FR2464717A1 - Compositions d'agents anti-microbiens a liberation maitrisee et leur utilisation - Google Patents

Abstract

L'INVENTION CONCERNE DES COMPOSITIONS A LIBERATION MAITRISEE CONTENANT UN AGENT ANTIMICROBIEN INTIMEMENT DISPERSE DANS UN COPOLYMERE D'ACIDE LACTIQUE ET D'ACIDE GLYCOLIQUE. LA COMPOSITION PERMET DE FOURNIR UNE DOSE EFFICACE D'UN AGENT ANTIMICROBIEN SUR UNE PERIODE DE TEMPS PROLONGEE ET EST BIODEGRADABLE EN SUBSTANCES FACILEMENT METABOLISEES ET EN PRODUITS METABOLIQUES NORMAUX. ELLE PEUT ETRE COMBINEE AVEC DES EXCIPIENTS ET SUPPORTS APPROPRIES.

Description

Cette invention concerne des compositions pouvant fournir une dose

efficace d'un agent antimicrobien à un animal sur une période de temps prolongée et leur utilisation

pour prévenir et traiter des maladies.

On connaît dans le domaine l'idée d'administrer un médicament à un animal sous une forme qui permet de fournir une dose efficace du médicament à l'animal sur une période de temps prolongée. Par exemple, Yolles décrit dans le brevet des E.U.A. No 3.887.699, une composition comprenant un médicament intimement dispersé dans un matériau polymère biodégradable qui est sous forme d'une pellicule pleine qui est implantée de façon souscutanée dans l'animal. Les brevets des E.U.A. No 3.736.646 et 3.875.937 décrivent des polymères et copolymères qui sont utilisables comme dispositifs chirurgicaux et dispositifs de distribution. Le brevet des E. U.A. No 3.773.919 décrit des compositions qui comprennent un polymère de lactideet qui, selon ce brevet, permettent une libération prolongée de

médicaments sur une période de temps maîtrisée.

L'utilisation de compositions polymères pour la libération lente de médicaments dans le traitement de diverses

maladies chez l'animal présente un certain nombre d'inconvé-

nients. Les polymères couramment disponibles sont généralement préparés d'une façon telle que l'enlèvement du catalyseur de polymérisation à partir du polymère est impossible ou irréalisable. Par suite, quand le polymère est placé dans un animal et se dégrade pendant un certain temps, des quantités indésirables de catalyseur de polymérisation comme les oxydes

métalliques ou les acides forts restent dans les tissus animaux.

Ceci est particulièrement indésirable quand les animaux ainsi traités sont utilisés pour la production de viande ou d'autres produits alimentaires. En outre, la plupart des polymères connus dans le domaine ont des caractéristiques physiques qui nécessitent leur administration par implantation; voir le brevet des E.U.A. No 3.887.699. Cette implantation nécessite les services d'une personne connaissant les méthodes

chirurgicales. En outre, comme indiqué dans le brevet des E.U.A.

N0 3.535.419, les compositions polymères à libération lente disponibles à l'heure actuelle ne présentent pas une vitesse de libération suffisamment maîtrisée pour être prévisible sur une période de temps utile. Cet aspect est particulièrement critique quand l'agent actif à administrer peut devenir létal

à des doses élevées et inefficace à des doses insuffisantes.

Cette invention fournit des compositions comprenant un agent pharmacologique qui est efficace de façon prophylactique ou thérapeutique, en combinaison avec un copolymère pouvant libérer uniformément l'agent actif en

quantités efficaces sur une période de temps prédéterminée.

Sont également fournies des compositions copolymères pouvant subir une biodéaradation totale en substances facilement métabolisées. Les compositions-que l'on peut administrer par injection et qui, une fois biodégradées, ne laissent pas de résidus indésirables dans les tissus animaux, sont également incluses. Il est en outre fourni un procédé permettant d'empêcher efficacement la formation de maladies infectieuses chez les animaux et de traitement d'animaux souffrant de

maladies infectieuses.

La présente invention fournit de nouvelles compositions qui permettent la distribution maîtrisée de produits pharmaceutiques à des systèmes animaux, et un procédé de traitement prophylactique et thérapeutique de maladies infectieuses. Plus particulièrement, l'invention fournit une composition à libération maîtrisée pouvant libérer une dose efficace d'un agent antimicrobien sur une période de temps prolongée, et biodégradable en substances facilement métabolisées et en produits métaboliques normaux de l'ingrédient actif, composition qui est utilisable dans le traitement prophylactique et thérapeutique de maladies provoquées par des microorganismes chez-les animaux, et qui contient environ 5 à environ 85 % en poids d'un agent antimicrobien intimement dispersé dans un copolymère obtenu à partir d'environ 60 à environ 95 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une viscosité intrinsèque d'environ 0,08 à 0,30 mesurée dans le chloroforme et un poids moléculaire moyen en poids d'environ 6000 à environ 35000, ladite composition étant en combinaison

avec des excipients et des supports appropriés.

Une composition préférée selon cette invention comprend une quantité efficace, surle plan prophylactique ou thérapeutique, d'un agent pharmaceutique intimement dispersé dans un copolymère obtenu à partir d'environ 60 à environ 90 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 10 % en poids d'acide sglycolique, ayant une viscosité dans le chloroforme d'environ 0,10 à environ 0,25 et un poids

moléculaire moyen en poids d'environ 15000 à environ 30000.

Une composition nettement préférée est une dans laquelle le copolymère contient d'environ 70 à environ 80 % en poids d'unités lactiques et environ 30 à environ 20 % en poids d'unités glycoliques et a une viscosité intrinsèque

d'environ 0,13 à environ 0,23.

Les agents pharmaceutiques particulièrement préférés utilisés dans les compositions sont les agents antimicrobiens comme les tétracyclines, les pénicillines, les céphalosporines, les antibiotiques de type macrolide, les médicaments de type sulfamide, les aminoglycosides et d'autres agents particulièrement utiles dans le traitement et la prévention

des infections microbiennes.

L'invention décrit en outre l'utilisation de ces compositions pour traiter des animaux souffrant d'une maladie microbienne ou suspectés de développer une infection microbienne, qui consiste à administrer à l'animal une composition copolymère pouvant libérer une quantité efficace d'un agent antimicrobien sur une période de temps prolongée. Le procédé est de préférence effectué par administration par voie sous-cutanée ou intramusculaire d'un copolymère dérivé d'environ 60 à environ 95 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 5 % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une viscosité intrinsèque dans le chloroforme d'environ 0,08 à environ 0,30, ledit copolymère contenant une

quantité efficace, uniformément dispersée, d'un agent anti-

microbien et d'autres diluants et excipients appropriés, ladite composition étant uniformément dispersée dans un support ou

diluant approprié pour faciliter l'administration.parentérale.

Une utilisation préférée selon cette invention consiste à administrer par voie sous-cutanée à un animal

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souffrant d'une infection microbienne ou susceptible de souffrir d'une infection microbienne et nécessitant un traitement, une quantité efficace d'une composition copolymère à libération

maîtrisée contenant un agent antimicrobien compatible.

Un matériau copolymère convenant idéalement pour la libération maîtrisée d'une quantité efficace d'un agent pharmaceutique à un animal, de sorte que l'animal puisse être efficacement traité avec un minimum d'administrations, a été découvert. On prépare ce matériau copolymère par un procédé qui permet l'élimination pratiquement totale du catalyseur de polymérisation, ce qui permet la dégradation totale de la matrice copolymère dans un système biologique sans accumulation conséquente de résidus toxiques dans les tissus animaux. Cet aspect de l'invention est particulièrement intéressant pour le traitement d'animaux utilisés dans la

production de viande destinée à la consommation humaine.

