FR2527221A1

FR2527221A1 - Appareil automatique pour le transfert de colonies bacteriennes

Info

Publication number: FR2527221A1
Application number: FR8308326A
Authority: FR
Inventors: Katsujiro Shibayama; Fukuo Iwaya; Kensaku Takahashi; Masumi Nukumi; Tatuhito Tuji; Michio Okuma; Yoji Odawara
Original assignee: Hitachi Ltd
Current assignee: Hitachi Ltd
Priority date: 1982-05-20
Filing date: 1983-05-19
Publication date: 1983-11-25
Also published as: GB2122640A; GB2122640B; FR2527221B1; DE3318287A1; GB8313746D0; US4613573A; NL8301790A

Abstract

L'APPAREIL POUR TRANSFERER AUTOMATIQUEMENT UNE COLONIE BACTERIENNE D'UN MILIEU SE TROUVANT DANS UNE BOITE DE PETRI DE CULTURE 15 SUR UN MILIEU SE TROUVANT DANS UNE BOITE DE PETRI D'ESSAIS 18 COMPREND UN ELEMENT DE PRELEVEMENTTRANSFERT 13A, UN MECANISME D'ENTRAINEMENT 42 COMMANDE PAR UN MICRO-ORDINATEUR 43. IL PERMET DE TRANSFERER AUTOMATIQUEMENT UNE COLONIE BACTERIENNE SANS INTERVENTION A L'EXCEPTION D'UNE OPERATION DE SELECTION DE COLONIES BACTERIENNES A L'AIDE D'UN DISPOSITIF DE SURVEILLANCE 39.

Description

Appareil automatique pour le transfert de colonies bactériennes La

présente invention concerne un appareil de transfert de colonies bactériennes dans lequel une colonie de bactéries, qui constitue un groupe de souche, peut être transférée d'une boite de Pétri pour culture à une botte de Pétri polr oussai OU bien à un tube à essais sans qu'il soit nrce F 4 sairû d ' intervenir à, l'exception d'une opération de vérification

visuelle pour le choix d'une colonie que l'on désire trans-

férer.

On a utilisé un procédé de découverte de bactéries actives présentes dans le sol ou autre milieu similaire pour développer de nouveaux types de substances vivantes telles que les antibiotiques A cette fin, on recueille ou prélève dans un sol hétérogène,sur de larges zones,des colonies de bactéries, et on les cultive en ayant recours à des opérations de transfert de colonies de bactéries entre des bottes de Pétri ou entre une boite de Pétri et un tube à essais En outre, dans le domaine des techniques génétiques o diverses recherches ont été entreprises rapidement dans un passé récent, on choisit une espèce spécifique de bactérie et on la cultive

en vue de créer de nouvelles substances vivantes par la re-

combinaison de gènes avec la bactérie cultivée De plus, dans

ces procédés, on effectue fréquemment des opérations de trans-

fert de colonies de bactéries.

Il est classique d'effectuer manuellement l'opération de transfert de colonies de bactéries en utilisant une boucle en platine dont une extrémité a une forme spéciale, comme celle de l'extrémité d'un cureoreilles, pendant que l'on inspecte

visuellement cette colonie de bactéries.

Dans un exemple d'une opération de transfert de colonies de bactéries parmi de nombreux modes d'opération, on choisit une colonie de bactéries qui s'est développée dans une certaine mesure, par exemple de 1 2 mm ou plus en diamètre, parmi des colonies de bactéries croissant de façon grégaire dans un

milieu formé d'agar dansune botte de Pétri en vue d'un essai.

Non seulement cette opération exige de l'habileté et beaucoup de Lemps, mais représente une complication considérable en ce :llii concerne l'enregistrement et le contrôle des diverses données concernant les positions, les types ou autres facteurs

analogues de la colonie bactérienne transférée.

En ce qui concerne les modes d'opérations de-transfert eu égard au type de récipient dans lequel on transfère une colonie, c'est en fonction des circonstances du moment que l'on juge si une boîte de Pétri pour essais convient pour le transfert d'une colonie de bactéries comprenant de nombreux types de bactéries,étant donné qu'on utilise sa large surface, tandis que l'on a recours à un tube à essais pour cultiver un

grand nombre de bactéries d'un seul type ou d'une seule espèce.

