FR2578425A1 - Preparations d'immunoglobulines presentant des titres eleves en anticorps bloquants anti-allergenes, leur preparation et leurs applications pour le traitement d'allergies - Google Patents

Abstract

LES PREPARATIONS A BASE D'IGG DE L'INVENTION PRESENTENT UN TITRE EN IGG4 D'AU MOINS 4 ET UN TAUX DE CHAINES POLYMERE D'AU MOINS 10, LEUR TITRE EN ANTICORPS, ANTI-ALLERGENES, ANTI-POLLENS ET ANTI-ACARIENS ETANT D'AU MOINS 4 UML DE PREPARATION.

Description

"Préparations d'immunoglobulines présentant des titres
élevés en anticorps bloquants anti-allergènes, leur prépara
tion et lieurs applications pour le traitement d'allergies.

L'invention a pour objet des préparations d'immunoglobulines présentant notamment des titres élevés en anticorps bloquants antiallergènes, leur préparation et leurs applications pour le traitement d'allergies.

Les manifestations allergiques sont liées à la présence d'anticorps de type IgE ou réagines présentes à la surface des cellules immunitaires et dans le sang circulant.

Ces anticorps IgE spécifiques des allergènes
sont présents à des taux élevés chez les sujets sensibilisés.

Les anticorps de type IgG dirigés contre ces mêmes allergènes exercent un effet protecteur vis-à-vis des réactions anaphylactiques nées de la rencontre IgE et allergènes.

Ces anticorps IgG sont appelés anticorps bloquants. Leur présence peut être mise en évidence dans le sérum de sujets ne présentant pas de réaction aller3ique. Leur taux sté-
lève lors des cures de 8ésensibilisation par des extraits d'allergènes (pollens, acariens, ou venins d'hyménoptères), leur élévation étant concomitante avec la diminution des manifestations cliniques.

Diverses préparations à base d'IgG sont utilisées ac
tuellement pour diminuer les réactions allergiques. Ces
préparations sont obtenues par extraction à partir de
plasma humain. La méthode d'extraction de Kistler P.,
Nitschmann H.et LergiRr W. décrite dans Helvetica Chimica Acta (1954), 37, p.866-873, modifiée par Kistler P. et
Nitschann H.comme décrit dans Vox Sanguinis 1962, t.7,Vol.4,P.414-424.

est généralement utilisée. Cette méthode, basée sur le fractionnement alcoolique, comprend l'addition à du plasma d'alcool, jusqu'à une concentration finale en alcool de
19 ou 22%, à un pH de 5,85. Le précipité qui se forme appelé précipité A, renferme les fractions I (fibrinogène, facteur TIII)et II+III (IgG, facteurs II,VII,IX,X et les o( et (3lobulinés).

T es préparations à base d'IgG utilisées en thérapeutique sont généralement obtenues à partir des tractions 11+111.

En étudiant se fractionnement, les inventeurs ont constaté qu'en traitant dans des conditions déteroinéea, l'ensemble du précipité A, il est possible de sélectionner des préparations à base d'IgG à titre plus élevé en anticorps bloquants anti-allergènes, permettant de réduire- avec une plus grande efficacité les manifestations allergiques.

L'invention a donc pour but de fournir de nouvelles préparations à base d'IgG possédant des propriétés immuno modulatrices anti-allergènes.

-Elle vise également à fournir un procédé permettant de sélectionner à partir de plasma de telles prpara- tions.

Elle vise, en outre, les applications de ces préparations pour le traitement de manifestations allergiques par immunothérapie passive.

Les préparations à base d'IgG selon l'invention sont caractérisées en ce qu'elles présentent un titre en
IgG de la sous-classe 4 ,ou IgG 4, d'au moins 4% et des titres en anticorps bloquants anti-allergènes, en particulier anti-pollens et anti-acariens d'au moins 15 u/ml de préparation environ, généralement d'au moins 15 u/ml.

Selon un autre aspect, les préparations à base d'IgG de l'invention présentent, outre un titre en IgGtd'au moins 4%, un taux de channes polymères d'au moins 10%.

