FI93548C

FI93548C - Menetelmä farmaseuttisesti vaikuttavien peptidiyhdisteiden valmistamiseksi

Info

Publication number: FI93548C
Application number: FI906204A
Authority: FI
Inventors: Masaaki Matsuo; Daijiro Hagiwara; Hiroshi Miyake
Original assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co
Priority date: 1989-12-22
Filing date: 1990-12-17
Publication date: 1995-04-25
Also published as: IE64570B1; IE904581A1; DK0443132T3; US5468731A; NO905572L; AU640185B2; CA2032864A1; NO177535C; JPH04210996A; HU211558A9; CA2032864C; RU2055078C1; JP2560919B2; EP0443132A1; HK18696A; CN1159949A; UA27254C2; PT96324A; KR0180223B1; CN1064080A

Description

93548

Menetelmä farmaseuttisesti vaikuttavien peptidiyhdisteiden valmistamiseksi - Förfarande för framställning av far-maseutiskt verksamma peptidföreningar Tämä keksintö koskee menetelmää valmistaa farmaseuttisesti vaikuttavaa peptidiyhdistettä, jolla on kaava iHj

I /RJ

R1-Y-A-N--CONHCHCON

^R4 jossa R1 on fenyyli tai ryhmä, jolla on kaava jossa X on CH tai N, ja Z on O tai N-R5, jossa R5 on vety tai alempi alkyyli, R2 on hydroksi tai alempi alkoksi, R3 on vety, alempi alkyyli, hydroksi(alempi)alkyyli tai suojattu hydroksi(alempi)alkyyli, R4 on fenyyli(alempi)alkyyli tai halogeeni(alempi)alkyyli, A on karbonyyli tai sulfonyyli, ja Y on sidos tai alempi alkenyleeni, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, Näillä keksinnön mukaan saaduilla uusilla peptidiyhdisteillä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävillä suoloilla on farmakologisia aktiivisuuksia, ja niitä voidaan käyttää takykinii-niantagonistina, erityisesti substanssi P-antogonistina, neurokiniini A-antagonistina tai neurokiniini B-antagonistina, 2 93548 joka on käyttökelpoinen hoitamaan tai ennaltaestämään taky-kiniinin välittämiä sairauksia, esimerkiksi hengityselinten sairauksia, kuten astmaa, keuhkoputken tulehdusta, riniittiä, yskää, yskösten yskimistä, ja vastaavia; silmäsairauksia, kuten sidekalvontulehdusta, keväistä sidekalvontulehdusta ja vastaavia; ihosairauksia, kuten kontakti-ihotulehdusta, atoop-pista ihotulehdusta, nokkosrokkoa ja muita ekseemaihotulehduk-sia ja vastaavia; tulehdussairauksia, kuten nivelreumaa, nivelrikkoa ja vastaavia; kipuja tai särkyjä (esimerkiksi migreeniä, päänsärkyä, hammassärkyä, syöpäkipua, selkäsärkyä ja vastaavia); ja vastaavia ihmisellä tai eläimillä.

Tämän keksinnön mukaisesti kaavan (I) mukaiset uudet pepti-diyhdisteet voidaan valmistaa seuraavissa kaavioissa kuvatuilla menetelmillä.

Menetelmä 1

R1 2 - Y - A - OH

(in) . 2 Uv UI tai sen reaktiivinen joh- / / dannainen karboksi- tai sul / CH-> z -χ foryhmässä tai sen suola

O ' /R

HN--CONHCHCON

^R4 (II) tai sen reaktiivinen

johdannainen iminoryhmässä ''U

tai sen suola R

/ Cli7 Γ n i R1 -y-A-N-CONHCHCON ^ \r4

II

2 tai sen suola 3 93548

Menetelmä 2

> jOO

r/ Γ1 ·· R1 - Y-A-N-LcONHCHCON ^ XR4 (I-a) tai sen suola R|:n hydroksisuoja-^ ryhmän poistaminen , r-f Γ’ Λ

R-Y-A-N-LCONHCHCON

XR4 (I-b) tai sen suola jossa R1, R2, R2, R4, A ja Y ovat kaikki edellä määriteltyjä, R| on suojattu hydroksi(alempi)alkyyli, ja on hydroksi(alempi)alkyyli.

Kaavan (II) mukainen lähtöaineyhdiste on uusi ja voidaan valmistaa seuraavissa kaavioissa kuvatuilla menetelmillä.

4 93548

Menetelmä A

r6 - 0Η PH

2 tai sen reaktiiviset joh- 1 dannaiset karboksiryhmässä H-NCHCOOH .a.

2 tai sen suola -> (1 ) (IV) tai sen reaktiiviset johdannaiset aminoryhmässä tai sen suola i^V^ ^r3 7^^ Ns‘r4 CH2 (VII) l tai sen reaktiivinen joh-

g J

R -NHCHCOOH dannainen aminoryhmässä tai sen suola (VI) -) tai sen suola (2) 2 3 aminosuojaryhmän poisto 6 ' -> R-NHCHCON ...

\r4 (3) (VIII) tai sen suola

II

5 93548 lTj rf

R7-N-COOH

CH-) I / r3 (x) f^NCHCON tai sen reaktiivinen joh- \ p4 . .

Λ dannainen karboksiryhmassa tai sen suola (IX) -) tai sen suola (4) / 03 / ch aminosuojaryhmän poisto I 2 /R3 ) R7 -N-LcoNHCHCON ( 5 ) VR4 (XI) tai sen suola rf ,,

HN-lCONHCHCON

XR4 (II) tai sen suola jossa R^, r3 ja ovat kaikki edellä määriteltyjä, ja R® ja R? ovat molemmat aminosuojaryhmiä.

6 93548

Koko kuvauksessa, aminohappo, peptidit, suojaryhmät, konden-sointireagenssit ja vastaavat on ilmaistu IUPAC-IUB:n (Commission on Biological Nomenclature) mukaisilla lyhenteillä, jotka ovat tekniikan tasolla yleisiä.

Lisäksi, ellei toisin ole mainittu, aminohapot ja niiden tähteet tarkoittavat tällaisilla lyhenteillä esitettyinä L-konfi-guraation omaavia yhdisteitä ja tähteitä.

Lähtöaine- ja kohdeyhdisteen sopivat farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ovat tavanomaisia ei-toksisia suoloja, ja lukien mukaan happoadditiosuolan, kuten orgaanisen hapon suola (esimerkiksi asetaatti, trifluoriasetaatti, maleaatti, tart-raatti, metaanisulfonaatti, bentseenisulfonaatti, formiaatti, tolueenisulfonaatti ja vastaavat), epäorgaanisen hapon suolan (esimerkiksi hydrokloridi, hydrobromidi, hydrojodidi, sulfaatti, nitraatti, fosfaatti ja vastaavat), tai suolan aminohapon kanssa (esimerkiksi arginiini, aspartaamihappo, glutaamihappo ja vastaavat), tai metallisuolan, kuten alkalimetallisuola (esimerkiksi natriumsuola, kaliumsuola ja vastaavat) ja maa-alkalimetallisuolan (esimerkiksi kalsiumsuola, magnesiumsuola ja vastaavat), ammoniumsuolan, orgaanisen emäksen suolan (esimerkiksi trimetyyliamiinisuola, trietyyliamiinisuola, pyridii-nisuola, pikoliinisuola, disykloheksyyliamiinisuola, N,N'-di-bentsyylietyleenidiamiinisuola ja vastaavat) tai vastaavat.

Tämän julkaisun edellä ja alla olevissa kuvauksissa, sopivia esimerkkejä ja kuvauksia tämän keksinnön suoja-alaan kuuluvista erilaisista määritelmistä selitetään alla yksityiskohtaisesti .

« Käsite "alempi" on tarkoitettu tarkoittamaan 1-6, edullisesti 1 - 4 hiiliatomia, ellei toisin ole mainittu.

Sopiva "alempi alkyyli" voi olla mm. suoraketjuinen tai haaroittunut alempi alkyyli, kuten metyyli, etyyli, propyyli,

II

7 93548 isopropyyli, butyyli, isobutyyli, tert-butyyli, pentyyli, heksyyli ja vastaavat, jolloin edullisin on metyyli.

Sopiva "aryyli" voi olla mm. fenyyli, tolyyli, ksylyyli, mesi-tyyli, kumenyyli, naftyyli ja vastaavat, jolloin edullinen on C6-C10-aryyli ja edullisin on fenyyli.

Sopiva ''alempi alkenyleeni" sisältää 2-6 hiiliatomia ja voi olla mm. vinyleeni, propenyleeni ja vastaavat, jolloin edullisin on vinyleeni.

Sopiva "alempi alkyyli, jossa voi olla sopiv(i)a substituent-ti/substituentteja" voi olla mm. tavanomainen ryhmä, jota käytetään tekniikan alalla, kuten alempi alkyyli, josta esitetään esimerkkejä edellä, karboksi(alempi)alkyyli (esimerkiksi karboksimetyyli, karboksietyyli ja vastaavat), suojattu karboksi (alempi) alkyyli, kuten esteröity karboksi(alempi)alkyyli, esimerkiksi, alempi alkoksikarbonyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi metoksikarbonyylimetyyli, etoksikarbonyylimetyyli, metoksikarbonyylietyyli, ja vastaava), karbamoyyli(alempi)-alkyyli, jossa voi olla sopiv(i)a substituentti/substituentte-ja, kuten karbamoyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi karbamoyyli-metyyli, karbamoyylietyyli, karbamoyylipropyyli ja vastaavat) ja karbamoyyli(alempi)alkyyli, jossa on sopiv(i)a substituent-ti/substituentteja, esimerkiksi alempi alkyylikarbamoyyli-(alempi) alkyyli (esimerkiksi, me tyylikarbamoyyl ime tyyli, etyylikarbamoyylimetyyli ja vastaavat), amino(alempi)alkyyli-karbamoyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi aminometyylikarbamoyy-limetyyli, aminoetyylikarbamoyylimetyyli ja vastaavat), alempi alkyyliamino(alempi)alkyylikarbamoyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi dimetyyliaminometyylikarbamoyylimetyyli, dimetyyliaminoetyylikarbamoyylimetyyli ja vastaavat), alempi alkyyliamino-(aiempi)alkyyli (esimerkiksi dimetyyliaminometyyli, dimetyyli-aminoetyyli ja vastaavat), hydroksi(alempi)alkyyli (esimerkiksi hydroksimetyyli, hydroksietyyli ja vastaavat), suojattu hydroksi(alempi)alkyyli, kuten asyylioksi(alempi)alkyyli, esimerkiksi alempi alkanoyylioksi(alempi)alkyyli (esimerkiksi 8 93548 asetyylioksietyyli, asetyylioksipropyyli, asetyylioksibutyyli, asetyylioksipentyyli, propionyylioksimetyyli, butyryylioksi-metyyli, heksanoyylioksimetyyli ja vastaavat) ja vastaavat.

Sopiva "ar(alempi)alkyyli, jossa voi olla sopiv(i)a substitu-entti/substituentteja" voi olla mm. tavanomainen ryhmä, jota käytetään aminohappo- ja peptidikemian alalla, kuten ar(alempi) alkyyli (esimerkiksi trityyli, bentshydryyli, bentsyyli, fenetyyli ja vastaavat), substituoitu ar(alempi)alkyyli, esimerkiksi mono- tai di- tai trihalogeenifenyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi o-fluoribentsyyli, m-fluoribentsyyli, p-fluori-bentsyyli, o-trifluorimetyylibentsyyli ja vastaavat) ja vastaavat .

