FR2539132A1

FR2539132A1 - Derives o-phosphonylmethyliques isomeres de diols vicinaux enantiomeres et racemiques et procede de leur preparation

Info

Publication number: FR2539132A1
Application number: FR8400116A
Authority: FR
Inventors: Antonin Holy; Ivan Rosenberg; Karel Slama
Original assignee: Czech Academy of Sciences CAS
Current assignee: Czech Academy of Sciences CAS
Priority date: 1983-01-06
Filing date: 1984-01-05
Publication date: 1984-07-13
Also published as: SE8400039D0; DE3400278C2; IT8419041A1; FR2539132B1; SE8400039L; CS233665B1; IT1174451B; DE3400278A1; GB2134907A; SE454591B; IT8419041A0; GB2134907B; US4659825A; BE898620A; GB8400168D0; CH666039A5

Abstract

Dérivés O-phosphonylméthyliques isomères de diols vicinaux énantiomères et racémiques et procédé de leur préparation ; les composés de l'invention répondent à la formule générale I : (CF DESSIN DANS BOPI) dans laquelle R**1 désigne un atome d'hydrogène, un radical alkyle ayant 1 à 3 atomes de carbone, un radical hydroxyalkyle ou un radical adénine-9-ylméthyle, R**2 et R**3 représentent des atomes d'hydrogène ou font partie ensemble d'un cycle ribonucléoside, les deux symboles R**4 sont l'un un atome d'hydrogène et l'autre un radical -CH2P(O)(OH)2, et la configuration des atomes de carbone est R, S ou RS ; un procédé de leur préparation est également décrit ; ces composés ont une activité biologique comme inhibiteurs de processus métaboliques, et, dans l'organisme, ils sont stables vis-à-vis des enzymes clivant les liaisons monoesters phosphoriques ; les composés ont également une action chimiostérilisante sur les insectes.

Description

L'invention concerne des dérivés O-phosphonylméthyliques isomères de diols

vicinaux énantiomères et racémiques et

un procédé de leur préparation.

Les esters d'acide phosphorique ont une importance capi-

tale dans les processus qui se produisent dans la matière vivante Les analogues isostères de ces composés peuvent agir comme des inhibiteurs des processus métaboliques et présentent donc une activité biologique Une condition importante de leur

emploi pratique est leur stabilité dans l'organisme, en parti-

culier vis-à-vis des enzymes qui clivent les liaisons mono-

esters phosphoriques Cette condition est remplie dans le cas des dérivés O-phosphonylméthyliques des alcools qui, à de

nombreux égards, ressemblent aux organophosphates naturels.

Cependant, ces composés contiennent, entre l'atome de phospho-

re et l'atome de carbone, une liaison qui est stable vis-à-vis des enzymes On peut préparer ces dérivés par réaction dl

alcoolates avec des esters de l'acide chlorométhanephospho-

nique (E N o Walsh, T M Beck, A Do Fo Toy: J Amer o Chem S Oq.

78, 4455 ( 1956)), par réaction du trichlorure de phosphore avec des formals (brevet US N 2 500 022) ou par traitement de diesters de l'acide p-toluènesulfonyloxyméthanephosphonique avec un alcoolate de sodium (certificat d'auteur tchèque PV 4087-81) Cependant, toutes ces réactions nécessitent une

hydrolyse ultérieure des esters phosphoniques qui ne sleffec-

tue que difficilement.

La condition de stabilité chimique et enzymatique est

remplie par les nouveaux composés de l'invention, cgest-à-

dire les dérivés O-phosphonylméthyliques isomères de diols vicinaux énantiomères et racémiques de formule générale I

R 2 R 3

1 1 4

R -C CH-OR (I)

1 4 OR 4 dans laquelle R désigne un atome d'hydrogène, un radical alkyle ayant 1 à 3 atomes de carbone, un radical hydroxyalkyle ou un radical adënine-9-ylméthyle, R 2 et R 3 représentent des

atomes d'hydrogène ou font partie ensemble d'un cycle ribo-

nucléoside, les deux R sont l'un un atome d'hydrogène et 1 '

autre un radical -CH 2 P(O)(OH) 2, et la configuration des ato-

mes de carbone est R, S ou RS.