Selon encore un autre aspect, les préparations à base d'IgG de l'invention présentent en plus de leur titre en IgG4 d'au moins 4%, et de leur taux en channes polymères d'au moins 10%, des titres en anticorps bloquants anti-allergènes, en particulier anti-pollens et anti-acarien d'environ 20 u/ml de préparation, généralement d'au moins 15 u/ml.

Les préparations ci-dessus, selon une disposition de l'invention renferment en moyenne a0 à 90%, notamment 85% environ d'IgG,. 7 à 15%, notamment 10% environ d'IgA, et 3 à 8%, notamment 5% environ d'IgM.

Dans la suite de la description, l'expression "préparatiors d'IgG " désigne des préparations à base d'IgG.

L'invention -vise également un procédé de fractionnement de préparations d'IgG répondant aux caractéristiques définies ci-dessus.

Conformément à ce procédé, on soumet les fractions d'IgG obtenues par précipitation alcoolique de plasma humain à l'action d'un acide gras linéaire satu ré,-de préférence de C4 à C12, et on récupère la partie soluble.

Selon une disposition avantageuse, la solution recueillie est soumise à au moins une étape de purification
Dans un mode préféré de réalisation de l'invention, les fractions d'IgG utilisées comme matière de départ sont du type de celles résultant de fractionnement alcoolique de plasma humain à l'aide d'éthanol à 95%, en quantité suffisante pour une concentration fiole de 19 à 22%, à pH 5,85, avec abaissement graduel de la température jusqu'à - 100C.

Ce type de fractionnement alcoolique est décrit par Kistler et Nitschmann dans la référence donnée ci-dessus.

L'addition d'alcool au plasma conduit à la formation d'un précipité appelé précipité A, qui renferme les fractions I+II+III
Le précipité A est remis en solution aux fins
du fractionnement à laide de l'acide gras saturé.

On utilise avantageusement une solution tampon
de pH 4,5 à 5,5, de préférence voisin de 4,8.

L'acide gras saturé est ajouté à raison d'en
viron 10 à 50 g/l, de préférence d'environ 20 gil à la
solution tampon renfermant le précipité A, pour une concen tration de cette solution en protéines de l'ordre de
20 à 30 g/l,de préférence d'environ 25 g/l.

Le précipité formé est éliminé, par exemple, par centrifugation et le surnageant qui renferme les fractions recherchées est recueilli
Un acide gras particulièrement préféré, permettant de protéger avec une grande sélectivité des
IgG est constitué par l'acide caprylique.

Compte-tenu des applications thérapeutiques des préparations d'IgG de l'invention, la solution d'acide gras obtenue, plus spécialement la solution caprylique, est soumise avantageusement à au moins une étape de purification.

Il s'agit, en particulier, d'éliminer l'acide gras lié aux protéines et l'acide gras en excès.

A cet égard, il est avantageux d'utiliser un adjuvant doté 'une affinité pour les acides gras, notamment, un sel tel que le phosphate tricalcique.

Auparavant, le pH est ajusté avantageusement à environ 6,5.

Des concentrations de l'ordre de 1 à 5 d'adjuvant, notamment de l'ordre de 2 à 4 s'avèrent satisfaisantes pour effectuer la séparation recherchée
L'adjuvant en excès est éliminé, par exemple, par centrifugation et la solution ainsi clarifiée est récupérée.

D'autres étapes de purification permettent de parfaire, si on le souhaite, la séparation entre l'acide gras et la préparation d'IgG de l'invention.

Des méthodes appropriées comprennent la précipitation alcoolique ou encore un procédé de séparation basé sur la différence de taille entre les Ig et les acides gras tels que la dialyse ou l'ultrafiltration.

Lorsqu'on effectue une précipitation alcoolique, le pH de la solution traitée est avantageusement ajusté à environ 7.

Des conditions satisfaisantes pour la précipitation alcoolique comprennent l'addition d'alcool, avantageusement d'éthanol jusqu'à une concentration finale d'environ 20 à 40 %, notamment, de l'ordre de 30%, à température inférieure à l'ambiante de préférence sur la solution refroidie à environ OOC dont la température est abaissée jusqu'à -10 C à -150C, en particulier - 120C environ durant l'addition d'alcool. Le précipité formé est recueilli. La solution avantageusement clarifiée d'IgG évoquée ci-dessus ou le précipité recueilli à l'issue de la précipitation alcoolique sont avantageusement traités afin de disposer de préparations injectables.