Sopiva "aminosuojaryhmä" voi olla tavanomainen suojaryhmä, jota käytetään aminohappo- ja peptidikemian alalla, ts., se voi olla mm. asyyli, kuten alempi alkanoyyli (esimerkiksi for-myyli, asetyyli, propionyyli, butyryyli, isobutyryyli, vale-ryyli, isovaleryyli, pivaloyyli, heksanoyyli ja vastaavat), alempi alkoksikarbonyyli (esimerkiksi metoksikarbonyyli, etok-sikarbonyyli, propoksikarbonyyli, butoksikarbonyyli, t-butok-sikarbonyyli ja vastaavat) ja vastaavat.

Sopiva "alempi alkoksi" voi olla mm. suoraketjuinen tai haaroittunut alempi alkoksi, kuten metoksi, etoksi, propoksi, isopropoksi, butoksi, heksyylioksi ja vastaavat.

Sopiva "hydroksi(alempi)alkyyli" ja "suojattu hydroksi(alempi) alkyyli" voi olla sama, kuin edellä esimerkkinä mainittu.

Erityisesti R^n, R2:n, R3.-n, R4:n, A:n ja Y:n edulliset suori- . tusmuodot ovat seuraavat.

»«·»· '· · R1 on fenyyli; bentsofuryyli; indatsolyyli; tai indolyyli (esimerkiksi lH-indol-3-yyli ja vastaavat); 1-(alempi alkyyli) indolyyli (esimerkiksi l-metyyli-lH-indol-2-yyli, 1-metyy- 9 93548 li-lH-indol-3-yyli, l-isopropyyli-lH-indol-3-yyli ja vastaavat) , R2 on hydroksi; tai alempi alkoksi (esimerkiksi metoksi ja vastaavat), R3 on vety; alempi alkyyli (esimerkiksi metyyli ja vastaavat); tai hydroksi(alempi)alkyyli (esimerkiksi hydroksimetyyli, hydroksietyyli ja vastaavat), R4 on fenyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi bentsyyli, fenetyyli ja vastaavat); tai halogeenifenyyli(alempi)alkyyli (esimerkiksi o-fluoribentsyyli, m-fluoribentsyyli, p-fluoribentsyyli ja vastaavat), A on karbonyyli; tai sulfonyyli, ja Y on sidos; tai alempi alkenyleeni (esimerkiksi vinyleeni ja vastaavat).

Menetelmät kaavan (I) mukaisten kohdeyhdisteiden valmistamiseksi selitetään alla yksityiskohtaisesti.

Menetelmä 1

Kaavan (I) mukainen kohdeyhdiste tai sen suola voidaan valmistaa saattamalla kaavan (II) mukainen yhdiste tai sen reaktiivinen johdannainen iminoryhmässä tai sen suola reagoimaan kaavan (III) mukaisen yhdisteen tai sen karboksi- tai sulforyh-mässä olevan reaktiivisen johdannaisen tai sen suolan kanssa.

Kaavan (II) mukaisen yhdisteen sopiva reaktiivinen johdannainen iminoryhmässä voi olla mm. Schiffin emäs-tyyppinen imino tai sen tautomeerinen enamiinityyppinen isomeeri, joka on muodostettu kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktiolla karbonyy-liyhdisteen, kuten aldehydin, ketonin tai vastaavan kanssa; • silyylijohdannainen, joka on muodostettu kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktiolla silyyliyhdisteen, kuten bis(trimetyyli-silyyli)asetamidin, mono(trimetyylisilyyli)asetamidin, bis-(trimetyylisilyyli)urean tai vastaavan kanssa; johdannainen, joka on muodostettu kaavan (II) mukaisen yhdisteen reaktiolla fosforitrikloridin tai fosgeenin kanssa, ja vastaava.

10 93548

Sopivista kaavan (II) mukaisen yhdisteen ja sen reaktiivisen johdannaisen suoloista voidaan mainita esimerkkeinä kaavan (I) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut.

Sopiva reaktiivinen johdannainen kaavan (II) mukaisen yhdisteen karboksi- tai sulforyhmässä voi olla mm. happohalogenidi, happoanhydridi, aktivoitu amidi, aktivoitu esteri ja vastaavat. Sopivia esimerkkejä reaktiivisista johdannaisista voivat olla happokloridi; happoatsidi; sekahappoanhydridi hapon, kuten substituoidun fosforihapon [esimerkiksi dialkyylifosfo-rihappo, fenyylifosforihappo, difenyylifosforihappo, dibent-syylifosforihappo, halogenoitu fosforihappo ja vastaavat], dialkyylifosforihapon, rikkihapokkeen, tiorikkihapon, rikkihapon, sulfonihapon, [esimerkiksi metaanisulfonihappo ja vastaavat], alifaattisen karboksyylihapon [esimerkiksi etikka-happo, propionihappo, voihappo, isovoihappo, pivaloyylihappo, pentaanihappo, isopentaanihappo, 2-etyylivoihappo, trikloori-etikkahappo ja vastaavat] tai aromaattisen karboksyylihapon [esimerkiksi bentsoehappo ja vastaavat]; symmetrinen happoanhydridi; aktivoitu amidi imidatsolin, 4-substituoidun imidat-solin, dimetyylipyratsolin, triatsolin tai tetratsolin kanssa; tai aktivoitu esteri [esimerkiksi syaanimetyyliesteri, metok-simetyyliesteri, dimetyyli-iminometyyli [ (CH2)N+=CH-] -esteri, vinyyliesteri, propargyyliesteri, p-nitrofenyyliesteri, 2,4-dinitrofenyyliesteri, trikloorifenyyliesteri, pentakloorife-nyyliesteri, mesyylifenyyliesteri, fenyyliatsofenyyliesteri, fenyylitioesteri, p-nitrofenyylitioesteri, p-kresyylitioeste-ri, karboksimetyylitioesteri, pyranyyliesteri, pyridyylieste-ri, piperidyyliesteri, 8-kinolyylitioesteri ja vastaavat], tai esteri N-hydroksiyhdisteen [esimerkiksi N,N-dimetyylihydrok-syyliamiini, l-hydroksi-2-(1H)-pyridoni, N-hydroksisukkinimi-di, N-hydroksiftalimidi, 1-hydroksi-lH-bentsotriatsoli ja vastaavat] kanssa, ja vastaavat. Nämä reaktiiviset johdannaiset voidaan mahdollisesti valita käytettävän kaavan (III) mukaisen yhdisteen tyypin mukaan.

11 93548

Sopivia kaavan (III) mukaisen yhdisteen ja sen reaktiivisen johdannaisen suoloja voivat olla mm. emässuola, kuten alkali-metallisuola [esimerkiksi natriumsuola, kaliumsuola ja vastaavat] , maa-alkalimetallisuola [esimerkiksi kalsiumsuola, magne-siumsuola ja vastaavat], ammoniumsuola, orgaaninen emässuola [esimerkiksi trimetyyliamiinisuola, trietyyliamiinisuola, pyridiinisuola, pikoliinisuola, disykloheksyyliamiinisuola, N,N'-dibentsyylietyleenidiamiinisuola ja vastaavat] tai vastaavat, ja happoadditiosuola, kuten esitettiin esimerkkinä kaavan (I) mukaiselle yhdisteelle.

Reaktio suoritetaan tavallisesti tavanomaisessa liuottimessa, kuten vesi, alkoholi [esimerkiksi metanoli, etanoli ja vastaavat] , asetoni, dioksaani, asetonitriili, kloroformi, metylee-nikloridi, etyleenikloridi, tetrahydrofuraani, etyyliasetaatti, Ν,Ν-dimetyyliformamidi, pyridiini tai mikä hyvänsä muu orgaaninen liuotin, joka ei vaikuta reaktioon haitallisesti. Näitä tavanomaisia liuottimia voidaan myös käyttää seoksena veden kanssa.

Tässä reaktiossa, kun kaavan (III) mukainen yhdiste on vapaan hapon tai sen suolan muodossa, reaktio suoritetaan edullisesti tavanomaisen kondensointireagenssin läsnäollessa, kuten N,N' -disykloheksyylikarbodi-imidin; N-sykloheksyyli-N'-morfolino-etyylikarbodi-imidin; N-sykloheksyyli-N'-(4-dietyyliaminosyk-loheksyyli) karbodi-imidin; N,N' -dietyylikarbodi-imidin, N, N' -di-isopropyylikarbodi-imidin; N-etyyli-N'-(3-dimetyyliamino-propyyli)karbodi-imidin; N,N'-karbonyylibis-(2-metyyli-imidat-solin); pentametyleeniketeeni-N-sykloheksyyli-imiinin; di-fenyyliketeeni-N-sykloheksyyli-imiinin, etoksiasetyleenin; 1-alkoksi-l-kloorietyleenin, trialkyylifosfiitin; etyylipoly-• fosfaatin; isopropyylipolyfosfaatin; fosforioksikloridin (fosforyylikloridi); fosforitrikloridin; difenyylifosforyyli-atsidin; tionyylikloridin; oksalyylikloridin; alempi alkyyli-halogeeniformiaatin [esimerkiksi etyyliklooriformiaatin, isopropyyliklooriformiaatin ja vastaavien]; trifenyylifosfii-nin; 2-etyyli-7-hydroksibentsisoksatsoliumsuolan; 2-etyyli-5- 12 93548 (m-sulfofenyyli)isoksatsoliumhydroksidin molekyylinsisäisen suolan; bentsotriatsol-l-yylioksitris(dimetyyliamino)fosfo-niumheksafluorifosfaatin; 1-(p-klooribentseenisulfonyylioksi)- 6-kloori-lH-bentsotriatsolin; niin kutsutun Vilsmeier-reagens-sin kanssa, joka valmistetaan Ν,Ν-dimetyyliformamidin reaktiolla tionyylikloridin, fosgeenin, trikloorimetyylikloorifor-miaatin, fosforioksikloridin, ja vastaavien kanssa; tai vastaavien .

Reaktio voidaan myös suorittaa epäorgaanisen tai orgaanisen emäksen, kuten alkalimetallibikarbonaatin, tri(alempi)alkyyli-amiinin, pyridiinin, N-(alempi)alkyylimorfoliinin, N,N-di-(alempi)alkyylibentsyyliamiinin tai vastaavien läsnäollessa.

Reaktiolämpötila ei ole kriittinen, ja reaktio suoritetaan tavallisesti jäähdyttäen/lämmittäen.

Menetelmä 2

Kaavan (I-b) mukainen kohdeyhdiste tai sen suola voidaan valmistaa käsittelemällä kaavan (I-a) yhdiste tai sen suola reaktiolla :n hydroksisuojaryhmän poistamiseksi.

Tässä suojaryhmänpoistoreaktiossa ovat sovellettavissa kaikki tavanomaiset menetelmät, joita käytetään hydroksisuojaryhmän-·.:.· poistoreaktiossa, esimerkiksi hydrolyysi, pelkistys, elimi-* ' nointi Lewis-happoa käyttämällä ja vastaavat.

Menetelmät kaavan (II) mukaisen lähtöaineyhdisteen valmistamiseksi selitetään alla yksityiskohtaisesti.

• Menetelmä A

Menetelmä (1)

Kaavan (VI) yhdiste tai sen suola voidaan valmistaa saattamalla kaavan (IV) yhdiste tai sen reaktiiviset johdannaiset II: 13 93548 aminoryhmässä tai sen suola reagoimaan kaavan (IV) mukaisen yhdisteen tai sen karboksiryhmässä olevan reaktiivisen johdannaisen tai sen suolan kanssa.

