FR2580283A1 - Nouveau conjugue nucleoside-phospholipide - Google Patents
Nouveau conjugue nucleoside-phospholipide Download PDFInfo
- Publication number
- FR2580283A1 FR2580283A1 FR8605371A FR8605371A FR2580283A1 FR 2580283 A1 FR2580283 A1 FR 2580283A1 FR 8605371 A FR8605371 A FR 8605371A FR 8605371 A FR8605371 A FR 8605371A FR 2580283 A1 FR2580283 A1 FR 2580283A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- nucleoside
- chloroform
- methanol
- represent
- arabinosyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/32—Nitrogen atom
- C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/052—Imidazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
- C07H19/20—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
- C07H19/207—Purine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids the phosphoric or polyphosphoric acids being esterified by a further hydroxylic compound, e.g. flavine adenine dinucleotide or nicotinamide-adenine dinucleotide
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
LA PRESENTE INVENTION CONCERNE UN COMPLEXE NUCLEOSIDE-PHOSPHOLIPIDE DE FORMULE: (CF DESSIN DANS BOPI) OU R1 ET R2 REPRESENTENT UN RESIDU ACIDE GRAS A LONGUE CHAINE, ET NS EST UN RESIDU NUCLEOSIDE CHOISI DANS LE GROUPE CONSTITUE PAR 5-FLUOROURIDINE-5-YL-, 5-FLUORO-2-DESOXYURIDINE-5-YL-, BREDININ-5-YL-, TUBERCIDIN-5-YL-, NEPLANOCIN-A-6-YL-, 5-FLUOROCYTIDINE-5-YL-, ARABINOSYLCYTOSINE-5-YL-, ARABINOCYL-5-FLUOROCYTOSINE-5-YL-, ARABINOSYLADENINE-5-YL- ET ARABINOSYLTYMINE-5-YL-, OU UN DE SES SELS.
Description
La présente invention concerne un nouveau conjugué nucléoside-
phospholipide ou son sel. Plus particulièrement, l'invention concerne le conjugué nucléoside-phospholipide de formule (1) CH: -O-Ri I{
CH}-O-R ( I)
O H o R1 et R2 représentent un résidu acide gras à longue chaine, et
Ns est un résidu nucléoside choisi dans le groupe constitué par 5-
fluorouridine-5'-yl-, 5-fluoro-2'-désoxyuridine-5'-yl-, brédinin-5'-
yl-, tubercidin-5'-yl-, néplanocin-A-6'-yl-, 5-fluorocytidine-5'-yl-, arabinosylcytosine-5'-yl-, arabinocyl-5-fluorocytosine-5'-yl-, arabinosyladénine-5'-yl- et arabinosylthymine-5'-yl-, ou un de ses sels. Les agents antitumoraux nucléosides sont largement utilisés comme agents chimiothérapeutiques efficaces pour les cellules néoplasiques; on a cependant souligné quelques problèmes dans l'application en chimiothérapie antitumorale. Il existe en effet certains inconvénients. Ainsi, dans un mécanisme d'action de l'agent antinéoplasique nucléoside, la phosphorylation du groupe hydroxyle en position 5' du nucléoside in vivo est essentielle pour l'activité antitumorale; le composé est décomposé en substance inactive par lnactivation comme par phosphorolyse et désamination; la résistance des cellules tumorales aux agents antitumoraux est accrue; et l'agent est quelquefois toxique pour les cellules mitotiques normales. On a synthétisé de nombreux types de dérivés de nucléosides pour pallier les Inconvénients des agents antitumoraux nucléosides. On sait que le CDP-diacylglycérol joue un rôle Important comme intermédiaire de la biosynthèse des glycérophospholipides in vivo, et leurs analogues conjugués arabinosylcytoslne-phospholipide ayant une activité antitumorale, ont été chimiquement synthétisés (Biochim. Biophys. Acta, 619
(1980), J. Med. Chem., 1982, 25, 1322-1329).
Comme on l'a expliqué ci-dessus, le ribonucléoside est synthétisé
par un procédé chimique et il faut donc des procédés de synthèse multi-
étapes. Le rendement est donc faible et les procédés sont compliqués. En outre le cytosilne-arabinoside n'est connu que comme résidu nucléoside de dérivé de conjugué phospholipide-nucléoside et Il existe une demande d'un
complexe phospholipide-nucléoside ayant d'autres types de résidus nucléosides.
A cet effet on peut utiliser un nucléoside autre que le cytosinearabinoside; cependant la synthèse chimique de ce complexe phospholipidenucléoside
nécessite des procédés de synthèse multi-étapes avec des conditions réaction-
nelles difficiles, et ainsi en pratique la synthèse chimique est restée essen-
tiellement impossible.
On a trouvé que l'on peut synthétiser le nouveau complexe phospholipidenucléoside en faisant réagir du L-glycérophospholipide avec le nucléoside en présence de phospholipase D o l'on fait réagir le groupe
hydroxyle primaire du nucléoside et le glycéro-phospholiplde.
Un objet de l'invention est de fournir un nouveau conjugué nucléosidephosphollpide de formule (1) CHs -O-Ri C H - 0 - R ic I
CH-O-R, (I)
I, 11o t' CH, -O-P-O-Na { OH
o R1, R2 et Ns ont les mêmes significations que ci-dessus.