Du fait qu'il est important d'empocher une pollution par d'autres germes divers au cours de l'opération de transfert de colonies de bactéries, on exécute l'opération à l'aide d'un meuble de sécurité et tous les instruments qu'il faut utiliser sont soumis à une désinfection et à une stérilisation (appelée simplenent par la suite une "stérilisation") au moment opportun Si on considère d'un point de vue différent l'opération de transfert de colonies de bactéries mentionnée ci-dessus, on s'aperçoit qu'au cours de la phase durant laquelle l'étude et le développement sont effectués, on a recours de façon répétée à un procédé pour prélever dans une colonie bactérienneo diverses espèces de bactéries sont cultivées de façon mélangée,une nouvelle espèce de bactérie qui semble prometteuse et utile tout en l'isolant de manière qu'elle constitue une espèce unique aussi pure que possible, ainsi qu'à un procédé pour effectuer une culture pure de l'espèce bactérienne prélevée Au cours de la phase o la nouvelle espèce de bactérie est produite industriellement en série ou est soumise à un enregistrement/stockage, on a recours à un procédé d'élimination del'espèce bactérienne qui semble

peu utile et est contaminée par divers germes qui, fonda-

mentalement, ne doivent pas exister Dans des cas réels, il est nécessaire de manipuler chaque jour plusieurs milliers, voire plus, de corps d'essais C'est pourquoi, bien que les opérations de transfert de colonies de bactéries mentionnées ci-dessus semblent à première vue simples, on effectue de façon répétée des opérations au cours desquelles on procède à une vérification visuelle pendant un temps prolongé pour déterminer une colonie bactérienne voulue et à des travaux pour prélever et transférer de façon précise la colonie bactérienne spécifiée, ce qui pose des problèmes en ce sens qu'il faut non seulement une personne qualifiée dans une certaine mesure, mais que même une telle personne se fatigue considérablement En outre, il existe un problème par le fait que, comme on l'a décrit ci-dessus, l'enregistrement et les stockages des informations concernant le transfert de la colonie de bactéries est fastidieux et se prête peu au rendement. La présente invention a pour objet un appareil de transfert de colonies bactériennes dans lequel les opérations de transfert de colonies bactériennes doivent être effectuées automatiquement de façon mécanique sauf en ce qui concerne l'opération de sélection de colonie bactérienne spécifique

que l'on est obligé d'exécuter manuellement dans les cir-

constances actuelles.

Il est devenu récemment possible-de se procurer d'une façon relativement aisée en raison des progrès remarquables de la mécanique-électronique un appareil pour effectuer un

positionnement avec une grande précision, cet appareil per-

mettant de reproduire une image agrandie d'une colonie bactérienne visée sur un dispositif de visualisation tel qu'un tube à rayons cathodiques (CRT) en utilisant une caméra de télévision au lieu d'avoir recours à une inspection visuelle directe de la colonie bactérienne visée de manière

à emmagasiner dans un dispositif de mémorisation les coordon-

nées de la position désignée, par exemple au moyen d'un curseur sur le dispositif de visualisation En outre, il est bien connu qu'il est devenu possible de nos jours non seulement d'effectuer à l'aide d'un ordinateur une commande de mécanisme séquentielle longue et compliquée qui ne pourrait pas être exécutée à l'aide de moyens mécaniques, mais que l'on peut aussi modifier facilement m 4 me les procédés de commande et que les divers types d'appareils de commande par ordinateur

deviennent extrêmement peu coûteux.

La présente invention a encore pour objet un appareil automatique de transfert de colonies bactériennes dans lequel une technique mécanique/électronique extrêmement précise et une technique de commande par ordinateur telles que mentionnées ci-dessus sont combinées de façon appropriée de telle sorte que seule l'opération relative au choix d'une colonie bactérienne voulue soit effectuée par une vérification visuelle et que toutes les autres opérations soient exécutées automatiquement de manière que l'on puisse ainsi procéder de façon efficace à la totalité des opérations de

transfert de colonies bactériennes.

Les objets et caractéristiques de la présente invention

mentionnés ci-dessus ainsi que d'autres objets et caractéris-

tiques de celle-ci apparaîtront dans la description détaillée

de modes de réalisation préférés que l'on va donner ci-après en référence aux dessins annexés, sur lesquels X la figure l A montre en (A) et en (B) un mode de réalisation d'un élément d'extrémité de prélèvement/

transfert de colonies bactériennes du type qui est auto-

chauffant et qui convient pour être utilisé dans l'appareil selon la présente invention; la figure 1 B montre en (C) et en (D) respectivement le courant d'alimentation et la température de l'élément d'extrémité représenté sur la figure 1 A; la figure 2 illustre l'utilisation d'un mode de réalisation d'un élément d'extrémité de prélèvement/transfert de colonies bactériennes du type que l'on jette après usage et qui convient pour être utilisé dans l'appareil selon la présente invention; la figure 3 illustre un procédé pour former un élément jetable similaire à celui représenté sur la figure 2; la figure 4 montre des vues en perspective schématiques destinées à expliquer un exemple de l'opération de transfert de colonies bactériennes quand on utilise une b 8 te de Pétri pour essais comme réceptacle d'essais; la figure 5 montre diverses coupes transversales d'un tube 'C essais pour expliquer un exemple de l'opération de transfert de colonies bactériennes lorsque l'on utilise un tube à essais comme réceptacle d'essais; la figure 6 est une vue en perspective de l'appareil de transfert de colonies bactériennes selon un mode de réalisation de la présente invention dans lequel on utilise un élément d'extrémité de prélèvement/transfert de colonies bactériennes du type réutilisable que l'on peut réutiliser fréquemment; la figure 7 est une vue en plan d'un appareil de transfert de colonies bactériennes selon un autre mode de réalisation de la présente invention, dans lequel on utilise un élément d'extrémité de prélèvement/transfert de colonies bactériennes du type jetable après usage; la figure 8 est une vue en perspective d'une partie de l'appareil de transfert de colonies bactériennes selon un mode de réalisation de la présente invention dans lequel on place de façon appropriée un tube à essais en tant que réceptacle d'essais; la figure 9 est une vue en coupe frontale de l'appareil de la figure 8; et la figure 10 est un schéma synoptique illustrant l'agencement d'un mode de réalisation de l'appareil de transfert