Sopivista kaavan (V) mukaisen yhdisteen suoloista voidaan mainita kaavan (III) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut .

Sopivista kaavan (VI) mukaisen yhdisteen suoloista voidaan mainita kaavan (I) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut .

Tämä reaktio voidaan suorittaa olennaisesti samalla tavalla, kuin menetelmässä 1, ja sen vuoksi tämän reaktion reaktiotavasta ja reaktio-olosuhteista [esimerkiksi reaktiivinen johdannaiset, liuottimet, reaktiolämpötila ja vastaavat] mainitaan esimerkkeinä menetelmässä 1 mainitut.

Menetelmä (2)

Kaavan (VIII) mukainen yhdiste tai sen suola voidaan valmistaa saattamalla kaavan (VI) mukainen yhdiste tai sen suola reagoimaan kaavan (VII) mukaisen yhdisteen tai sen aminoryhmässä olevan reaktiivisen johdannaisen tai sen suolan kanssa.

Sopivista kaavan (VII) mukaisen yhdisteen suoloista voidaan mainita kaavan (II) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut .

Sopivista kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen suoloista voidaan mainita kaavan (I) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä maini- • tut.

··!*» Tämä reaktio voidaan suorittaa olennaisesti samalla tavalla, kuin menetelmä 1, ja sen vuoksi tämän reaktion reaktiotavasta ja reaktio-olosuhteista [esimerkiksi reaktiivinen johdannai- 14 93548 set, liuottimet, reaktiolämpötila ja vastaavat] mainitaan esimerkkeinä menetelmässä 1 mainitut.

Menetelmä (3)

Kaavan (IX) mukainen yhdiste tai sen suola voidaan valmistaa käsittelemällä kaavan (VIII) yhdiste tai sen suola eliminoin-tireaktiolla aminosuojaryhmän poistamiseksi.

Sopivista kaavojen (VIII) ja (IX) yhdisteiden suoloista voidaan mainita kaavan (I) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut.

Tämä reaktio suoritetaan tavanomaisen menetelmän mukaisesti, kuten hydrolyysillä, pelkistyksellä tai vastaavilla.

Hydrolyysi suoritetaan edullisesti emäksen tai hapon läsnäollessa, mukaan lukien Lewis-hapon.

Sopiva emäs voi olla mm. epäorgaaninen emäs ja orgaaninen emäs, kuten alkalimetalli [esimerkiksi natrium, kalium ja vastaavat], maa-alkalimetalli [esimerkiksi magnesium, kalsium ja vastaavat], sen hydroksidi tai karbonaatti tai bikarbonaat-ti, hydratsiini, trialkyyliamiini [esimerkiksi trimetyylismiini, trietyyliamiini ja vastaavat], pikoliini, 1,5-diatsabisyk-' .· · lo [4.3.0] non-5-eeni, 1,4-diatsabisyklo [2.2.2] oktaani, 1,8-di- atsabisyklo-[5.4.0]undek-7-eeni tai vastaavat.

Sopiva happo voi olla mm. orgaaninen happo [esimerkiksi muurahaishappo, etikkahappo, propionihappo, trikloorietikkahappo, trifluorietikkahappo ja vastaavat], epäorgaaninen happo [esi-. merkiksi suolahappo, bromivetyhappo, rikkihappo, kloorivety, bromivety, fluorivety ja vastaavat] ja happoadditiosuolayhdis-te [esimerkiksi pyridiinihydrokloridi ja vastaavat].

Eliminointi käyttämällä Lewis-happoa, kuten trihalogeenietik-kahappoa [esimerkiksi trikloorietikkahappoa, trifluorietikka- 15 93548 happoa ja vastaavia] tai vastaavia käyttäen suoritetaan edullisesti kationinsieppausreagenssien [esimerkiksi anisolin, fenolin ja vastaavien] läsnäollessa.

Reaktio suoritetaan tavallisesti liuottimessa, kuten vedessä, alkoholissa [esimerkiksi metanoli, etanoli ja vastaavat], metyleenikloridissä, kloroformissa, tetrakloorimetaanissa, tetrahydrofuraanissa, näiden seoksessa tai missä hyvänsä muussa liuottimessa, joka ei vaikuta reaktioon haitallisesti. Liuottimena voidaan myös käyttää nestemäistä emästä tai happoa. Reaktion lämpötila ei ole kriittinen, ja reaktio suoritetaan tavallisesti jäähdyttäen/kuumentaen.

Eliminointireaktiossa sovellettava pelkistysmenetelmä voi olla mm. kemiallinen pelkistys ja katalyyttinen pelkistys.

Sopivia kemiallisessa pelkistyksessä käytettäviä pelkistysrea-gensseja ovat metallin [esimerkiksi tina, sinkki, rauta ja vastaavat] tai metallisen yhdisteen [esimerkiksi kromikloridi, kromiasetaatti ja vastaavat] ja orgaanisen tai epäorgaanisen hapon [esimerkiksi muurahaishappo, etikkahappo, propionihappo, trifluorietikkahappo, p-tolueenisulfonihappo, suolahappo, bromi vetyhappo ja vastaavat] yhdistelmät.

Sopivia katalyyttisessä pelkistyksessä käytettäviä katalysaattoreita ovat tavanomaiset katalysaattorit, kuten platina-katalysaattorit [esimerkiksi platinalevy, sienimäinen platina, platinamusta, kolloidinen platina, platinaoksidi, platinalanka ja vastaavat], palladiumkatalysaattorit [esimerkiksi sienimäinen palladium, palladiummusta, palladiumoksidi, palladium/hii-li, kolloidinen palladium, palladium/bariumsulfaatti, palla-dium/bariumkarbonaatti ja vastaavat], nikkelikatälysaattorit [esimerkiksi pelkistetty nikkeli, nikkelioksidi, Raney-nikkeli ja vastaavat], kobolttikatalysaattorit [esimerkiksi pelkistetty koboltti, Raney-koboltti ja vastaavat], rautakatalysaatto-rit [esimerkiksi pelkistetty rauta, Raney-rauta ja vastaavat], 16 93548 kuparikatalysaattorit [esimerkiksi pelkistetty kupari, Raney-kupari, Ullman-kupari ja vastaavat] ja vastaavat.

Tavallisesti pelkistys suoritetaan tavanomaisessa liuottimes-sa, joka ei vaikuta reaktioon haitallisesti, kuten vedessä, metanolissa, etanolissa, propanolissa, N,N-dimetyyliformami-dissa, tai näiden seoksessa. Lisäksi siinä tapauksessa, että edellä mainitussa kemiallisessa pelkistyksessä käytettävät hapot ovat nesteitä, niitä voidaan käyttää myös liuottimena. Edelleen katalyyttisessä pelkistyksessä käytetty sopiva liuotin voi olla edellä mainittu liuotin, ja muut tavanomaiset liuottimet, kuten dietyylieetteri, dioksaani, tetrahydrofuraa-ni ja vastaavat, tai näiden seos.

Tämän pelkistyksen reaktiolämpötila ei ole kriittinen, ja reaktio suoritetaan tavallisesti jäähdyttäen/kuumentaen.

Menetelmä (4)

Kaavan (XI) mukainen yhdiste tai sen suola voidaan valmistaa saattamalla kaavan (IX) mukainen yhdiste tai sen suola reagoimaan kaavan (X) mukaisen yhdisteen tai sen karboksiryhmässä olevan reaktiivisen johdannaisen tai sen suolan kanssa.

Sopivista kaavan (X) mukaisen yhdisteen suoloista voidaan mainita kaavan (III) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut.

Sopivista kaavan (XI) mukaisen yhdisteen suoloista voidaan mainita kaavan (I) mukaiselle yhdisteelle esimerkkeinä mainitut.

Tämä reaktio voidaan suorittaa olennaisesti samalla tavalla, kuin menetelmä 1, ja sen vuoksi tämän reaktion reaktiotavasta ja reaktio-olosuhteista [esimerkiksi reaktiivinen johdannaiset, liuottimet, reaktiolämpötila ja vastaavat] mainitaan esimerkkeinä menetelmässä 1 mainitut.

17 93548

Menetelmä (5)

Kaavan (II) mukainen yhdiste tai sen suola voidaan valmistaa käsittelemällä kaavan (XI) mukainen yhdiste tai sen suola reaktiolla aminosuojaryhmän poistamiseksi.

Tämä reaktio voidaan suorittaa olennaisesti samalla tavalla, kuin menetelmä (3), ja sen vuoksi tämän reaktion reaktiotavasta ja reaktio-olosuhteista [esimerkiksi reaktiivinen johdannaiset, liuottimet, reaktiolämpötila ja vastaavat] mainitaan esimerkkeinä menetelmässä (3) mainitut.

Edellä kuvatuilla menetelmillä saadut yhdisteet voidaan eristää ja puhdistaa tavanomaisella menetelmällä, kuten trituroin-nilla (pulverization), uudelleenkiteytyksellä, pylväskromato-grafiällä, uudelleensaostuksella tai vastaavalla.

On huomautettava, että kaavan (I) mukainen yhdiste (I) ja muut yhdisteet voivat sisältää 1 tai useampia asymmetrisistä hiili-atomeista johtuvia stereoisomeereja, ja näiden kaikki tällaiset isomeerit ja seokset kuuluvat tämän keksinnön suoja-alaan.

Kaavan (I) mukaisilla kohdeyhdisteillä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävällä suolalla on farmakologisia aktiivisuuksia, kuten takykiniiniantagoniaa, erityisesti substanssi P-antagoniaa, neurokiniini A-antagoniaa tai neurokiniini B-antagoniaa, ja siksi ne ovat käyttökelpoisia hoitamaan tai estämään ennalta takykiinin välittämiä sairauksia, erityisesti substanssi P:n välittämiä sairauksia, esimerkiksi hengitysteiden sairauksia, kuten astmaa, keuhkoputkentulehdusta, riniit-tiä, yskää, yskösten yskimistä ja vastaavia; silmäsairauksia, : kuten sidekalvontulehdusta, keväistä sidekalvontulehdusta ja vastaavia, ihosairauksia, kuten kontakti-ihotulehdusta, atooppista ihotulehdusta, nokkosrokkoa ja muita ekseemaihotu-lehduksia ja vastaavia; tulehdussairauksia, kuten nivelreumaa, nivelrikkoa ja vastaavia; kipuja tai särkyjä (esimerkiksi 18 93548 migreeniä, päänsärkyä, hammassärkyä, syöpäkipua, selkäsärkyä ja vastaavia); ja vastaavia.

Lisäksi keksinnön kaavan (I) mukaisten yhdisteiden odotetaan olevan käyttökelpoisia hoitamaan tai estämään ennalta silmä-sairauksia, kuten glaukooma, silmän keskikalvon tulehdusta ja vastaavia; ruoansulatuskanavan sairauksia, kuten haavaumia, haavauttavaa paksusuolen tulehdusta, ärtyvää suolioireyhtymää, ruoka-aineallergiaa ja vastaavia; tulehdussairauksia, kuten munuaistulehdusta ja vastaavia; verenkierron sairauksia, kuten liiallista verenpainetta, angina pectorista, sydämen vajaa toimintaa, veritulppia ja vastaavia; epilepsiaa; spastista halvausta; pollakiuriaa; dementiaa; Alzheimerin tautia; skitsofreniaa; Huntingtonin koreaa; karainoidioireyhtymää ja vastaavia, ja käyttökelpoisia immuniteettia alentavana aineena.