Ce traitement comprend une opération du type de la dialyse ou encore de l'ultrafiltration.

De bonnes conditions d'injection par oie intramusculaire sont réalisées avec des préparations renfermant environ 100 gil de protéines. Ces concentrations sont obtenues par exemple par dialyse contre NaCl à raison de 3 à 7 g/l de NaCl, de préférence d'environ 4,5 g/l, à une température inférieure à l'ambiante, avantageusement d'environ 40C.

L'osmolarité de la solution est ajustée à environ 250 à 500 mOsM/l, notamment à environ 300 mOsm/l, à l'aide, par exemple, d'un agent solubilsant et stabilisant tel que le glycocolle.

Grâce à ces dispositions, il est possible de sélectionner, à partir de l'ensemble du précipité A, des préparations d'IgG de grand intérêt.

Les titres élevés en anticorps bloquants antiallergènes des préparations de l'invention etc selon un autre aspect, leur teneur élevée en polymères d'IgG les rendent particulièrement appropriés pour le traitement des allergies.Leur intérêt est encore accru en raison de leur tolérance élevée.

L'invention vise donc également l'application des préparations définies ci-dessus, en tant que principes actifs de médicaments.

Les expérimentations cliniques en double aveugle réalisées avec les préparations de l'invention, injectées à un patient sensibilisé ont montré l'efficacité de ces préparations dans une immunothérapie passive et en partie ont permis de diminuer de manière importante les manifestations allergiques observées dans les pollinoses saison nières.

Les médicaments de l'invention sont utilisables pour le traitement des affections allergiques, en particulier, des pollinoses saisonnières ou des rhinites allergiques saisonnièresou nOn,dues aux pollens ou aux poussières de maison.

Chez les sujets atteints de rhume de foins, l'in- jection répétée à des intervalles réguliers, permet de prévenir ou d'atténuer les manifestations cliniques de 1 'al- lergie, qu'elles soient nasales, oculaires ou respiratoires.

Ces médicaments constituent des adjuvants de la désensibilisation pa rticulièrement intéressants des
IgG en début de dasensibilisation en renforçant et en complétant la désensibilisation, en permettant une progression plus rapide des quantités d'allergènes injectés et en évitant le recours à la corticothérapie.

Cette immunothérapie passive n'interfère pas avec l'immunothérapie active (désensibilisation). L'ìn- jection d'anticorps IgG anti-allergènes n'empêche pas la montée des anticorps IgG observée lors de la désensibilisation. Les médicaments de l'invention peuvent donc être utilisés conjointement avec les cures de désensi bilisation qu'elles soient anciennes ou récentes.

Ils sont également utilisables en cas d'échec de désensibilisation ou de désensibilisation tardive.

L'intérêt des médicaments de l'invention est de plus important lors d'une recrudescence des manifestations allergiques après une maladie virale ayant entrainé une immuno-dépression fonctionnelle temporaire, de coryza spasmodique apériodique,et de rhino-trachéo-bronchites allergiques dues en particulier aux poussières de maison.

Les médicaments de l'invention sont injectables par voie intramusculaire.

Ils sont présentés avantageusement sous la forme de seringues, auto-injectables par voie intramusculaire, contenant, par exemple, 5 ou 10 ml d'une solution à 100 g par litre de préparation d'lgG selon l'invention.

Des pré?arat.ons d'ISG préférées répondent aux caractéristiques suivantes.

Il s'agit de préparations stériles, apyrogènes, atoxique3 de pH 6, 4 à 7,2 environ, renfermant avantageusement de l'ordre de 100 à 170 g/l de protéines totales. Leur activité en anticorps est supérieure à 15 u/ml en tant qu'anti-pollens et supérieure à 15/ml en tant qu'anti-acariens. La pureté électrophorétique de ces préparations est supérieure à 90% environ et l'osmo- larité est de l'ordre de 250 à 500 mO sm/l.

