BE898620A

BE898620A - Derives o-phosphonylmethyle isomeres de diols enantiomeres et racemiques vicinaux, ainsi que leur procede de preparation

Info

Publication number: BE898620A
Application number: BE0/212167A
Authority: BE
Inventors: A Holy; I Rosenberg; K Slama
Original assignee: Ceskoslovenska Akademie Ved
Priority date: 1983-01-06
Filing date: 1984-01-05
Publication date: 1984-05-02
Also published as: GB2134907B; IT8419041A1; FR2539132A1; SE8400039D0; GB2134907A; IT8419041A0; IT1174451B; FR2539132B1; CH666039A5; GB8400168D0; CS233665B1; DE3400278C2; SE454591B; US4659825A; SE8400039L; DE3400278A1

Abstract

L'invention concerne des dérivés O-phosphonylméthyle isomères de diols énantiomères et racémiques vicinaux de formule générale I où R1 = H, alkyle en C1-C3, hydroxyalkyle ou adénin-9-yl-méthyle ; R2 et R3 = H ou, ensemble, ils font partie d'un noyau ribonucléoside ; les deux radicaux R4 représentent alternativement H et un groupe -CH2P(O)(OH)2, tandis que la configuration sur les atomes de carbone est R, S ou RS.

Description


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 EMI1.1 
 v Ceskoslovenska akademie ved --------------------------- 
 EMI1.2 
 Dérivés O-phosphonylméthyle isomères- diols énantiomères et racémiques vicinaux, ainsi que leur procédé de préparation. 



  ------------------------------------------------------------- 
 EMI1.3 
 / Inventeurs : Antonln HOLY, Ivan ROSENBERG et Karel SLAMA 

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 Dérivés   0-phosphonylméthyle   isomères de diols énantiomères et racémiques vicinaux, ainsi que leur procédé de préparation. 



   La présente invention concerne des dérivés   0-phosphonylméthyle   isomères de diols énantiomères et racémiques vicinaux, ainsi que leur procédé de préparation. 



   Les esters de l'acide phosphorique sont d'une importance déterminante dans des processus se déroulant dans la matière vivante. Des analogues isostériques de ces composés peuvent agir comme inhibiteurs de processus métaboliques et, dès lors, ils exercent une activité biologique. Une condition importante pour leur utilisation pratique est leur stabilité dans ltorganisme, en particulier, vis-àvis des enzymes clivant des liaisons phosphomonoester. 



  Cette condition est remplie dans le cas de dérivés   O-phosphonylméthyle   d'alcools organiques qui, à de nombreux égards, ressemblent aux organophosphates naturels. Toutefois, ces composés comportent, entre les atomes de phosphore et de carbone, une liaison qui est stable vis-à-vis des enzymes. On a préparé de tels dérivés en faisant réagir des alcoxydes avec des esters de l'acide chlorométhane-phosphonique (E. N. Walsh, T. M. Beck, A. D. F. Toy : J. Amer. Chem. 



  Soc. 78, 4455 (1956)), en faisant réagir du trichlo- 
 EMI2.1 
 rure de phosphore avec des formais (brevet des EtatsUnis d'Amérique 2. 500. 022) ou en traitant des dies- ters de l'acide p-toluène-sulfonyloxyméthane-phosphonique avec un alcoxyde de sodium (certificat d'auteur tchécoslovaque PV 4087-81). Toutefois, toutes ces réactions nécessitent une hydrolyse ultérieure d'esters phosphoniques, cette hydrolyse ne se déroulant qu'au prix de certaines difficultés. 

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   La stabilité chimique et enzymatique requise est assurée par les nouveaux composés suivant l'invention,   c'est-à-dire   les dérivés   O-phosphonyl-   méthyle isomères de diols énantiomères et racémiques vicinaux de formule générale I : 
 EMI3.1 
 dans laquelle   R   représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone, un groupe hydroxyalkyle ou un groupe   adénin-9-ylméthyle,   
 EMI3.2 
 2 et représentent chacun un atome d'hydrogène ou, 
R2ensemble, ils font partie d'un noyau ribonucléoside, les deux radicaux R4 représentent alternativement un atome d'hydrogène et un   groupe-CH2P (O) (OH)    tandis que la configuration existant sur les atomes de carbone est R, S ou RS. 
 EMI3.3 
 



  En outre, la présente invention concerne des dérivés O-phosphonylméthyle isomères de formule générale IV : 
 EMI3.4 
 dans laquelle R5 représente une fraction adénin-9-yle ou un groupe OH, R4 a la même signification que celle définie dans la formule I et la configuration sur l'atome de carbone en position 2 est S, R ou RS. 



