SU332727A1 - Способ получени моно- или дифосфатов (урацилил)- или -(пуринил)диоксиалканов - Google Patents

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНО- ИЛИ ДИОФОСФАТОВ N j - (УРАЦИЛИЛ)ИЛИ ГМ9-(ПУРИНИЛ)-ДИОКСИАЛКАНОВ

Изобретение относитс  к способу получени  новых органических соединегаш, которые могут быть рассмотрены как отдаленные аналоги природных мононуклеотидов. Полимеризаци  или поликонденсаци  этих соединений приводит к получению модельных олигомеров, структура которых напо Ш1нает строение нуклеиновых кислот. Подобно последним, такие модельные олйгомеры способны образовывать вторичные структуры или гибридизироватьс  между собой с образованием комплексов, обладающих сходством с двухнитчахой спиралью природных или синтетических (полученных ферментативной полимеризацией мононуклеотидов) нуклеиновых кислот.

Новые МОНО- и дифосфаты NI (урацилил)- и N9- (пуринил)-диоксиалканов получены путем фосфорилироваки  исходных NI - (урацилил) - и N9 (пуринил) - диоксиалканов. Целевые продукты выдел ют известными приемами.

Пример 1.К 30 мл стандартного раствора 1 пиридиновой соли цианэтилфосфата добавл ют 10 мл безводного пиридина и упаривают досуха при 30°С (ив дальнейшем упаривание и отгонку растворителей провод т при температуре 30° С) в вакуум Операцию повтор ют три раза. Затем к оста

ку добавл ют 1,47 г (0,005 моль) 6 - амино- 9 - (1,4-диоксибутил - 2) - пурина и 15 мл безводного пиридина. Смесь упаривают досуха в вакууме, раствор ют в 180 мл безводного пиридина , добавл ют раствор 8,2 г (0,04 моль) дициклогексилкарбодиимида в 10 мл безводного пиридина и выдерживают при комнатной температуре двое суток. За это врем  выдел етс  обильный осадок дшшклогексил у1Очевины.

К реакционной массе, не отфильтровьша  дициклогексилмочевину , добавл ют 4 мл воды и оставл ют сто ть в течение 1,5 час. Образовавшуюс  массу упаривают в вакууме досуха, добавл ют 80 мл воды и еще раз упаривают в вакуугле. Операцию повтор ют, добавл   20мл воды. К остатку добавл ют 200 мл 4Н LiOH и кип т т 45 мин, охлаждают и вьздерживают при 0°С в течение 1,5 час. Выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат пропускают через ионообмнную смолу Dowex 50 (Н) и элюируют водой. Элюат упаривают в вакууме до 100мл; вьшавший белый хлс ьевидный осадок (0,6 г), представл ющий собой 6 амино - 9 - (1,4 дафосфатбутил - 2) - пурин, отфильтровьшают..

бари  центрифз(гируют. рН фильт{Я1а после цент|жфугированн  с)аернатента довод т до 7,5 и осаждают допол{штелыю 0,3 г б - амино 9 - (1,4 дифосфатбутил - 2) пурина двукратным объемши этанола. О&ций выход 35,5%.

Найдено. %: С 28,58; Н 5,15; N 18,06; Р 16,17.

C HjsNsOgPj.

Вычиоюно,%: С 28,20; Н 3,94; N18,26; Р 18,26 УФ спектр: ЛАЩСС 262 л ис (0,1 н. NaOH); Амакс 261 мм (0,ГН. HCI).pKai 3.2; Каа 7,0.

При м е Р 2. К 50 МП раствора шфщщнвевой соли 0 - цианэ1илфосфата в пир даж (50 моль) добавл ют трижды по 50 мл  бсоакаво cyxQtQ пиридина (высушен над калыщ ) у. последний отгон ют в вакууме.

К высушенному раствору добавл ют paqtsop 1,6 г (7,5 моль) NI .- (1,4- даокс йутил - 2) тимина в пиридине и высушивают реакционную смесь, добавл   т; 1жды по 50 мл абсолютно сухого пиридина и упарива  его в . Добаод ют раствор 37,5 г (182 моль) да щклогек жшса1 одиимида в 30мл пиридина в peaKaBc i Qf амес{ выдерживают трое суток при пер ддическом Bcipaхивании на качалке. Добавл ют 30 мл Воды, выдерхошают сзгтки при комнатной температуре, вьшавшую flHiyiKHoreKciuiMC4eBHi4|f отсаоовают н пpOI на ют на фильтре 90 мл пиридава. Объедшжнацй раствор упаривают в вакууме на ротационномисшарителе , затем добавл ют 4(М) мл пиридаш и 450 мл 9МН4ОЙ и нагревают 3 часнри 1(.

Раствор упаривают в вакуз ие на ротационном испарителе, остаток раствор ют в 150мл воды и добавл ют водньш раствор 17,24 г ацетата Ш{иш. Выпадает осадок. Реакционную смесь вьздерживают

сутки при температуре от 0°С до ,+5° С, осадок | отсасьта к т и промывают на фильтре водой.

; К общему водному раствору объемом 2501лл добавл ют двухкратный объем этанола (500мл). Выпавший осадок отсасывзют4|1 Осадок 1, содержащий фосфат бари  и дифосфат NI - (1,4 -диоксибутил -2) -тамйиа раствор ют в воде с добавлением катионита Dowex 50 в Н+ форме до рНЗ и пропускают через колонку с катионитом

Dowex-50 в Na+ форме, элюиру  водой. Элюат обессоливают пропусканием через колонку с гелем SephandexG-10,

Элюируют водой, элюат упаривают в вакууме и лиофшшзуют. Получают 1 г Na соли дифосфата Nt ( - диокодбутил - 2) - тимина.

. Осадок И, содержащий ацетат бари , ди- и монофосфаты NI - (1,4 - диоксибутил) тимина, раствор ют в воде и пропускают последовательно через колонки с Dowex-50 в Na+ форме и SephandsxG-lO .

Элюаты, содержащие дифосфат (Rf-0,23) и М(№0фосфаты (Rf-0,46), собирают отдельно, упаришцш и лиофилизуют. Общий выход дифосфата 40 %, монофосфатсж 30 %.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ получевд  моно- шш дифосфатов NI 30 -(У1а1щлш1) - ида No - (пуришш) - даоксйалканов, отличающийс  тем, что Ni - (урацилил) - или N9 - (пуринил) - диоксиалканы подвергают взаимодействию с фоо орилирующим агентом с последуюпдам выделением целевого продукта известньа35 ми приемами.