L'invention concerne de plus des dérivés O-phosphonyl- méthyliques isomères de formule générale IV

R -CH 2 CHCH 20 R (IV)

OR dans laquelle R 5 représente un fragment adénine-9-yle ou un

radical hydroxy, R 4 a la même signification que dans la formu-

le I et la configuration de l'atome de carbone en position

2 est Sl R ou RS.

Le procédé de préparation des composés de formule I con-

siste en la réaction de composés de formule générale II

R 2 R 3

il Rs

1 1 1

R CH-OH (Ix) OH dans laquelle R, R 2 et R 3 ont la même signification que dans la formule I, avec 1-2 équivalents de dichlorure de chlorométhanephosphonyle de formule III Cl CH 2 P(O)C 12 ( 2 III) et simultanément avec 2 équivalents (par rapport au composé III) d'une base tertiaire, de préférence la pyridine, dans un solvant organique aprotique, de préférence la pyridine, à des températures de O à 80 C, après quoi on traite le mélange réactionnel avec une solution aqueuse d'un hydroxyde de métal

alcalin à des températuresde O à 100 C et on isole les compo-

sés de formule I par élimination des sels, de préférence par

chromatographie, sur une résine échangeuse d'ions.

Le procédé de préparation des composés de formule IV, o R représente un fragment adénine-9-yle, est caractérisé

en ce qu'on fait réagir des composés énantiomères ou racémi-

ques de formule générale V N R 6 IN ICI if (V)

N N

CH 2 CH-CH 20 H

i OH R 66 dans laquelle R désigne un atome d'hydrogène ou les 2 R 6 forment ensemble un radical =CH-N(CH 3)2 avec le chlorure de chlorométhanephosphonyle de formule III, après quoi on traite le mélange réactionnel de la même façon que décrit ci-dessus

et on isole les composés de formule générale I par élimina-

tion des sels du mélange réactionnel.

Egalement, le procédé de préparation des composés de

formule générale IV o R 5 estun radical hydroxy est caracté-

risé en ce qu'on fait réagir les composés énantiomères ou racémiques de formule générale VI

R 7 OCH 2 CHCH 2 OR 9 (VI)

OR

dans laquelle R 7 désigne un radical benzoyle ou triphényl-

8 9 7

-méthyle et R et R sont des atomes d'hydrogène, ou R dé-

signe un radical triphénylméthyle, R 8 est un atome d'hydrogène

9 7

et R est un radical benzoyle ou acétyle, ou R est un hydro-

gène et les deux symboles R 8 et R 9 forment ensemble un radical isopropylidène, avec le dichlorure de chlorométhanephosphonyle de formule III, o après quoi on traite le mélange réactionnel de la même façon

que décrit ci-dessus et on isole les composés de formule géné-

rale I par élimination des sels du mélange réactionnel.

La réaction repose en principe sur la formation du mono-

ester de l'acide chlorométhanephosphonique qui peut être soit isolé, soit, sans isolement, transformé par une réaction de

cyclisation intramoléculaire dans un milieu fortement alca-

lin directement en les composés de formule générale I. Le dichlorure de chlorométhanephosphonyle de formule III nécessaire à la réaction peut être préparé de préférence par réaction du trichlorure de phosphore avec le paraformaldéhyde (brevet US N 2 874 181; M I Kabachnik, E S Shepeleva: Izv Akad Nauk SSSR, Ser Chim 1951, 185; R L McConnell, M.A McCall, N W Coover: J Org Chem 22, 462 ( 1957)), par réaction de l'acide chlorométhanephosphonique ou de l'acide hydroxyméthanephosphonique avec le chlorure de thionyle (R.A B Bannard, J R Gilpin, G R Vavasour, A F McKay: Can J Chem 31, 976 ( 1953)), par réaction du chlorure de méthylène avec le trichlorure de phosphore en présence de chlorure d'aluminium (A M Kinnear, E A Pérren: J Chem.

Soc 1952, 3437), ou par oxydation de la chlorométhyldichloro-

-phosphine avec des oxydes d'azote (A J Jakubovich, V A. Ginsburgj: Zh Obshch Khim 22, 1534 ( 1952)) La réaction

s'effectue également bien avec le dibromure de bromométhane-

phosphonyle qu'il est cependant moins facile de se procurer que le composé de formule III ( J A Cade: J Chem Soc 1959,

2272).