Comme exemple de glycérophospholipide, on peut citer la phospha-
tidylcholine de formule (Il)
CH, -0-R,
CH-O-R1zII O CH, -O-P-0-Rs OH o R1 et R2 ont les mêmes significations que ci-dessus, et -OR3 est un résidu choline. Dans le glycérophospholipide de la série phosphatidylcholine, R1 et R2 représentent des résidus acide gras à longue chaîne semblables ou différents ayant de 16 à 20 atomes de carbone. On peut ainsi mentionner les résidus acide gras saturés à longue chaîne en C16 à C20 comme palmitoyle, stéaroyle ou dodécanoyle, et les résidus acide gras non saturés à longue
chaîne en C16 à C20 ayant de 1 à 4 liaisons non saturées comme palmito-
oléoyle, oléoyle, linoléoyle ou arachidonyle. Les exemples préférés sont la
dipalmitoyl-phosphatidyl-choline o R1 et R2 représentent palmitoyle, dioléyl-
phosphatidyl-choline o R1 et R2 représentent oléoyle, et dilinoléoylphospha-
tidyl-choline o R1 et R2 représentent linoléoyle. D'autres phosphatidyl-
cholines naturelles sont celles o R1 et R2 représentent des radyle de mélanges d'acides gras à longue chaîne en C16 à C20. Ces phosphatidylcholines peuvent
être synthétisées ou se trouvent dans le commerce.
Comme exemples de nucléosides, on peut citer par exemple la fluorouridine (appelée ci-dessous FUR), la 5-fluoro-2'-désoxyuridine (appelée
ci-dessous FUDR), la brénidine (4-carbamoyl-1-B-D-ribofuranosylimidazollum-
-oléate), la tubercidine (7-déazaadénosine), la néplanocine A (1-B-(6amino- 9H-9-yl)-4-hydroxyméthyl-4-cyclopentène-2, 30-diol) (appelée cidessous NepA), la 5-fluorocytidine (appelée ci-dessous FCR), l'arabinosylcytosine,
l'arabinosyl-5-fluorocytosine, l'arabinosyl-adénine ou l'arabinosylthymine.
On peut obtenir le complexe nucléoside-phospholipide de formule
(1) en faisant réagir le glycérophospholipide ci-dessus et le nucléoside éventuel-
lement en présence d'ions métalliques avec la phospholipase D. L'exemple préféré de phospholipase D est la phospholipase D-P obtenue à partir de Streptomyces sp. AA586 FERM P-6100 (brevet japonais non soumis à l'inspection publique N 58-152481, Toyo Jozo Co., catalogue N P-39). Sa quantité est de 0,01 unité de phospholipase D ou plus pour 1 mg de phosphatidyl-choline et est de préférence de 1-100 unités. Comme exemple de solvant que l'on peut utiliser, on peut citer un solvant bicouche de solvant organique et d'eau, par exemple un mélange d'un solvant organique comme l'éther, le benzène ou le chloroforme et d'une solution tampon de pH 3-9, de préférence pH 4-6. L'exemple de sol soluble dans l'eau pour la génération d'ions métalliques est généralement le chlorure de calcium. La température de la réaction est généralement de 20-600C et la durée de la réaction est de 30 minutes à 5 heures. On peut purifier le conjugué nucléoside-phospholipide ainsi obtenu
par un procédé de partition et/ou par chromatographie sur gel de silice.
On présente ci-dessous une synthèse en une étape du complexe
nucléoside-phospholipide de l'invention.
-s,,I quos (V daN ap se aEl suep,9 uoTl!sod ua no),; uoTiTSOd ua aaJIeWad alfixo.ipAq adnoi- ai,a epldlloqdo4d ai suep at4eqdsoqd adnoJ6 a[ Qo 9sodwoo un:sa snssap-li nuaqqo apldiloqdsoqd-apTlsoEIonu Vn6nCuoo al HO I SN-O-d-O- 1HO U I
su!ioql + Ul-O-H-
I
C.H9 HO
o I rHO-N- HO- H9-O-cd-O- tHO
/+ I1
tri o O HO+ l-O-SN +H IH-0- sHO On peut préparer le produit ainsi obtenu sous la forme d'un de ses sels non toxiques comme le sel de sodium, et on peut l'administrer généralement en
suspension dans de l'eau distillée stérilisée.
Les avantages du complexe nucléoside-phospholipide de l'invention ainsi préparé sont qu'il est plus lipophile par comparaison avec le nucléoside original; il est excrété moins facilement, et est donc actif pendant plus longtemps; il n'est pas affecté par l'inactivation comme la phosphorolyse, la désamination ou la réduction; il a une plus grande affinité vis-à-vis de la membrane cellulaire; le nucléoside-5'-monophosphate antinéoplasique est généré dans les cellules; et il a une longue durée d'action et une activité
accrue avec une faible toxicité.
Le nouveau complexe nucléoside-phospholipide de l'invention révèle une activité antitumorale marquée in vivo et en outre une activité
anti-métastatique pour les tumeurs et une activité antivirale.
L'activité antitumorale contre le carcinome P-388 de la Ieucémie de la souris et le carcinome de l'ascite d'Ehrlich abd est mise en évidence
comme suit.
(Activité antitumorale)
(1) Echantillons: présentés aux tableaux 1 et 2.
(2) Animaux: souris BDF1 ou souris ICR, âgées de 5 à 6 semaines, mâles, souris par groupe et7 souris témoin.
(3) Cellules tumorales: cellules de leucémie P-388; on inocule par voie intra-
péritonéale 1 x 10 /0,2 ml à des souris BDF1.
cellules de carcinome d'ascite d'Ehrlich; on inocule par voe intrapritonale 2 x 10/,2 ml 6 des souris ICR.
par voie intrapéritonéale 2 x 10 /0,2 ml à des souris ICR.