   Le procédé de préparation des composés de formule I consiste à faire réagir des composés de formule générale II : 
 EMI3.5 
 dans laquelle   RRetR   ont les mêmes significations que celles définies dans la formule I, avec 1-2 équivalents de dichlorure de chlorométhane- 

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 phosphonyle de formule III :

   
 EMI4.1 
 et simultanément avec 2 équivalents (par rapport au composé III) d'une base tertiaire, de préférence, la pyridine, dans un solvant organique   aprotique.   de préférence, la pyridine, à des températures de   o-800C,   après quoi on traite le mélange réactionnel avec une solution aqueuse d'un hydroxyde de métal alcalin à des températures de   0-100oC,   tandis que l'on isole les composés de formule I par dessalage, de préférence, par chromatographie sur une résine échangeuse d'ions. 



   Le procédé de préparation des composés de formule IV dans laquelle   R   représente une fraction adénin-9-yle, caractérisé en ce que des composés énantiomères ou racémiques de formule générale V : 
 EMI4.2 
 dans laquelle    R   représente un atome d'hydrogène ou un groupe =CH-N   (CH, J   sont amenés à réagir avec du dichlorure de chlorométhane-phosphonyle de formule III, le mélange réactionnel étant ensuite traité de la même manière que celle décrite ci-dessus, tandis que les composés de formule générale I sont isolés par dessalage du mélange réactionnel. 



   De même, le procédé de préparation des composés de formule générale IV dans laquelle R5 représente un groupe OH, est caractérisé en ce que les composés énantiomères ou racémiques de formule 

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 générale VI : 
 EMI5.1 
 dans laquelle R7 représente un groupe benzoyle ou 
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 8 9 un groupe triphénylméthyle et et représentent y chacun un atome d'hydrogène, ou représente un Q groupe un atome d'hydrogène et représente un groupe benzoyle ou 7 un groupe acétyle, ou encore représente un atome Q Q d'hydrogène et et ensemble forment un groupe 
R8isopropylidène, sont amenés à réagir avec le dichlorure de chlorométhane-phosphonyle de formule III, le mélange réactionnel étant ensuite traité de la même manière que celle décrite ci-dessus,

   tandis que les composés de formule générale I sont isolés par dessalage du mélange réactionnel. 



   En principe, la réaction est basée sur la formation d'un monoester d'acide chlorométhanephosphonique qui peut être isolé ou qui, sans isolation, peut être transformé directement en composés de formule générale I par une réaction de cyclisation intramoléculaire dans un milieu fortement alcalin. 



   De préférence, on peut préparer le dichlorure de chlorométhane-phosphonyle de formule III nécessaire pour la réaction en faisant réagir du trichlorure de phosphore avec du paraformaldéhyde 
 EMI5.3 
 (brevet des Etats-Unis d'Amérique 2. 874. M. I. 



  Kabachnik, E. S. Shepeleva : Izv. Akad. Nauk SSSR, Ser. Chim. 1951, 185 ; R. L. McConnell, M. A.   McCall,   N. W. Coover : J. Org. Chem. 22, 462 (1957)), en faisant réagir l'acide chlorométhane-phosphonique ou l'acide hydroxyméthane-phosphonique avec le chlorure de thionyle (R. A. B. Bannard, J. R. Gilpin, G. R. Vavasour, A. F. McKay : Can. J. Chem. 31, 976 (1953)), 

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 en faisant réagir le chlorure de méthylène avec le trichlorure de phosphore en présence de chlorure d'aluminium (A. M. Kinnear, E. A. Perren : J. Chem. 



  Soc. 1952,   3437),   ou en oxydant la chlorométhyldichlorophosphine avec des oxydes d'azote (A. J. 



  Jakubovich, V. A. Ginsburg : Zh. Obshch. Khim. 22, 1534 (1952)). La réaction se déroule tout aussi bien avec le dibromure de bromométhane-phosphonyle qui est toutefois moins aisément accessible que le composé de formule III (J. A. Cade : J. Chem. Soc. 



    1959,   2272). 



