FR2510990A1

FR2510990A1 - Alcoylamides de carboxyalcanoylpeptides

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Publication number: FR2510990A1
Application number: FR8213346A
Authority: FR
Inventors: Evzen Kasafirek; Premysl Fric; Jan Slaby; Alena Roubalova
Original assignee: Spofa Vereinigte Pharma Werke
Current assignee: Spofa Vereinigte Pharma Werke
Priority date: 1981-08-07
Filing date: 1982-07-30
Publication date: 1983-02-11
Also published as: CS226907B1; BE894065A; GB2104082B; IT1156108B; CH653038A5; IT8222506A1; JPS5849351A; IT8222506A0; GB2104082A; US4554100A; HU193029B; CA1238902A; FR2510990B1; DE3229632A1; JPH0349918B2; DE3229632C2

Abstract

A.ALCOYLAMIDES DE CARBOXYALCANOYLPEPTIDES. B.CARACTERISES EN CE QU'ILS ONT LA FORMULE GENERALE: (CF DESSIN DANS BOPI) OU : R EST UN ALCOYLE A CHAINE DROITE OU RAMIFIEE A 1 A 5 ATOMES DE CARBONE, OU UN ARALCOYLE, EN PARTICULIER LE PHENYLETHYLE; A EST UN RESIDU DE PROLINE OU D'ALANINE A LIAISON PEPTIDIQUE, OU RIEN; X EST UN GROUPEMENT -CH-, -CH-CH-, CH-CH-CH-, OU -CHCH-. C.L'INVENTION CONCERNE LES ALCOYLAMIDES DE CARBOXYALCANOYLPEPTIDES.

Description

Alcoylamides de carboxyalcanoylpeptides L'invention concerne des

alcoylamides de carboxyalcanoylpeptides de formule générale

COOH

/(I CO B Ala A NH R o: R est un alcoyle, à chaîne droite ou ramifiée, à 1 à 5 atomes de carbone, ou un aralcoyle, par exemple le phényléthyle, A est un résidu proline ou alanine à liaison peptidique,

B est un résidu de proline ou d'alanine à liaison pepti-

dique, ou n'existe pas, X est l'un des radicaux -CH 2-, -CH 2-CH-, ou -CH 2 C_ 2 CH 2-,

ou -CH=CH-.

Les alcoylamides-de dipeptides sont des inhi-

biteurs efficaces de l'élastase (brevets belges N 855 851

et 856 o 64) La séquence des dipeptides suit une composi-

tion optimale en acides aminés pour ce qui est du subs-

trat élastolytique, par exemple alanyl-alanine ou alanyl-

proline Cette séquence préposée dans ces brevets ne res-

pecte cependant pas tout à fait certaines connaissances nouvelles relatives à l'interaction entre le substrat et l'élastase, connaissances décisives pour ce qui est de la

fonction de l'inhibiteur telle qu'elle ressort de l'expe-

rience Dans les travaux antérieurs traitant de l'optima-

lisation du substrat eu égard à l'élastase pancréatique, l'on a constaté que la liaison électrostatique entre P 4-54 et P 5-55 (I Schechter et A Berger: Biochem.

Biophys Res Commun 32, 898 ( 1968)) présentait une im-

portance décisive pour ce qui était de l'interaction enzyme-substrat, liaison préférée pour ce qui était de ses liens avec l'interaction primaire (Eur J Biochem.

69, 1 ( 1976), FEBS Lett 40, 353 ( 1974)).

On a trouvé d'une manière surprenante, dans le cadre d'une comparaison entre le groupement carboxyle se trouvant dans la partie N-terminale de l'inhibiteur et le résidu hydrophobe (par exemple un résidu acétyle), que le groupement hydroxyle améliorait considérablement

la capacité d'inhibition, tout en améliorant les cons-

tantes d'hydrolyse élastolytique sur des substrats de ce type Les propriétés de l'inhibiteur élastolytique dépendent tant de la longueur de la chaîne peptidique que des substrats (Eur J Biochem 69, 1, 1976); la capacité d'inhibition d'un tripepdide sera plus élevée

que celle d'un dipeptide On a déterminé dans des expé-

riences in vitro les constantes (Ki) d'alcoylamides de carboxy-2 propionyl et carboxy-4 butyryl dipeptides et

tripeptides, en faisant appel à de l'élastase pancréati-

que et à des substrats chromogènes de p-nitroanilides de succinyl ou glutaryl-tétraalanines Les résultats sont présentés sur le Tableau 1 On a déterminé d'une manière analogue les constantes d'inhibition (Ki) de nouveaux inhibiteurs en faisant appel à de l'élastase humaine, c'est-àdire à de l'élastase du duodénum humain après

stimulation à la cholécystoquinine (E 1) ou du fluide pan-

créatique humain lyophilisé obtenu par canulation à l'orifice de sortie du canal pancréatique (E 2), et ces

résultats ont été comparés à ceux obtenus avec l'élasta-

se du pancréas du porc (E 3) Ces résultats sont présentés-

sur le Tableau 2.