Les copolymères nécessités pour les compositions de cette invention sont préparés par condensation d'acide lactique et d'acide glycolique en présence d'un catalyseur de polymérisation facilement éliminable. De.tels catalyseurs comprennent les résines échangeuses d'ions fortement acides sous forme de billes ou de structures dures similaires qui sont facilement enlevées par filtration ou par des techniques similaires. Les catalyseurs de polymérisation particulièrement préférés comprennent les résines échangeuses d'ions fortement acides disponibles dans le commerce comme Amberlite IR-118(H), Dowex HCR-W (préalablement Dowex 50W), Duolite C-20, Amberlyst 15, Dowex M SC-1, Duolite C-25D, Duolite ES-26 et les résines échangeuses d'ions fortement acides apparentées. Le catalyseur est ajouté à un mélange d'environ 60 à environ 95 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 5 % en poids d'acide glycolique. La quantité de catalyseur utilisée n'est pas critique pour la polymérisation mais est typiquement d'environ 0,01 à environ 20,0 parties en poids par rapport au poids total d'acide lactique et d'acide glycolique combinés. La polymérisation est généralement effectuée en l'absence de solvants; on peut cependant utiliser si on le désire des

solvants organiques comme le diméthylsulfoxyde ou le N,N-

diméthylformamide. On effectue généralement la réaction de polymérisation dans un dispositif réactionnel équipé d'un dispositif de condensation, ce qui permet le recueil et l'enlèvement de l'eau qui se forme et ce qui facilite l'enlèvement de tous sous-produits de type lactide et glycolide qui se forment. La réaction de polymérisation est généralement effectuée à une température élevée d'environ 100 à environ 2500C, et à cette température elle est généralement pratiquement terminée en environ 4.8 heures à environ 96 heures. Idéalement, la réaction peut être effectuée sous pression réduite ce qui facilite encore l'enlèvement de l'eau

et des sous-produits.

Le copolymère ainsi formé est- facilement recueilli simplement en filtrant le mélange réactionnel fondu pour enlever pratiquement la totalité du catalyseur de polymérisation échangeur d'ions fortement acide. On peut également refroidir le mélange réactionnel à la température ambiante puis le dissoudre dans un solvant organique approprié, comme le dichlorométhane ou l'acétone, et le filtrer par des moyens classiques de façon à enlever la résine échangeuse d'ions fortement acide insoluble dans le solvant. Le copolymère est ensuite isolé par enlèvement du solvant du filtrat, par exemple par évaporation sous pression réduite. On peut effectuer si on le désire une purification plus poussée du copolymère en le dissolvant à nouveau dans un solvant organique approprié et en le filtrant à nouveau, avec éventuellement si on le désire

l'utilisation d'adjuvants de filtration classiques.

Le copolymère ainsi formé est nécessaire dans les

compositions et leur utilisation fournies par cette invention.

Ces copolymères, bien qu'on n'ait pas encore déterminé leur structure exacte, sont caractérisés comme ayant un poids moléculaire moyen en poids d'environ 6000 à environ 35000, et de préférence d'environ 15000 à environ 30000. Les copolymères sont uniques en leur genre en ce qu'ils sont classés comme substances de poids moléculaire élevé ayant une viscosité intrinsèque d'environ 0,08 à environ 0,30, mesurée par des techniques classiques en utilisant un viscosimètre Ubbelohde dans lequel le chloroforme a un temps de sortie d'environ 51 secondes à 25 C. La viscosité intrinsèque des copolymères est déterminée par les équations suivantes: LIr n t/t Tir r = t/t nint = C o: r est la viscosité relative; to est le temps de sortie du solvant; t est le temps de sortie de la solution; nint est la viscosité intrinsèque; C est la concentration en g/100 ml de solvant; et

L est le logarithme naturel.

Les copolymères utilisés dans les compositions de cette invention sont en outre uniques en ce qu'ils peuvent fournir une libération maîtrisée d'agents pharmaceutiques que l'on ne pouvait pas obtenir jusqu'à présent, en plus d'avoir des caractéristiques physiques qui permettentleur mise en suspension dans un véhicule approprié, en permettant ainsi une

administration commode, par exemple par administration sous-

cutanée. Les compositions peuvent également être administrées

par voie orale ou par implantation.

Les compositions envisagées par cette invention comprennent une quantité efficace d'un agent antimicrobien uniformément mélangé et dispersé dans la matrice copolymère décrite précédemment. Les compositions contiennent d'environ 5 à environ 85 % en poids d'ingrédient actif, idéalement d'environ 20 à environ 75 % en poids, et de préférence encore d'environ 30 à environ 60 % en poids. Les agents antimicrobiens pharmacologiques que l'on peut utiliser dans les compositions comprennent les agents couramment utilisés dans le traitement de la maladie particulière que l'on cherche à prévenir ou à traiter par la composition de l'invention. Les agents actifs couramment utilisés comprennent les antibiotiques comme les

tétracyclines, en particulier la chlortétracycline, l'oxy-

tétracycline, la doxycycline et la tétracycline; les pénicillines comme l'ampicilline, la benzylpénicilline, la pénicilline V; les acides céphalosporaniques comme les

céphalosporine-oximes; les sels de céphalosporine; les oxy-

céphalosporines; les cloxacillines, etc. D'autres antibiotiques que l'on utilise de façon classique dans les compositions de l'invention comprennent la streptomycine, la novabiocine, la néomycine, les sulfonamides, l'érythromycine, la colistine, la lincomycine, l'acide nalidixique, l'apramycine, la salinomycine, la nigéricine, la kanamycine, la kitsamycine, la tylosine, la furaltadone, la vancomycine, le thiostrepton, la gentamycine, la tobramycine, la spiramycine, la ristocétine, la soimycine,

etc. Les compositions préférées contiennent un agent antimicro-

bien choisi parmi l'érythromycinei la spiramycine, la tylosine,

le 5-O-mycaminosyltylonolide, les tétracyclines, l'oxytétra-

cycline, la doxycycline, la néomycine, la lincomycine et les céphalosporines, en particulier les céphalosporine-oximes. Une composition particulièrement préférée de l'invention est une composition comprenant le copolymère et environ 30 à environ 60 % en poids de l'antibiotique de type macrolide qu'est la tylosine, en plus de diluants, excipients et supports

pharmaceutiques couramment utilisés.

Les compositions fournies par cette invention peuvent être préparées selon un certain nombre de façons. Un procédé préféré de préparation consiste à dissoudre une quantité appropriée du copolymère susmentionné dans un solvant organique qui est facilement éliminé par évaporation, puis à ajouter la quantité désirée d'agent actif sur le plan pharmacologique. Par exemple, on peut dissoudre environ 50 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en poids d'acide glycolique, le copolymère ayant une viscosité intrinsèque d'environ 0,23, dans environ 200 à environ 400 ml d'un solvant organique approprié comme le dichlorométhane, l'acétone, l'éther diéthylique, le tétrahydrofuranne, le chloroforme, etc. On peut ajouter au copolymère dissous un agent pharmacologique comme la tylosine, à raison d'environ 30 g. La solution ainsi formée peut être séchée par pulvérisation par des procédés classiques de façon à obtenir un produit solide composé comportant un mélange uniforme de copolymère et d'agent actif et ayant une granulométrie essentiellement uniforme. Une telle. composition peut être utilisée dans le traitement de maladies microbiennes chez les animaux. Par exemple, la composition peut être

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utilisée dans le traitement de la pneumonie chez les jeunes veaux. Si on le désire, une quantité appropriée de la composition peut être mise en suspension dans un véhicule approprié comme l'huile de sésame, le triacétate de glycérol ou la triacétine et injectée par voie sous-cutanée. Un tel traitement fournit la libération lente de l'ingrédient actif dans l'animal, de sorte que la dose efficace de médicament actif est d'environ 8,8 à environ 22 mg par kilo par jour pendant une

période d'environ 6 à 10 jours.

Les compositions de l'invention peuvent également

être préparées en dissolvant le copolymère et l'agent anti-

microbien dans un solvant organique approprié, puis en chassant le solvant par évaporation. La composition copolymère-agent microbien peut ensuite être fondue et le produit fondu peut être extrudé en bâtonnets ayant un diamètre d'environ 2,0 à environ 7,0 mm. Les bâtonnets extrudés peuvent être découpés à la longueur désirée de façon à donner une quantité particulière d'agent actif. Par exemple, une composition qui contient environ 50 g de l'antibiotique tylosine et environ 100 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 70 à environ % en poids d'acide lactique et d'environ 30 à environ 20 % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une viscosité intrinsèque d'environ 0,13 à environ 0,23, peut être extrudée avec fusion en bâtonnets ayant un diamètre d'environ 5,0 mm. Ces bâtonnets sont, une fois refroidis à la température ambiante, durs et translucides et ont donc l'aspect d'un verre de couleur ambre. Ce verre peut être découpé à la longueur désirée de façon à obtenir la dose désirée d'antibiotique. Le bâtonnet de verre d'environ 40 à 80 mm peut être implanté sous la peau de l'animal à traiter, ou bien le verre peut être broyé en petites particules et calibré sur un tamis métallique approprié, ayant par exemple une ouverture de maille d'environ