(4) Préparation d'échantillons et administration de médicaments: On met des échantillons en suspension dans une solution de sel physiologique Tris-HCI par traitement aux ultra-sons. On administre
0,1 ml/10 g de poids corporel. On conserve les échantillons à 4 C à l'obscurité.
Administration: 2 jours après l'inoculation de la tumeur, une fois par jour
pendant 2 à 7 jours. La posologie est donnée dans les tableaux.
(5) L'allongement de la durée de vie (ADV) est calculée par l'équation suivante.
ADV (%) - durée de vie moyenne (jours); traitées ADV (%) = 1- ____________ -1)x 100 durée de vie moyenne (jours); témoins Nb de jours d'expérience: 35 jours (pour partie 30 jours)
Les souris vivant dans les derniers jours ne sont pas caculées dans l'ADV.
(6) Résultat: Tableau 1.
Conjugué Nucléoside- ellules Admin. ADV* Survie au bout de phospholipide. umorale mg/kg (Z) 35 Jours CI) (Nb. d' Nb./traitées
adminis-
R. et Ri Ns tration) palmitoyl FUR-5'-yl P-388 30( x5) 206,3 0/5 Ehrlic 15( X 5) >88,0 2/5' palmitoyl NepA-6'-yl P-388 50( x3) >159,3 1/5 Ehrlic 10( x7) >68,7 2/5 radyl PUR-5'-yl P-388 30( x5) 98,3 0/5 linoléoyl PUR-5'yl P-388 15( x 5) 100,8 0/5 radyl brédinin- Ehrli- 50( X7) 75,4 1/5 '-yl ch *: Date de survie moyenne dans le groupe témoin; Leucémie P-388: 7,57 7,79 jours Carcinome d'ascite d'Ehrlich: 15,14 - 15,43 jours Les exemples suivants précisent l'invention mais ne sont pas
conçus comme limitatifs.
EXEMPLE 1
On dissout de la 5-fluorouridine (FUR, 4,0 g) dans 100 mM de tampon acétate (pH 5,6, 20 ml) contenant 100 mM de CaCt2 et on agite à 45 C pendant 20 minutes. On y ajoute de la phospholipase D-P (10 mg, à partir de Streptomyces, Toyo Jozo Co., activité spécifique 160 unités/mg) et une solution chloroformique (30 ml) de dipalmitoyl-phosphatidyl-choline (1,5 g) et on agite à 450C pendant 3 heures, puis on refroidit. On y ajoute du méthanol (20 ml) et on sépare la couche organique. En outre, on extrait la couche aqueuse avec du chloroforme (30 ml) et du méthanol (15 ml). On combine la couche organique et on y ajoute de l'eau (20 ml) et du méthanol (20 ml) et on répartit, puis on sépare la couche organique et on sèche sous vide. On ajoute au résidu un mélange de chloroforme:éthanol (1:1)(30 ml) et
on sèche à nouveau sous vide.
On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloro-
forme dans une colonne instantanée de gel de silice (Merck, silica-gel Art 9385,
4 cm x 15 cm) et on élue graduellement avec du chloroforme, du chlorofor-
me:méthanol (20:1), (7:1), (4:1), (3:1) et (2:1), dans cet ordre. On sèche l'éluat sous vide pour donner une poudre incolore de structure (Ia) ci-dessous
(0,92 g, rendement: 50,5%).
CH2-O-Rl Il CE-OO-R2 -C2 EN A lla) I O (la) CHZ0- 0Il il N OR
CH CH
CH-CE/-
I I
OH OH
o R1 et R2 représentent un palmitoyle.
Spectre d'absorption UV: 2 max = 268 nm (dans le méthanol:chloroforme = :1) Spectre de masse FAB: m/e 915 (M+Na) + Rf = 0,37 (chloroforme:méthanol:eau = 65: 25: 3, plaque Merck Art 5715, tache détectée par lampe UV et bleu de molybdène. Dans ce qui suit, la valeur
du Rf est mesurée de la même manière).
L'activité antitumorale est montrée dans le tableau.
On n'observe pas de toxicité aiguë à une dose de 150 mg/kg i.p. chez les
souris.
258.0283
EXEMPLE 2
Dans l'exemple 1 on utilise du Nep A (2,0 g) à la place de la
FUR pour donner le composé de formule (Ib) (0,31 g, rendement: 17,0%).
CE-'-0-R1 NE 2
I I
ci -O-RZ F- C C CN
0 C I
C l CHz--O- -0O-CH2 -.N/
- C CH
CH-CH
I I
OE OE
o R1 et R2 représentent un palmitoyle.
Spectre d'absorption UV - max - 261 nm (dans le méthanol:chloroforme
= 20:1)
Spectre de masse FAB: m/e 894 (MH) + Rf = 0,38
L'activité antitumorale de ce composé est précisée dans le tableau.
On n'observe aucune toxicité aiguë lorsqu'on administre le composé à raison
de 250 mg/kg.
EXEMPLE 3
On remplace la dipalmitoylphosphatidyl-choline de l'exemple 1 par la dilinoléoylphosphatidyl-choline (1,5 g) pour obtenir le composé de
formule (Ic) (1,09 g).
o CH=z- 0 - P,, il Cil-O-2 HN/C C-- F CI'i -- O-- 1, I (le)
I ?,C , CH
CHZ-0- P -0-CHZ 0 -N-H
CEC-CHC
I I
OH OH o R1 et R2 représentent un linoléoyle.
