, 6ß , 6aa) -5- [Octahidro-2- (2-hidroxietil) -6-metil-3 , 5-dioxo-2 , 6-epoxi-4H-oxireno [f] isoindol-4-il] -8-qu nolincarbonitrilo (464G) El compuesto 464F (1.30 g, 2.57 mmol) se disolvió en HC1 al 2% concentrado/EtOH (50 mL) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h y después se agregaron NaHC03 saturado (50 mL) y diclorometano (100 mL) . La capa orgánica se separó, se lavó una vez con salmuera y se secó sobre Na2S04. La concentración in vacuo dio 930 mg (93%) de compuesto 464G como un sólido amarillo. CLAR: 98% a 1.863 (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 392.20 [ +H] +.
H. (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -5- [2 - [2- [ (5-cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro- 6 -metil-3 , 5-dioxo-2 , 6-dioxo-2 , 6-epoxi-4H-oxireno [f] isoindol-4-il] -8-quinolincarbon.itrilo (464H) Se mezclaron trifenilfosfina (25 mg, 0.096 mmol) y DBAD (22 mg, 0.096 mmol) en THF (0.5 mL) bajo argón. Después de 5 min., se agregó 5-cloro-2-piridinol (13 mg, 0.096 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 22°C por otros 10 min., después se agregó el compuesto 464G (25 mg, 0.064 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 22°C bajo argón por 3 h, y después se concentró in vacuo. El material crudo fue purificado por CCD preparativa sobre gel de sílice eluyendo con 10% acetona en cloroformo para dar 11 mg (23%) de compuesto 464H como un sólido blanco. CLAR : 100% a 3.177 (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 503.14 [ +H]+.
Ejemplo 465 (3aa,43,7p,7aa) -5- [4- [2 -[[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-7 -metil-1, 3 - dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (465) El compuesto 464E (2.40 g, 4.91 mmol) se disolvió en acetato de etilo y se agregó Pd/C (10% Pd, 0.50 g) . El hidrógeno se introdujo después por medio de un globo. Después de 3 h, la reacción se purgó con nitrógeno y se filtró a través de Celite, enjuagando con acetato de etilo. La concentración in vacuo dio 2.39 g (99%) de compuesto 465 como un aceite amarillo. CLAR: 95% a 4.013 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 492.22 [M+H]+.
Ejemplo 466 (3aa, 43/ ß, 7aa) -5- [Octahidro- - (2-hidroxietil) -7-metil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (466) El compuesto 465 (1.40 g, 2.85 mmol) se disolvió en HCl concentrado al 2%/MeOH (20 mL) y se agitó a 22°C por 3 h. La reacción se concentró después hasta -5 mL de volumen y se apagó con una cantidad mínima de bicarbonato de sodio acuoso saturado. Esta solución se extrajo después con cloruro de metileno (3 x 30 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 0.893 g (93%) del compuesto 466 como un sólido amarillo. Este material se llevó sin purificación adicional. CLAR: 98% a 2.140 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 378.25 [M+H]+.
Ejemplo 467 [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [Octahidro-4 - (2 -hidroxietil) -7-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (467BÍ) y [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [Octahidro-4- (2- hidroxietil) -7 -metil- 1, 3 -dioxo- , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -8- quinolincarbonitrilo (467BÜ) A. [3aR- (33a,4ß,7ß,73a) ] -5- [4- [2- [ [(1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-7 -metil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -8-quinolincarbonitrilo (467AÍ) y [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [4- [2- [ [(1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-7 -metil- 1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (467AÜ) El compuesto 465 se separó en sus antípodos individuales por CLAR quiral preparativa en fase normal . Se usó la columna A ChiraCLel OD (50 x 500 mm) con una relación de flujo de 50 mL/min. (16% EtOH/hexanos) observando a 220 nm. El compuesto antípodo de elución más rápida 467AÍ tuvo un tiempo de retención de 40.85 min. (>99% ee) y el compuesto antípodo más lento 467AU tuvo un tiempo de retención de 62.81 min. (>99% ee) . Se aislaron ambos antípodos como sólidos blancos después de la separación. La conformación absoluta de los compuestos 467Ai y 467AÜ no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 467AÍ se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 467AÜ como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 467Ai se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 467AÜ se designan en la presente por tener una configuración "S" .
B. [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [Octahidro-4 - (2 -hidroxietil) -7-metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -8-quinolincarbonitrilo (467Bi) y [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5 -[Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol -2 - il] - 8 -quinolincarbonitrilo (467BÜ) Se desprotegieron ambos antípodos como se describen en el Ejemplo 464G para dar los alcoholes correspondientes, compuestos 467BÍ y 467BÜ como sólidos blancos: El compuesto 467BÍ: CLAR: 98% a 2.110 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM . (ES) : m/z 378.21 [M+H]+. El compuesto 467BÜ: CLAR : 98% a 2.117 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 378.20 [M+H]+.
Ejemplo 468 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -8- [Octahidro-4 , 7 -dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] - 5 -quinoxalincarbonitrilo (468C) A. 8-Nitro-quinoxalin-5-carbonitrilo (468A) Se agregó 2 , 3 -Diamino-4 -nitro-benzonitrilo (0.050 g, 0.28 mmol , como se preparó en WO-98/32439) a una solución de glioxal (40% en agua, 0.032 mL, 0.28 mmol) en ácido acético (0.75 mL) y se agitó a 22°C por 3 h. La reacción se enfrió hasta 0°C y se agregó agua (2.0 mL) y se ajustó el pH hasta 9.0 por la adición de hidróxido de amonio, que provocó que se precipitara el producto. La mezcla se filtró después y se enjuagó con agua fría. El secado in vacuo dio 0.039 g (70%) de compuesto 468A como un sólido color naranja. CLAR : 100% a 2.037 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
B. 8-Amino-quinoxalin-5-carbonitrilo (468B) El compuesto 468A (0.200 g, 1.00 mmol) se suspendió en ácido acético (5.0 mL) y se agregó polvo de hierro (malla 325, 0.112 g, 2.00 mmol) . La reacción se calentó después a 70°C por 20 min. y después se enfrió hasta 22°C. La reacción se filtró a través de Celite, enjuagando con acetato de etilo. El enjuague de acetato de etilo se recolectó y se lavó con K2C03 acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro. La concentración in vacuo dio 0.170 g (100%) de compuesto 468B como un sólido amarillo. CLAR: 88% a 1.677 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 171.29 [M+H] +.
C. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -8- [Octahidro-4 , 7 -dimetil - 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il] -5-quinoxalincarbonitrilo (468C) El compuesto 468B (0.060 g, 0.35 mmol) se suspendió en tolueno (1.0 mL) con sulfato de magnesio (0.060 g) y el compuesto 20A (0.104 g, 0.529 mmol). TEA (0.2 mL) se agregó después y la mezcla se calentó a 145 °C en un tubo sellado. Después de 16 h la reacción se enfrió hasta 22°C y se filtró a través de Celite, enjuagando con acetona. La mezcla se concentró in vacuo y después purificada por CCD preparativa sobre gel de sílice eluyendo con 7% acetato de etilo/cloruro de metileno. Esto dio 0.018 g (15%) de compuesto 468C como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 2.040 y 2.133 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 349.33 [M+H]+.
Ejemplo 469 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -1,2,3 , 4-Tetrahidro-8- (octahidro-4 , 7 -dimetil- 1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 - il) -5- quinoxalincarbonitrilo (469B) A. 8-Amino-l, 2,3, 4 - tetrahidro-guinoxalin-5-carbonitrilo (469A) El compuesto 468A (0.037 g, 0.18 mmol) se disolvió en una mezcla de acetato de etilo (1.0 mL)/etanol (1.0 mL) y se agregó 10% Pd/C (0.050 g) . Se introdujo después hidrógeno por medio de un globo. Después de 2 h, la reacción se purgó con nitrógeno y se filtró a través de Celite, se enjuagó con acetato de etilo. La concentración in vacuo dio 0.029 g (90%) de compuesto 469A como un aceite rojo, que se llevó sin purificación adicional. CLAR: 97% a 3.217 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
B. (3aa, 4ß , 7ß , 7aa) -1,2,3, 4-Tetrahidro-8- (octahidro-4 , 7-dimetil-1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -5-quinoxalincarbonitrilo (469B) El compuesto 469A (0.029 g, 0.17 mmol) se suspendió en tolueno (1.0 mL) con sulfato de magnesio (0.030 g) y compuesto 20A (0.050 g, 0.256 mmol). Se agregó después TEA (0.2 mL) y la mezcla se calentó a 145°C en un tubo sellado. Después de 48 h la reacción se enfrió hasta 22°C y se filtró a través de Celite, enjuagando con acetona. La mezcla se concentró in vacuo y después fue purificada por CCD preparativa eluyendo con 20% acetona en cloroformo. Esto dio 0.014 g (24%) de compuesto 469B como un sólido amarillo. CLAR: 85% a 2.267 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 353.19 [M+H]+.
Ejemplo 470 (3aa, 4ß , 7ß, 7aa) -4- (Octahidro- , 7-dimetil-l , 3-dioxo- , 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il) -1-isoquinolincarbonitrilo (470E) A. 2 -óxido de 4-Bromo-isoquinolina (470A) Una solución de 4 -bromoisoquinolina (4.16 g, 18.6 mmol) en 100 mL de cloroformo, se agregó gota a gota durante 1 h a una solución de 70% mCPBA (12.4 g, 50.3 mmol) en 100 mL de cloroformo a temperatura ambiente. Después de agitar 18 h, La mezcla de reacción se lavó con NaOH 1N (2 x 150 mL) , se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró in vacuo para resultar 4.23 g (94%) de compuesto 470A como un sólido blanco apagado. XH NMR-400 Hz (CDC13) : d 8.71 (s, 1H) , 8.43 (s, 1H) , 8.09 (d, 1H, J=8 Hz) , 7.70 (m, 3H) .
B. -Bromo-isoquinolin-l-carbonitrilo (470B) Se agregó 1 , 8 -Diazabiciclo [5.4.0] undec- 7 -eno (1.67 mL, 11.2 mmol) a una mezcla de compuesto 470A (1.12 g, 5.00 mmol) y cianotrimetilsilano (0.75 mL, 5.5 mmol) en 35 mL de THF . La mezcla homogénea resultante se puso a reflujo por 20 min. Después de concentrarse in vacuo, el residuo fue purificado por cromatografía instantánea sobre una columna de 5 x 15 cm de gel de sílice, eluyendo con 3:1 hexano : acetato de etilo para dar 0.95 g (82%) de compuesto 470B como un polvo blanco. XE RM (400 MHz , CDC13) : d 8.85 (s, 1H) . 8.36 (d, 1H, J = 8.5 Hz) , 8.28 (d, 1H, J = 8.5 Hz) , 7.96 (t, 1H, J = 8.5 Hz) , 7.89 (t, 1H, J = 8.5 Hz) .
C. 4- (2, -Dimetoxi-bencilamino) -isoquinolino- 1-carbonitrilo Una mezcla de compuesto 470B (699 mg, 3.00 mmol) y 2,4-dimetoxibencilamina (4.8 mL, 30 mmol) en 15 mL de acetonitrilo se puso a reflujo por 16 h. Después de la concentración in vacuo, el residuo se purificó en una columna de 5 x 15 cm de gel de sílice, eluyendo con 3:2 hexano : acetato de etilo para resultar 290 mg (30%) de 470C como un sólido amarillo claro. CLAR: 1.76 min. (tiempo de retención) (Phenomenex C-18, columna de 5 mieras, 4.6 x 30 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 2 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) .
D. 4-Amino-isoquinolin-l-carbonitrilo (470D) El compuesto 470C (50 mg, 0.16 mmol) se trató con ácido trifluoroacético (0.5 mL) por 1 h. La mezcla altamente coloreada se dividió entre acetato de etilo (30 mL) y NaOH 1N (30 mL) . Después de lavar con salmuera (15 mL) , la capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró in vacuo para resultar 24 mg (92%) de compuesto 470D como un sólido amarillo. CLAR: 99% a 1.09 min. (tiempo de retención) (Phenomenex C-18, columna de 5 mieras, 4.6 x 30 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 2 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) . EM (ES+) : m/z 170.2 [M+H]+. Una ruta alternativa para la síntesis del compuesto 470D es como sigue. Una mezcla de compuesto 470B (1.17 g, 5.02 mmol), benzofenona imina (1.05 mL, 6.26 mmol), acetato de paladio (25 mg, 0.11 mmol), rae- 2 , 2 ' -bis (difenilfosfino) - 1 , 1 ' binaftil (100 mg, 0.161 mmol) y carbonato de cesio (2.30 g, 7.06 mmol) en 20 mL de tolueno se calentó a 100°C por 20 h. La mezcla de reacción se diluyó con éter de etilo (200 mL) y se filtró a través de Celite. Después de concentrar el filtrado, el residuo se disolvió en 120 mL de THF y se trató con 40 mL de HC1 1N. Después de reposar por 2 h a temperatura ambiente, la mezcla se dividió entre acetato de etilo (150 mL) y 0.25 N NaOH (160 mL) . Después de lavar con salmuera (100 mL) , la capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio. La capa orgánica se filtró y - 50 g de celite se agregaron al filtrado. Después de la concentración in vacuo, el residuo en polvo fue purificado por cromatografía instantánea sobre una columna de 5 x 15 cm de gel de sílice eluyendo con 1 L de cada uno de 1:1 acetato de etilo : hexano, 6:4 acetato de etilo: hexano y 8:2 acetato de etilo: hexano para dar 450 mg (53%) de 470D como un polvo amarillo.
E. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7 -dimetil - 1, 3 -dioxo-4 , 7 - epoxi-2H-isoindol-2-il) - 1-isoquinolincarbonitrilo (470E) Una mezcla de compuesto 470D (24 mg, 0.14 mmol) , compuesto 20A (55 mg, 0.28 mmol), trietilamina (0.1 mL) , sulfato de magnesio (100 mg) , 2-metoxietiléter (0.5 mL) y DMF (0.1 mL) se calentó en un recipiente sellado hasta 250°C por un total de 2.5 h usando un dispositivo de calentamiento por microondas. Después de dividir la mezcla de reacción entre el acetato de etilo (25 mL) y agua (25 mL) , la capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró in vacuo. Aproximadamente la mitad del residuo fue purificado por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 50 mm, eluyendo con 10-100% metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.). La concentración de la fracción pura resultó en 6 mg (12%) de compuesto 470E como un polvo blanco. CLAR: 99% a 1.42 min. (tiempo de retención) (Phenomenex C-18, columna de 5 mieras, 4.6 x 30 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 2 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) . EM (ES+) : m/z 348.23 [M] + .
Ejemplo 471 [3aR- (3aa, ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- trifluorometil) benzonitrilo (471DÍ) y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5-hidroxi-4 , 7 -dimetil-1 , 3 - dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- Una mezcla de 3 -trifluorometil-4-ciano-anilina (24.0 g, 129 mmol) y anhídrido maleico (14.0 g, 143 mmol) en 50 mL de ácido acético se calentó a 115 °C durante la noche. Se obtuvo un precipitado durante el periodo de calentamiento. La reacción se dejó reposar a temperatura ambiente por un periodo adicional durante la noche. Se separó el sólido por filtración, se lavó la torta filtro con éter de dietilo y se secó para dar 21 g (79 mmol, 61%) de compuesto 471A como un sólido blanco apagado. CLAR: 100% a 2.11 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. (3act,4P,7p,7aa) -4- (1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 , 7-dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (471B) Una suspensión del compuesto 471A (13.0 g, 48.8 mmol) y 2 , 5-dimetilfurano (10.5 mL, 98.6 mmol) en 50 mL de tolueno se calentó a 60°C, bajo argón. Se obtuvo una solución con el calentamiento inicial y se observó un precipitado después de aproximadamente 1 h. El calentamiento continuó durante la noche. Después de enfriarla, la suspensión se dejó reposar a 4°C durante la noche. El sólido resultante se filtró y la torta filtro se lavó con tolueno frío, seguido por secado con aire para dar 13.2 g del compuesto puro 471B como un sólido blanco. El volumen de filtrado se redujo in vacuo por la mitad y se trató la solución resultante como arriba para resultar en 2.8 g adicionales de compuesto puro 471B (total 16.0 g, 90%). CLAR : 90% a 3.65 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
C. (3aa, 4ß?, 5ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (471C) Una solución de compuesto 471B (25 g, 69 mmol) en 125 mL de THF, en un matraz seco bajo nitrógeno, se enfrió hasta 10°C con un baño de hielo. A esta solución se le agregó un complejo puro borano-dimetilsulfuro (13.0 mL, 138 mmol) gota a gota durante 10 min., mientras se mantiene una temperatura de reacción de <15°C. La mezcla de reacción se agitó por 30 min. a temperatura ambiente y después en un baño de hielo se enfrió hasta 10 °C. A la solución fría se le agregó lentamente 480 mL de una solución amortiguadora de fosfato de pH 7, que resultó en una reacción exotérmica fuerte y evolución vigorosa del gas. La solución se mantuvo a <21°C a través de la adición por medio de un baño de hielo. A la solución resultante se le agregaron 240 mL de etanol y la mezcla resultante se enfrió hasta 5°C con un baño de hielo. A la solución enfriada se le agregaron 50 mL de peróxido de hidrógeno al 30% y la mezcla resultante se agitó .a 10-20°C por 1.5 h. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x 1 L) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con sulfito de sodio al 10% (1 x 500 mL) y salmuera (2 x 300 mL) y se secaron sobre MgS04. La concentración in vacuo resultó en 29 g de producto crudo como un sólido blanco. Este material se sometió a cromatografía instantánea en una columna de 1.2 L de gel de sílice equilibrada con 100% CH2C12. El material se aplicó a la columna como una solución que consiste de 100 mL de EtOAc (caliente) y 400 mL CH2C12. La elución inicial con CH2C12 (3 L) , seguida por 25% EtOAc/75% CH2Cl2 (3 L) y finalmente 50% EtOAc/50% CH2C12 (6 L) dio 11.8 g (45%) de compuesto 471C que es una mezcla racémica. Alternativamente el compuesto 471C se puede hacer por el siguiente método: Se desgasificó un matraz seco conteniendo el compuesto 471B (8.90 g, 24.6 mmol) y catalizador de Wilkinson (0.57 mg, 0.62 mmol) 4x con vacío/argón. Se agregó THF (40 mL) al matraz y la mezcla se agitó hasta que se obtuvo una solución café claro. Se agregó después catecolborano (49 mL, 49 mmol, 1 M en THF) gota a gota durante 20 min. y se observó una ligera exotermia. Se continuó la agitación por 45 min. seguida por enfriamiento de la mezcla de reacción con un baño de hielo. Se agregó lentamente una solución amortiguadora de fosfato con un pH 7 (175 mL) , seguido por la adición consecutiva de etanol (87 mL) y peróxido de hidrógeno al 30% (18 mL) . Se continuó la agitación con enfriamiento y el avance de la reacción se observó por CLAR por 4 h. La reacción se extrajo con CH2C12 (3 x 250 mL) . Los extractos combinados se lavaron con 1:1 NaOH 1N:15% de sulfito de sodio (300 mL) y salmuera, se secaron sobre MgS04, y el solvente se eliminó in vacuo para dar 8.5 g de un sólido café claro. El producto crudo se sometió a cromatografía instantánea en una columna de gel de sílice de 500 cm3 eluyendo con un gradiente de 25-50% EtOAc/CH2Cl2 para dar 6.00 g del compuesto 471C (15.8 mmol, 64%) como un sólido blanco. CLAR: 90% a 2.45 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 381.11 [M+H]+.
D. [3aR- (3aa,4p, 5p,7p,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi- , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (471DÍ) y [3aS- (3aa,4p, 5p,7p,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7 -dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-( trifluorometil) benzonitrilo (471DÜ) .
Los antípodos individuales del compuesto 471C se separaron por CLAR quiral preparativa en fase normal (columna CHIRALPAK AD, 5 x 50 cm) . Una porción de 2.5 g de 471C se disolvió en 25 mL de acetona caliente y se diluyó hasta 50-75 mL con hexano por inyección. La elución isocrática con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 50 mL/min. dio el compuesto de elución más rápida 471DÍ (CLAR quiral: 10.02 min. ; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) y el compuesto de elución más lenta 471DÜ (CLAR quiral: 14.74 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) . Compuestos 471DÍ y 471DÜ: CLAR: 90% a 2.45 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 381.11 [M+H]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 471DÍ y 471DÜ se determinó por estudios de difracción de rayos X de cristal sencillo y es como se describe para la nomenclatura designada. Las fracciones purificadas resultantes de la CLAR de los compuestos 471DÍ y 471DÜ se purificaron además por cristalización usando cualesquiera de los procedimientos abajo descritos. 1) A partir de Acetato de etilo Una porción de 700 mg del compuesto 471DÍ, obtenida después de cromatografía quiral como se describe arriba, se disolvió en acetato de etilo (10 mL) a temperatura ambiente. La solución se diluyó en porciones pequeñas de hexano (20 mL) hasta que se observó turbidez. La solución se dejó reposar durante la noche a temperatura ambiente. El sólido blanco resultante se filtró y se secó con aire para dar 430 mg de compuesto 471DÍ como un polvo blanco. Esta muestra se secó además a 60°C (3 h, 0.5 Torr) , después a 70°C, (12 h, 0.5 Torr) . 2) A partir de Acetona Una porción de 500 mg de compuesto 471Di, obtenida después de cromatografía quiral como se describe arriba, se disolvió en una cantidad mínima de acetona (3 mL) y se diluyó lentamente con hexano (1 mL) . La solución incolora transparente se dejó reposar durante la noche a temperatura ambiente. El sólido blanco resultante se filtró y se secó en aire para dar 440 mg de compuesto 471DÍ como un polvo blanco. Esta muestra se secó además a 60°C, (3 h, 0.5 Torr) después a 70°C, (12 h, 0.5 Torr) . 3) A partir de Metanol Una porción de 500 mg de compuesto 471Di, obtenida después de cromatografía quiral como se describe arriba, se disolvió en 5 mL de metanol caliente (baño de vapor) . La solución transparente incolora, se dejó reposar a temperatura ambiente por 2 h, después a 4°C durante la noche. El sólido resultante se filtró, se lavó con un mínimo de metanol frío y se secó con aire para resultar 360 mg de compuesto 471DÍ como un polvo blanco. Esta muestra se secó además a 70°C, (12 h, 0.5 Torr) . 4) A partir de CH2C12 Una porción de 7.00 g del compuesto 471Di, obtenido después de cromatografía quiral como se describe arriba, se disolvió en 75 mL de CH2Cl2 a temperatura ambiente. La solución transparente e incolora, se diluyó lentamente con hexano (48 mL) hasta que se observó la cristalización. La solución se dejó reposar a temperatura ambiente por 1 h, después a 4°C durante la noche. El material cristalino resultante se filtró y después se lavó con una cantidad mínima de 2:1 CH2Cl2 : hexano frío. Los cristales grandes se molieron hasta un polvo fino y se secaron a 50°C (12 h, 0.5 Torr) para dar 5.96 g de compuesto 471DÍ como un polvo blanco .
Ejemplo 472 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4, 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , -epoxi ¦ 2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (472) Una solución de compuesto 471B (500 mg, 1.38 mmol) en acetato de etilo (10 mL) , conteniendo 10% Pd/C (25 mg, cat . ) se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno introducido por medio de un globo. Después de 2 h la reacción se filtró a través de Celite y la torta filtro se lavó con EtOAc . El filtrado transparente, incoloro, se concentró in vacuo para producir 501 mg (1.38 mmol, 100%) de compuesto 472 como un sólido blanco. No se requirió de purificación adicional. CLAR: 99% a 3.04 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 382.2 [M+NH ]+.
Ejemplo 473 (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [5- (Acetiloxi ) octahidro-4 , 7 -dimetil-1 , 3 - dioxo-4, 7-epoxi-2H-i3oindol-2-il] - 2 - (trifluorometil) benzonitrilo (473 ) A una solución de compuesto 471C (1.50 g, 3.95 mmol) en 10 mL de piridina, que se enfrió hasta 0°C bajo argón, se agregó anhídrido acético (0.42 mL, 4.4 mmol) gota a gota, seguido por DMAP (5 mg, 0.04 mmol). La agitación se continuó a temperatura ambiente por 4 h. La solución se concentró in vacuo y el residuo resultante se diluyó con acetato de etilo, y se lavó consecutivamente con HCl 1N (2x) , salmuera (2x) , NaHCC>3 saturado, y salmuera (2x) . La capa orgánica se secó sobre MgS0 y se concentró in vacuo. El sólido resultante se secó a 60°C (20 h, 0.5 Torr) para dar 1.55 g (3.67 mmol, 93%) de compuesto 473 como un sólido cristalino blanco. CLAR: 99% a 2.10 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex Luna C18, 2 x 30 mm, 0-100% acetonitrilo acuoso durante 3 min. conteniendo 10 mM NH4OAc a 1 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 421.4 [M-H] " .
Ejemplo 474 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7 -dimetil-2- (2-metil-4- benzoxazolil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (474F) Se agregó al 2-amino-3-nitrofenol (6.17 g, 40.0 mmol) trietilortoacetato (25.96 g, 160.0 mmol) y la mezcla se calentó a 100°C por 12 h para dar una solución rojo oscuro. El enfriamiento hasta temperatura ambiente produjo una masa cristalina que se filtró y lavó con hexano para dar el compuesto 474A (6.78 g, 95%) como agujas color marrón claro. CLAR: 98.1% a 1.86 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 rara, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 179.08 [M+H]+.
B . -Amino-2-metilbenzoxazol (474B) El compuesto 474A (6.78 g, 38.1 mmol) se disolvió en una mezcla 1:1 de 10% ácido acético/acetato de etilo (100 mL volumen total) y se calentó hasta 65°C. Se agregó en porciones polvo de hierro (10.63 g, 190.2 mmol). Después de agitar por 3 h, la CCD indicó el consumo completo del material de partida. La mezcla de reacción enfriada se filtró a través de una almohadilla de Celite y la almohadilla se lavó con 50 mL de acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con agua (2 x 25 mL) , salmuera (1 x 25 mL) , se secó sobre MgS0 , se filtró y se concentró in vacuo. El material crudo fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 25% éter/CH2Cl2 para dar 3.90 g (69%) de compuesto 474B como un sólido café claro. CLAR: 95.8% a 2.43 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 149.11 [M+H]+.
C. 4-Amino-7-bromo-2-metilbenzoxazol (474C) El compuesto 474B (3.90 g, 26.3 mmol) se disolvió en DMF (45 mL) y se enfrió hasta 5°C y se agregó N-bromosuccinimida (4.68 g( 26.3 mmol) en porciones pequeñas y la reacción se agitó por 5 h. La mezcla se vació en 150 mL de agua hielo para dar un sólido coloreado crema que se filtró, se lavó con agua, se disolvió en CH2C12, se secó sobre gS04, se filtró y concentró in vacuo. La purificación del material crudo por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20% éter/CH2Cl2 dio el compuesto 474C (3.36 g, 56%) como un sólido beige. CLAR: 95.4% a 2.583 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm( eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 228.03 [M+H]+.
D. 1- (7-Bromo-2-metil-benzoxazol-4-il) -pirrol-2, 5-diona El compuesto 474C (1.40 g, 6.17 mmol) se disolvió en 20 mL de ácido acético, se agregó anhídrido maleico (0.635 g, 6.47 mmol) y la reacción se calentó a reflujo bajo nitrógeno por 5 h. El solvente se separó in vacuo y el producto crudo fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% éter/CH2Cl2 para dar el compuesto 474D (1.73 g, 91%) como un sólido amarillo pálido. CLAR: 93.6% a 1.36 min. (Columna Phenomenex, 30 x 4.6 mm, 10-90% metanol acuoso durante 2 min. conteniendo 0.1% TFA, 5 mL/min., observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 308.02 [M+H]+.
E. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (7-Bromo-2-metil-4-benzoxazolil) - 3a, 4 , 7 , 7a- tetrahidro-4, 7 -dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1,3 (2H) -diona (474E) El compuesto 474D (0.307 g, 1.00 mmol) se disolvió en benceno (2 mL) y se agregó 2 , 5 -dimetilf rano (0.154 g, 1.60 mmol) por medio de una jeringa. La mezcla de reacción se calentó a 60°C por 12 h. La mezcla de reacción enfriada se concentró in vacuo a 40 °C para dar el compuesto 474E como una espuma blanca descolorida que se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación.
F. (33a,4ß,7ß,78a) -Hexahidro-4, 7 -dimetil-2- (2-metil-4-benzoxazolil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (474F) El compuesto 474E (0.403 g, 1.00 mmol) se disolvió en EtOH/EtOAc (4 mL/4 mL) y se agregó 10% Pd/C (100 mg) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 6 h bajo una atmósfera de H2 suministrada por un globo y después se filtró a través de Celite. La concentración del filtrado in vacuo dio un sólido café. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% acetona/CHCl3 (250 mL) , 15% acetona/CHCl3 (250 mL) , y 20% acetona/CHCl3 (250 mL) dio el compuesto 474F (0.089 g, 27%) como una espuma blanca. CLA : 91% a 2.28 mín. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 328.34 [M+H]+.
Ejemplo 475 (3aot, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (7 -Bromo-2 -metil-4 -benzoxazolil) hexahidro- 4,7-dimetil -4,7- epoxi - 1H- isoindol - 1 , 3 (2H) -diona (475) El compuesto 474E (0.202 g, 0.501 mmol) se disolvió en 1/1 EtOAc/EtOH (10 mL) y se agregó 10% Pt/C (100 mg) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo un globo de H2 por 6 h. La reacción se filtró a través de Celite y se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% éter/CH2Cl2 dio 0.063 g (31%) del compuesto 475 como un aceite incoloro que se solidificó con reposo para dar un sólido blanco. CLAR: 92.5% a 2.83 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 406.21 [M+H] + .
Ejemplo 476 (3a , 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7 -dimetil -2 - [2- ( trifl orometil ) - 4-benzoxazolil] -4, 7 -epoxi- lH-isoindol-1 , 3 (2H) -diona(476D) -Nitro-2- trifluorometilbenzoxazol (476A) Se agregó 2 -Amino-3 -nitrofenol (10.00 g, 64.88 mmol) a 100 mL de anhídrido trifluoroacético vigorosamente agitado y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 12 h. El solvente se separó in vacuo para dar un sólido azul obscuro que se disolvió en 200 mL de CH2C12 y se lavó secuencialmente con 10% NaOH (2 x 100 mL) , agua (100 mL) , salmuera (100 mL) , y se secó sobre MgS04. La filtración y la concentración in vacuo dio el compuesto 476A (10.78 g, 72%) como un sólido café. No se requirió purificación adicional. CLAR: 92.9% a 2.43 min . (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. 4-Amino-2- trifluorometilbenzoxazol (476B) El compuesto 476 46.30 mmol) se disolvió en 1:1 EtOAc/10% HOAc (250 mL) y se calentó hasta 65°C. Se agregó polvo de hierro (12.93 g, 231.5 mmol) en porciones y la reacción se agitó por 6 h a 65°C. Después de enfriar, la mezcla se filtró a través de Celite enjuagando con EtOAc . La capa orgánica se separó, se lavó con H20 (3 x 100 mL) , salmuera (100 mL) , se secó sobre MgS04 , y se concentró in vacuo para dar un aceite café. El material crudo fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 70/30 CH2Cl2/hexanos para dar el compuesto 476B (7.02 g, 75%) como un sólido amarillo cristalino. CLAR: 96.7% a 2.68 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
C. 1- (2-Trifluorometil-benzoxazol-4-il) -pirrol-2 , 5-diona (476C) El compuesto 476B (0.500 g, 2.48 mmol) se disolvió en ácido acético (10 mL) y se agregó anhídrido maleico (0.267 g, 2.72 mmol) . La mezcla se calentó a reflujo por 3 h, se enfrió y el solvente se separó in vacuo para dar un sólido café claro. El producto crudo fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 2% eOH/CH2Cl2 para dar el compuesto 476C (0.40 g, 57%) como un sólido blanco descolorido. CLAR : 89.7% a 2.38 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mra, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 283.21 [M+H]+.
D. (3aa,4P,73,7aa) -Hexahidro-4, 7 -dimetil-2 - [2- ( trifluorometil) -4-benzoxazolil] -4,7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (476D) El compuesto 476C (0.24 g, 0.85 mmol) y 2,5-dimetilfurano (0.132 g, 1.37 mmol) se combinaron en 3 mL de benceno en un tubo sellado y se calentaron a 60°C por 12 h. La mezcla se enfrió y se concentró in vacuo para dar un aceite amarillo que se disolvió en l/l EtOAc/EtOH (6 mL) . Se agregó 10% Pd/C (100 mg) y la mezcla se agitó bajo un globo de H2 por 3.5 h. La reacción se filtró a través de Celite y el solvente se separó in vacuo para dar el producto crudo como un aceite amarillo pálido. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 2% Et20/CH2C12 dio 0.107 g (33%) del compuesto 476D como una espuma blanca. CLAR: 96.5% a 2.80 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 381.17 [M+H]+.
Ejemplo 477 (3aa,4P, 73, aa) -2-Metil-4- (octahidro-4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -7 -benzoxazoCLarbonitrilo (477E) A. 2-Ciano-5-nitrofe El 3 , 4 -Metilendioxinitrobenceno (1.67 g, 10.0 mmol) se disolvió en 20 mL de HMPA y se agregó cianuro de sodio (0.49 g, 10.0 mmol) . La reacción se calentó a 150°C bajo nitrógeno y se agregaron tres porciones de cianuro de sodio (0.245 g, 5.00 mmol, total) durante 15 min. La reacción se mantuvo a 150°C por 45 min. , se enfrió, y se vació en 50 mL de H20 seguido por la adición de 50 mL de 5% NaOH. La capa acuosa se extrajo con éter (2 x 25' mL) y la capa orgánica se descartó.
La capa acuosa básica se acidificó cuidadosamente hasta un pH de 4 por la adición de 10% HCl y se extrajo con éter (3 x 25 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (25 mL) , se secaron sobre sulfato de sodio y se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5% MeOH/CH2Cl2 dio 1.05 g (64%) del compuesto 477A como un sólido amarillo-café. CLAR: 91.6% a 1.03 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex, 30 x 4.6 trun, 10-90% metanol acuoso durante 2 min. conteniendo 0.1% TFA, 5 mL/min., observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 165.23 [M+H] +.
B. 2-Amino-4-ciano-3-hidroxinitrobenceno (477B) El compuesto 477A (0.438 g, 2.67 mmol) se disolvió en 25 mL de DEMO y se agregó yoduro de trimetilhidrazinio (0.534 g, 2.67 mmol) . Se agregó pentóxido de sodio (0.880 g, 8.01 mmol) bajo N2 para dar una solución rojo intenso y se continuó la agitación durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vació dentro de 50 mL de 10% HCl y se extrajo con EtOAc (2 x 25 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 mL) , salmuera (25 mL) , se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron in vacuo para dar el compuesto 477B como un sólido rojo aceitoso que se usó directamente en la siguiente reacción sin purificación adicional .
C. 7-Ciano-2-metil-4-nitrobenzoxazol (477C) El compuesto 477B (0.360 g, 2.01 mmol) y trietil ortoacetato (1.30 g, 8.04 mmol) se combinaron y calentaron a reflujo bajo nitrógeno por 1 h. El solvente se separó in vacuo y el residuo resultante purificado por cromatografía instantánea eluyendo con 5% éter/CH2Cl2 para dar 0.255 g (63%) de compuesto 477C como un sólido café. CLAR : 98.4% a 1.80 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 204.28 [M+H] +.
D. 4-Amino-7-ciano-2-metilbenzoxazol (477D) El compuesto 477C (0.156 g, 0.77 mmol) se disolvió en una mezcla 1:1 de EtOAc/10% HOAc (20 mL) y se calentó hasta 65°C. Se agregó polvo de hierro (malla 325, 0.214 g, 3.83 mmol) y la reacción se agitó por 4 h. La mezcla enfriada se filtró a través de Celite y el filtrado resultante se lavó con agua (25 mL) , salmuera (25 mL) , se secó sobre MgS0 , y se concentró para dar el compuesto 477D (0.118 g, 89%) como un sólido color naranja. CLAR: 87% a 2.03 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 174.05 [M+H]+.
E. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2 -Metil -4- (octahidro- , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -7 -benzoxazoCLarbonitrilo (477E) El compuesto 477D (0.060 g, 0.35 mmol) y el compuesto 20A (0.071 g, 0.37 mmol) se combinaron en un tubo sellado con tolueno (2 mL) , trietilamina (0.24 mL, 1.7 mmol) , y MgS04 (0.104 g, 0.866 mmol) . El tubo sellado se calentó a 135°C por dos días. La mezcla enfriada de reacción se diluyó con EtOAc, se filtró, y se concentró in vacuo para dar el producto crudo como un aceite café. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 1/1 EtOAc/hexanos dio 0.014 g (12%) de compuesto 477E como un sólido blanco descolorido. CLAR: 96.5% a 2.27 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 352.23 [M+H]+.
Ejemplo 478 (3aa,4P,5P/7 >7aa) -4- [7- [2- (4-Cianofenoxi) etil] octahidro-5- metoxi-4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 - il] - 1- Se agregó n-BuLi (0.050 mL, 1.6 M, 0.075 mmol) a una solución de compuesto 244ii (33.7 mg, 0.0683 mmol) en THF (1.0 mL) a -78°C bajo argón. La mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agregó metil fluorosulfonato (0.010 mL, 0.12 mmol) gota a gota. Una vez que se consumió el material de partida, como fue evidente por CLAR, la reacción se apagó con H20 y la mezcla acuosa resultante se extrajo con CH2C12 (3 5 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa [22.09 min. (Columna YMC S5 ODS, 20 x 100 mm, 0-100% metanol acuoso durante 25 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 ntn) ] dio 13.0 mg (38%) de compuesto 478 como un sólido blanco. CLAR: 93% a 3.35 min. (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 508.17 [M+H]+.
Ejemplo 479 (3act, 4ß, 7ß, 7aot) -Hexahidro-4, 7-dimetil-2- (2-metil-6- benzoxazolil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (479B) A. 2 -Metil-6-aminobenzoxazol (479A) A una solución de 2 -metil - 6 -nitrobenzoxazol (100 mg, 0.560 ramol) en AcOH (2 mL) se agregó polvo de hierro (malla 325, 63.0 mg, 1.12 mmol) a 70°C en una porción sencilla. Después de 15 min. a 70°C se agregó polvo de hierro adicional (malla 325, 63.0 mg, 1.12 mmol) y la agitación continuó por 15 min. La mezcla se enfrió y concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se tomó en EtOAc y se lavó con Na2C03 saturado seguido por H20. La capa orgánica se secó sobre MgS04, concentró bajo presión reducida y fue purificada or cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0 hasta 25% EtOAc en CH2C12 para resultar 69 mg (83%) de compuesto 479A como un sólido. CLAR : 97% a 0.24 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% H3P04, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 149.2 [M+H] + .
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7-dimetil-2- (2-metil-6-benzoxazolil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (479B) El compuesto 479A (30 mg, 0.20 mmol) , MgS04 (60 mg, 0.50 mmol) , trietilamina (140 µ??, 1.00 mmol) y el compuesto 20A (45 mg, 0.23 mmol) se tomaron en 0.25 mL de tolueno y se colocaron en un tubo sellado. El tubo sellado se calentó a 135°C por 14 h y la reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de una almohadilla corta de Celite, eluyendo con MeOH y el solvente se separó in vacuo. El residuo fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0 hasta 50% EtOAc en CH2Cl2 para dar 49 mg (65%) de compuesto 479B como un sólido café claro. CLAR: 98% a 2.30 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 326.9 [M+H]+.
Ejemplo 480 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (2, 1, 3 -Benzoxadiazol- 5-il) hexahidro-4, 7 ¦ dimetil-4,7-epoxi-lH-isoindol-l,3 (2H) -diona (480B) A. 5-Amino-2, 1, 3-benzoxadiazol (480A) A una solución de ácido 2 , 1 , 3-benzoxadiazol-5-carboxílico (102 mg, 0.621 mmol) en THF (3 mL) , se agregó trietilamina (103 µ?, 0.739 mmol) seguido por DPPA (160 µ??., 0.739 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó por 4 h, se diluyó con CH2C12 y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre MgS0 , se concentró y fue purificada por cromatografía instantánea sobre gel de sílice con 0 hasta 50% EtOAc en CH2C12. El material resultante se disolvió en AcOH (2 mL) , y se agregó agua (0.7 mL) gota a gota produciendo una solución ligeramente turbia que se calentó a 105°C por 30 min. La mezcla se enfrió, se hizo básica con solución saturada de a2CÜ3 y se extrajo varias veces con THF. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se concentraron y fueron purificadas por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 0 hasta 15% MeOH en CH2C12 para dar 34 mg (41%) de compuesto 480A como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 1.27 rnin. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% H3P0 , 4 mL/min.( observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 136.0 [M+H]+.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7acc) -2- (2 , 1, 3 -Benzoxadiazol-5 -il ) hexahidro-4 , 7 -dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (480B) El compuesto 480A (34 mg, 0.25 mmol), MgS04 (76 mg, 0.63 mmol) , trietilamina (180 µ?., 1.26 mmol) y compuesto 20A (74 mg, 0.38 mmol) se disolvieron en 0.25 mL de tolueno y se colocaron en un tubo sellado. El tubo sellado se calentó a 135°C por 14 h. La mezcla de reacción enfriada se filtró a través de una almohadilla corta de Celite, eluyendo con acetona y el solvente se eliminó in vacuo. El residuo fue purificado por CLAR preparativa de fase inversa (YMC S5 ODS 20 x 100 mm, eluyendo con 30-100% metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min.) . La concentración de las fracciones deseadas resultó en un residuo que se dividió entre CH2C12 y una solución saturada de NaHC03. La capa acuosa se extrajo una vez con CH2C12 y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04. La concentración bajo presión reducida dio 42 mg (53%) del compuesto 480B como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 2.62 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-9.0% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . ¾ RMN (400 MHz, CDC13) d = 7.91 (d, 1H) , 7.90 (dd, 1H) , 7.37 (dd, 1H) , 3.09 (s, 2H) , 1.85 (s, 4H) , 1.67 (s, 6H) .
Ejemplo 481 [3aR- [3aa,4P, 53,7P,7aa) ] -2- [6-Benzotiazolil) -7- [2- [ (5-cloro- 2-piridinil) oxi] etil] hexahidro- 5 -hidroxi-4 -metil-4 , 7-epoxi- lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (481D) y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] - 2- [6-Benzotiazolil) -7- [2- [ (5-cloro-2- piridinil) oxi] etil] hexahidro-5 -hidroxi-4 -metil-4 , 7 -epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona (481E) A. l-Benzotiazol-6-il-pirrol-2, 5-diona (481A) Una mezcla de 5 -aminobenzotiazol (2.00 g, 13.3 mmol) y anhídrido maleico (1.96 g, 20.0 mmol) en AcOH (27 mL) se calentó a 115°C por 20 h. La mezcla se enfrió y se concentró bajo presión reducida. El residuo se tomó en THF y se lavó con Na2C03 saturado. La capa acuosa se extrajo varias veces con THF y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04. La purificación por cromatogra ía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 0 hasta 50% EtOAc en CH2Cl2 dio 1.37 g (45%) de compuesto 481A como un sólido amarillo pálido. CLAR: 100% a 2.62 min . (tiempo de retención) (Column>a YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 231.0 [M+H]+.
B. (3aa,4p,7p,7aa) -2- ( 6-Benzotiazolil) -4-[2-[[(l,l-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -3a, 4 , 7 , 7a- tetrahidro-7-metil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (481B) Una suspensión del compuesto 481A (445 mg, 1.93 mmol) y del compuesto 204A (929 mg, 3.87 mmol) en benceno (2 mL) se calentó a 60 °C y se agregó acetona hasta que se obtuvo una solución transparente. La mezcla resultante se agitó a 60 °C por 24 h y después se concentró lentamente in vacuo. El residuo resultante se disolvió en acetona y se concentró lentamente in vacuo. Este proceso se repitió un total de tres veces. La purificación por cromatografí instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 0 hasta 30% de acetona en hexanos dio 820 mg (90%) de compuesto 481B como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.62 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 471.3 [M+H]+.
C. [3aR- (3aa,4p, 5ß,7ß, 7aa) ] -2- (6-Benzotiazolil) -7- [2- [ [(1,1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] hexahidro-5-Hidroxi-4-metil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (481Ci) y [3aS- (3aa,4P,5p,7p,7acc) ] -2- (6-Benzotiazolil) -7- [2 - [ [ (1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] hexahidro-5-hidroxi-4-metil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (481CÜ) A una solución de compuesto 481B (75 mg, 0.16 mmol) en THF (1 mL) se agregó catalizador de Wilkinson (32 mg, 0.030 mmol) y catecolborano (1.0 en THF, 1.6 mL, 1.6 mmol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla resultante se agitó por 2.5 h antes de que se enfriara hasta 0°C. Se agregaron EtOH (5 mL) , NaOH 3N (2 mL) y H202 (30%, 1 mL) secuencialmente , y la mezcla se agitó por 2 h a 0°C. La reacción se apagó por la adición de una solución fría al 10% de Na2S03 (en exceso) seguida por agua. La capa acuosa se extrajo varias veces con CH2Cl2 y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04. La concentración bajo presión reducida seguida por la purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos dio 13 mg (17%) de una mezcla racémica de los compuestos 481CÍ y 481CÜ como un sólido café claro. CLAR: 96% a 3.58 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% H3P04, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 489.3 [M+H]+. La mezcla racémica se separó en sus enantiómeros individuales por CLAR quiral preparativa en fase normal (columna CHIRALPAK AD 5 x 50 cm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrático) a 50 mL/min.) para dar el enantiómero de elución más rápida, compuesto 481CÍ: (CLAR quiral: 9.40 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) y el enantiómero de elución más lenta, compuesto 481CÜ: (CLAR quiral: 10.47 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) . La conformación absoluta de los compuestos 481CÍ y 481CÜ no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 481CÍ se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 481CÜ como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 481CÍ se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 481CÜ se designan en la presente por tener una configuración "S" .
D. [3aR- (3aa,4p, 5ß, 7p,7aa) ] -2- ( 6 -Benzotiazolil ) -7- [2- [ (5-cloro-2 -piridinil) oxi] etil] hexahidro-5-hidroxi-4-metil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (481D) El compuesto 481CÍ (84 mg, 0.17 mmol) se suspendió en EtOH (2 mL) y se agregó HC1 concentrado (40 µ?-? ) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó por 15 min. antes de que se agregaran varias gotas de una solución saturada de NaHC03. La concentración bajo presión reducida produjo un residuo que se dividió entre CH2C12 y solución saturada de NaHC03. La capa acuosa se extrajo varias veces con CH2C12 y finalmente con EtOAc . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se concentraron y purificaron por CCD preparativa eluyendo con 50% acetona en CHCI3. Este procedimiento sirvió para eliminar el grupo TBS del compuesto 481Ci, produciendo el alcohol primario libre. Una porción de 12 mg (0.03 mmol) del alcohol libre del compuesto 481CÍ reaccionó con 5-cloro-2-piridinol (8 mg, 0.06 mmol), PPh3 (17 mg, 0.060 mmol) y di-tert-butilazodicarboxilato (15 mg, 0.060 mmol) en THF (0.5 mL) según el procedimiento general descrito en el Ejemplo 244. La mezcla se agitó por 24 h a temperatura ambiente, se diluyó con NaOH 1N y la capa acuosa se extrajo varias veces con CH2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se concentraron y purificaron por CCD preparativa, eluyendo con 25% acetona en CHCl3 para dar 9 mg (58%) del compuesto 481D como un sólido blanco. CLAR : 98% a 2.94 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% H3P04( 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 486.2 [M+H]+.
E. [3aS- (3aa,4 ,5p,7p,7aa) ] - 2- (6-Benzotiazolil) -7- [2- [ (5-cloro-2 -piridinil) oxi] etil] hexahidro- 5-hidroxi-4 -metil -4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (481E) Como se describe en el Ejemplo 481D, el compuesto 481CÜ (58 mg, 0.12 mmol) se trató con EtOH (2 mL) conteniendo HCl 12N (40 µL) para producir el producto de aCLohol primario libre del compuesto 481CÜ. 15 mg (0.040 mmol) del aCLohol libre del compuesto 481CÜ reaccionaron con 5-cloro-2-piridinol (10 mg, 0.080 mmol), PPh3 (21 mg, 0.080 mmol) y di-tert-butilazodicarboxilato (18 mg, 0.080 mmol) en THF (0.5 mL) en la forma antes descrita, y el producto resultante se purificó como se describe arriba para producir 8 mg (41%) de compuesto 481E como un sólido blanco. CLAR: 99% a 2.93 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% H3PO4, 4 mL/min., observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 486.2 [M+H]+.
Ejemplo 482 [3aR- (3aa,4P, 53,73,7aa) ] -7- [7- [2- [ (5-Cloro-2- piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -2,1,3 -benzotiadiazol-4-carbonitrilo (482F) y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -7- [7- [2- [(5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -2,1,3 -benzotiadiazol-4 -carboni rilo (482G) 7- (2, 5-Dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il) benzo [1,2,5] tiadiazol-4 -carbonitrilo (482A) Se agregó anhídrido maleico (667 mg, 6.80 mmol) a una solución de compuesto 424A (600 mg, 3.41 mmol) en THF (9 mL) . La mezcla se calentó a 110°C por 10 h. La reacción se concentró bajo presión reducida y se agregó anhídrido acético (1 mL) al residuo. La mezcla de reacción se calentó a 75°C por 30 min. y después se enfrió hasta temperatura ambiente. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 3% acetona/CHCl3 dio 758 mg (2.96 mmol , 67%) del compuesto 482A. CLAR : 97% a 1.98 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 257.01 [ +H]+.
B. (3aa,4 ,7p,7aa) -7- [4- [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -l,3,3a,4,7, 7a-hexahidro-7 -metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 2,1,3-benzotiadiazol-4 -carbonitrilo (482B) Una solución del compuesto 482A (758 mg, 2.96 mmol) y del compuesto 204A (711 mg, 2.96 mmol) en benceno (2 mL) y acetona (2 mL) se calentó a 60°C por 6 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo a 42 °C por 40 min. para dar 1.5 g del compuesto crudo 482B, que se usó directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional .
C. (33a,4ß,5ß,7ß,7¾a) - 7- [7 -[2 -[[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro- 5 -hidroxi-4 -metil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2,1,3-benzotiadiazol-4 -carbonitrilo (482C) Se agregó complejo de borano-dimeti1sulfuro (0.66 mL, 6.96 mmol) a una solución de compuesto 482B (1.15 g, 2.32 mmol) en THF (6 mL) a 0°C. Después de agitar a 0°C por 2 h, la mezcla de reacción se apagó con solución amortiguadora de fosfato (60 mL, pH 7.2) y después se agregó EtOH (35 mL) , H202 (8 mL, 30% acuoso) y THF (4 mL) . La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 h y se extrajo después con CH2C12 (4 x 100 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con 10% Na2S03 acuoso (1 x 160 mL) seguido por salmuera (1 x 160 mL) y se secaron sobre Na2S0 . La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10% acetona/CHCl3 dio 250 mg (0.486 mmol, 21%) de compuesto 482C como un sólido color naranja. CLAR: 85% a 3.70 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. de gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 515.27 [M+H]+.
D. [3aR- (33a,4ß,5ß,7ß,7 a)] -7 - [7 - [2 - [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi- - metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2,1,3- benzotiadiazol-4-carbonitrilo y [3aS- (3acc, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -7- [7- [2- [ [ (1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5- hidroxi -4 -metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2,1,3- benzotiadiazol-4-carbonitrilo (482DÍ y 482DÜ) Los compuestos racémicos 482C se separaron por CLAR quiral preparativa en fase normal usando una columna Chiracel (5 cm x 50 cm) , eluyendo con 10% EtOH en hexano a 50 mL/min. para dar el compuesto de elución más rápida 482DÍ (CLAR quiral: 11.89 min . ; columna CHIRACLEL OD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 12% EtOH en hexano a 2 mL/min.) y el compuesto de elución más lenta 482DÜ (CLAR quiral: 16.10 min.; columna CHIRACLEL OD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 12% EtOH en hexano a 2 mL/min.) . La conformación absoluta de los compuestos 482Di y 482DÜ no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 482Di se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 482DÜ como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 482Di se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 482DÜ se designan en la presente por tener una configuración "S" .
E. [3aR- (3aa,4p, 5p,7p,7aa) ] -7- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2-hidroxietil) -4 -metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H-isoindol-2 - il] -2 , 1, 3 -benzotiadiazol-4-carbonitrilo (482EÍ) y [3aR- (3aa,4p,5p,7p,7act) ] -7- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol-2 - il] -2,1,3-benzotiadiazol-4-carbonitrilo (482EÜ) El compuesto 482DÍ (91 mg, 0.18 mmol) se disolvió en 2% de HCl 12N/EtOH (3.0 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 min. Se agregó NaHC03 saturado frío a la mezcla hasta que se hizo básica (pH 8) . La reacción se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas se lavaron después con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 73 mg (0.18 mmol, 100%) del compuesto 482EÍ como un sólido amarillo que no se purificó adicionalmente . CLAR: 95% a 1.73 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. de gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 401.13 [M+H] + . El compuesto 482DÜ (90 mg, 0.17 mmol) se disolvió en 2% de HC1 12N/EtOH (3.0 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 min. Se agregó NaHCC>3 saturado frío a la mezcla hasta que se hizo básica (pH 8) . La reacción se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas después se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 70 mg (0.17 mmol, 100%) del compuesto 482EÜ como un sólido color naranja que no se purificó adicionalmente . CLAR : 90% a 1.74 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. de gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 401.14 [M+H]+.