Tableau 1 Constantes d'inhibition (K) des alcoylamides de di et tripeptides acylés. Inhibiteur Ki ("mol) Suc (Ala)4-N An Gît (Ala)4-N Ar Suc(Ala)2-NH-Et 95,2 166 Glt-(Ala) -NH-Et 68,1 109 Suc-<Ala) 2-NH-Et Ph 1 456 666 Glt (Ala) 2-NH-Et Ph 982 770 Suc (Ala) -NH-Me 510 680 Glt-(Ala) 3NH-Me 280 320 Suc-(Ala)3-NH-Et 20 29 Glt-(Ala)3-N'H-Et 8,8 8,4 Mal-(Ala)3NH-Et 35 30 Ac (Ala) 3-NH-Et 28 46 Suc-<Ala) 3-Nq H-Pr 6,8 4,5 Glt-<Ala> 3-NH-Pr 2,5 2,5 Suc-(Ala) 3-NH-i Bu 816 1 474 Glt-(Ala) 3-NH-i Bu 668 794 Suc-Ala-Pro-NH-Et 111 80 Suc-Ala-Pro-NSH-i Bu 2 042 5 747 Suc-Ala-Ala-ProNH-Et 2,5 4,7 Glt-Ala-Ala-Pro-NH-Et 1,6 2,7 Suc = succinyle, c'est-à-dire carboxy-2 propionyle; 1 Gît = glutaryle, c'est-à-dire carboxy-4 butyryl-e; Mal= carboxy-3 acryloyle; Ac= acétyle, Me = méthyle, Et=

éthyle, Pr = propyle, i Bu= isobutyle, Et Ph = phényléthy-

le L'alanine et la proline (Ala et Pro) ont la configu-

ration L.

Tableau 2: Constantes d'inhibition (Ki) des alcoylami-

des de tripeptides acylés.

Ki 2 mo 1) Inhibiteur Suc-(Ala) 4-N An Glt-Ala) 4 N An

E 1 E 2 E 3 1 2 E 3

Ac-(Ala)3-NH-Et 238 69 28 123 117 46 Mal-(Ala)3-NH-Et 87 69 35 73 117 30 Suc (Ala) 3-NH-Et 76 29 20 89 47 29 Glt-(Ala)3-NH-Et 15 7,4 8,8 19 19 8,4 Suc-Ala-Ala-Pro-NH-Et 14 23 2,5 19 17 4,7 Glt-Ala- Ala-Pro-NH-Et 10 2,9 1, 6 12 13,8 2,7 Suc-(Ala)3-NH-Pr 12 13 6,8 21 14 4,5 Glt-(Ala)3-NH-Pr 11 3, 8 2,5 7,2 4,5 2,5 Suc = succinyle, Glt = glutaryle; N An = nitroanilide; Et = _:-e, Pr = propyle; Mal = carboxy-3 acryloyle,

c'est-à-dire maléoyle.

Dans les expériences in vivo portant sur la

pancreatite expérimentale chez le rat, induite par une ap-

^:Lcation nitroorganique de désoxycholate de sodium, on a montré que l'on obtenait un taux d'amylase sérique plus faible avec une application simultanée de Glt-(Ala)3-NH-Et ( 20 mg, par voie intra-péritonéale) Les inhibiteurs

Glt-(Ala)3-NH-Et, Glt-Ala-Ala-Pro-NH-Et et tout particu-

lièrement Glt-Ala-Ala-Pro-NH-Pr (à raison de 20 mg chez

le rat) diminuent de 20 à 40 % le développement de l'oe-

dème induit par une injection sous-cutanée d'élastase

dans la patte du rat.

Par rapport aux dérivés alcanoyles connus

(dipeptides) (Bioorgan Chem 8, 299 ( 1979)), on a cons-

taté une forte amélioration, d'un ordre de grandeur, de l'inhibition de l'hydrolyse élastolytique, ce qui montre

l'importance du caractère du substituant N-terminal.

Les inhibiteurs décrits ne contiennent aucun

groupement non-naturel, de sorte qu'il n'y aura normale-

ment aucune réaction indésirable au niveau de leur appli-

cation pharmacothérapique, en particulier dans la pan-

créatite aiguë, dans le syndrome respiratoire obstructif

chronique et dans certaines arthrites.

L'invention concerne donc des alcoylamides de carboxyalcanoylpeptides de formule générale (I) COOH / x (I) CO B Ala A NH R o R est un alcoyle à chatne droite ou ramifiée à 1 à 5 atomes de carbone, ou un aralcoyle, par exemple le phényléthyle,

A est un résidu de proline ou d'alanine à liaison pep-

tidique,

B est un résidu de proline ou d'alanine à liaison pep-

tidique, ou rien, X est l'un des groupements -CH 2 CH 2-CH 2, -CE 2-C-I 2 CH 2 î ou r H=CH-, ces alcoylamides étapt préparés de la mar niè 6 e suivante: on fait tout dabord réagir un com posé de formule générale (II) :

A NH -R (II)

o R et A sont comme il est indiqué à propos de la formu-

le (I), sur un composé de formule générale (III) Y-B-Ala (III) o B a la même signification que dans la formule {I), Y représentant un groupe protecteur facilement éliminable par exemple le groupement benzyloxycarbonyle, puis, après

enlèvement du groupement protecteur, ou soumet l'intrrme-

diaire obtenu à une reaction sur un dérivé réactif daun acide dicarboxylique de formule ganérale {i Vr) COOH X (Iv)

-COOH

o X a la même signification que dans la formule (I), ce

dérivé étant par exemple son anhydride, un semi-halogé-

nure, un semi-ester ou un semi-amide.

La synthèse de ces peptides biologiquement actifs se fait théoriquement par condensation fragmentée en solution, ou par formation d'acides aminés pas à pas; on peut aussi la réaliser par synthèse sur un support solide.