Spectre d'absorption UV: max - 268 nm (dans le méthanol:chloro-
forme - 20: 1) Spectre de masse FAS: m/e 963 (M+Na) + Rf = 0,37 L'activité antitumorale de ce composé est ADV 100,8% (15 mg/kg, administration à 5 reprises) contre la leucémie P-388 de souris, et l'on n'observe
aucune toxicité aiguë à des doses de 75 mg/kg chez la souris.
EXEMPLE 4
On ajoute de la 5-fluorouridine (FUR, 4,0 g) dans 100 mM de tampon d'acétate (pH 5,6, 20 ml) contenant 100 mM de CaCl2 et on agite à 45"C pendant 20 minutes. On y ajoute de la phospholipase D-P (10 mg, Toyo Jozo Co.) et une solution chloroformique (30 ml) de phosphatidyl-choline (lécithine d'oeuf, 1,5 g) et on agite à 45 C pendant 3 heures, puis on refroidit. Après la réaction, on effectue l'isolement de la même manière que dans l'exemple 1 et on purifie par chromatographie sur gel de silice pour donner le composé
de formule (Id) (1,11 g).
CH2- O--R1
I 2-O-P-O-CÉ2 OI\N ZCHu(Id)
* 01 1 0 I
II OI
CK CII
I I
OH OH
o R1 et R2 représentent un radyle.
Spectre d'absorption UV:-max- 268 nm (dans le méthanol:chloroforme = 20:1)
Rf - 0,37.
L'activité antitumorale de ce composé est ADV 98,3% (15 mg/kg,
administration à 5 reprises) contre la leucémie P-388 de la souris, et on n'ob-
serve pas de toxicité aiguë à des doses de 150 mg/kg chez la souris.
EXEMPLES 5 - 8
On remplace la FUR dans l'exemple 1 par le nucléoside présenté au tableau 3 pour donner un complexe phospholipide-nucléoside (I) qui a des activités antitumorales utiles. On n'observe pas de toxicité aiguë à des doses de 150 mg/kg chez la souris. Au tableau 3, * désigne le cas o l'on utilise 100 mM de tampon d'acétate (pH 5,6) contenant 100 mM de chlorure de calcium (15 ml). ** en
prenant le procédé de récupération du composé comme suit.
Au mélange réactionnel après refroidissement on ajoute du méthanol (20 ml) pour filtrer les fractions insolubles, on lave avec du méthanol:chloroforme (1:1), et on lave la couche organique après séparation avec une solution de chlorure de sodium, on filtre à travers du papier filtre WIhatman 1-PS et on sèche sous vide. On introduit le résidu dissous dans une
faible quantité de chloroforme dans une colonne instantanée (Merck, silica-
gel Art 7747,- 3 cm x 15 cm) et on élue avec du chloroforme, du chlorofor-
me:méthanol (10:1), (7:1), (5:1), (3:1) et (2:1), dans cet ordre.
Tableau 3:
EXEMPLE 5
Nucléoside: FUDR 1,5 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 0,75 g R1 et R2: palmitoyle Ns: FUDR-5'-yle Rendement: 0,41 g Spectre UV ( > max): 268 nm ' (méthanol:chloroforme (20:1)) Spectre de masse FAB (m/e): 899 (M+Na) + Rf: 0,44
EXEMPLE 6
Nucléoside: brédinine (*)(**) 10 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 2,0 g R1 et R2: palmitoyle Ns: brédinin-5'-yle Rendement: 1,36 g Spectre UV (? max): 280 nm (méthanol:chloroforme (20:1" Spectre de masse FAB (m/e): 890 (MH) + Rf: 0,25
EXEMPLE 7
Nucléoside: tubercidine 2,0 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 1,0 9
R1 et R2: palmitoyle -
Ns: tubercidin-5'-yle Rendement: 0,91 g Spectre UV (A max): 270 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Spectre de masse FAB (m/e): 897 (M+Na) + Rf: 0,38
EXEMPLE 8
Nucléoside: FCR 0,65 g Dipalmitoyl-phosphatidyl-choline: 0,73 g R1 et R2: palmitoyle Ns: FCR-5'-yle Rendement: 0,33 g Spectre UV (> max): 283 nm 241 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Spectre de masse FA8 (m/e): 914 (M+ Na) + Rf: 0,30
EXEMPLES 9 - 12
On remplace la FUR par le nucléoside présenté au tableau 4 pour obtenir le complexe phospholipide-nucléoside (I) qui a des activités antitumorales utiles. On n'observe pas de toxicité aiguë à des doses de 150 mg/kg. Dans le tableau, (*) et (**) ont les mêmes significations que ci-dessus.
TABLEAU 4
EXEMPLE 9
Nucléoside: FUDR 2,0 g Phosphatidyl-choline: 1,0 g R1 et R2: radyle Ns: FUDR-5'-yle Rendement: 0,41 g Spectre UV (; max): 268 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Rf: 0,44
EXEMPLE 10
Nucléoside: brédinine (*)(**) 10 g Phosphatidyl-choline: 2,0 g R1 et- R2: radyle Ns: brédinin-5'-yl Rendement: 1,18 g Spectre UV (X max): 280 nm (méthanol:chloroforme (20:1)) Rf: 0,25
EXEMPLE 11
Nuclé6oside: tubercidine 2,0 9 Phosphatidyl-choline: 1,0 9 R1 et R2: radyle Ns: tubercidin-5'-yle Rendement: 0,71 g Spectre UV (A max): 270 nm (méthanol:chloroforme (20:1" Rf: 0,38
EXEMPLE 12
Nucléoside: NepA 2,0 g Phosphatidyl-choline: 1,5 g R1 et R2: radyle Ns: NepA-6'-yle Rendement: 1,24 g Spectre UV (X max): 261 nm (méthanol:chloroforme (20:1"
Rf: 0,38.