F. [3aR- (33a,4ß,5ß,7ß,73a) ] -7- [7- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4 -metil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il] -2, 1, 3-benzotiadiazol-4-carbonitrilo (482F) Se agregó DBAD (21 mg, 0.090 mmol) a una solución de PPh3 (24 mg, 0.090 mmol) en THF (0.4 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 5-cloro-2 -piridinol (12 mg, 0.090 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. El compuesto 482Ei (18 mg, 0.045 mmol) se agregó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La reacción después se concentró bajo presión reducida. La purificación por CCD preparativa eluyendo con 20% acetona/CHCl2 dio 12 mg (0.023 mmol , 52%) de compuesto 482F. CLAR: 98% a 3.15 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. de gradiente con 0.2% H3PO4, observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 512.11 [M+H]+.
G. [3aS- (3aa,4p,5p,7 ,7aa) ] -7- [7- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2, 1, 3 -benzotiadiazol-4-carbonitrilo (482G) Se agregó DBAD (21 mg, 0.090 mmol) a una solución de PPh3 (24 mg, 0.090 mmol) en THF (0.4 mL) . Después de agitar por 10 min., se agregó 5-cloro-2-piridinol (12 mg, 0.090 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 min. adicionales. Se agregó el compuesto 482EÜ (18 mg, 0.045 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La reacción después se concentró bajo presión reducida. La purificación por CCD preparativa eluyendo con 20% acetona/CHCl3 dio 11 mg (0.021 mmol, 47.0%) del conpuesto 482G. CLAR: 98% a 3.15 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 pt?, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. de gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 512.15 [M+H]+.
Ejemplo 483 Ester de [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7act) ] -2- [4-ciano-3- ( trifluorometil) fenil] octahidro-4 , 7 -dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 - epoxi-lH-isoindol-5-ilo del ácido (1S, 4R) -4, 7, 7-Trimetil-3- oxo-2 -oxabiciclo [2,2,1] heptano- 1-carboxílico, (483 ) A una solución del compuesto 471DÍ (25 mg, 0.066 mmol) en 0.25 mL de CH2Cl2 a temperatura ambiente y bajo argón, se agregó una solución de ácido ( 1S) - ( - ) -canfánico (20 mg, 0.10 mmol) en 0.2 mL de CH2C12. Una solución de DCC (20 mg, 0.10 mmol) en 0.25 mL de CH2C12 se agregó después seguida por DMAP (4.0 mg, 0.034 mmol) . Se obtuvo inmediatamente un precipitado blanco, y se continuó la agitación durante la noche. El precipitado se separó por filtración y el filtrado se diluyó con EtOAc. La solución resultante se lavó con HC1 1N, salmuera, NaHC03 saturado y salmuera, después se secó sobre MgS04. La concentración in vacuo resultó en un residuo aceitoso viscoso. El material crudo se sometió a cromatografía instantánea sobre una columna de 20 cm3 de gel de sílice eluyendo con 50% EtOAc en hexanos hasta 32 mg de un sólido blanco. La recristalización de CH2Cl2/hexano produjo 20 mg (86%) del compuesto 483 como cristales grandes. Este material se sometió a estudios de difracción de cristal en rayos X, para obtener la estereoquímica exacta del . compuesto 471Di como se hace referencia a la estereoquímica fija conocida del apéndice del ácido ( 1S) - ( - ) -canfánico . CLEM: 100% a 1.9 min. (tiempo de retención) (Columna Phenomenex Luna C18, 2 x 30 mm, 0-100% acetonitrilo acuoso durante -3 min. conteniendo 10 mM NH40Ac a 1 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 559.3 [M-H] " .
Ejemplo 484 (3aa,43,53,73,7aa) -5- [7- [2- [ [(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4 metil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 8- quinolincarbonitrilo (484) A un fondo redondo de 25 mL, seco de tres cuellos, se agregó TiCl2Cp2 (0.500 g, 2.01 mmol) y THF (4 mL) para dar una solución rojo profundo. Se agregó polvo de zinc activado (0.392 g, 6 mmol, preparado como se describe en Fieser y Fieser, Volumen 1, p. 1276) y la suspensión se agitó por 30 min. , tiempo durante el cual cambió el color de rojo ladrillo a verde esmeralda. El polvo de zinc sin reaccionar se dejo asentar. En un matraz de fondo redondo de 25 mL de tres cuellos, separado, se agregó el compuesto 464F (0.202 g, 0.399 mmol) , THF (1 mL) y 1, 4 -ciclohexadieno (0.380 mL, 4.02 mmol). Se agregó el reactivo Ti(III) (0.90 mL, 0.45 mmol) por medio de un embudo de adición a un tapón de algodón al fondo enjuagando con THF (1 mL) . Después de 1 h, la CLAR mostró una conversión del -50% y se agregaron 0.9 mL adicionales (0.45 mmol) del reactivo de titanio. Después de 1 h, la CLAR mostró un consumo completo del material de partida. Se agregó cloruro de amonio saturado (5 mL) , seguido por 10 mL de EtOAc . La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera (5 mL) , se secó sobre Na2S04, y se concentró in vacuo para dar el producto crudo como un semi-sólido color naranja. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 50% CH2Cl2/48% EtOAc/2% MeOH para dar 0.10 g (59%) de compuesto 484 como una espuma amarillo claro. CLAR: 91% a 3.65 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 508.27 [M+H]+.
Ejemplo 485 [3aR- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ]-5-[7-[2-[[(l,l- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro- 5 - idroxi -4 - metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8- uinolincarbonitrilo (485i) y [3aS- (3act, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- [7- [2- [ [ (1, 1 -Dimetiletil] dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5- hidroxi-4-metil-l 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8- quinolincarbonitrilo (485ii) El compuesto racémico 484, se separó en sus antípodos individuales por CLAR quiral preparativa en fase normal. Una columna de ChiraCLel OD (50 x 500 mm) se usó con una relación de flujo de 50 mL/min. (20% EtOH/hexanos) observando a 220 nm. El antípodo de elución más rápida, el compuesto 485i tuvo un tiempo de retención de 35.8 min. y el antípodo más lento, el compuesto 485ii tuvo un tiempo de retención de 49.7 min. Los antípodos se aislaron como sólidos blancos después de la separación. Compuesto 485i: CLAR: 100% a 4.980 min. (tiempo de retención) (columna Chiracel OD (5 x 50 mm) , 2.0 mL/min., 20% EtOH/hexanos. observando a 220 nm) , >99% ee . EM (ES) : m/z 508.23 [M+H]+. Compuesto 485ii: CLAR: 98.6% a 7.357 min. (tiempo de retención) (columna Chiracel OD (5 x 50 mm) , 2.0 mL/min., 20% EtOH/hexanos , observando a 220 nm) , 97.2% ee . EM (ES) : m/z 508.21 [M+H]+. La conformación absoluta de los compuestos 485i y 485ii no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 485i se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 485ii como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 485i se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 485ii se designan en la presente por tener una configuración "S" .
Ejemplo 486 [3aR- (3aa,4P,53,73,7aa) ] -5- [Octahidro-5-hidroxi-7 - (2- hidroxietil) -4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -8- quinolincarbonitrilo (486i) y [3aS- (3act,4P, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -4-metil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2 -il] -S-quinolincarbonitrilo (486ii) Los compuestos 485i y 485ii se convirtieron a los productos de alcohol primario libre, como se describen en el Ejemplo 466 para dar los compuestos 486i y 486ii como sólidos blancos.
Compuesto 486i: CLAR: 98% a 1.650 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 394.21 [M+H]+. Compuesto 486ii: CLAR: 98% a 1.663 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 394.20 [M+H]+.
Ejemplo 487 [3aR- (3aa,43,73,7aa)] -5- [7- [2- [(5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (487) Se agregó el DBAD (0.088 g, 0.38 mmol) a una solución de trifenilfosfina (0.100 g, 0.382 mmol) en THF (1.0 mL) a 22°C y se agitó por 10 min. Se agregó 5-cloro-2-piridinol (0.049 g, 0.38 mmol) como un sólido y la agitación continuó por 10 min. La mezcla de reacción se agregó al compuesto 486i (0.100 g, 0.250 mmol) en THF (1.0 mL) . Después de agitar por 3 h, la reacción se concentró in vacuo y fue purificada por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20-50% acetona/cloroformo para dar 0.080 g (63%) de compuesto 487 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.023 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 505.16 [M+H]+.
Ejemplo 488 [3aS- (3aa,4p,7P,7aa) ] -5- [7- [2- [ (5 -Cloro-2 -piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi -4 -metil -1, 3 -dioxo-4 , 7 - epoxi - 2H- isoindol - 2 -il] - 8-quinolincarbonitrilo (488) Se agregó DBAD (0.088 g, 0.38 mmol) a una solución de trifenilfosfina (0.100 g, 0.382 mol) en THF (1.0 mL) a 22°C y se agitó por 10 min. Se agregó 5 -Cloro-2 -piridinol (0.049 g, 0.38 mmol) como un sólido y se continuó la agitación por 10 min. La mezcla de reacción se agregó al compuesto 486ii (0.100 g( 0.250 mmol) en THF (1.0 mL) . Después de agitar por 3 h, la reacción se concentró in vacuo y fue purificada por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 10-50% acetona/cloroformo para dar 0.080 g (63%) del compuesto 488 como un sólido blanco. CLAR: 95% a 3.030 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 505.12 [M+H] + .
Ejemplo 489 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß,7ßa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1,3-dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il) - 2 -yodobenzonitrilo (489GÍ) y [3aS- (3aa, 4ß , 5ß, 7ß , 7aa) ] -4- (Octahidro- 5-hidroxi- , 7 -dimetil- 1 , 3 -dioxo- , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 - il) -2 - yodobenzonitrilo (489GÜ) A. 2 -yodo-4 -nitro- fenilamina (489A) A una mezcla de yodo (46.0 g, 0.180 mol) y sulfato de plata (56.3 g, 0.180 mol) en etanol anhidro (500 mL) se agregó 4 -nitroanilina (25.0 g, 0.180 mol) y la mezcla de reacción se agitó por 5 h a temperatura ambiente. La solución amarilla resultante se filtró y se concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en 400 mL de acetato de etilo. se lavó con una solución 1N de hidróxido de sodio (2 x 250 mL) , se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró in vacuo para resultar en 45.5 (95%) del compuesto 489A, como un sólido amarillo. CLAR : 98% a 2.837 min. (tiempo de retención) (columna Sh madzu VP-ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% de ácido trifluoroacético , 4 mL/min., observando a 220 nm) . B (ES) : m/z 265.08 [ +H] +.
B. 2 -yodo-4-nitro-benzonitrilo (489B) El compuesto 489A (10.0 g, 37.9 mmol) se disolvió en una mezcla de 20 mL de HCl 12N/40 mL agua y después se enfrió hasta 0°C. A esta mezcla se le agregó lentamente una solución de nitrito de sodio (5.23 g, 75.8 mmol) en 10 mL de agua mientras se mantenía la temperatura de reacción a 0°C. La reacción se agitó por 1 h a 0°C y después se agregó lentamente a una solución mecánicamente agitada de cianuro cuproso recientemente preparado (3.0 g, 33 mmol, preparado como se describe en Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry, 5a edición, pág . 429) y cianuro de potasio (6.30 g, 96.7 mmol) en agua (50 mL) a 50°C. La reacción se agitó por 1 h a 50°C, se enfrió hasta 25°C y se extrajo con cloruro de metileno (2 x 200 mL) . La porción orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró in vacuo. El residuo resultante fue purificado por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 4:1 hexano : acetato de etilo para resultar 4.6 g (44%) de compuesto 489B como un sólido color naranja. CLAR: 98% a 2.647 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS, 4.6 x 50 rnm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) .
C. 4 -Amino-2 -yodo-benzonitrilo (489C) Una mezcla del compuesto 489B (4.60 g, 16.8 mmol), tetrahidrofurano (75 mL) , etanol (100 mL) , solución de cloruro de amonio (1.51 g, 28.3 mmol, disuelta en 100 mL de agua), y fierro (malla 325, 4.21 g, 75.4 mmol) se agitó mecánicamente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo por 3 h o hasta que se había consumido todo el material de partida. La mezcla de reacción se enfrió, se filtró a través de Celite y se concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en acetato de etilo (200 mL) y se lavó con hidróxido de sodio IN (2 x 150 mL) , se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró in vacuo para producir 3.97 g (97%) de compuesto 489C como un sólido oscuro. CLAR: 95% a 1.877 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 245.13 [ +H]+.
D. 4- (2, 5-Dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il) -2 -yodo-benzonitrilo El compuesto 489C (3.97 g, 16.3 mmol) y anhídrido maleico (2.41 g, 24.4 mmol) se pusieron a reflujo en ácido acético glacial (15 mL) por 5 h. La reacción se enfrió hasta 25°C y después se vació sobre hielo (100 mL) . El precipitado resultante se aisló por filtración y se lavó con agua (2 x 25 mL) y se secó bajo vacío para resultar 4.78 g (90%) de compuesto 489D como un sólido café claro. CLAR: 82% a 2.68 min. (tiempo de retención) columna C Shimadzu VP-ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% de ácido trifluoroacético, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 325.04 [M+H]+.
E. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 , 7 -dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -yodobenzonitrilo (489E) Una solución de compuesto 489D (0.40 g, 1.2 mmol) en 2 , 5-dimetilfurano (2.0 g) se agitó a 75°C por 2 h. La reacción se decantó de cualesquiera materiales insolubles y los materiales en forma de partículas se lavaron con éter de dietilo. El decantado combinado y los lavados con éter se combinaron y se concentraron in vacuo mientras se mantenía una temperatura de <50°C. El residuo resultante se trituró con hexanos para producir 0.56 g (94% con base en la pureza) del compuesto 489E como un sólido café claro. Debido a la propensión del producto para someterse a una reacción retro-Diels-Alder, no se intentó purificación adicional. CLAR: 85% a 3.01 min. (tiempo de retención) (columna Shimadzu VP-ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% de ácido trifluoroacético, 4 mL/min. , observando a 254 nm) . EM (ES): m/z 421.05 [M+H]+.
F . (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7 -dimetil- 1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -yodobenzonitrilo (489F) A una solución del compuesto 489E (0.40 g, 0.95 mmol) en THF seco (5 mL) se enfrió hasta 0°C, se agregó complejo de borano-dimetilsulfuro (0.2 mL, 1.9 mmol, 10 M) y la solución de reacción se dejó calentar hasta 25°C. Después de agitar por 30 min. , la reacción se enfrió hasta 0°C y se agregó lentamente una solución amortiguadora de fosfato de un pH de 7 (6.6 mL) , seguida por la adición de peróxido de hidrógeno al 30% (0.7 mL) . La reacción se agitó a 25°C por 1 h y después se dividió entre acetato de etilo (100 mL) y agua (100 mL) . Se aisló la porción orgánica, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó por gel de sílice eluyendo con 3:1 cloruro de metileno : acetato de etilo para resultar 0.11 g (25%) de compuesto 489F como un sólido blanco. CLAR: 99% a 2.527 min. (tiempo de retención) (columna Shimadzu VP-ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% de ácido trifluoroacético, 4 mL/min. , observando a 220 nra). EM (ES) : m/z 439.09 [M+H]+.
G. [3aR- (3aa,4p,5p,7P,7aa)] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2-il) - 2 -yodobenzonitrilo (489Gi) y [3aS- (3a<x, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4-(Octahidro- 5-hidroxi-4, 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-yodobenzonitrilo (489GÜ) Los compuestos racémicos 489F, se separaron en sus antípodos individuales por CLAR quiral preparativa en fase normal. Se usó una columna ChiraCLel AD (50 x 500 mm) con una relación de flujo de 50 mL/rnin. (70% Isopropanol/hexanos) observando a 220 nm. El antípodo de elución más rápida, compuesto 489GÍ tuvo un tiempo de retención de 4.587 min. y el antípodo de elución más lenta, compuesto 489GÜ tuvo un tiempo de retención de 6.496 min. Ambos antípodos se aislaron como sólidos blancos después de la separación. La conformación absoluta de los compuestos 489GÍ y 489GÜ no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 489Gi se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 489GÜ como que tiene una configuración "S" .
Ejemplo 490 (3aa,4p,5P,73,7aa) -4- [7- [2- [ (5 -Cloro- 2 - piridinil) oxi] etil] octahidro-5-metoxi-4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7 - epoxi-2H-i3oindol-2-il] - 1-naf alencarbonitrilo (490B) A. (3aa,4ß,7ß, 7aa) -4- [7- [2- [ (5 -Cloro- 2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (490A) Una mezcla de trifenilfosfina (166 mg, 0.633 mmol) y DBAD (146 mg, 0.633 mmol) se disolvió en THF (4 mL) bajo nitrógeno y la solución amarilla se agitó por 10 min. Se agregó 5 -cloro-piridin-2 -ol (82 mg, 0.63 mmol) y la mezcla se agitó por 5 min. después de lo cual se agregó el compuesto 242B (165 mg, 0.327 mmol) . La mezcla se agitó por 12 h y el solvente se separó bajo una corriente de nitrógeno. El aceite resultante se adsorbió sobre gel de sílice (1 g) y fue purificado por cromatografía instantánea sobre un cartucho de sílice para cromatografía Jones (5 g/25 mL) eluyendo con un gradiente de 0-50% acetona en cloroformo para dar 79.4 mg (47%) de compuesto 490A como una espuma blanca. CLAR: 99% a 3.48 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 504.17 [M+H]+.
B. (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [7- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi ] etil] octahidro- 5 -meto i - 4 -metil- 1,3-dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naf talencarboni trilo (490B) El compuesto 490A (24 mg, 0.048 mmol) se secó en un vial de 1 dracma con una barra de agitación magnética. Se agregaron óxido de plata (57 mg, 0.24 mmol) , CH3CN (500 µ?;) y yodometano (20 µ?,, 0.32 mmol) bajo nitrógeno y la mezcla se colocó en un bloque calentado (82°C) y se agitó por 14 h. La mezcla se hizo café después de 20 min. , después verde. La mezcla se filtró a través de Celite y Florisil y fue purificada por CLAR preparativa de fase inversa (columna Shimadzu Shimpac VP ODS, 20 x 50 mm, 0-100% metanol acuoso durante 6 min. conteniendo 0.1% TFA, observando a 220 nm) para dar 6.9 mg (28%) de compuesto 490B como una espuma blanca. CLAR: 99% a 3.64 min., 3.76 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 518.19 [M+H]+.
Ejemplo 491 [3aR- (3aa,4P, 5P,7P,7aa) ] -4- [7- [2- [(5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-metoxi-4-metil- 1, 3-dioxo-4 , 7 - epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo, (491Ci) y [3aR- (3aa,4P, 53,7p,7aa) ] -4- [7- [2- (5-Cloro-2-oxo-l (2H) - piridinil) etil] oetahidro-5-metoxi-4 -metil-1, 3-dioxo-4 , 7 - epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (491CÜ) A. (3acc,4p, 5ß,7ß,73(? ) -4- [7- [2- [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] octahidro-5-metoxi-4-metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 1-naftalencarbonitrilo El compuesto 243CÜ (142 mg, 0.280 mmol) se secó en un vial de 1 dracma equipado con una barra de agitación magnética y una tapa forrada con Teflón. Se agregó óxido de plata (324 mg, 1.40 mmol), CH3C (3 mL) y yodometano (90 µ?., 1.4 mmol) bajo nitrógeno y la mezcla se colocó en un bloque caliente (82 °C) . La reacción se agitó durante la noche, después se filtró a través de Celite y se concentró in vacuo. El residuo resultante fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% acetona en cloroformo para dar 62.2 mg (43%) de compuesto 491A. CLAR: 99% a 3.87 y 3.95 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 521.37 [M+H]+.
B. 3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro-7 - (2 -hidroxietil) -5-metoxi- 4-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitril El compuesto 491A (62.2 g, 0.119 mmol) se disolvió en etanol (2 mL) y se agregó ácido clorhídrico 12 N (50 uL) y la mezcla se agitó por 10 min. El solvente se eliminó in vacuo y el producto fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-20% acetona en cloroformo para dar 40.3 mg (83%) de compuesto 491B como un sólido blanco. CIAR: 96% a 2.30 y 2.45 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4' mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 407.22 [M+H]+.
C. [3aR- (3aa,4P,5p,7 ,7aa) ] -4- [7- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-5-metoxi-4-metil-l/ 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo, enantiómero de elución lenta (491CÍ) y [3aR- (3aa, 4ß, 5ß , 7ß, 7aa) ] -4- [7 - [2 -(5-Cloro-2-oxo-l (2H) -piridinil) etil] octahidro-5-metoxi-4-metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol-2 - il] - 1-naftalencarbonitrilo (491CÜ) Se disolvieron trifenilfosfina (40 mg, 0.15 mmol) y DBAD (35 mg, 0.15 mmol) en THF bajo nitrógeno y se agitó 10 min. Se agregó 5-Cloropiridin-2 -ol (20 mg, 0.15 mmol) y la mezcla se agitó por 5 min. Se agregó el compuesto 491B (40.3 mg, 0.0991 mmol) y la mezcla resultante se agitó por 2.5 h. El solvente se concentró in vacuo y el residuo resultante se purificó por cromatografía sobre Florisil (1.3 g) eluyendo con un gradiente de 0-40% acetona en cloroformo para dar 140 mg de una mezcla de 491CÍ, 491CÜ y DBAD. El aceite se suspendió en diclorometano (3 mL) y se agregó ácido trifluoroacetico (2 mL) . Después de 45 min., el solvente se separó in vacuo y el aceite resultante se dividió entre bicarbonato de sodio saturado (20 mL) y EtOAc (20 mL) . La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa (columna Shimadzu Shimpac VP ODS, 20 x 50 mm, 0-100% metanol acuoso durante 6 min. conteniendo 0.1% TFA, observando a 220 nm) dio 22 mg (44%) de compuesto 491CÍ y 4.6 mg (9% rendimiento) de compuesto 491CÜ. Compuesto 491CÍ: CLAR: 95% a 3.50 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 518.28 [M+H]+. Compuesto 491CÜ: CLAR: 85% a 2.94 y 3.07 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nra) . EM (ES) : m/z 518.27 [M+H]+.
Ejemplo 492 [3aR- (3aa,43, 5ß,73, 7aa) ] -4- [5- (Acetiloxi) -7- [2- [(5-cloro-2- Piridinil) oxi] etil] octahidro-4 -metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo, enantiómero de elución lenta (492) Se agregó cloruro de acetilo (25 µL, 0.35 mmol) a una solución de compuesto 490A (30 mg, 0.060 mmol) en piridina (600 µ??) . La mezcla se agitó durante la noche, diluida con ácido clorhídrico (0.5 N, 10 mL) , se extrajo con cloroformo (3 x 7 mL) . Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con agua (3 4 mL) y salmuera (4 mL) , se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% acetona en cloroformo dio 17 mg (53%) de compuesto 492. CLAR: 99% a 3.48 y 3.63 min. ( atropisómeros , tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 546.15 [M+H]+.
Ejemplo 493 Ester de [3aR- (3aot, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -7- [2 - [ (5-cloro-2- piridinil) oxi] etil] -2 - (4-ciano-l-naftalenil) octahidro-4- metil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-lH-isoindol-5-ilo del ácido dimetiCLarbámico, enantiómero de elución lenta (493) A una solución de compuesto 490A (30 mg, 0.060 mmol) en piridina (300 µ? ) se agregó cloruro de dimetiCLarbamilo (28 µ?, 0.30 mmol) y la mezcla se agitó a 25°C por 12 h. Se agregó una porción adicional de cloruro de dimetiCLarbamoilo (28 µ].·, 0.30 mmol) y la reacción se calentó a 70°C por 12 h. Se agregaron una tercera porción de cloruro de dimetiCLarbamoilo (28 µ?, 0.30 mmol) así como piridina (300 µ?) y la mezcla se agitó a 100°C por 24 h. La solución se diluyó con HC1 0.5 N (10 mL) y se extrajo con cloroformo (3 x 7 mL) . Las capas orgánicas se combinaron y se lavaron con agua (3 x 4 mL) y salmuera (4 mL) , se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentró in vacuo. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa (columna Shimadzu Shimpac VP ODS, 20 x 50 mm, 0-100% metanol acuoso durante 6 min. conteniendo 0.1% TFA, observando a 220 nm) dio 15.7 mg (46%) de compuesto 493 como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.52 min. y 3.69 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 575.10 [M+H]+.
Ejemplo 494 [3aR- (3aa,43,5p,7p,7aa) 3 -4- [7- [2- [ (5-Cloro-2- piridinil) oxi] etil] octahidro-4 -metil- 5- [ [ (metilamino) carbonil] oxi] -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il] -1-naftalencarbonitrilo, enantiómero de elución lenta Se agregó isocianato de metilo (36 µ?-., 0.60 mmol) a una solución de compuesto 490A (30 mg, 0.060 mmol) en dioxano (600 µ???) y se calentó a 80°C durante la noche. Se agregó una porción adicional de isocianato de metilo (36 µ??, 0.60 mmol) y la mezcla se calentó a 100 °C por 24 h.. Se agregó una tercera porción de isocianato de metilo (36 µ?.., 0.60 mmol) y la mezcla se agitó a 100°C por 24 h. El solvente se separó in vacuo y el aceite fue purificado por CLAR preparativa de fase inversa (columna Shimadzu Shimpac VP ODS, 20 x 50 mm, 0-100% metanol acuoso durante 6 min. conteniendo 0.1% TFA, observando a 220 nm) para dar 20 mg (59%) de compuesto 494 como un vidrio transparente. CLAR: 99% a 3.33 min. y 3.42 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 561.08 [M+H]+.
Ejemplo 495 [3aR(3aa^, 5p,7P,7aot) ] -4- [Octahidro-4 - (2 -hidroxietil) -7- metil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] - 1- naftalencarbonitrilo (495Ai) y [3aS (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -7 -metil -1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (495B) A. [3aS- (33a,4ß,5ß, 7ß,73a) ] -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -7-metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (495AÍ) y (3ßa,4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [2-(Acetiloxi) etil] -2- (4-ciano-l-naf alenil) hexahidro-7 -metil -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (495AÜ) El mmol) se disolvió en THF anhidro (500 mL) en una botella de 10 L. Se agregó éter de metil tert-butilo (4.86 L) , acetato de vinilo (216 mL) y se agregó Lipasa (108 g, [Sigma, Lipasa tipo II, cruda de páncreas porcino, producto No. L3126, Lote No. 021K1445] ) . La mezcla de reacción se agitó por 24 h a temperatura ambiente y la reacción se observó por CLAR usando las siguientes condiciones: Una muestra de 200 µL de la mezcla de reacción se filtró, se secó bajo una corriente de nitrógeno y se sometió a un análisis CLAR (columna YMC ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min.-, observando a 220 nm) . La reacción se detuvo después de que el 60% del material de partida se había consumido. La enzima se separó por filtración y el filtrado se concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en CHCI3 y se absorbió sobre gel de sílice. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 1-5% MeOH en CHC13 dio 3.78 g (37%) de compuesto 495AÍ y 6.84 g (60%) de compuesto 495AÜ, ambos como sólidos blancos. Compuesto 495AÍ: CLAR: 99% a 3.47 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 377.09 [M+H]+. CLAR quiral preparativa en fase normal: 37.8 min. (tiempo de retención) (columna chiralpak AD, 4.6 x 250 mm, 10 mieras, 40°C, elución isocrática con 8% EtOH/MeOH (1:1) en heptano, observando a 220 nm) , 99% ee . Compuesto 495AÜ: CLAR: 99% a 2.92 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS . 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. [3aR- (3aa,4P,5 ,7p,7aa)] -4- [Octahidro-4- (2 -hidroxietil) -7-metil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (495B) Se agregó lipasa (134 g, [Sigma, Lipasa tipo II, cruda de páncreas de porcino, producto No. L3126, Lote No. 021K1445] ) a 3.5 L de agua desionizada. La mezcla se centrifugó para eliminar la mayoría del material suspendido. El pH del sobrenadante se ajustó a 7.06 con hidróxido de sodio 1N y se agregó una solución de compuesto 495AÜ (8.04 g, 19.2 mmol) en TBME (1.5 L) . El pH se incrementó hasta 7.16 por adición de hidróxido de sodio 1N. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente y se observó por CLAR analítica como se describe en el Ejemplo 495A. Después de 30 min., La reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se extrajo con acetato de etilo (4 x 1 L) hasta que la CLAR mostró que se había eliminado todo el aCLohol . Las fracciones orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice (columna Jones, 50 g) usando un gradiente de 0-70% acetona en cloroformo seguida por 5% MeOH en cloroformo d-io 2.44 g (33%) del compuesto 495B como un sólido blanco. CLAR: 99% a 2.89 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 377.09 [M+H]+. CLAR quiral preparativa en fase normal: 11.1 min. (tiempo de retención) (columna chiralpak AD, 4.6 x 250 mm, 10 mieras, 40°C, elución isocrática con 8% EtOH/MeOH (1:1) en heptano, observando a 220 nm) , 95% ee .
Ejemplo 496 [3aR- (3aa,4P,73,7aa)3 -4- [4- [2- [ (5-Cloro-2- piridinil) oxi] etil] octahidro-7 -metil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (496BÍ) y [3aR- (3aa,4p,7P,7aa)] -4- [4- [2- (5-Cloro-2-oxo-l (2H) - piridinil ) etil] octahidro-7 -metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (496BÜ) A. Preparación de un soporte sólido (496A) = soporte sólido de poliestireno Una mezcla de CH2CI2 anhidro (10 mL) y piridina (10 mL) se agregó bajo nitrógeno al clorosulfonil poliestireno (Argonaut, 1.70 mmol/g, 3.0 g, 5.1 mmol) y el compuesto 495AÍ (3.78 g, 10.0 mmol) en un tubo de síntesis de polímeros. La mezcla cambió hacia un gel de color amarillo y se agitó vigorosamente (agitador de acción con la muñeca por 4 h.). Todos los solventes se absorbieron por la resina y se observó seca. La resina se lavó en porciones con CH2C12 (200 mL) y los lavados se combinaron y se extrajeron con 200 mL de HCl 1N. La fracción de HCl es volvió a extraer con acetato de etilo (200 mL) . Las fracciones orgánicas se combinaron y extrajeron con agua (50 mL) , salmuera (50 mL) y las fracciones orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron para dar 2.1 g de compuesto enlazado a la resina 496A (89% cargado con base en la recuperación del compuesto no enlazado 495Ai) . La resina se lavó consecutivamente con DMF (5X) , DMF: agua (3:1, 5X) , THF (3X) y C¾Cl2 (3X) (-30 mL cada lavado) . La resina se secó in vacuo por 1 h para dar 5.35 g de resina. La resina estaba todavía húmeda y se volvió a tratar con el aCLohol . El proceso de carga antes descrito se repitió usando el compuesto recuperado sin reaccionar 495AÍ del procedimiento anterior. El compuesto recuperado 495AÍ (2.1 g, 5.6 mmol) y diclorometano anhidro (15 iriL) y piridina (15 mL) y la resina se combinaron y sometieron a las condiciones de reacción antes descritas. La resina resultante se lavó como se describe previamente y se secó in vacuo durante la noche para dar 4.49 g de resina (87% cargada, con base en el compuesto no enlazado recuperado 495AÍ) . El aCLohol de partida se recuperó de la mezcla de diclorometano ¡piridina como se describe previamente (2.04 g de sólido blanco, lo que sugeriría una carga del 92% con base en el aCLohol recuperado) . El incremento en peso de la resina es usualmente más preciso para evaluación de la carga. La carga de resina se caCLuló que era 0.87 (determinada por el incremento en peso de la resina) X 1.08 mmol/g (caCLulado como carga al 100%) = 0.94 mmol/g. La resina se usó como estaba para la siguiente etapa.
B. [3aR- (3aa,4 ,73,7aa) ] -4- [4- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-7 -metil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (496BÍ) y [3aR-(3aa,4p,7p,7aa)] -4- [4- [2- (5-Cloro-2-oxo-l (2H) -piridinil) etil] octahidro-7-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (496BÜ) El siguiente procedimiento describe un proceso general para el cual las configuraciones de los compuestos de Fórmula I se pueden elaborar usando métodos automatizados. La información adicional sobre tales métodos automatizados sintéticos, se puede encontrar en el Ejemplo 8. Los compuestos 496BÍ y 496BÜ son un ejemplo de compuestos elaborados por tal procedimiento. Para los compuestos 496BÍ y 496BÜ, el 4 -cloropiridinol representa el reactivo nucleofilo. Una definición más amplia del término nucleofilo, está contenida en el cuerpo de este documento, y es bien entendida por alguien experto en la técnica. Se usó un MiniReactor Bohdan equipado con un bloque de calentamiento/enf iamiento con viales de 0.5 dracmas apilados uno sobre el otro para aCLanzar el mismo nivel que los tubos del reactor. Se midió la resina (compuesto 496A) en los viales individuales al usar una vez cada placa del módulo de transferencia de resina Bohdan "10 mg" y "20 mg" . Los pesos de resina suministrados estaban en el intervalo desde 17-23 mg (0.016-0.022 mmol) . Se agregó carbonato de cesio usando la placa Bohdan de "20 mg" que suministraba -57-60 mg (0.17-0.18 mmol) . Los nucleófilos se pesaron sobre viales de 1 Dracma y se diluyeron en THF hasta 0.06 M usando un manipulador de líquidos de ocho canales Tecan. Las soluciones resultantes (250 µL, 0.015 mmol) se agregaron manualmente por medio de una micro-pipeta a cada uno de los viales de reacción conteniendo resina, y la configuración resultante de los viales de reacción se colocó en el reactor Bohdan. Cuando los nucleófilos son aminas, se agregan ~13 µ?-? de diisopropiletilamina a la solución de THF de la amina. Los viales se taparon (cubiertos con teflón) y las reacciones se calentaron con agitación orbital (carrera corta 500 rpm) a 70°C por 24 h. Las reacciones se enfriaron hasta 25°C y se agregó 1 mL de una mezcla de heptano y acetato de etilo (1:1) seguida por 0.5 mL de agua. La capa orgánica se extrajo manualmente y se transfirió individualmente a un tubo de bloque de síntesis conteniendo sulfato de magnesio (-150 mg) . La configuración de los tubos del bloque de síntesis se filtró simultáneamente y los filtrados se recolectaron individualmente en microtubos (bloque de 96 pozos) . La capa acuosa se volvió a extraer con 1 mL de una mezcla de heptano y acetato de etilo (1:1), la capa orgánica se filtró como se describe arriba y el filtrado se recolectó individualmente como se describe arriba en los microtubos existentes. El análisis de la configuración de los compuestos preparados por el procedimiento anterior, se llevó a cabo usando el siguiente método automatizado. Una porción de 120 µ? de cada una de las reacciones anteriores (filtrados) formó alícuotas en dos bloques de 96 pozos profundos para el análisis. El solvente se concentró in vacuo y las placas se volvieron a diluir con metanol (500 µL) . Se analizó una placa por CLEM (columna Phenomenex ODS, 4.6 x 50 mm, 4 mL/min. , gradiente 0% A hasta 100% B (A: 90% agua, 10% MeOH, 0.1% TFA; B : A: 90% MeOH, 10% agua. 0.1% TFA) y la otra por RM de flujo (Varían Inova-500 MHz, MeOH, secuencia de supresión de pulsos de solvente WET, 128 barridos, sonda de celda de flujo de 60 µ?) . Los criterios para la entrega fueron: ión molecular correcto presente y pureza por CLAR/RMN >70%. Los compuestos que no reunieron los criterios deseados se purificaron por CLAR preparativa de fase inversa (columna Shimadzu UP-ODS, 20 x 50 mm, 20 mL/min., gradiente 40% B hasta 100% B en 6 min. con retención de 2 min. (A: 90% agua, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% agua, 0.1% TFA) . La purificación por CLAR produjo 3.4 mg (21%) de compuesto 496BÍ como un sólido vidrioso y 6.8 mg (41%) de compuesto 496BÜ como un sólido vidrioso. Compuesto 496BÍ: CLAR: 96% a 3.47 min. y 3.62 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna Phenominex ODS, 4.6 x 50 mm, 4 mL/min., gradiente 0% A hasta 100% B (A: 90% agua, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% agua, 0.1% TFA) , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 487.94 [M+H]+. Compuesto 496BÜ: CLAR : 96% a 3.00 min. y 3.12 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (columna Phenominex ODS, 4.6 x 50 mm, 4 mL/min., gradiente 0% A hasta 100% B (A: 90% agua, 10% MeOH, 0.1% TFA; B: A: 90% MeOH, 10% agua, 0.1% TFA) , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 488.12 [ +H]+. Compuestos adicionales hechos por este procedimiento se establecen en la Tabla 17.
Ejemplo 497 (33a,4ß,5ß,7ß,73a) -Hexahidro-4,7-dimetil-2- (7-metil-6- benzotiazolil) -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l , 3 (2H) -diona (497B) A. 6 -Amino -7 -metilbenzotiazol (497A) Se preparó el 7-Metil-6-nitrosobenzotiazol a partir de 6-nitrobenzotiazol según el procedimiento general descrito por Bartoli et al. Synlett 270 (1976). A una solución de 7-metil-6-nitrosobenzotiazol (889 mg, 5.00 mmol) en AcOH (40 mL) a 70°C se agregó polvo de hierro (malla 325, 559 mg, 10.0 mmol) en una porción sencilla. La mezcla de reacción obscura resultante se agitó por 15 min. antes de que se enfriara y se concentró in vacuo para dejar un residuo que se dividió entre HCl 1N (50 mL) y CH2CI2 (50 mL) . Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó una vez con HCl 1N (25 mL) . Las capas acuosas combinadas se hicieron básicas por la adición de NaHC03 sólido y se extrajeron dos veces con EtOAc. Se combinaron las fases orgánicas, se secaron sobre MgS0 y se concentró in vacuo para dar 534 mg (65%) de compuesto 497A como un sólido café claro. CLAR: 96% a 0.55 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% H3P04, "4 mL/min. observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 165.0 [M+H]+.
B. (3aa,4p,5 ,7 ,7aa) -Hexahidro-4, 7-dimetil-2- (7-metil-6-benzotiazolil) -4,7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (497B) Se tomaron 6-Amino- 7 -metilbenzotiazol (29 mg, 0.18 mmol) , MgS04 (54 mg, 0.45 mmol) , trietilamina (125 µ?.,, 0.897 mmol) y compuesto 20A (52 mg, 0.26 mmol) en 0.18 mL de DME y se colocaron en un tubo sellado. El tubo sellado se calentó a 135°C por 14 h. La mezcla de reacción enfriada se filtró a través de a una almohadilla corta de Celite eluyendo con EtOAc y el solvente se separó in vacuo. El residuo fue purificado por CLAR preparativa de fase inversa (Columna YMC S5 ODS, 20 x 100 mm, eluyendo con 30-100% metanol acuoso durante 10 min. conteniendo 0.1% TFA, 20 mL/min., observando a 220 nm) . La concentración de las fracciones deseadas resultó en un residuo que se dividió entre CH2C12 (10 mL) y NaHC03 saturado, solución (10 mL) . La capa acuosa se extrajo una vez con CH2C12 y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 y se concentraron in vacuo para dar 42 mg (68%) de compuesto 497B como un sólido café claro. CLAR: 2.36 min. y 2.55 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 343.3 [M+H]+.
Ejemplo 498 (3aoc, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -5- [Octahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) - 4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H-isoindol-2 - il] -8 - quinolincarbonitrilo (498i) y (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) - 5- [Octahidro- 5-hidroxi- - (2 -hidroxietil ) -7-ntetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-i3oindol-2-il] - 8 -quinolincarbonitrilo (498ii) El compuesto 464E (0.500 g, 1.02 mmol) se disolvió en THF (5.00 mL) y se enfrió hasta 0°C. BH3»DEM (0.193 mL, 2.04 mmol) se agregó después lentamente, seguido por calentamiento a 25°C. Después de 1 h, la reacción se enfrió hasta 0°C y se agregó una solución amortiguadora de fosfato de pH 7 (15.0 mL) resultando en la evolución del gas. Se agregaron después EtOH (7.0 mL) y peróxido de hidrógeno (30%, 1.5 mL) y la reacción se calentó hasta 25°C durante 2 h. Después de 3 h, la mezcla se extrajo con cloruro de metileno (3 x 50 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron una vez con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. El producto formó después un complejo con boro después de la preparación. Todos los intentos para romper este complejo fracasaron para dar el producto libre. El material crudo se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional. La mezcla cruda de reacción se disolvió en 2% HCl conc . /MeOH (5.0 mL) a temperatura ambiente. Después de 1 h, los volátiles se separaron in vacuo y el residuo resultante se disolvió en cloruro de metileno y se lavó una vez con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La eliminación del solvente in vacuo dio la mezcla cruda de compuestos 498i y 498ii como un sólido amarillo. La mezcla de compuestos se separó por CLAR preparativa de fase inversa: Compuesto 498i: 17.994 min. (tiempo de retención) y compuesto 498ii: 19.767 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 30 x 250 mm, 25 mL/min., 10-90% metanol acuoso durante 35 min. conteniendo 0.1% TFA, observando a 220 nm) . La eliminación del solvente in vacuo dio 0.012 g (3%) de compuesto 498i como un sólido blanco y 0.009 g (2%) de compuesto 498ii como un sólido blanco. Compuesto 498i: CLAR: 85% a 1.843 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/tnin., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 394.21 [M+H]+. Compuesto 498ii: CLAR: 98% a 1.650 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm. eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 394.21 [M+H]+.
Ejemplo 499 [3aR- (3aa,43,53,7P,7ag) ] -4 - [7 - [2 - [ [ (1, 1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -4-etiloctahidro-5-hidroxi- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (499i) y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [7- [2- [[(1,1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -4-etiloctahidro-5-hidroxi- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo El compuesto racémico 434C se separó en sus antípodos individuales por CLAR quiral preparativa en fase normal usando una columna Chiracel AD (5 cm x 50 cm) , eluyendo con 8% EtOH en hexano a 50 mL/min. para dar el compuesto de elución más rápida 499i (CLAR quiral: 6.74 min.; columna CHIRACLEL AD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 10% EtOH en hexano a 2 mL/min.) y el compuesto de elución más lenta 499ii (CLAR quiral: 9.99 min.; columna CHIRACLEL AD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 10% EtOH en hexano a 2 mL/min.) . Para cada compuesto 499i ó 499ii: CLAR: 100% a 3.96 min. (tiempo de retención) (columna YMC CombiSreen ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min. , 4 mL/min. , observando a 220 nra) . EM (ES) : m/ z 521.25 [M+H]+. La estereoquímica absoluta para los compuestos 499i y 499ii no se estableció. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 499i se designa aquí como que tiene la configuración "R" y el compuesto 499ii como que tiene la configuración "S". Los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 499i se designan en la presente como que tienen una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 499ii se designan en la presente como que tienen una configuración " S " .
Ejemplo 500 [3aR- (3aa,43, 5P,73/7aa) ] -4- [4-Etiloctahidro-5-hidroxi-7- (2- hidroxietil) -1, 3-dioxo- , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo (500i) y [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [4- Etiloctahidro-5-hidroxi-7- (2 -hidroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (500ii) El compuesto 499i (24.0 mg, 0.0461 mmol) se disolvió en 2% de HC1 conc./EtOH (0.8 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 min. El NaHC03 frío saturado se agregó a la mezcla hasta que la solución aCLanzó un pH de 8, después se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 14.7 mg (78%) del compuesto 500i como un sólido blanco que no requirió de purificación adicional. CLA : 95% a 2.40 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) . El compuesto 499ii (18.0 mg, 0.0346 mmol) se disolvió en 2% HCl conc./EtOH (0.6 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 min. Se agregó NaHC03 saturado frío a la mezcla hasta que la solución aCLanzó un pH de 8, después se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de sodio anhidro. La concentración in vacuo dio 14.1 mg (99%) de compuesto 500ii como un sólido blanco que no requirió de purificación adicional. CLAR: 95% a 2.40 min. (tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 4 min. gradiente con 0.2% H3P04, observando a 220 nm) .
Ejemplo 501 [3aR- (3ßa,4ß,7ß,7¾a) ] -4- [4- [2- [ (5-Cloro-2- piridinil) oxi] etil] octahidro-1, 3-dioxo-7-propil-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2 -il] -1-naf alencarbonitrilo (501D) A. 2- (5-Propil-furan-2-il) -etanol (501A) A una solución de 2-propilfurano (3.00 g, 31.2 mmol) en THF (31 mL) a -78°C, se agregó n-BuLi (15.0 mL, 2.5 M, 37.4 mmol) gota a gota durante 10 min. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó por 3.5 h. Después de enfriar a 0°C, se agregó óxido de etileno (2.33 mL, 46.8 mmol), la reacción se calentó hasta temperatura ambiente y continuó la agitación por 19 h. La reacción después se enfrió hasta 0°C y se apagó con ¾C1 sat. (20 mL) , seguido por la extracción con Et20 (2 x 50 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04( se filtraron, y se concentraron para dar 4.38 g (91%) de compuesto 501A como un aceite color naranja brillante. Este material se usó sin purificación adicional. CLAR: 94% a 2.91 min. (tiempo de retención) (columna YMC Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) .- m/z 137.13 [M-H20+H]+.
B. (3acc,4p,7p,7aa) -4- [1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 - (2-hidroxietil) -1, 3 -dioxo-7 -propil -4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitr Una suspensión de 2 - ( 5 -propi 1 - furan- 2 - il ) - etanol (2.50 g, 16.2 ramol) y 4 - (2 , 5 -dihidro-2 , 5 -dioxo-lH- 1 - il) - 1-naftalencarbonitrilo (4.02 g, 16.2 mmol) en benceno (16 mL) se calentó hasta 60°C. Después de 3 h, la reacción se concentró in vacuo para dar una espuma café. Se agregó metanol (17 mL) y la mezcla se sonicó para dar un sólido beige fino con un sobrenadante café. La filtración dio 1.75 g (27%) de compuesto 501B como un sólido blanco descolorido. Este material se usó sin purificación adicional. CLAR: 85% a 3.02 min. y 3.14 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna YMC Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 403.31 [M+H] +.
C. [3aR- (3aa,4P, 7ß, 7aa) ] -4- [Octahidro-4- (2-hidroxietil) -1,3-dioxo-7-propil-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (501CÍ) y [3aS- (3aa, 4ß , 7ß , 7aa) ] -4- [Octahidro-4- (2-hidroxietil) -1 , 3-dioxo-7-propil-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (501CÜ) A una suspensión del compuesto 501B (1.60 q , 3.97 mmol) en acetato de etilo (79.5 mL) se agregó 10% Pd/C (0.422 g, 0.397 mmol). Se burbujeó gas hidrógeno a través de la reacción por varios minutos y la reacción se dejó agitar bajo una atmósfera de hidrógeno por 3 h. La reacción se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró in vacuo para dar un sólido blanco (1.74 g) . El material crudo se disolvió en una cantidad mínima de cloruro de metileno y se cargó sobre 120 g de un cartucho ISCO de gel de sílice. La elución con un gradiente por etapas de 0 hasta 100% acetato de etilo/hexano dio 1.06 g (66%) de la mezcla racémica de compuestos 501CÍ y 501CÜ como una espuma blanca. Una porción de 500 mg de la mezcla racémica se separó por CLAR quiral preparativa en fase normal (columna Chiralpak AD; 5 x 50 era; elución isocrática con 13% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 50 mL/min., observando a 220 nm) para dar 245 mg del enantiómero de elución más rápida, compuesto 501CÍ y 245 mg del enantiómero de elución más lenta, compuesto 501CÜ, ambos como espumas blancas. Compuesto 501CÍ: CLAR quiral preparativa en fase normal: 28.0 min. (tiempo de retención) , >95% ee (columna Chiralpak AD 4.6 x 250 mm, eluyendo con 12% eOH/EtOH (1:1) en heptano a 1.0 mL/min.) . CLAR: 99% a 3.04 y 3.17 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna YMC Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . HREM m/z CaCLulado para C24H23N2O4 [M-H] " : 403.1658. Encontrado 403.1644. Compuesto 501CÜ: CLAR quiral: 65.7 min. (tiempo de retención), >95% ee (CLAR quiral: 65.7 min.; >95% ee; columna Chiralpak AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 12% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1.0 mL/min.) . CLAR: .98% a 3.02 y 3.15 min. (atropisómeros, tiempo de retención) (columna YMC Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4mL/min. , observando a 220 nm) . La estereoquímica absoluta de los compuestos 501CÍ y 501CÜ no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 501CÍ se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 501CÜ como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 501Ci se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 501CÜ se designan en la presente por tener una configuración "S" .
D. [3aR- (3aa,4p,7 ,7aa)] -4- [4- [2- [ (5-Cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro- 1, 3-dioxo-7-propil-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (501D) A una solución de DBAD (17.1 mg, 0.0741 mmol) en THF (0.5 mL) se agregó PPh3 (19.4 mg, 0.0741 mmol) . Después de 10 min., se agregó 5 -cloro-2 -piridinol (9.6 mg, 0.074 mmol) . Después de 5 min., se agregó el compuesto 501CÍ (20.0 mg, 0.0494 mmol) . Después de 1 h, se agregaron DBAD (17.1 mg, 0.0741 mmol) , PPh3 (19.4 mg, 0.0741 mmol) , y 5-cloro-2-piridinol (9.6 mg, 0.074 mmol) . Después de 3 h, el solvente se separó in vacuo para dar un residuo amarillo. La CLAR en fase preparativa inversa (columna YMC ODS, 20 x 100 mm, eluyendo con 40-100% metanol acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 30 min., 25 mL/min. , observando 220 nm) dio 9.5 mg (37%) de la sal del ácido trifluoroacético del compuesto 501D como un residuo incoloro, transparente. CLAR: 99% a 7.88 min. y 8.11 min. ( atropisómeros , tiempo de retención) (Zorbax SB C18 4.6 x 75 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 8 min., 2.5 mL/min., observando a 220 nm) . HREM m/z CaCLulado por C29H27 304Cl [M+H]+: 516.1690. Encontrado 516.1676.
Ejemplo 502 [3aR- (3aa, 43,7ß, 7aa) ] -4- [4-Butil-7- [2- [ (5-cloro-2- piridinil) oxi] etil] octahidro-1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il] -1-naf alencarbonitrilo (502D) A. 2- (5-Butil-furan-2-il) -etanol (502A) A una solución de 2-butilfurano (3.00 g, 24.2 mmol) en THF (24 mL) a -78°C, se agregó n-BuLi (11.6 mL, 2.5 M, 29.0 mmol) gota a gota durante 10 min. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó por 3.5 h. Después de enfriar a 0°C, se agregó óxido de etileno (1.81 mL, 36.2 mmol), la reacción se calentó a temperatura ambiente y se continuó la agitación por 19 h. La reacción después se enfrió hasta 0°C y se apagó con NH4CI sat . (20 mL) , seguida por la extracción con éter de dietilo (2 x 50 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentró in vacuo para dar 4.07 g (100%) del compuesto 502A como un aceite color naranja brillante. Este material se usó sin purificación adicional. CLAR: 96% a 3.23 min. (tiempo de retención) (columna Y C Combiscreen ODS- A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min. , 4 mL/min., observando a 220 nra) . E (ES) : m/z 169.22 [M+H]+.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [4-Butil- 1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-hexahidro-7 - (2- idroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarboni rilo (502B) Una suspensión del compuesto 502A (2.50 g, 14.9 mmol) y 4- (2, 5-dihidro-2, 5-dioxo-lH-l-il) - 1-naftalencarbonitrilo (3.70 g, 14.9 mmol) en benceno (15 mL) se calentó hasta 60°C. Después de 3 h, la reacción se concentró in vacuo para dar una espuma café. Se agregó metanol (17 mL) y la mezcla se sonicó para dar un sólido beige fino con un sobrenadante café-naranja. La filtración del precipitado dio 2.64 g (44%) de compuesto 502B como un sólido blanco descolorido. Este material se usó sin purificación adicional. CLAR: 95% a 3.25 min. y 3.35 min. (atropisomeros , tiempo de retención) (columna Y C Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 417.29 [M+H]+.