Terapeuttiseen tarkoitukseen kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja voidaan käyttää farmaseuttisen valmisteen muodossa, joka sisältää 1 mainituista yhdisteistä, aktiivisena valmistusaineena, seoksena farmaseuttisesti hyväksyttävän väliaineen, kuten orgaanisen tai epäorgaanisen kiinteän tai nestemäisen apuaineen kanssa, joka sopii oraaliseen, parenteraaliseen, ulkoiseen tai inhalaationa antoon. Farmaseuttiset valmisteet voivat olla kapseleita, tabletteja, rakeita, jyväsiä, liuos, suspensio, emulsio tai vastaava. Haluttaessa näihin valmisteisiin voidaan sisällyttää apuaineita, stabilointiaineita, kostutus- tai emulgoimisainei-ta, puskuroimisaineita ja muita kaupallisesti käytettyjä lisäaineita.

Vaikka kaavan (I) mukaisten yhdisteiden annostelu riippuu : potilaan iästä ja tilasta, voi keskimääräinen yksittäisannos noin 0,1 mg, 1 mg, 10 mg, 50 mg, 100 mg, 250 mg, 500 mg ja 1000 mg kaavan (I) mukaista yhdistettä olla tehokas astman ja vastaavien hoitoon. Yleensä voidaan antaa määriä välillä 0,1 mg/keho ja noin 1000 mg/keho päivässä.

19 93548

Kaavan (I) mukaisen kohdeyhdisteen käyttökelpoisuuden kuvaamiseksi seuraavaksi esitetään farmakologisia testitietoja joistain kaavan (I) mukaisista edustavista yhdisteistä.

Testivhdisteet:

Me (a) rn-r-CO- (2S,4R) -Pro(40H) -2Nal-N / I \ Bzl

Me | Me (b) J— CO- (2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N { v 0 \ Bzl

Me -1— CO- (2S,4R) - Pro (4 0Me) -2Nal-N/ I ^ Bzl (c) N ^

Me ^ Me (d) UJ-CH-CHCO- (2S.4RI -Pro(40H) -2Nal-N ' ^ Bzl (1) 3H-substanssi P:n reseptorisitoutuminen Testimenetelmä: (a) Raaka keuhkomembraanivalmiste

Koiraspuolisia Hartley-kannan marsuja tapettiin poistamalla . pää. Poistettiin henkitorvi ja keuhkot, ja homogenisoitiin puskurissa (0,25 M sakkaroosia, 50 mM Tris/HCl pH 7,5, 0,1 mM EDTA) käyttämällä Polytoron-laitetta (Kinematica). Homogenaat-ti sentrifugoitiin (1000 xg, 10 min) kudosrykelmien poistamiseksi, ja supernatantti sentrifugoitiin (14000 xg 20 min) pellettien tuottamiseksi. Pelletit suspendoitiin uudelleen 20 93548 puskuriin (5 mM Tris/HCl pH 7,5), homogenisoitiin teflonhomo-genisaattorilla ja sentrifugoitiin (14000 xg, 20 min), jolloin saatiin pellettejä, joita kutsuttiin raakamembraanijakeiksi. Saatuja pellettejä varastoitiin käyttöön asti -70°C:ssa.

(b) 3H-substanssi P:n sitoutuminen valmistemembraaniin

Pakastettuja raakamembraanijakeita sulatettiin ja suspendoi-tiin uudelleen väliaineeseen 1 (50 mM Tris/HCl pH 7,5, 5 mM MnCl2, 0,02 % BSA, 2 μ9/πι1 kymostatiinia, 4 μg/tnl leupeptii-niä, 40 μ9/πι1 basitrasiinia) . 3H-substanssi P:tä (1 nM) inku-boitiin 100 μΐ kanssa membraanivalmistetta väliaineessa 1 4°C:ssa 30 min ajan lopullisessa tilavuudessa 500 μΐ. Inku-bointivaiheen lopussa reaktioseos suodatettiin nopeasti Whatman GF/B-lasisuodattimella (esikäsitelty 0,1 % polyetyleeni-imiinillä 3 tunnin ajan ennen käyttöä) imun alla. Sitten suodattimet pestiin neljästi 5 ml :11a puskuria (50 mM Tris/HCl, pH 7,5). Radioaktiivisuus laskettiin 5 ml:ssa Aguazol-2:ta Packerd-tuikelaskurissa (Packerd TRI -CARB 4530).

Testitulokset: testiyhdisteet (0,1 μΐ/ml inhibitio (%) (a) 96 (b) 94 (c) 100 (d) 96 (2) Oraalisen annon vaikutus substanssi P-indusoituun keuhkoputkien limakalvojen turpoamiseen marsuissa

Testimenetelmä:

Koiraspuoliset Hartley-marsut (300 - 400 g) injisoitiin laskimonsisäisesti Evansin sinisellä liuoksella (20 mg/kg), joka sisälsi hepariinia (200 IU/kg) ja substanssi P:tä (10 n lii 21 93548 mol/kg). Kukin testiyhdiste (100 mg/kg) liuotettuna dimetyy-lisulfoksidiin annettiin oraalisesti 30 min ennen tätä injektiota. 10 min kuluttua eläimet tapettiin laskemalla veri, ja keuhkoja perfusoitiin 50 ml :11a suolaliuosta. Henkitorvet ja runkokeuhkoputket leikattiin ulos ja liuotettiin 0,5 ml IN KOH-liuosta 37°C:ssa 6 tunnin ajan. Kun oli uutettu 4,5 ml :11a asetoni/fosfaatti-liuosta (0,6 N H3P04:asetoni = 5:13), kudoksen Evansin sinisen pitoisuus kvantisoitiin kolorimetrisesti aallonpituudella 620 nm.

Testitulokset: testiyhdisteet (0,1 μΐ/ml inhibitio (%) (a) 94 (b) 82 (c) 60 (d) 96

Seuraavat esimerkit on annettu keksinnön havainnollistamiseksi yksityiskohtaisemmin.

Näissä esimerkeissä on käytetty seuraavia lyhenteitä IUPAC-IUB:n lyhenteiden lisäksi.

Ac : asetyyli

Boc : t-butoksikarbonyyli BSA : bistrimetyylisilyyliasetamidi

Bzl : bentsyyli

Bzl(o-F) : o-fluoribentsyyli

Bzl(m-F) : m-fluoribentsyyli li* ·

Bzl(p-F) : p-fluoribentsyyli HOBT : N-hydroksibentsotriatsoli IPE : isopropyylieetteri

Me : metyy1i 1 Nai : 3-(1-naftyyli)alaniini 2 Nai : 3-(2-naftyyli)alaniini -__ . - 22 93548 NMM : N-metyylimorfoliini 4N-HC1/D0X : 4N-vetykloridi 1,4-dioksaanissa

Ph : fenyyli

Pr1 : isopropyyli

Pro(40H) : 4-hydroksiproliini

Pro(40Me) : 4-metoksiproliini TEA : trietyyliamiini TFA : trifluorietikkahappo THF : tetrahydrofuraani WSC : l-etyyli-3-(3'-dimetyyliaminopropyyli)-karbodi- imidi

Seuraavissa valmistusmenetelmissä ja esimerkeissä käytetyt lähtöyhdisteet ja saadut kohdeyhdisteet on annettu alla olevassa taulukossa, jossa lähtöyhdisteiden kaavat ovat ylempänä ja vastaavasti kohdeyhdisteiden kaavat alempana.

23 93548

Taulukko valmistusmene- „ 0 . i .. Naava telma no.

H-2Nal-OH

1 -

Boc-2Nal-OH

2 -

Me

Boc-2Nal-N ^ ^Bzl

Me

Boc-2Nal-N ^ ^Bzl 3 - ^Me

HCl* H-2Nal-N

^Bzl

Me HCl*H-2Nal-N ^ ^ Bzl ; 4 - . Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N^ ^ Bzl

Me

Boc-(2S,4R)-Pro(4QH)-2Nal-N ^ ^Bzl 5 - . Me

HCl*H-{2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

^ Bzl

H-lNal-OH

6 -

Boc-lNal-OH

7-(1) - ^ Me

Boc-lNal-N

^ Bzl valmistusmene- „ e „ Tr ^ telinä no. Kaava 24 93548 _

Boc-2Nal-OH

7-(2) -

Boc-2Nal-NHBzl

Boc-2Nal-OH

7-(3) - ^ Me

Boc-2Nal-N

(CH2)2Ph

Boc-2Nal-OH

7-(4) .Me

Boc-2Nal-N

^ Bzl (m-F)

Boc-2Nal-OH

7-(5) -

Me

Boc-2Nal-N

^ Bzl (o-F)

Boc-2Nal-OH

7-(6) -

Boc-2Nal-NH(CH2)2Ph

Boc-2Nal-OH

7-(7) - . Me

Boc-2Nal-N

^ Bzl (p-F)

Boc-2Nal-OH

8 -

/ (CH9)9OH

Boc-2Nal-N

^ Bzl . (CH-,ΚΟΗ

Boc-2Nal-N

^ Bzl 9 - (CH-KOAc

Boc-2Nal-N

^ Bzl

II

valmistusmene telmä no. Kaava 25 93548 . Me

Boc-lNal-N

^ Bzl 10-(1) -

Me HCl-H-lNal-N ^ ^Bzl

Boc-2Nal-NHBzl 10-(2) - HCl*H-2Nal-NHBzl , Me

Boc-2Nal-N

M CH-)9Ph 10-(3) -—- /Me

HCl*H-2Nal-N

^(CH2)2Ph Me

Boc-2Nal-N

^ Bzl (m-F) 10-(4) - . Me HCl-H-2Nal-N^ ^ Bzl (m-F) /Me

Boc-2Nal-N

^Bzl (o-F) 10-(5) - /•Me

HCl*H-2Nal-N

^ Bzl (O-F)

Boc-2Nal-NH(CH-)-Ph 10-(6) -—- HCl*H-2Nal-NH(CH2)2Ph / Me

Boc-2Nal-N

Bzl (p-F) 10-(7) - . Me HCl*H-2Nal-N ^

Bzl (p-F) valmistusmene- ..

telmä no. Kaava 26 93548 . (CH~ ) -jOAc Boc-2Nal-N i 1

Bzl 10-(8) - (CHO-OAc

HCl-H-2Nal-N

^ Bzl , Me

HCl-H-2Nal-N

^ Bzl H-d) - . Me

Boc-(2S,4R)-Pro (40Me)-2Nal-N

V Bzl / Me

HCl-H-lNal-N

Bzl 11-(2) - . Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-lNal-N

^ Bzl HC1*H-2Nal-NHBzl 11-(3) -

Boc-(2S,4R)-Pro (40H)-2Nal-NHBzl , Me HCl*H-2Nal-N ^ (CH9)0Ph 11-(4) -—- . Me

Boc-(2S,4R)-Pro (40H)-2Nal-N

^ (CH2)2Ph / Me HCl-H-2Nal-N .

Bzl (m-F) 11-(5) - . Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ · ^ Bzl (m-F)

II

valmistusmene telmä no. Kaava 27 93548

Me HCl*H-2Nal-N^

Bzl (o-F) H-(6) - ^ Me

Boc- (2S,4R) -Pro ( 40H)-2Nal-N.