D'autres exemples de produits de départ et de produits de conjugué
phospholipide-nucléoside sont présentés dans ce qui suit.
Conjugué, Produits de départ phospholipidenucléosIde I phospholipide nucléoside Ri et R3 Ns
dioloyl-
phosphatidyl- PUR oléoyl PUR-5'-yl choline FCR FCR-5'-yl " NepA NepA-6'yl " PFUDR FUDR-5'-yl :" brédinine. bredinin-5'-yl tubercidine tubercidln -5'-yl
dilinoleoyl-
phosphatidyl- NepA linoleoyl NepA-6'-yl choline PFCR PFCR-5'-yl FUDR FUDR5'yl FUDR-5'-yl brédinin brédinin-5'-yl
EXEMPLE 13
On dissout de l'arabinosyl-5-fluorocytosine (783 mg) dans 100 mM de tampon acétate (pH 5,4, 6 ml) contenant 100 mM de CaC2
et on agite à 450C pendant 5 minutes.
ODn y ajoute de la phospholipase D-P (10 mg, à partir de Streptomyces, Toyo Jozo Co., activité spécifique 160 unités/mg) et une solution chloroformique (20 ml) de dipalmitoyl-phosphatidyl-choline (367 mg, 0,5 mM) et on agite à 45 C pendant 3 heures, puis on refroidit. Au mélange on ajoute de l'HCl 1 N (6 ml), du chloroforme (20 ml) et du méthanol et on sépare la couche organique. On lave la couche organique avec de l'eau et on sèche
sous vide. On ajoute de l'éthanol au résidu et on sèche deux fois sous vide.
On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloroforme dans une colonne instantanée de gel de silice (Merck, silica-gel Art 9385, 2 cm x 12 cm) et on élue graduellement avec du chloroforme, du chloroforme:méthanol
(20:1), (10:1), (5:1), (3:1) et (2:1), dans cet ordre.
On sèche l'éluat sous vide et on dissout le résidu dans le chloro-
forme:méthanol (2:1) (25 ml), puis on ajoute de l'eau pour séparer la couche organique, que l'on sèche sous vide pour fournir une poudre incolore
(156 mg, rendement: 35,0%). -
Spectre d'absorption UV: 1 max 284 nm, 240 nm (dans le chloroforme:méthanol
- 20:1)
Spectre de masse FAB: m/e 914 (M+Na) + Rf = 0,31 (chloroforme:méthanol:eau - 65:25:3, plaque Merck Art 5715, tache détectée par lampe UV et bleu de molybdène. Dans ce qui suit, la valeur de Rf est mesurée de la même manière.)
L'activité antitumorale de ce -composé a été présentée ci-dessus.
En outre on observe plus de 60% d'ADV lorsqu'on inocule par voie intrapéri-
tonéale le carcinome d'ascite d'Ehrlich, 2 x 10 6cellules, 0,2 ml, à des souris, et deux jours plus tard on administre ce composé (30 mg/kg) une fois par jour pendant 7 jours. On n'observe aucune toxicité aiguë à des doses de
mg/kg chez les souris.
EXEMPLE 14
On dissout de l'arabinosylcytosine (962 mg, 15 équivalents) dans 100 mM de tampon acétate (pH 5,4, 5 ml) contenant 100 mM de CaCI2 et on agite à 45 C pendant 10 minutes. On y ajoute de la phospholipase D-P (5 mg) et une solution chloroformique (10 ml) de L-*-lécithine-dioléyle (200 mg, 0, 263 mM) et on agite à 45 C pendant 2 heures, puis on refroidit. On y ajoute
du chloroforme (6,6 ml) et du méthanol (8,3 ml) et on sépare la couche organique.
On lave la couche organique avec de l'eau (5 ml) et on sèche sous vide. On ajoute de l'éthanol (15 ml) au résidu et on sèche deux fois sous vide. On introduit le résidu dissous dans une faible quantité de chloroforme dans une colonne instantanée de gel de silice (Merck, silica-gel Art 9385, 2,5 x 12 cm) et on élue graduellement avec du chloroforme:méthanol (15:1) et (1:0,1), puis du chloroforme:méthanol:eau (100:10:1), (70:10:1) et (50:10:1),
dans cet ordre. On sèche l'éluat sous vide et on dissout dans le chlorofor-
me-méthanol (2:1) (25 ml), puis on ajoute de l'eau (5 ml) tout en agitant bien pour séparer la couche organique, que l'on sèche sous vide. On y ajoute du méthanol et on sèche à nouveau sous vide pour donner une poudre incolore
(184 mg, rendement: 75,5%).
Spectre d'absorption UV: i max = 273 nm (dans le chlorofor-
me:méthanol = 20:1) Spectre de masse FAB: m/e 948 (M+Na) + Rf = 0,36
L'activité antitumorale de ce composé a été présentée ci-dessus.
En outre l'activité antitumorale contre le carcinome d'ascite d'Ehrlich de la souris est ADV 65,6%. On n'observe pas de toxicité aiguë ni de mortalité
à des doses de 150 mg/kg chez la souris.