C. [3aR- (3aa,4P,7p,7aa) ] -4- [4-Butiloctahidro-7- (2-hidroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (502CÍ) y [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -4- [4 -Butiloctahidro-7- (2 -hidroxietil) -1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (502CÜ) A una suspensión de compuesto 502C (1.47 g, 3.52 mmol) en acetato de etilo (70 mL) se agregó 10% Pd/C (0.375 g, 0.352 mmol) . Se burbujeó hidrógeno a través de la reacción por varios minutos y la reacción se dejó agitar bajo una atmósfera de hidrógeno por 3 h. La reacción se filtró a través de Celite®, se enjuagó con acetato de etilo (2 x 70 mL) . El filtrado se concentró in vacuo para dar una espuma blanca (1.50 g) . El material crudo se disolvió en una cantidad mínima de cloruro de metileno y se cargó sobre un cartucho ISCO con 120 g gel de sílice. La elución con un gradiente por etapas de 0 hasta 100% acetato de etilo/hexano dio 1.05 g (74%) de una mezcla racémica de compuestos 502Ci y 502CÜ como una espuma blanca. Una porción de 438 mg de la mezcla racémica de compuestos 502CÍ y 502ii se separó por CLAR quiral preparativa en fase normal (columna Chirapak AD, 5 x 50 cm, elución isocrática con 12% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 50 mL/min. , observando a 220 nm) para resultar 178 mg del enantiómero de elución más rápida, compuesto 502Ci como una espuma blanca y 132 mg del enantiómero de elución más lenta, compuesto 502CÜ, como un aceite viscoso, transparente. Compuesto 502CÍ: CLAR quiral: 25.5 min. (tiempo de retención) , >95% ee (CLAR quiral: columna Chiralpak AD .6 x 250 mm, eluyendo con 12% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1.0 mL/min.) y CLAR: 99% a 6.50 min. y 6.71 min. ( atropi someros , tiempo de retención) (columna YMC Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) HREM m/z CaCLulado para C25H25 2O4 [M-H] " : 417.1814. Encontrado 417.1800. Compuesto 502CÜ: CLAR: 55.6 min. (tiempo de retención), >95% ee (CLAR quiral: columna Chiralpak AD 4.6 x 250 mm; eluyendo con 12% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1.0 mL/min.) . CLAR: 99% a 3.26 min. y 3.38 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna YMC Combiscreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min. 4 mL/min., observando a 220 nm) . La estereoquímica absoluta de los compuestos 502CÍ y 502CÜ no se determinó. Por simplicidad en la nomenclatura, el compuesto 502CÍ se designa en la presente como que tiene una configuración "R" y el compuesto 502CÜ como que tiene una configuración "S" . Los productos enantioméricamente puros derivados de los compuestos 502CÍ se designan en la presente por tener una configuración "R" y los productos enantioméricamente puros derivados del compuesto 502CÜ se designan en la presente por tener una configuración "S" .
D. [3aR- (3aa,4P,7p,7aa)] -4- [4-Butil-7-2- [ (5-cloro-2 -piridinil) oxi] etil] octahidro-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (502D) A una solución de compuesto 502CÍ (20.0 mg, 0.0478 mmol) , PPh3 (37.6 mg, 0.143 mmol) y 5 -cloro-2 -piridinol (18.6 mg, 0.143 mmol) en THF (0.5 mL) se agregó DBAD (33.0 mg, 0.143 mmol) . La solución resultante se agitó a temperatura ambiente por 15.5 h. El solvente se separó in vacuo para dar un residuo amarillo. CLAR preparativa (columna Shimadzu VP ODS, 20 x 250 mm, eluyendo con · 40-100% metanol acuoso conteniendo 0.1% TFA durante 30 min. y 100% por 25 min. , 25 mL/min. , observando a 220 nm) dio 9.4 mg (37%) de la sal del ácido trifluoroacético del compuesto 502D como un residuo transparente, incoloro. CLAR: 99% a 8.14 min. y 8.36 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna Zorbax SB C18, 4.6 x 75 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 8 min., 2.5 mL/min., observando a 220 nm) . HREM m/z CaCLulado para C30H29N3O4CI [M+H]+: 530.1847. Encontrado 530.1855.
Ejemplo 503 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4 , 7 -dimetil-2 - [4- (5-oxazolil) -1- naftalenil] -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (503E) A. Ester de tert-butilo del ácido (4-Ciano-naftalen-l-il) -carbámico (503A) A una solución de 4 -amino- 1 -naftalencarbonitrilo (9.67 g, 57.5 mmol) en THF (100 mL) a temperatura ambiente se agregó, durante 10 min. , hexametildisilazano de sodio (1.0 M en THF, 133 mL, 133 mmol). Después de agitar por 15 min., se agregó una solución de di-t-butildicarbonato (15.1 g, 69.0 mmol) en THF (20 mL) . Después de agitar por 18 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se dividió entre Et20 (400 mL) y solución saturada de bisulfato de potasio (200 mL) . La capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (200 mL) , solución saturada de bicarbonato de sodio (200 mL) y salmuera (100 mL) . El secado sobre sulfato de magnesio anhidro, el tratamiento con carbón decolorante y la concentración in vacuo, resultó en un residuo que fue parcialmente purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20% acetato de etilo en hexano. El material parcialmente purificado se cristalizó de acetato de etilo/hexano para dar 5.26 g de compuesto 503A como cristales incoloros. El licor madre se concentró y se cristalizó de acetato de etilo/hexano para dar 2.8 g adicionales de compuesto 503A para dar un total de 8-.06 g (52%) de compuesto 503A. ?? RM (400 MHz , DEMO-ds) : d 9.81 (s, 1H) , 8.36 (d, 1H, J = 8.5 Hz) , 8.11 (m, 2H) , 7.92 (d, 1H, J = 8 Hz) , 7.78 (m, 1H) , 7.67 (m, 1H) , 1.53 (s, 9H) .
B. Ester de tert-butilo del ácido (4-Formil-naftalen-l-il) -carbámico (503B) Una mezcla de compuesto 503A (4.02 g, 15.0 mmol), níquel Raney (1.5 g) , hipofosfito de sodio (9.00 g, 86.5 mmol), piridina (50 mL) , agua (25 mL) y ácido acético (25 mL) se agitó a 45°C por 5 h. La mezcla se filtró a través de Celite y la torta filtro se enjuagó con etanol caliente (100 mL) . Después de agregar agua (600 mL) al filtrado y dejarlo reposar por 1 h( el precipitado resultante se filtró y se enjuagó con agua. El secado in vacuo resultó en 3.38 g de un sólido blanco que fue una mezcla 3:1 de compuestos 503B y 503A. El material se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz , DEMO-d6) : d 10.28 (s, 1H) , 9.77 (s, 1H) , 9.27 (d, 1H, J = 8.5 Hz) , 8.31 (m, 1H) , 8.13 (m, 1H) , 8.00 (d, 1H, J = 8 Hz) , 7.80 (m, 1H) , 7.70 (m, 1H) , 1.54 (s, 9H) .
C. Ester de tert-butilo del ácido (4-Oxazol-5-il-naftalen-l-il) -carbámico (503C) La mezcla anterior de conpuestos 503A y 503B (3.37 g, 10.0 mmol; corregida por la presencia del compuesto 503A) , isocianato de toluen-sulfonilo (2.15 g, 11.0 mmol) y carbonato de potasio (1.66 g, 12.0 mmol) en 50 mL de metanol se puso a reflujo por 4 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua (200 mL) y cloroformo (200 mL) . Después de extraer la capa acuosa con cloroformo (100 mL) , las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron in vacuo. El residuo crudo fue purificado por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 10-40% acetato de etilo en hexano para dar 1.35 g (44%) de compuesto 503C como un sólido blanco. ¾ RMN (400 MHz, DEMO-d6): d 9.45 (s, 1H) , 8.57 (s, 1H) , 8.20 (m, 2H) , 7.76 (m, 2H) , 7.64 (s, 1H) , 7.62 (m, 2H) , 1.51 (s, 9H) .
D. 4-Oxazol-5-il-naptalen-l-ilamina (503D) El compuesto 503C (1.34 g, 4.3 mmol) se disolvió en ácido trifluoroacético (10 mL) y la mezcla resultante se dejó reposar por 1 h a temperatura ambiente. Después de eliminar los volátiles in vacuo, el residuo se co-evaporó del acetato de etilo/heptano (2 x 50 mL) para eliminar trazas de ácido trifluoroacético . Después de dividir el residuo entre acetato de etilo (100 mL) y NaOH 1N (75 mL) , la capa orgánica se lavó con salmuera (50 mL) , se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró in vacuo para resultar 900 mg (99%) de compuesto 503D como un sólido amarillo cristalino. Condiciones CLAR: 95% a 0.92 min. (tiempo de retención) (columna Phenomenex de 5 mieras ODS, 4.6 x 30 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 2 min. gradiente con 0.1% TFA, observando a 254 nm.) . EM (ES) :m/z 211.22 [M+H] +.
E. (3aa, ß, 7ß, 7aa) -Hexahidro-4, 7 -dimetil-2- [4- (5-oxazolil) -1-naftalenil] -4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (503E) Una mezcla de compuesto 503D (42 mg, 0.020 mmol) y 20A (78 mg, 0.40 mmol) en ácido acético (1.0 mL) se puso a reflujo por 18 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se concentró in vacuo y el residuo se dividió entre acetato de etilo (30 mL) y solución saturada de bicarbonato de sodio (30 mL) . La capa orgánica se aisló, se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea sobre una columna de 2.5 x 15 cm de gel de sílice, usando un gradiente de 40- 60% de acetato de etilo en hexano dio 28 mg (37%) de compuesto 503E, como un polvo blanco. CLAR: 99% a 1.46 min. y 1.36 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Phenomenex 5 mieras ODS 4.6 x 30 mm, 10%-90% metanol acuoso durante 2 min. gradiente con 0.1% TFA, observando a 254 nm.) . EM (ES) : m/z 389.10 [M+H] +.
Ejemplo 504 [3aS- [3aocf 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- [7- [2- (4-Cianofenoxi) etil] -4- etiloctahidro-5-metoxi-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] - Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -4-etiloctahidro-5-metoxi- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (504A) A una solución de compuesto 499ii (0.235 g, 0.451 mmol) en CH2CN (6 mL) , se agregó óxido de plata (0.523 g, 2.26 mmol) y yodometano (0.56 mL, 9.0 mmol, se agitó sobre K2C03 antes de la adición) . La suspensión resultante se colocó en un baño de aceite precalentado (80°C) . Después de 24 h, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con CH3CN (20 mL) , se filtró a través de un tapón de Celite, y se concentró in vacuo para dar una goma café. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 30% acetato de etilo/hexanos dio 0.156 g (65%) de compuesto 504A como un sólido blanco. CLAR: 95% a 4.17 min. y 4.25 min. (atropisómeros , tiempo de. retención) (columna YMC CombiSreen ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 521.25 [M+H]+.
B. (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [ -Etiloctahidro-7 - (2 -hidroxietil) -5-metoxi-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1 -naftalencarbonitrilo (504B) A una solución de compuesto 504A (0.156 g, 0.292 mmol) en etanol (6 mL) se agregó HCl 1N (0.44 mL, 0.44 mmol) . Después de 20 min., la reacción se enfrió hasta 0°C y se apagó con NaHC03 acuoso saturado (2 mL) para dar a una suspensión blanca. Se agregó H20 hasta que se disolvió el sólido. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (20 mL) , se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron in vacuo para dar un sólido blanco. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 5% MeOH/CH2Cl2 dio 120 mg (99%) del compuesto 504A como un sólido blanco. CLAR: 98% a 5.17 y 5.44 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (columna YMC CombiSreen ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 8 min., 2.5 mL/min. , observando a 220 nm) . HREM m/z CaCLulado para 24H2 N2O5 [M-H] + : 419.1607. Encontrado 419.1611.
C. [3aS- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ] -4- [7- [2- (4-Cianofenoxi) etil] -4-etiloctahidro-5-metoxi-l, 3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (504C) A una solución de compuesto 504B (20 mg, 0.048 mmol) en THF anhidro (0.5 mL) se agregó PPh3 (37.0 mg, 0.143 mmol), para-cianofenol (17.0 mg, 0.143 mmol) y DBAD (32.0 mg, 0.143 mmol) . Después de 30 min., la solución se concentró para dar una goma café. La purificación por CLAR preparativa de fase inversa (Columna YMC S5 ODS, 20 x 250 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 35 min., 20 mL/min., observando a 220 nm) dio 16 mg (64%) de compuesto 504C como un aceite transparente, incoloro. CLAR 98% a 6.84 y 7.10 min. (atropisomeros , tiempo de retención) (columna Zorbax SB C18, 4.6 x 75 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 8 min., 2.5 mL/min., observando a 220 nm) . HREM m/z CaCLulado para C31H27 3O5, [M + NH4]+: 539.2295. Encontrado 539.2302.
Ejemplo 505 (3aa,4P,5P,73,7aa) - 4- [7 -[2 -[[(1,1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -4-etiloctahidro-5-hidroxi- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (505BÍ) y (3aa,43,5P,7p,7aa)-4-[4-[2-[[(l,l-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -7-etiloctahidro-5-hidroxi- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (505BÜ) A. (laa,2p,2aa,5aa,6P,7aoc) -4 - [2- [2 -[[(1,1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -6-etiloctahidro-3 , 5-dioxo- 2 , 6-epoxi-4H-oxireno [f] isoindol-4-il] -1-naftalencarbonitrilo (505A) A una solución de compuesto 434B (1.01 g, 2.01 mmol) en cloruro de metileno (20 mL) se agregó 60% de m-CPBA (0.863 g, 3.00 mmol) . Después de 48 h, la reacción se diluyó con cloruro, de metileno (50 mL) y se lavó con Na2S03 sat . (20 mL) y NaHC03 sat. (20 mL) . Las capas acuosas combinadas se extrajeron con CH2C12 (20 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mL) , se secaron sobre Na2S04, se filtraron, y se concentraron in vacuo para dar 1.01 g (97%) de compuesto 505A como un sólido amarillo. Este material usado sin purificación adicional. CLAR : 95% a 4.22 min. (tiempo de retención) (columna Phenominex Luna C18, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) . HREM m/z CaCLulado para C29H34N2O5SÍ [M-H]+: 517.2159. Encontrado 517.2163.
B. (3aa,4p,5 ,7 ,7aa) -4- [7- [2- [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -4-etiloctahidro-5-hidroxi- 1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -1-naftalencarbonitrilo (505Bi) y (3aa,4p,5p,7p,7aa) -4- [4- [2- [ [(1,1-Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] etil] -7-etiloctahidro-5-hidroxi-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-naftalencarbonitrilo (505BÜ) A una solución roja de bicloruro de titanoceno (0.500 g, 2.00 mmol) en THF anhidro (4.0 mL) se agregó polvo de zinc (0.392 g, 6.00 mmol) . La suspensión resultante se agitó vigorosamente por 1 h bajo una atmósfera de argón para dar una suspensión verde. El zinc en exceso se eliminó por filtración a través de un microfiltro de 0.45 µp? para dar una solución verde de cloruro de diciclopentadienil titanio (III) . A una solución de compuesto 505A (0.207 g, 0.399 mmol) y 1 , -ciclohexadieno (0.380 mL, 4.02 mmol) en THF anhidro (1 mL) se agregó gota a gota una solución 0.5 M del cloruro de diciclopentadienil titanio (III) antes descrito (0.9 mL, 0.45 mmol) . Después de 1 h, se agregó una alícuota adicional de la solución 0.5 M de cloruro de diciclopentadienil titanio (III) (0.9 mL, 0.45 mmol) , y la agitación continuó por 1 h. La reacción después se apagó con agua (2 mL) y se diluyó con acetato de etilo (10 mL) . Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera (5 mL) , se secó sobre Na2S04, se filtró, y se concentró in vacuo para dar una goma amarilla. El material crudo se disolvió en una cantidad mínima de cloruro de metileno y se cargó sobre una columna ISCO de 35 g de gel de sílice. La elución con gradiente con 0-80% acetato de etilo en hexano dio 0.043 g (21%) del compuesto 505Bi como un sólido blanco y 0.023 g (11%) del compuesto 505BÜ como un sólido blanco. Compuesto 505Bi : CLAR: 3.92 min. (tiempo de retención) (columna YMC CombiSreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 521.36 [M+H]+. Compuesto 505BÜ: CLAR : 91% a 3.97 min. (tiempo de retención) (columna YMC CombiScreen ODS-A, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante 4 min., 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 521.34 [M+H]+.
Ejemplo 506 4- C [3aS- (3aa/4P,5P<73,7aa) ] -5- (a-D- Glucopiranosiloxi) octahidro-4 , 7 -dimetil- 1 , 3 -dioxo- , 7 -epoxi 2H-isoindol-2 -il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (506B) A. [3aS- (3ßa,4ß,5ß,7ß,7ßa)] -4- [Octahidro-4 , 7 -dimetil-1, 3 - dioxo-5- [ [2,3,4,6-tetraq is-O- ( fenilmetil) -a-D-glucopiranosil] oxi] -4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (506A) Se preparó el bromuro de 2 , 3 , 4 , 6-Tetra-O-bencil-a-D-glucopiranosilo, según el procedimiento de Spohr et al. Can. J. Chem. 71, 1928-42 (1993) . Se agregó bromuro de oxalilo (0.48 mL, 0.95 mmol , 2 M en CH C1 ) gota a gota a una solución de 2 , 3 , 4 , 6-tetra-O-bencil-D-glucopiranosa (412 mg, 0.763 mmol) en CH2Cl2 (5 mL) y DMF (0.28 mL) a temperatura ambiente bajo Ar. La mezcla de reacción se agitó por 20 min. , se vació sobre una mezcla de hielo y H20 (1:1, 30 mL) y se diluyó con CH2C12 (30 mL) . Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con H20 fría (2 x 30 mL) y salmuera (1 x 30 mL) y se secaron sobre MgS04. La concentración in vacuo dio el bromuro deseado como un aceite café. Este aceite se tomó en CH2C12 (2 mL) y DMF (1 mL) . Se agregaron el compuesto 471DÜ (100 mg, 0.763 mmol) , bromuro de tetrabutilamonio (111 mg, 0.526 mmol) y mallas de 4 A (600 mg) a esta solución y la reacción se agitó ba o Ar por 4 d. La reacción se apagó con MeOH (2 mL) , se agitó por 0.5 h, se diluyó con CH2C12 (10 mL) y después se filtró a través de un embudo aglomerado de vidrio de porosidad media, enjuagando con CH2C12 (5 mL) . El solvente se separó in vacuo y el residuo resultante se disolvió en CH2Cl2 (25 mL) . La solución orgánica se lavó con NaHC03 sat . acuoso (1 x 20 mL) y H20 (1 x 20 mL) y se secó sobre MgS04. La purificación por cromatografía instantánea sobre Si02 eluyendo con 50% EtOAc/hexanos dio 79 mg (33%) de 506A como un sólido blanco. CLAR : 99% a 4.56 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 902 [ +H]+.
B. 4 - [ [3aS- (33a,4ß,5ß,7ß,73a) ] -5- (a-D- Glucopiranosiloxi) octahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H-isoindol-2 -il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (506B) Se agregó hidróxido de paladio (62 mg, 20 % peso de Pd (base seca) sobre carbón, húmedo) a una solución de 506A (65 mg, 0.07 mmol) en EtOAc (2 mL) y la mezcla se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno, introducida por medio de un globo. Después de 5 h, la reacción estuvo completa como fue evidente por CLAR, de manera que la mezcla se filtró a través de un embudo aglomerado de vidrio de porosidad media, enjuagando con MeOH (2 mL) y se concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en MeOH (2 mL) y se filtró a través de un filtro jeringa Gelman Acrodisc CR de 13 mm. con una membrana de 0.45 µ? de PTFE. La concentración produjo 38 mg de 506B como un sólido blanco. CLAR: 90% a 2.16 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 543.20 [M+H] + . Se recristalizó una porción de 10 mg de MeOH:H20 para dar cristales apropiados para estudios de difracción de cristal por rayos X, para obtener la estereoquímica exacta del compuesto 506B como se hace referencia a la estereoquímica fija conocida del apéndice de D-glucósido .
Ejemplo 507 (3aa,43, 7ß, 7aa) -4- (1, 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 , 7 -dimetil-1, 3- dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 - ( trifluorometil ) benzonitrilo (507) A 25 g (94.2 mmol ) del compuesto 471A se agregó 2,5-dimetilfurano puro (30 mL, 280 mmol) , y la suspensión espesa resultante se calentó a 60°C por 1 hasta 3 h con agitación mecánica. La suspensión resultante se enfrió hasta 0-5 °C, y se diluyó con tolueno frío (25 mL, 0-10 °C) . La suspensión fría se filtró bajo vacío. El matraz y la torta filtro se lavaron con tolueno frío (2 x 25 mL) , y la torta se desprendió del licor con vacío interior. El precipitado se secó in vacuo para dar 31.3 g (91.6%) de un compuesto 50-7 como un sólido café claro. CLAR: 99.6%, 19.43 min. (tiempo de retención) (Columna: Zorbax™ SB-C18, 4.6 x 15 cm; Fase Móvil: 40% CH3CN/60% H20 w/ 0.1% v/v TFA, isocrático; Relación de flujo: 1 mL/min. ; Detección: max 210 nm; Temperatura: 30 °C; Volumen de Inyección: 5 µL) .
Ejemplo 508 (3aa, 4ß, 5ß,7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi- , 7 -dimetil -1, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (508) Al THF (275 mL) que se había enfriado hasta -3 °C se agregó el compuesto 507 (55.0 g, 152 mmol) , que resultó en una suspensión. Se agregó a la suspensión el metilsulfuro de borano (14.4 mL, 152 mmol) , a una velocidad tal que la temperatura no superó los 0 °C. La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta 20°C durante 2.5 h. La temperatura de la mezcla de reacción se regresó después hasta 0 °C, en donde con la solución amortiguadora de fosfato (1056 mL, pH 7) se agregó cuidadosamente a una velocidad para controlar la evolución del gas hidrógeno y mantener una temperatura de £20 °C. La suspensión resultante se disolvió al agregar etanol (528 mL, 190 grados) . A 15°C, se agregó peróxido de hidrógeno (55 mL, 30 % peso) a una velocidad para mantener la temperatura a <20 °C. La solución homogénea se dejó agitando por 12 h a 20°C y un pH de 7.8, con lo que sucedió la cristalización. La suspensión espesa resultante, se recolectó por filtración y se lavó con agua (4 X 100 mL) y éter de metil-tert-butilo (2 X 100 mL) . El secado in vacuo resultó en 37.3 g (64.6%) de compuesto 508. El licor madre acuoso se extrajo con acetato de etilo (3 X 500 mL) . Los orgánicos ricos combinados se lavaron con sulfito de sodio acuoso al 10% en peso (1 X 100 mL) , y cloruro de sodio acuoso al 25 % en peso (1 X 100 mL) . Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron para recuperar 8.9 g (15.4%) de compuesto 508, y se recuperó una tercera fracción de 11.5 g (20%) del compuesto 508 del lavado de la torta de éter metil-tert-butilo. Las tres muestras sólidas anteriores de material crudo se volvieron a cristalizar por separado a partir de etanol de 190 grados (1 g / 10 mL) para resultar un total de 35.6 g (61.7%) del compuesto 508, que tiene un nivel de pureza de 98.7% como se determina por el análisis CLAR (condiciones a continuación) . Una segunda recolección del compuesto 508 se aisló del licor madre para resultar 9.3 g (16.1%) de sólido que tiene un nivel de pureza de 98.4% como se determina por análisis CLAR. El licor madre restante fue purificado por cromatografía en gel de sílice usando 200 g de Si02 y eluyendo con 4 L de 50 IV de acetato de etilo y 50 %V de heptano para dar 5.6 g (9.7%) del compuesto 508, que tiene un nivel de pureza de 94.0% como se determinó por análisis CLAR. Condiciones CLAR: 9.74 minutos de tiempo de retención sobre una columna YMC S5 ODS-AQ (4.6 x 150 mm) usando una elución de gradiente desde el 100% del solvente A hasta el 100% del solvente B durante 15 minutos a 1.0 mL/min. Solvente A = 95 %V agua (0.01 M NH40Ac) ; 5 %V acetonitrilo. Solvente B = 5 %V agua (0.01 M NH40Ac) ; 95 %V acetonitrilo . Detector de longitud de onda dual fijado a 210 y 245 nm. EM (ES): m/z 381.11 [M+H]+.
Ejemplo 509 (3act,43, 5ß,7ß, 7act) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7 -dimetil- 1, 3- dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- ( trifluorometil) benzonit ilo (509 ) El compuesto 471A (0.37 g, 1.4 mmol) y 2 , 5-dimetilfurano (0.73 mL, 6.9 mmol) se combinaron para formar una suspensión que se calentó a 60°C por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta -10°C y THF (1.0 mL) se agregó seguido de la adición de borano tetrahidrof urano (2.1 mL, 1 M) . La mezcla de reacción se agitó por 30 minutos a 0°C y 30 minutos a + 10° C. A la mezcla de reacción se agregó acetona (3.0 mL) , y la mezcla resultante se calentó hasta 20°C y se mantuvo a 20°C por 1 h. A esta solución se agregó bicarbonato de sodio (1.5 mL, pH 9, 8% peso) y la mezcla después se enfrió hasta 5°C antes de agregar peróxido de hidrógeno (0.3 mL, 30 %peso) . La adición de peróxido de hidrógeno fue exotérmica llevando la temperatura hasta 20°C. Una solución de sulfito de sodio (4.0 mL, 10 %peso) se agregó a 20°C resultando en una exotermia hasta 30°C. La fase bifásica se dejó reposar a 25°C por 12 h. Después de que se separaron las fases, los desechos acuosos se extrajeron nuevamente dos veces con acetato de etilo (5 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 mL) seguida por cloruro de sodio (2 mL, 25 %peso) . Las capas orgánicas se concentraron in vacuo para dar un aceite amarillo que se cristalizó rápidamente. Al producto crudo se agregó etanol de 190 grados (5.0 mL) y la mezcla se calentó a 60°C para resultar la disolución completa. El enfriamiento a 20°C por 17 h resultó en la cristalización. La suspensión de cristales se recolectó por filtración, se lavó con heptano (5 mL) , y se secó a 60°C bajo vacío (30 pulgadas (762 mm) /Hg) para resultar 0.23 g (44 %) de compuesto 509 que tiene un 93.1 de % de área CLAR . Condiciones CLAR: 9.74 minutos de tiempo de retención en una columna YMC S5 ODS-AQ (4.6 x 150 mm) usando una elución de gradiente desde el 100% del solvente A hasta el 100% del solvente B durante 15 minutos a 1.0 mL/min. Solvente A = 95 %V agua (0.01 M NH4OAc) ; 5 %V acetonitrilo . Solvente B = 5 %V agua (0.01 M NHOAc) ; 95 %V acetonitrilo. Detector fijado a 245 nra. EM (ES) : m/z 381.11 [M+H]+.
Ejemplo 510 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4-Octahidro-5-hidroxi-4,7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (510i) y [3aS- (3aaf 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [5- (Acetiloxi) octahidro-4, 7 -dimetil-1, 3- dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (510ii) El compuesto 509 (4 mg) , acetato de vinilo (0.1 mL) y tolueno (2 mL) se combinaron y se agregaron 20 mg de cada una de las enzimas mostradas en la Tabla 12. La mezcla se agitó con una barra de agitación magnética a temperatura ambiente en un tubo cerrado de 16 x 100 mm por el periodo de tiempo enlistado en la Tabla 12. La acetilación enantioselectiva de la mezcla racémica resultó en la formación del compuesto 510i y el compuesto acetilado 510ii. La pureza enantiomérica del compuesto 510i se determinó por CLAR quiral (método a continuación) y los resultados para cada enzima son como se muestran en la Tabla 12. La información resultante se usó para preparar un lote a gran escala de los compuestos 510i y 510ii como se describe a continuación.
Tabla 12 Enzima Proveedor Fuente Tiempo Comp . Comp. 510i Comp . Comp . 510i 510i 510ii H Mg/mL % % ee Mg/mL rendimiento AK-20 Amano Pseudomonas 15 0.74 39 100 1.02 fluorescens AP-12 Amano Aspergillus 144 1.10 58 55.4 0.74 niger PS-30 Amano Pseudomonas 15 0.46 24 100 1.24 cepacia Acilasa Amano Aspergíllus 15 0.51 27 12.2 1.26 30000 Quirazima Boehringer Candida 144 0.81 42 87.2 1.04 L3 rugosa Lipasa Sigma Candida 144 0.74 39 100 1.06 tipo VII rugosa Se agregaron a un matraz enchaquetado de 500 mL la lipasa de Amano AK20 de Pseudomonas fluorescens (25 g) , compuesto 509 (25 g) , metil-isobutil-cetona (475 mL) y acetato de vinilo (25 mL) . El matraz se mantuvo a 25°C con un baño de agua en circulación y se agitó con una barra de agitación magnética. La incubación se continuó por 42 h, punto en el cual el exceso enantiomérico del compuesto 510i aCLanzó 100%. La solución se filtró a través de papel filtro Whatman 4 para eliminar la enzima, y se lavó la torta filtro con 50 mL de metil isobutil cetona. El filtrado se concentró in vacuo y el residuo resultante se disolvió en EtOAc (50 mL) seguido por la adición de heptano (50 mL) . Esta solución se cargó sobre una columna de cartucho Phenomenex (sílice 800 g) en un sistema Biotage 75L y se eluyó la columna con 75% EtOAc/heptano a una relación de flujo de 110 mL/min. Las fracciones se recolectaron (500 mL) que contenían al compuesto 510ii y después se cambió el solvente de elución a 100% de EtOAc para eluir completamente el compuesto 510i. Las fracciones deseadas se acumularon y se eliminó el solvente in vacuo para producir 11.0 g del compuesto 510i, (44%, 100%ee) y 12.10 g de compuesto 510ii (44%) . El compuesto 510i se volvió a cristalizar a partir de 95% EtOH (5 mL/g) en dos recolecciones para resultar 9.61 g (38%) de compuesto 510i como un sólido cristalino blanco. Los compuestos 510i: CLAR guir-al .- 10.02 min. (tiempo de retención) (columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min.) . CLAR: 99% a 2.45 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 381.11 [M+H]+.
Ejemplo 511 [3aR- (3aa,4P, 5P,73,7aa) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3, dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (511i) y mono[3aS- (3aa,4P,5p,7p,7aa)] - [2- [4-ciano-3- ( trifluorometilfeniloctahidro-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-lH-isoindol-5-il] éster del ácido butanodioico - (511ii) Una mezcla del compuesto racémico 509 (10 mg) , anhídrido succínico (100 mg) y lipasa AK-20 de Amano (50 mg) en tolueno o MTBE (5 mL) , se agitó a temperatura ambiente por 20 horas. Después de 16 y 20 h, se tomaron muestras (0.1 mL) de cada mezcla de reacción, se evaporaron, se redisolvieron en acetonitrilo (1 mL) y se analizaron por CLAR de fase inversa (YMC Pro-pack ODS-A, 3(, 15 X 0.6 cm, acetonitrilo : agua 20:80 hasta 90:10 en 12 min.) para determinar la relación de área de los productos del compuesto 511i (RT = 8.8 min.) y compuesto 511ii (RT = 9.9 min.) . Se separó una segunda muestra (0.1 mL) de cada mezcla de reacción, se evaporó y se redisolvió en 1 mL de aCLohol isopropílico-heptano (1:1) y se analizó por CLAR quiral (Chiralpak AD , 25 X 0.46 cm, 20 °C, heptano : etanol 85:15, 0.5 mL/min., UV 210 nm) para determinar el % ee del compuesto 511i (TR = 32.2 min) y compuesto 471DÜ (TR = 34.8 min.) . Después de 20 h, las mezclas de reacción se filtraron completamente para separar los componentes insolubles (enzima, etc.) . Los filtrados se lavaron con NaHC03 acuoso al 5% (3 X 1 volumen) y agua (3 1 volumen) , se evaporaron in vacuo y se analizaron por CLAR como se describió arriba. Los resultados mostraron un rendimiento promedio de 48% (el rendimiento máximo teórico es del 50%) y 100% ee para el compuesto 511i. La separación completa del compuesto 511ii se logra por medio de la extracción con NaHC03 antes descrita. La Tabla 13 proporciona los detalles de cada reacción como se determina por los métodos antes descritos Compuesto 511i: CLAR quiral: 10.02 min.; columna CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm; elución isocrática con 20% eOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min., 100% ee . CLAR: 99% a 2.45 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 381.11 [M+H]+. Tabla 13.
Ejemplo 512 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß,73, aa) -4- [5- (Acetiloxi) octahidro-4 , 7- dimetil-1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- (trifluorometil) benzonitrilo (512i) y [3aS- (3a , 4ß , 53 , 7ß , 7aa) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3- dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (512ii) Se configuraron una serie de matraces de 50 mL y se pesaron las enzimas (ver Tabla 14 por tipo de enzima y cantidades) dentro de cada uno seguido por la adición de solución amortiguadora de fosfato (BF45, 5 mL, 100 mM, pH 7) .
Una solución de compuesto 473 (5 mg) en DEMO (50 µL) se agregó a cada matraz. Los matraces se agitaron a 200 rpm a 28 °C por 24 horas. Después de 24 horas, las mezclas de reacción se extrajeron con EtOAc (10 mL) . Se evaporó una porción del extracto de EtOAc (1 mL) , se volvió a disolver en acetonitrilo (1 mL) y se analizó por CLAR de fase inversa (C-18, acetonitrilo : agua 20:80 hasta 90:10 en 12 min.) para determinar la relación de área del compuesto 512i (TR = 11.0 min) y compuesto 512ii, (TR = 8.9 min.) . Se evaporó otra porción del extracto de EtOAc (4 mL) se volvió a disolver en 1 mL de aCLohol isopropílico-heptano (1:1) y se analizó por CLAR quiral (Chiralpak AD, heptano : etanol 85:15, 0.5 mL/min) para determinar el % ee del compuesto 512ii (RT = 34.8 min.) y compuesto 471DÍ (TR = 32.2 min.) en este sistema. La Tabla 14 proporciona detalles para una configuración de enzimas diferentes examinadas y los rendimientos resultantes y el % ee de los productos deseados.
Tabla 14. Enzima Proveedor Fuente Can Relación Exo- Exo- % ee t del área ACLohol ACLohol de de por CLAR Enz mg Comp . Comp . Comp . Comp . Comp . 512ii 512i 471DÍ 511Ü 512i Lipasa Amano Aspergillus 5 181 82% 18.8% 81.2% 62.5% AP-12 niger Lipasa Amano Aspergillus 25 50% 50% 41.0% 59.0% 17.9% AP-12 niger Lipasa Amano Pseudomonas 5 20% 80% 31.3% 68.7% 37.4% PS cepacia Lipasa Amano Pseudomonas 25 46% 54% 40.2% 59.8% 19.6% PS cepacia Acilasa Amano Especie 5 30% 70% 52.0% 48.0% -3.9% 150000 Aspergillus Acilasa Amano Especie 25 71% 29% 50.4% 49.6% -0.8% 150001 Aspergillus Newlasa Amano Rhi zopus 50 3% 97% 31.3% 68.7% 37.5% F ni eus Newlasa Amano Rhizopus 100 3% 97% 25.7% 74.3% 48.5% F niveus Acilasa Sigma Aspergillus 5 10% 90% 9.7% 90.3% 80.6% I melleus Acilasa Sigma Aspergillus 25 38% 62% 10.9% 89.1% 78.3% I melleus Esterasa Sigma Hígado de 5 76% 24% 36.0% 64.0% 27.9% porcino Ejemplo 513 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (513i) y [3aS- ^a,4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -hidroxi -4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- trifluorometil) benzonitrilo y (513ii) y (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (513iii) Se establecieron una serie de reacciones de biotransformación microbiana para generar los compuestos 513i, 513ii y 513iii. Los detalles de las reacciones para los diversos microorganismos se muestran en la Tabla 15, y se describe un procedimiento general a continuación. Se inoculó un vial deshielado del microbio (1 mL de cultivo) en un medio estéril de soya-glucosa (10 mL) en un matraz de 50 mL. Los microbios se hicieron crecer por agitación a 200 rpm a 28°C por 40 h. Se agregó una solución de compuesto 472 (10 mg en 100 µ?. de DEMO) a cada matraz y los matraces se agitaron a 200 rpm a 28°C. A las 24 y 48 h, se extrajeron 5 mL de las mezclas de reacción por EtOAc (10 mL) . Se evaporó una porción de extracto de EtOAc (1 mL) , se volvió a disolver en acetonitrilo (1 mL) y se analizó por CLAR de fase inversa (C-18, acetonitrilo: agua 20:80 hasta 90:10 en 12 min.) para determinar la relación de área del compuesto 472 (RT = 11.2 min.) y los compuestos producto 513i (RT = 8.9 min.), 513ii (RT = 8.9 min.) y 513iii (RT = 9.6 min.). Se evaporó una segunda porción del extracto de EtOAc (4 mL) , se volvió a disolver en aCLohol de isopropilo-heptano (1:1, 1 mL) y se analizó por CLAR quiral (Chiralpak AD, Heptano : Etanol 85:15, 0.5 mL/min.) para determinar el % ee de los compuestos 513i (RT = 32.2 min.) compuesto 513ii (RT = 34.8 min.) en este sistema .
Tabla 15.
Microorganismo ID Tiempo Análisis por fase Análisis de % % ee inversa CLAR (relación ee por CLAR de de área) Hrs Comp . Comp .513ii Comp . Comp .513i Comp . Comp . 513i 472 513ii 513i Especie SC1754 24 7% 0% 93% 96.9% 3.1% 93.9% Streptomyces 48 12% 0% 88% 96.7% 3.3% 93.3% Especie SC3740 24 11 0% 99% 88.0% 12.0% 76.0% Streptomyces 48 2% 0% 98% 85.8% 14.2% 71.7% Nocardia ATCC 24 5% 01 95% 93.2% 6.8% 86.3% in terforma 21072 48 8% 0% 92% 92.6% 7.4% 85.1% Streptomyces ATCC 24 11% 1% 88% 95.7% 4.3% 91.4% antibioticus 14890 48 48% 13% 39% 94.1% 5.9% 88.2% Streptomyces ATCC 24 1% 0% 99% 82.0% 18.0% 64.1% mediocidicus 13278 48 7% 0% 93% 79.4% 20.6% 58.8% Streptomyces NRRL 24 23% 0% 77% 85.0% 15.0% 70.0% griseus B8090 48 28% 0% 72% 85.9% 14.1% 71.8% Amycola topsis ATCC 24 12% 1% 86% 81.3% 18. % 62.5% orien talis 43490 48 25% 4% 71% 77.4% 22.6% 54.9% Ejemplo 514 [3aR- (3aa,43,53,73,7aa)3 -4- (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7 -dimetil - 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (514i) y [3aS- (3aa,43, 53,73,7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7 -dimetil- 1, 3 - dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo y (514ii) y (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) - 4 - (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7 -dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H- Se establecieron una serie de reacciones de biotransformación microbiana, para generar los compuestos 514i, 514ii y 514iii. Los detalles de las reacciones para los diversos microorganismos se muestran en la Tabla 16 y se describe a continuación un procedimiento general . Se usó un cultivo de 1 mL de Streptomyces griseus SC13971 de un vial congelado, para inocular 100 mL de medio (0.5% de nutrisoya tostada, 2% glucosa, 0.5% extracto de levadura, 0.5% K2HP04, 0.5% NaCl, ajustado a un pH de 7 con HC1 1N (R. V. Smith y J. P. Rosazza, Arch. Biochem. Biophys., 161, 551- 558 (1974) ) en un matraz de 500 mL Erlenmeyer, y el matraz se incubó a 28°C a 200 rpm por 3 días. Se usaron 10 mL de este cultivo, para inocular 100 mL de medio (como arriba) en un matraz de 500 mL Erlenmeyer, y el matraz se incubó a 28°C a 200 rpm por 1 día. Para los hongos filamentosos Mucor rouxii y Cunninghamella echinulata, se usó 1 mL de suspensión de esporas, preparada al lavar una superficie de agar en plano inclinado con 10 mL agua, para inocular 100 mL de medio (como arriba) en un matraz de 500 mL Erlenmeyer, y el matraz se incubó a 28°C a 200 rpm por 1 día. Se agregó el compuesto 472 (30 mg en 1 mL de metanol) a cada cultivo y las incubaciones continuaron por 6 hasta 10 días. Se separaron muestras de 10 mL del caldo de cultivo en cada matraz, y se extrajeron con acetato de etilo (20 mL) . Muestras de 10 mL de la capa orgánica, se evaporaron individualmente hasta sequedad a 40 °C bajo una corriente de nitrógeno. Los residuos se disolvieron en 1.2 mL de isopropanol y se analizaron por CLAR de fase inversa (YMC Pak ODS 150 x 6 mm, 3 µ C-18, acetonitrilo : agua 20:80 hasta 90:10 en 12 min. , 1 mL/min. , 40 °C) para determinar la concentración de compuesto 472 (RT = 11.2 min.) y los compuestos producto 514i (RT = 8 9 min.), 514ii (RT = 8.9 min.) y 514iii (RT = 9.6 min.) . Las mismas muestras se analizaron por CLAR quiral (Chiralpak AD. heptano :etanol 85:15, 0.5 mL/min.) para determinar el % ee de compuestos 514í (RT = 32.2 min.) compuesto 514ii (TR = 34.8 min.) en este sistema.
Tabla 16.
Ejemplo 515 [3aR- (3aa,43,5P,7P<7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil- 1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (515) Se llevó a cabo la transformación microbiana del compuesto 472 al compuesto 515 en una escala de 3 L en un fermentador de 5 L, usando Cunninghamella echinulata SC 16027 (ATCC 9244) y un medio que consistió de lo siguiente: 0.5% de nutrisoya tostada, 2% glucosa, 0.5% extracto de levadura, 0.5% K2HP04, 0.5% NaCl, ajustado a un pH de 7 con HC1 1N (R. V. Smith y J. P. Rosazza, Aren. Biochem. Biophys., 161, 551-558 (1974)). El fermentador se formó en lotes con 0.05% de antiespuma SAG antes de la esterilización. Se preparó el inoculo de esporas para lavar las esporas desde un cultivo en superficie de agar de plano inclinado de 10 días, de Cunninghamella echinulata SC 16027 (ATCC 9244) con 0.9% de solución salina/0.1% de T een 80. La etapa del inoculo se preparó al agregar 1 mL de inoculo de esporas dentro de 100 mL del medio en un matraz de 500 mL, después se hicieron crecer los cultivos a 28°C a 200 rpm por 1 día. Se mezcló 10% del inoculo del matraz en un mezclador estéril aring y se usó para inocular el fermentador estéril, conteniendo 3 L de medio estéril. El fermentador se corrió a 28°C a 600 rpm y 1 wm de aereación. Se agregó una solución estéril de tres antibióticos al fermentador después de la inoculación; 12 mg de cloruro de tetraciclina, 12 mg de sulfato de canamicina, y 60 mg de hidrato de cefalexina en 10 mL de agua desionizada. Después de 22 horas de crecimiento en el fermentador, se agregó una solución de un substrato estéril conteniendo 0.75 g de compuesto 472 disuelto en 30 mL de metanol, esta etapa se repitió dos horas después para un total de 0.5 g/L de compuesto 472 en la bioconversión. Las condiciones de fermentación se mantuvieron a 28°C a 600 rpm y 1 wm de aereación. Se mantuvo un pH de 6.5 por la adición automática de 10% de H2S04 o 10% de NaOH. Periódicamente, se tomaron muestras asépticas de 10 mL, y se extrajeron con dos porciones de 10 mL de acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se aisló, se secó bajo una corriente de nitrógeno a 40°C, y el residuo se disolvió en 2.0 mL de aCLohol isopropílico . Las muestras se analizaron por CLAR de fase inversa (método a continuación) para determinar la relación de compuesto 472 y del compuesto producto 515. Además, se analizó cada muestra por CLAR quiral (método a continuación) con objeto de determinar el % ee del compuesto 515. Durante el proceso de bioconversión, se alimentó una solución estéril de 30% de cerelosa y 1.5% de extracto de levadura a la reacción a -5 mL /hora. Después de 114 h desde el momento de la adición del substrato, el análisis por fase inversa de CLAR, indicó la producción de un rendimiento del 78% de compuesto 515. El análisis CLAR quiral medido como el % e.e. de compuesto 515 a 94.9%. El proceso anterior se repitió en otra bioconversión de 3L, y la reacción se llevó a cabo a 28°C a 600 rpm, 1 wm de aereación, con 0.5 g/L de entrada del compuesto 472. Después de 44 h, esta reacción dio un rendimiento del 80% de compuesto 515 con 95% e.e. El caldo se filtró a través de una almohadilla HyFlo™ para proporcionar un caldo de fermentación clarificado. El compuesto 515 se adsorbió completamente sobre 55 g de XAD-16 y se extrajo nuevamente en una mezcla 1:1 de EtOAc y acetona (3 X 100 mL) o éter de metil-tert-butilo (3 X 100 mL) . El solvente se separó in vacuo y el residuo resultante fue purificado por una almohadilla de sílice (5 g) , eluyendo con EtOAc . Las fracciones deseadas se recolectaron y trataron con carbón activado (0.5 g). para decolorar la solución y el solvente se eliminó in vacuo para producir 1.27 g de compuesto 515. La re-cristalización de este material de EtOAc/heptano (10 mL/20 mL) resultó en 950 mg de compuesto cristalino 515 que tiene un 97% de pureza por CLAR de fase inversa y 95% ee por CLAR quiral. CLAR de Fase Inversa: columna YMC Pak ODS-A C18, 4.6 x 50 mm, eluyendo con un gradiente de: 0 min. 20% acetonitrilo/80% 0.1% TFA en agua, 12 min. 90% acetonitrilo/10% 0.1% TFA en agua, 12.01-15 min. 20% acetonitrilo/80% 0.1% TFA en agua, observando a 250 nm, 40°C. 5 µL volumen de inyección) . Compuesto 515: RT = 8.86 min. CLAR quiral: columna CHIRALPAK OD 25 x 0.46 cm; elución isocrática con 15% etanol/85% heptano a 0.5 mL/min., 18°C, observando a 220 nm, volumen de inyección: 20 µL. Compuesto 515: TR = 36.5 min. En un proceso de recuperación alterno, el caldo de fermentación (1L) de la reacción de biohidroxilación anterior, se filtró y la torta de las células se lavó con 100 mL de agua. Se extrajo un caldo transparente con acetato de etilo (2 X 600 mL) y la torta de las células se extrajo con 400 mL de acetato de etilo. Las capas combinadas de acetato de etilo se concentraron y el residuo resultante se disolvió en 5 mL de 1:1 heptano/acetato de etilo y se cargó en una almohadilla de gel de sílice (70 g en 250 mL de filtro aglomerado de vidrio) .
La almohadilla de gel de sílice se eluyó con un gradiente de 80 hasta 90% EtOAc/heptano. Las fracciones se recolectaron y se acumularon las fracciones que contenien el compuesto 515. El solvente se separó in vacuo y se cristalizó el producto resultante a partir de EtOAc/heptano para dar un rendimiento del 90% de compuesto 515 con 98% de pureza por CLAR de fase inversa y 95% ee por CLAR quiral . CLAR de Fase Inversa: columna YMC Pak ODS-A C18, 4.6 x 50 mm, eluyendo con un gradiente de: 0 min. 20% acetonitrilo/80% 0.1% TFA en agua, 12 min. 90% acetonitrilo/10% 0.1% TFA en agua, 12.01-15 min. 20% acetonitrilo/80% 0.1% TFA en agua, observando a 250 nm, 40°C, 5 µL volumen de inyección) . Compuesto 472: RT = 11.12 min. Compuesto 515: TR = 8.86 min. CLAR quiral: columna CHIRALPAK OD 25x0.46 cm; elución isocrática con 15% etanol/85% heptano a 0.5 mL/min., 18°C, observando a 220 nm, volumen de inyección: 20 µL. Compuesto 472: TR = 27.4 min. Compuesto 515: TR = 36.5 min. Compuesto (514iii) TR = 39.1 min.
Ejemplo 516 4- (2, 5-DÍOXO-2, 5-dihidro-pirrol-l-il) -2- trifluorometilbenzonitrilo (516B) El siguiente ejemplo demuestra la preparación de un intermediario útil para la preparación de los compuestos de la fórmula I de la presente invención. Ácido 3- (4-Ciano-3-trifluorometilfeniCLarbamoil) acrílico 5-amino-2 -cianobenzotrifluoruro (210.6 minóles; 40.00 g) y acetato de butilo (80 mL) se agregaron a un matraz de fondo redondo de 250 mL, seguido por la adición de anhídrido maleico (231.9 mmoles, 23.20 g) . La suspensión resultante se calentó a 60°C por 3.5 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta 25°C y después se agregó heptano (160 mL) gota a gota durante un periodo de 25 minutos. La suspensión resultante se filtró y se lavó con una mezcla de 4:1, heptano : acetato de butilo (30 mL) y heptano (45 mL) . La torta se secó in vacuo para dar 60 g (95% rendimiento) de compuesto 516A.