   Le chlorure d'hydrogène se formant lors de la réaction de composés de formule II, V ou VI avec le dérivé chloré III est lié à une base tertiaire (par exemple, la pyridine, ses dérivés alkyliques ou la triéthylamine). La réaction peut être effectuée soit dans un solvant organique inerte (éther, dioxanne ou hydrocarbures chlorés), la dissolution complète des composés de départ n'étant pas nécessaire, soit directement dans la pyridine. Le temps de la réaction est habituellement de plusieurs heures à la température ambiante, mais la réaction peut également être effectuée à des températures élevées. Elle peut être effectuée dans des réacteurs habituels, la seule condition étant l'utilisation de solvants et de composants réactionnels secs, l'humidité étant exclue au cours de la réaction avec le composé III.

   Après évaporation du solvant, on traite le mélange avec de l'eau, puis avec un alcali aqueux tel que l'hydroxyde de lithium, l'hydroxyde de sodium ou l'hydroxyde de potassium à une concentration finale de 0,5-2 moles 1-1, à la température ambiante, pendant 24 heures ou à une température élevée pendant une plus courte période, pour obtenir ainsi le produit final de formule géné- 

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 raie I. Afin d'améliorer la solubilité des produits intermédiaires comportant des groupes hydrophobes, il est conseillé d'utiliser des mélanges d'hydroxydes aqueux avec l'éthanol, le méthanol ou le dioxanne en maintenant la même concentration finale en hydroxyde que celle mentionnée ci-dessus.

   Il est très avantageux d'utiliser l'hydroxyde de lithium dans le traitement des mélanges réactionnels, car l'hydroxyde en excès peut être éliminé soit avec une résine échangeuse de cations sous une forme acide, soit avec l'acide chlorhydrique avec élimination ultérieure des sels de lithium inorganiques par extraction avec un mélange d'acétone et d'éthanol. 



   Avec des diols symétriques, on ne peut obtenir qu'un seul isomère de formule I, tandis que des diols asymétriques donnent deux produits isomères. 



  Si des isomères purs de formule I sont nécessaires, il convient d'utiliser des diols de formule VI spécifiquement protégés tandis que, après la réaction avec le composé III, le groupe protecteur est éliminé soit dans un milieu faiblement acide ou alcalin, soit par hydrogénolyse. Le traitement du produit réactionnel avec un hydroxyde de métal alcalin donne alors un seul isomère dans lequel le groupe phosphonylméthyle est lié au groupe hydroxy initialement protégé. Les isomères des composés de formule I peuvent être séparés, par exemple, par chromatographie sur une résine échangeuse d'ions. 



   Etant donné que la réaction nécessite un groupement 1, 2-diol, on peut également l'utiliser pour la préparation d'analogues de ribonucléotides naturels et d'autres composés biologiquement actifs. 



  A titre d'exemple, on peut mentionner la réaction de ribonucléosides   5'-0-substitués   de formule générale VII : 

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 dans laquelle R10 représente un groupe acyle (acétyle, benzoyle) ou triphényle et B représente un radical d'une base de purine ou de pyrimidine (uracile, cytosin, adénine, guanine), avec un composé de formule III. Dans ce cas, l'élimination du groupe protecteur    R10   conduit à des analogues de nucléotides de formule VIII : 
 EMI8.2 
 (+ isomère   3')   dans laquelle B a la même signification que celle définie dans la formule VII, ces analogues contenant le groupement structural suivant la formule I. 



   Aucune précaution particulière n'est nécessaire dans le choix des groupes protecteurs pour les diols asymétriques ou pour la préparation d'isomères purs de formule I, puisqu'aussi bien la haute stabilité du groupe phosphonylméthyle permet d'effectuer des réactions complémentaires (par exemple, une hydrolyse alcaline ou acide, une méthanolyse, une hydrogénolyse, etc. ). 



   Lorsqu'ils sont sous forme d'acides libres, certains composés de formule I sont peu solubles dans l'eau et, par conséquent, il est avantageux de les transformer en leurs sels solubles de lithium, de sodium, de potassium ou d'ammonium. 



   Les composés de formule générale I exercent une action chimiostérilisante sur les insectes. 