de colonies bactériennes selon la présente invention.

On va décrire ci-après des modes de réalisation préférés

de la présente invention.

Pour des raisons de commodité, on appellera la botte de Pétri dans laquelle on place une colonie bactérienne que l'on a récoltée ou recueillie"une botte de Pétri de culture" et la botte de Pétri dans laquelle on transfère une colonie bactérienne se trouvant dans la botte de Pétri de culture "une botte de Pétri d'essais" de manière à distinguer l'une de

l'autre ces bottes de Pétri.

De façon classique, comme décrit ci-dessus, au cours des opérations manuelles de prélèvement/transfert de colonies bactériennes, on met en contact l'extrémité de la boucle de platine mentionnée ci-dessus que l'on a soiimist-préalablement

à un lavage et à une stérilisation avec une colonie bacté-

rienne présente dans un milieu se trouvant dans une boîte de Pétri de culture de manière à, provoquer la fixation de cette colonie à ladite extrémité, puis on met en contact l'extrémité de la boucle de platine avec un milieu se trouvant dans une boîte de Pétri d'essais ou dans un tube à essais de manière à,

transférer ainsi la colonie dans ce milieu.

Dans le présent cas, on peut se dispenser de laver et de tériliser la boucle de platine pendant les opérations continues de transfert de colonies bactériennes d'un seul et même type ou espèce Par contre, quand on reprend l'opération après une interruption ou dans le cas o l'on procède à un transfert d'une colonie bactérienne d'un type ou d'une espèce différente de celle qui vient d'être transférée immédiatement avant, un lavage et une stérilisation sont nécessaires Il est indispensable d'appliquer cette façon de procéder dans le cas o une automatisation est effectuée de la même manière que

celle mentionnée ci-dessus.

À cette fin, il existe un premier mode ou mode avec réutilisation dans lequel on soumet à un lavage et à une stérilisation une boucle de platine ou autre élément analogue à utiliser et un second mode ou mode avec mise au rebut après

utilisation dans lequel on supprime le lavage et la stérili-

sation.

La boucle de platine que l'on utilise dans le premier mode ou mode avec réutilisation mentionné ci-dessus et conforme

à la présente invention est bien connu, et aucune description

n'en sera donnée, tandis que l'on va décrire ci-après un élément de prélèvement du type autochauffant selon la présente invention. La figure 1 A illustre la caractéristique structurale d'un élément de prélèvement 10 d u type auto-chauffant tel que représenté en coupe transversale en (À) et en plan en (B), cet élément de prélèvement étant stérilisé par autochauffage grâce au courant qui circule Comme matière de l'élément de prélèvement, on utilise un fil résistant à la chaleur tel qu'un fil 11 en nichrdme On plie en deux le fil il en nichrome et on dispose entre ses branches un isolant 12 résistant à la chaleur, puis on effile la partie d'extrémité pliée 11-1 en la meulant et on l'usine de manière à obtenir une extrémité analogue à un cure-oreilles Lorsqu'un courant circule dans le fil 11 en nichrome dans la direction indiquée par exemple par les flèches sur la figure 1 A(A), l'extrémité 11-1 ayant une forte résistivité est chauffée au rouge de sorte que cette extrémité est stérilisée et que toute matière qui y est fixée est éliminée par combustion La figure 1 B montre en (C) le courant i circulant dans l'élément de prélèvement 10 et en (D) la température de chauffage T de cet élément Ce mode est avantageux par le fait que l'on peut régler avec précision la température T en ajustant le courant i et qu'aucun four de chauffage n'est nécessaire, ce qui se traduit par un agencement

simple de l'appareil.

On va décrire maintenant l'élément de prélèvement du second mode mentionné ci-dessus Comme représenté en (A) sur la figure 2, on déroule à l'aide d'un dispositif d'avance 22 un fin fil 22 d'une matière telle que l'or, l'aluminium, la fibre de verre, enroulé sur une bobine 21, puis on le maintient fixe à, l'aide d'un dispositif de blocage 24 et on coupe

l'extrémité du fil à l'aide d'un dispositif de coupe 25.