à 250 microns de façon à obtenir une composition copolymère-

tylosine que l'on peut facilement mettre en suspension dans une huile comme l'huile de sésame ou un produit similaire. L'huile peut ensuite être injectée par voie sous-cutanée-à un animal comme un veau pour permettre un traitement thérapeutique ou prophylactique vis-à-vis d'une infection microbienne, comme la pneumonie. Les compositions fournies par cette invention peuvent contenir, en plus de la matrice copolymère et de l'ingrédient antimicrobien, d'autres substances couramment utilisées dans les compositions médicales. Des diluants, supports, liants, excipients et adjuvants utilisés de façon classique dans de telles compositions comprennent la gomme adragante, la gomme arabique, l'amidon de mais, la gélatine, l'acide alginique, le stéarate de magnésium, le monostéarate d'aluminium, la cire d'abeille, le saccharose, le lactose, le méthylparaben, le propylparaben, le mannitol, le propylènealycol, la cellulose

microcristalline, le silicate de calcium, la silice, la poly-

vinylpyrrolidone, l'alcool cétostéarylique, le beurre de cacao, le monolaurate de polyoxyéthylènesorbitanne, le lactate d'éthyle, le trioléate de sorbitanne, le stéarate de calcium, le talc, etc. Des supports couramment utilisés pour administrer les compositions par injection comprennent l'huile minérale, l'huile d'arachide, l'huile de sésame, ainsi que des solutions aqueuses comme la solution physiologique de chlorure de sodium ou la solution de carboxyméthylcellulose sodique dans l'eau,

ainsi que la polyvinylpyrrolidone aqueuse.

Les compositions envisagées ici peuvent, si on le désire, comprendre plus d'un ingrédient actif sur le plan pharmacologique. Certains agents antibactériens ont par exemple une action immédiate tandis que d'autres ne peuvent être totalement efficaces que si le traitement normal a été effectué de façon répétée. Selon cette invention, on peut combiner un agent pharmacologique à action rapide avec la matrice copolymère susmentionnée, ainsi qu'un agent actif d'action plus lente. L'administration d'une telle composition est alors efficace pour traiter et protéger l'animal hôte vis-à-vis d'une maladie particulière pendant plusieurs jours, semaines ou

même mois.

Un autre aspect de cette invention concerne l'utilisation des nouvelles compositions décrites précédemment en vue d'un traitement. Le traitement fourni ici consiste à administrer à un animal souffrant d'une maladie microbienne infectieuse et nécessitant le traitement, ou à un animal suspecté de développer une maladie et nécessitant un traitement prophylactique, une quantité appropriée d'un copolymère dérivé d'environ 60 à environ 95 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 5 % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant-une viscosité intrinsèque dans le chloroforme d'environ 0,8 à environ 0,30 et ayant un poids moléculaire moyen en poids d'environ 6000 à environ 35000, ledit copolymère contenant en mélange uniforme une quantité efficace d'un agent antimicrobien, ladite quantité de produit administré comprenant le copolymère et l'agent antimicrobien étant telle que l'animal reçoit une quantité efficace d'agent antimicrobien sur une période de temps prolongée et prédéterminée. Un certain nombre d'animaux en particulier les animaux producteurs de produits alimentaires comme les porcs, les ruminants, la volaille, etc., sont affligés de diverses maladies à la naissance et au cours des premiers stades de leur développement. Un grand nombre de ces maladies sont transmises par les parents directement aux jeunes. Une telle maladie dont souffrent couramment les jeunes porcs est la pneumonie mycoplasmique. De même, de nombreux jeunes veaux souffrent et meurent chaque année de pneumonie contractée par suite d'une exposition à des conditions atmosphériques nuisibles. Des pertes économiques importantes résultent chaque année des morts provoquées par ces diverses maladies. Bien que l'on connaisse des agents thérapeutiques qui soient efficaces vis-à-vis de ces maladies, aucun moyen pratique et efficace n'a encore été mis au point pour l'administration de ces agents à de jeunes animaux. Par exemple, le propriétaire d'un.troupeau de plusieurs centaines de jeunes veaux ne peut manifestement pas traiter ce troupeau par un agent thérapeutique qui nécessite des administrations quotidiennes multiples. Bien que certains agents thérapeutiques soient efficaces par voie orale et peuvent être ajoutés aux aliments ou à l'eau, les très jeunes animaux comme les porcs et les veaux nouveaux-nés ne consomment pas de quantités suffisantes de ces substances pour absorber une dose d'agent actif suffisamment importante pour

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traiter efficacement la maladie. En outre, des pertes

substantielles peuvent être évitées si les animaux nouveaux-

nés pouvaient être protégés des maladies par traitement prophylactique jusqu'au moment o les animaux ont un système immunologique suffisamment développé pour combattre

efficacement les maladies auxquelles ils sont exposés.

Selon le procédé de cette invention, une composition à libération maîtrisée telle que décrite précédemment est administrée à un animal de sorte que l'animal reçoit, avec une seule administration, une dose efficace d'agent microbien continuellement pendant plusieurs jours. Par exemple, une composition à libération maîtrisée comprenant d'environ 2,0 à environ 12,0 g d'un antibiotique comme la tylosine ou l'oxytétracycline et d'environ 1,0 à environ 12,0 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en poids d'acide glycolique, peut être extrudée en un bâtonnet vitreux, broyée, tamisée jusqu'à uniformité à travers un tamis d'une ouverture de maille de 177 à 105 microns et mise en suspension dans de l'huile de sésame, du triacétate de glycérol ou de la triacétine contenant environ 1 à environ 2 % de monostéarate d'aluminium et environ 1 à environ 2 % de cire d'abeille, pour une administration sous-cutanée commode à un jeune veau pesant environ 45 à environ 90 kg. Un tel traitement permet de libérer dans l'animal l'ingrédient actif à raison d'environ 2,2 à environ 33. mg/kg chaque jour pendant environ huit jours. Ce traitement est particulièrement efficace pour le traitement thérapeutique et

prophylactique de la pneumonie chez les veaux.

Bien que les compositions à libération maîtrisée soient de préférence administrées par injection sous-cutanée ou intramusculaire selon cette invention, un traitement par d'autres voies d'administration est également envisagé. Par exemple, l'agent antimicrobien peut être préparé avec le copolymère et des liants et supports supplémentaires et moulé selon un bol approprié pour une administration par voie orale commode. Ou bien, les compositions à libération maîtrisée peuvent être extrudées en bâtonnets ou articles similaires et implantées sous la peau de l'animal selon des techniques classiques. En outre, les compositions peuvent être enfermées ou encapsulées dans un dispositif convenant pour l'administration sous forme de suppositoires ou sous forme d'un dispositif intra-utérin ou intra-mammaire. De telles compositions sont ainsi efficaces pour un traitement prolongé

de la mastite et des maladies similaires.

La quantité particulière de composition à libération maîtrisée nécessaire pour un traitement particulier variera selon l'espèce, l'âge et le poids de l'animal hôte à traiter, la maladie particulière envisagée ou traitée, ainsi que l'agent microbien particulier choisi pour le traitement, la voie d'administration et la fréquence. En général, une quantité de médicament à libération maîtrisée sera administrée

pour que l'administration quotidienne d'ingrédient anti-

microbien soit comparable ou quelque peu inférieure à la dose

quotidienne recommandée pour ce médicament actif particulier.

Par exemple, on sait que la tylosine est efficace dans le traitement de la pneumonie contagieuse des veaux, la diphtérie, le fourchet, la métrite et la pneumonie chez le bétail, et l'érysipèle, la pneumonie, la dysenterie et l'arthrite due au mycoplasma chez les porcs. La dose efficace de tylosine dans le traitement de ces maladies est d'environ 2,2 à environ 44 mg/kg de poids corporel, quand on l'administre par voie intramusculaire. Selon le procédé de cette invention, on administre une composition à libération maîtrisée de copolymère et de tylosine de sorte que la dose quotidienne de tylosine soit d'environ 1,1 à environ 33 mg/kg de poids corporel. Cette composition est telle que la distribution globale d'ingrédient antimicrobien est effectuée en environ 5 à environ 10 jours, généralement en environ 7 ou 8 jours. On envisage que, dans un aspect de cette invention, de jeunes veaux (âgés de 2 à environ 25 jours) peuvent être efficacement protégés et traités pour une maladie comme la pneumonie, par administration sous-cutanée d'une composition de cette invention contenant 2,0 à environ 10,0 a de tylosine une fois tous les 7 à 10 jours, le nombre total de ces traitements étant de 1 à environ 4, ou comme nécessité par la sévérité de l'état à traiter ou vis-à-vis duquel on désire se prémunir. Les compositions et leur utilisation fournies par cette invention ont été essayées dans plusieur essais conçus pour montrer leur utilité et leur efficacité. L'un de ces essais consiste à traiter des veaux en leur injectant des doses variables de tylosine dans des compositions à libération maîtrisée. La tylosine est préparée avec un copolymère dérivé d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en

poids d'acide glycolique, ayant une viscosité d'environ 0,20.