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  Cette activité peut être démontrée par des biotitrages de l'activité ovicide, exprimant l'inhibition de l'éclosion larvaire au départ des oeufs. Les animaux d'essai étaient des adultes récents de Pyrrhocoris apterus   L.,   tandis que les composés d'essai ont été administrés sous forme de solutions dans l'eau de boisson. La concentration de 1 mg. ml-l correspondait à la dose de 1 mg/g/24 heures. Chaque essai a été effectué sur un groupe de 10 mâles et de 10 femelles et l'évaluation a été effectuée suivant la toxicité et l'aptitude à l'éclosion des oeufs de la première et de la deuxième charge. L'activité des composés de formule I est indiquée par les résultats du tableau I. 



  Tableau I Inhibition de l'éclosion des oeufs de la première et de la deuxième charge de Pyrrhocoris apterus L. après administration par voie orale des composés de formule I à des adultes des deux sexes (pourcentage d'inhibition vis-à-vis des oeufs témoins). 
 EMI9.1 
 
<tb> 
<tb> 



  Concentration
<tb> (mg.ml-1 <SEP> d'eau) <SEP> 0,01 <SEP> 0,05 <SEP> 0,1 <SEP> 1, <SEP> 0
<tb> 1 <SEP> (RS) <SEP> -IV <SEP> (RS <SEP> = <SEP> adénin- <SEP> 30 <SEP> 50 <SEP> 100 <SEP> 100
<tb> 9-yle)
<tb> (isomère <SEP> 2')--27-
<tb> (isomère <SEP> 31) <SEP> - <SEP> - <SEP> 61 <SEP> - <SEP> 
<tb> 2 <SEP> (RS)-IV <SEP> (R <SEP> = <SEP> OH)---100 <SEP> 
<tb> 3 <SEP> (RS)-9- <SEP> (2, <SEP> 3-dihydroxy- <SEP> 
<tb> propyl) <SEP> adénine <SEP> (v,
<tb> R6 <SEP> = <SEP> H) <SEP> (étalon) <SEP> 10 <SEP> 37 <SEP> 100
<tb> 
 

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L'invention est illustrée sans aucune limitation par les exemples de réalisation ci-après. 



  Exemple 1
A une solution agitée de 10 millimoles de   1-0-benzyl-sn-glycérol   dans 100 ml de 1, 2-dichloréthane, on ajoute progressivement 60 millimoles de pyridine et 20 millimoles de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle, puis on agite le mélange dans un ballon bouché pendant 15 heures. On ajoute 25 ml (2 moles    * ) d'hydrogénocarbonate   de triéthylammonium d'un pH de 7, 5, on agite le mélange pendant 1 heure et 
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 on évapore le solvant à 400C sous pression réduite (pompe à eau). On chauffe le résidu sec à 400C avec 60   ml   (2 moles    1-1) d'une   solution d'hydroxyde de sodium pendant 15 heures.

   Tout en agitant, on ajoute du"Dowex 50 X   8"   (forme    H+)   jusqu'à ce que le mélange soit neutre, on filtre la résine et on la lave sur le filtre avec 100 ml de méthanol aqueux à 50%, et l'on retire le filtrat. On applique le résidu dans une colonne   (1, 6   x 50 cm)   de"Separon     SI C 18" (20 r) et on élue (3 ml/minute) avec un gradient linéaire de 0, 1 mole. l-1 d'hydrogénocar-   bonate de triéthylammonium d'un pH de   7, 5 (2   litres) et du méthanol à 20% dans le même tampon (2 litres). 



  On évapore la fraction du produit qui absorbe les rayons ultraviolets, on évapore simultanément le résidu avec de l'éthanol (3 x 50 ml) sous pression réduite (pompe à eau) à   40oC,   on le dissout dans 10 ml d'eau et on applique la solution obtenue dans une colonne de 20 ml   de"Dowex   50 X 8" (Li+). Après élution avec 200 ml d'eau, on retire l'eluat dans les conditions mentionnées ci-dessus, on distille simultanément le résidu avec de l'éthanol (3 x 50 ml) et on le précipite dans 5 ml de méthanol avec 200 ml d'éther.

   On recueille le précipité sur un filtre, on 

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 le lave avec de l'éther et on le sèche sous vide pour obtenir 550 mg (20%) d'un mélange de sels de dilithium de   1-0-benzyl-2     (3)-0-phosphonylméthyl-   sn-glycérols isomères (composés de formule IV, 
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 = C6H5CH20), ce mélange ne fondant pas jusqu'à 2600c ; Rf = 0, dans le système (Si) 2-propanol/ ammoniac/eau (7 : 1 : 2, poids/poids). 