Ces solutions renferment avantageusement
un agent antiseptique, conservateur tel que le
mercurothiolate de sodium. Des doses inférieures ou
égales à 1 pour 10 000 environ de cet agent s'avèrent
appropriées. Elles comportent, en outre,un agent de solubi
lisation et de stabilisation tel que le
glycocolle. Des concentrations appropriées en
glycocolle sont de l'ordre de 18 à 25 g/l. Les teneurs
en sodium et en chlorure sont d'environ 7 g/l.

A titre d'exemple, on donne ci-après les posologies utilisables dans le cas a) de manifestations allergiques moyennes et b) de manifestations sévères
a) Forme moyenne
- poids du malade inférieur à 60 kg
2 injections de 5 ml par semaine pendant
trois semaines,
- poids du malade supérieur à 60 kg : 2 injec
tions de 10 ml par semaine pendant trois
semaines.

b ) Forme sévère
- poids du malade inférieur à 60 kg : 3 à 4
injections de 5 ml par semaine pendant trois
semaines,
- poids du malade supérieurà 60 kg : 3 à 4
injections de 10 ml par semaine pendant trois
semaines.

EXEMPLE,: Procédé d'obtention d'une fraction d'IgG
selon l'invention 1.- Préparation de la matière de départ par fractionnement alcoolique à partir de plasma.

On décongèle de manière ménagée du plasma provenant de poches ou de flacons de poolages, ou des poches individuelles conservés à - 40 C.

On réchauffe progressivement par passage en chambre froide à - 100C et OOC puis on décongèle dans un bain-marie à +30C, de telle sorte que la température finale demeure inférieure à +30C.

Après vérification du taux de protéines, du pH et examen bactériologique, et élimination du cryoprécipité, on effectue un fractionnement par l'éthanol selon la méthode de Nitschmann Kistler dont question ci-dessus.

On rappelle que les étapes principales de ce fractionnement alcoolique comprennent
- l'ajustagedu taux de protéines à 5 gil à l'aide d'une solution de chlorure de sodium à 0,5 g%,
- la précipitation des immunoglobulines à pH 5,85 par l'éthanol à 95% en quantité suffisante pour une concentration finale de 19% (ou 22%),en faisant graduellement baisser la température jusqu'à - 100C,
- la centrifugation et la récupération du précipité constituant les immunoglobulines (précipité A). et, le cas échéant,
- la congélation à - 250 C.

Le précipité A qui renferme les fractions I+II+III se présente sous forme de pâte.

2.- Fractionnement caprylique
a) remise en solution
Le précipité est remis en solution dans un mélange tampon acétique/acétate de pH 4;8-4,9 obtenu par mélange d'une solution 0,05 M d'acide acétique et d'une solution 0,05M d'acétate de sodium.

On utilise 94 de tampon par kg de pâte. On
observe une dilacération progressive de la pâte dans le tampon, à une -température de 20 à 22 OC.

On laisse le mélange environ 2 heures au repos, aux fins d'homogénéisation.

Le taux de protéines est d'environ 25 gil.

b - précipitation caprylique α: : Addition d'acide caprylique
On ajoute, sous agitation, 20 g/l d'acide caprylique (pureté 99%-réf. 193-Merck). Après la fin de l'introduction, on continue l'agitation encore 45mn.

: Centrifugation
Sans laisser la suspension se refroidir, on centrifuge avec un débit d'environ 50 l/h(appareil
Sharples AS 16). On élimine le précipité (environ 40 kg et on recueille le surnageant (environ 360 à 380#),
K Ajustement du pH
On ajuste le p du surnageant à ó,5 à l'aide de 10 à 12 1 environ de NaOH
#:Addition de phosphate tricalcique
On ajoute du phosphate tricalcique à raison de 2 g/l de surnageant et on soumet à agitation pendant 30 mn.

: Centrifugation
On élimine le phosphate,par une centrifugation effectuée selon les conditions ci-dessus.

: : Filtration
Le surnageant est filtré sur des plaques contenant du charbon actif (par exemple plaques Seitz
AKS4). L'opération dure 1 h environ.

: Ajustement du pH
On ajuste le pH à 7 avec NaOH ou CH3COOH.