Bzl (o-F) HCl-H-2Nal-NH(CH-)-Ph 11-(7) -£_±-

Boc-(2S,4R)-Pro (40H)-2Nal-NH(CH2)2Ph Me HCl-H-2Nal-N ^

Bzl (p-F) H-(8) - , Me

Boc-(2S,4R)-Pro (40H)-2Nal-N ^

Bzl (p-F) / (CH-)-OAc HCl-H-2Nal-N - 1 1

Bzl 11- (9) - .(CH-)-OAc

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N Δ z ^ Bzl

Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-lNal-N ^

Bzl 12- (1) - , Me HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-lNal-N ^ ^ Bzl

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-NHBzl 12-(2) - HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-NHBzl

Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ M CH-)-Ph 12-(3) -- ^ Me

HCl*H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

^ (CH2)2Ph 28 93548 — valmis tusmene- vo„ a. ·· Naava telma no.

, Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl (m-F) 12-(4) -

Me HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl (m-F)

Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl (o-F) 12-(5) - . Me HCl*H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ X Bzl (o-F)

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-NH{CH-)-Ph 12-(6) -—- HCl·Η-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-NH(CH2)2Ph

Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

Bzl (p-F) : 12-(7) - ^ Me HCl*H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N .

Bzl (p-F) (CH9)-OAc

Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl 12-(8) - / (CH7)-OAc

HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N Z

Bzl

Me

Boc-(2S,4R)-Pro (40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl 13 - . Me TFA·H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N^

Bzl II: esimerkki Kaava no.

29

Me 93548 HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl 1 - * /Me

-pj-CO-( 2S, 4R) -Pro( 40H) -2Nal-N

__Me_ / Me

HClΉ-(2S,4R)-Pro(40H)-lNal-N

Bzl 2-(1) -

Me -π-CO- ( 2S,4R) -Pro( 40H) -INal-N ^

Bzl i __Me_ HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-NHBzl 2-(2) - —|j-CO-(2S/4R)-Pro( 40H)-2Nal-NHBzl __Me_ . Me

HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

^(CH7)-Ph 2-( 3 ) --

Me -n-C0-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ UJlNi) \(CH2)2Ph __Me_ .Me HCl*H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl (m-F) 2-(4) - /Me

--j-C°- (2S,4R) -Pro ( 40H) - 2Na 1 -N

kx/k NU ^Bzl (m-F) __Me_

Me 30 esimerkki v no. Kaava 93548

HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N CT

^ Bzl (o-F) 2-(5) - O. Me .--|-C0-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl (o-F) __Me_ HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-NH(CH- ) -Ph 2- ( 6 ) -—- -jj-CO- ( 2S, 4R) -Pro ( 4OH) -2Nal-NH ( CH2 ) 2Ph __Me_ ^ (CH-)_OAc

HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

Bzl 2-(7) - / (CH?)9OAc

-r-CO- ( 2S, 4R) -Pro( 40H) -2Nal-N

NJJ Bzl __Me_

Me HCl-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl (p-F) 2-(8) -

Me

Ö—^o-us,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

„'J Bzl (p-F) __Me_ . Me

TFA-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

^ Bzl Π .A CO- ( 2S, 4R) -Pro( 40H) -2Nal-N ^ j ^ Bzl __Me_

II

Me 31 93548 “^erkki Kaava TFA*H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl 4-(1) —^- r ii—π ^Me

(χΛ n>-C0-{ 2S, 4R) -Pro(40H)-2Nal-N

^ Bzl Με TFA-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl 4-(2) -

Me —frCO-(2S/4R)-Pro(40H)-2Nal-N^

NJI

__Ρτί_

Me TFA-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Bzl 4-(3) -

Me 0.-rr-C0-(2S/4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^

Ln^N ^Bzl __H_ . Me

Boc-(2S,4R)-Pro(40Me)-2Nal-N .

Bzl 5 -

Me --]—CO-(2S, 4R) -Pro( 40Me) -2Nal-N ^ kJ'J ^ Bzl __Me_ / Me TFA*H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N .

Bzl 6 - ^ Me

1^7,-n-CO-( 2S, 4R) -Pro( 40H) -2Nal-N

liJi.NJ) Bzl __H_ 93548

Me 32 esimerkki Kaava no.

TFA-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl m

^>-CH=CHCO- ( 2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

(trans) Bzl

Me TFA-H-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ ^ Bzl 8 -- r il /Me

^JJ-CH=CHSO_- ( 2S, 4R) -Pro ( 4oH) -2Nal-N

(trans)z Bzl CH- ) -OAc

-,—CO-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N

N BZ1 9 Me_

/(CH-UOH

a—j-|-CO-( 2S, 4R)-Pro ( 40H)-2Nal-N ^ n" Bz1 __Me_

II

33 93548

Valmistusmenetelmä 1

Suspendoituun seokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (2,0 g) veden (30 ml) ja asetonin (30 ml) liuotinseoksessa lisättiin trietyyliamiinia (1,94 ml) jäissä jäähdyttäen. Liuokseen lisättiin liuos, jossa oli di-tert-butyylidikarbonaattia (2,43 g) asetonissa (10 ml), ja liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa 2 tuntia ja huoneenlämpötilassa vielä 2 tuntia, minä aikana lisättiin di-tert-butyylidikarbonaattia (0,4 g). Asetoni poistettiin, minkä jälkeen lisättiin vettä (50 ml) ja vesiliuos pestiin kerran etyyliasetaatilla. Sitten vesikerros tehtiin happameksi pH:n arvoon 2 lisäämällä 6N suolahappoa ja uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Haihduttamisen jälkeen jäännös kiteytettiin di-isopropyylieetterin ja n-heksaanin liuotinseoksesta, ja otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikkoyhdistettä (2,46 g). sp.: 91-93°C

IR (Nujoli): 3390, 1720, 1690, 1520, 1274, 1250, 1170 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,28 (9H, s), 3,00 (1H, ABq:n d, J=13,7Hz ja 10,1Hz), 3,20 (1H, ABq:n d, J=13,7Hz ja 4,7Hz), 4,20 (1H, m), 7,16 UH, d, J=8.5Hz) , 7,4-7,6 (3H, m), 7,7-7,9 (1H, m)

Valmistusmenetelmä 2 , Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (1,34 g), N-metyylibentsyyliamiinia (0,49 ml), ja HOBT:ä (0,51 g) metyleenikloridissa (30 ml), lisättiin WSC‘HCl:ää (0,95 g). Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa yksi tunti ja huoneenlämpötilassa yön yli. Haihduttamisen jälkeen reak-tioseos uutettiin etyyliasetaatilla, ja orgaaninen kerros • ; pestiin peräkkäin vedellä ja natriumvetykarbonaa^in vesiliuoksella, 0,5N suolahapolla, vedellä ja natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Haihduttamalla saatiin kohdeyhdistettä (1,74 g) öljynä.

IR (CHC13): 3300, 1710, 1640, 1490, 1170 cm-1 34 93548 NMR (DMSO-d6, δ): 1,22 ja 1,32 (9H, s), 2,76 ja 2,87 (3H, s), 2,9-3,2 (2H, m), 4,6-4,8 (3H, m), 6,9-8,0 (13H, m)

Valmistusmenetelmä 3

Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (1,74 g) metyleenikloridissa (17 ml) lisättiin 4N-HCl/DOx:ää (17 ml). Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa viisi minuuttia. Sitten jäähdytyshaude poistettiin ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa puoli tuntia, minä aikana liuokseen lisättiin 4N-HCl/DOX:ää (8,4 ml). Haihduttamisen jälkeen jäännös hierrettiin di-isopropyylieetterin kanssa, otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin natriumhydroksidilla tyhjössä, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (1,54 g), sp.: 141-145°C

IR (Nujoli): 3320, 2700, 1660, 1605, 1580, 1495, 1280 cm1" NMR (DMSO-dg, δ): 2,65 ja 2,71 (3H, s), 3,1-3,4 (2H, m), 4,09, 4,59 ja 4,35, 4,56 (2H, kaksi kertaa ABq, J=16,2Hz ja 14,9Hz vastaavasti), 4,7-4,8 (1H, m), 7,0-7,25 (5H, m), 7,35-7,6 (3H, m), 7,8-8,0 (4H, m), 8,51 (3H, s)

Valmistusmenetelmä 4 Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (1,5 g), Boc-(2S,4R)-Pro(40H)-0H:ta (0,98 g) ja HOBT:ä (0,57 g) metyleenikloridin (40 ml) ja dimetyyliformamidin (5 ml) sekoitetussa liuottimessa lisättiin WSC:tä (0,77 ml). Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa yksi tunti ja huoneenlämpötilassa yön yli. Haihduttamisen jälkeen reaktioseos uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, vedellä, 0,5N suolahapolla, vedellä ja natriumkloridin vesiliuoksella, ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Haihduttamisen jälkeen jäännös puhdistettiin silikageelipylväässä (75 g) eluoiden kloroformin ja metanolin (50:1) liuotinseoksella, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (1,74 g) amorfisena kiinteänä aineena.

IR (CHC13): 3320, 3250, 1690 (sh), 1680, 1640, 1500, 1160 cm'1 11 35 93548 NMR (DMSO-dg, δ): 1,19 ja 1,39 (9H, s), 1,75-2,05 (2H, m), 2,5-2,9 (3H, m), 3,0-3,5 (4H, m), 4,1-5,2 (6H, m), 6,95-7,3 (5H, m), 7,4-7,6 (3H, m), 7,75-7,95 (4H, m), 8,6-8,7 (1H, m)

Valmistusmenetelmä 5 Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (1,07 g) metyleenikloridissa (11 ml) lisättiin 4N-HC1/DOXää (8,2 ml). Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa viisi minuuttia ja huoneen lämpötilassa 55 minuuttia. Haihduttamisen jälkeen jäännös hierrettiin di-isopropyylieetterin kanssa, otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (0,90 g).

IR (Nujoli): 3330, 2700, 1670 (sh), 1640, 1550 cm'1 NMR (DMSO-d6, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 2,2-2,4 (1H, m), 2,78 ja 2,85 (3H, s), 3,0-3,4 (4H, m), 4,2-4,6 (4H, m), 5,0-5,2 (1H, m), 5,55-5,6 (1H, m), 6,9-8,0 (13H, m), 9,24 (1H, d, J=7,6Hz)

Valmistusmenetelmä 6

Kohdeyhdiste saatiin valmistusmenetelmän 1 mukaisella tavalla.

Sp. : 90 -91°C

IR (Nujoli): 3370, 1730, 1660, 1400, 1250, 1165 cm'1 NMR {DMSO-dg, δ): 1,28 (9H, s), 3,20 (1H, dd, J=24,4Hz ja 10,4Hz), 3,59 (1H, dd, J=17,8Hz ja 3,9Hz), 4,16-4,27 (1H, m), 7,26 (1H, d, J=8,4Hz), 7,38-8,13 (7H, m), 12,75 (1H, br s)

Valmistusmenetelmä 7

Kohdeyhdisteet saatiin valmistusmenetelmän 2 mukaisella taval-' la.