  Exemple 2
A une solution agitée de 10 millimoles de   1-0-benzoyl-sn-glycérol   dans 100 ml de   1, 2-   dichloréthane, on ajoute progressivement 60 millimoles de pyridine et 20 millimoles de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle. On agite le mélange dans un ballon bouché à la température ambiante pendant 15 heures et on ajoute 20 ml de pyridine aqueuse à 50%. 



  Après agitation pendant 2 heures, on retire le mélange 
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 sous pression réduite (pompe à eau) à 40 C. On mélange le résidu sec avec 100 ml (2 moles. 1) d'une solution d'hydroxyde de lithium et on chauffe à   900C   pendant 16 heures. Après neutralisation avec "Dowex 50 X   8"   (forme   H+),   on filtre la bouillie et on règle le filtrat à un pH de 2 avec"Dowex". 



  Après filtration, on extrait le mélange avec de l'éther (3 x 50 ml), on neutralise la couche aqueuse avec de l'hydroxyde de lithium, on la retire sous vide et on extrait le résidu sec avec 100 ml d'un mélange 1 : 1 d'acétone et d'éthanol pendant une heure. On recueille la matière insoluble sur le filtre, on la lave avec 100 ml du même mélange de solvants et on la soumet à une chromatographie sur deux couches (45 x 16 x 0, 3 cm) de gel de silice dans le système 2-propanol/ammoniac/eau (7 : 1 : 2). On détecte les bandes du produit sur un papier chromatographique fixé en utilisant un réactif de détection au phosphore.

   On lave le gel de silice contenant le produit 

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 avec 500 ml d'eau, on évapore l'éluat, on dissout le résidu dans 25 ml d'eau et on applique la solution obtenue dans une colonne de 20 ml de"Dowex 50 X   8"   (forme Na+). On élue la colonne avec 100 ml d'eau et on retire l'éluat sous vide. En même temps, on distille le résidu avec de l'éthanol (2 x 50 ml) et on le précipite dans 10 ml de méthanol avec 200 ml d'éther. Par filtration et séchage, on obtient un mélange de sels disodiques de 1   (2)-0-phosphonylméthyl-sn-glycérols   isomères (composés de formule IV, R5 = OH) ; rendement : 1 g (43%) ; Rf = 0,18 (système   Sil).   



  Exemple 3
Tout en agitant, on ajoute 20 millimoles de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle à une solution de 10 millimoles de   1-0-trityl-sn-glycérol   dans 100 ml de pyridine. Après agitation dans un ballon bouché pendant 15 heures à la température ambiante, on ajoute 100 ml d'eau et on évapore le solvant à   400C   sous pression réduite (pompe à eau). 



  En même temps, on distille le résidu dans les mêmes conditions avec 100 ml d'ammoniaque aqueuse à 1% et on le soumet à une chromatographie dans une colonne de 200 g de gel de silice. On élue le produit avec un mélange 95 : 5 de chloroforme et d'éthanol et on évapore les solvants. On dissout le résidu dans 100 ml de dioxanne aqueux   (1   : 1) et on agite la solution obtenue avec 50 ml de"Dowex 50 X 8" (forme   H+)   pendant 6 heures à   40 C.   On filtre la résine échangeuse d'ions, on la lave avec 100 ml d'eau et on retire le filtrat sous vide. On dissout le résidu sec dans 200 ml d'eau et on extrait la solution avec de l'éther (3 x 50 ml).

   On évapore à nouveau la phase aqueuse jusqu'à siccité et on chauffe le résidu à   900C   pendant 16 heures avec 50 ml 

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 (2 moles.   1")   d'une solution d'hydroxyde de sodium. 



  Ensuite, on règle le mélange à un pH de 7 par addition de"Dowex 50 X   8"   (forme   H+),   on filtre la résine échangeuse d'ions, on la lave avec 50 ml d'eau et on retire le filtrat. On transforme le résidu sec en un sel de lithium de la même manière que celle décrite à l'exempte 1. Rendement : 900 mg (45%) de sels de dilithium de 1 (2)-0-phosphonylméthyl-sn-glycérols isomères (composés de formule IV, R5 = OH) ; Rf =   0, 18   (système   Si).   