Les compositions sont extrudées en bâtonnets de verre. Les bâtonnets de verre sont broyés, tamisés sur un tamis d'environ à 200 microns puis mis en suspension dans 5 ml d'huile de sésame. On prépare trois compositions de sorte que les doses efficaces de tylosine sont 5,5 mg/kg/jour, Ilmg/kg/jour et 16,5 mg/kg/jour respectivement. Les compositions contiennent également environ l à 2 % en poids de cire d'abeille et environ 1,5 à environ 2,5 % en poids de monostéarate d'aluminium, ingrédient qui améliore les caractéristiques d'injection en seringue. Les compositions ainsi préparées sont administrées par voie sous-cutanée dans le

cou de jeunes veaux souffrant de pneumonie bactérienne naturelle.

Quinze veaux sont conservés comme témoins et ne reçoivent pas.

de médicament. On traite trois croupes de quinze-veaux chacun le premier jour et à nouveau le septième jour avec les trois

compositions. On détermine la mortalité après quatorze jours.

Les résultats de l'essai sont donnés dans le Tableau I.

TABLEAU I

Dose de tylosine Mortalité (mg/kg/jour) (sur quinze) Témoin i0

,5 4

il,0 6

16,5 3

Dans une étude similaire, vingt jeunes veaux

souffrant de pneumonie naturelle sont traités par voie sous-

cutanée le jour zéro et à nouveau le septième jour avec une composition de tylosine conçue pour libérer environ 8,8 mg/kg/ jour pendant environ sept jours. On conserve dix veaux infectés comme témoins et on ne les traite pas. Au cours de l'expérience, on effectue diverses observations cliniques, comprenant l'écoulement nasal, l'écoulement oculaire et la

diarrhée. On note les températures rectales et la mortalité.

Parmi le groupe témoin ne recevant pas de médicament,.six des dix animaux infectés sont morts au vingt-et-unième jour (mortalité de 60 %). Dans le groupe traité, seuls cinq des vingt animaux infectés sont morts (mortalité de 25 %). Le Tableau II ci-dessous donne -la température rectale moyenne quotidienne du groupe témoin et du groupe traité. Les résultats montrent que le groupe traité a des températures uniformément inférieures par rapport au groupe témoin, ce qui indique que le groupe traité présente une infection moins

sévère que le groupe témoin.

TABLEAU II

Températures rectales quotidiennes moyennes ( C) Jours d'expérience

1 2 5 7 8 9 12 13 14

Groupe témoin 39,1 39,5 39,2 39,3 39,9 39,7 39,4 39,5 39,65 Groupe traité 39,2 39,2 38,95 39,0 39,6 39,25 38,9 39,1 38,95 Unfl Un traitement prophylactique particulièrement préféré selon cette invention consiste à administrer à de jeunes porcs une quantité efficace d'une composition de cette invention pour la prévention de la pneumonie mycoplasmique provoquée par Mycoplasma hyopneumoniae. On a estimé que cette maladie particulière se produit sur plus de la moitié des porcs dans le monde et provoque une perte économique moyenne d'environ un dollar par tête. Cette maladie particulière est transmise de la truie à un ou plusieurs porcs nouveaux-nés dans une portée dans les quelques jours qui suivent la naissance de la portée. En raison de sa nature contagieuse, la maladie peut être rapidement transmise à la plupart des autres nouveaux-nés de la portée. Bien que l'on ne connaisse aucun médicament qui soit efficace sur cette maladie une fois que l'animal a été infecté, certains médicaments, y compris la tylosine et la chlortétracycline, sont efficaces de façon prophylactique quand ils sont administrés à l'animal avant le contact avec la maladie. Alors que des injections quotidiennes de ces agents actifs permettraient de lutter vraisemblablement contre la maladie, un tel traitement n'est pas réalisable en raison du travail nécessaire, du prix, de

l'irritation du site d'injection et des facteurs apparentés.

En outre, les additifs alimentaires et l'addition de l'agent thérapeutique à de l'eau de boisson ne sont pas efficaces simplement car les animaux nouveaux-nés ne consomment pas des quantités suffisantes de ces substances pour ingérer une dose

efficace de l'agent thérapeutique.

Le procédé de la présente invention fournit un moyen grâce auquel les animaux nouveaux-nés et les jeunes animaux peuvent être efficacement protégés de l'infection par la pneumonie mycoplasmique. Ce procédé considère donc le traitement

de jeunes animaux par une composition d'agent antimyco-

plasmique et de copolymère, comme celles décrites précédemment.

Une telle composition peut être administrée à la naissance et périodiquement par la suite comme le nécessite le sevrage, ce qui fournit un traitement prophylactique efficace vis-à-vis de la maladie. Des compositions types utilisées pour le traitement de la pneumonie mycoplasmique chez les jeunes animaux selon le procédé de cette invention comprennent le copolymère susmentionné, dérivé d'environ 60 à environ 95 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 5 % en poids d'acide glycolique, et un agent antimycoplasmique approprié comme la tylosine ou la chlortétracycline. Un procédé particulièrement préféré de traitement'prophylactique selon cette invention consiste à administrer une composition à

libération maîtrisée du copolymère susmentionné et de tylosine.

Bien qu'il soit indiqué que la tylosine soit inefficace dans le traitement de la pneumonie mycoplasmique, elle est de façon surprenante et significative efficace sur le plan prophylactique vis-à-vis de cette maladie quand elle est administrée selon le procédé de l'invention. Par exemple, des compositions comprenant environ 100 à environ 1500 ma de tylosine intimement dispersées dans environ 100 à environ 1500 ma d'un copolymère dérivé d'environ 70 à environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 30 à environ 20 % en poids d'acide alycolique, ayant une viscosité d'environ 0,13 à environ 0,23 peuvent être administrées à un porc nouveau-né à raison d'environ 10 à environ 50 mc/kg à peu près une fois tous les sept à quatorze jours. Un tel traitement permet de protéger uniformément et continuellement le jeune animal de la

pneumonie mycoplasmique.

Comme indiqué précédemment, les compositions peuvent

être administrées selon l'une quelconque de plusieurs façons.

Pour le traitement des jeunes porcs, les compositions sont idéalement extrudées en bâtonnets et les bâtonnets sont découpés à la longueur appropriée, par exemple environ 20 mm, pour obtenir la dose désirée d'inarédient actif. Un tel bâtonnet peut être implanté de façon souscutanée dans l'animal. Les bâtonnets composés peuvent également être broyés jusqu'à uniformité et mis en suspension dans un support

approprié pour une injection sous-cutanée ou intramusculaire.

Les exemples détaillés suivants sont donnés à titre d'illustration de certains modes de réalisation spécifiques de l'invention.

EXEMPLE' 1

Dans un ballon à fond rond à trois tubulures équipé d'un réfrigérant et d'un thermomètre, on place 864,0 g d'acide lactique, 201,0 g d'acide glycolique et 12,0 g d'une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H. On agite et on chauffe le mélange à 130 C pendant trois heures, période pendant laquelle 400 ml d'eau distillent et sont recueillis. Apres avoir écarté l'eau ainsi produite, on poursuit l'agitation et le chauffage et on réduit progressivement la pression sous vide en trois heures, après quoi la température du mélance réactionnel augmente à 150 C à une pression finale de 6,65 millibars. On ajoute 12,0 g supplémentaires de catalyseur Dowex HCR-W2-H au mélange réactionnel puis on chauffe le mélange à 170 C à 6,65 millibars pendant 24 heures puis à C à 6,65 millibars pendant 48 heures supplémentaires. Puis on filtre le mélange réactionnel fondu pour enlever la majeure partie du catalyseur de polymérisation échangeur d'ions, et on laisse le filtrat refroidir jusqu'à la température ambiante pour obtenir 700 a d'un copolymère à 80 % d'acide lactique et % d'acide glycolique. On analyse le copolymère par spectrométrie de résonance magnétique nucléaire des protons et on montre qu'il contient 76 % en poids de motifs acides lactiques. On détermine la viscosité du copolymère dans un viscosimètre Ubbelohde dans lequel le chloroforme a un temps de sortie de 51 secondes à 25 C. On dissout le copolymère dans du chloroforme à une concentration de 0,50 g pour 100 ml de solvant. Puis on détermine la viscosité intrinsèque du copolymère selon les formules: 1rel =t int = rel t C o o: n re = viscosité relative rel to = temps de sortie du solvant (CHC13) t = temps de sortie de la solution int = viscosité intrinsèque Reint C = concentration en g/100 ml On détermine que la viscosité intrinsèque du copolymère ainsi

préparé est 0,19 dl/g.