B . 4- (2 , 5-Dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-il) -2 -trifluorornetil -benzonitrilo ( 516B) El compuesto 516A (17.42 mmoles, 5.000 g) se agregó al matraz de reacción seguido por la adición de bromuro de zinc (17.58 mmoles, 3.960 g) y después se agregó tolueno (50.00 mL, 43.25 g) a la mezcla. La suspensión resultante se agitó por 20 min. Se agregó hexametildisilazano (26.35 mmoles, 5.560 mL, 4.253 g) a esta suspensión que después se calentó a 60°C por 4.5 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 mL) y después se vació en una solución de HCl 1N (30 mL) a 25°C. La fase orgánica se recolectó y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (15 mL) . La fase orgánica se aisló, se combinó con la fase orgánica previa y se lavó consecutivamente con NaHC03 saturado (15 mL) . Una mezcla 1:1 de agua: solución de salmuera (15 mL) y salmuera (15 mL) . La solución resultante se secó sobre MgS04 , se filtró y se concentró in vacuo hasta una suspensión de 50 mL. Se agregó heptano (125 mL) gota a gota a esta suspensión con agitación. La suspensión espesa resultante se filtró y se lavó con una mezcla de 2:1 heptano : tolueno (15 mL) y después heptano (15 mL) para dar 4 g (85% rendimiento) de compuesto 516B. CLAR : 100% a 2.11 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
Ejemplos 517 al 746 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 517 al 746 tienen las estructuras que se muestran en la siguiente Tabla 17. La Tabla 17 también proporciona el nombre del compuesto, tiempo de retención/masa molecular, y el procedimiento empleado para la preparación de estos compuestos. Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 17 son como siguen: CL y CLEM se describieron en los Ejemplos 439 al 454 (Tabla 9) . La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 17, en donde se proporcionan, se determinaron por EM (ES) por la fórmula m/ z . 523 [3aS- 3.90 CL 245 y (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- [M+H] += 461 [4-[2-[(5-Cloro-2- 502.27 piridinil) oxi] etil] - 7-etiloctahidro-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 524 [3aS- 3.40 CL 435, (3aa,4 ,5 ,7 ,7aa)]-4- [M+H] += 499 y JT ? [7-[2-[(5-Cloro-2- 518.27 500 piridinil) oxi] etil] -4- 1 etiloctahidro-5- hidroxi-1, 3-dioxo-4, 7- Cl epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo 525 (33a,4ß,7ß,73 ) ]-5-[4- 3.32 CL 467 1 o n [2-[(5-cloro-2- [M+H] += piridinil) oxi] etil] octa 489.26 hidro-7-metil-l, 3- S 0 dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-8- quinolincarbonitrilo 536 [3aR- 3.15 CL 243 y (3ßa,4ß,5ß,7ß,73a) ]- [M+H] += 244 4-[7-[2-(1?-1,2,3- 493.8 Benzotriazol-1- il) etil] octahidro-5- hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 537 [3aR- 3.05 CL 243 y (3aa,4p,5p,7p,7a ) ]- [ ]+= 507.6 244 4- [Octahidro-5- hidroxi-7-[2-(lH- indol-4-iloxi)etil] - 4-metil-l, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 538 [3aR- 3.33 CL 243 y (3acc,4p,5p,7p,7aa) ]- [M+H]+= 244 4-[7-[2-[ (7-Cloro-4- 555.2 quinazolinil) oxi] etil ] octahidro-5-hidroxi- 4-metil-l, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 539 [3aR- 3.48 CL 243 y (3aa,4p,5p,7p,7aa)]- [M+H] += 244 4- [Octahidro-5- 552.2 hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-7-[2-[ (1,3,4- trim til-lH- pirazolo [3, 4- b]piridin-6- il) oxi] etil] -4,7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo [3aR- 3.08 CL 243 y (38a,4ß, 5P,7p,7aa) ]- [ +H]+= 244 4- [Octahidro-5- 524.2 hidroxi-4-metil-7- [2- [ (1-metil-lH- i 0 pirazolo[3, 4- b]piridin-3- il) oxijetil] -1, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aR- 2.70 CL 243 y Cl (3aa,4p,5p,7 ,7aa) ]- [M+H] += 244 4-[7-[2-{6-Cloro-9H- 529.0 purin-9- il) etil] octahidro-5- hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo- , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aR- 2.40 CL 243 y (3aa,4p,5P,7p,7aa) ]- [M+H] += 244 4-[7-[2-[[2- 542.3 (Dimetilamino) -5, 6- dimetil-4- pirimidinil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi- 4-metil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo (3aa,4p,7p,7aa)-7-[4- 3.52 CL 424A, [2-[ (5-Cloro-2- [ +H] += 204, piridinil) oxi] etil] oc 495.6 482F tahídro-7-metil-l, 3- y dioxo- , 7-epoxi-2H- 482G isoindol-2-il] -2, 1, 3- benzotiadiazol-4- carbonitrilo [3aR- 3.18 CL 243 y (3aa,4p,5p,7 ,7aa) ]- [M+OAc] "= 244 4-[Octahidro-5- 596.7 hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-7-[2-[[6- (trifluorometil) -4- pirimidinil] oxi] etil] -4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aR- 2.94 CL 243 y (3aa,4p,5p,7p,7a )]- 244 4-[Octahidro-5- 596.5 CF3 hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-7- [2- [6-OXO-4- (trifluorometil) - 1(6H)- pirimidinil] etil] - 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 554 [3aR- 3.03 CL 243 y (33 ,4ß,5ß,7ß,73a) ]- [M+H]+= 244 4- [Octahidro-5- 506.3 hidroxi-7-[2-(lH- indol-5-iloxi) etil] - 4-metil-l, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 555 [3aR- 2.85 CL 243 y (3aoc,4p,5p,7p,7aa)]- [M+H] += 244 4-[7-[2-[(5-Cloro- 520.5 1, 2-dihidro-2-oxo-3- piridinil) oxi] etil] oc tahidro-5-hidroxi- - metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo [3aR- 3.67 CL 243 y (3aa,4p, 5p,7p,7aa) ]- [M+H] += 244 4- [7- [2- [(3,5- 596.3 Dicloro-2- piridinil) oxi] etil] oc tahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo [3aR- 2.82 CL 243.y (33 ,4ß,5ß,7ß,73a) ]- [M+H] += 244 4-[7-[2-(l,3-Dihidro- 509.1 3-oxo-2H-indazol-2- il) etil] octahidro-5- hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo- , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 564 [3aR- 3.19 CL 243 y (3aa,4p,5p,7p,7aa) ]- [M+H] += 244 4-[Octahidro-5- 509.2 hidroxi-7-[2-(lH- indazol-3- iloxi) etil] -4-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 565 [3aR- 3.21 CL 481 (3aa,4p,5p,7p,7aa) ]- [M+H] += 2- (6-Benzotiazolil) - 526.2 7-[2-[ (5-cloro-l,2- benzisoxazol-3- il) oxi] etil]hexahidro -5-hidroxi-4-meti1- 4, 7-epoxi-lH- isoindol-l,3(2H)- diona 5 10 15 20 25 568 [3aS- 3.21 CL 481 (3aa,4 ,5 ,7 ,7aa) ]- [M+H]+= 2- (6-Benzotiazolil) - 526.1 7-[2-[ (5-cloro-l,2- benzisoxazol-3- il) oxi] etil] hexahidro -5-hidroxi-4-metil- Cl & 4, 7-epoxi-lH- isoindol-l,3(2H)- diona 569 [3aS- 2.84 CL 481 (3aa,4P,5p,7p,7aa) ]- [M+H] += 2- (6-Benzotiazolil) - 391.16 7- [2- (5-cloro-3-oxo- 1, 2-benzisoxazol- 2 (3H)- Cl il)etil]hexahidro-5- hidroxi-4-metil-4, 7- epoxi-lH-isoindol- l,3(2H)-diona 582 [3aR- 5.85 y 245C, (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- 6.06 461 y [4-[2-[ [2- atropisóme 62 (Dietilamino) -6- ro CL metil-4- [M+H] += pirimidinil]oxi] etil] 554.26 -7-etilocta idro-l, 3- dioxo- , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 583 [3aR- 7.23 y 245C, (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- 7.50 461 y [4-[2-(4-Ciano-3- atropisóme 462 fluorofenoxi) etil] -7- ros HRMS etiloctahidro-1, 3- [M-H] "= dioxo-4, 7-epoxi-2H- 508.1682 isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 584 [3aR- 3.60 CL 223, (3aa,4p,5p,7p,7aot) ]- [M+H]+= 495 y ? ? 4-[7-[2-[ (5-Cloro-2- 532.23 496 piridinil) oxi] etil] - -CN 5-etiloctahidro-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo 585 [3aR- 3.68 CL 491 (3aa,4p,5p,7p,7aa) ]- [ +H] += 4-[7-[2-[ (5-Cloro-2- 544.23 piridinil) oxi] etil] oc tahidro-4-metil-l, 3- dioxo-5- (2- propeniloxi) -4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo 588 [3aR- 3.37 CL 467 y (3aa,4 ,7 ,7a ) ]-5- [M+H] += 487 [Octahidro-4-metil-7- 493.24 [2- (5-metil-2H-l, 2, 3- benzotriazol-2- il) etil] -1, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-8- quinolincarbonitrilo 589 [3aS- 3.37 CL 467 y (3aa,4 ,7p,7aa)]-5- [M+H] += 487 [Octahidro-4-metil-7- 493.24 Í [2-(5-metil-2H-l,2,3- N N benzotriazol-2- il) etil] -1, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-8- quinolincarbonitrilo [3aR-(3act, 4ß,7ß,7ßa) ]- 3.14 CL 467 y 5- [4- [2- (4- [M+H] += 487 Cianofenoxi) etil]octahi 479.22 dro-7-metil-l, 3-dioxo- N—(' v)—CN 4, 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il]-8- quinolincarbonitrilo [3aS- (3aa, 4p,7p,7a ) ] - 3.14 CL 467 y ° 5- [4- [2- (4- [M+H] += 487 Cianofenoxi) etil]octahi 479.22 dro-7-metil-l, 3-dioxo- , 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il]-8- quinolincarbonitrilo [3aR- 3.38 CL 482 (3aa, ß,5ß,7ß,73a) ]-7- [M+H] += [7-[2-[(5-Cloro-l,2- 552.12 benzisoxazol-3- ? ' il) oxi] etil] octahidro- 5-hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-2, 1,3- benzotiadiazol-4- carbonitrilo 627 [3aR- 2.02 CLEM 496 -o (33a,4ß,7ß,73a) ]-4- [M+H]+= [Octahidro-4-[2-[ (3- 499.2 metoxifenil) iojetil] J -7-metil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 628 [3aR- 1.99 CLEM 496 (3aa,4 ,7p,7a ) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4- [2- [ (4- 499.2 metoxifenil) tío] etil] -7-metil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 629 [3aR- 2.27 CLEM 496 OH (3aa,4 ,7P,7aa) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4-[2-(3- 469.2 Hidroxifenoxi) etil] - 7-metil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H- 1 o isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 10 15 20 25 5 10 15 25 [3aR- 7.69 y 502 (3a ,4 ,7p,7a ) ]-4- 7.92 [4-Butil-7-[2-(4- atropisóme cianofenoxi) etil] octa ros CL hidro-1, 3-dioxo-7- [M+H] += propil-4, 7-epoxi-2H- 520.38 isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aR- 8.02 y 502 (3aa, 4ß,7ß,73 ) ] -4- 8.23 [4-Butiloctahidro- atropisóme ¿ l,3-dioxo-7-(2- ros CL *" ™ fenoxietil) -4,7- [M+H] += epoxi-2H-isoindo1-2- 495.33 il]-l- naftalencarbonitrilo 10 15 20 25 [3aS- 3.97 CLEM 496 (3acc,4p,7p,7aoc) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4-[2-(3- 483.1 metoxifenoxi) etil] -7- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-l- naftalencarbonitrilo N-[3-[2-[3aS- 3.42 CLEM 496 (3acc,4p,7p,7aa) ]-2- [M+H] += (4-Ciano-l- 510.1 naftalenil) octahidro- 7-metil-l, 3-dioxo- "V 4, 7-epoxi-4H- o isoindol-4- il] etoxi] fenilacetami da 695 [3aS- 3.83 CLEM 496 (3aa,4p,7p,7a ) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4-metil- 521.1 l,3-dioxo-7-[2-[3- (trifluorometil) fenox i] etil] -4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 696 [3aS- 3.86 CLEM 496 (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4-meti1- 521.2 l,3-dioxo-7-[2-[4- (trifluorometil) fenox i] etil] -4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aS- 4.15 CLEM 496 (3aoc,4p,7p,7act) ]-4- [M+H] += [4-[2-[[2- 566.2 (Dimetilamino) -6- (trifluorometil) -4- pirimidinil] oxi] etil] octahidro-7-metil- 1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo, trifluoroacetato (1:1) [3aS- 3.17 CLEM 496 (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- [M+H] += [Octahidro- -meti1-7- 466.5 [2-(3- metilfenoxi) etil] - 1, 3-dioxo- , 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aS- 3.40 CLEM 496 (3aa, 4ß,7ß,73a) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4-[2-(lH- 492.2 indol-5-iloxi) etil] - 7-metil-l, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aS- 3.20 CLEM 496 (3aa,4p,7p,7a ) ]-4- [M+H] += [4-[2-[ (2,3-Dihidro- 507.2 l-oxo-lH-inden-5- il) oxi] etil] octahidro -7-metil-l, 3-dioxo- 0 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aS- 3.71 CLEM 496 (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- [M+H] += [4- [2- [ (2-Amino-6- 484.2 metil-4- pirimidinil) oxi] etil] octahidro-7-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo [3aS- 4.23 CLEM 496 (3aa,4p,7p,7aa) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4- [2- (1H- 492.2 indol-7-iloxi) etil] - 7-metil-l, 3-dioxo- 4,7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 733 [3aS- 4.11 CLEM 496 (3aa, ß, 7ß, 7aa) ]-4- [M+H] += [2-[2-(4-ciano-l- 496.2 naftalenil) octahidro- 7-metil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-4H- isoindol-4- il] etoxi] benzamida 734 [3aR- 2.847 CL 485, (3aa,4p,5p,7p,7aa) ]- [M+H] += 486, 5- [Octahidro-5- 540.14 487 y hidroxi-4-metil-l, 3- 488 dioxo-7-[2-[[6- (trifluorometil) -4- pirimidinil] oxi] etil- 4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-8- quinolincarbonitrilo 741 [3aS- 3.94 CLEM 496 (3aa,4 ,7P,7aa) ]-4- [M+H] += [Octahidro-4-metil-7- 508.1 [2-[ (7-metil-l,2- benzisoxazol-3- il)oxi]etil]-l,3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il] -1- naftalencarbonitrilo 742 Ester de [3aR- [M-H]~= 483 (3act,4p,5p,7p,7aa) ]- 591.3 2- [4-ciano-3- (trifluorometil) fenil ]octahidro-4,7- diraetil-1, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-lH- isoindol-5-ilo del ácido (aS) -6-Metoxi- a-metil-2- naftalenacético [3aS- 3.05 CLEM 485, (3aa,4p,5p,7p, 7aa) ]- [M+H] += 486, 5- [7- (2- (3- 488.03 487 y Fluorofenoxi) etil] oct 488 ahidro-5-hidroxi-4- metil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2- il]-8- quinolincarbonitrilo [3aS- 2.98 CLEM 485, (33a,4ß,5ß,7ß,73a) ]- [M+H]+= 486, 5- [0ctahidro-5- 538.23 487 y hidroxi-4-metil-l, 3- 488 dioxo-7-[2-[(5,6,7,8- tetrahidro-5-oxo-l- naftalenil) oxi] etil] - 4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il]-8- quinolincarbonitrilo Ejemplo 747 [3aR- (3aa,43,73,7aa)] -4- [7- [2- [ (5-Cloro-2- piridinil) oxi] etil] octahidro-4 -metil-1, 3 , 5-trioxo-4, 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] - 1-naftalencarbonitrilo (747) El peryodinano Dess -Martin (122 mg, 0.29 mmol , preparado como se describe en Ishiharaa, J. , T. Fukuzakia, et al. Tetrahedron Letters 40(10), 1907-1910 (1999)) se agregó a una solución del compuesto 490A (120 mg, 0.24 mmol) en diclorometano (2.5 mL) bajo nitrógeno y la mezcla se agitó por 4h. La reacción se concentró a la mitad bajo una corriente de nitrógeno y se aplicó sobre un cartucho instantáneo (Jones 2 g) con celite en la parte superior y se eluyó con cloroformo : heptano (9:1) hasta cloroformo : acetona (4:1) para dar 148 mg de un sólido blanco todavía impuro. El sólido se disolvió en diclorometano (5 mL) y heptano (3 mL) y el precipitado se filtró sobre 1 g de sílice y se eluyó con diclorometano hasta cloroformo : acetona (4:1). Las fracciones 3-9 (58.8 mg de sólido blanco) fueron casi puras y las fracciones 10-13 (68 mg espuma blanca) estuvieron todavía impuras. Las fracciones 3-9 se purificaron sobre sílice (1 g) usando heptano a heptano : acetato de etilo (1:1) como eluyente para dar 35.8 mg (30% de rendimiento) del compuesto 747 como un sólido blanco. Las fracciones 10-13 se purificaron al agregar ~400 mg de sílice a una solución en exceso de compuesto crudo 747 en acetato de etilo y heptano y concentrándolas. La sílice se puso después en la parte superior de una columna preacondicionada (heptano) de sílice (1 g) y se eluyó con un gradiente de heptano a heptano acetato de etilo (1:1) para dar 36.7 mg adicionales (31% rendimiento) del compuesto 747 como un sólido blanco. CLAR: 94% a 3.46 y 3.59 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (YMC S5 ODS 4.6 X 50 mm, 4 mL min., 4 min. gradiente 100% A hasta 100% B (A: 10% metanol, 89.1% agua, 0.1% TFA; B: 10% agua, 89.1% metanol, 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 220 nm) . MS (ES) : m/z 502.11 [M+H]+.
Ejemplo 748 (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aot) -4- [Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l, 3- dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-isoq iiiolinocarbonitrilo (748D) A. 4- (2 , 5-Dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-il) -isoquinolino-1-carbonitrilo (748A) Una mezcla de compuesto 470D (200 mg, 1.18 mmol) y anhídrido maleico (470 mg, 4.7 mmol) en ácido acético glacial (5 mL) se calentó a reflujo por 4 horas. Después de eliminar los volátiles in vacuo, el residuo se dividió entre acetato de etilo (50 mL) y agua (50 mL) . La capa orgánica se lavó con una solución saturada de bicarbonato de sodio (2 x 50 mL) y salmuera (50 mL) . Después de secar sobre sulfato de magnesio, la capa orgánica se filtró a través de un tapón de 1 x 5 cm de gel de sílice. El filtrado se concentró para dar 263 mg (90%) de 748a como un sólido blanco descolorido. CLAR: 99% a 1.12 min. (Phenomenex 5 micron ODS 4.6X30 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 2 minutos con 0.1% TFA, detectando a 254 nm) . S (ES) : m/z 250.2 [M+H]+.
B. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (1,3, 3a, 4, 7, 7a-Hexahidro-4, 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -1-isoquinolinocarbonitrilo (748B) Una mezcla de compuesto 748A (250 mg, 1 mmol) y 2,5-dimetilfurano (4 mL) se calentó a 60°C por 2 h. a 15 min. , La mezcla de reacción se hizo homogénea. Se formó un precipitado a los 45 minutos. Después de enfriar hasta 25°C, la mezcla de reacción se diluyó con hexano y la torta filtro se lavó con etil éter: hexano, 1:1. El secado bajo alto vacío resultó en 270 mg (78%) de compuesto 748B como un sólido amarillo claro. XH RMN-400 MHz (CDC13) : d 8.55 (s, 1H) , 8.54 (m, 1H) , 7.86 (ra, 3H) , 6.45 (s, 2H) , 3.18 (s, 2H) , 1.81 (s, 6H) .
C. (laa, 2ß, 2aa, 5aa, 6ß, 6aa) -4- [Octahidro-2 , 6-dimetil-3 , 5-dioxo-2, 6 -epoxi-4H-oxireno [f] isoindol-4-il] -1-isoquinolinocarbonitrilo (748C) Se agregó m-CPBA, (70%, 110 mg, 0.45 mmol) a una solución de compuesto 748B (100 mg, 0.29 mmol) en 3 mL de diclorometano a 25 °C. Después de 1 h, se agregó m-CPBA adicional, (70%, 110 mg, 0.45 mmol) y la mezcla de reacción se agitó 18 h adicionales. Después de dividir la mezcla de reacción entre acetato de etilo (30 mL) y agua (30 mL) , la capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfito de sodio (30 mL) , solución saturada de bicarbonato de sodio (2 x 30 mL) y salmuera (30 mL) . La muestra se secó sobre sulfato de magnesio y concentración para resultar en 103 mg (98%) del compuesto 748C como un sólido blanco descolorido. CLAR: 99% a 1.09 y 1.22 min. (atropisómeros , tiempo de retención) (Phenomenex 5 mieras ODS 4.6X30 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 2 min. con 0.1% TFA, detectando a 25-4 nm) . MS (ES): m/z 362.07 [M+H]+.
D. (3aa,4P, 5 ,7p,7aa) -4- [Octahidro-5-hidroxi-4 , 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-isoquinolinocarbonitrilo (748D) Una solución 0.5 M de cloruro de bis (ciclopentadienil) titanio en THF (1.2 mL, 0.6 mmol) se agregó gota a gota durante 20 min. a una suspensión bien agitada de compuesto 748C (103 mg, 0.29 mmol) en THF (2.5 mL) y 1, 4-ciclohexadieno (1.2 mL) a 60 °C. Después de agitar 1 h a 60°C, la mezcla de reacción se dividió entre HC1 1N (40 mL) y acetato de etilo (50 mL) . El pH de la capa acuosa se ajustó hasta 7 con bicarbonato de sodio sólido. Después de extraer la capa acuosa con acetato de etilo, las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio. Se agregó carbón decolorante (-1 g) y la mezcla se dejó reposar por 18 h. La filtración y la concentración del filtrado in vacuo, resultaron en un aceite amarillo que se cromatografió sobre una columna de gel de sílice de 2.5 x 15 cm, usando diclorometano : acetona , 6:4 como la fase móvil. La concentración del producto conteniendo fracciones in vacuo dio un residuo parcialmente purificado que se sometió a cromatografía de capa delgada preparativa sobre gel de sílice, usando diclorometano : acetona 6.4 como la fase móvil. La extracción de la banda deseada con CH2C12, la filtración y la concentración del filtrado in vacuo resultaron en 3 mg (31%) de compuesto 748D como un sólido blanco descolorido. Condiciones CLAR: 95% a 1.46 min (Phenomenex 5 mieras ODS 4 6X30 mm, 10%-90% metanol acuoso durante un gradiente de 2 minutos con 0.1% TTA, detectando a 254 nm) . MS (ES) : m/z 364.19 [M+H]+ jemplo 749 (3ßa,4ß,7ß,7a)-4-[Octahidro-4,7-dimeti1-1,3-dioxo-4,7-epoxi- 2H-isoindol-2-il] -2 -tiofencarbonitrilo (749C) A. 2-Ciano-4-nitrotiofeno (749AÍ) y 2-Ciano-5-nitrotiofeno (749AÜ) Se agregó lentamente ácido nítrico fumante (21 mL) al ácido acético glacial (105 mL) y la mezcla se enfrió después en un baño de hielo. 2 -Cianotiofeno (7.98 g. 73.1 mmol) se disolvió en 20 mL de anhídrido acético y se agregó gota a gota a la mezcla ácida anterior, de manera que la temperatura no superara 25°C. Al terminar la adición, la mezcla de reacción se calentó hasta 22°C y se agitó por 48 h. La reacción se vació sobre 400 mL de hielo y se extrajo con 200 mL de dietil éter. La capa de éter se aisló, se lavó con agua, seguida por salmuera y se secó sobre MgS04. La filtración y la concentración in vacuo dio un residuo color naranja, pegajoso, que fue purificado por cromatografía en columna usando 1:1 hexanos/ cloruro de metileno como el eluyente para dar 1.69 g (15%) de compuesto 749Ai como un sólido blanco y 1.71 g (15%) de compuesto 749AÜ como una substancia cristalina amarilla. Compuesto 749AÍ: CLAR: 0.73 minutos (tiempo de retención) (Columna Phenomenex 30 x 4.6 mm eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 minutos conteniendo 0.1% TFA, 5 mL/min., observando a 220 nm) . Compuesto 749AÜ: CLAR: 99% a 0.89 minutos (tiempo de retención) (Columna Phenomenex 30 x 4.6 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 2 minutos conteniendo 0.1% TFA, 5 mL/min., observando a 220 nm) .
B. 4-Amino-2 -cianotiofeno (749B) A un matraz de 3 cuellos de 100 mL, se agregó el compuesto 749AÍ (1.42 g, 9.21 mmol) disuelto en acetato de etilo (20 mL) seguido por una solución al 10% de ácido acético (20 mL) . La mezcla bifásica se calentó a 65°C y se agregó después polvo de hierro (2.95 g, 52.9 mmol) en porciones durante 5 minutos. Después de agitar por 1.5 h a 65°C, la reacción se filtró a través de un lecho de Celite y la almohadilla se lavó con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con agua (3 x 20 mL) , salmuera y se secó sobre MgS04. La filtración y la concentración in vacuo dio un residuo ámbar oscuro que fue purificado por cromatografía en columna usando 30% de dietil éter/cloruro de metileno como eluyente para dar 84 mg (73%) de compuesto 749B como un sólido café. CLAR : 93.4% a 0 26 minutos (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min.; observando a 220 nm) .
C. (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro- , 7 -dime il- 1 , 3 -dioxo-4 , -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - tiofenocarbonitrilo (749C) A un tubo Pyrex se agregó el compuesto 749B (0.06 g, 0.5 mmol), tolueno (1 mL) , trietilamina (0.25 g, 0.35 mL, 2.5 mmol), gS04 (0.15 g, 1.3 mmol) , y compuesto 20A. El tubo se selló con una tapa de teflón y se calentó durante la noche a 145°C. La reacción se enfrió, se diluyó con cloruro de metileno y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en columna usando 10% de éter/cloruro de metileno como eluyente para dar 14 mg (95%) de compuesto 749C como un sólido cristalino amarillo claro. CLAR: 94.6% a 2.6 minutos (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm. MS (ES) : m/z 303.05 [ +H]+.
Ejemplo 750 (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) - 5- [Octahidro-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo- , 7 -epoxi- 2H-isoindol-2-il] -2 - tiofenocarbonitrilo (750B) A. 5-Amino-2-cianotiofeno (750A) A un matraz de 3 cuellos de 100 mL se agregó el compuesto 749AÜ (1.63 g 10 1 mmol) disuelto en acetato de etilo (20 mL) seguido por una solución al 10% de ácido acético (20 mL) . La mezcla bifásica se calentó, a 65°C y después se agregó polvo de hierro (2.95 g, 52.9 mmol) en porciones durante 5 minutos. Después de agitar por 1.5 h a 65°C, La reacción se filtró a través de una cama de Celite y la almohadilla se lavó con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con agua (3 x 20 mL) , salmuera y se secaron sobre MgS04. La filtración y la concentración in vacuo dio un residuo ámbar oscuro que fue purificado por cromatografía en columna usando 10% de dietil éter/cloruro de metileno como eluyente para dar 87 mg (66%) de compuesto 750A como un sólido café. CLAR: 94.2% a 1.05 minutos (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. (3aa,4p,7p,7aa) -5- [Octahidro-4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2 - tiofenocarbonitrilo (750B) Se agregó a un tubo Pyrex el compuesto 750A (0.06 g, 0.5 mmol), tolueno (1 mL) , trietilamina (0.25 g, 0.35 mL, 2.5 mmol), MgS0 (0.15 g. 1.3 mmol), y el compuesto 20B. El tubo se selló con una tapa de teflón y se calentó durante la noche a 145° C. La reacción se enfrió, se diluyó con cloruro de metileno y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía en columna usando 10% éter/cloruro de metileno como el eluyente para producir 143 mg (96%) de compuesto 750B como un sólido cristalino amarillo claro. CLAR: 92.7% a 2.93 minutos (tiempo de retención) (columna Y C S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , monitoreando a 220 nm. MS (ES) : m/z 303.21 [M+H]+.
Ejemplo 751 [3aS- (3aa, 43,73, 7aa) ] -Hexahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-4, 7- epoxiisobenzofuran-1, 3-diona (751) A una solución del compuesto 471DÜ (2.36 g, 6.21 mmol) en tetrahidrofurano (THF, 20 mL) se enfrió en un baño de hielo (~5°C) se agregó, en una porción, solución 1M NaOH acuosa (10 mL, 10 mmol) . La mezcla de reacción amarillo claro resultante, se agitó por 30 min. , después se acidificó por la adición de una solución HC1 1M acuoso (12 mL, 12 mmol) y se dividió entre agua (100 mL) y EtOAc (40 mL) . La capa acuosa se separó y extrajo con EtOAc (25 mL) . Las fases orgánicas se combinaron, se secaron rápidamente sobre sulfato de sodio y se filtraron, enjuagando con THF caliente para disolver algún producto sólido precipitado. Se filtró el concentrado in vacuo para dar el intermediario amido-ácido de anillo abierto, crudo como un sólido blanco. Una suspensión del material crudo suspendida en 60 mL de THF seco y 25 mL de HOAc glacial y se calentó con agitación hasta 60 °C tiempo durante el cual la mezcla se hizo homogénea. Después de 9 h, la mezcla de reacción se enfrió y concentró in vacuo para dar un sólido amarillo pálido. El sólido se trituró con 30 mL de tolueno, se entibió (~50 °C) , se dejó después enfriar a temperatura ambiente. El producto insoluble se recolectó en un embudo Buchner, se lavó con tolueno y se secó bajo vacío para resultar el compuesto 751 (75%) como un sólido blanco. 400 MHz 2H RM (DMS0-d6) d 1.34 (s, 3H) , 1.34 (m, 1H) , 1.45 (s, 3H) , 2.32 (dd, J=7.3, 13.1, 1H) , 3.20 (d, J=7.3, 1H) , 3.28 (d, J=7.2, 1H) , 3.79 (m, 1H) , 5.11 (d, J=6.1, 1H) ; 100 MHz 13C RMN (DMSO-dg) d 169.6, 86.7, 82.3, 72.8, 52.9, 50.3, 46.5, 16.0, 11.2. La estereoquímica absoluta del compuesto 751 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÜ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior.
Ejemplo 752 [3aR- (3aa, ß, 7ß, 7aa) ] -Hexa idro-5-hidroxi-4, 7 -dimetil- , 7- epoxiisobenzofuran-1, 3-diona (752) El compuesto 752 se sintetizó como se describe en el ejemplo 751 con la excepción de que el compuesto de partida 471DÍ se utilizó como el material de partida, más que el compuesto 471DÜ. 400 MHz XH RMN (DMSO-d6) d 1.34 (s, 3H) , 1.34 (m, 1H) , 1.45 (s, 3H) , 2.32 (dd, J=7.3, 13.1, 1H) , 3.20 (d, J=7.3, 1H) , 3.28 (d, J=7.2, 1?)·, 3.79 (m, 1H) , 5.11 (d, J=6.1, 1H) ; 100 MHz 13C RMN (DMS0-d6) d 169.6, 86.7, 82.3, 72.8, 52.9, 50.3, 46.5, 16.0, 11.2. La estereoquímica absoluta del compuesto 752 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior. [3aR- (3aa,43, 53,73,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4/ 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -yodobenzonitrilo A. 4- (2 , 5-Dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-.il) -2-trifluorometil-benzonitrilo (453A) Una mezcla de 3-trifluorometil-4-ciano-anilina (24.0 g, 129 mmol) y anhídrido maleico (14.0 g, 143 mmol) en 50 mL de ácido acético se calentó a 115°C durante la noche. Se obtuvo un precipitado durante el periodo de calentamiento. La reacción se dejó reposar a temperatura ambiente por un periodo adicional durante la noche.. El sólido se separó por filtración, la torta filtro se lavó con éter de dietilo y se secó para dar 21 g (79 mmol, 61%) del compuesto 753A como un sólido blanco descolorido. CLAR: 100% a 2.11 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
B. (3aa, 4p,7P,7aa) ] -4- (1 , 3 , 3a, 4 , 7 , 7a-Hexahidro-4 , 7-dimetil-1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(tri luorometil)benzonitrilo (753B) Una suspensión de 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-2 , 5-dioxo-lH- pirrol-l-il) -2-trifluorometil -benzonitrilo (15. Og, 56.35 mmol) y 2 , 5-dimetilfurano (32.5g, 338 mraol) se agitó a 60°C por 3h, seguido por la agitación continua por otras 14h a 23°C. La mezcla se diluyó con tolueno frío (~5°C) (15 mL) y el sólido blanco descolorido resultante se recolectó por filtración mientras estaba frío. La torta filtro se lavó con tolueno frío (20 mL) y se secó a 23 °C en un horno al vacío por 24 h para proporcionar el compuesto 753B (18.6g, 91% rendimiento) con una pureza de 98.7% como se califica por CLAR .
C. [3aR- (3aa,43,5 ,73,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7- dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (753C) Una suspensión espesa del compuesto 753B (5.0g, 13.81 mmol), dímero de cloruro de alilpaladio (10 mg, 0.027 mmol) y (R) -2-metoxi-2 ' -difenilfosfino-1 , 1' -binaftilo (R-MOP, 26mg, 0.055 mmol) en THF (14 mL) se purgó con nitrógeno y. se enfrió hasta 10 °C. A la mezcla anterior, se agregó triclorosilano (3.7g, 27.62 mmol) lentamente durante un periodo de 10 min. y la mezcla heterogénea resultante se agitó por 24 h a 10°C. La mezcla se diluyó con THF (85 mL) y se enfrió además hasta- -20 °C. A la mezcla anterior se agregó una solución de trietilamina (9.76g, 96.67 mmol) en etanol (6.35g, 138.1 mmol), lentamente manteniendo la temperatura <25°C y se agitó por otras 2 h a temperatura ambiente. El sólido blanco se filtró y la torta filtro se lavó con THF (50 mL) y el filtrado se evaporó bajo presión reducida. El residuo aceitoso se disolvió en acetato de etilo (100 mL) y se agitó a 23°C en presencia de ácido tritiocianúrico (T T, 500mg) y carbón mineral (500mg) por 5h. La suspensión espesa se filtró a través de una almohadilla de celite y gel de sílice y el filtrado se evaporó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en una mezcla de THF (175 mL) y metanol (125 mL) , y a esta mezcla se agregó fluoruro de potasio anhidro (2.0g, 34.5 mmol), carbonato ácido de potasio (6.9g, 69 mmol), seguido por el aducto de peróxido de hidrógeno-urea (6.5g, 69 mmol) . Esta suspensión se agitó a temperatura ambiente por 14 h y se agregó una cantidad adicional de fluoruro de potasio (800 mg, 13.81 mmol), carbonato ácido de potasio (1.38 g, 13.81 mmol) y aducto de peróxido de hidrógeno-urea (2.59 g, 27.62 mmol) . La agitación continuó por otras 12 h y la suspensión espesa se filtró y la torta filtro se lavó con acetato de etilo (100 mL) . El filtrado se lavó consecutivamente con sulfito ácido de sodio acuoso al 10% (50 mL x 2) , agua (50 mL) y salmuera (50 mL) . El solvente se evaporó bajo presión reducida para proporcionar una espuma café claro. La cromatografía en columna de esta espuma usando gel de sílice y EtOAc-heptano (2:3) resultó en el compuesto 753C (4.72g, 90%, >99% puro por CLAR) como un sólido blanco descolorido. Este material tiene una pureza enantiomérica de >96% ee por CLAR quiral y CL-EM: m/z 379 (M+H") . La estereoquímica absoluta del compuesto 753C se estableció por comparación con el material existente de estereoquímica conocida como se describe en el Ejemplo 483.
D. Ácido [13-(1ß,2a,3a,4ß,6ß)] -3- [ [ (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) amino] carbonil] - 6-hidroxi- 1 , 4 -dimetil - 7 -oxa-biciclo [2.2.1] heptano-2 -carboxílico y ácido [1R-(1ß,2a, 3a, 4ß, 5ß) ] -3- [ [ (4-Ciano-3-(trifluorometil) fenil) amino] carbonil] -5-hidroxi-l,4-dimetil- 7-oxa-biciclo[2.2.1]heptano-2-carboxílico (753DÍ y 753DÜ) El compuesto 753C (25.0 g, 65.7 mmol) se disolvió en THF (100 mL) a 22°C y se agregó 1 N NaOH (100 mL) . Después de 1 h, se agregó THF (100 mL) , HC1 1 N (110 mL) y salmuera (100 mL) . La mezcla se extrajo después una vez con EtOAc (200 mL) y dos veces con 1:1 THF/EtOAc (200 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, se filtraron y concentraron in vacuo para dar los compuestos 753DÍ y 753DÜ (1:1 por CLAR) como un sólido blanco. No fue necesaria purificación. CLAR: 100% a 2.217 y 2.413 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
E . [3aR- (3aa, 4ß , 7ß , 7aa) ] -Hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxiisobenzofuran-1 , 3-diona (753E) Los compuestos 753DÍ y 753DÜ se suspendieron en una mezcla de THF (500 mL) y AcOH (200 mL) y se calentaron hasta 60 °C por 16 h. La reacción se hizo homogénea después de 4 h. La reacción se enfrió a 22 °C y se concentró in vacuo. Se agregó después tolueno (200 mL) y la mezcla se calentó hasta 90 °C por 4 h hasta que se había disuelto todo el producto. La mezcla se enfrió después hasta 22 °C y se dejó reposar por 20 h. El compuesto 753E se precipita de la solución durante un periodo de 20 h. El sólido resultante se filtró y enjuagó con tolueno, seguido por secado in vacuo. Se obtuvo un rendimiento de 11.93 g del compuesto crudo 753E como un sólido blanco descolorido. El compuesto crudo 753E (10 g) se disolvió en 350 mi de EtOAc tibio (La solución estaba turbia) , y después se agregaron 5 g de carbón decolorante y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 40 min. Después de filtrar a través de celite, la torta filtro se lavó con EtOAc caliente (2 x 50 mi) . La concentración del filtrado resultó en un sólido blanco descolorido que se disolvió en 40 mi de acetonitrilo caliente. Después de agregar cuidadosamente 200 mi de éter de etilo, se agregaron 300 mi de hexano y el matraz se dejó reposar 18 hrs a temperatura ambiente. La filtración y secado resultaron en 8.32 g del compuesto 753E como un sólido cristalino incoloro. 1H RMN (DMSO-d6 ) : d = 5.11 (d, 1H, J = 6.0 Hz), 3.78 (dd, 1H, J = 7.2, 30.6 Hz) , 3.27 (d, 1 H, J = 7.2 Hz), 3.20 (d, 1 H, J = 7.3 Hz) , 2.27 (dd, 1H, J = 7.3, 13.1 Hz) , 1.44 (s, 3H) , 1.33 (s, 3 H) y 1.32 ppm (m, 1H) .
F. 4 -Amino-2 -yodo-benzonitrilo (753F) El 2-yodo-4-nitro-benzonitrilo (1.00 g, 3.65 mmol, se preparó por el método dado en J. Med. Chem. 2000, 43, 3344-47) se disolvió en THF (20 mL) a 60°C con agitación mecánica. Se agregó después EtOH (25 mL) , seguido de NH4C1 acuoso (0.293 g, 5.48 mmol en 20 mL H20) . Se agregó después polvo de hierro (malla 325, 0.815 g, 14.6 mmol) con agitación vigorosa. Después de 2 h, la reacción estaba completa. Se enfrió a 22 °C y se filtró a través de celite enjuagando con EtOAc. La mezcla se concentró después hasta ~20 mL y después se diluyó con EtOAc (200 mL) y se lavó una vez con 1 N NaOH (50 mL) , una vez con salmuera (50 mL) y se secó sobre MgS04 anhidro, para dar compuesto el 753F (0.710 g) como un sólido amarillo claro. No se necesitó purificación adicional. CLAR : 99% a 2.147 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
G. [3aR- (3aa,4P, 5ß, 7ß,7ßa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 -yodobenzonitrilo (753G) Una mezcla del compuesto 753E (1.60 g, 7.57 mmol), compuesto 753F (1.32 g, 5.41 mmol), mallas moleculares de 4Á (2.0 g) en dimetilacetamida (8 mL) se agitó en un baño de aceite a 175°C por 4 h. La mezcla obscura resultante se enfrió, se diluyó con EtOAc (50 mL) se filtró después para retirar las mallas y se enjuagó con EtOAc . El filtrado se dividió entre EtOAc (50 mL) y agua (75 mL) . La fase orgánica se separó, se lavó con agua (2 x 75 mL) , salmuera (50 mL) , después se diluyó con tetrahidrofurano (20 mL) , se secó sobre sulfato de sodio y concentró in vacuo para dar una espuma sólida. El material crudo se trituró con éter de dietilo (100 mL) después se agitó por 1.5 h. El precipitado sólido se recolectó en un embudo Buchner, y después se suspendió en éter de dietilo (50 mL) y se agitó por 16 h. El sólido resultante se recolectó en un embudo Buchner, se enjuagó con éter de dietilo y se secó bajo vacío (90°C) para resultar el compuesto 753G (67%) como un sólido blanco descolorido. CLAR : 96% a 3.00 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . MS (ES) : m/z 438.90 [ +H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 753G se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 753C y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta por la nomenclatura.
Ejemplo 754 [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7P,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 -yodobenzonitrilo (754) Una mezcla del compuesto 751 (850 mg, 4.01 mmol) , 4-ciano-3 -yodo-anilina (975 mg, 4.01 mmol), mallas moleculares de 4Á (1.2 g) en dimetilacetamida (4.5 mL) se agitó en un baño de aceite a 175 °C por 4 h. La mezcla obscura resultante se enfrió, se filtró para retirar las mallas y se enjuagó con EtOAc. El filtrado se dividió entre EtOAc (50 mL) y agua (50 mL) . La fase orgánica se separó, se lavó con agua (2 x 50 mL) , salmuera (25 mL) , se secó sobre sulfato de sodio y se concentró in vacuo. El material crudo se disolvió en tetrahidrofurano y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice, se eluye con 1:4 acetona/cloruro de metileno para dar un sólido blanco impuro. El material impuro se suspendió en éter de dietilo (75 mL) , se agitó por 18 h, después se recolectó en un embudo Buchner para resultar 650 mg (37%) del compuesto 754 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.90 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . MS (ES): m/z 438.95 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 754 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 755 Una solución del compuesto 471DÍ (80 mg, 0.21 mmol) , etil isocianato (30 mg, 0.43 mmol) y 4 -dimetiaminopiridina (5 mg, 0.04 mmol) en tetrahidrofurano seco (1 mL) se calentó hasta 55°C por 2 h, después se agregó etil isocianato adicional (30 mg) y se calentó por otras 2 h. Se agregó una porción final de EIC (30 mg) , y entonces después de 16 h la mezcla de reacción se enfrió, se concentró in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02, se eluye con 2:1 EtOAc/heptano para dar 80 mg (86%) del compuesto 755 como un sólido blanco. CLAR: 94% a 3.51 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . MS (ES) : m/z 452.29 [M+H] + La estereoquímica absoluta del compuesto 755 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471Di y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 756 Una solución del compuesto 471DÜ (80 mg, 0.21 mmol) , etil isocianato (100 mg, 1.4 mmol) y 4-dimetiaminopiridina (8 mg, 0.07 mmol) en tetrahidrofurano seco (2 mL) se calentó hasta 60°C por 16 h, después se enfrió, se agregó MeOH y la solución se concentró in vacuo. La mezcla de reacción se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice, se eluye con 2:1 EtOAc/heptano para dar 84 mg (90%) del compuesto 756 como una espuma de un sólido blanco. CLAR: 94% a 3.54 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . MS (ES) : m/ z 452.34 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 756 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÜ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 757 A. (757A) Una mezcla del compuesto 471Di (620 mg, 1.63 mmol), óxido de plata (I) (3.78 g, 16.3 mmol), yoduro de alilo (2.74 g, 16.3 mmol) y eCN seco (15 mL) se agitó rápidamente a 75- 80°C por 7.5 h. La mezcla resultante se enfrió y filtró a través de una almohadilla de Celite enjuagando con EtOAc. El filtrado se concentró in vacuo y el material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 se eluye con 1:1 EtOAc/heptano para dar 570 mg (83%) del compuesto 757A como un vidrio. CLAR: 96% a 3.72 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . MS (ES) : m/z 421.27 [M+H] +.
B . (757B) A una mezcla del compuesto 757A (85mg, 0.20 mmol) , N-óxido de 4-metilmorfolina (26mg, 0..22 mmol) y acetona (1.6 mL) a temperatura ambiente se agregó agua (0.4 mL) y después una solución de tetróxido de osmio al 2.5% en t-butanol (17 mg, 0.002 mmol) . La mezcla de reacción se agitó por 5 h, después se filtró a través de una almohadilla de Florosil . Se filtró el concentrado in vacuo y el residuo se dividió entre EtOAc y solución acuosa 1M de HCl . La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio, se concentró in vacuo y el material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02, se eluye con 2:1 acetona/heptano para dar el compuesto 757B (52 mg, 55%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.11 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . MS (ES) : m/z 455 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 757B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471Di y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 758 A una solución del compuesto 757A (45 mg, 0.11 mmol) , tetracloruro de carbono (0.50 mL) , acetonitrilo (0.5 mL) y agua (0.75 mL) a temperatura ambiente, se agregó peryodato de sodio (94 mg, 0.44 mmol), entonces después de varios minutos, hidrato del cloruro de rutenio(III) (50 mg, 0.24 mmol). Después de 30 min. la mezcla obscura se dividió entre cloruro de metileno (20 mL) y agua (20 mL) . La mezcla se filtró para retirar los sólidos, después la fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 se eluye con 1:20 MeOH/EtOAc, después 1:5:100 HOAc/MeOH/EtOAc para dar el compuesto 758 (19 mg, 36%) como una espuma de un sólido blanco. CLAR : 99% a 3.31 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . MS (ES): m/z 437.23 [M-H] " . La estereoquímica absoluta del compuesto 758 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 759 A una solución del compuesto 471DÍ (100 mg, 0.26 mmol) y trietilamina (50 mg, 0.50 mmol) en cloruro de metileno seco (3 mL) enfriado en un baño de hielo se agregó cloroformiato de etilo (40 L, 0.40 mmol). La reacción se entibió hasta temperatura ambiente por 2 h y se agregó una porción adicional de cloroformiato de etilo (40 µL) , trietilamina (50 mg) , 4 -dimetilaminopiridina (10 mg, 0.08 mmol). La mezcla de reacción se agitó por 18 h a temperatura ambiente, después se dividió entre 25 mL de EtOAc y 25 mL de una solución acuosa 1M de HC1. La fase orgánica se separó, se lavó con 1M HCl acuoso (2 x 25 mL) , salmuera (1 x 25 mL) , se secó (sulfato de sodio) y se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con 1:1 EtOAc/heptano, seguida por recristalización (EtOAc/heptano) resultó en 76 mg (65%) del compuesto 759 como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.85 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . MS (ES) : m/z 453.01 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 759 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 760 [3aS- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ] -2- (4-Cloro-2-metil-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (760D) A. N- (4-Cloro-3 - trifluorometilfenil) -2, 2 -dimetilpropionamida (760A) A una solución de 4 -cloro-3 - (trifluorometil ) anilina comercialmente disponible (15.0 g, 76.7 mrnol) en THF anhidro (200 mL) enfriada hasta 0-5 °C se agregó trietilamina (11.7 mL, 84.4 mmol) , seguida por cloruro de pivaloilo (10.4 mL, 84.4 mmol) durante 30 min. El baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La mezcla se diluyó con éter y se filtró. El filtrado se lavó con agua (2X) y salmuera, se secó sobre MgS04, se filtró y concentró. El residuo se trituró con hexanos y el sólido se filtró y se secó in vacuo para resultar el compuesto 760A (20.4 g, 95%); MS (ES) : m/z = 280 [M+l] +.
B. N- (4-Cloro-2-metil-3-trifluorometilfenil ) -2 , 2 -dimetilpropionamida (760B) A una solución de N- (4 -cloro-3 - trifluoromet il fenil ) - 2 , 2 -dimetilpropionamida (2.29 g, 8.19 mmol) en THF anhidro (25 mL) enfriada hasta 0-5°C se agregó una solución 1.6 M de n-butillitio en hexanos (12.3 mL, 19.7 mmol) lentamente de manera que la temperatura de reacción se mantuvo debajo de 5°C. La solución se agitó a 0-5°C por 1.5 h. Una solución de yodometano (0.56 mL, 9.01 mmol) en éter de petróleo (2 mL) se agregó durante 20 min. mientras se mantenía la temperatura debajo de 5°C. La suspensión se agitó a 0-5°C por 1 h y se diluyó con agua y éter. La capa acuosa se extrajo con éter y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron. El residuo se cromatografió (gel de sílice) , se eluye con CH2C12 para resultar el compuesto 760B (1.60 g, 67%) . MS (ES) : m/z = 294 [M+l]+.
C. 4-Cloro-2-metil-3-trifluorometilanilina (760C) N- (4-Cloro-2-metil-3-trifluorometilfenil) -2 , 2-dimetil-propionamida 1.0 g, 3.4 mmol) se agregó a una mezcla 1:1 (15 mL) de HC1 concentrado y etanol y se calentó a reflujo durante la noche. La reacción se enfrió y se concentró in vacuo para dar un sólido color marrón que se dividió después entre EtOAc y NaHC03 saturado. La capa orgánica se separó, se lavó con agua, salmuera, se secó (Na2S0 ) , se filtró y concentró para dar el compuesto 760C (0.54g, 76%) como un sólido café aceitoso.
D. [3aS- (3aa,4p,5 ,7p,7aa)] -2- (4 -Cloro-2 -metil-3- (trifluorometil) fenil)hexahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-1,3 (2H) -diona (760D) A un tubo Pyrex que se sella, se agregó 4-cloro-2-metil-3-trifluorometilanilina (O.lg, 0.48. mmol), el compuesto 751 (0.15g, 0.72 mmol), TEA (0.24g, 0.33 mL, 2.4 mmol), gS04 (0.14g, 1.2 mmol), y tolueno (0.5 mL) . La reacción se calentó en el tubo sellado a 150°C por 18 h. La reacción enfriada se diluyó con EtOAc, se filtró, se concentró y se purificó por CCD Prep usando CH2C12 como eluyente para dar el compuesto 760D (0.078g, 40%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 90% a 3.26 min. (Columna Y C S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES): m/z 404.01 [M+H]*. La estereoquímica absoluta del compuesto 760D se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 761 [3aR- (3aa,4 , 53,7P,7aa) ] -2- (4-Cloro-2-metil-3- ( trifluorometil) fenil) hexahidro-5- idroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7 - epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona (761) A un tubo Pyrex que se sella, se agregó el compuesto 760C (O.lg, 0.48 mmol) , compuesto 752 (0.15g, 0.72 mmol) , TEA (0.24g, 0.33 mL, 2.4 mmol), MgS04 (0.14g, 1.2 mmol), y tolueno (0.5 mL) . La reacción se calentó en el tubo sellado a 150°C por 18 h. La reacción enfriada se diluyó con EtOAc, se filtró, se concentró y se purificó por CCD-Prep en Si02 usando CH2C12 como eluyente para dar el compuesto 761 (0.056g, 29%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 90% a 3.27 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES): m/z 403.91 [M+H] + . La estereoquímica absoluta del compuesto 761 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y retención de la configuración en ella. La estereoquími absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resul de la nomenclatura.
Ejemplo 762 A. 3 -Metoxipiridina-1 -óxido (762A) La 3 -Metoxipiridina (20.08g, 209 mmol) se disolvió en 100 mL de ácido acético. Se agregó 30% de H202 (28.3 mL, 275 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 70°C por seis h. La mezcla de reacción enfriada se concentró y el residuo se disolvió en CH2C12 y se agitó durante la noche con 20 g de carbonato de potasio sólido. La mezcla se filtró y concentró para dar el compuesto 762A (25.2g, 100%) como un sólido amarillo claro que se caracteriza por 1H RMN y se lleva a la etapa siguiente.
B. 2-Ciano-3-metoxipiridina (762B) 3 -Metoxipiridina- 1 -óxido (25.2g, 209 mmol) se disolvió en acetonitrilo (260mL) . Se agregaron trimetilsilicianuro (66.35g, 669 mmol) y trietilamina (45.13g, 446 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante la noche. La solución enfriada se concentró in vacuo para dar un sólido café que se dividió entre CH2C12 y Na2C03 3M. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó ( gS0 ) , se filtraron y concentraron in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía en gel de sílice usando 1:1 EtOAc/hexanos como eluyente. El compuesto 762B se aisló (17.63g, 63%) como un sólido amarillo claro. CLA : 96.2% a 1.37 min. (Columna Y C S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. , observando a 220 nm. MS (ES): m/z 134.88 [M+H]+.
C. 2 -Ciano-3-metoxi-5-nitropiridina (762C) La 2 -Ciano-3 -metoxipiridina (17.63g, 131.4 mmol) se disolvió en CH2C12 (400 mL) y enfrió en un baño de hielo. Se disolvieron nitrato de tetrabutilamonio (52.02g, 170.8 mmol) y anhídrido trifluoroacético (35.88g, 170.8 mmol) en 200 mL de CH2C12 y se agregó en una corriente delgada por medio de un embudo de adición. La mezcla se entibió hasta 23 °C y se agitó por 60 h. La mezcla de reacción se agitó por una hora con bicarbonato de sodio saturado. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se filtró, se concentró in vacuo, y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando CH2C12 como eluyente para dar el compuesto 762C (18.07g, 79%) como un sólido amarillo claro cristalino. CLAR: 100% a 1.67 min. (Columna Y C S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES): m/z 179.93 [M+H]+.
D. 5-Amino-2-ciano-3-metoxipiridina (762D) La 2-Ciano-3 -metoxi - 5 -nitropiridina (l.Og, 5.6 mmol) se disolvió en 1:1 EtOAc/ AcOH (10 mL) y se calentó hasta 65°C. Se agregó polvo de hierro (1.61g, 28 mmol, malla 325) y la mezcla se agitó por dos horas. La mezcla se filtró a través de Celite y el filtrado se concentró in vacuo. El residuo se dividió entre EtOAc y bicarbonato de sodio saturado acuoso. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y concentró. El residuo se purificó por Si02 CCD-prep usando CH2C12 como el eluyente para dar el compuesto 762D (0.805 g, 97%) como un sólido blanco descolorido. CLAR : 100% a 1.31 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES) : m/z 149.90 [M+H] + .
E. (762E) 5-Amino-2-ciano-3 -metoxipiridina (O.lg, 0.67 mmol) , mallas moleculares de 4Á (0.4 g) , el compuesto 751 (0.142 g, 0.67 mmol), y N, -dimetilacetamida (0.67 mL) se combinaron en un tubo Pirex que se sella y se calentaron a 170°C por 1 h. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con EtOAc y se filtró. El filtrado se lavó 3x con 1:1 NH4C1 saturado / agua y después salmuera. El filtrado se secó sobre Na2S04, se filtró, se concentró y se purificó por CCD-prep usando 4:1 cloroformo/acetona como el eluyente para dar el compuesto 762E (0.062g, 27%) como un sólido blanco. CLAR: 94% a 1.85 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES) : m/z 344.02 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 762E se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 763 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro- 5-hidroxi-4 , 7 -dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3- ( rifluorometil) -2 - piridincarbonitrilo (763F) A. 3-Bromopiridina-l-óxido (763A) Se agregaron 3 -Bromopiridina (11.06g, 70 mraol) , 30% H202 (14 mL, 140 mmol), y metiltrioxorenio (0.035g, 0.14 mmol) a 28 mL de CH2C12 y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó una porción de 25 mg de dióxido de manganeso y la reacción se agitó hasta que estuvo completa la evolución del oxígeno (-1 h) . La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04 , se filtró, y se concentró in vacuo para dar el compuesto 673A (9.84g (81%) como un aceite amarillo.
B. 3-Bromo-2-cianopiridina (763B) El 3-Bromopiridina-l-óxido se convirtió al compuesto 763B como se describe en el ejemplo 762B. El producto crudo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando CH2CI2 como eluyente para dar el compuesto 763B (6.64g, 65%) como un sólido blanco descolorido. El producto se caracterizó por 1H RMN.
C. 3-Bromo-2-ciano-5-nitropiridina (763C) La 3 -Bromo-2 -cianopiridina se convirtió al compuesto 763C como se describe en el ejemplo 762C. El producto crudo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando 20% hexanos / CH2C12 como eluyente para dar el compuesto 763C (1.27g, 16%) como un sólido blanco descolorido. El producto se caracterizó por 1H RMN.
D. 2 -Ciano- 5-nitro-3 - trifluorometilpiridina (763D) La 3-Bromo-2-ciano-5-nitropiridina (0.23g, 1 mmol) se disolvió en DMF (3 mL) . Se agregaron yoduro de cobre (0.023g, 0.12 mmol) y metil 2 , 2 -difluoro- 2 - ( fluorosulfonil ) acetato (O.lg, 0.5 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 80°C por 7 h. Se agregó metil 2 , 2 -difluoro-2 - ( fluorosulfonil ) acetato adicional (0.05 g, 0.25 mmol) y se continuó el calentamiento a 80°C por 8 h adicionales. La mezcla de reacción enfriada se vació en agua para dar un aceite oscuro. Se decantó el agua y el aceite se disolvió .en EtOAc y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando CH2C12 como eluyente para el compuesto 763D (0.065g, 43%) como un aceite amarillo. CLAR : 90% a 2.09 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm.
E. 5-Amino-2-ciano-3 - trifluorometilpiridina (763E) La 2-Ciano-5-nitro-3-trifluorometilpiridina (0.065g, 0.3 mmol) reaccionó de la misma forma como se describe en el ejemplo 762D para dar el compuesto deseado 763E (0.046g, 82%) como un sólido color oro después de la trituración con éter. CLAR: 100% a 2.07 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES) : m/ z 187.82 [M+H]+.