Ensuite, on fait fondre l'extrémité coupée du fin fil 22 en le chauffant à l'aide d'une flamme 26 d'un chalumeau de manière à former une extrémité stérile 27 comme représenté

en (B) sur la figure 2 On effectue les opérations de prélève-

ment/transfert de colonies bactériennes en utilisant cette

extrémité sphérique 27 comme représenté en (C) sur la figure 2.

Dans le cas d'un usage répété, le procédé est repris en (A) de la figure 2 de manière que la partie d'extrémité comprenant l'extrémité sphérique 27 soit coupée et que l'extrémité coupée soit fondue par chauffage de manière à former une nouvelle extrémité sphérique 27 Cette extrémité sphérique se trouve stérilisée pendant son opération de formation, ce qui rend inutile l'opération de lavage Les opérations de formation de l'extrémité sphérique fondue 27 sont effectuées au moyen du

déplacement d'un étage X-Y sous la commande d'un ordinateur.

Comme flamme 26 de chalumeau, on peut utiliser la flamme d'un chalumeau à décharge électrique ou la flamme d'un chalumeau oxhydrique (qui sont maintenus à l'état allumé ou dont on peut régler la direction). Dans une variante, au lieu d'utiliser une extrémité sphérique fondue, on sectionne l'extrémité d'un fil 22 comme

représenté en (A) de la figure 3 et on la met en forme simul-

tanément de telle sorte que la partie d'extrémité coupée soit coudée de manière à former une partie coudée 7 ou 8,comme représenté respectivement en'(B) ou (C) sur la figure 3, en utilisant un outil de coupage/profilage 28 et on soumet la partie coudée 7 ou 8 à une stérilisation par chauffage à l'aide d'un dispositif de chauffage 29 comme, par exemple, un dispositif de chauffage électrique ordinaire ou un système de chauffage à micro-ondes, comme représenté en (D) sur la figure 3 Du fait que la partie d'extrémité est coupée une fois qu'ellea été utilisée, l'opération de lavage n'est pas non plus

nécessaire dans ce cas.

On va maintenant décrire tout d'abord les procédés d'automatisation de l'opération de transfert de colonies bactériennes à propos du cas dans lequel on utilise une boite de Pétri d'essais comme réceptacle d'essais La figure 4 illustre en (A) le cas dans lequel on utilise une boucle en platine comme élément de prélèvement On va supposer alors que la position d'une colonie bactérienne 17-1 choisie au moyen d'une vérification visuelle par un opérateur, comme

décrit ci-dessus, parmi diverses colonies bactériennes répar-

ties dans un milieu 16 se trouvant dans une botte de Pétri 15 de culture a été emmagasinée, c'est-à-dire mémorisée, dans un dispositif de mémorisation par sélection et désignation des positions de colonies affichées sur un écran de visualisation

à l'aide d'un moyen tel qu'un curseur, comme décrit précé-

demment. En se basant sur cette information mémorisée, un étage X-Y que l'on décrira par la suite est déplacé de telle sorte que la colonie bactérienne 17-1 soit placée directement sous la boucle 45 en platine de l'élément de prélèvement 22 puis on abaisse cet élément de prélèvement 22 pour faire venir la boucle 45 en contact avec la colonie bactérienne 17-1 de manière à prélever de cette façon cette colonie fixée à la boucle 45 A ce moment, on utilise un détecteur optique de hauteur 134 comportant un dispositif sensible à la lumière (LSD), une fibre optique, une photodiode, etc, pour commander la hauteur de la boucle 45 de manière à obtenir un léger contact de la boucle 45 avec la colonie bactérienne 17-1 Ensuite, l'élément de prélèvement 22 est tiré vers le haut et est déplacé par un mécanisme de transport que l'on décrira par la suite, de telle sorte que la boucle vienne directement à une position désignée par le curseur et mémorisée préalablement au-dessus d'un milieu 16 se trouvant dans une botte de Pétri 18-1, comme représenté en (B) sur la figure 4 Ensuite, l'élément de prélèvement 22 est abaissé jusqu'à ce que la boucle 45 vienne en contact avec le milieu 16 pour transférer de cette façon la colonie bactérienne 17-1 sur ce milieu 16 Pour régler les positions relatives entre la boucle 45 et la boite de Pétri de culture ainsi que la boite de Pétri d'essais, les plateaux X-Y sur lesquels les bottes de Pétri des cultures et d'essais sont montées respectivement sont déplacés La série mentionnée ci-dessus d'opérations de transfert peut être effectuée facilement sous la commande d'un ordinateur Une telle technique de commande à l'aide d'un ordinateur est bien connue et est utilisée couramment La figure 4 illustre en (B) le cas dans lequel la colonie bactérienne 17-1 d'une seule et même espèce est transférée dans la boîte de Pétri d'essais 18-1 de telle sorte que cette colonie bactérienne 17-1 soit disposée en une pluralité de positions sur le milieu 16 se trouvant dans la botte de Pétri 18-1; dans une variante, il est possible de transférer une pluralité de colonies bactériennes 17-2, 17-3, etc, de divers types de plusieurs

espèces, comme représenté en (C) de cette figure 4.