EXEMPLE 2

En suivant le mode opératoire général de l'Exemple 1, on condense 432 g d'acide lactique et 101 g d'acide glycolique en présence d'un total de 12, 0 g d'un catalyseur de polymérisation échangeur d'ions Amberlyst 15 et l'on obtient 350 g d'un copolymère comprenant environ 80 % de motifs acides lactiques et environ 20 % de motifs acides glycoliques. Le

copolymère a la viscosité intrinsèque suivante: 0,18 dl/g.

EXEMPLE 3

En suivant le mode opératoire général de l'Exemple 1,

on condense 422,0 g d'acide lactique avec 144,0 g d'acide aly-

colique en présence d'un total de 12,0 g de catalyseur de

polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-

W2-H. Après enlèvement du catalyseur par filtration du mélange réactionnel fondu, on obtient 350 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 75 % en poids d'acide lactique et d'environ % en poids d'acide glycolique. Le copolymère présente la

viscosité intrinsèque suivante: 0,19 dl/g.

EXEMPLE 4

En suivant le mode opératoire général de l'Exemple 1, on condense 1080 o d'acide lactique avec 252 g d'acide glycolique en présence d'un total de 30,0 g de catalyseur de

polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-

W2-H pour obtenir, après enlèvement du catalyseur, 750 g d'un copolymère dont une RMN du proton montre qu'il contient environ 79 % de motifs acides lactiques et environ 21 % de motifs acides glycoliques. Le copolymère présente la viscosité intrinsèque

suivante: 0,20 dl/g.

EXEMPLE 5

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 1, on condense 1080 a d'acide lactique avec 120 g d'acide glycolique en présence d'un total de 5,0 g de catalyseur de polymérisation qui est une résine échanceuse d'ions Dowex HCR-W2-H et l'on obtient, après traitement, 630 c d'un copolymère contenant environ 90 % en poids d'acide lactique et environ 10 % en poids d'acide alycolique. Le copolymère a une viscosité intrinsèque

de 0,2.0 dl/g.

EXEMPLE 6

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 1, on condense 710 g d'acide lacticue avec 190 g d'acide clycolique en présence d'un total de 12,0 g d'un catalyseur de polymérisation qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H et l'on obtient 500 g d'un copolymère comprenant environ 70 % de motifs acides lactiques et environ 30 % de motifs acides glycoliques. Le copolymère a une viscosité

intrinsèque de 0,12 après 24 heures à 175 C.

EXEMPLE 7

On suit le mode opératoire de l'Exemple 1 pour condenser 1080 g d'acide lactique avec 120 g d'acide glycolique

en présence d'un total de 30,0 g d'un catalyseur de polymérisa-

tion qui est une résine échangeuse d'ions Dowex HCR-W2-H.

Apres traitement, on recueille 750 g d'un copolymère contenant environ 89 % en poids d'acide lactique et environ 11 % d'acide glycolique et ayant une viscosité intrinsèque de

0,20 dl/g.

Les copolymères fournis par cette invention ont en outre été caractérisés par chromatoaraphie de perméabilité sur gel (chromatographie liquide sous pression élevée) et

détermination ultérieure du poids moléculaire. La chromatogra-

phie de perméabilité sur gel sépare les molécules de l'échantillon en raison des différences de la dimension moléculaire effective en solution. La séparation est effectuée en raison de la répartition de la dimension des pores dans le matériau de garniture. Cette technique analytique permet la détermination du poids moléculaire moyen en poids, du poids moléculaire moyen en nombre, de la distribution du poids

moléculaire et l'indice de dispersion des matériaux polymères.

Plusieurs expériences de ce type ont été effectuées sur les copolymères de cette invention. On a utilisé des colonnes chromatographiques de perméabilité sur sel classiques,

et le support dans chaque cas est du ptyracel du commerce.

Tous les échantillons et références ont été dissous dans une solution de 80 parties de tétrahydrofuranne et 20 parties de

dichlorométhane. On a utilisé la méthode indirecte (c'est-à-

dire la "Méthode du Facteur Q") de calibrage des çolonnes chromatographiques pour obtenir les moyennes des poids moléculaires pour les copolymères de l'invention. On utilise dans l'étalonnage du polystyrène commercial avec un facteur Q de 41,3. Le tableau suivant donne plusieurs déterminations du poids moléculaire par des techniques chromatographiques de perméabilité sur cel classiques comme indiqué précédemment. On trouvera une discussion plus détaillée de la technique utilisée dans Slade, Polymer Molecular Weights, MJarcel Deckker, Inc., 1975. Dans le tableau, la colonne I donne les proportions relatives de motifs acides lactiques et acides glycoliques constituant le copolymère analysé. La colonne II donne la viscosité intrinsèque de chaque copolymère analysé. La colonne III indique la résine échanaeuse d'ions fortement acide utilisée pour préparer le copolymère qu'on analyse. La colonne IV donne la dimension moyenne en poids (en angstrôms) déterminée par la durée de rétention chromatographique de perméabilité sur gel pour le copolymère particulier. La colonne V donne les poids moléculaires moyens en poids pour les divers

copolymères préparés par le procédé de cette invention. Les.

poids moléculaires moyens en poids sont déterminés en multipliant le facteur Q du polystyrène (41,3) par la dimension moyenne en poids en angstr5ms du copolymère particulier

analysé. La colonne VI donne le numéro de l'exemple en question.

Comme indiqué dans le tableau, les copolymères préférés de cette invention ont un poids moléculaire d'environ 15000 à environ 35000, et de préférence encore d'environ 15000

à environ 30000.

Tableau des poids moléculaires moyens en poids Colonne I II III IV V VI 20 0,19 Dowex HCR-W2-H 432,5 17 862 1 :20 0,18 Amberlyst 15 412,3 17 027 2 :25 0,19 Dowex HCR-W2-H 505,9 20 894 3 :20 0,20 Dowex HCR-W2-H 777,1 32 094 4 :10 0,20 Dowex HCR-W2-H 749,3 30 946 5 M :30 0,12 Dowex HCR-W2-H 400,5 16 541 6 :10 0,20 Dowex HCR-W2-H 522,1 21 563 7 r4 -j -j

EXEMPLE 8

Préparation d'une composition séchée par pulvérisation contenant de la tylosine On ajoute en une fois une solution de 50,0 g de tylosine (base libre) dans 150 ml de dichlorométhane, à une solution agitée de 50,0 a d'un copolymère préparé à partir d'environ 75:25 % en poids d'acide lactique et d'acide glycolique, ayant une viscosité intrinsèque de 0,18 dl/g, dans 200 ml de dichlorométhane. On ajoute du dichlorométhane frais au mélange jusqu'à ce que le volume de la solution soit de 400 ml. On agite la solution à la température ambiante puis on la sèche par pulvérisation dans un appareil de séchage classique ayant une pression de tête de réservoir sous pression de 0,688 bar et une pression d'atomisation de 0,07 bar. La température d'entrée dans l'appareil de séchage est d'environ

54 à environ 57 C et le débit de pulvérisation est de 8 ml/mn.

Le produit séché par pulvérisation est broyé à une valeur uniforme et calibré sur un tamis d'une ouverture de maille de 250 p. Le produit composé ainsi obtenu peut être mis en suspension dans un support qui est de l'huile de sésame pour une injection sous-cutanée commode à un animal souffrant d'une infection microbienne ou ayant besoin d'un traitement

prophylactique vis-à-vis d'une telle infection.

EXEMPLE 9

Préparation d'une composition séchée par pulvérisation contenant de l'apramycine A une solution agitée de 15,0 g d'un copolymère préparé à partir d'environ 65:35 % en poids d'acide lactique et d'acide glycolique, avant une viscosité intrinsèque de 0,19 dl/g, dans 40 ml de dichlorométhane, on ajoute en une fois 5,0 a d'apramycine base. On dilue la solution à 80 ml avec du dichlorométhane supplémentaire. Puis on sèche la solution par pulvérisation à raison de 10 ml/mn dans un appareil de séchage par pulvérisation, avec une température d'entrée d'environ 48 à environ 51 C et une pression d'atomisation de 0,07 bar. On broie la composition séchée et on la fait passer à travers un tamis d'une ouverture de maille de 250 p pour obtenir une compositions à libération maîtrisée de taille uniforme d'apramycine. La composition peut être mise en suspension dans un véhicule approprié et injectée par voie sous- cutanée chez un animal souffrant de pneumonie bactérienne.