IR (CHC13): 3310, 2995, 1705, 1640, 1490, 1365, 1250 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,21 ja 1,34 (9H, s), 2,53 ja 2,71 (3H, s), 3,3-3,45 (2H, m), 4,2-4,55 (2H, m), 4,75-4,95 (1H, m), 6,95-8,2 (13H, m) 36 93548

(2) sp.: 161-163°C

IR (Nujoli): 3360, 1650, 1660, 1530, 1305, 1245, 1185 cm1' NMR (DMSO-dg, δ): 1,28 (9H, s) , 2,99 (1H, dd, J=13,1Hz ja 9,2Hz), 3,14 (1H, dd, J=13,lHz ja 5,5Hz), 4,2-4,4 (3H, m), 7,05-7,25 (6H, m), 7,4-7,55 (3H, m), 7,7-7,9 (4H, m), 8,45 (1H, t, J=5,8Hz) MASSA: M+1 4 04 (3) IR (CHC13): 3450, 3310, 1705, 1635, 1605, 1365 cm'1 NMR (DMSO-d6, δ): 1,1-1,35 (9H, m) , 2,55-3,0 (4H, m) , 2,77 ja 2,84 (3H, s), 3,2-3,7 (2H, m), 4,5-4,7 (1H, m), 7,05-7,95 (13H, m) (4) IR (CHCI3): 3320, 1705, 1640, 1595 cm*1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,15-1,4 (9H, m), 2,75-3,2 (5H, m), 4,3-4,85 (3H, m), 6,8-7,65 (8H, m), 7,7-7,9 (4H, m) (5) IR (CHCI3): 3450, 3320, 1710, 1640, 1590, 1365 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,1-1,4 (9H, m), 2,79 ja 2,94 (3H, s), 2,8- 3,15 (2H, m) , 4,45-4,85 (3H, m), 6,8-7,6 (8H, m) , 7,65-7,95 (4H, m)

(6) sp.: 122-123°C

IR (Nujoli): 3350, 1690, 1650, 1525, 1320, 1270 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,26 (9H, s), 2,66 (2H, t, J=7,0Hz), 2,8-3,1 (2H, m), 3,2-3,4 (2H, m) , 4,15-4,3 (1H, m), 6,92 (1H, d, J=8,48Hz), 7,15-7,35 (5H, m), 7,4-7,5 (3H, m), 7,7-7,9 (4H, m), 7,95-8,1 (1H, m) (7) IR (CHCI3): 3470, 3330, 1710, 1645, 1610, 1370 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,15-1,4 (9H, m) , 2,7-3,2 (5H, m) , 4,35-4,85 (3H, m), 6,85-8,0 (12H, m) 11 37 9 3 5 4 8

Valmistusmenetelmä 8 Lähtöyhdiste liuotettiin metyleenikloridiin 35 ml ja NMM:ää (0,90 ml) lisättiin liuokseen. Liuos jäähdytettiin lämpötilaan -22°C - -20°C ja metyleenikloridiin (2 ml) liuotettu isobutyy-likloroformaatti (1,04 ml) lisättiin siihen tipoittain samassa lämpötilassa. Liuosta sekoitettiin neljännestunti, minä aikana lämpötila pidettiin -25°C ~ -20°C:ssa. Sitten liuos jäähdytettiin -30°C:een ja metyleenikloridiin (3 ml) lisättiin yhdellä kertaa liuotettua N-bentsyylietanoliamiinia (1,21 g). Liuosta sekoitettiin kaksi tuntia, minä aikana lämpötila kohosi 20°C:een. Väkevöimisen jälkeen jäännös uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin vedellä, natrium-vetykarbonaattiliuoksella, vedellä, 0,5N suolahapolla, ja natriumkloridiliuoksella ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Väkevöimisen jälkeen raakatuote puhdistettiin silikageelipyl-väässä (50 g) eluoiden ensin kloroformilla ja kloroformin ja metanolin liuotinseoksella (1,5 %), jolloin saatiin kohdeyh-distettä (2,69 g).

IR (CHCI3): 3430, 3300, 1700, 1630 cm"1 MASSA: (m/e) 448

Valmistusmenetelmä 9

Liuokseen, jossa on lähtöyhdistettä (2,65 g) ja pyridiiniä • t· (4,67 g) THF:ssä (50 ml) lisättiin asetyylikloridia (0,928 g) » jäissä jäähdyttäen. Lisäämisen jälkeen seosta sekoitettiin yksi tunti samassa lämpötilassa. Väkevöimisen jälkeen jäännös uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin vedellä, 0,5N suolahapolla, natriumvetykarbonaatti-liuoksella, ja natriumkloridiliuoksella ja kuivattiin magne-siumsulfaatilla. Väkevöimällä saatiin kohdeyhdistettä (2,82 g) öljynä.

IR (CHCI3): 3330, 1742, 1710, 1640 cm"1

Valmistusmenetelmä 10 38 9 3 5 4 8

Kohdeyhdisteet saatiin valmistusmenetelmän 3 mukaisella tavalla .

(1) IR (Nujoli): 3495, 1645, 1625, 1510, 1495, 1265 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 3,2-3,45 (1H, m), 3,36 (3H, s), 3,87 (1H, dd, J=8,6Hz ja 4,3Hz), 4,28 (2H, s), 4,64 (1H, dd, J=7,4Hz ja 4,4Hz), 6,75-8,15 (12H, m), 8,73 (2H, brs)

(2) sp. : 183 -185°C

IR (Nujoli): 3430, 1675, 1600, 1575, 1545, 1250, 1160 cm'1 NMR (DMSO-d6, δ): 3,26 (2H, d, J=7,lHz), 4,1-4,25 (2H, m), 4,36 (1H, dd, J=15,lHz ja 6,4Hz), 6,9-7,2 (5H, m), 7,4-7,6 (3H, m), 7,7-7,95 (4H, m), 8,48 (3H, br s), 9,05 (1H, t, J=5,7Hz) (3) IR (CHC13): 3500-3350, 1650, 1600, 1500 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 2,3-2,8 (5H, m), 3,05-3,70 (4H, m), 4,55-4,7 (1H, m), 7,1-7,6 ja 7,7-8,0 (12H, m), 8,42 (3H, br s) (4) IR (CHCI3): 3420, 1785, 1655, 1640, 1620, 1595 cm'1 NMR (DMSO-dg, 5): 2,67 ja 2,71 (3H, s), 3,15-3,4 (2H, m), 4,05-4,85 (3H, m), 6,8-8,0 (UH, m), 8,51 (3H, br s) (5) IR (CHCI3): 3500-3350, 1785, 1655-1645, 1600, 1585, 1370 cm'1 NMR (DMSO-dg, Ö): 2,71 (3H, s), 3,1-3,4 (2H, m), 4,1-4,9 (3H, m), 6,85-8,0 (UH, m), 8,52 (3H, br s) (6) IR (CHC13): 3450-3150, 1665, 1600, 1455, 1370, 1120 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 2,45-2,7 (2H, m), 3,1-3,5 (4H, m), 4,07 (1H, t, J=6,7Hz), 7,05-7,6 (8H, m), 7,7-7,95 (4H, m), 8,38 (3H, br s), 8,7-8,8 (1H, m) 39 9 3 5 4 8 (7) sp. : 14 5°C (haj.) IR (Nujoli): 3450, 1650, 1605, 1510, 1285, 1225 cm"1 NMR {DMSO-dg, δ): 2,64 ja 2,69 (3H, s), 3,1-3,4 (2H, m), 4,05-4,85 (3H, m), 6,85-7,1 ja 7,35-8,0 (UH, m), 8,53 (3H, br s) (8) IR (CHC13): 3450-3370, 1740, 1650, 1600, 1365 cm'1 NMR (DMSO-d6, δ): 1,89 ja 1,96 (3H, s), 3,0-3,8 (6H, m), 3.9- 4,9 (3H, m), 7,0-7,6 (8H, m), 7,7-8,0 (4H, m), 8,55 (2H, br s)

Valmistusmenetelmä 11

Kohdeyhdisteet saatiin valmistusmenetelmän 4 mukaisella tavalla.

(1) IR (puhdas): 3300, 1690, 1640 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,18 (s) ja 1,39 (s) (9H) , 1,5-1,8 (1H, m), 1.9- 2,3 (1H, m), 2,7-2,9 (3H, m), 2,9-3,3 (2H, m), 3,3-3,5 (2H, m), 3,7-3,9 (1H, m), 4,0-5,2 (4H, m), 6,8-7,3 (5H, m), 7,3-7,6 (3H, m), 7,6-7,9 (4H, m), 8,4-8,5 (1H, m) (2) IR (CHCI3) : 3420, 3300, 1680, 1630, 1520, 1490, 1400 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,32 ja 1,41 (9H, s), 1,6-1,8 (1H, m), 1.8- 2,0 (1H, m), 2,44 ja 2,66 ja 2,74 (3H, m), 3,2-3,5 • · (4H, m), 4,15-4,60 ja 4,9-5,3 (6H, m), 6,70-8,60 (13H, m) (3) sp.: 205°C (haj.) IR (Nujoli): 3400, 3350, 3280, 3100, 1680, 1645, 1570, 1540, 1290, 1170 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,08 ja 1,34 (9H, s), 1,5-1,8 (1H, m), ; 1,8--2,05 (1H, m), 2,95-3,5 (4H, m), 4,05-4,4 ja 4,45-4,8 ja 4.9- 5,0 (6H, m), 7,0-7,25 (5H, m), 7,35-7,5 (3H, m), 7,7-7,9 (4H, m), 8,1-8,3 (1H, m), 8,5-8,6 (1H, m) MASSA: M+1 517 40 93548 (4) IR (CHC13): 3420, 3300, 1690-1670, 1630, 1370 cm"1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,1-1,25 ja 1,3-1,5 (9H, m), 1,55-1,75 (1H, m), 1,75-2,0 (1H, m), 2,5-3,1 ja 3,2-3,8 (UH, m), 4,0-4,25 (2H, m), 4,9-5,05 (2H, m), 7,05-7,6 ja 7,6-7,9 (12H, m), 8,2-8,4 (1H, m) (5) IR (CHCI3): 3450-3250, 1700-1655, 1645, 1595 cm'1 NMR (DMSO-d6, δ): 1,1-1,4 (9H, m), 1,55-1,75 (1H, m), 1,8-2,0 (1H, m), 2,7-3,5 (7H, m), 4,1-5,2 (6H, m), 6,7-7,3 ja 7,4-7,6 ja 7,7-7,9 (11H, m), 8,4-8,5 (1H, m) (6) IR (CHCI3): 3450-3300, 1690-1630, 1640, 1370, 1160 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,1-1,45 (9H, m), 1,6-1,8 (1H, m), 1,85-2,05 (1H, m), 2,7-3,5 (7H, m), 4,1-4,7 ja 4,9-5,2 (6H, m), 6,7-7,9 (11H, m), 8,35-8,5 (1H, m)

(7) sp.: 202-203°C

IR (Nujoli): 3360, 3270, 3070, 1665, 1635, 1535, 1420, 1285, 1170 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,07 ja 1,40 (9H, s), 1,5-1,75 (1H, m), 1.8- 2,0 (1H, m), 2,55-2,7 (2H, m), 2,9-3,4 (6H, m), 4,0-4,2 ja 4,25-4,65 (3H, m), 4,93 (1H, dd, J=9,78Hz ja 6,43Hz), 7,1-7,55 ja 7,65-8,2 (14H, m) (8) IR (CHCI3): 3450-3300, 1690-1670, 1640, 1370, 1160 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,0-1,5 (9H, m), 1,6-1,8 (1H, m), 1,85-2,05 (1H, m), 2,7-2,9 (3H, m), 3,0-3,5 (4H, m), 4,1-5,2 (6H, m), 6.8- 7,05 ja 7,4-7,95 (UH, m), 8,35-8,5 (1H, m) (9) IR (CHCI3): 3450-3430, 1740, 1695-1680, 1365, 1160 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,1-1,5 (9H, m), 1,5-1,75 (1H, m),.1,8-2,0 (4H, m), 2,9-3,9 (8H, m), 3,9-5,2 (6H, m), 6,95-8,0 (12H, m), 8,4-8,5 (1H, m) II:

Valmistusmenetelmä 12 41 93548

Kohdeyhdisteet saatiin valmistusmenetelmän 5 mukaisella tavalla .