EXEMPLE 15
On remplace l'arabinosyl-5-fluorocytosine par l'arabinosyl-
adénine dans l'exemple 13 et de l'arabinosylthymine pour obtenir la dipalmitoyI-
phosphatidyl-arabinosyladénine et la dipalmitoyl-phosphatidyl-arabinosyl-
thymine. Ces composés ont une activité antivirale et on n'observe pas de
mortalité à des doses de 150 mg/kg chez la souris.
Dipalmitoyl-phosphatidyl-arabinosyladénine:
Spectre d'absorption UV: à max = 259 nm (dans le chlorofor-
me:méthanoa = 20:1) Spectre de masse FAB: m/e 898 (MH) + et (M + Na) + Rf = 0,39 Dipalmitoyl-phosphatidyl-arabinosylthymine:
Spectre d'absorption UV: L max = 269 nm (dans le chlorofor-
me:méthanol = 20:1) -
Spectre de masse FAB: m/e 911 (M + Na) + Rf = 0,46
TABLEAU 2
Complexe
Nucléoside-
phospholipide. Cellules Administ- ADV * (I)tumo- ration (Z) rales mg/kg R, et Rs Ns (XNO.) leucémie palmitoyl arabinosyl- P-388 15( x5) 151,9 fluoro-
cytosine-
' -yl leucémie oléoyl arabinosyl- P-388 30( x5) 153,6
cytosine-
' -yI leucémie radyl arabinosyl- P-388 50( X5) 112,0
cytosine-
'-yl *: Date moyenne de survie: Leucémie P-388: 7,57 - 7,64 jours
EXEMPLES 16 - 21
Dans l'exemple 1, on remplace la FUR par le nucléoside présenté dans le tableau 5 et on remplace la FUR par le nucléoside présenté au tableau et on remplace la djpalmitoyl-phosphatidyl-choline par la distéaroyl-phosphatidyl-choline pour obtenir le composé de formule (I) tel que présenté
au tableau 5.
TABLEAU 5
Traitement de la Produit de départ Conjugué phospholipide-nucléoside (I j Traitement de la leucémie P-388 Exemple nucléoside distéaroyl-phosadministration (utilisé) phatidyl-choline Rendt I Àmax. Rf (m/kg) ADV C) (x nb d'admin.) 16 FUR (2,63g) 0,79g 0,65g 268m 0,37 30g ( x5) 206 % 17 NeP A(1,60g) 0,79g. 0,38g 260nm 0,38 30g ( x5) 128 Z 18 Ara FC(1,3g) 0, 79g 0,44g 285nm 0,31 30mg ( x5) 194 Z. 19 Ara C (3,6g) 0,79g 0,48g 273n" 0,36 30g ( x5) 160 X FUDR (3,3g) 0,79g 0,40g 268n. 0,44 3So ( X5) 36 X 21 Brédinine(5,Og) 0,79g 0,26g 280na 0,25 - - N .,.co o, co CO
2580Z83
Claims (8)
1. Complexe nucléoside-phospholpide de formi. ()
CH: -O-R,
CH-O-R-. (I)
l O *0 CH, -O-P-O-Ns OH ou R1 et R2 représentent un résidu acide gras à longue chaine, et
Ns est un résidu nucléoside choisi dans le groupe constitué par 5-
fluorouridine-5'-yl-, 5-fluoro-2'-désoxyuridine-5' -yl-, brédinin-5'-
yl-, tubercidin-5'-yl-, néplanocin-A-6'-yl-, 5-fluorocytidine-5'-yl-, arabinosylcytosine-5'-yl-, arabinocyl-5-fluorocytosine-5'-yl-, arabinosyladénine-5'-yl- et arabinosylthymine-5'-yl-, ou un de ses sels.
2. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un palmitoyle et Ns est le 5-fluorouridin-5'-yl ou un de ses sels.
3. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un palmitoyle et Ns est le néplanocin-A-6'-yl- ou un de ses sels.
4. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et RZ
représentent un palmitoyle, Ns est l'arabinosyl-cytosine-5'-yl-, l'arabinosyl-
adénine-5'-yl- ou l'arabinosyl-thymine-5'-yl- ou un de leurs sels.
5. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un olévyle et Ns est un arabinosyl-cytosine-5'-yl- ou un de ses sels.
6. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un stéaroyle, Ns est le 5-fluorouridine-5'-yl- ou un de ses sels.
7. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2
représentent un stéaroyle, Ns est le néplanocin-A-6'-yl- ou un de ses sels.