EXEMPLE 10

A une solution de 5,0 a d'un copolymère fait d'environ 80:20 % en poids d'acide lactique et d'acide glycolique, avant une viscosité intrinsèque de 0,20 dl/g, dans 50 ml de chloroforme, on ajoute en une fois 5,0 a de tylosine base. On aaite la solution quelques minutes puis on chasse le solvant par évaporation sous pression réduite. Le produit ainsi formé est extrudé en bâtonnets d'un diamètre d'environ 5,0 mm, ces bâtonnets ressemblant à un verre ambre. Les bâtonnets vitreux sont broyés à uniformité et sont tamisés à environ à environ 105 p. La composition tamisée ainsi formée peut être mise en suspension dans un support approprié comme de

l'huile de sésame ou de la polyvinylpyrrolidone aqueuse à 10 %.

EXEMPLE 11

La composition vitreuse de tylosine à libération maîtrisée de l'Exemple 10 est essayée chez les souris pour déterminer son aptitude à libérer uniformément une quantité efficace d'acent actif sur une période de temps prolongée. La méthode utilisée est similaire à celle décrite par Ose et al., dans J. Vet. Res., 29, 1863-1866 (1968). On administre à des souris pesant environ 20,0 a, par injection sous-cutanée, mg de la composition (12,5 mg d'ingrédient actif par animal) puis on les traite avec des dilutions loga0 d'un bouillon de culture de tryptose de Erysipelothrix rhusiopathiae à divers intervalles de temps. On traite également par ces dilutions, au même taux que les groupes d'essai, des groupes témoins de souris non traitées par le médicament. On calcule à divers intervalles de temps la DL50 des animaux traités et des animaux témoins. La différence numérique représente le log,, des unités de protection attribuables au traitement, en indiquant ainsi le degré de protection sur une période prolongée. Les résultats d'une telle expérience sont donnés ci-dessous: Traitement Log10 des unités de protection Jour 7 Jour 10 Jour 14 Jour 18 Jour 21 Libération maîtrisée de tylosine 12,5 mg/animal 5,5 4,8 1,3 1,0 0, 2 On détermine des quantités mesurables de tylosine dans l'urine

des animaux traités pendant 18 jours suivant l'administration.

EXEMPLE 12

On extrude sous forme d'un bâtonnet vitreux une composition comprenant 50 % en poids de tylosine dans un copolymère fait d'environ 80 % en poids d'acide lactique et environ 20 % en poids d'acide glycolique. On découpe le bâtonnet en portions pesant 25 mg, de sorte que la dose de tylosine est de 12,5 mg par bâtonnet vitreux. On implante sur des souris les bâtonnets ainsi préparés et le degré de libération de l'agent actif est indiqué en mesurant le log10 des unités de protection à divers intervalles après le traitement, selon le procédé décrit dans l'Exemple 11. Les résultats sont présentés dans le tableau suivant: Traitement Logl0 des unités de protection Jour 1 7 11 14 17 21 28 Tylosine implantée (12,5 ma) >6,0 >5,3 4,2 6,0 5,7 3,3 1,2 Les essais décrits dans les Exemples 11 et 12 montrent que diverses compositions de tylosine à libération maîtrisée sont efficaces et fournissent une protection contre la maladie par libération lente de l'antibiotique pendant des périodes

allant jusqu'à 28 jours après l'administration.

EXENPLE 13

On prépare une composition selon cette invention en mélangeant une solution de 5 g d'érythromycine dans du dichlorométhane avec une solution dans le dichlorométhane de ,0 g d'un copolymère obtenu à partir d'environ 79 % en poids d'acide lactique et d'environ 21 % en poids d'acide alycolique (viscosité environ 0,20). On sèche la solution par pulvérisation en suivant le mode opératoire général décrit dans l'Exemple 8. Le produit ainsi formé est une poudre sèche de consistance uniforme. On fait passer la poudre sur un tamis métallique de 105 à 250 p. On sépare la composition ainsi formée en portions de 25 ma (contenant chacune 12,5 mg d'érythromycine) et on les met en suspension dans 0,2 ml de polyvinylpyrrolidone à 10 %. On injecte les compositions

ainsi préparées à raison de 12,5 mg par souris par voie sous-

cutanée sur des souris infectées par Erysipelothrix rhusiopathiae. Un groupe témoin de souris infectées reçoit une

dose d'érythromycine aqueuse à raison de 12,5 ma par souris.

On détermine à divers intervalles de temps après l'administration les Log10 des unités de protection vis-à-vis de

Erysipelothrix rhusiopathiae. Les résultats sont donnés ci-

dessous: Traitement Logl0 des unités de protection Jour 1 Jour 2 Jour 3 Jour 5 Groupe traité par une composition à libération maitrisée 4,1 3,4 1, 9 0 Groupe traité par de l'érythromycine aqueuse 1,3 0 0 0 Les résultats montrent qu'une seule dose de la composition à libération maîtrisée fournit une protection continue pendant plusieurs jours, alors qu'une seule dose de l'agent actif classique ne fournit qu'une protection minimale pendant une

courte période de temps.

EXEMPLE 14

On prépare et on sèche parpulvérisation selon le procédé

de l'Exemple 8 une composition comprenant 50 % en poids de tétra-

cycline et 50 % en poids d'un copolymère obtenu àpartir d'environ 80 %

en poids d'acide lactique et d'environ20 % enpoids d'acide glycoli-

que (viscosité environ 0,23). La composition ainsi préparée est mise en suspension dans de l'huile de sésame. Le premier jour, on administre 12,5 mg de la composition (6,25 mg/souris d'inarédient actif), par injection sous-cutanée à un groupe d'essai de souris. Les souris sont ensuite infectées par Pasteurella multocida. Un groupe témoin de souris infectées de façon similaire est traité le premier jour avec de la tétracycline aqueuse à raison de 6,25 mg/souris. Comme indiqué précédemment, on détermine les log,0 des unités de protection

pour les deux groupes à divers intervalles après le traitement.

Les résultats sont donnés dans le tableau suivant: Traitement Logl0 des unités de protection jour 1 Jour 2 Jour 3 Jour 5 Tétracycline à libération maîtrisée >4,8 >7,6 >5,0 >4,9

Tétracycline aqueuse 3,9 3,2 0,8- --

La composition à libération maîtrisée fournit une protection vis-à-vis de plusieurs dilutions d'infection loc 0 à chaque intervalle d'infection sur une période de temps prolongée, tandis que la tétracycline aqueuse ne permet pas d'obtenir une

protection significative au-delà du deuxième jour.

EXEMPLE 15

On détermine l'effet de la composition de tylosine à libération maîtrisée, préparée selon l'Exemple 10, chez de jeunes poulets, sur Mycoplasma gallisepticum, l'agent responsable de la maladie respiratoire chronique chez la volaille. Des groupes de jeunes poulets sont infectés par injection dans la poche d'air thoracique de 0,1 ml d'un bouillon de culture de Mycoplasma gallisepticum 5 ou 10 jours après une seule administration sous-cutanée de la composition de tylosine selon l'invention (25 ma de composition par poulet, 12,5 mg d'ingrédient actif par poulet). Un groupe témoin de poussins est infecté aux mêmes intervalles que le groupe traité, mais ne reçoit pas de médicament. Divers animaux provenant des deux groupes sont sacrifiés à divers intervalles de temps et on recherche la présence ou l'absence de lésions dans le sac d'air. Au cinquième jour après l'infection initiale par Mycoplasma gallisepticum, on analyse douze animaux de chaque groupe. Dans le groupe traité, aucun ne présente de lésions. Au contraire, neuf sur douze des animaux non traités présentent des lésions. Au dixième jour après l'infection initiale, seuls quatre des douze animaux traités présentent des lésions tandis que neuf des onze animaux non traités

présentent des lésions importantes.

EXEMPLE 16

On prépare par le procédé de séchage par pulvérisation décrit dans l'Exemple 8 une composition à libération maîtrisée contenant 50 % en poids de l'antibiotique de type aminohétéroside la néomycine et 50 % en poids d'un copolymère dérivé d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en poids d'acide glycolique. On met la composition en suspension dans de l'huile de sésame et on l'injecte par voie souscutanée dans un groupe de poussins d'un jour à raison de 10 mg/poussin (ingrédient actif à raison de 5 mg/poussin). Un autre groupe d'animaux est conservé comme témoin et ne reçoit pas d'agent antibactérien, tandis qu'un autre groupe d'animaux reçoit une seule injection de néomycine aqueuse à un taux de 5 mg/poussin. Des groupes choisis d'animaux traités sont infectés au premier jour, au troisième

jour et au cinquième jour respectivement par Escherichia coli.