: : Précipitation desIgG par l'éthanol à 30%
On ajoute de l'éthanol qsq 30% sur la solution prérefroidie à OOC. Durant l'addition d'alcool, on abaisse la température à - 120C.

e : Centrifugation
La solution est centrifugée tout d'abord avec un débit de 30 l/h (on utilise un appareil Sharples AS 16) puis à raison de 40 l/h (sur un appareil AS 26).

On recueille 12 kg de précipité, bleuâtre, qui présente un aspect visqueux.

k : Remise en solution
Le précipité est remis en solution à raison de 5 l/kg dans 60 1 un tampon NaCl : 4,5 g/l, glycocolle 4,5 g/l.

Le pH est ajusté à 7,5 si nécessaire. Le taux de protéines est d'environ 50 g/l.

: : Dialyse ou ultrafiltration
La solution, préalablement filtrée, est dialysée contre NaCl (4,5 g/l) à + 4 C durant environ 10 heures.

On vérifie le taux de protéines (environ 140 gel).

On ajuste l'osmolarité de la solution à environ 300 mOsm/l à l'aide de glycocolle (1lg/l). On ajoute du merthiolate de sodium (1 p 10000), puis on filtre stérilement sur un filtre avec des diamètres de pores de 0,22 4 (pas de colmatage).

Préalablement à la répartition en seringue, on ajuste le taux de protéines à 100 g/l minimum (en pratique 105 à 110 g/l). On complète les doses de sels, de glycocolle et de merthiolate selon dilution, ,uis on filtre stérilement. Ces préparations sont conservées de pre er ence a une température de l'ordre de +2 à +60C.

Evaluation des taux d'IgG, d'IgA, d'IgM et de la
sous-classe IgC4 des IgG
On opère selon la technique décrite par
Mancini et al dans Immuns Chemistry, No 3, p. 235, 1965.

On utilise un antisérum spécifique du commerce (de marque
Nordic ou Croix Rouge Hollandaise par exemple), et des témoins du taux d'IgG ou IgA ou IgM connu. Le témoin pour les IgG4 est constitué par un pool de 50 donneurs de sang sains dont le taux d'IgG4 est de 0,4 g/l.

Les résultats montrent que les préparations d'IgC selon l'invention contiennent en moyenne 85% d'IgG, 10% d'IgA et 5% d'IgM. Leur taux d'IgG 4 est supérieur ou égal à 4%.

La comparaison de six lots de préparation selon l'invention et six lots de gamma globulines fractionnées par l'alcool donne un taux moyen de 4,5% d'IgC 4 pour les premières et de 2% pour les secondes. Le pool de plasma témoin contenait 3 QI d'IgG 4.

Dosage de l'activité des anticorps anti-aller
gènes de type IgG, (anticorps bloquants)
a - principe de dosage
Les anticorps anti-allergène-s sont mesurés par un test radio-immunologique en phase solide. Des disques de nitro-cellulose sur lesquels ont été couplés d'une manière covalente les extraits d'allergènes sont incubés avec des dilutions de sérums ou d' immunoglobulines.

Après plusieurs lavages, les disques sont incubés avec la protéine A du staphylocoque marquée à l'iode 125 (service des Radio-isotopes, C.N.T.S.). La protéine A se fixe avec une haute affinité sur la partie Fc de 93% des IgG humaines.

Après 18 h de contacts, la protéine A non fixée est éluée par une série de lavages.

La quantité de protéine A liée aux IgG est mesurée par un compteur de rayonnement gamma et exprimée en % par rapport à la quantité totale de radioactivité introduite dans la réaction.

b - calcul du nombre d'unités présentes dans
les solutions de l'invention.

L'activité d'un pool de sérum de 100 donneurs (2m de chaque sérum) sert de référence et contient par définition 1 unité/ml. Elle est mesurée avec des dilutions desérum comprises entre 1/200 et 1/25. On établit une courbe de référence entre la dilution du pool de sérum et le
pourcentage de fixation de la protéine A.

Les solutions de gammaglobulines thérapeutiques sont diluées de manière à obtenir un pourcentage de fixation de la protéine correspondant à des dilutions d'environ 1/100 du pool de sérums.