  Exemple 4
On ajoute progressivement 60 millimoles de pyridine, puis 20 millimoles de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle à une solution agitée de 
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 10 millimoles de 1-benzoyloxY-3, dans 100 ml de 1, On traite le mélange comme décrit à l'exemple 2 pour obtenir les sels disodiques de 1   (2)-0-phosphonylméthyl-butane-   
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 1 1, isomères (composés de formule R 
2, 4-triosCH2CH2OH, R2 = R3 = H) avec un rendement de 40%. 



  Rf = 0, 20 (système   Si).   



  Exemple 5
On ajoute 20 millimoles de pyridine et 10 millimoles de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle à une solution de 5 millimoles de 1-0-   trityl-3-0-benzoyl-sn-glycérol   dans 50 ml de 1, 2dichloréthane et on agite le mélange dans un ballon bouché à la température ambiante pendant une nuit. 



  On ajoute 10 ml d'eau et, après agitation pendant une heure, on sépare la couche organique, on la lave avec de l'eau (3 x 25 ml), on la sèche sur du sulfate de magnésium, on la filtre et on évapore le solvant sous vide. On chauffe le résidu sec à   800c   pendant 12 heures avec 100 ml   (1   mole.    1-) d'une   solution d'hydroxyde de lithium, puis on règle le mélange à 

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 un pH de 2   avec"Dowex   50 X 8" (forme H+).

   Après agitation à 800C pendant 6 heures, on élimine la résine échangeuse d'ions par filtration, on la lave avec de l'eau et on extrait le filtrat avec de l'éther (3 x 50   ml),   on le neutralise avec de l'hydroxyde de lithium et on le soumet à un traitement complémentaire comme décrit à l'exemple 2 pour obtenir 380 mg du sel de dilithium de   1-0-phosphonyl-   méthyl-sn-glycérol (composé de formule IV, R5 = OH). 



  Rf =   0, 18   (système   Spi).   



  Exemple 6
On agite un mélange de 10 millimoles de   9- (RS) - (2, 3-dihydroxypropyl) -adénine,   de 25 ml de diméthylformamide et de 10 ml de diméthylformamide/ diméthyl-acétal dans un ballon bouché à la température ambiante pendant une nuit. On évapore le solvant à   400C   et 13 Pa, on évapore simultanément le résidu successivement avec 50 ml de pyridine aqueuse à 70% et 3 x 30 ml de pyridine, puis on le dissout dans 100 ml de   1, 2-dichloréthane.   On ajoute 3, 5 ml de pyridine, puis 3, 34 g (20 millimoles) de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle et l'on agite le mélange pendant une nuit dans un ballon bouché.

   On ajoute 50 ml (0, 2 mole. l-1) d'une solution d'hydrogénocarbonate de triéthylammonium d'un pH de 7,5 et, après 2 heures, on retire le mélange à   40 C   sous pression réduite (pompe à eau). On distille simultanément le résidu sec avec de l'éthanol (3 x 100 ml), on ajoute 100 ml d'acide acétique à 50% et on maintient le mélange 
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 à 400C pendant 15 heures.

   Après évaporation sous vide, on distille simultanément le résidu avec de l'eau (3 x 50 ml), on le dissout dans 50 ml d'eau et on applique la solution obtenue dans une colonne de 300 ml de"Dowex 50 X 8" (forme   H+).   On élue le produit avec de l'eau, on retire les fractions adé- 

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 quates et l'on précipite le résidu avec de l'éther dans une solution méthanolique pour obtenir 650 mg (20%) du dérivé 3'-chlorométhane-phosphonyle, 900 mg (28%) du dérivé   2'-chlorométhane-phosphonyle   et 750 mg (23, 5%) d'un mélange des deux dérivés.

   On chauffe chacun d'eux   (1   millimole) à 70 C pendant 8 heures avec 10 ml   d'une   solution d'hydroxyde de lithium (2 moles. l-1), on neutralise le mélange avec de l'acide chlorhydrique, on le retire et on traite le résidu avec de l'éthanol et de l'acétone comme décrit à l'exemple 2. Le rendement du composé isomériquement pur ou du mélange isomère   (composés de   formule    IV, Rl = adénin-9-yle)   est de 80-90% (sous forme du sel de dilithium). Les composés sont   isomériquement   purs   (R.   =   0, 18   dans le système   Si)   et ils sont homogènes à la chromatogra- 
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 phie liquide à haut rendement sur gel de silice C18. 