Le tableau suivant montre le nombre d'animaux qui meurent sur

chacun des trois groupes infectés.

Nombre de morts/nombre de traités (% de morts) Infection au 1er jour Infection au 3eme jour Infection au ème jour Groupe témoin infecté, pas de traitement Groupe témoin infecté, néomycine aqueuse Groupe infecté, néomycine à libération maîtrisée

9/20 (45 %)

4/20 (20 %)

1/20 ( 5 %)

/20 (100 %)

19/9 (100 %)

1/16 (6,3 %)

/20 (100 %)

14/14 (100 %)

3/10 ( 30 %)

%Di réj 0'u 0% -4 Traitement Les résultats montrent qu'une composition de cette invention fournit une protection continue sur une période de temps prolongée alors que le traitement classique ne fournit qu'une léaère protection pendant une période de temps relativement courte (un jour).

EXEMPLE 17

* Comme indiqué précédemment, l'utilisation préférée d'une composition selon cette invention consiste à administrer une composition à libération maîtrisée à un animal nouveau-né, comme un porc, en protégeant ainsi l'animal du développement d'une maladie microbienne pendant que cet animal

est à la mamelle.

L'expérience suivante permet d'illustrer l'efficacité de la composition de tylosine à libération maîtrisée pour la protection de porcs vis-à-vis de la pneumonie mycoplasmique pendant qu' ils sont à la mamelle. Seize porcs de moins d'une semaine sont inoculés par voie intranasale avec une suspension de tissu de poumon infecté de pneumonie mycoplasmique. On les place dans la moitié d'une unité d'isolation Horsfal-Bauer qui a été séparée par une grille à maille ouverte en deux compartiments de taille égale. Ces porcs sont considérés comme des porcs infectieux et servent à exposer des porcs témoins traités et non traités selon une exposition équivalente à celle fournie à

une portée parla truie.

Deux semaines plus tard, on place seize porcs nouveaux-

nés dans les parties non occupées des unités d'isolation en tant que représentants de porcs nouveaux-nés. Onze des nouveaux porcs sont traités par une composition à libération maîtrisée contenant 50 % de tylosine et de copolymère (préparée comme décrit dans l'Exemple 10). La compositionest mise en suspension dans de l'huile de sésame contenant 1,5 % èn poids de cire-d'abeille et 1,5 % en poids de monostéarate d'aluminium. Les animaux reçoivent une injection intramusculaire le jour zéro, en quantité suffisante pour que chaque porc reçoive 250 mg de tylosine (c'est-à-dire 500 mg de la-composition à libération maîtrisée). Le dixième jour de l'expérience, les porcs traités reçoivent une seconde injection telle que chaque porc reçoit 375 ma de tylosine, et à nouveau le douzième jour, on administre aux animaux traités 500 mg d'ingrédient actif (1000 mg de composition). Cinq porcs ne sont pas traités et sont utilisés comme témoins pour montrer que la transmission de la pneumonie mycoplasmique à partir des porcs

infectieux s'est produite. Tous les porcs sont tués le trente-

quatrième jour après le placement du second groupe de porcs dans les unités d'isolation. Les poumons sont isolés et on détermine les grosses lésions (c'est-à-dire indication de l'infection) et on fait des cultures de tissu de poumon pour y déterminer Mycoplasma hyopneumoniae. Comme le montre le tableau suivant, sur neuf porcs traités par la composition de tylosine à libération maîtrisée, aucun n'est infecté, comme le montrent les lésions des poumons ou la réisolation de M. hyopneumoniae à partir des poumons. Au contraire, la pneumonie mycoplasmique est transmise à trois des cinq témoins non traités. Les deux morts qui se produisent dans le groupe traité et celle du porc infectieux qui se produit pendant l'étude sont dues à des

causes autres que la pneumonie mycoplasmique.

Traitement par la tylosine de porcs exposés à Mycoplasma hyopneumoniae Traitement par la Isolation de M. hyopneumoniae Porc N tylosine Lésions des poumons à partir de tissu de poumon_ Traités Infectieux Traités Infectieux 1 Tylosine C.R., IM Normal 10 %:: - + 2 Jour 0 - 500 mg/porc Normal 25 % - + 3 Jour 10 - 750 mg/porc Normal 15 % - + 4 Jour 20 - 1000 mg/porc Normal 1 % - + Normal Mort - 0 6 Normal 20 % - + 7 Mort 4% 0 +

8 Normal 10 % - -

9 Normal 3 % + Normal 2 % - + 11 Mort 2 % 0 +

_________________________________________________________________________________________________

1 Témoins non traités Normal 5 % - +

2 2% 5% + +

3 7% 5% + +

4 Normal Traces - +

10 % 10 % + +

: % de poumons avec des lésions pneumoniques importantes 0% Les résultats de l'étude montrent que les animaux nouveaux-nés exposés à la pneumonie mycoplasmiaue peuvent être effectivement protégés vis-à-vis du contact de cette maladie, par traitement selon cette invention. Une seule administration parentérale d'une composition à libération maîtrisée de cette invention protège ces animaux pendant des périodes d'environ 7 à environ 12 jours. Des périodes de protection plus longues, par exemple d'environ 14 à environ 21 jours, peuvent être obtenues en administrant les compositions par implantation et

techniques similaires.

EXEMPLE 18

On prépare par le procédé de l'Exemple 8 une composition comprenant 50 % de doxycycline et 50 % d'un copolymère dérivé d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en poids d'acide glycolique. La composition

ainsi préparée est administrée par une seule injection sous-

cutanée (dans l'huile de sésame) à un groupe de souris à raison de 25 mg/souris (la dose effective de doxycYcline est donc de 12,5 mg/souris). Un autre groupe de souris reçoit une seule dose de doxycycline aqueuse à raison de 12,5 ma/souris. Après la médication, tous les animaux sont traités à divers intervalles de temps par Pasteurella multocida. Le tableau suivant présente les log10 des unités de protection à divers intervalles de temps après le traitement et l'infection

ultérieure.

Traitement Logl0 de protection après traitement Jour 0 Jour 3 Jour 5 Doxycycline aqueuse 3,3 0 1,2 Doxycycline à libération maîtrisée >5,8 >5, 3 _>6,7 Les résultats montrent que la doxycycline à libération maîtrisée de cette invention fournit une protection vis-à-vis de >5,3 loc10 d'unités d'infection Pasteurella multocida à chaque période d'infection. Au contraire, la doxycycline aqueuse fournit une faible protection au- delà du

traitement et de l'infection initiale.

EXEMPLE 19

Comme indiqué précédemment, une composition préférée de cette invention comprend un agent antibactérien du type céphalosporine intimement dispersé dans un copolymère tel que défini ci-avant. Les antibiotiques de type céphalosporine particulièrement préférés à utiliser comprennent les acides

7-a-méthoxyimino-a-(2-aminothiazol-4-yl) acétamido-3-céphem-4-

carboxyliques 3-substitués et leurs sels, o.le substituant en

position 3 est, entre autres, un croupement méthyle, 5-méthyl-

(1,3,4-thiadiazol-2-yl) thiométhyle, (1-méthvl-5,6-dioxo-

1,3,4-triazin-2-yl)thiométhyle, (1-carboxyméthyl-1,2,3,4-

tétrazol-5-yl)thiométhyle et (1,2,3,4-tétrazol-5-yl)-thio-

méthyle. Une céphalosporine type couramment utilisée dans les

compositions de l'invention est l'acide 3-méthyl-7-a-méthoxy-

imino-a-(2-aminothiazol-4-yl)acétamido-3-céphem-4-carboxylique.

On dissout ce composé dans un solvant organique comme du dichloro-

méthane, à raison d'environ 100 mg/100 ml de solvant. On ajoute à la solution environ 100 mg d'un copolvmère obtenu à partir d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en

poids d'acide glycolique, avec une viscosité d'environ 0,20.

Puis on sèche la solution par pulvérisation selon le procédé de l'Exemple 8 pour obtenir un mélange uniforme d'agent actif et de copolymère. La composition ainsi formée est mise en suspension

dans 20 ml d'huile de sésame.