La description ci-dessus a trait fondamentalement au

cas dans lequel on effectue le transfert en utilisant un élément de prélèvement Lel que celui représenté sur les

figures 1, ' et 3.

On va maintenant décrire le cas dans lequel on transfère une colonie bactérienne d'une boîte de Pétri de culture dans un tube à essais Lorsque le milieu se trouvant dans le tuuie a essais est liquide, il suffit d'immerger l'extrémité de l'élément de prélèvement dans le milieu liquide et on ne

donnera donc aucune description déLaillée de ce procédé.

Par contre, lorsque l'on utilise de l'agar gélifié comme milieu, on utilise le procédé suivant pour effectuer efficacement l'opération de transfert On va décrire ce

procédé en se référant à la figure 5.

Le but du transfert dans un tube à essais est de produire efficacement en grandes quantités une colonie bactérienne d'une seule espèce et, à cette fin, on fait en sorte que la surface du milieu dans le tube à essais soit incliné-par rapport à l'axe longitudinal de ce tube de manière

à accroître la superficie de contact du milieu avec l'air.

On forme cette surface inclinée en versant une matière (agar) de constitution de milieu sous la forme liquide dans un tube à essais maintenu au préalable dans l'état convenablement incliné et on laisse cette matière s'y solidifier Il est donc possible d'obtenir la forme du milieu, c'est-à-dire l'angle d'inclinaison, la hauteur, etc, d'une façon voulue et

prédéterminée.

La figure 5 montre en (A) les phases de transfert d'une colonie bactérienne dans un tube à essais 19 en utilisant

indifféremment la boucle en platine ou les éléments de pré-

lèvement représentés sur les figures 1 A, 2 et 3 Dans ce cas, la hauteur A (représentée par une flèche) par rapport à la surface 50 d'un milieu est détectée par un détecteur 13 A de hauteur de manière à déterminer la direction de la normale à la surface 50 du milieu à l'aide d'une commande par calcul effectuée par l'ordinateur et, après que le tube à essais a été déplacé par un mécanisme rotatif que l'on décrira par la suite dans la direction prédéterminée et stoppé à ce moment, l'extrémité de prélèvement 27 est abaissée comme représenté 1 i 1 en traits interrompus Ensuite, les plateaux X-Y sur lesquels sont montés respectivement le tube à essais et l'élément de prélèvement sont déplacés en liaison l'un avec l'autre de telle sorte que l'extrémité 27 de l'élément de prélèvement soit déplacée vers le haut depuis sa position basse dans une direction en zig-zag en glissant vers le haut sur la surface de la culture de manière à disperser et à transférer ainsi

les bactéries, comme représenté en (C) sur la figure 5.

La figure 5 illustre en (B) le cas dans lequel on a recours à un dispositif de prélèvement réutilisable conforme au premier mode mentionné précédemment et muni d'un élément de prélèvement qui peut détecter le contact entre son extrémité et la surface 50 du milieu par utilisation d'une jauge 51 de contrainte, l'extrémité de cet élément de prélèvement étant arrêtée à une position prédéterminée décalée du centre du tube et voisine de la paroi intérieure de ce tube par un moyen de transport que l'on décrira par la suite Si on fait tourner le tube à essais 19 dans la direction indiquée par la flèche R et si l'extrémité de l'élément de prélèvement est en contact avec la surface 50 du milieu, ce contact est détecté par la jauge de contrainte 51 et la rotation du tube à essais

est arrêtée A ce moment, l'extrémité de l'élément de pré-

lèvement est amenéeen contact avec la surface 50 du milieu, comme représenté en traits interrompuspar le déplacement descendant de l'élément de prélèvement et par le déplacement horizontal du plateau X-Y Ensuite, l'extrémité de l'élément de prélèvement se déplace dans une direction en zig-zag comme représenté en (C) de la figure 5, ainsi qu'on l'a décrit

ci-dessus, sous la commande de l'ordinateur.

On a représenté-en (D) et (B) de la figure 5 un mode de réalisation du transfert de colonies bactériennes dans un tube à essais dans lequel on utilise une plaque de profilage En (D) de la figure 5, la plaque de profilage 23 est fixée à l'extrémité d'une tige flexible 22 à l'aide d'un mécanisme BS de joint à rotule La plaque de profilage 23 peut donc pivoter librement dans n'importe quelle direction inclinée par rapport à la tige 22 La plaque de profilage 23 est introduite dans le tube à essais 19 et est amenée en contact avec la surface 50 du milieu Il est possible de maintenir un bon contact de la plaque de profilage 23 avec la surface du milieu quelles que soient les directions de cette surface 50 du milieu et de faire glisser cette plaque vers le haut

et vers le bas tout en faisant fléchir la tige comme repré-

senté sur le dessin, de manière à permettre ainsi d'effectuer

en une seule fois l'opération de dispersion et de transfert.