L'acide chlorhydrique qui se forme dans la réaction des composés de formule II, V ou VI avec le dérivé chloro III est fixé à une base tertiaire (par exemple la pyridine, ses dérivés alkyliques ou la triéthylamine) On peut effectuer la réaction soit dans un solvant organique inerte (éther, dioxanne ou hydrocarbures chlorés), la dissolution complète

des composés de départ n'étant pas nécessaire, soit directe-

ment dans la pyridine La durée de réaction est généralement de plusieurs heures à la température ordinaire mais on peut

également effectuer la réaction à des températures élevées.

On peut l'effectuer dans des réacteurs habituels, la seule condition étant l'emploi de composants réactionnels et de solvants anhydres et l'absence d'humidité pendant la réaction avec le composé III Après l'évaporation du solvant, on traite le mélange avec de l'eau puis avec un alcali aqueux tel que

l'hydroxyde de lithium, de sodium ou de potassium à une con-

centration finale des 0,5-2,0 mol 1, à la température or- dinaire pendant 24 heures ou à une température élevée pendant une durée plus brève pour obtenir ainsi le produit final de

formule générale I Pour accroître la solubilité des inter-

médiaires avec des radicaux hydrophobes, il est souhaitable d utiliser des mélanges des hydroxydes aqueux avec l'éthanol, le méthanol ou le dioxanne en maintenant la même concentration finale en hydroxyle que celle précédemment mentionnée L' emploi d'hydroxyde de lithium dans le traitement des mélanges réactionnels est très avantageux car l'excès d'hydroxyde peut être éliminé soit avec une résine échangeuse de cations sous

une forme acide, soit avec l'acide chlorhydrique avec élimi-

nation ultérieure des sels minéraux de lithium par extraction

avec un mélange d'acétone et d'éthanol.

Avec les diols symétriques, un seul isomère de formule I est possible, tandis que les diols asymétriques fournissent deux produits isomères Si les isomères purs de formule I sont nécessaires, on doit utiliser des diols de formule VI protégés de façon spécifique et, après la réaction avec le composé III,

on élimine le groupe protecteur soit dans un milieu faible-

ment acide ou alcalin, soitpar hydrogénolyse Le traitement

du produit réactionnel avec un hydroxyde de métal alcalin four-

nit un isomère unique dans lequel le radical phosphonylméthyle est fixé à l"hydroxy initialement protégé On peut séparer les

isomères des composés de formule I, par exemple par chromato-

graphie sur une résine échangeuse d'ionso Comme la réaction nécessite un groupe 1,2-diol, on peut l'utiliser également pour la préparation d'analogues de ribonucléotides naturels et d'autres composés à activité biologique On peut citer comme exemple la réaction de ribonucléosides 5 'O-substitués de formule générale VII

R 00

(VII} dans laquelle R O représente un radicalacyle (acétyle, benzoyle) ou triphényle, et B est un reste d'une base purine ou pyrimidique (uracile, cytosine, adénine, guanine) avec le composé de formule III Dans ce cas, l'élimination du groupe protecteur R 10 conduit aux analogues du nucléotides de formule VIII

(VXII)

HO OCH 2 P(O)(OH)2

(+ l'isomère 31) dans laquelle B a la même signification que dans la formule VII qui contient le groupe structural de formule I. Aucune précaution particulière n'est nécessaire dans le choix des groupes protecteurs pour les diols asymétriques ou pour la préparation des isomères purs de formule 1, car la

grande stabilité du radical phosphonylméthyle permet d'effec-

tuer des réactions ultérieures (telles qu'une hydrolyse

alcaline ou acides une mréthanolyse, une hydrogénolyse, etc).