Dans un essai conçu pour démontrer la libération maîtrisée de l'ingrédient actif à partir de la composition précédente, on donne à un croupe de souris une seule injection

sous-cutanée de 12,5 ma d'acide 3-méthyl-7-a-méthoxyimnino-a-

(2-aminothiazol-4-yl)acétamido-3-céphem-4-carboxylique (appelé ci-après céphalosporine acide). On administre à un autre groupe de souris une seule injection sous-cutanée de 25 mc de la composition à libération maîtrisée (appelée ci-après céphalosporine acide à libération maîtrisée), de sorte que la dose d'ingrédient actif est de 12,5 mg/souris. On infecte ensuite les animaux à divers intervalles de temps avec Pasteurella multocida. Le tableau suivant montre les résultats des traitements en unités de lo1l0 protection à divers jours après

le traitement pour les deux croupes traités.

Traitement Log,0 protection à divers jours après traitement Jour 0 Jour l Jour 3 Jour 5 Céphalosporine acide >5,2 0,7 0 0,4 Céphalosporine acide à libération >5,2 >4,4 >4,5 >4,7 maîtrisée Les résultats mettent en évidence le fait qu'un seul traitement avec une composition à libération maîtrisée de cette invention protège l'animal hôte pendant plusieurs jours, tandis qu'une seule dose correspondante de l'ingrédient actif

seul fournit une protection pendant pas plus d'un jour.

EXEMPLE 20

L'un des dérivés de céphalosporine suivants est dissous dans un solvant organique comme le dichlorométhane à raison d'environ 90 mg dans 100 ml de solvant. On ajoute à la solution environ 250 ma d'un copolymère dérivé d'environ % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en poids d'acide alycolique, avec une viscosité d'environ 0,20. Puis on sèche la solution par pulvérisation par le procédé de l'Exemple 8 et l'on obtient un mélange uniforme d'agent actif et de copolymère. La composition ainsi formée est mise en suspension

dans environ 20 ml de triacétine.

Dans un essai conçu pour démontrer la libération maîtrisée de l'ingrédient actif à partir de la composition précédente, on administre à un groupe de souris une seule injection sous-cutanée de 4,6 mg de l'un des dérivés de céphalosporine suivants dans la composition à libération maîtrisée. Les animaux sont ensuite infectés à divers intervalles de temps avec Pasteurella multocida. Le tableau suivant montre les résultats des traitements en unités de loca0 protection à divers jours après le traitement pour les divers groupes. Traitement Log1O protection à divers jours après traitement Jour 1 Jour 2 Jour 3 A B 6,6 4,4 ,1 2,4 4,5 1,0

A = 7-a-méthoxyimino-a-(2-aminothiazol-4-yl)acétamido-3-

(1-méthyl-5,6-dioxo-1,3,4-triazin-2-yl)thiométhyl-3-

céphem-3-carboxylate de sodium

B = 7-a-méthoxyimino-a-(2-aminothiazol-4-yl)acétamido-3-

méthyl-3-céphem-4-carboxylate de sodium.

Les données indiquent que les deux composés

fournissent une protection pendant plusieurs jours.

Claims (23)

REVENDICATIONS

1. Composition à libération maîtrisée pouvant libérer une dose efficace d'un agent antimicrobien sur une période de temps prolongée et biodégradable en substances facilement métabolisées et en produit métabolique normal de l'ingrédient actif, composition qui est utilisable dans le traitement prophylactique et thérapeutique de maladies provoquées par des micro-organismes chez les animaux, caractérisée en ce qu'elle comprend environ 5 à environ 85 % en poids d'un agent antimicrobien intimement dispersé dans un copolymère dérivé d'environ 60 à environ 95 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à Environ 5 % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une viscosité inhérente d'environ 0,08 à environ 0,30 mesurée dans le chloroforme, un poids moléculaire moyen en poids d'environ 6000 à environ 35000, ladite composition étant combinée avec des excipients

et supports appropriés.

2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le copolymère est dérivé d'environ 60 à environ 90 % en poids d'acide lactique et d'environ 40 à environ 10 % en poids d'acide alycolique, ledit copolymère ayant une viscosité d'environ 0,10 à environ 0,25 et un. poids moléculaire moyen en

poids d'environ 15000 à environ 30000.

3. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 1 et 2, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est une pénicilline, une céphalosporine, une tétracycline, un sulfamide, un antibiotique de type macrolide

ou un aminohétéroside.

4. Composition selon la revendication 3,

caractérisée en ce que l'agent antimicrobien est la chlor-

tétracycline, la tétracycline, l'oxytétracycline, la doxy-

cycline, l'ampicilline, la benzylpénicilline, la pénicilline V, les céphalosporines, la cloxicilline, la streptomycine, la lincomycine, la novobiocine, la néomycine, la spiramycine,

l'érythromycine, la colistine, l'acide nalidixique, la salino-

mycine, la nigéricine, la kanamycine, la kitsamyQine, la gentamycine, la tobramycine, l'apramycine, la furaltadone, la vancomycine, le thiostrepton, la ristocétine, la soimycine, la

tylosine, le 5-O-mycaminosyltylonolide ou les sulfonamides.

5. Composition selon l'une quelconque des

revendications 1 à 4, caractérisée en ce que le copolymère est

dérivé d'environ 70 à environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 30 à environ 20 % en poids d'acide glycolique, et

a une viscosité intrinsèque d'environ 0,13 à environ 0,23.

6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que l'agent antimicrobien est l'un des

suivants: tétracycline, oxytétracycline, doxycycline, linco-

mycine, spiramycine, néomycine, érythromycine, tylosine, acide

3-méthyl-7-a-méthoxyimino-a-(2-aminothiazol-4-yl)acétamido-3-

céphem-4-carboxylique ou acide 3-(1-méthyl-5,6-dioxo-1,3,4-

triazin-2-yl)thiométhyl-7-a-méthoxyimino-a-(2-aminothiazol-

4-yl)acétamido-3-céphem-4-carboxylique.

7. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle contient environ 20 à environ 75 % en poids d'un agent antimicrobien uniformément mélangé avec un copolymère obtenu à partir d'environ 70 à environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 30 à environ 20 % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une viscosité

d'environ 0,13 à environ 0,23.

8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que l'agent antimicrobien est présent à

raison d'environ 30 à environ 60 % en poids.

9. Composition selon l'une ou l'autre des -

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est la doxycycline.

10. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est l'oxytétracycline.

11. Composition selon l'une quelconque des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est l'acide 3-méthyl-7-a-méthoxyimino-a-(2-amino-

thiazol-4-yl)acétamido-3-céphem-4-carboxylique ou l'acide 3-

(1-méthyl-5,6-dioxo-l,3,4-triazin-2-yl)thiométhyl-7-a-méthoxy-

imino-ae-(2-aminothiazol-4-yl)acétamido-3-céphem-4-carboxylique

ou leurs sels.

12. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est la lincomycine.

13. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est la spiramycine.

14. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est l'érythromycine.

15. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est la néomycine.

16. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 6 et 8, caractérisée en ce que l'agent anti-

microbien est la tylosine ou le 5-O-mycaminosyl-tylonolide.

17. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle contient environ 30 à environ 60 % en poids de tylosine mélangée avec d'environ 70 à environ 40 % en poids d'un copolymère obtenu à partir d'environ 70 à environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 30 à environ

20 % en poids d'acide glycolique.

18. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 1 et 17, caractérisée en ce qu'elle contient

environ 40 % en poids de tylosine mélangée à un copolymère obtenu à partir d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ 20 % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère

ayant une viscosité d'environ 0,18 à environ 0,23.

19. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 1 et 17, caractérisée en ce qu'elle contient

environ 50 % en poids de tylosine mélangcée à un copolymère dérivé d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ % en poids d'acide glycolique, ledit copolymère ayant une

viscosité d'environ 0,18 à environ 0,23.

20. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 1 et 17, caractérisée en ce qu'elle contient

environ 55 % en poids de tylosine mélangée à un copolymère dérivé d'environ 80 % en poids d'acide lactique et d'environ % en poids d'acide lycolique, ledit copolvmère ayant une

viscosité d'environ 0,18 à environ 0,23.

21. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 1 et 17, caractérisée en ce qu'elle a la forme

de bâtonnets vitreux extrudés ayant un diamètre d'environ 2 à

environ 7 mm.

22. Composition selon l'une ou l'autre des

revendications 1 et 17, caractérisée en ce qu'elle a la forme

de bâtonnets vitreux extrudés qui ont été broyés de façon uniforme et tamisés sur un tamis ayant une ouverture de maille

d'environ 105 à 250 microns. -

23. Utilisation de l'une quelconque des

revendications 1 à 22 pour traiter les infections microbiennes

chez les animaux par administration d'une quantité efficace

de cette composition.