F. [3aR- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ] -5- (Octahidro-5 -hidroxi-4 , 7 -dimetil-1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -3- ( trifluorometil) -2 -piridincarbonitrilo (763F) La 5-Amino-2-ciano-3-trifluorometilpiridina (0.044g, 0.24 mmol) reaccionó con el compuesto 752 (0.087g, 0.41 mmol) de acuerdo con el procedimiento descrito por la síntesis del compuesto 762. El producto crudo se purificó por Si02 CCD-prep usando 15% acetona / CHC13 como eluyente para dar el compuesto 763F (0.058g, 65%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 92% a 2.58 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. MS (ES) : m/z 382.33 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 763F se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 764 [3aS- (3atx, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi -4, 7 -dimetil - 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3- ( trifluorometil ) -2- piridincarbonitrilo (764) La 5-Amino-2-ciano-3-trifluorometilpiridina (0.2g, 1.07 mmol) reaccionó con el compuesto 751 (0.386g, 1.82 mmol) según el procedimiento descrito en el ejemplo 763F. El producto crudo se purificó por Si02 CCD-prep usando 15% acetona / CHC13 como el eluyente para dar el compuesto 764 (0.293g, 72%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 92% a 2.58 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 382.23 [ +H] + . La estereoquímica absoluta del compuesto 764 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 765 (765D) Se suspendió la 2-Hidroxi-5-nitropiridina (7.0g, 50 mmol) en 100 mL de ácido sulfúrico al 20%, y se trató después con yodato de potasio (4.2g, 19.6 mmol) disuelto en 10 mL de agua. La mezcla se calentó hasta 100 °C y el yoduro de potasio (8.0g, 48.2 mmol) disuelto en 20 mL de agua se agregó gota a gota durante una hora. La mezcla de reacción cambia a un rojo púrpura y se forma un precipitado. Después de 0.5 h, la mezcla de reacción se enfrió y. se filtró. El sólido se agitó por 15 min. con 10% de una solución de meta-bisulfito de sodio, se filtró, se lavó con agua y se secó a 80°C durante la noche sobre una bomba de vacío para dar el compuesto deseado 765A (12.32 g, 92%) como un sólido amarillo. El producto se caracterizó por 1H RMN.
B. 2-Cloro-3-yodo-5-nitropiridina (765B) La 2-Hidroxi-3-yodo-5-nitropiridina (2.55g, 9.5 mmol) , pentacloruro de fósforo (2.60g, 12 mmol) y oxicloruro de fósforo (2 mL) se combinaron en un matraz bajo nitrógeno y se calentaron hasta 140°C por 45 min. La mezcla de reacción enfriada se vació sobre hielo para dar un sólido que se dividió entre CH2C12 y agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se filtró, y el solvente se separó in vacuo para dar el compuesto 765B (2.25 g, 83%) como un sólido amarillo. CLAR: 98.5% a 2.75 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm.
C. 5-Amino-2-cloro-3-yodopiridina (765C) La 2 -Cloro-3 -yodo-5-nitropiridina (0.25g, 0.88 mmol) reaccionó con polvo de hierro (0.25g, 4.4 mmol) en la forma descrita en el ejemplo 762D. La separación del solvente in vacuo dio el compuesto 765C (0.172g, 77%), como un sólido dorado amarillo. CLAR: 100% a 2.32 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES): m/z 255.03 [M+H]+.
D. (765D) 5-Amino-2-cloro-3-yodopiridina (0.06g, 0.24 mmol ) y el compuesto 752 (0.085g, 0.4 mmol) reaccionaron como se describió previamente en el ejemplo 762E. El producto crudo obtenido después de la preparación se purificó por S1O2 CCD-prep usando 10% acetona/CHCl3 como eluyente para dar -el compuesto 765D (0.067g, 62%) como una espuma blanca descolorida. CLAR: 95% a 2.65 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. E (ES) : m/z 448.96 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 765D se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 766 [3aR- (3aa,4p,5p,7p,7aa) j -2- (4 -Cloro-3 - (trifluorometil) iridinil) hexahidro- 5 -hidroxi-4 , 7-dimetil- 4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (766C) A. 2-Cloro-5-nitro-3-trifluorometilpiridina (766A) 2-Cloro-3-yodo-5-nitropiridina (l.Og, 3.5 mmol), metil 2 , 2 -difluoro-2 - (fluorosulfonil) acetato (0.35g, 1.82 mmol), y yoduro de cobre (0.083g, 0.44 mmol) reaccionaron en DMF (10 mL) según el método descrito en el ejemplo 763D. El producto crudo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando 30% CH2C12 / hexano como el eluyente para dar el compuesto 766A (0.278g, 35%) como un aceite incoloro. El producto se caracterizó por 1H RM y 19F RMN.
B. 5-Amino-2-cloro-3-trifluorometilpiridina (766B) La 2-Cloro-5-nitro-3-trifluorometilpiridina (0.16g, 0.68 mmol) y polvo de hierro (0.2g, 3.42 mmol, Malla 325) reaccionaron como se describe en el ejemplo 762D. La purificación del producto crudo por CCD-prep usando 10% éter / CH2C12 como eluyente dio el compuesto 766B (0.098g, 73%) como un sólido amarillo. CLAR: 89% a 2.52 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 197.01 [M+H]+.
C. [3aR- (3aa,4P,5p,7p,7aa) ] -2- (4 -Cloro- 3- ( trifluorometil) iridinil) hexahidro- 5 -hidroxi -4 , 7 -dimetil -4,7-epoxi-lH-isoindol-l,3 (2H) -diona (766C) 5-Amino-2-cloro-3-trifluorometilpiridina (0.045g, 0.23 mmol) y el compuesto 751 (0.085g, 0.4 mmol) reaccionaron como se describe en el ejemplo 762E. Después de la preparación, el producto crudo se purificó por CCD-prep usando 10% acetona/CHCl3 como el eluyente para dar el compuesto 766C (0.038g, 42%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 100% a 2.92 min (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES): m/z 391.06 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 766C se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la conf guración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 767 La 5-Amino-2-cloro-3-yodopiridina (0.06g, 0.24 mmol) compuesto 752 (0.085g, 0.4 mmol) reaccionaron como describe en el ejemplo 762E. El producto crudo de reacción se purificó por CCD-prep usando 20% acetona/CHCl3 como el eluyente para dar el compuesto 767 (0.061g, 58%) como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 2.64 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 449.02 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 767 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 768 [3aS- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ] -2- (4-Cloro-3- ( trifluorometil)piridinil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil- 4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (768) La 6-Cloro-5-trifluorometil -piridin- 3 - ilamina (0.045g, 0.23 mmol) y el compuesto 752 (0.085g, 0.4 mmol) reaccionaron como se describe en el ejemplo 762E. El producto crudo se purificó por Si02 CCD-prep usando 10% acetona/CHCl3 como el eluyente para dar el compuesto 768 (0.048g, 54%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.91 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 391.21 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 768 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 769 A. 5-Amino-3-bromo-2-cianopiridina (769A) 3-Bromo-2-ciano-5-nitropiridina (0.4g, 1.75 mmol) y polvo de hierro (0.51 g, 8.8 mmol, Malla 325) reaccionaron como se describe en el ejemplo 762D. El sólido crudo obtenido por trituración con éter se purificó por Si02 CCD-prep usando 4:1 CH2C12 / éter como eluyente para dar el compuesto 769A (0.16 g, (65%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 100% a 1.77 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 197.93 [M+H]+.
B. (769B) La 5-Amino-3-bromo-2-cianopiridina (0.06g, 0.3 mmol) y el compuesto 752 (0.096 g, 0.45 mmol) reaccionaron como previamente en el ejemplo 762E. El producto crudo se purificó por Si02 CCD-prep usando 20% acetona/CHCl3 como el eluyente para dar el compuesto 769B (0.036g, 30%) como un sólido blanco descolorido. CLAR : 100% a 2.29 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES): m/z 393.33 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 769B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 770 La 5-Amino-3-bromo-2-cianopiridina (0.06g, 0.3 ramol) y el compuesto 751 (0.096g, 0.45 mmol) reaccionaron como previamente en el ejemplo 762E. El producto crudo se purificó por Si02 CCD-prep usando 20% acetona/CHCl3 para dar el compuesto 770 (0.038g (31%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 99.2% a 2.28 min. (Columna YMC S5 ODS) -se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 392.27 [M]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 770 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 771 A. 3-Fluoropiridina-l-óxido (771A) 3-Fluoropiridina (9.71g( 100 mmol), 30% H202 (20 mL, 200 mmol), y metiltrioxorenio (0.13g, 0.5 mmol) reaccionaron en 40 mL de CH2C12 según el mismo procedimiento descrito en el ejemplo 760C. La filtración y la concentración del solvente in vacuo dio el compuesto 771A (8.79g, 78%) como un sólido amarillo .
B. 2 -Ciano-3 -fluoropiridina (771B) 3 -Fluoropiridina-l-óxido (10. Og, 88.4 mmol ) , trimetilsililcianuro (26.32g, 265.3 mmol), y trietilamina (17.89g, 177 mmol) reaccionaron en 90 mL de acetonitrilo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 762B. La purificación del crudo por cromatografía de gel de sílice usando CH2C12 como eluyente da el compuesto 771B (7.5g, 70%) como un sólido amarillo claro.
C. 2-Ciano-3-fluoro-5-nitropiridina (771C) 2-Ciano-3-fluoropiridina (6.5g, 53.2 mmol), nitrato de tetrabutilamonio (21.07 g, 69.2 mmol), y anhídrido trifluoroacético (14.53g, 69.2 mmol) reaccionaron en 245 mL de CH2C12 utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 762C. La purificación del crudo por cromatografía de gel de sílice usando 20% hexanos/CH2Cl2 dio el compuesto 771C (0.12g, 1.3%) como un aceite amarillo.
D. 5-Amino-2 -ciano-3 - fluoropiridina (771D) 2-Ciano-3-fluoro-5-nitropiridina (0.12g, 0.72 mmol) y polvo de hierro (0.21g, 3.6 mmol, Malla 325) reaccionaron en 1:1 EtOAc/AcOH (10 mL) utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 762D. La trituración del producto crudo con éter dio el compuesto 771D (0.093g, 94%) como un sólido amarillo pálido. CLAR: 99% a 1.27 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. E (ES): m/z 138.02 [M+H] + .
E. (771E) La 5-Amino-2-ciano-3-fluoropiridina (0.45g, 0.33 mmol) y el compuesto 752 (0.104g, 0.49 mmol) reaccionaron en 0.33 mL de dimetilacetamida utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 762E. El residuo crudo se purificó por CCD-prep usando 20% acetona/CHCl3 como el eluyente, produciendo el compuesto 771E (0.026g, 23%) como un sólido color durazno pálido. CLAR: 90.2% a 1.97 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 tnin. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 332.2 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 771E se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 772 A. 2-Ciano-3-metil-5-nitropiridina (772A) La 2 -ciano-3 -metilpiridina comercialmente disponible (2.36g, 20 mmol), nitrato de tetrabutil amonio (6.7g, 22 mmol) y anhídrido trifluoroacético (4.20g, 20 mmol) reaccionaron en 65 mL de CH2C12 utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 762B. La purificación del crudo por cromatografía de gel de sílice usando 20% hexanos/CH2Cl2 como el eluyente da el compuesto 772A (l.05g (32%) como un sólido amarillo claro.
B. 5-Amino-2-ciano-3-metilpiridina (772B) La 2 -Ciano-3 -metil - 5 -nitropiridina (0.2 g, 1.23 mmol) se disolvió en 6 mL de 90% etanol y cloruro de calcio (0.07g, 0.64 mmol) se agregó seguido por polvo de hierro (0.62g, 11.1 mmol, malla 325). La mezcla heterogénea se agitó por una hora. La mezcla se filtró a través de Celite y se concentró para dar el compuesto 772B (0.13g, 81%) como un sólido café claro .
C. (772C) La 5 -Amino-2 -ciano-3 -metilpiridina (0.067g, 0.5 mmol), el compuesto 20A (0.103g, 0.53 mmol), gS04 (0.15g, 1.25 mmol), trietilamina (0.25g, 2.5 mmol) y 1 mL de tolueno se combinaron en un tubo sellado y se calentaron a 145°C por 16 h. La mezcla enfriada se diluyó con CH2C12, se filtró, y se purificó por cromatografía de gel de sílice usando 5% éter/ CH2C12 como el eluyente para dar el compuesto 772C (0.055g, 35%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 100% a 2.49 min (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES): m/z 312.2 [ +H]+.
Ejemplo 773 A. 2-Ciano-3 , 4-dimetil-5-nitropiridina (773A) La 2-Ciano-3-metil-5-nitropiridina (0.33g, 2 mmol) se disolvió en 10 mL de THF y se enfrió en un baño de hielo seco/acetona bajo nitrógeno. Se agregó bromuro de metilmagnesio (1.33 mL, 4 mmol) por medio de una jeringa durante cinco minutos. La reacción se agitó por 2 h a -70°C. Se agregó DDQ (0.068g, 3 mmol) en 7 mL de THF y la mezcla se entibió a 25°C. El solvente se separó in vacuo y el residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando CH2CI2 como el eluyente para dar el compuesto 773A (0.15g, 42%) como un aceite rojo.
B. 5-Amino-2-ciano-3 , 4-dimetilpiridina (773B) 2 -Ciano-3 , 4 -dimetil -5-nitropiridina (0.15g, 0.85 mmol), cloruro de calcio (0.05g, 0.42 mmol) , y polvo .de hierro (0.44g, 7.8 mmol, malla 325) reaccionaron como se describe en el ejemplo 772B. La purificación del producto crudo por cromatografía de gel de sílice usando 1:1 éter/ CH2C12 como el eluyente dio el compuesto 773B (0.054g, 50%) como un sólido amarillo .
C. (773C) 5-Amino-2 -ciano-3 , 4 -dimetilpiridina (0.05g, 0.34 mmol) y el compuesto 20A (O.lg, 0.5 mmol) reaccionaron como se describe en el ejemplo 772C. El producto crudo obtenido después de filtración a través de Celite se purificó por cromatografía de gel de sílice usando 10% éter/ CH2C12 como el eluyente para dar el compuesto 773C (0.33g, 30%). como un sólido amarillo. CLAR: 90% a 2.58 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES): m/z 326.22 [M+H]+.
Ejemplo 774 [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7 ,7aa) ] -4- (Octahid.ro- 5 -hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-?????-4, 7-epoxi-2H-Í3QÍndol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi- , 7-dimetil-l , 3 -dioxo- , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (774BÍ y A. [3aR- (3aa,4p, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- [5- [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] octahidro-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo- , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - ( trifluorometil) benzonitrilo y [3aS- (3aa,4P, 5a,7p,7aa) ] -4- [5- [ [ (1, 1- Dimetiletil) dimetilsilil] oxi] octahidro-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo- 4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (774AÍ y 774AÜ) El compuesto racémico 222C se separó en sus enantiómeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK AD 5x50 cm; se eluye con 7% EtOH en hexanos (isocrático) a 50 mL/min.) para dar el compuesto de elución más rápida 774Ai (18 min.) y el compuesto de elución más lenta 774AÜ.
B. [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5-hidroxi-4, 7 -dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi - 2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (774BÍ y 774BÜ) El 774AÍ y el 774AÜ (0.12g, 0.25 mmol) fueron cada uno disueltos en 2 mL de THF y se agregó 2 mL de 10% HCl/MeOH y las reacciones se agitaron durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó bicarbonato de sodio saturado y EtOAc y la capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (Na2S04) , se filtró, y se concentró in vacuo para dar el compuesto 774BÍ (0.084mg, 88%) y el compuesto 774BÜ (0.076g, 82%) como sólidos blancos. Compuesto 774BÍ: CLAR: 100% a 2.89 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 381.19 [M+H] . Compuesto 774BÜ: CLAR: 100% a 2.89 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 381.16 [M+H]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 774BÍ y 774BÜ no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 775 (775F) A. 3 -Cloropiridina-l-óxido (775A) La 3 -cloropiridina comercialmente disponible (11.36g, 100 mmol) se disolvió en 60 mL de ácido acético y se agregó peróxido de hidrógeno al 30% (15 mL) . La mezcla de reacción se calentó hasta 70°C por 16 h. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con cloroformo y se agitó con carbonato de potasio sólido. La mezcla se filtró y el solvente se separó in vacuo para dar el compuesto 775A (10.21g, 79%) como un aceite amarillo-verdoso.
B. 3 -Cloro-2-cianopiridina (775B) 3-Cloropiridina-l-óxido (2.59g, 20 mmol), trimetilsilil cianuro (5.95g, 60 mmol) , y trietilamina (4.05g( 40 mmol) se combinaron en 40 mL de acetonitrilo y reaccionaron como se describe en el ejemplo 763A. El solvente se separó in vacuo y el residuo se dividió entre CH2C12 y carbonato de potasio 3M. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , y se concentró in vacuo. La purificación del producto crudo por cromatografía de gel de sílice usando 5% éter/ CH2C12 como el eluyente dio el compuesto 775B (1.84 g, 67%) como un sólido cristalino blanco. CLAR: 100% a 1.64 min (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) :m/z 139.0[M+H]+.
C. 3-Cloro-2-ciano-5-nitropiridina (775C) 3 -Cloro-2 -cianopiridina (1.75g, 12.7 mmol), nitrato de tetrabutilamonio (5.02g, 16.5 mmol), y anhídrido trifluoroacético (3.15g, 15 mmol) se combinaron en 65 mL de CH2C12 y reaccionaron como se describe en el ejemplo 762C. El producto crudo se purificó por cromatografía de gel de sílice usando CH2C12 como el eluyente para dar el compuesto 775C (0.43g, 16%) como un sólido amarillo pálido.
D. 5-Amino-3-cloro-2-cianopiridina (775D) 3 -Cloro-2 -ciano-5-nitropiridina (0.35g, 1.9 mmol) , polvo de hierro (0.56g, 10 mmol, malla 325) y cloruro de calcio (0.06g, 0.55 mmol) se combinaron en 10 mL de 90% etanol y como se describe en el ejemplo 772B. La purificación del producto crudo por medio de cromatografía de gel de sílice usando 10% éter/ CH2C12 como el eluyente da el compuesto 775D (0.14g, 43%) como un sólido café claro. CLAR: 95.5% a 1.69 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. EM (ES) : m/z 154.03 [ +H]+.
E. (775E) La 5 -Amino- 3 -cloro-2 -cianopiridina (0.05g, 0.33 mmol) y el compuesto 20A (0.07g, 0.36 mmol) reaccionaron como se describe en el ejemplo 772C. El producto crudo obtenido después de la preparación se purificó por cromatografía de gel de sílice usando 5% éter/ CH2C12 para dar el compuesto 775E (0.054g, 50%) como un sólido blanco descolorido. CLAR -. 97.6% a 2.86 min . (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. E (ES): m/z 332.16 [M+H] +.
Ejemplo 776 A una solución transparente del compuesto 741DÍ (190 mg, 0.5 mmol) en dioxano anhidro (3.5 mL) se agregó reactivo Burgess (143 mg, 0.6 mmol) a temperatura ambiente bajo argón. Después de que la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 70 min., se agregó bis (ciclopentadienil ) dicloruro de titanio (137 mg, 0.55 mmol). La mezcla se agitó a 100°C por 1 día, después se enfrió hasta temperatura ambiente . Se agregaron H20 y una solución saturada acuosa de KHS04. La mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04 y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:4 hasta 1:0) dio el compuesto 776 (170 mg, 74%) como un sólido amarillo vidrioso. CLAR: 99% a 3.27 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A 4.6 x 50 mm se eluye con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 458 [M-H] " . La estereoquímica absoluta del compuesto 776 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 741DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 777 A. Ester de etilo del ácido Pirazol [1, 5-a] piridin-4-carboxílico (777A) A una solución transparente de éster de etilo del ácido 2 -metil-nicotínico (50.6 g, 306 mmol) en cloruro de metileno anhidro (200 mL) se agregó O-mesitilenosulfonil hidroxilamina (73 g, 337 mmol; preparada de acuerdo con un procedimiento de la literatura descrito en Krause; J.G. , Synthesis 1972, 140); en porciones a 0°C. La solución obtenida se agitó a 0°C por 15 min., y después a temperatura ambiente por 1 h. La concentración bajo presión reducida dio un sólido amarillo.
Después de que el sólido se disolvió en DMF anhidro (300 mL) , se agregó N, N-dimetilformamida dimetil acetal (122 mL, 918 mmol) a 0°C. La mezcla se agitó a 0°C por 15 min., y después a 90°C por 3 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, se mezcló con H2O (200 mL) , y se extrajo con Et20 (3 x 180 mL) . Las soluciones orgánicas combinadas se lavaron secuencialmente con salmuera (50 mL) , HC1 1N acuoso (50 mL) , y salmuera (50 mL) , y se secaron sobre Na2S04. La filtración a través de una columna de S1O2, que se eluyó después con 30% EtOAc en heptano, dio el compuesto 777A (43.3 g, 74%) como un sólido amarillo. CLAR: 80% a 3.20 min. (tiempo de retención) más 20% correspondiente al éster de metilo a 2.83 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A 4.6 x 50 inri se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 191 [M+H]+.
B. Ácido Pirazol [1 , 5-a]piridina-4-carboxilico (777B) A una mezcla agitada de éster del ácido pirazolo [ 1 , 5-a] piridina-4 -carboxílico (35.1 g, 185 mmol), KOH (85%, 25 g, 379 mmol), y MeOH (200 mL) , enfriada hasta temperatura ambiente en un baño de agua, se agregó H20 lentamente. La mezcla de reacción obtenida se agitó a temperatura ambiente por 1.5 h y después se concentró bajo presión reducida para eliminar el MeOH. Se agregó una cantidad mínima de H20 al residuo para hacer una solución transparente que se acidificó después hasta un pH=l a 0°C con HC1 acuoso (HC1 concentrado, 11 mL; HC1 5N, 10 mL, después HCl 2N y 1N) . Después del calentamiento en un baño de vapor, la mezcla se enfrió. El sólido se filtró, se lavó con H20, y se secó bajo vacío para dar el compuesto 777B (29 g, 97%) como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 2.14 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 163 [ +H] + . Ácido 7-yodo-pirazol [1, 5-a] iridina-4-carboxílico (777C) A una suspensión agitada de ácido pirazol[l,5-a] piridina-4-carboxílico (29 g, 179 mmol) en THF anhidro (1000 mL) enfriada a 0°C se agregó una solución de hexametildisilazida de litio (1M en THF, 200 mL, 200 mmol) . Después de que la mezcla se agitó a 0°C por 30 min. , se agregó una solución adicional de LHMDS (1M en THF, 320 mL, 320 mmol) a -4°C. Después de que la mezcla se agitó por 10 min. , se agregó yodo (55 g, 215 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se agitó a -4°C por 1.5 h, a temperatura ambiente por 1 h, y después se enfrió hasta 0°C. Se agregaron HCl acuoso (5N, 40 mL) y solución de NaS203 (10 g en 40 mL de H20) . La mezcla se agitó a 0°C por 30 min., y después se concentró bajo presión reducida. La mezcla residual se mezcló con una solución de NaHC03 saturado (100 mL) , éter de etilo (150 mL) , y H20 (130 mL) . La solución de éter se separó y extrajo con H20 (50 mL) . Las soluciones acuosas combinadas se lavaron con éter de etilo (150 mL) , se acidificaron hasta pH=l con una solución acuosa saturada de KHS04 , se calentó en un baño de vapor, y después se enfrió. El sólido se filtró, se lavó con H20, y después se secó después para dar el compuesto 777C (50 g, 97%) como un sólido amarillo. CLAR : 100% a 2.88 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 289 [M+H]+.
D. Ester de tert-butilo del acido ( 7 -yodo-piiazol [1 , 5 -a] iridin-4-il) -carbámico (777D) NHBoc * A una solución transparente de ácido 7 -yodo-pirazol [1 , 5- a] iridina-4-carboxílico (23.4 g, 81.2 mmol) y diisopropiletilamina (65 mL) en tert-butanol (250 mL) y tolueno anhidro (200 mL) se agregó difenil fosforil azida (25 mL, 114 mmol) bajo argón. Después de que la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 30 min. , la temperatura se elevó lentamente hasta 90°C. La mezcla se agitó a 90°C durante la noche y se concentró bajo presión reducida para eliminar los solventes. El residuo se dividió entre EtOAc (200 mL) y una solución acuosa de NaOH (2N, 75 mL) . La solución acuosa se separó y extrajo con EtOAc (100 mL) . Las soluciones orgánicas combinadas se lavaron con solución acuosa de NaOH (1N, 75 mL) , se secaron sobre Na2S0 , y concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 0:1 a 1:1) dio un sólido de tono café. La recristalización en heptano con algo de EtOAc dio el compuesto 777D (19.6 g, 67%) como un sólido amarillo. CLAR: 95% a 3.83 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 360 [M+H]+.
E. Ester de tert-butilo del ácido (7 -ciano-pirazol [1, 5-a] iridin-4-il) -carbámico (777E) Una mezcla de éster de tert -butilo del ácido (7-yodo-pirazol [1 , 5-a] piridin-4-il) -carbámico (36 mg, 0.1 mmol) , cianuro de zinc (24 mg, 0.2 mmol) , tetraquis (trifenilfosfino) paladio (0) (23 mg, 0.02 mmol), y D F anhidro (1 ttiL) se desgasificó con argón. Después, la mezcla se agitó a 80°C por 4.5 h, se enfrió hasta temperatura ambiente, se mezcló con EtOAc (6 mL) , y se filtró. Se filtró el concentrado bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación 1:4 hasta 1:2) dio el compuesto 777E (24 mg, 93%) como un sólido blanco. CLAR: 93% a 3.64 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. , contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 259 [M+H]+.
F. 4 -amino-pirazolo [1, 5-a] piridina-7-carbonitrilo (777F) A una solución transparente de éster de tert -butilo del ácido (7 -ciano-pirazol [1 , 5-a] piridin-4 -il ) -carbámico (3 g, 11.6 mmol) en cloruro de metileno (40 mL) se agregó TFA (8 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 3 h, y después se concentró bajo presión reducida. El residuo se dividió entre EtOAc (100 mL) y una solución saturada de NaHC03 (50 mL) . La solución acuosa se separó y extrajo c©n EtOAc (2x50 mL) . Las soluciones orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtró a través de una almohadilla de S1O2, y se concentró bajo presión reducida. La cristalización en EtOAc y 95% EtOH dio el compuesto 777F (1.07 g, 58%) como un sólido amarillo oscuro. CLAR: 97% a 1.96 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 159 [M+H] + .
G. (777G) Una mezcla de 4 -amino-pirazol [1 , 5-a] piridina-7-carbonitrilo (135 mg, 0.85 mmol), compuesto 752 (225 mg, 1.06 mmol), polvo de malla molecular de 4Á (850 mg) , y DMA (0.85 mL) se agitó bajo argón a temperatura ambiente por 10 min., a 170°C por 3 h, y después se enfrió hasta temperatura ambiente. El polvo de malla molecular se filtró completamente, y se filtró el concentrado bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con EtOAc (gradiente con MeOH desde 0% hasta 5%) dio el compuesto 777G (98 mg, 33%) como un sólido amarillento. CLAR: 99% a 2.28 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 ram se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 353 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 777G se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 778 Una mezcla de 4-amino-pirazol [1 , 5-a] piridina-7-carbonitrilo (60 mg, 0.38 mmol), compuesto 751 (110 mg, 0.52 mmol) , MgS04 (360 mg, 3 mmol), diisopropiletilamina (0.35 mL, 2 mmol), y tolueno anhidro (0.6 mL) se agitó a _135°C bajo argón por 20 h. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice, se eluye con EtOAc (gradiente con MeOH desde 0% hasta 5%) dio el compuesto 778 (115 mg, 86%) como un sólido grisáceo.. CLAR: 98% a 2.28 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min.( observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 353 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 778 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 779 Una solución transparente del compuesto 20A (50 mg, 0.25 mmol) , p-aminoacetofenona (68 mg, 0.5 mmol) , y N,N-dimetilformamida dimetil acetal (0.065 mL, 0.49 mmol) en N,N-dimetilformamida anhidra (0.2 mL) se agitó a 100°C bajo argón por 18 h, y después se concentró. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02, se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:4 hasta 1:0) dio un sólido que se cristalizó en una mezcla de EtOAc y heptano para dar el compuesto 779 (11 mg, 14%) como un sólido blanco. CLAR : 98% a 2.89 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5. ODS-A de 4.6 x 50 mtn se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. , contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nra) . E (ES): m/z 314 [M+H]+.
Ejemplo 780 ?. Éster de 2 , 3 -dimetilo del éster de 7-tert-butilo del 1, -dimetil-7-aza-biciclo [2.2.1] hepta-2 , 5-dieno-2 , 3,7-tricarboxílico (780A) Una mezcla de éster de tert-butilo crudo del ácido 2,5-dimetil-pirrol-l-carboxílico (preparado según la literatura (Haiser, H.-P.; et al. J. Org. Chem. 1984 49(22) 4203-4209); 500 mg) y dimetil acetilendicarboxilato (0.5 mL, casi 4 eq) se agitó a 120 °C bajo argón por 2 h. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02, se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:20 hasta 1:2 ratio) y dio el compuesto 7-80A (166 mg, 50% rendimiento) como un líquido incoloro. CLAR: 90% a 3.67 min. (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A de„ 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90%. metanol acuoso durante 4 min. , contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) .
A una solución transparente de éster de 2, 3 -dimetilo del éster de 7-tert-butilo del ácido 1 , 4-dimetil-7-aza-biciclo [2.2.1] hepta-2 , 5-dieno-2 , 3 , 7-tricarboxílico (1.5 g, 4.4 mmol) en MeOH (10 mL) y H20 (5 mL) se enfrió en agua con hielo y se agregó KOH (2.9 g, 44 mmol) en porciones. Se agregó después más H20 (5 mL) . Después de que la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h, se agregó hidrazina (1.4 mL, 44 mmol), HCl (solución acuosa 2N, 17mL, 34 mmol), y peróxido de hidrógeno (solución acuosa al 50%, 1.27mL, 22 mmol) secuencialmente a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 3 h, y después se concentró bajo presión reducida para eliminar el MeOH. La solución acuosa obtenida se acidificó hasta un pH=l con una solución acuosa saturada de KHS04 y se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04( y concentraron bajo presión reducida para dar un sólido amarillo. El sólido amarillo anterior se disolvió en anhídrido acético (15 mL) . La solución se agit,ó a 100°C por 1 h. La concentración bajo presión reducida dio 1.3 g (100%) del compuesto 78 OB como un sólido color naranja.
C. (780C) Una mezcla del compuesto 780B (0.8g, 2.7 mmol), 4-amino- 2 - trifluorometilbenzonitrilo (0.5 g, 2.7 mmol), MgS04 (2.6 g, 22 mmol), diisopropiletilamina (2.35 mL, 13.5 mmol), y tolueno anhidro (2.9 mL) se agitó a 135°C bajo argón por 15 h. El sólido se filtró y se lavó con EtOAc . El filtrado se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice, se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:4 hasta 1:2) dio el compuesto 780C (1.03 g, 82%) como un sólido vidrioso. CLAR: 100% a 4.26 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 462.34 [M-H] " .
Ejemplo 781 A una solución del compuesto 780C (770 mg, 1.66 mmol) en oruro de metileno (10 mL) se agregó ácido . trifloroacético (5 mL) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 40 min . La mezcla se concentró después bajo presión reducida, basificada con una solución saturada de NaHC03, y se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04 y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto 781 (600 mg, 99%) como un sólido color naranja. CLAR: 100% a 2.55 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 364 [M+H]+.
Ejemplo 782 A una solución transparente del compuesto 781 (27 mg, 0.074 mmol) y trietilamina (0.061 mL, 0.44 mmol) en cloruro de metileno anhidro (3 mL) se agregó cloruro de acetilo (0.016 mL, 0.22 mmol) a 0°C bajo argón. Después de que la mezcla se agitó a 0°C por 30 min. y a temperatura ambiente por 30 min., se agregó una solución saturada de NaHC03. Después de que la mezcla se agitó por 15 min. , la solución orgánica se separó, se secó sobre Na2S04, y se ^filtró a través de una almohadilla de Si02 que después se enjuagó con EtOAc . El filtrado se concentró bajo presión reducida. La cristalización en una mezcla de EtOAc y heptano dio el compuesto 782 (19 mg, 63%) como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.56 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. , contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 406 [ +H]+.
Ejemplo 783 (3aa, 4 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4, 7 , 8- trimetil-1, 3 -dioxo-4, 7- imino-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (783) Una mezcla del compuesto 781 (180 mg, 0.5 mmol), formaldehido (solución acuosa al 37%, 0.11 mL, 1.5 mmol), NaHB(OAc)3 (318 mg, 1.5 mmol), y 1 , 2 -dicloroetano (9 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo argón durante la noche., y después se secó sobre Na2S04. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se „ eluye con EtOAc (gradiente con trietilamina desde 2%' hasta 10%) dio el compuesto 783 (160 mg, 84%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.46 min (tiempo de retención) (Columna YMC -65 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 378 [M+H]+.
Ejemplo 784 A una solución transparente del compuesto 781 (20 mg, 0.055 mmol) y trietilamina (0.04 mL, 0.24 mmol) en cloruro de metileno anhidro (1 mL) enfriada a 0°C, se agregó cloruro de metanosulfonilo (0.01 mL, 0.13 mmol). Después de que la mezcla de reacción se agitó a 0°C por 30 min, se agregó una solución saturada de NaHC03 (0.1 mL) . La mezcla se agitó por 10 min, se secó sobre Na2C03, y se filtró a través de una almohadilla de Si02 que después se enjuagó con EtOAc. El filtrado se concentró bajo presión reducida. La cristalización en una mezcla de EtOAc y heptano dio elv compuesto 784 (14 mg, 58%) como un sólido blanco. CLAR: 98% a 3.58 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 440 [M-H] " .
Ejemplo 785 A una solución agitada del compuesto 230BÍ (50 mg, 0.13 mmol) y trietilamina (0.09 mL, 0.65 mmol) en cloruro de metileno anhidro (5 mL) se agregó fosgeno (20% en tolueno, 0.25 mL, 0.48 mmol) gota a gota. Después de que la reacción se completó, se agregó una solución saturada de NaHC03. La mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04, se filtraron a través de una almohadilla de Si02, y se concentraron bajo presión reducida. La cristalización en una mezcla de EtOH y H20 dio el compuesto 785 (40 mg, 73%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.55 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 377 [M-C02-H]".
Ejemplos 786i y 786ii [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (octahidro- 5 , 6 -dicloro-4.7 - dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoiridol-2-il) -2- (trifluorometiDbenzonitrilo y [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) 3 -4- (octahidro-5, 6 -dicloro-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2 -il) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (786i y 786ii) A una mezcla agitada del compuesto 230Bi (544 mg, 1.5 mmol) , acetona (10 mL) , ácido acético (2 mL) , y salmuera (2 mL) enfriada a 0°C se agregó blanqueador (5 mL) gota a gota. La solución transparente obtenida se agitó a temperatura ambiente por 1 h, y después se concentró bajo presión reducida. La mezcla residual se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04, y concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02, se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:9 hasta 1:2 ratio) dio un sólido blanco que se cristalizó en una mezcla de EtOAc y heptano para dar 301 mg (46%) de la mezcla racémica de los compuestos 786i y 786ii como un sólido blanco. CLAR: 100% a 4.11 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 395 [M-HCl-H]". La separación por CLAR quiral de la mezcla racémica dio dos enantiómeros : compuesto 786i y compuesto 7JJ6Ü.
Condiciones de CLAR quira empleadas para la separación: Condición de CLAR Quiral Columna : CHIRALPAK AD 50 x 500 mm, 20 µ Temperatura : temperatura ambiente Volumen de inyección: 20 mL Fase Móvil : A: IPA con 0.1% dietilamina B: Heptano con dietilamina Isocrática, 45% de A, 60 min.
Relación de flujo: 50 mL/min. Detección UV: 245 nm Condiciones de CLAR quiral empleadas para el análisis Condición de CLAR quiral Columna .- CHIRALPAK AD 4.6 x 250 mm, 10 µ, Temperatura : 25°C Volumen de inyección: 10 µ? Fase Móvil : A: IPA con 0.1'% dietilamina B: Heptano con dietilamina Isocrática, 45% de A, 15 Relación de flujo: 1 mL/min. Detección UV: 245 nm TR: Compuesto 786i 10.6 min Compuesto 786ii 7.0 min La estereoquímica absoluta de los compuestos 785i y 785ii no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 787i y 787ii [3aR- (3aa, 4ß , 5ß , 6ß, 7ß , 7aa) ] -4- (octahidro-5-cloro-6-hidroxi- 4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo y [3aS- (3aa, 4ß , 5ß , 6ß, 7ß , 7act) ] -4-(octahidro-5-cloro-6-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi- 2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (787i y 787ii) A una solución agitada del compuesto 230BÍ (181 mg, 0.5 mmol) en cloruro de metileno anhidro (4 mL) enfriada a -78 °C bajo argón se agregó cloruro de cromilo (0.048 mL, 0.6 mmol) gota a gota. Después de que la mezcla de reacción se agitó a -78°C por 1 h, la temperatura de reacción se elevó lentamente hasta la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 2 h. Se agregó luego una solución saturada de NaHC03 (10 mL) a 0°C con agitación vigorosa. La mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Na2S04, y se concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:4 hasta 1:0) dio 98 mg (47%) de mezcla racémica de los compuestos 787i y 787ii como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.32 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 377 [M-HC1-H]". La separación por CLAR quiral del racemato dio dos enantiómeros : compuesto 787i y compuesto 787ii. Condiciones de CLAR quiral empleadas para la separación: Condición de CLAR Quiral Columna: CHIRALCEL OD 50 x 500 mm, 20µ Temperatura: temperatura ambiente Volumen de Inyección: 20 mL Fase Móvil: A: IPA con 0.1% de dietilamina B: heptano con 0.1% de dietilamina Isocrática, 35% de A, 90 min. Relación de flujo: 50 ml/min. Detección UV: 245 nm TR: Compuesto 787i 41 min Compuesto 787ii 51 min La estereoquímica absoluta de los compuestos 787i y 787ii no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 788 (3aa,43, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5 , 6 -dihidroxi-4 , 7 -dimetil- 1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- A. (33a,4ß,5a,6ß,7ß,7ßa) -4- (Óctahidro-5- [ [ (1,1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] -6-hidroxi-4,7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (788A) A una solución agitada del compuesto 222B (1.49 g, 3 mmol) en THF anhidro (31 mL) se agregó un comple o de borano-metil sulfuro (0.61 mL, 6.1 mmol) gota a gota a temperatura ambiente bajo argón. Después de que la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 1.5 h, EtOH (20 mL) se agregó lentamente a 0°C, seguido por solución amortiguadora de fosfato (pH = 7.2, 39 mL) , y H202 (30% acuoso, 12 mL) . La mezcla se agitó vigorosamente a 0°C por 30 min, a temperatura ambiente por 21 h, y después se concentró bajo presión reducida a temperatura ambiente para eliminar el THF. El residuo se dividió entre EtOAc (160 mL) y salmuera (160 mL) . La solución orgánica se separó, se lavó con 5% de solución de Na2S03 (120 mL) , se secó sobre Na2S04, y se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:8 hasta 1:0) compuesto 788A (1.15 g, 75%) como una espuma sólida.
B. [3aS- (3aa,4P, 5ß, 6a, 7P,7aa) ] -4- (Octahidro-5, 6-dihidroxi- 4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol-2 - il) -2 - ( trifluorometil) benzonitrilo (788B) A una solución agitada del compuesto 788A (0.67 g, 1.3 mmol) en EtOH (100%, 19 mL) se agregó HC1 concentrado (3.7 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 21 h, a 40°C por 3 h, y después se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:1 hasta 1:0) dio el compuesto 788B (0.47 mg, 92%) como un sólido vidrioso. CLAR: 98% a 3.07 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 397 [M+H]+. El compuesto 788B representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 789 A una solución agitada del compuesto 788B (40 mg, 0.1 mmol) y trietilamina (0.16 mL, 1.1 mraol) en cloruro de metileno anhidro (1 mL) se agregó cloruro de metanosulfonilo (0.042 mL, 0.54 mmol) a 0°C bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 10 min, y a temperatura ambiente por 30 min. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:2 hasta 1:0) dio el compuesto 789 (50 mg, 90%) como un sólido vidrioso. CLAR: 100% a 3.66 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 575 [M+Na]+. El compuesto 789 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 790 Una solución transparente del compuesto 788B (40 mg, 0.1 mmol), piridina (0.04 mL, 0.49 mmol), y cloruro de metansul fonilo (0.032 mL, 0.41 mmol) en cloruro de metileno anhidro (1 mL) se agitó a temperatura ambiente por 1 día. La purificación por CLAR preparativa (Columna YMC S5 ODS 20 x 100 mm, 20 mL/min, observando a 245 nm, gradiente de elución con 10-100% de solvente B durante 10 mins. Solvente A: 10% MeOH-90% H2O-0.1 TFA. Solvente B: 90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA. ) dio el compuesto 790 (23 mg, 48%) como un sólido vidrioso. CLAR: 98% a 3.46 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 475 [M+H] + . El compuesto 790 representa una mezcla racémica de antipodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 791 [3aS- (3aa, 4ß , 53, 6a, 7ß , 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi-4 , 7- dimetil-1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-(trifluorometil)benzonitrilo y [3aR- (3aa, 4ß , 5ß , 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-S , 6-dihidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (791i y 791ii) El compuesto racémico 788B (lg) se separó en sus enantiómeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm; se eluye con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrático) + 0.1% dietilamina a 50 mL/min) para dar 296 mg del compuesto de elusión más rápida 791i (CLAR quiral: 8.92 min; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm; se eluye con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano +0.1% dietilamina a 1 mL/min); CLAR: 95% a 1.25 min (tiempo de retención) (Columna Phenomenex S5 ODS de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 397.37 [M+H] + y 274 mg del 791ii de elusión más lenta (CLAR quiral: 11.25 min; columna CHIRALPAK OJ 4.6 X 250 mm; se eluye con 20% MeOH/EtOH (1:1) en heptano +0.1% dietilamina a 1 mL/min); CLAR: 95% a 1.25 min (tiempo de retención) (columna Phenomenex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 397.43 [M+H]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 791i y 791ii no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 792 Ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7 - epoxi- 1H- isoindol -5-carboxílico (792B) A. Ácido (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) tetrahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi -lH-isoindol- 5-carboxílico (792A) Una mezcla de ácido 2 , 5-dimetil-3 -furoico (11.2 g; 80 mmol) y 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-2 , 5-dioxo-lH-pirrol-l-il) -2-trifluorometilbenzonitrilo (5.32 g; 20 mmol) en 20 mL de THF se calentó hasta 65°C. por 2 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, el residuo sólido formó suspensión en EtOAc y se cargó sobre una columna de 5 x 30 cm de gel de sílice, empacada en hexanos . La columna se eluyó -con 2 L de EtOAc , seguido por 1.5 L de 1% AcOH/EtOAc. Las fracciones que contienen el ácido acrílico deseado se concentraron y el residuo se co-evaporó a partir de EtOAc/Heptano (3 x 100 mL) . Después de disolver el residuo sólido en -15 mL de EtOAc, se agregó heptano (-50 mL) y la mezcla se concentró hasta un volumen de -25 mL. La suspensión se filtró y la torta filtro se lavó con hexano . La separación del solvente in vacuo produjo el compuesto 792A (1.5g, 16%) como un polvo blanco.
B. Ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3 - (trifluorometil) fenil) hexahidro- , 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4,7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (792B) El compuesto 792A (220 mg 0.54 mmol) se hidrogenó a 1 atm. en EtOAc (5 mL) sobre 10% . Pd/C (20 mg) por 4 horas. Después de filtrar a través de Celite, el filtrado se concentró y el residuo se cromatografió sobre una columna de 2.5 x 15 cm de gel de sílice que se eluye con EtOAc : Heptano, 1:1 + 0.5% AcOH. Las fracciones puras se concentraron para resultar el compuesto 792B (173 mg, 79%) como un vidrio incoloro. CLAR: 95.7% a 1.64 min (tiempo de retención) (columna Phenomonex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 409.23 [M+H]+.
Ejemplo 793 Ester de metilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) hexahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4, 7- epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (793B) A. Ester de metilo del ácido (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2 - (4 -Ciano-3 ¦ (trifluorometil) fenil) tetrahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi - 1H- isoindol - 5 -carboxílico ( 793A) Una mezcla de metil-2 , 5-dimetil-3-furoato (30 mL; 200 mmol) y 4 - (2 , 5-dihidro-2 , 5-2 , 5-dioxo-lH-pirrol - 1 -il) -2 -trifluorometilbenzonitrilo (13.3 g; 50 mmol) se calentó hasta 120°C por 5 h. Después de enfriar lentamente hasta temperatura ambiente durante 18 h, se agregó éter de etilo (-150 mL) y la suspensión espesa resultante se -filtró. Al enjuagar completamente con éter de etilo y secar, se produjo el compuesto 793A (11.3 g, 54%) como un polvo blanco.
B. Ester de metilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2 - (4 -Ciano-3 - (trifluorometil) fenil) hexahidro-4 , 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi - 1H- isoindo1 - 5- carboxílico (793B) El compuesto 793A (1 g,- 2.38 mmol) se hidrogenó a 1 atm. en EtOAc (25 mL) sobre 10% Pd/C (100 mg) por 2 h. Después de filtrar a través de Celite, el filtrado se concentró y el residuo se cromatografió en una columna de 2.5 x 15 cm de gel de sílice que se eluye con EtOAc :Hexano, 1:3. Las fracciones puras se concentraron para resultar el compuesto 793B (665 mg, 65%) como un polvo amarillo. CLAR: 99% a 1.67 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 423.27 [M+H]+. El compuesto 793B representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 794B Una gota de DMF se agregó a una solución del compuesto 792B (160 mg; 0.4 mmol) y cloruro de oxalilo (0.09 mL; 1 mmol) en cloruro de metileno (4 mL) a temperatura ambiente. Después de agitar 1 h a temperatura ambiente, los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se disolvió en 2 mL de THF para resultar una solución 0.2 M del compuesto 794A en THF.
C. (794B) Una solución 0.2 del compuesto 794A en THF (1 mL; 0.2 mmol) se agregó a una solución 0.5 M de amoniaco en dioxano (5 mL; 2.5 mmol) a temperatura ambiente. Después de reposar 1 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (25 mL) . La capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (25 mL) y salmuera (25 mL) . El secado sobre MgS04 seguido por la concentración in vacuo dio un residuo sólido que se trituró con éter de etilo para resultar el compuesto 794B (60 mg, 74%) como un sólido blanco. CLAR: 95.6% a 1.41 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 408.03 [M+H]+. El compuesto 794B representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 795 Una solución 0.2 M del compuesto 794A en THF (1 mL; 0.2 mmol) se agregó a una solución 2.0 M de dimetilamina en dioxano (2.5 mL; 5 mmol) a temperatura ambiente. Después de reposar 1 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (25 mL) . La capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (25 mL) y salmuera (25 mL) . El secado sobre MgS04 seguido por la concentración in vacuo dio un residuo que se purificó por CCD preparativa (EtOAc :Hexano , 3:2) para resultar el compuesto 795 (45 mg, 52%) como un polvo blanco. CLAR: 99% a 1.52 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 435.10 [ +H]+. El compuesto 795 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 796 [3aR- (3aa,43,73,7aa) 3 -4- (Octahidro-4, 7-dimetil-l, 3, 5-trioxo- 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 - ( trifluorometil) benzonitrilo El compuesto 471DÍ (0.10 g, 0.263 mmol) se disolvió en una mezcla de CH2C12 (1.0 mL) y THF (2.0 mL) a 22 °C. Se agregó peryodinano Dess-Martin (0.279 g, 0.658 mmol) con agitación. Después de 3 h, La reacción se apagó con una mezcla 1:1 de NaHC03 saturado acuoso y NaHS03 saturado acuoso (5 mL) . Después de agitación por 15 min, la mezcla se extrajo con CH2CI2 (3 x 10 mL) y los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 5 - 10 - 20% de acetona en cloroformo para dar el compuesto 796 (0.090 g) como un sólido blanco. CLAR:' 100% a 3.170 min. (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min-, contiene 0.2% ácido fosfórico,, 4 mL/min, observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z 379.11 [M+H]+. CLAR analítica quiral usando una columna Chiracel OD de 4.6 X 250 rara, se eluye con 20% (1:1) EtOH/MeOH en hexanos a 2.0 mL/min y observando a 220 nm dio un tiempo de retención de 9.097 minutos. La estereoquímica absoluta del compuesto 796 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 741DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 797 [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7acc) ] -4- (octahidro-4, 7 -dimetil- 1, 3 , 5- trioxo- 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo El compuesto 471DÜ (0.10 g, 0.263 mmol) se disolvió en una mezcla de CH2C12 (1.0 mL) y THF (2.0 mL) a 22°C. Se agregó peryodinano Dess-Martin (0.279 g, 0.658 mmol) con agitación. Después de 3 h, la reacción se apagó con una mezcla 1:1 de NaHC03 acuoso saturado y NaHS03 acuoso saturado (5 mL) . Después de agitación por 15 min, la mezcla se extrajo con C¾C12 (3 x 10 mL) y los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 que se eluye con 5 - 10 - 20% acetona en cloroformo para dar el compuesto 797 (0.094 g) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.170 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z 379.11 [M+H]+. CLAR quiral analítica usando una columna de Chiracel OD, de 4.6 X 250 mm, que se eluye con 20% (1:1) EtOH/MeOH en hexanos a 2.0 mL/min y observando a 220 nm dio un tiempo de retención de 5.710 mins. La estereoquímica absoluta del compuesto 797 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÜ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 798 [3aR- (3aa,43,7p,7aa) 3 -4- [5 - [ [ (1, 1- dimetiletil) dimetilsilil] oxi] tetrahidro-4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il3 -2- (trifluorometil) benzonitrilo y [3aR- (3aa, 4ß, 7 * 7aot) ] -4 - [5 - [ [ (1, 1-dimetiletil) dimetilsilil] oxi] tetrahidro-4, 7-dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il] -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (798i y 798ii) Los enantiómeros individuales del compuesto 222B se separaron por CLAR quiral preparativa usando una columna Chiracel OD, de 50 X 500 mm, que se eluye con 12% EtOH en hexanos a 50 mL/min y observando a 220 nm. El compuesto 798i tiene un tiempo de retención de 22 min (>99% ee por analítica) y el compuesto 798ii tuvo un tiempo de retención de 40 min (95% ee por analítica) . La estereoquímica absoluta se confirmó por hidrólisis acida del enol éter de sililo para la cetona correspondiente (compuestos 796 y 797) . La comparación por CLAR quiral analítica demuestra claramente que el producto de cetona derivado del compuesto 798i tuvo un tiempo de retención idéntico a aquel observado por el compuesto 796 y el producto de cetona derivado del compuesto 798ii tuvo un tiempo de retención idéntico a aquel observado por el compuesto 797. En esta forma, la configuración absoluta de los compuestos 798i y 798ii se puede inferir por la configuración absoluta conocida de los compuestos 796 y 797. Compuesto 798i: CLAR: 100% a 4.211 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . Compuesto 798ii: CLAR: 100% a 4.210 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) .
Ejemplo 799 [3aS- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) 3 -4- (octahidro-6-fluoro-5, 5 -dihidroxi- 4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- El compuesto 798i (2.20 g, 4.47 mmol) se disolvió en acetonitrilo (45 mL) y enfrió hasta 0°C. Se agregó después 1-Fluoro-4-hidroxi-l , 4 -diazoniabiciclo [2.2.2] octano bis- (tetrafluoro-borato) (50% p/p sobre alúmina, 5.75 g, 8.94 mmol) con agitación vigorosa. Después de 0.5 h, la reacción se apagó con NaHC03 acuoso saturado (20 mL) y salmuera (20 mL) . La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre MgS0 anhidro y se concentraron in vacuo. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 que se eluye con 0-35% acetona en -cloroformo para dar una mezcla de cetona e hidrato. La mezcla se disolvió en CH3CN (50 mL) y se agregó agua (5.0 mL) . La mezcla se agitó por 3 h y después se concentró in vacuo seguida por la formación de azeótropo con C¾CN adicional tres veces y después se secó in vacuo a 50 °C por 12 h para dar el compuesto 799 (1.09 g) como un sólido blanco. El compuesto 799 se mostró que era el hidrato solamente por 1H y 19F espectroscopia RMN. CLAR: 100% a 2.687 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z 413.27 [M-H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 799 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 798i y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 800 [3aS- (3aa,43, 6ß, 7P,7aa) ] -4- (octahidro-6-hidroxi-4-metil-l/ 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo y [3aR- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4 -(octahidro-6-hidroxi -4 -metil- 1, 3 -dioxo- , 7-epoxi -2H- isoindol- 2 -il) -2- (trifluorometiDbenzonitrilo (799CÍ y 799CÜ) A. (800A) 2-Metil furano (5.33 mL, 59.1 mmol) se agregó a 4- (2,5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-il) -2-trifluorometil-benzonitrilo (1.50 g, 5.91 mmol) y la mezcla se calentó a 60°C por 3 h. Con el calentamiento, la reacción se hizo homogénea, seguido rápidamente por la trituración del producto a partir de la solución. La mezcla se enfrió hasta 22 °C y se diluyó con heptano (25 mL) y se filtró, enjuagando con heptano frío. La concentración in vacuo dio el compuesto 800A (1.76 g) como un sólido blanco. Este compuesto se lleva más adelante sin purificación adicional. CLAR: 100% a 2.250 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) .