Sous forme des acides libres, certains des composés de formule I sont faiblement solubles dans l'eau et il est donc

avantageux de les transformer en leurs sels solubles de li-

thium, de sodium, de potassium ou d Vammoniumo

Les composés de formule générale I ont une action chimio-

stérilisante sur les insectes Cette activité peut être établie par des essais biologiques de l'activité ovicide exprimant l'inhibition de l'éclosion des larves à partir

des oeufs Les animaux expérimentaux sont des adultes frai-

chement éclos de Pyrrhocoris apterus L et les composés étu-

diés sont administrés en solution dans l'eau de boisson La concentration de 1 mg ml-1 correspond à la dose de 1 mg/g par 24 h On effectue chaque essai sur un groupe de 10 males et de 10 femelles et on évalue la toxicité et l'aptitude à 1 ' éclosion des oeufs du premier et du secondlot d'oeufs L' activité des composés de formule I est établie par les valeurs

du tableau suivant.

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Tableau

Inhibition de l'éclosion des oeufs du lot d'oeufs de Pyrrhocoris apterus L. orale des composés de formule I à des (% d'inhibition par rapport aux oeufs premier et du second après administration adultes des deux sexes témoins).

L'invention est illustrée par les exemples de réalisa-

tion non limitatifs suivants.

Exemple 1

A une solution agitée de 10 mmol de l-O-benzyl-sn-glycé-

rol dans 100 ml de 1,2-dichloroéthane, on ajoute progressi-

vement 60 mmol de pyridine et 20 mmol de dichlorure de

chlorométhanephosphonyle et on agite le mélange dans un réci-

pient bouché pendant 15 heures On ajoute de l'hydrogénocarbo-

nate de triéthylammonium à p H 7,5 ( 2 mol 11; 25 ml), on agite le mélange pendant 1 heure et on évapore le solvant à C sous pression réduite (trompe à eau) On chauffe le résidu sec avec 60 ml d'une solution d'hydroxyde de sodium ( 2 mol 1 1) pendant 15 heures On ajoute du Dowex 50 x 8 (forme H+) en agitant jusqu'à ce que le mélange soit neutre, on filtre la résine et on lave sur le filtre avec 100 ml de méthanol aqueux à 50 % et on concentre le filtrat On applique le résidu à une colonne ( 1, 6 x 50 cm) de Separon SI C 18 ( 20 pm) et on élue ( 3 ml/min) avec un gradient linéaire d' hydrogénocarbonate de triéthylammonium à 0,1 mol 1-1 à p H 7,5 Concentration (mg ml 1 d'eau) 0,01 0,05 0,1 1,0 1 (RS)-IV (R 5 =adénine-9-yle) 30 50 100 100

(isomère 2 ') 27 -

(isomère 3 ') 61 -

2(RS)-IV (R 5 = O H) 100

3 (RS)-9-( 2,3-dihydroxy-

propyl)adénine (V, R 6 =H) (standard) 10 37 100

( 2 1) et de méthanol à 20 % dans le même tampon ( 2 1) On éva-

pore la fraction absorbant les ultraviolets du produit, on

coévapore le résidu avec de l'éthanol ( 3 x 50 ml) sous pres-

sion réduite (trompe à eau) à 40 C, on dissout dans 10 ml d'eau et on applique à une colonne de Dowex 50 x 8 (Li+; ml) Après élution avec 200 ml d'eau, on concentre l'éluat dans les conditions précitées, on codistille le résidu avec

de l'éthanol ( 3 x 50 ml) et on précipite dans 5 ml de métha-

nol avec 200 ml d'éther On recueille le précipité sur un filtre, on lave à l'éther et on sèche sous vide pour obtenir

550 mg ( 20 %) d'un mélange des sels de dilithium, des 1-O-

benzyl-2 ( 3)-O-phosphonylméthyl-sn-glycérols isomères (composés de formule IV, R = C 6 H 5 CH 2 O) qui ne fond pas à 260 C; R = 0,40 dans le système ( 51) 2-propanol-ammoniaque-eau ( 7/1/2) en

poids).