  Exemple 7 On ajoute 1, g de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle à une solution de 1, g de 9- adénine dans 50 ml de pyridine et on agite le mélange dans un ballon bouché à la température ambiante pendant 15 heures. 



  Après addition de 10 ml d'eau et évaporation de la pyridine sous vide, on chauffe le résidu sec à 800C pendant 6 heures avec 50 ml   d'une   solution d'hydroxyde de lithium (2 moles.   1).   On neutralise le mélange avec de l'acide chlorhydrique et on le retire sous vide. On dissout le résidu sec dans 10 ml d'eau et on applique la solution dans une 
 EMI15.2 
 colonne de 150 ml de"Dowex 50 X 8" (forme H). Après lavage avec 250 ml d'eau, on élue le produit avec 500 ml d'ammoniaque à 2%. On retire l'éluat d'ammoniaque sous vide et on dissout le résidu dans 10 ml d'eau, puis on l'applique dans une colonne de 

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 100 ml   de"Dowex   1 X 2" (acétate).

   Après lavage avec de l'eau, on élue le produit avec un gradient linéaire de 2 litres d'eau et de 2 litres d'acide acétique   0, 5M.   On retire la fraction du produit qui absorbe les rayons ultraviolets, on distille simultanément le résidu avec de l'eau (3 x 25 ml) et on le cristallise dans de l'eau pour obtenir 
 EMI16.1 
 un mélange de dérivés 2' stéréo-isomères de la 9- adénine (composé de formule IVR adénin-9-yle) avec un rendement de 50-60%. Le produit est obtenu sous forme de l'acide libre et il est homogène à la chromatographie sur papier (Rf = 0, dans le système 51), ainsi qu'à la chromatographie liquide à haut rendement sur du gel de silice C18. 



  Exemple 8
Tout en agitant, on ajoute 20 millimoles de dichlorure de chlorométhane-phosphonyle à un mélange de 10 millimoles de   5'-0-trityluridine,   de 100 ml de 1, 2-dichloréthane et de 40 millimoles de pyridine. Après agitation à la température ambiante pendant 24 heures, on ajoute 100 ml de pyridine aqueuse à   5%,   on agite le mélange pendant une heure et on évapore les solvants sous pression réduite (pompe à eau) jusqu'à siccité. On mélange le résidu avec 100 ml   (1   mole. l) dtacide sulfurique dans du dioxanne aqueux à 50% et on maintient le mélange à   400C   pendant 24 heures. Après addition de 200 ml d'eau, on concentre le mélange sous vide à 50 ml, on le dilue avec 200 ml d'eau et on l'extrait avec de l'éther (3 x 50 ml).

   On neutralise la couche aqueuse avec une solution d'hydroxyde de baryum, on la chauffe à 800C et on la filtre à travers de la"Celite". On retire le filtrat sous vide et on mélange le résidu avec 100 ml   (1   mole. l) 

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 d'hydroxyde de sodium, on maintient le mélange à   400C   pendant 20 heures, on le neutralise avec   "Dowex   50 X 8" (forme H+), on le filtre et on retire le filtrat sous vide.

   La chromatographie dans une colonne de 200 ml de DEAE-Sephadex A-25 (formiate) dans un gradient linéaire de 2 litres d'eau et de 2 litres (2 moles.    1- 1) d'acide formique,   donne (après évaporation sous vide, distillation simultanée avec de l'éthanol et précipitation dans 10 ml d'éthanol avec 200 ml d'éther) un mélange de 2' (3')-O-phosphonylméthyluridines isomères (acides libres) avec un rendement de 60%. Le rapport des isomères est de 1 : 1.

   Spectre d'absorption des 
 EMI17.1 
 rayons ultraviolets :/t 260 nm, max Rf = 0, (également dans le système 2-propanol/ ammoniac/eau (7 : 1 : 2), Eux = 94 (pH 7, N/P calculé : 2 ; trouvé : 1, Exemple 9
De la même manière que celle décrite à l'exemple   8,   on traite un mélange de 10 millimoles 
 EMI17.2 
 0 de de 100 ml de pyridine et de 20 millimoles de chlorure de chlorométhane-phosphonyle pour obtenir un 
 EMI17.3 
 mélange 33 : 67 de 2' nes isomères avec un rendement de 54% ; * max   (3') -0-phosphonylméthyl-guanosi- 12.000 ; Rf = 0, 12 (dans le système Si) max   N/P trouvé : 4, 90 (calculé :   5, 0).   