8. Conjugué nucléoside-phospholipide selon la revendication 1 o R1 et R2 représentent un stéaroyle, Ns est l'arabinosyl-cytosine-5'-yl- ou un de ses
sels.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP7828385A JPS61236793A (ja) | 1985-04-15 | 1985-04-15 | 新規リン脂質・ヌクレオシド誘導体 |
JP23769585A JPS6299393A (ja) | 1985-10-25 | 1985-10-25 | 新規アラビノヌクレオシド−リン脂質複合体 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FR2580283A1 true FR2580283A1 (fr) | 1986-10-17 |
FR2580283B1 FR2580283B1 (fr) | 1989-11-24 |
Family
ID=26419358
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FR8605371A Expired FR2580283B1 (fr) | 1985-04-15 | 1986-04-15 | Nouveau conjugue nucleoside-phospholipide |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4797479A (fr) |
DE (1) | DE3612636C2 (fr) |
FR (1) | FR2580283B1 (fr) |
GB (1) | GB2175588B (fr) |
IT (1) | IT1188654B (fr) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0347852A2 (fr) * | 1988-06-20 | 1989-12-27 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Dérivés de néplanocine |
Families Citing this family (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5106963A (en) * | 1984-12-28 | 1992-04-21 | Miles, Inc., Successor In Interest To Technicon Instruments Corp. | Phospholipid conjugates and their preparation |
US6448392B1 (en) * | 1985-03-06 | 2002-09-10 | Chimerix, Inc. | Lipid derivatives of antiviral nucleosides: liposomal incorporation and method of use |
US5187266A (en) * | 1986-06-30 | 1993-02-16 | Board Of Regents The University Of Texas System | Antitumor aldophosphamide glycoside and dideoxyuridine derivatives |
US4737295A (en) * | 1986-07-21 | 1988-04-12 | Venture Chemicals, Inc. | Organophilic polyphenolic acid adducts |
DE3778626D1 (de) * | 1986-09-27 | 1992-06-04 | Toyo Jozo Kk | Nukleosid-phospholipid-konjugat. |
US6599887B2 (en) | 1988-07-07 | 2003-07-29 | Chimerix, Inc. | Methods of treating viral infections using antiviral liponucleotides |
US5817638A (en) * | 1988-07-07 | 1998-10-06 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Antiviral liponucleosides: treatment of hepatitis B |
US6252060B1 (en) | 1988-07-07 | 2001-06-26 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Antiviral liponucleosides: treatment of hepatitis B |
IE980216A1 (en) * | 1989-04-17 | 2000-02-23 | Scotia Holdings Plc | Anti-virals |
JPH0421694A (ja) * | 1990-05-16 | 1992-01-24 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 新規なヌクレオシド―リン脂質複合体 |
CA2083961A1 (fr) * | 1990-05-29 | 1991-11-30 | Henk Van Den Bosch | Synthese de derives de di- et de triphosphate de glycerol |
DE69119074T2 (de) * | 1990-06-15 | 1996-12-12 | University Of North Carolina At Chapel Hill, Chapel Hill, N.C. | Kovalente-ther lipidnukleosid-konjugate |
JPH04364198A (ja) * | 1991-04-04 | 1992-12-16 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 5’−ホスファチジル−5−フルオロウリジン誘導体 |
US5512671A (en) * | 1993-02-16 | 1996-04-30 | Wake Forest University | Ether lipid-nucleoside covalent conjugates |
CA2156288C (fr) * | 1993-02-19 | 2005-10-18 | Junichi Yano | Derive du glycerol; dispositif et composition pharmaceutique |
WO1994028908A2 (fr) * | 1993-06-10 | 1994-12-22 | Wake Forest University | (phospho)lipides contre l'infection a virus de l'hepatite b |
DE4418690A1 (de) * | 1994-05-28 | 1996-01-11 | Boehringer Mannheim Gmbh | Neue Lipidester von Nucleosid-Monophosphaten und deren Verwendung als immunsuppressive Arzneimittel |
US7135584B2 (en) * | 1995-08-07 | 2006-11-14 | Wake Forest University | Lipid analogs for treating viral infections |
JP4259611B2 (ja) | 1994-08-29 | 2009-04-30 | ウェイク フォレスト ユニバーシティ | ウィルス感染を治療するための脂質アナログ |
US7026469B2 (en) * | 2000-10-19 | 2006-04-11 | Wake Forest University School Of Medicine | Compositions and methods of double-targeting virus infections and cancer cells |
US7309696B2 (en) | 2000-10-19 | 2007-12-18 | Wake Forest University | Compositions and methods for targeting cancer cells |
CN1486289A (zh) * | 2001-05-29 | 2004-03-31 | 皇家菲利浦电子有限公司 | 金属-陶瓷的结合 |
IL160080A0 (en) * | 2001-08-31 | 2004-06-20 | Thomson Licensing Sa | Sequence counter for an audio visual stream |
WO2004012746A2 (fr) * | 2002-08-02 | 2004-02-12 | The Regents Of The University Of California | Nouvelles utilisations d'inhibiteurs de l'inosine monophosphate deshydrogenase |
EP1426053A1 (fr) * | 2002-12-03 | 2004-06-09 | Fresenius Kabi Deutschland GmbH | Utilisation de lipides amphiphiles pour l'inhibition de métastases |
US20050187191A1 (en) * | 2004-02-20 | 2005-08-25 | Kucera Louis S. | Methods and compositions for the treatment of respiratory syncytial virus |
EP2012799B1 (fr) | 2006-05-03 | 2016-08-24 | Chimerix, Inc. | Esters d'alcoxyalkyle de phosphonates, et de phosphonates et de phosphates nucléosidiques antiviraux et antiprolofératifs métaboliquement stables |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4291024A (en) * | 1978-04-10 | 1981-09-22 | Turcotte Joseph G | Cytotoxic liponucleotide analogs |
US4471113A (en) * | 1982-02-03 | 1984-09-11 | The United States Of America As Represented By The Department Of Energy | Prodrugs based on phospholipid-nucleoside conjugates |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4783402A (en) * | 1983-04-11 | 1988-11-08 | Meito Sangyo Kabushiki Kaisha | Production of primary or secondary alcohol derivatives of phospholipids by the enzymatic technique |