Exemple 2

A une solution agitée de 10 mmol de l-O-benzoyl-sn-glycé-

-rol dans 100 ml de 1,2-dichloroéthane, on ajoute progressive-

ment 60 mmol de pyridine et 20 mmol de dichlorure de chloro-

méthanephosphonyle On agite le mélange dans un récipient bouché à la température ordinaire pendant 15 heures et on ajoute 20 ml de pyridine aqueuse à 50 % Apres 2 heures d' agitation, on concentre le mélange sous pression réduite

(trompe à eau) à 40 C On mélange le résidu sec avec une solu-

tion d'hydroxyde de lithium ( 2 mol 1-1; 100 ml) et on chauffe à 90 C pendant 16 heures Après neutralisation avec du Dowex 50 x 8 (forme H), on filtre la suspension et on ajuste le p H du filtrat à 2 avec du Dowex Après filtration,

on extrait le mélange avec de l'éther ( 3 x 50 ml), on neutra-

lise la couche aqueuse avec de l'hydroxyde de lithium, on concentre sous vide et on extrait le résidu sec avec un

mélange d'acétone et d'éthanol ( 1/1; 100 ml) pendant 1 heure.

On recueillie la matière insoluble sur un filtre, on lave avec 100 ml du même mélange de solvants et on chromatographie sur deux couches ( 40 x 16 x 0,3 cm) de gel de silice dans le système 2-propanol-ammoniaque-eau ( 7/1/2) On détecte les bandes du produit sur un papier chromatographique joint en utilisant un réactif de détection du phosphore On lave le gel de silice contenant le produit avec de l'eau ( 500 ml),

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on évapore l'éluat et on dissout le résidu dans 25 ml d'eau et on l'applique à une colonne de Dowex 50 x 8 (forme Na, ml) On élue la colonne avec 100 ml d'eau et on concentre l'éluat sous vide On codistille le résidu avec de l'éthanol ( 2 x 50 ml) et on précipite dans 10 ml de méthanol avec 200 ml d'éther Par filtration et séchage, on obtient un mélange des sels de disodium des 1 ( 2) -O 0-phosphonylméthyl-snglycérols isomères (composés de formule IV, R = OH); rendement, 1 g

( 43 %); RF = 0,18 (système Si).

Exemple 3

On ajoute 20 mmol de dichlorure de chlorométhanephospho-

-nyle en agitant à une solution de 10 mmol de 1-O-trityl-sn-

glycérol dans 100 ml de pyridine Après agitation dans-un récipient:bouché pendant 15 heures à la température ordinaire, on ajoute 100 ml d'eau et on évapore le solvant à 40 C sous pression réduite (trompe à eau) On codistille le résidu dans les mêmes conditions avec 100 ml d'ammoniaque à 1 % et on

chromatographie sur une colonne de 200 g de gel de silice.

On élue le produit avec un mélange de chloroforme et d'éthanol ( 95/5) et on évapore les solvants On dissout le résidu dans du dioxanne aqueux ( 1/1; 100 ml) et on agite avec du Dowex x 8 (forme H+, 50 ml) pendant 6 heures à 40 C On filtre la résine échangeuse d'ions, on lave avec 100 ml d'eau et on concentre le filtrat sous vide On dissout le résidu sec dans 200 ml d'eau et on extrait la solution avec de l'éther ( 3 x ml), on évapore à nouveau la phase aqueuse à sec et on chauffe le résidu avec une solution d'hydroxyde de sodium ( 2 mol 1 1; 50 ml) à 90 C pendant 16 heures On ajuste le p H du mélange à 7,0 par addition de Dowex 50 x 8 (forme H+) on filtre la résine échangeuse d'ions, on lave avec 50 ml d'eau et on concentre le'filtrat On transforme le résidu sec en le sel de lithium comme décrit dans l'exemple 1 On obtient un rendement de 900 mg ( 45 %) des sels de dilithium des 1 ( 2)-O-phosphonylméthyl-sn-glycérols isomères (composés de

formule IV, R = OH); RF = 0,18 (système Si).

Exemple 4

On ajoute progressivement 60 mmol de pyridine puis 20 mmol de dichlorure de chlorométhanephosphonyle à une solution agitée de 10 mmol de 1benzoyloxy-3,4-dihydroxybutane dans

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ml de 1,2-dichloroéthane On traite le mélange comme décrit dans l'exemple 2 pour obtenir les sels de disodium des 1 ( 2)-O phosphonylméthyibutane-l, 2,4,-triols (composés de formule I, R = CHCHOH, R = R = H) avec un rendement de 40 %, 2 2 R = 0,20 (système Si).