On a utilisé, en tant que groupement protec-

teur des intermédiaires, un groupement du type uréthane (benzyloxycarbonyle), mais on peut aussi utiliser des groupements instables en milieu faiblement acide (par

exemple le tert-butyloxycarbonyle ou l'o-nitrobenzène sul-

phényle et assimilé), ou encore des groupements réduits par des métaux ou par voie électrolytique, si nécessaire

(halogéno-2 éthyloxycarbonyle).

L'on a exécuté les réactions de condensation par la méthode à l'azide, par la méthode du carbodiimide et par la méthode des anhydrides mixtes, mais on peut aussi faire appel à d'autres méthodes utilisées pour la

synthèse des peptides.

L'invention sera mieux comprise en regard

des exemples ci-après.

EXEMPLE 1: Benzyloxycarbonylalaninéthylamide.

On a ajouté 14 mi de N-éthylpipéridine à une solution de 23,3 g de benzyloxycarbonylalanine dans ml de tétrahydrofuranne puis, après refroidissement

à -10 C, on a ajouté 14 ml de chloroformiate de sec-bu-

tyle; après 8 minutes d'agitation et refroidissement à -6 C, on a ajouté 30 ml d'une solution 4,1 M d'éthylamine dans le tétrahydrofuranne Après 30 minutes d'agitation à O C et 2 heures d'agitation à la température armbiante,

on a fait évaporer la solution de réaction, on l'a suc-

cessivement secouée avec une solution de carbonate de

sodium monohydrogéné à 5 %, puis avec de l'eau, puis sé-

chée avec du carbonate de sodium anhydre, avant évapora-

tion On a recristallisé le résidu de l'évaporation à

partir de 30 ml d'acétate d'éthyle et d'éther de pétrole.

On a obtenu 18,1 g de produit, présentant un point de fu-

sion de 116 à 117 C.

Bromhydrate d'alaninéthylamide.

On a versé sur 10 g de benzyloxycarbonylala-

nine éthylamide 40 ml d'une solution à 36 % de bromure d'hydrogène dans de l'acide acétique absolu; au bout d'une heure, on a versé 150 ml d'éther dans la solution

obtenue, et on a séparé un produit cristallin par gratta-

ge, le produit étant ensuite extrait par filtration, con-

venablement lavé à l'éther, puis séché dans un dessicca-

teur sur du pentoxyde de phosphore et de l'hydroxyde de sodium L'on a obtenu 7,7 g de bromhydrate, de point de

fusion 224-226 C.

Rf 0,26/51, 0,58/52 Si: alcool n-butylique acide acétique eau ( 4:1:1) 52: alcool n-butylique acide acétique pyridine eau

( 15:3:10:6)

Benzyloxycarbonylalanylalanylalaninéthyla-

mide. On a ajouté à -12 C, à une solution de 3,08 g de benzyloxycarbonylalanylalaninhydrazide dans

ml de tétrahydrofuranne et de 4 ml d'acide chlorhy-

drique azéotrope, une solution de 690 ml de nitrile de sodium dans 2,8 ml d'eau Après 8 minutes d'agitation et

refroidissement à -10 C, on a dilue la solution de réac-

tion avec 200 ml d'acétate d'éthyle prérefroidi, on a extrait la phase organique avec une solution de carbonate de sodium monohydrogéné dans une saumure à 3 %, à -150 C, puis on l'a séchée sur du sulfate de sodium avant de

l'ajouter à une solution prérefroidie à -10 C d'alanine-

éthylamide dans 40 ml de diméthylformamide préparée à

partir de 1,97 g du bromhydrate correspondant, par neu-

tralisation avec 1,4 ml de N-éthylpipéridine On a lais-

sé reposer pendant 12 heures à O C, puis a fait évaporer la solution et l'on a recristallisé le résidu solide de l'évaporation à partir d'un mélange de 50 ml d'alcool

2-propylique et de 50 ml de diméthylformamide, par addi-

tion de 250 ml d'eau On a obtenu 2,71 g d'un produit de

=_ 8 (c 0,;di-

point de fusion 271-273 C = 8,3 c 0,3; dimé-

D thylformamide). Pour C 19 H 28 N 405 ( 392,5) calculé: 58,15 % C, 7,19 % H, 14,29 %, N; constaté: 57,97 % C, 7,27 % H, 13,93 % N. Alanylalaninéthylamide.

On a versé sur 1 g de benzyloxycarbonylala-

nylalanulalaninéthylamide 3 ml d'une solution à 36 % de bromure d'hydrogène dans de l'acide acétique puis, au bout d'une heure, on a versé sur la solution obtenue ml d'éther On a extrait par filtration le bronmhydrate séparé, on a séché pendant 2 heures au dessiccateur sur du pentoxyde de phosphore et de l'hydroxyde de sodium, puis on l'a dissous dans 20 ml d'une solution aqueuse à

% d'alcool méthylique, puis désionisé sur de la Zéro-

lite FF sous forme OH dans de l'alcool méthylique L'éluat méthanolique a été évaporé, et l'on a séché le résidu de l'évaporation par distillation azéotrope à partir d'un

mélange d'alcool méthylique et de benzène On a recris-

tallisé le résidu d'évaporation à partir de 10 ml d'al-

cool méthylique et de 30 ml d'éther pour obtenir 495 mg d'un produit, point de fusion 259-26 O C " O = -67,1

( c 0,3; alcool méthylique) Rf 0,14/51, 0,58/52.

1 0990

Pour Cll H 22 N 403 ( 258,3): calculé: 51,15 % C, 8,58 % H, 21,69 % N; constaté: 50,82 % C, 8,63 % H, 21,37 % N.