-
1986
- 1986-04-15 FR FR8605371A patent/FR2580283B1/fr not_active Expired
- 1986-04-15 US US06/852,881 patent/US4797479A/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-04-15 DE DE3612636A patent/DE3612636C2/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-04-15 GB GB08609112A patent/GB2175588B/en not_active Expired
- 1986-04-15 IT IT20090/86A patent/IT1188654B/it active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4291024A (en) * | 1978-04-10 | 1981-09-22 | Turcotte Joseph G | Cytotoxic liponucleotide analogs |
US4471113A (en) * | 1982-02-03 | 1984-09-11 | The United States Of America As Represented By The Department Of Energy | Prodrugs based on phospholipid-nucleoside conjugates |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
CHEMICAL ABSTRACTS, vol. 98, 1983, page 362, résumé no. 132201z, Columbus, Ohio, US; M. MACCOSS et al.: "Synthesis and biological activity of novel nucleoside-phospholipid prodrugs", & PROC. INT. ROUND TABLE NUCLEOSIDES, NUCLEOTIDES THEIR BIOL. APPL., 4th 1981 (Pub. 1982) * |
JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 25, 1982, pages 1322-1329, American Chemical Society, Columbus, Ohio, US; E.K. RYU et al.: "Phospholipid-nucleoside conjugates. 3. Syntheses and preliminary biological evaluation of 1-beta-D-arabinofuranosylcytosine 5'-monophosphate-L-1,2-dipalmitin and selected 1-beta-D-arabinofuranosylcytosine 5'-diphosphate-L-1,2-diacylglycerols" * |
SYNTHESIS, mai 1982, pages 402-404, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, DE; F. RAMIREZ et al.: "Synthesis of phospholiponucleosides" * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0347852A2 (fr) * | 1988-06-20 | 1989-12-27 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Dérivés de néplanocine |
EP0347852A3 (fr) * | 1988-06-20 | 1991-09-11 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Dérivés de néplanocine |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IT1188654B (it) | 1988-01-20 |
DE3612636C2 (de) | 1993-11-18 |
GB2175588A (en) | 1986-12-03 |
US4797479A (en) | 1989-01-10 |
FR2580283B1 (fr) | 1989-11-24 |
GB8609112D0 (en) | 1986-05-21 |
DE3612636A1 (de) | 1986-11-06 |
GB2175588B (en) | 1988-08-10 |
IT8620090A1 (it) | 1987-10-15 |
IT8620090A0 (it) | 1986-04-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FR2580283A1 (fr) | Nouveau conjugue nucleoside-phospholipide | |
EP0642528B1 (fr) | Composes biologiquement actifs de type phosphotriesters | |
TW201802105A (zh) | 用於製備菸醯胺核苷之合成方法及相關化合物 | |
WO1992019620A1 (fr) | Nouveaux derives de pyrrolo [1, 4]-benzodiazepines, leur procede de preparation et medicaments les contenant | |
JPH05507929A (ja) | エーテル脂質―ヌクレオシド共有結合体 | |
EP0352301A1 (fr) | Esters de l'acide n-butyrique et leur utilisation comme medicaments | |
FR2763953A1 (fr) | Derives de 5'-desoxy-cytidine | |
BE897516A (fr) | Nouveaux derives de la desoxyuridine leur preparation et leur utilisation comme medicaments | |
EP2024379B1 (fr) | Nouveaux composes c-glycosides gem-difluores derives de la podophyllotoxine, leur preparation et leurs applications | |
EP1101770B1 (fr) | Nouveaux dérives de 12,13-(pyranosyl)-indolo(2,3-a)pyrrolo(3,4-c)carbazole et 12,13-(pyranosyl)-furo(3,4-c)indolo(2,3-a)carbazole, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
EP0318392A1 (fr) | Nouveaux dérivés N-(vinblastinoyl-23) d'acide amino-1 méthylphosphonique, leurs procédés de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
FR2574412A1 (fr) | Procede de fabrication de derives de nucleosides utiles notamment comme agents anticancereux | |
FR2922551A1 (fr) | Prodrogues phosphoesters de la gemcitabine comme agents anticancereux | |
BE1003519A3 (fr) | Nouveaux derives de la carbonyl-2 n,n'-di-(trimethoxybenzoyle) piperazine, un procede pour leur preparation et compositions therapeutiques en contenant. | |
EP1438320A1 (fr) | Nouveaux derives d'hydroxyalkyle indolocarbazole, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
FR2554450A1 (fr) | Glycosides de 4'-halo-anthracycline, procede pour les preparer et leur emploi comme medicament | |
FR2571374A1 (fr) | Nouveaux derives de 5-fluoro-2'-desoxyuridine et leurs sels, leur procede de preparation, et agents antitumoraux les contenant | |
US3751408A (en) | Imidazole-ribosyl cyclophosphate compounds and therapeutic compositions | |
FR2631964A1 (fr) | Glucosyl phosphotriesters de derives de thymidine ayant une activite contre les retrovirus | |
BE1004365A4 (fr) | Derive nucleotidique. | |
EP3021669B1 (fr) | Nouveaux composes dérivés de la solanidine | |
JPH0560476B2 (fr) | ||
EP0229128A1 (fr) | Derives de glycero-3(2)-phospho-l-serine et preparations pharmaceutiques les contenant. | |
CA2022538C (fr) | Derives n-(vincristinoyl-23) et n-(noranhydro-5' vinblastinoyl-23) d'acide amino-1 methylphosphonique, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
Leisvuori et al. | Chemical and enzymatic stability of amino acid derived phosphoramidates of antiviral nucleoside 5′-monophosphates bearing a biodegradable protecting group |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TP | Transmission of property | ||
ST | Notification of lapse |