B. (3aa,4 ,6p,7p,7aa) ] -4- (octahidro-6-hidroxi-4-metil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (800B) El compuesto 80 OA (0.500 g, 1.49 mmol) se disolvió en THF seco (15 mL) y se agregó catalizador de Wilkinson (0.028 g, 0.029 mmol) . Después de la agitación por 10 min, se agregó después catecolborano (solución 1.0 M en THF, 3.00 mL, 3.00 mmol) durante un periodo de 5 min. Después de 1 h, la reacción se enfrió hasta 0°C seguida por la adición secuencial de EtOH (7.0 mL) , solución amortiguadora de fosfato de pH 7.4 (16.0 mL) y 30% de H202 acuoso (1.5 g) . La mezcla se entibió lentamente hasta 22 °C y después de 2 h, se extrajo con CH2C12 (3 x 50 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se lavaron una vez con una mezcla 1 : 1 de NaOH 1N/ NaHS03 saturado acuoso (50 mL) , una vez con salmuera y se secaron sobre Na2S03 anhidro. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 que se eluye con 5 - 10 - 20 - 40% acetona en cloroformo para dar el compuesto 800B (0.344 g) como una ' espuma blanca. La espectroscopia por RMN confirmó la asignación y no estuvieron presentes otros isómeros. CLAR: 94% a 2.460 -min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10- 90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z 367.22 [M+H]+.
C. [3aS- (3aa,4p,6 ,7 ,7aa)] -4- (Octahidro-6-hidroxi-4-metil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo y [3aR- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 6-hidroxi-4-metil-l, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (800CÍ y 800CÜ) Los enantiómeros individuales del compuesto 800B se separaron por CLAR quiral preparativa usando una columna Chiralcel OD (50 x 500 mm) que se eluye con 17% EtOH/hexanos a 50 mL/min observando a 220 nm. El compuesto 800CÍ tiene un tiempo de retención de 69.4 min y el compuesto 800CÜ tiene un tiempo de retención de 84.1 min. La estereoquímica absoluta no se determinó. Compuesto 800CÍ: CLAR: 100% a 2.460 min, (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . Compuesto 800CÜ: CLAR: 100% a 2.460 min, (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . La estereoquímica absoluta de los compuestos 800CÍ y 800CÜ no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 801 [3aR- (3aa,43,5P,7p,7aa)] -2- (4-Cloro-3-yodofenil)hexahidro-5- hidroxi-4, 7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (801C) -Cloro-2- odo-4 -nitro-benceno ( 801A) El 2-amino-5-nitro-yodobenceno (10.00 g, 37.9 mmol) se suspendió en HCl 12 N (25 mL) y agua (40 mL) y se agitó por 30 min a 22°C. La mezcla después se enfrió hasta 0°C y NaN02 (5.23 g, 75.8 mmol en 18 mL de H20) se agregó durante un periodo de 10 min. Después de 1 h, esta solución se transfirió a una solución de CuCl (3.75 g, '37.9 mmol) en agua (50 mL) a 60°C. Después de 2 h, la mezcla se enfrió hasta 22°C y se extrajo con EtOAc (3 x 150 mL) y- los compuestos orgánicos se secaron sobre MgS0 anhidro. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 10 - 20% CH2C12 en hexanos para dar el compuesto 801A (4.20 g) como un sólido amarillo. CLAR : 100% a 3.447 min, (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) .
B. 4-Cloro-3 -yodo-fenilamina (801B) El l-Cloro-2 -yodo-4 -nitro-benceno (2.00 g, 7.09 mmol) se disolvió en THF (30 mL) a 60 °C y EtOH (35 mL) se agregó seguido por NH4C1 (0.569 g, 10.6 mmol en 30 mL de agua) y polvo de hierro (1.58 g, 28.4 mmol) . Esta mezcla se agitó vigorosamente por 3 h y después se enfrió a 22°C y se filtró a través de celite enjuagando con EtOAc. La solución se concentró después hasta -30 mL in vacuo y después se vació dentro de una solución 1:1 de NaOH IN/salmuera (100 mL) . Esta mezcla después se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL) y los compuestos orgánicos se secaron sobre MgS0 anhidro. La filtración y la concentración dieron el compuesto 801B como un sólido amarillo. No fue necesaria purificación. CLAR: 100% a 2.310 min (tiempo de retención) (Columna YíJC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye. con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 raL/min, observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z 517.6 [M+Na]+.
C. [3aR- (3aa,4p,5p,7p,7aa) ] -2- (4-Cloro-3-yodofenil) hexahidro-5-hidroxi-4,7-dimetil-4, 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona (801C) El compuesto 80IB (0.300 g, 1.19 mmol) y el compuesto 752 (0.229 g, 1.08 mmol) se agregaron a DMA (1.2 mL) en un recipiente de reacción a alta presión. Se agregaron después mallas moleculares de 4Á (0.300 g) y se selló y calentó el recipiente hasta 190°C. Después de 45 min, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se vació en EtOAc (50 mL) . La solución después se lavó una vez con agua (20 mL) , tres veces con NH4C1 acuosa saturada (20 mL) y se secó sobre MgS04 anhidro. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre sílice que se eluye con 10 -20 - 30% acetona en cloroformo para dar el compuesto 801C (0.217 g) como un sólido color marrón. CLAR: 100% a 3.000 min, (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) , EM (ES) : m/z 448.18 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 801C se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella.
La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 802 El 4- (2 , 5-Dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-il) -2-trifluorometil-benzonitrilo (0.200 g, 0.79 mmol) y 2- (N,N-dimetilaminometil) -5-metilfurano (0.548 g, 3.94 mmol) fueron disueltos en THF (0.5 mL) y se calentaron a 60°C por 3 h. La mezcla se concentró después in vacuo para dar el compuesto 802A como un aceite color café. El material crudo se usó sin purificación .
B. (802B) El compuesto 802A (~ 0.4 mmol) se disolvió en EtOAc (5.0 mL) y Pd/C (10% Pd, 0.020 g) se agregó, seguido por la introducción de .H2 por medio de un globo. Después de 3 h, la reacción se purgó con N2 y se filtró a través de celite, enjuagando con EtOAc . El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 10 - 20 - 30% acetona en cloroformo para dar el compuesto 802B (0.080 g) como un aceite color marrón. CLAR: 95% a 2.040 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) , EM (ES): m/z 408.31 [M+H]+. El compuesto 802B representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 803 A. Ester 2-metoxietoximetil del ácido 2, 5-Dimetilfuran-3-carboxílico (803A) Un matraz .de fondo redondo de 2 L equipado con un agitador mecánico se cargó con ácido 2 , 5-dimetil-3-furoico (81.0 g, 0.58 mol) y carbonato de potasio (95.9 g, 0.69 mol) en DMF (500 mL) . Un baño de hielo se usó para enfriar la reacción cuando el cloruro de 2 -metoxietoximetilo (72.2 g, 0.58 mol) se agregó en porciones. La reacción se agitó por 5 h a temperatura ambiente. La mezcla después se diluyó con agua (1.5 L) y se extrajo con EtOAc (2 x 600 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 x 900 mL) y solución saturada de cloruro de sodio (1 L) , se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron para resultar el compuesto 803A (103 g, 82%) como un aceite amarillo. 1H RMN(CDC13) : d = 6.23 (s, 1H) , 5.47 (s, 1H) , 3.84 (m, 2H) , 3.56 (m, 2H) , 3.38 (s, 3H) , 2.51 (s, 3H) y 2.20 ppm (s, 3H) .
B.
Un matraz de fondo redondo de 250 mL se cargó con 4- (2 , 5-dioxo-2 , 5-dihidropirrol- 1-il) -2 -trifluorometilbenzonitrilo (15.0 g, 0.056 mol) y ácido 2,5-dimetilfuran-3 -carboxílico, éster 2 -metoxieteximetilo (22.8 g, 0.10 mol). La mezcla se calentó hasta 125°C por 1.5 h después se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El producto crudo se disolvió en EtOAc y adsorbió sobre gel de sílice. La purificación por cromatografía de gel de sílice, se eluye con 30% EtOAc en hexanos, produjo el compuesto 803B (8.21 g, 30%) como un aceite viscoso. XH RMN (CDC13) : d = 7.95 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.86 (d, J= 1.9 Hz, 1H) , 7.75 (m, 1H) , 7.13 (s, 1H) , 5.44 (m, 2H) , 3.83 (m, 2H) , 3.57 (m, 2H) , 3.39 (s, 3H) , 3.19 (d, J= 6.5 Hz, 1H) , 3.09 (d, J = 6.5 Hz, 1H) , 2.04 (s, 3H) y 1.91 ppm (s, 3H) .
C. (803C) Una botella de hidrogenacion de 250 mL Parr se cargó con el compuesto 803B (7.75 g, 0.015 mol), EtOAc (80 mL) y paladio sobre carbón (0.40 g, 10% Pd, 50% húmedo) . La botella se colocó en un aparato de hidrogenacion Parr, se presurizó con hidrógeno a 5 psi (0.35 kg/cm2) , y se agitó, hasta que cesó la absorción de hidrógeno. La filtración de los contenidos sobre celite y la concentración produjo un aceite amarillo. La purificación por cromatografía de- gel de sílice, se eluye con 30.% de EtOAc en hexanos, produjo el compuesto 803C (3.92 g, 50%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 14.5 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µp?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó) . Rf = 0.61 (Si02, 60% EtOAc en hexanos) . P.f. >300°C. ¾ RMN (CDC13) : d = 7.94 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.84 (d, J = 1.9 Hz, 1H) , 7.74 (m, 1H) , 5.46 (d, J = 6.1 Hz, 1H) , 5.34 (d, J = 6.1 Hz, 2H) , 3.85 (m, 2H) , 3.57 (t, J = 4.5 Hz, 2H) , 3.38 (s, 3H) , 3.33 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.19 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.04 (m, 1H) , 2.28 (m, 1H) , 2.05 (t, J = 12.2 Hz, 1H) , 1.78 (s, 3H) y 1.64 ppm (s, 3H) . m/z = 496 [M+H]+.
D. (803DÍ y 803DÜ) . El compuesto racémico 803C se separó en sus dos enantiómeros por CLAR quiral preparativa usando una columna Chiracel OD (50 x 500 mm) se eluye con 50% EtOH en heptano a 100 mL/min y detección a 290 nm. El compuesto 803DÍ tuvo un tiempo de retención de 6.68 min y [a] 25D = +28.1°' (c = 1.0, MeOH) . El compuesto 803DÜ tuvo un tiempo de retención de 13.9 min y [a] 25D = -29.2° (c = 1.0, MeOH) . La estereoquímica absoluta de los compuestos 803DÍ y 803DÜ no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 804 Ácido [3aR- (3aa,4P, 5a, 7ß, 7aa) 3-2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo epoxi - 1H-isoindol- 5-carboxilico (80 ) Un matraz de fondo redondo de 250 mL se cargó con el compuesto 803DÍ (9.85 g, 19.8 mmol) y THF (60 mL) . Una solución de ácido clorhídrico 3N (50 mL) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por 16 h a temperatura ambiente. Se agregó agua (60 mL) después y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 120 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron para resultar el compuesto 804 (8.00 g, 98%) que mostró ser idéntico al compuesto 791. CLAR: 100% . 13.3 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µt?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de fluj.o de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó), E (ES): m/z 409 [M+H]+. Rf = 0.41 (Si02, 10% eOH en CH2Cl2) . P.f. >300°C. [ ] 2SD = -28.5° (c = 1.0, MeOH). XH RMN (CD3OD) : d = 8.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.92 (s, 1H) , 7.82 (dd, J = 8.3 y 2.0 Hz, 1H) , 3.39 (t, J = 6.7 Hz, 1H) , 3.30 (d, J = 6.7 Hz, 1H) , 3.00 (dd, J = 12.0 y 5.2 Hz, 1H) , 2.23 (dd, J = 12.0 y 5.2 Hz, 1H) , 2.01 (t, J = 12.0 Hz, 1H) , 1.70 (s, 3H) y 1.57 ppm (s, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 804 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 805 Ácido [3S- (3aa, 43,5a, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-4 , 7-dimetil-l, 3 -d.ioxo-4, 7- epoxi-1H-isoindo1- 5 -carboxílico (805) (+) El compuesto 805 se preparó en forma idéntica como se describe en el ejemplo 804 con la excepción de que el compuesto 803DÜ fue el material de partida en lugar del compuesto 803Di. El compuesto 805 se obtuvo en 98% de rendimiento. [a] 2SD = +28.0° (c = 1.0, MeOH) . La estereoquímica absoluta del compuesto 805 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 806 Un matraz de fondo redondo de 50 mL se cargó con dioxano (6 mL) , compuesto 804 (400 mg, 0.984 mmol) , difenilfosforilo azida (334 mg, 1.21 mmol), trietilamina (123 mg, 1.22 mmol) y mallas moleculares pulverizadas de 4Á (400 mg) . La suspensión resultante se calentó a 50°C por 1.5 h, la temperatura se elevó después hasta 75°C y 2 - (trimetilsilil ) etanol (590 mg, 5.02 mmol) se agregó. Se continuó el calentamiento por 1.5 h adicionales. La mezcla de reacción se enfrió después, se filtró a través de una almohadilla de celite y- el filtrado se concentró bajo presión reducida. La purificación del residuo por cromatografía de gel de sílice, que se eluye con 20% después 40% EtOAc en hexanos, produjo el compuesto 806 (400 mg, 78%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 15.3 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µp?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% de ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó), E (ES) : m/z 524 [M+H]+. Rf = 0.79 (Si02, 50% EtOAc en hexanos). P.f. >300°C. [a] 25D = -1.8° (c = 1.0, MeOH) . XH RMN(CDCl3): d = 7.96 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.83 (s, 1H) , 7.73 (dd, J = 8.3 y 2.0 Hz, 1H) , 4.72 (bs, 1H) , 4.19 (t, J = 12.0 Hz, 2H) , 4.05 (m, 1H) , 3.45 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 3.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 2.36 (t, J = 12.0 Hz, 1H) , 1.61 (s, 6H) , 1.04 (t, J = 12.0 Hz , 2H) y 0.05 ppm (s, 6H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 806 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 807 El compuesto 807 se preparó en forma idéntica como se describe en el ejemplo 806 con la excepción de que el compuesto 805 fue el material de partida en lugar del compuesto 804. El compuesto 807 se obtuvo en 80% de rendimiento, [a] 25D = +1.1° (c = 1.0, MeOH) . La estereoquímica absoluta del compuesto 807 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 808 [3aR- (3aoc, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) 3-4- (octahidro-5 -amino-4 , 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonibrilo (808) Una solución del compuesto 806 (400 mg, 0.76 mmol) en cloruro de metileno (10 mL) se trató con ácido trifluoroacético (2 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2 h. Después de este tiempo, la reacción se hizo básica (pH = 9) por la adición de una solución de carbonato de sodio acuoso saturada (20 mL) y carbonato de potasio sólido. La fase orgánica después se separó y la capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (3 x 40 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y concentraron para resultar el compuesto 808 (283 mg, 99%) como un sólido blanco. CLAR : 100% a 10.5 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µt?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó),, EM (ES) : m/z 380 [M+H]+. Rf = 0.59 (Si02, 5% MeOH en CH2C12) . [a] 25D = -26.7° (c = 1.0, MeOH) . P.f. = 150-152°C. XH RMN (CD3OD) : d = 8.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.94 (s, 1H) , 7.83 (dd, J = 8.3 y 2.0 Hz, 1H) , 3.66 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.21 (m, 4H) , 2.16 (t, 7= 12.0 Hz, 1H) , 1.51 (s, 3H) , 1.49 (s, 3H) y 1.42 ppm (dd, 7 12.0 y 5.0 Hz, 1H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 808 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto .
Ejemplo 809 [3aS- (3aa,4P, 5a,7P,7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -amino- , 7 -dimetil- 1,3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindo1-2-il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (809) El compuesto 809 se preparó en forma idéntica como se describe en el ejemplo 808 con la excepción de que el compuesto 807 fue el material de partida en lugar del compuesto 806. El compuesto 809 se aisló en 94% rendimiento global, [a] 25D = +27.3° (c = 1.0, MeOH) . La estereoquímica absoluta del compuesto 809 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 810 (3ßa,4ß, 5a,7ß,7ßa) -4- (octahidro-5-etilsulfonamido-4, 7- dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (810) Un matraz de fondo redondo de 25 mL se cargó con una mezcla racémica de los compuestos 808 y 809 (102 mg, 0.27 mmol) y cloruro de metileno (10 mL) . Se agregaron cloruro de etansulfonilo (54.3 mg, 0.42 mmol) y trietilamina (43.6 mg, 0.43 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El análisis de la mezcla de reacción por CCD (Si02, EtOAc) indicó la presencia del material de partida, entonces se agregó un equivalente adicional de cloruro de etansulfonilo (54/3 mg, 0.42 mmol) y la agitación continuó a temperatura ambiente por 4 h. La mezcla de reacción después se diluyó con CH2C-12 (25 mL) y se lavó con agua (10 mL) . El secado sobre sulfato de magnesio, filtración, y la concentración produjo un aceite amarillo. La purificación de este aceite por cromatografía de gel de sílice, se eluye con 25% EtOAc en hexanos , después 50% EtOAc en hexanos y finalmente EtOAc, produjo el compuesto 810 (55.9 mg, 44%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 13.8 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µp?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó), EM (ES) : m/z 472 [M+H]+. Rf = 0.72 (EtOAc) . P.f. = 189-192°C. XH RMN (CDCl3) : d = 7.94 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.85 (s, 1H) , 7.74 (dd, J = 8.3 y 2.0 Hz, 1H) , 5.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 3.71 (m, 1H) , 3.51 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.18 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.11 (q, J = 7.2 Hz, 2H) , 2.37 (t, J = 12.0 Hz, 1H) , 1.67 (m, 1H) , 1.62 (s, 3H) , 1.61 (s, 3H) y 1.40 ppm (t, J = 7.2 Hz, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 810 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 811 (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (octahidro-5- [ [ ( (fenilmetil) amino) carbonil] oxi] -4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (811) Un matraz de fondo redondo de 25 mL se cargó con el compuesto 222D (102 mg, 0.27 mmol) y THF (2 mL) . Se agregó isocianato de bencilo (37.7 mg, 0.28 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por 1.5 h, después se calentó a 60°C por 1.5 h. adicionales. Se agregó después hidruro de sodio (50 mg, 60% dispersión en aceite mineral) seguido por isocianato de bencilo adicional (37.7 mg, 0.28 mmol) . El calentamiento continuó a 60°C durante la noche. Se agregó después isocianato de bencilo (75.4 mg, 0.56 mmol) y THF (2 mL) y la reacción se volvió a calentar hasta 60°C por 3 h adicionales. La mezcla de reacción después se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida para resultar un sólido blanco descolorido. Se agregó después éter (20 mL) y se formó un precipitado. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró hasta un sólido blanco, que se purificó además por CLAR preparativa. Las fracciones conteniendo el producto deseado se concentraron y se agregó una solución de bicarbonato de sodio saturado (15 mL) . La capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (3 x 25 mL) , se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y concentró para resultar el compuesto 811 (119 mg, 80%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 15.3 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µp?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó), EM (ES) : m/z 514 [M+H]+. Rf = 0.58 (Si02, 50% EtOAc en hexanos) . P.f. >300°C. H RM (CDC13) : d = 7.94 (d, J = 8.1 Hz, 1H) , 7.85 (s, 1H) , 7.74 (m, 1H) , 7.36-7.34 (m, 5H) , 5.07 (bs, 1H) , 4.92 (m, 1H) , 4.39 (bs, 2H) , 3.59 (m, 1H) , 3.11 (m, 1H) , 2.35 (t, J = 12.0 Hz, 1H) y 1.61 ppm (s, 6H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 811 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 812 [3aR- (3aa,4 ,5a,73,7aa)] -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-4, 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7- epoxi-N-metil-N-fenil-lH-isoindol-5-carboxamida (812 ) A un matraz de fondo redondo seco, purgado con nitrógeno, de 100 mL, se agregó el compuesto 804 (100 mg, 0.245 mmol) y CH2C12 (10 mL) . La solución se agitó a temperatura ambiente y se agregaron cloruro de oxalilo (311 mg, 2.45 mmol) y ?,?-dimetilformamida (28.0 mg, 0.387 mmol). Se observó la evolución del gas y la reacción se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La solución resultante se concentró después hasta sequedad bajo presión reducida y se agregó CH2C12 (10 mL) . Se agregó N-metilanilina (262 mg, 2.45 mmol) y la reacción se agitó por 15 h a temperatura ambiente. Después de concentrar la solución resultante bajo presión reducida, el aceite resultante se cromatografió sobre gel de sílice, usando 50% EtOAc en hexanos como el eluyente, para dar un aceite color naranja que se contaminó con N-metilanilina . El material se volvió a procesar por cromatografía sobre gel de sílice, usando- 40% EtOAc en hexanos como eluyente, para resultar el compuesto 812 (115 mg, 94%) como una espuma blanca. CLAR: 100% a 18.7 min (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µ??, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó), EM (ES): m/z 498 [M+H]+. Rf = 0.37 (Si02, 40% EtOAc en hexanos). P.f. >300°C. [a] 25D = -30.0° (c = 1.0, MeOH) . XH RMN (CDC13) : d = 7.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.84 (d, J = .1.5 Hz , 1H) , 7.73 (dd, J = 8.3 y 2.0 Hz, 1H) , 7.52-7.35 (m, 3H) , 7.17 (d, J= 7.1 Hz, 2H) , 4.24 (d, J = 7.3 Hz, 1H) , 3.30 (s, 3H) , 3.28 (d, J = 7.3 Hz, 1H) , 3.09-2.96 (m, 1H) , 2.10-1.99 (m, 1H) , 1.81 (t, J = 12.0 Hz, 1H) , 1.56 (s, 3H) y 1.41 ppm (s, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 812 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto .
Ejemplo 813 Un matraz de fondo redondo de 25 mL se cargó con dioxano (3 mL) , compuesto 805 (76.3 mg, 0.187 mmol) , difenilfosforil azida (62.6 mg, 0.227 mmol), trietilamina (23.2 mg, 0.230 mmol) y mallas moleculares pulverizadas de 4A (200 mg) y la suspensión resultante se calentó a 50°C por 1.5 h. La temperatura después se elevó hasta 75°C y se agregó fenol (93.0 mg, 0.988 mmol). Se continuó el calentamiento por 1.5 h adicionales. La mezcla de reacción después se enfrió, se filtró a través de una almohadilla de celite y el filtrado se concentró bajo presión reducida. La purificación del residuo por cromatografía en gel de sílice, que se eluye con 10%-50% EtOAc en hexanos, produjo el compuesto 813 (71.5 mg, 77%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 15.9 min. (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µ??, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de ,0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitriló (comienzo) hasta 100% acetonitriló durante 15 min., después 100% acetonitriló or 5 min. se usó), Rf = 0.70 (Si02, 50% EtOAc en hexanos). [a] 2BD = +13.0° (c = 1.0, MeOH) . P.f. >300°C. CLAR : Rt = 15.9 min. ¾ RMN (CD3OD) : d = 8.14 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.95 (s, 1H) , 7.85 (dd, J = 8.3 y 2.0 Hz , 1H) , 7.41-7.12 (m, 5H) , 4.06 (dd, J = 12.0 y 5.0 Hz, 1H) , 3.55 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.29 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 2.29 (t, J = 12.0 Hz, 1H) , 1.71 (dd, J = 12.0 y 5.0 Hz, 1H) , 1.56 (s, 3H) y 1.54 ppm (s, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 813 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 814 El compuesto 814 se preparó en forma idéntica como se describe en el ejemplo 813 con la excepción de que el compuesto 804 fue el material de partida en lugar del compuesto 805. El compuesto 814 se aisló en 62% rendimiento global, [a] 2BD = -11.7° (c = 1.0, MeOH). La estereoquímica absoluta del compuesto 814 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 815 El compuesto 807 (0.060 g, 0.15 mmol) se disolvió en 2 mL de CH2C12 y trietilamina (0.020 g, 0.16 mmol) y se agregó una cantidad catalítica de DMAP, seguida por cloruro de isobutirilo (0.02g, 0.16 mmol) . La reacción se agitó por 1 h a 23 °C cuando la CLAR mostró un consumo completo del material de partida. La reacción se diluyó con CH2C12, se lavó sucesivamente con HCl 1N, bicarbonato de sodio saturado, salmuera, se secó (MgS04) , se filtró y concentró in vacuo para dar el compuesto 815 (0.06 g, 83%), como un sólido blanco. No fue necesaria la purificación. CLAR: 100% a 3.12 min. (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min. observando a 220 nm. CL/EM - [M+H] = 450.12. La estereoquímica absoluta del compuesto - 815 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflej an la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 816 [3aR- (3aa,4P, 5a,7P,7aa) ] -4- (octahidro-5- [ [ [ (ciclopropilmetil) amino] carbonil] amino] -4 , 7-dimetil- 1, 3 dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 - il) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo (816) Un matraz de fondo redondo de 50 mL se cargó con el compuesto 815 (0.052 g, 0.10 mmol), metil sulfóxido (2 mL) y aminometil ciclopropano (10 µ??, 8.2 mg, 0.11 mmol). La reacción se agitó por 4 h tiempo después del cual la mezcla de reacción se diluyó con agua (9 mL) y una solución saturada de NaHC03 (1 mL) . La extracción con CH2Cl2 (1 x 20 mL después 1 x 10 mL) , secado sobre MgS04, filtración y la concentración produjo el producto crudo como un aceite amarillo. La purificación por cromatografía de gel de sílice, que se eluye con 20% hasta 50% EtOAc en hexanos produjo el compuesto 816 (33.6 mg, 67%). .CLAR : 100% a 12.9 min. (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µp?, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min. , después 100% acetonitrilo por 5 min. se usó), EM (ES): m/z 477 [M+H]+. Rf = 0.42 (Si02, 50% EtOAc en hexanos) . P.f. > 300°C. [a] 25D = -31.5° (c =1.0, MeOH) . ¾ RMN(CDC13) : d = 8.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.94 (s, 1H) , 7.84 (d, J = 8.3 Hz, 1H) 4.12-4.06 (m, 1H) , 3.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 3.34 (bs, 1H) , 3.22 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 1.41 (t, J = 12.3 Hz, 1H) , 1.54 (s, 3H) , 1.50 (s, 3H) , 1.01-0.92 (m, 1H) , 0.51-0.45 (m, 2H) y 0.21-0.17 ppm (m, 2H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 816 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 817 Un matraz de fondo redondo de 50 mL se cargó con el compuesto 809 (0.057 g, 0.15 mmol) y fenil isocianato (0.1 mL, 0.9 mmol) . Después de calentar por 3 h a 65-70°C, el análisis de la reacción por CLAR indicó un consumo completo del material de partida. La dilución con EtOAc (0.5 mL) y la purificación por cromatografía de gel de sílice, que se eluye con 60% EtOAc en hexanos produjo el compuesto 817 (39 mg, 52%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 14.2 min. (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, 250 x 4.6 mm, 5 µ?t, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min. se usó) , EM (ES) : m/z 499 [M+H]+. Rf = 0.17 (50% EtOAc en hexanos) . P.f. > 300°C. [a] 25D = +30.7° (c = 1.0, eOH) . ? R N(CDC13) : d = 8.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.94 (s, 1H) , 7.84 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.35 (d, J = 7.8 Hz, 2H) , 7.26 (t, J = 7.7 Hz, 2H) , 6.99 (t, J = 7.1 Hz, 1H) , 4.19-4.14 (m, 1H) , 3.51 (d, J = 7.1 Hz, 1H) , 3.27-3.25 (m, 2H) , 2.31 (t, J= 12.3 Hz, 1H) , 1.63-1.61 (m, 1H) , 1.56 (s, 3H) y 1.55 ppm (s, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 817 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 818 [3aR- (3aa, 4ß# 5a, 7ß, 7aa) 3 -4- (octahidro- 5- [ [ (dimetilamino) sulfonil] amino] -4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (817) Un matraz de fondo redondo de 50 mL se cargó con el compuesto 808 (100 mg, 0.28 mmol) , cloruro de metileno (2 mL) , trietilamina (28.3 mg, 0.28 mmol) y cloruro de dimetilsulfamoilo (40.2 mg, 0.28 mmol). La reacción después se agitó a temperatura ambiente por 3 h, tiempo después del cual se apagó con agua (10 mL) y se extrajo con CH2C12 (2 x 20 mL) . La capa orgánica se lavó una vez más con agua (10 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró y concentró hasta un aceite amarillo. La purificación por cromatografía de gel de sílice, se eluye con 20% EtOAc en hexanos hasta 100% EtOAc resultó en el compuesto 818 (64.2 mg, 47%). CLAR: 100% a 14.2 min. (tiempo de retención) (columna Hypersil C18 BDS, ,250 x 4.6 mm, 5 corridas, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 1-0% acetonitrilo (comienzo) hasta 100% acetonitrilo durante 15 min. , después 100% acetonitrilo por 5 min. se usó), EM (ES): m/z 487 [M+H]+. Rf = 0.19 (Si02, 50% EtOAc en hexanos) . [a] 2SD = -22.8° (c = 1.0, MeOH) . P.f. = 262-269°C. ¾ RMN(CDCl3): d = 8.12 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.94 (s, 1H) , 7.84 (d, J = 8.2 Hz, 1H) , 3.61 (m, 1H) , 3.54 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 3.35 (s, 1H) , 3.22 (d, J = 7.2 Hz, 1H) , 2.79 (s, 6H) , 2.27 (t, J = 12.4 Hz , 1H) , 1.68 (m, 1H) , 1.54 (s, 3H) y 1.53 ppm (s, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 818 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 819 Una mezcla de 4- (2 , 5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-il) -isoquinolin-l-carbonitrilo (1 g, 4 mmol), 2 , 5-dimetil -2 , 3 -dihidrofurano-3-ona (0.45 g, 4 mmol), DMAP (20 mg, 0.16 mmol) , cloruro de metileno anhidro (10 mL) , y THF (20mL) se agitó a 80 °C durante la noche, y después se concentró bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por. gel de sílice sobre Si02 se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:4 hasta 1:0) dio un sólido que se cristalizó en una mezcla de EtOAc y heptano para dar 0.4 g (28%) del compuesto 819 como a sólido amarillento. CLAR: 90% a 3.37 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nra) . EM (ES): m/z 362 [M+H]+. Compuesto 819 representa una mezcla racemica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 820 A una solución agitada del compuesto 819 (36 mg, 0.1 mmol) en THF anhidro (1 mL) enfriada a 0°C bajo argón se agregó MeMgBr (solución de THF 1.4 M, 0.3 mL, 0.4 mmol) gota a gota. Después de que la mezcla se agitó a 0°C por 1 h y a temperatura ambiente por 10 min., se agregó una solución acuosa saturada de NH4C1 con agitación. La' mezcla se extrajo con EtOAc (3X) . Los extractos combinados se secaron sobre Ma2S04, y concentraron bajo presión reducida. JL,a purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con EtOAc/heptano (gradiente desde una relación de 1:2 hasta 1:0) dio un sólido que se cristalizó en una mezcla de EtOH y H20 para dar el compuesto 820 (8 mg, 21%) como un sólido blanco. CLAR: 97% a 3.36 min . (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm que se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 378 [M+H]+. El compuesto 820 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 821 [3aS- (3aa,4P, 5 ,7 ,7aa) ] -5- (oetahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4,7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3 -metil-2 - piridincarbonitrilo (821) Una mezcla del compuesto 772B (20 mg, 0.14 mmol), compuesto 751 (48 mg, 0.20 mmol) y mallas moleculares de 4Á (100 mg) en DMA (0.2 mL) se calentó a 70°C en un tubo sellado por 5 h. La mezcla de reacción se filtró y el residuo se lavó on EtOAc . Los filtrados se combinaron y se -lavaron con H20 (2 5 mL) y, salmuera (1 x 5 mL) . Las capas acuosas combinadas se extrajeron con EtOAc (2 5 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 y concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio 55 mg de producto contaminado con el compuesto 751. La purificación adicional por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre Si02 que se eluye con 90% EtOAc/hexanos dio el compuesto 821 (46 mg, 62%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.27 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 328.2 [ +H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 821 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 822 [3aR- (3aa, 4ß, 4aa, 5aa, 6ß, 7aa) 3-4- (Octahidro-4a-hidroxi-4 , 6- dimetil-1, 3-dioxo-4, 6 -epoxicicloprop [f] isoindol-2 (1H) -il) -2- ( trifluorometil) benzonitrilo (822) Una solución del compuesto 222B (114 mg, 0.231 mmol) en 1 , 2 -dicloroetano (2.30 mL) , en un matraz seco bajo argón, se enfrió hasta 0°C con un baño de hielo. A esta solución se agregó una solución de Et2Zn (0.460 mL, 0.462 mmol, 1 M en hexanos) , seguido por la adición gota a gota de cloroyodometano (70.0 µ 0.926 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 1 h después a temperatura ambiente por 18 h. Después de juzgar la reacción por estar solamente terminada en un 50% por los métodos de CCD y CLAR, se agregaron más Et2Zn (0.469 mL) y cloroyodometano (70.0 µL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 2.5 h. La mezcla de reacción se apagó con NH4C1 saturado, se extrajo con t-butil metil éter (2 X 10 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 e in vacuo. El material crudo (174 mg) se disolvió en una mezcla de EtOH (5 mL) y HCl concentrado (2 mL) y se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La mezcla después se diluyó con H20 y se extrajo con EtOAc (1 X 25 mL) . La capa orgánica se lavó con salmuera (1- X 25 mL) , se secó y concentró bajo presión reducida. La purificación por CCD preparativa (Si02) que se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio el compuesto 822 (9.1 mg, 10%) como un sólido color marrón. CLAR : 90% a 3.15 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 393.03 [M+H]+. El compuesto 822 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 823 [3'aR(3' aa,4'P, 7'3,7'aa) ] -Tetrahidro-4 ' ,7' -dimetil-2 ' - [4- ciano-3 ( trifluorometil) fenil] -espiro [1, 3-dioxolan-2 , 5' -4, 7- epoxi (5H) isoindol] -1' ,3' (2'H,4'H) -diona (823) Una mezcla del compuesto 796 (44.3 mg, 0.117 mmol) , etilen glicol (0.065 mL, 1.17 mmol) y ácido p-toluensulfónico (2.2 mg, 0.012 mmol) en benceno (3 mL) se puso a reflujo por 18 h. La mezcla de reacción después se diluyó con benceno, se lavó con 5% Na2C03 (1 X 10 mL) , H20 (1 X 10 mL) , se secó (Na2S04) y concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre gel de sílice que se eluye con 10% acetona/CHCl3 dio el compuesto 823 (44.5 mg, 90%) como un sólido blanco. CLAR: 99% a 3.11 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 423.01 [M+H]+. El compuesto 823 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 824 [3' aR- (3' aa,4' ß, 6' P,7'3,7'aot) ] -Tetrahidro-6f -hidroxi-4' ,7' - dimet.il-2f - [4-ciano-3 (fcrifluorornetil) fenil] -espiro [1,3- dioxolan-2,5'-4,7-epoxi(5H)isoindol]l' , 3 ' (2 ' H , ' H) -diona ?. (824?) Una solución de dimetildioxirano (32 mL, 1.588 mmol, 0.05 M) se agregó a una solución del compuesto 222B (521.6 mg, 1.059 ramol). en acetona (1 mL) a temperatura ambiente. Después de 2.5 h la reacción mostró estar completa por CLAR y se concentró bajo presión reducida para dar 559 mg (cuant.) de compuesto crudo 824A como un sólido amarillo.
B. -Tetrahidro-6' -hidroxi-4' ,7'-dimetil-2' - [4-ciano-3 (trifluorornetil) fenil] -espiro [1, 3-dioxolano-2,5' -4 , 7-epoxi (5H) isoindol] -1' ,3' (2'H,4'H) -diona (824B) Una mezcla del compuesto 824A (57.5 mg, 0.113 mmol) , etilen glicol (0.100 mL, 1.13 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (11.0 mg, 0.057 mmol) en benceno (5 mL) se puso a reflujo por 18 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio el compuesto 824B (43 mg, 88%) como un sólido blanco. CLAR: 98% a 2.87 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 439.07 [M+H]+. El compuesto 824B representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 825 [3aR- (3aa,43, 5P,7P,7aa) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo- , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -3 -cloro-2 - Una mezcla de 4-amino-3-cloro-2-metil-benzonitrilo (23 mg, 0.14 mmol), compuesto 752 (44 mg, 0.21 mmol) y mallas moleculares de 4Á (100 mg) en DMA (0.2 mL) se calentó a 135°C en un tubo sellado por 18 h. Purificación por CCD preparativa (Si02) se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio el compuesto 825 (5.0 mg, 10%) como una película amarilla. CLAR: 90% a 2.37 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 360.97 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 825 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 826 [3aR- (380,4 ,53,73,780) ] -4- [Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2- ( trifluorometil ) bencencarbotioamida (826) Se condensó el gas de H2S en un tubo pyrex a -78°C hasta que hubieron 5 mL de líquido. Se agregaron el compuesto 471Di (108 mg, 0.284 mmol) , Et3N (50.0 µ?,, 0.341 mmol) y DMF (1 mL) a -78°C y se selló el tubo. La mezcla de reacción se dejó entibiar hasta temperatura ambiente con agitación, detrás de un blindaje contra explosiones y después se calentó a 90°C por 50 min. , tiempo en el cual el color cambió a verde. La mezcla de reacción se re-enfrió hasta -78 °C para verificar el avance por CLAR. Todo el material de partida se consumió, de manera que la mezcla se dejara entibiar a temperatura ambiente para eliminar el H2S, se diluyó con EtOAc y se lavó con H20 (4 X 10 mL) . La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 50% acetona/CHCl3 dio el compuesto 826 (116 mg, 98%-) como un sólido blanco. CLAR : 98% a 1.90 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante .4 min. , contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . E (ES): m/z 415.23 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 826 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 827 [3aR(3aa,4P,53,7P,7aa)] -2- [3- (trifluorometil) -4- (2- tiazolil) fenil] -5- (acetoxi) hexahidro-4 , 7-dimetil-4, 7-epoxi- lH-isoindol-1,3 (2H) -diona (827i) y [3R- (3aa,43, 53,7P,7aa) ] -2- [3 -trifluorometil) -4- (2 -tiazolil) fenil] hexahidro-5-hidroxi- 4,7-dimetil-4/7-epoxi-lH-isoindol-l,3 (2H) -diona (827ii) Una solución del compuesto 826 (61.6 mg, 0.149 mmol), bromoacetaldehido dietil acetal (30.0 µL, 0.186 mmol) y ácido p- oluensulfónico (1 mg, cat . ) en AcOH (1 mL) se calentó a 100°C por 1 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se diluyó con H20. La mezcla se extrajo con EtOAc (1 X 10 mL) y la capa orgánica resultante se lavó con H20. (1 X 10 mL) , NaHC03 saturado (1 X 10 mL) y salmuera (1 X 10 mL) , después se secó sobre MgS04 y se concentró in vacuo. La purificación por CCD preparativa (Si02) se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio dos productos, los cuales ambos se sometieron a purificación adicional. El producto menos polar se purificó además por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 50% EtOAc/hexanos para dar el compuesto 827i (30.0 mg, 42%) como un sólido blanco. El producto más polar producto se purificó además por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 10% acetona/CHCl3 para dar el compuesto 827ii (4.6 mg, 7%) como un sólido blanco. Compuesto 827i: CLAR: 99% a 3.12 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm que se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 481.04 [M+H]+. Compuesto 827ii: CLAR: 99% a 2.62 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. , contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 439.02 [M+H]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 827i y 827ii se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÍ y la retención de la configuración en ella.- La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 828 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aoc) ] - 5- (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7 -dimetil ¦ 1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -3 , -dimetil-2 - piridincarbonitrilo (828) Una mezcla de 5-amino-3 , 4 -dimetilpiridina-2 -carbonitrilo (30 mg, 0.20 mmol), compuesto 752 (65 mg, 0.31 mmol) y mallas moleculares de 4A (200 mg) en DMA (1 mL) se calentó a 160°C en un tubo sellado por 18 h. La mezcla de reacción se filtró, el residuo se lavó con EtOAc y los filtrados combinados se concentraron bajo presión reducida. La purificación por CCD preparativa (Si02) que se eluye con 90% EtOAc/hexanos dio el compuesto 828 (42 mg, 40%) como un sólido color rosa claro. CLAR: 94% a 1.92 y 2.00 min. (tiempo de retención-atropisómeros) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 342.21 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 828 se establece por la estereoquímica conocida del. compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 829 [3aS- (3aa,43,53, 7 ,7aa)] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1,3-dioxo-4,7-epoxi - 2H- isoindol-2-il)-3,4-dimeti1 - 2 - piridincarbonitrilo (829) Una mezcla de 5-amino-3 , 4 -dimetilpiridina-2 -carbonitrilo (30 mg, 0.20 truno1) , compuesto 751 (65 mg, 0.31 mmol) y mallas moleculares de 4Á (200 mg) en DMA (0.25 mL) se calentó a 160°C en un tubo sellado por 18 h. La mezcla de reacción se filtró, el residuo se lavó con EtOAc y los filtrados combinados se lavaron con H20 (2 X 10 mL) , salmuera (? X 10 mL) , se secaron (Na2S04) y concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice sobre gel de sílice se eluye con 90% EtOAc/hexanos seguida por CCD preparativa (Si02) que se eluye con 90% EtOAc/hexanos dio el compuesto 829 (35 mg, 33%) como un sólido color de rosa claro. CLAR: 98% a 1.92 y 2.00 min. (tiempo de retención-atropisómeros) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 342.21 [M+H] + . La estereoquímica absoluta del compuesto 829 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto .intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 830 Una solución del compuesto 791B (41 mg; 0.1 mmol), metilamina 2.0 M en THF (0.2 mL; 0.4 mmol), l-hidroxi-7-azabenzotriazol (17 mg; 0.12 mmol), EDCI (40 mg; 0.2 mmol) y diisopropiletilamina (0.075 mL; 0.4 mmol) en 0.5 mL de DMF se calentó hasta 55 °C por 3 horas. Después de dividir la mezcla de reacción entre EtOAc (20 mL) y agua (20 mL) , la capa orgánica se lavó con NaOH 1N (2 x 20 mL) , solución saturada de bisulfato de potasio (2 x 20 mL) y salmuera (20 mL) . El secado (MgS04) y la concentración in vacuo dio un residuo que se cristalizó a partir de éter de etilo para resultar el compuesto 830 (30 mg, 71%) como un sólido blanco. CLAR: 97.5% a 1.48 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso^ durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 422.30 [M+H]+. El compuesto 830 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatuxa y estructura mostradas no .reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto .
Ejemplo 831 Una gota de DMF se agregó a una solución del compuesto 792B (60 mg; 0.15 mmol) y cloruro de oxalilo (0.026 mL; 0.3 mmol) en cloruro de metileno (1 mL) a temperatura ambiente. Después de agitación por 2 h a temperatura ambiente, los compuestos volátiles se separaron in vacuo. El residuo se disolvió en -2 mL de isopropanol. Después de reposar 30 min. a temperatura ambiente, los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se disolvió en EtOAc : isopropanol , 9:1 (20 mL) . La solución se dejó reposar 15 min. sobre carbón decolorante. La filtración a través de celite y la concentración del filtrado produjo el compuesto 831 (56 mg, 83%) como una espuma amarillo claro. CLAR: 96.9% a 1.52 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM CES) : m/z 451.08 [M+H]+. El compuesto 831 representa una mezcla racémica de antípodos . La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 832 Nombre 832i y 832ii El compuesto racémico 831 (0.4 g) se separó en sus enantiómeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm; se eluye con 25% MeOH/EtOH (1:1) en hexano (isocrática) a 50 mL/min.) para dar 170 mg de enantiómero de elución más rápida, compuesto 832i (CLAR quiral: 8.97 min.; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm; se eluye con 20% MeOH/EtOH (1:1) en hexano a 1 mL/min.); CLAR: 99% a 1.84 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 451.06 [M+H] + y 190 mg del enantiómero de elución más lenta, compuesto 832ii (CLAR quiral: 14.79 min.; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm; se eluye con 20% J^leOH/EtOH (1:1) en hexano a 1 mL/min.); CLAR: 99% a 1.85 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 451.03 [M+H]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 832i y 832ii no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 833 Una solución del compuesto 792B (45 mg; 0.11 mmol) , metan sulfonamida (27 mg; 0.28 mmol), 4 -dimetilaminopiridina (34 mg; 0.28 mmol) y EDCI (24 mg; 0.12 mmol) en 1 mL de diclorometano se agitó a temperatura ambiente por 18 hs . Después de dividir la mezcla de reacción entre EtOAc (25 mL) y agua (25 mL) , la capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (25 mL) , agua (25 mL) y salmuera (25 mL) . El secado (MgS04) y la concentración dio un residuo que se trituró con éter de etilo para resultar el compuesto 833 (29 mg, 55%) como un polvo blanco descolorido.
CLAR: 98% a 1.44 min . (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, . contiene 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 254 nm) ; EM (ES) : m/z 485.94 [M+H]+. El compuesto 833 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 834 3aa,4P,5a,7P,7aa) -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil) fenil) - hexahidro-4 , 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi- lH-isoindol- 5-carb Una mezcla del compuesto 792B (100 mg; 0.24 mmol) , hidróxido de (metoxicarbonilsulfamoil) trietilamonio, sal interna (125 mg; 0.5 mmol) y trietilamina (0.15 mL; 1 mmol) en 2.5 mL de THF se agitó a temperatura ambiente por 2 hs . Después de dividir la mezcla de reacción entre éter de etilo (30 mL) y agua (30 mL) , la capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (30 mL) , solución de bicarbonato de sodio saturado (30 mL) y salmuera (30 mL) . El secado (MgS04) y la concentración in vacuo produjo el compuesto 834 (80 mg, 97%) como un polvo .blanco. CLAR: 99% a 1.51 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 390.03 [ +H]+. El compuesto 834 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 835 Una mezcla del compuesto 793A (121 mg; 0.29 mmol) y bencilamina (0.032 mL; 0.29 mmol) en 0.6 mL de THF se agitó a temperatura ambiente por 18 hs . Después de agregar -5 mL de hexano, la suspensión resultante se filtró y se secó para resultar el compuesto 835 (135 mg, 89%) como un polvo blanco. CLAR: 99% a 1.42 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 528.39 JM+H]+. El compuesto 835 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 836 Una mezcla del compuesto 793A (190 mg; 0.45 mmol) y amoniaco 2.0 M en THF (0.3 mL; 0.6 mmol) en 0.7 mL de THF se agitó a temperatura ambiente. Después de 1 h, se agregó una cantidad adicional de amoniaco 2.0 M en THF (0.7mL; 1.4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 18 hs . Los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se trituró a partir de hexano para resultar el compuesto 835 (145 mg, 74%) como un polvo blanco descolorido. CLAR: 95.1% a 1.28 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min. , observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 438.26 [M+H]+. El compuesto 836 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 837 Una mezcla del compuesto 793A (42 mg; 0.1 mmol) y dimetilamina 2.0 M en MeOH (0.1 mL; 0.1 mmol) en 0.5 mL de THF se agitó a temperatura ambiente por 18 h. Los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se filtró a través de un tapón de 0.5 x 5 cm de gel de sílice, se eluyó con ~50 mL de EtOAc . Después de la concentración del filtrado, el residuo amarillo claro se disolvió en éter de etilo y se agregaron 0.3 mL de HCl 1M en éter de etilo. Los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo sólido se trituró a partir del éter de etilo para resultar el compuesto 837 (25 mg, 50%) como un polvo color crema. CLAR: 99% a 1.31 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min., contiene 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 466.33 [M+H]+. El compuesto 837 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto .
Ejemplo 838 Una mezcla del compuesto 793A (42 mg; 0.1 mmol) y dimetilamina 2.0 M en THF (0.1 mL; 0.1 mmol) en 0.5 mL de THF se agitó a temperatura ambiente por 18 h. Los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se filtró a través de un tapón de 0.5 x 5 cm de gel de sílice, eluido con ~50 mL de EtOAc . Después de la concentración del filtrado, el residuo amarillo se disolvió en éter de etilo y se agregó 0.3 mL de HC1 1M en éter de etilo. Los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo sólido se trituró a partir del éter de etilo para resultar el compuesto 838 (22 mg, 46%) como un polvo amarillo. CLAR: 99% a 1.28 min. (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min., observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 452.31 [M+H]+. El compuesto 838 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 839 -Metil-benzo [1,2,5] tiadiazol (839A) A una solución de 2 , 3 -diaminotolueno (5.0g, 40.9 mmol) en piridina (40 mL) a 0°C se agregó cloruro de tionilo (7.0 mL, 98.2 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 30 min., después se agregó agua (200 mL) . La solución se extrajo con diclorometano (2 x 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04 y concentraron in vacuo para dar el compuesto 839A (5.57g) como un líquido café obscuro.
B. 4-Metil-5-nitro-benzo [1, 2, 5] tiadiazol (839B) A una solución de 4 -metil-benzo [1 , 2 , 5] tiadiazol (5.57 g, 37.1 mmol) en H2S04 concentrado (14.5 mL) a 0°C se agregó lentamente HN03/H2S04 (3.25 mL/4.25 mL) . La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 20 min. y después a temperatura ambiente por 30 min. y después se vació en agua helada (200 mL) . El precipitado resultante se aisló por filtración, se enjuagó con agua y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice, se eluye con CHCI3 para dar el compuesto 839B (1.5 g) como un sólido amarillo y 4-metil-7-nitro- benzo [1, 2 , 5] tiadiazol (2.0 g) como un sólido amarillo.
C. 4-Metil-benzo [1,2, 5] tiadiazol-5-ilamina (839C) El 4-Metil-5-nitro-benzo [1, 2, 5] tiadiazol (1.4 g, 7.18 mmol) se disolvió en THF (10 mL) , ácido acético (1 mL) y agua (21 mL) y polvo de hierro (1.4 g, 25.0 mmol, malla 325) se agregó. La mezcla de reacción se calentó a 80°C por 1.5 h, enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de celite para separar el polvo de hierro. La solución se extrajo con CHC13 (2 x 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SC>4 y concentraron in vacuo para dar el compuesto 839C (1.1 g) como un sólido café claro.
D. (839D) 4-Metil-benzo [1, 2, 5] tiadiazol-5-ilamina (0.10 g, 0.610 mmol), mallas moleculares de 4Á (0.46 g) y ej. compuesto 752 (0.128 g, 0.610 mmol) fueron disueltos en DMA (0.60 mL) en un tubo sellado. La mezcla de reacción se calentó a 190°C por 1 h y después se enfrió hasta temperatura ambiente. La solución se filtró a través de celite para separar las mallas y después el filtrado se lavó con NH4C1 saturado (10 mL) seguido por salmuera (10 mL) . La capa orgánica después se secó sobre Na2S04 y se concentró in vacuo para resultar un aceite amarillo. El material resultante se purificó por CCD preparativa (Si02) , se eluye con 20% acetona en CHC13 para dar el compuesto 839D (70 mg) como un sólido amarillo claro. CLAR: 98% a 2.87 min. (tiempo de retención) (columna YMC S-5 ODS-A, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 360.19 [M+H] . La estereoquímica absoluta del compuesto 752 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 839D y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 840 4-Metil-benzo [1, 2 , 5] tiadiazol-5-ilamina (0.078g, 0.47 mmol) , mallas moleculares de 4Á (0.46 g) y el compuesto 751 (0.100 g, 0.47 mmol) fueron disueltos en DMA (0.50 mL) en un tubo sellado. La mezcla de reacción se calentó a 190°C por 1 h y después se enfrió hasta temperatura ambiente. La solución se filtró a través de celite para separar las mallas y después el filtrado se lavó con saturated NH4C1 saturado (10 mL) , seguido por salmuera (10 mL) . La capa orgánica después se secó sobre Na2S04 y se concentró in vacuo para resultar un aceite amarillo. El material resultante se purificó por CCD preparativa (Si02) , se eluye con 20% acetona en CHC13 para dar el compuesto 840 (20 mg) como un sólido amarillo claro. CLAR: 97% a 2.87 min. (tiempo de retención) (columna YMC S-5 ODS-A, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min. , observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 360.30 [M+H] . La estereoquímica absoluta del compuesto 840 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 841 [3aR- (3aa,4P,53,73,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7 -dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3-metil-2- ( rifluorometil) benzonitrilo (841S) A. N- ( -Cloro- 3 - trifluorometilfenil) -2,2 -dimetilpropionamida (841A) A una solución de 4-cloro-3- (trifluorometil) anilina comercialmente disponible (15.0 g, 76.7 mraol) en THF anhidro (200 mL) enfriada hasta 0-5°C, se agregó trietilamina (11.7 mL, 84.4 mmol) seguida por cloruro de pivaloilo (10.4 mL, 84.4 mmol) durante 30 min. El baño de hielo se separó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por 1 h. La mezcla se diluyó con éter y se filtró. El filtrado se lavó con agua (2X) y salmuera, se secó sobre MgS04/ se filtró y concentró. El residuo se trituró con hexanos y el sólido se filtró y se secó in vacuo para resultar el compuesto 841A (20.4 g, 95%). EM (ES) : m/z = 280 [M+l] +.