Exemple 5

On ajoute 20 mmol de pyridine et 10 mmol de dichlorure de chlorométhanephosphonyle à une solution de 5 mmol de

l-O-trityl-3-O-benzoyl-sn-glycérol dans 50 ml de 1,2-dichloro-

-éthane et on agite le mélange dans un récipient bouché à la température ordinaire pendant une nuit On ajoute 10 ml d'eau et, après 1 heure d'agitation, on sépare la couche organique, on lave avec de l'eau ( 3 x 25 ml), on sèche sur sulfate de magnésium, on filtre et on évapore le solvant sous vide On chauffe le résidu sec avec une solution d'hydroxyde de lithium -i ( 1 mol 11; 100 ml) à 80 C pendant 12 heures puis on ajuste le p H du mélange à 2 avec du Dowex 50 x 8 (forme H+)o Après agitation à 80 C pendant 6 heures, on élimine par filtration la résine déchangeuse d'ions, on lave à l'eau et on extrait le filtrat avec de l'éther ( 3 x 50 ml), on neutralise avec de l'hydroxyde de lithium et on traite ensuite comme décrit dans l'exemple 2 pour obtenir 380 mg du sel de dilithium du 1-O-phosphonylméthyl-sn-glycérol (composé de formule IV, R 5 = OH) RF = 0,18 (système Sl) o

Exemple 6

On agite dans un flacon bouché à la température ordinaire

pendant une nuit, un mélange de 10 mmol de 9-(RS)-( 2,3-dihy-

-droxypropyl)adénine, 25 ml de diméthylformamide et 10 ml de diméthylformamide-diméthylacétal On évapore le solvant à 40 C et 13 Pa et on coévapore le résidu successivement avec 50 ml de pyridine aqueuse à 70 % et trois fois 30 ml de pyridine et on dissout dans 100 ml de 1,2dichloroéthane On ajoute 3,5 ml

de pyridine puis 3,34 g ( 20 mmol) de dichlorure de chloro-

-méthanephosphonyleet on agite le mélange dans un flacon

bouché pendant une nuit On ajoute une solution d'hydrogéno-

-carbonate de triéthylammonium ( 0,2 mol 1-l; 50 ml) à p H 7,5 et, après 2 heures, on concentre le mélange à 40 C sous pression réduite (trompe à eau) On codistille le résidu sec avec de l'éthanol ( 3 x 100 ml), on ajoute 100 ml d'acide acétique à 50 % et on maintient le mélange à 40 C pendant heures Apres évaporation sous vide, on codistille le résidu avec de l'eau ( 3 x 50 ml), on dissout dans 50 ml d'eau

et on applique la solution à une colonne de Dowex 50 x 8 (for-

me H; 300 ml) On élue le produit avec de l'eau, on concen- tre les fractions appropriées et on précipite par de l'éther le résidu en solution dans le méthanol pour obtenir 650 mg ( 20 %) du dérivé 3 'chlorométhanephosphonylique, 900 mg ( 28 %) du dérivé 2 'chlorométhanephosphonylique et 750 mg ( 23,5 %) d'un mélange des deux On chauffe 1 mmol de chacun d'entre eux avec une solution d'hydrure de lithium ( 2 mol 1-1; 10 ml) à 70 C pendant 8 heures, on neutralise le mélange avec de l'acide chlorhydrique, on concentre et on traite le résidu avec de l'éthanol et de l'acétone comme décrit dans l'exemple 2 Lé rendement des isomères purs ou du mélange des isomères (composés de formule IV, R 1 = adénine-9-yle) est de 80-90 %

(sous forme du sel de dilithium) Les composés sont des iso-

mères purs (RF = 0,18 dans le système Sl) et homogènes selon la chromatographie liquide haute pression sur gel de silice

C 18.