(1) IR (CHC13): 3350-3200, 3050, 1685, 1645-1630, 1550, 1495, 1450 cm'1 NMR {DMSO-dg, δ): 1,60-1,90 (1H, m), 2,15-2,40 (1H, m), 2,39 ja 2,69 (3H, m), 3,0-3,6 (4H, m), 4,1-4,5 ja 5,1-6,75 (6H, m), 6,9-8,35 js 9,3-9,4 (12H, m), 8,71 (1H, br s), 10,18 (1H, br s) (2) sp.: 250°C (haj.) IR (Nujoli): 3300, 2700, 1665, 1650, 1560, 1295, 1255 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,75-1,95 (1H, m), 2,25-2,4 (1H, m), 3,0-3,5 (4H, m), 4,15-4,45 (4H, m), 4,65-4,8 (1H, m), 5,52 (1H, br s), 7,0-7,2 (5H, m), 7,45-7,55 <3H, m), 7,75-7,9 (4H, m), 8,56 (1H, br s), 8,74 (1H, t, J=5,9Hz), 9,04 (1H, d, J=8,lHz), 9,83 (1H, br s) (3) IR (CHCI3): 3400-3200, 1680, 1630 cm-1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 2,2-2,4 (1H, m), 2,5-2,75 (2H, m), 2,79 ja 2,83 (3H, s), 2,95-3,2 ja 3,2-4,7 (6H, m), 4,2-4,45 ja 4,9-5,1 (4H, m), 7,05-7,55 ja 7,65-8,0 (12H, m), 8,6 (1H, br S), 9,1-9,25 (1H, m), 9,97 (1H, br s) (4) IR (CHCI3): 3400-3200, 1680, 1640, 1590 cm-1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 2,2-2,4 (1H, m), 2,78 ja 2,88 (3H, m), 3,0-3,4 (4H, m), 4,2-4,75 ja 5,0-5,2 ja 5,5-5,7 (6H, m), 6,8-7,95 (UH, m), 8,6 (1H, br s), 9,26 (1H, d, J=7,6Hz), 9,95 (1H, br s) (5) IR (CHCI3) : 3350-3200, 1680, 1640, 1550 cm"1 NMR (DMSO-dg, 6): 1,7-1,9 (1H, m), 2,2-2,4 (1H, m), 2,8 ja 2,92 (3H, s), 3,0-3,5 (4H, m), 4,2-4,85 ja 5,0-5,2 (6H, m), 6,7-7,95 (11H, m), 8,6 (1H, br s), 9,26 (1H, d, J=7,72Hz), 10,05 (1H, br s) » · 42 93548

(6) sp.: 259-261°C

IR (Nujoli): 3300, 2700, 1670, 1645, 1555, 1290, 1250 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 2,25-2,4 (1H, m), 2,65 (2H, t, J=7,12Hz), 2,9-3,45 (6H, m), 4,2-4,7 (3H, m), 5,54 (1H, d, J=2,91Hz), 7,1-7,55 ja 7,7-7,9 (12H, m), 8,5-8,7 (2H, m), 8,97 (1H, d, J=8,24Hz), 9,9 (1H, s) (7) IR (CHC13): 3400-3220, 1680, 1640, 1610, 1225 cm'1 NMR (DMSO-d6, 6): 1,75-1,9 (1H, m) , 2,2-2,4 (1H, m), 2,75 ja 2,84 (3H, s), 3,0-3,4 (4H, m), 4,2-4,65 ja 5,1- 5,7 (6H, m), 6.8- 7,1 ja 7,3-7,95 (11H, m), 8,62 (1H, br s), 9,25 (1H, d, J=7,47Hz), 9,93 (1H, br s) (8) IR (CHCI3) : 3320-3180, 1740, 1685, 1640, 1365 cm_17 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-2,0 (4H, m), 2,1-2,4 (1H, m), 3,0-3,7 ja 4,0-4,2 (8H, m) , 4,25-5,7 (6H, m), 7,0-8,0 (12H, m) , 8,6 (1H, br s), 9,2-9,35 (1H, m), 9,94 <1H, br s)

Valmistusmenetelmä 13

Liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (10,0 g) metyleeniklori-dissa (20 ml) lisättiin trifluorietikkahappoa (50 ml) jäissä jäähdyttäen. Liuosta sekoitettiin puoli tuntia samassa lämpötilassa ja haihdutettiin tyhjössä. Jäännös kiteytettiin lisäämällä eetteriä (50 ml) ja suodatettiin, pestiin eetterillä ja kuivattiin, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (9,26 g), sp.: 157-159°C

IR (Nujoli): 3400, 3330, 3150, 1670, 1625, 1565, 1495, 1200 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,95 (1H, m), 2,2-2,45 (1H, m), 2,79 ja 2,87 (3H, s), 3,0-3,4 (4H, m), 4,2-4,7 ja 5,0-5,15 (6H, m), 6.9- 8,0 ja 9,15-9,3 (12H, m), 8,65 (1H, br s), 9,71 (1H, br s) il 43 93548

Esimerkki 1 Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli l-metyyli-indoli-3-karboksyylihappoa (0,33 g), lähtöyhdistettä (0,88 g) ja HOBT:ä (0,25 g) lisättiin WSC:tä (0,34 ml). Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa yksi tunti ja huoneenlämpötilassa yön yli. Haihduttamisen jälkeen reaktioseos uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin natriumvety-karbonaatin vesiliuoksella, vedellä, 0,5N suolahapolla, vedellä ja natriumkloridin vesiliuoksella, ja kuivattiin magnesium-sulfaatilla. Haihduttamisen jälkeen jäännös puhdistettiin silikageelipylväässä (50 g) eluoiden kloroformin ja metanolin (50:1) liuotinseoksella. Haluttua yhdistettä sisältävät jakeet otettiin talteen ja haihdutettiin. Sitten jäännös kiteytettiin etyyliasetaatista, otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (0,66 g), sp.: >115°C (haj.) IR (Nujoli): 3430, 3300, 1656, 1640, 1600, 1574, 1535 cm"1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-2,2 (2H, m), 2,71 ja 2,80 (3H, s), 3,0-3,25 (2H, m), 3,6-3,7 (1H, m), 3,85 (3H, s), 3,8-4,0 (1H, m), 4,2-4,55 (3H, m), 4,65-4,8 (1H, m), 5,0-5,2 (2H, m), 6,9-7,3 (7H, m), 7,4-7,55 (4H, m), 7,7-7,9 (5H, m), 8,08 (1H, d, J=7,4Hz), 8,5-8,6 (1H, m)

Alkuaineanalyysi C36H36N4°4-H20:lle C 72,27, H 6,31, N 9,23 saatu: C 72,17, H 6,42, N 9,04

Esimerkki 2

Kohdeyhdisteet saatiin esimerkin 1 mukaisella tavalla.

(1) IR (CHCI3): 3420-3300, 3005, 1645, 1630, 1595, 1530, 1470, 1370 cm-1 NMR (DMSO-d6, Ö): 1,6-1,9 (1H, m), 1,9-2,15 (1H, m), 2,42 ja 2,63 (3H, S), 3,35-4,0 (4H, m), 3,87 (3H, s), 4,2-4,4 (3H, m), 4,6-5,3 (3H, m), 6,7-8,15 (17H, m), 8,54 (1H, br s) • · 44 93548

(2) sp.: 213-215°C

IR (Nujoli): 3280, 1660, 1635, 1590, 1570, 1535, 1340, 1250, 1225 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,65-1,85 (1H, m), 1,85-2,05 (1H, m), 3,0-3,4 (2H, m), 3,6-4,4 (5H, m), 3,86 (3H, s), 4,5-4,7 (2H, m), 5,04 (1H, d, J=3,3Hz), 7,0-7,3 (7H, m), 7,3-7,6 (4H, m), 7,7-8,0 (5H, m), 8,09 (1H, d, J=7,7Hz), 8,2-8,45 (2H, m)

(3) sp. : 13 0 -134°C

IR (Nujoli): 3400, 3270, 3070, 1650, 1630, 1600, 1565, 1535, 1320 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 1,9-2,1 (1H, m), 2,5-2,7 (2H, m), 2,72 ja 2,78 (3H, s), 2,9-3,7 (6H, m), 3,84 (3H, m), 4,15-4,3 (1H, m), 4,6-4,8 (1H, m), 4,95-5,05 (2H, m), 7,0-7,55 (11H, m), 7,75-7,9 (5H, m), 8,0-8,1 (1H, m), 8,3-8,5 (1H, m) (4) sp. 129°C (haj.) IR (Nujoli): 3420, 3290, 3060, 1655, 1625, 1600, 1560, 1535, 1320 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 1,9-2,1 (1H, m) , 2,71 ja 2,82 (3H, s), 3,0-3,4 (2H, m) , 3,6-3,7 (1H, m), 3,85 (3H, s) , 3,8-4,0 (1H, m) , 4,2-5,2 (6H, m) , 6,8-8,1 (16H, m), 8,5-8,6 (1H, m)

(5) sp.: 134-136°C

IR (Nujoli): 3380, 3060, 1685, 1655, 1590, 1545, 1335, 1250 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 1,9-2,1 (1H, m) , 2,72 ja 2,87 (3H, s) , 3,1-3,45 (2H, m) , 3,6-3,75 (1H, m), 3,8-4,0 (1H, m), 3,85 (3H, s), 4,2-5,2 (6H, m), 6,8-8,2 (16H, m), 8,53 (1H, br s)

(6) sp.: 195-197°C

IR (Nujoli): 3350, 3270, 3100, 1660, 1630, 1590, 1570, 1535, 1310, 1245 cm'1 II; 45 93548 NMR (DMSO-dg, δ): 1,65-1,85 (1H, m) , 1,85-2,0 (1H, m) , 2,45-2,6 (2H, m), 3,0-3,35 (4H, m), 3,65-4,1 (2H, m), 3,88 (3H, s), 4,25-4,6 (3H, m), 5,05 (1H, d, J=3,13Hz), 7,0-7,6 (11H, m), 7,45-8,05 (6H, m), 8,15-8,25 (2H, m) (7) IR (CHCI3) : 3450-3320, 1745, 1650-1635, 1375 era'1 NMR (DMSO-d6, δ) : 1,7-1,9 (4H, m), 1,9-2,1 (1H, m), 3,0-4,1 (11H, m), 4,2-5,2 (6H, m), 6,9-7,95 (16H, m), 8,0-8,15 (1H, m), 8,5-8,65 (1H, m) (8) sp.: 105°C (haj.) IR (Nujoli): 3450, 3270, 1665, 1640, 1605, 1575, 1535, 1510, 1245 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,7-1,9 (1H, m), 1,9-2,1 (1H, m), 2,68 ja 2,80 (3H, m), 3,0-3,3 (2H, m), 3,6-4,0 (2H, m), 3,86 (3H, s), 4,2-5,15 (6H, m), 6,65-8,15 (16H, m), 8,4-8,6 (1H, m)

Esimerkki 3

Suspendoituun seokseen, jossa oli l-metyyli-indoli-2-karbok-syylihappoa (225 mg) ja HOBTitä (173 mg) metyleenikloridissa (10 ml) lisättiin WSC.HCl:ää (246 mg) huoneenlämpötilassa.

Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa yksi tunti. Toisessa reaktioastiässä lähtöyhdiste (700 mg) liuotettiin metyleenik-loridiin (10 ml), ja liuoksen lisättiin TEA:a (0,20 ml) jäissä jäähdyttäen. Liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa neljännestunti, minkä jälkeen siihen lisättiin edellinen liuos.

Liuosta sekoitettiin 6 tuntia, ja liuokseen lisättiin TEA:a (0,05 ml) ja sekoitettiin yön yli. Väkevöimisen jälkeen jäännös uutettiin etyyliasetaatilla, orgaaninen kerros pestiin peräkkäin natriumvetykarbonaatin kyllästetyllä liuoksella, * vedellä, 0,5N suolahapolla, ja natriumkloridiliuoksella, ja

kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Väkevöimisen jälkeen jäännös kiteytettiin lisäämällä asetonia, suodatettiin, pestiin asetonilla, ja kuivattiin 40°C:ssa tyhjössä, jolloin saatiin lähtöyhdistettä (0,47 g). sp.: 183,0-184,0°C

46 93548 IR (Nujoli): 3350, 3275, 3110, 1670, 1640, 1577, 1530, 1495, 1465, 1355, 1340, 1318, 813, 735, 693 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,65-2,20 (2H, m), 2,730, 2,822 (3H, s), 3,00-3,40 (2H, m) , 3,50-3,95 (2H, m) , 3,756, 3,827 (3H, s) , 4,05-5,20 (6H, m), 6,05-7,90 (17H, m), 8,50-8,65 (1H, m) Alkuaineanalyysi C36H36N4°4:lle C 73,45, H 6,16, N 9,52 saatu: C 73,44, H 6,17, N 9,50

Esimerkki 4

Kohdeyhdisteet saatiin esimerkin 3 mukaisella tavalla.

(1) IR (CHC13): 3300, 3000, 1630, 1560, 1450, 1420 cm"1 NMR (DMSO-dg, 6): 1,7-1,9 (1H, m), 2,2-2,4 (1H, m), 2,6-2,8 (3H, m), 3,0-3,3 (2H, m), 3,36 (1H, m), 3,67 (1H, m), 3,8-5,2 (6H, m), 6,8-7,9 (17H, m), 8,65-8,85 (1H, m)

(2) sp.: 111-114°C

IR (Nujoli): 3420, 3280, 1655, 1630, 1600, 1530, 1225 cm'1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,51 (6H, br s), 1,7-2,1 (2H, m), 2,7-2,9 (3H, m), 3,0-3,3 (2H, m), 3,6-3,75 (1H, m), 3,9-4,1 (1H, m), 4,2-4,55 (3H, m), 4,7-5,2 (4H, m); 6,9-7,3 (7H, m), 7,4-7,95 (9H, m), 8,07 (1H, m), 8,55 (1H, m)

Alkuaineanalyysi ^38H40N4^4:He C 74,00, H 6,54, N 9,08 saatu: C 73,53, H 6,48, N 8,95

(3) sp.: 219-222°C

IR (Nujoli): 3460, 3250, 3100, 1678, 1640, 1570 cm"1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,8-2,1 (2H, m), 2,6-2,9 (3H, m), 3,1-3,3 (2H, m), 3,7-4,2 (2H, m), 4,2-4,8 (3H, m), 5,0-5,4 (3H, m), • · 6,7-7,9 (15H, m), 8,2 (1H, m), 8,65 (1H, m), 13,6 (1H, br s) tl:

Esimerkki 5 47 9 3 5 4 8

Kohdeyhdiste saatiin valmistusmenetelmän 5 ja esimerkin 1 mukaisella tavalla peräkkäin.

IR (Nujoli): 3300, 1635, 1610, 1535 cm'1 NMR (DMSO-d6, δ): 1,7-2,0 (1H, m), 2,0-2,3 (1H, m), 2,71 (s) ja 2,81 (s) (3H), 2,9-3,3 (2H, m), 3,13 (s) ja 3,15 (s)(3H), 3,7-4,0 (6H, m), 4,3-4,7 (3H, m), 4,9-5,2 (1H, m), 6,8-7,3 (7H, m), 7,3-7,6 (4H, m), 7,6-8,0 (5H, m), 8,0-8,1 (1H, m), 8,4-8,7 (1H, m)

Esimerkki 6 Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (0,5 g) metyleenikloridissa (15 ml) lisättiin peräkkäin BSA:ta (0,68 ml) ja indoli-3-karbonyylikloridia (0,20 g). Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa yksi tunti, minä aikana liuokseen lisättiin indoli-3-karbonyylikloridia kolmena annoksena (0,20 g, 0,08 g ja 0,20 g) ja BSA:ta (0,3 ml). Väkevöimi-sen jälkeen jäännös liuotettiin THF:ään (10 ml), ja lN-suola-happoa (1 ml) lisättiin jäissä jäähdyttäen. Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa 15 minuuttia. Väkevöimisen jälkeen jäännös uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin peräkkäin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella ja natriumklo-'.· ridin kyllästetyllä liuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja väkevöitiin tyhjössä. Jäännös puhdistettiin pylväskro-matografisesti silikageelillä eluoiden ensin etyyliasetaatilla ja sitten kloroformin, metanolin ja etyyliasetaatin (4:1:1:) liuotinseoksella, jolloin saatiin kohdeyhdistettä amorfisena kiinteänä aineena (0,28 g).

IR (Nujoli): 3275, 1630, 1530 cm-1 NMR (DMSO-dg, δ): 1,65-2,00 (2H, m), 2,708, 2809 (3H, s), 3,00-3,25 (2H, m), 3,60-4,00 (2H, m), 4,20-5,20 (6H, m), 6,80-8,10 (17H, m), 8,40-8,60 (1H, br s), 11,60 (1H, s) » * i . ·

Esimerkki 7 48 93548

Suspendoituun seokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (1,0 g) metyleenikloridissa (20 ml) lisättiin TEA:a (0,51 ml) ja kinnamoyylikloridia (0,31 g) jäissä jäähdyttäen. Liuosta sekoitettiin samassa lämpötilassa 3 tuntia ja huoneenlämpötilassa yön yli. Haihduttamisen jälkeen reaktioseos uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella, vedellä, 0,5N suolahapolla, vedellä ja natriumkloridin vesiliuoksella, ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Haihduttamisen jälkeen jäännös puhdistettiin silikageelipylväässä (50 g) eluoiden kloroformin ja metanolin (40:1) liuotinseoksella. Haluttua yhdistettä sisältävät jakeet otettiin talteen ja haihdutettiin. Sitten jäännös kiteytettiin isopropyylieetteristä, otettiin talteen suodattamalla ja kuivattiin, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (0,66 g).

IR (CHC13): 3400, 3300, 3000, 1640, 1600, 1545, 1495, 1450, 1420 cm-1 NMR (DMSO-dg, 6): 1,6-2,3 (2H, m), 2,6-2,9 (3H, m), 2,9-3,3 (2H, m), 3,5-3,9 (2H, m), 4,2-5,2 (6H, m), 6,65-7,9 (19H, m), 8,45-8,6 ja 8,9-9,05 (1H, m)

Esimerkki 8

Kohdeyhdiste saatiin esimerkin 7 mukaisella tavalla.

IR (CHCI3): 3400, 1635, 1510, 1490, 1450, 1340, 1145 cm'1 NMR (DMSO-d6, Ö): 1,6-1,8 (1H, m), 1,8-2,0 (1H, m), 2,77 ja 2,86 (3H, s), 3,0-3,35 (3H, m), 3,45-3,65 (1H, m), 4,1-4,7 ja 4,95-5,2 (6H, m), 6,95-7,9 (19H, m), 8,4-8,55 (1H, m) • · · * • · ·

Esimerkki 9 Jäissä jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli lähtöyhdistettä (0,72 g) metanolissa (15 ml) lisättiin IN natriumhydroksidin (1,1 ml) liuosta. Liuosta sekoitettiin 3 tuntia huoneenlämpö- •« · tl.

49 93548 tilassa. Väkevöimisen jälkeen tuote uutettiin etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros pestiin peräkkäin vedellä ja natrium-kloridiliuoksella, ja kuivattiin magnesiumsulfaatilla. Liuottimen haihduttamisen jälkeen kiinteän aineen jäännös pestiin etyyliasetaatilla, suodatettiin ja kuivattiin, jolloin saatiin kohdeyhdistettä (0,60 g), sp.: 115°C (haj.) IR (Nujoli): 3470, 3290, 1665, 1620, 1605, 1575, 1535, 1250 cm-1 1 ·

Claims

1. Menetelmä valmistaa farmaseuttisesti vaikuttavaa pepti-diyhdistettä, jolla on kaava 9¾ I /R3 R1 - Y - A - N--CONHCH CON ^R4 jossa R1 on fenyyli tai ryhmä, jolla on kaava j ossa X on CH tai N, ja Z on O tai N-R5, jossa R5 on vety tai alempi alkyyli, R2 on hydroksi tai alempi alkoksi, R3 on vety, alempi alkyyli, hydroksi(alempi)alkyyli tai suojattu hydroksi(alempi)alkyyli, R4 on fenyyli(alempi)alkyyli tai halogeeni(alempi)alkyyli, A on karbonyyli tai sulfonyyli, ja Y on sidos tai alempi alkenyleeni, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja, tunnettu siitä, että II. saatetaan yhdiste, jolla on kaava 93548 ”>00 ΗΝ-C0NHCHC0N \ 4 R jossa R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen reaktiiviset johdokset iminoryhmässä tai sen suola reagoimaan yhdisteen, jolla on kaava R1-Y-A-0H jossa R1, A ja Y tarkoittavat samaa kuin edellä, tai sen reaktiivisen johdoksen karboksi- tai sulforyhmässä tai sen suolan kanssa, tai 2. poistetaan yhdisteestä, jolla on kaava *> 00 , 0 ' ! ^ R-Y-A-N-'-COHHCHCON XR4 jossa R1, R2, R4, A ja Y tarkoittavat samaa kuin edellä, ja R3a on suojattu hydroksi(alempi)alkyyli, tai sen suolasta R3a:n hydroksisuojaryhmä hydrolyysilla, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava 00 , 0 Γ· ^ R -Y-A-N-L-CONHCHCON "-R4 93548 jossa R1, R2, R4, A ja Y tarkoittavat samaa kuin edellä, ja R3b on hydroksi(alempi)alkyyli, tai sen suola.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava ^Me C0-( 2S, 4R) -Prol 40H) -2Nal-N Bzl, Me. tunnettu siitä, että käytetään vastaavia lähtöaineita.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava CTJiL jLco-(2S, 4R)-Pro( 4OH) -2Nal-N ^ ^ Bzl, tunnettu siitä, että käytetään vastaavia lähtöaineita.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava Me -jj—C0-(2S,4R)-Pro(40Me)-2Nal-N ^ UM ^ Bzl. Me tunnettu siitä, että käytetään vastaavia lähtöaineita.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava II: 53 93548 f^N Me k^i*-CH=CHC0-(2S,4R)-Pro(40H)-2Nal-N ,. \ Bzl, (trans) tunnettu siitä, että käytetään vastaavia lähtöaineita.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä yhdisteen valmistamiseksi, jolla on kaava ^jLcH=CHS02-(2S/4R)-Pro(40H)-2Nal-N ^ (trans) Bzl· tunnettu siitä, että käytetään vastaavia lähtöaineita. 54 9 3 5 4 8