Bien que le procédé de prélèvement préalable d'une colonie

bactérienne sur la surface de dessous de la plaque de pro-

filage à partir d'une botte de Pétri de culture soit similaire

àa celui du cas dans lequel on utilise les divers types men-

tionnés ci-dessus d'éléments de prélèvement, ce cas est avantageux par le fait qu'une colonie bactérienne se trouvant dans une large zone peut être prélevée en une seule fois par

une opération dite "d'estampillage".

La figure 6 est une vue en perspective illustrant le mécanisme complet de l'appareil de transfert de colonies bactériennes selon un mode de réalisation de l'invention, dans lequel l'appareil est assemblé sur une table 30 à surface rigide Un dispositif d'indexage 33 est placé sur la table dans sa partie centrale et un bras rotatif 31 fixé à ce dispositif d'indexage 33 peut être arrêté avec précision à

chacune des quatre positions de coins disposés à 900 d'in-

tervalle Un mandrin 32 est fixé à l'extrémité avant du bras 31 et la boucle en platine ou l'élément de prélèvement réutilisable, tel que celui représenté sur la figure 1 A, est monté de façon amovible dans le mandrin 32 Les références 34-1 et 34-2 désignent des plateaux X-Y sur lesquels une botte de Pétri de culture 15 et une boite de Pétri d'essais 18 sont montéesrespectivement, de manière que la colonie bactérienne soit transférée de la botte de Pétri de culture 15 à la boite de Pétri d'essais 18 par la rotation et le déplacement vers le haut et vers le bas du bras rotatif 31 La rotation et le déplacement vers le haut et vers le bas du mécanisme sont effectués sous la commande programmée de l'ordinateur comme on l'a déjà mentionné La stérilisation de la boucle de platine ou de l'élément de prélèvement est exécutée par une section de stérilisation 35 et le lavage et le refroidissement ont été effectués dans un bac de lavage 36 La stérilisation de la section de stérilisation 35 peut être effectuée àa l'aide d'un chauffage, d'un fluide médical et d'un laser optique On va expliquer ci-après la stérilisation effectuée dans ce mode

de réalisation dans le cas o l'on utilise un moyen de chauf-

fage Si on a recours dans cet appareil à un élément de pré-

lèvement du type autochauffant tel que celui représenté sur la figure 1 A, la section de chauffage 35 et la section de lavage ne sont pas nécessaires En outre, si on utilise un élément de prélèvement comportant une extrémité sphérique 27 telle que celle représentée sur la figure 2 ou un élément de prélèvement du type dans lequel un fin fil métallique 22 est coupé et mis en forme comme représenté sur la figure 3, l'appareil est agencé comme représenté dans une vue en plan sur la figure 7, o la formation de l'extrémité sphérique 27 ou la mise en forme de l'extrémité du mince fil 22 sont effectuées dans une section 37 de traitement d'extrémité à l'aide des procédés représentés sur la figure 2 ou la figure 3, tandis que les opérations de prélèvement et de transfert sont exécutées de la même manière

que dans le cas de la figure 6.

Les opérations automatiques de fusion, de découpage, etc effectuées dans la section 37 de traitement d'extrémité sont bien connues, dans le cas par exemple d'une machine automatique de connexion de fils utilisée largement dans la

technique relative au domaine de la fabrication de semi- conducteurs,et aucune description n'en sera donc donnée.

Dans le cas o l'on utilise un tube à essais comme réceptacle d'essais, il est nécessaire de fixer un support de tube à essais sur la table 30 en utilisant un élément auxiliaire étant donné qu'un tube à essais a une hauteur plus grande qu'une botte de Pétri et il est en outre nécessaire de prévoir un mécanisme rotatif, car il faut faire tourner le tube à

essais 19 comme on l'a décrit précédemment.

La figure 8 montre un mode de réalisation illustrant la façon selon laquelle le tube à essais 19 est fixé et entraîné en rotation O Sur cette figiuie 8, un élément auxiliaire 30 ' est fixé à la table 30,conmme représenté sur le dessin,de manière à abaisser la position verticale du plateau X-Y 34-2 et une section rotative 38 est prévue sur le plateau X-Y 34-2, cette section rotative 38 comportant un trou 38 ' dans lequel peut être introduit le tube à essais 19 Bien que le mécanisme rotatif de la section rotative 38 n'ait pas été représenté,

on comprendra qu'un tel mécanisme rotatif ainsi que le méca-

nisme pour un déplacement dans la direction X-Y peuvent être

réalisés facilement.