On a cristallisé à partir d'alcool méthyli-

que et d'éther un échantillon analytique de bromhydrate d'alanylalanylalaninéthylamide; point de fusion

284-289 C.

Pour Cll H 22 N 406,H Br ( 339,2): calculé: 38,95 % C, 6,83 % H, 16,52 % N; constaté: 38,70 % C, 6,91 % H, 16,18 % N.

(Carboxy-3 propionyl)alanylalanylalaniné-

thylamide. On a ajouté 300 mg d'anhydride succinique à une solution de 260 mg d'alanylalanylalaninéthylamide

dans 5 ml de diméthylformamide et 30 ml de tétrahydrofu-

ranne, puis on a chauffé la solution de réaction pendant

2 heures au reflux On a ensuite extrait le produit cris-

tallin séparé par filtration, puis lavé au tétrahydrofu-

ranne et à l'éther, pour obtenir par cristallisation à partir de 18 ml d'eau 180 mg d'un produit de point de

fusion 285-287 C.

Pour C 15 H 26 N 406 ( 359,2)} 1 k O = -6 l,8 o (c 0,3; alcool méthylique) : calculé: 50,16 % C, 7,30 % H, 15,60 % N; constaté: 50,10 % C, 7,40 % H, 15,61 % N.

(Carboxy-4 butyryl)alanylalanylalaninéthy-

lamide.

Ce produit a été préparé par un procédé ana-

logue à celui du dérivé carboxy-3 propionyle, par acyla-

tion à l'anhydride glutarique, pour un rendement de 65 %.

Le produit obtenu possède un point de fusion de 278 à 2800 C, LC 3 D 2 O _ 86,0 (c 0,3; alcool méthylique à 50 %) Pour C 16 H 28 N 405 ( 372,4) calculé: 51,60 % C, 7,58 % H, 15,04 % N; constaté: 51,24 % C, 7,68 % H, 14,90 % N.

EXEMPLE-2

Benzyloxycarbonylalaninephényléthylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé ana-

logue à celui de l'éthylamide correspondant présenté

dans l'exemple 1 Rendement 87 %, point de fusion 125-

126 C.

Pour C 19 H 22 N 203 ( 326,3) 7 (c 0,3; diméthylformamide): calculé: 69, 94 % C, 6,80 % H, 8,59 % N; constaté: 70,32 % C, 7,01 % H, 8,70 % N.

Benzyloxycarbonylalanylalaninephényléthyla-

mide.

On a ajouté 5,5 g de N,N'-dicyclohexylcar-

bodiimide à la solution de 4,9 g d'alaninephényléthylami-

de libérée du dérivé benzyloxycarbonyle correspondant dégagé par une solution à 36 % de bromure d'hydrogène dans de l'acide acétique (Rf 0, 44/51; 0,58/52) et de ,6 g de benzyloxycarbonylalanine dans 200 ml de dimé-

thylformamide, refroidi à -5 C Après 1 heure d'agita-

tion à O C et 3 heures à la température ambiante, on a extrait par filtration la N,N'dicyclohexylurée ainsi séparée, on l'a lavée au diméthylformamide, puis on a

fait évaporer le filtrat sous vide On a mélangé progres-

sivement au résidu d'évaporation cristallin de l'acide

chlorhydrique 1 M, de l'eau, une solution à 5 % de carbo-

nate de sodium monohydrogéné, de l'eau, le résidu étant ensuite cristallisé à partir d'un mélange de 150 ml d'alcool éthylique et de 100 ml d'eau L'on a obtenu 7,75 g d'un produit présentant un point de fusion de

211-212 C l Ck = -1,95 ; (c 0,3; diméthylformamide).

Pour C 22 H 27 N 304 ( 397,5): calculé: 66,55 % C, 6,85 % H, 10,57 % N; constaté: 66,89 % C, 6,99 % H, 10,74 % N. Alanylalaninephényléthylamide.

Ce produit a été préparé comme l'alanylala-

ny 1 alaninéthylamide de l'Exemple 1 Rendement 93 %

point de fusion 107-1100 C Rf 0,31/Sl, 0,63/52.

ç, 120

L'JD = -44,90 ( c 0,3; alcool méthylique).

Pour C,4 H 2 l N 302 ( 263,4) calculé 63,85 % C, 8,04 % H, 15,96 % N constaté 63,38 % C, 8,14 % H, 16,20 % N.

(Carboxy-3 propi onyl)alanylalaninephényl-

éthylamide.

Ce produit a été préparé d'une manière ana-

logue au (carboxy-3 priopionyl)alanylalany 1 a 1 aniinéthylamai-

de présenté dans l'Exemple i Rendement 63 % point de fusion 209-2110 C 20 = 45,30 ( c 0,3; alcool m'

thylique à 50 %).

Pour C 18 H 25 N 305 ( 364,2) calculé 59,37 % C, 6,92 % H-, 11,54 % N constaté 59,22 % C, 6,85 % H, 11,82 %

(Carboxy-4 butyryl) alanylalaninephény 11-

éthylamide.

Ce produit a été préparé d'une manière ana-

logue au (carboxy-3 butyryl)alanyl alanyialantinétlhyla-nîlde

présenté dans l'Exemple 1 Rendement 57 % point de fu-

sion 208-2090 C -c 3 -61,4 ' (c 0,3 alcool ïctt&thyli-

que). Pu C 19 H 27 N 3 4 ( 377,5) calculé 60,46 % C, 7,21 % H 1, 11,-13 % N constaté 59,58 % C, 7,19 % H, 11,25 % N.