La courbe de référence précédemment établie permet alors de calculer le nombre d'unités/ml d'immunoglobulines anti-allergènes présentes dans la solution thérapeutique.

c - normes
Les anticorps IgG sont dosés quant à leur activité vis-à-vis d'au moins un extrait de pollen de graminées (Phleum pratense, ou Dactylis glomerata) et d'un extrait d'acariens (Dermatophagoides pteronyssinus).

Le titre en anticorps bloquants anti-allergènes des préparations d'IgG. selon l'invention est au minimum de 15 AÂ/ml anti-pollens et de 15 w/.ml anti-acariens.

La moyenne de l'activité anti-pollen de 16 lots de préparation selon l'invention est de 23 /mol, le taux en anti-acariens étant identique ou légèrement supérieur.

Taux de polymères
On effectue une chromatographie de perméation avec un gel séparant les protéines de PM compris entre 20 000 et 350 000 daltons.

Les résultats ci-après ont été obtenus en opérant comme suit
On utilise une colonne de 100 cm, diamètre 2,5 cm, contenant comme gel, le produit commercialisé sous la marque Ultrogel AcA 34 (LKB). On dépose 100 mg de protéines dans 2,5 ml
Le débit d'élution est de 20 ml/h.

Les pics sont détectés à 280 mm (mesure de la densité optique). On évalue la surface par planimétrie.

Les résultats obtenus montrent que les taux de polymères des préparations d'IgG de l'invention sont supérieurs à 10% (moyenne de 5 lots 15%) alors que les fractions d' immunoglobulines fractionnées par l'alcool dépassent rarement 5% (moyenne de 13 lots 4,5%).

L'étude de la composition des fractions monomères, dimères et polymères despréparations de I' inven- tion a montré une variation de composition en immunoglobuline de chacune des fractions
On rapporte dans le tableau ci-après les différents taux d'IgG, IgA et IgM respectivement mesurés.

Préparation Fraction "dimères" "monomères"
de l'invention polymérisée
lgG 85 % 50 % - 70 % 95 % IgA 10 96 10 % < N25 5%
IgM 5 % 40 % - 4, 5% 0%
EXEMPLE 2 : Résultats relatifs aux essais cliniques
effectués avec des solutions de préparation
selon l'invention -
On ut-ilise des solutions à 100 g/l de préparations d'IgC selon l'invention, titrant 15 unités/ml anti-pollen et 15 unités/ml anti-acariens et renfermant en tant qu'additif 1 p 10000 de mercurothiolate.

Selon le protocole thérapeutique utilisé, on a effectué une série d'injections intramusculaires de préparation selon l'invention, à raison de 20ml/semaine, durant 5 semaines. L'évaluation de l'activité était effectuée par une observation journalière dés symptomes de la maladie. Les manifestations cliniques (nasales, oculaires et respiratoires) étaient notées. Sur 33 malades soumis à ce traitement, on a obtenu 15 très bons résultats, 10 bons résultats ; 8 échecs ont été observés.

Dans une autre expérimentation, sur 19 sujets, on a obtenu 8 très bon résultats, 3 bons résultats et 8 échecs.

Le troupe placebo se dstngue du groupe de malades traités par la préparation selon l'invention par un "score symptômes" satistiquement moins important lors des trois dernières semaines du traitement et par une consommation médicamenteuse significativement inférieure.

Les divers essais réalisés ont montré que la tolérance des préparations d'IgG selon l'invention est toujours satisfaisante et qu'une amélioration des signes cliniques de la maladie était observée.

Claims (13)

REVENDICATION

1.- Préparations à base d'IgG, caractérisées en ce qu'elles présentent un titre en IgG de la sous-classe 4, ou IgG 4 d'au moins 4% et des titres en anticorps bloquants anti-allergènes, en particulier anti-pollens et anti-acariens d'au moins 15 u/ml de préparation environ, généralement d'au moins 15 u/ml.

2.- Préparations à base d'IgG, caractérisées en ce qu'elles présentent un titre en IgG4 d'au moins 4% et un taux de chaînes polymères d'au moins 10X.