Dans le cas o l'on place manuellement le tube à essais 19 de telle sorte que la surface du milieu soit orientée dans

une direction prédéterminée, on peut bien entendu se dis-

penser du mécanisme rotatifce qui fait que le mécanisme

complet et sa commande s'en trouvent remarquablement simpli-

fiés. La figure 9 est une vue de face (partiellement en coupe) du mode de réalisation décrit ci-dessus, dans lequel une caméra de télévision 38-1 est fixée au-dessus de la botte de Pétri de culture 15 et un écran d'affichage 39-2 de dispositif de surveillance est placé en un endroit convenant pour une surveillance par un opérateur L'opérateur peut agir sur un tableau de commande 41 pour déplacer un curseur dans le plan de l'image de l'écran d'affichage 39-2 de manière à choisir une colonie bactérienne voulue devant être transférée La référence 40 désigne un couvercle destiné à empêcher l'entrée

de germes ainsi que de la lumière.

La figure 10 est un schéma synoptique illustrant la configuration complète du mode de réalisation de la présente invention, dans lequel une boite de Pétri de culture 15 et une boîte de Pétri d'essais 18 ou un tube à essais 19 sont montés respectivement sur des plateaux X-Y 34-1 et 34-2 qui

-ont disposés respectivement au voisinage de parties d'ex-

trémité opposées d'une table commune 30 et une section de prélèvement 13 est déplacée entre la boîte de Pétri de culture et la boîte de Pétri d'essais 18 ou le tube à essais 19

par un mécanisme de transport 42 sous la commande d'un micro-

ordinateur 43 muni d'une mémoire 44 et d'un tableau de commande 41 Un détecteur 13 A de hauteur disposé dans la section de prélèvement 13 détecte la hauteur de cette dernière par rapport à la surface du milieu de manière à commander la hauteur de l'extrémité de cette section de prélèvement 13 comme on l'a décrit précédemment Les plateaux X-Y 34-1 et 34-2 peuvent être déplacés de façon fine dans les

deux directions orthogonales X-Y au moyen d'un moteur d'en-

trainement tel qu'un moteur pas à pas Dans une position intermédiaire entre les plateaux X-Y 34-1 et 34-2 est disposée une section 37 de traitement d'éléments de prélèvement pour un traitement de regénération/stérilisation de l'extrémité de

l'élément de prélèvement, par exemple la formation de l'extré-

mité sphérique fondue 27 Ce traitement devient nécessaire lorsqu'une colonie bactérienne à transporter qui vient d'être choisie par la section de surveillance 39 (laquelle sera décrite par la suite) est d'un type ou d'une espèce différente du type ou de l'espèce de la colonie bactérienne qui a été manipulée jusqu'à ce moment, ou lorsque l'opération recommence après une interruption, et cette opération de traitement est

effectuée sous la commande d'un micro-ordinateur 43 conjointe-

ment avec le déplacement des plateaux X-Y Le prélèvement et le transfert d'une colonie bactérienne est effectué de la manière déjà décrite cidessus La section de surveillance 39 est constituée par une caméra de télévision et un dispositif d'affichage ou de visualisation, la caméra de télévision étant montée sur la table commune 30 de telle sorte que la surface du milieu se trouvant dansla botte de Pétri de culture 15

puisse être inspectée facilement.

Bien que l'on ait décrit une botte de Pétri circulaire dans le mode de réalisation décrit ci-dessus, la forme de ce réceptacle n'est pas limitée à' une telle forme circulaire mais on peut utiliser bien entendu n'importe quel récipient ayant une forme qui convient pour l'appareil de transfert de colonies bactériennes, par exemple une forme ayant des propriétés directionnelles comme un cercle auquel il manque

un segment.

Un appareil automatique de transfert de colonies bactériennes tel que décrit ci-dessus et conforme à la présente invention est avantageux par le fait que non seu lement une personne qualifiée n'est pas indispensable pour l'opération de transfert de colonies bactériennes mais que l'enregistrement et la mémorisation des informations relatives à ce transfert peuvent être effectuées efficacement de façon électronique.

Claims

REVENDICATIONS le Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes, caractérisé par le fait qu'il comprend: une table commune ( 30); un ordinateur ( 43) muni de mémoires appropriées ( 44); un récipient ( 15) de culture dans lequel des colonies bactériennes sont ciiltivées; un récipient d'essais ( 18) dans lequel une colonie bactérienne voulue parmi les colonies bactériennes est transférée dudit récipient de culture; deux plateaux X-Y ( 34-1, 34-2) sur lesquels ledit récipient de culture et ledit récipient d'essais sont montés respectivement, lesdits plateaux X-Y étant disposés de manière àa pouvoir être déplacés sous la commande dudit ordinateur ( 43) indépendamment l'un de l'autre; une section de surveillance ( 39-1, 39-2) pour inspecter les colonies bactériennes sur une surface d'un milieu se trouvant dans ledit récipient de culture afin de choisir ladite colonie bactérienne voulue; une section de prélèvement ( 13) pour prélever ladite colonie bactérienne choisie dudit récipient de culture et pour transférer ladite colonie bactérienne prélevée sur une surface d'un milieu ( 50) se trouvant dans ledit récipient d'essais; une section d'extrémité ( 7, 8, 10, 23, 27 ou 45) qui est destinée au prélèvement/transfert de colonies bactériennes et qui est fixée à ladite section de prélèvement ( 30); et une section de transport ( 42) pour déplacer séquentiel- lement ladite section de prélèvement entre lesdits récipients de culture et d'essais sous la commande dudit ordinateur, ladite colonie bactérienne voulue étant de cette façon choisie par l'intermédiaire de ladite section de surveillance et étant transférée automatiquement du milieu dudit récipient de culture au milieu dudit récipient d'essais.