EXEMPLE 3

Prolinéthyl amide.

on a ajouté 40 ml d'une sclution Eà 36 % de

bromure d'hydrogène dans de l'acide acétique à une solu-

tion de il g de benzyloxyrcarbonylprolinéthylamide dans ml d'acide acétique Au bout d'uine heulre, on a ajout 300 ml d'éther à la solution l réacti-'on, l Io reydxt (non cristallin) séparé a 4 t; &:4 Cau cou p 2 h-, ,,-:-1 dans uin dessiccateuîsur du p xci de horor t Jie l'hydroxyde de sodium, puis mis en suspension dans 60 ml

d'une solution ammoniacale saturée de chloroforme à O C.

On a laissé reposer pendant 20 minutes à 3 C, puis on a

filtré la suspension de réaction et fait évaporer le fil-

trat On a obtenu 5,7 g d'un produit non cristallin,

Rf 0,25/51, 0,56/52.

Benzyloxycarbonylalanylprolinéthylamide.

On a ajouté 9,0 g de N,N'-dicyclohexylcar-

bodiimide à une solution de 5,6 g de prolinéthylamide et de 9,0 g de benzyloxycarbonylalanine dans un mélange de ml de diméthylformamide et de 60 ml de tétrahydrofu- ranne refroidi à -5 C Après agitation à O C pendant 1 heure, on a laissé reposer le mélange de réaction pendant

12 heures à la température ambiante La N,N'dicyclohexyl-

urée séparée a été extraite par filtration, puis on a

fait évaporer le filtrat et dissous le résidu de l'évapo-

ration dans le mélange acétate d'éthyle-eau L'on a en-

suite successivement agité la phase organique avec de l'acide chlorhydrique 1 M, de l'eau, du carbonate de sodium monohydrogéné à 5 %, puis avec de l'eau, pour le sécher ensuite sur du sulfate de sodium anhydre et le faire évaporer Le résidu d'évaporation a été cristallisé à partir d'un mélange de 30 ml d'éther et de 30 ml

d'éther de pétrole pour donner 5,4 g d'un produit présen-

tant un point de fusion de 99 à 101 C 20 = 93,40

(c 0,3; alcool méthylique).

Pour C 18 H 25 N 304 ( 347,4) calculé: 62,23 % C, 7,25 % H, 12,09 % N; constaté: 62,13 % C, 7,44 % H, 11,70 % N.

Alanylprolinéthylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui du proline-éthylamide, avec un rende-

ment quantitatif, à partir du dérivé benzyloxycarbonyle

correspondant Rf 0,13/51, 0,57/52.

(Carboxy-3 propionyl)alanylprolinéthylamide.

On a ajouté 500 mg d'anhydride succinique à une solution de 500 mg d'alanylprolinéthylamide dans ml de dioxanne et 0,25 ml de diméthylformamide, et l'on a chauffé la solution de réaction au reflux pendant 30 minutes Après évaporation, on a cristallisé le rési- du d'évaporation à partir de 10 ml d'acétone et 30 ml d'éther pour obtenir 510 mg d'un produit présentant un point de fusion de 139-141 C 2 = _ 129, 20 (c 0,3;

alcool méthylique à 50 %).

Pour C 15 H 26 N 406 ( 359,2) calculé: 53,53 % C, 7,38 % H, 13,38 % N; constante: 52,90 % C, 7,45 % H, 12,98 % N.

EXEMPLE 4

Benzyloxycarbonylalanylalanylprolinéthylami-

de.

On a ajouté 1,6 g de N,N'-dicyclohexylcarbo-

diimide à une solution d'analylprolinéthylamide (préparée à partir de 2, 45 g d'un dérivé benzyloxycarbonyle sous

l'action du bromure d'hydrogène à 36 % dans l'acide acé-

tique, suivie d'une libération sur Zerolite FF sous for-

me OH) dans 20 ml de diméthylformamide et 1,55 g de ben-

zyloxycarbonylalanine refroidie à -5 C Après agitation pendant 1 heure à O C, on a laissé reposer A 3 C pendant

12 heures, puis on a extrait par filtration la N,N'dicy-

clohexylurée séparée L'on a ensuite fait évaporer le filtrat, et le résidu d'évaporation non-cristallin a été

dissous dans 50 ml d'acétate d'éthyle On a laissé repo-

ser pendant 12 heures à 3 C, puis on a extrait par fil-

tration le produit séparé pour obtenir 1,75 g d'un pro-

duit présentant un point de fusion de 138-139 C.

Jc} D = -47,0 e (c 0,3; diméthylformamide).

Pour C 21 H 30 N 405 ( 418,5): calculé: 60,27 % C, 7,23 % H, 13,39 % N; constaté: 59,97 % C, 7,21 % H, 13,12 % N.

Benzyloxycarbonylalanylalanylproliné-thyl-

amide.

On a ajouté 11,0 g de N,N'-dicyclohexylcar-

bodiimide à une solution de 14,7 g de benzyloxycarbonyl-

alanylalanine dans 100 ml de diméthylformamide et 7,6 g

de prolinéthylamide prépare à partir du dérivé benzyloxy-

carbonyle correspondant, refroidi à -5 C, et l'on a traité le mélange de réaction selon le procédé habituel pour obtenir 10,6 g d'un produit présentant un point de

* fusion de 139-1400 C = 20 -46,5 (c 0,3; diméthyl-

D =D formamide). Pour C 21 H 30 N 405 ( 418,5) calculé: 60,27 % C, 7,23 % H, 13,39 % N; constaté: 60,08 % C, 7,55 % H, 13,32 % N. Alanylalanylprolinéthylamide. Ce produit a été préparé à partir du dérivé benzyloxycarbonyle correspondant, par le même procédé que l'alanylalanylalaninéthylamide mentionné dans l'Exemple 1 Rendement 69 %, point de fusion 109-111 C Rf 0,14/51,

0,42/52 lCA 20 = -126,1 (c 0,3; alcool méthylique).