  Exemple 10
De la même manière que celle décrite à 
 EMI17.4 
 l'exemple on traite 10 millimoles de N-diméthylaminométhylène-5'-0-tritylcytidine pour obtenir un mélange 1 : 1 de 2' (3')-0-phosphonylméthyl-cytidines isomères avec un rendement de 67% ; 281 max g 10. 000 ; Rf = zaps le système Si) /max Eup = 0, 

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 EMI18.1 
 Exemple 11 De la même manière que celle décrite à l'exemple 8, on traite 10 millimoles de 
8aminométhylène-5'-O-trityladénosine pour obtenir un mélange de 2' (3')-O-phosphonylméthyladénosines isomères avec un rendement de 72%   ;#max     258 nom,     #max 14.000 ; Rf = 0,18   (dans le système   S1)   ; EUp =   0,83,   N/P trouvé :   5,05   (calculé :   5,0).

Claims

REVENDICATIONS 1. Dérivés O-phosphonylméthyle isomères de diols énantiomères et racémiques vicinaux de formule générale I : EMI19.1 dans laquelle R représente un atome d'hydrogène, un groupe alkyle contenant 1 à 3 atomes de carbone, un EMI19.2 groupe hydroxyalkyle ou un groupe adénin-9-yl-mé- 2 thyle, et représentent chacun un atome d'hydrogène ou ensemble, ils font partie d'un noyau ribo- R2nucléoside, les deux radicaux R4 représentent alternativement un atome d'hydrogène et un groupe - CH2P (O) (OH) 2' tandis que la configuration sur les atomes de carbone est R, S ou RS.
2. Dérivés O-phosphonylméthyle isomères de formule générale IV : EMI19.3 dans laquelle R5 représente une fraction adénin-9yle ou un groupe OH, R4 a la même signification que celle définie dans la formule I, tandis que la configuration sur l'atome de carbone occupant la position 2 est S, R ou RS.
3. Procédé de préparation de composés de formule générale I suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir des composés de formule générale II : EMI19.4 EMI19.5 12 dans laquelle et ont les mêmes significa- tions que celles définies dans la formule I, avec 1-2 équivalents de dichlorure de chlorométhane- <Desc/Clms Page number 20> phosphonyle de formule III :

EMI20.1 et simultanément avec 2 équivalents (par rapport au composé III) d'une base tertiaire, de préférence, la pyridine, dans un solvant organique aprotique, de préférence, la pyridine, à des températures de o-80oc, après quoi on traite le mélange réactionnel avec une solution aqueuse d'un hydroxyde de métal alcalin à des températures de O-100 C, puis on isole les composés de formule I par dessalage, de préférence, par chromatographie sur une résine échangeuse d'ions.
4. Procédé de préparation de composés de formule IV suivant la revendication 3 dans laquelle R5 représente un radical adénin-9-yle, caractérisé en ce qu'on amène des composés énantiomères ou racémiques de formule générale V : EMI20.2 dans laquelle RU représente un atome d'hydrogène ou un groupe =CH-N (CH) , à réagir avec du dichlorure de chlorométhane-phosphonyle de formule III, après quoi on traite le mélange réactionnel de la même manière que celle décrite dans la revendication 2 et on isole les composés de formule générale I par dessalage du mélange réactionnel.
5. Procédé de préparation de composés de formule générale IV suivant la revendication 3 dans laquelle R représente OH, caractérisé en ce <Desc/Clms Page number 21> EMI21.1 1 1. qu'on amène des composés énantiomères ou racémiques de formule générale VI :

EMI21.2 dans laquelle R7 représente un groupe benzoyle ou EMI21.3 Q Q triphénylméthyle, tandis que et représentent y chacun un atome d'hydrogène, ou représente un Q groupe triphénylméthyle, représente un atome R8d'hydrogène et R9 représente un groupe benzoyle ou un groupe acétyle, ou encore R7 représente un atome EMI21.4 8 d'hydrogène et R et R ensemble forment un groupe isopropylidène, à réagir avec du dichlorure de chlorométhane-phosphonyle de formule III, après quoi on traite le mélange réactionnel de la même manière que celle décrite dans la revendication 2 et l'on isole les composés de formule générale I par dessalage du mélange réactionnel.