Exemple 7

On ajoute 1,67 g de dichlorure de chlorométhanephosphonyle à une solution de 1,05 g de 9-(S)-( 2,3-dihydroxypropyl)adénine dans 50 ml de pyridine et on agite le mélange dans un flacon bouché à la température ordinaire pendant 15 heures Après

addition de 10 ml d'eau et évaporation sous vide de la pyridi-

ne, on chauffe le résidu sec avec une solution d'hydroxyde de lithium ( 2 mol 1-1; 50 ml) à 80 C pendant 6 heures On neutralise le mélange avec de l'acide chlorhydrique et on concentre sous vide On dissout le résidu sec dans 10 ml d' eau et on applique la solution à une colonne de Dowex 50 x 8 (forme H; 150 ml) Après lavage avec 250 ml d'eau, on élue le produit avec 500 ml d'amoniaque à 2 % On reconcentre sous vide l'éluat ammoniacal et on dissout le résidu dans 10 ml d'eau et on l'applique à une colonne de Dowex 1 x 2 (acétate; ml) Après lavage à l'eau, on élue le produit avec un

gradient linéaire d'eau ( 2 1) et d'acide acétique 0,5 M ( 2 1).

On concentre la fraction de produit absorbant les rayons ultraviolets, on codistille le résidu avec de l'eau ( 3 x 25 ml) et on cristallise dans l'eau pour obtenir un mélange des dérivés 2 '( 3 ')-Ophosphonylméthyliques stéréo-isomères de la 9-(S)-( 2,3-dihydroxypropyl) adénine (composé de formule IV, R 1 = adénine-9-yle) avec un rendement de 50-60 % Le produit est obtenu sous forme de l'acide libre et il est homogène

selon la chromatographie sur papier (RF = 0,18 dans le systè-

me Sl)ainsi quelachromatographie liquide haute pression sur gel

de silice C 18.

Exemple 8

On ajoute 20 mmol de dichlorure de chlorométhanephospho-

nyle en agitant à un mélange de 10 mmol de 5 '-O-trityl-uridi-

-ne, 100 ml de 1,2-dichloroéthane et 40 mmol de pyridine.

Après agitation à la températurec ordinaire pendant 24 heures,

on ajoute 100 ml de pyridine aqueuse à 5 %, on agite le mélan-

ge pendant 1 heure et on évapore les solvants à sec sous pression réduite (pompe à eau) On mélange le résidu avec de l'acide sulfurique ( 1 mol 11; 100 ml) dans du dioxanne aqueux à 50 % et on maintient à 40 C pendant 24 heures Apres addition de 200 ml d'eau, on concentre le mélange sous vide à 50 ml, on dilue avec 200 ml d'eau et on extrait avec de 1 ' éther ( 3 x 50 ml) On neutralise la couche aqueuse avec une

solution d'hydroxyde de baryum, on chauffe à 80 C et on fil-

tre sur élite On concentre le filtrat sous vide et on mélan-

ge le résidu avec de l'hydroxyde de sodium ( 1 mol 1-1; 100 ml), on maintient à 40 C pendant 20 heures, on neutralise avec du Dowex 50 x 8 (forme H+), on filtre et on concentre lefiltrat sous vide La chromatographie sur une colonne de DEAE-Sephadex A-25 (formiate; 200 ml) dans un gradient linéaire d'eau-( 2 1) et d'acide formique à 2 mol 1-1 ( 2 1) fournit (après évaporation sous vide, codistillation avec de l'éthanol et précipitation dans 10 ml d'éthanol avec 200 ml d'éther) un mélange des 2 '( 3 ')-O-phosphonylméthyluridines isomères (acides libres); avec un rendement de 60 % Le rapport des isomères est de 1/1 Spectre UV: i max 260 nm,

X = 0,20 (également dans le système 2-propanol-ammoniaque-

eau ( 7/1/2)), Eup = 0,94 (p H 7,5) N/P théorique: 2; trouvé: 1,97.

Exemple 9

On traite de la façon décrite dans l'exemple 8 un mélange de 10 mmol de N 2-diméthylaminométhylène-5 '-0 O-tritylquanosine,

ml de pyridine et 20 mmol de chlorure de chlorométhane-

-phosphonyle pour obtenir un mélange ( 33/67) de 2 '( 3 ')-0phosphonylméthylguanosines isomères avec un rendement de 54 %; max 257 nm,

RF = 0,12 (dans le système Si); N/P trouvé: 4,90 (théori-

que: 5,0).

Exemple 10

On traite 10 mmol de N 6-diméthylaminométhylène-5 '-O-

-trityl-cytidine de la même-façon que celle décrite dans 1 '

exemple 8 pour obtenir un mélange 1/1 de 2 '( 3 ')-O-phosphonyl-

=méthylcytidines isomères avec un rendement de 67 %; h max 280 nm,

RF = 0,18 (dans le système Sl); Eup = 0,80.