Pour C 13 H 24 N 403 ( 284,4): calculé: 54,91 % C, 8,51 % H, 19,70 % N; constaté: 54,43 % C, 8,61 % H, 19,44 % N.

(Carboxy-4 butyryl)alanylalanylprolinéthyl-

amide. On a ajouté 1,7 g dnhydride glutarique à une solution de 4,0 g d'alanylalanylprolinéthylamide dans ml de diméthylformamide, et on a chauffé la solution de réaction pendant 1 heure à 60 C Après évaporation de

la solution de réaction, on a dissous le résidu non-cris-

tallin d'évaporation dans 30 ml d'acétate d'éthyle On a laissé reposer à 3 C pendant 48 heures, puis on a extrait par filtration 3,6 g du produit sépare, qui présentait un point de fusion de 154 à 156 C I 20 -137,3

( c 0,3; alcool méthylique à 50 %).

Pour C 18 H 30 N 404 ( 398,5) calculé: 54,26 % C, 7,59 % H, 14,06 % N;

constaté: 53,96 % C, 7,75 % H, 13,87 %-N.

Carboxy-3 propionyl)alanylalanylprolinéthyl-

amide.

Ce produit a été préparé d'une manière ana-

logue au (carboxy-3 propionyl)alanylalanylalaninéthylami-

de Rendement 71 %, point de fusion 185-186 C.

{cl 20 -69,30 (c 0,3; diméthylformamide).

Pour C 17 H 28 N 406 ( 385,2): calculé: 53,01 % C, 7,33 % H, 14,55 % N; constaté: 52,74 % C, 7,45 % H, 14,44 % N.

EXEMPLE 5

Benzyloxycarbonylalaninisobutylamide.

On a ajouté 14 ml de formiate de chloro-sec-

butyle, à -10 C, à une solution de 23 g de benzyloxycar-

bonylalanine dans 200 ml de chlorure de méthylène et 14 ml de Néthylpipéridine Un traitement analogue à celui mentionné dans l'Exemple 1, par cristallisation à partir de 60 ml d'acétate d'éthyle et 200 ml d'éther de

pétrole, a permis d'obtenir 20,7 g d'un produit prêsen-

87 o tant un point de fusion de 109-111 C 8,7

(c 0,3; diméthylformamide).

Pour C 15 H 22 N 203 ( 278,4): calculé: 64,73 % C, 7,97 % H, 10,06 % N; constaté: 64,45 % C, 8,01 % H, 9,83 % N.

Alaninisobutylamide.

Ce produit a été préparé à partir du dérivé

benzyloxycarbonyle correspondant, par un procédé analo-

gue à celui de l'Exemple 1 Rf 0,32/51, 0,69/52.

Benzyloxycarbonylalanylalanylalaninisobutyl-

amide.

Ce produit a été préparé par un procédé ana-

logue à celui du benzyloxycarbonylalanylalanylalaninéthyl-

amide correspondant Rendement 58 %, point de fusion 260-

2 o

262 C r 3 20 = -10,9 (c 0,3; diméthylforrtamide).

Pour C 21 H 32 N 405 ( 420,5): calculé: 59,98 % C, 7,67 % H, 13,32 % N; constaté: 59,63 % C, 7,70 % H, 13,20 % N Alanylalanylalaninisobutylamide. Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui de l'alanylalanylalaninéthylamide cor-

respondant Rendement 76 %, point de fusion 249-252 C.

Rf 0,28/51, 0,68/52 Ie 4 20 -66,4 ( c 0,3; alcool méthylique). Pour C 13 H 26 N 403,H 20 ( 304,4) calculé: 51,30 % C, 9,27 % H, 18,41 % N; constaté: 51,10 % C, 8,73 % H, 18,71 % N. On a cristallisé à partir d'un mélange

d'alcool méthylique et d'éther un échantillon, pour ana-

lyse, de bromhydrate d'alanylalanylalanineisobutylamide,

avec un point de fusion de 214-216 C.

Pour C 13 H 26 N 403,H Br ( 367,3) calculé: 42,51 % C, 7,41 % H, 15,25 % N; constaté: 42,54 % C, 7,36 % H, 15,23 % N.

(Carboxy-3 propionyl)alanylalanylalaniniso-

butylamide.

Ce produit a été préparé d'une manière ana-

logue au dérivé éthylamide correspondant Rendement 81 %,

point de fusion 283-286 C l} -58,20 (c 0,3; di-

méthylformamide). Pour C 17 H 30 N 406 ( 387,2) calculé: 52,74 % C, 7,81 % H, 14,47 % N; constaté: 52,34 % C, 7,93 % H, 14,58 % N.

(Carboxy-4 butyryl)alanylalanylalaninisobu-

tylamide.

Ce produit a été préparé d'une manière ana-

logue au dérivé éthylamide mentionné dans l'Exemple 1.

292 93 o Ctol 20 Rendement 69 %, point de fusion 292-293 C D =-82,7

(c 0,3; alcool méthylique à 50 %).

Pour C 18 32 N 405 ( 400,5) calculé: 53,99 % C, 8,05 % H, 13,99 % N; constaté: 54,33 % C, 7,88 % H, 14,19 % N.