3.- Préparations à base d'IgG, caractérisées en ce qu'elles présentent un titre en I}G4 d'au moins 4%, un taux en chaînes polymères d'au moins 10% et des titres en anticorps bloquants anti-allergènes, en particulier anti-pollens et anti-acariens d'environ 20 u/ml de préparation, généralement d'au moins 15 u/ml.

4.- Préparations selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisées en ce qu'elles renferment en moyenne 80 à 90%, notamment 85% environ d'IgG, 7 à 15%, notamment 10% environ 'd 'IgA, et 3 à 8%, notamment 5% environ d'IgM.

5.- Préparations à base d'IgG, selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé-es en ce qu'il s'agit de préparations stériles, apyrogènes, atoxiques de pH 6, 4 à 7,2 environ, renfermant avantageusement de l'ordre de 100 à 170 g/l de protéines totales, présentant une activité en anticorps supérieure à 15 u/ml en tant qu'anti-pollens et supérieure à 15 u/ml en tant qu'anti-acariens, une pureté électrophorétique supérieure à 90% environ et une osmomolarité de l'ordre de 250 à 500 mOsm/l, ces préparations renfermant avantageusement un agent antiseptique, conservateur , tel que le mercurothiolate de sodium, en particulier, à des doses inférieures ou égales à 1 pour 10 000, ainsi qu'un agent de solubilisation et de stabilisation tel que le glycocolle, en particulier à raison de 18 à 25 g/l environ.

6.- Procédé d'obtention de préparations d'IgG selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'on soumet les fractions d'immunoglobulines obtenues par précipitation alcoolique de plasma humain à l'action d'un acide gras linéaire saturé, de préférence de C4 à C12, et que la partie soluble est soumise avantageusement à au moins une étape de purification.

7.- Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que les fractions d'IgG utilisées comme matière de départ sont du type de celles résultant de fractionnement alcoolique de plasma humain à l'aide d'éthanol à 95%, en quantité suffisante pour une concentration finale de 19 à 22%, à pH 5,85, avec abaissement graduel de la température jusqu'à -100C, l'addition d'alcool conduisant à la promotion d'un précipité A renfermant les IgG.

8.- Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que le précipité A, remis en solution, en particulier dans une solution tampon de pH 4,5 à 5,5, de préférence voisin de 4,8, est traité par addition d'un acide gras saturé, en partie par environ 10 à 50% , de préférence environ 20g/l de solution tampon renfermant le précipité A, pour une concentration de cette solution en protéines de l'ordre de 20 à 30 g/l, de préférence 25 g/l.

9.- Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'on utilise, comme acide gras saturé, de l'acide caprylique.

10.- Procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 9, caractérisé en ce qu'il comporte, en outre, au moins une étape de purification telle que l'addition d'un adju- vant doté d'une affinité pour les acides gras, notamment d'un sel, tel que le phosphate tricalcique, de préférence à raison de 1 à 5 g/l, notamment de 2 à 4 g/l et/ou une

étape de précipitation alcoolique et/ou une séparation basée sur la différence de taille entre les Ig et les acides gras tels que la dialyse ou l'-ultrafiltration.

11.- Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que l'acétyl de précipitation alcoolique est réalisée par addition d'alcool, avantageusement d'éthanol jusqu'à une concentration finale d'environ 20 à 40%, notamment, de l'ordre de 30%, à température inférieure à l'ambiante, de préférence sur la solution refroidie à environ OOC dont la température est abaissée jusqu'à -100C à -150C, en particulier -120C environ durant l'addition d'alcool, et que la dialyse est effectuée contre NaCl à raison de 3 à 7 g/l de NaCl, de préférence d'environ 4,5 g/l, à une température inférieure à l'ambiante, avantageusement d'environ 4 C et qu'on ajoute ltosmomolarité de la solution à environ 250 à 500 mOsM/l notamment à environ 300mOsm/l, à l'aide, par exemple, d'un agent solubilisant et stabilisant. tel que le glycocolle.

12.- Médicaments caractérisés (?n re r ils renferment dans leur principe actif au moins une préparation d'IgG selon l'une quelconque des revendications 1 à 5.

13.- Médicaments selon la revendication 12, caractérisés en ce qu'ils se présentent sous forme de solutions stériles injectables par voie intramusculaire.