Exemple 11

On traite 10 mmol de N 6-diméthylaminométhylène-5 '-O-

trityladénosine de la même façon que celle décrite dans 1 l

exemple 8 pour obtenir un mélange de 2 ' ( 3 ')-O-phosphonylméthyl-

-adénosines isomères avec un rendement de 72 %; \ 258 nm, max RF = 0,18 (dans le système Si); Eup = 0,83, N/P trouvé: 5,05

(théorique: 5,0).

Claims

REVENDICATIONS

1 Dérivés O-phosphonylméthyliques isomères de diols vicinaux énantiomères et racémiques de formule générale I

2 3

R-C CF-OR 4 ( 1)

O 14 dans laquelle R désigne un atome d'hydrogène, un radical alkyle ayant 1 à 3 atomes de carbone, un radical hydroxyalkyle ou un radical adénine-9-ylméthyle, R et R représentent des

atomes d'hydrogène ou font partie ensemble d'un cycle ribo-

-nucléoside, les deux symboles R 4 sont l'un un atome d'hydro-

gène et l'autre un radical -CH 2 P(O)(OH)2, et la configuration

des atomes de carbone est R, S ou RS.

2 Dérivés O-phosphonylméthyliques isomères de formule générale IV

R 5-CH 2 CHCH 20 R 4 (IV)

o 2 2

dans laquelle R 5 désigne un fragment adénine-9-yle ou un ra-

dical hydroxy, R 4 a la même signification que dans la formule I, et la configuration de l'atome de carbone en position 2

est S, R ou RS.

3 Procédé de préparation des composés de formule géné-

raie I selon la revendication 1, consistant en la réaction de composés de formule générale II

R 2 R 3

-C CH-CH (I)

OH

1 2 3

dans laquelle R 1 R et R ont la même signification que dans la formule I, avec 1-2 équivalents de dichlorure de chlorométhanephosphonyle de formule III

C 1 CH 2 P(O)C 12 (III)

et simultanément avec 2 équivalents (par rapport au composé III) d'une base tertiaire, de préférence la pyridine, dans un solvant organique aprotique, de préférence la pyridine, à des températures de 0-80 C, après quoi on traite le mélange réactionnel avec une solution aqueuse d'un hydroxyde de métal

alcalin à des températures de 0-100 C et on isole les compo-

sés de formule I par élimination des sels, de préférence par

chromatographie sur une résine échangeuse d'ions.

4 Procédé de préparation des composés de formule IV

selon la revendication 3, ou R 5 désigne un reste d'adénine-

9-yle, caractérisé en ce qu'on fait réagir les composés énan-

tiomères ou racémiques de formule générale V K y 1 Ai N (V) "H St CH-CJ 4 OH OH dans laquelle R 6 désigne un atome d'hydrogène ou les 2 R 6 forment ensemble un radical =CH-N(CH 3)2, avec le dichlorure de chlorométhanephosphonyle de formule III, après quoi on traite le mélange réactionnel de la même façon que définie dans la revendication 2 et on isole les composés de formule générale I par élimination des sels du mélange réactionnel. Procédé de préparation des composés de formule géné-

rale -IV selon la revendication 3, o R 5 est un hydroxy, carac-

térisé en ce qu'on fait réagir les composés énantiomères ou racémiques de formule générale VI

R 7 OCH CHCH ORG (VI)

OR

dans laquelle R 7 dsigne un radical benzoyle ou triphnyl-

dans laquelle R désigne un radical benzoyle ou triphényl-

-méthyle et R et R sont des atomes d'hydrogène, ou R 7 dési-

gne un radical triphénylméthyle, R 8 est un atome d'hydrogène

9 7

et R est un radical benzoyle ou acétyle, ou R est un atome d'hydrogène et les deux symboles R 8 et R 9 forment ensemble un radical isopropylidène, avec le dichlorure de chlorométhane- -phosphonyle de formule III, après quoi on traite le mélange

réactionnel de la même façon que définie dans la revendica-

tion 2 et on isole les composés de formule générale I par

élimination des sels du mélange réactionnel.