EXEMPLE 6:

Benzyloxycarbonylalaninepropylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé ana-

logue au benzyloxycarbonylalaninéthylamide de l'Exemple

1 Rendement 87 %, point de fusion 118-119 C.

= 8,40 (c 0,3; diméthylformamide).

D Pour C 14 H 20 N 203 ( 264,3) calculé: 63,62 % C, 7,63 % H, 10,60 % N; constaté: 63,64 % C, 7,74 % H, 10,46 % N.

Benzyloxycarbonylalanylalanylalaninepro-

pylamide. Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui de l'éthylamide correspondant mentionné

dans l'Exemple 1 Rendement 56 %, point de fusion 268-

2690 C lc J DO = -10,6 (c 0,3; diméthylformamide) Pour C 2 o O H 3 N 405 ( 406,5): calculé: 59,10 C, 7,44 % H, 13,78 % N; constaté: 58,74 % C, 7,61 % H, 13,78 % N.

Alanylalanylalaninepropylamide.

Ce produit a été préparé d'une manière analogue à l'alanylalanylalaninéthylamide mentionné dans l'Exemple 1 Rendement 71 %, point de fusion 265-268 O C.

Rf 0,18/51, 057/52 t 43 20 = -82,1 (c 0,3; alcool mé-

Rf O 1/1, O,57/52 ' J D=

thylique à 50 %).

Pour C 12 H 24 N 403 ( 272,4) calculé: 52,92 % C, 8,88 % H, 20,57 % N; constaté: 53,15 % C, 8,87 % H, 20,54 % N.

(Carboxy-3 propionyl)alanylalanylalanine-

propylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui du dérivé éthylamide correspondant men-

tionné dans l'Exemple 1 Rendement 88 %, point de fusion 284-287 'C 20 = 59,1 (c 0,3, alcool méthylique à D

50 %).

Pour C 16 H 28 N 406 ( 373,2): calculé: 51,50 % C, 7,56 % H, 15,01 % N; constaté: 51,69 % C, 7,52 % H, 14,67 % N.

(Carboxy-4 butyryl)alanylalanylalaninepro-

pylamide. Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui du dérivé éthylamide correspondant men-

tionné aans l'Exemple 1 Rendement 89 %, point de fusion 283-2850 C 20 = 84,7 (c 0,3; alcool méthylique à

50 %).

Pour C 17 H 30 N 405 ( 386,5): calculé: 52,84 % C, 7,82 % H, 14,50 % N; constaté: 53,24 % C, 7,92 % H, 14,55 % N.

EXEMPLE 7:

Benzyloxycarbonylprolinepropylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui du dérivé éthylamide correspondant de

la benzyloxycarbonylalanine mentionnée dans l'Exemple 1.

Rendement 83 %, point de fusion 74-75 e C. Pour C 1622 N 203 ( 290,4) calculé: 66,19 % C, 7,64 % H, 9,65 % N; constaté: 66,05 % C, 7,41 % H, 9, 52 % N. Prolinepropylamide. Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui du prolinéthylamide mentionné dans

l'Exemple 3 Rf 0,21/51, 0,61/52.

Benzyloxycarbonylalanylprolinepropylamide. Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui de l'éthylamide correspondant mention-

né dans l'Exemple 3 Rendement 73 %, point de fusion

117-1200 C.

Pour C 1 e 27 N 304 ( 361,4): calculé: 63,14 % C, 7,53 % H, 11,63 % N; constaté: 63,03 % C, 7,39 % H, 11,28 % N.

Alanylprolinepropylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui de l'éthylamide correspondant mention-

né dans les Exemples 1 et 3 Rendement 79 % Rf 0,14/51,

0,49/52.

Benzyloxycarbonylalanylalanylprolinepro- pylamide. Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui du benzyloxycarbonylalaninéthylamide, à

partir de la benzyloxycarbonylalanine et de l'alanylpro-

linepropylamide Rendement 71 %, point de fusion 101-

103 C 20 = _ 47,70 (c 0,3; diméthylformamide).

Pour C 22 H 32 N 405 ( 432,5) calculé: 61,09 % C, 7,46 % H, 12,95 % N; constaté: 61,11 % C, 7,69 % H, 12,98 % N.

Alanylalanylprolinepropylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui de l'éthylamide correspondant mention-

né dans l'Exemple 4 Rendement 68 %, point de fusion 103 à 105 C Rf 0, 12/51, 0,56/52 l = -135,3

(c 0,3; alcool méthylique).

Pour C 14 H 26 N 403 ( 298,4) calculé: 56,35 % C, 8,78 % H, 18,78 % N; constaté: 55,-87 % C, 8,93 % H, 18,78 % N.

(Carboxy-4 butyryl)alanylalanylprolinepro-

pylamide.

Ce produit a été préparé par un procédé analogue à celui de l'éthylamide correspondant mentionné

dans l'Exemple 4 Rendement 73 %, point de fusion 131-

2 o 134 C ta D = -148,7 (c 0,3; alcool méthylique à

50 %).

Pour C 19 H 32 N 404 ( 412,5) calculé: 55,32 % C, 7,82 % H, 13,58 % N; constaté: 55,25 % C, 7,99 % H, 13,74 % N.

EXEMPLE 8:

Ester méthylique de la benzyloxycarbonyl-

prolylalaline.