2 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 1, caractérisé par le fait nue ladite section d'extrémité destinée au prélèvement/ tr;il úert de colonies bactériennes est ccnstituée par un fil fin ( 22) formé d'une matière telle que l'or, l'aluminium, l'acier inoxydable, la fibre de verre lit apun,-, e::itant 1 outre une ection ( 37) de traitement d'éléments de prélèvement pour dérouler par traction, couper, chauffer, profiler ledit fil fin ( 221 en liaison avec l'opération de transfert de Ladite colonie bactérienne choisie dudit récipient de culture

audit récipient d'essais.
3 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 2, caractérisé par le fait que ladite section de prélèvement est munie d'un moyen ( 13 A) de détection de hauteur comprenant un dispositif sensible à la lumière, une fibre optique et une photodiode, pour détecter une hauteur par rapport à la surface dudit

milieu ( 50) dudit récipient d'essais.
4 o Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que ladite section de surveillance ( 39-1, 39-2) comprend une caméra de télévision pour photographier les colonies bactériennes se trouvant dans ledit récipient de culture ( 15), un dispositif d'affichage pour afficher une image agrandie desdites colonies et un curseur pour désigner une colonie voulue parmi lesdites colonies bactériennes sur le

plan de l'image du dispositif d'affichage précité principale-

ment pour mémoriser des informations relatives à l'amplitude et à la direction du déplacement de chacun desdits plateaux XA-Y ( 34-1, 34-2) qui sont d-ilacés en liaison avec l'opération

de sélection de ladite colonie bactérienne précitée.

Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que ladite section de tr:nsport ( 42) comprend un bras ( 31) comportant des extrémités opposées, ladite section de prélèvement étant disposée à une première desdites extrémités opposées, un dispositif d'indexage ( 33) étant prévu à la seconde extrémité et servant d'axe de rotation audit bras, les deux plateaux X-Y précités et une section ( 37) de tritemenit d'éléments de prélèvement étant disposes sur le cercle décrit par ladite première extrémité dudit brase 6 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que ladite section de transport ( 42) comprend un dispositif d'indexage ( 33) disposé sur ladite table commune

( 30), un bras ( 31) qui peut pivoter, le dispositif d'in-

dexage précité servant d'axe de rotation, sous l'action du dispositif d'indexage précité et qui est agencé de manière à powoir s'arrêter à au moins quatre positions, et un élément d'extrémité ( 7, 8, 10, 27, 23 ou 45) de transfert de colonies bactériennes pouvant se déplacer verticalement et disposé à

une extrémité dudit bras ( 31).
7 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 6, caractérisé par le fait que ledit élément d'extrémité pour le transfert de

colonies bactériennes est une boucle en platine.
8 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 6, caractérisé par le fait que ledit élément d'extrémité pour le transfert de colonies bactériennes est un élément du type autochauffant constitué par un fil ( 11) doué de résistivité et qui est plié en deux, une matière isolante ( 12) résistant à la chaleur étant insérée entre les deux branches ainsi formées, la partie d'extrémité pliée dudit fil étant traitée de manière que sa

surface de section droite soit réduite.
9 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 6, caractérisé par le fait que ledit élément d'extrémité pour le transfert de colonies bactériennes est une petite plaque plate ( 23) fixée

à l'extrémité d'une mince tige flexible ( 22) par l'inter-

médiaire d'un joint a rotule (BS).

Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 6, caractérisé par le fait que lesdites quatre positions comprennent des positions o sont disposés respectivement ledit récipient de culture ( 15), ledit récipient d'essais ( 18), une section de chauffage ( 35) pour chauffer/stériliser ledit élément d'extrémité servant au transfert de colonies bactériennes, et une section de lavage/refroidissement ( 36) pour laver/refroidir ledit élément d'extrémité chauffé/stérilisé servant au transfert de

colonies bactériennes.
11 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 6, caractérisé par le fait que ledit appareil comprend, en outre, un moyen ( 51) formant jauge de contrainte disposé à une partie de base dudit

élément d'extrémité servant au transfert de colonies bacté-

riennes en vue de détecter le contact de cet élément avec la

surface dudit milieu ( 50) dudit récipient d'essais.
12 Appareil automatique de transfert de colonies bactériennes suivant la revendication 1, caractérisé par le fait que ledit récipient de culture est une botte de Pétri de culture ( 15) et que ledit récipient d'essais est une boîte

de Pétri d'essais ( 18) ou un tube à essais ( 19).