B. N- (4-Cloro-2-metil-3-trifluorometilfenil ) -2 , 2-dimetil-propionamida (841B) A una solución de N- (4 -cloro-3 -trifluorometilfenil ) -2 , 2 -dimetilpropionamida (2.29 g, 8.19 mmol ) en THF anhidro (25 mL) enfriada hasta 0-5°C se agregó una solución de 1.6 M n-butillitio en hexanos (12.3 mL, 19.7 mmol), se agregó lentamente de manera que la temperatura de reacción se mantuvo debajo de 5°C. La solución se agitó a 0-5°C por 1.5 h. Una solución de yodometano (0.56 mL, 9.01 mmol) en éter de petróleo (2 mL) se agregó durante 20 min. mientras se mantenía la temperatura debajo de 5°C. La suspensión se agitó a 0-5°C por 1 h y se diluyó con agua y éter. La capa acuosa se extrajo con éter y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secó sobre MgS0 , se filtró y concentró in vacuo. El residuo se cromatografió (gel de sílice) , se eluye con CH2C12 para resultar el compuesto 841B (1.60 g, 67%) . EM (ES) : m/z = 294 [ +l]+.
C. N- (4-Ciano-2-metil-3-trifluorometilfenil ) -2, 2-dimetil-propionamida (841C) Una suspensión de N- (4 -cloro-2 -metil -3 -trifluorometilfenil) -2 , 2 -dimetil -propionamida (8.36 g, 28.5 mmol) y CuCN (4.33 g, 65.5 mmol) en N-metilpirrolidinona anhidra (85 mL) se puso a reflujo por 38 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la suspensión se vació en agua con hielo con agitación. El sólido resultante se filtró, se lavó con agua y se secó para resultar una mezcla 85:15 (7.55 g) del compuesto 841C y 841D. La mezcla resultante se usó en la siguiente etapa.
D. 4-Amino-3-metil-2- trifluorometilbenzonitrilo (841D) Una solución del producto mezclado del 841C (7.53 g, 26.5 mmol) se disolvió en 120 mL de HC1 concentrado /EtOH (1:1) y se puso a reflujo por 14 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la solución se concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2X) y salmuera (IX) , se secó sobre MgS04, se filtró y concentró in vacuo. El residuo se cromatografió (gel de sílice), se eluye con cloroformo/metanol (98:2) para ensamblar el compuesto 841D (4.62 g, 87%). EM (ES): m/z = 201 [M+l]+.
E. [3aR- (3ßa,4ß, 5P,7P,7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7- dimetil-1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -3 -metil-2- ( trifluorometil) benzonitrilo ( 841E) 4-Amino-3-metil-2-trifluorometilbenzonitrilo (0.051 g, 0.25 mmol), malla molecular de 4Á (0.20 g) y el compuesto 752 (0.059 g, 0.28 mmol) fueron disueltos en DMA (0.30 mL) en un tubo sellado. La mezcla de reacción se calentó a 175°C por 30 min y después se enfrió hasta temperatura ambiente. La solución se filtró a través de celite para separar las mallas y después el filtrado se lavó con NH4C1 saturado (10 mL) , seguido por salmuera (10 mL) . La capa orgánica después se secó sobre Na2S04 y se concentró in vacuo para resultar un aceite amarillo. El material resultante se purificó por CCD preparativa (Si02) , se eluye con 25% acetona en CHC13 para dar el compuesto 841E (40 mg) como un sólido café claro. CLAR: 97% a 3.18 min. (tiempo de retención) (columna YMC S-5 ODS-A, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min. conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 393.18 [M-H] " . La estereoquímica absoluta del compuesto 841E se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 842 [3aS- (3aa, 4 , 5ß, 73,7act) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3 -cloro- 2- piridincarbonitrilo (842) El compuesto 752 (500 mg, 2.36 mmol) , mallas moleculares de 4 Á (1.5 g) , 5 -amino-3 -cloro-2 -cianopiridina (357 mg, 2.34 mmol) y DMA (2 mL) se combinaron en un tubo sellado. La mezcla se calentó en un baño de aceite precalentado a 170 °C por 25 min., se enfrió y la malla se separó por filtración, se eluye con EtOAc . Los compuestos orgánicos se lavaron 3x con agua, seguido por salmuera. Los compuestos orgánicos resultantes se secaron sobre MgS0 y se concentró in vacuo. El residuo se pre-adsorbió sobre Celite y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 40% de acetona en CH2C12 para dar el compuesto 842 (480 mg, 63%) como un sólido color marrón. CLAR: 97% a 2.66 min. (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min., contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min., observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 348.30 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 842 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 843 A. 5-Metil-imidazo[l,2-a]piridin-6-ilamina (843?) 2-Metil-3-nitro-6-amino piridina (63 mg, 0.41 mmol) se suspendió en 1.3 mL de EtOH conteniendo 0.3 mL de HC1 concentrado. Se agregó 2-Bromo-l , 1-dimetoxi-etano (73 µ?,, 0.62 mmol) y la mezcla resultante se puso a reflujo por 8 h, punto en el cual se agregó 2-bromo-l , 1-dimetoxi-etano adicional (0.1 mL, 0.85 mmol). La mezcla se agitó a reflujo durante la noche, se enfrió y diluyó con CH2CI2. Los compuestos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHC03, se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo. El residuo se disolvió en 4 mL AcOH/EtOAc (1:1) y la solución resultante se calentó hasta 75°C. Polvo de hierro (46 mg, 0.82 mmol, malla 325) se agregó y la mezcla se agitó por 20 rnin. Se agregó polvo de hierro adicional (46 mg, 0.82 mmol, malla 325) y la agitación continuó por 30 min. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice con 20% de MeOH en CH2Cl2 para dar el compuesto 843A (51 mg, 85%) como un sólido amarillo-café. CLAR: 72% a 0.18 min y 28% a 0.27 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P0 , 4 mL/min, observando a 220 nm) . E (ES) : m/z 147.85 [ +H] +.
C. (843B) En un tubo sellado se colocó 5-metil-imidazo [1 , 2-a] piridin- 6 - ilamina (46 mg, 0.31 mmol), compuesto 20A (92 mg, 0.47 mmol), 250 mg de mallas moleculares de 4Á y 0.3 mL de DMA. El tubo se selló y calentó en un baño de aceite precalentado a 170°C por 30 min. La mezcla se enfrió y se filtró, se eluye con EtOAc. El filtrado se lavó 3x con agua seguido por salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgS04, se concentró in vacuo y se purificó por CCD preparativa (S1O2) con 50% acetona en CHC13 para dar el compuesto 843B (32 mg, 32%) como un sólido amarillo pálido. CLAR: 99% a 1.47 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P0 , 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 326.39 [M+H]+.
Ejemplo 844 En un tubo sellado se combinaron 5-metil -imidazo [1 , 2 -a] iridin-6-ilamina (50 mg, 0.34 mmol) , compuesto 752 (108 mg, 0.51 mmol), MgS04 (102 mg, 0.85 mmol), Et3N (0.24 mL, 1.7 mmol) y 0.3 mL de 1 , 2 -dimetoxi -etano . El tubo se selló y se calentó a 135°C por 14 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró para separar la malla, se eluye con MeOH, y se concentró in vacuo. La purificación del residuo resultante por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 10% MeOH en CH2C12 produjo el compuesto 844 (86 mg, 74%) como un sólido color marrón. CLAR: 100% a 0.85 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3PO4, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 342.20 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 844 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 845 Según el procedimiento de Ejemplo 843, 5-metil-imidazo [1 , 2-a] piridin-6-ilamina (50 mg, 0.34 mmol), él compuesto 751 (108 mg, 0.51 mmol), MgS04 (102 mg, 0.85 mmol), Et3N (0.24 mL, 1.7 mmol) reaccionaron en 0.3 mL de 1,2-dimetoxi-etano . La purificación dio el compuesto 845 (79 mg, 68%) como un sólido color marrón. CLAR: 100% a 0.85 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3PO4, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 342.20 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 845 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 846 A. Imidazo [1, 2 -a] piridin- 6 -ilamina (846A) 2-Amino-5-nitro piridina se suspendió en 40 mL de una solución de EtOH/HCl concentrado (3 :1) . A esta suspensión se agregó 2 -bromo- 1 , 1-dimetoxi -etano (6.37 mL, 53.91 mmol) y la mezcla resultante se calentó hasta reflujo por 8 h, después de lo cual se agregó 2 -bromo- 1 , 1-dimetoxi -etano adicional (6.37 mL, 53.91 mmol) . La mezcla se calentó a reflujo durante la noche, se enfrió hasta temperatura ambiente y se colocó en un refrigerador por 24 h. Los precipitados se colectaron, se lavaron con EtOH enfriado con hielo, se secaron con aire y convirtieron a la base libre usando procedimientos estándar para resultar un sólido amarillo. El sólido amarillo crudo resultante, (404 mg) se disolvió en 150 mL THF/MeOH (1:1) y la solución resultante se hidrogenó por 4 h sobre Pd/C (250 mg, 10%) usando un globo de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de Celite se eluye con THF/MeOH (1:1) y se concentró el filtrado. La purificación se alcanzó usando cromatografía instantánea por gel de sílice con 20% MeOH en CH2C12 para dar el compuesto 846A (241 mg, 75%) como un aceite incoloro que se obscurece con el reposo.
B. (846B) En un tubo sellado se combinaron imidazo [ 1 , 2 -a] piridin-6-ilamina (64 mg, 0.48 mmol), compuesto 752 (148 mg, 0.71 mmol), MgS04 (146 mg, 1.21 mmol), Et3N (0.34 mL, 2.40 mmol) y 0.4 mL de 1 , 2 -dimetoxi -etano . El tubo se selló y se calentó hasta 135°C por 14 h. La mezcla se enfrió, se filtró a través de Celite se eluye con MeOH y se concentró. La purificación se alcanzó por cromatografía instantánea por gel de sílice con 10% MeOH en CH2Cl2 para dar el compuesto 846B (107 mg, 64%) como un sólido amarillo pálido. CLAR: 40% a 0.19 min y 60% a 0.38 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos y contiene 0.2% H3PO4, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 328.16 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 846B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 847 Según el procedimiento dado en el Ejemplo 846, imidazo [ 1 , 2-a] piridin-6-ilamina (50 mg, 0.38 mmol), compuesto 751 (119 mg, 0.56 mmol), MgSO„ (114 mg, 0.95 mmol), Et3N (0.26 mL, 1.9 mmol) reaccionaron en 0.35 mL de 1 , 2-dimetoxi-etano . La purificación dio el compuesto 847 (87 mg, 70%) como un sólido blanco. CLAR: 32% a 0.20 min y 68% a 0.37 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 328.12 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 847 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 751 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 848 A. 4-amino-2-metoxi-benzonitrilo (848A) El 2-Metoxi-4-nitro-benzonitrilo (500 mg, 2.81 mmol) se suspendió en 4 mL de AcOH/EtOAc (1:1) y la mezcla resultante se calentó hasta 75°C para dar una solución transparente. Se agregó polvo de Fe (313 mg, 5.61 mmol, malla 325) y la mezcla se agitó por 30 min, después de lo cual se introdujo polvo de Fe adicional (313 mg, 5.61 mmol, malla 325) . La mezcla se agitó a 75°C por 30 min adicionales, y después enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró, se eluye con EtOAc. Se concentró el filtrado in vacuo, re-disuelto en EtOAc, se filtró (se eluye con EtOAc) y concentró. La purificación se alcanzó por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 a 10% de MeOH en CH2C12 para dar el compuesto 848A como un sólido color marrón.
B. (848B) En un tubo sellado se combinaron 4 -amino-2 -metoxi -benzonitrilo (40 mg, 0.27 mmol) , compuesto 752 (86 mg, 0.41 mmol), MgS04 (81 mg, 0.68 mmol) , Et3N (0.19 mL, 1.4 mmol) y 0.25 mL de 1 , 2 -dimetoxi -etano . El tubo se cerró y calentó a 135°C por 14 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró (se eluye con MeOH) y se concentró in vacuo. La purificación del residuo resultante por cromatografía instantánea por gel de sílice usando 0 hasta 100% EtOAc en CH2Cl2 para resultar el compuesto 848B (36 mg, 39%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 100% a 2.36 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3PO4, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 341.23 [M-H] " . La estereoquímica absoluta del compuesto 848B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 849 A. 6-amino-2-metil-nicotinonitrilo (849A) Una mezcla de 6-amino-2-metil-nicotinonitrilo (500 mg, 2.67 mmol) , CuCN (478 mg, 5.34 mmol) y DMA (2 mL) se agitó bajo nitrógeno por 20 h a 170°C. La mezcla de reacción se enfrió y se agregó a 50 mL de una solución acuosa al 20% de etan- 1 , 2 -diamina . Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo 3x con EtOAc. Los compuestos orgánicos combinados se lavaron con agua seguida por salmuera, se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo. La purificación por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% EtOAc en CH2C12 dio el compuesto 849A (199 mg, 56%) como un sólido blanco.
B. (849B) En un tubo sellado se colocó 6-amino-2-metil-nicotinonitrilo (50 mg, 0.38 mmol) , compuesto 752 (119 mg, 0.56 mmol), MgS04 (114 mg, 0.95 mmol), Et3N (0.26 mL, 1.9 mmol) y 0.3 mL de 1 , 2-dimetoxi-etano . El tubo se selló y calentó a 135°C por 14 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró (se eluye con eOH) y se concentró in vacuo.. Se concentró el filtrado y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% EtOAc en CH2C12 para dar el compuesto 849B (36 mg, 29%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 1.99 min (tiempo de retención) (Columna Y C S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% H3PO4, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 328.04 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 849B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 850 A. 6-amino-4, 5-dimetil-nicotinonitrilo (850A) Una mezcla de 5-bromo-3 , 4-dimetil -piridin-2 -ilamina (500 mg, 2.49 mmol), CuCN (445 mg, 4.97 mmol) y DMA (3.5 mL) se agitó bajo nitrógeno por 20 h a 170°C. La mezcla de reacción se enfrió y se agregó a 50 mL de una solución acuosa al 20% de etano-1 , 2 -diamina . Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo 3x con EtOAc . Los compuestos orgánicos combinados se lavaron con agua, seguido por salmuera y se secaron sobre MgS04. La concentración in vacuo produjo el compuesto 850A (362 mg, 99%) como un sólido blanco.
B. (850B) En un tubo sellado se combinaron 6-amino-4 , 5 -dimetil -nicotinonitrilo (50 mg, 0.34 mmol), compuesto 752 (108 mg, 0.50 mmol), MgS04 (102 mg, 0.85 mmol), Et3N (0.24 mL, 1.7 mmol) y 0.3 mL de 1 , 2 -dimetoxi -etano . El tubo se cerró' y se calentó hasta 135°C por 14 h. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró (se eluye con MeOH) y se concentró in vacuo. La purificación del residuo resultante por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% EtOAc en CH2C12 produjo el compuesto 850B (68 mg, 59%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 10% a 2.15 min y 82% a 2.31 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min, observando a 220 nm) . E (ES): m/z 342.06 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 850B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 851 A. 6-amino-4-metil-nicotinonitrilo (851?) Una mezcla de 5-bromo-4-metil-piridin-2-ilamina (500 mg, 2.67 mmol), CuCN (478 mg, 5.34 mmol) y DMA (2 mL) se agitó bajo nitrógeno por 20 h a 170°C. La mezcla de reacción se enfrió y se agregó a 50 mL de una solución acuosa al 20% de etano- 1 , 2 -diamina . Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo 3x con EtOAc . Los compuestos orgánicos combinados se lavaron con agua seguida por salmuera y se secaron sobre MgS04. La concentración in vacuo produjo el compuesto 851A (309 mg, 87%) como un sólido blanco.
B. (851B) En un tubo sellado se colocó 6-amino-4-metil-nicotinonitrilo (50 mg, 0.38 mmol) , compuesto 752 (119 mg, 0.56 mmol), MgS04 (114 mg, 0.95 mmol), Et3N (0.26 mL, 1.9 mmol) y 0.3 mL de 1 , 2 -dimetoxi-etano . El tubo se selló y se calentó hasta 135°C por 14 h. La mezcla se permitió enfriar a temperatura ambiente y se filtró, se eluye con MeOH. Se filtró el concentrado in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% de EtOAc en CH2C12 para dar el compuesto 851B (67 mg, 54%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 1.95 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 328.04 [ +H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 851B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 852 A. tert-Butil- (2 , 5 -dimetil- furan-3 - ilmetoxi ) -dimetil-silano En un matraz de fondo redondo seco de 100 mL, se preparó una solución de metil 2 , 5-dimetil-3 -furoato (2.00 g, 13.0 mmol) en Et20 anhidro (10 mL) bajo una atmósfera inerte. A esta solución se agregó gota a gota una solución 1.0 M de LiAlH4 en Et20 (13 mL, 13 mmol) a 0°C. La suspensión resultante se agitó a 0°C por 30 min y se dejó después entibiar a temperatura ambiente, en donde se mantuvo por 4 h. La reacción se apagó por la adición cuidadosa de Na2SO4«10 H20 sólido (exceso) y Celite (exceso) . Para facilitar la agitación, se agregó Et20 como fue. necesario. La mezcla resultante se agitó durante la noche, se filtró y se concentró cuidadosamente in vacuo para resultar el alcohol volátil que se disolvió en DMF anhidro (5 mL) bajo una atmósfera inerte. A esta solución se le agregó imidazol (1.32 g, 19.5 mmol) y TBSCl (2.05 g, 13.6 mmol) y la mezcla se agitó por 6 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se agregó agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó varias veces con agua. Los compuestos orgánicos se secaron sobre MgS04, se concentraron in vacuo y se purificaron por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 50% de EtOAc en hexanos, resultando el compuesto 852A (3.08 g, 99%) como un aceite incoloro.
En un tubo sellado se combinaron tert-butil - (2 , 5-dimetil - furan-3 - ilmetoxi) -dimetil-silano (2.60 g, 10.8 mmol), 4- (2 , 5-dihidro-2 , 5-2 , 5 -dioxo-H-pirrol - 1-il ) -2-trifluorometilbenzonitrilo (1.44 g, 5.41 g) y THF (1 mL) . El tubo se selló y se calentó rápidamente hasta 95°C para resultar una solución casi transparente. La mezcla después se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La purificación se logró por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos para dar el compuesto 852B (2.37 g, 86%) como un sólido blanco.
Una solución del compuesto 852B de (1.4 g, 2.8 mmol) en EtOAc (50 mL) se hidrogenó sobre Pd/C (10%, 800 mg) por 6 h usando un globo de hidrógeno. La mezcla se filtró, se eluye con EtOAc, y se concentró in vacuo. La purificación se logró usando cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos para resultar el compuesto 852C (0.9 g, 64%) como una espuma blanca.
D. El compuesto 852C (0.9 g, 1.8 mmol) se disolvió en 7 mL de EtOH conteniendo 2% de HC1 concentrado a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó por 2 h. La mezcla de reacción se vació cuidadosamente en solución saturada de NaHCÜ3 y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04, se concentraron in vacuo y se purificaron por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100 % de EtOAc en CH2CI2 para resultar una mezcla racémica del compuesto 852Di y 852DÜ (0.7 g, 100%) como un sólido blanco. El material racémico se separó en sus enantiómeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm; se eluye con 30% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrático) a 50 mL/min) para dar el enantiómero de elución más rápida compuesto 852DÍ (CLAR quiral: 5.56 min; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm se eluye con 30% MeOH/EtOH (1:1) en heptano conteniendo 0.1% DBA a 1 mL/min) y el enantiómero de elución más lenta compuesto 852DÜ (CLAR quiral: 7.01 min; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm; se eluye con 30% MeOH/EtOH (1:1) en heptano conteniendo a 1 mL/min) . La estereoquímica absoluta de los compuestos 852Di y 852DÜ no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 853 (3aa,4P,5a,7P,7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [6- (trifluorometil) -4- pirimidinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil- 1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo (853) Trifenilfosfina (0.066g, 0.254 mmol) y di-ter-butil-azodicarboxilato (0.058g, 0.254 mmol) en THF (0.5 mL) se agitaron a temperatura ambiente bajo N2 por 10 min, se agregó después 6-trifluorometil -4 -pirimidinol (0.042g, 0.254 mmol) . La mezcla de reacción se agitó bajo N2 por otros 15 min, seguido por la adición de una mezcla racémica de los compuestos 852DÍ y 852DÜ (0.050g, 0.127 mmol) . La reacción se dejó proceder por 2 h, punto en el cual se agregó el CH2C12 (15 mL) . La capa orgánica se aisló y después se lavó consecutivamente con NaOH 1N (15 mL) , salmuera (15 mL) y se secó sobre MgS0 y se concentró in vacuo. El sólido resultante se purificó por cromatografía en gel de sílice, se eluye con EtOAc en hexano desde 0% hasta 100%, para dar el compuesto 853 (60 mg) como un sólido blanco. CLAR: 99% a 4.083 min (tiempo de retención) (columna YMC S-5 ODS-A, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 541.06 [ +H] . El compuesto 853 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 854 En un tubo sellado se preparó una mezcla del compuesto 852DÍ (150 mg, 0.38 mmol), Mel (0.24 mL, 3.8 mmol) y Ag20 (881 mg, 3.8 mmol) en 2 mL de CH3CN. El tubo se selló y calentó hasta 80°C durante la noche. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró, se eluye con EtOAc, y concentra. La purificación se logró por cromatografía instantánea por gel de sílice con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos para dar el compuesto 854 (49 mg, 32%) como un aceite incoloro. CLAR : 97% a 3.58 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 407.20 [ +H] + . La estereoquímica absoluta del compuesto 854 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ej eatiplo 855 El compuesto 852DÜ (150 mg, 0.38 mmol), Mel (0.24 mL, 3.8 mmol) y Ag20 (881 mg, 3.8 mmol) reaccionaron en 2 mL de CH3CN y la mezcla de reacción se purificó como se describe por el Ejemplo 854 para resultar el compuesto 855 (45 mg, 29%) como un aceite incoloro. CLAR: 98% a 3.58 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04 , 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 407.19 [M-H]~. La estereoquímica absoluta del compuesto 855 no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 856 A una solución del compuesto 852B (835 mg, 1.65 mmol) en 10 mL de THF se agregó una solución 1.0 M de BH3»THF (3.3 mL, 3.30 mmol) gota a gota a 0°C. La mezcla resultante se agitó a 0°C por 2 h, después de lo cual se agregaron 15 mL- de EtOH, 5 mL de THF, 30 mL de una solución amortiguadora de fosfato de pH 7 y 2.1 mL de 30% de H202. La mezcla resultante se agitó por 2 h a 0°C, después de lo cual se agregaron agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo nuevamente con EtOAc . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución al 10% de Na2S203 seguida por salmuera. Los compuestos orgánicos se secaron sobre MgS04, se concentraron y purificaron por cromatografía instantánea con 0 hasta 25% de EtOAc en CH2C12. El material se disolvió en 8 mL de EtOH conteniendo 2% de HCl concentrado y la mezcla resultante se agitó por 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se vació cuidadosamente en una solución saturada de NaHC03. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo nuevamente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron in vacuo. El material racémico resultante se separó en sus enantiomeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK OD 5 x 50 cm; se eluye con 15% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrática) a 50 mL/min) para dar el compuesto de elución más rápida 856i (128 mg) (CLAR quiral: 13.64 min; columna CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm; se eluye con 15% MeOH/EtOH (1:1) en heptano conteniendo a 1 mL/min) y el compuesto de elución más lenta 856ii (137 mg, 39% rendimiento combinado) (CLAR quiral: 16.31 min; columna CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm; se eluye con 15% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min) . ) . EM (ES) : m/z 411.01 [M+H]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 856i y 856ii no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 857 El compuesto 798i se convirtió al compuesto 857A por el procedimiento descrito en el Ejemplo 774. CLAR : 95% a 4.307 min, (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) .
B.
El compuesto 857A se convirtió al compuesto 857B por el procedimiento descrito en el ejemplo 774. CLAR: 100% a 2.89 min, (tiempo de retención) (columna YMC S5 ODS-A 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 381.16 [M+H] +.
C. (857C) El compuesto 857B (0.100 g, 0.26 mmol) , Mel (0.163 mL, 2.6 mmol), Ag20 (0.603 g, 2.60 mmol) y acetonitrilo (2.5 mL) se agregaron a un recipiente de reacción de alta presión. El recipiente se selló y calentó hasta 75°C. Después de 16 h, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc y se filtró a través de celite, enjuagando con EtOAc. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea sobre sílice, que se eluye con 0-5-8% acetona en cloroformo para dar el compuesto 857C como un sólido blanco. CLAR: 90% a 2.887 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 395.07 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 857C no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 858 A. (858AÍ y 858AÜ) El compuesto 857B (2.50 g, 6.57 mmol) se disolvió en THF (10.0 mL) a 22°C y se agregó NaOH 1N (10.0 mL) . Después de 1 h, se agregaron THF (10.0 mL) , HCl 1N (1.10 mL) y salmuera (10.0 mL) . La mezcla después se extrajo una vez con EtOAc (20.0 mL) y dos veces con 1:1 THF/EtOAc (20.0 mL) . Los compuestos orgánicos combinados se secaron sobre MgS0 anhidro, se filtraron y concentraron in vacuo para dar los compuestos 858AÍ y 858AÜ (1:1 por CLAR) como un sólido blanco. No fue necesaria la purificación. CLAR: 100% a 2.383 y 2.573 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) .
B. (858B) Los compuestos 858Ai y 858AÜ se suspendieron en una mezcla de THF (50.0 mL) y AcOH (20.0 mL) y se calentaron hasta 60 °C por 16 h. La reacción se hizo homogénea después de 4 h. La reacción se enfrió hasta 22 °C y se concentró in vacuo. Se agregó después tolueno (20.0 mL) y la mezcla se calentó hasta 90 °C por 4 h hasta que todo el producto fue disuelto. La mezcla después se enfrió hasta 22 °C y se dejó reposar por 20 h. El compuesto 858B se precipita de la solución durante el periodo de 20 h. El producto se filtró y se enjuagó con tolueno seguido por secado in vacuo. El compuesto 858B (1.10 g) se aisló como un sólido blanco descolorido y se usó sin purificación adicional. 1H R N(DMSO-d6) : d = 4.91 (d, 1H, J = 6.2 Hz) , 3.97 (dd, 1H, J = 3.9, 6.2 Hz), 3.82 (d, 1H, J = 7.6 Hz) , 3.31 (d, 1H, J = 7.6 Hz) , 2.27 (dd, 1H, J = 10.2, 12.8 Hz), 1.77 (s, 3H) , 1.49 (m, 1H) y 1.47 ppm (s, 3H) . La estereoquímica absoluta del compuesto 858B no se ha establecido. Aunque el compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 859 Ester de metilo del ácido (3aa, 43> 5a, 6ß , 7 , 7aa) -2 - (4 -Ciano- 3 - (trifluorometil) fenil) hexahidro-6-ciano-4 , 7-dimetil-l, 3 - dioxo-4,7-epoxi - 1H- isoindol- 5 - carboxí1ico (859) Una mezcla del compuesto 792A (84 mg; 0.2 mmol) , KCN (15 mg; 0.22 mmol) y cloruro de amonio (12 mg; 0.22 mmol) en 1 mi de DMF y 0.25 mi de agua se agitó a temperatura ambiente por 18 hr. Se formó un precipitado al reposar durante la noche. Después de agregar 10 mi adicionales de agua, la suspensión se filtró y la torta filtro se lavó con agua. El secado y trituración con hexano produjo el compuesto 859 (25 mg, 28%) como a un polvo color marrón. CLAR: 95% a 1.67 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 448.29 [M+H]+. El compuesto 859 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 860 Una mezcla del compuesto 792A (44 mg; 0.1 mmol) -y anhídrido acético (0.25 mi) se calentó hasta 60°C por 2 hr. Los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se co-evaporó del heptano (3 x 2 mi) para resultar el compuesto 860 (47 mg, 99%) como un polvo blanco. CLAR: 95.8% a 1.49 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; E (ES) : m/z 480.35 [M+H]+. El compuesto 860 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 861 Se agregó hidruro de sodio, 60% en aceite mineral (120 mg; 3 mmol) en porciones durante 10 min a una solución del compuesto 792A (1.9 g; 4.5 mmol) y acetona oxima (667 mg; 9 mmol) en THF a temperatura ambiente. Después de agitación por 45 min, la mezcla de reacción se dividió entre salmuera (100 mi) y EtOAc (150 mi) . La capa orgánica se lavó con salmuera (50 mi), se secó (MgS04) y se concentró in vacuo. El residuo se cromatografió sobre una columna de 5 x 20 cm de gel de sílice, se eluye con 1000 mi de 25% EtOAc/hexano y 500 mi de 40% EtOAc/hexano. La concentración de las fracciones puras i'n vacuo produjo el compuesto 861 (1.75 g, 80%) como un polvo blanco. CLAR: 98% a 1.82 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TEA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES) : m/z 494.05 [M+H]+. El compuesto 861 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 862 Ester de metilo del ácido (3aa, ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) ] -2 - (4 -Ciano-3 - ( trifluorome il) fenil) -hexahidro- 6 -hidroxi-4 , 7 -dimetil - 1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (862) Una mezcla del compuesto 861 (1.75 g; 3.5 mmol) y polvo de zinc (6.07 g, 87.50 mA) en 19 mi de ácido fórmico se puso a reflujo por 20 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con -50 mi de EtOAc y se filtró a través de celite. El filtrado se diluyó con -200 mi de EtOAc y la capa orgánica se lavó con agua (200 mi), NaOH 0.5 (2 x 200 mi),' agua (200 mi) y salmuera (100 mi) . El secado sobre MgS04 y la concentración in vacuo dio un residuo que se cromatografió en una columna de 2.5 x 20 cm de gel de sílice, se eluye con 1000 mi de 40% EtOAc/hexano y 500 mi de 50% EtOAc/hexano . La concentración de las fracciones puras in vacuo produjo el compuesto 862 (820 g, 54%) como una espuma incolora. CLAR: 99% a 1.47 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 rara se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 438.99 [M+H]+. Compuesto 862 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ester de metilo del ácido [3aS- (3aa, ß , 5a, 6ß , 7ß, 7aa) 1 -2 - (4- Ciano-3- trifluorometil) fenil) -hexahidro-6-hidroxi- , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-lH- isoindol- 5-carboxílico ( 863 i) y éster de metilo del ácido [3aS- (3aa, 4ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) ] -2 - (4 - Ciano-3-trifluorometil) fenil) -hexahidro-6-hidroxi-4, 7- dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (863ii) El compuesto racémico 862 (0.8 g) se separó en sus enantiómeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK OD 5 x 50 cm; se eluye con 15% EtOH en hexanos (isocrática) a 50 mL/min) para dar 355 mg del compuesto de elución más rápida 863i (CLAR quiral: 8.89 min; columna CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm; se eluye con 15% EtOH en hexanos a 2 mL/min); CLAR: 99% a 2.91 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) ; EM (ES) : m/z 471.00 [M+MeOH] + y 330 mg de el compuesto de elución más lenta 863ii (CLAR quiral: 12.30 min; columna CHIRALPAK OD 4.6 x 250 mm; se eluye con 15% EtOH en hexanos a 2 mL/min) ; CLAR: 99% a 2.89 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) ; EM (ES): m/z 471.99 [M+MeOH]+. La estereoquímica absoluta de los compuestos 863i y 863ii no se ha establecido.
Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 864 Ester de metilo del ácido (3act, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) -hexahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (864) Una mezcla del compuesto 792A (210 mg; 0.5 mmol), fenilsilano (0.13 mi, 1 mmol) y Mn(acac)2 (5mg; 0.01 mmol) en 2.5 mi de isopropanol y 0.25 mi de THF se agitó 3 días a temperatura ambiente en aire abierto. Después de agregar 5% de bisulfito de sodio (5 mi) y agitación por 30 min, la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (30 mi) y agua (30 mi) . El lavado de la capa orgánica con salmuera (20 mi), seguido por el secado sobre gS04 y la concentración in vacuo, produjo un residuo que se cromatografió sobre una columna de 2.5 x 15 cm de gel de sílice, se eluye con 50%EtOAc/hexano . La concentración de las fracciones puras in vacuo, produjo el compuesto 864 (109 mg, 50%) como un polvo blanco. CLAR: 98.6% a 1.18 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES) : m/z 438.98 [M+H]+. El compuesto 864 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 865 Ester de (1-metiletilo) del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2 - (4 - Ciano-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7- dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (865C) A. éster de isopropilo del ácido 2 , 5-Dimetil-furan-3-carboxílico (865A) Se agregó isopropanol (5 mi) a una solución de cloruro de 2 , 5-dimetilfuran-3-carbonilo (1.64 g; 10.3 mmol) en 15 mi de cloruro de metileno a temperatura ambiente. Después de permitir que la mezcla de reacción reposara a temperatura ambiente por 30 minutos, los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se co-evaporó del isopropanol para resultar el compuesto 865A (1.8 g, 96%) como -un líquido color ámbar claro. 1HRMN (CDC13) : d 1.30 (d, j= 6.5 Hz, 6H) , 2.23 (s, 3H) , 2.52 (s, 3H) , 5.14 (m, 1H) , 6.21 (s, 1H) .
B. éster de (1-metiletilo) del ácido (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2 - (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) tetrahidro-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-lH-isoindol-5-carboxilico (865B) Una mezcla de 4 - (2 , 5-dihidro-2 , 5 -2 , 5-dioxo- ??-pirrol -1-il) -2-trifluorometil-benzonitrilo (851 mg; 3.2 mmol) y compuesto 865A (1.7 g; 9.4 mmol) se calentó hasta 140°C por 4 h. Después de permitir a la mezcla enfriar a temperatura ambiente y reposar 4 días, la mezcla de reacción se cromatografió sobre una columna de 5 x 25 cm de gel de sílice, que se eluye con 25% EtOAc/hexano . La concentración de las fracciones puras in vacuo produjo el compuesto 865B (869 mg, 60%) como un aceite amarillo espeso. Debido a la inestabilidad de este compuesto, se almacenó a -20C y se usó rápidamente .
C. éster de (1-metiletilo) del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3 - ( trifluorometil ) fenil) hexahidro- 5-hidroxi-4 , 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carbox£lico (865C) El compuesto 865B (224; 0.5 mmol) se convirtió al compuesto 865C usando el procedimiento descrito en el ejemplo 791B para resultar el compuesto 865C (82 mg, 35%) como un polvo blanco. CLAR: 98.4% a 1.18 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES) : m/z 466.98 [M+H]+. El compuesto 865 C representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 866 (3aa,4P, 5a,7ß, 7aa) -2- [4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) hexahidro- 5 -hidroxi -4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4,7-epoxi -N, N-dimeti1 - 1H- isoindol- 5 - carboxamida ( 866C) dimetilamida del ácido 2, 5-Dimetil-furan-3-carboxílico (866?) Una solución de cloruro de 2 , 5-dimetilfuran- 3 -carbonilo (2.19 g; 13.8 mmol) en 10 mi de THF se agregó a una solución 2M de dimetilamina en dioxano (21 mi; 42 mmol) en 80 mi de THF a temperatura ambiente. Después de agitación por 1 hr, los compuestos volátiles se separaron in vacuo y el residuo se dividió entre EtOAc (100 mi) y agua (100 mi) . La capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (100 mi) , NaOH 1N (50 mi) y salmuera (50 mi). El secado sobre MgS04 y la concentración in vacuo produjo el compuesto 866A (1.84 g, 80%) como un líquido color ámbar. 1HRM (CDC13) : d 2.23 (s, 3H) , 2.33 (s, 3H) , 3.04 (s, 6H) , 5.96 (s, 1H) .
Una mezcla de 4 - (2 , 5-dihidro- , 5-2 , 5 -dioxo- ??-pirrol - 1 -il) -2-trifluorometil -benzonitrilo (1.45 mg; 5.4 mmol) y compuesto 866A (1.82 g; 10.9 mmol) se calentó puro hasta 125°C por 1 hr . Después de dejar a la mezcla enfriar a temperatura ambiente durante la noche, la mezcla de reacción se disolvió en ~75 mi de EtOAc . El tratamiento con carbón decolorante, filtración a través de celite y la concentración in vacuo del filtrado dio un residuo que se disolvió en -20 mi de éter de etilo. La adición de ~30 mi de hexano, seguida por filtración y secado produjo el compuesto 866B (1.89 g, 81%) como un sólido color rosa claro.
C. (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7 -epoxi-N,N-dimetil-lH-isoindol- 5-carboxamida ( 866C) El compuesto 866B (433 ; 1 mmol) se convirtió al compuesto 866C usando el procedimiento descrito en el ejemplo 792B para resultar el compuesto 866C (85 mg, 18%) como un polvo blanco. CLAR: 97.9% a 1.39 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 452.00 [M+H]+. El compuesto 866C representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 867 Una gota de DMF se agregó a una solución del compuesto 792B (50 mg; 0.125 mtnol) y cloruro de oxalilo (0.03 mi; 0.36 mmol) en cloruro de metileno (1 mi) a temperatura ambiente. Después de agitación 1.5 h a temperatura ambiente, los compuestos volátiles se separaron in vacuo. El residuo se trató con 1 mi de 1 , 3 -hexafluoro-2 -propanol , seguido por 0.04 mi de piridina y 2 mg de 4 -dimetilpiridina . Después de agitación por 18 h a temperatura- ambiente la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (20 mi) y solución de bicarbonato de sodio saturado (20 mi) . La capa orgánica se lavó con solución saturada de bisulfato de potasio (20 mi) y salmuera (20 mi) . El secado sobre MgS04 y la concentración in vacuo produjo un residuo que se cromatografió sobre una columna de 2.5 x 15 cm de gel de sílice, que se eluye con 25%EtOAc/hexano . La concentración de las fracciones puras in vacuo produjo el compuesto 867 (36 mg, 52%) como un sólido blanco. CLAR: 99% a 1.96 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 558.00 [ +H] + . El compuesto 867 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 868 Ester de propilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7P,7aa) -2- (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (868B) A ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- ( trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (868A) Se agregó NaOH 1N (2.2 mi; 2.2 mmol) a una solución del compuesto 867 (238 mg; 0.54 mmol) en 5 mi de metanol a temperatura ambiente. Después de agitación por 5 h a temperatura ambiente, los compuestos volátiles se · separaron in vacuo y el residuo se trató con 2 mi de ácido trifluoroacético por 18 hr. La concentración de la mezcla de reacción in vacuo, seguida por co-evaporación del tolueno (3 x 8 mi) dio un residuo que se dividió entre EtOAc (40 mi) 'y salmuera (20 mi) . El secado sobre MgS0 y la concentración in vacuo produjo el sólido que se trituró con hexano para resultar el compuesto 868A (120 mg, 53%) como un sólido de color crema. CLAR: 93% a 1.35 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES): m/z 425.08 [M+H]+.
B. éster de propilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3 - (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-l, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico (868B) Se agregó cloruro de oxalilo (0.18 mi, 2 mmol) a una solución del compuesto 868A (135 mg; 0.32 mmol) en 4 mi de THF a temperatura ambiente. Se observó inmediatamente el burbujeo. Se agregó una gota de DMF y la mezcla de reacción se agitó 4 hrs . Después de agregar 2 mi de n-propanol y agitación por 18 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (30 mi) y agua (30 mi) . La capa orgánica se lavó con solución de bicarbonato de sodio saturado (30 mi), se secó sobre MgS04 y se concentró in vacuo. El residuo se cromatografió sobre una columna de 2.5 x 15 cm de gel de sílice, se eluye con 25% EtOAc/hexano . Las fracciones puras se concentraron in vacuo para resultar el compuesto 868B (78 mg, 52%) como un polvo blanco. CLA : 95.4% a 1.63 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 mirí, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nm) ; EM (ES) : m/z 467.10 [M+H]+. El compuesto 868B representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 869 Se agregó peróxido de hidrógeno al 30% (0.1 mi) a una solución del compuesto 748 (36 mg; 0.1 mmol) en 1 mi de AcOH a 100 C. Se agregaron cuatro alícuotas adicionales de 0.1 mi de peróxido de hidrógeno al 30% en intervalos de 30 min a la mezcla de reacción. Se agregó agua (8 mi) a la mezcla de reacción 30 minutos después de la última adición de peróxido de hidrógeno al 30%. Después de enfriar a temperatura ambiente y reposar 2 días, la suspensión resultante se filtró y la torta filtro se lavó con agua. Después de secar, el sólido se disolvió en -2 mi de acetona y la solución se aplicó a una placa de cromatografía preparativa de capa delgada en Si02. La elución con 30% acetona/cloroformo, la extracción de la banda más polar, filtración y la concentración produjeron el compuesto 869 (6 mg, 16%) como un sólido blanco descolorido. CLAR: 99% a 1.06 min (tiempo de retención) (Columna Phenominex S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 2 min, contiene 0.1% TFA, 4 mL/min, observando a 254 nra) ; EM (ES) : m/z 380.43 [M+H]+. El compuesto 869 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 870 Una mezcla racémica del compuesto 852Di y 852DÜ (150 mg, 0.38 mmol) se disolvió en THF (2 mL) bajo nitrógeno y se agregó 2-nitrofenil selenocianato (202 mg, 0.89 mmol) seguido por PBu3 (0.22 mL, 0.89 mmol) . La mezcla resultante se agitó or 20 h, concentró y se purificó por cromatografía instantánea con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos . El producto resultante se disolvió en THF (11 mL) y se trató con 2 mL de 30% H202 a 0°C. La mezcla de reacción se agitó por 10 min, después se entibió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se apagó por la adición de una solución al 5% de Na2S203 y salmuera. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo 2X con CH2C12. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, se concentraron in vacuo y se purificaron por cromatografía instantánea con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos para dar el compuesto 870 (114 mg, 80%) como un sólido amarillo. CLAR: 100% a 3.67 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 375.23 [M-H] " . El compuesto 870 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 871 (871BÍ y 871BÜ) A. ica de los compuestos 852DÍ y 852DÜ (33 mg, 0.09 mmol) en 0.5 mL acetona/0.4 mL agua, se agregó una solución al 50% en peso de NMO en agua (22 µ?, 0.11 mmol) seguido por una solución al 4% en peso de 0s04 en agua (54 µ?.,, 8.7 µp???) . La mezcla resultante se agitó por 12 h y la reacción se apagó por la adición de una solución al 5% de Na2S203. Se agregó CH2C12, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2CI2. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS0 , concentraron in vacuo y se purificaron por CCD preparativa de Si02 con 40% de acetona en CH2C12 para dar el compuesto racémico 871A (30 mg, 83%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 2.91 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 469.26 [M+OAc] . El compuesto 871A representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
B. (871BÍ y 871BÜ) El compuesto racámico 871? se separó en sus enantiómeros por CLAR quiral preparativa de fase normal (columna CHIRALPAK OJ 5 x 50 cm; se eluye con 30% MeOH/EtOH (1:1) en heptano (isocrático) a 50 mL/min) para dar el compuesto antípodo de elución más rápida 871BÍ (CLAR quiral: 7.35 min; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm; se eluye con 30% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min) y el compuesto antípodo de elución más lenta 871BÜ (CLAR quiral: 11.49 min; columna CHIRALPAK OJ 4.6 x 250 mm, se eluye con 30% MeOH/EtOH (1:1) en heptano a 1 mL/min) . La estereoquímica absoluta de los compuestos 871BÍ y 871BÜ no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 872 (3aa,43,5a,7P,7aa) -4- (Octa idro-5- [ [ [difluorometil] oxi] metil] -4 , 7 -dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi- 2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo (872) Una mezcla racémica de los compuestos 852DÍ y 852DÜ (50 mg, 0.13 mmol) fue disuelta bajo nitrógeno en 1 mL de CH3CN y se agregó Cul (2 mg, 8.9 µp???) . Esta mezcla se calentó hasta 45°C y se agregó ácido 2- (fluorosulfonil) difluoroacetico (27 mg, 0.15 mmol) por medio de una jeringa. La mezcla de reacción se agitó por 1.5 h a 45°C y después se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se apagó por la adición de agua y CH2C12. Las capas se separaron y la capa acuosa 'se extrajo con CH2C12. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04í se concentraron in vacuo y purificaron dos veces por cromatografía instantánea sobre Si02 con 0 hasta 100% de EtOAc en hexanos para resultar el compuesto 872 (10 mg, 18%) como una espuma blanca. CLAR: 92% a 3.72 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P04, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 443.22 [M-H] " . El compuesto 872 representa una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 873 (873i y 873ii) El compuesto 471DÍ (50 mg, 0.13 mmol), Cul (2 mg, 8.9 µp???) y ácido 2- (fluorosulfonil) difluoroacético (28 mg, 0.16 mmol) reaccionaron en 1 mL de CH3CN y se purificaron como se describe en el ejemplo 872. Los compuestos 873i y 873ii (15 mg, 0.03 mmol) se obtuvieron como una mezcla inseparable 6:1 como se determina por ^-RM . CLAR: 91% a 3.64 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS-A de 4.6 x 50 mm Ballistic, 10-90% metanol acuoso durante 4 min, contiene 0.2% H3P0 , 4 mL/min, observando a 220 nm) . E (ES): m/z 489.22 [M+OAc]". Los compuestos 873i y 873ii representan cada uno, una mezcla racémica de antípodos. La nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto.
Ejemplo 874 (874i y 874ii) Trifenilfosfina (0.067g, 0.254 mmol) y di-tert-butil-azodicarboxilato (0.059g, 0.254 mmol) en THF (1 mL) se agitaron a temperatura ambiente bajo N2 por 10 min, después se agregó sacarina (0.047g, 0.254 mmol). La mezcla de reacción se agitó bajo N2 por otros 15 min, seguido por la adición del compuesto 429i (0.050g, 0.127 mmol). La reacción se dejó avanzar por 24 h, punto en el cual se agregó CH2C12 (15 mL) . La capa orgánica se aisló y después se lavó consecutivamente con NaOH 1N (15 mL) , salmuera (15 mL) y se secó sobre MgS04 y se concentró in vacuo. El sólido resultante se purificó por CCD preparativa de Si02, que se eluye con 25% de acetona en CHC13, para dar el compuesto 874i (18 mg, 25%) como un sólido blanco (CLAR: 91% a 2.96 min (tiempo de retención) (columna YMC S-5 ODS-A, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ESI): m/z 559.42 [M+H] +) y compuesto 874ii (18 mg, 25%) como un sólido blanco (CLAR: 93% a 2.85 min (tiempo de retención) (columna YMC S-5 ODS-A, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ESI) : m/z 557.12 [M-H] ") . La estereoquímica absoluta de los compuestos 874i y 874ii no se ha establecido. Aunque cada compuesto representa un antípodo sencillo, la nomenclatura y estructura mostradas no reflejan la estereoquímica absoluta del compuesto .
Ejemplo 875 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5-ciclopropiloxi-4 , 7- dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- Una solución del compuesto 471DÍ (300 mg, 0.79 mmol), trifluoroacetato mercúrico (17 mg, 0.04 mmol) en tetrahidrofurano (THF, 1.5 mL) y éter de etil vinilo (3 mL) en un tubo sellado de pared gruesa, se calentó hasta 45°C por 48 h. El tubo se enfrió y la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar un aceite. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 1:4:4 EtOAc/cloruro de metileno/heptano para dar el compuesto 875A (115 mg, 36%) como un sólido blanco. CLAR : 99% a 3.80 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 407.09 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 875A se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471DÍ y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
B. [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -ciclopropiloxi - 4 , 7 -dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (875B) A una solución del compuesto 875A (100 mg, 0.25 mmol) en cloruro de metileno seco (5 mL) enfriado a 5°C, se agregó, gota a gota, una solución de dietilzinc (1.0 M en hexanos, 1.4 mL, 1.4 mmol) . La mezcla de reacción se entibió hasta temperatura ambiente, después se introdujo diyodometano (80 mL, 1.0 mmol) . Después de 3 h, la CLAR indicó que la reacción estaba 2/3 completa. Se agregaron sucesivamente dos porciones adicionales de dietilzinc y diyodometano, después la mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo, se apagó con agua, y se dividió entre una solución de HCl 1M (20 mL) y EtOAc (20 mL) . La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio, se concentró in vacuo y se purificó por cromatografía instantánea por gel de sílice que se eluye con 2:3 EtOAc/heptano para dar el compuesto 875B como un sólido blanco. CLAR : 100% a 3.72 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 421.08 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 875B se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 471Di y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 876 Una mezcla racémica de los compuestos 808 y 809 (0.057g, 0.15 mmol) se disolvió en 2 mL de CH2C12. Se agregaron trietilamina (0.018g, 0.18 mmol), una cantidad catalítica de DMAP, y cloruro de 4 - fluorobenzoilo (0.075g, 0.48 mmol) y la reacción se agitó por 6 h. La mezcla de reacción se diluyó con CH2C12 y se lavó secuencialmente con HC1 1N, 10% K2C03, y salmuera, se secaron sobre MgS04, se filtraron y concentraron in vacuo. El residuo se purificó por CCD preparativa sobre gel de sílice usando 2:1 EtOAc/hexanos como eluyente. La separación del solvente dio el compuesto 876 (0.066g, 70%) como un sólido blanco. CLAR: 100% a 3.94 min (Columna YMC S5 ODS) se eluye con 10-90% metanol acuoso conteniendo 0.2% ácido fosfórico durante un gradiente de 4 min observando a 220 nm. EM (ES): m/z 552.11 [M+H]+.
Ejemplo 877 Una solución 1.6 M de n-BuLi (54.6 mL, 87.4 mL) se agregó gota a gota a una solución de diisopropilamina (12.8 mL, 91.6 mmol) en THF (40 mL) a -20 °C. La mezcla de reacción se enfrió a -78 °C y se agregó una solución de benzofurazano (10.0 g, 83.3 mmol) en THF (34 mL) gota a gota. Después de agitación por 35 minutos, la mezcla se vació en una solución de DMF (10.3 mL, 133.2 mmol) en THF (34 mL) a -78 °C y se agregó una solución de 3:1 H20:AcOH (80 mL) . Después de agitación a temperatura ambiente por 12 h, se agregó tolueno (150 mL) y las capas se separaron. La capa orgánica se concentró hasta -30 mL y se trituró con hexanos (150 mL) . El sólido resultante se filtró y se enjuagó con hexanos. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice que se eluye con 50% EtOAc/hexanos dio el compuesto 877A (7.77 g, 63%) como un sólido color marrón. CLAR: 99% a 1.22 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 trun, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 149.08 [M+H]+.
B. (877B) Se agregó NaBH4 (2.00 g, 52.5 mmol) en porciones a una solución del compuesto 877A (7.77 g, 52.5 mmol) en MeOH (100 mL) a 0 °C. Después de 5 minutos, la mezcla se dividió entre H20 (100 mL) y CH2C12 (100 mL) . La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 X 100 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04) y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto crudo 877B (7.55 g, 96%) que se tomó sin purificación. CLAR: 99% a 1.63 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 133.05 [M+H-H20]+.
Se agregó HN03 fumante (4.25 mL, 100.58 mmol) gota a gota a una solución de compuesto crudo 877B (7.55 g, 50.29 mmol) en H2S04 (50 mL) a 0 °C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 20 minutos, se vació sobre hielo (1 L) , se entibió a temperatura ambiente y después se extrajo con EtOAc (3 X 250 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04) y concentraron bajo presión reducida. El sólido resultante se lavó con H20 y se secó con aire para dar el compuesto 877C (6.0 g) como un sólido color naranja. Se recuperaron 2.7 g adicionales del lavado acuoso por extracción con EtOAc para un rendimiento total de 8.7 g (83%). CLAR: 99% a 1.63 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 210.18 [M+H]+.
Se agregó urea (29.3 mg, 0.488 mmol) en porciones a una solución del compuesto 877C (100 mg, 0.488 mmol) en H2S0 fumante (2 mL) a 50 °C con agitación vigorosa. La mezcla después se calentó hasta 100 °C por 30 minutos, se enfrió a temperatura ambiente y se vació sobre hielo (100 mL) . La mezcla acuosa resultante se extrajo con EtOAc (3 X 50 mL) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20 (1 X 100 mL) , se secaron (MgS0 ) y concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice que se eluye con 50% EtOAc/hexanos dio el compuesto 877D (76.3 mg, 77%) como un sólido amarillo-naranj . CLAR: 96% a 1.39 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES): m/z 209.17 [M+H] + .
E. (877E) Una mezcla del compuesto 877D (1.01 mg, 4.85 mmol) y P205 (2.75 g, 9.70 mmol) en tolueno (24 mL) se puso a reflujo por 30 minutos. Se agregó H20 (50 mL) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 X 100 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04) y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto 877E (0.90 g, 98%) como un sólido café que se llevó sin purificación. CLAR: 90% a 1,78 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS , 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . (877F) Se agregó polvo de hierro (0.53 g, 9.47 mmol, malla 325) en una porción a una solución del compuesto 877E (0.90 g, 4.73 mmol) en AcOH (24 mL) a 70 °C. La reacción estuvo completa después de 30 minutos, como se calificó por CLAR. La mezcla se concentró bajo presión reducida, fue disuelta en EtOAC (50 mL) y se lavó con NaHC03 saturado (2 X 50 mL) . La capa acuosa se extrajo con EtOAc (4 X 20 mL) y las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2S04) y concentraron bajo presión reducida. La purificación por cromatografía instantánea sobre gel de sílice que se eluye con 50% EtOAc/hexanos dio el compuesto 877F (0.62 g, 82%) como un sólido color naranja obscuro. CLAR: 94% a 1.94 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 161.00 [M+H]+.