On a ajouté 11,0 g de N,N'-dicyclohexylcar-

bodiimide à une solution, dans 40 ml de méthylène refroi-

di à -5 C, de 12,45 g de benzyloxycarbonylproline et de

l'ester méthylique de l'alanine dégagé de 7,0 g du chlo-

rhydrate correspondant à l'aide de 7 ml de N-éthylpipéri- dine On a agité la suspension de réaction pendant 1

heure à O C, on a extrait par filtration la N,N'-dicy-

clohexylurée séparée, puis on l'a laissée reposer pen-

dant 12 heures à 3 C On a successivement lavé le fil-

trat avec de l'acide chlorhydrique 1 M, de l'eau, du

carbonate de sodium monohydrogéné à 5 %, puis de l'eau.

On l'a enfin séché sur du sulfate de sodium anhydre.

Après évaporation, on a cristallisé le résidu solide d'évaporation à partir d'un mélange de 100 ml d'acétate d'éthyle et de 500 ml d'éther de pétrole, pour obtenir 12,2 g d'un produit présentant un point de fusion de -49 a C. Benzyloxycarbonylprolylalaninhydrazide. On a ajouté 7,5 ml d'hydrazine hydratée à 80 % à une solution de 10,0 g de l'ester méthylique de la benzyloxycarbonylprolylalanine dans 100 ml d'alcool méthylique, et on a chauffé au reflux pendant 2 heures

la solution de réaction Après évaporation de la solu-

tion, on a cristallisé le résidu solide d'évaporation à partir de 40 ml d'eau et l'on a obtenu 6,8 g d'un produit

présentant un point de fusion de 142-143 C.

Pour C 16 HZ 2 N 404 ( 334,4): calculé: 57,47 % C, 6,63 % H, 16,76 % N; constaté: 57,41 % C, 6,85 % H, 16,90 % N.

Benzyloxycarbonylpropylalanylalaninéthyl-

amide. Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui du benzyloxycarbonylalanylalanylalanin-

éthylamide correspondant mentionné dans l'Exemple 1, a partir du benzyloxycarbonylpropylalaninhydrazine et de l'alanine-éthylamide Rendement 49 %, point de fusion

219-220 C '} 20 = -36,2 (c 0,3; diméthylformamide).

D= Pour C 21 H 30 N 405 ( 418,5) calculé: 60,27 % C, 7,23 % H, 13,39 % N; constaté: 60,08 % C, 7,41 % H, 13,22 % N. Prolylalanylalaninéthylamide. Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui de 1 'alanylalanylalaninéthylamide men-

tionné dans l'Exemple 1 Rendement 53 %, point de fusion

216-219 C Rf 0,07/51, 0,54/52.

Pour C 13 H 24 N 403 ( 284,4) calculé: 54,91 % C, 8,51 % H, 19,17 % N; constaté: 54,49 % C, 8,42 % H, 19,39 % N.

(Carboxy-4 butyryl)prolylalanylalaninéthyl-

amide.

Ce produit a été préparé par un procédé

analogue à celui du (carboxy-4 butyryl)alanylalanylala-

ninéthylamide mentionné dans l'Exemple 1 Rendement 44 %,

point de fusion 172-177 C.

Pour C 18 H 30 N 404 ( 398,5): calculé: 54,26 % C, 7,59 % H, 14,06 % N; constaté: 54,81 % C, 7,43 % H, 14,38 % N.

EXEMPLE 9

(Carboxy-3 acrylol)alanylalanylalaninéthyl-

amide.

On a ajouté 200 mg d'anhydride maléique à une solution de 260 mg d'alanylalanylalaninéthylamide dans 20 ml de diméthylformamide chauffé à 60 C, puis on a chauffé la solution de réaction pendant 30 minutes à 80 C Après évaporation du mélange de réaction, on a

cristallisé le résidu d'évaporation à partir de diméthyl-

formamide et d'alcool 2-propylique, pour obtenir 185 mg d'un produit présentant un point de fusion de 260-266 C

avec décomposition} DO = -35,6 (c 0,3; diméthyl-

formamide).

Pour C H( 356,4)

" 24 N 06

calculé 5 '0,55 % C, 6,79 % H, 15,72 % N constaté 49,97 % C, 7,13 % 1 H 15,83 % N.

Claims

R E V E N D I C A T IONS

1 ) Alcoylamides de carboxyalcanoylpeptides, caractérisés en ce qu'ils ont la formule générale (I):

COOH

x (I) CO B Ala A NH R o: R est un alcoyle à cha ne droite ou ramifiée à 1 & 5 atomes de carbone, ou un aralcoyle, en particulier le phényléthyle,

A est un résidu de proline ou d'alanine à liaison pepti-

dique,

B est un résidu de proline ou d'alanine à liaison pepti-

dique, ou rien, X est un groupement -CH 2-, -CH 2-CH 2-, -CH 2-CH 2-CH 2-, ou

-CH=CH-.

2 ) Procédé de production d'alcoylamides de carboxyalcanoylpeptides de formule générale (I) selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on fait d'abord réagir un composé de formule générale (II):

A NH R (II)

o R et A ont la même signification que dans la formule (I), sur un composé de formule générale (III) Y B Ala (III)

o B a la même signification que dans l'Exemple 1, Y re-

présentant un groupe protecteur facilement éliminable,

par exemple le groupement benzyloxycarbonyle, l'inter-

médiaire produit apres enlèvement du groupe protecteur étant soumis à une réaction sur un dérivé réactif d'un acide dicarboxylique de formule générale (IV) COOH x (IV) COOH o X a la même signification que dans la formule (I), savoir son anhydride, un semi-halogénure, un semi-ester

ou un semi-amide de cet acide.