G. (877G) Se cargó un pequeño vial con el compuesto 752 (22.1 mg, 0.104 mmol) compuesto 877F (11.1 mg, 0.069 mmol) y MgS04 (21 mg, 0.173 mmol). Se agregó DME (0.07 mL) , después Et3N (0.05 mL) y se selló el vial con cinta de teflón y se calentó a 135 °C por 18 h. La purificación por CCD preparativa (Si02) que se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio el compuesto 877G (6.3 mg, 17%) como un sólido café. CLAR: 98% a 2.15 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS, 4.6 x 50 mm, se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 min conteniendo 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 337.16 [M+H-H20]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 877G se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplo 878 [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7 ,7aa) 3-4- [Octahidro- 5 -hidroxi-4 , 7 -dimetil - 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -2 -cloro- 3- metilbenzonitrilo (878) Una mezcla de 4 -amino-2 -cloro-3 -metil-benzonitrilo (54.5 mg, 0.327 mmol), compuesto 752 (104 mg, 0.491 mmol) , MgS0 (98 mg, 0.818 mmol) y diisopropiletil amina (0.28 mL, 1.64 mmol) en DME (0.33 mL) se calentó a 150 °C en un tubo sellado por 18 h. La purificación por CCD preparativa (Si02) que se eluye con 30% acetona/CHCl3 dio 53.0 mg (45%) del compuesto 878 como un sólido color marrón. CLAR: 95% a 2.63 min (tiempo de retención) (Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm se eluye con 10-90% metanol acuoso durante 4 minutos y contiene 0.2% ácido fosfórico, 4 mL/min, observando a 220 nm) . EM (ES) : m/z 361.03 [M+H]+. La estereoquímica absoluta del compuesto 878 se establece por la estereoquímica conocida del compuesto intermediario 752 y la retención de la configuración en ella. La estereoquímica absoluta es como se obtiene en la figura anterior y resulta de la nomenclatura.
Ejemplos 879 al 1020 Los compuestos adicionales de la presente invención se prepararon por procedimientos análogos a aquellos antes descritos. Los compuestos de los Ejemplos 879 al 1020 tienen la siguiente estructura (L es un enlace) : en donde la estructura, el nombre del compuesto, tiempo de retención, masa molecular, y el procedimiento empleado s"e establecen en la Tabla 18. No se determinó la configuración absoluta para los compuestos designados. Los compuestos que tienen uno o más centros ópticos, se designan por ser racémicos o quirales. Los compuestos racémicos representan una mezcla de ambos antípodos posibles. Quiral se refiere a un compuesto que representa un antípodo sencillo de un par posible. Para los compuestos que son quirales pero que no se conoce la estereoquímica absoluta, la estructura no refleja la estereoquímica absoluta. Para los compuestos que son quirales y que se conoce la estereoquímica absoluta con referencia al material de partida, entonces la estructura refleja la estereoquímica absoluta del compuesto. Las técnicas de cromatografía usadas para determinar los tiempos de retención de los compuestos de la Tabla 18 son como sigue: CLEM = Columna YMC S5 ODS, 4.6 X 50 mm que se eluye con 10-90% eOH/H20 durante 4 minutos y contiene 0.1% TFA; 4 mL/min, observando a 220 nm. CLEM* = Columna YMC S5 ODS , 4.6 X 50 mm que se eluye con 10-90% eOH/H20 durante 2 minutos y contiene 0.1% TFA; 4 mL/min, observando a 220 nm. CL* = columna Hypersil C18 BDS , 250 x 4.6 mm, 5 m, una longitud de onda de detección de 254 nm, y una relación de flujo de 1 mL/min. Un gradiente lineal de 90% de 0.1% ácido trifluoroacético en agua, 10% acetonitrilo (comienzo) to 100% acetonitrilo durante 15 min, después 100% acetonitrilo por 5 min se usó. CL = Columna YMC S5 ODS 4.6 x 50 mm eluyendo con 10-90% de eOH/H20 durante 4 minutos conteniendo ácido fosfórico al 0.2%, 4 mL/min, observado a 220 nm. La masa molecular de los compuestos enlistados en la Tabla 18 se determinaron por EM(ES) por la fórmula m/z .
Tabla 18 Ej . Estructura Compuesto Tiempo de Proc . No. Nombre/Comentar retención Del ios Min . /Masa Ej . molecular 908 Quiral , 2.10 CLEM 761 estereoquímica [M+H] += absoluta como 345.14 se muestra 909 Quiral , 2.10 CLEM 754 estereoquímica [M+H ] += absoluta como 345.14 se muestra [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7a Quiral a) ]-2-(6- Benzotiazolil ) h exahidro-5- idroxi-4 , 7- dimetil-4, 7- epoxi-lH- isoindol- 1, 3 (2H) -diona Estructura Compuesto Tiempo de Proc.
No. Nombre/Comen'bar retención Del ios Min . /Masa Ej. molecular 910 Quiral , 3.90 CLEM 756 estereoquímica [M+H] += Q 0 "ik Jf absoluta como 514.36 se muestra 911 Quiral , 2.15 CLEM 761 Ha o '°SN estereoquímica [M+H] += absoluta como 337.16 se muestra 912 Quiral, 2.55 CLEM 761 estereoquímica [M+H] += absoluta como se 364.18 ?Ha o N'° N muestra [3aR- (33 ,4ß,5ß,7ß,73 ) ]- 2-(7-Cloro-2,l,3- benzoxadiazol-4- il) hexahidro-5- hidroxi- , 7-dimetil- 4,7-epoxi-lH- isoindol-1, 3 (2H) -diona Ej__ Estructura Ccrrrpuesto Tiempo de Proc.
No. Ncxnbre/Cciiksntarios retención Del Min. Masa Ü÷ molecular 913 Quiral, estereoquímica 2.933 763E, absoluta no se conoce CLEM 799 [3aR- [M+H]+= (3aa,4P,5a,7p,7aa) ]-2- 382.26 (Octahidro-5-hidroxi- 4, 7-dimetil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2- il) -3- (trifluorometil) - 2-piridincarbonitrilo 914 Quiral, estereoquímica 2.73 CLEM 753F, absoluta no se conoce [M+H] += 799 [3aR- 439.30 ('3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ]-4- (Octahidro-5-hidroxi- 4, 7-dimetil-l, 3-dioxo- 4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2- il) -2-yodobenzonitrilo Ej . Estructura Conpuesto Tiempo de Proc. No. Nombre/Comentarios retención Del Min. /Masa E¿. molecular 938 Quiral, estereoquímica 14.842 812 absoluta no se conoce CL* (3aa,4 ,5a,7p,7aa)-4- [M+H] += (0ctahidro-5- 416 [ [propiloxicarbonil] amino] -4, 7-dimetil-l, 3-dioxo- 4, 7-epoxi-2H-isoindol-2- il)-2- (trifluorometil) benzonitri lo 939 Quiral, estereoquímica 14.852 812 absoluta no se conoce CL* (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- [M+H] += (Octahidro-5- 478 [ [ [ciclopropilmetiloxi] carbo nil] amino] -4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol- 2-il)-2- (trifluorcmetil)benzonitrilo Ej . Estructura Compuesto Tiempo de Proc.
No . Ncnibre/Comentarios retención Del Min./Masa E¿. molecular 940 Quiral, estereoquímica 13.241 812 absoluta no se conoce CL* (3aoc, 4ß,5a,7ß,7ßa)-4- [M+H+= (Octahidro-5- 438 [ [metoxicarbonil] amino] - 4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitri lo 941 Quiral, estereoquímica 14.671 855 absoluta no se conoce CL* [M+H]+= 395.3 942 Quiral, estereoquímica 2.63 CLEM 761 absoluta como se muestra [M+H] += [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- 382.95 (Octahidro-5-hidroxi-4, 7- dimetil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) - 2 , 3-diclorobenzonitrilo 1 Estructura Ccmpuesto Tiempo de Proc.
No. Nanbre/Comentarios retención Del Min./Masa E¿^ molecular 952 Quiral, estereoquímica 2.497 753F, absoluta como se muestra CLEM 798 [3aR-(3aa, 4ß, 6ot,7p,7aa) ]- [M+H]+= H0 ÉH, 4- (Octahidro-6-fluoro-5, 5- 471.07 dihidroxi-4, 7-dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- yodobenzonitrilo 953 Quiral, estereoquímica 2.497 absoluta como se muestra CLEM [M- [3aS- (3aa, 4ß, 6a, 7ß, 7aa) ] - 4- (Octahidro-6-fluoro-5, 5- 471.07 dihidroxi-4, -dimetil-l, 3- dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2-il) -2- yodobenzonitrilo Estructura Ccxrpuesto Tiempo de Proc.
No. Ncrnbre/Comentarios retención Del Min. /Masa Ej. molecular 954 Quiral, estereoquímica 17.119** A. absoluta no se conoce EM 757A [M+H] += 435 955 Quiral, estereoquímica 14.536 812 absoluta no se conoce CL* [3aR-(3aa,4p,5a,7p,7act) ]- [M+H]+= 4- (Octahidro-5- 452 [ [etoxicarbonil] artiino] - 4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitri lo 56 Quiral, estereoquímica 18.043 830 absoluta no se conoce CL* [M+H] += 436.2 Ej . Estructura Ccnpuesto Tiempo de Proc.
No. Ncnnbre/Ccroentarios retención Del in./Masa IL molecular 957 Quiral, estereoquímica 13.764 830 absoluta no se conoce CL* [M+H] += 506.2 958 Quiral, estereoquímica 3.243 855 absoluta no se conoce CLEM S¾ o [3aR-(3act,4p,5a, 7p,7aoc) ]- [M+H] += 4- (Octahidro-5-metoxi- , 7- 395.07 dimetil-1, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitri lo 959 Quiral, estereoquímica 4.15 CLEM 757 absoluta como se muestra [M+H] += 455.00 Ej . Estructura Conpuesto Tiempo de Proc.
No. Ncmbre/Ccrnen arios retención Del Min./Masa SL molecular 960 Quiral, estereoquímica 3.933 851 absoluta como se muestra CLEM (3aa,4p,5a,7p,7aa) ]-4- [M+H]+= (Octahidro-5- [ [ [2-metil-5- 543.00 (trifluorometil) -2H- pirazol-3-il] oxijmetil] - 4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitri lo 961 Quiral, estereoquímica 4.46 CLEM 851 absoluta como se muestra [M+H] += (3aoc,4p,5a,7p,7aa)-4- 505.92 (Octahidro-5- [ [ [5-cloro-2- piridinil] oxijmetil] -4,7- dimetil-1, 3-dioxo- , 7- epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitri lo Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la practica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. arilalquilo. substituido; R2 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido,- R3 y R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, hidroxilamina , hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR^'R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; R4 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido,, cicloalquenilo

Claims (26)

1009 Reivindicaciones Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en klas siguientes reivindicaciones :
1. Un compuesto de la siguiente fórmula: (la) caracterizado porque los símbolos tienen los siguientes significados y son, cada que se presentan, seleccionados independientemente : G es un grupo arilo o heterociclo donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones; Zi es O, S, NH, o NR6; Z2 es O, S, NH, O NR6; Ai es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02, NH, NR7, CR7R7' , R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHNR6, NR5NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido,^ cicloalquenilo 1010 o cicloaLquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7 )n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; y W es CR7CR7 -CR7R7' , CR7CR7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2-C=CH2, CR7R7-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser 0, S, S=0, S02, NH, NR7, 0P=00R2, OP=ONHR2, 0S02, NHNH, NHNR6, NR6NH, o N=N; cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes R7 y R7' cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo . o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, 1011 heterociclo. (por ejemplo heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo heteroarilo) , halo, CN, R10C=0, R4C=0, R5R6NC=0, H0CR7R7', nitro, R^, RxO, NH2 , C=0SRx, SO2R1 o NR4R5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo heteroarilo substituido), halo, CN, R1OC=0, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7' , nitro, R1OCH2 , R10, NH2, C=0SR1, SO2R1, o NR4R5; L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NR5, NH(CR7R7')n, o NR5 (CR7R7' ) n, donde n = 0-3 ; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido,, arilalquilo o o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R^XD, ^00=0, R1NHC=0, SO2OR1, o SOaN^R1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0, SO2R1, SO2OR1, o SOsNR^1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido,, arilalquilo o arilalquilo. substituido, CN, OH, OR1, R^O, R1NHC=0 , SO2R1 , SO2OR1 , o SOsNR^1' ; R7 y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina, hidroxilamida, amino, NHR4, NR2R5, ÑOR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, H0C=0 , R1C=0 , R1(C=0) 0 , R10C=0 , SO2R1 , SO2OR1 , o S02NR1R1', o, en donde Ai o A2 contiene un grupo R7 y W contiene un grupo R7, los grupos R7 de Ax o A2 y forman juntos un anillo heterocíclico ; R8 y R8' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, OR1, alquiltio o alquiltío substituido, C=OSR1, SO2R1, POsR^1', o S02NR1R1'; y R9 y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, R1C=0, R^OC^O, R1NHC=0, SO2R1, SOsOR1, o S02 R1R1' ; con la condición de que: (1) cuando Y' es -O-, Qi y Q2 son hidrógeno, Zx y Z2 son O, W es -CH2-CH2-, y x y A2 son CH, entonces G-L no es fenilo, fenilo monosubstituido o fenilo que está substituido con dos o más de los siguientes grupos: metoxi, halo, N02, metilo, C¾-S-, OH, C02H, trifluorometilo, -C(0)-C6H5, NH2, 4-7-epoxi, hexahidro- lH-isoindol-l , 3 (2H) diona, o -C(0)-CH3; (2) cuando _?' es -O-, y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es CH2-CH2, y uno de Ai y A2 es CH y el otro es CR7, entonces G-L no es fenilo insubstituido; (3) cuando Y' es -O-, Qx y Q2 son hidrógeno, Zx y Z2 son O, W es CH2-CH2/ y uno de Ai y A2 es CH y el otro es C-CH3/ entonces G-L no es fenilo substituido con cloro y/o metilo ; (4) cuando Y' es -O- o -S-, Qi y Q2 son hidrógeno, Zx y Z2 son 0, W es CH2-CH2, y uno de Ax y A2 es CH y el otro es CH o C-alquilo, entonces G-L no es piperazin-alquilo N-substituido o imidazolidin-alquilo N-substituido; (5) cuando Y' es -0-; Qi y Q2 son hidrógeno, Zx y Z2 son O, W es CH2-CH2, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es oxazol o triazol; (6) cuando Y' es -0- ; Qi y Q2 son hidrógeno o metilo, i y Z2 son O, W es CH2-CH2, y Ax y A son CH o C-CH3f entonces G-L no es tiazol o tiazol substituido; (7) cuando Y' contiene un grupo J' seleccionado de S, S=0, S02, NH, NR7, R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHR6 , NR6NH o N=N, W es CR7R7'-CR7R7' , y Zi y Z2 son O, entonces G-L no es fenilo insubstituido; (8) cuando Y es NR7, W es fenilo insubstituido o substituido, y Qi y Q2 son hidrógeno, entonces Z1 y Z2 no son O; (9) cuando .Y' es -O-, Qi y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es dihidroisoxazol que porta un grupo fenilo opcionalmente substituido, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es fenilo insubstituido o diclorofenilo; (10) cuando Y' es 0, Qi y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es óxido de etileno, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es raetilfenilo o clorofenilo ; (11) cuando Y' es NR7—CR7R7' , W es CR8=CR8' , Qi y Q2 son hidrógeno, Ax y A2 son CH, C-CH3, C-CH2-C6H5 o C-CH2-CH3, y Zx y Z2 son 0, entonces G-L no es fenilo insubstituido, fenilo monosubstituido o metilpiridinilo ; (12) cuando Y' es CR7R7'—C=0, W es NR9—CR7R7' , Qi y Q2 son hidrógeno, Ai y A2 son CH, y Zx y Z2 son O, entonces G-L no es fenilo insubstituido; (13) cuando Y' es CHR7'—NR7 donde R7' es fenilo insubstituido, metoxi o etoxi y R7 es fenilo insubstituido, metilo o -C(0)-C6H5, W es dimetoxifenileno o fenileno insubstituido, Zx y Z2 son O, Qi y Q2 son hidrógeno, x y A2 son CH, C-CN, C-C(0)-C6H5, o -C (0) -dimetoxifenilo, entonces G-L no es fenilo insubstituido ; (14) el compuesto de la fórmula la no es 6 , 10 -epitio-4H-tieno- [3' , 4 ' : 5, 6] ciclooct [1, 2-f] isoindol-7, 9 (5H, 8H) -diona, 8- (3, 5-diclorofenil) -6, 6a, 9a, 10, 11, 12, -hexahidro- 1,3,6, 10-tetrametil-2 ,2, 13 -trióxido, (6R, 6aR, 9aS, IOS) ; (15) cuando Y' es O, W es -CH2-CH2-, Qi y Q2 son metilo, ?? y Z2 son O, y Ax y A2 son CH, entonces G-L no es fenilo insubstituido, fenilo substituido con metoxi, fenil-alquilo, o morfolin-alquilo, ni es el compuesto conectado a sí mismo a través de un grupo L que es alquileno para formar un compuesto bis; (16) cuando Y' es -O-, Q1 y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es CR7R7'—CR7R7', y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es un grupo fenilo insubstituido; y (17) cuando Y' es -O-, Qi y Q2 son hidrógeno, Zi y Z2 son O, W es ciclopentilo, ciclohexilo, 3-fenil-2- isoxazolina o CR7R7'—CR7R7' donde R7 y R7' son cada uno independientemente definidos como Cl , Br, H y 4- butirolactona y R7 y R7' no son todos simultáneamente H, y Ai y A2 son CH, entonces G-L no es un anillo naftilo insubstituido o un anillo fenilo monosubstituido, donde el substituyente es metoxi, Br, Cl , N02, metilo, etilo, CH2-fenilo, S-fenilo, u O-fenilo; o una sal, solvato, profármaco o estereisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque G es un grupo arilo o heterociclo donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones; Zx es 0, S, NH, o NR6; Z2 es 0, S, NH, o NR6 ; Ai es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y' es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02í NH, NR7, CR7R7' , R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02 , NHNH, NHNR6, NRSNH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y' no es un enlace; W es CR7CR7'—CR7R7', CR7R7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2-C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR7, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02, NHNH, NHNR6, NR6NH, o N=N; o cuando es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes R7 y R7 cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R10C=0, R4C=0, R5R6NC=0, HOCRR7', nitro, R^CHs, R^, NH2, o NRR5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R10C=0, R4C=0, R5R6NC=0, H0CR7R7' , nitro, R10CH2, R^, NH2 , o NR4R5 ; L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NR5 o NR5 (CRR7' ) n, donde n = 0- 3; R1 y R1' son cada uno independientemente ?,· alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterocicl substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido,, arilalquilo o arilalquilo, substituido, halo, CN, hidroxilamina, hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR1R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; R4 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0, o SOzNR^1' ; R5 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0, SO2R1, o S02NR1R1'; s es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido,, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, ^0=0 , R^IK^O, SO2R1 , o SOaNRV; R7 y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina, hidrox lamida, amino, NHR4, NR2R5, N0R1 , tiol, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0 , R1(C=0) 0 , S02 1 , o S02NR1R1' ; R8 y R8' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN , OR1 , amino, NHR4 , NR RB , OR1 , alquiltio o alquiltio substituido, C=OSR1 , SO2R1 , POs^R1', o S02NR1R1'; Rs ' son cada uno independientemente H , alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido; cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN , OH , OR1 , R1C=0, R1OC=0, R^HC D , o SOiNR^-R1 ' ; as condiciones (1) hasta (17) de tal fórmula la donde (i) cuando Y' es - O- y W es CR7R7 ' — CR7R7 ' , Ai y A2 no son simultáneamente CH ; y (ii) cuando L s un enlace, G no es un grupo fenilo insubstituido; o una sal, solvato, profármaco o- estereisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.
3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque G es un grupo arilo o heterociclo donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones, Z2 es O; Ai es CR7; A2 es CR7; Y' es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u O, S, S=0, S02, NH, NR7, CR7R7' , R2P=0, R2P=S, R2OP=0, R2NHP=0, OP=O0R2, OP=ONHR2, OS02, NHNH, NHNR6, NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y' no es un enlace; W es CR7R7'—CR7R7', CR7R7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2-C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9— R9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9— R9', o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J'. deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR , OP=OOR2, OP=ONHR2, OS02, NHNH, HNR6 , NR6NH , O N=N; O cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes R7 y R7' cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7', nitro, R^ CH^ R^, NH2 , o NR4R5 ; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido-, halo, CN, R4C=0, R5R6NC=0, HOCRV, nitro, ^00?2, ^?, NH2 , o NR4R5; L es un enlace; y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o eterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, ¦ arilalquilo o arilalquilo substituido; es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; y R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR1!?2 , alquiltio o alquiltio substituido; H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, ^0=0, R^HC^O, o S02NR1R1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0, SO2R1, o S02NR1R1' ; es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN , OH , OR1 , RxC=0 , R1NHC=0 , S02R1 , O S02NR1R1 ' ; y R7 ' son cada uno independientemente H , alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN , OR4 , nitro, amino, NHR4 , NR2R5 , alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0 , R1 ( C=0 ) 0 , R^HC^ , SO2R1 , R1R1 ' NC=0 , o SOaNRV ; , y R8 ' son cada uno independientemente ?,· alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0, R1NHC=0, R1R1'NC=0, SO2R1, o S02NR1R1'; y R9 y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, R1C=0, R1NHC=0/ o SOz R^1'; con las condiciones (1) hasta (17) de tal fórmula la donde (i) cuando Y' es -O- y W es CR7R7'—CR7R7' , Ai y A2 no son V simultáneamente CH; y (ii) cuando L és un enlace, G no es un grupo fenilo insubstituido; o una sal, solvato, profármaco o - estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo.
4. Un compuesto, caracterizado porque es seleccionado del grupo que consiste de: (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- [Octahidro- 5 -hidroxi- 4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -1-isoquinolincarbonitrilo (748D) ; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aot) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol -2 - il ) -2- ( trifluorometil ) benzonitrilo (471DÍ) o [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo (471DÜ) ; [3aS- (33a,4ß, 5ß, 7ß, 7acc) ] - 5- [7 - [2 [ [3 -Cloro- 5- ( trifluorometil) -2 -piridinil] oxi] etil] octahidro-5-hidroxi-4-metil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 -il] -8-quinolincarbonitrilo (744) ; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ]-5-[7-[2-(3-Fluorofenoxi) etil] octahidro- 5 -hidroxi -4 -metil - 1 , 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (745) ; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] - 5- [7- [2- (1, 3-Benzodioxol-5-iloxi) etil] octahidro-5 -hidroxi -4—metil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo; [3aS- (33a,4ß,5ß,7ß,73a)] -5- [7- [2- (4-Fluorofenoxi) etil] octahidro- 5 -hidroxi -4 -metil-1 , 3 -dioxo-4 , 7- epoxi-2H-isoindol-2-il] -8 -quinolincarbonitrilo ,· [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- [7- [2- ( 1 , 2 -Bencisoxazol - 3 - iloxi) etil] octahidro-5-hidroxi-4 -metil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo; [3aS- (3aoc,4p, 5ß, 7ß, 7a ) ] - 5- [7- [2 - [ (5-cloro-l, 2-bencisoxazol-3-il) oxi] etil] octahidro-5 -hidroxi-4 -metil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (737) ; [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7acc) ] -5- [4- [2- [ (5-cloro-2-piridinil) oxi] etil] octahidro-7-metil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (577) ; [3aS- (3acc, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [Octahidro-4 -metil -1 , 3-dioxo-7- [2 - [ [6- (trifluorometil ) -4 -pirimidinil ] oxi] etil] -4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (579) ; [3aS- (3aa,4p, 7ß, 7aa) ] -5- [4- [2- [ (5 - cloro- 1, 2-bencisoxazol-3-il) oxi] etil] octahidro-7-metil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il] -8-quinolincarbonitrilo (581) ; [3aS- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [Octahidro-4 -metil -7- [2- (5-metil -2H- 1 ,2,3 -benzotriazol -2 - il ) etil] - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (589); [3aS- (3aP, 4ß, 5ß, 7ß, 7a ) ] -5- [Octahidro-5-hidroxi-4 -metil -1, 3-dioxo-7- [2- [ [6- (trifluorometil ) -4 -pirimidinil ] oxi] etil] -4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8-quinolincarbonitrilo (689) ; [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- [7- [2- [ (5-cloro-2r piridinil) oxi] etil] octahidro-5 -hidroxi-4 -metil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il] -8 -quinolincarbonitrilo (487) ; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 - il ) -2 -yodobenzonitrilo (489GÍ) ; [3aS- (3a , 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 -hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il ) -2-yodobenzonit lo (489GÜ) ; (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -1, 2-bencencarbonitrilo (313) ; (33a,4ß, 7ß, 7aa) -2-Metoxi-4- (Octahidro-4, 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il ) benzonitrilo (328) ; (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -5- (Octahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -8-quinolincarbonitrilo (345) ; (3aa, 4ß, 7ß, 7a ) -2- (Metiltio) -4- (octahidro-4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il) benzonitrilo (224) ; (33a, ß, 7ß, 7aa) -2- (6-Benzotiazolil) hexahidro-4, 7-dimetil-4 , 7 -epoxi -1H- isoindol -1, 3 (2H) -diona (368) ; (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -7- [Octahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H- isoindol -2 -il] -2,1,3 -benzoxadiazol -4 -carbonitrilo (423) ; y (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -2- (2,1, 3 -Benzoxadiazol - 5-il ) hexahidro-4 , 7-dimetil-4, 7-epoxi - lH-isoindol - 1 , 3 (2H) -diona (480B) ; o una sal, solvato o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.
5. Un compuesto caracterizado porque es seleccionado del grupo que consiste de: [3aS- (3aa,4p, 6ß, 7ß, 7aoc) ] -4- (Octahidro-6-hidroxi-4-metil- 1 , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR(3aa,4P,6 ,7P,7a ) ] -4- (Octahidro-6-hidroxi-4-metil- 1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aoc, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi- 4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol -2 -il ) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -3metil-2-piridincarbonitrilo; [3as- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (2 , 1 , 3-Benzoxadiazol-5-il ) hexahidro- 5-hidroxi -4 , 7-dimetil -4 , 7-epoxi-lH- isoindol-1,3 (2H) -diona; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -3 , 4 -dimetil-2 -piridincarbonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7p,'7aa) ] -5- (Octahidro-5 -hidroxi-4 , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -3 , 4 -dimetil-2 -piridincarbonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] - 2- (6-Benzotiazolil) hexahidro-5 hidroxi-4 , 7-dimetil- , 7 -epoxi - lH-isoindol - 1 , 3 (2H) -diona; [3aR- (3aa,4p, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (7-Cloro-2, 1 , 3 -benzoxadiazol 4-il) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7 -epoxi-??- isoindol -1, 3 (2H) -diona ; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro- 5 -hidroxi -4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il ) -3 - (trifluorometil ) -2-piridincarbonitrilo ; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -hidroxi- 4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 -il ) -2-yodobenzonitrilo ; éster de metilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) -2- (4 Ciano-3 - ( trifluorometil ) fenil ) hexahidro-6-ciano-4 , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi - 1H- isoindol -5 -carboxílico; (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7, 8-trimetil-l, 3-dioxo- 4 , 7-imino-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 , 6-dicloro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa,4fi, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dicloro- , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il ) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-4 , 7^-dimetil-l , 3 , 5-trioxo- , 7 -epoxi -2H- isoindol -2 - il ) - 2 -yodobenzonitrilo-; (3aa, ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [difluorometil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [fenilmetoxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi 2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [propiloxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (33a,4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [ciclopropilmetiloxi] carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo 4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5 - [ [metoxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (33a,4ß,5ß,7ß,73a) ] -4- (0ctahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2, 3-diclorobenzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 4aa, 5aa, 6ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-4a-hidroxi-4, 6-dimetil-l,3-dioxo-dimetil-l, 3-dioxo-4, 6-epoxicicloprop [f] isoindol-2 (1H) -il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3-(trifluorometil ) fenil) hexahidro-5 -hidroxi-4 , 7 -dimetil -1,3-dioxo-4 , 7-epoxi -N, -dimetil-lH-isoindol -5-carboxamida ; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-cloro-6-hidroxi -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -2 - (trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa,4P,5 ,6p,7 ,7aa) ] -4- (Octahidro-5-cloro-6-hidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; (3aoc, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [6- (trifluorometil ) -4 -pirimidinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; (3acc, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5 - [ [ [5-cloro-2-piridinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- t [ [fenilamino] carbonil] amino] -4 , -dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (1-metiletiloxi) carbonil] amino] -4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epóxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [5-fluoro-4-pirimidinil] oxi] metil] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 -[ [etiloxicarbonil] amino]' -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; éster de 4 -piridinilmetilo del ácido [3aR- (3ßa,4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil ) fenil) -hexahidro-4 , 7-dimetil - 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-lH- isoindol -5-carboxílico ; [3aR- (3aa, ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [4-piridinilmetoxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; 3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [2-metil-5- (trifluorometil ) -2H-pirazol-3-il] oxi] metil] -5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; éster de metilo del ácido (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3 - (trifluorometil ) fenil ) hexahidro-4 , 7 -dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- 1H- isoindol - 5 -carboxílico ; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 -ciclopropilmetoxi-4 , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5 - [ [ ( (fenilmetil ) amino) carbonil] oxi] -4 , 7 -dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; y [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-ciclopropiloxi-4 , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H- isoindol -2 - il ) -2-(trifluorometil ) benzonitrilo; o una sal, solvato o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.
6. Un compuesto caracterizado porque es seleccionado del grupo que consiste de: [3aR- (3aa,4P, 5ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 ,7-dimetil-1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il ) -3- (trifluorometil ) -2-piridincarbonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7a ) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3- (trifluorometil ) -2-piridincarbonitrilo; [3aR- (33a, ß, 5ß, 7ß, 7a ) ] -2- (4-Cloro-3-yodofenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 - il ) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (33 ,4ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 , 5-trioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol-2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3a , 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 -hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il ) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-hidroxi-4-metil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -2 - (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aR- (3aa,4p, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4 -Cloro-3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-1, 3 (2H) -diona; [3aS- (3aa,4p, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il) -2 -yodobenzonitrilo ; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7a ) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -2-yodobenzonitrilo ; [3aS- (33a,4ß,5ß, 7ß,73a) ] -2- (4-Cloro-3- (trifluorometil) piridinil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-l, 3 (2H) -diona; [3aR- (3a , 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4 , 7 -epoxi-2H-isoindol-2 -il) -3-metil-2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-metoxi-4 , 7-dimetil-1, 3 -dioxo- , 7-epoxi -2H-isoindol-2 - il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-1, 3-dioxo-4 , 7-ep'oxi-2H-isoindol-2-il) -3-(trifluorometil ) -2 -piridincarbonitrilo,- [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-metoxi-4 , 7- dimetil-1, 3 -dioxo-4, 7 -epoxi-2H- isoindol -2 -il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo ; [3aS- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-fluoro-5 , 5-dihidroxi-4 , 7-dimetil- 1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H- isoindol -2 -il ) - 2 - (trifluorometil ) benzonitrilo ; [3aR- (3aa, 4ß, 7ß, 7aa) ] -5- (Octahidro-4 , 7-dimetil -1 , 3 , 5-trioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -3- (trifluorometil ) -2-piridincarbonitrilo; [3aS- (3aa, 4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4 -Cloro-2 -metil -3 - (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol -1 , 3 (2H) -diona; [3aR- (33a,4ß, 5ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4 -Cloro-2 -metil -3- (trifluorometil) fenil) hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil-4 , 7-epoxi-lH-isoindol -1 , 3 (2H) -diona ; (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7acc) -4- (Octahidro-6-fluoro-5, 5-dihidroxi-4, 7-dimetil-1, 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H- isoindol-2 -il ) -2-yodobenzonitrilo; éster de metilo del ácido (3a , 4ß, 5a, 7ß, 7aoc) -2- (4-Ciano- 3 - (trifluorometil) fenil) -hexahidro-5-hidroxi-4 , 7-dimetil - 1,3-dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carbox£lico; [3aS- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-fluoro-5, 5-dihidroxi-4, 7 -dimetil- 1 ,'3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2 -yodobenzonitrilo ; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-etilsulfonamido-4 , 7 -dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa,4p, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (4-fluorofenilamino) carbonil] oxi] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa,4p, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (1-metiletilamino) carbonil] oxi] -4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aS- (3aa,4p,5a,7p,7aa) ] -4- (Octahidro-5- [ [ (1-metiletoxi) carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa,4P, 6ß, 7P, 7aa) ] -4- (Octahidro- 6-fluoro-5, 5-dihidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol -2 - il) -2-yodobenzonitrilo ; [3aR- (3aa, 4P, 5a, 7p, 7aa) ] -2- (4-Ciano-3-(trifluorometil) fenil) hexahidro-4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-N-metil -N-fenil-1H- isoindol -5-carboxamida ; [3R- (3aa,4P, 5 , 7 , 7aa) ] -4- (Octahidro-5-hidroxi-4, 7-dimetil-l,3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2-cloro-3-metilbenzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7 , 7aa) ] -4- (Octahidro-5-[ [etoxicarbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa,4p, 5a, 7p, 7aa) -4- (Octahidro-5- [ [ [2-metil-5-(trifluorometil) -2H-pirazol-3-il]oxi]metil] -4, 7-dimetil-l,3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil)benzonitrilo; éster de metilo del ácido [3aS- (3aoc, 4ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4 -Ciano-3 - (trifluorometil ) fenil ) -hexahidro-6-hidroxi-4 , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi- lH-isoindol-5-carboxílico; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5 - [ [ [6- (trifluorometil ) - 4-pirimidinil] oxi] metil] - , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il ) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 -metoxi-4 , 7-dimetil -1 , 3 -dioxo-4 , 7-epoxi-2H-isoindol -2 -il) _-2 - (trifluorometil ) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -2- (4-Ciano-3- (trifluorometil ) fenil) -hexahidro-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi-lH-isoindol-5-carbonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5ß, 6a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5 , 6-dihidroxi-4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -3-metil-2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-[ [ [ (ciclopropilmetil) amino] carbonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2-(trifluorometil) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-5-[ [ (dimetilamino) sulfonil] amino] -4, 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2 -il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) -4- (Octahidro-5-benzenesulfonamido- 4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; [3aR- (3aa, 4ß, 6ß, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro-6-fluoro-5 , 5-dihidroxi-4 , 7-dimetil-l , 3-dioxo-4 , 7-epoxi -2H-isoindol -2 - il ) -2- (trifluorometil ) benzonitrilo; éster de metilo del ácido [3aR- (3a , 4ß, 5a, 6ß, 7ß, 7aa) ] -2- (4 -Ciano-3 - (trifluorometil) fenil ) -hexahidro-6-hidroxi -4 , 7-dimetil-l, 3-dioxo-4, 7-epoxi-lH-isoindol-5-carboxílico; y [3aR- (3aa, 4ß, 5a, 7ß, 7aa) ] -4- (Octahidro- 5 - [ [ (dimetilamino) sulfonil] amino] -4 , 7-dimetil-l , 3 -dioxo- , 7-epoxi-2H-isoindol-2-il) -2- (trifluorometil) benzonitrilo; o una sal, solvato, profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo. 7. Una composición farmacéutica capaz de tratar una condición asociada a NHR, caracterizada porque comprende un compuesto de la siguiente fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable:
(I) en donde los símbolos tienen los siguientes significados y son, cada que se . resentan, seleccionados independientemente: G es un grupo arilo o heterociclo donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones; Z1 es O, S, NH, o NR6 ; Z2 es 0, S, NH, o NR6; Ai es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y es J-J'-J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02, NH, NR7, C=0, 0C=0, NR1C=0, CR7R7' , C=CR8R8', R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2 , 0P=0NHR2, 0P=0R2, 0S02( C=NR7, NHNH, NHNR6 , NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; W es CR7CR7'—CR7R7', CR8=CR8' , CR7R7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2-C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , S-CR7R7', SO-CR7R7' , S02-CR7R7' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, 'en donde, cuando W no es NR —CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9— R9' , S-CR7R7', SO-CR7R7', S02-CR7R7', o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR7, OC=0, NR1C=0/ OP=OOR2, OP=ONHR2, OS02, NHNH, NHNR6, NR6NH, O N=N; O cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, ^00=0, R4C=0, R5R6NC=0, H0CR7R7' , nitro, R^CHs, Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo. o heterociclo substituido, halo, CN , R10C=O , R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7 ' , nitro, R^CHs , R^ , NH2 , C=OSR1 , SO2R1 o NR4R5 ; L es un enlace, ( CR7R7')n, NH, NR5 , NH ( CR7R7')n o NR5 ( CR R7 ' ) n, donde n = 0 - 3 ; R1 y R1 ' son cada uno independientemente H , alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R2 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3 y R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido,, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, hidroxilamina, hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR-'-R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; s H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R^O, R1OC=0, R1NHC=0, SOaOR1, o S02 R1R1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, ^???=0, SO2R1, SO2OR1, o S02NR1R1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, R1C=0, R1NHC=0, R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido,, arilalquilo o arilalquilo. substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina, hidroxilamida, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, OR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, H0C=0, R^O, R1(C=0)0, R1OC=0, R1NHC=0, NH2C=0, SO2R1, SOR1, PO^R1' , R1R1'NC=0, C=OSR1, SO2R1, SO2OR1, o S02NR1R1' , o en donde Ai, A2 contiene un grupo R7 y W contiene un grupo R7, los grupos R7 de Ai o A2 y W forman juntos un anillo heterociclico ; R8 y R8' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, ÑOR1, alquiltio o alquiltio substituido, SÜ2R1, POaR^1', o S02NR1R1' ; y R9 y R9 son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido; cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, 1^0=0, R10C=0, ^NHC^, SO2R1, SOaOR1© SOzNR^1' ;
8. Una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque además comprende otro agente anti-cáncer.
9. Una composición farmacéutica capaz de tratar una condición asociada con NHR, caracterizada porque comprende al menos un compuesto como se define en la reivindicación 2 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable.
10. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada porque comprende además otro agente anti-cáncer.
11. Una composición farmacéutica capaz de tratar una condición asociada con NHR, caracterizada porque comprende al menos un compuesto como se define en la reivindicación 3 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador farmacéuticamente aceptable.
12. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque comprejide además otro agente anti-cáncer.
13. Un método de modulación de la función del receptor de hormona nuclear, caracterizada porque comprende administrar a una especie de mamífero que necesite del mismo una cantidad efectiva moduladora del receptor de hormona nuclear de la siguiente fórmula I: (I) en donde los símbolos tienen los siguientes significados y son, cada que se presentan, seleccionados independientemente: G es un grupo arilo o heterociclo donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones; Zi es 0, S, NH, o NR6 ; Z2 es O, S, NH, O NR6; A2 es CR7 o N; Y es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02, NH, NR7, C=0, CX 0, NRxC=0, CR7R7' , C=CR8R8', R P=0, R2P=S, R2OP=0, R2NHP=0, OP=O0R2, OP=ONHR2, OP=OR2, OS02 C=NR7, NHNH, NHNR6 , NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; es CR7CR7'-CR7R7' , CR8=CR8', CR7CR7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2-C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , S-CR7R7', SO-CR7R7' , S02-CR7R7' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—-NR9' , S-CR7R7' , SO-CR7R7', S02-CR7R7', o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser O, S, S=0, S02, NH, NR7, OC=0, R^O, OP=OOR2, OP=ONHR2, OS02 , NHNH, NHNR6, NR6NH, O N=N; O cuando es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7 enlazado al mismo átomo de carbono; Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo ó alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R10C=0, NH2, C=0SR1, SO2R1 o NR4R5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, R1OC=0, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7', nitro, R10CE2, L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NR5, NH(CR7R7')n, o NR5 (CR7R7' ) n, donde n = 0 -3 ; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, hidroxilamina , hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, NR1R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; 3 H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido., alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, ^0=0, ^00=0, ^??0=0, SO2OR1, S02Rx o SOz R^1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, O SOs R^1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, ^0=0, ^ ?0=0, S02R1, SO2OR1, O SOzNR^1'; R7 y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina, hidroxilamida, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, OR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, H0C=0, R1C=0, R1(C=0)0, R10C=0, R1NHC=0, NH2C=0, SO2 1 , SOR1, P03R1R1', O S02NR1 1', O , en donde Ai o A2 contiene un grupo R7 y W contiene un grupo R7, los grupos R7 de Ai o A2 y W forman juntos un anillo heterocíclico ; R8 y R8' son cada uno independientemente H, alquilo, o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4, NR2R5, ÑOR1, alquiltio o alquiltio substituido, C=0SR1, R10C=0, R1C=0, R1NHC=0, R1R1'NC=0, SO2OR1 , S=OR1, SO2R1 , POaR^1', o SOz RV; y R9 y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido CN, OH, OR1, R1C=0, R10C=0, R1NHC=0, SOzR1, SO2OR1 , O SOsNR^1' ; o una sal, solvato, profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.
14. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es un receptor de hormona nuclear de enlace esteroide.
15. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor andrógeno.
16. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor estrógeno.
17. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor de progesterona.
18. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor glucocorticoide .
19. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor mineralocorticoide .
20. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor de aldosterona.
21. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor RORbeta .
22. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el receptor de hormona nuclear es el receptor COUP-TF2.
23. Un método para el tratamiento de una condición o trastorno, caracterizado porque comprende administrar a una especie de mamíferos en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la siguiente fórmula : o una sal, solvato, profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los símbolos tienen los siguientes significados y son, cada que se presentan, seleccionados independientemente: G es un grupo arilo o heterociclo, donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones; Zi es 0, S, NH, o NR6; Z2 es 0, S, NH, O NR6; Ai es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u 0, S, S=0, S02/ NH, NR7, C=0, 0C=0, NR1C=0, CR7R7' , C=CR8R8', R2P=0, R2P=S, R20P=0, R2NHP=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, OP=OR2, OS02, C=NR7, NHNH, NHNR6 , NR6NH, N=sN, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; W es CR7CR7'-CR7R7' , CR8=CR8' , CRCR7'—C=0, C=0-C=0, CR7R7'-C=CH2 , C=CH2-C=CH2, CR7R7'-C=NR1, C=NR1-C=NR1, NR9—CRR7' , N=CR8, N=N, NR9-^JR9', S-CR7R7', SO-CR7R7' , S02-CR7R7', cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9' , S-CR7R7' , SO-CRR7', S02-CR7R7', o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' deberá ser 0, S, S=0, S02, NH, NR7, 0C=0, NR1C=0, 0P=00R2, 0P=0NHR2, 0S02 , NHNH, NHNR6 , NR6NH, o N=N; O cuando W es CR7R7'—CR7R7' , los substituyentes cada que se presentan, pueden tomarse juntos para formar un sistema de anillo heterocíclico substituido o no substituido o carbocíclico substituido o no substituido que puede formarse por cualquier combinación de R7 y R7' enlazado al mismo átomo de carbono; Qx es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, 1^00=0, R4C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7' , nitro, R10CH2 , Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo (por ejemplo, heteroarilo) o heterociclo substituido (por ejemplo, heteroarilo substituido) , halo, CN, R10C=0, R C=0, R5R6NC=0, HOCR7R7' , nitro, R^CHz, L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NR5, NH(CR7R7')n, o NR5 (CR7R7' ) n, donde n = 0 - 3 ; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o ciQloalquilalquilo substituido,, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heteroc cloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R2 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R3 y R3' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, hidroxilamina , hidroxamida, alcoxi o alcoxi substituido, amino, R^'R2, tiol, alquiltio o alquiltio substituido; . H, alquilo, o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R^XD, 1^00=0, R^ÍKXD, SO2OR1, SO2R1 o SOs R^1' ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0, SO2R1, SO2OR1, o SOsNRV ; alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo s bstituido/ cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, R^O, R^HC^, SO2R1 , SO2OR1 , o S02NR1R1' ; R7 y R7 son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina, hidroxilamida, amino, NHR4, NR2R5, NR5R5, ÑOR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, H0C=0 , R1C=0 , R1(C=0) 0 , ^00=0, R1NHC=0 , NH2C=0 , SO2R1 , SOR1, SO2R1 , SO2OR1 , o S02NR1R1' , o, en donde Ai o A2 contiene un grupo R7 y contiene un grupo R7, los grupos R7 de Ai o A2 y W forman juntos un anillo heterocíclico; R8 y R8' son cada uno independientemente H,' alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterocicl substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquil substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquil< substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, nitro, halo, CN, OR1, amino, NHR4 , NR2R5, OR1, alquiltio o alquiltio substituido, C=OSR1, R1OC=0, R1C=0, R1NHC=0, RV'NC=0, SO2OR1, S=OR1, y R9' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido CN, OH, OR1, R1C=0, R1OC=0, O SOaNRV ; donde la condición o trastorno se seleccionado del grupo que consiste de enfermedades proliferativas , cánceres, hipertrofia benigna de la próstata, adenomas y neoplasias de la próstata, células de tumores malignos o benignos que contienen al receptor andrógeno, enfermedad del corazón, condiciones o trastornos angiogénicos , hirsutismo, acné, hiperpilosidad, inflamación, modulación inmune, seborrea, endometriosis , síndrome de los ovarios poliquístico, alopecia androgénica, hipogonadismo, osteoporosis , espermatogénesis supresora, libido, caquexia, anorexia, inhibición de la atrofia muscular en pacientes ambulatorios, complementación de andrógenos en niveles de testosterona en hombres disminuidos con la edad, cánceres que expresan el receptor estrógeno, cáncer de próstata, cáncer de pecho, cáncer de endometrio, bochornos, sequedad vaginal, menopausia, amenorrea, di smenorrea , anticoncepción, terminación del embarazo, cánceres que contienen al receptor de la progesteron , endometrios i , caquexia, menopausia, sincronía de ciclos, meniginoma, fibroides, inducción del parto, enfermedades autoinmunes, enfermedad de Alzheimer, trastornos psicóticos, dependencia de fármacos, diabetes mellitus no dependiente de la insulina, trastornos mediados por el receptor de la dopamina, insuficiencia^ cardiaca congestiva, desregulación de la- homeostasis de colesterol, y atenuación del metabolismo de un agente farmacéutico.
24. Un método para la preparación de un compuesto de la fórmula siguiente XVI, o una sal del mismo: XVI caracterizado porque G es un grupo arilo o heterociclo, donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones Z2 es O, S, NH, o NR6; ?? es CR7 O N; A2 es CR7 O N; Y' es J-J' -J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u O, S, S=0, S02, NH, NR7, 0P=00R2, 0C=0, NR1C=0, OP=ONHR2, OS02, NHNH, NHNR6 , NR6NH, O N=N, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, Qi es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R1OC=0, R4C=0, R5R6NC=0, HOC V, nitro, R^CHs , R^, NH2 , C=OSR1, SO2R1 o NR4R5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R1OC=0, R4C=0, R5R6NC=0, H0CR7R7' , nitro, ^OCE^ , ^?, NH2, C=0SR1, SO2R1 o NR4R5; L es un enlace, (CR7R7')n, H, NR5, o NR5 (CR7R7' ) n, donde n = 0- 3; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; R2 es alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo. substituido. cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido; H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o SO2R1 o SOa RV; alquilo o alquilo substituido, alquenilo, o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, R1C=0, R1NHC=0 , . SO2R1 , SO2OR1 o S02NR1R1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, OR1, R1C=0, R^HC^O, S02Rx, SO2OR1, o S02NR1R1',- y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, halo, CN, OR4 , nitro, hidroxilamina, hidroxilamida, amino, NHR4, NR2R5, OR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0, R1(C=0)0, R10C=0, R1NHC=0, SO2R1, SOR1, P03R1R1' , R1R1'NC=0, C=0SR1, SOz 1, SOzOR1, o S02NR1R1'; que comprende las etapas de hacer contacto de un compuesto de la siguiente fórmula XV, o una sal del mismo: XV en donde los símbolos son como se definieron arriba; con una enzima o microorganismo capaz de catalizar la hidroxilacion del compuesto XV al compuesto XVI y efectuar la hidroxilacion.
25. Un método de preparación de un compuesto de la fórmula siguiente XVIII, o una sal del mismo: caracterizado porque G es un grupo arilo o heterociclo, donde el grupo es mono- o policíclico, y el cual está opcionalmente substituido en una o más posiciones Zi es 0, S, NH, o NR6; Z2 es O, S, NH, o NR6; Ax es CR7 o N; A2 es CR7 o N; Y' es J-J'-J" donde J es (CR7R7')n y n =. 0-3, J' es un enlace u ?,. S, S=0 , S02 , H, NR7, OP=OOR2, OC=0 , NR1C=0 , OP=ONHR2, OS02 NHNH, NHNR6 , NR6NH, o N=N, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, Qi es H , alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, . arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R1OC=0, R4C=0 , R5R6NC=0 , H0CR7R7', nitro, R^CHs, R^, NH2, C=0SR1 , SO2R1 o NR4R5; Q2 es H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, arilo o arilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, halo, CN, R1OC=0 , R4C=0, R5ReNC=0, HOCR7R7' , nitro, R^OCH;., R1^ NH2, C=OSR1, S02R1 o NRR5; L es un enlace, (CR7R7')n, NH, NR5, o NR5 (CR7R7' ) n, donde n = 0- 3; R1 y R1' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo. substituido, alquinilo o. alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido , arilo o arilo substituido , arilalquilo o arilalquilo substituido ; S alquilo o alquilo substituido , alquenilo o alquenilo substituido , alquinilo o alquinilo substituido , cicloalquilo o cicloalquilo subst ituido , cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido , heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido ; s H , alquilo o alquilo substituido , alquenilo o alquenilo substituido , alquinilo o alquinilo subst ituido , cicloalquilo o cicloalquilo substituido , cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido , heterociclo o heterociclo substituido , cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido , cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido , heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido , arilo o arilo subst ituido , arilalquilo , ^0=0, F^NÍ XD , SO2OR1 , SO2R1 O SOs ^R1 ' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, ^0=0, RxNHC=0, SOsR1, SO2OR1 O SOsNR^1' ; s alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido, arilalquilo o arilalquilo substituido, CN, OH, 0R1, I?C=0, R^&O, SO2R1, SC^OR1, O SOa R^1' ; y R7' son cada uno independientemente H, alquilo o alquilo substituido, alquenilo o alquenilo substituido, alquinilo o alquinilo substituido, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, cicloalquilalquilo o cicloalquilalquilo substituido, cicloalquenilalquilo o cicloalquenilalquilo substituido, heterocicloalquilo o heterocicloalquilo substituido, arilo o arilo substituido,, arilalquilo o arilalquilo. substituido, halo, CN, OR4, nitro, hidroxilamina , hidroxilam da , amino, NHR4 , NR2R5, ÑOR1, tiol, alquiltio o alquiltio substituido, R1C=0 , R1(C= 0 ) 0 , R10C = 0 , R1NHC= 0 , SO2R1 , SOR1, POsR^1' , R1R1'NC=0 , C=OSR1, SO2R1 , S020R1 , o S02NR1R1' ; que comprende las etapas de poner en contacto un compuesto de la siguiente fórmula XVII, o una sal del mismo: en donde los símbolos son como se definieron arriba; con una enzima o microorganismo capaz de catalizar la abertura del anillo epóxido del compuesto XVII para formar el diol del compuesto XVIII, y efectuar la abertura del anillo y la formación del diol .
26. El compuesto de la siguiente fórmula Ib: Ib caracterizado porque G , Z1 ( Z2 , Qi y Q2 son como se definen en la reivindicación 1; Y' es J-J'-J" donde J es (CR7R7')n y n = 0-3, J' es un enlace u O, S, S=0, S02, NH, NR7, CR7R7' , ROP=0 , R2P=S, R2OP=0, R2NHP=0, OP=OOR2, OP=ONHR2 , OS02 , NHNH, NHNR5, NR6NH, N=N, cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, o heterociclo o heterociclo substituido, y J" es (CR7R7')n y n = 0-3, donde Y no es un enlace; y W es CR7CR7'—CR7R7', CR7R7'—C=0, NR9—CR7R7' , N=CR8 , N=N, NR9—NR9' , cicloalquilo o cicloalquilo substituido, cicloalquenilo o cicloalquenilo substituido, heterociclo o heterociclo substituido, o arilo o arilo substituido, en donde, cuando W no es NR9—CR7R7' , N=CR8, N=N, NR9—NR9', o heterociclo o heterociclo substituido, entonces J' debe ser O, S, S=0, S<¾, NH, NR7, OP=OOR2, OP=ONHR2, OSC , NHNH, NHNR5, NR^H, o N=N; o alternativamente , Y' es CR7R7'-O0 y W es NR9-CR7R7'; L es un enlace; y Ai y A2 son como se definen arriba con la condición de que, cuando Y'=0 y '=-CH2-CH2-, entonces al menos uno de Ai o A2 no es CH; con las condiciones adicionales (2) , (3), (6), (7) y (8) de la reivindicación 1; o una sal, solvato, profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo.
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